TWI259078B - Novel formulation - Google Patents

Description

1259078 五、發明說明（1) 發明範圍 本發明係關於一種新穎α〜（2,4-二磺苯基）—N-第三—丁 基硝酮及其醫藥上可接堂的鹽的醫藥調配物，&此等調配 物在治療各種疾病上的用途。此等化合物也可稱作4-[(第 三一丁基亞胺基）曱基]苯二磺酸N-氧化物衍生物。 發明背景 美國專利5, 488, 145號揭示α—(2,4 -二磺苯基）—N—第三—

丁基硝酮及其醫藥上可接受的鹽。美國專利5,475,〇32號 揭示此類化合物在治療中風及進行性中樞神經系統功能喪 失的情況上的用途。美國專利5, 5〇8, 3〇5號揭示此類化合 物在改善由治療抗腫瘤疾病所引起的氧化性傷害副作用上 的用途。W0 95/17876也有類似的揭示。美國專利 5，7 8 0，51 0號同類化合物在治療震傷上的用途。

作如中風’震傷’大腦損傷及中插神經系統（C n § )外傷 之治療時，α-(2,4-二磺苯基）-N-第三-丁基硝酮之醫藥 上可接受的鹽必須以非經口給予。特佳是，此化合物應作 靜脈輸液給予。α-(2,4-二磺苯基）-Ν-第三-丁基硝酮及 其醫藥上可接受的鹽有一問題是其易於分解。具體地說， 此類調配物的貨架壽命短得令人不能接受。本發明揭示以 （2,4-二磺苯基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽水溶液為基 礎的醫藥調配物，其能解決分解的問題，特別適於非經腸 給予 〇 明揭示 一方面，本發明提供通式（Ί )化合物的醫藥調配物

第4 X 1259078

M+

Ο) 代表醫藥上可接受的陽離子 特佳是M+代表Na+。 少 等

α _( 2, 4-二續苯基）—N〜第三-丁基硝酮二鈉鹽水溶液至 以—種不同徑路分解。2,4-二磺苯甲醛二鈉鹽（I I)是此 途徑的共同產物。

不必受理論的束縳’ 一種分解途徑包括硝酮的官能基水 解成醛（II)及N-第三-丁基羥基胺。第二途徑包括自體氧 化’很可能包括自由基降解。在此途徑中，開始時是生成 相同的二種產物，但後來N-第三-丁基羥基胺又進一步反 應生成其他的產物。現已知自體氧化過程受溫度、氫離子 k 濃度、微量金屬、微量過氧化物或光線的影響[Κ· ·

Kasraian et al., Pharm. Dev. & Technol., 4(4),

1259078 五、發明說明（3) 475-480 (1999)]。例如，Fenton型自體氧化就是週知 的。此類自體氧化一般是由金屬，特別是鐵，及分子氧開 始’產生經基[B· Halliwell and J. Gutteridge， Biochem. J., 219， 1-14(1984)] °

由於氧化分解的複雜性質，也由於現在的情形是有水解 裂分解同時發生，現尚不清楚如何生產安定的式（丨）化合 物調配物。此技藝已知，易於氧化分解的化合物應於低pH 值（酸性）調配，這樣可增加對氧化的抵抗性。具體地說， 此類分解一般於pH 3至4為最低（Pharmaceutical Pref〇rmu 1 ation, ed. Je I. Wells, Ellis Horwood, 1 988， 166頁）。但此情形是，使用低？11會同時發生不能接 受的快速水解。 為確定到底那一因素對α-(2, 4-二續苯基）—N-第三—丁 基確酮二鈉鹽水溶液有重要影響，發明人等作了研究。研 究的因素包括pH，上述溶液中的氧含量，微量金屬的有無 及加抗氧化劑或螯合劑。於第一種情形，測定溶液中生成 的2, 4-二磺苯曱醛二鈉鹽（11)的濃度評估其分解。

各批α-(2, 4 -二磺苯基）-N-第三-丁基硝酮二鈉鹽的微 量金屬分析顯示，即使鐵，也可能還包括銅，鉻及鋁，息 達ppm含量以下，仍會對之後所製的調配物的安定性有影s 響。但加四醋酸伸乙基二胺二鈉（E DT A )，一種眾所週知^ 螯合劑，仍不會改良此水性調配物的安定性（表2 )。使用的 螯合劑樹脂Che lex_100®(Bio-Rad Laboratories)會導敢 醛（Π)的少然而卻明顯的減少，此種醛是於儲存期生成

1259078 五、發明說明（4) (實例3 )。 在將抗壞血酸鈉，一種抗氧化劑，加於α-(2,4_二磺苯 基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽的濃縮水性條配物内時，儲 存期中生成的醛（11)幾乎減少一半（表2 )。但溶液褪色並 出現沉澱物，是以排除用抗壞血酸鹽作為減少分解的手 段。令人I；可的是，只簡單地於(2,4—二磺苯基）_Ν — 第三-丁基硝酮二鈉鹽的濃縮水溶液内吹入氮氣也會使醛 (II)之生成達到類似程度之減少（表2及3)。

除了於濃縮水溶液内吹入惰性氣體外，減小裝此濃縮溶 液的小瓶頂部的容積並於此空間内充以惰性氣體也是有益 的（表4 5及6 )較佳是’此頂部容積應少於小瓶總容積 的30%。更佳是，此頂部容積應少於小瓶總容積的2〇%。就 :準的ίο毫升二小的醫藥小瓶言，實際最大總容積為13毫 丄實際上裝藥容積為1〇·7毫升。就標準的2〇毫升大小的 =樂小，言，實際最大總容積為25毫升，實際上裝藥容積 二2 0 · 7毫升。較佳是使用標準的2 〇毫升大小的醫藥小瓶。

最令人驚奇的事實是，α_(2,4—二磺苯基）—Ν—第三一丁 酮二鈉鹽水溶液的安定性基本上隨α -(2, 4—二磺苯 :第二丁基硝酮二鈉鹽在溶液中濃度的增加而增 這女疋性可由酸^11)生成量的減少及進一步生成自 體氧化產物的減少（表8，9及1 0 )而得到證明。 所以本發明特定的調配物含有濃縮的“ 24 —二磺笨 = )—Ν—第三—一丁基硝酮二鈉鹽水溶液，其中α—(2, 4一二磺 本基）-Ν-第三—丁基硝酮二鈉嘰的濃度為5〇至6〇〇毫克/毫

第7頁 1259078 五、發明說明（5) 升。較佳的調配物是這樣的調配物，其中濃度為1 0 0至6 0 0 毫克/毫升。更佳的調配物是這樣的調配物，其中濃度為 2 0 0至4 0 0毫克/毫升。特佳的調配物是這樣的調配物，其 中濃度為4 0 0毫克/毫升。尤佳是此種溶液是經惰性氣體吹 洗並儲存於惰性氣體下。特佳是使用氮作為惰性氣體。 此種濃縮溶液不需緩衝劑作進一步安定。但此種溶液在 以靜脈内輸液給予病人前需先以生理鹽水稀釋。此一稀釋 過程導致pH降低，因而也導製此稀釋過的溶液加速分解。 為防止此一 pH變、化，需加緩衝劑。較方便是此缓衝劑包括 於濃縮調配物内，而非在稀釋時加入（表丨丨，丨2及丨3 )。 所以，本發明另一方面提供 種濃縮調配

▼、，，， 一 ”一一… T η 液緩衝至pH 7至9· 5。更佳是此溶液緩衝至ρΗ 8· 5。可用 f何，理上可接受的緩衝劑。緩衝劑較佳是磷酸鹽緩衝 ^ °疋以’於此濃縮物内加磷酸氫鹽（5至5 〇 )並藉加』 氣化納水溶液或鹽酸水溶液將pH調整至所需水平。一另方面’本發明係關於製造α-(2, 4-二確苯基 ^ 丁基罐嗣醫藥上可接受的鹽的新穎調配物的方法。ili，是製備α-(2,4_二確苯基）-n_第三—丁基硕_二 納鹽新穎調配物的方法。 股而言， 基硝酮的醫筚上α—(2,4—二磺苯基）—N—第三― 内，麸 樂上τ接文的鹽溶於水或適宜的水性緩衝》 …、、傻’如有需要，將溶液調整至 再視需要用惰性氣體如氮將溶液去氣。 9·5…、 此法較佳包括如下步驟·…

1259078 五、發明說明（6) a )將適宜的緩衝劑如磷酸氫二鈉溶於注射用水内； b)將α-(2,4-二磺苯基）-N-第三〜丁基硝酮二鈉鹽溶於 該緩衝液内； c) 檢查pH，然後藉加適量的氫氧化鈉水溶液或鹽酸水 溶液將p Η調整至7至9 . 5 ; d) 在加注射用水產生所需終濃度的α-(2,4—二績苯基） 第三-丁基硝酮二鈉鹽； e) 用氮氣將此溶液去氣適宜的時間；

f) 用0 · 2 2微米滅菌過濾器將溶液作滅菌過濾入預先滅 菌的容器内；及 g) 將此溶液在氮氣下無菌移入個別小瓶内，再將其封 閉。 、’、 具體的較佳方法如實例1所揭示。

f某些情形下，特別方便的是能將非經腸給予的本發明 醫藥調配物裝入多劑量容器内。所謂多劑量容器即可由其 1抽出聯續部分的内容物而不會改變剩餘部分的強度，品 貝或純度。按規定（歐洲藥典2 〇 〇 1 )需要，多劑量水性注射 液3有適宜濃度的適宜的抗微生物防腐劑，除非此製劑本 身具適宜的抗微生物性質。此技藝現已知，無菌裝入的醫 藥產物（即最終以〇· 22微米過濾器過濾的製劑）在製造期間 對微生物污木非常敏感。不論是從製造觀點或叢其他安全 理由j如，在產物搬運或診所儲存期内破損所可能引起 的=木看，如果藥物調配物本身展現抗微生物性質是認 作有明顯優點。所以，#果醫藥調配物本身能實現關於防

1259078 五、發明說明（7) 腐的規定所需，即可不必另加防腐劑。 所以本發明的另一傣點县 — 呈古日日骷从 > 视 ”，疋此處所揭不的濃縮水性調配物 盆、Μ够一 初庇貝疋以，對α-(2, 4-二磺苯 基）-Ν-第二-丁基石肖酮_如臨 % π ^ ^ ^ = 鈉鹽调物抑制下述細菌的藥效 乍。平估·銅、、亲假單胞菌，金普 . Γ · '、匕利词艰®，Bur.cepacia， 士 5H:V-Ia’大腸桿菌’白色假絲酵母，及黑色放線菌。 麵趟Γ4ηη =古/3*α_(2, 二續苯基）-N~第三—丁基石肖酮二 微Γ物兮Γ 笔升）的本發明濃縮水性調配物具有相當抗 微生物效果。以對銅綠假單胞菌Bur.

而^ ’於6小時内可見明顯的每毫升菌落形成單 (U/笔升）的減少（^1〇3倍）。對金黃色葡萄球菌及大 士干於24小時内也有相似效果，對白色假絲酵母於48小 =内也有相似效果。詳細結果見表14，α_(2 4_二磺苯 =)~Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽（丨〇毫克/毫升）調配物及緩衝 /夜對照比較結果分別見表1 5及1 6。

如表7所示，稀α—(2, 4-二磺苯基）—N—第三—丁基硝酮二 納鹽（0.9毫克/毫升）水溶液在於室溫曝露於正常室内光線 下8小時時即有明顯的光降解現象。如果水溶液加緩衝液 後光降解速度即下降。較濃的水溶液（1〇毫克/毫升）之光 降解速度更小（表7 )。在相同條件下，本發明水性濃縮調 酉己物（400毫克/毫升）在相同時間内不發生光降解。 於特定較佳具體實施例中，本發明提供醫藥調配物，其 各有α-（2，4~二績苯基）-N-第三-丁基确酮二鈉鹽（4〇〇毫 克/¾:升）濃縮水溶液及鱗酸氫二鈉（5至50 mM)，pH 8.5，

第10頁 1259078 五、發明說明（8)

以氮氣吹洗過，儲於密封的2 0毫升坡壤， 頂部容積，其内充有氮氣。更佳是磷酸^ 1内，=小瓶有 1 〇 mM。此種調配物之貨架壽命，在儲、一鈉的濃度為約 至8。〇時，出乎意料的長達24個月，其子5於六水箱（溫度約2 持可用情況達至少6個月。 主存於室溫時仍維 今以下述實例說明本發明，但決非限制本發 實例1 " 水性濃縮調 ^二m-..三磺苯基）-n-第三-丁某！ 莖之製備

將二水合磷酸氫二鈉（186克）加於注射用水（6〇公斤） =。將此混合物以3 0 0轉/分鐘的速度攪拌至完全溶解（1〇 ，鐘）。此時溶液ρΗ為9·3。然後加α—(2,4—二磺苯基）—Ν 一 丁基硝酮二鈉鹽（39·6公斤），繼續攪拌至此物&質完 王’各解（2 0分鐘）。然後加2 μ氫氧化鈉水溶液（6 〇 4毫升）將 Τ液pH調整至5· 8至8· 5。再加注射用水至終重量為11 7· 1 公斤。得含α-(2, 4-二磺苯基）-N-第三-丁基硝酮二鈉鹽 4〇〇毫克/毫升的濃縮物。藉改變所用硝酮的量，以類似方 法製得濃度為5〇至6〇〇毫克/毫升的濃縮物。

然後將此溶液以氮氣去氣130分鐘（表1 )。

1259078 五、發明說明（9) 表 去氣時間(分鐘） 15 30 130

溶解的氧(毫克/公升) 7.8 8.2 0.6 1.3 器置於氮氣10至15千帕 400公升的不錄鋼容器内。將此容 下。將此溶液用滅菌過渡過的ϋ名丄 、 ' j. 滅菌的1〇毫升或20毫升玻璃小；：在無菌條件下裝於乾； 吹洗小瓶。裝添容積分別是10=9，此氮氣是於裝添前旅 或20 7臺井。 過程中對小瓶内殘留氧氣的柝钿/ (ν AnMyser完成。小瓶頂部空間内=^用丁〇1*^ 〇χπ6η 0.1〇/〇(n = 29) 〇 1内殘餘的氧氣含量為0.9± (2，4 —二碏茉某）#

差^Ζ-Χ^硝酮一二液老_定性的相對影響 乂夕臭技術δ又计的實驗研究數種添加的因素的影響。將 二^於0.3% 2,4-二續苯甲醛二鈉鹽（11)的“一（2,4_二續 苯基）Ν〜第二-丁基硝酮二鈉鹽水溶液（1〇〇毫克/毫升）裏 於裝。添容積1 0毫升的封閉的1 0毫升玻璃小瓶内。於+ 40 °c 及7 5 /相對濕度儲存二個月後以色層分析法測定降解產

1259078 五、發明說明（10) 物，特別是2，4 -二磺苯甲醛二鈉鹽（丨丨）的濃度。 結果如表2所示。 表 2 添加因素 溶液pH範圍 最終醛(II)量 (面積％) 無（η = 5) 7.0 JL 8.2 2·20±0.11 抗壞血酸鹽(η = 3) 7·0 至 7·3 1.32 ± 0.11 (ρ< 0.001) EDTA (η = 5) 7.0 至 8·8 2.27±0·12 氮吹洗（η = 3) 7·0 至 8·6 1.34 ± 0.18 (ρ< 0.001) 各值為平均±標準誤差，η代表獨立實驗數。作卜試驗評 估不同因素的意義。 此實驗研究的pH範圍，PH 7至9，對分解的程度盔重大 影響。 μ 實例3 · 二 基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉 容液安定性的影響 將α-(2，4-二磺苯基）-N-第三-丁基石肖酮二納鹽（1〇〇毫 克/宅升）濃縮水溶液及磷酸氫二鈉（5. 3 mM)於ΡΗ 8. 0用螯 巍 a Μ細脂C h e 1 e X - 1 0 0 ®柱過濾過夜。將所得溶液分成數份 (8毫升）置入1 〇毫升玻璃小瓶内，然後密封。開始時酸 (II)的1為〇·2〇%。+40 °C及75%相對濕度過二個月後，搭 (Π)濃度增至2· 3%。於省去樹脂處理的對照實驗中，藤 . (1 1 )量增至3. 〇 %。 …

第13頁 1259078 五、發明說明（11) 實例4 ^同的皇·氣食i玄丄先對α二二磺笨基）_N_ 第T基^麵^二鈉鹽澧縮水溶液安;;響 將α-(2,4-二磺苯基）_N_第三-丁基硝鲷:二鹽（4〇〇毫 克/毫升）濃縮水溶液及磷酸氫二鈉（5.3 mM)於pH 85用不 同的空氣/虱混合物吹洗。將7毫升此溶液裝於密封的丨〇毫 升玻璃小瓶内儲存。各樣品於+ 4〇 °C及7 5%相對濕度過二個 月。開始濃縮水溶液含醛（Π)(〇· 25面積％)及有關物質 (0· 56面積％)。結果如表3所示。

表 3 吹洗氣混合物内 空氣％ 最終醛(11)量_ (面積％) 最終相關物質量 (面積％) 0 0.57 1.3 6.25 0.68 ±0.08 (η = 2) 1.5 ±0.1 (η = 2) 12.5 0.63 ± 0.01 (η = 2) 1.4 25 0.77 1.6 50 0.93 1.9 100 1.27 2.4

實例5 小瓶頂端空間容積复^性評估 避免曝露於氧氣的另一方面是藉增加裝填容積減少小瓶 頂端空間的容積。 〜

第14頁 1259078

將α-(2, 4-二磺苯基）第三-丁基硝酮二鈉鹽（400毫 克/毫升）濃縮水溶液及磷酸氫二鈉（10.5 mM)於pH 8.5用 氮氣吹洗30分鐘。然後用8毫升或1 3毫升此溶液裝入標準 的1 0毫升玻璃小瓶（標準丨〇毫升玻璃小瓶的最大可裝入容 積為1 3毫升）内。頂部空間不用氮吹洗。將小瓶密封，於 + 40°(：及75%相對濕度過二個月。開始醛含量為〇1%。 結果如表4所示。 表 4 裝填容積(毫升） 最終醛(Π)量 (面積％) 13 0.6 8 1.1

實例6 以空氣或氮裝填頂端空問的士. _ 將α-(2,4-二磺苯基）—n-第三—丁基硝酮二鈉鹽（15〇〇 克）加入含溶解的二水合磷酸氫二鈉（3· 51克）的注射用水 ( 22 0 0毫升）内製成40 0毫克/毫升的α—(2,4—二磺苯基）—Ν一 第三-丁基硝酮二鈉鹽濃縮溶液。然後於此溶液内加2Μ氫 氧化納溶液將pH調整至8.5，然後加注射用水使終容積為 3 7 5 0毫升。製備完了後，此溶液用氮氣吹洗9 〇分鐘，然後 裝於10毫升玻璃小瓶内，裝入容積為7·7毫升。蓋上蓋子 前，頂端空間先以氮氣吹洗。取丨〇個小瓶測定頂端空間氧 的含量，發現少於0· 05%。將小瓶儲於+ 5艺週邊濕度或

第15頁 1259078 五、發明說明（13) + 2 5 °C 6 0 %相對濕度。 將第二批400毫克/毫升濃度的^:-(2,4 -二績苯基）_N-弟 三-丁基硝酮二鈉鹽以5 0 mM磷酸鹽緩衝液缓衝，再以同法 處理，但頂部空間裝以空氣而不裝氮，裝填容積為1 〇. 5毫 升。 結果總結如表5。 表 5 儲存時間 —(月） 醛(II)量 (面積％) 裝氮頂部空間 裝空氣頂部空間 + 5°C + 25 °C + 5°C + 25°C 0 0.2 0.2 0.3 0.3 3 0.2 0.4 0.3 0.7 6 0.2 0.3 0.5 1.0 12 0.3 0.5 0.4 0.7

另外的數據見表6。1 0毫升大小之小瓶之裝入容積為1 〇 · 7 毫升；20毫升大小之小瓶之裝入容積為20,7毫升。

第16頁 1259078 五、發明說明（14) 表 組合物 f 二磺苯基)-Ν-弟二-丁基石肖ig二納鹽 濃度(毫克/毫升） 50 50 100 400 400 400 400 小瓶大小[毫升] 10 10 10 10 10 20 20 頂端空間内氣體 空氣 n2 空氣 空氣 n2 空氣 n2 儲存條件 醛(II)量 (重量/重量％) 開始 0.2 0.2 0.2 0.3 0.3 0.3 0.3 +40°C 2個月 2.8 1.4 1.8 0.8 0.5 0.7 0.5 +40°C 3個月 3.3 1.5 N.A. 0.9 0.6 0.8 0.5 +40°C 6個月 3.5 1.7 N.A. N.A. N.A. N.A. N.A.

N. A.表示未分析 實例7 α -（2, 4-二磺苯基）-N-第三-丁基硝酮二鈉鹽水溶液光降 解評估

將稀釋的α-(2,4 -二磺苯基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽 水溶液（0.9毫克/毫升或10毫克/毫升）於室溫曝露於室内 光線8小時試驗其光安定性。此較低濃度溶液以加或不加 碳酸鹽緩衝液試驗。生成主要光降解產物。緩衝過的調配 物較未緩衝過的調配物忍受光降解較佳。α - ( 2，4-二磺苯 基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽（10毫克/毫升）之光降解速度

第17頁 (15)~' ' ' 1259〇78 最低。 ^ 毫克/¾升的α-(2,4 -二磺苯基）—N—第三-丁基硝 —鈉鹽水溶液作類似實驗顯示於實驗條件下8小時後未 發現降解。 所得結果見表7 ° 表 Ί 時間 (小時） 光降解產物量 (面積％) α<2,4_二磺苯基) 第三-丁基硝酮 二鈉鹽0.9毫克/ 毫升 未緩衝 〇Κ2,4-二磺苯基） 第三_丁基硝酮 二鈉鹽0.9毫克/ 毫升 已緩衝 α<2,4_二磺苯基） 第三-丁基硝酮 二鈉鹽10毫克/ 毫升 未緩衝 0 _ 0.03 0 0 1 0.3 0.3 0.2 2 0.8 0.6 0.2 3___ 1.2 0.9 0.4 4 1.8 1.3 0.5 5 ___ 2.5 1.6 0.6 6___ 2.9 2.0 0.8 7__ 3.5 2.3 0.8 8___ 4.0 2.7 0.9 實例8 度對a 碏茉基）-N二三-丁基_^|^二鈉鹽水溶

第18頁 1259078 五、發明說明（16) 液安定的影響 種不 於開始實驗中，將以碳酸氫鈉（5 0 mM )緩衝過的 同濃度的(2,4 -二績苯基）-N-第三-丁基石肖酮二納鹽水 溶液分入20毫升玻璃小瓶内，密封，然後於+ 40 °C及75%相 對濕度儲存40天。特定的一批α-(2，4-二續苯基）-N-第三 -丁基硝酮二鈉鹽有高開始醛含量。所得結果總結於所得 結果總結於表8。 表 8 «-(2,4_二磺苯基）； -N-第三-丁基硝嗣 二鈉鹽濃度 (毫克/毫升） 開始醛(II)含量 (面積％) 最終醛(II)含量 (面積％) 200 1.7 3.5 300 1.7 3.2 400 1.8 2.9

於第二研究中，將未緩衝的α-(2，4-二續苯基）-N-第三 -丁基硝酮二鈉鹽水溶液（濃度為100毫克/毫升或200毫克/ 毫升）分入50毫升玻璃小瓶内，於+5 °C儲存。 所得結果總結於表9。

第19頁 1259078 五、發明說明（17)

表 9 儲存時間 (月） 濃度(1〇〇毫克/毫升） 濃度(2 00宅克/毫升） 醛(II)含量 (面積％) pH 醛(II)含量 (面 #%) ------ pH 0 0.2 7.4 0.2 7.6 1 0.5 7.5 0.4 7.6 3 1.0 7.3 0.6 7.4 6 1.6 7.1 0.8 7.4 12 1.6 6.9 1.1 6.9

於第三研究中，將磷酸鹽緩衝（50毫莫耳濃度）緩衝的α -（2, 4 -二磺苯基）_Ν-第三—丁基硝酮二鈉鹽水溶液（濃度為 200¾克/毫升或4〇〇毫克/毫升）分入10¾升玻璃小瓶内， 於+ 5 C儲存。 所得結果總結於表1 〇。 表 10

儲存時間 (月） 濃度(200毫克/毫另 0 濃度(400毫克/臺弁〉 醛(II)含量 (面積％) pH 酸KH)含量 (面積。/c〇 pH 0 0.1 8.0 0.1 8.0 6 0.4 7.9 0.3 7.8 12 0.6 7.9 0.4 7.8 18 0.7 8.0 0.4 7.9 第20頁 1259078

五、發明說明（18) 實例9 二鈉鹽 pH對α-(2，4-二續苯基）-N-第三-安定的影響 對α-(2,4-二磺苯基）-N-第三—丁基硝 依賴ΡΗ的降解作過廣泛研究。表未緩—衝的二 :續苯基）-N- f三-丁基墙酮二納鹽水溶液（4毫克/毫升） ”以磷酸鹽（0.53 mM)緩衝的α-(2,4-二磺苯基）—N_第三-丁基硝酮二鈉鹽水溶液（4毫克/毫升）的比較。二種溶液荀

=稀7對應&濃縮物製#，也都是在類似給病人使用說 稀釋的浪縮物的條件下儲於室溫下。 表 11

貝n 1 υ

X-^ 確_二鈉鹽水性澧 製備三批α-(2,4-二磺苯基）_Ν_第 丁基硝酮二鈉鹽

Ϊ259078 、發明說明（19) 水性濃縮物（40 0毫克/毫升）並將pH調整至8· 5。一種濃縮 ^不/缓衝，其他二種濃縮物分別用2· 6或26 mM磷酸氫二鈉 緩衝。都是將濃縮物的7毫升移入裝於PVC袋内的〇· 9%氣化 鈉溶液（ 5 0 0毫升）内。然後將各袋在暗處儲存於室溫下48 小時。於0，24及48小時取樣品分析。 結果總結如表1 2。

表 12 時間 (小時） 48 無緩衝劑 濃縮物内 1衝劑強度 (2.6 Mm) 濃縮物内 緩衝劑強度 (26 Mm) pH 醛(II)量 (面積％) pH 醛(II)量 (面積％) pH 醛(II)量 •(面積％) 6.01 0.25 6.50 ——=:-- 0.30 7.43 0.17 6.32 0.68 6.69 0.44 7.39 0.20 6.48 0.89 6.67 0.57 7.38 0.25

及濃縮物的景t塑 曰- 於進一研究中，比較二種除存於室溫下的缓衝過的 酸氫鈉）及未緩衝的α—(2, 4—二磺苯基）—N-第三一 丁基硝 二鈉鹽水溶液及濃縮物。結果（表13)顯示，二種分解都 濃度依賴性的，且於較低pH值時更明顯。缓衝過的溶液

苐22頁 1259078 五、發明說明（20) 儲存時間較短及儲存溫度較低，顯示無濃度依賴性分解。 表 13 儲存時間 (小時） α-(2,4·二磺苯基） 第三_ 丁基 硝酮二鈉鹽 (毫克/毫升） 未緩衝 緩衝 醛(II)量 (面積％) pH 醛⑼量 (面積％) pH 0 7.5 1.0 5.8 0.6 8.1 48 7.5 2.4 6.3 0.7 8.7 0 75 1.1 6.1 0.6 8.0 48 75 1.9 6.7 0.7 8.1 0 150 1.0 6.1 0.6 7.9 48 150 1.7 6.7 0.7 7.8 實例1 2 α-(2, 4 -二磺笨基）-N-第三-丁基硝酮二鈉鹽（400毫克/毫 升）與α-(2, 4 -二磺苯基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽（10毫 克/毫升）及對照抗微生物效杲的比較 以三種不同的溶液試驗其抗微生物效果： i) α-(2,4-二磺苯基）-Ν-第三-丁基硝酮二鈉鹽，10毫 克/毫升； ii) α-(2，4 -二續苯基）-Ν-第三-丁基石肖酮二納鹽，400 毫克/毫升；及 i i i) 碳酸鹽緩衝液對照 根據歐洲藥典2 0 0 0，5. 1. 3章，2 59至2 60頁進行試驗。

1259078 五、發明說明（21) 給七個1 0毫升小瓶接種，每試驗微生物接種一小瓶。在試 驗期間，將小瓶儲存於控制室溫，不使見光。於不同時間 抽取樣品，作適宜稀釋後用標準碟計數方法測定活微生物 (每毫升菌落形成單位，CFU/毫升）。 此三種溶液所得結果分別見表1 4，1 5及1 6。

第24頁 1259078 五、發明說明（22) 黑色放線菌 白色假絲酵母 Iv. gcrgoviac Π\ιγ. cepacia 銅綠假單胞菌 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 試驗 微生物 1.8xl05 1.5χ105 I 5.6χ105 Ι.ΙχΙΟ6 5.5χ105 2.2χ106 一J 計算出的 每毫升接種物 l.OxlO5 1.6x10s 5.2χ105 Ι.ΙχΙΟ5 Ι.ΙχΙΟ4 3.8χ105 3.3xl06 <1分鈸 每毫升CFU數目-接種後時間 5.9xl04 U) X 1.3x102 8.7x1ο1 1.4x1ο1 X 6.7x105 3.4xl04 6-lxlO1 Λ Λ Λ Λ 8.7x102 24小時 1.7xl04 Λ λ /\ Λ Λ' 3.8xl02 48小時 I.9xl02 Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ 14天 .Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ 21天 Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ 28天 >14

第25頁 1259078 五、發明說明（23) 黑色放線菌 白色假絲酵母 E. gcrgoviac Bur. cepacia 銅綠假單胞菌 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 試驗 微生物 l.OxlO5 —1 9.5xl05 8.0xl05 4.5x10s l.OxlO6 2.0x106 2.0x106 計算出的 每毫升接種物 5.0xl04 6.5x10s 8.0x10s 3.5xl05 1_ 1.5xlOfi 1.5χ106 2.0χ106 <1分鐘 :每毫升CFU數目-接種後時間 I 丨 4.5χ104 7.0x105 2.0xl05 1.5xl03 4.0x104 9.0x10s 4·5χ105 6小時 I ! 5.0xI04 6.5x10s <10 Λ 4.0xl02 5.0χ104 4.5χ103 24小時 1- 5.5xl04 1 6.5x10s Λ Λ 3.5xl02 <10 <10 48小時 1- 3·0χ104 <10 Λ Λ <10 A Λ > l.OxlO3 Λ Λ Λ Λ Λ Λ Μ天 I- l.OxlO2 Λ Λ Λ Λ Λ Λ 21天 ΙΛ Λ Λ Λ Λ Λ Λ 28天 I ΜΜl· 藏 I—k Ο 柳 Ϊ S 薛 萍 |> >

ιιηϋΐ 第26頁 1259078 五、發明說明（24) 白色假絲酵母 Π. gcrgoviac Rur. cepacia 銅綠假單胞菌 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 試驗 微生物 1 9.5x10s 8.0xl05 1 [ 4.5xl05 l.OxlO6 2.0xl06 1 2.0xl06 ------------- 1 計算出的 每毫升接種物 7.5xl05 7.5xl05 4.0xl05 l.5x!06 1.5xl06 2.5xl06 _1 <1分鐘 每毫升CFU數目-接種後時間 7.0xl05 6.5xl05 3.0x10s 1.5xl06 1.5xl06 2.0x106 6小時 7.0x10s 1.5xl06 5.0x10s 5.5xl06 5.0χ10ό 1.5χ106 24小時 6.0x105 2.0x106 l.OxlO6 6.0x106 7.0x106 7.0χ105 48小時 7.0x10s 3.5xl06 2.0x10s 7.0x106 6.5x106 1 3.0χ104 >Η 7.0xI05 1.5xl06 6.0x106 4.0xi06 l.OxlO3 14天 7.5xl05 l.OxlO6 5.0xl02 5.0xl06 4.0xl06 4.5χ107 21天 7.5xl()5 8.5x10s 1.5xl06 2.5x106 28天

IHil 第27頁 1259078

第28頁

Claims (1)

1259078 案號 901Π180 年> 月 六、申請專利範圍 κι»Η"

爾-V.丨 无 更 § 1 . 一種醫藥調配物，其含有濃縮的α - ( 2，4 -二磺笨基） - Ν -苐三-丁基墙二納鹽水溶液’其特點在於此濃度在5 0 至600毫克/毫升範圍内及pH在7至9. 5之範圍内。 2 .根據申請專利範圍第1項之調配物，其中濃度是1 0 0至 600毫克/毫升。 3 ·根據申請專利範圍第1項之調配物，其中濃度是2 0 0至 400毫克/毫升。 4.根據申請專利範圍第1項之調配物，其中濃度是約4 0 0 毫克/毫升。 5 .根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其中此 溶液是以惰性氣體吹洗並儲存於惰性氣體下。 6 .根據申請專利範圍第5項之調配物，其中惰性氣體是 氮。 7 ·根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其中此 溶液是用生理上可接受的緩衝液緩衝至P Η 7至9. 5範圍 内。 8 .根據申請專利範圍第7項之調配物，其中此溶液是緩 衝至約ρ Η 8 . 5。 9 .根據申請專利範圍第7項之調配物，其中緩衝液是磷 酸鹽緩衝液。 1 0.根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其中 此溶液是封於頂端空間容積最小的玻璃小瓶内，頂端空間 内裝有惰性氣體。 1 1.根據申請專利範圍第1 0項之調配物，其中密封的玻

O:\70\70937-930209.ptc 第29頁 1259078 _案號 9Q111180 六、申請專利範圍 臼 修正 璃小瓶内的頂端空間容積小於小瓶最大總容積的2 0 %。 1 2. —種製備根據申請專利範圍第1至9項任一項之調配 物的方法，其包括將a - ( 2，4 -二續苯基）-Ν -第三-丁基硝 酮二鈉鹽溶於注射用水或適宜的水性緩衝液内；及，如有 需要，經溶液ρ Η調整至7至9 . 5範圍内；然後視需要將此溶 液以惰性氣體去氣。 1 3.根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其係 -用於製備供治療中風的靜脈内輸液。 1 4.根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其係 . 用於製備供治療震傷的靜脈内輸液。 1 5.根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其係 鲁 用於製備供治療外傷性腦損傷的靜脈内輸液。 1 6.根據申請專利範圍第1至4項任一項之調配物，其係 用於製備供治療中樞神經系統傷害的靜脈内輸液。

O:\70\70937-930209.ptc 第30頁