[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

WO2017042944A1 - フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法 - Google Patents

フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2017042944A1
WO2017042944A1 PCT/JP2015/075773 JP2015075773W WO2017042944A1 WO 2017042944 A1 WO2017042944 A1 WO 2017042944A1 JP 2015075773 W JP2015075773 W JP 2015075773W WO 2017042944 A1 WO2017042944 A1 WO 2017042944A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
imatinib
tyrosine kinase
lymphocytic leukemia
bcr
philadelphia chromosome
Prior art date
Application number
PCT/JP2015/075773
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
完爾 杉田
安藤　潔
Original Assignee
国立大学法人山梨大学
学校法人東海大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 国立大学法人山梨大学, 学校法人東海大学 filed Critical 国立大学法人山梨大学
Priority to PCT/JP2015/075773 priority Critical patent/WO2017042944A1/ja
Priority to US15/758,582 priority patent/US10314834B2/en
Priority to PCT/JP2016/076636 priority patent/WO2017043633A1/ja
Publication of WO2017042944A1 publication Critical patent/WO2017042944A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/502—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. cinnoline, phthalazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Definitions

  • Philadelphia Chromosome Positive (Ph +) Acute Lymphocytic Leukemia (ALL) is an extremely refractory that cannot be completely cured by conventional chemotherapy because the 9; 22 chromosomal translocation produces a powerful fusion tyrosine kinase (BCR-ABL) Acute leukemia.
  • Philadelphia chromosome positive (Ph +) chronic myelogenous leukemia (CML) causes blast crisis in most cases, but two-thirds are myeloid, and one-third are lymphoid ( lymphoid crisis, LC).
  • Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation is the only way to achieve complete cure, but there are many challenges that must be overcome, such as transplant-related death, recurrence of the underlying disease, chronic graft-versus-host disease, and late organ complications. ing. Therefore, there is a need for a new treatment strategy for improving the treatment outcome while maintaining the high quality of life (PQ) of Ph + ALL patients.
  • PQ quality of life
  • Ph + ALL and Ph + LC are both Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia or Called Ph + lymphocytic leukemia).
  • BCR-ABL inhibitors imatinib, dasatinib, etc.
  • Patent Document 1 discloses an injection that selectively binds to a BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and various cytokine receptors (IL-3R, G-CSFR, GM-CSFR) expressed on the extracellular side (cell surface) of leukemia cells. Disclosed is a method of treating Ph + leukemia in a patient using a pharmaceutical agent.
  • the target case is chronic phase CML
  • the treatment method is complicated because it uses a tyrosine kinase inhibitor which is an internal medicine and a drug for injection.
  • the present inventors examined in detail in vitro about the combined effect of imatinib and lenalidomide, a derivative with reduced toxicity of thalidomide, using a human Ph + ALL cell line.
  • Imatinib alone and lenalidomide alone showed only a moderate growth-inhibiting effect, but when they were used in combination, they found a strong cell death-inducing effect and found that most cells were killed within 1 week of culture. This effect was also demonstrated in an in vivo system in which human Ph + ALL cells were transplanted into immunodeficient mice (NOG mice), as shown in Examples described later.
  • a pharmaceutical composition comprising a BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and a thalidomide derivative.
  • the composition can be used for the treatment of Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia.
  • a Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia comprising a step of administering a BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and a thalidomide derivative to a patient suffering from Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia.
  • a method of treatment is provided. By applying this method to patients suffering from Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia, it becomes possible to treat leukemia.
  • FIG. 1 is a graph showing that the Ph + ALL strain (KOPN57bi) inhibited the uptake of H 3 -thymidine under the conditions of addition of lenalidomide alone, imatinib alone, and combination thereof. It is. Lena indicates lenalidomide and Ima indicates imatinib. In FIG. 1A, the concentration of imatinib is varied. In FIG. 1B, the concentration of lenalidomide is varied.
  • FIG. 2 shows the results of measuring the inhibition of H 3 -thymidine uptake in the Ph + ALL strain (KOPN57bi) over time.
  • FIG. 3 shows a flow cytometry graph for cell death of the Ph + ALL cell line (KOPN57bi), observed using Annexin 5 (Pronexin IV) / propidium iodide (PI) double staining method.
  • FIGS. 3A-D show the results of control, lenalidomide alone, imatinib alone, and a combination of lenalidomide and imatinib, respectively.
  • FIG. 4 shows a graph showing the results of PI staining of the Ph + ALL cell line (KOPN57bi) in the case of control, LMD, Imatinib, or combined use of LMD and Imatinib.
  • FIG. 5 shows physiological saline administration, LMD single administration, Imatinib single administration, and LMD / Imatinib combination administration to NOD / SCID / ⁇ null mice (NOG mice) administered with 2 ⁇ 10 6 Ph + ALL cell line (KOPN57bi). It is a graph which shows follow-up observation.
  • Philadelphia Chromosome Positive (Ph +) Lymphocytic Leukemia Philadelphia Chromosome Positive (Ph +) Lymphocytic Leukemia (Ph + Lymphocytic Leukemia) includes Philadelphia Chromosome Positive (Ph +) Acute Lymphocytic Leukemia (Ph + ALL) and Philadelphia Includes lymphoid transformation (Ph + LC) of chromosome positive (Ph +) chronic myeloid leukemia.
  • BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor is approved for the treatment of chronic phase CML and Ph + ALL and is clinically applied as a normal treatment.
  • the tyrosine kinase inhibitors include, 406, AP24534, XL228, PHA-739358, MK-0457, SGX393 and DC2036. These tyrosine kinase inhibitors may be used alone or in combination.
  • the tyrosine kinase inhibitor is imatinib (IUPAC: 4- (4-Methylpiperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3- (4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-ylamino) phenyl] benzamide monomethanesulfonate).
  • the tyrosine kinase inhibitor has a daily dose of 400 mg in the treatment of Ph + lymphoblastic leukemia, and the daily dose is 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg depending on the age, weight and severity of the patient. 600 mg, 700 mg, or 800 mg, and may be within a range between any two of the numerical values exemplified herein.
  • Thalidomide derivatives Derivatives with reduced toxicity of thalidomide have various biological activities and are collectively called immunomodulators (IMiDs). In recent years, it has been shown to be effective in the treatment of multiple myeloma and certain myelodysplastic syndromes, and has been approved for clinical use and clinically applied. Examples of the thalidomide derivative include, but are not limited to, lenalidomide and pomalidomide. The thalidomide derivatives may be used alone or in combination. The thalidomide derivative is preferably lenalidomide (IUPAC: (RS) -3- (4-amino-1-oxo-3H-isoindol-2-yl) piperidine-2,6-dione).
  • IUPAC lenalidomide
  • Lenalidomide has been clinically applied in multiple myeloma once daily for 10-20 mg for 3 weeks, with a 1-week treatment schedule, and single-agent toxicity is known to those skilled in the art.
  • the above thalidomide derivatives may be 5 mg, 7 mg, 10 mg, 12 mg, 15 mg, 17 mg and 20 mg per day depending on the patient's age, weight and severity in the treatment of Ph + lymphocytic leukemia It may be within a range between any two of the numerical values exemplified here.
  • composition containing BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivative a pharmaceutical composition comprising a BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and a thalidomide derivative is provided.
  • the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivative may be administered in the form of a pharmaceutical composition.
  • the pharmaceutical composition is manufactured under GMP conditions.
  • the pharmaceutical composition may be provided in a unit dosage form (ie, a dosage for a single administration) comprising any of the dosages set forth below.
  • the pharmaceutical composition may be manufactured by conventional methods of mixing, dissolving, granulating, dragee forming, levating, emulsifying, encapsulating, encapsulating, or lyophilizing processes.
  • BCR-ABL tyrosine kinase inhibitors and thalidomide derivatives may be used in the formulations and compositions described below.
  • the pharmaceutical composition comprises one or more physiologically acceptable carriers, diluents, excipients that facilitate the processing of the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivative into a formulation that can be used medically.
  • Formulations or auxiliaries may be used in a conventional manner. Proper formulation is dependent upon the route of administration chosen.
  • Administration may be parenteral, intravenous, oral, subcutaneous, intraarterial, intracranial, intrathecal, intraperitoneal, topical, intranasal or intramuscular. Oral administration is preferred.
  • the pharmaceutical composition for parenteral administration is preferably sterile and substantially isotonic.
  • the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivative may be formulated in an aqueous solution, preferably Hanks's solution, Ringer's solution, or saline or acetate buffer (to reduce discomfort at the injection site In a physiologically compatible buffer solution.
  • the solution may contain modifiers such as suspending, stabilizing and / or dispersing agents.
  • the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivative may be in powder form to make up a suitable vehicle (eg, sterile, pyrogen-free water) before use.
  • a suitable vehicle eg, sterile, pyrogen-free water
  • penetrants appropriate to the barrier to be permeated are used in the formulation. This route of administration may be used to deliver BCR-ABL tyrosine kinase inhibitors and thalidomide derivatives to the nasal cavity or for sublingual administration.
  • BCR-ABL tyrosine kinase inhibitors and thalidomide derivatives are tablets, pills, dragees, capsules, liquids, gels, syrups, slurries, suspensions and to be taken orally by the patient being treated. It may be formulated by combining with a pharmaceutically acceptable carrier as an analog.
  • suitable excipients are fillers such as sugars such as lactose, sucrose, mannitol and sorbitol; corn starch, wheat starch, rice starch, potato Cellulose preparations such as starch, gelatin, gum tragacanth, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, and / or polyvinylpyrrolidone (PVP); granules; and binders.
  • disintegrating agents may be added, such as cross-linked polyvinyl pyrrolidone, agar, or alginic acid or a salt thereof such as sodium alginate.
  • solid dosage forms may be sugar coated or enteric coated using standard techniques.
  • suitable carriers, excipients or diluents include water, glycols, oils, alcohols.
  • fragrances, preservatives, colorants and the like may be added.
  • the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and thalidomide derivatives may also be formulated as sustained release preparations. Such long lasting formulations may be administered by implantation (for example subcutaneously or intramuscularly) or by intramuscular injection.
  • BCR-ABL tyrosine kinase inhibitors and thalidomide derivatives can be combined with suitable polymers or hydrophobic materials (eg, as an acceptable emulsion in oil) or ion exchange resins, or, for example, moderately water soluble It may be formulated as a moderate water-soluble derivative such as a salt.
  • Liposomes and emulsions may be used to carry BCR-ABL tyrosine kinase inhibitors and thalidomide derivatives.
  • Certain organic solvents such as dimethyl sulfoxide may also be used at the expense of greater toxicity than usual.
  • the compounds may be delivered using sustained release systems such as solid polymeric semipermeable matrices containing therapeutic agents.
  • Philadelphia chromosome positive comprising administering a BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and a thalidomide derivative to a patient suffering from Philadelphia chromosome positive (Ph +) lymphocytic leukemia.
  • a method of treating lymphocytic leukemia is provided.
  • the patient may be a mammal, preferably a human.
  • Ph + ALL Philadelphia Chromosome Positive
  • Ph + LC Philadelphia Chromosome Positive
  • the BCR-ABL tyrosine kinase inhibitor and the thalidomide derivative may be administered simultaneously.
  • the inhibitor and the derivative may be administered as a combination, or a single agent may be administered simultaneously.
  • the inhibitor and the derivative may be administered with a time difference, and the order of administration is not particularly limited.
  • the time difference may be, for example, within 1 second, 5 seconds, 10 seconds, 1 minute, 5 minutes, 10 minutes, 30 minutes, 1 hour or 2 hours, and between any two of the numerical values illustrated here It may be within the range.
  • the present invention will be further described with reference to examples and drawings, but the present invention is not limited thereto.
  • Statistically significant means that the p-value is ⁇ 0.05, preferably ⁇ 0.01, and most preferably ⁇ 0.001.
  • LMD lenalidomide
  • the Ph + ALL strain shows a tendency to suppress H 3 -thymidine-uptake more strongly than other cell lines.
  • the two Ph + ALL strains (KOPN55bi, KOPN57bi) have an inhibition rate of about 50% (% inhibition). Shown (not shown).
  • Example 2 Using Ph + ALL strain (KOPN57bi), the combined effect of LMD and Imatinib was examined.
  • the Ph + ALL strain (KOPN57bi) was cultured with H 3 -thymidine for 3 days under the conditions of 20 ⁇ M concentration of LMD alone, 0.5 ⁇ M concentration of Imatinib alone and their combined addition, and H 3 -thymidine-uptake Was measured.
  • the addition of LMD and Imatinib alone showed about 50%% inhibition, but the combined addition showed more than 90%% inhibition.
  • the LMD concentration was kept constant at 20 ⁇ M and the Imatinib concentration was varied, the% inhibition increased to 90% or more at 0.5 ⁇ M or more (FIG. 1A).
  • Example 3 Examination of viable cell count using alamarBlue method Since Thymidine is taken up into the DNA of proliferating cells, the decrease in H 3 -thymidine-uptake is affected by both proliferating and viable cell counts.
  • LMD (20 ⁇ M) or Imatinib (0.5 ⁇ M) alone or The Ph + ALL cell line (KOPN57bi) was cultured with H 3 -thymidine for 3 days under the conditions of the combined use, and the number of viable cells was calculated by the alamarBlue method.
  • the decrease in the number of viable cells was slight when added alone, but the number of viable cells decreased markedly when added together. Therefore, it was suggested that the addition alone mainly induced growth arrest and the combination addition mainly induced cell death (not shown).
  • Example 4 Examination of cell death using Annexin V / propidium iodide (PI) double staining method
  • Annexin V showing strong binding to phospholipid
  • PI propidium iodide
  • the Ph + ALL cell line (KOPN57bi) was cultured for 3 days under the conditions of LMD (20 ⁇ M) or Imatinib (0.5 ⁇ M) alone or in combination. After incubation, Annexin V and PI were added to the medium. When examined with the Annexin V / PI double staining method, the survival cell rate (Annexin V-, PI-) was 85% with no addition and about 60% with each addition, but decreased to 28% with the addition. (FIG. 3). The decrease in the viable cell rate due to the combined administration was more markedly observed when the culture period was extended (not shown).
  • Example 5 Examination of cell rotation using PI staining method
  • the staining intensity changes depending on the amount of DNA.
  • cell rotation arrest phase G0 / G1 phase, 2N
  • DNA synthesis phase S phase, 2N ⁇ 4N
  • early cell division G2, 4N
  • cell division phase M phase, 4N ⁇ 2N
  • cell death is induced by apoptosis
  • a cell fraction in which the amount of DNA is decreased (less than 2N) from the G0 / G1 phase by DNA cleavage is detected.
  • the Ph + ALL cell line (KOPN57bi) was cultured for 3 days under the condition of adding LMD (20 ⁇ M) or Imatinib (0.5 ⁇ M) alone or in combination thereof, and then PI staining was performed on each cell line after culturing.
  • LMD 20 ⁇ M
  • Imatinib 0.5 ⁇ M
  • PI staining was performed on each cell line after culturing.
  • Example 5 In vivo studies using immunodeficient mice NOD / SCID / ⁇ null mice (NOG mice) are widely used for research as immunodeficient mice capable of efficiently transplanting human hematopoietic stem cells and tumor cells.
  • a mouse transplanted with human leukemia cells is a system in which the therapeutic effect of a drug on human leukemia cells can be examined in the mouse (in vivo).
  • Ph + ALL cell line (KOPN57bi) administered from the tail vein of mice, saline diet group, LMD monotherapy group (LMD30 mg / kg / day), Imatinib monotherapy group (150 mg / kg / day), LMD
  • LMD monotherapy group (LMD30 mg / kg / day)
  • Imatinib monotherapy group 150 mg / kg / day
  • LMD The follow-up was divided into groups treated with / Imatinib (LMD 30 mg / kg / day, Imatinib 150 mg / kg / day) (4 mice in each group).
  • the Ph + ALL cells in the mononuclear cell fraction were analyzed by flow cytometry. The ratio was examined.
  • LMD and Imatinib showed a strong cell death-inducing effect on human Ph + ALL cells both in vitro and in vivo.
  • a pharmaceutical composition using LMD and Imatini in combination is an excellent pharmaceutical composition that can significantly improve the therapeutic results of Ph + ALL patients, and the combined use of LMD and Imatini is an excellent treatment method.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本発明によれば、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体とを含む医薬組成物が提供される。また、本発明によれば、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を患っている患者にBCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を投与するステップを含む、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を治療する方法が提供される。

Description

フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法
　フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)急性リンパ性白血病（ALL）は、9;22染色体転座により強力な融合チロシンキナーゼ(BCR-ABL)が生成され、通常の化学療法では完治しえない極めて難治性な急性白血病である。また、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)慢性骨髄性白血病(CML)は、ほとんどの症例が経過中に急性転化を来たすが、その３分の２は骨髄性転化、３分の１はリンパ性転化(lymphoid crisis, LC)である。
　完治を目指すためには、同種造血幹細胞移植が唯一の方法であるが、移植関連死亡、原病の再発、慢性移植片対宿主病、晩期の臓器合併症など克服しなければならない課題が山積している。そのため、Ph+ALL患者の高い生存の質(quality of life, QOL)を保ちながら治療成績を向上させるための新たな治療戦略が求められている。
　CML-LCの治療にはPh+ALLと同様の薬剤が用いられているが、極めて難治性である(以後、Ph+ALLとPh+LCの両者をフィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病又はPh+リンパ性白血病と呼称する)。近年、CMLやPh+リンパ性白血病に対する分子標的薬であるBCR-ABL阻害剤(イマチニブ、ダサチニブなど)が創薬、保健認可され、実際の治療に導入されることで予後が改善されてきているが、その成績はまだ満足できるレベルには達していない。
　特許文献１は、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤と、白血病細胞の細胞外（細胞表面）に発現する各種サイトカイン受容体（IL-3R, G-CSFR, GM-CSFR）に選択的に結合する注射用薬剤を用いた、患者のPh+白血病を治療する方法を開示している。
特表2013-505968
　しかし、上記の従来技術には、以下のような点で更なる改善の余地があった。
　特許文献１において、対象症例は、慢性期CMLであり、その治療方法は、内服薬であるチロシンキナーゼ阻害剤と注射用薬剤とを用いるため治療方法が煩雑であった。
　本発明者らは、ヒトPh+ALL細胞株を用いて、イマチニブと、サリドマイドの毒性を軽減した誘導体であるレナリドミドとの併用効果についてin vitroで詳細に検討した。イマチニブ単独とレナリドミド単独では中等度の増殖抑制効果を示しただけであったが、それらを併用すると強力な細胞死誘導効果を示し、培養１週以内にほとんどの細胞が死滅することを発見した。この効果は、後述する実施例に示す通り、ヒトPh+ALL細胞を免疫不全マウス（NOGマウス）に移植したin vivoの系でも実証された。サリドマイド誘導体は、米国で悪性リンパ腫や成人T細胞白血病リンパ腫に対する臨床治験が始まっているが、ALLに対する効果はこれまで全く調べられておらず、当然臨床応用もされていない。本発明者らは、両薬剤の併用投与を実際の臨床に応用すれば、Ph+ALLの治療成績を格段に向上させることができることを初めて明らかにし、本発明は完成した。
　即ち、本発明によれば、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体とを含む医薬組成物が提供される。この構成によれば、上記組成物をフィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病の治療に用いることが可能になる。
　本発明によれば、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を患っている患者にBCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を投与するステップを含む、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を治療する方法が提供される。この方法を、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を患っている患者に施すことによって、白血病を治療することが可能になる。
図1は、レナリドミド(Lenalidomide)単独添加、イマチニブ(Imatinib)単独添加及びそれらの併用添加の条件下で、Ph+ALL株(KOPN57bi)は、H3-thymidineの取り込みが抑制されたことを示すグラフである。Lenaは、レナリドミドを示し、Imaは、イマチニブを示す。図1Aにおいては、イマチニブの濃度を変動させている。図1Bにおいては、レナリドミドの濃度を変動させている。 図２は、Ph+ALL株(KOPN57bi)におけるH3-thymidineの取り込み抑制を経時的に測定した結果である。 図３は、アネキシン５(Annexin V)/プロピジウムアイオダイド(PI)二重染色法を用いて観察した、Ph+ALL細胞株(KOPN57bi)の細胞死に関するフローサイトメトリーのグラフを示している。図３A-Dは、それぞれ、コントロール、レナリドミド単独、イマチニブ単独、及び、レナリドミドとイマチニブとの併用の結果を示している。 図４は、コントロール、LMD、Imatinib又はLMDとImatinibとの併用添加における、Ph+ALL細胞株(KOPN57bi)のPI染色の結果を示すグラフを示している。図３A-Dは、それぞれ、コントロール、レナリドミド単独、イマチニブ単独、及び、レナリドミドとイマチニブとの併用の結果を示している。 図５は、2x106細胞のPh+ALL細胞株(KOPN57bi)を投与したNOD/SCID/γnullマウス(NOGマウス)への生理食塩水投与、LMD単独投与、Imatinib単独投与、LMD/Imatinib併用投与の経過観察を示すグラフである。
　以下、本発明の実施の形態について、詳しく説明する。以下、本発明の実施の形態について、詳しく説明する。なお、同様な内容については繰り返しの煩雑をさけるために、適宜説明を省略する。
1.　フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病
　フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病(Ph+リンパ性白血病)には、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)急性リンパ性白血病（Ph+ALL）とフィラデルフィア染色体陽性(Ph+)慢性骨髄性白血病のリンパ性転化(Ph+LC)が含まれる。
2.　BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤
　BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤は、慢性期CMLやPh+ALLの治療薬として認可され、通常治療薬として臨床応用されている。上記チロシンキナーゼ阻害剤としては、例えば、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、アキシチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダムナカンタール、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ネラチニブ、セマキサニブ、スニチニブ、トセラニブ、チルホスチン、ヴァンデタニブ、ヴァタラニブ、INNO-406、AP24534、XL228、PHA-739358、MK-0457、SGX393及びDC2036が挙げられる。これらのチロシンキナーゼ阻害剤は、単独でもよく、複数種を組み合わせてもよい。好ましくは、上記チロシンキナーゼ阻害剤は、イマチニブ(IUPAC: 4-(4-Methylpiperazin-1-ylmethyl)-N-[4-methyl-3-(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-ylamino)phenyl]benzamide monomethanesulfonate)である。上記チロシンキナーゼ阻害剤は、Ph+リンパ性白血病の治療においては、1日当たりの用量は400mgであり、患者の年齢、体重及び重症度に応じて、1日当たりの用量は、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、700mg又は800mgであってもよく、ここで例示した数値の何れか２つの間の範囲内であってもよい。
3.　サリドマイド誘導体
　サリドマイドの毒性を軽減した誘導体は、多様な生物学的活性を有し、免疫調整剤（IMiDs）と総称されている。近年、多発性骨髄腫や特定の骨髄異形成症候群の治療に有効であることが明らかになり、保健認可がおり、臨床応用されている。上記サリドマイド誘導体としては、レナリドミド及びポマリドミドが挙げられるが、これらに限定するものではない。上記サリドマイド誘導体は、単独で使用してもよく、組み合わせて使用してもよい。上記サリドマイド誘導体は、好ましくはレナリドミド(IUPAC: (RS)-3-(4-amino-1-oxo-3H-isoindol-2-yl)piperidine-2,6-dione)である。レナリドミドは、多発性骨髄腫において、１日１回10-20mgを３週間投与、１週間休薬の治療スケジュールで臨床応用されており、単剤における毒性は当業者には公知である。上記サリドマイド誘導体は、Ph+リンパ性白血病の治療においては、患者の年齢、体重及び重症度に応じて、1日当たりの用量は、5mg、7mg、10mg、12mg、15mg、17mg及び20mgであってもよく、ここで例示した数値の何れか２つの間の範囲内であってもよい。
4.　BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体とを含む医薬組成物
　本発明によれば、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体とを含む医薬組成物が提供される。BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、医薬組成物の形で投与されてもよい。医薬組成物は、ＧＭＰ条件下で製造される。医薬組成物は、以下に示す任意の投与量を含む単位用量形態（すなわち、単一の投与のための投与量）で提供してもよい。医薬組成物は、混合、溶解、造粒、糖衣錠形成、粉末化（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、カプセル化、封入（ｅｎｔｒａｐｐｉｎｇ）、又は凍結乾燥工程の従来の方法で製造されてもよい。特に、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、以下で説明する処方及び組成物中で使用されてもよい。
　医薬組成物は、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を医療用に使用することができる製剤へと加工することを促進する、1又は複数の生理学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤又は助剤を使って、従来の方法で処方されてもよい。適切な処方は、選択された投与経路に依存する。
　投与は、非経口、静脈内、経口、皮下、動脈内、頭蓋内、髄腔内、腹腔内、局所、鼻腔
内又は筋中であってもよい。経口投与が好ましい。
　非経口投与のための医薬組成物は、好ましくは滅菌及び実質的に等張である。注射については、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、水溶液中に処方されてもよく、好ましくはハンクス溶液、リンガー溶液、又は生理食塩水若しくは酢酸緩衝液（注射部位での不快感を軽減するため）などの生理的に互換性のある緩衝液中である。該溶液は、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤などの調整剤を含んでもよい。
　また、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、使用前に適したビークル（例えば無菌で発熱物質フリーの水）で構成するために粉末状でもよい。
　経粘膜的な投与については、透過させる障壁に適切な浸透剤が、該処方中に使用される。この投与経路が、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を鼻腔に運ぶために又は舌下投与のために使用されてもよい。
　経口投与については、治療される患者により経口摂取されるために、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液体、ジェル、シロップ、スラリー、懸濁液及びそれに類似するものとしての薬学的に許容できる担体とを組み合わせることにより処方されてもよい。例えば、粉末、カプセル及び錠剤などの経口固形製剤については、適切な賦形剤は、ラクトース、ショ糖、マンニトール及びソルビトールなどの糖質のような充填剤；トウモロコシ澱粉、小麦澱粉、米澱粉、ジャガイモ澱粉、ゼラチン、ガムトラガント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのセルロース製剤；顆粒剤；及び結合剤を含む。必要であれば、架橋したポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウムの様なその塩などの崩壊剤が加えられてもよい。必要な場合は、固形用量形態は標準的な技術を使用して糖衣又は腸溶コーティングされてもよい。例えば、懸濁液、エリキシル剤及び溶液などの経口液体製剤については、適した担体、賦形剤又は希釈剤は水、グリコール、オイル、アルコールを含む。さらに、香料、防腐剤、着色剤及びそれに類似するものを加えてもよい。
　上述した製剤に加えて、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、また、徐放性製剤として処方されてもよい。このような長期持続製剤は、移植（例えば、皮下又は筋中）又は筋肉注射によって投与されてもよい。従って、例えば、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、適した高分子あるいは疎水性材料（例えば、許容されるオイル中のエマルジョンとして）若しくはイオン交換樹脂と共に、又は、例えば中程度の水溶性塩の様な中程度の水溶性誘導体として処方されてもよい。
　あるいは、他の医薬品運搬システムが用いられてもよい。リポソーム及びエマルジョンがBCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を運搬するのに使用されてもよい。ジメチルスルホキシドのような特定の有機溶剤が、また、通常より大きな毒性の犠牲を払うが、用いられてもよい。さらに、該化合物は治療剤を含む固体高分子の半透性マトリックスなどの徐放システムを使用して運搬されてもよい。
5.　治療方法
　本発明によれば、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を患っている患者にBCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体を投与するステップを含む、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病を治療する方法が提供される。上記患者は、哺乳動物であってもよく、好ましくはヒトである。フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)リンパ性白血病は、フィラデルフィア染色体陽性(Ph+)急性リンパ性白血病（Ph+ALL）又はフィラデルフィア染色体陽性(Ph+)慢性骨髄性白血病のリンパ性転化(Ph+LC)であり、このましくは、Ph+ALLである。
　本治療方法において、BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体は、同時に投与してもよい。この場合、上記阻害剤と誘導体は、合剤として投与してもよく、単剤を同時に投与してもよい。また、上記阻害剤と誘導体は、時間差をもって投与してもよく、投与の順番は、特に限定されない。時間差は、例えば、1秒、5秒、10秒、1分、5分、10分、30分、1時間又は2時間以内であってもよく、ここで例示した数値の何れか２つの間の範囲内であってもよい。
　以下、本発明を実施例及び図面によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。統計的に有意とは、ｐ値が＜０．０５、好ましくは＜０．０１、及び最も好ましくは＜０．００１であることを指す。
実施例1
トリチウムサイミジン取り込み法（H3-thymidine uptake法）を用いた検討
　最初に、種々のALL細胞株を用いて、レナリドミド（LMD）単独でのH3-thymidine-uptakeに対する影響を検討した。96ウエル培養プレートを用いて、H3-thymidineをPh+ALL株(n=7)、1;19転座株(n=2)、17;19転座株(n=2)、MLL転座株(n=2)、12;21転座株(n=2)に加えて、20μM濃度のLMDの添加又は無添加の条件下で各細胞株を3日間培養（5x104 細胞/ウエル）して、各株が取り込んだH3-thymidineを測定した。Ph+ALL株は、他の細胞株よりH3-thymidine-uptakeが強く抑制される傾向を示し、特に2つのPh+ALL株(KOPN55bi,KOPN57bi)は約50%の阻害率（%inhibition）を示した(不図示)。
実施例２
　Ph+ALL株(KOPN57bi)を用いて、LMDとImatinibの併用効果を検討した。20μM濃度のLMDの単独添加、0.5μM濃度のImatinibの単独添加及びそれらの併用添加の条件下で、Ph+ALL株(KOPN57bi)をH3-thymidineと共に3日間培養し、H3-thymidine-uptakeを測定した。LMDとImatinib単独添加では約50%の%inhibitionを示したが、併用添加では90%以上の%inhibitionを示した。LMD濃度を20μMと一定にし、Imatinib濃度を変動させると、0.5μM以上で%inhibitionが90%以上に増大した（図１A）。次にImatinib濃度を0.5μMと一定にし、LMD濃度を変動させると、2μM以上で%inhibitionが90%以上に増大した（図１B）。従って、培養3日間では、LMD濃度2μM、Imatinib濃度0.5μMでほぼ最大の抑制効果が認められた。20μM濃度のLMDと0.5μM濃度で1-5日間培養すると、培養2日目から併用効果が認められ、3日目で%inhibitionが90%以上となり、その効果は5日目まで認められた（図２）。
実施例３
alamarBlue法を用いた生細胞数の検討
　Thymidineは増殖期細胞のDNAに取り込まれるため、H3-thymidine-uptakeの低下は、増殖期細胞数と生細胞数の両者に影響を受ける。LMDとImatinibの併用添加によるH3-thymidine-uptakeの低下が増殖停止と細胞死のどちらの機序でもたらされるかを明らかにするために、LMD(20μM)若しくはImatinib(0.5μM)の単独又はそれらの併用添加の条件下でPh+ALL細胞株(KOPN57bi)をH3-thymidineと共に3日間培養し、alamarBlue法で生細胞数を算出した。その結果、単独添加では生細胞数の減少は軽度であったが、併用添加では生細胞数が著明に減少した。従って、単独添加では主として増殖停止を誘導し、併用添加では主として細胞死を誘導していることが示唆された(不図示)。
実施例４
アネキシン５(Annexin V)/プロピジウムアイオダイド(PI)二重染色法を用いた細胞死の検討
　細胞が細胞死に至る早期段階では、細胞膜上に特定のリン脂質が表出される。このリン脂質に強い結合性を示すAnnexin Vを蛍光色素で標識し、フローサイトメトリー法で検討すると、早期細胞死の割合を検出できる。一方、細胞死の後期段階では、細胞膜・核膜が部分的に破壊されるため、DNA結合色素のPIが核内DNAに結合することが可能になり、PI染色を用いたフローサイトメトリー法で後期細胞死の割合を検出できる。LMD(20μM)若しくはImatinib(0.5μM)の単独又はそれらの併用添加の条件下でPh+ALL細胞株(KOPN57bi)を3日間培養した。培養後、Annexin VとPIを培地に加えた。Annexin V/PI二重染色法で検討すると、生存細胞率（Annexin V-, PI-）は、無添加で85％、単独添加ではそれぞれ約60%であったが、併用添加では28%まで減少した（図３）。併用投与による生存細胞率の低下は培養期間を延長するとより著明に認められた(不図示)。
実施例５
PI染色法を用いた細胞回転の検討
　細胞膜・核膜を薬剤で固定し、PIが自由に核内DNAに結合できる条件下でPI染色を行うと、DNA量に応じて染色強度が変化するため、フローサイトメトリー法で細胞回転停止期（G0/G1期、2N）、DNA合成期（S期、2N→4N）、細胞分裂前期（G2期、4N）、細胞分裂期（M期、4N→2N）を区別できる。また、細胞死がアポトーシスによって誘導される場合は、DNA切断によってG0/G1期よりDNA量が減少（2N未満）した細胞分画が検出される。LMD(20μM)若しくはImatinib(0.5μM)の単独又はそれらの併用添加の条件下でPh+ALL細胞株(KOPN57bi)を3日間培養し、培養後各細胞株においてPI染色を行った。単独添加では、S期分画の低下とアポトーシス分画の軽度の増加が認められただけであったが、併用添加では、全ての生細胞分画の割合が低下すると同時に、アポトーシス分画が42.34%と著明に増加した（図４）。
実施例５
免疫不全マウスを用いたin vivoにおける検討
　NOD/SCID/γnullマウス(NOGマウス)は、ヒトの造血幹細胞や腫瘍細胞を効率的に移植可能な免疫不全マウスとして研究に汎用されている。ヒト白血病細胞が移植されたマウスは、ヒト白血病細胞に対する薬剤の治療効果をマウス体内(in vivo)で検討が可能となるシステムである。2x106細胞のPh+ALL細胞株(KOPN57bi)をマウスの尾静脈から投与し、生食投与群、LMD単独投与群（LMD30mg/kg/日）、Imatinib単独投与群（150mg/kg/日）、LMD/Imatinib併用投与群（LMD30mg/kg/日, Imatinib 150mg/kg/日）（それぞれの群に4匹のマウス）に分けて経過観察を行った。投与2週間後のマウス骨髄血から単核球分画を分離し、ヒト白血病細胞に結合する抗ヒトCD45抗体で染色した後に、フローサイトメトリー法で単核球分画中のPh+ALL細胞の割合を検討した。生食投与群では約30％のPh+ALL細胞を認め、Imatinib単独投与群では効果が認められなかったが、LMD単独投与群では2.1%まで減少した。併用投与群では0.3%まで減少した（図５）。この結果は、LMDとImatinibの併用投与は、in vitroのみならず、in vivoにおいても細胞死を強く誘導した。
まとめ
　以上の結果をまとめると、LMDとImatinibの併用投与は、in vitroにおいてもin vivoにおいても、ヒトPh+ALL細胞に強い細胞死誘導効果を示すことが明らかになった。LMDとImatiniとを併用した医薬組成物は、Ph+ALL患者の治療成績を格段に向上させることができる優れた医薬組成物であり、LMDとImatiniとの併用は、優れた治療方法である。

Claims (3)

  1. 　BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤とサリドマイド誘導体とを含む医薬組成物。
  2. 　前記サリドマイド誘導体は、レナリドミド及び/又はポマリドミドである、請求項1に記載の医薬組成物。
  3. 　前記BCR-ABLチロシンキナーゼ阻害剤は、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、アキシチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダムナカンタール、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ネラチニブ、セマキサニブ、スニチニブ、トセラニブ、チルホスチン、ヴァンデタニブ、ヴァタラニブ、INNO-406、AP24534、XL228、PHA-739358、MK-0457、SGX393及びDC2036からなる群より選択される少なくとも1つである、請求項1又は2に記載の医薬組成物。
PCT/JP2015/075773 2015-09-10 2015-09-10 フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法 WO2017042944A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/JP2015/075773 WO2017042944A1 (ja) 2015-09-10 2015-09-10 フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法
US15/758,582 US10314834B2 (en) 2015-09-10 2016-09-09 Therapeutic agent or treatment method for Philadelphia chromosome-positive (Ph+) acute lymphocytic leukemia (ALL) having IKZF1 mutation
PCT/JP2016/076636 WO2017043633A1 (ja) 2015-09-10 2016-09-09 ＩＫＺＦ１変異を有するフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/JP2015/075773 WO2017042944A1 (ja) 2015-09-10 2015-09-10 フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017042944A1 true WO2017042944A1 (ja) 2017-03-16

Family

ID=58239338

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2015/075773 WO2017042944A1 (ja) 2015-09-10 2015-09-10 フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法
PCT/JP2016/076636 WO2017043633A1 (ja) 2015-09-10 2016-09-09 ＩＫＺＦ１変異を有するフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2016/076636 WO2017043633A1 (ja) 2015-09-10 2016-09-09 ＩＫＺＦ１変異を有するフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法

Country Status (2)

Country Link
US (1) US10314834B2 (ja)
WO (2) WO2017042944A1 (ja)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10966966B2 (en) 2019-08-12 2021-04-06 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11185535B2 (en) 2019-12-30 2021-11-30 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Amorphous kinase inhibitor formulations and methods of use thereof
US11266635B2 (en) 2019-08-12 2022-03-08 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11395818B2 (en) 2019-12-30 2022-07-26 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
US11779572B1 (en) 2022-09-02 2023-10-10 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11986463B2 (en) 2018-01-31 2024-05-21 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Combination therapy for the treatment of gastrointestinal stromal tumor
US12102620B2 (en) 2018-01-31 2024-10-01 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Combination therapy for the treatment of mastocytosis

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3391907B8 (en) * 2017-04-20 2020-03-04 iOmx Therapeutics AG Intracellular kinase sik3 associated with resistance against anti-tumour immune responses, and uses thereof
IL307799A (en) * 2021-05-17 2023-12-01 Biohaven Therapeutics Ltd Agents for targeted coupling techniques and conjugated products

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2010302961A1 (en) 2009-10-01 2012-04-19 Csl Limited Method of treatment of philadelphia chromosome positive leukaemia

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRAUN, TAL.: "Targeting NF-KB in hematologic malignancies", CELL DEATH AND DIFFERENTIATION, vol. 13, no. 5, May 2006 (2006-05-01), pages 748 - 758, XP055374010, ISSN: 1350-9047 *
HURTADO MONROY, RAFAEL ET AL.: "Imatinib (IM) Plus Thalidomide (Thali), A Effective Combination For The Treatment Of Chronic Myeloid Leukemia (CML) Philadelphia ChromosomePositive (Ph +) In IM-Resistant Disease.", REPORT OF 14 NEW CASES FROM A SINGLE CENTER IN MEXICO , BLOOD, vol. 122, no. Issue 21, 2013, pages 5172, XP055370316, ISSN: 1528-0020 *
HURTADO-MONROY, RAFAEL ET AL.: "Chronic Myeloid Leukemia Philadelphia Chromosome Positive (CML Ph+) With Imatinib (IM) Intolerance or Resistant Disease Response to Thalidomide (TALI) Treatment Preliminary Report of a Serial of Cases With Encouraging Results", CLINICAL LYMPHOMA, MYELOMA & LEUKEMIA, vol. 13, no. Supplement 2, September 2013 (2013-09-01), pages S385 - S386, XP055369594, ISSN: 2152-2650 *
JUNGKUNZ-STIER, ISABEL ET AL.: "Modulation of natural killer cell effector functions through lenalidomide/dasatinib and their combined effects against multiple myeloma cells", LEUKEMIA & LYMPHOMA, vol. 55, no. 1, 2014, pages 168 - 176, XP055373993, ISSN: 1029-2403, [retrieved on 20130603] *
OFFIAH, C ET AL.: "Co-existing chronic myeloid leukaemia and multiple myeloma: rapid response to lenalidomide during imatinib treatment", INTERNATIONAL JOURNAL OF HEMATOLOGY, vol. 95, no. 4, 2012, pages 451 - 452, XP055374002, ISSN: 0925-5710 *
OTA, FUCHS: "Transcription factor NF-KB inhibitors as single therapeutic agents or in combination with classical chemotherapeutic agents for the treatment of hematologic malignancies", CURRENT MOLECULAR PHARMACOLOGY, vol. 3, no. 3, 2010, pages 98 - 122, XP002632066, ISSN: 1874-4672 *
RINI, B. ET AL.: "A phase I/II study of lenalidomide in combination with sunitinib in patients with advanced or metastatic renal cell carcinoma", ANNALS OF ONCOLOGY, vol. 25, no. 9, June 2014 (2014-06-01), pages 1794 - 1799, XP055373987, ISSN: 0923-7534 *
TSAI, HJ ET AL.: "Bioimaging analysis of nuclear factor-KB activity in Philadelphia chromosome- positive acute lymphoblastic leukemia cells reveals its synergistic upregulation by tumor necrosis factor-a-stimulated changes to the microenvironment", CANCER SCIENCE, vol. 102, no. Issue 11, 2011, pages 2014 - 2021, ISSN: 1349-7006 *

Cited By (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11986463B2 (en) 2018-01-31 2024-05-21 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Combination therapy for the treatment of gastrointestinal stromal tumor
US12102620B2 (en) 2018-01-31 2024-10-01 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Combination therapy for the treatment of mastocytosis
US11969414B2 (en) 2019-08-12 2024-04-30 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US10966966B2 (en) 2019-08-12 2021-04-06 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US12059411B2 (en) 2019-08-12 2024-08-13 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11426390B2 (en) 2019-08-12 2022-08-30 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11433056B1 (en) 2019-08-12 2022-09-06 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11529336B2 (en) 2019-08-12 2022-12-20 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US12023325B2 (en) 2019-08-12 2024-07-02 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11576904B2 (en) 2019-08-12 2023-02-14 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US12023326B2 (en) 2019-08-12 2024-07-02 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US12023327B2 (en) 2019-08-12 2024-07-02 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11266635B2 (en) 2019-08-12 2022-03-08 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11344536B1 (en) 2019-08-12 2022-05-31 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11534432B2 (en) 2019-08-12 2022-12-27 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11813251B2 (en) 2019-08-12 2023-11-14 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US12059410B2 (en) 2019-08-12 2024-08-13 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
US11801237B2 (en) 2019-12-30 2023-10-31 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Amorphous kinase inhibitor formulations and methods of use thereof
US11911370B1 (en) 2019-12-30 2024-02-27 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11185535B2 (en) 2019-12-30 2021-11-30 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Amorphous kinase inhibitor formulations and methods of use thereof
US11903933B2 (en) 2019-12-30 2024-02-20 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11896585B2 (en) 2019-12-30 2024-02-13 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
US11918564B1 (en) 2019-12-30 2024-03-05 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11969415B1 (en) 2019-12-30 2024-04-30 Deciphera Pharmaceuticals, Llc (methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11576903B2 (en) 2019-12-30 2023-02-14 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Amorphous kinase inhibitor formulations and methods of use thereof
US11612591B2 (en) 2019-12-30 2023-03-28 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
US11793795B2 (en) 2019-12-30 2023-10-24 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
US11844788B1 (en) 2019-12-30 2023-12-19 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US12023328B2 (en) 2019-12-30 2024-07-02 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11850241B1 (en) 2019-12-30 2023-12-26 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11395818B2 (en) 2019-12-30 2022-07-26 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
US11850240B1 (en) 2019-12-30 2023-12-26 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US12064422B2 (en) 2019-12-30 2024-08-20 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluoropheyl)-3-phenylurea
US11779572B1 (en) 2022-09-02 2023-10-10 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors

Also Published As

Publication number Publication date
US20180243284A1 (en) 2018-08-30
US10314834B2 (en) 2019-06-11
WO2017043633A1 (ja) 2017-03-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2017042944A1 (ja) フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の治療薬又は治療方法
US20170259081A1 (en) Methods for regulating cell mitosis by inhibiting serine/threonine phosphatase
US11524009B2 (en) Combination comprising at least one spliceosome modulator and at least one inhibitor chosen from BCL2 inhibitors, BCL2/BCLxL inhibitors, and BCLxL inhibitors and methods of use
TWI759316B (zh) Bcl-2抑制劑及mcl1抑制劑之組合、其用途及醫藥組合物
WO2016204193A1 (ja) 抗がん剤
JP7111811B2 (ja) がんの治療に使用するためのミルシクリブの製剤及びその治療的組み合わせ
KR20220024639A (ko) 백혈병 또는 골수이형성 증후군을 치료하기 위한 베네토클락스, 길테리티닙, 미도스타우린 또는 다른 화합물과 조합된 아자시티딘
WO2012136732A1 (en) Treatment of multiple myeloma with masitinib
JP2023533485A (ja) 重症型の肺高血圧症の治療方法
JP2016502981A (ja) ムチンが関与する疾患の処置
RU2746705C2 (ru) Комбинация bcl-2 ингибитора и mcl-1 ингибитора, их применения и фармацевтические композиции
JP7493503B2 (ja) Ｍｃｌ－１阻害剤とミドスタウリンとの組み合わせ、その使用及び医薬組成物
JP2019523277A (ja) 血液癌の併用療法
WO2019082124A1 (en) COMPOSITION AND METHOD FOR THE TREATMENT OF LARGE B-CELL DIFFUSED LYMPHOMA
JP7186731B2 (ja) 血液ガンのためのｍｃｌ－１阻害剤と標準治療処置との組み合わせ、その使用及び医薬組成物
JP2021063014A (ja) 白血病治療薬
WO2023242100A1 (en) Novel ras inhibitors
KR20240112932A (ko) 암 치료를 위한 cdk2 억제제 및 cdk4 억제제를 포함하는 방법 및 투여 섭생법
JP2020537689A (ja) Ａ−ノル−５αアンドロスタン化合物を含む白血球増多製剤およびその使用
RU2818453C2 (ru) Комбинация ингибитора mcl-1 и мидостаурина, ее применения и фармацевтические композиции
JP6352952B2 (ja) グリアジンペプチドを用いた癌の治療のためのキットおよび方法
JP2012025734A (ja) 骨髄異形性症候群を治療するための組成物および方法
TWI674094B (zh) 治療或緩解慢性骨髓性白血病用之醫藥組合物
JP2024523123A (ja) 去勢抵抗性前立腺がんの治療薬の調製におけるスタキオースの使用
WO2024150014A1 (en) Medicinal products and methods for the alleviation of cancer immunotherapy-associated cytokine release syndrome

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 15903606

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 15903606

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP