WO1999055805A1

WO1999055805A1 - Verfahren zur markierung von flüssigkeiten mit mindestens zwei markierstoffen und verfahren zu deren detektion

Info

Publication number: WO1999055805A1
Application number: PCT/EP1999/002452
Authority: WO
Inventors: Frank Meyer; Gerhard Wagenblast; Karin Heidrun Beck; Christos Vamvakaris
Original assignee: Basf Aktiengesellschaft
Priority date: 1998-04-23
Filing date: 1999-04-12
Publication date: 1999-11-04
Also published as: AU3707399A; TW460571B; DE19818177A1; AR016218A1; PE20000464A1

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten mit mindestens zwei Markierstoffen, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß die Markierstoffe im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm absorbieren und als Folge davon Fluoreszenzstrahlung emittieren, im wesentlichen nicht miteinander überlappende Absorptionsbereiche aufweisen und mindestens einer der Markierstoffe eine Wellenlänge des Absorptionsmaximums von mehr als 850 nm besitzt. Weiter betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Detektion solcher Markierstoffe in Flüssigkeiten, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine Strahlungsquelle verwendet, welche in den Absorptionsbereichen der Markierstoffe Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist oder welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man für jeden einzelnen Markierstoff eine entsprechende Strahlungsquelle verwendet, welche im Absorptionsbereich des Markierstoffs Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist. Die vorliegende Erfindung betrifft zudem Flüssigkeiten, welche nach dem Verfahren der vorliegenden Erfindung markiert sind.

Description

Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten mit mindestens zwei Markierstoffen und Verfahren zu deren Detektion

Beschreibung

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten mit mindestens zwei Markierstoffen, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß die Markierstoffe im Spektralbe- reich von 600 bis 1200 nm absorbieren und als Folge davon Fluoreszenzstrahlung emittieren, im wesentlichen nicht miteinander überlappende Absorptionsbereiche aufweisen und mindestens einer der Markierstoffe eine Wellenlänge des Absorptions- maximums von mehr als 850 nm besitzt.

Weiter betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Detektion solcher Markierstoffe in Flüssigkeiten, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine Strahlungsquelle verwendet, welche in den Absorptionsbereichen der Markierstoffe Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist oder welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man für jeden einzelnen Markierstoff eine entsprechende Strahlungsquelle verwendet, welche im Absorptionsbereich des Markiersto fs Strahlung emittiert, und man die von den Markier- Stoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist.

Die vorliegende Erfindung betrifft zudem Flüssigkeiten, welche nach dem Verfahren der vorliegenden Erfindung markiert sind.

Es ist häufig erforderlich, Flüssigkeiten zu markieren, um in der Folge, z.B. bei ihrer Anwendung, mittels geeigneter Methoden die so markierten Flüssigkeiten wieder zu detektieren. Beispielsweise kann auf diese Weise Heizöl, welches üblicherweise steuerlich begünstigt ist, von in der Regel höher versteuertem Dieselöl unterschieden werden oder es lassen sich flüssige Produktströme in großtechnischen Anlagen, wie z.B. Erdölraffinerien, markieren und dadurch verfolgen.

Soll die Markierung der Flüssigkeiten für das menschliche Auge unsichtbar sein, so ist man auf Markierstoffe angewiesen, welche außerhalb des sichtbaren Bereichs des Spektrums absorbieren und/ oder Strahlung emittieren. Wegen der hohen Empfindlichkeit des Nachweises und damit verbunden der Möglichkeit, mit geringen Zugaben des Markierstoffs eine zuverlässige Markierung zu erreichen, sind hier vor allem Markierstoffe von Bedeutung, welche die absorbierte Strahlung als Fluoreszenzstrahlung wieder emittieren. In der Regel besitzt diese emittierte Strahlung dabei 2 eine niedrigere Frequenz als die absorbierte Strahlung (STOKES- Strahlung) , in selteneren Fällen dieselbe (Resonanz-Fluoreszenz) oder sogar eine höhere Frequenz (A TI-STOKES-Strahlung) .

Von großer (volks-)wirtschaftlicher Bedeutung ist die Markierung von Kohlenwasserstoffen und Kohlenwasserstoffgemischen (z.B. verschiedenste Qualitäten von Diesel- und Ottokraftstoffen sowie sonstigen Mineralölen) . Da diese Flüssigkeiten üblicherweise im Spektralbereich unterhalb von etwa 600 nm selbst hohe Absorption und/oder Fluoreszenz aufweisen, werden sinnvollerweise Markierstoffe verwendet, welche oberhalb von etwa 600 nm absorbieren und/oder fluoreszieren.

Idealerweise besitzen daher Verbindungen, die als Markierstoffe verwendet werden sollen, folgende Grundvoraussetzungen:

Sie zeigen im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm eine starke Absorption,

sie besitzen im sichtbaren Bereich des Spektrums dagegen keine oder nur geringfügige Absorption bzw. Fluoreszenz,

sie zeigen im Spektralbereich von etwa 600 bis etwa 1200 nm eine starke Emission von Fluoreszenzstrahlung,

die emittierte Fluoreszenzstrahlung läßt sich auch bei (gewichts- mäßigen) Konzentrationen der Markierstoffe in der betreffenden

Flüssigkeit von weniger als 1 pp noch zuverlässig detektieren und

sie besitzen in der zu markierenden Flüssigkeit eine ausreichende

Löslichkeit.

Je nach spezieller Anforderung können für die Verbindungen, die als Markierstoffe verwendet werden sollen, noch ein oder mehrere der nachfolgend genannten Punkte von Bedeutung sein:

Sie sind mit anderen Markierstoffen und gegebenenfalls vorliegenden Additiven mischbar (dies gilt auch für die Mischbarkeit von markierten und gegebenenfalls additivierten Flüssigkeiten miteinander) ,

sie sind sowohl selbst als auch gelöst in der zu markierenden Flüssigkeit unter Einwirkung äußerer Bedingungen, wie z.B. Temperatur, Licht, Feuchtigkeit etc., stabil, 3 sie wirken nicht schädigend auf die Umgebung, wie z.B. Verbrennungsmotoren, Lagertanks etc. , in welcher sie verwendet werden und

sie sind sowohl toxikologisch als auch ökologisch verträglich.

In der Schrift WO 94/02570 wird zur Markierung von Flüssigkeiten die Verwendung von Markierstoffen aus der Klasse der metallfreien oder metallhaltigen Phthalocyanine, der metallfreien oder metall- haltigen Naphthalocyanine, der Nickel -Dithiolen-Komplexe, der

A iniumverbindungen von aromatischen Aminen, der Methinfarbstoffe oder der Azulenquadratsäurefarbstoffe beschrieben, welche ihr Absorptionsmaximum im Bereich von 600 bis 1 200 nm und/oder ein Fluoreszenzmaximum im Bereich von 620 bis 1 200 nm aufweisen. Weiter wird ein Verfahren beschrieben, welches im wesentlichen darin besteht, daß die Fluoreszenzstrahlung des in der Flüssigkeit vorhandenen Markierstoffs, welcher im besagten Spektral - bereich Strahlung absorbiert, detektiert wird. Auch wird ein Detektor beschrieben, welcher zum Nachweis des Markierstoffs ver- wendet wird. Die Verwendung mehrerer Markierstoffe gleichzeitig wird jedoch nicht explizit erwähnt.

Die Schrift US 5,525,516 beschreibt ebenfalls ein Verfahren zur Markierung von Mineralölen mit Verbindungen, welche Fluoreszenzen im NIR aufweisen. Als solche Markierstoffe kommen substituierte Phthalocyanine, substituierte Naphthalocyanine sowie Quadratoder Krokonsäurederivate zur Verwendung. In der Beschreibung dieser US-Schrift (Spalte 3, Zeilen 35 bis 40) wird ausgeführt, daß im Rahmen der beschriebenen Erfindung ein oder mehrere Mineralöle nicht nur mit einer, sondern auch mit zweien oder mehreren im IR-Bereich fluoreszierenden Verbindungen markiert werden können. Weiter wird aber auch darauf hingewiesen (Spalte 3, Zeilen 41 bis 44), daß diese fluoreszierende (n) Verbindung (en) vorzugsweise unterhalb von 850 nm absorbieren sollten, da ober- halb dieser Wellenlänge die Mineralöle starke Absorption zeigten. Weiter wird in dieser Schrift ein Verfahren zur Identifizierung von Mineralölen beansprucht, welche mit einem oder mehreren Markierstoffen markiert worden sind. Hierbei wird ein Anregungs- bereich (Absorptionsbereich) für das markierte Mineralöl bzw. die darin enthaltenen Markierstoffe von 670 bis 850 nm angegeben. Darüber hinaus werden aber keine weiteren Hinweise darauf geliefert, wie im Falle der Markierung von Mineralölen mit mehr als einem Markierstoff verfahren werden soll.

In der Schrift US 5,710,046 wird ein Verfahren zur Markierung von Benzin beschrieben, welches ebenfalls auf die Detektion eines im Benzin gelösten und im wesentlichen metallfreien Fluoreszenzfarb- 4

Stoffs hinausläuft. Hierbei wird eine entsprechend markierte Benzinprobe mit Strahlung aus einem Wellenlängenband von 600 bis 2500 nm angeregt, das im Wellenlängenband von etwa 600 bis 2500 nm vom Farbstoff emittierte Fluoreszenzlicht detektiert und das resultierende Detektionssignal zur Identifizierung der markierten Probe herangezogen. Weiter wird in dieser Schrift ausführlich der Aufbau eines Detektors zum Nachweis der Fluoreszenz - farbstoffe in den markierten Benzinproben beschrieben. Auf die Verwendung von mehreren Markierstoffen (Farbstoffen) wird jedoch nicht eingegangen.

Sollen Flüssigkeiten, wie z.B. Kohlenwasserstoffe und Kohlenwasserstoffgemische (beispielsweise Diesel- und Ottokraftstoffe sowie sonstigen Mineralöle) , unterschiedlicher Herkunft oder ver- schiedener Hersteller markiert werden, so benötigt man bei Verwendung von lediglich einem Markierstoff je Flüssigkeit eine Vielzahl verschiedener Markierstoffe. Diese müssen sich hinsichtlich ihres Absorptions- und/oder Fluoreszenzverhaltens dabei ausreichend voneinander unterscheiden, damit eine Identifizierung der Flüssigkeiten hinsichtlich ihrer Provenienz und/oder ihres Herstellers möglich wird. Durch die Markierung von Flüssigkeiten mit nur einem Markierstoff ist es zudem unbefugten Dritten leichter möglich, unmarkierte Flüssigkeiten durch Zugabe des entsprechenden Markierstoffs zu "fälschen" . Dies ist von großer Bedeutung, wenn chemisch und qualitativ gleichwertige Flüssigkeiten mit unterschiedlichen Fiskalabgaben belegt sind. Beispielsweise seien hier nur Heizöl und Dieselkraftstoff genannt.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung war es daher, durch Zugabe von mehr als zwei Markierstoffen Flüssigkeiten so zu markieren, d.h. so mit einem "Fingerabdruck" zu versehen, daß eine Nachstellung der Markierung erschwert wird.

Diese Aufgabe wurde gelöst durch ein Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten mit mindestens zwei Markierstoffen, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß die Markierstoffe

im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm absorbieren und als Folge davon Fluoreszenzstrahlung emittieren,

im wesentlichen nicht miteinander überlappende Absorptionsbereiche aufweisen und

mindestens einer der Markierstoffe eine Wellenlänge des Absorptionsmaximums von mehr als 850 nm besitzt. 5

Durch die Verwendung von mindestens einem Markierstoff, dessen Absorptionsbereich bei mehr als 850 nm liegt, wird ein größerer Wellenlängenbereich der Absorption/Fluoreszenz zur Markierung von' Flüssigkeiten erschlossen. Hierdurch ist es möglich, eine größere Anzahl von Markierstoffen einzusetzen, deren Absorptionsbereiche sich im wesentlichen nicht überlappen.

"Im wesentlichen nicht miteinander überlappende Absorptions- bereiche" bedeutet hierbei, daß sich die jeweiligen Absorptions- spektren zweier beliebiger in Betracht kommender Markierstoffe, bezogen auf vergleichbare Bedingungen (wie z.B. dieselbe Flüssigkeit, dieselbe molare Konzentration in der markierten Flüssigkeit und dieselbe absorbierende Schichtdicke der markierten Flüssigkeit) , möglichst nicht überlappen sollen. Sofern jedoch Über- lappung eintritt, sollte bei allen Wellenlängen im Überlappungs- bereich bei jeder jeweiligen in Betracht stehenden Wellenlänge der Wert des Extinktionskoef izienten des einen Markierstoffs nicht mehr als etwa 5 % des Werts des anderen Markierstoffs betragen. Zugrunde liegt dieser Betrachtung dabei ein auf den Blindwert bezogenes Absorptionsspektrum. Dieser Blindwert entspricht dem unter vergleichbaren Bedingungen gemessenen Absorptionsspektrum der entsprechenden reinen (unmarkierten) Flüssigkeit.

Bevorzugt verwendet man im erfindungsgemäßen Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten Markierstoffe, deren jeweilige Wellenlänge des Absorptionsmaximums im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm liegt.

Bevorzugt wird im erfindungsgemäßen Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten eine Kombination von n Markierstoffen verwendet, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 10, also Werte von 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10 bedeutet.

Besonders bevorzugt wird im erfindungsgemäßen Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten eine Kombination von n Markier - Stoffen verwendet, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 6, also Werte von 2, 3, 4, 5 oder 6 bedeutet.

Ganz besonders bevorzugt wird im erfindungsgemäßen Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten eine Kombination von n Markier - Stoffen verwendet, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 4, also Werte von 2, 3 oder 4 bedeutet.

Als Markierstoffe, welche im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm absorbieren und als Folge davon FluoreszenzStrahlung emittieren, setzt man im erfindungsgemäßen Verfahren sowie in den bevorzugten 6

Ausführungsformen, in welchen man eine Kombination von n gleich 2 bis 10, n gleich 2 bis 6 oder n gleich 2 bis 4 Markierstoffen verwendet, Verbindungen zu, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus metallfreien und metallhaltigen Phthalocyaninen, metallfreien und metallhaltigen Naphthalocyaninen, Nickel -Dithio - len- Komplexen, Aminiu verbindungen von aromatischen Aminen, Methinfarbstoffen, Quadratsäurefarbstoffen und Krokonsäurefarb- stoffen.

Als Markierstoffe, die bei einer Wellenlänge des Absorptions- maximums im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm absorbieren und als Folge davon Fluoreszenzstrahlung emittieren, setzt man im erfindungsgemäßen Verfahren sowie in den bevorzugten Ausführungs- formen, in welchen man eine Kombination von n gleich 2 bis 10, n gleich 2 bis 6 oder n gleich 2 bis 4 Markierstoffen verwendet, vorzugsweise ebensolche Verbindungen zu, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus metallfreien und metallhaltigen Phthalocyaninen, metallfreien und metallhaltigen Naphthalocyaninen, Nickel -Dithiolen-Komplexen, Aminiumverbindungen von aromatischen Aminen, Methinfarbstoffen, Quadratsäurefarbstoffen und Krokonsäurefarbstoffen.

Als Markierstoffe, die bei einer Wellenlänge des Absorptions- maximums von mehr als 850 nm absorbieren und als Folge davon Fluoreszenzstrahlung emittieren, setzt man im erfindungsgemäßen Verfahren sowie in den bevorzugten Ausführungsformen, in welchen man eine Kombination von n gleich 2 bis 10, n gleich 2 bis 6 oder n gleich 2 bis 4 Markierstoffen verwendet, vorzugsweise mindestens eine Verbindungen zu, die ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus metallfreien und metallhaltigen Naphthalocyaninen, Nickel -Dithiolen-Komplexen, Aminiumverbindungen von aromatischen Aminen, Methinfarbstoffen, Quadratsäurefarbstoffen und Krokonsäurefarbstoffen.

Geeignete Phthalocyanine gehorchen z.B. der Formel Ia

(ia),

in der

Me¹ zweimal Wasserstoff, zweimal Lithium, Magnesium, Zink, Kupfer, Nickel, VO, TiO, A1C1, AlO-Cι-C₂₀-Alkyl, A1NH-Cι-C₂₀-Alkyl, AlN(Cι~ C₂₀-Alkyl)₂, AlO-C₆-C₂₀-Aryl, Al-NH-C₆-C₂₀-Aryl oder A1N(-C₆-C₂₀- Aryl)₂/ AIN-Het, wobei N-Het ein heterocyclischer, gesättigter oder ungesättigter fünf-, sechs- oder siebengliedriger Ring ist, welcher neben mindestens einem Stickstoffatom noch ein oder zwei weitere Stickstoffatome und/oder ein weiteres Sauerstoff- oder Schwefelatom im Ring enthalten kann, welcher gegebenenfalls ein- bis dreifach mit Cι-C₄-Alkyl, Phenyl, Benzyl oder Phenylethyl substituiert ist und welcher über ein (bzw. das) Ringstickstoffatom an das Aluminiumatom gebunden ist, oder Si(OH)₂,

mindestens 4 der Reste R¹ bis R¹⁶ unabhängig voneinander für einen Rest der Formel W-X¹, worin W für eine chemische Bindung, Sauerstoff, Schwefel, Imino, Cι-C-Alkylimino oder Phenylimino und X¹ für Cι-Crj-Alkyl oder C₃-Cι₀-Cycloalkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist und durch Phenyl substituiert sein kann, Adamantyl oder gegebenenfalls substituiertes Phenyl, heterocyclische, gesättigte fünf-, sechs- oder siebengliedrige Ringe, welche noch ein oder zwei weitere Stickstoffatome und/oder ein weiteres Sauerstoff- oder Schwefel - atom im Ring enthalten können, welche gegebenenfalls ein- bis dreifach mit Cι~C-Alkyl, Phenyl, Benzyl oder Phenylethyl substituiert sind und welche über ein (bzw. das) Ringstickstoffatom an den Benzolring gebunden sind, stehen und

gegebenenfalls die übrigen Reste R¹ bis R¹⁶ Wasserstoff, Halogen, Hydroxysulfonyl oder Cχ-C-Dialkylsulfamoyl bedeuten.

Geeignete Phthalocyanine gehorchen weiterhin z.B. der Formel Ib (Ib),

in der

R¹⁷ und R¹⁸ oder R¹⁸ und R¹⁹ oder R¹⁹ und R²⁰ zusammen jeweils einen Rest der Formel X²-C₂H-X³, worin einer der beiden Reste X² und X³ für Sauerstoff und der andere für Imino oder Cι-C₄-Alkylimino steht, und

R¹⁹ und R²⁰ oder R¹⁷ und R²⁰ oder R¹⁷ und R¹⁸ unabhängig voneinander jeweils Wasserstoff oder Halogen bedeuten und

Me¹ die obengenannte Bedeutung besitzt.

Weitere geeignete Phthalocyanine sind, sofern sie nicht bereits unter den oben aufgeführten Phthalocyaninen erwähnt wurden, in der Schrift US 5,526,516 unter der allgemeinen Formel I und exemplarisch in Tabelle 3 sowie in der Schrift US 5,703,229 unter der allgemeinen Formel II und exemplarisch in Tabelle 3 gezeigt.

Geeignete Naphthalocyanine gehorchen z.B. der Formel II

(II)

9 in der

Y¹, Y², Y³, Y⁴, Y⁵, Y⁶, Y⁷ und Y⁸ unabhängig voneinander jeweils Wasserstoff, Hydroxy, Cι-C₂o-Alkyl, C₃-Cιo-Cycloalkyl oder Cχ-C₂o-Alkoxy, wobei die Alkylgruppen jeweils durch 1 bis 4 Sauer - stoffatome in Etherfunktion unterbrochen sein können und gegebenenfalls durch Phenyl substituiert sind, heterocyclische, gesättigte fünf-, sechs- oder siebengliedrige Ringe, welche noch ein oder zwei weitere Stickstoffatome und/oder ein weiteres Sauerstoff- oder Schwefelatom im Ring enthalten können, welche gegebenenfalls ein- bis dreifach mit Cι-C₄-Alkyl, Phenyl, Benzyl oder Phenylethyl substituiert sind und welche über ein (bzw. das) Ringstickstoffatom an den Benzolring gebunden sind,

Y⁹, Y¹⁰, Y¹¹ und Y¹² unabhängig voneinander jeweils Wasserstoff, Cι~C o-Alkyl oder Cι-C₂o-Alkoxy, wobei die Alkylgruppen jeweils durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen sein können, Halogen, Hydroxysulfonyl oder Cι-C₄-Dialkylsulfamoyl und

Me² die Bedeutung von Me¹ besitzt oder den Rest

γl7

/

Si L

\ γl 8 bedeutet , wobei

Y¹⁷ und Y¹⁸ unabhängig voneinander j eweils für Hydroxy, Cι-C₂o- Alkoxy, Cι-C₂₀-Alkyl , C₂-C₂o-Alkenyl , C₃-C₂o-Alkenyloxy oder einen Rest der Formel

γ20

O-Si-O-Y¹⁹ γ21

stehen, worin Y¹⁹ die Bedeutung von Cι-C₂o-Alkyl, C₂-C₂o~Alkenyl oder C-C₂o-Alkadienyl und Y²⁰ und Y²¹ unabhängig voneinander jeweils die Bedeutung von Cι-Cι -Alkyl, C₂-Cχ-Alkenyl oder des obengenannten Rests OY¹⁹ besitzen.

Von besonderem Interesse sind dabei Naphthalocyanine der Formel II, in der mindestens einer der Reste Y¹ bis Y⁸ von Wasserstoff verschieden sind. 10

Weitere geeignete Naphthalocyanine sind, sofern sie nicht bereits unter den oben aufgeführten Naphthalocyaninen erwähnt wurden, in der Schrift US 5,526,516 unter der allgemeinen Formel II und exemplarisch in Tabelle 4 sowie in der Schrift US 5,703,229 unter der allgemeinen Formel III und exemplarisch in Tabelle 4 gezeigt.

Geeignete Nickel-Dithiolen-Komplexe gehorchen z.B. der Formel III

(III)

in der

L¹, L², L³ und L⁴ unabhängig voneinander jeweils Cι-C₂o-Alkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist, Phenyl, Cι-C₂o-Alkylphenyl, Cι-C o~Alkoxyphenyl, wobei die Alkylgruppen jeweils durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen sein können, oder L¹ und L² und/oder L³ und L⁴ jeweils zusammen den Rest der Formel

bedeuten.

Geeignete Aminiumverbindungen gehorchen z.B. der Formel IV

©

A^nC (IV),

in der

Z¹, Z², Z³ und Z⁴ unabhängig voneinander jeweils Cι-C₂o-Alkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist, Cι-C₂o-Alkanoyl oder einen Rest der Formel 11

/

\ z« z⁷

worin Z⁶ für Wasserstoff, Cι-C₂o-Alkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist, oder Cι-C₂o-Alkanoyl, Z⁷ für Wasserstoff oder Cι-C₂₀-Alkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist, und Z⁸ für Wasserstoff, Cι-C₂₀-Alkyl, das gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen ist, oder Halogen stehen, und

Aⁿ® das Äquivalent eines Anions bedeuten.

Geeignete Methinfarbstoffe gehorchen z.B. der Formel V

Aⁿ© (V) n

in der die Ringe A und B unabhängig voneinander jeweils gegebenenfalls benzoanelliert sind und substituiert sein können,

E¹ und E² unabhängig voneinander jeweils Sauerstoff, Schwefel, Imino oder einen Rest der Formel

—C(CH₃)₂— oder —CH=CH— ,

D einen Rest der Formel

-CE³= oder —CH=CE³—CH=

worin E³ für Wasserstoff, Cι-C₆-Alkyl, Chlor oder Brom und E⁴ für Wasserstoff oder Cι-C₆-Alkyl stehen,

Q¹ und Q² unabhängig voneinander jeweils Phenyl, C₅-C₇-Cycloalkyl, Cι-Cι₂-Alkyl das durch 1 bis 3 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen sein kann und gegebenenfalls durch Hydroxy, Chlor, 12

Brom, Carboxyl, Cι-C₄-Alkoxycarbonyl, Acryloyloxy, Methacryloy- loxy, Hydroxysulfonyl, Ci-^-Alkanoylamino, Ci-C_δ-Alkylcarbamoyl, Cι-C₆-Alkylcarbamoyloxy oder einen Rest der Formel G®(K)₃, worin G für Stickstoff oder Phosphor und K für Phenyl, C₅-C₇-Cycloalkyl oder Cι-Cι₂-Alkyl stehen, substituiert sind,

Aⁿ® das Äquivalent eines Anions und

n 1, 2 oder 3 bedeuten.

Geeignete Quadratsäurefarbstoffe sind z.B. solche Verbindungen, welche in der Schrift US 5,526,516 unter der allgemeinen Formel III gezeigt und exemplarisch in Tabelle 2 sowie in der Schrift US 5,703,229 unter der allgemeinen Formel IV und exemplarisch in Tabelle 2 aufgeführt sind.

Geeignete Quadratsäurefarbstoffe sind auch Azulenquadratsäure- farbstoffe, welche z.B. der nachstehend gezeigten Formel VI gehorchen

Oθ

(VI),

in der

J Cι-C₁₂-Alkylen,

T¹ Wasserstoff, Halogen, Amino, Hydroxy, Cι-Cι₂-Alkoxy, Phenyl, substituiertes Phenyl, Carboxyl, Cι-Cι₂-Alkoxycarbonyl, Cyano oder einen Rest der Formel -NT⁷-CO-T⁶, -CO-NT⁶T⁷ oder 0-CO-NT⁶T⁷, worin T⁶ und T⁷ unabhängig voneinander jeweils für Wasserstoff, Cι-Cι₂-Alkyl, C₅-C₇-Cycloalkyl, Phenyl, 2, 2, 6, 6-Tetramethyl- piperidin-4-yl oder Cyclohexylaminocarbonyl stehen, und

T², T³, T⁴ und T⁵ unabhängig voneinander jeweils Wasserstoff oder C__.-Ci₂-Alkyl, das gegebenenfalls durch Halogen, Amino, Cχ-Cι₂- Alkoxy, Phenyl, substituiertes Phenyl, Carboxyl, Cι~Cι -Alkoxy- carbonyl oder Cyano substituiert ist, bedeuten, 13 mit der Maßgabe, daß wenn T⁵ Wasserstoff bedeutet, an einem oder beiden Azulenringen die Ringpositionen der Substituenten J-T¹ und T⁴ innerhalb eines Azulenrings auch gegeneinander vertauscht sein können.

Geeignete Quadratsäurefarbstoffe sind z.B. auch solche Verbindungen, welche der nachstehenden Formel Via gehorchen,

Ar- Arθ (via) ,

in der Ar jeweils unabhängig voneinander für einen gegebenenfalls mit Cι-C₂o-Alkoxy, Cι-C o-Alkylamino, Cι-C₂o-Dialkylamino oder Cχ~ Co~Alkylthio substituierten, aromatischen oder heteroaromatischen fünf- oder sechsgliedrigen Ring, wie z.B. Phenyl, Naphthyl, Thio- phen, Pyridin oder Thiazol steht. Die Alkylgruppen können jeweils durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen und gegebenenfalls durch Phenyl substituiert sein.

Ar ist bevorzugt Phenyl, welches in 2-, 2,4- oder 2, 4, 6-Stellung mit den besagten Resten mono-, di- bzw. trisubstituiert ist. Vorzugsweise sind bei mehrfacher Substitution des Phenyls diese Reste gleich. Insbesondere kommen in Betracht solche Verbindungen, in welchen beide Ar gleich sind.

Geeignete Krokonsäurefarbstoffe sind z.B. solche Verbindungen, welche in der Schrift US 5,526,516 unter der allgemeinen Formel IV gezeigt und exemplarisch in Tabelle 5 aufgeführt sind.

Alle in den obengenannten Formeln auftretenden Alkyl-, Alkylen- oder Alkenylreste können sowohl geradkettig als auch verzweigt sein.

In Formel Ia, II, III, IV oder Via sind geeignete Cι-C₂o-Alkyl- reste, die gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Ether- funktion unterbrochen sind, z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Iso- propyl, Butyl, Isobutyl, sec-Butyl, tert-Butyl, Pentyl, Iso- pentyl, Neopentyl, tert-Pentyl, Hexyl, 2-Methylpentyl, Heptyl, Octyl, 2-Ethylhexyl, Isooctyl, Nonyl, Isononyl, Decyl, Isodecyl, Undecyl, Dodecyl, Tridecyl, 3 , 5, 5, 7-Tetramethylnonyl, Isotridecyl (die obigen Bezeichnungen Isooctyl, Isononyl, Isodecyl und Isotridecyl sind Trivialbezeichnungen und stammen von den nach der Oxosynthese erhaltenen Alkoholen - vgl. dazu Ull anns 14

Encyklopädie der technischen Chemie, 4. Auflage, Band 7, Seiten 215 bis 217, sowie Band 11, Seiten 435 und 436), Tetradecyl, Pentadecyl, Hexadecyl, Heptadecyl, Octadecyl, Nonadecyl, Eicosyl,^' 2-Methoxyethyl, 2-Ethoxyethyl, 2-Propoxyethyl, 2-Isopropoxyethyl, 2-Butoxyethyl, 2- oder 3-Methoxypropyl, 2- oder 3-Ethoxypropyl, 2- oder 3-Propoxypropyl, 2- oder 3-Butoxypropyl, 2- oder 4-Meth- oxybutyl, 2- oder 4-Ethoxybutyl, 2- oder 4-Propoxybutyl, 2- oder 4-Butoxybutyl, 3 , 6-Dioxaheptyl, 3, 6-Dioxaoctyl, 4, 8-Dioxanonyl, 3, 7-Dioxaoctyl, 3, 7-Dioxanonyl, 4, 7-Dioxaoctyl, 4 , 7-Dioxanonyl, 4, 8-Dioxadecyl, 3 , 6, 8-Trioxadecyl , 3, 6, 9-Trioxaundecyl,

3, 6, 9, 12-Tetraoxatridecyl oder 3, 6, 9, 12-Tetraoxatetradecyl.

In Formel Ia oder II sind geeignete C₃-Cιrj-Cycloalkylreste verzweigte oder unverzweigte Cycloalkylreste, die gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen sind, z.B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Tetrahydrof ranyl, Cyclohexyl, Tetrahydropyranyl , Cycloheptyl, Oxepanyl, 1 -Methyl - cyclopropyl, 1-Ethylcyclopropyl, 1-Propylcyclopropyl, 1-Butyl- cyclopropyl, 1-Pentylcyclopropyl, 1 -Methyl -1-Butylcyclopropyl, 1, 2-Dimethylcyclypropyl, 1 -Methyl-2 -Ethylcyclopropyl, Cyclooctyl, Cyclononyl oder Cyclodecyl.

In Formel Ia, Ib oder II sind geeignete C₆-C₂o~Arylreste in den AlO-C₆-C₂₀-Aryl-, Al-NH-C₆-C₂₀-Aryl- oder A1N (-C₆-C₂₀-Aryl)₂- Gruppierungen von Me¹ bzw. Me² z.B. gegebenenfalls mit bis zu zwei Cι-C₇-Alkyl-, mit bis zu drei Cι-C-Alkyl-, mit bis zu vier Cι~C₃- Alkyl- oder mit bis zu fünf Methyl- oder Ethylresten substituiertes Phenyl oder gegebenenfalls mit bis zu zwei Cχ-C5-Alkyl, mit bis zu drei Cχ-C₃-Alkyl- oder mit bis zu vier Methyl- oder Ethyl- resten substituiertes Naphthyl, wobei solche gegebenenfalls vorhandenen Alkylsubstituenten bereits unter den vorher aufgeführten ^ci"^c ₂₀~Alkylresten genannt sind.

In Formel Ia, Ib oder II leiten sich geeignete N-Het in den A1N- Het-Gruppierungen von Me¹ bzw. Me² ab von z.B. Pyrrol, Pyrrolidin, Pyrazol, Pyrazolidin, Imidazol, Imidazolin, 1H-1, 2, 3-Triazol, 1, 2,3-Triazolidin, 1H-1, 2, 4-Triazol, 1, 2, 4-Triazolidin, Pyridin, Piperidin, Pyrazin, Piperazin, Pyridazin, Morpholin, lH-Azepin, 2H-Azepin, Azepan, Oxazol, Oxazolidin, Thiazol, Thiazolidin, 1,2,3-, 1,2,4- oder 1, 3, 4-Oxadiazol, 1,2,3-, 1,2,4- oder

1, 3, 4-Oxadiazolidin, 1,2,3-, 1,2,4- oder 1, 3, 4-Thiadiazol oder 1,2,3-, 1,2,4- oder 1, 3, 4-Thiadiazolidin, wobei die heterocycli- schen Ringe gegebenenfalls ein- bis dreifach mit Cι-C₄-Alkyl, Phenyl, Benzyl oder Phenylethyl substituiert sind. Entsprechende, gegebenenfalls in Frage kommende Cχ-C-Alkylreste wurden bereits oben bei den Cι-C₂o-Alkylresten genannt. 15

In Formel Ia oder II leiten sich geeignete heterocyclische, ringförmige Reste für R¹ bis R¹⁶ bzw. Y¹ bis Y⁸ ab von heterocycli- schen, gesättigten fünf-, sechs- oder siebengliedrigen Ringen, welche noch ein oder zwei weitere Stickstoffatome und/oder ein weiteres Sauerstoff- oder Schwefelatom im Ring enthalten können, z.B. Pyrrolidin, Pyrazolidin, Imidazolin, 1, 2, 3-Triazolidin, 1, 2, 4-Triazolidin, Piperidin, Piperazin, Morpholin, Azepan, Oxa- zolidin, Thiazolidin, 1,2,3-, 1,2,4- oder 1, 3, 4-Oxadiazolidin, oder 1,2,3-, 1,2,4- oder 1, 3, 4-Thiadiazolidin, wobei die hetero- cyclischen Ringe gegebenenfalls ein- bis dreifach mit Cι-C-Alkyl, Phenyl, Benzyl oder Phenylethyl substituiert sind. Entsprechende, gegebenenfalls in Frage kommende Cι~C-Alkylreste wurden bereits oben bei den Cι-C₂₀-Alkylresten genannt.

In Formel Ia, II oder Via ist geeignetes Cι-C₂o-Alkyl, das durch Phenyl substituiert ist, z.B. Benzyl oder 1- oder 2-Phenylethyl.

In Formel II, III, IV oder Via sind geeignete Cι-C₂o-Alkoxyreste, die gegebenenfalls durch 1 bis 4 Sauerstoffatome in Etherfunktion unterbrochen sind, z.B. Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Isopropoxy, Butoxy, Isobutoxy, Pentyloxy, Hexyloxy, Heptyloxy, Octyloxy, 2-Ethylhexyloxy, Isooctyloxy, Nonyloxy, Isononyloxy, Decyloxy, Isodecyloxy, Undecyloxy, Dodecyloxy, Tridecyloxy, Isotridecyloxy, Tetradecyloxy, Pentadecyloxy, Hexadecyloxy, Heptadecyloxy, Octa- decyloxy, Nonadecyloxy, Eicosyloxy, 2-Methoxyethoxy, 2-Ethoxy- ethoxy, 2-Propoxyethoxy, 2-lsopropoxyethoxy, 2-Butoxyethoxy, 2- oder 3-Methoxypropoxy, 2- oder 3-Ethoxypropoxy, 2- oder 3-Prop- oxypropoxy, 2- oder 3-Butoxypropoxy, 2- oder 4-Methoxybutoxy, 2- oder 4-Ethoxybutoxy, 2- oder 4-Propoxybutoxy, 2- oder 4-Butoxy- butoxy, 3, 6-Dioxaheptyloxy, 3, 6-Dioxaoctyloxy, 4, 8-Dioxanonyloxy, 3, 7-Dioxaoctyloxy, 3, 7-Dioxanonyloxy, 4, 7-Dioxaoctyloxy, 4, 7-Dioxanonyloxy, 4, 8-Dioxadecyloxy, 3, 6, 8-Trioxadecyloxy, 3, 6, 9-Trioxaundecyloxy, 3, 6, 9 , 12-Tetraoxatridecyloxy oder 3,6,9, 12-Tetraoxatetradecyloxy.

In Formel II oder Via ist geeignetes Cι-C₂o~Alkoxy, das durch Phenyl substituiert ist, z.B. Benzyloxy oder 1- oder 2-Phenyl- ethoxy.

In Formel Ia, III oder VI ist geeignetes substituiertes Phenyl z.B. durch Ci-Cg-Alkyl, Cι-C₆-Alkoxy, Hydroxy oder Halogen substituiertes Phenyl. In der Regel können dabei 1 bis 3 Substituenten auftreten. Insbesondere ist das Phenyl mit 1 oder mit 2 Substituenten Ci-Cβ-Alkyl oder Cι-C₆-Alkoxy substituiert. Bei Monosub- stitution befindet sich der Substituent vorzugsweise in para- 16

Stellung. Bei Disubstitution sind die Substituenten vorzugsweise in 2,3-, 2,4-, 3,4- und 3 , 5-Stellung.

Halogen in Formel Ib, II, IV oder VI ist z.B. Fluor, Chlor oder Brom.

Reste W in Formel Ia sowie X² oder X³ in Formel Ib sind z.B. Methylimino, Ethylimino, Propylimino, Isopropylimino oder Butyl- imino .

Reste R¹ bis R¹⁶ in Formel Ia sowie Y⁹ bis Y¹² in Formel II sind z.B. Dirnethylsulfamoyl, Diethylsulfamoyl, Dipropylsulfamoyl, Di- butylsulfamoyl oder N-Methyl-N-ethylsulfamoyl .

C₂-Co-Alkenyl sowie C-Co-Alkandienyl in Formel II ist z.B.

Vinyl, Allyl, Prop-1-en-l-yl, Methallyl, Ethallyl, But-3-en-l-yl, Pentenyl, Pentadienyl, Hexadienyl, 3, 7-Dimethylocta-l, 6- dien-1-yl, Undec-10-en-l-yl, 6, 10-Dimethylundeca-5, 9-dien-2-yl, Octadec-9-en-l-yl, Octadeca-9, 12- dien-1-yl, 3, 7 , 11, 15-Tetra- methylhexadec-l-en-3-yl oder Eicos-9-en-l-yl.

C₃-Co~Alkenyloxy in Formel II ist z.B. Allyloxy, Methallyloxy, But-3-en-l-yloxy, Undec-10-en-l-yloxy, Octadec-9-en-l-yloxy oder Eicos-9-en-l-yloxy.

Z⁶ in Formel IV bedeutet z.B. Formyl, Acetyl, Propionyl, Butyryl, Isobutyryl, Pentanoyl, Hexanoyl, Heptanoyl, Octanoyl oder 2-Ethylhexanoyl .

Wenn die Ringe A und/oder B in Formel V substituiert sind, so können als Substituenten z.B. Cι-C₆-Alkyl, Phenyl-Cι-C₆-alkoxy, Phenoxy, Halogen, Hydroxy, Amino, Ci-Ce-Mono- oder Dialkylamino oder Cyano in Betracht kommen. Die Ringe sind dabei in der Regel 1 bis 3-fach substituiert.

Reste E³, E⁴, Q¹ und Q² in Formel V sind z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sec-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, tert-Pentyl oder Hexyl.

Reste Q¹ und Q² sind weiterhin z.B. Hexyl, 2-Methylpentyl, Heptyl, Octyl, 2-Ethylhexyl, Isooctyl, Nonyl, Isononyl, Decyl, Isodecyl, Undecyl, Dodecyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl, 2-Methoxyethyl, 2-Ethoxyethyl, 2- oder 3-Methoxypropyl, 2- oder 3-Ethoxypropyl, 2-Hydroxyethyl, 2- oder 3-Hydroxypropyl, 2-Chlorethyl, 2-Brom- ethyl, 2- oder 3-Chiorpropyl, 2- oder 3-Brompropyl, 2-Carboxy- ethyl, 2- oder 3-Carboxypropyl, 2-Methoxycarbonylethyl, 2-Ethoxy- carbonylethyl, 2- oder 3-Methoxycarbonylpropyl, 2- oder 3-Ethoxy- 17 carbonylpropyl , 2-Acryloyloxyethyl, 2- oder 3-Acryloyloxypropyl, 2-Methacryloyloxyethyl, 2- oder 3-Methacryloyloxypropyl, 2-Hydro- xysulfonylethyl, 2- oder 3-Hydroxysulfonylpropyl, 2-Acetylaminoe- ^' thyl, 2- oder 3-Acetylaminopropyl, 2-Methylcarbamoylethyl, 2-Ethylcarbamoylethyl, 2- oder 3-Methylcarbamoylpropyl, 2- oder 3-Ethylcarbamoylpropyl, 2-Methylcarbamoyloxyethyl, 2-Ethylcarba- moyloxyethyl, 2- oder 3-Methylcarbamoyloxy- propyl, 2- oder 3-Ethylcarbamoyloxypropyl, 2- (Trimethylammonium) ethyl, 2- (Triethylammonium) ethyl, 2- oder 3- (Trimethylammonium) propyl, 2- oder 3- (Triethylammonium) propyl, 2- (Triphenylphosphonium) ethyl oder 2- oder 3- (Triphenylphosphonium) ropyl .

pj£⁾ ±_n Formel IV oder V leitet sich z.B. von Anionen organischer oder anorganischer Säuren ab. Besonders bevorzugt sind dabei z.B. Methansulfonat, 4-Methylbenzolsulfonat, Acetat, Trifluoroacetat, Heptafluorobutyrat, Chlorid, Bromid, Iodid, Perchlorat, Tetra- fluoroborat, Nitrat, Hexafluorophosphat oder Tetraphenylborat.

Reste J in Formel VI sind z.B. Methylen, Ethylen, 1,2- oder 1, 3-Propylen, 1,2-, 1,3-, 2,3- oder 1,4-Butylen, Penta ethylen, Hexamethylen, Heptamethylen, Octamethylen, Nonamethylen, Deca- methylen, Undecamethylen oder Dodecamethylen.

Reste T², T³, T⁴ und T⁵ in Formel VI sind beispielsweise Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sec-Butyl, tert-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, tert-Pentyl, 2-Methylbutyl, Hexyl, 2-Methylpentyl, Heptyl, Octyl, 2-Ethylhexyl, Isooctyl, Nonyl, Isononyl, Decyl, Undecyl, Dodecyl, Fluormethyl, Chlormethyl, Di- fluor ethyl, Trifluor ethyl, Trichlormethyl, 2-Fluorethyl, 2-Chlorethyl, 2-Bromethyl, 1, 1, 1-Trifluorethyl, Heptafluorpropyl, 4-Chlorbutyl, 5-Fluorpentyl, 6-Chlorhexyl, Cyanomethyl, 2-Cyano- ethyl, 3-Cyanopropyl, 2-Cyanobutyl, 4-Cyanobutyl, 5-Cyanopentyl, 6-Cyanohexyl, 2-Aminoethyl, 2-Aminopropyl, 3-Aminopropyl, 2-Aminobutyl, 4-Aminobutyl, 5-Aminopentyl, 6-Aminohexyl, 2-Hydro- xyethyl, 2-Hydroxypropyl, 3-Hydroxypropyl , 2-Hydroxybutyl,

4-Hydroxybutyl, 5-Hydroxypentyl, 6-Hydroxyhexyl, 2-Methoxyethyl, 2-Ethoxyethyl, 2-Propoxyethyl, 2-Isopropoxyethyl, 2-Butoxyethyl, 2-Methoxypropyl, 2-Ethoxypropyl, 3-Ethoxypropyl, 4-Ethoxyb tyl, 4-Isopropoxybutyl, 5-Ethoxypentyl, 6-Methoxyhexyl, Benzyl, 1-Phenylethyl, 2-Phenylethyl, 4-Chlorbenzyl, 4-Methoxybenzyl, 2- (4-Methylphenyl) ethyl, Carboxymethyl, 2-Carboxyethyl, 3-Carb- oxypropyl, 4-Carboxybutyl, 5-Carboxypentyl, 6-Carboxyhexy1, Methoxycarbonylmethyl, Ethoxycarbonylmethyl, 2-Methoxycarbony- lethyl, 2-Ethoxycarbonylethyl, 3-Methoxycarbonylpropyl, 3-Ethoxy- carbonylpropyl, 4-Methoxycarbonylbutyl, 4-Ethoxycarbonylbutyl, 18

5-Methoxycarbonylpentyl , 5-Ethoxycarbonylpentyl , 6-Methoxycarbo- nylhexyl oder 6-Ethoxycarbonylhexyl .

T¹ in Formel VI ist z.B. Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxy- carbonyl , Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Isobutoxycarbonyl, sec-Butoxycarbonyl, tert-Butoxycarbonyl, Pentyloxycarbonyl , Iso- pentyloxycarbonyl, Neopentyloxycarbonyl , tert-Pentyloxycarbonyl, Hexyloxycarbonyl , Heptyloxycarbonyl, Octyloxycarbonyl , Isooctylo- xycarbonyl, Nonyloxycarbonyl , Isononyloxycarbonyl, Decyloxycarbo- nyl, Isodecyloxycarbonyl, Undecyloxycarbonyl, Dodecyloxycarbonyl, Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Isopropoxy, Butoxy, Isobutoxy, Penty- loxy, Hexyloxy, Acetylamino, Carbamoyl, Mono- oder Dimethylcarba- moyl, Mono- oder Diethylcarbamoyl, Monocyclohexylcarbonyl, Phenylcarbamoyl, Dimethylcarbamoyloxy oder Diethylcarbamoyloxy.

Als Markierstoffe sind weiter besonders hervorzuheben die Naphthalocyanine der Formel Ha

(Ha)

in der

Y¹ , Y² , Y³ , Y⁴ , Y⁵ , Y⁶ , Y⁷ und Y⁸ unabhängig voneinander j eweils Wasserstof f , Hydroxy, Cι-C₄-Alkyl oder Cι-C₂o-Alkoxy und

Me² die Bedeutung von Me¹ hat oder dem Rest

γ²o

I

S i— (-0 — S i — 0 — Y¹⁹ ) ₂ γ21 19 entspricht, worin R¹⁹ für Cχ-Cι₃-Alkyl oder Cιo-C₂o-Alkadienyl und Y²⁰ und Y²¹ unabhängig voneinander jeweils für Cι-Cι₃-Alkyl oder C₂-C-Alkenyl stehen.

Besonders hervorzuheben sind hierbei Naphthalocyanine der Formel Ha, in der Y¹, Y², Y³, Y , Y⁵, Y⁶, Y⁷ und Y⁸ unabhängig voneinander jeweils Hydroxy, Cι-Co-Alkoxy, insbesondere Cι-Cιo-Alkoxy bedeuten. Die Alkoxyreste können dabei gleich oder verschieden sein. Weiter sind besonders hervorzuheben Naphthalocyanine der Formel Ha, in der Me² zweimal Wasserstoff bedeutet.

Als Markierstoffe sind weiter hervorzuheben Nickel-Dithiolen- Komplexe der Formel III, in der L¹, L², L³ und L⁴ unabhängig voneinander jeweils Phenyl, Cι-C₂o-Alkylphenyl, Cι-C o-Alkoxyphenyl oder durch Hydroxy und Cι-C₂₀-Alkyl substituiertes Phenyl oder L¹ und L² sowie L³ und L⁴ jeweils zusammen den Rest der Formel

bedeuten.

Besonders hervorzuheben sind hierbei Nickel-Dithiolen-Komplexe der Formel III, in der L¹ und L⁴ jeweils Phenyl und L² und L⁴ jeweils einen Rest der Formel 4- [CH₅-C (CH₃) ₂] -C₆H bedeuten.

Die Phthalocyanine der Formel Ia sind an sich bekannt und z.B. in DE-B-1 073 739 oder EP-A-155 780 beschrieben oder können nach an sich bekannten Methoden, wie sie bei der Herstellung von Phthalo- cyaninen oder Naphthalocyaninen zur Anwendung kommen und wie sie beispielsweise in F.H. Moser, A.L. Thomas "The Phthalocyanines" , CRC Press, Boca Rota, Florida, 1983, oder J. Am. Chem. Soc. Band 106, Seiten 7404 bis 7410, 1984, beschrieben sind, erhalten werden. Die Phthalocyanine der Formel Ib sind ebenfalls an sich bekannt und z.B. in EP-A-155 780 beschrieben oder können gemäß den Methoden des obengenannten Standes der Technik (Moser, J.Am. Chem. Soc.) erhalten werden.

Die Naphthalocyanine der Formel II sind ebenfalls an sich be- kannt und beispielsweise in der EP-A-336 213, EP-A-358 080,

GB-A-2 168 372 oder GB-A-2 200 650 beschrieben oder können gemäß 20 den Methoden des obengenannten Standes der Technik (Moser, J.Am. Chem. Soc.) erhalten werden.

Die Nickel-Dithiolen-Komplexe der Formel III sind ebenfalls an sich bekannt und beispielsweise in der EP-A-192 215 beschrieben.

Die Aminiumverbindungen der Formel IV sind ebenfalls an sich bekannt und z.B. in US-A-3 484 467 beschrieben oder können gemäß den dort genannten Methoden erhalten werden.

Die Methinfarbstoffe der Formel V sind ebenfalls an sich bekannt und z.B. in der EP-A-464 543 beschrieben oder können gemäß den dort genannten Methoden erhalten werden.

Die Herstellung der Quadratsäurefarbstoffe ist in den Schriften US 5,525,516 und US 5,703,229 und der jeweils darin zitierten Literatur beschrieben.

Die Herstellung der Krokonsäurefarbstoffe ist in der Schrift US 5,525,516 und der darin zitierten Literatur beschrieben.

Die Azulenquadratsäurefarbstoffe der Formel VI sind ebenfalls an sich bekannt und z.B. in der EP-A-310 080 oder US-A-4 990 649 beschrieben oder können gemäß den dort genannten Methoden erhalten werden.

Flüssigkeiten, die man nach dem erfindungsgemäßen Verfahren mit einer Kombination aus mindestens zwei der oben näher bezeichneten Verbindungen als Markierstoffe markieren kann, sind üblicherweise organische Flüssigkeiten, beispielsweise

Alkohole, wie Methanol, Ethanol, Propanol, Isopropanol, Butanol, Isobutanol, sec-Butanol, Pentanol, Isopentanol, Neopentanol oder Hexanol,

Glykole, wie 1, 2-Ethylenglykol, 1,2- oder 1, 3-Propylenglykol, 1,2-, 2,3- oder 1, 4-Butylenglykol, Di- oder Triethylenglykol oder Di- oder Tripropylenglykol,

Ether, wie Methyl-tert.butylether, 1, 2-Ethylenglykolmono- oder -dimethylether, 1, 2-Ethylenglykolmono- oder -diethylether, 3-Methoxypropanol, 3-Isopropoxypropanol, Tetrahydrofuran oder Dioxan,

Ketone, wie Aceton, Methylethylketon oder Diacetonalkohol, 21

Ester, wie Essigsäure- methylester, Essigsäureethylester, Essig- säurepropylester oder Essigsäurebutylester,

aliphatische oder aromatische Kohlenwasserstoffe wie Pentan, Hexan, Heptan, Octan, Isooctan, Petrolether, Toluol, Xylol, Ethylbenzol, Tetralin, Dekalin, Dimethylnaphthalin, Testbenzin,

natürliche Öle, wie Olivenöl, Sojaöl oder Sonnenblumenöl, oder natürliche oder synthetische Motoren-, Hydraulik- oder Getriebeöle, z.B. Fahrzeugmotorenöl oder Nähmaschinenöl, oder Bremsflüssigkeiten

und Mineralöle, wie Benzin, Kerosin, Dieselöl oder Heizöl.

Besonders vorteilhaft verwendet man die obengenannten Verbindungen zum Markieren von Mineralölen, bei denen gleichzeitig eine Kennzeichnung gefordert wird, z.B. aus steuerlichen Gründen. Um die Kosten der Kennzeichnung gering zu halten aber auch um mögliche Wechselwirkungen der markierten Mineralöle mit gegebenenfalls vorliegenden anderen Inhaltsstoffen zu minimieren, strebt man an, die Menge an Markierstoffen möglichst gering zu halten. Ein weiterer Grund, die Menge an Markierstoffen möglichst klein zu halten, kann darin liegen, deren mögliche schädigende Einflüsse, beispielsweise auf den Kraftstoffein- und Abgas- auslassbereich von Verbrennungsmotoren, zu unterbinden.

Wie weiter oben bereits erwähnt, ist man generell bestrebt, für die Markierung von Flüssigkeiten solche Verbindungen als Markier- Stoffe zu verwenden, welche eine hohe Fluoreszenzquantenausbeute ergeben, also einen großen Teil der absorbierten Strahlungs- quanten als Fluoreszenzstrahlungsquanten wieder abgeben.

Diese als Markierstoffe zu verwendenden Verbindungen werden den Flüssigkeiten dabei in solchen Mengen zugegeben, daß eine zuver- lässige Detektion gewährleistet ist. Üblicherweise beträgt der (gewichtsbezogene) Gesamtgehalt an Markierstoffen in den markierten Flüssigkeit etwa 0,1 bis 5000 ppb, bevorzugt 1 bis 2000 ppb und besonders bevorzugt 1 bis 1000 ppb.

Zur Markierung der Flüssigkeiten werden die oben als Markier- Stoffe genannten Verbindungen (bzw. deren Kombinationen aus mindestens zwei Markierstoffen) im allgemeinen in Form von Lösungen (Stammlösungen) zugegeben. Insbesondere bei Mineralölen eignen sich als Lösungsmittel zur Bereitung dieser Stammlösungen vor- zugsweise aromatische Kohlenwasserstoffe, wie Toluol, Xylol oder höhersiedende Aromatengemische. 22

Um eine zu hohe Viskosität solcher Stammlösungen (und damit schlechte Dosier- und Handhabbarkeit) zu vermeiden, wählt man im allgemeinen eine Gesamtkonzentration der Markierstoffe von 0,5 bis 50 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht dieser Stamm- lösungen.

Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren und dessen bevorzugten Aus- führungsformen markiert worden sind, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine Strahlungsquelle verwendet, welche in den Absorptionsbereichen aller Markierstoffe Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenz - Strahlung nachweist.

Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren und dessen bevorzugten Aus- führungsformen markiert worden sind, welches dadurch gekennzeich- net ist, daß man für jeden einzelnen Markierstoff eine entsprechende Strahlungsquelle verwendet, welche im Absorptions- bereich des Markierstoffs Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist.

Der prinzipielle apparative Aufbau zur Anregung und zum Nachweis der Fluoreszenz in einer erfindungsgemäß markierten Flüssigkeit enthält:

eine Probenküvette, welche die markierte Flüssigkeit enthält,

eine Anregungseinheit (A) , welche enthält:

αi) eine Strahlungsquelle, welche üblicherweise mit einer Kollimatoroptik versehen ist, und

α₂) üblicherweise einen Planspiegel, welcher sich der Strahlungs- quelle gegenüber auf der, der Strahlungsquelle abgewandten Seite der Probenküvette befindet und durch Reflektion der transmittier- ten Strahlung der Erhöhung der in die Probe eingestrahlten Intensität dient,

eine Detektionseinheit (D) , welche enthält:

δi) einen Photodetektor (üblicherweise mit einer Kollimatoroptik versehen), vor welchem sich üblicherweise optische Filter (z.B. Kanten- oder Interferenzfilter) und gegebenenfalls NIR-Polarisatoren befinden und welcher so angeordnet ist, daß die in seine 23

Richtung emittierte Fluoreszenzstrahlung auf ihn auftrifft (oder abgebildet wird) und nachgewiesen wird, und

δ₂) üblicherweise einen Hohlspiegel, welcher sich dem Photo- detektor gegenüber auf der, dem Photodetektor abgewandten Seite der Probenküvette befindet und durch Reflektion der in Gegenrichtung (vom Photodetektor weg) emittierten Fluoreszenzstrahlung, und damit der Erhöhung der Nachweisempfindlichkeit, dient.

Ein solcher Aufbau ist im Prinzip in der Schrift WO 94/02570 zeichnerisch dargestellt (abweichend zur Strahlrichtung der Strahlungsquelle) . Die Detektion der Fluoreszenzstrahlung muß dabei aber nicht senkrecht, sondern kann unter nahezu beliebigem Winkel zur Strahlrichtung erfolgen. Sinnvollerweise kommen aber Winkel von 0° bzw. 180° nicht in Betracht.

Im Hinblick auf die nachfolgenden Ausführungen sollen folgende Definitionen gelten:

Anregungs- bzw. Detektionseinheiten im allgemeinen Sinn werden als A bzw. D bezeichnet (s.o) . Markierstoffe im allgemeinen Sinn werden als M bezeichnet.

Eine Anregungseinheit, welche mittels einer entsprechenden Strah- lungsquelle speziell an einen der Markierstoffe Mμ angepaßt ist (d.h. die Strahlungsquelle emittiert Strahlung im Absorptionsbereich des Markierstoffs Mμ) , wird mit Aμ bezeichnet. Da z.B. die Anzahl n der Markierstoffe im Rahmen der bevorzugten Ausführungs- formen 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 beträgt, kann μ dem- entsprechend ganze Zahlenwerte von 1 bis 10 bzw. 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 annehmen.

Analog wird eine spezielle Detektionseinheit, welche, z.B. mittels entsprechender optischer Filter (und gegebenenfalls Polari- satoren) , speziell auf die emittierte Fluoreszenzstrahlung eines der Markierstoffe Mμ eingestellt ist, wird mit Dμ (oder auch als Detektionskanal μ) bezeichnet.

So lassen sich z.B. den drei Markierstoffen Ml, M2 und M3 die daran angepaßten Einheiten AI, A2 und A3 bzw. Dl, D2 und D3 zuordnen.

Findet innerhalb einer Anregungseinheit A die Anpassung an den jeweiligen Markierstoff Mμ lediglich durch den Einsatz einer ent- sprechenden Strahlungsquelle αiμ statt (d.h. diese emittiert Strahlung im Absorptionsbereich des Markierstoffs Mμ) , so wird dies für den Fall von n Markierstoffen mit A(l,2), A(l,2,3), usw. 24 bis A(l,2,3, ... ,9,10) bzw. A(l,2), A(l,2,3) usw. bis A(l,2,3, ... ,5,6) bzw. A(l,2), A (1, 2 , 3) ,A(l, 2 , 3 , 4) bezeichnet, wobei hier beispielsweise n gleich 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 ist.

Analog gelten für eine Detektionseinheit Dμ, in welcher die Anpassung an die emittierte Fluoreszenzstrahlung des jeweiligen Markierstoffs Mμ durch den Einsatz entsprechender Photodetektoren und/oder optischer Filter (und gegebenenfalls Polarisatoren) er- folgt, für den Fall von n Markierstoffen die Bezeichnungen D(l,2), D(l,2,3), usw. bis D (1, 2, 3 , ... , 9 , 10) bzw. D(l,2), D(l,2,3) usw. bis D (1 , 2 , ... , 5, 6 ) bzw. D(l,2), D(l,2,3), D(l,2,3,4), wobei hier beispielsweise n wiederum gleich 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 ist.

Werden n Markierstoffe Mμ, wobei n beispielsweise wieder gleich 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 ist, jeweils nacheinander mit den jeweils an sie angepassten Einheiten Aμ und Dμ angeregt und detektiert, so wird dies durch die Schreibweise "Al/Ml/Dl, A2/M2/D2, ..." usw. bis " ...A9/M9/D9, A10/M10/D10" bzw. "Al/Ml/Dl, A2/M2/D2, ..." usw. bis " ...A5/M5/D5, A6/M6/D6" bzw. "Al/Ml/Dl, A2/M2/D2, A3/M3/D3, A4/M4/D4" zum Ausdruck gebracht. In kürzerer Form läßt sich dies auch durch "AI/Dl, A2/D2,..." usw. bis "...A9/D9, A10/D10" bzw. "AI/Dl, A2/D2,..." usw. bis "...A5/D5, A6/D6" bzw. "AI/Dl, A2/D2, A3/D3, A4/D4" darstellen, da die Notation von Aμ/Dμ den Bezug auf den Markierstoff Mμ impliziert.

Werden n Markierstoffe Mμ gleichzeitig mit n Einheiten Aμ angeregt und gleichzeitig deren emittierte Fluoreszenzstrahlungen mit n Einheiten Dμ detektiert so wird dies mit

"A1/A2/.../An/Ml/M2/.../Mn/Dl/D2/.../Dn" oder auch kürzer mit "A1/A2/.../An/Dl/D2/... /Dn" bezeichnet.

Werden n Markierstoffe gleichzeitig mit n Einheiten Aμ angeregt und gleichzeitig deren emittierte Fluoreszenzstrahlungen mit einer Einheit D, z.B. einem Vielwellenlängendetektor (bestehend aus einem optischen, dispersiven Element, wie z.B. einem Prisma oder Gitter, und einem Zeilen- oder Flächendetektor) , detektiert so wird dies mit "A1/A2/... /An/Ml/M2/ .../Mn/D" oder auch kürzer mit "A1/A2/.../An/D" bezeichnet.

Im wesentlichen sind die beiden Fälle zu unterscheiden, daß die Anregung der markierten Probe durch die Einheiten A

I) in demselben Probenvolumen oder

II) in verschiedenen Probenvolumina erfolgt. 25

In Fall I) können folgende Verfahren und beispielhafte Aufbaumög- lichkeiten der Detektionsgeräte Anwendung finden (n nimmt hierbei z.B. die Werte von 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 an):

1.1) AI/Dl, A2/D2, ... , An-l/Dn-1, An/Dn (die n Markierstoffe werden jeweils durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ bzw. Dμ angeregt bzw. detektiert) .

a) Der Aufbau entspricht im wesentlichen dem eingangs erwähnten und in der Schrift WO 94/02570 gezeigten Aufbau. Der Unterschied besteht darin, daß für jeden Markierstoff Mμ jeweils entsprechend angepaßte Einheiten Aμ bzw. Dμ verwendet werden. Dies kann durch die räumlich versetzte Anordnung mehrerer, der Anzahl der zu detektierenden Markierstoffe entsprechenden Paare von Einheiten Aμ und Dμ radial um die Probenküvette erfolgen. Letztere besitzt dann vorzugsweise einen kreisförmigen Querschnitt. Die von den Einheiten Aμ durchstrahlten Probenvolumina (bzw. Probenwege) sind dabei jedoch -im strengen Sinne- nicht identisch. Die (in einer Ebene liegenden) Anregungsstrahlen schneiden sich jedoch in einem gemeinsamen Stück des Probenvolumens. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann sowohl nacheinander als auch gleichzeitig erfolgen.

b) Ein weiterer möglicher Aufbau besteht beispielsweise darin, daß sich die Strahlungsquellen αiμ bzw. Photodetektoren δiμ der

Einheiten Aμ bzw. Dμ jeweils auf entsprechenden Karussells befinden (anstelle von individuellen Planspiegeln αμ bzw. Hohlspiegeln δ₂μ verwendet man in diesem Fall sinnvollerweise nur jeweils einen feststehenden Plan- bzw. Hohlspiegel) . Zur Detektion des Markier - Stoffs Mμ werden die entsprechende Strahlungsquelle αiμ bzw. der entsprechende Photodetektor δiμ durch Rotation der jeweiligen Karussells in die Anregungs- bzw. Detektionsposition bewegt. Der Strahlenverlauf durch die markierte Probe und das durchstrahlte Probenvolumen sind hierbei für jeden zu bestimmenden Markierstoff identisch. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen.

c) Verwendet man beispielsweise eine zylinderförmige Probenküvette, welche entweder an einem oder an beiden Enden mit Fenstern aus demselben Material, aus welchem die Küvette besteht, verschlossen werden kann oder welche an beiden Enden geschlossen ist und vorzugsweise seitliche Probenein- und -auslasse besitzt, so läßt sich ein geänderter Aufbau erstellen. Ähnlich wie unter b) beschrieben können sich die Strahlungsquellen αiμ der Einheiten Aμ auf einem Karussell befinden (anstelle von individuellen Planspiegeln α μ verwendet man dann sinnvollerweise nur einen feststehenden Planspiegel) . Die jeweilige Einheit Aμ strahlt dann 26 parallel zur Längsachse der Küvette ein. Radial dazu (und damit immer senkrecht zur Strahlrichtung der Anregungsstrahlung) lassen sich die jeweiligen Einheiten Dμ (diesmal selbstverständlich mit ^' ihren jeweiligen Untereinheiten δ₂μ) zur Detektion der jeweils emittierten Fluoreszenzstrahlung um die Probenküvette plazieren. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen (potentiell kann natürlich die Detektion der von mehreren Markierstoffen gleichzeitig emittierten Fluoreszenzstrahlung durch die Einheiten Dμ simultan er- folgen) .

1.2) A/D1,A/D2, ... ,A/Dn-1,A/Dn (alle n Markierstoffe Mμ werden gleichzeitig durch eine "polychromatische" Strahlungsquelle angeregt und mittels ihres jeweiligen Detektionskanals Dμ detektiert) .

a) Der Aufbau kann ähnlich dem in b) unter 1.1) beschriebenen erfolgen. Anstelle eines entsprechenden Karussells für die Untereinheiten αiμ wird jedoch eine polychromatische Anregungseinheit A verwendet. Die Detektion erfolgt entsprechend dem unter b) von I.l) beschriebenen Aufbau. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen.

b) Verwendet man, in Anlehnung an den in c) unter I.l) beschrie- benen Aufbau, beispielsweise eine zylinderförmige Probenküvette, so strahlt die Einheit A parallel zur Längsachse der Küvette ein. Radial dazu (und damit jeweils senkrecht zur Strahlrichtung der Anregungsstrahlung) lassen sich wiederum die jeweiligen Einheiten Dμ um die Probenküvette plazieren. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann sowohl nacheinander als auch gleichzeitig erfolgen.

1.3) A1/D,A2/D, ... ,An-l/D,An/D (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils durch ihre entsprechende Einheit Aμ angeregt und mit einer Detektionseinheit, z.B. einem Vielwellenlängendetektor, detektiert) .

a) Der Aufbau kann ähnlich dem in b) unter I.l) beschriebenen erfolgen. Anstelle eines entsprechenden Karussells für die Photo- detektoren δ_xμ wird jedoch nur eine Detektionseinheit D, z.B. ein Vielwellenlängendetektor, verwendet. Entsprechend dem unter b) von I.l) beschriebenen Aufbau erfolgt die Anregung. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen. 27 b) Verwendet man, in Anlehnung an den in c) unter I.l) beschriebenen Aufbau, beispielsweise eine zylinderförmige Probenküvette, so detektiert die Einheit D die jeweils emittierte Fluoreszenz - Strahlung parallel zur Längsachse der Küvette. Radial dazu (und damit jeweils senkrecht zur Längsachse der Küvette) lassen sich die jeweiligen Einheiten Aμ (zusammen mit ihren entsprechenden Planspiegeln α₂μ) um die Probenküvette plazieren. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann sowohl nacheinander als auch gleichzeitig erfolgen.

Die hier genannten Möglichkeiten des Aufbaus sind damit den in a) und b) von Punkt 1.2) genannten vergleichbar und unterscheiden sich nur durch den räumlichen Austausch der Anregungs- und Detektionseinheit (en) .

1.4) A(l,2,... ,n-l,n)/Dl,A(l,2, ... ,n-l,n)/D2, ... , A(l,2, ... ,n-l,n) /Dn-1, A (1, 2 , ... , n-1, n) /Dn (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils angeregt und mittels ihres jeweiligen Detektionskanals Dμ detektiert) .

a) Der Aufbau kann ähnlich dem in a) unter 1.2) beschriebenen erfolgen. Anstelle eines entsprechenden Karussells für die Strahlungsquellen αμ wird jedoch eine Anregungseinheit A verwendet, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Strahlungsquellen αiμ enthält. Weiter kann A aber auch mehrere Strahlungsquellen αiμ enthalten, deren jeweilige Strahlung, z.B. (Fall a ) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln oder kollinearer Überlagerung der einzelnen Strahlen der Strahlungsquellen mittels optischer Elemente, wie z.B. Strahlteiler, dichroitische Strahlteiler, Gitter usw., so geleitet wird, daß sie jeweils am selben Ort der Probenküvette in diese eintritt. Entsprechend dem unter a) von 1.2) beschriebenen Aufbau erfolgt die Detektion der jeweiligen Fluoreszenz - Strahlung. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen.

b) Verwendet man, in Anlehnung an den in c) unter I.l) beschriebenen Aufbau, beispielsweise eine zylinderförmige Probenküvette, so strahlt eine, wie unter a) (Fall ai oder Fall a₂) beschriebene Einheit A parallel zur Längsachse der Küvette ein. Radial dazu (und damit jeweils senkrecht zur Strahlrichtung der Anregungs- Strahlung) lassen sich wiederum die jeweiligen Einheiten Dμ um die Probenküvette plazieren. Mit einer Einheit A entsprechend Fall ai kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nur nacheinander erfolgen. Mit einer Einheit A entsprechend Fall a₂ kann die Kombination von Anregung und Detek- 28 tion der n Markierstoffe Mμ nacheinander und potentiell auch gleichzeitig erfolgen.

1.5) Al/D(l,2, ... ,n-l,n) ,A2/D(1,2, ... , n-1, n) , ... , An-1/D(l, 2, ... ,n-l,n) ,An/D(l,2, ... ,n-l,n) (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils durch ihre entsprechende Einheit Aμ angeregt und detektiert) .

a) Der Aufbau kann ähnlich dem in b) unter I.l) beschriebenen er- folgen. Anstelle eines entsprechenden Karussells für die Photodetektoren δiμ wird jedoch eine Detektionseinheit D verwendet, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Photodetektoren und/oder austauschbare optische Filter (und gegebenenfalls Polarisatoren) δiμ enthält. Weiter kann D aber auch mehrere Photodetektoren δiμ ent- halten, welchen die jeweilige emittierte Fluoreszenzstrahlung, z.B. (Fall a₂) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln, zugeleitet wird. Entsprechend dem unter b) von I.l) beschriebenen Aufbau erfolgt die Anregung. Die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann nur nacheinander erfolgen.

b) Verwendet man, in Anlehnung an den in c) unter I.l) beschriebenen Aufbau, beispielsweise eine zylinderförmige Probenküvette, so detektiert eine, wie unter a) (Fall ai oder Fall a₂) beschriebene Einheit D die jeweils parallel zur Längsachse der Küvette emittierte Fluoreszenzstrahlung. Radial dazu (und damit jeweils senkrecht zur Längsachse der Küvette) lassen sich wiederum die jeweiligen Einheiten Aμ um die Probenküvette plazieren. Mit einer Einheit D entsprechend Fall ai kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nur nacheinander erfolgen. Mit einer Einheit D entsprechend Fall a₂ kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markier- Stoffe Mμ nacheinander und potentiell auch gleichzeitig erfolgen.

1.6) A(l,2, ... ,n-l,n)/D(l,2 n-l,n) (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils angeregt und detektiert) .

Der Aufbau kann unter Verwendung einer Anregungseinheit A erfolgen, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Strahlungsquellen αiμ enthält oder Strahlungsquellen αiμ, deren jeweilige Strahlung, z.B. (Fall a₂) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln oder kollinearer Überlagerung der einzelnen Strahlen der Strahlungsquellen mittels optischer Elemente, wie z.B. Strahlteuer, dichroitische Strahlteiler, Gitter usw. , so geleitet wird, daß sie jeweils am selben Ort der Probenküvette in diese eintritt. Entsprechend kann eine Detektionseinheit D verwendet werden, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Photodetektoren und/oder austauschbare optische Filter (und gegebenenfalls Polarisatoren) δiμ 29 enthält oder auch mehrere Photodetektoren δiμ, welchen die jeweilige emittierte Fluoreszenzstrahlung, z.B. (Fall a ) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln, zugeleitet wird. Für ^■ die Fälle A(Fall aι)/D(Fall a_x) , A(Fall aι)/D(Fall a₂) und A (Fall a )/D(Fall ai) kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nur nacheinander erfolgen. Für den Fall A(Fall a₂)/D(Fall a₂) kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nacheinander und potentiell auch gleichzeitig erfolgen.

Die geometrische Beziehung der Anregungs- und Detektionseinheiten zueinander entspricht hierbei im wesentlichen den unter Punkt a) von I.l) und den in der Schrift WO 94/02570 beschriebenen Verhältnissen.

1.7) A1/A2/.../An-1/An/Dl/D2/.../Dn-l/Dn (die n Markierstoffe Mμ werden gleichzeitig durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ bzw. Dμ angeregt bzw. detektiert) .

Die gleichzeitige Anregung bzw. Detektion der n Markierstoffe läßt sich im Prinzip mit den geometrischen Verhältnissen durchführen wie sie unter Punkt I.l) in a) , Punkt 1.2) in b) , Punkt 1.3) in b) , Punkt 1.4) in Fall a₂ von b) , Punkt 1.5) in Fall a₂ von b) und Punkt 1.6) im Fall A(Fall a )/D(Fall a₂) beschrieben wurden.

In Fall II) , d.h. die Anregung erfolgt in verschiedenen Probenvolumina, können folgende Verfahren und beispielhafte Aufbaumöglichkeiten der Detektionsgeräte Anwendung finden (n nimmt hierbei z.B. die Werte von 2 bis 10 bzw. 2 bis 6 bzw. 2 bis 4 an) :

II.1) AI/Dl, A2/D2, ... , An-l/Dn-1, An/Dn (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ bzw. Dμan- geregt bzw. detektiert) .

Die Anordnung der jeweiligen Paare Aμ/Dμ entspricht im wesentlichen der in Punkt I.l) in a) erläuterten sowie der in der Schrift WO 94/02570 zeichnerisch dargestellten Geometrie. D.h. die optische Achse der Einheit Aμ (entsprechend der Richtung des Anregungsstrahls) und die optische Achse der entsprechenden Einheit Dμ liegen in einer Ebene, auf welcher die Längsachse der Probenküvette senkrecht steht. Diese beiden optischen Achsen bilden einen Winkel χ, welcher zwischen 0° und 180° liegt, wobei hier Folgendes definiert sein soll: bei Blick von der Einheit Aμ in deren Strahlrichtung soll dieser Winkel +χ bzw. -χ betragen, wenn sich die entsprechende Einheit Dμ rechts bzw. links dieser 30

Blickrichtung befindet. Dies wird durch die Schreibweise Aμ(+)Dμ bzw. Aμ(-)Dμ symbolisiert, d.h. A1(+)D1, A2(+)D2, A3(+)D3 usw. bzw. A1(-)D1, A2(-)D2, A3(-)D3 usw. Die Anregung (und Detektion) räumlich verschiedener Probenvolumina erfolgt in der Weise, daß die Anord- nung der jeweiligen Paare Am/Dm in parallelen Ebenen stattfindet. Die Abfolge der Ebenen kann dabei in der Form

Al(+)D1,A2(+)D2,A3(+)D3, ... , An(+)Dn (äquivalent dazu in der Form Al(-)D1,A2(-)D2,A3(-)D3, ... , An(-)Dn) oder auch beispielsweise in der Form A1(+)D1,A2(-)D2, A3(+)D3 , ... ,An-l(-/+)Dn-1, An(+/-)Dn erfolgen. Wenn z.B. die Einheiten Aμ in einer Reihe angeordnet sind, so sind die Einheiten Dμ in ersterem Fall ebenfalls in einer Reihe auf einer (der "rechten") Seite, in letzerem Fall alternierend in zwei Reihen auf gegenüberliegenden Seiten der Probenküvette angeordnet. Auch ist eine Verschiebung der Ebenen gegeneinander denkbar (Translation) . Dies kommt aber üblicherweise nur in Betracht, wenn die von den Einheiten Aμ jeweils emittierte Anregungsstrahlung nach wie vor senkrecht auf die Aussenseite der Probenküvette auftrifft. Dies ist in der Regel im Falle von Küvetten mit rechteckigem, nicht aber im Falle von solchen mit rundem Querschnitt gewährleistet.

Weiter können diese Ebenen auch zueinander verdreht sein (Rotation) . Bei Blick (Projektion) entlang der Längsachse der Küvette bilden somit die zu zwei benachbarten Einheiten Aμ gehörenden optischen Achsen einen Winkel, der zwischen 0 und 360° liegt. Beispielsweise ergeben sich im Falle von n gleich 2, 3, 4, 5 oder 6 (und bei regelmäßiger, schraubenförmiger Anordnung) entsprechende Winkel zwischen benachbarten Einheiten Aμ von 180, 120, 90, 72 bzw. 60°. Für n gleich 3, 4, 5 oder 6 implizieren dabei komplemen- täre Winkel von 240, 270, 288 bzw. 300° (oder -120, -90, -72 bzw. -60°) eine entsprechende gegensinnige Helizität in der Anordnung (im Falle von n gleich 2, d.h. 180° nicht gegeben) . Es sei noch angemerkt, daß natürlich auch hier die Ebenen nicht nur entsprechend der Abfolge A1(+)D1,A2(+)D2, A3(+)D3, ... ,An(+)Dn (äquivalent dazu in der Abfolge A1(-)D1,A2(-)D2,A3(-)D3, ... ,An(-)Dn) sondern ebenfalls beispielsweise in der Abfolge A1(+)D1,A2(-)D2, A3(+)D3 , ... , An-l(-/+)Dn-l, An(+/-)Dn vorliegen können. Für n gleich 2 (180°) oder 4 (90°) kommt üblicherweise einer Küvette mit rechteckigem Querschnitt zur Anwendung, für n gleich 3 (120°), 5 (72°) oder 6 (60°) wird man üblicherweise (für n gleich 2 oder 4 kann man natürlich auch) eine Küvette mit kreisförmigem Querschnitt verwenden. Die Kombination aus Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ kann mit den erwähnten Anordnungen sowohl gleichzeitig als auch nacheinander durchgeführt werden. 31

II.2) A1/D.A2/D, ... ,An-l/D,An/D (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils durch ihre entsprechende Einheit Aμ angeregt und mit einer Detektionseinheit D, z.B. einem Vielwellenlängendetektor detektiert.

a) Die Anordnung der Einheiten Aμ kann entsprechend den unter II.1) dargelegten Ausführungen gestaltet werden. Sind die Einheiten Aμ in einer Reihe angeordnet (Fall ai) , so kann die Einheit D, bei genügender Größe ihres Strahlungseintrittsfensters oder bei Verwendung einer entsprechenden Abbildungsoptik in der entsprechenden χ-Position ortsfest installiert sein. Andernfalls (Fall a₂) muß eine (translatorische) Nachführung in die entsprechende Position erfolgen. Im Falle der übrigen Anordnungen der Einheiten Aμ (Fall a₃) muß eine (translatorische und rotatorische) Nachführung der Einheit D in die entsprechenden χ-Positionen erfolgen. Somit kann im Fall ai die Kombination aus Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ sowohl gleichzeitig als auch nacheinander, in den Fällen a₂ und a₃ nur nacheinander erfolgen.

b) Prinzipiell ist auch eine Anordnung in Anlehnung an b) unter Punkt 1.3) möglich, d.h. die optische Achse der Einheit D liegt parallel zur Längsachse einer zylinderförmigen Probenküvette, die Einheiten Aμ sind entsprechend den unter II.1) dargelegten Ausführungen angeordnet. Hierbei ergeben sich jedoch unterschied- liehe Weglängen, welche die von den jeweiligen Markierstoffen Mμ emittierte Fluoreszenzstrahlung auf dem Weg zur Einheit D durch die Probe zurücklegen muß, bzw. unterschiedliche Raumwinkel, unter welchen die Fluoreszenzstrahlung die Einheit D (bzw. deren Detektionsfenster) trifft. Dies kann zu Ungenauigkeiten in den detektierten Intensitäten führen oder muß entsprechend in den Auswertungen berücksichtigt werden. Prinzipiell kann jedoch in diesen Anordnungen die Kombination aus Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ sowohl gleichzeitig als auch nacheinander erfolgen.

II.3) Al/D(l,2, ... ,n-l,n) ,A2/D (1 , 2 , ... ,n-l,n) , ... , An-1/D(l,2, ... ,n-l,n) ,An/D(l,2, ... ,n-l,n) (die n Markierstoffe Mμ werden jeweils durch ihre entsprechende Einheit Aμ angeregt und detektiert) .

a) Die Anordnungen entsprechen im wesentlichen jenen in a) unter Punkt II.2) ausgeführten. Anstelle einer Einheit D (z.B. einem Vielwellenlängendetektor) wird jedoch eine Detektionseinheit verwendet, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Photodetektoren und/ oder austauschbare optische Filter (und gegebenenfalls Polarisatoren) δiμ enthält. Weiter kann D aber auch mehrere Photodetektoren δiμ enthalten, welchen die jeweilige emittierte 32

Fluoreszenzstrahlung, z.B. (Fall a₂) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln, zugeleitet wird. Mit einer Einheit D entsprechend Fall ai kann die Kombination von Anregung und Detektion^' der n Markierstoffe Mμ nur nacheinander erfolgen, da ein Wechsel der Untereinheiten δiμ und gegebenenfalls auch eine (translatorische oder translatorische und rotatorische) Nachführung der Einheit D erfolgen muß. Mit einer Einheit D entsprechend Fall a₂ kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markier- Stoffe Mμ nacheinander und potentiell (bei geeigneter Anordnung der Einheiten Aμ) auch gleichzeitig durchgeführt werden, wenn, z.B. durch geeignete optische Einrichtungen, eine Bündelung (z.B. durch optische Linse) der von den Markierstoffen Mμ gleichzeitig emittierten Fluoreszenzstrahlung auf die Lichtleitfasern oder -faserbündel erfolgt.

b) Die Anordnungen entsprechen im wesentlichen jenen in b) unter Punkt II.2) ausgeführten. Anstelle einer Einheit D (z.B. einem Vielwellenlängendetektor) wird jedoch wiederum eine Detektionseinheit verwendet, welche z.B. (Fall ai) austauschbare Photo- detektoren und/oder austauschbare optische Filter (und gegebenenfalls Polarisatoren) δiμ enthält. Weiter kann D aber auch mehrere Photodetektoren δiμ enthalten, welchen die jeweilige emittierte Fluoreszenzstrahlung, z.B. (Fall a₂) mittels Lichtleitfasern oder Lichtleitfaserbündeln, zugeleitet wird. Mit einer Einheit D ent- sprechend Fall ai kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nur nacheinander erfolgen. Mit einer Einheit D entsprechend Fall a₂ kann die Kombination von Anregung und Detektion der n Markierstoffe Mμ nacheinander und potentiell auch gleichzeitig durchgeführt werden. Die Ausführungen in b) unter Punkt II.2) betreffend die unterschiedlichen Weglängen und Raumwinkel der von den Markierstoffen Mμ emittierten Fluoreszenz - Strahlung treffen natürlich auch hier wieder zu.

II.4) A1/A2/.../An-1/An/Dl/D2/.../Dn-l/Dn (die n Markierstoffe werden gleichzeitig durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ bzw. Dμ angeregt bzw. detektiert) .

Die gleichzeitige Anregung bzw. Detektion der n Markierstoffe läßt sich im Prinzip mit den Anordnungen und geometrischen Ver- hältnissen durchführen wie sie in Punkt II.1), Punkt II.2) in Fall ai von a) , Punkt II.2) in b) , Punkt II.3) in Fall a₂ von a) und Punkt II.3) in Fall a₂ von b) beschrieben wurden. 33

Die Anordnungen und beispielhaften Aufbaumöglichkeiten von Detek- tionsgeräten in Fall I, d.h. bei Anregung in denselben Proben- volumina, sind in der Regel zur zeitlich aufeinander folgenden Anregung der n Markierstoffe Mμ geeignet.

Die Anordnungen und beispielhaften Aufbaumöglichkeiten von Detektionsgeräten in Fall II, d.h. bei Anregung in verschiedenen Probenvolumina, sind in der Regel zur gleichzeitigen Anregung aller n Markierstoffe Mμ geeignet. Besonders sind darunter solche Anordnungen und beispielhaften Aufbaumöglichkeiten von Detektionsgeräten geeignet, in welchen zudem die jeweils emittierte Fluoreszenzstrahlung an räumlich unterschiedlichen Orten gleichzeitig detektiert werden können.

Generell kann die Anregungsstrahlung der Einheiten Aμ gepulst oder kontinuierlich, d.h. im continous-wave- (CW-)Modus, eingestrahlt werden. Weiter kann die Intensität der AnregungsStrahlung jeder Einheit Aμ mit einer Frequenz fμ moduliert sein, so daß diese Einheit Aμ eine ebenfalls mit fμ intensitätsmodulierte Fluoreszenz - Strahlung des Markierstoffs Mμ anregt, welche von Dμ selektiv gemessen werden kann. Üblicherweise verwendet man dabei Modulationsfrequenzen, welche sich von der Frequenz des Stromnetzes (üblicherweise 50 Hz) sowie den halb- und ganzzahligen Vielfachen dieser Frequenz unterscheiden. Im Falle der gleichzeitigen An- regung und Detektion der von allen Markierstoffen Mμ emittierten Fluoreszenzstrahlung kann über die unterschiedlichen Modulations- frequenzen fμ eine Zuordnung der Fluoreszenzstrahlung des jeweiligen Markierstoffes Mμ sowie ein besseres Signal/Rausch-Verhältnis erreicht werden. Zur Detektion der intensitätsmodulierten Fluoreszenzsignale verwendet man üblicherweise das "Lock-in- Verfahren" .

Eine bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche nach dem erfindungsgemäßen Verfahren markiert worden sind, besteht in der zeitlich nacheinander erfolgenden Anregung der n Markier- Stoffe Mμ durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ in demselben Probenvolumen und der (zeitlich nacheinander erfolgenden) Detektion der jeweils durch Mμ emittierten Fluoreszenzstrahlung.

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche nach dem erfindungsgemäßen Verfahren markiert worden sind, besteht in der gleichzeitig erfolgenden Anregung der n Markier- Stoffe Mμ durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ in demselben Probenvolumen und der gleichzeitig oder zeitlich nacheinander 34 erfolgenden Detektion der jeweils durch Mμ emittierten Fluoreszenzstrahlung mittels eines Vielwellenlängendetektors.

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche nach dem erfindungsgemäßen Verfahren markiert worden sind, besteht in der gleichzeitig erfolgenden Anregung der n Markier- Stoffe Mμ durch eine polychromatische Einheit A in demselben Probenvolumen und der gleichzeitig oder zeitlich nacheinander erfolgenden Detektion der jeweils durch Mμ emittierten

Fluoreszenzstrahlung mittels eines Vielwellenlängendetektors.

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche nach dem erfindungsgemäßen Verfahren markiert worden sind, besteht in der gleichzeitig erfolgenden Anregung der n Markier- Stoffe Mμ durch jeweilige, mit der Frequenz fμ intensitätsmodu- lierten Einheiten Aμ in demselben Probenvolumen und der gleichzeitig oder zeitlich nacheinander erfolgenden Detektion der je- weiligen, durch Mμ emittierten und intensitätsmodulierten Fluoreszenzstrahlung .

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche nach dem erfindungsgemäßen Verfahren markiert worden sind, besteht in der gleichzeitig erfolgenden Anregung der n Markier - Stoffe Mμ durch ihre entsprechenden Einheiten Aμ in jeweils verschiedenen Probenvolumina und der gleichzeitig oder zeitlich nacheinander erfolgenden Detektion der durch Mμ emittierten Fluoreszenzstrahlung mittels der jeweiligen Einheit Dμ.

Bevorzugt verwendet man in den Einheiten Aμ als Strahlungsquellen αiμ Halbleiterlaser, Halbleiterdioden oder Festkörperlaser, welche eine maximale Emission im Spektralbereich von λ_maχ - 100 nm bis λ_max + 20 nm aufweisen, wobei λ_max die Wellenlänge des Absorptionsmaximums des jeweils entsprechenden Markierstoffs Mμbezeichnet.

Als Photodetektoren δiμ in den Einheiten Dμ werden vorteilhaft Halbleiterdetektoren, insbesondere Silicium- Photodioden oder Ger- manium-Photodioden verwendet.

Als optische Filter in den Photodetektoren δiμ der Einheiten Dμ kommen bevorzugt Interferenzfilter und/oder Kantenfilter mit einer kurzwelligen Transmissionskante im Bereich von m_ax bis λ_max + 80 nm in Frage, wobei λ_max die Wellenlänge des Absorptionsmaximums des jeweils entsprechenden Markierstoffs Mμbezeichnet. 35

Gegebenenfalls können auch noch ein oder mehrere NIR-Polarisato- ren verwendet werden.

Das folgende Beispiel soll die Erfindung näher erläutern.

Beispiel 1:

Eine Mischung aus jeweils 0,5 pp A (PcH- (3' -methylphenyloxy) ) , B (PcH₂- (cyclopentylamino) ) und C (NcH₂- (OCH₉) ₈) wird in blei- freiem Ottokraftstoff (ROZ 95) gelöst (PcH₂ bezeichnet das

Phthalocyanin-System, in welchem Me¹ (Formel Ia) zweimal Wasserstoff und je ein Rest der Restepaare R¹ und R⁴, R⁵ und R⁸, R⁹ und R¹² sowie R¹³ und R¹⁶ in Formel Ia Wasserstoff, der andere Rest 3' -methylphenyloxy (A) bzw. cyclopentylamino (B) entspricht; NcH bezeichnet das Naphthalocyanin-System, in welchem Me² (Formel II) zweimal Wasserstoff entspricht, und alle Restepaare Y¹ und Y², Y³ und Y⁴, Y⁵ und Y⁶ sowie Y⁷ und Y⁸ in Formel II OC₄H₉ (C) entsprechen) .

Das Absorptionsspektrum der Markierstoff-Mischung aus A,B und C zeigt im wesentlichen keine Überlappung der Absorptionsspektren der einzelnen Markierstoffe.

Claims

36Patentansprüche

1. Verfahren zur Markierung von Flüssigkeiten mit mindestens zwei Markierstoffen, dadurch gekennzeichnet, daß die Markier- stoffe

mindestens einer der Markierstoffe eine Wellenlänge des Ab- sorptionsmaximums von mehr als 850 nm besitzt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Markierstoffe verwendet, deren jeweilige Wellenlänge des Absorptionsmaximums im Spektralbereich von 600 bis 1200 nm liegt.

3. Verfahren nach den Ansprüchen 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man n Markierstoffe zusetzt, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 10 bedeutet.

4. Verfahren nach den Ansprüchen 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man n Markierstoffe zusetzt, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 6 bedeutet.

5. Verfahren nach den Ansprüchen 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man n Markierstoffe zusetzt, wobei n eine ganze Zahl von 2 bis 4 bedeutet.

6. Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 5, dadurch gekennzeich- net, daß man als Markierstoffe Verbindungen zusetzt, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus metallfreien und metallhaltigen Phthalocyaninen, metallfreien und metallhaltigen Naphthalocyaninen, Nickel -Dithiolen-Komplexen, Aminiumverbindungen von aromatischen Aminen, Methinfarbstoffen, Qua- dratsäurefarbstoffen und Krokonsäurefarbstoffen.

7. Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß man als Markierstoffe mit einer Wellenlänge des Absorptionsmaximums von mehr als 850 nm mindestens eine Verbin- düng ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus metallfreien und metallhaltigen Naphthalocyaninen, Nickel -Dithiolen-Komplexen, Aminiumverbindungen von aromatischen Aminen, Methinfarbstof - 37 fen, Quadratsäurefarbstoffen und Krokonsäurefarbstoffen zusetzt.

.. Verfahren zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche gemäß einem Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 7 markiert worden sind, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Strahlungsquelle verwendet, welche in den Absorptionsbereichen aller Markierstoffe Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist.

9. Verfahren zur Detektion von Markierstoffen in Flüssigkeiten, welche gemäß einem Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 7 markiert worden sind, dadurch gekennzeichnet, daß man für jeden einzelnen Markierstoff eine entsprechende Strahlungsquelle verwendet, welche im Absorptionsbereich des Markierstoffs

Strahlung emittiert, und man die von den Markierstoffen emittierte Fluoreszenzstrahlung nachweist.

10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man als Strahlungsquellen Halbleiterlaser, Halbleiterdioden oder

Festkörperlaser verwendet, welche eine maximale Emission im Spektralbereich von λ-_nax - 100 nm bis λm_ax + 20 nm aufweisen, wobei λ_max die Wellenlänge des Absorptionsmaximums des jeweils entsprechenden Markierstoffs bezeichnet.

11. Flüssigkeiten, welche gemäß einem Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 7 markiert worden sind.