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TW201932482A - 對b細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸 - Google Patents

對b細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸 Download PDF

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TW201932482A
TW201932482A TW107138735A TW107138735A TW201932482A TW 201932482 A TW201932482 A TW 201932482A TW 107138735 A TW107138735 A TW 107138735A TW 107138735 A TW107138735 A TW 107138735A TW 201932482 A TW201932482 A TW 201932482A
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cdr
seq
amino acid
region
acid sequence
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TW107138735A
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布萊斯 Ｄ 賽特
Original Assignee
美商奇諾治療有限公司
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Abstract

本文提供嵌合受體(receptor)，諸如嵌合抗原受體(CAR)，其包含BCMA結合分子，諸如抗BCMA抗體及其抗原結合片段，諸如重鏈可變(VH)區及單鏈抗體片段；及編碼聚核苷酸。在一些實施例中，抗BCMA嵌合受體特異性結合於BCMA。在抗BCMA結合分子當中為人類抗體，包括與參考抗體，諸如與非人類參考抗體競爭結合於BCMA之彼等人類抗體。亦提供表現該等CAR的經基因工程改造之細胞，及其諸如在授受細胞療法中之用途。

Description

對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸
本發明在一些態樣中係關於嵌合抗原受體(CAR)，其含有對B細胞成熟抗原(BCMA)具特異性之抗體部分；及編碼對BCMA具特異性之CAR的聚核苷酸。本發明進一步係關於含有此類BCMA結合受體的經基因工程改造之細胞，及其在授受細胞療法中之用途。
B細胞成熟抗原(BCMA)為在成熟B淋巴球上表現之III型跨膜蛋白。在BCMA結合於其配位體，即TNF家族之B細胞活化子(BAFF)或增殖誘導性配位體(APRIL)時，將促存活細胞信號遞送至B細胞，已發現該遞送為漿細胞存活所需要的。BCMA之表現已與若干疾病有關，包括癌症、自體免疫病症及感染性疾病。歸因於BCMA在各種疾病及病狀(包括癌症)中之作用，BCMA為治療標靶。可獲得各種BCMA結合嵌合抗原受體(CAR)及表現此類CAR之細胞。然而，仍需要經改良之BCMA結合CAR及經工程改造的以表現BCMA-CAR為目標之細胞，諸如用於授受細胞療法中之細胞。本文提供滿足此類需要之實施例。
提供編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其含有編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區，其中在於細胞中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。在一些情況下，間隔子來源於免疫球蛋白。在一些實施例中，間隔子包括鉸鏈區、CH 2及CH 3區之序列。在一些實施例中，鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者全部或部分地來源於IgG4或IgG2。在一些情況下，鉸鏈、CH 2及CH 3來源於IgG4。在一些態樣中，鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且含有來源於IgG4及IgG2之序列。在一些實例中，間隔子含有IgG4/2嵌合鉸鏈、IgG2/4 CH 2及IgG4 CH 3區。在一些實施例中，所編碼之間隔子為或含有(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。在一些實施例中，所編碼之間隔子為或包括SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
在任何實施例中之一些中，間隔子之長度為長度125至300個胺基酸、長度125至250個胺基酸、長度125至230個胺基酸、長度125至200個胺基酸、長度125至180個胺基酸、長度125至150個胺基酸、長度150至300個胺基酸、長度150至250個胺基酸、長度150至230個胺基酸、長度150至200個胺基酸、長度150至180個胺基酸、長度180至300個胺基酸、長度180至250個胺基酸、長度180至230個胺基酸、長度180至200個胺基酸、長度200至300個胺基酸、長度200至250個胺基酸、長度200至230個胺基酸、長度230至300個胺基酸、長度230至250個胺基酸或長度250至300個胺基酸。在一些實施例中，間隔子為至少或至少約或為或為約長度130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、221、222、223、224、225、226、227、228或229個胺基酸，或長度介於前述任一者之間。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，編碼間隔子之核酸包括至少一個經修飾之剪接供體及/或剪接受體(acceptor)位點，該經修飾之剪接供體及/或受體位點含有對應於SEQ ID NO:621中所闡述之序列中所含有之參考剪接供體位點及/或參考剪接受體位點的一或多個修飾。在一些情況下，一或多個核苷酸修飾含有插入、缺失、取代或其組合。在一些情況下，參考剪接受體及/或參考剪接供體位點為典型、非典型或隱蔽之剪接位點。在一些實例中，參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.4、0.5、0.6、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，參考剪接供體位點包括序列aatctaagtacggac (SEQ ID NO:705)、tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)、acaattagtaaggca (SEQ ID NO:707)及/或accacaggtgtatac (SEQ ID NO:708)；且/或參考剪接受體位點包括序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)及/或gggcaacgtgttctcttgcagtgtcatgcacgaagccctgc (SEQ ID NO:743)。在一些實例中，參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。在一些實施例中，參考剪接供體位點含有序列tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)；且/或參考剪接受體位點含有序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，一或多個核苷酸修飾中之至少一者處於參考剪接受體及/或參考剪接供體位點之剪接位點接合處(junction)的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基內。在一些態樣中，一或多個核苷酸修飾為靜默的，及/或產生與SEQ ID NO:621相比簡併之密碼子，及/或不改變所編碼之間隔子的胺基酸序列。在一些實施例中，經修飾之剪接供體位點闡述於agtctaaatacggac (SEQ ID NO:661)、tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)、accatctccaaggcc (SEQ ID NO:663)及/或gccccaggtttacac (SEQ ID NO:664)中；且/或經修飾之剪接受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)、gggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgc (SEQ ID NO:673)及/或aagtttctttctgtattccagactgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:854)中。在一些情況下，經修飾之剪接供體位點闡述於tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)中，且/或經修飾之受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)中。在任何此類實施例中之一些中，間隔子係由SEQ ID NO:622中所闡述之核苷酸序列或其一部分編碼。
提供一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包括編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸為或包括SEQ ID NO:622中所闡述之序列或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
亦提供一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包括編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸包括或主要包括SEQ ID NO:622中所闡述之序列或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
在任一實施例中之一些中，在於細胞中表現聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。在一些實施例中，在於細胞中表現時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現其異質性與自參考聚核苷酸轉錄之mRNA的異質性相比減小，該參考聚核苷酸編碼與該聚核苷酸相同之胺基酸序列，其中該參考聚核苷酸與該聚核苷酸相比的不同之處在於在編碼間隔子之核酸中存在一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點及/或與該聚核苷酸相比包括一或多個核苷酸修飾。在一些情況下，RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。在一些情況下，來自參考聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。在任何此類實施例中之一些中，RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。在任何此類實施例中之一些中，聚核苷酸經密碼子最佳化。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，抗原與疾病或病狀相關聯或在與疾病或病狀相關聯之病灶之環境的細胞中進行表現。在一些情況下，疾病或病狀為癌症。在一些實例中，疾病或病狀為骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。在一些實施例中，抗原為ROR1、B細胞成熟抗原(BCMA)、碳酸酐酶9 (CAIX)、tEGFR、Her2/neu (受體酪胺酸激酶erbB2)、L1-CAM、CD19、CD20、CD22、間皮素、CEA及B型肝炎表面抗原、抗葉酸受體、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮醣蛋白2 (EPG-2)、上皮醣蛋白40 (EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二聚體、EGFR vIII、葉酸結合蛋白(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎兒乙醯膽鹼受體、GD2、GD3、HMW-MAA、IL-22R-α、IL-13R-α2、激酶插入域受體(kdr)、κ輕鏈、Lewis Y、L1細胞黏附分子(L1-CAM)、黑素瘤相關抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、優先表現之黑素瘤抗原(PRAME)、存活素、TAG72、B7-H6、IL-13受體α2 (IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6整合素、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒AchR、NKG2D配位體、CD44v6、雙重抗原、睪丸癌抗原、間皮素、鼠類CMV、黏蛋白1 (MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胚抗原(oncofetal antigen)、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、Her2/neu、雌激素受體、孕酮受體、肝配蛋白B2、CD123、c-Met、GD-2、O-乙醯化GD2 (OGD2)、CE7、威爾姆斯腫瘤1 (WT-1)、週期蛋白、週期蛋白A2、CCL-1、CD138、病原體特異性抗原。在一些情況下，抗原為B細胞成熟抗原(BCMA)。
在任何此類實施例中之一些中，抗原結合域為含有可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。在一些態樣中，VH 區為或包括與SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或VL 區為或包括與SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一些情況下，VH 區為或包括與SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或VL 區為或包括與116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區為或含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或VL 區為或包括選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在一些實施例中，VH 區為或含有選自SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或VL 區為或包括選自SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在一些實施例中，VH 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、294、295,507、532、593、596、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)含有選自SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、594、597、605或612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595、606、613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或VL 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)含有選自SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區為或含有(a)含有選自SEQ ID NO:1、2、3、141、143、144、288、289、507、593、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)含有選自SEQ ID NO:4、5、6、145、147、148、290、291、372、513、594、605或612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:7、8、9、10、149、153、154、155、156、157、292、293、376、517、595、606或613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或VL 區為或含有(a)含有選自SEQ ID NO:26、27、28、30、31、33、34、174、176、177、178、302、303、380、381、382、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)含有選自SEQ ID NO:37、38、39、41、43、44、179、181、182、183、304、305、399、400、401、402、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)含有選自47、48、49、51、52、55、56、185、189、190、191、192、193、194、306、307、415、417、418、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區含有選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：分別含有SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及11之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:140、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及150之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:142、146及151之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及377之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、373及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及378之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、374及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或分別含有SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區含有選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：分別含有SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或分別含有SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區為或包括SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在一些態樣中，VH 區為或包括SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在一些實施例中，VH 區含有分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或VH 區包括分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。在一些實施例中，VH 區為或包括SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VL 區包括選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：分別含有SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:29、40及50之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:32、42及53之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:35、45及57之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:36、46及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及184之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及186之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及187之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:383、403及419之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:384、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:385、180及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:386、404及420之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:387、405及422之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:388、406及423之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:388、407及424之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:389、408及425之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:390、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:391、409及426之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:392、40及427之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:394、39及429之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:395、411及430之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:396、412及431之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:396、412及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:397、413及432之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:398、414及433之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或分別含有SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VL 區包括選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：分別含有SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或分別含有SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在任何此類實施例中之一些中，VL 區為或包括SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在一些態樣中，VL 區為或含有SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VL 區含有分別包括SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VL 區含有分別包括SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3在一些情況下，VL 區為或包括SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。
在任何實施例中之一些中，VH 區為或包含與SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774或814-832中之任一者之VH 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且VL 區為或包含與SEQ ID NO:618、116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777或833-849中之任一者之VL 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在任何實施例中之一些中，VH 區為或包含選自SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且VL 區為或包含選自SEQ ID NO:618、116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在任何實施例中之一些中，VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:593、611、1-3、140-144、288、289、294、295、507、532、596或604中之任一者之序列的CDR-H1；(b)包含選自SEQ ID NO:594、612、4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、597或605中之任一者之序列的CDR-H2；及(c)包含選自SEQ ID NO:595、613、7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517或606中之任一者之序列的CDR-H3；且VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:601、614、26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589或607中之任一者之序列的CDR-L1；(b)包含選自SEQ ID NO:602、615、37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590或608中之任一者之序列的CDR-L2；及(c)包含選自SEQ ID NO:603、47-58、184-194、306、307、415-427、429-433或591中之任一者之序列的CDR-L3。
在任何此類實施例中之一些中，VH 區及VL 區包括SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及119中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及119具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及122中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及122具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及123中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及123具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:114及126中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:114及126具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及127中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及127具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:247及257中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:247及257具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:249及259中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:249及259具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:250及260中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:250及260具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:251及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:251及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:523及539中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:523及539具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及540中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及540具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:524及541中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及541具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:525及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:525及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:526及542中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:526及542具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:527及543中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:527及543具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:528及544中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及544具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:529及545中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:529及545具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:528及546中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及546具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及547中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及547具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及548中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及548具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:530及549中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:530及549具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:531及550中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:531及550具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及552中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及552具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及553中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及553具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:533及554中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:533及554具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及555中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及555具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:524及556中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及556具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及557中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及557具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:772及775中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:772及775具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:773及776中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:773及776具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:774及777中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:774及777具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:815及833中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:815及833具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:816及834中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:816及834具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:817及835中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:817及835具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:818及836中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:818及836具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:819及837中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:819及837具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:820及838中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:820及838具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:821及839中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:821及839具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:822及840中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:822及840具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:823及841中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:823及841具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:824及842中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:824及842具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:825及843中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:825及843具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:826及844中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:826及844具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:827及845中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:827及845具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:828及846中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:828及846具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:829及847中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:829及847具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:830及847中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:830及847具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:831及848中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:831及848具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:832及849中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:832及849具有至少90%一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，由聚核苷酸編碼之VH 區及VL 區包括SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:772及775中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:772及775具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:773及776中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:773及776具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:774及777中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:774及777具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:815及833中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:815及833具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:816及834中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:816及834具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:817及835中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:817及835具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:818及836中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:818及836具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:819及837中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:819及837具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:820及838中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:820及838具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:821及839中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:821及839具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:822及840中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:822及840具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:823及841中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:823及841具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:824及842中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:824及842具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:825及843中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:825及843具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:826及844中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:826及844具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:827及845中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:827及845具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:828及846中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:828及846具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:829及847中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:829及847具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:830及847中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:830及847具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:831及848中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:831及848具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:832及849中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:832及849具有至少90%一致性之胺基酸序列。
在任何實施例中之一些中，VH 區為或包含SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774或814-832中之任一者的序列；且VL 區為或包含SEQ ID NO:618、116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777或833-849中之任一者的序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，片段包括scFv。在一些實施例中，VH 區及VL 區由柔性連接子接合。在一些實施例中，scFv包括含有胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。在一些實施例中，VH 區處於VL 區之胺基端。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，抗原結合域包括選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一些實施例中，抗原結合域包括選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸包括(a) SEQ ID NO:330-352、647、648、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:330-352、647、648、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。在一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸包括(a) SEQ ID NO:352、647、648、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:352、647、648、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。在一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸經密碼子最佳化。在一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸包括SEQ ID NO:440、460、715、717或719中之任一者中所闡述的核苷酸序列。在一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸包括SEQ ID NO:460中所闡述之核苷酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，VH 區處於VL 區之羧基端。在一些實施例中，scFv包括SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
提供嵌合抗原受體，其包含：(1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含：(i)包含與SEQ ID NO:617之VH 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈(VH )；及(ii)包含與SEQ ID NO:618中之任一者之VL 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈(VL )區；(2) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子或其中編碼該間隔子之核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列；(3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及(4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。亦提供編碼此類嵌合抗原受體之聚核苷酸。在任何實施例中之一些中，VH 區包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且VL 區包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
提供嵌合抗原受體，其包含：(1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含：包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的可變重鏈(VH )區；及包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的可變輕鏈(VL )區；或VH 區包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且VL 區包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；(2) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子或其中編碼該間隔子之核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列；(3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及(4)細胞內信號傳導區，其包含人類CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及人類4-1BB或人類CD28之細胞內信號傳導域。亦提供編碼此類嵌合抗原受體之聚核苷酸。在任何實施例中之一些中，細胞外抗原結合域包含SEQ ID NO:617之VH 區序列及SEQ ID NO:618之VL 區序列。
在一些實施例中，受體包括與本文(包括在前述實施例中之任一者中)所描述的抗體及片段中之任一者或具有所提供VH/VL或CDR序列組合之抗體結合於BCMA上相同或基本上相同之抗原決定基或競爭結合於BCMA的抗原結合域。在一些實施例中，結合域識別包含BCMA多肽內一或多個胺基酸序列之一部分的抗原決定基。在一些態樣中，此類一或多個胺基酸序列為或包含：MLMAG (SEQ ID NO:640)、YFDSL (SEQ ID NO:779)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)。在一些態樣中，此類一或多個胺基酸序列為或包含：MLMAG (SEQ ID NO:640)、YFDSLL (SEQ ID NO:641)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)。在一些態樣中，此類一或多個胺基酸序列為或包含：MLMAG (SEQ ID NO:640)、QNEYFDSLL (SEQ ID NO:780)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)。在一些態樣中，此類一或多個胺基酸序列為或包含：QNEYF (SEQ ID NO:637)、CIPCQL (SEQ ID NO:638)及CQRYC (SEQ ID NO:639)。在一些態樣中，此類一或多個胺基酸序列為或包含：CSQNEYF (闡述於SEQ ID NO:410中)及LLHACIPCQLR (闡述於SEQ ID NO:428中)。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，細胞內信號傳導區包括活化性細胞質信號傳導域。在一些實施例中，活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包括基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。在一些實施例中，活化性細胞質信號傳導域為或包括CD3-ζ (CD3ζ)鏈之ζ鏈的細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。在一些實施例中，活化性細胞質域為人類的或來源於人類蛋白質。在一些實施例中，活化性細胞質域為或包括SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，編碼活化性細胞質域之核酸為或包括SEQ ID NO:627中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。在其他實施例中，編碼活化性細胞質信號傳導域之核酸為或包括SEQ ID NO:652中所闡述之序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，細胞內信號傳導區進一步包括共刺激信號傳導區。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括4-1BB之細胞內信號傳導域。在一些實施例中，共刺激信號傳導區為人類的或來源於人類蛋白質。在其他實施例中，共刺激信號傳導區為或包括SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，編碼共刺激區之核酸為或包括SEQ ID NO:625中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。在一些實施例中，編碼共刺激信號傳導區之核酸包括SEQ ID NO:681中所闡述之序列。在一些實施例中，共刺激信號傳導區處於跨膜域與細胞內信號傳導區之間。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD4、CD28或CD8之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD28之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為人類的或來源於人類蛋白質。在其他實施例中，跨膜域為或包括SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，編碼跨膜域之核酸為或包括SEQ ID NO:623中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。在一些實施例中，編碼跨膜域之核酸包括SEQ ID NO:688中所闡述之序列。在本文所描述之任一聚核苷酸的一些實施例中，所編碼之嵌合抗原受體自其N端至C端依序包括：抗原結合域、間隔子、跨膜域及細胞內信號傳導域。
在任一實施例中之一些中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述的序列或與SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。在任一實施例中之一些中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述的序列或與SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。在任一實施例中之一些中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列或與其展現至少或至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。在任一實施例中之一些中，聚核苷酸包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
在一些實施例中，聚核苷酸進一步編碼截短之受體。
亦提供包含本文所描述之任一聚核苷酸的載體。在任何實施例中之一些中，載體為病毒載體。在任何實施例中之一些中，病毒載體為反轉錄病毒載體。在任何實施例中之一些中，病毒載體為慢病毒載體。
在一些態樣中提供由本文所描述之任一實施例之聚核苷酸編碼的嵌合抗原受體。在一些實施例中，嵌合抗原受體包括：(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，間隔子來源於免疫球蛋白。在一些實施例中，間隔子包括鉸鏈區、CH 2及CH 3區之序列。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者全部或部分地來源於IgG4或IgG2。在一些實施例中，鉸鏈、CH 2及CH 3來源於IgG4。在一些實施例中，鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且包括來源於IgG4及IgG2之序列。在一些實施例中，間隔子含有IgG4/2嵌合鉸鏈、IgG2/4 CH 2及IgG4 CH 3區。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，間隔子為或包括(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。在一些實施例中，所編碼之間隔子為或包括SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
在其他態樣中提供嵌合抗原受體，其包括(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，抗原結合域為含有可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括與SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或VL 區為或包括與SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括與SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或VL 區為或包括與SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或VL 區為或包括選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括選自SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或VL 區為或包括選自SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、294、295、507、532、593、596、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)含有選自SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、594、597、605、612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595、606、613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或VL 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)含有選自SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:1、2、3、141、143、144、288、289、507、593、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)含有選自SEQ ID NO:4、5、6、145、147、148、290、291、372、513、594、605或612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:7、8、9、10、149、153、154、155、156、157、292、293、376、517、595、606或613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或VL 區為或包括(a)含有選自SEQ ID NO:26、27、28、30、31、33、34、174、176、177、178、302、303、380、381、382、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)含有選自SEQ ID NO:37、38、39、41、43、44、179、181、182、183、304、305、399、400、401、402、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)含有選自SEQ ID NO:47、48、49、51、52、55、56、185、189、190、191、192、193、194、306、307、415、417、418、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區包括選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：分別含有SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及11之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:140、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及150之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:142、146及151之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及377之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、373及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及378之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、374及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或分別含有SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區包括選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：分別含有SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別含有SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或分別含有SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區為或包括SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在一些實施例中，VH 區包括分別含有SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或VH 區包括分別含有SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。在一些實施例中，VH 區為或包括SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區包括選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：分別含有SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:29、40及50之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:32、42及53之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:35、45及57之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:36、46及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及184之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及186之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及187之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:383、403及419之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:384、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:385、180及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:386、404及420之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:387、405及422之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:388、406及423之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:388、407及424之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:389、408及425之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:390、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:391、409及426之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:392、40及427之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:394、39及429之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:395、411及430之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:396、412及431之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:396、412及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:397、413及432之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:398、414及433之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或分別含有SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區包括選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：分別含有SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別含有SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或分別含有SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區為或包括SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區為或包括SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區包括分別含有SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VL 區包括分別含有SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VL 區為或包括SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及119中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及119具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及122中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及122具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及123中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及123具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:114及126中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:114及126具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及127中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及127具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:247及257中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:247及257具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:249及259中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:249及259具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:250及260中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:250及260具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:251及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:251及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:523及539中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:523及539具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及540中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及540具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:524及541中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及541具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:525及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:525及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:526及542中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:526及542具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:527及543中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:527及543具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:528及544中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及544具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:529及545中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:529及545具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:528及546中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及546具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及547中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及547具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及548中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及548具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:530及549中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:530及549具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:531及550中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:531及550具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及552中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及552具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及553中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及553具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:533及554中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:533及554具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及555中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及555具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:524及556中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及556具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及557中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及557具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區含有SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，片段包括scFv。在一些實施例中，VH 區及VL 區由柔性連接子接合。在一些實施例中，scFv包括含有胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。在一些實施例中，VH 區處於VL 區之胺基端。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，抗原結合域包括選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一些實施例中，抗原結合域包括選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，VH 區處於VL 區之羧基端。在一些實施例中，scFv包括SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，細胞內信號傳導區包括活化性細胞質信號傳導域。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包括基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。在一些實施例中，活化性細胞質信號傳導域為或包括CD3-ζ (CD3ζ)鏈之ζ鏈的細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。在一些實施例中，活化性細胞質域為人類的或來源於人類蛋白質。在一些實施例中，活化性細胞質域為或包括SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，細胞內信號傳導區進一步包括共刺激信號傳導區。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括4-1BB之細胞內信號傳導域。在一些實施例中，共刺激信號傳導區為人類的或來源於人類蛋白質。在一些實施例中，共刺激信號傳導區為或包括SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。在一些實施例中，共刺激信號傳導區處於跨膜域與細胞內信號傳導區之間。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD4、CD28或CD8之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD28之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為人類的或來源於人類蛋白質。在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，跨膜域為或包括SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
在本文所描述之任一嵌合抗原受體的一些實施例中，所編碼之嵌合抗原受體自其N端至C端依序包括：抗原結合域、間隔子、跨膜域及細胞內信號傳導域。
在任一實施例中之一些中，嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列或與SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。在任一實施例中之一些中，嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列或與SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。在任一實施例中之一些中，嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列或與其展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。在任一實施例中之一些中，嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列的聚核苷酸序列編碼。
在一些實施例中提供經工程改造之細胞，其含有本文所描述之任一實施例的聚核苷酸。在本文所描述之任一經工程改造之細胞的一些實施例中，該經工程改造之細胞含有本文所描述之任一實施例的嵌合抗原受體。
在本文所描述之任一經工程改造之細胞的一些實施例中，該細胞為免疫細胞。在一些實施例中，免疫細胞為獲自個體之初代細胞。在一些實施例中，免疫細胞為NK細胞或T細胞。在一些實施例中，免疫細胞為T細胞，且該T細胞為CD4+及/或CD8+ T細胞。
在本文所描述之任一經工程改造之細胞的一些實施例中，細胞含有編碼嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。在一些實施例中，細胞含有編碼嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現其異質性與處於編碼參考嵌合抗原受體之細胞中之經轉錄mRNA的異質性相比減小，該參考嵌合抗原受體含有與該嵌合抗原受體相同之胺基酸序列，但由在編碼該等CAR之聚核苷酸中含有一或多個核苷酸差異的不同聚核苷酸序列編碼，且/或其中該參考嵌合抗原受體係由在編碼間隔子之核酸中含有一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點的聚核苷酸編碼。在一些實施例中，RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。在一些實施例中，編碼參考CAR之細胞包括編碼參考CAR之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。在一些實施例中，RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。
在本文所描述之任一經工程改造之細胞的一些實施例中，在複數個經工程改造之細胞當中，在該複數個細胞中少於或少於約10%、9%、8%、7%、5%、4%、3%、2%或1%之細胞含有展現滋養型(tonic)信號傳導及/或與抗原無關之活性或信號傳導的嵌合抗原受體。
亦提供包含本文所提供之任一經工程改造之細胞的組合物。在任何此類實施例中之一些中，組合物包含CD4+及CD8+ T細胞，且CD4+與CD8+ T細胞之比率為自或自約1:3至3:1，視情況，1:2至2:1。
本文亦提供組合物，其含有本文所描述之任一實施例的聚核苷酸、本文所描述之任一實施例的嵌合抗原受體或本文所描述之任一實施例的經工程改造之細胞。在一些實施例中，組合物進一步含有醫藥學上可接受之賦形劑。在任一此等實施例中之一些中，組合物為無菌的。
在其他態樣中提供治療方法，其涉及向患有疾病或病症之個體投與本文所描述之任一實施例的經工程改造之細胞或本文所描述之任一實施例的組合物。
在本文所描述之任一方法的一些實施例中，疾病或病症與B細胞成熟抗原(BCMA)之表現相關聯。在一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為B細胞相關病症。在一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為自體免疫疾病或病症。在一些實施例中，自體免疫疾病或病症為全身性紅斑性狼瘡症(SLE)、狼瘡性腎炎、發炎性腸病、類風濕性關節炎、ANCA相關脈管炎、特發性血小板減少性紫癜症(ITP)、自體免疫血小板減少症、卻格司氏病(Chagas' disease)、格雷氏病(Grave's disease)、韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)、結節性多動脈炎、休格連氏症候群(Sjogren's syndrome)、尋常天疱瘡、硬皮病、多發性硬化症、牛皮癬、IgA腎病變、IgM多發性神經病變、脈管炎、糖尿病、雷諾氏症候群(Reynaud's syndrome)、抗磷脂症候群、古巴士德氏疾病(Goodpasture's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、自體免疫溶血性貧血、重症肌無力或進行性絲球體腎炎。
在本文所描述之任一方法的一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為癌症。在一些實施例中，癌症為BCMA表現性癌症。在一些實施例中，癌症為B細胞惡性病。在一些實施例中，癌症為淋巴瘤、白血病或漿細胞惡性病。在一些實施例中，癌症為淋巴瘤，且該淋巴瘤為伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)、濾泡性淋巴瘤、小無裂細胞淋巴瘤、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、邊緣區淋巴瘤、脾淋巴瘤、結節單核細胞樣B細胞淋巴瘤、免疫母細胞淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、瀰漫性混合細胞淋巴瘤、肺部B細胞血管中心性淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL)或套細胞淋巴瘤(MCL)。在一些實施例中，癌症為白血病，且該白血病為慢性淋巴球性白血病(CLL)、漿細胞白血病或急性淋巴球性白血病(ALL)。在一些實施例中，癌症為漿細胞惡性病，且該漿細胞惡性病為多發性骨髓瘤(MM)或漿細胞瘤。在一些實施例中，癌症為多發性骨髓瘤(MM)。
本文亦提供測定轉殖基因之經轉錄核酸之異質性的方法，該方法包含：a)使用至少一種5′及3′引子對使經轉錄核酸擴增，其中至少一對包含與經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與經轉錄核酸之3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子，以產生一或多種擴增產物；及b)偵測該等擴增產物，其中存在來自至少一種5′及3′引子對的兩種或超過兩種擴增產物指示該等擴增產物中之異質性。
在該方法之一些實施例中，在b)中所偵測之差異為擴增之轉錄本的不同長度。在一些實施例中，在b)中之差異為在擴增之轉錄本之層析概況中的差異。
在一些實施例中，擴增產物中之差異係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或層析來加以測定。在一些實施例中，5′引子對自經轉錄核酸之啟動子區轉錄的序列具特異性。在一些實施例中，經轉錄核酸係使用對聚核苷酸之胺基酸編碼序列內之序列及/或經轉錄前驅mRNA上之3′非轉譯區具特異性的3′引子來加以擴增。在一些實施例中，3引子對經轉錄前驅mRNA之3′非轉譯區的聚腺苷酸化序列或增強子區具特異性。
在一些實施例中，步驟a)係藉由單個擴增反應使用單個5′及3′引子對來實現，該引子對包含與經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子。在一些實施例中，步驟a)係藉由平行或後續擴增反應使用第一5′及3′引子對、第二5′及3′引子對及視情況另外之5′及3′引子對來實現，其中：該第一5′及3′引子對含有與經轉錄核酸之5′ UTR內之核酸序列互補的5′引子及與經轉錄核酸之3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子；該第二5′及3′引子對含有其序列與核酸轉錄本之經轉譯序列之一部分互補的5′引子及其序列與轉錄本之3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子；且該視情況另外之5′及3′引子對各自含有與轉錄本之經轉譯區內之序列互補的序列。在一些實施例中，平行或後續擴增反應使轉錄本之重疊部分擴增。
在一些實施例中，擴增產物預測為長度約1.5千鹼基、2千鹼基、2.5千鹼基、3千鹼基、3.5千鹼基、4千鹼基、4.5千鹼基、5千鹼基、5.5千鹼基、6千鹼基、7千鹼基或8千鹼基。
在任何實施例中之一些中，偵測為具有異質性之經轉錄核酸鑑別為用於一或多個剪接位點之移除的轉殖基因候選者。在任何實施例中之一些中，轉殖基因候選者之經轉錄核酸在於細胞中表現時展現至少或至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或超過75%異質性。
亦提供減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法，該方法包含：a)根據本文所提供的任一用於測定經轉錄核酸之異質性的方法來鑑別用於剪接位點移除之轉殖基因候選者；b)鑑別一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點；及c)對在b)中所鑑別之一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點處或附近的核酸序列進行修飾，藉此產生經修飾之聚核苷酸。
在任何此類實施例中之一些中，該方法亦涉及d)如同步驟a)中，評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。在任何此類實施例中之一些中，該方法亦涉及e)重複步驟b)-d)，直至步驟d)中之轉錄本的異質性與如在步驟a)中所測定之轉錄本異質性相比減小為止。
在任何此類實施例中之一些中，一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點展現剪接事件之得分為約或至少約0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95或1.0，且/或該/該等位點涉及剪接事件之機率預測為至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
在任何此類實施例中之一些中，剪接供體位點及剪接受體位點獨立地加以鑑別。在任何此類實施例中之一些中，剪接受體及/或供體位點為典型、非典型及/或隱蔽之剪接受體及/或供體位點。
在任何此類實施例中之一些中，轉殖基因為嵌合抗原受體或嵌合抗原受體之一部分。在任何此類實施例中之一些中，CAR多肽包含抗原結合域、間隔子區、跨膜區及細胞內信號傳導區，該抗原結合域包含有包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )之抗體片段，視情況，單鏈抗體片段(scFv)。
在任何此類實施例中之一些中，經修飾之聚核苷酸不在所編碼CAR多肽之抗原結合域的編碼序列內經修飾。在任何此類實施例中之一些中，在聚核苷酸之修飾後，轉殖基因的所編碼之胺基酸序列不變。在任何此類實施例中之一些中，自經修飾之聚核苷酸轉錄的RNA展現在於細胞中表現未經修飾之聚核苷酸時的至少或至少約70%、75%、80%、85%、90%或95%同質性。
在任何此類實施例中之一些中，細胞為人類細胞。在任何此類實施例中之一些中，細胞為T細胞。
在任何此類實施例中之一些中，該方法為電腦實施之方法，且其中一或多個步驟a)-c)在包含一或多個處理器及記憶體之電子裝置處進行。
亦提供包含處理器及記憶體之電腦系統，該記憶體包含可操作以使處理器進行減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法中之任何一或多個步驟的指令。
相關申請案之交叉參考
本申請案主張以下臨時申請案之優先權：2017年11月1日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸(CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS SPECIFIC FOR B-CELL MATURATION ANTIGEN AND ENCODING POLYNUCLEOTIDES)」之美國臨時申請案62/580,439、2017年11月1日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/580,445號、2017年11月7日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/582,932號、2017年11月7日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/582,938號、2017年12月8日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/596,765號、2017年12月8日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/596,763號、2018年1月8日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/614,960號、2018年1月8日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/614,963號、2018年5月1日提交之名稱為「對B細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸」之美國臨時申請案第62/665,442號及2018年5月1日提交之名稱為「評定重組抗原受體之活性的方法(METHOD OF ASSESSING ACTIVITY OF RECOMBINANT ANTIGEN RECEPTORS)」之美國臨時申請案第62/665,447號，其內容以全文引用之方式併入。
序列表以引用之方式併入
本申請案與電子格式之序列表一起提交。序列表以2018年10月30日產生的名稱為735042009942SeqList.txt之文件形式提供，其大小為593千位元組。電子格式之序列表中的資訊以全文引用之方式併入。
在所提供之實施例當中為組合物、製品、化合物、方法及用途，包括靶向或針對於BCMA及BCMA表現性細胞及疾病之彼等組合物、製品、化合物、方法及用途。觀測到BCMA在某些疾病及病狀(諸如惡性病)或其組織或細胞上，例如在諸如來自所有復發性或新診斷之骨髓瘤患者的惡性漿細胞上表現，例如異質地表現，而在正常組織上表現極少。在所提供之實施例當中為適用於治療此類疾病及病狀及/或適用於靶向此類細胞類型的途徑，包括編碼BCMA結合受體(包括嵌合抗原受體(CAR))之核酸分子，及所編碼之受體(諸如所編碼之CAR)，及包含其之組合物及製品。受體一般可含有對BCMA具特異性之抗體(包括抗原結合抗體片段，諸如重鏈可變(VH )區、單域抗體片段及單鏈片段，包括scFv)。亦提供表現此類BCMA結合受體(例如抗BCMA CAR)及/或含有編碼此類受體之核酸的細胞(諸如經工程改造或重組之細胞)，及含有此類細胞之組合物及製品及治療劑。亦提供對核酸序列，例如對編碼重組BCMA結合受體之核酸序列進行評估、最佳化、製造及使用的方法。亦提供製造及使用(諸如在治療或改善BCMA表現性疾病及病狀中使用)表現或含有重組BCMA結合受體及編碼重組BCMA結合受體之聚核苷酸的細胞(例如經工程改造該等細胞)或含有此類細胞之組合物的方法。
I. BCMA結合受體及編碼聚核苷酸
在一些態樣中提供BCMA結合劑，諸如結合或識別BCMA分子之細胞表面蛋白質(諸如重組受體或嵌合抗原受體)，及編碼BCMA結合細胞表面蛋白質(諸如重組受體(例如CAR))之聚核苷酸，及表現此類受體之細胞。BCMA結合細胞表面蛋白質一般含有特異性識別(諸如特異性結合於) BCMA (諸如BCMA蛋白質，諸如人類BCMA蛋白質)的抗體(例如抗原結合抗體片段)及/或其他結合肽。在一些態樣中，藥劑結合於BCMA之細胞外部分。
在一些實施例中，聚核苷酸經最佳化，或含有經設計以用於最佳化(諸如用於密碼子使用)之某些特徵，以減小RNA異質性及/或調節所編碼之受體的表現(諸如表面表現) (例如增加其表現或使其表現在細胞產品批次之間更一致)。在一些實施例中，編碼BCMA結合細胞表面蛋白質之聚核苷酸與參考聚核苷酸相比經修飾，以便移除隱蔽/隱藏剪接位點，以減小RNA異質性。在一些實施例中，編碼BCMA結合細胞表面蛋白質之聚核苷酸經密碼子最佳化，諸如用於在哺乳動物(例如人類)細胞中，諸如在人類T細胞中表現。在一些態樣中，當在細胞中表現時，經修飾之聚核苷酸引起表現(例如表面表現)量改良，例如增加或更均勻或更一致。此類聚核苷酸可在用於產生表現所編碼之BCMA結合細胞表面蛋白質的經工程改造之細胞的構築體中進行使用。因此，亦提供表現由本文所提供之聚核苷酸編碼之重組受體的細胞及其在授受細胞療法中之用途，諸如治療與BCMA表現相關聯之疾病及病症。
在所提供之聚核苷酸當中為編碼特異性識別(諸如特異性結合) BCMA之重組受體(諸如抗原受體)的彼等聚核苷酸。在一些態樣中，亦提供所編碼之受體，諸如含有BCMA結合多肽之彼等受體，及其組合物及製品及用途。
在BCMA結合多肽當中為抗體，諸如單鏈抗體(例如抗原結合抗體片段)，或其部分。在一些實例中，重組受體為嵌合抗原受體，諸如含有抗BCMA抗體或其抗原結合片段之彼等嵌合抗原受體。在任一實施例中，所提供之CAR中的特異性識別抗原(例如BCMA)之抗體或抗原結合片段特異性結合於該抗原。所提供之聚核苷酸可併入至構築體中，諸如脫氧核糖核酸(DNA)或RNA構築體中，諸如可引入至用於表現所編碼之重組BCMA結合受體的細胞中的彼等構築體中。
在一些情況下，編碼BCMA結合受體之聚核苷酸含有編碼信號肽之信號序列，在一些情況下，該信號序列在編碼BCMA結合受體之核酸序列的上游進行編碼或接合在編碼抗原結合域之核酸序列的5'端處。在一些情況下，含有編碼BCMA結合受體(例如嵌合抗原受體(CAR))之核酸序列的聚核苷酸含有編碼信號肽之信號序列。在一些態樣中，信號序列可編碼來源於原生多肽之信號肽。在其他態樣中，信號序列可編碼異源或非原生信號肽。在一些態樣中，非限制性例示性信號肽包括SEQ ID NO:620中所闡述或由SEQ ID NO:619或682-685中所闡述之核苷酸序列編碼的IgGκ鏈信號肽；SEQ ID NO:851中所闡述及由SEQ ID NO:850中所闡述之核苷酸序列編碼的GMCSFRα鏈；SEQ ID NO:852中所闡述之CD8α信號肽；或SEQ ID NO:853中所闡述之CD33信號肽。在一些情況下，編碼BCMA結合受體之聚核苷酸可含有編碼另外之分子(諸如替代性標記物或其他標記物)的核酸序列，或可含有另外之組分，諸如啟動子、調控元件及/或多順反子元件。在一些實施例中，編碼BCMA結合受體之核酸序列可操作地連接於任一另外之組分。
A. 所編碼之重組BCMA結合受體的組分
所提供之BCMA結合受體一般含有細胞外結合分子及細胞內信號傳導域。在所提供之結合分子當中為含有抗體之多肽，包括單鏈細胞表面蛋白質，例如含有此類抗體之重組受體(諸如嵌合抗原受體)。
在所提供之結合分子(例如BCMA結合分子)當中為包括所提供之抗體或其片段(例如BCMA結合片段)中之一者的單鏈細胞表面蛋白質，諸如重組受體(例如抗原受體)。重組受體包括特異性結合於或特異性識別BCMA之抗原受體，諸如含有所提供之抗BCMA抗體的抗原受體，例如抗原結合片段。在抗原受體當中為功能性非TCR抗原受體，諸如嵌合抗原受體(CAR)。亦提供表現重組受體之細胞及其用於授受細胞療法中之用途，諸如治療與BCMA表現相關聯之疾病及病症。
例示性抗原受體(包括CAR)及用於對此類抗原受體進行工程改造及將其引入至細胞中之方法包括例如國際專利申請公開案第WO200014257號、第WO2013126726號、第WO2012/129514號、第WO2014031687號、第WO2013166321號、第WO2013071154號、第WO2013123061號，美國專利申請公開案第US2002131960號、第US2013287748號、第US20130149337號，美國專利第6,451,995號、第7,446,190號、第8,252,592號、第8,339,645號、第8,398,282號、第7,446,179號、第6,410,319號、第7,070,995號、第7,265,209號、第7,354,762號、第7,446,191號、第8,324,353號及第8,479,118號，以及歐洲專利申請案第EP2537416號中所描述之彼等內容，及/或由Sadelain等人，Cancer Discov. 2013年4月; 3(4): 388-398；Davila等人 (2013) PLoS ONE 8(4): e61338；Turtle等人，Curr. Opin. Immunol., 2012年10月; 24(5): 633-39；Wu等人，Cancer, 2012年3月 18(2): 160-75所描述之彼等內容。在一些態樣中，抗原受體包括如美國專利第7,446,190號中所描述之CAR及國際專利申請公開案第WO2014055668號中所描述之彼等抗原受體。例示性CAR包括如任一前述公開案(諸如WO2014031687、US 8,339,645、US 7,446,179、US 2013/0149337、US 7,446,190及US 8,389,282)中所揭示之CAR，且其中抗原結合部分(例如scFv)經如本文所提供之抗體或其抗原結合片段置換。
在一些實施例中，所提供之CAR具有選自SEQ ID NO:757-762當中之胺基酸序列，或與SEQ ID NO 757-762中之任一者中所闡述的胺基酸序列展現至少或約至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性。在一些實施例中，所提供之CAR係由聚核苷酸編碼，諸如具有SEQ ID NO 751-756中之任一者中所闡述之核酸序列或與SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之核酸序列展現至少或至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸。
在一些實施例中，所提供之CAR係由聚核苷酸編碼，諸如具有SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之核酸序列或與SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之核酸序列展現至少或至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸。
在一些實施例中，所提供之CAR係由聚核苷酸編碼，諸如具有SEQ ID NO:755中所闡述之核酸序列或與其展現至少或至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸。在一些實施例中，所提供之CAR係由聚核苷酸編碼，諸如具有SEQ ID NO:755中所闡述之核酸序列的聚核苷酸。
在一些實施例中，編碼抗原結合域之核酸包含(a) SEQ ID NO:648、330-352、647、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:648、330-352、647、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。
1. 抗原結合域
在嵌合受體當中為嵌合抗原受體(CAR)。嵌合受體(諸如CAR)一般包括細胞外抗原結合域，該細胞外抗原結合域包括所提供之抗BCMA抗體中之一者、為所提供之抗BCMA抗體中之一者、或包含於所提供之抗BCMA抗體中之一者內或其包含所提供之抗BCMA抗體中之一者。因此，嵌合受體(例如CAR)在其細胞外部分中通常包括一或多個BCMA結合分子，諸如一或多個抗原結合片段、結合域或結合部分，或一或多個抗體可變區及/或抗體分子，諸如本文所描述之彼等分子。
本文中，術語「抗體」係在最廣泛意義上使用且包括多株及單株抗體，包括完整抗體及功能性(抗原結合)抗體片段，包括抗原結合片段(Fab)、F(ab')2 片段、Fab'片段、Fv片段、重組IgG (rIgG)片段、能夠特異性結合抗原之可變重鏈(VH )區、單鏈抗體片段，包括單鏈可變片段(scFv)及單域抗體(例如sdAb、sdFv、奈米抗體)片段。該術語涵蓋免疫球蛋白的經基因工程改造及/或以其他方式修飾之形式，諸如胞內抗體、肽體、嵌合抗體、完全人類抗體、人類化抗體，及異結合抗體、多特異性(例如雙特異性或三特異性)抗體、雙功能抗體、三功能抗體及四功能抗體、串聯二-scFv、串聯三-scFv。除非另外陳述，否則術語「抗體」應理解為涵蓋其功能性抗體片段，在本文中亦稱為「抗原結合片段」。該術語亦涵蓋完整或全長抗體，包括任何類別或子類之抗體，包括IgG及其子類、IgM、IgE、IgA及IgD。
與「高變區」或「HVR」同義之術語「互補決定區」及「CDR」在此項技術中已知係指抗體可變區內之非連續胺基酸序列，其賦予抗原特異性及/或結合親和力。一般而言，各重鏈可變區中存在三個CDR (CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)，且各輕鏈可變區中存在三個CDR (CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3)。「構架區」及「FR」在此項技術中已知係指重鏈及輕鏈之可變區的非CDR部分。一般而言，各全長重鏈可變區中存在四個FR (FR-H1、FR-H2、FR-H3及FR-H4)，且各全長輕鏈可變區中存在四個FR (FR-L1、FR-L2、FR-L3及FR-L4)。
既定CDR或FR之精確胺基酸序列邊界可使用多種熟知方案中之任一者來容易地加以確定，包括由以下所描述之彼等方案：Kabat等人 (1991), 「Sequences of Proteins of Immunological Interest」, 第5版公共衛生署(Public Health Service), 美國國家衛生研究院(National Institutes of Health), Bethesda, MD (「Kabat」編號方案)；Al-Lazikani等人，(1997) JMB 273,927-948 (「Chothia」編號方案)；MacCallum等人，J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), 「Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography」, J. Mol. Biol. 262, 732-745. (「接觸(Contact)」編號方案)；Lefranc MP等人，「IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains」, Dev Comp Immunol, 2003年1月;27(1):55-77 (「IMGT」編號方案)；Honegger A及Plückthun A, 「Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool」, J Mol Biol, 2001年6月8日;309(3):657-70 (「Aho」編號方案)；及Martin等人，「Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm」, PNAS, 1989, 86(23):9268-9272。
既定CDR或FR之邊界可視用於鑑別之方案而變化。舉例而言，Kabat方案係基於結構比對，而Chothia方案係基於結構資訊。Kabat及Chothia方案兩者之編號均係基於最共同抗體區序列長度，其中在一些抗體中出現由插入字母(例如「30a」)表示之插入及缺失。兩種方案使得某些插入及缺失(「插入缺失(indel)」)位於不同位置，產生不同編號。接觸方案係基於對複雜晶體結構之分析，且在多個方面與Chothia編號方案類似。AbM方案為基於由Oxford Molecular之AbM抗體模型化軟體使用之方案的介於Kabat與Chothia定義之間的折衷。
下表 1 列出分別如藉由Kabat、Chothia、AbM及接觸方案所鑑別的CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3及CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3之例示性位置邊界。對於CDR-H1，殘基編號使用Kabat及Chothia編號方案兩者來進行列出。FR位於CDR之間，舉例而言，其中FR-L1位於CDR-L1之前，FR-L2位於CDR-L1與CDR-L2之間，FR-L3位於CDR-L2與CDR-L3之間等等。應注意，因為所示Kabat編號方案使得插入位於H35A及H35B處，所以視環長度而定，Chothia CDR-H1環之末端在使用所示Kabat編號規約進行編號時在H32與H34之間變化。
因此，除非另外指定，否則既定抗體或其區(諸如其可變區)的「CDR」或「互補決定區」或個別指定之CDR (例如CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)應理解為涵蓋如藉由任一前述方案或其他已知方案所定義之互補決定區(或具體互補決定區)。舉例而言，在陳述特定CDR (例如CDR-H3)含有既定VH 或VL 區胺基酸序列中相應CDR之胺基酸序列的情況下，應理解，此類CDR具有如藉由任一前述方案或其他已知方案所定義的可變區內相應CDR (例如CDR-H3)之序列。在一些實施例中，指定具體CDR序列。所提供之抗體的例示性CDR序列使用各種編號方案來加以描述，但應理解，所提供之抗體可包括如根據任一其他前述編號方案或熟習此項技術者已知之其他編號方案所描述的CDR。
同樣，除非另外指定，否則既定抗體或其區(諸如其可變區)的FR或個別指定之FR (例如FR-H1、FR-H2、FR-H3、FR-H4)應理解為涵蓋如藉由任一已知方案所定義之構架區(或具體構架區)。在一些情況下，指定用於鑑別特定CDR、FR或多個FR或CDR之方案，諸如如藉由Kabat、Chothia、AbM或接觸方法或其他已知方案所定義的CDR。在其他情況下，給出CDR或FR之特定胺基酸序列。
術語「可變區」或「可變域」係指涉及抗體結合於抗原的抗體重鏈或輕鏈域。原生抗體之重鏈及輕鏈的可變區(分別為VH 及VL )一般具有類似結構，其中各結構域包含四個保守性構架區(FR)及三個CDR。(參見例如Kindt等人，Kuby Immunology, 第6版, W.H. Freeman and Co., 第91頁 (2007)。單個VH 或VL 域可足以賦予抗原結合特異性。此外，結合特定抗原之抗體可使用來自結合該抗原之抗體的VH 或VL 域來加以分離以分別篩選互補VH 或VL 域之文庫。參見例如Portolano等人，J. Immunol. 150:880-887 (1993)；Clarkson等人，Nature 352:624-628 (1991)。
在所提供之CAR中所包括的抗體當中為抗體片段。「抗體片段」或「抗原結合片段」係指包含完整抗體中結合該完整抗體所結合之抗原的部分的除完整抗體以外之分子。抗體片段之實例包括(但不限於) Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2 ；雙功能抗體；線性抗體；重鏈可變(VH )區、單鏈抗體分子，諸如scFv及僅包含VH 區之單域抗體；以及由抗體片段形成之多特異性抗體。在一些實施例中，所提供之CAR中的抗原結合域為或包含有包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。在特定實施例中，抗體為包含重鏈可變(VH )區及/或輕鏈可變(VL )區之單鏈抗體片段，諸如scFv。
單域抗體(sdAb)為包含抗體之重鏈可變區之全部或一部分或輕鏈可變區之全部或一部分的抗體片段。在某些實施例中，單域抗體為人類單域抗體。
抗體片段可藉由各種技術製得，包括(但不限於)完整抗體之蛋白分解消化以及由重組宿主細胞產生。在一些實施例中，抗體為以重組方式產生之片段，諸如包含不天然存在之排列的片段，諸如具有由合成性連接子(例如肽連接子)接合之兩個或超過兩個抗體區或鏈的彼等片段，及/或無法藉由對天然存在之完整抗體進行酶消化而產生的片段。在一些態樣中，抗體片段為scFv。
「人類化」抗體為其中全部或基本上全部CDR胺基酸殘基均來源於非人類CDR且全部或基本上全部FR胺基酸殘基均來源於人類FR的抗體。人類化抗體視情況可包括來源於人類抗體之抗體恆定區的至少一部分。非人類抗體之「人類化形式」係指已經歷人類化(通常用以降低對人類之免疫原性)，同時保持親本非人類抗體之特異性及親和力的非人類抗體變異體。在一些實施例中，人類化抗體中之一些FR殘基經來自非人類抗體(例如，CDR殘基所來源於之抗體)之相應殘基取代，例如用以恢復或改良抗體特異性或親和力。
在所提供之CAR中所包括的抗BCMA抗體當中為人類抗體。「人類抗體」為具有對應於由人類或人類細胞所產生抗體之胺基酸序列的胺基酸序列或具有使用人類抗體譜系或編碼其他人類抗體之序列(包括人類抗體文庫)之非人類來源的抗體。該術語不包括包含非人類抗原結合區的非人類抗體之人類化形式，諸如其中全部或基本上全部CDR為非人類CDR之彼等抗體。該術語包括人類抗體之抗原結合片段。
人類抗體可藉由向已經改造以響應於抗原攻擊而產生完整人類抗體或具有人類可變區之完整抗體的轉殖基因動物投與免疫原來加以製備。此類動物通常含有人類免疫球蛋白基因座之全部或一部分，其置換內源性免疫球蛋白基因座，或存在於染色體外或隨機整合至動物染色體中。在此類轉殖基因動物中，內源性免疫球蛋白基因座一般已不活化。人類抗體亦可來源於人類抗體文庫，包括噬菌體呈現文庫及無細胞文庫，其含有來源於人類譜系的編碼抗體之序列。
在所提供之CAR中所包括的抗體當中為彼等單株抗體，包括單株抗體片段。如本文所用之術語「單株抗體」係指獲自基本上同質之抗體群體或在該群體內獲得的抗體，亦即除含有天然存在之突變或在單株抗體製劑生產期間出現的可能變異體以外，構成群體之個別抗體完全相同，此類變異體一般少量存在。與通常包括針對不同抗原決定基之不同抗體的多株抗體製劑對比，單株抗體製劑之各單株抗體係針對抗原上之單一抗原決定基。該術語不應解釋為需要藉由任何特定方法來產生抗體。單株抗體可藉由多種技術製得，包括(但不限於)自融合瘤產生、重組DNA方法、噬菌體呈現及其他抗體呈現方法。
在一些實施例中，CAR包括抗體分子之一或多個BCMA結合部分，諸如抗體之重鏈可變(VH )區及/或輕鏈可變(VL )區，例如scFv抗體片段。在一些實施例中，所提供之BCMA結合CAR含有賦予所提供CAR之BCMA結合特性的抗體(諸如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段。在一些實施例中，抗體或抗原結合域可為所描述之任何抗BCMA抗體或來源於所描述之任何抗BCMA抗體。參見例如Carpenter等人. ,Clin Cancer Res ., 2013, 19(8):2048-2060，WO 2016090320、WO2016090327、WO2010104949及WO2017173256。此類抗BCMA抗體或抗原結合片段中之任一者均可用於所提供之CAR中。在一些實施例中，抗BCMA CAR含有抗原結合域，其為含有來源於WO 2016090320或WO2016090327中所描述之抗體的可變重鏈(VH )及/或可變輕鏈(VL )區的scFv。
在一些實施例中，抗體(例如抗BCMA抗體)或抗原結合片段含有如所描述之重鏈及/或輕鏈可變(VH 或VL )區序列或其足夠抗原結合部分。在一些實施例中，抗BCMA抗體(例如抗原結合片段)含有含有如所描述之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3的VH 區序列或其足夠抗原結合部分。在一些實施例中，抗BCMA抗體(例如抗原結合片段)含有含有如所描述之CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3的VL 區序列或其足夠抗原結合部分。在一些實施例中，抗BCMA抗體(例如抗原結合片段)含有含有如所描述之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3的VH 區序列，且含有含有如所描述之CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3的VL 區序列。在抗體當中亦為具有與此類序列至少或約90%、約91%、約92%、約93%、約94%、約95%、約96%、約97%、約98%或約99%一致之序列的彼等抗體。
在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體(例如其抗原結合片段)具有擁有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617及772-774及814-832中之任一者之胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的重鏈可變(VH )區，或含有存在於此類VH 序列中之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3。在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體或抗體片段具有WO 2016090327、WO 2016090320或WO 2017173256中所描述之抗體或抗體結合片段中之任一者的VH 區。
在一些實施例中，抗BCMA抗體之VH 區為包括重鏈互補決定區3 (CDR-H3)之VH 區，該CDR-H3包含胺基酸序列X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 X13 X14 (SEQ ID NO:355)，其中X1 為A、D、E、G、L、V或W；X2 為A、D、G、L、P、Q或S；X3 為A、D、G、L或Y；X4 為D、G、P、R、S、V、Y或不存在；X5 為D、I、P、S、T、Y或不存在；X6 為A、G、I、S、T、V、Y或不存在；X7 為A、D、E、F、L、P、S、Y或不存在；X8 為P、Q、T、Y或不存在；X9 為D、G、R、Y或不存在；X10 為A、F、Y或不存在；X11 為D、F或不存在；X12 為F或不存在；X13 為D、T或Y；且X14 為I、L、N、V或Y。在一些此類實施例中，在該CDR-H3中，X1 為V；X2 為D；X3 為G；X4 為D；X5 為Y；X6 為V；X7 為D；X8 不存在；X9 不存在；X10 不存在；X11 不存在；X12 不存在；X13 為D；且X14 為Y。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有胺基酸序列包含選自根據Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517及595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH區含有胺基酸序列包含選自SEQ ID NO:606及613之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有具有SEQ ID NO:517、595、606或613之胺基酸序列的CDR-H3。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者的VH 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-H3序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基H95至H102)經選自以下之CDR-H3序列置換：根據Kabat編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517及595中之任一者，根據Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517及595中之任一者或SEQ ID NO:606及613中之任一者。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H3。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區為包括重鏈互補決定區1 (CDR-H1)之VH 區，該CDR-H1包含X1 X2 X3 MX4 (SEQ ID NO:353)之胺基酸序列，X1 為D或S；X2 為Y或S；X3 為A、G、W或Y；且X4 為H、Q或S。在一些實施例中，在該CDR-H1中，X1 為D；X2 為Y；X3 為Y；且X4 為S。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有胺基酸序列包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、507及593中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有胺基酸序列包含選自根據Chothia編號之SEQ ID NO:12-15、158-160、294、295、532及596中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有胺基酸序列包含選自根據AbM編號之SEQ ID NO:19-22、165-169、298、299、509、577及598中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有胺基酸序列包含選自SEQ ID NO 604及611中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有具有SEQ ID NO:507、532、577、593、596、598、604及611之胺基酸序列的CDR-H1。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者的VH 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-H1序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基H31至H35)經選自以下之CDR-H1序列置換：根據Kabat編號之SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、507及593中之任一者，根據Chothia編號之SEQ ID NO:12-15、158-160、294、295、532及596中之任一者，根據AbM編號之SEQ ID NO:19-22、165-169、509、298、299、509、577及598中之任一者或SEQ ID NO:604及611中之任一者。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區為包括重鏈互補決定區2 (CDR-H2)之VH 區，該CDR-H2包含X1 IX2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 YX12 X13 X14 X15 X16 X17 (SEQ ID NO:354)之胺基酸序列，其中X1 為F、G、H、V、W或Y；X2 為N、R、S或V；X3 為P、Q、S、V、W或Y；X4 為K或不存在；X5 為A或不存在；X6 為D、G、N、S或Y；X7 為G或S；X8 為G或S；X9 為E、G、N、T或S；X10 為I、K或T；X11 為E、G、N或Y；X12 為A或V；X13 為A、D或Q；X14 為K或S；X15 為F或V；X16 為K或Q；且X17 為E或G。在一些實施例中，在該CDR-H2中，X1 為Y；X2 為S、X3 為S；X4 不存在；X5 不存在；X6 為S；X7 為G；X8 為S；X9 為T；X10 為I；X11 為Y；X12 為A；X13 為D；X14 為S；X15 為V；X16 為K；且X17 為G。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、372-374、513及594中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有包含選自根據Chothia編號之SEQ ID NO:16-18、161-164、296、297、514-516、551、597中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有包含選自根據AbM編號之SEQ ID NO:23-25、170-173、300、301、510-512、587及599中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有包含選自SEQ ID NO:605及612中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有具有SEQ ID NO:513、551、587、594、597、599、605或612中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者的VH 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-H2序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基H50至H65)經選自以下之CDR-H2序列置換：根據Kabat編號之SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、372-374、513及594中之任一者，根據Chothia編號之SEQ ID NO:16-18、161-164、296、297、514-516、551、597中之任一者，根據AbM編號之SEQ ID NO:23-25、170-173、300、301、510-512、587及599中之任一者或SEQ ID NO 605或612中之任一者。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區含有選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H2。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有本身為或包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、507及593中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；本身為或包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、372-374、513及594中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及本身為或包含選自根據Kabat編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517及595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有本身為或包含選自根據Chothia編號之SEQ ID NO:12-15、158-160、294、295、532及596中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；本身為或包含選自根據Chothia編號之SEQ ID NO:16-18、161-164、296、297、514-516、551、597中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及本身為或包含選自根據Chothia編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517及595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有本身為或包含選自根據AbM編號之SEQ ID NO:19-22、165-169、509、298、299、509、577及598中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；本身為或包含選自根據AbM編號之SEQ ID NO:23-25、170-173、300、201、510-512、587及599中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及本身為或包含選自根據AbM編號之SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595、606及613中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有本身為或包含選自SEQ ID NO:604及611中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；本身為或包含選自SEQ ID NO:605及612中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及本身為或包含選自SEQ ID NO:606及613中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區包含根據Kabat編號之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區包含根據Chothia編號之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區包含根據AbM編號之CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有包含選自由以下組成之群之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的VH 區：根據Kabat編號，分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:3、6及11之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:140、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:141、145及150之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:142、146及151之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:3、6及377之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、373及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:2、5及378之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；包含SEQ ID NO:2、374及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；包含SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；包含SEQ ID NO:289、291、293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
舉例而言，本文所提供之抗體或其抗原結合片段包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含選自以下當中之胺基酸序列的VH 區：根據Kabat編號，SEQ ID NO:1、4及7；SEQ ID NO:2、5及8；SEQ ID NO:2、5及9；SEQ ID NO:2、5及10；SEQ ID NO:3、6及11；SEQ ID NO:140、145及149；SEQ ID NO:141、145及149；SEQ ID NO:141、145及150；SEQ ID NO:142、146及151；SEQ ID NO:2、5及152；SEQ ID NO:143、147及153；SEQ ID NO:144、148及154；SEQ ID NO:3、6及155；SEQ ID NO:2、5及156；SEQ ID NO:2、5及157；SEQ ID NO:2、6及376；SEQ ID NO:3、372及376；SEQ ID NO:3、6及376；SEQ ID NO:3、6及377；SEQ ID NO:2、373及152；SEQ ID NO:2、5及378；SEQ ID NO:2、374及9、SEQ ID NO:288、290及292；SEQ ID NO:289、291、293；SEQ ID NO:507、513及517；及SEQ ID NO:593、594及595
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:609或SEQ ID NO:617之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3包含分別SEQ ID NO:593、594及595；分別SEQ ID NO:596、597及595；分別SEQ ID NO:598、599及595；或分別SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的VH 區。
在本文所提供之抗體或其抗原結合片段的一些實施例中，VH 區包含如所描述之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3中的任一者，且包含分別與選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的構架區1 (FR1)、FR2、FR3及/或FR4具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的FR1、FR2、FR3及/或FR4。舉例而言，抗BCMA抗體或其抗原結合片段可包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內分別含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3以及與選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的構架區(例如FR1、FR2、FR3及/或FR4)含有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的構架區(例如FR1、FR2、FR3及/或FR4)。在一些實施例中，VH 區包含選自以下之FR1、FR2、FR3及/或FR4：包含選自SEQ ID NO:59-63、195-203、308、309及434-439中之任一者之胺基酸序列的FR1；包含選自SEQ ID NO:64-66、204-209、310及311中之任一者之胺基酸序列的FR2；包含選自SEQ ID NO:67-69、210-216、312、313、441及443中之任一者之胺基酸序列的FR3；及/或包含選自SEQ ID NO:70-71、217-220、314、315、444及445中之任一者之胺基酸序列的FR4。在一些實施例中，VH 區包含有包含SEQ ID NO:61之胺基酸序列的FR1、包含SEQ ID NO:65之胺基酸序列的FR2、包含SEQ ID NO:69之胺基酸序列的FR3及/或包含SEQ ID NO:70之胺基酸的FR4。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之胺基酸序列的VH 區。
亦提供具有與此類序列至少或約至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體及其抗原結合片段。舉例而言，本文提供一種抗體或抗原結合片段，其包含有包含與選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的VH 區。
在一些實施例中，抗體為僅包含VH 區序列或其足夠抗原結合部分之單域抗體，諸如上文所描述之VH 序列中的任一者(例如CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3及/或CDR-H4)。
在一些實施例中，本文所提供的包含VH 區之抗體(例如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段進一步包含輕鏈或其足夠抗原結合部分。舉例而言，在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有VH 區及VL 區，或VH 及VL 區之足夠抗原結合部分。在此類實施例中，VH 區序列可為上文所描述之VH 序列中的任一者。在一些此類實施例中，抗體為抗原結合片段，諸如Fab或scFv。在一些此類實施例中，抗體為亦含有恆定區之全長抗體。
在一些實施例中，抗體(例如其抗原結合片段)具有擁有選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的輕鏈可變(VL )區。在一些實施例中，抗體或抗原結合片段具有WO 2016090327、WO 2016090320或WO 2017173256中之任一者中所描述的VL區。
在一些實施例中，本文所描述之抗體(例如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段的VL 區為包括輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)之VL 區，該CDR-L3包含胺基酸序列X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 、 (SEQ ID NO:358)，其中X1 為A、C、G、H、I、Q或S；X2 為A、Q、S或V；X3 為S、W或Y；X4 為D、F、G、H或Y；X5 為D、G、M、R、S或T；X6 為A、G、H、L、R、S、T或Y；X7 為L、P、R、S或不存在；X8 為D、G、N、R、S、T或不存在；X9 為A、G、H、L、P或不存在；X10 為F、S或不存在；X11 為L、P、W或Y；且X12 為S、T或V。在一些實施例中，在該CDR-L3中，X1 為H；X2 為V；X3 為W；X4 為D；X5 為R；X6 為S；X7 為R；X8 為D；X9 為H；X10 不存在；X11 為Y；且X12 為V。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591及603中之任一者之胺基酸序列的CDR-L3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有具有根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:591或603之胺基酸序列的CDR-L3。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者的VL 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-L3序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基L89至L97)經選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591及603中之任一者的CDR-L3序列置換。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含SEQ ID NO:610或SEQ ID NO:618之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L3。
在一些實施例中，本文所描述之抗體(例如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段的VL 區為包括輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)之VL 區，該CDR-L1含有胺基酸序列：X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 X13 X14 X15 X16 X17 (SEQ ID NO:356)，其中X1 為G、K、R、S或T；X2 為A、G或S；X3 為G、N、S或T；X4 為G、K、N、Q、R或S；X5 為S或不存在；X6 為D、N、V或不存在；X7 為L、V或不存在；X8 為H、S、Y或不存在；X9 為S、T或不存在；X10 為S或不存在；X11 為D、G、I、N、S或不存在；X12 為D、E、G、K、I、N或不存在；X13 為F、G、K、N、R、S、Y或不存在；X14 為D、K、N、T或不存在；X15 為A、D、G、L、N、S、T或Y；X16 為L或V；X17 為A、H、N、Q或S。在一些實施例中，X1 為G；X2 為A；X3 為N；X4 為N；X5 不存在；X6 不存在；X7 不存在；X8 不存在；X9 不存在；X10 不存在；X11 為I；X12 為G；X13 為S；X14 為K；X15 為S；X16 為V；X17 為H。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589或601中之任一者之胺基酸序列的CDR-L1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含選自SEQ ID NO:607及614中之任一者之胺基酸序列的CDR-L1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有具有根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:589或601之胺基酸序列的CDR-L1。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者的VL 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-L1序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基L24至L34)經選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589或601中之任一者的CDR-L1序列置換。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含SEQ ID NO:589、601、607或614之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1。
在一些實施例中，本文所描述之抗體(例如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段的VL 區為包括輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)之VL 區，該CDR-L2含有X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 (SEQ ID NO:357)之胺基酸序列，其中X1 為A、D、E、N、S、V或W；X2 為A、D、N、S或V；X3 為A、D、H、I、N或S；X4 為D、K、N、Q、R或T；X5 為L、R或V；X6 為A、E、P或Q；且X7 為A、D、S或T。在一些實施例中，X1 為D；X2 為D；X3 為D；X4 為D；X5 為R；X6 為P；且X7 為S。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590及602中之任一者之胺基酸序列的CDR-L2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含選自SEQ ID NO:608及615中之任一者之胺基酸序列的CDR-L2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有具有根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:590或SEQ ID NO:602之胺基酸序列的CDR-L2。在任一此類實例中，抗體或其抗原結合片段可含有選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者的VL 區序列，其中，其中所含有之相應CDR-L2序列(例如對應於根據Kabat編號之胺基酸殘基L50至L56)經選自以下之CDR-L2序列置換：根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590及602中之任一者或經SEQ ID NO:608及615中之任一者。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L2。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含SEQ ID NO:589、601、607或614之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L2。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有本身為或包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589或601中之任一者之胺基酸序列的CDR-L1；本身為或包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590及602中之任一者之胺基酸序列的CDR-L2；及本身為或包含選自根據Kabat編號、Chothia編號或AbM編號之SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591及603中之任一者之胺基酸序列的CDR-L3。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含根據Kabat編號之CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含根據Chothia編號之CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VL 區包含根據AbM編號之CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3。
在本文所提供之抗體或其抗原結合片段的一些實施例中，VL 區包含選自以下當中之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：分別包含SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:29、40及50之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:32、42及53之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:30、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:35、45及57之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:36、46及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及184之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及186之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及187之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:383、403及419之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:384、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:385、180及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:386、404及420之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:387、405及422之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:388、406及423之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:388、407及424之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:389、408及425之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:390、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:391、409及426之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:392、40及427之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:394、39及429之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:395、411及430之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:396、412及431之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:396、412及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:397、413及432之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:398、414及433之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在本文所提供之抗體或其抗原結合片段的一些實施例中，VL 區包含有分別包含SEQ ID NO:589、590及591；分別包含SEQ ID NO:607、608及591；分別包含SEQ ID NO:601、602及603；或分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
舉例而言，本文所提供之抗體或其抗原結合片段包含有所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含選自以下當中之胺基酸序列的VL 區：SEQ ID NO:26、37及47；SEQ ID NO:27、38及48；SEQ ID NO:28、39及49；SEQ ID NO:29、40及50；SEQ ID NO:30、39及51；SEQ ID NO:31、41及52；SEQ ID NO:32、42及53；SEQ ID NO:30、39及54；SEQ ID NO:33、43及55；SEQ ID NO:34、44及56；SEQ ID NO:35、45及57；SEQ ID NO:36、46及58；SEQ ID NO:174、179及184；SEQ ID NO:174、179及185；SEQ ID NO:174、179及186；SEQ ID NO:174、179及187；SEQ ID NO:175、180及188；SEQ ID NO:174、179及189；SEQ ID NO:176、181及190；SEQ ID NO:177、182及191；SEQ ID NO:174、179及192；SEQ ID NO:178、183及193；SEQ ID NO:178、183及194；SEQ ID NO:30、399及415；SEQ ID NO:380、400及416；SEQ ID NO:33、43及421；SEQ ID NO:381、401及417；SEQ ID NO:382、402及418；SEQ ID NO:383、403及419；SEQ ID NO:384、39及54；SEQ ID NO:385、180及58；SEQ ID NO:175、180及188；SEQ ID NO:386、404及420；SEQ ID NO:387、405及422；SEQ ID NO:388、406及423；SEQ ID NO:388、407及424；SEQ ID NO:389、408及425；SEQ ID NO:390、183及193；SEQ ID NO:391、409及426；SEQ ID NO:392、40及427；SEQ ID NO:394、39及429；SEQ ID NO:395、411及430；SEQ ID NO:396、412及431；SEQ ID NO:396、412及58；SEQ ID NO:397、413及432；SEQ ID NO:398、414及433；SEQ ID NO:589、590及591；SEQ ID NO:607、608及591；SEQ ID NO:601、602及603；或SEQ ID NO:614、615及603。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內分別含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在一些實施例中，抗體含有選自SEQ ID NO:610或SEQ ID NO:618之VL 區胺基酸序列內分別含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603；或分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的VL 區。
在本文所提供之抗體或其抗原結合片段的一些實施例中，VL 區包含如所描述之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3中的任一者，且包含分別與選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的構架區1 (FR1)、FR2、FR3及/或FR4具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的FR1、FR2、FR3及/或FR4。舉例而言，抗BCMA抗體或其抗原結合片段可包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內分別含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3以及與選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的構架區(例如FR1、FR2、FR3及/或FR4)含有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的構架區(例如FR1、FR2、FR3及/或FR4)。在一些實施例中，VL 區包含選自以下之FR1、FR2、FR3及/或FR4：包含選自SEQ ID NO:72-82、221-227、316、317、446-459及461-466中之任一者之胺基酸序列的FR1；包含選自SEQ ID NO:83-92、228-232、318、319、467-477及479-482中之任一者之胺基酸序列的FR2；包含選自SEQ ID NO:93-101、233-242、320、321、483-495及497-501中之任一者之胺基酸序列的FR3；及/或包含選自SEQ ID NO:102-109、243-246、322、323、502-506及508中之任一者之胺基酸序列的FR4。在一些實施例中，VL 區包含有包含SEQ ID NO:79之胺基酸序列的FR1、包含SEQ ID NO:89之胺基酸序列的FR2、包含SEQ ID NO:98之胺基酸序列的FR3及/或包含SEQ ID NO:108之胺基酸序列的FR4。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段包含有包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之胺基酸序列的VL 區。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段含有包含SEQ ID NO:610或SEQ ID NO:618之胺基酸序列的VL 區。
亦提供具有與此類序列至少或約至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體。
在一些實施例中，抗體或片段之VH 區包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者的胺基酸序列，且抗體或片段之VL 區包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者的胺基酸序列。
亦提供具有與此類序列至少或約至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體及其抗原結合片段。舉例而言，本文提供一種抗體或抗原結合片段，其含有包含與選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的VL 區且/或包含與選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。在一些實施例中，抗體或抗原結合片段含有包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777及833-849中之任一者之胺基酸序列的VL 區及選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774及814-832中之任一者的VH 區。
在一些實施例中，VH 區為或包含與SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774或814-832中之任一者之VH 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且VL 區為或包含與SEQ ID NO:618、116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777或833-849中之任一者之VL 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些實施例中，VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:617及618之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及116之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:111及117之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及118之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及119之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及120之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及121之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及122之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及123之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:112及124之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:113及125之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:114及126之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及127之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:247及257之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:248及258之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:249及259之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:250及260之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:251及261之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:252及262之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:253及263之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:254及264之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:255及265之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及266之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及267之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:518及534之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及535之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及536之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:520及264之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:521及537之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:522及538之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:523及539之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及540之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:524及541之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:525及261之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:526及542之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:527及543之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:528及544之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:529及545之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:528及546之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:522及547之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及548之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:530及549之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:531及550之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及552之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及553之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:533及554之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及555之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:524及556之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及557之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:324及326之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:325及327之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:609及610之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:772及775之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:773及776之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:774及777之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:815及833之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:816及834之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:817及835之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:818及836之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:819及837之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:820及838之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:821及839之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:822及840之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:823及841之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:824及842之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:825及843之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:826及844之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:827及845之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:828及846之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:829及847之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:830及847之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:831及848之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列；或VH 區及VL 區分別包含SEQ ID NO:832及849之序列或與其具有至少90%一致性之胺基酸序列。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 區所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含選自SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774及814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3之胺基酸序列；且其所包含之CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3分別包含選自SEQ ID NO:618,116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777及833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3之胺基酸序列。
在一些實施例中，VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:593、611、1-3、140-144、288、289、294、295、507、532、596或604中之任一者之序列的CDR-H1；(b)包含選自SEQ ID NO:594、612、4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、597或605中之任一者之序列的CDR-H2；及(c)包含選自SEQ ID NO:595、613、7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517或606中之任一者之序列的CDR-H3；且VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:601、614、26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589或607中之任一者之序列的CDR-L1；(b)包含選自SEQ ID NO:602、615、37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590或608中之任一者之序列的CDR-L2；及(c)包含選自SEQ ID NO:603、47-58、184-194、306、307、415-427、429-433或591中之任一者之序列的CDR-L3。
在一些實施例中，VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:26、37及47之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及8之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:27、38及48之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:28、39及49之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:29、40及50之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:30、39及51之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:31、41及52之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:32、42及53之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:30、39及54之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及9之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:33、43及55之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:34、44及56之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及11之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:35、45及57之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:36、46及58之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:140、145及149之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及184之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:141、145及149之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及185之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:141、145及150之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及186之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:142、146及151之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及187之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及152之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:175、180及188之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:143、147及153之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及189之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:144、148及154之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:176、181及190之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及155之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:177、182及191之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及156之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:174、179及192之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及157之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:178、183及193之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及157之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:178、183及194之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、6及376之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:30、399及415之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:380、400及416之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:33、43及421之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及155之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:177、182及191之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、372及376之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:381、401及417之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及376之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:382、402及418之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及377之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:383、403及419之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:384、39及54之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:385、180及58之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、373及152之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:175、180及188之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及11之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:386、404及420之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及378之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:33、43及421之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及9之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:387、405及422之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及9之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:388、406及423之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及9之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:388、407及424之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:3、6及376之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:389、408及425之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及157之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:390、183及193之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、374及9之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:391、409及426之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:392、40及427之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:394、39及429之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:395、411及430之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:28、39及49之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:396、412及431之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:396、412及58之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:397、413及432之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:398、414及433之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:288、290及292之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:302、304及306之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:288、290及292之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:302、304及306之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:289、291及293之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:303、305及307之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:289、291及293之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:303、305及307之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:507、513及517之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:589、590及591之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在一些實施例中，VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在一些實施例中，VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。在一些實施例中，VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
在一些實施例中，VH 區為或包含SEQ ID NO:617、110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、772-774或814-832中之任一者的序列；且VL 區為或包含SEQ ID NO:618、116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、775-777或833-849中之任一者的序列。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及116之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:111及117之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及118之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及119之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及120之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及121之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及122之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及123之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:112及124之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:113及125之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:114及126之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及127之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:247及257之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:248及258之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:249及259之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:250及260之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:251及261之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:252及262之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:253及263之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:254及264之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:255及265之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及266之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及267之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:518及534之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及535之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及536之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:520及264之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:521及537之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:522及538之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:523及539之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及540之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:524及541之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:525及261之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:526及542之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:527及543之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:528及544之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:529及545之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:528及546之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:522及547之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:256及548之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:530及549之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:531及550之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及552之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及553之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:110及118之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:533及554之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:115及555之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:524及556之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:519及557之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:324及326之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:325及327之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:609及610之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:617及618之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:772及775之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:773及776之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:774及777之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:815及833之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:816及834之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:817及835之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:818及836之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:819及837之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:820及838之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:821及839之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:822及840之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:823及841之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:824及842之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:825及843之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:826及844之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:827及845之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:828及846之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:829及847之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:830及847之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:831及848之胺基酸序列；抗體或其抗原結合片段之VH 及VL 區分別包含SEQ ID NO:832及849之胺基酸序列，或與上文VH 及VL 中之任一者具有至少90%序列一致性，諸如與其具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的任何抗體或其抗原結合片段。
舉例而言，其中所提供之抗體或其抗原結合片段的VH 及VL 區包含分別選自以下之胺基酸序列：SEQ ID NO:110及116；SEQ ID NO:111及117；SEQ ID NO:110及118；SEQ ID NO:110及119；SEQ ID NO:110及120；SEQ ID NO:110及121；SEQ ID NO:110及122；SEQ ID NO:110及123；SEQ ID NO:112及124；SEQ ID NO:113及125；SEQ ID NO:114及126；SEQ ID NO:115及127；SEQ ID NO:247及257；SEQ ID NO:248及258；SEQ ID NO:249及259；SEQ ID NO:250及260；SEQ ID NO:251及261；SEQ ID NO:252及262；SEQ ID NO:253及263；SEQ ID NO:254及264；SEQ ID NO:255及265；SEQ ID NO:256及266；SEQ ID NO:256及267；SEQ ID NO:518及534；SEQ ID NO:519及535；SEQ ID NO:115及536；SEQ ID NO:520及264；SEQ ID NO:521及537；SEQ ID NO:522及538；SEQ ID NO:523及539；SEQ ID NO:519及540；SEQ ID NO:524及541；SEQ ID NO:525及261；SEQ ID NO:526及542；SEQ ID NO:527及543；SEQ ID NO:528及544；SEQ ID NO:529及545；SEQ ID NO:528及546；SEQ ID NO:522及547；SEQ ID NO:256及548；SEQ ID NO:530及549；SEQ ID NO:531及550；SEQ ID NO:519及552；SEQ ID NO:110及553；SEQ ID NO:110及118；SEQ ID NO:533及554；SEQ ID NO:115及555；SEQ ID NO:524及556；SEQ ID NO:519及557、SEQ ID NO:324及326、SEQ ID NO:325及327、SEQ ID NO:609及610；SEQ ID NO:617及618；SEQ ID NO:772及775；SEQ ID NO:773及776；SEQ ID NO:774及777；SEQ ID NO:815及833；SEQ ID NO:816及834；SEQ ID NO:817及835；SEQ ID NO:818及836；SEQ ID NO:819及837；SEQ ID NO:820及838；SEQ ID NO:821及839；NO:822及840；SEQ ID NO:823及841；SEQ ID NO:824及842；SEQ ID NO:825及843；SEQ ID NO:826及844；SEQ ID NO:827及845；SEQ ID NO:828及846；SEQ ID NO:829及847；SEQ ID NO:830及847；SEQ ID NO:831及848；以及SEQ ID NO:832及849，或與上文VH 及VL 中之任一者具有至少90%序列一致性，諸如與其具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的任何抗體或其抗原結合片段，或包含上文VH 及VL 中之任一者的VH 區內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3以及其VL 區內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的任何抗體或其抗原結合片段。
在一些實施例中，其中所提供之抗體或其抗原結合片段的VH 及VL 區包含分別選自以下之胺基酸序列：SEQ ID NO:617及618；SEQ ID NO:256及267；SEQ ID NO:519及535；SEQ ID NO:115及536；或SEQ ID NO:609及610；或與上文VH 及VL 中之任一者具有至少90%序列一致性，諸如與其具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的任何抗體或其抗原結合片段，或包含上文VH 及VL 中之任一者的VH 區內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3以及其VL 區內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的任何抗體或其抗原結合片段。
在一些實施例中，其中所提供之抗體或其抗原結合片段的VH 及VL 區包含選自以下之胺基酸序列：SEQ ID NO:617及618，或與上文VH 及VL 中之任一者具有至少90%序列一致性，諸如與其具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的任何抗體或其抗原結合片段，或包含上文VH 及VL 中之任一者的VH 區內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3以及其VL 區內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的任何抗體或其抗原結合片段。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段為單鏈抗體片段，諸如單鏈可變片段(scFv)或雙功能抗體或單域抗體(sdAb)。在一些實施例中，抗體或抗原結合片段為僅包含VH 區之單域抗體。在一些實施例中，抗體或抗原結合片段為包含重鏈可變(VH )區及輕鏈可變(VL )區之scFv。在一些實施例中，單鏈抗體片段(例如scFv)包括接合兩個抗體結構域或區，諸如重鏈可變(VH )區及輕鏈可變(VL )區的一或多個連接子。連接子通常為肽連接子，例如柔性及/或可溶性肽連接子。在連接子當中為富含甘胺酸及絲胺酸且/或在一些情況下富含蘇胺酸之彼等連接子。在一些實施例中，連接子進一步包括可改良溶解度之帶電殘基，諸如離胺酸及/或麩胺酸。在一些實施例中，連接子進一步包括一或多個脯胺酸。
因此，所提供之抗BCMA抗體包括單鏈抗體片段，諸如scFv及雙功能抗體，尤其人類單鏈抗體片段，其通常包含接合兩個抗體結構域或區(此類VH 及VL 區)之連接子。連接子通常為肽連接子，例如柔性及/或可溶性肽連接子，諸如富含甘胺酸及絲胺酸之肽連接子。
在一些態樣中，富含甘胺酸及絲胺酸(及/或蘇胺酸)之連接子包括至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%之此類胺基酸。在一些實施例中，其包括至少或約50%、55%、60%、70%或75%之甘胺酸、絲胺酸及/或蘇胺酸。在一些實施例中，連接子基本上完全由甘胺酸、絲胺酸及/或蘇胺酸構成。連接子一般為長度介於約5與約50個胺基酸之間，通常介於10或約10與30或約30個之間，例如為10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個，且在一些實例中長度介於約10與約25個胺基酸之間。例示性連接子包括具有序列GGGGS (4GS；SEQ ID NO:359)或GGGS (3GS；SEQ ID NO:360)之各種數目重複(諸如介於2、3、4與5個之間的此類序列之重複)的連接子。例示性連接子包括具有SEQ ID NO:361中所闡述之序列(GGGGSGGGGSGGGGS)或由其組成的彼等連接子。例示性連接子進一步包括具有SEQ ID NO:362中所闡述之序列(GSTSGSGKPGSGEGSTKG)或由其組成的彼等連接子。例示性連接子進一步包括具有SEQ ID NO:778中所闡述之序列(SRGGGGSGGGGSGGGGSLEMA)或由其組成的彼等連接子。
因此，在一些實施例中，所提供之實施例包括包含前述連接子中之一或多者的單鏈抗體片段(例如scFv)，該等連接子諸如富含甘胺酸/絲胺酸之連接子，包括具有GGGS (SEQ ID NO:360)或GGGGS (SEQ ID NO:359)之重複的連接子，諸如SEQ ID NO:361中所闡述之連接子。
在一些實施例中，連接子具有含有SEQ ID NO:361闡述之序列的胺基酸序列。片段(例如scFv)可包括VH 區或其部分，後接連接子，後接VL 區或其部分。片段(例如scFv)可包括VL 區或其部分，後接連接子，後接VH 區或其部分。
在一些實施例中，抗原結合域包含選自SEQ ID NO:478、128-139、268-278、329、442、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的序列或與選自SEQ ID NO:478、128-139、268-278、329、442、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
在一些態樣中，本文所提供之scFv包含選自SEQ ID NO:128-139、268-278、328、329、442、478、558-576、578-583、585、586及769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-139、268-278、328、329、442、478、558-576、578-583、585、586及769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少或約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
舉例而言，本文所提供之scFv包含選自SEQ ID NO:128、129、130、132、133、136、137、269、273、274、275、276、277、278、328、329、442、478、558、559、560、561、562、563、564、565、566、567、568、569、570、571、572、573、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、585、586、769、770、771、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812或813中之任一者的胺基酸序列或具有與選自SEQ ID NO:128、129、130、132、133、136、137、269、273、274、275、276、277、278、328、329、442、478、558、559、560、561、562、563、564、565、566、567、568、569、570、571、572、573、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、585、586、769、770、771、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812或813中之任一者之胺基酸序列具有至少或約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
表 2 提供在所提供之BCMA結合受體(諸如抗BCMA嵌合抗原受體(CAR))中可包含之例示性抗原結合域(諸如抗體或抗原結合片段)的SEQ ID NO。在一些實施例中，BCMA結合受體含有BCMA結合抗體或其片段，其包含有包含下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3序列的VH 區及包含其中所闡述之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3序列的VL 區。在一些實施例中，BCMA結合受體含有BCMA結合抗體或其片段，其包含有包含下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之VH 區序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的VH 區及包含其中所闡述之VL 區內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3序列的VL 區。在一些實施例中，BCMA結合受體含有包含下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之VH 區序列及VL 區序列的BCMA結合抗體或其片段，或包含與下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之VH 區序列及VL 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之VH 及VL 區胺基酸序列的抗體。在一些實施例中，BCMA結合受體含有包含下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之scFv序列的BCMA結合抗體或其片段，或包含與下表 2 之每一列中所列出SEQ ID NO中所闡述之scFv序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之scFv胺基酸序列的抗體。
在所提供之CAR中的抗體(例如抗原結合片段)當中為人類抗體。在所提供之人類抗BCMA抗體(例如抗原結合片段)的一些實施例中，人類抗體含有包含與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段編碼之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之部分、與由生殖系核苷酸人類重鏈D區段編碼之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之部分及/或與由生殖系核苷酸人類重鏈J區段編碼之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之部分的VH 區；且/或含有包含與由生殖系核苷酸人類κ或λ鏈V區段編碼之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之部分及/或與由生殖系核苷酸人類κ或λ鏈J區段編碼之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之部分的VL 區。在一些實施例中，VH 區之部分對應於CDR-H1、CDR-H2及/或CDR-H3。在一些實施例中，VH 區之部分對應於構架區1 (FR1)、FR2、FR3及/或FR4。在一些實施例中，VL 區之部分對應於CDR-L1、CDR-L2及/或CDR-L3。在一些實施例中，VL 區之部分對應於FR1、FR2、FR3及/或FR4。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-H1區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-H1。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-H1區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-H1。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-H2區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-H2。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-H2區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-H2。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段、D區段及J區段編碼之序列內的相應CDR-H3區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-H3。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類重鏈V區段、D區段及J區段編碼之序列內的相應CDR-H3區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-H3。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-L1區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-L1。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-L1區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-L1。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-L2區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-L2。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段編碼之序列內的相應CDR-L2區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-L2。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段及J區段編碼之序列內的相應CDR-L3區之胺基酸序列具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性的CDR-L3。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有其序列與由生殖系核苷酸人類輕鏈V區段及J區段編碼之序列內的相應CDR-L3區相比100%一致或具有不超過一個、兩個或三個胺基酸差異的CDR-L3。
在一些實施例中，人類抗體(例如抗原結合片段)含有含有人類生殖系基因區段序列之構架區。舉例而言，在一些實施例中，人類抗體含有VH 區，其中構架區(例如FR1、FR2、FR3及FR4)與由人類生殖系抗體區段(諸如V區段及/或J區段)編碼之構架區具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性。在一些實施例中，人類抗體含有VL 區，其中構架區(例如FR1、FR2、FR3及FR4)與由人類生殖系抗體區段(諸如V區段及/或J區段)編碼之構架區具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性。舉例而言，在一些此類實施例中，VH 區及/或VL 區內所含有之構架區序列與由人類生殖系抗體區段編碼之構架區序列相比相差不超過10個胺基酸，諸如不超過9、8、7、6、5、4、3、2或1個胺基酸。
在一些實施例中，參考抗體可為國際專利申請公開案第WO 2010/104949號中所描述之小鼠抗BCMA scFv。
抗體(例如抗原結合片段)可含有免疫球蛋白恆定區之至少一部分，諸如一或多個恆定區結構域。在一些實施例中，恆定區包括輕鏈恆定區及/或重鏈恆定區1 (CH 1)。在一些實施例中，抗體包括CH 2及/或CH 3域，諸如Fc區。在一些實施例中，Fc區為人類IgG (諸如IgG1或IgG4)之Fc區。
2. 間隔子
在一些實施例中，包含本文所提供之抗體(例如抗原結合片段)的重組受體(諸如CAR)進一步包括間隔子，其可為或包括免疫球蛋白恆定區或其變異體或經修飾之型式的至少一部分，諸如鉸鏈區(例如IgG4鉸鏈區)及/或CH 1/CL及/或Fc區。在一些實施例中，恆定區或部分來自人類IgG，諸如IgG4或IgG1。在一些態樣中，恆定區之部分充當處於抗原識別組分(例如scFv)與跨膜域之間的間隔子區。在一些實施例中，間隔子之長度經調整以使CAR表現性細胞(諸如CAR表現性細胞)與CAR標靶(諸如BCMA表現性腫瘤細胞)之間的生物物理學突觸距離最佳化。在一些實施例中，CAR由T細胞表現，且間隔子之長度調整為對於T細胞活化相容之長度或經調整以使CAR T細胞效能最佳化。
在一些實施例中，間隔子可具有提供抗原結合後之細胞反應性與在不存在間隔子的情況下相比增加的長度。在一些實例中，間隔子為長度12或約12個胺基酸或為長度不超過12個胺基酸。在一些實施例中，間隔子為長度至少100個胺基酸，諸如長度至少110、125、130、135、140、145、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240或250個胺基酸。例示性間隔子包括具有至少約10至300個胺基酸、約10至200個胺基酸、約50至175個胺基酸、約50至150個胺基酸、約10至125個胺基酸、約50至100個胺基酸、約100至300個胺基酸、約100至250個胺基酸、約125至250個胺基酸或約200至250個胺基酸且包括介於任一所列範圍之端點間之任何整數的彼等間隔子。在一些實施例中，間隔子區具有至少約12個胺基酸、至少約119個或少於119個胺基酸、至少約125個胺基酸、至少約200個胺基酸或至少約220個胺基酸或至少約225個胺基酸。
在一些實施例中，間隔子之長度為長度125至300個胺基酸、長度125至250個胺基酸、長度125至230個胺基酸、長度125至200個胺基酸、長度125至180個胺基酸、長度125至150個胺基酸、長度150至300個胺基酸、長度150至250個胺基酸、長度150至230個胺基酸、長度150至200個胺基酸、長度150至180個胺基酸、長度180至300個胺基酸、長度180至250個胺基酸、長度180至230個胺基酸、長度180至200個胺基酸、長度200至300個胺基酸、長度200至250個胺基酸、長度200至230個胺基酸、長度230至300個胺基酸、長度230至250個胺基酸或長度250至300個胺基酸。在一些實施例中，間隔子為至少或至少約或為或為約長度130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、221、222、223、224、225、226、227、228或229個胺基酸，或長度介於前述任一者之間。
例示性間隔子包括單獨IgG鉸鏈、連接於CH 2及CH 3域中之一或多者的IgG鉸鏈或連接於CH 3域之IgG鉸鏈。在一些實施例中，IgG鉸鏈、CH 2及/或CH 3可全部或部分地來源於IgG4或IgG2。在一些實施例中，間隔子可為含有來源於IgG4、IgG2及/或IgG2及IgG4之鉸鏈、CH 2及/或CH 3序列中之一或多者的嵌合多肽。在一些實施例中，間隔子可全部或部分地來源於IgG4及/或IgG2，且可含有突變，諸如在一或多個結構域中含有一或多個單胺基酸突變。在一些實例中，胺基酸修飾為在IgG4之鉸鏈區中脯胺酸(P)取代絲胺酸(S)。在一些實施例中，胺基酸修飾為麩醯胺酸(Q)取代天冬醯胺(N)以減小糖基化異質性，諸如在SEQ ID NO:750中所闡述之全長IgG4 Fc序列的CH 2區中處於位置177處之N177Q突變或在SEQ ID NO:749中所闡述之全長IgG2 Fc序列的CH 2區中處於位置176處之N176Q突變。在一些實施例中，間隔子為或包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子。在一些實施例中，間隔子包含以下胺基酸序列：
ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 649)
其由已經最佳化以用於密碼子表現及/或消除剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)的聚核苷酸編碼。在一些實施例中，間隔子之編碼序列包含SEQ ID NO:622中所闡述之核酸序列。在一些實施例中，間隔子之編碼序列包含SEQ ID NO:855或856中所闡述之核酸序列。
另外之例示性間隔子包括(但不限於) Hudecek等人 (2013)Clin. Cancer Res ., 19:3153，Hudecek等人 (2015)Cancer Immunol. Res ., 3(2):125-135或國際專利申請公開案第WO2014031687號中所描述之彼等間隔子。在一些實施例中，間隔子之核苷酸序列經最佳化以在表現時減小RNA異質性。在一些實施例中，間隔子之核苷酸序列經最佳化以減少隱蔽剪接位點或降低在剪接位點處發生剪接事件之可能性。
在一些實施例中，間隔子具有SEQ ID NO:363中所闡述之胺基酸序列，且係由SEQ ID NO:364中所闡述之聚核苷酸序列編碼。在一些實施例中，間隔子具有SEQ ID NO:365中所闡述之胺基酸序列。在一些實施例中，間隔子具有SEQ ID NO:366中所闡述之胺基酸序列。在一些實施例中，間隔子具有SEQ ID NO:630中所闡述之胺基酸序列，且係由SEQ ID NO:629中所闡述之聚核苷酸序列編碼。在一些實施例中，間隔子具有SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列，由SEQ ID NO:621、622、855或856中所闡述之聚核苷酸序列或與SEQ ID NO:621、622、855或856展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或超過99%序列一致性之聚核苷酸編碼。在一些實施例中，間隔子具有與SEQ ID NO:649展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或超過99%序列一致性之胺基酸序列，由已視情況經最佳化以用於密碼子使用及/或減小RNA異質性之聚核苷酸編碼。
3. 跨膜域及細胞內信號傳導組分
抗原識別組分一般連接於一或多個含有信號傳導組分之細胞內信號傳導區，該等信號傳導組分諸如模擬經由抗原受體複合物(諸如在CAR的情況下，TCR複合物)之刺激及/或活化及/或經由另一種細胞表面受體進行信號傳導的信號傳導組分。因此，在一些實施例中，BCMA結合分子(例如抗體或其抗原結合片段)連接於一或多個跨膜域(諸如本文所描述之彼等跨膜域)及包含一或多個細胞內組分(諸如本文所描述之彼等組分)的細胞內信號傳導區或域。在一些實施例中，跨膜域與細胞外域融合。在一個實施例中，使用與受體(例如CAR)中之一個結構域天然關聯的跨膜域。在一些情況下，跨膜域可經選擇或藉由胺基酸取代加以修飾以避免此類結構域結合於相同或不同表面膜蛋白質之跨膜域，從而使與受體複合物之其他成員的相互作用最小化。
在一些實施例中，跨膜域來源於天然或合成來源。在天然來源的情況下，在一些態樣中，結構域來源於任何膜結合蛋白或跨膜蛋白。跨膜域包括來源於以下之彼等跨膜域(亦即，包含至少以下之跨膜域)：T細胞受體之α、β或ζ鏈，CD3ε、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD28、CD33、CD37、CD45、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137及/或CD154。舉例而言，跨膜域可為包含由SEQ ID NO:623或SEQ ID NO:688中所闡述之核酸序列編碼的SEQ ID NO:624中所闡述之胺基酸序列的CD28跨膜域。或者，在一些實施例中，跨膜域為合成的。在一些態樣中，合成性跨膜域主要包含疏水性殘基，諸如白胺酸及纈胺酸。在一些態樣中，將在合成性跨膜域之各端處發現苯丙胺酸、色胺酸及纈胺酸之三聯體。在一些實施例中，藉由連接子、間隔子及/或跨膜域連接。
在細胞內信號傳導區或域當中為模擬或接近經由天然抗原受體之信號、經由此受體與共刺激受體之組合之信號及/或經由單獨共刺激受體之信號的彼等區或域。在一些實施例中，存在短寡肽或多肽連接子(例如長度介於2與10個胺基酸之間的連接子，諸如含有甘胺酸及絲胺酸之連接子，例如甘胺酸-絲胺酸二聯體)且形成CAR之跨膜域與細胞內信號傳導域之間的連接。
受體(例如CAR)一般包括包含至少一個細胞內信號傳導組分之細胞內信號傳導區。在一些實施例中，受體包括TCR複合物之細胞內組分或信號傳導域，諸如介導T細胞活化及細胞毒性之TCR CD3鏈，例如CD3ζ鏈。因此，在一些態樣中，BCMA結合抗體連接於一或多個細胞信號傳導模組。在一些實施例中，細胞信號傳導模組包括CD3跨膜域、CD3細胞內信號傳導域及/或其他CD跨膜域。在一些實施例中，受體(例如CAR)進一步包括另一或多個分子之一部分，該等分子諸如Fc受體γ、CD8、CD4、CD25或CD16。舉例而言，在一些態樣中，CAR包括CD3-ζ (CD3-ζ)或Fc受體γ與CD8、CD4、CD25或CD16之間的嵌合分子。
在一些實施例中，在CAR接合時，CAR之細胞質域或細胞內信號傳導域刺激及/或活化免疫細胞(例如經工程改造以表現CAR之T細胞)的正常效應功能或反應中之至少一者。舉例而言，在一些情形下，CAR誘導T細胞功能，諸如溶胞活性；或T輔助細胞活性，諸如細胞介素或其他因子之分泌。在一些實施例中，使用抗原受體組分或共刺激分子之細胞內信號傳導域的截短部分代替完整免疫刺激鏈，例如在該部分轉導效應功能信號之情況下使用。在一些實施例中，細胞內信號傳導域包括T細胞受體(TCR)之細胞質序列，且在一些態樣中，亦包括在天然環境下與此類受體協同作用以在抗原受體接合之後起始信號轉導之共受體的細胞質序列，及/或此類分子之任何衍生物或變異體，及/或具有相同功能性能力之任何合成序列。
在天然TCR之情形下，完全活化一般不僅需要經由TCR進行信號傳導，且亦需要共刺激信號。因此，在一些實施例中，為了促進完全活化，CAR中亦包括用於產生二級或共刺激信號之組分。在其他實施例中，CAR不包括用於產生共刺激信號之組分。在一些態樣中，另一種CAR表現於同一細胞中且提供用於產生二級或共刺激信號之組分。
T細胞活化在一些態樣中描述為由兩類細胞質信號傳導序列介導：經由TCR起始抗原依賴性初級活化之彼等細胞質信號傳導序列(初級細胞質信號傳導序列)，及以抗原非依賴性方式起作用以提供二級或共刺激信號之彼等細胞質信號傳導序列(二級細胞質信號傳導序列)。在一些態樣中，CAR包括此類細胞質信號傳導序列中之一或兩者。
在一些態樣中，CAR包括調控TCR複合物之初級刺激及/或活化的初級細胞質信號傳導序列。以刺激性方式起作用之初級細胞質信號傳導序列可含有信號傳導模體，其稱為基於免疫受體酪胺酸之活化模體或ITAM。含有ITAM之初級細胞質信號傳導序列的實例包括來源於以下之彼等初級細胞質信號傳導序列：TCR或CD3ζ、FcRγ、CD3γ、CD3δ及CD3ε。在一些實施例中，CAR中之細胞內信號傳導區或域含有細胞質信號傳導域、其一部分或來源於CD3ζ之序列。在一些實施例中，CD3ζ包含由SEQ ID NO:627或SEQ ID NO:652中所闡述之核酸序列編碼的SEQ ID NO:628中所闡述之胺基酸序列。
在一些實施例中，CAR包括共刺激分子(諸如T細胞共刺激分子)之信號傳導域(例如細胞內或細胞質信號傳導域)及/或跨膜部分。例示性共刺激分子包括CD28、4-1BB、OX40、DAP10及ICOS。舉例而言，共刺激分子可來源於4-1BB，且可包含由SEQ ID NO:625或SEQ ID NO:681中所闡述之核苷酸序列編碼的SEQ ID NO:626中所闡述之胺基酸序列。在一些態樣中，相同CAR包括刺激性或活化性組分(例如細胞質信號傳導序列)及共刺激組分兩者。
在一些實施例中，刺激性或活化性組分包括於一個CAR內，而共刺激組分由識別另一抗原之另一CAR提供。在一些實施例中，CAR包括均表現於同一細胞上之活化性或刺激性CAR及共刺激CAR (參見WO2014/055668)。在一些態樣中，靶向BCMA之CAR為刺激性或活化性CAR；在其他態樣中，其為共刺激CAR。在一些實施例中，細胞進一步包括抑制性CAR (iCAR，參見Fedorov等人，Sci. Transl. Medicine, 5(215) (2013年12月)，諸如識別除BCMA以外之抗原的CAR，其中藉由抑制性CAR與其配位體之結合來減弱或抑制經由靶向BCMA之CAR遞送的刺激或活化信號，以例如減少脫靶效應。
在某些實施例中，細胞內信號傳導區包含連接於CD3 (例如CD3-ζ)細胞內域之CD28跨膜及信號傳導域。在一些實施例中，細胞內信號傳導域包含連接於CD3ζ細胞內域之嵌合CD28及CD137 (4-1BB、TNFRSF9)共刺激域。
在一些實施例中，CAR在細胞質部分中包涵一或多(例如兩個或超過兩個)共刺激域及一個刺激性或活化域(例如初級活化域)。例示性CAR包括CD3-ζ、CD28及4-1BB之細胞內組分。
在一些實施例中，所提供之嵌合抗原受體包含：(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，諸如本文所描述之任何抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含分別包含SEQ ID NO:617及618之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列的VH 區及VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含本身為或包含SEQ ID NO:617之VH 區胺基酸序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的VH 區；及本身為或包含SEQ ID NO:618之VL 區胺基酸序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:593、594及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:596、597及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:598、599及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:611、612及613的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:614、615及603的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含本身為或包含SEQ ID NO:617之胺基酸序列的VH 區；及本身為或包含SEQ ID NO:618之胺基酸序列的VL 區。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含SEQ ID NO:478之胺基酸序列。在一些實施例中，細胞內信號傳導區包括刺激性細胞質信號傳導域。在一些實施例中，刺激性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包括基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。在一些實施例中，刺激性細胞質信號傳導域為或包括CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。在一些實施例中，刺激性細胞質域為人類的或來源於人類蛋白質。在一些實施例中，刺激性細胞質域為或包括SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。在一些實施例中，編碼刺激性細胞質域之核酸為或包括SEQ ID NO:627中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。在其他實施例中，編碼刺激性細胞質信號傳導域之核酸為或包括SEQ ID NO:652中所闡述之序列。在一些實施例中，細胞內信號傳導區進一步包括共刺激信號傳導區。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。在一些實施例中，共刺激信號傳導區包括4-1BB之細胞內信號傳導域。在一些實施例中，共刺激信號傳導區為人類的或來源於人類蛋白質。在其他實施例中，共刺激信號傳導區為或包括SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。在一些實施例中，編碼共刺激區之核酸為或包括SEQ ID NO:625中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。在一些實施例中，編碼共刺激信號傳導區之核酸包括SEQ ID NO:681中所闡述之序列。在一些實施例中，共刺激信號傳導區處於跨膜域與細胞內信號傳導區之間。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD4、CD28或CD8之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為或包括來源於CD28之跨膜域。在一些實施例中，跨膜域為人類的或來源於人類蛋白質。在其他實施例中，跨膜域為或包括SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
提供嵌合抗原受體，其包含：(1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含：(i)包含與SEQ ID NO:617之VH 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈(VH )；及(ii)包含與SEQ ID NO:618中之任一者之VL 區序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈(VL )區；(2) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子或其中編碼該間隔子之核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列；(3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及(4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。亦提供編碼此類嵌合抗原受體之聚核苷酸。
在一些實施例中，VH 區包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且VL 區包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
提供嵌合抗原受體，其包含：(1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含：包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的可變重鏈(VH )區；及包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的可變輕鏈(VL )區；或VH 區包含SEQ ID NO:617之VH 區序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且VL 區包含SEQ ID NO:618之VL 區序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；(2) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子或其中編碼該間隔子之核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列；(3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及(4)細胞內信號傳導區，其包含人類CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域(視情況，來自人類4-1BB或人類CD28之細胞內信號傳導域)。亦提供編碼此類嵌合抗原受體之聚核苷酸。在一些實施例中，細胞外抗原結合域包含SEQ ID NO:617之VH 區序列及SEQ ID NO:618之VL 區序列。在一些實施例中，此類受體之抗原結合域，其包含SEQ ID NO:478之胺基酸序列。在一些實施例中，嵌合抗原受體之其他結構域、區或組分包括本文所描述之任何結構域、區或組分。
4. 替代性標記物
在一些實施例中，CAR進一步包括替代性標記物，諸如細胞表面標記物(例如，截短之細胞表面標記物)，其可用於證實對細胞進行轉導或工程改造以表現受體。舉例而言，在一些態樣中，外源性標記基因與經工程改造之細胞療法結合使用以容許偵測或選擇細胞，且在一些情況下，亦促進藉由ADCC進行之細胞自殺。例示性標記基因包括截短之表皮生長因子受體(EGFRt)，其可與所關注之轉殖基因(例如CAR或TCR)在經轉導之細胞中共表現(參見例如美國專利第8,802,374號)。EGFRt含有由抗體西妥昔單抗(cetuximab) (Erbitux®)識別之抗原決定基。出於此原因，Erbitux®可用於鑑別或選擇已經EGFRt構築體工程改造之細胞，包括在亦經另一重組受體(諸如嵌合抗原受體(CAR))共同工程改造之細胞中進行鑑別或選擇。另外，EGFRt常用作與細胞療法結合之自殺機制。在一些態樣中，當EGFRt在細胞中與所關注之轉殖基因(例如CAR或TCR)一起共表現時，其可由西妥昔單抗單株抗體靶向以經由ADCC減少或耗乏經所轉移之基因修飾的細胞(參見美國專利第8,802,374號及Liu等人，Nature Biotech. 2016年4月; 34(4): 430-434)。重要的是，使用tEGFR之自殺殺滅途徑需要抗體抗原決定基可供使用。此類標記基因之另一實例為前列腺特異性膜抗原(PSMA)或其經修飾之形式。PSMA或其經修飾之形式可包含與靶向PSMA之分子(諸如抗體或其抗原結合片段)結合或識別該分子的胺基酸序列。靶向PSMA之分子可用於鑑別或選擇已經PSMA或經修飾之構築體工程改造的細胞，包括在亦經另一重組受體(諸如本文所提供之嵌合抗原受體(CAR))共同工程改造的細胞中進行鑑別或選擇。在一些態樣中，標記物包括CD34、神經生長因子受體(NGFR)、表皮生長因子受體(例如EGFR)或PSMA之全部或一部分(例如，截短之形式)。
例示性替代性標記物可包括細胞表面多肽的截短之形式，諸如不具功能性且不轉導或不能轉導信號或通常由全長形式之細胞表面多肽轉導之信號，且/或不內化或不能內化的截短之形式。例示性截短之細胞表面多肽，其包括生長因子或其他受體的截短之形式，諸如截短之人類表皮生長因子受體2 (tHER2)、截短之表皮生長因子受體(tEGFR，例示性tEGFR序列闡述於SEQ ID NO:11或76)或前列腺特異性膜抗原(PSMA)或其經修飾之形式。tEGFR可含有由抗體西妥昔單抗(Erbitux®)或其他治療性抗EGFR抗體或結合分子識別之抗原決定基，該抗體或分子可用於鑑別或選擇已經tEGFR構築體及所編碼之外源性蛋白質工程改造的細胞及/或消除或分離表現所編碼之外源性蛋白質的細胞。參見美國專利第8,802,374號及Liu等人，Nature Biotech. 2016年4月; 34(4): 430-434)。在一些態樣中，標記物(例如替代性標記物)包括CD34、NGFR、CD19或截短之CD19 (例如截短之非人類CD19)或表皮生長因子受體(例如tEGFR)的全部或一部分(例如，截短之形式)。在一些實施例中，標記物為或包含螢光蛋白，諸如綠色螢光蛋白(GFP)；增強型綠色螢光蛋白(EGFP)；諸如超摺疊GFP (sfGFP)；紅色螢光蛋白(RFP)，諸如tdTomato、mCherry、mStrawberry、AsRed2、DsRed或DsRed2；青色螢光蛋白質(CFP)；藍綠色螢光蛋白(BFP)；增強型藍色螢光蛋白(EBFP)及黃色螢光蛋白(YFP)，及其變異體，包括螢光蛋白的物種變異體、單體變異體及經密碼子最佳化及/或增強之變異體。在一些實施例中，標記物為或包含酶，諸如螢光素酶、來自大腸桿菌(E. coli )之lacZ基因、鹼性磷酸酶、分泌性胚胎鹼性磷酸酶(SEAP)、氯黴素乙醯基轉移酶(CAT)。例示性發光報導基因包括螢光素酶(luc)、β-半乳糖苷酶、氯黴素乙醯基轉移酶(CAT)、β-葡糖醛酸酶(GUS)或其變異體。
在一些實施例中，標記物為選擇標記物。在一些實施例中，選擇標記物為或包含賦予對外源性藥劑或藥物之耐藥性的多肽。在一些實施例中，選擇標記物為抗生素耐藥性基因。在一些實施例中，選擇標記物為向哺乳動物細胞賦予抗生素耐藥性的抗生素耐藥性基因。在一些實施例中，選擇標記物為或包含嘌呤黴素耐藥性基因、濕黴素耐藥性基因、殺稻瘟菌素耐藥性基因、新黴素耐藥性基因、遺傳黴素耐藥性基因或吉歐黴素耐藥性基因，或其經修飾之形式。
在一些實施例中，編碼標記物之核酸可操作地連接於編碼連接子序列(諸如可裂解連接子序列，例如T2A)之聚核苷酸。參見WO2014031687。在一些實施例中，引入由T2A核糖體開關分隔開的編碼CAR及替代性標記物之構築體可自同一構築體表現兩種蛋白質，以使得該替代性標記物可用作偵測表現此類構築體之細胞的標記物。在一些實施例中，標記物及(視情況，連接子序列)可為如國際公開案第WO2014031687號中所揭示之任一者。舉例而言，標記物可為截短之EGFR (tEGFR)或PSMA，其視情況連接於連接子序列，諸如2A可裂解連接子序列(例如，本文其他地方所描述的之T2A、P2A、E2A或F2A可裂解連接子)。用於截短之EGFR替代性標記物的例示性多肽包含SEQ ID NO:634中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:634展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或超過99%序列一致性之胺基酸序列。在一些實施例中，間隔子為或包含富含甘胺酸-絲胺酸之序列或其他柔性連接子，諸如已知柔性連接子。
在一些實施例中，標記物為未在T細胞上天然發現或未在T細胞表面上天然發現之分子(例如細胞表面蛋白質)或其一部分。
在一些實施例中，分子為非自身分子，例如非自身蛋白質，亦即未由細胞將授受性轉移之宿主的免疫系統識別為「自身」的分子。
在一些實施例中，標記物不提供治療功能及/或除作為標記物用於基因工程改造(例如用於選擇成功地經工程改造之細胞)以外不產生作用。在其他實施例中，標記物可為治療性分子或以其他方式發揮一些所需作用之分子，諸如活體內所遇到之細胞的配位體，諸如共刺激或免疫檢查點分子，以在授受性轉移及與配位體相遇時增強及/或減弱細胞反應。
在一些情況下，CAR稱為第一、第二及/或第三代CAR。在一些態樣中，第一代CAR為在抗原結合時僅提供CD3鏈誘導之信號的CAR；在一些態樣中，第二代CAR為提供此類信號及共刺激信號之CAR，諸如包括來自共刺激受體(諸如CD28或CD137)之細胞內信號傳導域的CAR；在一些態樣中，第三代CAR在一些態樣中為包括不同共刺激受體之多個共刺激域的CAR。
在一些實施例中，嵌合抗原受體包括含有本文所描述之抗體或片段的細胞外部分。在一些態樣中，嵌合抗原受體包括含有本文所描述之抗體或片段及細胞內信號傳導域的細胞外部分。在一些實施例中，抗體或片段包括僅包含VH 區之scFv或單域抗體，且細胞內信號傳導域含有ITAM。在一些態樣中，細胞內信號傳導域包括CD3-ζ (CD3ζ)鏈之ζ鏈的信號傳導域。在一些實施例中，嵌合抗原受體包括連接細胞外域及細胞內信號傳導域之跨膜域。在一些態樣中，跨膜域含有CD28之跨膜部分。細胞外域及跨膜域可直接地或間接地連接。在一些實施例中，細胞外域與跨膜域由間隔子(諸如本文所描述之任何間隔子)連接。在一些實施例中，嵌合抗原受體含有共刺激分子(例如T細胞共刺激分子)之細胞內域，諸如在跨膜域與細胞內信號傳導域之間含有。在一些態樣中，T細胞共刺激分子為CD28或4-1BB。
在一些實施例中，受體(例如CAR)之跨膜域為人類CD28之跨膜域或其變異體，例如人類CD28 (寄存編號：P10747.1) 的27個胺基酸之跨膜域。在一些實施例中，細胞內信號傳導域包含人類CD28之細胞內共刺激信號傳導域或其功能變異體，諸如其41個胺基酸之結構域及/或在原生CD28蛋白質之位置186-187處具有LL變為GG之取代的此類結構域。在一些實施例中，細胞內域包含4-1BB之細胞內共刺激信號傳導域或其功能變異體，諸如人類4-1BB (寄存編號Q07011.1)的42個胺基酸之細胞質域。在一些實施例中，細胞內信號傳導域包含人類CD3ζ刺激信號傳導域或其功能變異體，諸如人類CD3ζ (寄存編號：P20963.2)之同功異型物3的112 aa細胞質域或如美國專利第7,446,190號中所描述之CD3ζ信號傳導域。
舉例而言，在一些實施例中，CAR包括BCMA抗體或片段，諸如本文所描述之任一人類BCMA抗體，包括sdAb及scFv；間隔子，諸如任一含有Ig鉸鏈之間隔子；CD28跨膜域、CD28細胞內信號傳導域及CD3ζ信號傳導域。在一些實施例中，CAR包括BCMA抗體或片段，諸如本文所描述之任一人類BCMA抗體，包括sdAb及scFv；間隔子，諸如任一含有Ig鉸鏈之間隔子；CD28跨膜域、4-1BB細胞內信號傳導域及CD3ζ信號傳導域。在一些實施例中，此類CAR構築體在例如CAR下游進一步包括T2A核糖體跳過元件及/或tEGFR序列。
在某些實施例中，多特異性結合分子(例如多特異性嵌合受體，諸如多特異性CAR)可含有任一多特異性抗體，包括例如雙特異性抗體、多特異性單鏈抗體，例如雙功能抗體、三功能抗體及四功能抗體、串聯二-scFv及串聯三-scFv，諸如上文在章節I.A中所描述之任何分子。
B. 例示性特徵
在一些態樣中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段具有一或多種指定功能特徵，諸如結合特性，包括識別或結合於特定抗原決定基，諸如結合於與由其他抗體(諸如參考抗體)特異性結合之彼等抗原決定基類似或重疊的抗原決定基或與由其他抗體(諸如參考抗體)特異性結合之彼等抗原決定基不同的抗原決定基；與其他抗體(諸如參考抗體)競爭結合之能力；及/或特定結合親和力。在其他實施例中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段識別(諸如特異性識別)或結合(例如特異性結合)於與其他抗體(諸如參考抗體)特異性結合之彼等抗原決定基不同或不重疊的抗原決定基。舉例而言，所提供之CAR中的由抗體特異性結合之抗原決定基與由其他抗體(諸如參考抗體)特異性結合之彼等抗原決定基不同。在一些實施例中，抗體及其抗原結合片段不與其他抗體(諸如參考抗體)直接競爭結合或競爭結合之程度較低。
在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段特異性識別或特異性結合於BCMA蛋白質。在任一實施例中，所提供之CAR中的特異性識別BCMA之抗體或抗原結合片段特異性結合BCMA。在本文所提供之一些實施例中，BCMA蛋白質係指人類BCMA、小鼠BCMA蛋白質或非人類靈長類(例如食蟹獼猴) BCMA蛋白質。在本文任一實施例的一些實施例中，BCMA蛋白質係指人類BCMA蛋白質。觀測到抗體或其他結合分子結合於BCMA蛋白質或特異性結合於BCMA蛋白質不一定意謂其結合於每個物種之BCMA蛋白質。舉例而言，在一些實施例中，結合於BCMA蛋白質之特徵(諸如特異性結合於其及/或與參考抗體競爭結合於其及/或以特定親和力結合或競爭達到特定程度之能力)在一些實施例中係指相對於人類BCMA蛋白質之能力，且抗體可不具有相對於另一物種(諸如小鼠)之BCMA蛋白質的此特徵。
在一些實施例中，抗體或抗原結合片段結合於哺乳動物BCMA蛋白質，包括結合於天然存在之BCMA變異體，諸如某些剪接變異體或對偶基因變異體。
在一些實施例中，抗體特異性結合於人類BCMA蛋白質，諸如結合於人類BCMA蛋白質之抗原決定基或區，該人類BCMA蛋白質諸如包含SEQ ID NO:367 (GenBank編號BAB60895.1)或SEQ ID NO:368 (NCBI編號NP_001183.2)之胺基酸序列的人類BCMA蛋白質或其對偶基因變異體或剪接變異體。在一個實施例中，人類BCMA蛋白質係由轉錄本變異體編碼或為具有SEQ ID NO:369中所闡述之胺基酸序列的同功異型物。在一些實施例中，抗體結合於食蟹獼猴BCMA蛋白質，諸如SEQ ID NO:371 (GenBank編號EHH60172.1)中所闡述之食蟹獼猴BCMA蛋白質。在一些實施例中，抗體結合於人類BCMA但不結合於或以較低水準或程度或親和力結合於食蟹獼猴BCMA蛋白質，諸如SEQ ID NO:371 (GenBank編號EHH60172.1)中所闡述之食蟹獼猴BCMA蛋白質。在一些實施例中，抗體不結合於或以較低水準或程度或親和力結合於小鼠BCMA蛋白質，諸如SEQ ID NO:370 (NCBI編號NP_035738.1)中所闡述之小鼠BCMA蛋白質。在一些實施例中，抗體結合於小鼠BCMA蛋白質，諸如SEQ ID NO:370 (NCBI編號NP_035738.1)中所闡述之小鼠BCMA蛋白質。在一些實施例中，抗體結合於小鼠BCMA蛋白質之親和力比其結合於人類BCMA蛋白質及/或食蟹獼猴BCMA蛋白質之親和力更低。在一些實施例中，抗體結合於小鼠BCMA蛋白質及/或食蟹獼猴BCMA蛋白質之親和力比其結合於人類BCMA蛋白質之親和力更低。在一些實施例中，抗體結合於小鼠BCMA蛋白質及/或食蟹獼猴BCMA蛋白質之結合親和力與其結合於人類BCMA蛋白質之結合親和力類似。
在一些實施例中，所提供之抗原結合域或CAR展現，與可溶性BCMA相比，優先結合於膜結合之BCMA。在一些實施例中，所提供之抗原結合域或CAR展現，對膜結合之BCMA的結合親和力比對可溶性BCMA更大。
在一個實施例中，如例如藉由放射免疫分析(RIA)所量測，抗BCMA抗體或抗原結合域或CAR與不相關之非BCMA蛋白質(諸如非人類BCMA蛋白質或其他非BCMA蛋白質)結合的程度為抗體或抗原結合域或CAR與人類BCMA蛋白質或人類膜結合之BCMA結合的小於10%或小於約10%。在一些實施例中，在所提供之CAR中的抗體或抗原結合域當中為其中與小鼠BCMA蛋白質之結合為抗體與人類BCMA蛋白質之結合的小於10%或10%或約10%的抗體。在一些實施例中，在所提供之CAR中的抗體或抗原結合域當中為其中與食蟹獼猴BCMA蛋白質之結合為抗體與人類BCMA蛋白質之結合的小於10%或10%或約10%的抗體。在一些實施例中，在所提供之CAR中的抗體或抗原結合域當中為其中與食蟹獼猴BCMA蛋白質及/或小鼠BCMA蛋白質之結合與抗體與人類BCMA蛋白質之結合類似或約相同的抗體。在一些實施例中，在所提供之CAR中的抗體或抗原結合域當中為其中與可溶性BCMA蛋白質之結合為抗體與膜結合之BCMA蛋白質之結合的小於10%或10%或約10%的抗體或抗原結合域或CAR。
在一些實施例中，抗體特異性結合於BCMA蛋白質及/或與參考抗體競爭結合於其及/或以特定親和力結合或競爭結合達到特定程度，該BCMA蛋白質例如人類BCMA、小鼠BCMA蛋白質或非人類靈長類(例如食蟹獼猴) BCMA蛋白質。
在一些實施例中，如藉由多種已知方法中之任一者所量測，所提供之CAR中的抗體能夠以至少某一親和力結合BCMA蛋白質，諸如人類BCMA蛋白質。在一些實施例中，親和力由平衡解離常數(KD )表示；在一些實施例中，親和力由EC50 表示。
已知多種分析用於評定結合親和力及/或確定結合分子(例如抗體或其片段)是否特異性結合於特定配位體(例如抗原，諸如BCMA蛋白質)。諸如藉由使用此項技術中熟知之多種結合分析中的任一者來測定結合分子(例如抗體)對抗原(例如BCMA，諸如人類BCMA或食蟹獼猴BCMA或小鼠BCMA)之結合親和力處於熟練技術人員之水準內。舉例而言，在一些實施例中，BIAcore®儀器可用於使用表面電漿子共振(SPR)分析來測定兩個蛋白質(例如，抗體或其片段與抗原(諸如BCMA蛋白質))之間複合物的結合動力學及常數(參見例如Scatchard等人，Ann. N.Y. Acad. Sci. 51 :660, 1949；Wilson,Science 295 :2103, 2002；Wolff等人，Cancer Res .53 :2560, 1993；及美國專利第5,283,173號、第5,468,614號或等效物)。
SPR在分子結合於感測器表面或自該表面解離時量測該表面處之分子濃度的變化。SPR信號之變化與接近表面之質量濃度的變化成正比，藉此允許量測兩個分子之間的結合動力學。複合物之解離常數可藉由監測在緩衝液傳遞通過晶片時折射率相對於時間之變化來加以測定。其他適合的用於量測一個蛋白質與另一個蛋白質之結合的分析包括例如免疫分析，諸如酶聯免疫吸附分析(ELISA)及放射免疫分析(RIA)，或藉由經由螢光、UV吸收、圓二色譜或核磁共振(NMR)監測蛋白質之光譜或光學特性變化來測定結合。其他例示性分析包括(但不限於)西方墨點法(Western blot)、ELISA、分析型超速離心、光譜法、流式細胞量測術、定序及用於偵測所表現聚核苷酸或蛋白質之結合的其他方法。
在一些實施例中，結合分子(例如CAR之抗體或其片段或抗原結合域)結合(諸如特異性結合)於抗原(例如BCMA蛋白質或其中之抗原決定基)的親和力或KA (亦即，特定結合相互作用之平衡締合常數，其單位為1/M；在假定為雙分子相互作用的情況下，等於此締合反應之締合速率[k合 或ka ]與解離速率[k離 或kd ]的比率)等於或大於105 M-1 。在一些實施例中，CAR之抗體或其片段或抗原結合域展現對肽抗原決定基之結合親和力的KD (亦即，特定結合相互作用之平衡解離常數，其單位為M；在假定為雙分子相互作用的情況下，等於此締合反應之解離速率[k離 或kd ]與締合速率[k合 或ka ]的比率)等於或小於10-5 M。舉例而言，平衡解離常數KD 在10-5 M至10-13 M，諸如10-7 M至10-11 M、10-8 M至10-10 M或10-9 M至10-10 M之範圍內。締合速率(締合速率常數；k合 或ka ；單元為1/Ms)及解離速率(解離速率常數；k離 或kd ；單位為1/s)可使用此項技術中已知之分析方法中的任一者，例如表面電漿子共振(SPR)來加以測定。
在一些實施例中，CAR之抗體(例如抗原結合片段)或抗原結合域與約BCMA蛋白質(諸如人類BCMA蛋白質)之結合親和力(EC50 )及/或解離常數為自或自約0.01 nM至約500 nM、自或自約0.01 nM至約400 nM、自或自約0.01 nM至約100 nM、自或自約0.01 nM至約50 nM、自或自約0.01 nM至約10 nM、自或自約0.01 nM至約1 nM、自或自約0.01 nM至約0.1 nM、is 自或自約0.1 nM至約500 nM、自或自約0.1 nM至約400 nM、自或自約0.1 nM至約100 nM、自或自約0.1 nM至約50 nM、自或自約0.1 nM至約10 nM、自或自約0.1 nM至約1 nM、自或自約0.5 nM至約200 nM、自或自約1 nM至約500 nM、自或自約1 nM至約100 nM、自或自約1 nM至約50 nM、自或自約1 nM至約10 nM、自或自約2 nM至約50 nM、自或自約10 nM至約500 nM、自或自約10 nM至約100 nM、自或自約10 nM至約50 nM、自或自約50 nM至約500 nM、自或自約50 nM至約100 nM或自或自約100 nM至約500 nM。在某些實施例中，抗體與BCMA蛋白質(諸如人類BCMA蛋白質)之結合親和力(EC50 )及/或平衡解離常數KD 為或小於或小於約400 nM、300 nM、200 nM、100 nM、50 nM、40 nM、30 nM、25 nM、20 nM、19 nM、18 nM、17 nM、16 nM、15 nM、14 nM、13 nM、12 nM、11 nM、10 nM、9 nM、8 nM、7 nM、6 nM、5 nM、4 nM、3 nM、2 nM或1 nM或小於1 nM。在一些實施例中，抗體結合於BCMA蛋白質(諸如人類BCMA蛋白質)之結合親和力低於奈莫耳，例如結合親和力小於約1 nM，諸如小於約0.9 nM、約0.8 nM、約0.7 nM、約0.6 nM、約0.5 nM、約0.4 nM、約0.3 nM、約0.2 nM或約0.1 nM或或小於0.1 nM。
在一些實施例中，結合親和力可分類為高親和力或低親和力。在一些情況下，展現低至中度親和力之結合的CAR之結合分子(例如抗體或其片段)或抗原結合域展現KA 為至多107 M-1 、至多106 M-1 、至多105 M-1 。在一些情況下，展現與特定抗原決定基之高親和力結合的結合分子(例如抗體或其片段)與此類抗原決定基相互作用之KA 為至少107 M-1 、至少108 M-1 、至少109 M-1 、至少1010 M-1 、至少1011 M-1 、至少1012 M-1 或至少1013 M-1 。在一些實施例中，CAR之結合分子(例如抗BCMA抗體或其片段或抗原結合域)與BCMA蛋白質的結合親和力(EC50 )及/或平衡解離常數KD 為自或自約0.01 nM至約1 μM、0.1 nM至1 μM、1 nM至1 μM、1 nM至500 nM、1 nM至100 nM、1 nM至50 nM、1 nM至10 nM、10 nM至500 nM、10 nM至100 nM、10 nM至50 nM、50 nM至500 nM、50 nM至100 nM或100 nM至500 nM。在某些實施例中，CAR之結合分子(例如抗BCMA抗體或其片段或抗原結合域)與BCMA蛋白質的結合親和力(EC50 )及/或平衡解離常數之解離常數KD 為或為約或小於或小於約1 μM、500 nM、100 nM、50 nM、40 nM、30 nM、25 nM、20 nM、19 nM、18 nM、17 nM、16 nM、15 nM、14 nM、13 nM、12 nM、11 nM、10 nM、9 nM、8 nM、7 nM、6 nM、5 nM、4 nM、3 nM、2 nM或1 nM或小於1 nM。特定抗體之親和力的程度可與已知抗體(諸如參考抗體)之親和力相比。
在一些實施例中，可比較CAR之結合分子(諸如抗BCMA抗體或抗原結合域)對不同抗原(例如來自不同物種之BCMA蛋白質)的結合親和力以確定物種交叉反應性。舉例而言，物種交叉反應性可分類為高交叉反應性或低交叉反應性。在一些實施例中，可比較對不同抗原(例如來自不同物種(諸如人類、食蟹獼猴或小鼠)之BCMA蛋白質)的平衡解離常數KD 以確定物種交叉反應性。在一些實施例中，CAR之抗BCMA抗體或抗原結合域的物種交叉反應性可較高，例如，抗BCMA抗體結合於人類BCMA及物種變異型BCMA的程度類似，例如，對人類BCMA之KD 與對物種變異型BCMA之KD 的比率為或為約1。在一些實施例中，CAR之抗BCMA抗體或抗原結合域的物種交叉反應性可較低，例如，抗BCMA抗體對人類BCMA之親和力較高而對物種變異型BCMA之親和力較低，或反之亦然。舉例而言，對物種變異型BCMA之KD 與對人類BCMA之KD 的比率大於10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、1000、2000或超過2000，且抗BCMA抗體具有較低物種交叉反應性。物種交叉反應性之程度可與已知抗體(諸如參考抗體)之物種交叉反應性相比。
在一些實施例中，CAR之抗BCMA抗體或抗原結合域對不同形式或拓樸類型之抗原(例如可溶性BCMA蛋白質)的結合親和力與對膜結合之BCMA的結合親和力相比，以確定對特定形式或拓樸類型之優先結合或相對親和力。舉例而言，在一些態樣中，所提供之抗BCMA抗體或抗原結合域可展現與可溶性BCMA相比優先結合於膜結合之BCMA，及/或展現對膜結合之BCMA的結合親和力比對可溶性BCMA更大。在一些實施例中，可比較對不同形式或拓樸類型之BCMA蛋白質的平衡解離常數KD 以確定優先結合或相對結合親和力。在一些實施例中，與可溶性BCMA相比，對膜結合之BCMA的優先結合或相對親和力可較高。舉例而言，在一些情況下，對可溶性BCMA之KD 與對膜結合之BCMA之KD 的比率大於10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、1000、2000或超過2000，且抗體或抗原結合域優先結合膜結合之BCMA或對膜結合之BCMA的結合親和力更高。在一些情況下，對膜結合之BCMA之KA 與對可溶性BCMA之KA 的比率大於10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、1000、2000或超過2000，且抗體或抗原結合域優先結合膜結合之BCMA或對膜結合之BCMA的結合親和力更高。在一些情況下，CAR之抗體或抗原結合域結合可溶性BCMA及膜結合之BCMA的程度類似，例如，對可溶性BCMA之KD 與對膜結合之BCMA之KD 的比率為或為約1。在一些情況下，CAR之抗體或抗原結合域結合可溶性BCMA及膜結合之BCMA的程度類似，例如，對可溶性BCMA之KA 與對膜結合之BCMA之KA 的比率為或為約1。對膜結合之BCMA或可溶性BCMA優先結合或相對親和力的程度可與已知抗體(諸如參考抗體)之程度相比。
在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段以類似程度結合於人類BCMA蛋白質及非人類BCMA蛋白質或其他非BCMA蛋白質。舉例而言，在一些實施例中，CAR之抗體或其抗原結合片段或抗原結合域以平衡解離常數(KD )結合於人類BCMA蛋白質，諸如包含SEQ ID NO:367 (GenBank編號BAB60895.1)或SEQ ID NO:368 (NCBI編號NP_001183.2)之胺基酸序列的人類BCMA蛋白質或其對偶基因變異體或剪接變異體；且以類似或約相同或相差小於2倍或相差小於5倍之KD 結合於非人類BCMA，諸如食蟹獼猴BCMA，諸如SEQ ID NO:371 (GenBank編號EHH60172.1)中所闡述之食蟹獼猴BCMA蛋白質。
在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段以類似程度結合於可溶性BCMA蛋白質及膜結合之BCMA蛋白質，其平衡解離常數(KD )類似或約相同或相差小於2倍或相差小於5倍。
舉例而言，在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段結合於人類BCMA的KD 為約或小於或小於約1 μM、500 nM、100 nM、50 nM、40 nM、30 nM、25 nM、20 nM、19 nM、18 nM、17 nM、16 nM、15 nM、14nM、13 nM、12 nM、11 nM、10 nM、9 nM、8 nM、7 nM、6 nM、5 nM、4 nM、3 nM、2 nM或1 nM或小於1 nM，且結合於食蟹獼猴BCMA的KD 為約或小於或小於約1μM、500 nM、100 nM、50 nM、40 nM、30 nM、25 nM、20 nM、19 nM、18 nM、17 nM、16 nM、15nM、14 nM、13 nM、12 nM、11 nM、10 nM、9 nM、8 nM、7 nM、6 nM、5 nM、4 nM、3 nM、2 nM或1 nM或小於1 nM。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段結合於小鼠BCMA蛋白質之KD 為約或小於或小於約1 μM、500 nM、100 nM、50 nM、40 nM、30 nM、25 nM、20 nM、19 nM、18 nM、17 nM、16 nM、15 nM、14 nM、13 nM、12 nM、11 nM、10 nM、9 nM、8 nM、7 nM、6 nM、5 nM、4 nM、3 nM、2 nM或1 nM或小於1 nM。在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體或其抗原結合片段以高親和力結合於人類BCMA、食蟹獼猴BCMA及小鼠BCMA。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段以高親和力結合於人類BCMA及食蟹獼猴BCMA，而以低親和力結合於小鼠BCMA。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段以高親和力結合於人類BCMA及來自其他物種之BCMA或該BCMA蛋白質之其他變異體。
在一些實施例中，如使用特定表面電漿子共振(SPR)條件所量測之總結合力(Rmax )用於確定抗體或其抗原結合片段與抗原(例如BCMA蛋白質，諸如人類BCMA蛋白質)結合之能力(ability)或結合力(capacity)。對於SPR分析，「配位體」為在感測器之表面上固定的標靶分子，例如BCMA蛋白質，而「被分析物」為用於結合於該「配位體」之測試分子，例如抗體。舉例而言，「被分析物」可為結合於BCMA蛋白質之任一抗體或其抗原結合片段。對於SPR中之特定配位體與被分析物對，對於特定條件，Rmax 可在假定1:1結合化學計量模型的情況下加以確定。結合力(Rmax )使用下式來加以確定：Rmax (RU) = (被分析物分子量)/(配位體分子量) × 固定之配位體的含量(RU)。舉例而言，在特定SPR條件下，在抗體或其抗原結合片段中之任一者與BCMA蛋白質(諸如人類BCMA或食蟹獼猴BCMA)之間結合的Rmax 為至少或至少約50共振單位(RU)，諸如約25 RU、20 RU、15 RU、10 RU、5 RU或1 RU。
在一些實施例中，所提供之CAR中的抗體(諸如人類抗體)特異性結合於BCMA蛋白質之特定抗原決定基或區，諸如一般為細胞外抗原決定基或區。BCMA蛋白質為184個胺基酸之III型膜蛋白質，其含有細胞外域、跨膜域及細胞質域。參考SEQ ID NO:367中所闡述之人類BCMA胺基酸序列，細胞外域對應於胺基酸1-54，胺基酸55-77對應於跨膜域，且胺基酸78-184對應於細胞質域。
C. 多特異性抗體
在某些實施例中，BCMA結合分子(例如抗體或含有該等抗體之多肽，諸如嵌合受體)具有多特異性。在多特異性結合分子當中為多特異性抗體，包括例如雙特異性抗體。多特異性結合搭配物(例如抗體)具有對可處於相同或不同抗原中之至少兩個不同位點的結合特異性。在某些實施例中，結合特異性中之一者係對於BCMA且另一者係對於另一抗原。在一些實施例中，另外之結合分子結合於及/或識別第三或更多抗原。在某些實施例中，雙特異性抗體可結合於BCMA之兩個不同抗原決定基。雙特異性抗體亦可用於使細胞毒性劑定位於表現BCMA之細胞。雙特異性抗體可製備為全長抗體或抗體片段。在多特異性抗體當中為多特異性單鏈抗體，例如雙功能抗體、三功能抗體及四功能抗體、串聯二-scFv及串聯三-scFv。亦提供含有抗體(例如抗原結合片段)之多特異性嵌合受體，諸如多特異性CAR。亦提供含有抗體或包括該等抗體之多肽的多特異性細胞，諸如含有包括抗BCMA抗體之細胞表面蛋白質及結合於不同抗原或BCMA上不同抗原決定基之另一種細胞表面蛋白質(諸如另一種嵌合受體)的細胞。
例示性抗原包括B細胞特異性抗原、其他腫瘤特異性抗原，諸如在以下上特異性表現或與之相關聯的抗原：白血病(例如B細胞白血病)、淋巴瘤(例如霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤等)或骨髓瘤(例如多發性骨髓瘤(MM))、漿細胞惡性病(例如漿細胞瘤)。舉例而言，抗原包括在以下上特異性表現或與之相關聯的彼等抗原：B細胞慢性淋巴球性白血病(CLL)、瀰漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性淋巴球性白血病(ALL)、伯基特氏淋巴瘤(例如地方性伯基特氏淋巴瘤或偶發性伯基特氏淋巴瘤)、套細胞淋巴瘤(MCL)、非小細胞肺癌(NSCLC)、慢性骨髓(或骨髓性)白血病(CML)、毛細胞白血病(HCL)、小淋巴球性淋巴瘤(SLL)、邊緣區淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(HL)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、間變性大細胞淋巴瘤(ALCL)、難治性濾泡性淋巴瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、濾泡性淋巴瘤、小無裂細胞淋巴瘤、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、邊緣區淋巴瘤、結節單核細胞樣B細胞淋巴瘤、免疫母細胞淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、瀰漫性混合細胞淋巴瘤、肺部B細胞血管中心性淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL)、神經母細胞瘤、腎細胞癌、結腸癌、結腸直腸癌、乳癌、上皮鱗狀細胞癌、黑素瘤、骨髓瘤(諸如多發性骨髓瘤，例如非分泌型多發性骨髓瘤、鬱積型多發性骨髓瘤)、胃癌、食道癌、腦癌、肺癌(例如小細胞肺癌)、胰臟癌、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌(例如肝癌瘤、肝腫瘤等)、膀胱癌、前列腺癌、睪丸癌、甲狀腺癌、子宮癌、脾臟癌(例如脾淋巴瘤)、腎上腺癌及/或頭頸癌；及在T細胞上表現之抗原。
在一些實施例中，在用於多靶向策略的第二或另外之抗原當中包括其中該等抗原中之至少一者為通用腫瘤抗原或其家族成員的彼等抗原。在一些實施例中，第二或另外之抗原為在腫瘤上表現之抗原。在一些實施例中，本文所提供之BCMA結合分子靶向與第二或另外之抗原相同之腫瘤類型上的抗原。在一些實施例中，第二或另外之抗原亦可為通用腫瘤抗原，或可為對一種腫瘤類型具特異性之腫瘤抗原。
例示性第二或另外之抗原包括CD4、CD5、CD8、CD14、CD15、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD46、CD52、CD54、CD74、CD80、CD126、CD138、B7、MUC-1、Ia、HM1.24、HLA-DR、肌腱蛋白、血管生成因子、VEGF、PIGF、ED-B纖維黏連蛋白、致癌基因、致癌基因產物、CD66a-d、壞死抗原、Ii、IL-2、T101、TAC、IL-6、ROR1、TRAIL-R1 (DR4)、TRAIL-R2 (DR5)、tEGFR、Her2、L1-CAM、間皮素、CEA、B型肝炎表面抗原、抗葉酸受體、CD24、CD30、CD44、EGFR、EGP-2、EGP-4、EPHa2、ErbB2、ErbB3、ErbB4、erbB二聚體、EGFR vIII、FBP、FCRL5、FCRH5、胎兒乙醯膽鹼受體、GD2、GD3、G蛋白偶聯受體C類5族成員D (GPRC5D)、HMW-MAA、IL-22R-α、IL-13R-α2、kdr、κ輕鏈、Lewis Y、L1-細胞黏附分子(L1-CAM)、黑素瘤相關抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、優先表現之黑素瘤抗原(PRAME)、存活素(survivin)、EGP2、EGP40、TAG72、B7-H6、IL-13受體a2 (IL-13Ra2)、CA9、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6整合素、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒AchR、NKG2D配位體、雙重抗原、與通用標籤締合之抗原、睪丸癌抗原、MUC1、MUC16、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胚抗原(oncofetal antigen)、VEGF-R2、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、前列腺特異性抗原、PSMA、Her2/neu、雌激素受體、孕酮受體、肝配蛋白B2、CD123、c-Met、GD-2、O-乙醯化GD2 (OGD2)、CE7、威爾姆斯腫瘤1 (WT-1)、週期蛋白、週期蛋白A2、CCL-1、hTERT、MDM2、CYP1B、WT1、活素(livin)、AFP、p53、週期蛋白(D1)、CS-1、BAFF-R、TACI、CD56、TIM-3、CD123、L1-細胞黏附分子、MAGE-A1、MAGE A3、週期蛋白(諸如週期蛋白A1 (CCNA1))及/或病原體特異性抗原、生物素化分子，由HIV、HCV、HBV及/或其他病原體表現之分子，及/或在一些態樣中，新抗原決定基或其新抗原。在一些實施例中，抗原與通用標籤締合或為通用標籤。
在一些態樣中，抗原(例如第二或另外之抗原，諸如疾病特異性抗原及/或相關抗原)表現於多發性骨髓瘤上，該抗原諸如G蛋白偶聯受體C類5族成員D (GPRC5D)、CD38 (環狀ADP核糖羥化酶)、CD138 (多配體蛋白聚糖-1，多配體蛋白聚糖，SYN-1)、CS-1 (CS1、CD2亞群1、CRACC、SLAMF7、CD319及19A24)、BAFF-R、TACI及/或FcRH5。其他例示性多發性骨髓瘤抗原包括CD56、TIM-3、CD33、CD123、CD44、CD20、CD40、CD74、CD200、EGFR、β2-微球蛋白、HM1.24、IGF-1R、IL-6R、TRAIL-R1及IIA型活化素受體(ActRIIA)。參見Benson及Byrd, J. Clin. Oncol. (2012) 30(16): 2013-15；Tao及Anderson, Bone Marrow Research (2011):924058；Chu等人，Leukemia (2013) 28(4):917-27；Garfall等人，Discov Med. (2014) 17(91):37-46。在一些實施例中，抗原包括存在於淋巴腫瘤、骨髓瘤、AIDS相關淋巴瘤及/或移植後淋巴組織增生上之彼等抗原，諸如CD38。針對此類抗原之抗體或抗原結合片段為已知的，且包括例如美國專利第8,153,765號；第8,603477號、第8,008,450號；美國公開案第US20120189622號或第US20100260748號；及/或國際PCT公開案第WO2006099875號；第WO2009080829號或第WO2012092612號或第WO2014210064號中所描述之彼等抗體或抗原結合片段。在一些實施例中，此類抗體或其抗原結合片段(例如scFv)含於多特異性抗體、多特異性嵌合受體(諸如多特異性CAR)及/或多特異性細胞中。
II. 對聚核苷酸(例如編碼BCMA CAR之聚核苷酸)進行最佳化及製造的方法，及經最佳化之聚核苷酸
本文提供用於使用於表現及/或治療用途之聚核苷酸最佳化的方法，及例如根據該等方法最佳化之聚核苷酸。在一些實施例中，所提供之方法或最佳化減小經轉錄RNA (諸如信使RNA (mRNA))之異質性及/或增加其同質性，例如當在細胞中，諸如在特定細胞類型中，諸如在哺乳動物中，例如人類細胞類型，諸如人類T細胞，諸如初代人類T細胞或T細胞株中表現聚核苷酸時減小異質性及/或增加同質性。在一些實施例中，用於使聚核苷酸最佳化的方法包括鑑別及移除或改變一或多個隱蔽剪接位點之序列，諸如供體剪接位點或受體剪接位點中之一或兩者的方法。在一些實施例中，該等方法可另外或進一步包括密碼子最佳化。在一些實施例中，密碼子最佳化可在減小經轉錄RNA (例如mRNA)之異質性，諸如藉由移除或消除所預測之剪接位點來減小的方法之前及/或之後執行。在一些實施例中，密碼子最佳化整合於減小經轉錄RNA之異質性之方法的任何一或多個步驟中。在一些實施例中，減小異質性，諸如藉由移除或消除所預測之剪接位點來減小異質性的方法可在密碼子最佳化之後執行。在一些實施例中，提供以下方法，其中編碼轉殖基因之聚核苷酸，包括編碼所提供之抗BCMA CAR多肽中之任一者的聚核苷酸可經最佳化以用於表現及/或用於治療用途。在一些實施例中，聚核苷酸經修飾以使密碼子使用最佳化。在一些實施例中，聚核苷酸經密碼子最佳化以用於在人類細胞，諸如人類T細胞，諸如初代人類T細胞中表現。在一些實施例中，聚核苷酸(諸如編碼本文所提供之抗體、受體(諸如抗原受體，諸如嵌合抗原受體)及/或BCMA特異性結合蛋白中之任一者的彼等聚核苷酸)經修飾或已經修飾以減小異質性或含有本文所觀測到之一或多個核酸序列(諸如藉由最佳化方法)來引起多肽(諸如CAR)之特徵與含有不同參考序列或尚未經最佳化之序列的彼等多肽相比得到改良。在此類特徵當中包括RNA異質性改良，諸如由存在一或多個剪接位點(諸如一或多個隱蔽剪接位點)而引起之異質性改良；及/或所編碼之蛋白質的表現及/或表面表現改良，諸如在經工程改造以表現該等多肽之細胞或不同治療性細胞組合物當中的表現之量、均勻性或一致性增加。在一些實施例中，聚核苷酸可經密碼子最佳化以用於在人類細胞中表現。
在自然界中，哺乳動物細胞中之基因組核酸序列一般與轉錄共同或緊隨轉錄經歷處理，其中在一些情況下，自基因組脫氧核糖核酸(DNA)序列轉錄初生前驅信使核糖核酸(前驅mRNA)藉助於剪接來加以編輯以移除內含子，後接在真核細胞中進行外顯子接合。剪接位點之共同序列為已知的，但在一些態樣中，界定剪接位點之具體核苷酸資訊可能較複雜，且基於可獲得之方法可能無法顯而易見。隱蔽剪接位點為基於標準共同序列無法預測且可變地進行活化之剪接位點。因此，在於真核細胞中表現時，前驅mRNA在隱蔽剪接位點處之可變剪接在經轉錄mRNA產物中導致異質性。
用於表現轉殖基因而產生之聚核苷酸通常由不含內含子之核酸序列，諸如互補DNA (cDNA)或其部分來構築。因此，預期此類序列不發生剪接。然而，在cDNA序列內存在隱蔽剪接位點可能在經轉錄mRNA中導致非預期或非所需之剪接反應及異質性。此類異質性引起轉譯非預期之蛋白質產物，諸如展現經調節之表現及/或活性的具有可變胺基酸序列之截短之蛋白質產物。
亦提供用於測定經轉錄核酸(諸如編碼或含有轉殖基因或編碼重組蛋白之核酸)之異質性的方法及途徑。在一些實施例中，該等方法包括測定包括經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)之全部或一部分及/或3′非轉譯區(3′ UTR)之全部或一部分的經轉錄核酸序列的異質性。本文亦提供基於經轉錄核酸之異質性來鑑別剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)之存在的方法。亦提供使用所提供的測定轉殖基因之經轉錄核酸之異質性的方法來鑑別用於剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)移除之轉殖基因候選者的方法。亦提供減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法。
本文亦提供鑑別用於一或多個剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)移除或修飾之轉殖基因或重組蛋白或核酸候選者的方法，該等鑑別諸如基於所測定的例如轉殖基因之經轉錄核酸之異質性來進行。
亦提供用於減小轉殖基因之經轉錄核酸(例如轉錄本) (例如，所表現之轉殖基因轉錄本)或其他核酸之異質性的方法及途徑。此類方法及途徑可包括根據所提供之方法來鑑別用於剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)移除之轉殖基因候選者，及在轉殖基因內鑑別一或多個潛在剪接供體及/或剪接受體位點。在所提供之方法的實施例中，剪接供體及/或剪接受體位點可處於經轉錄核酸(例如轉錄本)之經轉譯區及/或非轉譯區中。
在一些實施例中，消除剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)可使轉殖基因產物，諸如自轉殖基因轉譯之多肽，諸如抗BCMA CAR多肽之表現改良或最佳化。在所編碼之轉殖基因，諸如所編碼之BMCA CAR分子的隱蔽剪接位點處剪接可導致蛋白質表現(例如在細胞表面上之表現)降低及/或功能降低(例如細胞內信號傳導降低)。本文提供編碼抗BMCA CAR蛋白質之聚核苷酸，其已經最佳化以減少或消除隱蔽剪接位點。本文亦提供編碼抗BCMA CAR蛋白質之聚核苷酸，其已經最佳化以用於密碼子表現；及/或其中存在一或多個序列，諸如藉由本文關於剪接位點之方法或觀測所鑑別的序列；及/或其中不存在所鑑別之剪接位點，諸如本文所鑑別之任一剪接位點。在所提供之聚核苷酸當中為當在某些條件下表現及/或引入至指定細胞類型(諸如人類T細胞，諸如初代人類T細胞)及含有此類多肽及/或展現此類特性之細胞及組合物及製品中時展現RNA異質性或剪接形式低於某一程度的彼等聚核苷酸。
在一些實施例中，減小RNA異質性或移除潛在剪接位點包含對聚核苷酸進行修飾。在一些實施例中，與參考聚核苷(諸如編碼相同多肽的未經修飾之聚核苷酸)相比，修飾包括一或多個核苷酸修飾，諸如置換或取代。在一些實施例中，參考聚核苷酸為其中經轉錄RNA (例如mRNA)在於細胞中表現時展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性的聚核苷酸。在一些實施例中，所提供之方法可產生其中經轉錄RNA之RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%的聚核苷酸。在一些實施例中，所提供之方法產生其中經轉錄RNA之RNA同質性為至少70%、75%、80%、85%、90%或95%或大於95%的聚核苷酸。
A. 量測及減小RNA異質性之方法
本文提供用於量測、評估及/或減小核酸(諸如經轉錄RNA)之RNA異質性的方法、途徑及策略，例如，當在特定細胞類型中或情形下表現時的方法、途徑及策略，以及展現此類異質性及/或其風險與參考聚核苷酸相比減小之聚核苷酸。在一些實施例中，可評定參考聚核苷酸之RNA異質性，諸如藉由如此章節中所描述之方法來進行評定。在一些實施例中，所提供之途徑涉及鑑別RNA (例如mRNA)異質性或其可能性，諸如在特定細胞中或情形下鑑別，諸如鑑別歸因於隱蔽剪接位點之異質性。在一些態樣中，此類異質性藉由以下來加以鑑別：使用對5′非轉譯區(5′ UTR) (其對應於位於經轉錄RNA中轉殖基因上游之元件(諸如啟動子)的一部分)具特異性之第一引子及對3′非轉譯區(3′ UTR) (其位於經轉錄RNA序列中所表現之轉殖基因的下游)具特異性或對轉殖基因內之序列具特異性之第二引子來使RNA轉錄本擴增。在一些實施例中，該等方法涉及使用至少一種5′及3′引子對使經轉錄核酸擴增，其中至少一對包含與經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與經轉錄核酸之3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子，以產生一或多種擴增產物。在一些實施例中，該等方法涉及偵測擴增產物，其中存在來自至少一種5′及3′引子對的兩種或超過兩種擴增產物指示該等擴增產物中之異質性。在一些實施例中，在轉錄本中所偵測到之差異為擴增轉錄本之長度不同。在一些實施例中，在轉錄本中所偵測到之差異為層析概況中之差異。在下文描述用於鑑別具有RNA異質性之聚核苷酸的例示性方法。在一些實施例中，該等方法包含為了經修飾以減小異質性來評估RNA異質性。在一些實施例中，選擇展現RNA異質性大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%之聚核苷酸用於核苷酸修飾以移除一或多個剪接位點，諸如一或多個隱蔽剪接位點。
1. 量測RNA異質性
RNA異質性可藉由本文所提供或描述或已知之多種方法中的任一者來加以測定。在一些實施例中，經轉錄核酸之RNA異質性係藉由以下來加以測定：諸如藉由逆轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)使經轉錄核酸擴增，後接在一或多種擴增產物中偵測一或多個差異，諸如尺寸差異。在一些實施例中，RNA異質性係基於不同地尺寸化之擴增產物的數目或各種不同尺寸化之擴增產物的比例來加以測定。舉例而言，在一些實施例中，RNA異質性係藉由測定不同尺寸化之擴增產物的數目、量或比例與總擴增產物之數目或量相比的結果來加以量化。在一些情況下，全部或基本上全部之特定轉錄本測定為尺寸相等，且在此情況下，RNA異質性較低。在一些情況下，存在多種不同尺寸化之轉錄本，或與在無隱蔽或非所需剪接事件的情況下所預測的擴增產物之尺寸相比，較大比例之特定轉錄本具有不同尺寸。在一些實施例中，RNA異質性可藉由用與所預測的擴增產物之尺寸相比具有不同尺寸之所有擴增產物的總數或量除以所有擴增產物之總數或量來加以計算。在一些實施例中，所預測的轉錄本或擴增產物之尺寸係來自不含或未預測為含有隱蔽剪接位點之RNA。在一些實施例中，所預測的轉錄本或擴增產物之尺寸考量所需或有意置放之一或多個剪接位點。
在一些實施例中，RNA (諸如總RNA或細胞質聚腺苷酸化RNA)係自表現待最佳化之轉殖基因的細胞採集，且藉由逆轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)，使用對5′非轉譯區(5′ UTR) (在一些情況下，其對應於位於經轉錄RNA中轉殖基因上游的表現載體中之啟動子序列的一部分)具特異性之引子及對3′非轉譯區(3′ UTR) (其位於經轉錄RNA序列中所表現之轉殖基因的下游)具特異性之引子或對轉殖基因內之序列具特異性之引子來進行擴增。在特定實施例中，採用至少一個與5′非轉譯區(UTR)中之序列互補的引子及至少一個與3′非轉譯區(UTR)中之序列互補的引子來使轉殖基因擴增。在圖 21A 中提供對以下的例示性描繪：使用對5′ UTR具特異性之正向引子及對具3′ UTR中之核苷酸序列特異性之引子進行的轉錄本之擴增及所得產物，及在不發生剪接事件的情況下所預測之擴增產物。在圖 21B 中展示對例示性多個擴增產物(亦即，異質性)之例示性描繪，該等擴增產物係由使用對5′ UTR及3′ UTR具特異性之引子使具有其中經轉錄啟動子序列含有已知剪接供體位點(P-SD)及已知剪接受體位點(P-SA)之5′ UTR、含有未知(隱蔽)剪接供體位點(T-SD)及兩個未知(隱蔽)剪接受體位點(T-SA)之經轉錄轉殖基因及3′ UTR的轉錄本擴增來產生。
對5′非轉譯區(UTR)具特異性之例示性引子包括針對於轉殖基因之啟動子內之序列的引子。在一些實例中，對EF1a/HTLV啟動子具特異性之引子。對EF1a-HTLV啟動子具特異性之例示性正向引子闡述於SEQ ID NO:763中。
對3′非轉譯區(UTR)具特異性之例示性引子包括針對於位於轉殖基因下游之3′轉錄後調控元件的引子。例示性3′轉錄後調控元件包括SEQ ID NO:636中所闡述之土撥鼠肝炎病毒(WHP)轉錄後調控元件(WPRE)。對WPRE具特異性之例示性正向引子闡述於SEQ ID NO:764中。
在一些實施例中，多個引子對可用於使轉殖基因擴增，諸如用於較長轉殖基因。在一些實施例中，使擴增產物之滑動窗摺疊的正向及反向引子之依序對或巢式對可用於獲得序列之完全及重疊覆蓋。通常，引子經設計以使長度大致1.5-6 kb、2-6 kb或3-6 kb之轉殖基因擴增。在圖 21C 中提供對使用巢式引子對之轉錄本擴增的例示性描繪。
隨後分析擴增核酸序列在擴增轉錄本長度方面之異質性。在一些實例中，異質性係藉由所表現序列之條帶的數目及強度確定。在一些實施例中，在表現時具有剪接事件之RNA序列產生具有不同遷移率之多重條帶。在一些實施例中，在對不具有任何未預測之剪接事件的序列所預測之遷移率處偵測到主要條帶，且另1或多個強度及遷移率不同之條帶指示在轉殖基因序列內出現一或多個隱蔽剪接事件。
熟練技術人員可解析RNA (諸如信使RNA)，且藉由若干方法來分析其異質性。非限制性例示性方法包括瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型離心、場流動分級分離及層析，諸如尺寸排阻層析或液相層析。
上文技術之一或多個步驟可在變性條件、部分變性條件或非變性條件下執行。變性條件可包括引起核酸轉錄本(例如mRNA)因溫度、離液劑(包括鹽)、有機試劑以及用於變性之其他機制而變性的條件。在熱變性條件下，可施加高溫。高溫可為足以使分子內氫鍵變性的溫度，以使得二級或三級結構等等變化或喪失。舉例而言，溫度或熱變性條件可包括25攝氏度至95攝氏度、35至85攝氏度、55至75攝氏度或彼等範圍內之另一範圍的溫度。類似地，可視需要使用更高或更低溫度以引起所需程度之變性。溫度或熱變性條件亦可視核酸轉錄本之屬性(identity)而定，以使得不同溫度用於不同核酸轉錄本或核酸轉錄本類型。變性條件亦可包括使用離液劑，諸如過氯酸鋰及其他過氯酸鹽、氯化鈲及其他鈲鹽、脲、丁醇、乙醇、乙酸鋰、氯化鎂、苯酚、丙醇、十二烷基硫酸鈉、硫脲或其他。變性條件可進一步包括有機變性劑，諸如二甲亞碸(DMSO)、乙腈及乙二醛。另外，變性條件可包括此等類型之變性條件中之兩者或超過兩者的組合。RNA異質性測定技術中之任何一或多個步驟可在高溫下或在環境溫度下，在存在或不存在離液劑或有機試劑的情況下執行。
a) 凝膠電泳
在一些實施例中，RNA轉錄本拓樸結構及表觀(流體動力學)尺寸可藉由凝膠電泳(諸如瓊脂糖凝膠電泳)來加以分析。在一些實例中，RNA轉錄本可在0.05%至2%瓊脂糖凝膠(諸如1.2%瓊脂糖凝膠)上進行解析，且藉由染色或使用對特定序列具特異性之探針來進行可視化。在一些實施例中，RNA轉錄本可藉由凝膠電泳直接進行評定，或可在擴增(諸如定量擴增方法)之後進行評定。用於使瓊脂糖凝膠上之核酸可視化的核酸染色劑為熟知的。例示性染色劑包括BlueView™核酸染色劑(Millipore Sigma)、SYBR®金色核酸染色劑(ThermoFisher)、SYBR®綠色核酸染色劑(Millipore Sigma)、SYBR®綠色II (ThermoFisher)、PicoGreen®核酸染色劑(Invitrogen)及溴化乙錠：在蒸餾水中製備為0.5 µg/mL或併入至凝膠中。在一些實例中，使用Quant-iT™ PicoGreen®結合對核酸進行染色，後接對擴增產物之螢光偵測及定量。瓊脂糖凝膠方法給出較大量但解析度較小之尺寸分佈量度。在一些實施例中，藉由瓊脂糖凝膠電泳解析之核酸片段可藉由用於RNA之北方墨點法(Northern blot)或用於擴增逆轉錄酶-聚合酶鏈反應(RT-PCR)產物之南方墨點法(Southern blot)來可視化。
b) 基於晶片之毛細電泳
可使用基於晶片之毛細電泳(例如使用AGILENT 2100 BIOANALYZER™)，其為用於監測RNA轉錄本完整性及其尺寸分佈的快速及常規方法。分離係基於流體動力學尺寸及電荷，且受RNA轉錄本之核苷酸長度及摺疊結構影響。在一個實施例中，該方法包括將樣品與電解質介質一起遞送至晶片通道中，及向該晶片施加使該RNA轉錄本及雜質經由該通道遷移之電場。RNA轉錄本之電泳遷移率與雜質不同，以使得RNA轉錄本遷移通過通道之速率與雜質遷移通過通道之速率不同。RNA轉錄本之電泳遷移率與RNA轉錄本離子電荷成比例，且與電解質介質中之摩擦力成反比。該方法亦包括自晶片收集包含RNA轉錄本之樣品及包含雜質之一或多個各別樣品部分。另外，該方法包括表徵包含RNA轉錄本之樣品及包含雜質之一或多個各別樣品部分中的至少一者的態樣。表徵可包括例如對電荷變異體進行量化。
c) 分析型超速離心(AUC)
分析型超速離心(AUC)為用於量測分子量分佈之溶液相方法，其不具有在SEC、瓊脂糖或其他方法中可能由基質(樹脂或凝膠)相互作用而引入之潛在偽影。使用平衡AUC及沈降超速離心兩者，且後者提供與RNA轉錄本之尺寸及形狀兩者相關的沈降係數。配備有掃描UV/可見光光學元件之BECKMAN™分析型超速離心機用於分析RNA轉錄本。
d) 場流動分級分離(FFF)
另一種用於評定流體動力學尺寸分佈之溶液相方法為場流動分級分離(FFF)。FFF為分離技術，其中向泵送通過長且窄之通道的流體懸浮液或溶液施加垂直於流動方向之場，以使得存在於流體中之聚核苷酸(RNA轉錄本)在由該場施加之力下分離。場可為通過半透膜之不對稱流、重力流、離心流、熱梯度流、電流、磁性流等。
e) 層析
層析亦可用於偵測RNA轉錄本長度之異質性。用於測定mRNA異質性的尺寸排阻層析及液相層析之方法描述於WO2014144711中，其以引用之方式併入本文中。
B. 使聚核苷酸(例如編碼BCMA CAR之聚核苷酸)最佳化的方法
在一些實施例中，所提供之方法包括對聚核苷酸進行最佳化及/或修飾以例如減小RNA異質性及/或移除或消除隱蔽或非所需剪接位點。在一些態樣中，提供減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法，該方法涉及鑑別用於剪接位點移除之轉殖基因候選者，諸如藉由上文在章節I.A.中所描述之方法來鑑別；鑑別一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點；及對在一或多個所鑑別之剪接供體位點處或附近的核酸序列進行修飾，藉此產生經修飾之聚核苷酸。在一些態樣中，該等方法亦涉及評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。在一些實施例中，該等方法亦包括重複上文之一或多個步驟，直至轉錄本之異質性與如所測定之轉錄本初始異質性(諸如在修飾之前)相比減小為止。
在一些實施例中，減小異質性，諸如藉由移除或消除所預測之剪接位點來減小的方法可在密碼子最佳化之後或對非密碼子最佳化之RNA執行。在一些態樣中，該等方法涉及鑑別剪接位點，諸如一或多個潛在剪接供體及/或受體位點，及修飾或改變RNA序列(例如，藉由置換或取代剪接位點處或附近之一或多個核苷酸來進行。在一些實施例中，密碼子最佳化可在減小經轉錄RNA (例如mRNA)之異質性，諸如藉由移除或消除所預測之剪接位點來減小的方法之前及/或之後執行。在一些實施例中，轉錄本是否為用於減小RNA異質性之候選者係基於量測RNA異質性之方法，例如，如本文章節II.A中所描述之方法來加以測定。在一些態樣中，偵測為具有異質性之經轉錄核酸鑑別為用於一或多個剪接位點之移除的轉殖基因候選者。在一些實施例中，當轉殖基因候選者之經轉錄核酸在於細胞中表現時展現至少或至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或超過75%異質性時，轉殖基因序列可為用於減小異質性之候選者。
1. 減小RNA異質性之方法
提供減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法。在一些實施例中，該等方法涉及鑑別一或多個潛在剪接供體及/或剪接受體位點，及對在一或多個所鑑別之剪接供體位點處或附近的核酸序列進行修飾。在一些實施例中，該等方法亦涉及評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。在一些態樣中，可重複本文所描述之一或多個步驟，例如直至潛在RNA異質性與起始或未經修飾之轉錄本相比減小為止。
a) 剪接位點鑑別
在一些態樣中，存在於轉錄本(諸如轉殖基因轉錄本)中之潛在隱蔽剪接位點(剪接供體及/或受體位點)的存在可在於細胞中表現時引起轉錄本之RNA異質性。在一些實施例中，該等方法涉及鑑別可能存在於轉殖基因轉錄本中的一或多個潛在剪接位點，其不為所需的且/或可在轉錄本密碼子最佳化時由各種基礎(underlying)序列在轉殖基因轉錄本中產生及/或在轉錄中藉由突變或錯誤或差錯產生。在所提供之實施例的一些態樣中，剪接供體位點及剪接受體位點獨立地加以鑑別。在一些實施例中，剪接受體及/或供體位點為典型、非典型及/或隱蔽之剪接受體及/或供體位點。
在一些實施例中，所提供之方法包括在可聚核苷酸，諸如編碼展現RNA異質性或含有非所需物之轉殖基因(諸如重組受體)的聚核苷酸中鑑別一或多個潛在剪接位點(例如，典型、非典型及/或隱蔽之剪接受體及/或供體位點或分支位點)。亦提供此類剪接位點之數目與此類參考聚核苷酸相比減少的多肽。
在一些態樣中，在核酸序列中鑑別一或多個剪接位點為反覆過程。在一些實施例中，剪接位點可使用剪接位點及/或密碼子最佳化預測工具來加以鑑別，諸如藉由向能夠在計算上或演算法上比較起始或參考序列的資料庫、基因合成供應商或其他來源提交編碼轉殖基因(諸如BCMA結合受體，例如抗BCMA CAR)之起始或參考序列以鑑別或預測剪接位點及/或用於密碼子最佳化及/或剪接位點移除。在一些實施例中，在修飾序列以用於密碼子最佳化及/或剪接位點移除之後，使用一或多種其他或另外之剪接位點預測工具對序列(諸如經修正或經修飾之核酸序列)進行一或多種其他評定，以進一步評估剪接位點移除，諸如隱蔽剪接位點。
在一些態樣中，RNA異質性可由存在於真核細胞中之剪接體的活性產生。在一些態樣中，剪接通常在由剪接體催化之一系列反應中進行。剪接位點之共同序列為已知的，但在一些態樣中，界定剪接位點之具體核苷酸資訊可能較複雜，且基於可獲得之方法可能無法顯而易見。隱蔽剪接位點為基於標準共同序列無法預測且可變地進行活化之剪接位點。因此，在於真核細胞中表現時，前驅mRNA在隱蔽剪接位點處之可變剪接在經轉錄mRNA產物中導致異質性。在一些情況下，在剪接體內含子內，剪接事件需要供體位點(通常處於內含子之5'端)、分支位點(處於內含子之3'端附近)及受體位點(內含子之3'端)。剪接供體位點可包括處於內含子之5'端處的GU序列，其具有較大之保守性較低區。處於內含子之3'端處的剪接受體位點可以AG序列終止。
在一些實施例中，剪接位點(包括潛在隱蔽剪接位點)可藉由將序列與已知剪接位點序列(諸如序列資料庫中之彼等序列)相比來加以鑑別。在一些實施例中，剪接位點可在計算上藉由提交核苷酸序列用於由剪接位點預測工具分析來加以鑑別，該等剪接位點預測工具諸如Human Splice Finder (Desmet等人，Nucl. Acids Res. 37(9):e67 (2009))、神經網路剪接位點預測工具NNSplice (Reese等人，J. Comput. Biol. , 4(4):311 (1997))、GeneSplicer (Pertea等人，Nucleic Acids Res. 2001 29(5): 1185-1190)或NetUTR (Eden及Brunak, Nucleic Acids Res. 32(3):1131 (2004))，其鑑別潛在剪接位點及此類位點處之剪接事件機率。另外之剪接預測工具包括RegRNA、ESEfinder及MIT剪接預測器。剪接位點預測工具(諸如GeneSplicer)已在用於不同物種(諸如人類、黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)、惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)、阿拉伯芥(Arabidopsis thaliana)及稻米之資料庫上成功地進行訓練及/或測試。在一些實施例中，不同預測工具可經調適以用於不同資料庫上之不同程度及/或用於不同物種。在一些實施例中，一或多種預測工具係基於其在某些資料庫中及/或用於某些物種之效用來加以選擇。參見例如Saxonov等人，(2000) Nucleic Acids Res., 28, 185-190。
在一些實施例中，一或多個剪接位點預測工具經選擇以用於確定潛在剪接供體及/或受體位點。在一些實施例中，可採用可在本地運行；可在使用者位點處用一組資料重新訓練；可使用用於特定物種(諸如人類)之資料庫，可經編譯以用於多個平台，允許對用於序列選擇進行即時預測及/或本身為可修改特定工具或外掛程式之OSI註冊開放原始碼軟體的剪接位點預測工具。可採用之例示性工具包括NNSplice、GeneSplicer或兩者。.
在一些態樣中，剪接位點預測工具用於在含有轉殖基因序列之序列(諸如聚核苷酸序列)中鑑別潛在剪接供體及/或剪接受體位點之清單。在一些態樣中，預測工具亦可對聚核苷酸中之一或多個序列產生一或多個預測得分，其可指示該一或多個序列成為剪接供體或受體位點序列之可能性。
在一些實施例中，該方法涉及將特定剪接位點之預測得分與閾值得分或參考得分相比，以確定或鑑別本身為用於消除或移除之候選者的特定剪接位點。舉例而言，在一些實施例中，當預測得分大於或不小於閾值得分或參考得分時，將所預測之剪接位點鑑別為潛在剪接位點。在一些態樣中，消除或移除特定剪接位點之考慮因素包括與參考得分或閾值得分相比之預測得分；及特定剪接位點是否為所需或有意的(舉例而言，當剪接事件更有利或調控轉錄及/或轉譯需要剪接事件時)。在一些態樣中，當確定用於消除或移除特定供體及/或受體位點時，考慮所得剪接變異體喪失所需功能或功能受損之可能性。在一些態樣中，一或多個潛在剪接供體及/或剪接受體位點展現剪接事件或剪接事件機率之得分為約或至少約0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95或1.0 (例如，在最大值為1.0之標度上)，且該位點可為用於剪接位點消除或移除之候選者。在一些態樣中，在一或多個潛在剪接供體及/或剪接位點處之得分(例如，由GeneSplicer使用之得分)係基於由真馬爾可夫模型(Markov model)返回的該序列之對數幾率得分與由假馬爾可夫模型計算之得分之間的差異。在特定實施例中，剪接供體位點及剪接受體位點獨立地或個別地進行評估。在一些實施例中，剪接供體位點及剪接受體位點以剪接供體/受體對之形式進行評估。
b) 剪接位點消除
在一些實施例中，所提供之方法涉及消除或消除一或多個剪接供體及/或剪接受體位點，諸如可能涉及非所需或引起非所需RNA異質性之隱蔽剪接事件的潛在剪接供體及/或受體位點。在一些實施例中，消除一或多個剪接位點包含對處於本身為移除候選者之剪接供體及/或受體位點處、含有該等位點或處於該等位點附近的一或多個核苷酸進行修飾(例如，藉由取代或置換)。在一些態樣中，處於剪接位點處、含有該等位點或處於該等位點附近之密碼子內的特定核苷酸經修飾(例如，經取代或置換)。在一些態樣中，修飾(諸如取代或置換)保留或保持由該位點處特定密碼子編碼之胺基酸，同時移除潛在剪接供體及/或受體位點。
在一些實施例中，處於用於修飾之剪接位點處或附近的密碼子包含涉及潛在剪接位點處兩個核苷酸中之一或兩者的一或多個密碼子(在一些情況下，稱為「剪接位點密碼子」)。當預測潛在剪接在密碼子中之兩個核苷酸之間發生時，該密碼子為此剪接位點之唯一剪接位點密碼子。若預測潛在剪接在兩個相鄰密碼子之間，例如在第一密碼子之最後一個核苷酸與下一密碼子之第一核苷酸之間發生，則該兩個密碼子均為剪接位點密碼子。舉例而言，對於預測為處於兩個密碼子之邊界處的剪接位點，該兩個相鄰密碼子均可為用於核苷酸修飾之候選者。在一些實施例中，一或多個密碼子包含一個剪接位點密碼子。在一些實施例中，一或多個密碼子包含兩個剪接位點密碼子。在一些實施例中，該方法涉及藉由修飾一個或兩個剪接位點密碼子來消除潛在剪接供體位點。在一些實施例中，該方法涉及藉由修飾一個或兩個剪接位點密碼子來消除潛在剪接受體供體位點。在一些實施例中，例如當剪接位點密碼子不存在同義密碼子時，該剪接位點處之一個或兩個密碼子未經修飾。在一些實施例中，若不存在可供用於特定剪接位點密碼子之同義密碼子，則鄰近密碼子中之一或多個核苷酸可經修飾。在一些實施例中，經修飾之一或多個密碼子包括剪接位點密碼子，其中該修飾包含將該剪接位點處之一個或兩個核苷酸變為一或多個不同核苷酸。在一些實施例中，在一些實施例中，該方法涉及藉由修飾一個或兩個剪接位點密碼子來消除剪接供體位點，其中該修飾不將剪接位點處之一或兩個核苷酸變為不同核苷酸，而修飾鄰近核苷酸，例如與剪接位點相鄰之密碼子的一部分。在一些實施例中，可經修飾之鄰近或相鄰核苷酸包括修飾本身為鄰近或相鄰密碼子之一部分的核苷酸，諸如處於剪接位點密碼子上游或下游之一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個密碼子內的密碼子。
在一些情況下，可採用聚核苷酸之人工修飾，同時保持所編碼之胺基酸序列，以降低所預測之剪接位點的機率。在一些實施例中，具有至少80%、85%、90%或95%之剪接位點機率的所預測之剪接位點中的一或多者經人工修飾以降低剪接事件之機率。在一些實施例中，一或多個修飾係藉由對1、2、3、4、5、6或7個核苷酸進行核苷酸置換或取代。在一些實施例中，修飾處於剪接供體位點之接合處或處於剪接受體位點之接合處。在一些實施例中，一或多個核苷酸修飾中之至少一者處於剪接受體及/或剪接供體位點之剪接位點接合處的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基內。在一些實施例中，可產生隱蔽剪接位點之機率降低的經修飾之核酸序列的文庫。在一些實施例中，剪接供體位點及剪接受體位點以剪接供體/受體對之形式進行評估。在特定實施例中剪接供體位點及剪接受體位點獨立地或個別地進行評估，而不作為剪接供體/受體對之部分。在一些實施例中，一或多個所預測之剪接位點未得到消除。在一些實施例中，轉錄本之啟動子區內的剪接位點(諸如已知或所預測之剪接位點)未得到消除。
在一些實施例中，該方法涉及藉由修飾一或兩個剪接位點密碼子或一或多個鄰近或相鄰密碼子(例如，若剪接位點密碼子無法獲得同義密碼子)來消除一或多個潛在供體剪接位點。在一些實施例中，該方法涉及藉由修飾一或兩個剪接位點密碼子或一或多個鄰近或相鄰密碼子(例如，若剪接位點密碼子無法獲得同義密碼子)來消除一或多個潛在受體剪接位點。在一些實施例中，進行修飾之鄰近或相鄰密碼子包括處於剪接位點密碼子上游或下游之一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個密碼子內的密碼子，諸如距離剪接位點一個、兩個或三個密碼子內之密碼子。在一些實施例中，該等方法可包括移除或消除用於剪接之潛在分支位點。在一些態樣中，處於分支位點處或附近之密碼子內的核苷酸可經修飾，例如經取代或置換，以消除隱蔽剪接及/或減小RNA異質性。在一些實施例中，修飾一或多個核苷酸可涉及取代或置換可能涉及剪接之核苷酸中的一者(諸如在剪接供體位點、剪接受體位點或剪接分支位點處)，以使得保持由密碼子編碼之胺基酸，且核苷酸取代或置換不改變由聚核苷酸編碼之多肽序列。在一些情況下，密碼子中之第三位置比其他兩個位置更簡併。因此，各種同義密碼子可編碼特定胺基酸(參見例如下文章節II.B.2)。在一些實施例中，修飾包括用其中引入聚核苷酸之細胞的物種(例如人類)中所用之同義密碼子置換該密碼子。在一些實施例中，物種為人類。在一些實施例中，一或多個密碼子經物種中最頻繁使用之相應同義密碼子或使用頻率與相應密碼子類似(例如，使用頻率最接近)之同義密碼子置換(參見例如下文章節II.B.2)。
在一些實施例中，該等方法亦涉及在所提出之初始修飾之後，評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。在一些態樣中，可再次評估所提出之修飾，以在修飾及/或密碼子最佳化之後評定所提出之修飾且鑑別任何其他潛在剪接位點。在一些態樣中，在修飾序列以用於密碼子最佳化及/或剪接位點移除之後，使用相同或一或多種其他或另外之剪接位點預測工具對序列(諸如經修正或經修飾之核酸序列)進行一或多種其他評定，以進一步評估剪接位點移除，諸如隱蔽剪接位點。在一些態樣中，為了後續步驟考慮所提出之修飾，且可使用反覆最佳化。在一些態樣中，該等方法亦包括重複鑑別及/或修飾步驟中之任一者，例如直至轉錄本之異質性與如最初所測定之轉錄本異質性相比減小為止。在一些實施例中，可在反覆評估及評定之後進行另一或不同修飾，諸如在同一密碼子處用不同核苷酸置換進行修飾或在不同位置或密碼子處進行修飾。在一些實施例中，可使用相應之不同同義密碼子，諸如在特定物種中第二最頻繁使用之同義密碼子或使用頻率與相應密碼子類似(例如，使用頻率次最接近)之密碼子(參見例如下文章節II.B.2)。
在一些態樣中，可進一步評估所提出之修飾以例如評定該修飾是否在聚核苷酸中產生非所需或另外之限制位點。在一些態樣中，可能不需要另一個限制位點，且可考慮另一或不同修飾(例如，在同一密碼子處用不同核苷酸置換進行修飾或在不同位置或密碼子處進行修飾)。在一些態樣中，避免特定限制位點，諸如指定之限制位點。在一些態樣中，若修飾不顯著減小或降低剪接位點預測得分，則可提出另一個或替代性修飾。在一些實施例中，在該等方法之一或多個反覆之後，剪接位點預測得分可減小或降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%或75%。
在本文所提供任一之方法的一些實施例中，電腦系統可用於執行一或多個步驟、工具、功能、過程或腳本。在某些實施例中，本文所提供之方法為電腦實施之方法及/或藉助於電腦來執行。在一些實施例中，用於剪接位點消除或移除之剪接位點預測、評估及修飾可藉由電腦實施之方法及/或藉由包括電腦實施之步驟的方法來執行。在一些實施例中，將序列與已知資料庫相比、計算剪接位點預測得分、確定潛在核苷酸修飾、密碼子最佳化及/或任一反覆步驟中均可藉由電腦或使用電腦實施之步驟、工具、功能、過程或腳本來實施。在特定實施例中，提供包含處理器及記憶體之電腦系統，其中該記憶體含有可操作以使處理器進行本文所提供之方法中之任何一或多個步驟的指令。在一些實施例中，該等方法包括在計算上執行，例如使用一或多種電腦程式及/或經由使用計算演算法來執行的步驟、功能、過程或腳本。
所提供之用於鑑別及/或移除可能剪接位點之方法的例示性步驟、功能、過程或腳本包括以下之一或多個步驟：選擇序列，書寫FASTA格式序列，加載密碼子表(例如，自www.kazusa.or.jp/codon，運行GeneSplicer，加載預測，解析密碼子，確定預測中之重疊，鑑別次最高使用之同義密碼子，審查限制位點，產生標註或評定其他密碼子。特定步驟可評定正向及反向股兩者。在一些態樣中，亦可考慮先前標註之剪接位點修飾，以允許反覆最佳化。在一些實施例中，可重複步驟、功能、過程或腳本中之任何一或多者。
在某些實施例中，本文所提供之方法可至少部分地使用以下電腦系統配置來進行實踐，包括單處理器或多處理器電腦系統、微型電腦、大型主機電腦，以及個人電腦、手持時計算裝置、基於微處理器及/或可編程之消費型電子裝置及其類似物，其中之每一者均可與一或多種相關裝置可操作地通信。在特定實施例中，本文所提供之方法可至少部分地在分散式計算環境中進行實踐，以使得某些任務由經由通信網路連接之遠程處理裝置執行。在分散式計算環境中，程式模組可位於本地及遠端記憶體儲存裝置中。在特定實施例中，本文所提供之方法的一些或所有步驟可在單獨電腦上進行實踐。
在特定實施例中，本文所提供之方法中的一些或所有步驟可在電腦可執行指令之通用情形下操作，該等電腦可執行指令諸如由一或多個組件執行之程式模組、外掛程式及/或腳本。一般而言，程式模組包括執行特定任務或實施特定抽象資料類型之常式、程式、目標、資料結構及/或腳本。通常，程式模組之功能性可視需要經組合或分散。在某些實施例中，可操作以使處理器進行本文所提供之方法中之任何一或多個步驟的指令可在具有電腦可執行指令之電腦可讀媒體上實施，且以經製造以傳輸此類指令以及執行該等指令之結果的信號形式例如在網路上傳輸。在一些實施例中，亦提供用於進行或執行本文所提供之方法之一或多個步驟的電腦系統、電腦可讀指令、軟體、系統、網路及/或裝置。
2. 密碼子最佳化
在一些實施例中，聚核苷酸藉由對用於在人體內表現之密碼子進行最佳化來加以修飾。在一些態樣中，可在用於剪接位點鑑別及/或剪接位點消除之步驟之前及/或之後，及/或在用於減小RNA異質性之每一反覆步驟處考慮密碼子最佳化。密碼子最佳化一般涉及使所選密碼子之百分比與人類轉移RNA之豐度(例如所公開之豐度)平衡，以例如使得不發生過載或限制。在一些情況下，此類平衡為必要或適用，此係因為大部分胺基酸係由超過一種密碼子編碼，且密碼子使用一般在生物體之間變化。在經轉染或轉導之基因或核酸與宿主細胞之間的密碼子使用差異可對自核酸分子之蛋白質表現具有影響。下表 3 闡述例示性人類密碼子使用頻率表。在一些實施例中，為了產生經密碼子最佳化之核酸序列，選擇密碼子以選擇與人類使用頻率平衡之彼等密碼子。用於胺基酸該等密碼子的冗餘使得不同密碼子編碼一種胺基酸，諸如表 3 中所描繪。在選擇用於置換之密碼子中，需要所得突變為靜默突變，以使得密碼子變化不影響胺基酸序列。一般而言，密碼子之最後一個核苷酸(例如，在第三位置處)可保持不變，而不影響胺基酸序列。
舉例而言，密碼子TCT、TCC、TCA、TCG、AGT及AGC均編碼絲胺酸(應注意，DNA中之T等效於RNA中之U)。自諸如上表 3 中所闡述之人類密碼子使用頻率，此等密碼子之相應使用頻率分別為15.2、17.7、12.2、4.4、12.1及19.5。由於TCG對應於4.4%，故若此密碼子在基因合成中常用，則此密碼子之tRNA將為限制的。在密碼子最佳化中，目標為將各密碼子之使用與其中意欲表現轉殖基因之動物物種中的正常使用頻率平衡。
C. 經最佳化之抗BCMA CAR
在一些實施例中，評定編碼轉殖基因(諸如BCMA結合受體，例如抗BCMA CAR)之起始或參考序列以用於密碼子最佳化及/或剪接位點移除。
在一些實施例中，該等方法對抗BCMA CAR進行，諸如含有對BCMA具特異性之scFv抗原結合域、間隔子(諸如SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子)、共刺激信號傳導區(諸如來自4-1BB及CD3ζ信號傳導區之共刺激信號傳導域)的CAR。對於例示性抗BCMA CAR，例示性鑑別剪接供體位點及剪接受體位點及其相應得分列出於下表3及4中。


在一些實施例中，隨後合成所得經修飾之核酸序列，且將其用於轉導細胞以測試如由RNA異質性所指示之剪接。例示性方法如下且描述於實例中。簡言之，自表現性細胞採集RNA，藉由逆轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)使其擴增，且藉由瓊脂糖凝膠電泳進行解析以測定與起始序列相比之RNA異質性。在一些情況下，可向基因合成供應商重新提交經改良之序列以用於進一步密碼子最佳化及剪接位點移除，後接進行進一步隱蔽剪接位點評估、修飾、合成及測試，直至瓊脂糖凝膠上之RNA展現最小RNA異質性為止。
在一些實施例中，所提供的用於使編碼轉殖基因(諸如本文所提供之抗BCMA CAR或本文所提供之構築體)之編碼核酸序列最佳化的方法為減小或消除隱蔽剪接位點(例示性經密碼子最佳化及剪接位點消除之間隔子序列參見例如SEQ ID NO:622)及使人類密碼子使用最佳化(經最佳化之例示性密碼子及間隔子序列參見例如SEQ ID NO:855)。例示性最佳化策略描述於實例中。
在一些實施例中，提供編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別BCMA之細胞外抗原結合域；包括下文所描述之任一抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區，其中在於細胞中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。在一些實施例中，抗原結合域包含有包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列的VH 區及VL 區。在一些實施例中，抗原結合域包含本身為或包含選自SEQ ID NO:617之VH 區胺基酸序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的VH 區；及本身為或包含選自SEQ ID NO:618之VL 區胺基酸序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的VL 區。在一些實施例中，在一些實施例中，抗原結合域包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:593、594及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:596、597及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:598、599及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:611、612及613的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:614、615及603的VL 區；或本身為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列的VH 區；及本身為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列的VL 區。在一些實施例中，由聚核苷酸編碼之嵌合抗原受體中的例示性抗原結合域包括本文表 2 之每一列中所描述的彼等抗原結合域。在任一此類實施例中，CAR之跨膜域為或包含來源於CD28之跨膜域；細胞內信號傳導區包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分，且共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
在一些實施例中，提供編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別BCMA之細胞外抗原結合域；包括下文所描述之任一抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列或由其組成或基本上由其組成，或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。在一些實施例中，抗原結合域包含有包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列的VH 區及VL 區。在一些實施例中，抗原結合域包含本身為或包含選自SEQ ID NO:617之VH 區胺基酸序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的VH 區；及本身為或包含選自SEQ ID NO:618之VL 區胺基酸序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的VL 區。在一些實施例中，在一些實施例中，抗原結合域包含有所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:593、594及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:596、597及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:598、599及595的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:601、602及603的VL 區；或所包含之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3分別包含SEQ ID NO:611、612及613的VH 區及所包含之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3分別包含SEQ ID NO:614、615及603的VL 區；或本身為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列的VH 區；及本身為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列的VL 區。在一些實施例中，由聚核苷酸編碼之嵌合抗原受體中的例示性抗原結合域包括本文表2之每一列中所描述的彼等抗原結合域。在任一此類實施例中，CAR之跨膜域為或包含來源於CD28之跨膜域；細胞內信號傳導區包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分，且共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
本文亦提供例示性經修飾之聚核苷酸，包括經修飾以用於密碼子最佳化(O)及/或剪接位點消除(SSE)之聚核苷酸。此類聚核苷酸之實例闡述於表 5 中，其中提供在剪接位點消除及密碼子最佳化之前(非最佳化)的用於例示性CAR構築體組分之例示性核苷酸(nt)序列、在剪接位點消除及最佳化後(O/SSE)的用於CAR構築體組分之核酸(nt)序列及由該等核酸序列編碼之相應胺基酸(aa)序列。組分包括IgG-κ信號傳導序列(ss)、抗BCMA scFv、間隔子區、跨膜(tm)域、共同信號傳導序列(4-1BB共同信號傳導或CD28共同信號傳導)、CD3-ζ信號傳導域(CD3-ζ)、T2A核糖體跳過元件(T2A)及截短之EGF受體(EGFRt)序列。例示性CAR構築體之聚核苷酸序列闡述於SEQ ID NO:751-756中，其編碼SEQ ID NO:757-762中所闡述之胺基酸序列。
III. 經工程改造之細胞
亦提供含有重組受體(例如嵌合抗原受體)之細胞(諸如經工程改造之細胞)，該重組受體諸如含有包括如本文所描述之抗BCMA抗體或片段的細胞外域的重組受體。亦提供此類細胞之群體、含有此類細胞及/或富集此類細胞之組合物，諸如其中表現BCMA結合分子之細胞構成組合物中總細胞或某一類型之細胞(諸如T細胞或CD8+或CD4+細胞)的至少50%、60%、70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或超過99%。在組合物當中為用於投藥(諸如用於授受細胞療法)之醫藥組合物及調配物。亦提供用於向個體(例如患者)投與細胞及組合物之治療方法。
因此，亦提供表現含有抗體之重組受體的經基因工程改造之細胞，例如含有CAR之細胞。細胞一般為真核細胞，諸如哺乳動物細胞，且通常為人類細胞。在一些實施例中，細胞來源於血液、骨髓、淋巴或淋巴器官，為免疫系統細胞，諸如先天性或後天性免疫細胞，例如骨髓或淋巴細胞，包括淋巴球，通常為T細胞及/或NK細胞。其他例示性細胞包括幹細胞，諸如多潛能(multipotent)及多能(pluripotent)幹細胞，包括經誘導之多能幹細胞(iPSC)。細胞通常為初代細胞，諸如直接自個體分離及/或自個體分離且冷凍之彼等細胞。在一些實施例中，細胞包括T細胞或其他細胞類型之一或多個亞群，諸如完整T細胞群體、CD4+細胞、CD8+細胞及其亞群，諸如根據以下定義之彼等細胞：功能、活化狀態、成熟度、分化潛能、擴增、再循環、位置及/或存留能力、抗原特異性、抗原受體類型、特定器官或區室中之存在、標記物或細胞介素分泌概況及/或分化程度。提及所治療之個體時，細胞可為同種異體細胞及/或自體細胞。在該等方法當中包括現成方法。在一些態樣中，諸如在現成技術中，細胞為多能及/或多潛能細胞，諸如幹細胞，諸如經誘導之多能幹細胞(iPSC)。在一些實施例中，該等方法包括如本文所描述自個體分離出細胞、對其進行製備、處理、培養及/或工程改造，及在低溫保藏之前或之後將其再引入至同一患者中。
在T細胞及/或CD4+ T細胞及/或CD8+ T細胞之亞型及亞群當中為原初T (TN )細胞、效應T細胞(TEFF )、記憶T細胞及其亞型，諸如幹細胞記憶T (TSCM )、中樞記憶T (TCM )、效應記憶T (TEM )或末期分化效應記憶T細胞；腫瘤浸潤性淋巴球(TIL)、不成熟T細胞、成熟T細胞、輔助T細胞、細胞毒性T細胞、黏膜相關不變T (MAIT)細胞、天然存在及適應性調控性T (Treg)細胞、輔助T細胞，諸如TH1細胞、TH2細胞、TH3細胞、TH17細胞、TH9細胞、TH22細胞、濾泡性輔助T細胞；α/β T細胞及δ/γ T細胞。
在一些實施例中，細胞為自然殺手(NK)細胞。在一些實施例中，細胞為單核球或粒細胞，例如骨髓細胞、巨噬細胞、嗜中性球、樹突狀細胞、肥大細胞、嗜伊紅血球及/或嗜鹼性血球。
在一些實施例中，細胞包括一或多種經由基因工程改造引入之聚核苷酸，且藉此表現此類聚核苷酸的重組產物或經基因工程改造之產物。在一些實施例中，聚核苷酸為異源核酸，亦即通常不存在於細胞或獲自該細胞之樣品中的聚核苷酸，諸如獲自另一生物體或細胞之聚核苷酸，此類聚核苷酸例如在經工程改造之細胞及/或此類細胞所來源之生物體中通常未發現。在一些實施例中，聚核苷酸不為天然存在之聚核苷酸，諸如在自然中未發現之聚核苷酸，包括包含編碼來自多種不同細胞類型之各種結構域的聚核苷酸之嵌合組合的聚核苷酸。在一些實施例中，細胞(例如，經工程改造之細胞)包含如本文所描述之載體(例如病毒載體、表現載體等)，諸如包含編碼本文所描述之重組受體之核酸的載體。
A. 用於基因工程改造之載體及方法
亦提供用於表現結合分子(例如抗BCMA結合分子)，包括包含該等結合分子之重組受體(例如CAR)及用於製造表現此類結合分子之經基因工程改造之細胞的方法、聚核苷酸、組合物及套組。在一些實施例中，一或多個結合分子(包括重組受體(例如CAR))可經基因工程改造進入細胞或複數個細胞中。基因工程改造一般涉及將編碼重組組分或經工程改造之組分的核酸引入至細胞中，諸如藉由反轉錄病毒轉導、轉染或轉型來引入。
亦提供編碼嵌合抗原受體及/或其部分(例如鏈)之聚核苷酸。在所提供之聚核苷酸當中為編碼本文所描述之抗BCMA嵌合抗原受體(例如抗原結合片段)的彼等聚核苷酸。亦提供編碼一或多種抗體及/或其部分之聚核苷酸，例如編碼本文所描述之一或多種抗BCMA抗體(例如抗原結合片段)及/或其他抗體及/或其部分(例如結合其他靶抗原之抗體及/或其部分)的彼等聚核苷酸。聚核苷酸可包括包涵天然及/或非天然存在之核苷酸及鹼基的彼等聚核苷酸，例如包括具有主鏈修飾之彼等聚核苷酸。術語「核酸分子」、「核酸」及「聚核苷酸」可互換使用，且係指核苷酸聚合物。此類核苷酸聚合物可含有天然及/或非天然核苷酸，且包括(但不限於) DNA、RNA及PNA。「核酸序列」係指構成核酸分子或聚核苷酸之核苷酸的線性序列。
亦提供已經最佳化以用於密碼子使用及/或消除剪接位點(諸如隱蔽剪接位點)之聚核苷酸。亦提供對嵌合抗原受體(諸如本文所描述之任一嵌合抗原受體)之編碼序列進行最佳化及製造的方法。此類方法描述於本文章節II中。
亦提供含有聚核苷酸(諸如本文所描述之任一聚核苷酸)的載體及含有該等載體之宿主細胞，其例如用於製造抗體或其抗原結合片段。在一些實施例中，載體為病毒載體。在一些實施例中，載體為反轉錄病毒載體或慢病毒載體。亦提供用於製造抗體或其抗原結合片段之方法。核酸可編碼包含抗體之VL 區的胺基酸序列及/或包含其VH 區之胺基酸序列(例如，抗體之輕鏈及/或重鏈)。核酸可編碼一或多個包含抗體之VL 區的胺基酸序列及/或包含其VH 區之胺基酸序列(例如，抗體之輕鏈及/或重鏈)。在另一實施例中，提供一或多種包含此類聚核苷酸之載體(例如表現載體)。在另一實施例中，提供包含此類聚核苷酸之宿主細胞。在一個此類實施例中宿主細胞包含(例如，已經以下轉型)：包含編碼包含抗體VH 區之胺基酸序列的核酸的載體。在另一此類實施例中，宿主細胞包含(例如，已經以下轉型)：(1)包含編碼包含抗體VL 區之胺基酸序列及包含抗體VH 區之胺基酸序列的核酸的載體，或(2)包含編碼包含抗體VL 區之胺基酸序列的核酸的第一載體及包含編碼包含抗體VH 區之胺基酸序列的核酸的第二載體。在一些實施例中，宿主細胞包含(例如，已經以下轉型)：包含編碼包含一或多種抗體及/或其部分(例如其抗原結合片段)之一或多個胺基酸序列的一或多種核酸的一或多種載體。在一些實施例中，提供一或多種此類宿主細胞。在一些實施例中，提供含有一或多種此類宿主細胞之組合物。在一些實施例中，一或多種宿主細胞可表現不同抗體或相同抗體。在一些實施例中，宿主細胞中之每一者均可表現超過一種抗體。
亦提供製造抗BCMA嵌合抗原受體之方法。對於嵌合受體之重組產生，可分離編碼例如如本文所描述之嵌合受體抗體的核酸序列且將其插入至一或多種載體中以用於在宿主細胞中進一步選殖及/或表現。此類核酸序列可使用習知程序來容易地進行分離及定序(例如，藉由使用能夠特異性結合於編碼抗體重鏈及輕鏈之基因的寡核苷酸探針來進行)。在一些實施例中，提供製造抗BCMA嵌合抗原受體之方法，其中該方法包含在適於表現受體之條件下培養包含如上文所提供之編碼抗體之核酸序列的宿主細胞。
在一些態樣中，對於經分離或分泌性多肽之產生，除原核生物以外，真核微生物(諸如絲狀真菌或酵母)為用於編碼抗體之載體的適合之選殖或表現宿主，包括其糖基化路徑已經調節以模擬或接近人類細胞中之彼等路徑從而產生具有部分或全人類糖基化模式之抗體的真菌及酵母菌株。參見Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)及Li等人，Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)。
可用於表現多肽(包括經分離或分泌性多肽)之例示性真核細胞包括(但不限於) COS細胞，包括COS 7細胞；293細胞，包括293-6E細胞；CHO細胞，包括CHO-S、DG44、Lec13 CHO細胞及FUT8 CHO細胞；PER.C6® cells；及NSO細胞。在一些實施例中，抗體重鏈及/或輕鏈(例如，VH 區及/或VL 區)可在酵母中進行表現。參見例如美國公開案第US 2006/0270045 A1號。在一些實施例中，特定真核宿主細胞係基於其對重鏈及/或輕鏈(例如，VH 區及/或VL 區)進行所需轉譯後修飾之能力來加以選擇。舉例而言，在一些實施例中，CHO細胞產生多肽，該等多肽之唾液酸化水準高於293細胞中所產生之相同多肽。
在特定實例中，免疫細胞(諸如人類免疫細胞)用於表現所提供的編碼嵌合抗原受體之多肽。在一些實例中免疫細胞為T細胞，諸如CD4+及/或CD8+免疫細胞，包括初代細胞，諸如初代CD4+及CD8+細胞。
在一些實施例中，基因轉移藉由以下來實現：首先刺激細胞，諸如藉由將該細胞與誘導諸如增殖、存活及/或活化(例如，如藉由細胞介素或活化標記物之表現所量測)之反應的刺激物組合來刺激，後接對經活化之細胞進行轉導，及在培養物中擴增至足以用於臨床應用之數目。
在一些情形下，刺激因子(例如淋巴介素或細胞介素)之過度表現可能對個體具有毒性。因此，在一些情形下，經工程改造之細胞包括使得細胞對活體內陰性選擇敏感(諸如在以授受性免疫療法投藥時)的基因區段。舉例而言，在一些態樣中，細胞經工程改造以使得其可由於其所投與之患者的活體內條件變化而排除。陰性可選表型可由賦予對所投與藥劑(例如化合物)之敏感性之基因的插入而產生。陰性可選基因包括賦予更昔洛韋(ganciclovir)敏感性之單純性疱疹病毒I型胸苷激酶(HSV-I TK)基因(Wigler等人，Cell 2:223, 1977)；細胞次黃嘌呤磷酸核糖基轉移酶(HPRT)基因、細胞腺嘌呤磷酸核糖基轉移酶(APRT)基因、細菌胞嘧啶脫胺酶(Mullen等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:33 (1992))。
在一些態樣中，細胞進一步經工程改造以促進細胞介素或其他因子表現。用於引入經基因工程改造之組分(例如抗原受體，例如CAR)的各種方法為熟知的，且可與所提供之方法及組合物一起使用。例示性方法包括用於轉移編碼受體之核酸的方法，包括經由病毒(例如反轉錄病毒或慢病毒)轉導、轉座子及電穿孔來進行。
在一些實施例中，使用重組感染性病毒顆粒(諸如來源於猴病毒40 (SV40)、腺病毒、腺相關病毒(AAV)之載體)將重組聚核苷酸轉移至細胞中。在一些實施例中，使用重組慢病毒載體或反轉錄病毒載體(諸如γ-反轉錄病毒載體)將重組聚核苷酸轉移至T細胞中(參見例如Koste等人 (2014) Gene Therapy 2014年4月3日. doi: 10.1038/gt.2014.25；Carlens等人 (2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46；Alonso-Camino等人 (2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93；Park等人，Trends Biotechnol. 2011年11月 29(11): 550-557)。
在一些實施例中，反轉錄病毒載體具有長末端重複序列(LTR)，例如來源於莫洛尼鼠白血病病毒(Moloney murine leukemia virus，MoMLV)、骨髓增生性肉瘤病毒(MPSV)、鼠類胚幹細胞病毒(MESV)、鼠類幹細胞病毒(MSCV)、脾病灶形成病毒(SFFV)或1型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)。大部分反轉錄病毒載體來源於鼠類反轉錄病毒。在一些實施例中，反轉錄病毒包括來源於任何禽鳥或哺乳動物細胞來源之彼等反轉錄病毒。反轉錄病毒通常具有雙嗜性，意謂其能夠感染若干物種(包括人類)之宿主細胞。在一個實施例中，待表現之基因置換反轉錄病毒gag、pol及/或env序列。已描述多種說明性反轉錄病毒系統(例如美國專利第5,219,740號；第6,207,453號；第5,219,740號；Miller及Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990；Miller, A. D. (1990) Human Gene Therapy 1:5-14；Scarpa等人 (1991) Virology 180:849-852；Burns等人 (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037；及Boris-Lawrie及Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109。
慢病毒轉導方法為已知的。例示性方法描述於例如Wang等人 (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；Cooper等人 (2003) Blood. 101:1637-1644；Verhoeyen等人 (2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114；及Cavalieri等人 (2003) Blood. 102(2): 497-505中。
在一些實施例中，重組聚核苷酸經由電穿孔轉移至T細胞中(參見例如Chicaybam等人，(2013) PLoS ONE 8(3): e60298及Van Tedeloo等人，(2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437)。在一些實施例中，重組聚核苷酸經由轉位轉移至T細胞中(參見例如Manuri等人 (2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437；Sharma等人 (2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74；及Huang等人 (2009) Methods Mol Biol 506: 115-126)。將遺傳物質引入且表現於免疫細胞中的其他方法包括磷酸鈣轉染(例如，如Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley&Sons, New York. N.Y.中所描述)、原生質體融合、陽離子脂質體介導之轉染；鎢顆粒促進之微粒轟擊(Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990))；及磷酸鍶DNA共沈澱(Brash等人，Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987))。
用於轉移編碼重組產物之聚核苷酸的其他途徑及載體為例如國際專利申請公開案第WO2014055668號及美國專利第7,446,190號中所描述之彼等途徑及載體。
在另外之聚核苷酸(例如用於引入之基因)當中為改善治療功效(諸如藉由促進所轉移細胞之存活力及/或功能來改善)的彼等聚核苷酸；為了選擇及/或評估細胞(諸如評定活體內存活或定位)提供基因標記物之基因；改善安全性(例如藉由使得細胞對活體內陰性選擇敏感來改善)之基因，如由Lupton S. D.等人，Mol. and Cell Biol., 11:6 (1991)；及Riddell等人，Human Gene Therapy 3:319-338 (1992)所描述；亦參見Lupton等人之公開案PCT/US91/08442及PCT/US94/05601，其描述經由主要陽性可選標記物與陰性可選標記物融合所得之雙功能可選融合基因的用途。參見例如Riddell等人，美國專利第6,040,177號, 第14-17欄。
在一些實施例中，一或多個結合分子(包括抗體及/或重組受體(例如CAR))可經基因工程改造以在細胞或複數個細胞中進行表現。在一些實施例中，第一重組受體及第二結合分子)例如重組受體)係由同一或各別之核酸分子編碼。在一些實施例中，另外之結合分子經工程改造以在細胞或複數個細胞中進行表現。
在一些情況下，含有編碼BCMA結合受體(例如嵌合抗原受體(CAR))之核酸序列的聚核苷酸含有編碼信號肽之信號序列。在一些態樣中，信號序列可編碼來源於原生多肽之信號肽。在其他態樣中，信號序列可編碼異源或非原生信號肽。在一些態樣中，非限制性例示性信號肽包括SEQ ID NO:620中所闡述或由SEQ ID NO:619或682-685中所闡述之核苷酸序列編碼的IgGκ鏈信號肽；SEQ ID NO:851中所闡述及由SEQ ID NO:850中所闡述之核苷酸序列編碼的GMCSFRα鏈；SEQ ID NO:852中所闡述之CD8α信號肽；或SEQ ID NO:853中所闡述之CD33信號肽。
在一些實施例中，載體或構築體可含有啟動子及/或增強子或調控所編碼重組受體之表現的調控元件。在一些實例中，啟動子及/或增強子或調控元件可為條件依賴性啟動子、增強子及/或調控元件。在一些實例中，此等元件驅動轉殖基因之表現。在一些實例中CAR轉殖基因可操作地連接於啟動子，諸如具有HTLV1增強子之EF1α啟動子(SEQ ID NO:635)。在一些實例中CAR轉殖基因可操作地連接於位於轉殖基因下游之土撥鼠肝炎病毒(WHP)轉錄後調控元件(WPRE；SEQ ID NO:636)。
在一些實施例中，載體或構築體可含有驅動一或多個核酸分子之表現的單個啟動子。在一些實施例中，此類核酸分子)例如轉錄本)可為多順反子(雙順反子或三順反子，參見例如美國專利第6,060,273號)。舉例而言，在一些實施例中，轉錄單元可經工程改造為含有IRES (內部核糖體入口位點)之雙順反子單元，其允許藉由來自單個啟動子之訊息來對基因產物進行共表現(例如編碼第一及第二嵌合受體)。或者，在一些情況下，單個啟動子可導引RNA之表現，該RNA在單個開放閱讀框架(ORF)中含有由編碼自裂解肽(例如2A裂解序列)或蛋白酶識別位點(例如弗林蛋白酶(furin))之序列彼此間隔開的兩個或三個基因(例如編碼第一及第二結合分子，例如抗體重組受體)。因此，ORF編碼單個多肽，該多肽在轉譯期間(在T2A的情況下)或之後裂解為個別蛋白質。在一些情況下，肽(諸如T2A)可導致核糖體跳過(即，核糖體跳過)合成處於2A元件之C端處的肽鍵，導致2A序列之末端與下游之下一個肽之間分離(參見例如de Felipe.Genetic Vaccines and Ther. 2:13 (2004)及deFelipe等人Traffic 5:616-626 (2004))。許多2A元件為已知的。可用於本文所揭示之方法及聚核苷酸中的2A序列之實例，不限於如美國專利公開案第20070116690號中所描述的來自口蹄疫病毒之2A序列(F2A，例如SEQ ID NO:659或660)、來自馬A型鼻炎病毒之2A序列(E2A，例如SEQ ID NO:657或658)、來自明脈扁刺蛾(Thosea asigna)病毒之2A序列(T2A，例如SEQ ID NO:631、653或654)及來自豬捷申病毒-1之2A序列(P2A，例如SEQ ID NO:655或656)。在一些實施例中，一或多個不同或各別啟動子驅動編碼一或多個結合分子(例如重組受體)之一或多個核酸分子的表現。
任一結合分子(例如本文所提供之抗體及/或重組受體，例如BCMA結合分子及/或另外之重組受體)可由以任何組合或排列含有一或多個編碼該等受體之核酸分子的聚核苷酸編碼。舉例而言，一個、兩個、三個或超過三個聚核苷酸可編碼一個、兩個、三個或超過三個不同受體或結構域。在一些實施例中，一種載體或構築體含有編碼一或多個結合分子(例如抗體及/或重組受體)之核酸分子，且各別載體或構築體含有編碼另一個結合分子(例如抗體及/或重組受體)之核酸分子。核酸分子中之每一者亦可編碼一或多種標記物，諸如表面標記物，例如截短之EGFR (tEGFR)。
亦提供含有核酸分子、載體或構築體中之一或多者，諸如上文所描述之任何核酸分子、載體構築體構築體的組合物。在一些實施例中，核酸分子、載體、構築體或組合物可用於對細胞(諸如T細胞)進行工程改造以表現結合分子(例如抗體或重組受體)及/或另外之結合分子中的任一者。
B. 用於工程改造之細胞的製備
在一些實施例中，經工程改造之細胞的製備包括一或多個培養及/或製備步驟。用於引入重組受體(例如CAR)之細胞可自樣品，諸如生物樣品，例如獲自或來源於個體之樣品分離。在一些實施例中，經分離細胞所來自之個體為患有疾病或病狀、或需要細胞療法、或細胞療法將投與之個體。在一些實施例中，個體為需要特定治療性干預(諸如為其進行細胞分離、處理及/或工程改造之授受細胞療法)的人類。
因此，在一些實施例中，細胞為初代細胞，例如初代人類細胞。樣品包括直接自個體取得之組織、體液及其他樣品，以及由一或多個處理步驟產生之樣品，該等處理步驟諸如分離、離心、基因工程改造(例如，用病毒載體轉導)、洗滌及/或培育生物樣品可為直接獲自生物學來源之樣品或經處理之樣品。生物樣品包括(但不限於)體液，諸如血液、血漿、血清、腦脊髓液、滑液、尿液及汗液；組織及器官樣品，包括來源於其之經處理樣品。
在一些態樣中，所得或經分離之細胞所來自的樣品為血液或血液源性樣品，或為或來源於清除術或白血球清除術產物。例示性樣品包括全血、周邊血液單核細胞(PBMC)、白血球、骨髓、胸腺、組織活檢體、腫瘤、白血病、淋巴瘤、淋巴結、腸道相關淋巴組織、黏膜相關淋巴組織、脾臟、其他淋巴組織、肝臟、肺、胃、腸、結腸、腎臟、胰臟、乳房、骨骼、前列腺、子宮頸、睪丸、卵巢、扁桃體或其他器官，及/或來源於其之細胞。在細胞療法(例如授受細胞療法)之情形下，樣品包括來自自體及同種異體來源之樣品。
在一些實施例中，細胞來源於細胞株，例如T細胞株。在一些實施例中，細胞獲自異種來源，例如獲自小鼠、大鼠、非人類靈長類動物或豬。
在一些實施例中，細胞之分離包括一或多個製備步驟及/或基於非親和力之細胞分離步驟。在一些實例中，對細胞進行洗滌、離心且/或在一或多種試劑存在下培育，以例如移除不合需要之組分、富集所需組分、溶解或移除對特定試劑敏感之細胞。在一些實例中，基於一或多種特性(諸如密度、黏附特性、尺寸、敏感性及/或對特定組分之耐藥性)分離細胞。
在一些實例中，來自個體循環血液之細胞例如藉由清除術或白血球清除術來獲得。在一些態樣中，樣品含有淋巴球，包括T細胞、單核球、粒細胞、B細胞、其他成核白血球、紅血球及/或血小板，且在一些態樣中含有除紅血球及血小板以外之細胞。
在一些實施例中，自個體收集之血細胞可經洗滌，以例如移除血漿級分，且將該等細胞置放於適當緩衝液或培養基中以用於後續處理步驟。在一些實施例中，細胞用磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)進行洗滌。在一些實施例中，洗滌溶液缺乏鈣及/或鎂及/或多種或全部二價陽離子。在一些態樣中，根據製造商說明書，利用半自動化「流過」式離心機(例如Cobe 2991細胞處理器，Baxter)來實現洗滌步驟。在一些態樣中，根據製造商說明書，藉由切向流過濾(TFF)來實現洗滌步驟。在一些實施例中，在洗滌之後將細胞再懸浮於多種生物相容性緩衝液(諸如無Ca++ /Mg++ 之PBS)中。在某些實施例中，移除血細胞樣品之組分，且將細胞直接再懸浮於培養基中。
在一些實施例中，該等方法包括基於密度之細胞分離方法，諸如藉由使紅血球溶解而自周邊血液製備白血球及經由Percoll或Ficoll梯度離心。
在一些實施例中，分離方法包括基於一或多種具體分子(諸如表面標記物，例如表面蛋白質；細胞內標記物或核酸)在細胞中之表現或存在來分離不同細胞類型。在一些實施例中，可使用用於基於此類標記物分離之任何已知方法。在一些實施例中，分離為基於親和力或免疫親和力之分離。舉例而言，在一些態樣中，分離包括基於一或多種標記物(通常為細胞表面標記物)之細胞表現或表現量來分離細胞及細胞群體，例如藉由與特異性結合於此類標記物之抗體或結合搭配物一起培育，一般後接進行洗滌步驟且將已結合抗體或結合搭配物之細胞與尚未結合於抗體或結合搭配物之彼等細胞分離。
此類分離步驟可基於陽性選擇，其中保留已結合試劑之細胞供進一步使用；及/或陰性選擇，其中保留尚未結合於抗體或結合搭配物之細胞。在一些實例中，兩個級分均保留以供進一步使用。在一些態樣中，在其中無法獲得在異質群體中特異性鑑別一種細胞類型之抗體的情況下，陰性選擇可為尤其適用的，以使得分離最佳基於除所需群體以外之細胞所表現的標記物來進行。
分離無需對特定細胞群體或表現特定標記物之細胞進行100%富集或移除。舉例而言，特定類型之細胞(諸如表現標記物之彼等細胞)的陽性選擇或富集係指增加此類細胞之數目或百分比，但無需使得不表現該標記物之細胞完全不存在。同樣，特定類型之細胞(諸如表現標記物之彼等細胞)的陰性選擇、移除或耗乏係指減少此類細胞之數目或百分比，但無需使得所有此類細胞完全移除。
在一些實例中，進行多輪分離步驟，其中對來自一個步驟的經陽性或陰性選擇之級分進行另一個分離步驟，諸如後續陽性或陰性選擇。在一些實例中，單個分離步驟可耗乏同時表現多個標記物之細胞，諸如藉由使細胞與各自對成為陰性選擇目標之標記物具特異性的複數種抗體或結合搭配物一起培育。同樣，多種細胞類型可藉由使細胞與各種細胞類型上所表現之複數種抗體或結合搭配物一起培育而同時進行陽性選擇。
舉例而言，在一些態樣中，藉由陽性或陰性選擇技術來分離T細胞之具體亞群，諸如陽性或表現高水準之一或多種表面標記物的細胞，例如CD28+、CD62L+、CCR7+、CD27+、CD127+、CD4+、CD8+、CD45RA+及/或CD45RO+ T細胞。
舉例而言，CD3+、CD28+ T細胞可使用CD3/CD28結合之磁性珠粒(例如，DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T細胞擴增劑，MACSiBeads™等)來進行陽性選擇。
在一些實施例中，分離藉由以下進行：藉由陽性選擇富集特定細胞群體，或藉由陰性選擇耗乏特定細胞群體。在一些實施例中，陽性或陰性選擇藉由將細胞與特異性結合於分別在陽性或陰性選擇之細胞上表現(標記物+ )或以相對高含量(標記物高 )表現之一或多種表面標記物的一或多種抗體或其他結合劑一起培育來實現。
在一些實施例中，藉由對非T細胞(諸如B細胞、單核球或其他白血球)上所表現之標記物(諸如CD14)進行陰性選擇來將T細胞自PBMC樣品中分離。在一些態樣中，使用CD4+或CD8+選擇步驟分離CD4+輔助細胞及CD8+細胞毒性T細胞。此類CD4+及CD8+群體可藉由對在一或多種原初、記憶及/或效應T細胞亞群上表現或以相對較高程度表現之標記物進行陽性或陰性選擇而進一步分選成亞群。
在一些實施例中，CD8+細胞相對於原初、中樞記憶、效應記憶及/或中樞記憶幹細胞進一步富集或耗乏，諸如藉由基於與各別亞群相關聯之表面抗原進行陽性或陰性選擇而富集或耗乏。在一些實施例中，對中樞記憶T (TCM )細胞進行富集以增加功效，諸如在投藥後改善長期存活率、擴增及/或移植，在一些態樣中，功效在此類亞群中尤其穩固。參見Terakura等人 (2012) Blood.1:72-82；Wang等人 (2012) J Immunother. 35(9):689-701。在一些實施例中，將TCM 富集之CD8+ T細胞與CD4+ T細胞組合進一步增強功效。
在實施例中，記憶T細胞存在於CD8+周邊血液淋巴球之CD62L+及CD62L-亞群兩者中。PBMC可富集或耗乏CD62L-CD8+及/或CD62L+CD8+級分中，諸如使用抗CD8及抗CD62L抗體來富集或耗乏。
在一些實施例中，中樞記憶T (TCM )細胞之富集係基於CD45RO、CD62L、CCR7、CD28、CD3及/或CD 127之陽性或高表面表現；在一些態樣中，其係基於對表現或高度表現CD45RA及/或顆粒酶B之細胞進行的陰性選擇。在一些態樣中，TCM 細胞富集之CD8+群體的分離藉由耗乏表現CD4、CD14、CD45RA之細胞及對表現CD62L之細胞進行陽性選擇或富集來進行。在一個態樣中，如下進行中樞記憶T (TCM )細胞之富集：以基於CD4表現所選擇之陰性細胞級分為起始物，基於CD14及CD45RA之表現對其進行陰性選擇，且基於CD62L進行陽性選擇。此類選擇在一些態樣中同時進行，且在其他態樣中以任一次序依序進行。在一些態樣中，在製備CD8+細胞群體或亞群中所用的基於CD4表現之相同選擇步驟亦用於產生CD4+細胞群體或亞群，以使得來自基於CD4之分離的陽性及陰性級分兩者均得到保留且用於該等方法之後續步驟中，視情況在一或多個其他陽性或陰性選擇步驟之後進行使用。
在一個特定實例中，對PBMC樣品或其他白血球樣品進行CD4+細胞之選擇，其中陰性及陽性級分兩者均得到保留。隨後基於CD14及CD45RA之表現對陰性級分進行陰性選擇，且基於中樞記憶T細胞所特有之標記物(諸如CD62L或CCR7)進行陽性選擇，其中陽性及陰性選擇以任一次序進行。
藉由鑑別具有細胞表面抗原之細胞群體來將CD4+ T輔助細胞分選成原初、中樞記憶及效應細胞。CD4+淋巴球可藉由標準方法獲得。在一些實施例中，原初CD4+ T淋巴球為CD45RO-、CD45RA+、CD62L+、CD4+ T細胞。在一些實施例中，中樞記憶CD4+細胞為CD62L+及CD45RO+。在一些實施例中，效應CD4+細胞為CD62L-及CD45RO-。
在一個實例中，為了藉由陰性選擇來富集CD4+細胞，單株抗體混合液通常包括針對CD14、CD20、CD11b、CD16、HLA-DR及CD8之抗體。在一些實施例中，抗體或結合搭配物結合於固體載體或基質，諸如磁性珠粒或順磁珠粒，以便分離用於陽性及/或陰性選擇之細胞。舉例而言，在一些實施例中，細胞及細胞群體使用免疫磁性(或親和磁性)分離技術來分離(separate)或分離(isolate) (綜述於Methods in Molecular Medicine, 第58卷: Metastasis Research Protocols, 第2卷: Cell Behavior In vitro and In vivo, 第17-25頁, 編輯為S. A. Brooks及U. Schumacher © Humana Press Inc., Totowa, NJ)。
在一些態樣中，將待分離之細胞的樣品或組合物與可磁化或具磁反應性之小材料(諸如具磁反應性之顆粒或微粒，諸如順磁珠粒(例如Dynabeads®或MACS®珠粒))一起培育。具磁反應性之材料(例如顆粒)一般直接或間接地附接於結合搭配物(例如抗體)，該結合搭配物特異性結合於存在於需要分離(例如需要陰性或陽性選擇)之一或多種細胞或細胞群體上的分子(例如表面標記物)。
在一些實施例中，磁性顆粒或珠粒包含結合於特異性結合成員(諸如抗體或其他結合搭配物)的具磁反應性之材料。存在多種在磁性分離方法中所用的熟知的具磁反應性之材料。適合之磁性顆粒包括Molday, 美國專利第4,452,773號及歐洲專利說明書EP 452342 B中所描述之彼等磁性顆粒，該等專利以引用之方式併入本文中。膠態尺寸化顆粒(諸如Owen, 美國專利第4,795,698號及Liberti等人，美國專利第5,200,084號中所描述之彼等顆粒)為其他實例。
培育一般在一定條件下進行，其中附接於磁性顆粒或珠粒的抗體或結合搭配物或特異性結合於此類抗體或結合搭配物之分子(諸如二級抗體或其他試劑)特異性結合於樣品內之細胞上的細胞表面分子(若存在)。
在一些態樣中，將樣品置放於磁場中，且附接有具磁反應性或可磁化之顆粒的彼等細胞將吸引至磁體且與未標記之細胞分離。對於陽性選擇，保留吸引至磁體之細胞；對於陰性選擇，保留未吸引之細胞(未標記之細胞)。在一些態樣中，在同一選擇步驟期間執行陽性及陰性選擇之組合，其中保留陽性及陰性級分且進一步處理或進行其他分離步驟。
在某些實施例中，具磁反應性之顆粒塗佈有一級抗體或其他結合搭配物、二級抗體、凝集素、酶或抗生蛋白鏈菌素。在某些實施例中，磁性顆粒經由對一或多種標記物具特異性之一級抗體的塗佈而附接於細胞。在某些實施例中，細胞(而非珠粒)經一級抗體或結合搭配物標記，且隨後添加經對細胞類型具特異性之二級抗體或其他結合搭配物(例如抗生蛋白鏈菌素)塗佈的磁性顆粒。在某些實施例中，經抗生蛋白鏈菌素塗佈之磁性顆粒與生物素化之一級或二級抗體結合使用。
在一些實施例中，具磁反應性之顆粒保持附接於待隨後培育、培養及/或工程改造之細胞；在一些態樣中，顆粒保持附接於用於向患者投與之細胞。在一些實施例中，自細胞移除可磁化或具磁反應性之顆粒。用於自細胞移除可磁化顆粒之方法為已知的，且包括例如使用未經標記之競爭性抗體、可磁化顆粒或與可裂解連接子結合之抗體等。在一些實施例中，可磁化顆粒為可生物降解的。
在一些實施例中，基於親和力之選擇係經由磁性活化細胞分選術(MACS®) (Miltenyi Biotech, Auburn, CA)。磁性活化細胞分選術(MACS®)系統能夠對附接有磁化顆粒之細胞進行高純度選擇。在某些實施例中，MACS®以其中在施加外部磁場之後依序溶離非靶及標靶物種的模式操作。亦即，附接於磁化顆粒之細胞保持在適當位置，同時溶離未附接之物質。隨後，在此第一溶離步驟完成之後，使在磁場中捕獲且防止其溶離之物種以某一方式釋放，以使得其可溶離及回收。在某些實施例中，非靶細胞經標記且自異質細胞群體耗乏。
在某些實施例中，分離(isolation)或分離(separation)係使用進行該等方法之分離(isolation)、細胞製備、分離(separation)、處理、培育、培養且/或調配步驟中之一或多者的系統、裝置或設備來進行。在一些態樣中，系統用於在封閉或無菌環境中進行此等步驟中之每一者，以例如使誤差、使用者操作及/或污染最小化。在一個實例中，系統為如國際專利申請案公開案第WO2009/072003號或US 20110003380 A1中所描述之系統。
在一些實施例中，系統或設備在整合式或整裝式系統中及/或以自動化或可程式化方式進行分離、處理、工程改造及調配步驟中之一或多者(例如全部)。在一些態樣中，系統或設備包括與系統或設備通信之電腦及/或電腦程式，其允許使用者對處理、分離、工程改造及調配步驟進行程式化、控制、評估其結果及/或調整其各個態樣。
在一些態樣中，分離及/或其他步驟係使用例如用於在封閉且無菌之系統中、在臨床規模水準上自動化分離細胞的CliniMACS®系統(Miltenyi Biotec)來進行。組件可包括整合式微電腦、磁性分離單元、蠕動泵及各種夾閥。在一些態樣中，整合式電腦控制儀器之所有組件且導引系統以標準化順序執行重複程序。在一些態樣中，磁性分離單元包括可移動永久磁體及用於選擇管柱之固持器。蠕動泵控制通過整個管組之流動速率，且連同夾閥一起確保緩衝液通過系統之受控流動及細胞之持續懸浮。
在一些態樣中，CliniMACS®系統使用以無菌之非熱解溶液形式供應的抗體偶聯之可磁化顆粒。在一些實施例中，在用磁性顆粒標記細胞之後，洗滌該等細胞以移除過量顆粒。隨後將細胞製劑袋連接至管組，管組隨後又連接至含有緩衝液之袋及細胞收集袋。管組由預組裝之無菌管組成，包括前管柱及分離管柱，且僅用於單次使用。在起始分離程式之後，系統自動地將細胞樣品施加至分離管柱上。經標記之細胞保留於管柱內，而未標記之細胞藉由一系列洗滌步驟移除。在一些實施例中，與本文所描述之方法一起使用的細胞群體未標記且未保留於管柱中。在一些實施例中，與本文所描述之方法一起使用的細胞群體經標記且保留於管柱中。在一些實施例中，在移除磁場之後，自管柱溶離與本文所描述之方法一起使用的細胞群體，且收集於細胞收集袋內。
在某些實施例中，分離及/或其他步驟係使用CliniMACS Prodigy®系統(Miltenyi Biotec)來進行。在一些態樣中，CliniMACS Prodigy®系統配備有容許自動化洗滌及藉由離心對細胞進行分級分離之細胞處理單元。CliniMACS Prodigy®系統亦可包括機載照相機及影像識別軟體，該軟體藉由辨別源細胞產物之宏觀層來確定最佳細胞分級分離終點。舉例而言，周邊血液可自動分離成紅血球、白血球及血漿層。CliniMACS Prodigy®系統亦可包括整合式細胞培育室，其實現細胞培養方案，諸如細胞分化及擴增、抗原負載及長期細胞培養。輸入埠可允許對培養基進行無菌移除及補充，且細胞可使用整合式顯微鏡來進行監測。參見例如Klebanoff等人 (2012) J Immunother. 35(9): 651-660，Terakura等人 (2012) Blood.1:72-82及Wang等人 (2012) J Immunother. 35(9):689-701。
在一些實施例中，本文所描述之細胞群體經由流式細胞量測術來收集及富集(或耗乏)，其中針對多種細胞表面標記物進行染色之細胞運載於流體流中。在一些實施例中，本文所描述之細胞群體經由製備級(FACS)分選術來收集及富集(或耗乏)。在某些實施例中，本文所描述之細胞群體藉由使用微機電系統(MEMS)晶片與基於FACS之偵測系統的組合來收集及富集(或耗乏) (參見例如WO 2010/033140；Cho等人 (2010) Lab Chip 10, 1567-1573；及Godin等人 (2008) J Biophoton. 1(5):355-376。在兩種情況下，細胞可經多種標記物標記，從而允許以高純度對界限分明之T細胞亞群進行分離。
在一些實施例中，抗體或結合搭配物經一或多種可偵測標記物標記，以促進用於陽性及/或陰性選擇之分離。舉例而言，分離可基於與經螢光標記之抗體的結合。在一些實例中，基於對一或多種細胞表面標記物具特異性之抗體或其他結合搭配物之結合的細胞分離在流體流中進行，諸如藉由螢光活化細胞分選術(FACS)，包括製備級(FACS)及/或微機電系統(MEMS)晶片，例如與流式細胞學偵測系統組合。此類方法允許基於多種標記物同時進行陽性及陰性選擇。
在一些實施例中，製備方法包括在分離、培育及/或工程改造之前或之後，冷凍(例如低溫保藏)細胞之步驟。在一些實施例中，冷凍及後續解凍步驟移除細胞群體中之粒細胞且在一定程度上移除單核球。在一些實施例中，將細胞懸浮於冷凍溶液中，例如在洗滌步驟之後將細胞懸浮於冷凍溶液中，以移除血漿及血小板。在一些態樣中，可使用多種已知冷凍溶液及參數中之任一者。一個實例涉及使用含有20% DMSO及8%人類血清白蛋白(HSA)之PBS，或其他適合之細胞冷凍培養基。隨後用培養基對此進行1:1稀釋，以使得DMSO及HSA之最終濃度分別為10%及4%。細胞隨後以每分鐘1°之速率冷凍至-80℃且儲存於液氮儲槽之氣相中。
在一些實施例中，所提供之方法包括培育(cultivation)、培育(incubation)、培養及/或基因工程改造步驟。舉例而言，在一些實施例中，提供對所耗乏之細胞群體進行培育及/或工程改造的方法及起始培養之組合物。
因此，在一些實施例中，在起始培養之組合物中培育細胞群體。培育(incubation)及/或工程改造可在培養容器中進行，諸如用於培養或培育(cultivate)細胞之單元、腔室、孔、管柱、管、管組、閥、小瓶、培養盤、袋或其他容器。
在一些實施例中，細胞在基因工程改造之前或與基因工程改造結合進行培育及/或培養。培育(incubation)步驟可包括培養、培育(cultivation)、刺激、活化及/或繁殖。在一些實施例中，組合物或細胞在刺激條件或刺激劑存在下進行培育。此類條件包括經設計以誘導群體中之細胞增殖、擴增、活化及/或存活、模擬抗原暴露及/或使用於基因工程改造(諸如用於引入重組抗原受體)之細胞預致敏的彼等條件。
該等條件可包括以下中之一或多者：特定培養基、溫度、氧氣含量、二氧化碳含量、時間、藥劑，例如營養物、胺基酸、抗生素、離子及/或刺激因子，諸如細胞介素、趨化介素、抗原、結合搭配物、融合蛋白、重組可溶性受體及經設計以使細胞活化之任何其他藥劑。
在一些實施例中，刺激條件或藥劑包括一或多種能夠使TCR複合物之細胞內信號傳導域活化的藥劑，例如配位體。在一些態樣中，藥劑開啟或起始T細胞中之TCR/CD3細胞內信號傳導級聯。此類藥劑可包括抗體，諸如對TCR(例如抗CD3)具特異性之彼等抗體。在一些實施例中，刺激條件包括一或多種能夠刺激共刺激受體(例如抗CD28)之藥劑(例如配位體)。在一些實施例中，此類藥劑及/或配位體可結合於固體載體(諸如珠粒)及/或一或多種細胞介素。視情況，擴增方法可進一步包含向培養基中添加抗CD3及/或抗CD28抗體(例如以至少約0.5 ng/ml之濃度添加)的步驟。在一些實施例中，刺激劑包括IL-2、IL-15及/或IL-7。在一些態樣中，IL-2濃度為至少約10單位/毫升。
在一些態樣中，培育根據以下技術來進行，諸如Riddell等人之美國專利第6,040,177號、Klebanoff等人 (2012) J Immunother. 35(9): 651-660、Terakura等人 (2012) Blood.1:72-82及/或Wang等人 (2012) J Immunother. 35(9):689-701中所描述之彼等技術。
在一些實施例中，T細胞藉由以下來進行擴增：向起始培養之組合物中添加飼養細胞，諸如非分裂周邊血液單核細胞(PBMC) (例如使得所得細胞群體對於待擴增之初始群體中的每個T淋巴球含有至少約5、10、20或40或超過40個PBMC飼養細胞)；及培育培養物(例如持續足以使T細胞數目擴增之時間)。在一些態樣中，非分裂飼養細胞可包含γ輻射PBMC飼養細胞。在一些實施例中，PBMC經約3000至3600拉德範圍內之γ射線輻射以防止細胞分裂。在一些態樣中，在添加T細胞群體之前，向培養基中添加飼養細胞。
在一些實施例中，刺激條件包括適於人類T淋巴球生長之溫度，例如至少約25攝氏度，一般至少約30度且一般或約37攝氏度。視情況，培育可進一步包含添加非分裂的經EBV轉型之類淋巴母細胞(LCL)作為飼養細胞。LCL可經約6000至10,000拉德範圍內之γ射線輻射。在一些態樣中，LCL飼養細胞以任何適合量提供，諸如LCL飼養細胞與初始T淋巴球之比率至少約10:1。
在實施例中，抗原特異性T細胞(諸如抗原特異性CD4+及/或CD8+ T細胞)藉由用抗原刺激原初或抗原特異性T淋巴球來獲得。舉例而言，針對細胞巨大病毒抗原之抗原特異性T細胞株或純系可藉由自經感染之個體分離T細胞且用相同抗原活體外刺激該等細胞來產生。
C. 用於多靶向的經工程改造之細胞、載體及組合物
亦提供可結合於及/或靶向多種抗原的細胞，諸如經工程改造之細胞。在一些實施例中，經由靶向多種抗原之策略來達成選擇性及特異性改良。此類策略一般涉及多個抗原結合域，該等抗原結合域通常存在於不同的經基因工程改造之抗原受體上且特異性結合於不同抗原。在一些實施例中，細胞經工程改造以能夠結合超過一種抗原。舉例而言，在一些實施例中，細胞經工程改造以表現多特異性結合分子。在一些實施例中，細胞表現多種結合分子(例如重組受體)，其中之每一者均可靶向一種抗原或多種抗原，例如一種靶向BCMA (諸如本文所描述之任何BCMA)之受體及另一種靶向另一抗原(例如腫瘤抗原)之受體。在一些態樣中，將複數個經基因工程改造之抗原受體引入至細胞中，該等抗原受體特異性結合於不同抗原，該等抗原各自在待用該等細胞靶向之疾病或病狀或其組織或細胞中或在該疾病或病狀或其組織或細胞上進行表現。在一些態樣中，此類特徵可解決或降低脫靶效應之可能性或增加功效。舉例而言，在表現於疾病或病狀中之單個抗原亦表現於非患病或正常之細胞上或該等細胞中的情況下，此類多靶向途徑可藉由要求經由多個抗原受體進行結合來提供對所需細胞類型之選擇性，以便使該細胞活化或誘導特定效應功能。在一些實施例中，複數個細胞可經工程改造以表現一或多種不同結合分子(例如重組受體)，其中之每一者均可靶向一種抗原或多種抗原。
亦提供含有本文所描述之任一結合分子的多特異性細胞，諸如含有包括抗BCMA抗體之細胞表面蛋白質及結合於不同抗原或BCMA上不同抗原決定基之另一種細胞表面蛋白質(諸如另一種嵌合受體)的細胞。在一些實施例中，提供表現重組受體之細胞的組合物，其中結合分子、多特異性結合分子及/或重組受體中之一或多者結合及/或靶向BCMA。在一些實施例中，多特異性結合分子及/或重組受體靶向BCMA上之一或多個不同抗原決定基。
在一些實施例中，提供細胞組合物，其中各類型之細胞表現一或多個結合分子，例如重組受體。在一些實施例中，細胞包含(例如，已經以下轉型)：包含編碼包含一或多種抗體及/或其部分(例如其抗原結合片段)之一或多個胺基酸序列的一或多種核酸的一或多種載體。在一些實施例中，提供一或多種此類細胞。在一些實施例中，提供含有一或多種此類細胞之組合物。在一些實施例中，一或多種細胞可表現不同抗體或相同抗體。在一些實施例中，細胞中之每一者均表現一或多種抗體，諸如超過一種抗體。在一些實施例中，細胞中之每一者表現多特異性結合分子，例如多特異性受體，例如CAR。
在一些實施例中，細胞包括靶向BCMA及與特定疾病或病狀相關聯之第二或另外之抗原的多靶向策略。在一些實施例中，第二或另外之抗原由一個多特異性結合分子及/或多個結合分子及/或複數個各自經工程改造以表現一或多種重組受體之細胞(例如一或多個細胞)靶向。在一些實施例中，靶向第二或另外之抗原的重組受體表現於與BCMA結合分子相同之細胞上或表現於不同細胞上。
在一些實施例中，在用於多靶向策略的第二或另外之抗原當中包括其中該等抗原中之至少一者為通用腫瘤抗原或其家族成員的彼等抗原。在一些實施例中，第二或另外之抗原為在腫瘤上表現之抗原。在一些實施例中，本文所提供之BCMA結合分子靶向與第二或另外之抗原相同之腫瘤類型上的抗原。在一些實施例中，第二或另外之抗原亦可為通用腫瘤抗原，或可為對一種腫瘤類型具特異性之腫瘤抗原。在一些實施例中，細胞進一步包含另一種經基因工程改造之抗原受體，其識別在待治療之疾病或病狀上表現的第二或另外之抗原且誘導刺激或活化信號。
例示性抗原包括CD4、CD5、CD8、CD14、CD15、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD46、CD52、CD54、CD74、CD80、CD126、CD138、B7、MUC-1、Ia、HM1.24、HLA-DR、肌腱蛋白、血管生成因子、VEGF、PIGF、ED-B纖維黏連蛋白、致癌基因、致癌基因產物、CD66a-d、壞死抗原、Ii、IL-2、T101、TAC、IL-6、ROR1、TRAIL-R1 (DR4)、TRAIL-R2 (DR5)、B細胞成熟抗原(BCMA)、tEGFR、Her2、L1-CAM、間皮素、CEA、B型肝炎表面抗原、抗葉酸受體、CD24、CD30、CD44、EGFR、EGP-2、EGP-4、EPHa2、ErbB2、ErbB3、ErbB4、erbB二聚體、EGFR vIII、FBP、FCRL5、FCRH5、胎兒乙醯膽鹼受體、GD2、GD3、G蛋白偶聯受體C類5族成員D (GPRC5D)、HMW-MAA、IL-22R-α、IL-13R-α2、kdr、κ輕鏈、Lewis Y、L1-細胞黏附分子(L1-CAM)、黑素瘤相關抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、優先表現之黑素瘤抗原(PRAME)、存活素(survivin)、EGP2、EGP40、TAG72、B7-H6、IL-13受體a2 (IL-13Ra2)、CA9、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6整合素、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒AchR、NKG2D配位體、雙重抗原、與通用標籤締合之抗原、睪丸癌抗原、MUC1、MUC16、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胚抗原(oncofetal antigen)、VEGF-R2、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、前列腺特異性抗原、PSMA、Her2/neu、雌激素受體、孕酮受體、肝配蛋白B2、CD123、c-Met、GD-2、O-乙醯化GD2 (OGD2)、CE7、威爾姆斯腫瘤1 (WT-1)、週期蛋白、週期蛋白A2、CCL-1、hTERT、MDM2、CYP1B、WT1、活素(livin)、AFP、p53、週期蛋白(D1)、CS-1、BCMA、BAFF-R、TACI、CD56、TIM-3、CD123、L1-細胞黏附分子、MAGE-A1、MAGE A3、週期蛋白(諸如週期蛋白A1 (CCNA1))及/或病原體特異性抗原、生物素化分子，由HIV、HCV、HBV及/或其他病原體表現之分子，及/或在一些態樣中，新抗原決定基或其新抗原。在一些實施例中，抗原與通用標籤締合或為通用標籤。
在一些實施例中，複數種抗原(例如，第一抗原，例如BCMA；及第二或另外之抗原)表現於所靶向之細胞、組織或疾病或病狀上諸如癌細胞上。在一些態樣中，細胞、組織、疾病或病況為多發性骨髓瘤或多發性骨髓瘤細胞。複數種抗原中之一或多者一般亦表現於不需要用細胞療法靶向之細胞上，諸如正常或非患病之細胞或組織及/或經工程改造之細胞本身。在此類實施例中，藉由要求多個受體之接合達成細胞反應而達成特異性及/或功效。
在一些態樣中，抗原(例如第二或另外之抗原，諸如疾病特異性抗原及/或相關抗原)表現於多發性骨髓瘤上，該抗原諸如G蛋白偶聯受體C類5族成員D (GPRC5D)、CD38 (環狀ADP核糖羥化酶)、CD138 (多配體蛋白聚糖-1，多配體蛋白聚糖，SYN-1)、CS-1 (CS1、CD2亞群1、CRACC、SLAMF7、CD319及19A24)、BAFF-R、TACI及/或FcRH5。其他例示性多發性骨髓瘤抗原包括CD56、TIM-3、CD33、CD123、CD44、CD20、CD40、CD74、CD200、EGFR、β2-微球蛋白、HM1.24、IGF-1R、IL-6R、TRAIL-R1及IIA型活化素受體(ActRIIA)。參見Benson及Byrd, J. Clin. Oncol. (2012) 30(16): 2013-15；Tao及Anderson, Bone Marrow Research (2011):924058；Chu等人，Leukemia (2013) 28(4):917-27；Garfall等人，Discov Med. (2014) 17(91):37-46。在一些實施例中，抗原包括存在於淋巴腫瘤、骨髓瘤、AIDS相關淋巴瘤及/或移植後淋巴組織增生上之彼等抗原，諸如CD38。針對此類抗原之抗體或抗原結合片段為已知的，且包括例如美國專利第8,153,765號；第8,603477號、第8,008,450號；美國公開案第US20120189622號或第US20100260748號；及/或國際PCT公開案第WO2006099875號；第WO2009080829號或第WO2012092612號或第WO2014210064號中所描述之彼等抗體或抗原結合片段。在一些實施例中，此類抗體或其抗原結合片段(例如scFv)含於多特異性抗體、多特異性嵌合受體(諸如多特異性CAR)及/或多特異性細胞中。
在一些實施例中，細胞及方法包括多靶向策略，諸如表現細胞上之兩個或超過兩個經基因工程改造之受體，其各自識別不同抗原且通常各自包括不同細胞內信號傳導組分。此類多靶向策略描述於例如國際專利申請公開案第WO 2014055668 A1號(描述刺激性或活化性及共刺激CAR (例如，靶向兩種不同抗原之CAR)的組合，其個別地存在於脫靶(例如正常)細胞上但在一起僅存在於待治療之疾病或病狀的細胞上)及Fedorov等人，Sci. Transl. Medicine , 5(215) (2013年12月) (描述表現刺激性或活化性及抑制性CAR之細胞，諸如其中刺激性或活化性CAR結合於在正常或非患病之細胞及待治療之疾病或病狀之細胞上表現之一種抗原且抑制性CAR結合於僅在正常細胞或不需要治療之細胞上表現之另一種抗原的彼等細胞)中。
在一些實施例中，提供複數種細胞，其各自經工程改造以表現一或多種重組受體。舉例而言，在一些實施例中，一種細胞經工程改造以表現結合及/或靶向BCMA之結合分子，且另一種細胞經工程改造以表現結合及/或靶向另外或第二抗原之結合分子。在一些實施例中，細胞可各自表現多特異性結合分子，例如多特異性重組受體，其中靶抗原中之一或多者為BCMA。在一些此類實施例中，複數種細胞可在一起或分開地進行投與。在一些實施例中，複數種細胞與該等細胞同時或並行地進行投與，例如在同一天投與，及/或以任何次序與該複數種細胞中之另一種經工程改造之細胞依序或間歇地進行投與。舉例而言，在一些實施例中，表現BCMA結合分子(例如CAR)的經工程改造之細胞與表現結合不同靶抗原或BCMA上不同抗原決定基之結合分子的另一種經工程改造之細胞同時進行投與或以任何次序依序進行投與。在一些實施例中，複數種細胞可處於同一組合物中。例示性細胞組合物包括下文章節II中所描述之組合物。
IV. 醫藥組合物
亦提供組合物，其包括BCMA結合分子、免疫結合物、重組受體及經工程改造之細胞，包括醫藥組合物及調配物。在此類組合物當中為包括表現所提供之抗BCMA重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞(諸如複數個經工程改造之細胞)的彼等組合物。
提供醫藥調配物，其包含BCMA結合重組嵌合抗原受體或表現該等受體的經工程改造之細胞、複數個表現該等受體的經工程改造之細胞及/或用於組合治療或療法的另外之藥劑。醫藥組合物及調配物一般包括一或多種視情況選用的醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。在一些實施例中，組合物包括至少一種另外之治療劑。
術語「醫藥調配物」係指所呈形式容許其中所含活性成分之生物活性有效且不含對該調配物將投與之個體具有不可接受毒性之另外組分的製劑。
「醫藥學上可接受之載劑」係指醫藥調配物中除活性成分以外之對個體無毒的成分。醫藥學上可接受之載劑包括(但不限於)緩衝劑、賦形劑、穩定劑或防腐劑。
在一些態樣中，載劑之選擇部分地係由特定細胞、結合分子及/或抗體，及/或由投藥方法決定。因此，存在多種適合之調配物。舉例而言，醫藥組合物可含有防腐劑。適合之防腐劑可包括例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯甲酸鈉及苯紮氯銨(benzalkonium chloride)。在一些態樣中，使用兩種或超過兩種防腐劑之混合物。防腐劑或其混合物通常以總組合物之約0.0001重量%至約2重量%的量存在。載劑由例如Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A.編 (1980)描述。醫藥學上可接受之載劑在所採用之劑量及濃度下一般對接受者無毒，且包括(但不限於)：緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如氯化十八烷基二甲基苯甲基銨；氯化六羥季銨；苯紮氯銨；苄索氯銨(benzethonium chloride)；苯酚、丁醇或苯甲醇；對羥基苯甲酸烷酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(小於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖類，諸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬錯合物(例如Zn-蛋白質錯合物)；及/或非離子型界面活性劑，諸如聚乙二醇(PEG)。
在一些態樣中，組合物中包括緩衝劑。適合之緩衝劑包括例如檸檬酸、檸檬酸鈉、磷酸、磷酸鉀以及各種其他酸及鹽。在一些態樣中，使用兩種或超過兩種緩衝劑之混合物。緩衝劑或其混合物通常以總組合物之約0.001重量%至約4重量%的量存在。用於製備可投與之醫藥組合物的方法為已知的。例示性方法更詳細地描述於例如Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 第21版 (2005年5月1日)中。
本文所描述之抗體的調配物可包括凍乾調配物及水溶液。
調配物或組合物亦可含有超過一種適用於特定適應症、疾病或病狀之活性成分，該適應症、疾病或病狀用結合分子或細胞(較佳具有與該結合分子或細胞互補之活性的彼等結合分子或細胞)治療，其中各別活性彼此間無不利影響。此類活性成分適合地以對預期目的有效之量組合存在。因此，在一些實施例中，醫藥組合物進一步包括其他醫藥活性劑或藥物，諸如化學治療劑，例如天冬醯胺酶、白消安(busulfan)、卡鉑(carboplatin)、順鉑(cisplatin)、道諾黴素(daunorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他濱(gemcitabine)、羥基脲、甲胺喋呤(methotrexate)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、利妥昔單抗(rituximab)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)等。在一些實施例中，細胞或抗體以鹽(例如醫藥學上可接受之鹽)的形式進行投與。適合的醫藥學上可接受之酸加成鹽包括衍生自無機酸及有機酸之彼等酸加成鹽，該無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸及硫酸，該有機酸諸如酒石酸、乙酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、反丁烯二酸、苯甲酸、乙醇酸、葡萄糖酸、丁二酸及芳基磺酸(例如對甲苯磺酸)。
活性成分可截留於微膠囊、膠態藥物遞送系統(例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米顆粒及奈米膠囊)或巨乳液中。在某些實施例中，醫藥組合物調配為包合錯合物，諸如環糊精包合錯合物；或調配為脂質體。脂質體可用於使宿主細胞(例如T細胞或NK細胞)靶向特定組織。多種方法可供用於製備脂質體，諸如以下文獻中所描述之彼等方法：例如Szoka等人，Ann. Rev. Biophys. Bioeng., 9: 467 (1980)，及美國專利4,235,871、4,501,728、4,837,028及5,019,369。
在一些態樣中，醫藥組合物可採用定時釋放型、延遲釋放型及持續釋放型遞送系統，以使得組合物之遞送發生在待治療之部位敏感化之前且有充分時間以引起待治療之部位的敏感化。多種類型之釋放遞送系統為可獲得且已知的。此類系統可避免重複投與組合物，藉此提高個體及醫師之便利性。
在一些實施例中，醫藥組合物含有有效治療或預防疾病或病狀之量(諸如治療有效量或預防有效量)的結合分子及/或細胞。在一些實施例中，治療或預防功效係藉由定期評估所治療之個體來加以監測。對於經數天或更長時間之重複投與，視病狀而定，重複治療直至所需之疾病症狀遏制發生為止。然而，其他給藥方案可適用且可確定。所需劑量可藉由單次推注(bolus)投與組合物、藉由多次推注投與組合物或藉由連續輸注投與組合物來遞送。
在某些實施例中，在經基因工程改造之細胞含有結合分子的情形下，向個體投與範圍為約一百萬至約1000億個細胞，諸如1百萬至約500億個細胞(例如約5百萬個細胞、約2500萬個細胞、約5億個細胞、約10億個細胞、約50億個細胞、約200億個細胞、約300億個細胞、約400億個細胞，或任何兩個前述值所界定之範圍)，諸如約1千萬至約1000億個細胞(例如約2千萬個細胞、約3千萬個細胞、約4千萬個細胞、約6千萬個細胞、約7千萬個細胞、約8千萬個細胞、約9千萬個細胞、約100億個細胞、約250億個細胞、約500億個細胞、約750億個細胞、約900億個細胞，或任何兩個前述值所界定之範圍)，且在一些情況下為約1億個細胞至約500億個細胞(例如約1.2億個細胞、約2.5億個細胞、約3.5億個細胞、約4.5億個細胞、約6.5億個細胞、約8億個細胞、約9億個細胞、約30億個細胞、約300億個細胞、約450億個細胞)或此等範圍之間的任何值，及/或此數目之細胞/公斤之個體體重。在一些態樣中，在經基因工程改造之細胞表現結合分子的情形下，例如，組合物可含有至少用於為了細胞療法給藥而投與之數目的細胞，諸如至少本文所描述用於投藥之數目的細胞，例如在章節V.A中所描述。
可使用標準投藥技術、調配物及/或裝置進行投與。提供調配物及用於儲存及投與組合物之裝置，諸如注射器及小瓶。細胞之投與可為自體或異源的。舉例而言，免疫反應性細胞或祖細胞可自一位個體獲得且向同一個體或不同的相容個體進行投與。來源於周邊血液之免疫反應性細胞或其後代(例如活體內、離體或活體外來源)可經由局域化注射進行投與，包括導管投藥、全身性注射、局域化注射、靜脈內注射或非經腸投藥。當投與治療性組合物(例如含有經基因修飾之免疫反應性細胞的醫藥組合物)時，其將一般調配成單位劑量可注射形式(溶液、懸浮液、乳液)。
調配物包括用於經口、靜脈內、腹膜內、皮下、經肺、經皮、肌肉內、鼻內、經頰、舌下或栓劑投藥之彼等調配物。在一些實施例中，細胞群體非經腸進行投與。如本文所用之術語「非經腸」包括靜脈內、肌內、皮下、經直腸、經陰道、顱內、胸內及腹膜內投藥。在一些實施例中，細胞群體使用周邊全身性遞送藉由靜脈內、腹膜內或皮下注射來向個體進行投與。
在一些實施例中，組合物以無菌液體製劑形式提供，例如等張性水溶液、懸浮液、乳液、分散液或黏稠組合物，在一些態樣中，其可緩衝至所選擇之pH。製備液體製劑通常比凝膠、其他黏稠組合物及固體組合物更容易。另外，投與，尤其藉由注射投與液體組合物在某種程度上更方便。另一方面，黏稠組合物可在適當黏度範圍內調配以使得與特定組織接觸之時段更長。液體或黏稠組合物可包含載劑，載劑可為含有例如水、鹽水、磷酸鹽緩衝鹽水、多元醇(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇)及其適合之混合物的溶劑或分散介質。
無菌可注射溶液可藉由將結合分子併入溶劑(諸如與適合之載劑、稀釋劑或賦形劑(諸如無菌水、生理鹽水、葡萄糖、右旋糖或其類似物)混合)來加以製備。組合物亦可凍乾。視投藥途徑及所需製劑而定，組合物可含有輔助物質，諸如濕潤劑、分散劑或乳化劑(例如甲基纖維素)、pH緩衝劑、膠凝或黏度增強添加劑、防腐劑、調味劑、顏料及類似物。在一些態樣中，可查詢標準文本以製備適合之製劑。
可添加增強組合物之穩定性及無菌性的各種添加劑，包括抗微生物防腐劑、抗氧化劑、螯合劑及緩衝劑。可藉由各種抗細菌劑及抗真菌劑(例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸及其類似物)來確保防止微生物之活動。可注射醫藥形式之延長吸收可藉由使用延遲吸收劑(諸如單硬脂酸鋁及明膠)來實現。
可以製備持續釋放型製劑。持續釋放型製劑之適合實例包括含有抗體之固體疏水性聚合物之半滲透基質，該等基質呈成形物品形式，例如膜或微膠囊。
待用於活體內投與之調配物一般為無菌的。無菌性可藉由例如經由無菌過濾膜過濾來容易地實現。
亦提供用於組合療法之醫藥組合物。可製備用於本文所描述之組合療法的任一另外之藥劑，諸如章節III.B中所描述之藥劑，且以一或多種醫藥組合物之形式與本文所描述的BCMA結合分子(例如抗體)、免疫結合物、重組受體(例如嵌合抗原受體)及/或表現該等分子(例如重組受體)的經工程改造之細胞一起投與。組合療法可以一或多種醫藥組合物形式進行投與，例如，其中結合分子、重組受體及/或細胞處於與另外之藥劑相同的醫藥組合物中或處於各別醫藥組合物中。舉例而言，在一些實施例中，另外之藥劑為另外的經工程改造之細胞，例如經工程改造以表現不同重組受體之細胞，且在同一組合物中或在各別組合物中進行投與。在一些實施例中，醫藥組合物中之每一者均根據特定結合分子、重組受體、細胞(例如經工程改造之細胞)及/或另外之藥劑及特定給藥方案及/或遞送方法而以適合之調配物形式進行調配。
V. 方法及用途
亦提供使用BCMA結合分子、免疫結合物、重組受體、經工程改造之細胞及其醫藥組合物及調配物的方法及其用途，諸如用於治療其中表現BCMA之疾病、病狀及病症及/或用於偵測、診斷及預後方法中。在此類方法及用途當中為涉及向個體投與表現所提供之抗BCMA重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞，諸如複數個經工程改造之細胞的彼等方法及用途。亦提供組合療法及/或治療之方法。
A. 治療及預防方法及用途
亦提供投與BCMA結合分子(包括抗BCMA重組受體(例如CAR)、表現該等重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞、複數個表現該等受體的經工程改造之細胞及/或包含其之組合物)的方法及其用途，諸如治療及預防用途。此類方法及用途包括以下治療方法及用途，例如涉及向患有與BCMA相關聯之疾病、病狀或病症的個體投與分子(例如重組受體)、細胞(例如經工程改造之細胞)或含有其之組合物，該疾病、病狀或病症諸如與BCMA表現相關聯及/或其中細胞或組織表現(例如特異性地表現) BCMA的疾病、病狀或病症。在一些實施例中，分子、細胞及/或組合物以實現對疾病或病症之治療的有效量進行投與。本文提供重組受體(例如CAR)及細胞(例如經工程改造之細胞)的用途，其用於此類方法及治療中且用於製備進行此類治療方法之藥劑。在一些實施例中，該等方法係藉由向患有、曾患有或疑似患有疾病或病狀之個體投與結合分子或細胞或包含其之組合物來進行。在一些實施例中，該等方法藉此治療個體之疾病或病狀或病症。
如本文所用，「治療(treatment)」(及其文法變化形式，諸如「治療(treat)」或「治療(treating)」)係指疾病或病狀或病症、或症狀、不良作用或後果、或與其相關聯之表型完全或部分改善或減輕。所需治療作用包括(但不限於)預防疾病出現或復發、緩解症狀、減輕疾病之任何直接或間接病理性後果、預防癌轉移、降低疾病進展速率、改善(amelioration)或緩和疾病病況及緩解或改善(improved)預後。該術語不暗示疾病之完全治癒或任何症狀之完全消除或對所有症狀或結果均有作用。
如本文所用，「延遲疾病發展」意謂延緩、阻礙、減緩、扼止、穩定、遏制及/或推遲疾病(諸如癌症)之發展。視所治療之疾病及/或個體之病史而定，此延遲可具有不同時間長度。足夠或顯著延遲可實際上涵蓋預防，從而使個體不患上疾病。舉例而言，可延遲晚期癌症，諸如癌轉移發展。
如本文所用，「預防」包括在個體疾病出現或復發方面提供預防作用，該個體可能易患該疾病但尚未診斷患有該疾病。在一些實施例中，所提供之分子及組合物用於延遲疾病發展或減慢疾病進展。
如本文所用，「遏制」功能或活性為當與除所關注之條件或參數以外在其他方面相同之條件相比或者與另一條件相比時，減小功能或活性。舉例而言，與在不存在抗體或組合物或細胞之情況下的腫瘤生長速率相比，遏制腫瘤生長之抗體或組合物或細胞使腫瘤生長速率降低。
藥劑(例如醫藥調配物、結合分子、抗體、細胞或組合物)在投藥情形下之「有效量」係指在必要劑量/量下及在必要時間段內有效達成所需結果(諸如治療或預防結果)的量。
藥劑(例如醫藥調配物、結合分子、抗體、細胞或組合物)之「治療有效量」係指在必要劑量/量下及在必要時間段內達成所需治療結果(諸如治療疾病、病狀或病症，及/或治療之藥物動力學或藥效學作用)的量。治療有效量可根據以下因素而變化：諸如個體之疾病病況、年齡、性別及體重以及所投與之細胞群體。在一些實施例中，所提供之方法涉及以有效量(例如治療有效量)投與分子、抗體、細胞及/或組合物。
「預防有效量」係指在必要劑量下及在必要時間段內有效達成所需預防結果的量。通常但不一定，由於個體在患病之前或在疾病早期使用預防劑量，故預防有效量將低於治療有效量。
如本文所用，「個體(subject/individual)」為哺乳動物。在一些實施例中，「哺乳動物」包括人類、非人類靈長類動物、家畜及農畜以及動物園動物、體育運動用動物或寵物，諸如狗、馬、兔、牛、豬、倉鼠、沙鼠、小鼠、雪貂、大鼠、貓、猴等。在一些實施例中，個體為人類。
在待治療之疾病當中為任何與BCMA相關聯之疾病或病症，或任何其中特異性表現BCMA及/或其中BCMA已成為治療目標之疾病或病症(在本文中亦可互換地稱為「BCMA相關疾病或病症」)。與BCMA表現相關聯之癌症包括血液學惡性病，諸如多發性骨髓瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症以及霍奇金氏及非霍奇金氏淋巴瘤兩者。BCMA之綜述參見Coquery等人，Crit Rev Immunol ., 2012, 32(4):287-305。由於BCMA已牽涉介導腫瘤細胞存活，故其為癌症療法之潛在標靶。先前已描述含有小鼠抗人類BCMA抗體之嵌合抗原受體及表現此類嵌合受體之細胞。參見Carpenter等人，Clin Cancer Res ., 2013, 19(8):2048-2060。
在一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為B細胞相關病症。在一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為來自以下當中之一或多種疾病或病狀：神經膠母細胞瘤、淋巴瘤樣肉芽腫、移植後淋巴組織增生病症、免疫調控失調症、重鏈疾病、原發性或免疫細胞相關澱粉樣變性病或意義不明之單株球蛋白症。
在一些實施例中，與BCMA相關聯之疾病或病症為自體免疫疾病或病症。此類自體免疫疾病或病症包括(但不限於)全身性紅斑性狼瘡症(SLE)、狼瘡性腎炎、發炎性腸病、類風濕性關節炎(例如青少年類風濕性關節炎)、ANCA相關脈管炎、特發性血小板減少性紫癜症(ITP)、血栓性血小板減少性紫癜症(TTP)、自體免疫血小板減少症、卻格司氏病、格雷氏病、韋格納氏肉芽腫病、結節性多動脈炎、休格連氏症候群、尋常天疱瘡、硬皮病、多發性硬化症、牛皮癬、IgA腎病變、IgM多發性神經病變、脈管炎、糖尿病、雷諾氏症候群、抗磷脂症候群、古巴士德氏疾病、川崎病、自體免疫溶血性貧血、重症肌無力或進行性絲球體腎炎。
在某些疾病及病狀中，BCMA表現於惡性細胞及癌症上。在一些實施例中，癌症(例如BCMA表現性癌症)為B細胞惡性病。在一些實施例中，癌症(例如BCMA表現性癌症)為淋巴瘤、白血病或漿細胞惡性病。本文涵蓋之淋巴瘤包括(但不限於)伯基特淋巴瘤(例如地方性伯基特氏淋巴瘤或偶發性伯基特氏淋巴瘤)、非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)、霍奇金氏淋巴瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、濾泡性淋巴瘤、小無裂細胞淋巴瘤、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、邊緣區淋巴瘤、脾淋巴瘤、結節單核細胞樣B細胞淋巴瘤、免疫母細胞淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、瀰漫性混合細胞淋巴瘤、肺部B細胞血管中心性淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL)或套細胞淋巴瘤(MCL)。此處涵蓋之白血病包括(但不限於)慢性淋巴球性白血病(CLL)、漿細胞白血病或急性淋巴球性白血病(ALL)。本文亦涵蓋漿細胞惡性病，包括(但不限於)多發性骨髓瘤(例如非分泌型多發性骨髓瘤、鬱積型多發性骨髓瘤)或漿細胞瘤。在一些實施例中，疾病或病狀為多發性骨髓瘤，諸如復發性及/或難治性多發性骨髓瘤。在可治療的與BCMA相關聯之疾病、病症或病狀(例如BCMA表現性癌症)當中包括(但不限於)神經母細胞瘤、腎細胞癌、結腸癌、結腸直腸癌、乳癌、上皮鱗狀細胞癌、黑素瘤、骨髓瘤(例如多發性骨髓瘤)、胃癌、腦癌、肺癌、胰臟癌、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸癌、甲狀腺癌、子宮癌、腎上腺癌及頭頸癌。
在一些實施例中，該等方法可鑑別患有BCMA相關疾病或病症、疑似患有該疾病或病症、或具有患上該疾病或病症之風險的個體。因此，提供用於以下之方法：鑑別患有與BCMA表現升高相關聯之疾病或病症的個體，及選擇其用所提供之BCMA結合重組受體(例如CAR)及/或表現該等重組受體的經工程改造之細胞進行治療。
舉例而言，個體可針對與BCMA表現升高相關聯之疾病或病症(諸如BCMA表現性癌症)的存在進行篩選。在一些實施例中，該等方法包括針對BCMA相關疾病(例如腫瘤)之存在進行篩選或偵測其存在。因此，在一些態樣中，樣品可獲自疑似患有與BCMA表現升高相關聯之疾病或病症的患者且分析其BCMA表現量。在一些態樣中，可選擇針對BCMA相關疾病或病症測試為陽性之個體進行藉由本發明方法之治療，且可投與治療有效量的如本文所描述之包含BCMA結合分子之重組受體(例如CAR)、含有重組受體之細胞或其醫藥組合物。
在一些實施例中，個體患有持久性或復發疾病，例如在用另一種BCMA特異性抗體及/或表現靶向BCMA之嵌合受體的細胞及/或其他療法(包括化學療法、輻射及/或造血幹細胞移植(HSCT)，例如同種異體HSCT)治療之後患有持久性或復發疾病。在一些實施例中，儘管個體已對另一種靶向BCMA之療法變得具有耐藥性，但投藥有效地治療該個體。在一些實施例中，個體未復發但確定為具有復發之風險，諸如具有高復發風險，且因此預防性投與化合物或組合物，以例如降低復發可能性或防止復發。
在一些實施例中，個體為符合移植條件，諸如符合造血幹細胞移植(HSCT) (例如同種異體HSCT)條件的個體。在一些此類實施例中，在投與如本文所提供的BCMA結合分子(包括抗BCMA重組受體(例如CAR)、表現該等重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞、複數個表現該等受體的經工程改造之細胞及/或包含其之組合物)之前，個體儘管符合條件但先前尚未接受移植。
在一些實施例中，個體為不符合移植條件，諸如不符合造血幹細胞移植(HSCT) (例如同種異體HSCT)條件的個體。在一些此類實施例中，根據本文所提供之實施例，對此類個體投與BCMA結合分子，包括抗BCMA重組受體(例如CAR)、表現該等重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞、複數個表現該等受體的經工程改造之細胞及/或包含其之組合物。
在一些實施例中，治療不會誘導個體對療法之免疫反應，及/或未在妨礙有效治療疾病或病狀的程度上誘導此類反應。在一些態樣中，免疫原性及/或移植物抗宿主反應之程度小於使用不同但類似療法所觀測到之程度。舉例而言，與包括與所提供之抗體(諸如小鼠或兔或人類化抗體)結合於類似(例如重疊)抗原決定基及/或競爭結合於BCMA之不同抗體的CAR相比，在使用表現包括所提供之抗BCMA抗體之CAR的細胞進行授受細胞療法的情況下，免疫原性程度在一些實施例中降低。
在一些實施例中，該等方法包括授受細胞療法，其中向個體投與表現所提供之包含BCMA結合分子之重組受體(例如，包含抗BCMA抗體或其抗原結合片段之CAR)的經基因工程改造之細胞。此類投藥可促進細胞以靶向BCMA之方式活化(例如T細胞活化)，以使得疾病或病症之細胞成為破壞目標。
因此，所提供之方法及用途包括用於授受細胞療法之方法及用途。在一些實施例中，該等方法包括向個體、組織或細胞(諸如患有疾病、病狀或病症，具有患有疾病、病狀或病症之風險或疑似患有疾病、病狀或病症者)投與細胞或含有該等細胞之組合物。在一些實施例中，細胞、群體及組合物向患有待治療之特定疾病或病狀的個體進行投與，例如經由授受細胞療法(諸如授受性T細胞療法)來進行投與。在一些實施例中，向個體(諸如患有疾病或病狀或具有疾病或病狀之風險的個體)投與細胞或組合物。在一些態樣中，該等方法藉此治療(例如改善)疾病或病狀之一或多種症狀，諸如藉由減輕BCMA表現性癌症中之腫瘤負荷來治療。
投與用於授受細胞療法之細胞的方法為已知的，且可與所提供之方法及組合物結合使用。舉例而言，授受性T細胞療法描述於例如Gruenberg等人之美國專利申請公開案第2003/0170238號；Rosenberg之美國專利第4,690,915號；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)中。參見例如Themeli等人 (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933；Tsukahara等人 (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9；Davila等人 (2013) PLoS ONE 8(4): e61338。
在一些實施例中，細胞療法(例如授受細胞療法，例如授受性T細胞療法)藉由自體轉移來進行，其中自將接受細胞療法之個體或自來源於此個體之樣品分離細胞及/或以其他方式製備細胞。在一些態樣中，細胞來源於需要治療之個體(例如患者)且細胞在分離及處理之後向同一個體進行投與。
在一些實施例中，細胞療法(例如授受細胞療法，例如授受性T細胞療法)藉由同種異體轉移來進行，其中自除將接受或最終接受細胞療法之個體以外的個體(例如第一個體)分離細胞及/或以其他方式製備細胞。在此類實施例中，隨後向相同物種之不同個體(例如第二個體)投與該等細胞。在一些實施例中，第一及第二個體在基因上相同。在一些實施例中，第一及第二個體在基因上類似。在一些實施例中，第二個體表現與第一個體相同之HLA類別或超型。
在一些實施例中，細胞、細胞群體或組合物所投與之個體為靈長類動物，諸如人類。在一些實施例中，細胞、細胞群體或組合物所投與之個體為非人類靈長類動物。在一些實施例中，非人類靈長類動物為猴(例如食蟹獼猴)或猿。個體可為雄性或雌性且可為任何適齡(包括嬰兒、幼年、青年、成年及老年)個體。在一些實施例中，個體為非靈長類哺乳動物，諸如嚙齒動物(例如小鼠、大鼠等)。在一些實例中，患者或個體為經驗證之動物模型，其用於疾病、授受細胞療法及/或用於評定毒性結果，諸如細胞介素釋放症候群(CRS)。
BCMA結合分子(諸如重組受體(例如CAR)及表現其之細胞)可藉由任何適合之方式進行投與，例如藉由注射，例如靜脈內或皮下注射、眼內注射、眼周注射、視網膜下注射、玻璃體內注射、經中隔注射、鞏膜下注射、脈絡膜內注射、前房內注射、結膜下注射(subconjunctival injection)、結膜下注射(subconjuntival injection)、眼球筋膜囊下注射(sub-Tenon's injection)、眼球後注射、眼球周注射，或後近鞏膜遞送。在一些實施例中，其藉由非經腸、肺內及鼻內投藥，且若需要用於局部治療，藉由病灶內投藥來進行投與。非經腸輸注包括肌內、靜脈內、動脈內、腹膜內、顱內、胸內或皮下投藥。給藥及投藥可部分地視投藥是短暫還是長期而定。各種給藥時程包括(但不限於)單次投藥或在各時間點多次投藥、推注投藥及脈衝輸注。
對於疾病之預防或治療，結合分子、重組受體或細胞之適當劑量可視以下而定：待治療之疾病的類型、結合分子或重組受體之類型、疾病之嚴重程度及病程、結合分子或重組受體是為預防還是治療目的而投與、先前療法、患者臨床病史及對重組受體或細胞之反應，及主治醫師之判斷。在一些實施例中，組合物及分子及細胞適合一次性或經一系列治療而向患者進行投與。
在一些實施例中，投藥之劑量及/或頻率係基於功效及/或反應來決定。在一些實施例中，功效係藉由評估疾病狀態來確定。用於評定疾病狀態之例示性方法包括：藉由電泳及免疫固定來量測生物流體(諸如血液及/或尿液)中之M蛋白質；對血液之sFLC (κ及λ)進行量化；骨骼調查；及在患有髓外疾病之個體中藉由正電子發射斷層攝影術(PET)/電腦斷層攝影術(CT)來進行成像。在一些實施例中，疾病狀態可藉由骨髓檢查來加以評估。在一些實例中，投藥之劑量及/或頻率係藉由重組受體或細胞在血液及/或骨髓中之擴增及存留性來決定。在一些實施例中，投藥之劑量及/或頻率係基於重組受體或經工程改造之細胞的抗腫瘤活性來決定。在一些實施例中，抗腫瘤活性係藉由總反應率(ORR)及/或國際骨髓瘤工作小組(International Myeloma Working Group，IMWG)統一反應準則來確定。在一些實施例中，反應使用微小殘留病(MRD)評定來進行評估。在一些實施例中，反應基於投與重組受體或細胞之後的反應持續時間來進行評估。在一些實例中，投藥之劑量及/或頻率可基於毒性。在一些實施例中，劑量及/或頻率可基於重組受體及/或細胞所投與之個體的健康狀況相關之生活品質(HRQoL)來決定。在一些實施例中，投藥之劑量及/或頻率可基於以上準則中之任一者而變化，亦即增加或減少。
在一些實施例中，可監測治療之毒性及/或副作用，且將其用於調整投與重組受體(例如CAR)、細胞及或組合物之劑量及/或頻率。舉例而言，可監測不良事件及實驗室異常，且將其用於調整投藥之劑量及/或頻率。不良事件包括輸注反應、細胞介素釋放症候群(CRS)、神經毒性、巨噬細胞活化症候群及腫瘤溶解症候群(TLS)。此類事件中之任一者均可確立劑量限制性毒性及認為有必要使劑量減少及/或治療終止。可用作確立投藥之劑量及/或頻率之指南的其他副作用或不良事件包括非血液科不良事件，其包括(但不限於)疲乏、發熱或發熱性嗜中性球減少症、轉胺酶增加持續固定持續時間(例如，小於或等於2週或小於或等於7天)、頭痛、骨痛、低血壓、低氧、發冷、腹瀉、噁心/嘔吐、神經毒性(例如，混亂、失語、癲癇、抽搐、昏睡及/或心理狀態改變)、彌散性血管內凝血、其他無症狀非血液學臨床實驗室異常，諸如電解質異常。可用作確立投藥之劑量及/或頻率之指南的其他副作用或不良事件包括血液科不良事件，其包括(但不限於)嗜中性球減少症、白血球減少症、血小板減少症、動物及/或B細胞發育不全及低γ球蛋白血症(hypogammaglobinemia)。
在某些實施例中，在經基因工程改造之細胞含有結合分子或重組受體的情形下，向個體投與範圍為約一百萬至約1000億個細胞及/或該量之細胞/公斤之體重，諸如，例如約1百萬至約500億個細胞(例如約5百萬個細胞、約2500萬個細胞、約5億個細胞、約10億個細胞、約50億個細胞、約200億個細胞、約300億個細胞、約400億個細胞，或任何兩個前述值所界定之範圍)，諸如約1千萬至約1000億個細胞(例如約2千萬個細胞、約2500萬個細胞、約3千萬個細胞、約4千萬個細胞、約6千萬個細胞、約7千萬個細胞、約8千萬個細胞、約9千萬個細胞、約100億個細胞、約250億個細胞、約500億個細胞、約750億個細胞、約900億個細胞，或任何兩個前述值所界定之範圍)，且在一些情況下為約1億個細胞至約500億個細胞(例如約1.2億個細胞、約1.5億個細胞、約2.5億個細胞、約3億個細胞、約3.5億個細胞、約4.5億個細胞、約5億個細胞、約6億個細胞、約6.5億個細胞、約8億個細胞、約9億個細胞、約10億個細胞、約12億個細胞、約30億個細胞、約300億個細胞、約450億個細胞或約500億個細胞)或此等範圍之間的任何值及/或該值/公斤之個體體重。此外，劑量可視疾病或病症及/或患者及/或其他治療特有之性質而變化。
在一些實施例中，所投與之細胞為經工程改造以表現BCMA結合重組受體(例如CAR)之免疫細胞。在一些實施例中，免疫細胞為T細胞。在一些實施例中，所投與之細胞為CD4+ T細胞。在一些實施例中，所投與之細胞為CD8+ T細胞。在一些實施例中，所投與之細胞為CD4+及CD8+ T細胞之組合，諸如CAR T細胞。在一些實例中，CD4+細胞與CD8+細胞之比率(CD4:CD8)為1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1。
在一些實施例中，細胞、結合分子或重組受體作為組合治療之一部分進行投與，諸如與另一種治療性干預(諸如另一種抗體或經工程改造之細胞或受體或藥劑，諸如細胞毒性劑或治療劑)同時進行投與或以任何次序依序進行投與。
在一些實施例中，細胞、結合分子及/或重組受體與另一或多種治療劑一起共投與或與另一種治療性干預結合，同時或以任何次序依序共投與。在一些情形下，細胞與另一種療法在足夠接近之時間上共投與，以使得細胞群體增強另一或多種治療劑之作用，或反之亦然。在一些實施例中，細胞、結合分子及/或重組受體在另一或多種治療劑之前進行投與。在一些實施例中，細胞、結合分子及/或重組受體在另一或多種治療劑之後進行投與。
在一些實施例中，個體可在白血球清除術之後及在淋巴球耗乏化學療法之前接受橋接療法(bridging therapy)。治療醫師可在製造所提供之組合物或細胞期間決定橋接療法是否為必要的，例如對於疾病控制為必要的。在一些實施例中，橋接療法不包括生物試劑，諸如抗體(例如達雷木單抗(Daratumumab))。在一些實施例中，橋接療法在淋巴球耗乏起始之前中斷。在一些實施例中，橋接療法在淋巴球耗乏之前1天、2天、3天、4天、5天、7天、10天、14天、21天、28天、45天或60天時中斷。
在一些態樣中，一旦向哺乳動物(例如人類)投與細胞，則藉由多種已知方法中之任一者來量測經工程改造之細胞群體及/或抗體的生物活性。評定參數包括在活體內(例如藉由成像)或離體(例如藉由ELISA或流式細胞量測術)評定的經工程改造或天然之T細胞或其他免疫細胞對抗原的特異性結合。在某些實施例中，經工程改造之細胞破壞靶細胞的能力可使用此項技術中已知的任何適合之方法來加以量測，諸如以下文獻中所描述之細胞毒性分析：例如Kochenderfer等人，J. Immunotherapy , 32(7): 689-702 (2009)，及Herman等人J. Immunological Methods , 285(1): 25-40 (2004)。在某些實施例中，細胞之生物活性亦可藉由分析某些細胞介素(諸如CD 107a、IFNγ、IL-2及TNF)之表現及/或分泌來加以量測。在一些態樣中，生物活性藉由評定臨床結果(諸如腫瘤負荷或負載之減小)來加以量測。
在某些實施例中，經工程改造之細胞以多種方式進行修飾，以使得其治療或預防功效增加。舉例而言，在一些實施例中，由群體表現的經工程改造之CAR或TCR直接或經由連接子間接與靶向部分結合。使化合物(例如CAR或TCR)與靶向部分結合之實踐為此項技術中已知的。參見例如Wadwa等人，J. Drug Targeting, 3(2):111 (1995)，及美國專利5,087,616。
B. 組合療法
亦提供組合療法之方法，其包括投與BCMA結合重組受體(例如CAR)、表現該等重組受體(例如CAR)的經工程改造之細胞、複數個表現該等受體的經工程改造之細胞及/或包含其之組合物的方法及其用途，諸如治療及預防用途。
在一些實施例中，本文所描述的BCMA結合重組受體(例如嵌合抗原受體)及/或表現該等分子(例如重組受體)的經工程改造之細胞作為組合治療或組合療法之一部分進行投與，諸如與另一或多種治療性干預同時進行投與、以任何次序依序或間歇地進行投與。在一些實施例中，另一或多種治療性干預包括例如抗體、經工程改造之細胞、受體及/或藥劑，諸如表現重組受體之細胞，及/或細胞毒性劑或治療劑，例如化學治療劑。在一些實施例中，組合療法包括投與另一或多種藥劑、療法及/或治療，例如本文所描述的另外之藥劑、療法及/或治療中的任一者。在一些實施例中，組合療法包括投與另一或多種用於治療或療法之藥劑，諸如免疫調節劑、免疫檢查點抑制劑、腺苷路徑或腺苷受體拮抗劑或促效劑、及激酶抑制劑。在一些實施例中，組合治療或組合療法包括另外之治療，諸如手術治療、移植及/或放射線療法。亦提供組合治療或組合療法之方法，其包括本文所描述之BCMA結合重組受體(例如CAR)、細胞及/或組合物及另一或多種治療性干預。
在一些實施例中，用於組合治療或組合療法的另外之藥劑增強、升高及/或促進結合分子、重組受體、細胞及/或組合物之治療作用的功效及/或安全性。在一些實施例中，另外之藥劑增強或改善所投與之細胞(例如表現結合分子或重組受體之細胞)的功效、存活期或存留性。在一些實施例中，另外之藥劑係選自以下當中：蛋白質磷酸酶抑制劑、激酶抑制劑、細胞介素、免疫調節劑或降低調控性T (Treg)細胞之水準或活性的藥劑。在一些實施例中，另外之藥劑借助於減輕或改善所投與之結合分子、重組受體、細胞及/或組合物的不良作用來增強其安全性。在一些實施例中，另外之藥劑可治療相同之疾病、病狀或共病。在一些實施例中，另外之藥劑可改善、減輕或消除與投與重組受體、細胞及/或組合物(例如CAR表現性細胞)相關聯之一或多種毒性、不良作用或副作用。
在一些實施例中，疼痛控制藥物治療(諸如乙醯胺苯酚)或抗組胺劑(諸如苯海拉明)可在投與本文所提供之重組受體、細胞或組合物之前、期間或之後進行投與，以改善或減輕或消除與治療相關聯之輕微副作用。在一些實例中，可投與紅血球及血小板輸注及/或群落刺激因子，減輕或消除與投與重組受體、細胞及/或組合物(例如CAR表現性細胞)相關聯之一或多種毒性、不良作用或副作用。在一些實施例中，可投與預防性或經驗性抗感染劑(例如，用於肺囊蟲肺炎[PCP]預防之三甲氧苄二胺嘧啶/磺胺甲基異噁唑、廣譜抗生素、抗真菌劑或用於發熱性嗜中性球減少症之抗病毒劑)以治療由治療引起之副作用。在一些實例中，當必要時，可提供預防藥以治療由於治療而發生之淋巴球減少症及/或嗜中性球減少症。
在一些實施例中，另外之療法、治療或藥劑包括化學療法、放射線療法、手術、移植、授受細胞療法、抗體、細胞毒性劑、化學治療劑、細胞介素、生長抑制劑、抗激素劑、激酶抑制劑、抗血管生成劑、保心藥、免疫刺激劑、免疫抑制劑、免疫檢查點抑制劑、抗生素、血管生成抑制劑、代謝調節劑或其他治療劑，或其任何組合。在一些實施例中，另外之藥劑為蛋白質、肽、核酸、小分子藥劑、細胞、毒素、脂質、碳水化合物或其組合，或任何其他類型之治療劑，例如輻射。在一些實施例中，另外之療法、藥劑或治療包括手術、化學療法、放射線療法、移植，投與表現重組受體(例如CAR)之細胞、激酶抑制劑、免疫檢查點抑制劑、mTOR路徑抑制劑、免疫抑制劑、免疫調節劑、抗體、免疫燒蝕劑、抗體及/或其抗原結合片段、抗體結合物、其他抗體療法、細胞毒素、類固醇、細胞介素、肽疫苗、激素療法、抗代謝物、代謝調節劑、抑制鈣依賴性磷酸酶鈣調神經磷酸酶或p70S6激酶FK506或抑制p70S6激酶之藥物、烷基化劑、蒽環黴素(anthracycline)、長春花生物鹼(vinca alkaloid)、蛋白酶體抑制劑、GITR促效劑、蛋白質酪胺酸磷酸酶抑制劑、蛋白激酶抑制劑、溶瘤病毒及/或其它類型之免疫療法。在一些實施例中，另外之藥劑或治療為骨髓移植、使用化學治療劑(諸如氟達拉濱(fludarabine))之T細胞燒蝕療法、外部射束放射線療法(XRT)、環磷醯胺及/或抗體療法。
在一些實施例中，細胞、BCMA結合重組受體及/或組合物(例如CAR表現性細胞)與其他經工程改造之細胞(例如其他CAR表現性細胞)組合投與。在一些實施例中，另外之藥劑為激酶抑制劑，例如布魯東氏酪胺酸激酶(Bruton's tyrosine kinase，Btk)之抑制劑，例如依魯替尼(ibrutinib)。在一些實施例中，另外之藥劑為腺苷路徑或腺苷受體拮抗劑或促效劑。在一些實施例中，另外之藥劑為免疫調節劑，諸如沙立度胺(thalidomide)或沙立度胺衍生物(例如來那度胺(lenalidomide))。在一些實施例中，另外之藥劑為γ分泌酶抑制劑，諸如抑制或減少細胞(諸如腫瘤/癌細胞)上之γ分泌酶標靶(例如BCMA)之膜內裂解的γ分泌酶抑制劑。在一些實施例中，另外之療法、藥劑或治療為細胞毒性劑或化學治療劑、生物療法(例如抗體(例如單株抗體)或細胞療法)或抑制劑(例如激酶抑制劑)。
在一些實施例中，另外之藥劑為化學治療劑。例示性化學治療劑包括蒽環黴素(例如小紅莓，諸如脂質體小紅莓)；長春花生物鹼(例如長春鹼、長春新鹼、長春地辛(vindesine)、長春瑞濱(vinorelbine))；烷基化劑(例如環磷醯胺、達卡巴嗪(decarbazine)、美法侖(melphalan)、異環磷醯胺、替莫唑胺(temozolomide))；免疫細胞抗體(例如阿侖單抗(alemtuzumab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、利妥昔單抗、托西莫單抗(tositumomab))；抗代謝物(包括例如葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物及腺苷脫胺酶抑制劑，諸如氟達拉濱)；TNFR糖皮質激素誘導之TNFR相關蛋白質(GITR)促效劑；蛋白酶體抑制劑(例如阿克拉黴素(aclacinomycin) A、膠毒素(gliotoxin)或硼替佐米(bortezomib))；免疫調節藥，諸如沙立度胺或沙立度胺衍生物(例如來那度胺)。
在一些實施例中，另外之療法或治療為細胞療法，例如授受細胞療法。在一些實施例中，另外之療法包括投與經工程改造之細胞，例如另外之CAR表現性細胞。在一些實施例中，另外的經工程改造之細胞為表現與本文所提供之經工程改造之細胞(例如抗BCMA CAR表現性細胞)相同或不同之重組受體的CAR表現性細胞。在一些實施例中，在另外的經工程改造之細胞上表現的重組受體(例如CAR)識別不同抗原及/或抗原決定基。在一些實施例中，在另外的經工程改造之細胞上表現的重組受體(例如CAR)識別與本文所描述之重組受體(例如BCMA)相同之抗原的不同抗原決定基。在一些實施例中，在另外的經工程改造之細胞上表現的重組受體(例如CAR)識別不同抗原(例如不同腫瘤抗原)或抗原之組合。舉例而言，在一些實施例中，在另外的經工程改造之細胞上表現的重組受體(例如CAR)靶向表現早期譜系標記物之癌細胞(例如癌症幹細胞)，而其他CAR表現性細胞靶向表現晚期譜系標記物之癌細胞。在此類實施例中，另外的經工程改造之細胞在投與(例如輸注)本文所描述之CAR表現性細胞之前、與其並行或在其之後進行投與。在一些實施例中，另外的經工程改造之細胞表現同種異體CAR。
在一些實施例中，一或多個CAR分子之組態包含一個初級細胞內信號傳導域及兩個或超過兩個(例如2、3、4或5或超過5個)共刺激信號傳導域。在一些實施例中，一或多個CAR分子可具有相同或不同之初級細胞內信號傳導域、相同或不同之共刺激信號傳導域或相同數目或不同數目個共刺激信號傳導域。在一些實施例中，一或多個CAR分子可經組態為分離(split)之CAR，其中CAR分子中之一者包含抗原結合域及共刺激域(例如4-1BB)，而另一個CAR分子包含抗原結合域及初級細胞內信號傳導域(例如CD3ζ)。
在一些實施例中，另外之藥劑為經工程改造以表現抗BCMA結合分子中之一或多者的細胞及/或經工程改造以表現另外之靶向不同抗原之結合分子(例如重組受體，例如CAR)的細胞中之任一者。在一些實施例中，另外之藥劑包括本文所描述，例如在章節I.C中所描述之細胞或複數個細胞中的任一者。在一些實施例中，另外之藥劑為經工程改造以表現靶向不同抗原決定基及/或抗原(例如與疾病或病狀相關聯之不同抗原)之重組受體(例如CAR)的細胞。在一些實施例中，另外之藥劑為經工程改造以表現靶向在多發性骨髓瘤中表現之第二或另外之抗原(例如CD38、CD138、CS-1、BAFF-R、TACI及/或FcRH5)之重組受體(例如CAR)的細胞。
在一些實施例中，另外之藥劑為免疫調節劑。在一些實施例中，組合療法包括免疫調節劑，其可對抗腫瘤免疫反應(例如來自所投與經工程改造之細胞的抗腫瘤免疫反應)進行刺激、增幅及/或以其他方式增強，諸如藉由抑制免疫抑制信號傳導或增強免疫刺激信號傳導來增強。在一些實施例中，免疫調節劑為肽、蛋白質或為小分子。在一些實施例中，蛋白質可為融合蛋白或重組蛋白。在一些實施例中，免疫調節劑結合於免疫標靶，諸如在免疫細胞(諸如T細胞、B細胞或抗原呈遞細胞)上表現之細胞表面受體。舉例而言，在一些實施例中，免疫調節劑為抗體或抗原結合抗體片段、融合蛋白、小分子或多肽。在一些實施例中，重組受體、細胞及/或組合物與本身為抗體或其抗原結合片段(諸如單株抗體)的另外之藥劑組合投與。
在一些實施例中，免疫調節劑阻斷、抑制或抵消免疫檢查點路徑之組分。免疫系統具有多種涉及維持自身耐受性及用於調節免疫反應的抑制性路徑。腫瘤可使用某些免疫檢查點路徑作為主要免疫耐藥性機制，尤其針對對腫瘤抗原具特異性之T細胞(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264)例如經工程改造之細胞，諸如CAR表現性細胞的免疫耐藥性。因為多種此類免疫檢查點藉由配位體-受體相互作用起始，所以其可容易地由針對該等配位體及/或其受體之抗體阻斷。
因此，使用阻斷免疫檢查點路徑之拮抗分子(諸如小分子、核酸抑制劑(例如RNAi)或抗體分子)的療法正在成為有前景的用於癌症及其他疾病之免疫療法途徑。與大部分抗癌劑對比，檢查點抑制劑未必直接靶向腫瘤細胞，而實際上靶向淋巴球受體或其配位體以便增強免疫系統之內源性抗腫瘤活性。
如本文所用，術語「免疫檢查點抑制劑」係指完全或部分地減少、抑制、干擾或調節一或多種檢查點蛋白質的分子。檢查點蛋白質調控T細胞活化或功能。此等蛋白質為T細胞反應之共刺激或抑制性交互作用的原因。免疫檢查點蛋白質調控且維持自身耐受性以及生理免疫反應之持續時間及幅度。在一些實施例中，可向個體投與另一種可增強或升高免疫反應，例如由本文所提供之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物實現的針對疾病或病狀(例如癌症，諸如本文所描述之任何癌症)的免疫反應。
免疫檢查點抑制劑包括以統計學上顯著之方式阻斷或抑制免疫系統之抑制路徑的任何藥劑。此類抑制劑可包括小分子抑制劑或可包括抗體或其抗原結合片段，其結合於且阻斷或抑制免疫檢查點受體、配位體及/或受體-配位體相互作用。在一些實施例中，調節、增強及/或刺激特定受體可克服免疫檢查點路徑組分。可成為阻斷、抑制、調節、增強及/或刺激之目標的說明性免疫檢查點分子包括(但不限於) PD-1 (CD279)、PD-L1 (CD274、B7-H1)、PDL2 (CD273、B7-DC)、CTLA-4、LAG-3 (CD223)、TIM-3、4-1BB (CD137)、4-1BBL (CD137L)、GITR (TNFRSF18、AITR)、CD40、OX40 (CD134、TNFRSF4)、CXCR2、腫瘤相關抗原(TAA)、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、GAL9、B7H3、B7H4、VISTA、KIR、2B4 (屬於CD2分子家族且表現於所有NK、γδ及記憶CD8+ (αβ)T細胞上)、CD160 (亦稱為BY55)、CGEN-15049、CEACAM (例如CEACAM-1、CEACAM-3及/或CEACAM-5)、TIGIT、LAIR1、CD160、2B4、CD80、CD86、B7-H3 (CD276)、B7-H4 (VTCN1)、HVEM (TNFRSF14或CD270)、KIR、A2aR、I類MHC、II類MHC、GAL9、腺苷及轉型生長因子受體(TGFR；例如TGFRβ)。免疫檢查點抑制劑包括抗體或其抗原結合片段或其他結合蛋白，其結合於且阻斷或抑制及/或增強或刺激任一該等分子中之一或多者的活性。
例示性免疫檢查點抑制劑包括曲美單抗(Tremelimumab) (CTLA-4阻斷抗體，亦稱為替西單抗(ticilimumab)、CP-675,206)、抗OX40藥、PD-L1單株抗體(抗B7-H1藥；MEDI4736)、MK-3475 (PD-1阻斷劑)、納武單抗(nivolumab) (抗PD-1抗體)、CT-011 (抗PD-1抗體)、BY55單株抗體、AMP224 (抗PD-L1抗體)、BMS-936559 (抗PD-L1抗體)、MPLDL3280A (抗PD-L1抗體)、MSB0010718C (抗PD-L1抗體)及伊匹單抗(ipilimumab) (抗CTLA-4抗體，亦稱為Yervoy®，MDX-010及MDX-101)。例示性免疫調節抗體包括(但不限於)達利珠單抗(Daclizumab) (Zenapax)、貝伐單抗(Bevacizumab) (Avastin ®)、巴利昔單抗(Basiliximab)、伊匹單抗、納武單抗、派立珠單抗(pembrolizumab)、MPDL3280A、皮立珠單抗(Pidilizumab) (CT-011)、MK-3475、BMS-936559、MPDL3280A (阿特珠單抗(Atezolizumab))、曲美單抗、IMP321、BMS-986016、LAG525、烏瑞魯單抗(urelumab)、PF-05082566、TRX518、MK-4166、達西珠單抗(dacetuzumab) (SGN-40)、魯卡木單抗(lucatumumab) (HCD122)、SEA-CD40、CP-870、CP-893、MEDI6469、MEDI6383、MOXR0916、AMP-224、MSB0010718C (艾維路單抗(Avelumab))、MEDI4736、PDR001、rHIgM12B7、尤洛庫單抗(Ulocuplumab)、BKT140、瓦里木單抗(Varlilumab) (CDX-1127)、ARGX-110、MGA271、利瑞路單抗(lirilumab) (BMS-986015、IPH2101)、IPH2201、ARGX-115、艾瑪圖單抗(Emactuzumab)、CC-90002及MNRP1685A或其抗體結合片段。其他例示性免疫調節劑包括例如阿夫妥珠單抗(afutuzumab) (可購自Roche®)；派非格司亭(pegfilgrastim) (Neulasta®)；來那度胺(CC-5013，Revlimid®)；沙立度胺(Thalomid®)、艾可米得(actimid) (CC4047)；及IRX-2 (包括介白素1、介白素2及干擾素γ之人類細胞介素混合物，CAS 951209-71-5，可購自IRX Therapeutics)。
計劃性細胞死亡1 (PD-1) 為在B細胞、NK細胞及T細胞中表現之免疫檢查點蛋白質(Shinohara等人，1995, Genomics 23:704-6；Blank等人，2007, Cancer Immunol Immunother 56:739-45；Finger等人，1997, Gene 197:177-87；Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264)。PD-1之主要作用為限制周邊組織中之T細胞在發炎期間響應於感染之活性以及限制自體免疫。PD-1表現在活化T細胞中得到誘導，且PD-1與其內源性配位體中之一者的結合用以藉由抑制刺激性激酶來抑制T細胞活化。PD-1亦用以抑制TCR「終止信號」。PD-1高度表現於Treg細胞上，且可在配位體存在下增加其增殖(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264)。抗PD 1抗體已用於治療黑素瘤、非小細胞肺癌、膀胱癌、前列腺癌、結腸直腸癌、頭頸癌、三陰性乳癌、白血病、淋巴瘤及腎細胞癌(Topalian等人，2012, N Engl J Med 366:2443-54；Lipson等人，2013, Clin Cancer Res 19:462-8；Berger等人，2008, Clin Cancer Res 14:3044-51；Gildener-Leapman等人，2013, Oral Oncol 49:1089-96；Menzies及Long, 2013, Ther Adv Med Oncol 5:278-85)。例示性抗PD-1抗體包括納武單抗(BMS之Opdivo)、派立珠單抗(Merck之Keytruda)、皮立珠單抗(Cure Tech之CT-011)、拉立珠單抗(lambrolizumab) (Merck之MK-3475)及AMP-224 (Merck)，納武單抗(亦稱為Opdivo、BMS-936558或MDX1106；Bristol-Myers Squibb)為特異性阻斷PD-1之全人類IgG4單株抗體。異性結合於PD-1之納武單抗(純系5C4)及特其他人類單株抗體描述於US 8,008,449及WO2006/121168中。皮立珠單抗(Pidilizumab) (CT-011；Cure Tech)為結合於PD-1之人類化IgG1k單株抗體。皮立珠單抗及其他人類化抗PD-1單株抗體描述於WO2009/101611中。派立珠單抗(先前稱為拉立珠單抗，且亦稱為Keytruda、MK03475；Merck)為結合於PD-1之人類化IgG4單株抗體。派立珠單抗及其他人類化抗PD-1抗體描述於US 8,354,509及WO2009/114335中。其他抗PD-1抗體尤其包括AMP 514 (Amplimmune)，例如，US 8,609,089、US 2010028330、US 20120114649及/或US 20150210769中所描述之抗PD-1抗體。AMP-224 (B7-DCIg；Amplimmune；例如描述於WO2010/027827及WO2011/066342中)為阻斷PD-1與B7-H1之間相互作用的PD-L2 Fc融合可溶性受體。
PD-L1 (亦稱為CD274及B7-H1)及PD-L2 (亦稱為CD273及B7-DC)為PD-1之配位體，其見於活化T細胞、B細胞、骨髓細胞、巨噬細胞及一些類型之腫瘤細胞上。抗腫瘤療法已集中於抗PD-L1抗體。PD-1及PD-L1之複合物抑制CD8+ T細胞之增殖且減輕免疫反應(Topalian等人，2012, N Engl J Med 366:2443-54；Brahmer等人，2012, N Eng J Med 366:2455-65)。抗PD-L1抗體已用於治療非小細胞肺癌、黑素瘤、結腸直腸癌、腎細胞癌、胰臟癌、胃癌、卵巢癌、乳癌及血液學惡性病(Brahmer等人，2012, N Eng J Med 366:2455-65；Ott等人，2013, Clin Cancer Res 19:5300-9；Radvanyi等人，2013, Clin Cancer Res 19:5541；Menzies及Long, 2013, Ther Adv Med Oncol 5:278-85；Berger等人，2008, Clin Cancer Res 14:13044-51)。例示性抗PD-L1抗體包括MDX-1105 (Medarex)、MEDI4736 (Medimmune)、MPDL3280A (Genentech)、BMS-935559 (Bristol-Myers Squibb)及MSB0010718C。MEDI4736 (Medimmune)為結合於PD-L1且抑制配位體與PD-1之相互作用的人類單株抗體。MDPL3280A (Genentech/Roche)為結合於PD-L1人類Fc經最佳化之IgG1單株抗體。MDPL3280A及針對PD-L1之其他人類單株抗體描述於美國專利第7,943,743號及美國公開案第20120039906號中。其他抗PD-L1結合劑包括YW243.55.S70 (參見WO2010/077634)及MDX-1105 (亦稱為BMS-936559，及例如，WO2007/005874中所描述之抗PD-L1結合劑)。
細胞毒性T淋巴球相關抗原(CTLA-4)亦稱為CD152，其為用以調控T細胞活化之共同抑制分子。CTLA-4為排他性地在T細胞上表現之免疫球蛋白超家族成員。CTLA-4用以抑制T細胞活化，且據報導抑制輔助T細胞活性且增強調控性T細胞免疫抑制活性。儘管CTLA-4之確切作用機制仍在調查中，但已表明其藉由競爭結合於CD80及CD86超過CD28以及向T細胞主動遞送抑制劑信號來抑制T細胞活化(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264)。抗CTLA-4抗體已在臨床試驗中用於治療黑素瘤、前列腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌(Robert及Ghiringhelli, 2009, Oncologist 14:848-61；Ott等人，2013, Clin Cancer Res 19:5300；Weber, 2007, Oncologist 12:864-72；Wada等人，2013, J Transl Med 11:89)。抗CTLA-4之明顯特徵為抗腫瘤作用之動力學，其在生理反應所需要之初始治療之後的滯後時段高達6個月。在一些情況下，在治療起始之後，腫瘤可在發現減小之前實際上尺寸增加(Pardoll (2012) Nature Reviews Cancer 12:252-264)。例示性抗CTLA-4抗體包括伊匹單抗(Bristol-Myers Squibb)及曲美單抗(Pfizer)。伊匹單抗最近已獲得FDA批准用於治療轉移性黑素瘤(Wada等人，2013, J Transl Med 11:89)。
淋巴球活化基因-3 (LAG-3)亦稱為CD223，其為另一種免疫檢查點蛋白質。LAG-3已與淋巴球活性之抑制相關聯，且在一些情況下與淋巴球無變應性之誘導相關聯。LAG-3表現於免疫系統中之各種細胞上，包括B細胞、NK細胞及樹突狀細胞。LAG-3為II類MHC受體之天然配位體，其顯著表現於黑素瘤浸潤性T細胞上，包括具有強效免疫抑制活性之彼等T細胞上。例示性抗LAG-3抗體包括BMS-986016 (Bristol-Myers Squib)，其為靶向LAG-3之單株抗體。IMP701 (Immutep)為拮抗性LAG-3抗體，且IMP731 (Immutep及GlaxoSmithKline)為耗乏性LAG-3抗體。其他LAG-3抑制劑包括IMP321 (Immutep)，其為LAG3及Ig之可溶性部分的重組融合蛋白，其結合於II類MHC分子且活化使抗原呈遞細胞(APC)活化。其他抗體描述於例如WO2010/019570及US 2015/0259420中。
已展示最初在活化Th1細胞上鑑別之T細胞免疫球蛋白結構域及黏蛋白結構域-3 (TIM-3)為免疫反應之負調控子。TIM-3之阻斷促進T細胞介導之抗腫瘤免疫且在一系列小鼠腫瘤模型內具有抗腫瘤活性。TIM-3阻斷與其他免疫治療劑(諸如TSR-042、抗CD137抗體及其他)之組合在增加抗腫瘤作用中可為累加或協同的。TIM-3表現已與多種不同腫瘤類型(包括黑素瘤、NSCLC及腎癌)相關聯，且另外，已展示瘤內TIM-3之表現與一系列腫瘤類型(包括NSCLC、子宮頸癌及胃癌)之不良預後相關。TIM-3之阻斷亦在促進針對多種慢性病毒性疾病之免疫性增加中受關注。亦已展示TIM-3與多種配位體(包括半乳糖凝集素-9、磷脂醯絲胺酸及HMGB1)相互作用，但目前尚不清楚此等中之哪一個(若存在)在抗腫瘤反應之調控中相關。在一些實施例中，靶向TIM-3之抗體、抗體片段、小分子或肽抑制劑可結合於TIM-3之IgV結構域以抑制與其配位體之相互作用。抑制TIM-3之例示性抗體及肽描述於US 2015/0218274、WO2013/006490及US 2010/0247521中。其他抗TIM-3抗體包括RMT3-23之人類化型式(Ngiow等人，2011, Cancer Res, 71:3540-3551)及純系8B.2C12 (Monney等人，2002, Nature, 415:536-541)。抑制TIM-3及PD-1之雙特異性抗體描述於US 2013/0156774中。
在一些實施例中，另外之藥劑為CEACAM抑制劑(例如CEACAM-1、CEACAM-3及/或CEACAM-5抑制劑)。在一些實施例中，CEACAM之抑制劑為抗CEACAM抗體分子。例示性抗CEACAM-1抗體描述於WO 2010/125571、WO 2013/082366、WO 2014/059251及WO 2014/022332中，例如單株抗體34B1、26H7及5F4；或其重組形式，如例如US 2004/0047858、US 7,132,255及WO 99/052552中所描述。在一些實施例中，抗CEACAM抗體結合於CEACAM-5，如例如Zheng等人 PLoS One. (2011) 6(6): e21146)中所描述，或與CEACAM-1及CEACAM-5交叉反應，如例如WO 2013/054331及US 2014/0271618中所描述。
4-1BB亦稱為CD137，其為跨膜糖蛋白屬於TNFR超家族之跨膜醣蛋白。4-1BB受體存在於活化T細胞及B細胞及單核球上。例示性抗4-1BB抗體為烏瑞魯單抗(BMS-663513)，其具有潛在免疫刺激及抗贅生活性。
腫瘤壞死因子受體超家族成員4 (TNFRSF4)亦稱為OX40及CD134，其為TNFR超家族之另一個成員。OX40不會組成性表現於靜息原初T細胞上，且充當二級共刺激免疫檢查點分子。例示性抗OX40抗體為MEDI6469及MOXR0916 (RG7888，Genentech)。
在一些實施例中，另外之藥劑包括減少調控性T細胞(Treg)群體之分子。減少Treg細胞之數目(例如耗乏)的方法為此項技術中已知的，且包括例如CD25耗乏、環磷醯胺投與及調節糖皮質激素誘導之TNFR家族相關基因(GITR)功能。GITR為在活化T細胞上上調之TNFR超家族成員，其增強免疫系統。在清除術之前或在投與經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前減少個體中Treg細胞之數目可減少腫瘤微環境中不合需要之免疫細胞(例如Treg)的數目且降低個體之復發風險。在一些實施例中，另外之藥劑包括靶向GITR及/或調節GITR功能之分子，諸如GITR促效劑及/或耗乏調控性T細胞(Treg)之GITR抗體。在一些實施例中，另外之藥劑包括環磷醯胺。在一些實施例中，GITR結合分子及/或調節GITR功能之分子(例如GITR促效劑及/或耗乏Treg之GITR抗體)在經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前進行投與。舉例而言，在一些實施例中，GITR促效劑可在細胞清除術之前進行投與。在一些實施例中，環磷醯胺在投與(例如，輸注或再輸注)經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前或在細胞清除術之前向個體進行投與。在一些實施例中，環磷醯胺及抗GITR抗體在投與(例如，輸注或再輸注)經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前或在細胞清除術之前向個體進行投與。
在一些實施例中，另外之藥劑為GITR促效劑。例示性GITR促效劑包括例如GITR融合蛋白及抗GITR抗體(例如二價抗GITR抗體)，諸如，例如美國專利第6,111,090號、歐洲專利第090505B 1號、美國專利第8,586,023號、PCT公開案第WO 2010/003118號及第2011/090754號中所描述之GITR融合蛋白，或例如美國專利第7,025,962號、歐洲專利第1947183B 1號、美國專利第7,812,135號、美國專利第8,388,967號、美國專利第8,591,886號、歐洲專利第EP 1866339號、PCT公開案第WO 2011/028683號、PCT公開案第WO 2013/039954號、PCT公開案第WO2005/007190號、PCT公開案第WO 2007/133822號、PCT公開案第WO2005/055808號、PCT公開案第WO 99/40196號、PCT公開案第WO 2001/03720號、PCT公開案第WO99/20758號、PCT公開案第WO2006/083289號、PCT公開案第WO 2005/115451號、美國專利第7,618,632號及PCT公開案第WO 2011/051726號中所描述之抗GITR抗體。例示性抗GITR抗體為TRX518。
在一些實施例中，另外之藥劑增強所投與之細胞(例如CAR表現性細胞)之腫瘤浸潤或反式遷移(transmigration)。舉例而言，在一些實施例中，另外之藥劑刺激CD40，諸如CD40L，例如重組人類CD40L。分化簇40 (CD40)亦為TNFR超家族之成員。CD40為見於抗原呈遞細胞上之共刺激蛋白質，且介導廣泛多種免疫及發炎性反應。CD40亦表現於一些惡性病上，其中其促進增殖。例示性抗CD40抗體為達西珠單抗(SGN-40)、魯卡木單抗(Novartis，拮抗劑)、SEA-CD40 (Seattle Genetics)及CP-870,893。在一些實施例中，增強腫瘤浸潤的另外之藥劑包括酪胺酸激酶抑制劑遜尼替尼(sunitnib)、肝素酶及/或趨化介素受體，諸如CCR2、CCR4及CCR7。
在一些實施例中，另外之藥劑包括沙立度胺藥物或其類似物及/或其衍生物，諸如來那度胺、泊利度胺(pomalidomide)或阿普司特(apremilast)。參見例如Bertilaccio等人，Blood (2013) 122:4171；Otahal等人，Oncoimmunology (2016) 5(4):e1115940；Fecteau等人，Blood (2014) 124(10):1637-1644；及Kuramitsu等人，Cancer Gene Therapy (2015) 22:487-495)。來那度胺((RS)-3-(4-胺基-1-側氧基-1,3-二氫-2H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮；亦稱為Revlimid)為沙立度胺之合成衍生物，且具有多種免疫調節作用，包括在T細胞與抗原呈遞細胞(APC)之間強制執行免疫突觸形成。舉例而言，在一些情況下，來那度胺調節T細胞反應且引起介白素(IL)-2在CD4+及CD8+ T細胞中之產生增加，誘導T輔助(Th)反應自Th2移位至Th1，抑制T細胞調控性亞群(Treg)擴增，及改善濾泡性淋巴瘤及慢性淋巴球性白血病(CLL)中免疫突觸之機能(Otahal等人，Oncoimmunology (2016) 5(4):e1115940)。來那度胺在患有多發性骨髓瘤(MM)之患者中亦具有直接腫瘤破壞活性，且藉由影響見於淋巴組織微環境中之支持性細胞(諸如類撫育細胞(nurse-like cell)來直接及間接調節CLL腫瘤細胞之存活期。來那度胺亦可響應於T細胞經由CD3接合之活化或樹突狀細胞介導之活化而增強T細胞增殖及干擾素-γ產生。來那度胺亦可誘導惡性B細胞表現較高量之免疫刺激性分子(諸如CD80、CD86、HLA-DR、CD95及CD40) (Fecteau等人，Blood (2014) 124(10):1637-1644)。在一些實施例中，來那度胺以每日約1 mg至約20 mg，例如約1 mg至約10 mg、約2.5 mg至約7.5 mg、約5 mg至約15 mg，諸如每日約5 mg、10 mg、15 mg或20 mg之劑量進行投與。在一些實施例中，來那度胺以約10 µg/kg至5 mg/kg，例如約100 µg/kg至約2 mg/kg、約200 µg/kg至約1 mg/kg、約400 µg/kg至約600 µg/kg，諸如約500 µg/kg之劑量進行投與。在一些實施例中，利妥昔單抗以約350-550 mg/m2 (例如，350-375、375-400、400-425、425-450、450-475或475-500 mg/m2 )之劑量進行投與，例如靜脈內投與。在一些實施例中，來那度胺以低劑量進行投與。
在一些實施例中，另外之藥劑為B細胞抑制劑。在一些實施例中，另外之藥劑為選自以下當中之一或多種B細胞抑制劑：CD10、CD19、CD20、CD22、CD34、CD123、CD79a、CD79b、CD179b、FLT-3或ROR1之抑制劑，或其組合。在一些實施例中，B細胞抑制劑為抗體(例如單或雙特異性抗體)或其抗原結合片段。在一些實施例中，另外之藥劑為表現靶向B細胞標靶之重組受體的經工程改造之細胞，該等B細胞標靶例如CD10、CD19、CD20、CD22、CD34、CD123、CD79a、CD79b、CD179b、FLT-3或ROR1。
在一些實施例中，另外藥劑為CD20抑制劑，例如抗CD20抗體(例如抗CD20單或雙特異性抗體)或其片段。例示性抗CD20抗體包括(但不限於)利妥昔單抗、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧克珠單抗(ocrelizumab) (亦稱為GA101或RO5072759)、維托珠單抗(veltuzumab)、歐比托珠單抗(obinutuzumab)、TRU-015 (Trubion Pharmaceuticals)、奧卡拉珠單抗(ocaratuzumab) (亦稱為AME-133v或奧卡拉珠單抗)及Pro131921 (Genentech)。參見例如Lim等人 Haematologica. (2010) 95(1):135-43。在一些實施例中，抗CD20抗體包含利妥昔單抗。利妥昔單抗為結合於CD20且引起CD20表現性細胞之細胞溶解的嵌合小鼠/人類單株抗體IgG1κ。在一些實施例中，另外之藥劑包括利妥昔單抗。在一些實施例中，CD20抑制劑為小分子。
在一些實施例中，另外之藥劑為CD22抑制劑，例如抗CD22抗體(例如抗CD22單或雙特異性抗體)或其片段。例示性抗CD22抗體包括依帕珠單抗(epratuzumab)及RFB4。在一些實施例中，CD22抑制劑為小分子。在一些實施例中，抗體為單特異性抗體，其視情況與第二藥劑(諸如化學治療劑)結合。舉例而言，在一些實施例中，抗體為抗CD22單株抗體-MMAE結合物(例如DCDT2980S)。在一些實施例中，抗體為抗CD22抗體之scFv，例如抗體RFB4之scFv。在一些實施例中，scFv與假單胞菌外毒素-A (例如BL22)之全部或片段融合。在一些實施例中，scFv與假單胞菌外毒素-A (例如莫昔土莫單抗-帕蘇多毒素(moxetumomab pasudotox))之全部或片段(例如38 kDa片段)融合。在一些實施例中，抗CD22抗體為抗CD19/CD22雙特異性抗體，其視情況與毒素結合。舉例而言，在一些實施例中，抗CD22抗體包含抗CD19/CD22雙特異性部分(例如，兩個scFv配位體，其識別人類CD19及CD22)，其視情況連接於白喉毒素(DT)之全部或一部分，例如白喉毒素(DT)之前389個胺基酸，DT 390，例如配位體定向毒素，諸如DT2219ARL)。在一些實施例中，雙特異性部分(例如，抗CD 19/抗CD22)連接於毒素，諸如脫糖基化蓖麻毒素A鏈(例如Combotox)。
在一些實施例中，免疫調節劑為細胞介素。在一些實施例中，免疫調節劑為細胞介素或為誘導細胞介素在腫瘤微環境中之表現增加的藥劑。細胞介素具有與T細胞擴增、分化、存活及內穩定相關之重要功能。可向接受本文所提供之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物的個體投與之細胞介素包括IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15、IL-18及IL-21中之一或多者。在一些實施例中，所投與之細胞介素為IL-7、IL-15或IL-21，或其組合。在一些實施例中，向對投與經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)具有次佳反應的個體投與細胞介素改善所投與之細胞(例如CAR表現性細胞)的功效及/或抗腫瘤活性。
「細胞介素」意謂由一種細胞群體釋放而作用於另一細胞之蛋白質(作為細胞間介體)的通用術語。此類細胞介素之實例為淋巴介素、單核球介素及傳統多肽介素。細胞介素當中包括生長激素，諸如人類生長激素、N-甲硫胺醯基人類生長激素及牛類生長激素；副甲狀腺激素；甲狀腺素；胰島素；胰島素原；鬆弛素；鬆弛素原；醣蛋白激素，諸如濾泡刺激激素(FSH)、促甲狀腺激素(TSH)及促黃體激素(LH)；肝生長因子(HGF)；纖維母細胞生長因子(FGF)；促乳素；胎盤催乳激素；腫瘤壞死因子-α及腫瘤壞死因子-β；苗勒氏管抑制性物質(mullerian-inhibiting substance)；小鼠促性腺激素相關肽；抑制素；活化素；血管內皮生長因子；整合素；血小板生成素(TPO)；神經生長因子(NGF)，諸如NGF-β；血小板生長因子；轉型生長因子(TGF)，諸如TGF-α及TGF-β；類胰島素生長因子-I及胰島素樣生長因子-II；紅血球生成素(EPO)；骨性誘導因子；干擾素，諸如干擾素-α、干擾素-β及干擾素-γ；群落刺激因子(CSF)，諸如巨噬細胞-CSF (M-CSF)；粒細胞-巨噬細胞-CSF (GM-CSF)；及粒細胞-CSF (G-CSF)；介白素(IL)，諸如IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12；IL-15、腫瘤壞死因子，諸如TNF-α或TNF-β；及其他多肽因子，包括LIF及kit配位體(KL)。如本文所用，術語細胞介素包括來自天然來源或來自重組細胞培養物之蛋白質及天然序列細胞介素之生物活性等效物。舉例而言，免疫調節劑為細胞介素，且該細胞介素為IL-4、TNF-α、GM-CSF或IL-2。
在一些實施例中，另外之藥劑包括介白素-15 (IL-15)多肽、介白素-15受體α (IL-15Rα)多肽或其組合，例如hetIL-15 (Admune Therapeutics, LLC)。hetIL-15為IL-15及IL-15Rα之異二聚非共價複合物。hetIL-15描述於例如U.S. 8,124,084、U.S. 2012/0177598、U.S. 2009/0082299、U.S. 2012/0141413及U.S. 2011/0081311中。在一些實施例中，免疫調節劑可含有一或多種細胞介素。舉例而言，介白素可包括白細胞介白素注射劑(Multikine)，其為天然細胞介素之組合。在一些實施例中，免疫調節劑為類鐸受體(TLR)促效劑、佐劑或細胞介素。
在一些實施例中，另外之藥劑為改善或抵消與細胞療法相關聯之一或多種毒性或副作用的藥劑。在一些實施例中，另外之藥劑係選自以下當中：類固醇(例如皮質類固醇)、TNFα抑制劑及IL-6抑制劑。TNFα抑制劑之實例為抗TNFα抗體分子，諸如英利昔單抗(infliximab)、阿達木單抗(adalimumab)、聚乙二醇化賽妥珠單抗(certolizumab pegol)及戈利木單抗(golimumab)。TNFα抑制劑之另一實例為融合蛋白，諸如依那西普(entanercept)。TNFα之小分子抑制劑包括(但不限於)黃嘌呤衍生物(例如己酮可可鹼(pentoxifylline))及安非他酮(bupropion)。IL-6抑制劑之一個實例為抗IL-6抗體分子，諸如托西利單抗(tocilizumab)、沙瑞盧單抗(sarilumab)、艾思莫單抗(elsilimomab)、CNTO 328、ALD518/BMS-945429、CNTO 136、CPSI-2364、CDP6038、VX30、ARGX-109、FE301及FM101。在一些實施例中，抗IL-6抗體分子為托西利單抗。在一些實施例中，另外之藥劑為IL-1R抑制劑，諸如阿那白滯素(anakinra)。
在一些實施例中，另外之藥劑為腺苷水準及/或腺苷路徑組分之調節劑。腺苷可在體內充當免疫調節劑。舉例而言，非選擇性地使腺苷受體亞型活化之腺苷及一些腺苷類似物減少中性粒細胞產生發炎性氧化性產物(Cronstein等人，Ann. N.Y. Acad. Sci. 451:291, 1985；Roberts等人，Biochem. J., 227:669, 1985；Schrier等人，J. Immunol. 137:3284, 1986；Cronstein等人，Clinical Immunol. Immunopath. 42:76, 1987)。在一些情況下，細胞外腺苷或腺苷類似物之濃度可在具體環境(例如腫瘤微環境(TME))中增加。在一些情況下，腺苷或腺苷類似物信號傳導視低氧或涉及低氧之因子或其調控(例如低氧誘導性因子(HIF))而定。在一些實施例中，腺苷信號傳導增加可增加細胞內cAMP及cAMP依賴性蛋白激酶，其引起對促炎性細胞介素產生之抑制，且可導致免疫抑制分子之合成及Treg之發育(Sitkovsky等人，Cancer Immunol Res (2014) 2(7):598-605)。在一些實施例中，另外之藥劑可減小或逆轉腺苷、腺苷類似物及/或腺苷信號傳導之免疫抑制作用。在一些實施例中，另外之藥劑可減小或逆轉低氧驅動之A2腺苷作用性T細胞免疫抑制。在一些實施例中，另外之藥劑係選自以下當中：腺苷受體之拮抗劑、細胞外腺苷降解劑、由CD39/CD73胞外酶產生腺苷之抑制劑及低氧-HIF-1α信號傳導之抑制劑。在一些實施例中，另外之藥劑為腺苷受體拮抗劑或促效劑。
借助於細胞外腺苷之抑制劑(諸如防止細胞外腺苷形成、降解、使其無活性及/或減少之藥劑)及/或腺苷受體抑制劑(諸如腺苷受體拮抗劑)抑制或減少細胞外腺苷或腺苷受體可增強免疫反應，諸如巨噬細胞、中性粒細胞、粒細胞、樹突狀細胞、T細胞及/或B細胞介導之反應。另外，Gs蛋白質之抑制劑介導的cAMP依賴性細胞內路徑及腺苷受體觸發之Gi蛋白質之抑制劑介導的細胞內路徑亦可增加急性及慢性發炎。
在一些實施例中，另外之藥劑為腺苷受體拮抗劑或促效劑，例如腺苷受體A2a、A2b、A1及A3中之一或多者的拮抗劑或促效劑。分別地，A1及A3抑制而A2a及A2b刺激腺苷酸環化酶活性。某些腺苷受體(諸如A2a、A2b及A3)可在發炎期間遏制或減輕免疫反應。因此，使免疫抑制腺苷受體拮抗可強化、升高或增強免疫反應，例如來自所投與之細胞(例如CAR表現性T細胞)的免疫反應。在一些實施例中，另外之藥劑抑制細胞外腺苷產生及腺苷經由腺苷受體觸發之信號傳導。舉例而言，免疫反應增強、局部組織發炎及標靶組織破壞可藉由抑制或減輕產生腺苷之局部組織低氧；藉由使積聚之細胞外腺苷降解(或使其無活性)；藉由防止或減少腺苷受體在免疫細胞上表現；及/或藉由抑制/拮抗腺苷配位體經由腺苷受體之信號傳導來進行增強。
拮抗劑為傾向於取消另一種物質之作用的任何物質，其作為結合於細胞受體而不引發生物反應之藥劑。在一些實施例中，拮抗劑為本身為腺苷受體(諸如A2a、A2b或A3受體)之拮抗劑的化合物。在一些實施例中，拮抗劑為結合腺苷受體但不觸發Gi蛋白質依賴性細胞內路徑之肽或擬肽，例示性拮抗劑描述於美國專利第5,565,566號；第5,545, 627, 5,981,524號；第5,861,405號；第6,066,642號；第6,326,390號；第5,670,501號；第6,117,998號；第6,232,297號；第5,786,360號；第5,424,297號；第6,313,131, 5,504,090號；及第6,322,771號中。
在一些實施例中，另外之藥劑為A2受體(A2R)拮抗劑，諸如A2a拮抗劑。例示性A2R拮抗劑包括KW6002 (istradefyline)、SCH58261、咖啡鹼、副黃嘌呤、3,7-二甲基-1-炔丙基黃嘌呤(DMPX)、8-(間氯苯乙烯基)咖啡鹼(CSC)、MSX-2、MSX-3、MSX-4、CGS-15943、ZM-241385、SCH-442416、普雷迪南(preladenant)、韋帕迪蘭(vipadenant) (BII014)、V2006、ST-1535、SYN-115、PSB-1115、ZM241365、FSPTP及靶向A2R表現之抑制性核酸(例如siRNA或shRNA)，或靶向A2R之任何抗體或其抗原結合片段。在一些實施例中，另外藥劑為以下文獻中所描述之A2R拮抗劑：例如Ohta等人，Proc Natl Acad Sci U S A (2006) 103:13132-13137；Jin等人，Cancer Res. (2010) 70(6):2245-2255；Leone等人，Computational and Structural Biotechnology Journal (2015) 13:265-272；Beavis等人，Proc Natl Acad Sci U S A (2013) 110:14711-14716；及Pinna, A., Expert Opin Investig Drugs (2009) 18:1619-1631；Sitkovsky等人，Cancer Immunol Res (2014) 2(7):598-605；US 8,080,554；US 8,716,301；US 20140056922；WO2008/147482；US 8,883,500；US 20140377240；WO02/055083；US 7,141,575；US 7,405,219；US 8,883,500；US 8,450,329及US 8,987,279)。
在一些實施例中，拮抗劑為特異性結合編碼腺苷受體之mRNA的反義分子、抑制性核酸分子(例如小抑制性RNA(siRNA))或催化性核酸分子(例如核糖核酸酶)。在一些實施例中，反義分子、抑制性核酸分子或催化性核酸分子結合編碼A2a、A2b或A3之核酸。在一些實施例中，反義分子、抑制性核酸分子或催化性核酸靶向腺苷受體下游之生化路徑。舉例而言反義分子或催化性核酸可抑制涉及Gs蛋白質或Gi蛋白質依賴性細胞內路徑之酶。在一些實施例中，另外之藥劑包括腺苷受體(諸如A2a、A2b或A3)之主要陰性突變形式。
在一些實施例中，抑制細胞外腺苷的另外之藥劑包括使得細胞外腺苷無功能(或減少此類功能)之藥劑，諸如修飾腺苷之結構已抑制腺苷經由腺苷受體進行信號傳導之能力的物質。在一些實施例中，另外之藥劑為細胞外腺苷產生酶或腺苷降解酶、其修飾形式或其調節劑。舉例而言，在一些實施例中，另外之藥劑為選擇性地結合及破壞腺苷之酶(例如腺苷脫胺酶)或另一種催化性分子，藉此消除或顯著降低內源性形成之腺苷經由腺苷受體進行信號傳導且終止發炎的能力。
在一些實施例中，另外之藥劑為腺苷脫胺酶(ADA)或其修飾形式，例如重組ADA及/或經聚乙二醇修飾之ADA (ADA-PEG)，其可抑制細胞外腺苷之局部組織積聚。ADA-PEG已用於治療患有ADA SCID之患者(Hershfield (1995) Hum Mutat. 5:107)。在一些實施例中，抑制細胞外腺苷之藥劑包括防止或減少細胞外腺苷形成及/或防止或減少細胞外腺苷積聚之藥劑，藉此消除或顯著減小腺苷之免疫抑制作用。在一些實施例中，另外之藥劑特異性抑制涉及促發炎分子合成及/或分泌之調控的酶及蛋白質，包括核轉錄因子之調節劑。遏制腺苷受體表現或Gs蛋白質或Gi蛋白質依賴性細胞內路徑或cAMP依賴性細胞內路徑之表現可引起免疫反應增加/增強。
在一些實施例中，另外之藥劑可靶向產生或生產細胞外腺苷之胞外酶。在一些實施例中，另外之藥劑靶向CD39及CD73胞外酶，其以串聯方式用以產生細胞外腺苷。CD39 (亦稱為胞外核苷三磷酸酯二磷酸水解酶)將細胞外ATP (或ADP)轉化成5′AMP。隨後，CD73 (亦稱為5′核苷酸酶將5′AMP轉化成腺苷。CD39之活性為藉由NDP激酶及腺苷酸激酶之作用而可逆的，而CD73之活性為不可逆的。CD39及CD73表現於腫瘤基質細胞，包括內皮細胞及Treg，以及多種癌細胞上。舉例而言，CD39及CD73在內皮細胞上之表現在腫瘤微環境之低氧條件下增加。腫瘤低氧可由不充分之血液供應及雜亂之腫瘤血管(損害氧氣遞送)引起(Carroll及Ashcroft (2005), Expert. Rev. Mol. Med. 7(6):1-16)。低氧亦抑制腺苷酸激酶(AK，其將腺苷轉化成AMP)，導致極高細胞外腺苷濃度。因此，腺苷響應於低氧而以高濃度釋放，其為在實體腫瘤中或周圍之腫瘤微環境(TME)時常出現的條件。在一些實施例中，另外之藥劑為抗CD39抗體或其抗原結合片段、抗CD73抗體或其抗原結合片段(例如MEDI9447或TY/23)、α-β-亞甲基-二磷酸腺苷(ADP)、ARL 67156、POM-3、IPH52中之一或多者(參見例如Allard等人 Clin Cancer Res (2013) 19(20):5626-5635；Hausler等人，Am J Transl Res (2014) 6(2):129-139；Zhang, B., Cancer Res. (2010) 70(16):6407-6411)。
在一些實施例中，另外藥劑為低氧誘導性因子1α (HIF-1α)信號傳導之抑制劑。HIF-1α之例示性抑制劑包括地高辛(digoxin)、吖啶黃素(acriflavine)、長壽蛋白(sirtuin)-7及加利特皮(ganetespib)。
在一些實施例中，另外之藥劑包括蛋白質酪胺酸磷酸酶抑制劑，例如本文所描述之蛋白質酪胺酸磷酸酶抑制劑。在一些實施例中，蛋白質酪胺酸磷酸酶抑制劑為SHP-1抑制劑，例如本文所描述之SHP-1抑制劑，諸如葡萄糖酸銻鈉。在一些實施例中，蛋白質酪胺酸磷酸酶抑制劑為SHP-2抑制劑，例如本文所描述之SHP-2抑制劑。
在一些實施例中，另外之藥劑為激酶抑制劑。激酶抑制劑(諸如CDK4激酶抑制劑、BTK激酶抑制劑、MNK激酶抑制劑或DGK激酶抑制劑可調控腫瘤細胞中之組成性活性存活路徑及/或調節免疫細胞之功能。在一些實施例中，激酶抑制劑為布魯東氏酪胺酸激酶(BTK)抑制劑，例如依魯替尼。在一些實施例中，激酶抑制劑為磷脂醯肌醇-4,5-二磷酸3-激酶(PI3K)抑制劑。在一些實施例中，激酶抑制劑為CDK4抑制劑，例如CDK4/6抑制劑。在一些實施例中，激酶抑制劑mTOR抑制劑，諸如雷帕黴素(rapamycin)、雷帕黴素類似物、OSI-027。mTOR抑制劑可為例如mTORC1抑制劑及/或mTORC2抑制劑，例如mTORC1抑制劑及/或mTORC2抑制劑。在一些實施例中，激酶抑制劑為MNK抑制劑或雙重PI3K/mTOR抑制劑。在一些實施例中，其他例示性激酶抑制劑包括AKT抑制劑哌立福新(perifosine)、mTOR抑制劑替西羅莫司(temsirolimus)、Src激酶抑制劑達沙替尼(dasatinib)及福他替尼(fostamatinib)、JAK2抑制劑帕瑞替尼(pacritinib)及蘆可替尼(ruxolitinib)、PKCβ抑制劑恩紮妥林(enzastaurin)及苔蘚蟲素(bryostatin)及AAK抑制劑阿立塞替(alisertib)。
在一些實施例中，激酶抑制劑為選自以下之BTK抑制劑：依魯替尼(PCI- 32765)；GDC-0834；RN-486；CGI-560；CGI-1764；HM-71224；CC-292；ONO-4059；CNX-774；及LFM-A13。在一些實施例中，BTK抑制劑不減小或抑制介白素-2誘導性激酶(ITK)之激酶活性，且係選自GDC-0834；RN-486；CGI-560；CGI-1764；HM-71224；CC-292；ONO-4059；CNX-774；及LFM-A13。
在一些實施例中，激酶抑制劑為BTK抑制劑，例如依魯替尼(1-[(3R)-3-[4-胺基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮；亦稱為PCI-32765)。在一些實施例中，激酶抑制劑為BTK抑制劑，例如依魯替尼(PCI-32765)，且依魯替尼以每日約250 mg、300 mg、350 mg、400 mg、420 mg、440 mg、460 mg、480 mg、500 mg、520 mg、540 mg、560 mg、580 mg、600 mg (例如250 mg、420 mg或560 mg)之劑量進行投與持續一段時間，例如，每日投與持續21天週期或每日投與持續28天週期。在一些實施例中，投與1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或超過12個週期之依魯替尼。在一些實施例中，BTK抑制劑為國際申請案WO 2015/079417中所描述之BTK抑制劑。
在一些實施例中，激酶抑制劑為PI3K抑制劑。PI3K為涉及細胞周期調控及淋巴瘤存活之PI3K/Akt/mTOR路徑的中心。例示性PI3K抑制劑包括艾德昔布(idelalisib) (PI3Kδ抑制劑)。在一些實施例中，另外之藥劑為艾德昔布及利妥昔單抗。
在一些實施例中，另外之藥劑為哺乳動物雷帕黴素標靶(mTOR)之抑制劑。在一些實施例中，激酶抑制劑為選自以下之mTOR抑制劑：替西羅莫司；瑞達莫司(ridaforolimus) (亦稱為AP23573及MK8669)；依維莫司(everolimus) (RAD001)；雷帕黴素(AY22989)；斯馬匹莫(simapimod)；AZD8055；PF04691502；SF1126；及XL765。在一些實施例中，另外之藥劑為有絲分裂原活化蛋白激酶(MAPK)之抑制劑，諸如維羅非尼(vemurafenib)、達拉非尼(dabrafenib)及曲美替尼(trametinib)。
在一些實施例中，另外之藥劑為調控促凋亡蛋白或抗凋亡蛋白抗之藥劑。在一些實施例中，另外之藥劑包括B細胞淋巴瘤2 (BCL-2)抑制劑(例如，維奈托克(venetoclax)，亦稱為ABT-199或GDC-0199；或ABT-737)。維奈托克為抑制抗凋亡蛋白BCL-2之小分子(4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-1-環己-1-基]甲基}-1-哌嗪基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-哌喃-4-基甲基)胺基]苯基}磺醯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲醯胺)。調節促凋亡蛋白或抗凋亡蛋白之其他藥劑包括出於最大功效之BCL-2抑制劑ABT-737、納維克拉斯(navitoclax) (ABT-263)；Mcl-1 siRNA或Mcl-1抑制劑類視黃素N-(4-羥基苯基)瑞汀醯胺(4-HPR)。在一些實施例中，另外之藥劑提供促凋亡刺激，諸如重組腫瘤壞死因子相關細胞凋亡誘導性配位體(TRAIL)，其可藉由結合於腫瘤細胞表面上之TRAIL死亡受體DR-4及DR-5或TRAIL-R2促效性抗體來使細胞凋亡路徑活化。
在一些實施例中，另外之藥劑包括吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)抑制劑。IDO為催化胺基酸、L-色胺酸降解為犬尿胺酸之酶。多種癌症過度表現IDO，例如前列腺癌、結腸直腸癌、胰臟癌、子宮頸癌、胃癌、卵巢癌、頭部癌及肺癌。漿細胞樣樹突狀細胞(pDC)、巨噬細胞及樹突狀細胞(DC)可表現IDO。在一些態樣中，L-色胺酸減少(例如，藉由IDO催化)藉由誘導T細胞無變應性及細胞凋亡而引起免疫抑制背景。因此，在一些態樣中，IDO抑制劑可增強本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物的功效，例如藉由減少所投與之CAR表現性細胞的遏制或死亡來增強。例示性IDO抑制劑包括(但不限於) 1-甲基-色胺酸、吲哚莫德(indoximod) (New Link Genetics) (參見例如臨床試驗標識號NCT01191216；NCT01792050)及INCB024360 (Incyte Corp.) (參見例如臨床試驗標識號NCT01604889；NCT01685255)。
在一些實施例中，另外之藥劑包括細胞毒性劑，例如CPX-351 (Celator Pharmaceuticals)、阿糖胞苷(cytarabine)、道諾黴素、沃薩洛辛(vosaroxin) (Sunesis Pharmaceuticals)、沙帕他濱(sapacitabine) (Cyclacel Pharmaceuticals)、艾達黴素(idarubicin)或米托蒽醌(mitoxantrone)。在一些實施例中，另外之藥劑包括低甲基化劑，例如DNA甲基轉移酶抑制劑，例如阿紮胞苷(azacitidine)或地西他濱(decitabine)。
在另一實施例中，另外之療法為移植，例如同種異體幹細胞移植。
在一些實施例中，另外之療法為淋巴球耗乏療法。認為淋巴球耗乏化學療法改良重組受體表現性細胞(諸如CAR T細胞)之移植及活性。在一些實施例中，淋巴球耗乏化學療法可增強授受性轉移之腫瘤特異性T細胞經由內穩定增殖而活體內增殖(Grossman 2004，Stachel 2004)。在一些實施例中，化學療法可減少或消除CD4+CD25+調控性T細胞，該等細胞可遏制靶向腫瘤之授受性轉移之T細胞的功能(Turk 2004)。在一些實施例中，在授受性T細胞療法之前進行淋巴球耗乏化學療法可增強基質細胞源性因子1 (SDF-1)在骨髓中之表現，從而增強經修飾之T細胞經由SDF-1與在T細胞表面上表現之CXCR-4的結合而回歸原發性腫瘤(Pinthus 2004)。在一些實施例中，淋巴球耗乏化學療法可進一步減小個體之腫瘤負荷，且潛在地降低CRS之風險及嚴重程度。
在一些實施例中，淋巴細胞耗乏例如在投與經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前對個體執行。在一些實施例中，淋巴細胞耗乏包含投與美法侖、環磷醯胺(Cytoxan)、環磷醯胺及/或氟達拉濱。在一些實施例中，淋巴球耗乏化學療法在投與(例如輸注)經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前、與其並行或在其之後向個體進行投與。在一個實例中，淋巴球耗乏化學療法在投與經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)之前向個體進行投與。在一些實施例中，淋巴球耗乏化學療法在投與經工程改造之細胞之前1至10天時，諸如在投與經工程改造之細胞之前1、2、3、4、5、6、7、8、9或10天時進行投與。投與經工程改造之細胞在淋巴球耗乏化學療法之後的天數可基於臨床或邏輯情形來決定。在一些實例中，對淋巴球耗乏化學療法方案之劑量調整或其他改變可因如由治療醫師所確定的個體之健康狀況(諸如個體之基礎器官功能)來實施。
在一些實施例中，除地塞米松(dexamethasone)或其他類固醇以外之止吐療法可在淋巴球耗乏化學療法之前進行給予。在一些實施例中，美司鈉(Mesna)可用於具有出血性膀胱炎病史之個體。
在一些實施例中，另外之藥劑為溶瘤病毒。在一些實施例中，溶瘤病毒能夠在癌細胞中選擇性地複製，且觸發癌細胞死亡或減緩癌細胞生長。在一些情況下，溶瘤病毒對非癌細胞無作用或作用最小。溶瘤病毒包括(但不限於)溶瘤腺病毒、溶瘤單純性疱疹病毒、溶瘤反轉錄病毒、溶瘤小病毒、溶瘤痘瘡病毒、溶瘤新必斯病毒(oncolytic Sinbis virus)、溶瘤流感病毒或溶瘤RNA病毒(例如，溶瘤呼腸孤病毒、溶瘤新城疫病毒(Newcastle Disease Virus，NDV)、溶瘤麻疹病毒或溶瘤水泡性口炎病毒(VSV))。
其他例示性組合療法、治療及/或藥劑包括抗過敏劑、止吐藥、鎮痛劑及佐劑療法。在一些實施例中，另外之藥劑包括細胞保護劑，諸如神經保護劑、自由基清除劑、心臟保護劑、蒽環黴素滲出中和劑及營養物。
在一些實施例中，用作另外之藥劑的抗體結合或以其他方式結合於治療劑，例如化學治療劑(例如環磷醯胺、氟達拉濱、組蛋白脫乙醯基酶抑制劑、脫甲基化劑、肽疫苗、抗腫瘤抗生素、酪胺酸激酶抑制劑、烷基化劑、抗微管或抗有絲分裂劑)、抗過敏劑、抗噁心劑(或止吐劑)、疼痛舒解劑或本文所描述之細胞保護劑。在一些實施例中，另外之藥劑為抗體-藥物結合物。
在一些實施例中，另外之藥劑可在DNA、RNA或蛋白質水準上調節、抑制或刺激特定因子，以增強或升高本文所提供之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物的功效。在一些實施例中，另外之藥劑可在核酸水準(例如DNA或RNA)上，在所投與之細胞(例如經工程改造以表現重組受體(例如CAR)之細胞)內調節因子。在一些實施例中，抑制性核酸(例如抑制性核酸，例如dsRNA，例如siRNA或shRNA)或成簇規律間隔短回文重複序列(CRISPR)、類轉錄活化因子效應核酸酶(TALEN)或鋅指核酸內切酶(ZFN)可用於抑制抑制性分子在經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)中的表現。在一些實施例中，抑制劑為shRNA。在一些實施例中，抑制性分子在經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)內受抑制。在一些實施例中，編碼dsRNA分子(其抑制調節或調控(例如抑制)T細胞功能之分子的表現)之核酸分子可操作地連接於啟動子，例如HI源性或U6源性啟動子以使得抑制抑制性分子之表現的dsRNA分子表現於經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)內。參見例如Brummelkamp TR等人，(2002) Science 296: 550- 553；Miyagishi M等人，(2002) Nat. Biotechnol. 19: 497-500。
在一些實施例中，另外之藥劑能夠破壞編碼抑制性分子之基因，諸如本文所描述之任何免疫檢查點抑制劑。在一些實施例中，破壞係藉由缺失，例如整個基因、外顯子或區缺失；及/或用外源性序列置換；及/或藉由在基因內，通常在基因之外顯子內進行突變，例如讀框轉移或錯義突變。在一些實施例中，破壞引起提前終止密碼子併入至基因中，以使得抑制性分子不進行表現或不以能夠在細胞表面上表現及/或能夠介導細胞信號傳導之形式進行表現。破壞一般在DNA水準上進行。破壞一般為永久、不可逆或非暫時的。
在一些態樣中，破壞係藉由基因編輯來進行，諸如使用特異性結合於成為破壞目標之區處之基因或與其雜交的DNA結合蛋白或DNA結合核酸。在一些態樣中，蛋白質或核酸與核酸酶偶聯或複合，諸如在嵌合或融合蛋白中偶聯或複合。舉例而言，在一些實施例中，破壞使用對所破壞之基因具特異性的包含靶向DNA之蛋白質及核酸酶的融合物來實現，該核酸酶諸如鋅指核酸酶(ZFN)或TAL效應核酸酶(TALEN)或RNA引導之核酸酶，諸如成簇規律間隔短回文重複序列(CRISPR)-Cas系統，諸如CRISPR-Cas9系統。在一些實施例中，生產或產生經基因工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)的方法包括向細胞群體中引入編碼經基因工程改造之抗原受體(例如CAR)的核酸分子及編碼靶向抑制性分子之藥劑(其為基因編輯核酸酶)的核酸分子，該藥劑諸如對抑制性分子具特異性的包含靶向DNA之蛋白質及核酸酶的融合物，該核酸酶諸如ZFN或TALEN或RNA引導之核酸酶，諸如CRISPR-Cas9系統之核酸酶。
本文所描述之另外藥劑中的任一者可製備且與本文所描述之BCMA結合重組受體(例如嵌合抗原受體)及/或表現該等分子(例如重組受體)的經工程改造之細胞一起以組合療法形式進行投與，諸如在包含組合療法之一或多種藥劑及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物(諸如本文所描述之任何醫藥組合物)中進行投與。在一些實施例中，BCMA結合重組受體(例如嵌合抗原受體)、表現該等分子(例如重組受體)的經工程改造之細胞、複數個表現該等分子(例如重組受體)的經工程改造之細胞可與另外之藥劑、療法或治療同時、並行或以任何次序依序進行投與，其中此類投與在個體體內提供各自為治療學上有效量之藥劑。在一些實施例中，另外之藥劑可與本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物一起共投與，例如作為同一醫藥組合物之一部分或使用相同遞送方法共投與。在一些實施例中，另外之藥劑與本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物同時，但在各別組合物中進行投與。在一些實施例中，另外之藥劑為另外的經工程改造之細胞，例如經工程改造以表現不同重組受體之細胞，且在同一組合物中或在各別組合物中進行投與。在一些實施例中，另外之藥劑在投與細胞之前與經工程改造之細胞(例如CAR表現性細胞)一起進行培育。
在一些實例中，另一或多種藥劑在投與本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物之後或之前，間隔開所選時間段進行投與。在一些實例中，時間段為1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、1個月、2個月或3個月。在一些實例中，另一或多種藥劑多次進行投與，及/或本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物多次進行投與。舉例而言，在一些實施例中，另外之藥劑在本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物之前進行投與，例如在投藥之前兩週、12天、10天、8天、一週、6天、5天、4天、3天、2天或1天時進行投與。舉例而言，在一些實施例中，另外之藥劑在本文所描述之BCMA結合重組受體、細胞及/或組合物之後進行投與，例如在投藥之後兩週、12天、10天、8天、一週、6天、5天、4天、3天、2天或1天時進行投與。
另外之藥劑的劑量可為任何治療有效量，例如本文所描述之任何劑量，且另外之藥劑的適當劑量可視以下而定：待治療之疾病類型，所投與之重組受體、細胞及/或組合物的類型、劑量及/或頻率，疾病之嚴重程度及病程，重組受體、細胞及/或組合物是出於預防目的還是出於治療目的進行投與，先前療法，患者之臨床病史及其對重組受體、細胞及/或組合物之反應，及主治醫師之判斷。重組受體、細胞及/或組合物及/或另外之藥劑及/或療法可向患者一次性投與、重複或歷經一系列治療進行投與。
VI. 製品或套組
亦提供含有所提供之重組受體(例如CAR)、經基因工程改造之細胞及/或包含其之組合物的製品或套組。製品可包括容器及處於容器上或與容器相聯之標籤或藥品說明書。適合之容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、試管、IV溶液袋等。容器可由多種材料(諸如玻璃或塑膠)形成。在一些實施例中，容器具有無菌接取口。例示性容器包括靜脈內溶液袋、小瓶，包括具有可由注射用針刺穿之塞子的彼等容器。製品或套組可進一步包括指示組合物可用於治療特定病狀(諸如本文所描述之病狀，例如多發性骨髓瘤)之藥品說明書。或者或另外，製品或套組可進一步包括另一個或同一個包含醫藥學上可接受之緩衝液的容器。其可進一步包括其他材料，諸如其他緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針及/或注射器。
標籤或藥品說明書可指示組合物用於在個體中治療BCMA表現性或BCMA相關疾病、病症或病狀。處於容器上或與容器相聯之標籤或藥品說明書可指示用於復原及/或使用調配物之說明。標籤或藥品說明書可進一步指示調配物適用或意欲用於皮下、靜脈內或其他投與模式以用於在個體中治療或預防BCMA表現性或BCMA相關疾病、病症或病狀。
在一些實施例中，容器裝有單獨或與另一種有效治療、預防及/或診斷病狀之組合物組合的組合物。製品或套組可包括(a)其中容納有組合物(亦即第一藥劑)之第一容器，其中該組合物包括抗體(例如抗BCMA抗體)或其抗原結合片段或重組受體(例如CAR)；及(b)其中容納有組合物(亦即第二藥劑)之第二容器，其中該組合物包括另一藥劑，諸如細胞毒性劑或其他形式之治療劑，且該製品或套組進一步包含用於以有效量之第二藥劑治療個體得標籤或藥品說明書指示。
VII. 定義
如本文所用，提及抗體之「相應形式」意謂當比較兩種抗體之特性或活性時，使用相同之抗體形式來比較該特性。舉例而言，若陳述抗體活性大於第一抗體之相應形式的活性，則意謂該抗體之特定形式(諸如scFv)的活性大於該第一抗體之scFv形式。
本文中之術語「Fc區」用於定義含有恆定區之至少一部分的免疫球蛋白重鏈C端區。該術語包括原生序列Fc區及變異型Fc區。在一個實施例中，人類IgG重鏈Fc區自Cys226或自Pro230延伸至重鏈之羧基端。然而，Fc區之C端離胺酸(Lys447)可存在或可不存在。除非本文另外指定，否則Fc區或恆定區中胺基酸殘基之編號係根據EU編號系統，亦稱為EU索引，如Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版. 公共衛生署(Public Health Service), 美國國家衛生研究院(National Institutes of Health), Bethesda, MD, 1991中所描述。
術語「全長抗體」、「完整抗體」及「全抗體」在本文中可互換使用以指結構基本上類似於原生抗體結構或具有含有如本文所定義之Fc區之重鏈的抗體。
「經分離」抗體為已與其天然環境之組分分離的抗體。在一些實施例中，抗體純化至大於95%或99%之純度，如藉由例如電泳(例如SDS-PAGE、等電聚焦(IEF)、毛細管電泳)或層析(例如離子交換或逆相HPLC)所測定。用於評定抗體純度之方法的綜述參見例如Flatman等人，J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007)。
「經分離」核酸係指已與其天然環境之組分分離的核酸分子。經分離核酸包括通常含有核酸分子之細胞中所含有的核酸分子，但該核酸分子存在於染色體外或在不同於其天然染色體位置之染色體位置處。
「編碼抗BCMA抗體之經分離核酸」係指編碼抗體重鏈及輕鏈(或其片段)之一或多種核酸分子，包括單一載體或各別載體中之此類核酸分子及存在於宿主細胞中之一或多個位置處的此類核酸分子。
術語「宿主細胞」、「宿主細胞株」及「宿主細胞培養物」可互換使用且係指已向其中引入外源核酸之細胞，包括此類細胞之後代。宿主細胞包括「轉型體」及「轉型細胞」，其包括初代轉型細胞及來源於其之後代(不考慮繼代次數)。後代之核酸含量與母細胞可能不完全相同，但可能含有突變。本文包括針對原始轉型細胞篩選或選擇的具有相同功能或生物活性之突變型後代。
術語「多肽」及「蛋白質」可互換使用以指胺基酸殘基之聚合物，且不限於最小長度。多肽(包括抗體及抗體鏈及其他肽，例如連接子及BCMA結合肽)可包括胺基酸殘基，包括天然及/或非天然胺基酸殘基。該等術語亦包括多肽之表現後修飾，例如糖基化、唾液酸化、乙醯化、磷酸化及其類似修飾。在一些態樣中，多肽可含有相對於原生或天然序列之修飾，只要蛋白質維持所需活性即可。此等修飾可為有意的，如經由定點突變誘發；或可為偶然的，諸如經由產生蛋白質之宿主的突變或由於PCR擴增所引起的差錯。
如本文所用，「胺基酸序列一致性百分比(%)」及「一致性百分比」及「序列一致性」當結合胺基酸序列(參考多肽序列)使用時，定義為在比對序列且在必要時引入空隙以達成最大序列一致性百分比之後且在不將任何保守性取代視為序列一致性之一部分的情況下，與參考多肽序列中胺基酸殘基一致之候選序列(例如個體抗體或片段)中胺基酸殘基的百分比。用於測定胺基酸序列一致性百分比之目的的比對可以此項技術之技能範圍內之多種方式達成，例如使用公開可獲得之電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN、ALIGN或Megalign (DNASTAR)軟體。熟習此項技術者可確定用於比對序列之適當參數，包括在所比較序列之全長內達成最大比對所需的任何算法。
胺基酸取代可包括多肽中之一個胺基酸經另一個胺基酸置換。可將胺基酸取代引入至所關注之結合分子(例如抗體)中且根據所需活性(例如保持/改良之抗原結合或降低之免疫原性)篩選產物。
胺基酸一般可根據以下共同側鏈特性分組：
(1) 疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；
(2) 中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；
(3) 酸性：Asp、Glu；
(4) 鹼性：His、Lys、Arg；
(5) 影響鏈取向之殘基：Gly、Pro；
(6) 芳族：Trp、Tyr、Phe。
非保守胺基酸取代將涉及將此等類別中之一者的成員換成另一類別。
如本文所用，術語「載體」係指一種能夠傳播其所連接之另一種核酸分子的核酸分子。該術語包括呈自我複製核酸結構之載體以及併入已引入其之宿主細胞之基因組中的載體。某些載體能夠導引可操作地連接其之核酸的表現。此類載體在本文中稱為「表現載體」。
術語「藥品說明書」用於指通常包括於治療性產品之商業包裝中的說明書，其含有關於與使用此類治療性產品有關之適應症、用法、劑量、投藥、組合療法、禁忌症及/或警告的資訊。
除非上下文另外明確規定，否則如本文所用，單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數個指示物。舉例而言，「一個/種(a/an)」意謂「至少一個/種」或「一或多個/種」。應理解，本文所描述之態樣、實施例及變化形式包括「包含態樣、實施例及變化形式」、「由態樣、實施例及變化形式組成」及/或「基本上由態樣、實施例及變化形式組成」。
在本發明通篇中，所主張之標的物的各種態樣均以範圍形式呈現。應理解，範圍形式之描述僅為方便及簡潔起見，且不應解釋為對所主張標的物之範疇的不靈活限制。因此，範圍之描述應視為已具體揭示所有可能之子範圍以及該範圍內之個別數值。舉例而言，在提供值範圍之情況下，應理解，該範圍之上限與下限之間的各中間值及所陳述之該範圍內的任何其他所陳述值或中間值均涵蓋於所主張之標的物內。此等較小範圍之上限及下限可獨立地包括於較小範圍內且亦涵蓋於所主張之標的物內，受所陳述範圍內之任何具體排除之限值限定。在所陳述之範圍包括一個或兩個限制之情況下，排除彼等所包括之限值中之任一者或兩者的範圍亦包括於所主張之標的物中。不管範圍之寬度如何，此均適用。
如本文所用，術語「約」係指此技術領域之技術人員易於知曉之各別值的常見誤差範圍。本文中，提及「約」一個值或參數包括(且描述)針對該值或參數本身之實施例。舉例而言，提及「約X」之描述包括「X」之描述。
如本文所用，「組合物」係指兩種或超過兩種產物、物質或化合物(包括細胞)之任何混合物。其可為溶液、懸浮液、液體、粉末、膏劑、水溶液、非水溶液或其任何組合。
如本文所用，細胞或細胞群體對於特定標記物呈「陽性」之表述係指特定標記物(通常為表面標記物)可偵測地存在於細胞上或細胞內。當提及表面標記物時，該術語係指如藉由流式細胞量測術所偵測存在表面表現，例如藉由用特異性結合於標記物之抗體染色且偵測該抗體所偵測，其中該染色可藉由流式細胞量測術偵測之水準顯著高於使用同型匹配對照物在其他方面相同之條件下進行相同程序所偵測之染色，及/或其水準基本上類似於已知對標記物呈陽性之細胞的水準，及/或其水準顯著高於已知對標記物呈陰性之細胞的水準。
如本文所用，細胞或細胞群體對特定標記物呈「陰性」之表述係指不存在實質性可偵測存在於細胞上或細胞內之特定標記物(通常為表面標記物)。當提及表面標記物時，該術語係指如藉由流式細胞量測術所偵測不存在表面表現，例如藉由用特異性結合於標記物之抗體染色且偵測該抗體所偵測，其中該染色可藉由流式細胞量測術偵測之水準顯著高於使用同型匹配對照物在其他方面相同之條件下執行相同程序所偵測之染色的水準，及/或其水準顯著低於已知對標記物呈陽性之細胞的水準，及/或其水準基本上類似於已知對標記物呈陰性之細胞的水準。
除非另有定義，否則本文所用之所有技術術語、標記法及其他技術及科學術語意欲具有與一般熟習所主張標的物所屬技術者通常所理解相同的含義。在一些情況下，出於清楚起見及/或方便參考，在本文中定義具有通常所理解含義之術語，且本文中包括此類定義不應必然解釋為表示與此項技術中一般所理解存在實質性差異。
本申請案中所提及之所有出版物(包括專利文件、科學論文及資料庫)，出於所有目的均以全文引用之方式併入本文中，其引用之程度如同各個別出版物以引用之方式個別地併入一般。若本文所闡述之定義與以引用方式併入本文中之專利、申請案、公開申請案及其他公開案中所闡述的定義相反或以其他方式不一致，則以本文所闡述之定義為准，而非以以引用方式併入本文中的定義為准。
本文所用之章節標題僅出於組織目的而不應解釋為限制所描述之標的物。
VIII. 例示性實施例
在本文所提供之實施例當中為：
1. 一種編碼嵌合抗原受體(receptor)之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區，其中在於細胞中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
2. 如實施例1之聚核苷酸，其中該間隔子來源於免疫球蛋白。
3. 如實施例1或實施例2之聚核苷酸，其中該間隔子包含鉸鏈區、CH 2及CH 3區之序列。
4. 如實施例1至3中任一者之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子為或包含(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。
5. 如實施例1至4中任一者之聚核苷酸，其中編碼該間隔子之核酸包含至少一個經修飾之剪接供體及/或剪接受體(acceptor)位點，該經修飾之剪接供體及/或受體位點包含對應於SEQ ID NO:621中所闡述之序列中所含有之參考剪接供體位點及/或參考剪接受體位點的一或多個核苷酸修飾。
6. 如實施例5之聚核苷酸，其中該一或多種核苷酸修飾包含插入、缺失、取代或其組合。
7. 如實施例5或實施例6之聚核苷酸，其中該等參考剪接受體及/或參考剪接供體位點為典型、非典型或隱蔽之剪接位點。
8. 如實施例5至7中任一者之聚核苷酸，其中：
該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.4、0.5、0.6、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或
該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
9. 如實施例5至8中任一者之聚核苷酸，其中：
該參考剪接供體位點包含序列aatctaagtacggac (SEQ ID NO:705)、tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)、acaattagtaaggca (SEQ ID NO:707)及/或accacaggtgtatac (SEQ ID NO:708)；且/或
該參考剪接受體位點包含序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)及/或gggcaacgtgttctcttgcagtgtcatgcacgaagccctgc (SEQ ID NO:743)。
10. 如實施例5至8中任一者之聚核苷酸，其中：
該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或
該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
11. 如實施例5至8及10中任一者之聚核苷酸，其中：
該參考剪接供體位點包含序列tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)；且/或
該參考剪接受體位點包含序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)。
12. 如實施例5至11中任一者之聚核苷酸，其中該一或多個核苷酸修飾中之至少一者處於該參考剪接受體及/或參考剪接供體位點之剪接位點接合處(junction)的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基內。
13. 如實施例5至12中任一者之聚核苷酸，其中該一或多個核苷酸修飾為靜默的，及/或產生與SEQ ID NO:621相比簡併之密碼子，及/或不改變所編碼之該間隔子的胺基酸序列。
14. 如實施例5至9及12至13中任一者之聚核苷酸，其中
經修飾之該剪接供體位點闡述於agtctaaatacggac (SEQ ID NO:661)、tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)、accatctccaaggcc (SEQ ID NO:663)及/或gccccaggtttacac (SEQ ID NO:664)中；且/或
經修飾之該剪接受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)、gggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgc (SEQ ID NO:673)及/或cgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggacct (SEQ ID NO:766)中。
15. 如實施例5至14中任一者之聚核苷酸，其中該經修飾之剪接供體位點闡述於tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)中，且/或該經修飾之受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)及/或cgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggacct (SEQ ID NO:766)中。
16. 如實施例1至15中任一者之聚核苷酸，其中該間隔子係由SEQ ID NO:622中所闡述之核苷酸序列或其一部分編碼。
17. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
18. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸由SEQ ID NO:622中所闡述之序列組成或基本上由其組成或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
19. 如實施例17或實施例18之聚核苷酸，其中在於細胞中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
20. 如實施例1至19中任一者之聚核苷酸，其中，在於細胞中表現時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現其異質性與自參考聚核苷酸轉錄之mRNA的異質性相比減小，該參考聚核苷酸編碼與該聚核苷酸相同之胺基酸序列，其中該參考聚核苷酸與該聚核苷酸相比的不同之處在於在該編碼該間隔子之核酸中存在一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點及/或與該聚核苷酸相比包含一或多個核苷酸修飾。
21. 如實施例20之聚核苷酸，其中該RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。
22. 如實施例20或實施例21之聚核苷酸，其中來自該參考聚核苷酸之該經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。
23. 如實施例1至22中任一者之聚核苷酸，其中該RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。
24. 如實施例1至23中任一者之聚核苷酸，其中該聚核苷酸經密碼子最佳化。
25. 如實施例1至24中任一者之聚核苷酸，其中該抗原與疾病或病狀相關聯或在與疾病或病狀相關聯之病灶之環境的細胞中進行表現。
26. 如實施例1至25中任一者之聚核苷酸，其中該疾病或病狀為癌症。
27. 如實施例1至26中任一者之聚核苷酸，其中該疾病或病狀為骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。
28. 如實施例1至27中任一者之聚核苷酸，其中該抗原為ROR1、B細胞成熟抗原(BCMA)、碳酸酐酶9 (CAIX)、tEGFR、Her2/neu (受體酪胺酸激酶erbB2)、L1-CAM、CD19、CD20、CD22、間皮素、CEA及B型肝炎表面抗原、抗葉酸受體、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮醣蛋白2 (EPG-2)、上皮醣蛋白40 (EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二聚體、EGFR vIII、葉酸結合蛋白(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎兒乙醯膽鹼受體、GD2、GD3、HMW-MAA、IL-22R-α、IL-13R-α2、激酶插入域受體(kdr)、κ輕鏈、Lewis Y、L1細胞黏附分子(L1-CAM)、黑素瘤相關抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、優先表現之黑素瘤抗原(PRAME)、存活素、TAG72、B7-H6、IL-13受體α2 (IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6整合素、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒AchR、NKG2D配位體、CD44v6、雙重抗原、睪丸癌抗原、間皮素、鼠類CMV、黏蛋白1 (MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胚抗原(oncofetal antigen)、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、Her2/neu、雌激素受體、孕酮受體、肝配蛋白B2、CD123、c-Met、GD-2、O-乙醯化GD2 (OGD2)、CE7、威爾姆斯腫瘤1 (WT-1)、週期蛋白、週期蛋白A2、CCL-1、CD138、病原體特異性抗原。
29. 如實施例28之聚核苷酸，其中該抗原為B細胞成熟抗原(BCMA)。
30. 如實施例1至29中任一者之聚核苷酸，其中該抗原結合域為包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。
31. 如實施例30之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含與SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或
該VL 區為或包含與SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
32. 如實施例30或實施例31之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含與SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或
該VL 區為或包含與SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
33. 如實施例30或實施例31之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或
該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
34. 如實施例30至33中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或
該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
35. 如實施例30至34中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、294、295、507、532、593、596、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)包含選自SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、594、597、605、612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595、606、613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或
該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)包含選自SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
36. 如實施例30至35中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1、2、3、141、143、144、288、289、507、593、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)包含選自SEQ ID NO:4、5、6、145、147、148、290、291、372、513、594、605或612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:7、8、9、10、149、153、154、155、156、157、292、293、376、517、595、606或613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或
該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:26、27、28、30、31、33、34、174、176、177、178、302、303、380、381、382、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)包含選自SEQ ID NO:37、38、39、41、43、44、179、181、182、183、304、305、399、400、401、402、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:47、48、49、51、52、55、56、185、189、190、191、192、193、194、306、307、415、417、418、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
37. 如實施例30至36中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區包含選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：
分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及11之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:140、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及150之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:142、146及151之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及377之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、373及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及378之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、374及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
分別包含SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
38. 如實施例30至37中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區包含選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：
分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
分別包含SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
39. 如實施例30至38中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
40. 如實施例30至39中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
41. 如實施例30至40中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
42. 如實施例30至41中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列。
43. 如實施例30至42中任一者之聚核苷酸，其中該VL 區包含選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：
分別包含SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:29、40及50之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:32、42及53之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:35、45及57之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:36、46及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及184之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及186之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及187之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:383、403及419之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:384、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:385、180及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:386、404及420之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:387、405及422之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:388、406及423之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:388、407及424之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:389、408及425之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:390、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:391、409及426之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:392、40及427之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:394、39及429之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:395、411及430之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:396、412及431之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:396、412及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:397、413及432之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:398、414及433之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
分別包含SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
44. 如實施例30至43中任一者之聚核苷酸，其中該VL 區包含選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：
分別包含SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
分別包含SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
45. 如實施例30至44中任一者之聚核苷酸，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
46. 如實施例30至45中任一者之聚核苷酸，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
47. 如實施例30至46中任一者之聚核苷酸，其中：
該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
48. 如實施例30至47中任一者之聚核苷酸，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。
49. 如實施例30至48中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及119中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及119具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及122中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及122具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及123中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及123具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:114及126中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:114及126具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及127中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及127具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:247及257中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:247及257具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:249及259中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:249及259具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:250及260中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:250及260具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:251及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:251及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:523及539中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:523及539具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及540中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及540具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:524及541中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及541具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:525及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:525及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:526及542中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:526及542具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:527及543中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:527及543具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:528及544中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及544具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:529及545中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:529及545具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:528及546中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及546具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及547中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及547具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及548中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及548具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:530及549中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:530及549具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:531及550中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:531及550具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及552中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及552具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及553中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及553具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:533及554中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:533及554具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及555中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及555具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:524及556中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及556具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及557中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及557具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
50. 如實施例30至49中任一者之聚核苷酸，其中：
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
51. 如實施例30至50中任一者之聚核苷酸，其中該片段包含scFv。
52. 如實施例30至51中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區及該VL 區由柔性連接子接合。
53. 如實施例52之聚核苷酸，其中該scFv包含有包含胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。
54. 如實施例30至53中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區處於該VL 區之胺基端。
55. 如實施例30至54中任一者之聚核苷酸，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
56. 如實施例30至55中任一者之聚核苷酸，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
57. 如實施例30至56中任一者之聚核苷酸，其中編碼該抗原結合域之核酸包含(a) SEQ ID NO:330-352、647、648、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:330-352、647、648、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。
58. 如實施例30至57中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含(a) SEQ ID NO:352、647、648、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:352、647、648、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。
59. 如實施例30至57中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸經密碼子最佳化。
60. 如實施例30至57中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:440、460、715、717或719中之任一者中所闡述的核苷酸序列。
61. 如實施例30至60中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:460中所闡述之核苷酸序列。
62. 如實施例30至53中任一者之聚核苷酸，其中該VH 區處於該VL 區之羧基端。
63. 如實施例51至53及62中任一者之聚核苷酸，其中該scFv包含SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
64. 如實施例1至59中任一者之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區包含活化性細胞質信號傳導域。
65. 如實施例60之聚核苷酸，其中該活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包含基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。
66. 如實施例64或實施例65之聚核苷酸，其中該活化性細胞質信號傳導域為或包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之ζ鏈的細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。
67. 如實施例64至66中任一者之聚核苷酸，其中該活化性細胞質域為人類的或來源於人類蛋白質。
68. 如實施例64至67中任一者之聚核苷酸，其中該活化性細胞質域為或包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
69. 如實施例64至68中任一者之聚核苷酸，其中編碼該活化性細胞質域之核酸為或包含SEQ ID NO:627中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
70. 如實施例64至69中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該活化性細胞質信號傳導域之核酸為或包含SEQ ID NO:652中所闡述之序列。
71. 如實施例64至70中任一者之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區進一步包含共刺激信號傳導區。
72. 如實施例71之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
73. 如實施例71或實施例72之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
74. 如實施例71至73中任一者之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
75. 如實施例71至74中任一者之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區為人類的或來源於人類蛋白質。
76. 如實施例71至75中任一者之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區為或包含SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。
77. 如實施例71至76中任一者之聚核苷酸，其中編碼該共刺激區之核酸為或包含SEQ ID NO:625中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
78. 如實施例71至77中任一者之聚核苷酸，其中該編碼該共刺激信號傳導區之核酸包含SEQ ID NO:681中所闡述之序列。
79. 如實施例71至78中任一者之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區處於該跨膜域與該細胞內信號傳導區之間。
80. 如實施例1至79中任一者之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含來源於CD4、CD28或CD8之跨膜域。
81. 如實施例80之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含來源於CD28之跨膜域。
82. 如實施例1至81中任一者之聚核苷酸，其中該跨膜域為人類的或來源於人類蛋白質。
83. 如實施例1至82中任一者之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
84. 如實施例1至83中任一者之聚核苷酸，其中編碼該跨膜域之核酸為或包含SEQ ID NO:623中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
85. 如實施例84之聚核苷酸，其中該編碼該跨膜域之核酸包含SEQ ID NO:688中所闡述之序列。
86. 如實施例1至85中任一者之聚核苷酸，其中所編碼之該嵌合抗原受體自其N端至C端依序包含：該抗原結合域、該間隔子、該跨膜域及該細胞內信號傳導域。
87. 如實施例1至86中任一者之聚核苷酸，其中該聚核苷酸進一步編碼截短之受體。
88. 一種嵌合抗原受體，其由如實施例1至87中任一者之聚核苷酸編碼。
89. 一種嵌合抗原受體，其包含(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
90. 如實施例89之嵌合抗原受體，其中該間隔子來源於免疫球蛋白。
91. 如實施例89或實施例90之嵌合抗原受體，其中該間隔子包含鉸鏈區、CH 2及CH 3區之序列。
92. 如實施例91之嵌合抗原受體，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者全部或部分地來源於IgG4或IgG2，視情況，人類IgG4或人類IgG2。
93. 如實施例90或實施例91之嵌合抗原受體，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3來源於IgG4。
94. 如實施例90或實施例91之嵌合抗原受體，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且包含來源於IgG4及IgG2之序列。
95. 如實施例94之嵌合抗原受體，其中該間隔子包含IgG4/2嵌合鉸鏈或與人類IgG4相比包含至少一個胺基酸置換的經修飾之IgG4；IgG2/4嵌合CH 2；及IgG4 CH 3區。
96. 如實施例89至92及94至95中任一者之嵌合抗原受體，其中該間隔子為或包含(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。
97. 如實施例89至92及94至96中任一者之嵌合抗原受體，其中所編碼之該間隔子為或包含SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
98. 一種嵌合抗原受體，其包含：(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
99. 如實施例89至98中任一者之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域為包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。
100. 如實施例99之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含與SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609或617中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或
該VL 區為或包含與SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
101. 如實施例99或實施例100之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含與SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且/或
該VL 區為或包含與SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
102. 如實施例99或實施例100之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或
該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
103. 如實施例99至102中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且/或
該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
104. 如實施例99至103中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1-3、140-144、288、289、294、295、507、532、593、596、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)包含選自SEQ ID NO:4-6、145-148、290、291、296、297、372-374、513、551、594、597、605、612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:7-11、149-157、279-287、292、293、376-378、517、595、606、613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或
該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:26-36、174-178、302、303、380-392、394-398、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)包含選自SEQ ID NO:37-46、179-183、304、305、399-409、411-414、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:47-58、184-194、306、307、415-427、429-433、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
105. 如實施例99至104中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1、2、3、141、143、144、288、289、507、593、604、611中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)；及/或(b)包含選自SEQ ID NO:4、5、6、145、147、148、290、291、372、513、594、605或612中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區2 (CDR-H2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:7、8、9、10、149、153、154、155、156、157、292、293、376、517、595、606或613中之任一者之胺基酸序列的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且/或
該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:26、27、28、30、31、33、34、174、176、177、178、302、303、380、381、382、589、601、607或614中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)；(b)包含選自SEQ ID NO:37、38、39、41、43、44、179、181、182、183、304、305、399、400、401、402、590、602、608或615中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)；及(c)包含選自SEQ ID NO:47、48、49、51、52、55、56、185、189、190、191、192、193、194、306、307、415、417、418、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
106. 如實施例99至105中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區包含選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：
分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及11之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:140、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及150之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:142、146及151之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及377之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、373及152之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及378之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、374及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
分別包含SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
107. 如實施例99至106中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區包含選自以下之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3：
分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及8之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及9之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:141、145及149之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:143、147及153之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:144、148及154之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及156之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:2、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及155之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、372及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:3、6及376之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:604、605及606之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；
分別包含SEQ ID NO:288、290及292之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
分別包含SEQ ID NO:289、291及293之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
108. 如實施例99至107中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:110-115、247-256、324、325、518-531、533、609、617、772-774或814-832中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
109. 如實施例99至108中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:110、111、112、113、115、248、252、253、254、255、256、324、325、518、519、520、521、522、609或617中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
110. 如實施例99至109中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或
該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3。
111. 如實施例99至110中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列。
112. 如實施例99至111中任一者之嵌合抗原受體，其中該VL 區包含選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：
分別包含SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:29、40及50之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:32、42及53之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:35、45及57之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:36、46及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及184之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及186之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及187之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:383、403及419之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:384、39及54之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:385、180及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:175、180及188之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:386、404及420之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:387、405及422之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:388、406及423之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:388、407及424之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:389、408及425之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:390、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:391、409及426之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:392、40及427之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:394、39及429之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:395、411及430之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:396、412及431之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:396、412及58之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:397、413及432之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:398、414及433之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
分別包含SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
113. 如實施例99至112中任一者之嵌合抗原受體，其中該VL 區包含選自以下之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3：
分別包含SEQ ID NO:26、37及47之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:27、38及48之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:28、39及49之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、39及51之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:31、41及52之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及55之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:34、44及56之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及185之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及189之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:176、181及190之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:177、182及191之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:174、179及192之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及193之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:30、399及415之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:381、401及417之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:382、402及418之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:607、608及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；
分別包含SEQ ID NO:302、304及306之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
分別包含SEQ ID NO:303、305及307之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
114. 如實施例99至113中任一者之嵌合抗原受體，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:116-127、257-267、326、327、534-550、552-557、610、618、775-777或833-849中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
115. 如實施例99至114中任一者之嵌合抗原受體，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:116、117、118、120、121、124、125、258、262、263、264、265、266、267、326、327、534、535、536、537、538、610或618中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
116. 如實施例99至115中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或
該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
117. 如實施例99至116中任一者之嵌合抗原受體，其中該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。
118. 如實施例99至117中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及119中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及119具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及122中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及122具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及123中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及123具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:114及126中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:114及126具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及127中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及127具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:247及257中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:247及257具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:249及259中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:249及259具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:250及260中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:250及260具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:251及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:251及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:523及539中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:523及539具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及540中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及540具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:524及541中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及541具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:525及261中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:525及261具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:526及542中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:526及542具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:527及543中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:527及543具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:528及544中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及544具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:529及545中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:529及545具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:528及546中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:528及546具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及547中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及547具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及548中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及548具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:530及549中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:530及549具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:531及550中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:531及550具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及552中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及552具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及553中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及553具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:533及554中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:533及554具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及555中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及555具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:524及556中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:524及556具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及557中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及557具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
119. 如實施例99至118中任一者之嵌合抗原受體，其中：
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及116中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及116具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:111及117中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:111及117具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及118中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及118具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及120中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及120具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:110及121中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:110及121具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:112及124中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:112及124具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:113及125中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:113及125具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:248及258中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:248及258具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:252及262中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:252及262具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:253及263中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:253及263具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:254及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:254及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:255及265中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:255及265具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及266中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及266具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:518及534中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:518及534具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:520及264中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:520及264具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:521及537中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:521及537具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:522及538中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:522及538具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列；
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:324及326中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:324及326具有至少90%一致性之胺基酸序列；或
該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:325及327中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:325及327具有至少90%一致性之胺基酸序列。
120. 如實施例99至119中任一者之嵌合抗原受體，其中該片段包含scFv。
121. 如實施例99至120中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區及該VL 區由柔性連接子接合。
122. 如實施例121之嵌合抗原受體，其中該scFv包含有包含胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。
123. 如實施例99至122中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區處於該VL 區之胺基端。
124. 如實施例99至123中任一者之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-139、268-278、329、442、478、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
125. 如實施例99至124中任一者之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-278、329、442、478、558-563或585中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
126. 如實施例99至122中任一者之嵌合抗原受體，其中該VH 區處於該VL 區之羧基端。
127. 如實施例99至122及126中任一者之嵌合抗原受體，其中該scFv包含SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:328或586中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
128. 如實施例89至127中任一者之嵌合抗原受體，其中該細胞內信號傳導區包含活化性細胞質信號傳導域。
129. 如實施例128之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包含基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。
130. 如實施例128或實施例129之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質信號傳導域為或包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之ζ鏈的細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。
131. 如實施例128至130中任一者之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質域為人類的或來源於人類蛋白質。
132. 如實施例128至131中任一者之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質域為或包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
133. 如實施例128至132中任一者之嵌合抗原受體，其中該細胞內信號傳導區進一步包含共刺激信號傳導區。
134. 如實施例133之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
135. 如實施例133或實施例134之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
136. 如實施例133至135中任一者之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
137. 如實施例133至136中任一者之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區為人類的或來源於人類蛋白質。
138. 如實施例133至137中任一者之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區為或包含SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。
139. 如實施例133至139中任一者之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區處於該跨膜域與該細胞內信號傳導區之間。
140. 如實施例89至139中任一者之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含來源於CD4、CD28或CD8之跨膜域。
141. 如實施例140之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含來源於CD28之跨膜域。
142. 如實施例89至141中任一者之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為人類的或來源於人類蛋白質。
143. 如實施例89至142中任一者之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
144. 如實施例89至143中任一者之嵌合抗原受體，其中所編碼之該嵌合抗原受體自其N端至C端依序包含：該抗原結合域、該間隔子、該跨膜域及該細胞內信號傳導域。
145. 一種經工程改造之細胞，其包含如實施例1至87及173至179中任一者之聚核苷酸。
146. 一種經工程改造之細胞，其包含如實施例88至144及181中任一者之嵌合抗原受體。
147. 如實施例145或實施例146之經工程改造之細胞，其中該細胞為免疫細胞。
148. 如實施例147之經工程改造之細胞，其中該免疫細胞為獲自個體之初代細胞。
149. 如實施例147或實施例148之經工程改造之細胞，其中該免疫細胞為NK細胞或T細胞。
150. 如實施例147至149中任一者之經工程改造之細胞，其中該免疫細胞為T細胞，且該T細胞為CD4+及/或CD8+ T細胞。
151. 如實施例145至150中任一者之經工程改造之細胞，其中該細胞包含編碼該嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
152. 如實施例145至151中任一者之經工程改造之細胞，其中該細胞包含編碼該嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現其異質性與處於編碼參考嵌合抗原受體之細胞中之經轉錄mRNA的異質性相比減小，該參考嵌合抗原受體包含與該嵌合抗原受體相同之胺基酸序列，但由在編碼該等CAR之聚核苷酸中包含一或多個核苷酸差異的不同聚核苷酸序列編碼，且/或其中該參考嵌合抗原受體係由在該編碼該間隔子之核酸中包含一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點的聚核苷酸編碼。
153. 如實施例152之經工程改造之細胞，其中該RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。
154. 如實施例152或實施例153之經工程改造之細胞，其中編碼該參考CAR之細胞包含編碼該參考CAR之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。
155. 如實施例151至154中任一者之經工程改造之細胞，其中該RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。
156. 如實施例145至155中任一者之經工程改造之細胞，其中，在複數個該等經工程改造之細胞當中，在該複數個細胞中少於或少於約10%、9%、8%、7%、5%、4%、3%、2%或1%之細胞包含展現滋養型(tonic)信號傳導及/或與抗原無關之活性或信號傳導的嵌合抗原受體。
157. 一種組合物，其包含如實施例1至87及173至179中任一者之聚核苷酸、如實施例88至144及180中任一者之嵌合抗原受體或如實施例145至156中任一者之經工程改造之細胞。
158. 如實施例157之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之賦形劑。
159. 如實施例157或實施例158之組合物，其為無菌的。
160. 一種治療方法，其包含向患有疾病或病症之個體投與如實施例144之156中任一者之經工程改造之細胞或如實施例157至159中任一者之組合物。
161. 如實施例160之方法，其中該疾病或病症與B細胞成熟抗原(BCMA)之表現相關聯。
162. 如任一實施例160或實施例161之方法，其中與BCMA相關聯之該疾病或病症為B細胞相關病症。
163. 如實施例160至162中任一者之方法，其中該與BCMA相關聯之疾病或病症為自體免疫疾病或病症。
164. 如實施例163之方法，其中該自體免疫疾病或病症為全身性紅斑性狼瘡症(SLE)、狼瘡性腎炎、發炎性腸病、類風濕性關節炎、ANCA相關脈管炎、特發性血小板減少性紫癜症(ITP)、自體免疫血小板減少症、卻格司氏病(Chagas' disease)、格雷氏病(Grave's disease)、韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)、結節性多動脈炎、休格連氏症候群(Sjogren's syndrome)、尋常天疱瘡、硬皮病、多發性硬化症、牛皮癬、IgA腎病變、IgM多發性神經病變、脈管炎、糖尿病、雷諾氏症候群(Reynaud's syndrome)、抗磷脂症候群、古巴士德氏疾病(Goodpasture's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、自體免疫溶血性貧血、重症肌無力或進行性絲球體腎炎。
165. 如實施例160至164中任一者之方法，其中該與BCMA相關聯之疾病或病症為癌症。
166. 如實施例165之方法，其中該癌症為BCMA表現性癌症。
167. 如實施例165或166之方法，其中該癌症為B細胞惡性病。
168. 如實施例165至167中任一者之方法，其中該癌症為淋巴瘤、白血病或漿細胞惡性病。
169. 如實施例168之方法，其中該癌症為淋巴瘤，且該淋巴瘤為伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)、濾泡性淋巴瘤、小無裂細胞淋巴瘤、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、邊緣區淋巴瘤、脾淋巴瘤、結節單核細胞樣B細胞淋巴瘤、免疫母細胞淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、瀰漫性混合細胞淋巴瘤、肺部B細胞血管中心性淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL)或套細胞淋巴瘤(MCL)。
170. 如實施例168之方法，其中該癌症為白血病，且該白血病為慢性淋巴球性白血病(CLL)、漿細胞白血病或急性淋巴球性白血病(ALL)。
171. 如實施例168之方法，其中該癌症為漿細胞惡性病，且該漿細胞惡性病為多發性骨髓瘤(MM)或漿細胞瘤。
172. 如實施例165至168及171中任一者之方法，其中該癌症為多發性骨髓瘤(MM)。
173. 如實施例1至87中任一者之聚核苷酸，其中該抗原結合域及/或所編碼之該嵌合抗原受體展現，與可溶性BCMA相比優先結合於膜結合之BCMA，及/或對膜結合之BCMA的結合親和力比對可溶性BCMA更大。
174. 如實施例1至87及173中任一者之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含SEQ ID NO:751-762中之任一者中所闡述的序列或與SEQ ID NO:751-762中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
175. 如實施例1至87、173及174中任一者之聚核苷酸，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者全部或部分地來源於IgG4或IgG2，視情況，人類IgG4或人類IgG2。
176. 如實施例1至87、173至175中任一者之聚核苷酸，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3來源於IgG4。
177. 如實施例1至87及173至176中任一者之聚核苷酸，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且包含來源於IgG4及IgG2之序列。
178. 如實施例177之聚核苷酸，其中該間隔子包含IgG4/2嵌合鉸鏈或與人類IgG4相比包含至少一個胺基酸置換的經修飾之IgG4；IgG2/4嵌合CH 2；及IgG4 CH 3區。
179. 如實施例1至87及173至178中任一者之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子為或包含SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
180. 如實施例88至144中任一者之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域及/或該嵌合抗原受體展現，與可溶性BCMA相比優先結合於膜結合之BCMA，及/或對膜結合之BCMA的結合親和力比對可溶性BCMA更大。
181. 如實施例88至144中任一者之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域及或該嵌合抗原受體或指示所編碼之該嵌合抗原受體在暴露於表現表面BCMA之細胞後之功能或活性的量度在可溶性或脫落形式之BCMA存在下不減小或受阻斷或不顯著減小或受阻斷。
182. 如實施例181之嵌合抗原受體，其中該可溶性或脫落形式之BCMA的濃度或量對應於存在於個體或多發性骨髓瘤患者之血清或血液或血漿中的濃度或量或在該疾病或病症之患者群體中的平均濃度或量，或該可溶性或脫落形式之BCMA所處的濃度或量使得在相同分析中，表現參考抗BCMA重組受體(視情況，參考抗BCMA CAR)之細胞的結合或量度減小或受阻斷或顯著減小或受阻斷。
183. 一種測定轉殖基因之經轉錄核酸之異質性的方法，該方法包含：
a)使用至少一種5′及3′引子對使經轉錄核酸擴增，其中至少一對包含與該經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與該經轉錄核酸之3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子，以產生一或多種擴增產物；及
b)偵測該等擴增產物，其中存在來自至少一種5′及3′引子對的兩種或超過兩種擴增產物指示該等擴增產物中之異質性。
184. 如實施例183之方法，其中在b)中所偵測之該等差異為該等擴增之轉錄本的不同長度。
185. 如實施例183之方法，其中在b)中之該等差異為在該等擴增之轉錄本之層析概況中的差異。
186. 如實施例183至185中任一者之方法，其中該等擴增產物中之差異係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或層析來加以測定。
187. 如實施例183至186中任一者之方法，其中該5′引子對自該經轉錄核酸之啟動子區轉錄的序列具特異性。
188. 如實施例183至187中任一者之方法，其中該經轉錄核酸係使用對該聚核苷酸之胺基酸編碼序列內之序列及/或經轉錄前驅mRNA之3′非轉譯區具特異性的3′引子來加以擴增。
189. 如實施例183至188中任一者之方法，其中該3引子對該經轉錄前驅mRNA之該3′非轉譯區的聚腺苷酸化序列或增強子區具特異性。
190. 如實施例183至189中任一者之方法，其中步驟a)係藉由單個擴增反應使用單個5′及3′引子對來實現，該引子對包含與該經轉錄核酸之該5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與該3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子。
191. 如實施例183至190中任一者之方法，其中步驟a)係藉由平行或後續擴增反應使用第一5′及3′引子對、第二5′及3′引子對及視情況另外之5′及3′引子對來實現，其中：
該第一5′及3′引子對含有與該經轉錄核酸之該5′ UTR內之核酸序列互補的5′引子及與該經轉錄核酸之該3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子；
該第二5′及3′引子對含有其序列與該核酸轉錄本之經轉譯序列之一部分互補的5′引子及其序列與該轉錄本之該3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子；且
該視情況另外之5′及3′引子對各自含有與該轉錄本之經轉譯區內之序列互補的序列。
192. 如實施例191之方法，其中該等平行或後續擴增反應使該轉錄本之重疊部分擴增。
193. 如實施例183至192中任一者之方法，其中該等擴增產物預測為長度約1.5千鹼基、2千鹼基、2.5千鹼基、3千鹼基、3.5千鹼基、4千鹼基、4.5千鹼基、5千鹼基、5.5千鹼基、6千鹼基、7千鹼基或8千鹼基。
194. 如實施例183至193中任一者之方法，其中偵測為具有異質性之經轉錄核酸鑑別為用於一或多個剪接位點之移除的轉殖基因候選者。
195. 如實施例194之方法，其中該轉殖基因候選者之該經轉錄核酸在於細胞中表現時展現至少或至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或超過75%異質性。
196. 一種減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法，該方法包含：
a)根據如實施例194或實施例195之方法來鑑別用於剪接位點移除之轉殖基因候選者；
b)鑑別一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點；及
c)對在b)中所鑑別之該一或多個剪接供體位點處或附近的核酸序列進行修飾，藉此產生經修飾之聚核苷酸。
197. 如實施例196之方法，其進一步包含：d)如同步驟a)中，評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。
198. 如實施例197之方法，其進一步包含e)重複步驟b)-d)，直至步驟d)中之轉錄本的異質性與如在步驟a)中所測定之轉錄本異質性相比減小為止。
199. 如實施例196至198中任一者之方法，其中該一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點展現剪接事件或剪接事件之機率的得分為約或至少約0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95或1.0。
200. 如實施例196至199中任一者之方法，其中剪接供體位點及剪接受體位點獨立地加以鑑別。
201. 如實施例196至200中任一者之方法，其中該(等)剪接受體及/或供體位點為典型、非典型及/或隱蔽之剪接受體及/或供體位點。
202. 如實施例196至201中任一者之方法，其中該轉殖基因為嵌合抗原受體或嵌合抗原受體之一部分。
203. 如實施例202之方法，其中該CAR多肽包含抗原結合域、間隔子區、跨膜區及細胞內信號傳導區，該抗原結合域包含有包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )之抗體片段，視情況，單鏈抗體片段(scFv)。
204. 如實施例202或實施例203之方法，其中該經修飾之聚核苷酸不在所編碼之該CAR多肽之該抗原結合域的編碼序列內經修飾。
205. 如實施例196至204中任一者之方法，其中在該聚核苷酸之修飾後，該轉殖基因的所編碼之胺基酸序列不變。
206. 如實施例196至205中任一者之方法，其中自該經修飾之聚核苷酸轉錄的RNA展現在於細胞中表現未經修飾之聚核苷酸時的至少或至少約70%、75%、80%、85%、90%或95%同質性。
207. 如實施例183至206中任一者之方法，其中該細胞為人類細胞。
208. 如實施例183至207中任一者之方法，其中細胞為T細胞。
IX. 實例
包括以下實例僅為達成說明之目的，且不意欲限制本發明之範疇。
實例1: 產生及評定抗BCMA抗體(僅VH 鏈)
產生及評定例示性抗BCMA抗體，其含有特異性結合於BCMA之重鏈可變(VH )區，甚至在不存在輕鏈可變(VL )的情況下進行產生及評定。
A. 文庫選擇及抗體產生
經由對在無細胞系統中顯示的由dsDNA編碼的經His標記之人類正常供體抗體VH 文庫的成員進行一系列選擇步驟來產生多個BCMA結合VH 區。對VH 文庫之成員進行多個回合之篩選以選擇特異性結合於與免疫球蛋白Fc區融合之可溶性人類BCMA (hBMCA-Fc)的VH 區。根據與不表現BCMA之親本HEK293細胞株相比，與表現人類BCMA之重組HEK293細胞株(hBCMA/HEK293細胞株)的結合，以及根據與表現內源性BCMA之人類骨髓瘤細胞株(H929細胞)的結合，藉由流式細胞量測術使用螢光染料結合之抗HIS抗體來篩選來自所選hBCMA-Fc池之VH 區。結果鑑別展現特異性結合於hBCMA/HEK293細胞且以較小程度特異性結合於H929細胞的VH 區純系。
對展現特異性結合於表現BCMA之細胞株但不特異性結合於BCMA陰性對照細胞的例示性VH 純系進行定序，且進行純化以用於進一步表徵。對純系進行純化及滴定，且使用基於流式細胞量測術之分析使用螢光染料結合之抗HIS抗體來量測其與hBCMA/HEK293細胞之結合親和力(EC50 )。表 E1 列出含有人類VH 3源性構架區之例示性純系的重鏈互補決定區3 (CDR-H3)及其在此研究中所觀測到之各別結合親和力(EC50 )。
表 E1. 用於代表性VH 純系之CDR3胺基酸序列
a 根據Kabat編號。
b ND指示未偵測到
實例2: 產生及評定抗BCMA抗體(scFv)
鑑別形式化為單鏈抗體片段(scFv)之例示性抗BCMA抗體，且評定其與BCMA之結合。
A. 文庫選擇及scFv抗體產生
經由對在無細胞系統中顯示的由dsDNA編碼之人類正常供體抗體文庫進行各種選擇來產生例示性抗BCMA scFv抗體。在一種途徑中，藉由改組使自實例1中所描述之途徑中之第一輪篩選而富集的VH 區文庫成員與人類正常供體VL 文庫配對，以產生呈VH -(G4 S)3 -VL 形式之scFv文庫。在後續選擇輪中，與親本HEK293細胞相比，根據與BCMA表現性HEK293細胞之特異性結合，富集所得scFv文庫。
在另一種途徑中，藉由根據在存在或不存在小鼠抗BCMA參考scFv抗體(BCMA-C1，VL -VH scFv抗體，SEQ ID NO:328；或BCMA-C2，VH -scFv抗體，SEQ ID NO:329)之競爭性溶離的情況下的BCMA與hBCMA-Fc之特異性結合而篩選正常供體源性人類scFv文庫來進行重新選擇(de novo selection)。在至少2輪選擇之後，回收scFv結合劑。
藉由流式細胞量測術使用活體外轉譯之粗細胞溶解物或使用細菌產生之上清液來評定，與不表現BCMA之對照細胞相比，所得scFv純系與BCMA表現性HEK293細胞的特異性結合。進一步分析某些顯示偏好結合BCMA之scFv純系。
使用正向及反向引子對所選scFv純系進行定序，且進行純化以用於進一步表徵。表 E2 列出對應於scFv之胺基酸(aa)及核苷酸(nt)序列以及相應重鏈(VH )或輕鏈(VL )可變區、CDR及構架區(FR)之胺基酸序列的序列識別符(SEQ ID NO)。相對於純系BCMA-22，觀測到已自生殖系構架區遺傳的輕鏈CDR3之第一殘基(半胱胺酸)經絲胺酸置換以產生另外之scFv，指定為BCMA-23。表 E2 亦闡述用作對照物且用於如後續實例中所描述之競爭研究中的例示性小鼠抗BCMA參考抗體之序列。
對例示性純系進行純化及滴定，且測試其與hBMCA之結合親和力(EC50 )：BCMA-1、BCMA-2、BCMA-3、BCMA-4、BCMA-5、BCMA-6、BCMA-7、BCMA-8、BCMA-9、BCMA-10、BCMA-11、BCMA-12、BCMA-13、BCMA-14、BCMA-14、BCMA-15、BCMA-16、BCMA-17、BCMA-18、BCMA-19、BCMA-20、BCMA-21、BCMA-22、BCMA-23、BCMA-24、BCMA-25、BCMA-26、BCMA-27、BCMA-28及BCMA-29。亦評定其他抗BCMA scFv抗體(參見表 E3 )，諸如含有WO2016090327中所描述之抗體之VH 及VL 序列的scFv及含有WO2010104949中所描述之BCMA抗體之VH 及VL 序列的scFv。
實例3: 產生針對BCMA之嵌合抗原受體(CAR)及表現抗BCMA CAR之細胞
產生編碼例示性嵌合抗原受體(CAR)之聚核苷酸，其各自含有人類抗BCMA scFv抗原結合域。在人類抗BCMA scFv當中為實例2中所描述之彼等scFv。在所產生之CAR當中亦為所含scFv含有WO2016090327中所描述之抗體之VH及VL序列的CAR。亦產生所含scFv具有WO2010104949中所描述之BCMA抗體之VH及VL序列的抗BCMA CAR。在scFv之一些情況下，VH 處於VL 之胺基端，且在一些情況下VL 處於VH 之胺基端。所產生之CAR中的scFv區闡述於表 E4 中。
具體言之，例示性聚核苷酸CAR構築體含有編碼以下之核酸：人類IgG-κ信號傳導序列(SEQ ID NO:619，編碼SEQ ID NO:620)、人類抗BCMA scFv (SEQ ID NO:128-130、132、133、136、137、269、273-277、442、478及558-563)、間隔子(諸如含有經修飾之IgG4-鉸鏈CH 2-CH 3的間隔子(SEQ ID NO:621，編碼SEQ ID NO:649) (在一些情況下，該間隔子可稱為「LS」)或，在一些情況下，較短間隔子(其可稱為「SS」)，諸如來源於IgG鉸鏈區之間隔子，諸如IgG4源性鉸鏈區或其修飾形式，或來源於CD28細胞外域；人類CD28跨膜域；人類4-1BB源性細胞內共同信號傳導序列；及人類CD3-ζ源性細胞內信號傳導域。例示性間隔子包括來源於IgG4鉸鏈區之彼等間隔子(諸如由例如SEQ ID NO:364編碼及/或含有SEQ ID NO:363之胺基酸序列的彼等間隔子)及CD28胞外域源性間隔子，諸如由例如SEQ ID NO:629之序列編碼的彼等間隔子或具有SEQ ID NO:630之胺基酸序列的彼等間隔子。
亦產生編碼另一CAR構築體之聚核苷酸，其含有編碼以下之核酸：人類IgG-κ信號序列(SEQ ID NO:619，編碼SEQ ID NO:620)、小鼠抗BCMA scFv (SEQ ID NO:328 (BCMA-C1；VL -VH )、329 (BCMA-C2；VH -VL )、585 (BCMA-C1；VH -VL) 或586 (BCMAC-2；VL -VH ))、間隔子(SEQ ID NO:621，編碼SEQ ID NO:649)、人類CD28跨膜域、人類4-1BB源性細胞內共同信號傳導序列及CD3-ζ源性細胞內信號傳導域。
編碼此類CAR之cDNA純系連接於下游核糖體跳過元件(諸如編碼T2A之序列SEQ ID NO:686或687，其編碼SEQ ID NO:654)，後接編碼截短之受體的序列，且選殖至慢病毒表現載體中。
為了產生抗BCMA CAR表現性T細胞，藉由基於免疫親和力之富集自來自人類供體個體之白血球清除術樣品分離出T細胞。使經分離之T細胞活化，且用含有編碼該等抗BCMA CAR之各別聚核苷酸的慢病毒載體進行轉導。在轉導及擴增之後，用對截短之受體具特異性之抗體且用經螢光標記之重組人類BCMA對CD4+及CD8+ T細胞進行染色，且藉由流式細胞量測術來分析，確認細胞之轉導及抗BCMA CAR之表現。
實例4: 評定潛在RNA異質性及修飾
在使用對例示性CAR轉錄本之5′ UTR及3′ UTR中的啟動子及下游WPRE具特異性之引子進行逆轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)後，藉由瓊脂糖凝膠電泳來分析來自用如實例3中所描述之例示性抗BCMA CAR轉導之細胞的RNA異質性。對於所含例示性間隔子包括經修飾之IgG CH 2-CH 3-鉸鏈區的各種抗BCMA CAR構築體(BCMA-LS CAR)觀測到多重條帶(圖 1A )，指示RNA異質性。對於含有較短間隔子之例示性CAR，諸如包括人類CD28細胞外區之一部分的CAR (參見例如BCMA-52-SS CAR)觀測到較小RNA異質性。
在編碼各種BCMA-LS CAR之核苷酸序列中評定潛在剪接位點，且以保守方式進行修飾，包括移除所預測之潛在剪接位點。對修飾之前的序列(起始序列)及修飾後之彼等序列(經最佳化之序列)進行分析以評定潛在隱蔽剪接位點之存在。剪接供體位點及剪接受體位點獨立地進行評估。鑑別構築體之各個區之起始序列的例示性剪接供體及剪接受體位點(例如在啟動子區及長間隔子區中鑑別)。在初始密碼子最佳化後，在長間隔子區內鑑別例示性剪接供體位點及剪接受體位點，其剪接位點得分＞ 0.7 (＞70%)，例如SEQ ID NO:693 (剪接位點得分為0.96)及708 (剪接位點得分為0.97)中分別闡述之供體位點。在進行初始密碼子最佳化(例示性經初始密碼子最佳化之間隔子序列參見例如SEQ ID NO:855)以便減小不合需要之剪接位點的可能性後，產生在所評定之區內含有另外之修飾的經修飾之構築體，其剪接位點得分＞ 0.7 (＞70%)。在於密碼子最佳化/剪接位點消除之後經進一步修飾之此類區當中為在較長間隔子區序列內之彼等區，例如剪接供體位點及剪接受體位點的最終經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE)序列分別闡述於SEQ ID NO:662及672中。
如上文所描述構築經修飾之序列且測試其RNA異質性。電泳確認RNA異質性減小。在剪接位點消除之前及之後對BCMA-CAR構築體之分析展現RNA異質性減小(圖 1B )。產生含有長間隔子區之修飾的例示性O/SSE CAR構築體，例如BCMA-23-LS-O/SSE CAR、BCMA-25-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-52-LS-O/SSE CAR及BCMA-55-LS-O/SSE CAR。
實例5: 在初代T細胞中評定CAR表現及功能
將如實例3中所描述的所含編碼抗BCMA CAR之聚核苷酸分別具有起始序列及經最佳化序列的慢病毒構築體轉導至T細胞中，且藉由流式細胞量測術來分析經轉導之細胞的轉導(基於替代性標記物之表現及CAR表現(基於與重組BCMA-Fc融合蛋白之結合)。與經由具有起始(非SSE)序列之聚核苷酸轉導以表現抗BCMA CAR的細胞相比，使用經最佳化之序列(BCMA-52-LS-O/SSE CAR及BCMA-55-LS-O/SSE CAR)轉導的CD4+及CD8+ T細胞在表面上表現相同相應抗BCMA CAR的百分比更大。代表性資料闡述於圖2及下表 E5 中。
使用各種體積的含有編碼CAR構築體(BCMA-23-LS CAR、BCMA 26-LS CAR、BCMA 55-LS CAR及BCMA 55-LS-O/SSE CAR)之慢病毒載體的病毒製劑來轉導500,000個供體源性初代人類T細胞，且比較轉導效率。與起始序列(圖 3 ，三角形)相比，在藉由經最佳化之序列(圖 3 ，圓形)轉導後，T細胞之轉導百分比增加。
實例6: 表徵BCMA-52及BCMA-55 scFv
A. 對組織進行免疫組織化學染色
藉由免疫組織化學來評定表現不同BCMA量之細胞及組織與例示性抗BCMA抗體的結合。藉由免疫組織化學來評定已與小鼠IgG1 Fc區肽融合的例示性靶向BCMA之人類CAR的結合域(scFv)與細胞及組織的結合。
B. 評定結合動力學
在Jurkat T細胞株中表現具有BCMA-55源性scFv結合域、經修飾之IgG源性CH 2-CH 3-鉸鏈間隔子、CD28跨膜域及41BB及CD3ζ胞內域的CAR。使用動力學排除分析來評定CAR與重組人類BCMA-hFc (rhBCMA hFc)之結合動力學。亦使用基於Biacore之分析來評定含有CAR之scFv部分的Fc融合蛋白(scFv-Fc)與重組人類BCMA融合蛋白之結合親和力。在此等研究中，觀測到由CAR及scFv-Fc融合物分別結合之KD 為大致1 nM及10 nM。
在另一實驗中，用編碼具有BCMA-55源性scFv結合域之CAR的聚核苷酸轉導Jurkat細胞，且將其培養至密度為約2 × 106 個。採集細胞，且將其在4℃下以1500g旋轉15分鐘。洗滌細胞集結粒，且使細胞再懸浮且在20 nM或1 nM生物素化rhBCMA hFc中連續稀釋(在此分析中亦稱為恆定結合搭配物(CBP))。在平衡之後，對細胞進行快速離心，且採集上清液用於KinExa動力學排除分析。簡言之，使來自經平衡之BCMA-55-LS CAR O/SSE表現性Jurkat細胞的含有rhBCMA hFc之上清液流動經過抗生蛋白鏈菌素珠粒流槽以捕獲自由之生物素化rhBCMA hFc。隨後使用經螢光標記之二級抗hBCMA抗體來偵測rhBCMA。對於各樣品記錄所偵測之rhBCMA hFc的吸收率，且針對各稀釋液中細胞之數目進行繪製(Darling (2004) Assay Drug. Dev., 2:647-657)。在此研究中，BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性細胞結合於rhBCMA hFc之相互作用的KD 在此分析中測定為大致1.46 nM，且表現量(EL) 測定為每CAR表現性Jurkat細胞大致146,500個CAR。
C. BCMA-55 scFv-Fc選擇性
使用膜蛋白質組陣列(MPA)分析，使用scFv-Fc融合蛋白來評定BCMA-55源性結合域之結合特異性。使用Retrogenix™平台來評估BCMA-55-Fc與表現超過4400種獨特人類細胞外蛋白質(代表超過85%之人類細胞外蛋白質組)及螢光蛋白之HEK293細胞的相互作用。偵測螢光蛋白以檢驗轉染，且含有匹配之Fc的CTLA4-Fc (在0.2 µg/mL下進行測試)亦作為陽性對照物用於篩選CD86。初始篩選涉及BCMA-55-scFv針對全蛋白質小組之scFv結合分析。隨後執行後續確認篩選，對BCMA-55-Fc與在初始篩選中鑑別之潛在成功結果之子組的相互作用進行再測試。在此分析中，BCMA鑑別為唯一強、特異性成功結果，與此結合域相對於其他細胞外蛋白質對BCMA具高選擇性的結論一致。對於組織蛋白酶G (CTSG)，觀測到低水準信號，但觀測到未賦予功能活性(參見實例16)。
實例7: 對經工程改造以表現各種抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)之T細胞進行活體外功能評定
在與BCMA表現性靶細胞一起共同培養後，活體外評定表現各種例示性抗BCMA CAR的經基因工程改造之人類T細胞。BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR、BCMA-52-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-LS-O/SSE CAR轉導T細胞。將反應與作為陽性對照物的參考抗BCMA CAR表現性細胞或作為陰性對照物的經假擬處理之細胞相比。
A. 針對靶細胞之溶胞活性
在5:1、2.5:1、1.25:1及0.65:1之效應細胞與靶細胞(E:T)比率下，將BCMA表現性靶細胞與表現BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR或參考抗BCMA CAR之T細胞一起培育。作為對照物，將靶細胞與不表現CAR之T細胞(假擬對照物)一起培育。具體言之，經BCMA轉導之K562細胞(K562/BCMA，BCMA高 )或RPMI 8226細胞(BCMA低 人類多發性骨髓瘤細胞株)用作用於溶解之標靶。靶細胞經NucLight Red (NLR)標記以容許藉由顯微法來追蹤靶細胞。藉由量測如由紅色螢光信號(使用IncuCyte®活細胞分析系統，Essen Bioscience)所測定的可存活靶細胞在介於24與72小時之間之時段內的損失來評定溶胞活性。溶解百分比(溶解%)相對於在與經假擬處理之T細胞一起培育之靶細胞中所發生的溶解進行正規化。如圖 4A 中所示，抗BCMA CAR表現性T細胞展現針對BCMA+細胞之抗原特異性溶胞活性。細胞溶解之程度視特定細胞株及CAR而不同。
在另一單獨實驗中，在3:1之E:T比率下，用RPMI 8226靶細胞測試溶胞活性。如圖 4B 中所示，在相對於不表現CAR的經假擬處理之細胞的溶解進行正規化的情況下，BCMA-52-LS-CAR及BCMA-55-LS-CAR表現性細胞展示大致70%溶解，而表現含有參考抗BCMA抗體結合域之CAR的細胞展示大致50%溶解。因此，結果展示，經工程改造以表現BCMA-52-CAR或BCMA-55-CAR之細胞的溶胞活性與含結合域之參考CAR的溶胞活性類似或比其更高。
為了比較經由未經修飾之CAR構築體或經最佳化之CAR構築體編碼之相同CAR工程改造之T細胞的溶胞活性，使用含有未經修飾之聚核苷酸構築體(BCMA-52-LS CAR及BCMA-55-LS CAR)或經最佳化之聚核苷酸構築體(BCMA-52-LS-O/SSE CAR及BCMA-55-LS-O/SSE CAR)的病毒載體對T細胞進行工程改造以表現抗BCMA CAR。基本上如上文所描述來分析經工程改造之細胞的溶胞活性。在3:1之E:T比率下，將CAR表現性T細胞與靶細胞K562-BCMA、RPMI 8226、MM1.S細胞(BCMA中 人類多發性骨髓瘤細胞株)或OPM2細胞(BCMA中 人類多發性骨髓瘤細胞株)靶細胞一起培育。如圖 4C 及圖 4D 中所示，經CO/SSE CAR構築體轉導之CAR表現性細胞展現溶胞活性比經相應未經修飾之構築體轉導的細胞更大。
B. 細胞介素釋放
在將各種抗BCMA CAR表現性細胞與抗原表現性靶細胞一起培育後，評定細胞介素釋放。
在5:1、2.5:1、1.25:1或0.6:1之E:T比率下，將BCMA表現性靶細胞K562/BCMA或RPMI 8226細胞與表現BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR或含參考結合域之抗BCMA CAR一起培育。作為對照物，將靶細胞與不表現CAR之T細胞(假擬對照物)一起培育。將經共同培養之細胞培育約24小時，且隨後收集上清液用於使用多重細胞介素免疫分析來量測IFN-γ、TNF-α及IL-2。如圖 5A 中所示，所測試之抗BCMA CAR表現性T細胞在抗原刺激後產生細胞介素。
為了評定經由未經修飾之CAR構築體或經最佳化之CAR構築體編碼之相同CAR工程改造之T細胞的抗原依賴性細胞介素產生，使用含有未經修飾之聚核苷酸構築體(BCMA-52-LS CAR及BCMA-55-LS CAR)或經最佳化之聚核苷酸構築體(BCMA-52-LS-O/SSE CAR及BCMA-55-LS-O/SSE CAR)的病毒載體對T細胞進行工程改造以表現抗BCMA CAR。在3:1、1.5:1、0.75:1及0.375:1之E:T比率下，將CAR表現性T細胞與靶細胞K562/BCMA、RPMI 8226細胞、MM1S (BCMA中 人類多發性骨髓瘤細胞株)或OPM2細胞(BCMA中 人類多發性骨髓瘤細胞株)靶細胞一起培育。如上文所描述來評定細胞介素IFN-γ、TNF-α及IL-2之產生。如圖 5B 中所示，觀測到使用O/SSE最佳化之構築體轉導的CAR表現性細胞展現細胞介素產生比經相應未經修飾之(起始)構築體轉導的細胞更高。
C. 響應於在其表面上表現不同抗原量之標靶的溶胞活性、細胞介素釋放及增殖
在將 BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞與表現不同BCMA量之BCMA表現性細胞一起培育後，評定溶胞活性、細胞介素釋放及增殖。在存在或不存在可溶性BCMA的情況下評估所有活性。
用CD3/CD28珠粒對自兩個人類供體(D#1及D#2)採集的1:1比率之CD4+及CD8+初代T細胞進行刺激，且用慢病毒載體轉導以穩定表現BMCA-55 CAR。在BCMA表現性靶細胞存在下，在1:3、1:1或3:1之E:T比率下培養經轉導之細胞。亦將來自相同供體的經假擬處理之T細胞與靶細胞混合以用作對照物。BCMA+靶細胞Daudi、RPMI-8226及K562-BCMA細胞展現表面不同量之BCMA抗原密度(抗原密度：Daudi (＜1000個BCMA分子/細胞) ＜ RPMI-8226 ＜ K562-BCMA)，且在與T細胞一起培育之前用羧基螢光素丁二醯亞胺基酯(CFSE)進行染色。在具有T細胞及BCMA+靶細胞之培養物中亦包括相等數目之標靶陰性細胞，其不表現BCMA且經cell trace紫(cell trace violet，CTV)染色。在24小時培育之後，藉由流式細胞量測術來量測剩餘BCMA+對比BCMA-靶細胞，且評定靶細胞溶解之程度，其指示細胞毒性。
當與靶細胞一起培養時，不論BCMA表現量如何，BCMA-55-LS-O/SSE CAR T細胞均顯示類似溶胞活性(圖 6 )。另外，對於表現大於100,000個分子/細胞之靶細胞(NCI-H929)，觀測到類似結果。經假擬處理之T細胞不展示針對任一BCMA+靶細胞株之活性。對BCMA表現呈陰性之靶細胞不由來自所測試之任一供體的BCMA-55-LS-O/SSE CAR T細胞溶解(資料未示)。
在培育後，分析上清液之積聚IFN-γ、TNF-α及IL-2細胞介素。資料與以下結論一致：BCMA-55-LS-O/SSE CAR T細胞在與BCMA表現性靶細胞接合時釋放一系列細胞介素；其中所釋放細胞介素之量一般與抗原量增加(亦即，Daudi ＜ RPMI 8226 ＜ K562-BCMA)對應。IFN-γ之結果展示於圖7中；對TNF-α及IL-2觀測到類似資料(資料未示)。BCMA-55-LS CAR O/SSE T細胞不響應於BCMA陰性標靶而釋放細胞介素，其亦不在不存在任何靶細胞的情況下表現細胞介素，展現對BCMA+靶細胞之特異性及缺乏滋養型信號傳導。
評定BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞在存在可溶性BCMA對比不存在可溶性BCMA的情況下之活性。將BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞與RPMI-8226腫瘤細胞、與重組BCMA-Fc或與來源於NCI-H929多發性骨髓瘤細胞之細胞培養物上清液(BCMA分泌性細胞株，上清液含有可溶性BCMA)一起共同培養。觀測到腫瘤細胞溶解及細胞介素產生均不受NCI-H929源性BCMA之任一濃度(高達1000 ng/mL)影響。在類似地生理學高量之重組BCMA下，腫瘤細胞溶解及細胞介素產生僅極小地減少。
在BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞及經假擬處理之T細胞中量測響應於BCMA之增殖。用cell trace紫(CTV)標記經轉導之T細胞，且在BCMA陽性靶細胞、BCMA陰性靶細胞或無細胞存在下，在1:1之效應細胞與靶細胞(E:T)比率下培養72小時。藉由流式細胞量測術來量測增殖。僅對BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞觀測到響應於與BCMA陽性靶細胞一起培育而進行T細胞(CD4+及CD8+ T細胞)增殖。
D. 自健康供體及骨髓瘤患者採集的經轉導之T細胞
在與BCMA+及BCMA- K562靶細胞一起培育24小時後，將自多發性骨髓瘤患者採集的經工程改造以表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之T細胞與來源於健康人類供體之彼等T細胞相比。不表現CAR之T細胞亦評估為陰性對照物。與表現來源於健康人類供體之CAR的細胞相比，來源於多發性骨髓瘤患者之CAR T細胞展現類似表現、擴增及抗原特異活性。
實例8: 具有不同間隔子之抗BCMA CAR
產生編碼抗BCMA CAR之聚核苷酸構築體，該等抗BCMA CAR在所編碼CAR多肽之scFv及跨膜區段之間含有不同間隔子區。具體言之，產生含有以下之CAR：(1)來源於IgG鉸鏈區之間隔子(例如，BCMA-5-SS、BCMA-9-SS、BCMA-18-SS、BCMA-23-SS、BCMA-25-SS、BCMA-26-SS、BCMA-52-SS、BCMA-55-SS及參考物1 (VH/VL)-SS)；或(2)來源於CD28之胞外域的短間隔子(例如BCMA-52-SCD28及BCMA-55-SCD28)。將表現含此類間隔子之CAR的T細胞與用編碼含有如實例3中所描述間隔子(例如BCMA-1-LS、BCMA-5-LS、BCMA-9-LS、BCMA-18-LS、BCMA-23-LS、BCMA-25-LS、BCMA-26-LS、BCMA-27-LS、BCMA-52-LS、BCMA-55-LS及參考物1 (VH/VL)-LS)之例示性CAR之聚核苷酸構築體轉導的T細胞相比。
藉由監測在1.25:1及0.65:1之效應細胞與靶細胞(E:T)比率下與CAR表現性T細胞一起培養之OPM2人類多發性骨髓瘤靶細胞的溶解來評定CAR表現性細胞之溶胞活性。不表現CAR之細胞(假擬物)用作陰性對照物。如實例7中所描述來評定溶胞活性。對於所評定之大部分CAR表現性細胞，與經含有較短間隔子之CAR工程改造的細胞相比，經工程改造以表現含有CH 2-CH 3-鉸鏈間隔子之CAR的細胞的靶細胞溶解更大(圖 8 )。
實例9: 評定藥劑對抗BCMA CAR活性之阻斷活性
在與BCMA表現性靶細胞及可溶性BCMA或其他蛋白質一起培育後，評定抗BCMA CAR表現性細胞之功能。基本上如實例7中所描述來評定溶胞活性及細胞介素產生。
A. 溶胞活性 1. 可溶性重組BCMA (rBCMA) - OPM2靶細胞
在可溶性BCMA-Fc以0、0.3、3、30或300 ng/mL存在下，在5:1之E:T比率下，將抗BCMA CAR表現性T細胞BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR或含結合域之參考CAR與OPM2靶細胞一起培育。如圖 9A 中所示，在3 ng/mL或超過3 ng/mL BCMA-Fc存在下，表現含結合域之參考CAR或BCMA-52-LS CAR之T細胞的溶胞活性顯著減小，然而，表現BCMA-55-LS CAR之細胞的溶胞活性不受存在高達300 ng/mL BCMA-Fc阻斷。
在另一個實驗中，在可溶性BCMA-Fc以0、7.8、15.6、31.3、62.5、125、250、500及1000 ng/mL之濃度存在下，在5:1之E:T比率下，將抗BCMA CAR表現性T細胞(BCMA-1-LS CAR、BCMA-9-LS CAR、BCMA-23-LS CAR、BCMA-25-LS CAR、BCMA-26-LS CAR、BCMA-55-LS CAR及參考物1 (VH/VL)-LS CAR)與OPM2靶細胞一起培育。如圖9B 中所示，表現BCMA-55-CAR之細胞的溶胞活性不受存在所測試任一濃度之BCMA-Fc阻斷；然而，存在可變濃度之BCMA-Fc以不同程度阻斷表現其他抗BCMA CAR之細胞的活性。
2. 多發性骨髓瘤細胞株(H929)上清液 - OPM2靶細胞
在0、111、333及1000 ng/mL來自H929多發性骨髓瘤細胞株之培養物上清液存在下，在5:1之E:T比率下，將經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE)抗BCMA CAR表現性T細胞BCMA-52-LS-O/SSE CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR或含結合域之參考CAR與OPM2靶細胞一起培育。藉由ELISA對來自H929上清液之可溶性BCMA的濃度進行量化。如圖 10A 中所示，表現BCMA-52-LS-O/SSE CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR或參考CAR之細胞的溶胞活性不受存在H929上清液阻斷。
3. 可溶性重組BCMA (rBCMA)及H929上清液 - RPMI-8226靶細胞
在另一研究中，在0、111、333及1000 ng/mL來自H929多發性骨髓瘤細胞株之培養物上清液的可溶性BCMA(藉由ELISA定量之可溶性BCMA)或BCMA-Fc存在下，在3:1之E:T比率下將經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE) BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞與RPMI-8226腫瘤靶細胞一起培育。表現BCMA-52-LS-O/SSE CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR或參考CAR之細胞的溶胞活性不受存在H929上清液阻斷。
4. B細胞活化因子(BAFF)
在0、1、10、100及1000 ng/mL重組B細胞活化因子(BAFF) (一種BCMA配位體)存在下，在5:1之E:T比率下將經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE)抗BCMA CAR表現性T細胞BCMA-52-LS-O/SSE CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR或參考CAR與OPM2靶細胞一起培育。如圖10B 中所示，表現BCMA-52-LS-O/SSE CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR或參考CAR之T細胞的溶胞活性不受存在BAFF阻斷。
B. 細胞介素釋放 1. BCMA-Fc
在可溶性BCMA-Fc以0、111、333及1000 ng/mL存在下，在5:1之E:T比率下將抗BCMA CAR表現性T細胞BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR或參考-LS CAR與OPM2靶細胞一起培育。亦評定不表現CAR之T細胞(假擬物)。評定IFN-γ、TNF-α及IL-2在上清液中之細胞介素積聚。如圖11A 中所示，在111 ng/mL或超過111 ng/mL BCMA-Fc存在下，含有表現參考CAR或BCMA-52-CAR之T細胞的培養物中之細胞介素積聚顯著減少，然而在可溶性BCMA-Fc以所測試之所有濃度存在下，在含有表現BCMA-55-CAR之T細胞的培養物中觀測到細胞介素積聚減少較小。
2. 多發性骨髓瘤細胞株(H929)上清液
在0、111、333及1000 ng/mL來自多發性骨髓瘤細胞株H929之培養物上清液存在下，在5:1之E:T比率下將抗BCMA CAR表現性T細胞BCMA-52-LS CAR、BCMA-55-LS CAR或參考-LS CAR與OPM2靶細胞一起培育。含有表現BCMA-52-CAR、BCMA-55-CAR或參考CAR之T細胞的培養物中之細胞介素積聚不受存在H929上清液阻斷(圖 11B )。
實例10: 抗BCMA CAR表現性T細胞在活體內授受性轉移之後的抗腫瘤作用
藉由在將細胞授受性轉移於攜有腫瘤之動物模型(包括OPM2人類多發性骨髓瘤異種移植物小鼠模型(正位骨髓模型)及RPMI 8226人類多發性骨髓瘤異種移植物小鼠模型(皮下植入物模型))中後監測腫瘤來評定例示性經工程改造之抗BCMA CAR表現性初代人類T細胞的抗腫瘤作用。
A. OPM2 (正位/骨髓)模型
用2 × 106 個經螢火蟲螢光素酶轉染之OPM2 (多發性骨髓瘤)細胞(OPM2-ffluc)對NOD.Cg.Prkdcscid IL2rgtm1Wjl / SzJ (NSG)小鼠進行靜脈內(i.v.)注射。在腫瘤移植後第14天，小鼠接受單次靜脈內(i.v.)注射表現經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE) BCMA-23-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-LS-O/SSE CAR的抗BCMA CAR T細胞。抗BCMA CAR表現性T細胞以每隻小鼠1 × 106 個(低劑量，n=8)或3 × 106 個(高劑量，n=8) CAR表現性T細胞之劑量進行投與，且對來源於兩個不同供體之CAR表現性T細胞重複各條件。作為對照物，向小鼠投與不表現CAR之細胞(假擬物，n=8)或不對小鼠進行處理(n=3)。歷經90天評定存活率及腫瘤負荷。
藉由在CAR-T細胞投藥後每3至6天進行生物發光成像來監測授受性轉移之CAR表現性(CAR-T)細胞的抗腫瘤活性持續研究時長。對於生物發光成像，小鼠接受腹膜內(i.p.)注射再懸浮於PBS中之螢光素受質(CaliperLife Sciences, Hopkinton, MA) (15 µg /g體重)。使小鼠麻醉且基本上如WO2015/095895中所描述進行成像。在各時間點測定總通量(光子/秒)。對於經陰性對照物處理之小鼠，歸因於高腫瘤負荷，在CAR-T細胞投藥之後19與23天之間殺死動物。來自一個供體源性CAR表現性T細胞之代表性結果展示於圖 12A 中。
如圖 12A 中所示，對於所有經處理之小鼠，接受經假擬處理之T細胞或未接受T細胞之小鼠中的腫瘤在研究時程內繼續生長。與對照小鼠相比，觀測到接受經工程改造以表現BCMA-23-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-LS-O/SSE CAR之T細胞之授受性轉移的小鼠的生物發光信號程度較低，指示在經處理之動物中，腫瘤生長隨時間減輕及/或腫瘤生長程度較低。對於所測試之例示性抗BCMA CAR，在使用較高劑量之抗BCMA CAR表現性細胞的情況下，對腫瘤生長之影響較大。
評定且比較如上文所描述進行處理之小鼠的存活率，直至CAR表現性T細胞灌注後第79天為止。來自一個供體之卡普蘭-邁耶方法(Kaplan-Meier method)代表性存活曲線(GraphPad Prism 7.0, GraphPad Software, La Jolla)展示於圖 12B 中。如圖所示，與不未接受處理或接受經假擬處理之T細胞的小鼠相比，低及高劑量的所測試之抗BCMA CAR T細胞引起更大存活百分比。亦評定小鼠中與腫瘤負荷相關聯之臨床徵象的呈現，包括後肢麻痹(HLP)、大於20%體重損失(＞20% BWL)及移植物抗宿主病(GvHD)。具有此等臨床徵象之小鼠的數目與未接受處理或治療假擬T細胞之小鼠相比減少。
B. RPMI-8226 (皮下)模型
用RPMI 8226 (周邊血液漿細胞瘤)細胞對NOD.Cg.PrkdcscidIL2rgtm1Wjl/SzJ (NSG)小鼠進行皮下注射。在第27天，基於最小平均腫瘤體積大致130 mm3 ，將小鼠隨機分入各組。在第29天，小鼠以1 × 106 個(低劑量，n=8)或3 × 106 個(高劑量，n=8)CAR表現性T細胞之劑量接受單次靜脈內(i.v.)注射表現經最佳化及剪接位點消除之(O/SSE) BCMA-23-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-LS-O/SSE CAR的初代人類T細胞(CD4+及CD8+)。對來源於兩個不同供體之CAR表現性T細胞重複各條件。投與經假擬處理之細胞的小鼠及未經處理之小鼠用作陰性對照物。藉由測徑規每週兩次量測腫瘤體積直至CAR T細胞轉移後第152天，且當瀕死時、20%體重損失時或當腫瘤體積超出1500 mm3 時進行安樂死。使用卡普蘭-邁耶方法繪製存活曲線直至CAR T細胞轉移後第108天(GraphPad Prism 7.0, GraphPad)。
來源於一個供體之CAR表現性T細胞的腫瘤生長及存活率之代表性結果分別展示於圖 13A 及13B 中。如圖 13A 中所示，在授受性轉移陰性對照細胞後或在未接受處理之小鼠中，腫瘤在研究時程內繼續生長。與對照小鼠相比，接受經工程改造以表現BCMA-23-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-LS-O/SSE CAR之T細胞之授受性轉移的小鼠展示，在接受低或高劑量之CAR表現性T細胞之後，腫瘤體積顯著減小(圖 13A )。在此模型中，投與兩種所測試劑量之抗BCMA CAR T細胞的小鼠展現在CAR T細胞轉移後20天為止腫瘤生長完全消退，其持續圖 13A 中所示之整個研究評定持續時間。
投與抗BCMA CAR表現性T細胞之小鼠的存活百分比亦顯著大於對照組(圖 13B )。在CAR T細胞輸注後108天時，在用高劑量之BCMA-26-LS-O/SSE CAR表現性T細胞處理之組中，在腫瘤消除後損失兩隻動物，但此很可能歸因於在此模型中之移植物抗宿主疾病(GVHD)症狀。所有其他經CAR-T細胞處理之小鼠在CAR T細胞投藥後保持存活高達108天。
在來自處理組之小鼠中監測血液中CAR+ T細胞之存在以評定CAR表現性T細胞之藥物動力學。將各處理組之8隻小鼠分成2組，每組4隻小鼠。在CAR-T細胞投藥後，每週藉由眼眶後採血來抽取血液，在2組之間進行交替以使得各小鼠每隔一週進行採血持續4週(亦即，在CAR-T細胞投藥後第7、14、21及28天時)。藉由流式細胞量測術分析所收集之血液的每微升血液中CAR表現性T細胞(如使用針對替代性標記物或可溶性BCMA-Fc之抗體所測定)及非CAR T細胞之數目(FlowJo software, Treestar Inc., Ashland, OR)。
對於一個供體，在第7、14、21及28天時每微升血液中CD4+及CD8+ T細胞之數目分別展示於圖 14A 及圖 14B 中，且對於第二供體，分別展示於圖 15A 及圖 15B 中。如圖所示，在高及低劑量組中，在CD4+及CD8+ T細胞中發生CAR-T擴增，其中對於兩個供體，均在CAR T細胞轉移後第14天觀測到最大或峰值擴增。在所評定之所有CAR-T細胞轉移後時間中，對於兩個供體均觀測到CD8+ CAR+ T細胞之數目比CD4+ CAR+ T細胞更大(比較圖 14A 及圖 14B 或圖 15A 及圖 15B )。與展現CAR表現彼此相當的表現BCMA-23-LS-O/SSE CAR及BCMA-26-LS-O/SSE CAR構築體之T細胞相比，經工程改造以表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之T細胞展現CAR表現更大。此等結果展現，可在腫瘤清除期間鑑別出BCMA-55-LS CAR表現性T細胞在血液中循環。
實例11: 在報導細胞株中評定Nur77-tdTomato報導體信號中經由抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)之信號
產生含有Nur77基因敲入報導體之例示性穩定Jurkat T細胞報導細胞株，其中在內源性Nur77基因座處經由同源性依賴性修復(HDR)敲入編碼該報導體分子之核酸序列。孤兒核激素受體Nur77 (亦稱為Nr4a1)為由來自T細胞受體之信號的活化誘導及/或經由含有基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)的分子誘導的立即早期反應基因。Nur77報導細胞株用於在經CAR工程改造之細胞中評定T細胞活化，此係由於Nur77為T淋巴球中之立即早期基因產物；轉錄在CD3ζ信號傳導之下游特異性起始，且不受細胞介素或TLR介導之信號影響。在Jurkat T細胞純系E6-1 (ATCC® TIB-152™)中，藉由使用基因編輯引入基因破壞及藉由同源性依賴性修復(HDR)靶向用於在基因破壞附近位點處整合之轉殖基因，編碼紅色螢光蛋白(RFP；諸如tdTomato螢光蛋白)之核酸序列成為與在終止密碼子之前且在「自身裂解」T2A元件(SEQ ID NO:686或687中所闡述之序列，編碼SEQ ID NO:631、653或654中所闡述之多肽序列)之後的最終外顯子處之內源性Nr4a1 (Nur77)基因同框整合的目標，以允許RFP作為Nur77表現之報導體共表現。Nur77-tdTomato報導細胞株經工程改造以表現各種抗BCMA嵌合抗原受體，且評定報導體表現。
將含有編碼實例3中所描述之以下抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)之聚核苷酸的病毒載體引入至Nur77-tdTomato報導Jurkat T細胞株中：BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR及BCMA-25-LS-O/SSE CAR。評估抗BCMA CAR表現性報導細胞在共同培養20小時之後，響應於培養盤結合之重組BCMA的量增加或響應於例示性多發性骨髓瘤細胞株的Nur77信號傳導活性。
A. 響應於培養盤結合之重組BCMA的Nur77信號傳導
將經編碼BCMA-55-LS-O/SSE CAR之病毒載體轉導的報導細胞在已經不同濃度(0.008 µg/mL、0.04 µg/mL、0.2 µg/mL、1 µg/mL及5 µg/mL)之BCMA-Fc (在其C端與IgG之Fc區融合的可溶性人類BCMA)融合多肽塗佈隔夜的96孔細胞培養盤中培育6小時。重組Fc多肽用作對照物(Fc對照物)。如圖 16A 中所示，在用重組抗原刺激抗BCMA CAR表現性報導細胞時，觀測到tdTomato表現之劑量依賴性增加。
在另一個研究中，將經工程改造以表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR及BCMA-25-LS-O/SSE CAR之報導細胞與BCMA-Fc之十(10)個2倍連續稀釋液一起培育。表現抗CD19 CAR之報導細胞用作非靶對照物。測定tdTomato表現性細胞在表現CAR之細胞群體內的百分比(如基於替代性標記物之表現而測定)。如圖 16B 中所示，在用重組抗原刺激時，觀測到tdTomato表現之劑量依賴性增加。使用表現針對非靶抗原之CAR的對照報導細胞，觀測到對於用BCMA-Fc刺激無反應。
B. 響應於多發性骨髓瘤細胞株之Nur77信號傳導
將經編碼BCMA-55-LS-O/SSE CAR之病毒載體轉導的報導細胞與NALM6、Daudi、RPMI-8226、MM1S、OPM2及H929細胞一起培育20小時。視對抗BCMA CAR表現性報導細胞進行刺激之細胞株而定，觀測到不同量之RFP表現。
為了評定用於刺激抗BCMA CAR表現性報導細胞之多發性骨髓瘤細胞株之表面上的BCMA表現量，用抗人類BCMA抗體(BioLegend, San Diego, CA)對該等細胞進行染色，在上LSRFortessa™流式細胞儀(BD Biosciences, San Jose, CA)上收集流式細胞量測事件，且用FlowJo軟體(Treestar Inc., Ashland, OR)來分析資料。藉由使用塗佈有相同抗人類BCMA抗體之Quantum™ Simply Cellular®抗小鼠IgG微球體珠粒來測定BCMA抗原密度(AD)。對微球體進行標記，且計算BCMA抗體結合力。結果確認偵測到在CAR表現性報導細胞中指示特定CAR活性之參數(可偵測之報導體的量)，當與各種不同BCMA表現性細胞中之每一者一起培育時，其展現一系列不同抗原密度，而當與標靶陰性細胞一起培育時不展現。RFP報導體信號之程度一般與表面BCMA之表現量相關。當與其中觀測到較低量之表面BCMA表現的細胞一起培育時，CAR表現性報導細胞展現較低水準的指示活性之報導體。同樣，與其中觀測到較高量之表面BCMA表現的細胞株一起培育的CAR表現性報導細胞展現較高水準的指示活性之報導體。因此，觀測到各種多發性骨髓瘤細胞株之表面上的BCMA表現密度與指示表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之報導細胞之抗原特異性活性的參數水準相關，指示表現該CAR之細胞可在一系列抗原密度內展現活性，且在一些態樣中，可展現活性隨著抗原水準增加而增加。
實例12: 在表現含有不同長度間隔子之抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)的報導細胞株中評定Nur77-tdTomato報導體信號
在與靶細胞一起共同培養之後測定報導體在經工程改造以表現含有相同抗原結合域但不同長度間隔子之抗BCMA CAR的細胞中的表現。如實例11中所描述而產生之Jurkat Nur77-tdTomato細胞經工程改造以表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR (含有來源於IgG4鉸鏈-CH 2-CH 3之較長間隔子，該間隔子闡述於SEQ ID NO:649中)或BCMA-55-SS CAR (含有來源於IgG4鉸鏈之較短間隔子，該間隔子闡述於SEQ ID NO:363中)。在各種E:T比率下將細胞與人類BCMA表現性K562靶細胞(BCMA-K562)靶細胞共同培養。表現靶向不同抗原之CAR(抗CD19 CAR)的報導細胞用作對照物。如圖 17 中所示，觀測到Nur77-tdTomato表現量在含有不同間隔子長度之抗BCMA CAR中不同，且觀測到對用表現BCMA之靶細胞刺激的劑量依賴性反應。
實例13: 評定來自不同抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)的與抗原無關之(滋養型)信號傳導
如上文實例11中所描述，用編碼抗CD19 CAR (對照物)、BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR或BCMA-25-LS-O/SSE CAR之病毒載體對Nur77-tdTomato報導細胞進行轉導，除了用於轉導之替代性標記物為超摺疊綠色螢光蛋白sfGFP。在此模型中，滋養型信號傳導由在不存在BCMA抗原刺激的情況下之tdTomato表現指示。
亦產生編碼含有不同抗BCMA scFv之抗BCMA CAR (指定為BCMA-52-LS-O/SSE CAR)的病毒載體，且將其轉導至報導細胞中。在不進行抗原刺激的情況下培育各種CAR表現性細胞持續3天以評定與抗原無關之(滋養型)信號傳導的程度，且藉由流式細胞量測術來評估其tdTomato表現。
如圖 18 中所示，在不存抗原刺激在的情況下，各種CAR表現性細胞株展現不同程度之tdTomato表現。在表現不同CAR之細胞中，tdTomato+細胞(指示滋養型報導體活化)在CAR表現性細胞(由GFP+細胞指示)當中的百分比在0.23%至19.3%間變化。
實例14: 評定來自含有不同細胞內域之抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)的與抗原無關之(滋養型)信號傳導
在表現含有不同細胞內信號傳導區之各種CAR的報導細胞中評定與抗原無關之(滋養型)信號傳導。用一般如實例11及13中所描述產生的編碼抗CD19 CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR或BCMA-52-LS-O/SSE CAR之病毒載體對Nur77-tdTomato報導細胞進行轉導，除了該等CAR含有來源於4-1BB或CD28之細胞內域且用於轉導之替代性標記物為截短之受體。在不進行抗原刺激的情況下培育各種CAR表現性細胞以評定與抗原無關之(滋養型)信號傳導的程度，且藉由流式細胞量測術來評估其tdTomato表現。
如圖 19A 及圖 19B 中所示，各種CAR中之4-1BB及CD28源性細胞內域引起不同水準之滋養型信號傳導，如由tdTomato+細胞在CAR+細胞當中之百分比(如基於替代性標記物之表現而測定)所指示。
實例15: 使用報導細胞株來評定抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)之抗原交叉反應性
採用經工程改造以表現對人類BCMA具特異性且如實例11中一般描述而產生之BCMA-55-LS-O/SSE CAR的Nur77-tdTomato細胞株來評定CAR之抗原結合域的交叉反應性。在2:1或5:1之E:T比率下，將表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之報導細胞株與表現人類BCMA (huBCMA)、鼠類BCMA (muBCMA)或食蟹獼猴BCMA (cynoBCMA)之K562人類骨髓性白血病細胞一起共同培養。藉由流式細胞量測術來測定tdTomato+細胞之百分比。
如圖20A 中所示，觀測到當在所測試之兩種E:T比率下與表現huBCMA之靶細胞一起培養時，超過90%之BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性細胞為tdTomato+。相比之下，當與表現muBCMA之靶細胞一起培養時，極少細胞為tdTomato+，指示極低交叉反應性。當與表現cynoBCMA之靶細胞一起培養時，大致10%至20%之細胞為tdTomato+，指示cynoBCMA之一些交叉反應性。
將表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之報導細胞株與塗佈在96孔平底培養盤上的濃度逐漸增加(0、0.1、0.25、1、2.5、10、25及100µg/mL)之huBCMA及cynoBCMA一起培育。測定CAR+細胞中tdTomato+細胞之百分比及tdTomato信號之平均螢光強度(MFI)。
如圖 20B 及20C 中所示，cynoBCMA在低濃度下不與BCMA-55-LS-O/SSE CAR交叉反應，但在高濃度下交叉反應。
實例16: 使用報導細胞株來評定抗BCMA嵌合抗原受體(CAR)之抗原特異性
藉由將Jurkat Nur77報導細胞響應於BCMA表現性MM1S靶細胞的活化與其響應於經工程改造以表現非BCMA蛋白質(其展示為實例5C中由BCMA-55-scFv Fc以低水準識別，亦即組織蛋白酶G (CTSG))之K562靶細胞的活化相比較來測試用於BCMA-55-LS -O/SSE CAR表現性細胞之活化的抗原特異性。作為陰性對照物，亦評定親本K542細胞。簡言之，在5:1、1:1及1:5之效應細胞:靶細胞比率下，將經編碼BCMA-55-LS-O/SSE CAR之病毒載體轉導的Nur77報導細胞與上文所列出之靶細胞一起培育24小時。結果展現BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性細胞由BCMA表現性MM1S細胞活化，但不由BCMA陰性靶細胞(親本細胞或表現非BCMA抗原(CTSG)之細胞)活化。
實例17: 確定用於BCMA-52及BCMA-55 scFv之結合抗原決定基
使用完全不連續之抗原決定基定位藉由肽與支架之化學鍵(Chemical Linkage of Peptides onto Scaffolds，CLIPS；Pepscan Presto BV, Lelystad, The Netherlands；參見例如Timmerman等人，(2007) J. Mol. Recognit. 20: 283-329)來評定由例示性抗BCMA scFv純系(BCMA-1、BCMA-5、BCMA-9、BCMA-23、BCMA-25、BCMA-26、BCMA-52及BCMA-55 抗BCMA scFv)識別(例如特異性結合)之抗原決定基。使用抗BCMA scFv純系，諸如與小鼠Fc融合之彼等純系(scFv-mFc)來進行定位。
基於組合矩陣設計來產生人類BCMA之胺基酸殘基1-54 (闡述為SEQ ID NO:367之胺基酸殘基1-54)的線性及構形肽文庫。在胺基官能化之固體載體上使用線性肽及結構模擬物(包括單個環、α-螺旋、β-轉角、組合及線性二硫橋鍵模擬物及不連續抗原決定基模擬物)以及陽性及陰性對照肽。
用於結合於抗原決定基文庫中之肽的親和力係使用ELISA來加以測定。將肽陣列與含有scFv之溶液一起在4℃下培育隔夜。在反覆篩選中使用親和力資訊以界定抗原決定基之序列及構形。產生關於兩個或超過兩個環之親和力資訊的熱度圖。
觀測到所評定之scFv識別包括BCMA肽序列之若干不連續肽片段的構形抗原決定基。觀測到BCMA-1、BCMA-5、BCMA-23及BCMA-25 scFv結合於30 SNTPPLTCQR39 (闡述於SEQ ID NO:379中)之肽，其可以線性形式識別。在一些態樣中，此類抗體識別包括SEQ ID NO:379之此類肽之殘基的非線性或線性抗原決定基，且在一些態樣中，識別進一步包括21 CIPCQLR27 (闡述於SEQ ID NO:375中)、30 SNTPPLTCQR39 及/或44 SVTNSVK50 (闡述於SEQ ID NO:393中)之殘基的非線性抗原決定基。觀測到BCMA-26 scFv識別包含存在於8 CSQNEYF14 (闡述於SEQ ID NO:410中)及17 LLHACIPCQLR27 (闡述於SEQ ID NO:428中)中之殘基的抗原決定基。觀測到BCMA-52-scFv-mFc結合於含有以下不連續肽之殘基的抗原決定基：10 QNEYF14 (SEQ ID NO:637)、21 CIPCQL26 (SEQ ID NO:638)及7 CQRYC41 (SEQ ID NO:639)。觀測到BCMA-55-scFv-mFc特異性結合於含有存在於包含BCMA多肽序列不連續部分之肽中之殘基的抗原決定基，該等不連續部分個別地包含以下序列：1 MLMAG6 (SEQ ID NO:640)、13 YFDSL17 (SEQ ID NO:779)及25 QLRCSSNTPPL35 (SEQ ID NO:642)。在一些實施例中，所提供之抗體或受體特異性結合於包含存在於具有以下序列之不連續肽中之一或多者(例如每一者)內之殘基的抗原決定基：MLMAG (SEQ ID NO:640)、YFDSL (SEQ ID NO:779)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)。在一些態樣中，所提供之抗體或受體特異性結合於包含存在於具有以下序列之以下不連續肽中之一或多者(例如每一者)內之殘基的抗原決定基：MLMAG (SEQ ID NO:640)、YFDSLL (SEQ ID NO:641)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)；在一些態樣中，所提供之抗體或受體特異性結合於包含存在於具有以下序列之以下不連續肽中之一或多者(例如每一者)內之殘基的抗原決定基：MLMAG (SEQ ID NO:640)、QNEYFDSLL (SEQ ID NO:780)及QLRCSSNTPPL (SEQ ID NO:642)。
本發明不欲將範疇限制於特定揭示之實施例，提供該等實施例以例如說明本發明之各種態樣。對所描述之組合物及方法的各種修改將由本文中之描述及教示而變得顯而易見。此類變化形式可在不背離本發明之真正範疇及精神的情況下加以實踐且意欲屬於本發明之範疇內。
序列
SEQ ID NO 序列 描述
1 DYAMS BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H1 (aa) Kabat編號
2 DYYMS BCMA-2、-9、-10、-12、-17、-21、-22、-23、-24、-26、-32、-33、-35、-36、-37、-38、-40、-41、-47、-48、-49 CDR-H1 (aa) Kabat編號
3 DYAMH BCMA-11、-20、-27、-28、-29、-30、-34、-39 CDR-H1 (aa) Kabat編號
4 FIRSKAYGGTTEYAASVKG BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H2 (aa) Kabat編號
5 YISSSGSTIYYADSVKG BCMA-2、-9、-10、-12、-17、-21、-22、-23、-26、-32、-35、-36、-37、-38、-40、-47、-48、-49 CDR-H2 (aa) Kabat編號
6 GISWNSGSIGYADSVKG BCMA-11、-20、-24、-27、-29、-30、-34、-39 CDR-H2 (aa) Kabat編號
7 WSAPTDY BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51及VH-2 CDR-H3 (aa)
8 VDGPPSSDI BCMA-2 CDR-H3 (aa)
9 VDGDYVDDY BCMA-9、-36、-37、-38、-41及VH-8 CDR-H3 (aa)
10 VDGPPSFDI BCMA-10、-12、-26、-32、-47、-48、-49及VH-1 CDR-H3 (aa)
11 DLGPDYDPDAFDI BCMA-11、-34 CDR-H3 (aa)
12 GFTFGDY BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-30、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H1 (aa) Chothia編號
13 GFTFSDY BCMA-2、-9、-12、-17、-21、-22、-23、-24、-26、-32、-33、-35、-36、-37、-38、-40、-41、-47、-48、-49 CDR-H1 (aa) Chothia編號
14 GFPFSDY BCMA-10 CDR-H1 (aa) Chothia編號
15 GFTFDDY BCMA-11、-20、-27、-28、-29、-34、-39 CDR-H1 (aa) Chothia編號
16 RSKAYGGT BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H2 (aa) Chothia編號
17 SSSGST BCMA-2、-9、-10、-12、-17、-21、-22、-23、-26、-32、-35、-36、-37、-38、-40、-47、-48 CDR-H2 (aa) Chothia編號
18 SWNSGS BCMA-11、-20、-24、-27、-29、-30、-34、-39 CDR-H2 (aa) Chothia編號
19 GFTFGDYAMS BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H1 (aa) AbM編號
20 GFTFSDYYMS BCMA-2、-9、-12、-17、-21、-22、-23、-24、-26、-32、-33、-35、-36、-37、-38、-40、-41、-47、-48、-49 CDR-H1 (aa) AbM編號
21 GFPFSDYYMS BCMA-10 CDR-H1 (aa) AbM編號
22 GFTFDDYAMH BCMA-11、-20、-27、-28、-29、-34、-39 CDR-H1 (aa) AbM編號
23 FIRSKAYGGTTE BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 CDR-H2 (aa) AbM編號
24 YISSSGSTIY BCMA-2、-9、-10、-12、-17、-21、-22、-23、-26、-32、-35、-36、-37、-38、-40、-47、-48、-49 CDR-H2 (aa) AbM編號
25 GISWNSGSIG BCMA-11、-20、-24、-27、-29、-30、-34、-39 CDR-H2 (aa) AbM編號
26 KSSQSVLSTSNNKNYLA BCMA-1 CDR-L1 (aa)
27 RASQSIKTNLA BCMA-2 CDR-L1 (aa)
28 KSSQSVLHSSNNKNYLA BCMA-3、-46 CDR-L1 (aa)
29 RASQDIRNSLA BCMA-4 CDR-L1 (aa)
30 KSSQSVLYSSNNKNYLA BCMA-5、-8、-24 CDR-L1 (aa)
31 RASQSISNSLA BCMA-6 CDR-L1 (aa)
32 RASQDIGDYLA BCMA-7 CDR-L1 (aa)
33 GANNIGSKSVH BCMA-9、-26、-35 CDR-L1 (aa)
34 GGNNIERKNVH BCMA-10 CDR-L1 (aa)
35 SGSSSNIGSNAVN BCMA-11 CDR-L1 (aa)
36 SGSRSNIGNNYVS BCMA-12 CDR-L1 (aa)
37 WASTREA BCMA-1 CDR-L2 (aa)
38 AASTRAT BCMA-2 CDR-L2 (aa)
39 WASTRES BCMA-3、-5、-8、-31、-44、-46 CDR-L2 (aa)
40 AASRLES BCMA-4、-42 CDR-L2 (aa)
41 AASNVED BCMA-6 CDR-L2 (aa)
42 VASTLQS BCMA-7 CDR-L2 (aa)
43 DDDDRPS BCMA-9、-26、-35 CDR-L2 (aa)
44 DDSDRAS BCMA-10 CDR-L2 (aa)
45 NSHQRPS BCMA-11 CDR-L2 (aa)
46 DNAKRPS BCMA-12 CDR-L2 (aa)
47 QQYFSSPYT BCMA-1 CDR-L3 (aa)
48 QQYGSSPT BCMA-2 CDR-L3 (aa)
49 QQYYTTPLT BCMA-3、-46 CDR-L3 (aa)
50 QQYYSLPLS BCMA-4 CDR-L3 (aa)
51 QQYYSTPWT BCMA-5 CDR-L3 (aa)
52 QQSHMYPPT BCMA-6 CDR-L3 (aa)
53 QQYHSHPWT BCMA-7 CDR-L3 (aa)
54 QQYYSTPYT BCMA-8、-31 CDR-L3 (aa)
55 HVWDRSRDHYV BCMA-9 CDR-L3 (aa)
56 QAWDSSSTLYV BCMA-10 CDR-L3 (aa)
57 AAWDDSLRGYV BCMA-11 CDR-L3 (aa)
58 QVWDSSSDHWV BCMA-12、-32、-48 CDR-L3 (aa)
59 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFG BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-45、-46 VH FR1 (aa)
60 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-2、-12、-22、-23、-26、-40、-48 VH FR1 (aa)
61 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-9、-24、-35、-37 VH FR1 (aa)
62 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFPFS BCMA-10 VH FR1 (aa)
63 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFD BCMA-11、-28、-29、-39 VH FR1 (aa)
64 WFRQAPGKGLEWVG BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 VH FR2 (aa)
65 WIRQAPGKGLEWVS BCMA-2、-9、-10、-12、-21、-22、-23、-24、-26、-32、-33、-35、-36、-37、-38、-40、-41、-47、-48、-49 VH FR2 (aa)
66 WVRRAPGKGLEWVS BCMA-11 VH FR2 (aa)
67 RFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAA BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-25、-31、-42、-44、-45、-46、-51 VH FR3 (aa)
68 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAK BCMA-2、-10、-12、-21、-22、-23、-26、-32、-40、-41、-48、-49 VH FR3 (aa)
69 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR BCMA-9、-11、-17、-24、-28、-29、-30、-33、-34、-35、-36、-38、-39 VH FR3 (aa)
70 WGQGTLVTVSS BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-9、-15、-16、-18、-20、-21、-22、-23、-25、-27、-31、-35、-36、-37、-38、-40、-41、-42、-44、-45、-46、-51 VH FR4 (aa)
71 WGQGTMVTVSS BCMA-2、-10、-11、-12、-24、-26、-29、-30、-32、-34、-39、-48、-49、-50 VH FR4 (aa)
72 DIVMTQSPDSLSVSPGERATISC BCMA-1 VL FR1 (aa)
73 EIVMTQSPATLSVSPGETATLSC BCMA-2 VL FR1 (aa)
74 DIVMTQSPDSLVVSLGERATINC BCMA-3、-46 VL FR1 (aa)
75 AIRMTQSPSSLSASLGDRVTITC BCMA-4 VL FR1 (aa)
76 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC BCMA-5、-8、-24 VL FR1 (aa)
77 DIVMTQSPSSLSVSVGERVTITC BCMA-6 VL FR1 (aa)
78 VIQLTQSPSSLSASVGDRVTITC BCMA-7 VL FR1 (aa)
79 SYELTQPPSVSVAPGQTARVTC BCMA-9 VL FR1 (aa)
80 SYVLTQPPSVSVAPGQTARITC BCMA-10、-26 VL FR1 (aa)
81 QLVLTQPPSASGTPGQRVTISC BCMA-11 VL FR1 (aa)
82 QSALTQPPSVSAAPGQKVTISC BCMA-12 VL FR1 (aa)
83 WYQQKPGQPPRLLLY BCMA-1 VL FR2 (aa)
84 WYQQKPGQAPRLLIY BCMA-2、-34 VL FR2 (aa)
85 WYQQKPGQPPKLLIY BCMA-3、-5、-8、-24、-44、-46 VL FR2 (aa)
86 WYQQRPGKAPKLLLS BCMA-4 VL FR2 (aa)
87 WYKQRPGEAPKLLIH BCMA-6 VL FR2 (aa)
88 WFQQRPGKAPKSLIY BCMA-7 VL FR2 (aa)
89 WYQQKPGQAPMLVVY BCMA-9、-26、-35 VL FR2 (aa)
90 WYQQKPGQAPVPVVY BCMA-10 VL FR2 (aa)
91 WYQQLPGTAPEVLIY BCMA-11 VL FR2 (aa)
92 WYQQLPGTAPKLLIY BCMA-12 VL FR2 (aa)
93 GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC BCMA-1、-3、-5、-8、-31、-44、-46 VL FR3 (aa)
94 GIPDRFSGSGSGTDFTLTITRLEPEDFAVYYC BCMA-2 VL FR3 (aa)
95 GVPSRFSGTTSGAEYALSISSLQPEDVASYFC BCMA-4 VL FR3 (aa)
96 GVPSRFSGRGSGTVFTLAISNVQPEDFATYYC BCMA-6 VL FR3 (aa)
97 GVPSRFSGSGSGTHFTLTINSLQPEDFATYYC BCMA-7 VL FR3 (aa)
98 GIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFC BCMA-9、-26、-35 VL FR3 (aa)
99 GIPERFSASNSGNTATLTISGAQATDEAEYYC BCMA-10 VL FR3 (aa)
100 GVPDRFSGSKSGTSASLAINGLQSEDEADYYC BCMA-11 VL FR3 (aa)
101 GIPDRFSGSKSGTSATLDIAGLQTGDEADYYC BCMA-12 VL FR3 (aa)
102 FGHGTKLEIK BCMA-1 VL FR4 (aa)
103 FGRGTKLEIK BCMA-2、-39 VL FR4 (aa)
104 FGGGTKVEIK BCMA-3、-4、-6、-30、-46 VL FR4 (aa)
105 FGQGTKVDIK BCMA-5、-45 VL FR4 (aa)
106 FGPGTKVDIK BCMA-7 VL FR4 (aa)
107 FGQGTKLEIK BCMA-8、-44 VL FR4 (aa)
108 FGTGTKLTVL BCMA-9、-10、-11、-26、-40、-47 VL FR4 (aa)
109 FGGGTKLTVL BCMA-12、-14、-15、-16、-17、-18、-32、-33、-36、-37、-38、-41、-48、-49、-50 VL FR4 (aa)
110 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSS BCMA-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-45、-46 VH鏈(aa)
111 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSSDIWGQGTMVTVSS BCMA-2 VH 鏈(aa)
112 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSS BCMA-9 VH 鏈(aa)
113 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFPFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSS BCMA-10 VH 鏈(aa)
114 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRRAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPDYDPDAFDIWGQGTMVTVSS BCMA-11 VH 鏈(aa)
115 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSS BCMA-12、-26、-48 VH 鏈(aa)
116 DIVMTQSPDSLSVSPGERATISCKSSQSVLSTSNNKNYLAWYQQKPGQPPRLLLYWASTREAGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYFSSPYTFGHGTKLEIK BCMA-1 VL 鏈(aa)
117 EIVMTQSPATLSVSPGETATLSCRASQSIKTNLAWYQQKPGQAPRLLIYAASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTITRLEPEDFAVYYCQQYGSSPTFGRGTKLEIK BCMA-2 VL 鏈(aa)
118 DIVMTQSPDSLVVSLGERATINCKSSQSVLHSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTTPLTFGGGTKVEIK BCMA-3、-46 VL鏈(aa)
119 AIRMTQSPSSLSASLGDRVTITCRASQDIRNSLAWYQQRPGKAPKLLLSAASRLESGVPSRFSGTTSGAEYALSISSLQPEDVASYFCQQYYSLPLSFGGGTKVEIK BCMA-4 VL 鏈(aa)
120 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPWTFGQGTKVDIK BCMA-5 VL 鏈(aa)
121 DIVMTQSPSSLSVSVGERVTITCRASQSISNSLAWYKQRPGEAPKLLIHAASNVEDGVPSRFSGRGSGTVFTLAISNVQPEDFATYYCQQSHMYPPTFGGGTKVEIK BCMA-6 VL 鏈(aa)
122 VIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIGDYLAWFQQRPGKAPKSLIYVASTLQSGVPSRFSGSGSGTHFTLTINSLQPEDFATYYCQQYHSHPWTFGPGTKVDIK BCMA-7 VL 鏈(aa)
123 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPYTFGQGTKLEIK BCMA-8 VL 鏈(aa)
124 SYELTQPPSVSVAPGQTARVTCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHVWDRSRDHYVFGTGTKLTVL BCMA-9 VL 鏈(aa)
125 SYVLTQPPSVSVAPGQTARITCGGNNIERKNVHWYQQKPGQAPVPVVYDDSDRASGIPERFSASNSGNTATLTISGAQATDEAEYYCQAWDSSSTLYVFGTGTKLTVL BCMA-10 VL 鏈(aa)
126 QLVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNAVNWYQQLPGTAPEVLIYNSHQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAINGLQSEDEADYYCAAWDDSLRGYVFGTGTKLTVL BCMA-11 VL 鏈(aa)
127 QSALTQPPSVSAAPGQKVTISCSGSRSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNAKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLDIAGLQTGDEADYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-12 VL 鏈(aa)
128 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLSVSPGERATISCKSSQSVLSTSNNKNYLAWYQQKPGQPPRLLLYWASTREAGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYFSSPYTFGHGTKLEIK BCMA-1 scFv (aa)
129 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSSDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSVSPGETATLSCRASQSIKTNLAWYQQKPGQAPRLLIYAASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTITRLEPEDFAVYYCQQYGSSPTFGRGTKLEIK BCMA-2 scFv (aa)
130 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLVVSLGERATINCKSSQSVLHSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTTPLTFGGGTKVEIK BCMA-3、46 scFv (aa)
131 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPSSLSASLGDRVTITCRASQDIRNSLAWYQQRPGKAPKLLLSAASRLESGVPSRFSGTTSGAEYALSISSLQPEDVASYFCQQYYSLPLSFGGGTKVEIK BCMA-4 scFv (aa)
132 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPWTFGQGTKVDIK BCMA-5 scFv (aa)
133 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPSSLSVSVGERVTITCRASQSISNSLAWYKQRPGEAPKLLIHAASNVEDGVPSRFSGRGSGTVFTLAISNVQPEDFATYYCQQSHMYPPTFGGGTKVEIK BCMA-6 scFv (aa)
134 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSVIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIGDYLAWFQQRPGKAPKSLIYVASTLQSGVPSRFSGSGSGTHFTLTINSLQPEDFATYYCQQYHSHPWTFGPGTKVDIK BCMA-7 scFv (aa)
135 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPYTFGQGTKLEIK BCMA-8 scFv (aa)
136 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSSYELTQPPSVSVAPGQTARVTCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHVWDRSRDHYVFGTGTKLTVL BCMA-9 scFv (aa)
137 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFPFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSSYVLTQPPSVSVAPGQTARITCGGNNIERKNVHWYQQKPGQAPVPVVYDDSDRASGIPERFSASNSGNTATLTISGAQATDEAEYYCQAWDSSSTLYVFGTGTKLTVL BCMA-10 scFv (aa)
138 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRRAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPDYDPDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQLVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNAVNWYQQLPGTAPEVLIYNSHQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAINGLQSEDEADYYCAAWDDSLRGYVFGTGTKLTVL BCMA-11 scFv (aa)
139 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPPSVSAAPGQKVTISCSGSRSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNAKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLDIAGLQTGDEADYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-12 scFv (aa)
140 SYAMH BCMA-13 CDR-H1 (aa) Kabat編號
141 SYGMH BCMA-14、-15 CDR-H1 (aa) Kabat編號
142 SSAMQ BCMA-16 CDR-H1 (aa) Kabat編號
143 SYWMS BCMA-18 CDR-H1 (aa) Kabat編號
144 SYYMH BCMA-19 CDR-H1 (aa) Kabat編號
145 VISYDGSNKYYADSVKG BCMA-13、-14、-15 CDR-H2 (aa) Kabat編號
146 WIVVGSGNTNYAQKFQE BCMA-16 CDR-H2 (aa) Kabat編號
147 HINQDGSEKYYVDSVKG BCMA-18 CDR-H2 (aa) Kabat編號
148 WINPNSGGTNYAQKFQG BCMA-19 CDR-H2 (aa) Kabat編號
149 LPGRDGYPGAFDY BCMA-13、-14 CDR-H3 (aa)
150 DQYSSSAQRADFDY BCMA-15 CDR-H3 (aa)
151 APYYDILTGYYL BCMA-16 CDR-H3 (aa)
152 EADSSADY BCMA-17、-33 CDR-H3 (aa)
153 WLAVTN BCMA-18 CDR-H3 (aa)
154 DGGDV BCMA-19 CDR-H3 (aa)
155 GGLGITPYYFDY BCMA-20、-27 CDR-H3 (aa)
156 VDGGYTEDY BCMA-21 CDR-H3 (aa)
157 VDGDYTEDY BCMA-22、-23、-40 CDR-H3 (aa)
158 GFTFSSY BCMA-13、-14、-15、-18 CDR-H1 (aa) Chothia編號
159 GFTFTSS BCMA-16 CDR-H1 (aa) Chothia編號
160 GYTFTSY BCMA-19 CDR-H1 (aa) Chothia編號
161 SYDGSN BCMA-13、-14、-15 CDR-H2 (aa) Chothia編號
162 VVGSGN BCMA-16 CDR-H2 (aa) Chothia編號
163 NQDGSE BCMA-18 CDR-H2 (aa) Chothia編號
164 NPNSGG BCMA-19 CDR-H2 (aa) Chothia編號
165 GFTFSSYAMH BCMA-13 CDR-H1 (aa) AbM編號
166 GFTFSSYGMH BCMA-14、-15 CDR-H1 (aa) AbM編號
167 GFTFTSSAMQ BCMA-16 CDR-H1 (aa) AbM編號
168 GFTFSSYWMS BCMA-18 CDR-H1 (aa) AbM編號
169 GYTFTSYYMH BCMA-19 CDR-H1 (aa) AbM編號
170 VISYDGSNKY BCMA-13、-14、-15 CDR-H2 (aa) AbM編號
171 WIVVGSGNTN BCMA-16 CDR-H2 (aa) AbM編號
172 HINQDGSEKY BCMA-18 CDR-H2 (aa) AbM編號
173 WINPNSGGTN BCMA-19 CDR-H2 (aa) AbM編號
174 GSGSNIGSNDVS BCMA-13、-14、-15、-16、-18、-21 CDR-L1 (aa)
175 GGNNIGFKGVQ BCMA-17、-33 CDR-L1 (aa)
176 TGTSSDVGDYNYVA BCMA-19 CDR-L1 (aa)
177 SGGKTVN BCMA-20、-27 CDR-L1 (aa)
178 TGSSSDVGKYNLVS BCMA-22、-23 CDR-L1 (aa)
179 WNDQRPS BCMA-13、-14、-15、-16、-18、-21 CDR-L2 (aa)
180 DDSDRPS BCMA-17、-32、-33 CDR-L2 (aa)
181 EVINRPS BCMA-19 CDR-L2 (aa)
182 SNDQRPS BCMA-20、-27 CDR-L2 (aa)
183 DVNKRPS BCMA-22、-23、-40 CDR-L2 (aa)
184 AAWDDSLGGSWV BCMA-13 CDR-L3 (aa)
185 AAWDDRLNGFWV BCMA-14 CDR-L3 (aa)
186 AAWDDSLSGWV BCMA-15 CDR-L3 (aa)
187 ASWDDSLSGWV BCMA-16 CDR-L3 (aa)
188 QVWDSASDHWV BCMA-17、-33 CDR-L3 (aa)
189 AAWDDSLNGWV BCMA-18 CDR-L3 (aa)
190 ISYSRGSTPYV BCMA-19 CDR-L3 (aa)
191 GSWDDSLNAWV BCMA-20、-27 CDR-L3 (aa)
192 AAWDDSLNGYV BCMA-21 CDR-L3 (aa)
193 CSYGGSRSYV BCMA-22、-40 CDR-L3 (aa)
194 SSYGGSRSYV BCMA-23 CDR-L3 (aa)
195 QMQLVQYGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFS BCMA-13 VH FR1 (aa)
196 EVQLLESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFS BCMA-14 VH FR1 (aa)
197 QVQLLESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-15、-47 VH FR1 (aa)
198 EVQLVQSGPEVKKPGTSVKVSCKASGFTFT BCMA-16 VH FR1 (aa)
199 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-17、-33、-36、-38、-41 VH FR1 (aa)
200 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-18 VH FR1 (aa)
201 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT BCMA-19 VH FR1 (aa)
202 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFD BCMA-20 VH FR1 (aa)
203 EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFS BCMA-21 VH FR1 (aa)
204 WVRQAPGKGLEWVA BCMA-13、-14、-15 VH FR2 (aa)
205 WVRQARGQRLEWIG BCMA-16 VH FR2 (aa)
206 WIRLAPGKGLEWVS BCMA-17 VH FR2 (aa)
207 WHRQAPGKGPEWVA BCMA-18 VH FR2 (aa)
208 WVRQAPGQGLEWMG BCMA-19 VH FR2 (aa)
209 WVRQAPGKGLEWVS BCMA-20、-27、-28、-29、-30、-34、-39 VH FR2 (aa)
210 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLKAEDTAVYYCAT BCMA-13 VH FR3 (aa)
211 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAT BCMA-14 VH FR3 (aa)
212 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAK BCMA-15 VH FR3 (aa)
213 RVTITRDMSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAA BCMA-16 VH FR3 (aa)
214 RFTISRDNAESSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR BCMA-18 VH FR3 (aa)
215 RVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAR BCMA-19 VH FR3 (aa)
216 RFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAK BCMA-20、-27 VH FR3 (aa)
217 RGQGTLVTVSS BCMA-13 VH FR4 (aa)
218 RGPGTLVTVSS BCMA-14 VH FR4 (aa)
219 WGQGTLVNVSS BCMA-17、-33 VH FR4 (aa)
220 WGQGTTVTVSS BCMA-19 VH FR4 (aa)
221 QAVLTQPPSASGTPGQRVTISC BCMA-13、-14 VL FR1 (aa)
222 QSVLTQPPSASGTPGQRVTISC BCMA-15、-18、-21 VL FR1 (aa)
223 QSALTQPPSASGTPGQRVTISC BCMA-16 VL FR1 (aa)
224 QPVLTQPPSVSVAPGKTAMITC BCMA-17、-33 VL FR1 (aa)
225 QAVLTQPASVSGSPGQSITISC BCMA-19 VL FR1 (aa)
226 QPVLTQPPSASGTPGQRVTISC BCMA-20、-27 VL FR1 (aa)
227 QSALTQPASVSGSPGQSITISC BCMA-22、-23、-40 VL FR1 (aa)
228 WYQQIPGTAPKLLIY BCMA-13、-14、-15、-16、-18、-21 VL FR2 (aa)
229 WYQQKTGQAPVLVVY BCMA-17、-33 VL FR2 (aa)
230 WYQQHPGKDPKLMIF BCMA-19 VL FR2 (aa)
231 WFRQVPGTAPQLLIY BCMA-20、-27 VL FR2 (aa)
232 WYQQPPGKAPKLIIY BCMA-22、-23、-40 VL FR2 (aa)
233 GVPDRFSASKSGTSASLAISGLRSEDEADYYC BCMA-13 VL FR3 (aa)
234 GVPDRFSGSKSGASASLAISGLQSEDEADYYC BCMA-14 VL FR3 (aa)
235 GVPDRFSGSKSGTSASLVISGLRSEDEADYYC BCMA-15 VL FR3 (aa)
236 GVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYC BCMA-16 VL FR3 (aa)
237 GIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYC BCMA-17、-33 VL FR3 (aa)
238 GVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYC BCMA-18 VL FR3 (aa)
239 GVSDRFSGSKSGNTASLDISGLQPEDEADYYC BCMA-19 VL FR3 (aa)
240 GVPDRFSGSKSGSSASLDISGLQSEDEAYYYC BCMA-20、-27 VL FR3 (aa)
241 GVPDRFSGSKSGISASLAISGLRSEDEADYYC BCMA-21 VL FR3 (aa)
242 GVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYC BCMA-22、-23、-40 VL FR3 (aa)
243 FGGGTKVTVL BCMA-13 VL FR4 (aa)
244 IGTGTKVTVL BCMA-19 VL FR4 (aa)
245 FGGETKLTVL BCMA-20、-27 VL FR4 (aa)
246 FGTGTKVTVL BCMA-21、-22、-23 VL FR4 (aa)
247 QMQLVQYGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYAMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLKAEDTAVYYCATLPGRDGYPGAFDYRGQGTLVTVSS BCMA-13 VH 鏈(aa)
248 EVQLLESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATLPGRDGYPGAFDYRGPGTLVTVSS BCMA-14 VH 鏈(aa)
249 QVQLLESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDQYSSSAQRADFDYWGQGTLVTVSS BCMA-15 VH 鏈(aa)
250 EVQLVQSGPEVKKPGTSVKVSCKASGFTFTSSAMQWVRQARGQRLEWIGWIVVGSGNTNYAQKFQERVTITRDMSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAAAPYYDILTGYYLWGQGTLVTVSS BCMA-16 VH 鏈(aa)
251 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRLAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREADSSADYWGQGTLVNVSS BCMA-17 VH 鏈(aa)
252 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWHRQAPGKGPEWVAHINQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAESSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARWLAVTNWGQGTLVTVSS BCMA-18 VH 鏈(aa)
253 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARDGGDVWGQGTTVTVSS BCMA-19 VH 鏈(aa)
254 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKGGLGITPYYFDYWGQGTLVTVSS BCMA-20 VH 鏈(aa)
255 EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGGYTEDYWGQGTLVTVSS BCMA-21 VH 鏈(aa)
256 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYTEDYWGQGTLVTVSS BCMA-22、-23、-40 VH 鏈(aa)
257 QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSASKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLGGSWVFGGGTKVTVL BCMA-13 VL 鏈(aa)
258 QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGASASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDRLNGFWVFGGGTKLTVL BCMA-14 VL 鏈(aa)
259 QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLVISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGWVFGGGTKLTVL BCMA-15 VL 鏈(aa)
260 QSALTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCASWDDSLSGWVFGGGTKLTVL BCMA-16 VL 鏈(aa)
261 QPVLTQPPSVSVAPGKTAMITCGGNNIGFKGVQWYQQKTGQAPVLVVYDDSDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSASDHWVFGGGTKLTVL BCMA-17、-33 VL 鏈(aa)
262 QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGWVFGGGTKLTVL BCMA-18 VL 鏈(aa)
263 QAVLTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGDYNYVAWYQQHPGKDPKLMIFEVINRPSGVSDRFSGSKSGNTASLDISGLQPEDEADYYCISYSRGSTPYVIGTGTKVTVL BCMA-19 VL 鏈(aa)
264 QPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGGKTVNWFRQVPGTAPQLLIYSNDQRPSGVPDRFSGSKSGSSASLDISGLQSEDEAYYYCGSWDDSLNAWVFGGETKLTVL BCMA-20、-27 VL 鏈(aa)
265 QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGISASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVL BCMA-21 VL 鏈(aa)
266 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCCSYGGSRSYVFGTGTKVTVL BCMA-22 VL 鏈(aa)
267 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCSSYGGSRSYVFGTGTKVTVL BCMA-23 VL 鏈(aa)
268 QMQLVQYGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYAMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLKAEDTAVYYCATLPGRDGYPGAFDYRGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSASKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLGGSWVFGGGTKVTVL BCMA-13 scFv (aa)
269 EVQLLESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATLPGRDGYPGAFDYRGPGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGASASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDRLNGFWVFGGGTKLTVL BCMA-14 scFv (aa)
270 QVQLLESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDQYSSSAQRADFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLVISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGWVFGGGTKLTVL BCMA-15 scFv (aa)
271 EVQLVQSGPEVKKPGTSVKVSCKASGFTFTSSAMQWVRQARGQRLEWIGWIVVGSGNTNYAQKFQERVTITRDMSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAAAPYYDILTGYYLWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCASWDDSLSGWVFGGGTKLTVL BCMA-16 scFv (aa)
272 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRLAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREADSSADYWGQGTLVNVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSVSVAPGKTAMITCGGNNIGFKGVQWYQQKTGQAPVLVVYDDSDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSASDHWVFGGGTKLTVL BCMA-17 scFv (aa)
273 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWHRQAPGKGPEWVAHINQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAESSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARWLAVTNWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGWVFGGGTKLTVL BCMA-18 scFv (aa)
274 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARDGGDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAVLTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGDYNYVAWYQQHPGKDPKLMIFEVINRPSGVSDRFSGSKSGNTASLDISGLQPEDEADYYCISYSRGSTPYVIGTGTKVTVL BCMA-19 scFv (aa)
275 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKGGLGITPYYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGGKTVNWFRQVPGTAPQLLIYSNDQRPSGVPDRFSGSKSGSSASLDISGLQSEDEAYYYCGSWDDSLNAWVFGGETKLTVL BCMA-20 scFv (aa)
276 EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGGYTEDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSGSNIGSNDVSWYQQIPGTAPKLLIYWNDQRPSGVPDRFSGSKSGISASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVL BCMA-21 scFv (aa)
277 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYTEDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCCSYGGSRSYVFGTGTKVTVL BCMA-22 scFv (aa)
278 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYTEDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCSSYGGSRSYVFGTGTKVTVL BCMA-23 scFv (aa)
279 VDGDDAFDI VH -3 CDR-H3 (aa)
280 DPLSWDSSGKGPR VH -4 CDR-H3 (aa)
281 ENYDFWSWRYYYDMDV VH -5 CDR-H3 (aa)
282 VDGPPSYDI VH -6 CDR-H3 (aa)
283 GDWDDAFDI VH -7 CDR-H3 (aa)
284 VDGDYEDY VH -9 CDR-H3 (aa)
285 DVPSSGDDAFDI VH -10 CDR-H3 (aa)
286 VDGDDVFDI VH -11 CDR-H3 (aa)
287 VDGDAFDI VH -12 CDR-H3 (aa)
288 DYSIN BCMA-C1 VH CDR-H1 (aa)
289 NFGMN BCMA-C2 VH CDR-H1 (aa)
290 WINTETREPAYAYDFRG BCMA-C1 VH CDR-H2 (aa)
291 WINTYTGESYFADDFKG BCMA-C2 VH CDR-H2 (aa)
292 DYSYAMDY BCMA-C1 VH CDR-H3 (aa)
293 GEIYYGYDGGFAY BCMA-C2 VH CDR-H3 (aa)
294 GYTFTDY BCMA-C1 VH CDR-H1 (aa) Chothia編號
295 GYTFTNF BCMA-C2 VH CDR-H1 (aa) Chothia編號
296 NTETRE BCMA-C1 VH CDR-H2 (aa) Chothia編號
297 NTYTGE BCMA-C2 VH CDR-H2 (aa) Chothia編號
298 GYTFTDYSIN BCMA-C1 VH CDR-H1 (aa) AbM編號
299 GYTFTNFGMN BCMA-C2 VH CDR-H1 (aa) AbM編號
300 WINTETREPA BCMA-C1 VH CDR-H2 (aa) AbM編號
301 WINTYTGESY BCMA-C2 VH CDR-H2 (aa) AbM編號
302 RASESVTILGSHLIH BCMA-C1 VL CDR-L1 (aa)
303 RASQDVNTAVS BCMA-C2 VL CDR-L1 (aa)
304 LASNVQT BCMA-C1 VL CDR-L2 (aa)
305 SASYRYT BCMA-C2 VL CDR-L2 (aa)
306 LQSRTIPRT BCMA-C1 VL CDR-L3 (aa)
307 QQHYSTPWT BCMA-C2 VL CDR-L3 (aa)
308 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFT BCMA-C1 VH FR1 (aa)
309 QIQLVQSGPDLKKPGETVKLSCKASGYTFT BCMA-C2 VH FR1 (aa)
310 WVKRAPGKGLKWMG BCMA-C1 VH FR2 (aa)
311 WVKQAPGKGFKWMA BCMA-C2 VH FR2 (aa)
312 RFAFSLETSASTAYLQINNLKYEDTATYFCAL BCMA-C1 VH FR3 (aa)
313 RFAFSVETSATTAYLQINNLKTEDTATYFCAR BCMA-C2 VH FR3 (aa)
314 WGQGTSVTVSS BCMA-C1 VH FR4 (aa)
315 WGQGTLVTVSA BCMA-C2 VH FR4 (aa)
316 DIVLTQSPPSLAMSLGKRATISC BCMA-C1 VL FR1 (aa)
317 DVVMTQSHRFMSTSVGDRVSITC BCMA-C2 VL FR1 (aa)
318 WYQQKPGQPPTLLIQ BCMA-C1 VL FR2 (aa)
319 WYQQKPGQSPKLLIF BCMA-C2 VL FR2 (aa)
320 GVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYC BCMA-C1 VL FR3 (aa)
321 GVPDRFTGSGSGADFTLTISSVQAEDLAVYYC BCMA-C2 VL FR3 (aa)
322 FGGGTKLEIK BCMA-C1 VL FR4 (aa)
323 FGGGTKLDIK BCMA-C2 VL FR4 (aa)
324 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDYSINWVKRAPGKGLKWMGWINTETREPAYAYDFRGRFAFSLETSASTAYLQINNLKYEDTATYFCALDYSYAMDYWGQGTSVTVSS BCMA-C1 VH 鏈(aa)
325 QIQLVQSGPDLKKPGETVKLSCKASGYTFTNFGMNWVKQAPGKGFKWMAWINTYTGESYFADDFKGRFAFSVETSATTAYLQINNLKTEDTATYFCARGEIYYGYDGGFAYWGQGTLVTVSA BCMA-C2 VH 鏈(aa)
326 DIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIHWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIK BCMA-C1 VL 鏈(aa)
327 DVVMTQSHRFMSTSVGDRVSITCRASQDVNTAVSWYQQKPGQSPKLLIFSASYRYTGVPDRFTGSGSGADFTLTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPWTFGGGTKLDIK BCMA-C2 VL 鏈(aa)
328 DIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIHWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDYSINWVKRAPGKGLKWMGWINTETREPAYAYDFRGRFAFSLETSASTAYLQINNLKYEDTATYFCALDYSYAMDYWGQGTSVTVSS BCMA-C1 VL-VH scFv (aa)
329 QIQLVQSGPDLKKPGETVKLSCKASGYTFTNFGMNWVKQAPGKGFKWMAWINTYTGESYFADDFKGRFAFSVETSATTAYLQINNLKTEDTATYFCARGEIYYGYDGGFAYWGQGTLVTVSAGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSHRFMSTSVGDRVSITCRASQDVNTAVSWYQQKPGQSPKLLIFSASYRYTGVPDRFTGSGSGADFTLTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPWTFGGGTKLDIK BCMA-C2 VH-VL scFv (aa)
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332 CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTAGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTGCGGCCTGGAGTGCCCCGACTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGGATATTGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGTTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTACACAGCTCCAACAATAAGAATTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGGTTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAGTATTATACTACTCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA BCMA-3 scFv (nt)
333 CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTAGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTGCGGCCTGGAGTGCCCCGACTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGGCCATCCGGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCCGCGTCTCTGGGGGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCGAGTCAGGACATTAGGAATTCTTTGGCCTGGTATCAGCAGAGGCCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGCTTTCTGCTGCATCCAGATTGGAAAGTGGGGTCCCTTCTAGGTTCAGTGGCACTACTTCTGGGGCGGAGTATGCTCTCAGCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTCGCATCTTATTTCTGTCAGCAGTATTATAGTCTCCCTCTCTCCTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA BCMA-4 scFv (nt)
334 CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTAGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTGCGGCCTGGAGTGCCCCGACTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGGACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATACAGCTCCAACAATAAGAACTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTACTCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGATATCAAA BCMA-5 scFv (nt)
335 CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTAGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTGCGGCCTGGAGTGCCCCGACTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGGATATTGTGATGACCCAGTCTCCATCGTCCCTGTCTGTGTCTGTAGGAGAGAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGTCTATAAGTAATTCCTTAGCCTGGTATAAACAGAGACCGGGAGAAGCCCCTAAACTCCTGATACATGCTGCATCCAATGTGGAAGATGGGGTCCCTTCGAGGTTCAGCGGCAGGGGATCTGGGACAGTTTTCACTCTCGCCATCAGCAATGTACAGCCTGAAGATTTCGCAACTTACTACTGTCAGCAGAGTCACATGTACCCTCCGACTTTCGGCGGGGGGACCAAGGTGGAAATCAAA BCMA-6 scFv (nt)
336 CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCAGGGCGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCTTCTGGATTCACCTTTGGTGATTATGCTATGAGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTAGGTTTCATTAGAAGCAAAGCTTATGGTGGGACAACAGAATACGCCGCGTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGCATCGCCTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTGTATTACTGTGCGGCCTGGAGTGCCCCGACTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGGTCATCCAGTTGACCCAGTCTCCCTCCTCACTGTCTGCATCTGTAGGGGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGACATTGGCGATTATTTAGCCTGGTTTCAGCAGAGACCAGGGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGTTGCGTCCACTTTGCAGAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACACTTCACTCTCACCATCAACAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATCATAGTCACCCGTGGACGTTCGGCCCAGGGACCAAGGTGGATATCAAA BCMA-7 scFv (nt)
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338 GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTGGACGGTGACTACGTCGATGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGTCCTATGAGCTGACTCAGCCGCCCTCGGTGTCTGTGGCCCCAGGACAGACGGCCAGGGTTACCTGTGGGGCAAATAATATTGGAAGCAAAAGTGTCCACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCCATGCTGGTCGTCTATGATGATGACGACCGGCCCTCCGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCGGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTACTTCTGTCACGTGTGGGATAGAAGTCGTGATCATTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-9 scFv (nt)
339 GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGTGGACGGTGACTACGTCGATGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGTCCTATGAGCTGACTCAGCCGCCCTCGGTGTCTGTGGCCCCAGGACAGACGGCCAGGGTTACCTGTGGGGCAAATAATATTGGAAGCAAAAGTGTCCACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCCATGCTGGTCGTCTATGATGATGACGACCGGCCCTCCGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCGGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTACTTCTGTCACGTGTGGGATAGAAGTCGTGATCATTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-10 scFv (nt)
340 CAGGTGCAGCTGGTACAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGGCGAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTAGCATAGGCTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCTGGGGCCCGACTACGATCCCGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTTTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGCTTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAGTAATGCTGTAAACTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCGAAGTCCTCATCTATAATAGTCATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAATGGGCTCCAGTCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGAGGTTACGTCTTCGGAACTGGGACCAAGCTCACCGTCCTA BCMA-11 scFv (nt)
341 GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAAGTGGATGGCCCTCCTTCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGCCCTGACGCAGCCGCCCTCAGTGTCTGCGGCCCCAGGACAGAAGGTCACCATCTCCTGCTCTGGAAGCCGCTCCAACATTGGGAATAATTATGTATCCTGGTACCAACAGCTCCCAGGAACAGCCCCCAAACTCCTCATTTATGACAATGCTAAGCGACCCTCAGGAATTCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACGTCAGCCACCCTGGACATCGCCGGACTCCAGACTGGGGATGAGGCCGACTATTACTGTCAGGTGTGGGATAGTAGTAGTGATCATTGGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA BCMA-12 scFv (nt)
342 CAGATGCAGCTGGTGCAGTATGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGCTATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCTACCCTACCCGGTAGAGATGGCTACCCCGGAGCCTTTGACTACAGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGGCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGCCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGGGTGGTTCTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA BCMA-13 scFv (nt)
343 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCTACCCTACCCGGTAGAGATGGCTACCCCGGAGCCTTTGACTACAGGGGCCCGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGGCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCGCCTCAGCCTCTCTGGCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTGATTATTATTGTGCAGCATGGGATGACAGGTTGAACGGTTTTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA BCMA-14 scFv (nt)
344 CAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCATATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAAAGATCAGTATAGCAGTAGCGCACAAAGGGCCGACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGTTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGTGCTGACGCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGGTTCTCAGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGTCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-15 scFv (nt)
345 GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGCCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGACCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATTCACCTTTACTAGCTCTGCTATGCAGTGGGTGCGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGATGGATCGTCGTTGGCAGTGGTAACACAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGAAAGAGTCACCATTACCAGGGACATGTCCACAAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGGCAGCTCCGTATTACGATATTTTGACTGGTTATTATTTATGGGGCCAGGGAACGCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCTGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGCCCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCATCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-16 scFv (nt)
346 CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCTGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGCCGATAGTAGCGCTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCAACGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCATGATTACCTGTGGGGGAAACAACATTGGATTTAAAGGTGTGCAGTGGTACCAGCAGAAGACAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCGTCTATGATGATAGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAAGCCGGGGATGAGGCCGATTATTACTGTCAGGTGTGGGATAGTGCTAGTGATCATTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-17 scFv (nt)
347 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACGTTTAGTAGCTATTGGATGAGCTGGCACCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCCGGAGTGGGTGGCCCACATAAACCAAGACGGAAGTGAGAAGTACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCGAGAGTTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGGTGGCTGGCGGTTACTAACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGTGTTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGGACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-18 scFv (nt)
348 CAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCAGCTACTATATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCACAAACTATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATGGTGGGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGGCTGTGCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCACCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACGTTGGTGATTATAACTATGTCGCCTGGTATCAACAACACCCAGGCAAAGACCCCAAACTCATGATTTTTGAGGTCATTAATCGGCCCTCAGGGGTTTCTGATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCTCCCTGGACATCTCTGGGCTCCAGCCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCATCTCATATTCACGAGGCAGCACTCCTTATGTCATCGGAACTGGGACCAAGGTGACCGTCCTA BCMA-19 scFv (nt)
349 GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTAGCATAGGCTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAGGGGGGCCTAGGAATAACCCCATACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCGGGAGGCAAGACTGTAAACTGGTTCCGGCAGGTCCCAGGAACGGCCCCCCAACTCCTCATCTATAGTAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCTCCTCAGCCTCCCTGGACATCAGTGGGCTCCAGTCTGAGGATGAGGCTTATTATTACTGTGGATCATGGGATGACAGCCTCAATGCTTGGGTGTTCGGCGGAGAGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-20 scFv (nt)
350 GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAAGTAGACGGAGGCTACACAGAGGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCGGCTCCAACATCGGAAGTAATGATGTCTCCTGGTATCAGCAGATCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACTGGAATGATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGGTTCTCAGGCTCCAAGTCTGGCATCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGCGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAATGGTTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA BCMA-21 scFv (nt)
351 GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAAGTAGACGGAGACTACACAGAGGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCACTATCTCCTGCACTGGAAGCAGCAGTGATGTTGGCAAATATAATCTTGTCTCCTGGTACCAACAGCCCCCAGGCAAAGCCCCCAAGCTCATAATTTATGACGTCAATAAGCGGCCCTCAGGGGTTTCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCACCCTGACAATCTCTGGGCTCCAGGGTGACGACGAGGCTGATTATTATTGTTGCTCATATGGAGGTAGTAGGTCTTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTGACCGTCCTA BCMA-22 scFv (nt)
352 GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAAGTAGACGGAGACTACACAGAGGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGATCACTATCTCCTGCACTGGAAGCAGCAGTGATGTTGGCAAATATAATCTTGTCTCCTGGTACCAACAGCCCCCAGGCAAAGCCCCCAAGCTCATAATTTATGACGTCAATAAGCGGCCCTCAGGGGTTTCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCAACACGGCCACCCTGACAATCTCTGGGCTCCAGGGTGACGACGAGGCTGATTATTATTGTAGCTCATATGGAGGTAGTAGGTCTTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTGACCGTCCTA BCMA-23 scFv (nt)
353 X1 X2 X3 MX4 X1 = D或S； X2 = Y或S； X3 = A、G、W或Y； X4 = H、Q或S 共同CDR-H1
354 X1 IX2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 YX12 X13 X14 X15 X16 X17 X1 = F、G、H、V、W或Y； X2 = N、R、S或V； X3 = P、Q、S、V、W或Y； X4 = K或不存在； X5 = A或不存在； X6 = D、G、N、S或Y； X7 = G或S； X8 = G或S； X9 = E、G、N、T或S； X10 = I、K或T； X11 = E、G、N或Y； X12 = A或V； X13 = A、D或Q； X14 = K或S； X15 = F或V； X16 = K或Q； X17 = E或G 共同CDR-H2
355 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 X13 X14 X1 = A、D、E、G、L、V或W； X2 = A、D、G、L、P、Q或S； X3 = A、D、G、L或Y； X4 = D、G、P、R、S、V、Y或不存在； X5 = D、I、P、S、T、Y或不存在； X6 = A、G、I、S、T、V、Y或不存在； X7 = A、D、E、F、L、P、S、Y或不存在； X8 = P、Q、T、Y或不存在； X9 = D、G、R、Y或不存在； X10 = A、F、Y或不存在； X11 = D、F或不存在； X12 = F或不存在； X13 = D、T或Y； X14 = I、L、N、V或Y 共同CDR-H3
356 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 X13 X14 X15 X16 X17 X1 = G、K、R、S或T； X2 = A、G或S； X3 = G、N、S或T； X4 = G、K、N、Q、R或S； X5 = S或不存在； X6 = D、N、V或不存在； X7 = L、V或不存在； X8 = H、S、Y或不存在； X9 = S、T或不存在； X10 = S或不存在； X11 = D、G、I、N、S或不存在； X12 = D、E、G、K、I、N或不存在； X13 = F、G、K、N、R、S、Y或不存在； X14 = D、K、N、T或不存在； X15 = A、D、G、L、N、S、T或Y； X16 = L或V； X17 = A、H、N、Q或S 共同CDR-L1
357 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X1 = A、D、E、N、S、V或W； X2 = A、D、N、S或V； X3 = A、D、H、I、N或S； X4 = D、K、N、Q、R或T； X5 = L、R或V； X6 = A、E、P或Q； X7 = A、D、S或T 共同CDR-L2
358 X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 X11 X12 X1 = A、C、G、H、I、Q或S；X2 = A、Q、S或V；X3 = S、W或Y；X4 = D、F、G、H或Y；X5 = D、G、M、R、S或T；X6 = A、G、H、L、R、S、T或Y；X7 = L、P、R、S或不存在；X8 = D、G、N、R、S、T或不存在；X9 = A、G、H、L、P或不存在；X10 = F、S或不存在；X11 = L、P、W或Y；X12 = S、T或V 共同CDR-L3
359 GGGGS 4GS連接子(aa)
360 GGGS 3GS連接子(aa)
361 GGGGSGGGGSGGGGS (4GS)3 連接子(aa)
362 GSTSGSGKPGSGEGSTKG 連接子(aa)
363 ESKYGPPCPPCP 間隔子(IgG4鉸鏈) (aa)
364 gaatctaagtacggaccgccctgccccccttgccct 間隔子(IgG4鉸鏈) (nt)
365 ESKYGPPCPPCPGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 鉸鏈-CH 3間隔子(aa)
366 ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 鉸鏈-CH 2-CH 3間隔子(aa)
367 MLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRCSSNTPPLTCQRYCNASVTNSVKGTNAILWTCLGLSLIISLAVFVLMFLLRKISSEPLKDEFKNTGSGLLGMANIDLEKSRTGDEIILPRGLEYTVEECTCEDCIKSKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCKSLPAALSATEIEKSISAR 人類BCMA；GenBank編號BAB60895.1
368 MLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRCSSNTPPLTCQRYCNASVTNSVKGTNAILWTCLGLSLIISLAVFVLMFLLRKINSEPLKDEFKNTGSGLLGMANIDLEKSRTGDEIILPRGLEYTVEECTCEDCIKSKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCKSLPAALSATEIEKSISAR 人類BCMA；NCBI編號NP_001183.2
369 MLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRCSSNTPPLTCQRYCNARSGLLGMANIDLEKSRTGDEIILPRGLEYTVEECTCEDCIKSKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCKSLPAALSATEIEKSISAR 人類BCMA變異體；GenBank編號ABN42510.1
370 MAQQCFHSEYFDSLLHACKPCHLRCSNPPATCQPYCDPSVTSSVKGTYTVLWIFLGLTLVLSLALFTISFLLRKMNPEALKDEPQSPGQLDGSAQLDKADTELTRIRAGDDRIFPRSLEYTVEECTCEDCVKSKPKGDSDHFFPLPAMEEGATILVTTKTGDYGKSSVPTALQSVMGMEKPTHTR 小鼠BCMA；NCBI編號NP_035738.1
371 MLQMARQCSQNEYFDSLLHDCKPCQLRCSSTPPLTCQRYCNASMTNSVKGMNAILWTCLGLSLIISLAVFVLTFLLRKMSSEPLKDEFKNTGSGLLGMANIDLEKGRTGDEIVLPRGLEYTVEECTCEDCIKNKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCNSLSAALSVTEIEKSISAR 食蟹獼猴BCMA；GenBank編號EHH60172.1
372 GISWNSGSIXYADSVKG BCMA-28 CDR-H2 (aa) Kabat編號
373 YISGSGSTIYYADSVKG BCMA-33 CDR-H2 (aa) Kabat編號
374 YISSSGNTIYYADSVKG BCMA-41 CDR-H2 Kabat編號
375 CIPCQLR 人類BCMA抗原決定基(殘基21-27)
376 DLGPPYGDDAFDI BCMA-24、-28、-29、-39 CDR-H3 (aa)
377 DLDPDDAFDI BCMA-30 CDR-H3 (aa)
378 VDGDYDDY BCMA-35 CDR-H3 (aa)
379 SNTPPLTCQR 人類BCMA抗原決定基(殘基30-39)
380 RASQGISNYLA BCMA-25 CDR-L1 (aa)
381 RSSQSLLHSNGYNYLD BCMA-28 CDR-L1 (aa)
382 TGTSSDVGSYNLVS BCMA-29 CDR-L1 (aa)
383 RASQPIRSNLA BCMA-30 CDR-L1 (aa)
384 KSSQSVLNSSNNKNYVA BCMA-31 CDR-L1 (aa)
385 GGNNIGSKGVH BCMA-32 CDR-L1 (aa)
386 RASQSISNYLA BCMA-34 CDR-L1 (aa)
387 GSSTGPVTSAHSPS BCMA-36 CDR-L1 (aa)
388 GSSTGAVTNGHSPY BCMA-37、-38 CDR-L1 (aa)
389 RASQGIRYELX BCMA-39 CDR-L1 (aa)
390 TGSSSDVSKYNLVS BCMA-40 CDR-L1 (aa)
391 SGSSSNIGGNSVD BCMA-41 CDR-L1 (aa)
392 RASQGIGNGLA BCMA-42 CDR-L1 (aa)
393 SVTNSVK 人類BCMA抗原決定基(殘基44-50)
394 KSSQNLLYSSNNKNYLA BCMA-44 CDR-L1 (aa)
395 RASQGIGRSLA BCMA-45 CDR-L1 (aa)
396 GGNNIGSKSVH BCMA-47、-48 CDR-L1 (aa)
397 GGDQIGRKSVH BCMA-49 CDR-L1 (aa)
398 RASQNIGDWLA BCMA-51 CDR-L1 (aa)
399 WGSTRES BCMA-24 CDR-L2 (aa)
400 SASTLQS BCMA-25 CDR-L2 (aa)
401 LGSNRAS BCMA-28 CDR-L2 (aa)
402 EVSKRPS BCMA-29 CDR-L2 (aa)
403 SASTRAT BCMA-30 CDR-L2 (aa)
404 DASNRAT BCMA-34 CDR-L2 (aa)
405 ETTNRHS BCMA-36 CDR-L2 (aa)
406 DTTNRHS BCMA-37 CDR-L2 (aa)
407 DTNNRHS BCMA-38 CDR-L2 (aa)
408 AASTLQS BCMA-39 CDR-L2 (aa)
409 ANDRRPS BCMA-41 CDR-L2 (aa)
410 CSQNEYF 人類BCMA抗原決定基(殘基8-15)
411 DASSLRS BCMA-45 CDR-L2 (aa)
412 YDTDRPS BCMA-47、-48 CDR-L2 (aa)
413 YDSDRPS BCMA-49 CDR-L2 (aa)
414 GASILES BCMA-51 CDR-L2 (aa)
415 QQYISLPWT BCMA-24 CDR-L3 (aa)
416 QQSYTSRQT BCMA-25 CDR-L3 (aa)
417 MQALQTPPWT BCMA-28 CDR-L3 (aa)
418 CSYAGSSTSRDV BCMA-29 CDR-L3 (aa)
419 RHYAPLT BCMA-30 CDR-L3 (aa)
420 QQRSNWPPYT BCMA-34 CDR-L3 (aa)
421 HLWDRSRDHYV BCMA-26、-35 CDR-L3 (aa)
422 LLSSGDARMV BCMA-36 CDR-L3 (aa)
423 SLSHAGDRVF BCMA-37 CDR-L3 (aa)
424 LLSYSDARLA BCMA-38 CDR-L3 (aa)
425 LQHNSYPLT BCMA-39 CDR-L3 (aa)
426 ESWDDALNGHV BCMA-41 CDR-L3 (aa)
427 QQYVEDALT BCMA-42 CDR-L3 (aa)
428 LLHACIPCQLR 人類BCMA抗原決定基(殘基17-27)
429 QQYYSSPYT BCMA-44 CDR-L3 (aa)
430 QQLNGYPWT BCMA-45 CDR-L3 (aa)
431 QLWDSDSDDFA BCMA-47 CDR-L3 (aa)
432 QVWDSSTGQYVV BCMA-49 CDR-L3 (aa)
433 QKYDGAPPWT BCMA-51 CDR-L3 (aa)
434 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCVASGFTFD BCMA-27 VH FR1 (aa)
435 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFG BCMA-30 VH FR1 (aa)
436 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFG BCMA-25、-31、-44、-51 VH FR1 (aa)
437 QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFS BCMA-32、-49 VH FR1 (aa)
438 TGQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFD BCMA-34 VH FR1 (aa)
439 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFG BCMA-42 VH FR1 (aa)
440 agctatgagctgacacagcctccaagcgcctctggcacacctggacagcgagtgacaatgagctgtagcggcaccagcagcaacatcggcagccacagcgtgaactggtatcagcagctgcctggcacagcccctaaactgctgatctacaccaacaaccagcggcctagcggcgtgcccgatagattttctggcagcaagagcggcacaagcgccagcctggctatttctggactgcagagcgaggacgaggccgactattattgtgccgcctgggacggctctctgaacggccttgtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctgggatctagaggtggcggaggatctggcggcggaggaagcggaggcggcggatctcttgaaatggctgaagtgcagctggtgcagtctggcgccgaagtgaagaagcctggcgagagcctgaagatcagctgcaaaggcagcggctacagcttcaccagctactggatcggctgggtccgacagatgcctggcaaaggccttgagtggatgggcatcatctaccccggcgacagcgacaccagatacagccctagctttcagggccacgtgaccatcagcgccgacaagtctatcagcaccgcctacctgcagtggtccagcctgaaggcctctgacaccgccatgtactactgcgccagatactctggcagcttcgacaattggggccagggcacactggtcaccgtgtccagc BCMA-52 scFv (nt) (O/SSE)
441 RFTISRDNAKSSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR BCMA-37 VH FR3 (aa)
442 SYELTQPPSASGTPGQRVTMSCSGTSSNIGSHSVNWYQQLPGTAPKLLIYTNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNGLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGHVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYSGSFDNWGQGTLVTVSS BCMA-52 scFv (aa)
443 DSPSPGTTPKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAK BCMA-47 VH FR3 (aa)
444 GGQGTMVTVSS BCMA-28 VH FR4 (aa)
445 WRQGTMVTVSS BCMA-47 VH FR4 (aa)
446 DIQMTQSPAFLSASVGDRVTVTC BCMA-25 VL FR1 (aa)
447 DIVMTQSPLSLSVTPGEPASISC BCMA-28 VL FR1 (aa)
448 QPVLTQPASVSGSPGQSITISC BCMA-29 VL FR1 (aa)
449 EIVLTQSPATLSVSPGERATLSC BCMA-30 VL FR1 (aa)
450 DVVMTQSPDSLAVSLGERATISC BCMA-31 VL FR1 (aa)
451 QTVVTQPPSVSVAPGQTARITC BCMA-32 VL FR1 (aa)
452 EIVMTQSPATLSLSPGDRATLSC BCMA-34 VL FR1 (aa)
453 NFMLTQPPSVSVAPGQTARITC BCMA-35 VL FR1 (aa)
454 QSVLTQEPSLTVSPGETVTLTC BCMA-36 VL FR1 (aa)
455 QLVLTQEPSLTVSPGGTVTLTC BCMA-37 VL FR1 (aa)
456 QAVLTQEPSLTVSPGGTVTLTC BCMA-38 VL FR1 (aa)
457 DIQXTQSPSSLSASVGDRVTITC BCMA-39 VL FR1 (aa)
458 QPVLTQPPSVSGTPGQRVTIPC BCMA-41 VL FR1 (aa)
459 DIQMTQSPSLVSASVGDRVTITC BCMA-42 VL FR1 (aa)
460 cagtctgccctgacacagcctgccagcgttagtgctagtcccggacagtctatcgccatcagctgtaccggcaccagctctgacgttggctggtatcagcagcaccctggcaaggcccctaagctgatgatctacgaggacagcaagaggcccagcggcgtgtccaatagattcagcggcagcaagagcggcaacaccgccagcctgacaattagcggactgcaggccgaggacgaggccgattactactgcagcagcaacacccggtccagcacactggtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctgggatctagaggtggcggaggatctggcggcggaggaagcggaggcggcggatctcttgaaatggctgaagtgcagctggtgcagtctggcgccgagatgaagaaacctggcgcctctctgaagctgagctgcaaggccagcggctacaccttcatcgactactacgtgtactggatgcggcaggcccctggacagggactcgaatctatgggctggatcaaccccaatagcggcggcaccaattacgcccagaaattccagggcagagtgaccatgaccagagacaccagcatcagcaccgcctacatggaactgagccggctgagatccgacgacaccgccatgtactactgcgccagatctcagcgcgacggctacatggattattggggccagggaaccctggtcaccgtgtccagc BCMA-55 scFv (nt) (O/SSE)
461 DVVMTQSPDSLAVSLGERATINC BCMA-44 VL FR1 (aa)
462 AIRMTQSPSSLSASVGDRVTITC BCMA-45 VL FR1 (aa)
463 QAVLTQPPSVSVAPGKTATITC BCMA-47 VL FR1 (aa)
464 QPVLTQPPSVSVAPGKTATITC BCMA-48 VL FR1 (aa)
465 LPVLTQPPSVSVAPGKTARITC BCMA-49 VL FR1 (aa)
466 AIQLTQSPSTLSASVGDRVAITC BCMA-51 VL FR1 (aa)
467 WYQQKPGNAPRLLIY BCMA-25 VL FR2 (aa)
468 WYLQKPGQSPQLLIY BCMA-28 VL FR2 (aa)
469 WYQQHPGKAPKLMIY BCMA-29 VL FR2 (aa)
470 WYQQKPGQAPKLLIY BCMA-30 VL FR2 (aa)
471 WYKQKPGQPPKLVIS BCMA-31 VL FR2 (aa)
472 WYRQRPGQAPEVVIY BCMA-32 VL FR2 (aa)
473 WFQKKPGQAPTTLIY BCMA-36 VL FR2 (aa)
474 WFQQKPGQAPRTLIY BCMA-37、-38 VL FR2 (aa)
475 WYQQKPGKAPKLLIY BCMA-39 VL FR2 (aa)
476 WFQEVPGTAPKLLIY BCMA-41 VL FR2 (aa)
477 WYQQKPGKAPKLLLF BCMA-42 VL FR2 (aa)
478 QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSS BCMA-55 scFv (aa)
479 WYKQKPGGVPQLLIH BCMA-45 VL FR2 (aa)
480 WYQRKPGQGPVVVIQ BCMA-47、-48 VL FR2 (aa)
481 WYQQKPGQAPVLVMS BCMA-49 VL FR2 (aa)
482 WYQQKPGKAPKLLIF BCMA-51 VL FR2 (aa)
483 GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAIYHC BCMA-24 VL FR3 (aa)
484 GVPSRFRGTGYGTEFSLTIDSLQPEDFATYYC BCMA-25 VL FR3 (aa)
485 GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC BCMA-28 VL FR3 (aa)
486 GVSNRFSGSKSGNTASPTISGLQAEDEADYYC BCMA-29 VL FR3 (aa)
487 GIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEHEDFAVYYR BCMA-30 VL FR3 (aa)
488 GVPDRFSGSNSGNTATLTVRGVEAGDEADYYC BCMA-32 VL FR3 (aa)
489 GIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC BCMA-34 VL FR3 (aa)
490 WTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYYC BCMA-36 VL FR3 (aa)
491 WTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEAEYYC BCMA-37 VL FR3 (aa)
492 WTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYFC BCMA-38 VL FR3 (aa)
493 GVPSRFSGSGSGTDFALTIRSLQPEDFATYYC BCMA-39 VL FR3 (aa)
494 GVPDRFSGTKSGTSASLAIRGLQSDDDAHYYC BCMA-41 VL FR3 (aa)
495 GVPSRFSGSRSGTDYTLTISSLQPEDVATYYC BCMA-42 VL FR3 (aa)
496 gaggtgcagctggtgcagtctggagcagaggtgaaaaagcccggggagtctctgaagatctcctgtaagggttctggatacagctttaccagctactggatcggctgggtgcgccagatgcccgggaaaggcctggagtggatggggatcatctatcctggtgactctgataccagatacagcccgtccttccaaggccacgtcaccatctcagctgacaagtccatcagcactgcctacctgcagtggagcagcctgaaggcctcggacaccgccatgtattactgtgcgcgctactctggttctttcgataactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctcagc BCMA-52 VH鏈(nt)
497 GVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQSEDSATYHC BCMA-45 VL FR3 (aa)
498 GIPERFSGSKSGDTASLTISGVEAGDEADYYC BCMA-47 VL FR3 (aa)
499 GIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEGDYYC BCMA-48 VL FR3 (aa)
500 GIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEAAYYC BCMA-49 VL FR3 (aa)
501 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVAVYYC BCMA-51 VL FR3 (aa)
502 FGPGTRLDIK BCMA-25 VL FR4 (aa)
503 FGXGTKLTVL BCMA-29 VL FR4 (aa)
504 FGQGTKLDIK BCMA-31、-34 VL FR4 (aa)
505 FGTGTKLDIK BCMA-35 VL FR4 (aa)
506 FGGGTKVDIK BCMA-42 VL FR4 (aa)
507 SYWIG BCMA-52 CDR-H1 (aa) - Kabat編號
508 FGQGTKVEIK BCMA-24、-28、-51 VL FR4 (aa)
509 GFTFGDYAMH BCMA-30 CDR-H1 (aa) AbM編號
510 GISWNSGSIX BCMA-28 CDR-H2 (aa) AbM編號
511 YISGSGSTIY BCMA-33 CDR-H2 (aa) AbM編號
512 YISSSGNTIY BCMA-41 CDR-H2 AbM編號
513 IIYPGDSDTRYSPSFQG BCMA-52 CDR-H2 (aa) - Kabat編號
514 SWNSG BCMA-28 CDR-H2 (aa) Chothia編號
515 SGSGST BCMA-33 CDR-H2 (aa) Chothia編號
516 SSSGNT BCMA-41 CDR-H2 Chothia編號
517 YSGSFDN BCMA-52 CDR-H3 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
518 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIWGQGTMVTVSS BCMA-24 VH鏈(aa)
519 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSS BCMA-25、-31、-44、-51 VH鏈(aa)
520 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCVASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKGGLGITPYYFDYWGQGTLVTVSS BCMA-27 VH鏈(aa)
521 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIXYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIGGQGTMVTVSS BCMA-28 VH鏈(aa)
522 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIWGQGTMVTVSS BCMA-29、-39 VH鏈(aa)
523 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFGDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLDPDDAFDIWGQGTMVTVSS BCMA-30 VH鏈(aa)
524 QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSS BCMA-32、-49 VH鏈(aa)
525 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISGSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREADSSADYWGQGTLVNVSS BCMA-33 VH鏈(aa)
526 TGQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPDYDPDAFDIWGQGTMVTVSS BCMA-34 VH鏈(aa)
527 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYDDYWGQGTLVTVSS BCMA-35 VH鏈(aa)
528 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSS BCMA-36、38 VH鏈(aa)
529 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSS BCMA-37 VH鏈(aa)
530 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGNTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYVDDYWGQGTLVTVSS BCMA-41 VH鏈(aa)
531 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSS BCMA-42 VH鏈(aa)
532 GYSFTSY BCMA-52 CDR-H1 (aa) - Chothia編號
533 QVQLLESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGDSPSPGTTPKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWRQGTMVTVSS BCMA-47 VH鏈(aa)
534 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWGSTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAIYHCQQYISLPWTFGQGTKVEIK BCMA-24 VL鏈(aa)
535 DIQMTQSPAFLSASVGDRVTVTCRASQGISNYLAWYQQKPGNAPRLLIYSASTLQSGVPSRFRGTGYGTEFSLTIDSLQPEDFATYYCQQSYTSRQTFGPGTRLDIK BCMA-25 VL鏈(aa)
536 SYVLTQPPSVSVAPGQTARITCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHLWDRSRDHYVFGTGTKLTVL BCMA-26 VL鏈(aa)
537 DIVMTQSPLSLSVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPPWTFGQGTKVEIK BCMA-28 VL鏈(aa)
538 QPVLTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNLVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASPTISGLQAEDEADYYCCSYAGSSTSRDVFGXGTKLTVL BCMA-29 VL鏈(aa)
539 EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQPIRSNLAWYQQKPGQAPKLLIYSASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEHEDFAVYYRRHYAPLTFGGGTKVEIK BCMA-30 VL鏈(aa)
540 DVVMTQSPDSLAVSLGERATISCKSSQSVLNSSNNKNYVAWYKQKPGQPPKLVISWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPYTFGQGTKLDIK BCMA-31 VL鏈(aa)
541 QTVVTQPPSVSVAPGQTARITCGGNNIGSKGVHWYRQRPGQAPEVVIYDDSDRPSGVPDRFSGSNSGNTATLTVRGVEAGDEADYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-32 VL鏈(aa)
542 EIVMTQSPATLSLSPGDRATLSCRASQSISNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPYTFGQGTKLDIK BCMA-34 VL鏈(aa)
543 NFMLTQPPSVSVAPGQTARITCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHLWDRSRDHYVFGTGTKLDIK BCMA-35 VL鏈(aa)
544 QSVLTQEPSLTVSPGETVTLTCGSSTGPVTSAHSPSWFQKKPGQAPTTLIYETTNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYYCLLSSGDARMVFGGGTKLTVL BCMA-36 VL鏈(aa)
545 QLVLTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTNGHSPYWFQQKPGQAPRTLIYDTTNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEAEYYCSLSHAGDRVFFGGGTKLTVL BCMA-37 VL鏈(aa)
546 QAVLTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTNGHSPYWFQQKPGQAPRTLIYDTNNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYFCLLSYSDARLAFGGGTKLTVL BCMA-38 VL鏈(aa)
547 DIQXTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRYELXWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFALTIRSLQPEDFATYYCLQHNSYPLTFGRGTKLEIK BCMA-39 VL鏈(aa)
548 QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVSKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCCSYGGSRSYVFGTGTKLTVL BCMA-40 VL鏈(aa)
549 QPVLTQPPSVSGTPGQRVTIPCSGSSSNIGGNSVDWFQEVPGTAPKLLIYANDRRPSGVPDRFSGTKSGTSASLAIRGLQSDDDAHYYCESWDDALNGHVFGGGTKLTVL BCMA-41 VL鏈(aa)
550 DIQMTQSPSLVSASVGDRVTITCRASQGIGNGLAWYQQKPGKAPKLLLFAASRLESGVPSRFSGSRSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQQYVEDALTFGGGTKVDIK BCMA-42 VL鏈(aa)
551 YPGDSD BCMA-52 CDR-H2 (aa) - Chothia編號
552 DVVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQNLLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSSPYTFGQGTKLEIK BCMA-44 VL鏈(aa)
553 AIRMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIGRSLAWYKQKPGGVPQLLIHDASSLRSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQSEDSATYHCQQLNGYPWTFGQGTKVDIK BCMA-45 VL鏈(aa)
554 QAVLTQPPSVSVAPGKTATITCGGNNIGSKSVHWYQRKPGQGPVVVIQYDTDRPSGIPERFSGSKSGDTASLTISGVEAGDEADYYCQLWDSDSDDFAFGTGTKLTVL BCMA-47 VL鏈(aa)
555 QPVLTQPPSVSVAPGKTATITCGGNNIGSKSVHWYQRKPGQGPVVVIQYDTDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEGDYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-48 VL鏈(aa)
556 LPVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGDQIGRKSVHWYQQKPGQAPVLVMSYDSDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEAAYYCQVWDSSTGQYVVFGGGTKLTVL BCMA-49 VL鏈(aa)
557 AIQLTQSPSTLSASVGDRVAITCRASQNIGDWLAWYQQKPGKAPKLLIFGASILESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVAVYYCQKYDGAPPWTFGQGTKVEIK BCMA-51 VL鏈(aa)
558 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWGSTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAIYHCQQYISLPWTFGQGTKVEIK BCMA-24 scFv序列(aa)
559 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPAFLSASVGDRVTVTCRASQGISNYLAWYQQKPGNAPRLLIYSASTLQSGVPSRFRGTGYGTEFSLTIDSLQPEDFATYYCQQSYTSRQTFGPGTRLDIK BCMA-25 scFv序列(aa)
560 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSSYVLTQPPSVSVAPGQTARITCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHLWDRSRDHYVFGTGTKLTVL BCMA-26 scFv序列(aa)
561 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCVASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKGGLGITPYYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGGKTVNWFRQVPGTAPQLLIYSNDQRPSGVPDRFSGSKSGSSASLDISGLQSEDEAYYYCGSWDDSLNAWVFGGETKLTVL BCMA-27 scFv序列(aa)
562 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIXYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIGGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPLSLSVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPPWTFGQGTKVEIK BCMA-28 scFv序列(aa)
563 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNLVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASPTISGLQAEDEADYYCCSYAGSSTSRDVFGXGTKLTVL BCMA-29 scFv序列(aa)
564 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFGDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLDPDDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQPIRSNLAWYQQKPGQAPKLLIYSASTRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEHEDFAVYYRRHYAPLTFGGGTKVEIK BCMA-30 scFv序列(aa)
565 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPDSLAVSLGERATISCKSSQSVLNSSNNKNYVAWYKQKPGQPPKLVISWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPYTFGQGTKLDIK BCMA-31 scFv序列(aa)
566 QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQTVVTQPPSVSVAPGQTARITCGGNNIGSKGVHWYRQRPGQAPEVVIYDDSDRPSGVPDRFSGSNSGNTATLTVRGVEAGDEADYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-32 scFv序列(aa)
567 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISGSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREADSSADYWGQGTLVNVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSVSVAPGKTAMITCGGNNIGFKGVQWYQQKTGQAPVLVVYDDSDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSASDHWVFGGGTKLTVL BCMA-33 scFv序列(aa)
568 TGQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPDYDPDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGDRATLSCRASQSISNYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPYTFGQGTKLDIK BCMA-34 scFv序列(aa)
569 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSNFMLTQPPSVSVAPGQTARITCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHLWDRSRDHYVFGTGTKLDIK BCMA-35 scFv序列(aa)
570 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSVLTQEPSLTVSPGETVTLTCGSSTGPVTSAHSPSWFQKKPGQAPTTLIYETTNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYYCLLSSGDARMVFGGGTKLTVL BCMA-36 scFv序列(aa)
571 EVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKSSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQLVLTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTNGHSPYWFQQKPGQAPRTLIYDTTNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEAEYYCSLSHAGDRVFFGGGTKLTVL BCMA-37 scFv序列(aa)
572 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVDGDYVDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAVLTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTNGHSPYWFQQKPGQAPRTLIYDTNNRHSWTPARFSGSLLGGKAALTLSGAQPEDEADYFCLLSYSDARLAFGGGTKLTVL BCMA-38 scFv序列(aa)
573 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEWVSGISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLGPPYGDDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQXTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRYELXWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFALTIRSLQPEDFATYYCLQHNSYPLTFGRGTKLEIK BCMA-39 scFv序列(aa)
574 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYTEDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVSKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCCSYGGSRSYVFGTGTKLTVL BCMA-40 scFv序列(aa)
575 QVQLVQSGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGNTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYVDDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSVSGTPGQRVTIPCSGSSSNIGGNSVDWFQEVPGTAPKLLIYANDRRPSGVPDRFSGTKSGTSASLAIRGLQSDDDAHYYCESWDDALNGHVFGGGTKLTVL BCMA-41 scFv序列(aa)
576 EVQLLESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSLVSASVGDRVTITCRASQGIGNGLAWYQQKPGKAPKLLLFAASRLESGVPSRFSGSRSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQQYVEDALTFGGGTKVDIK BCMA-42 scFv序列(aa)
577 GYSFTSYWIG BCMA-52 CDR-H1 (aa) - AbM編號
578 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQNLLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSSPYTFGQGTKLEIK BCMA-44 scFv序列(aa)
579 QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIGRSLAWYKQKPGGVPQLLIHDASSLRSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQSEDSATYHCQQLNGYPWTFGQGTKVDIK BCMA-45 scFv序列(aa)
580 QVQLLESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGDSPSPGTTPKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWRQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQAVLTQPPSVSVAPGKTATITCGGNNIGSKSVHWYQRKPGQGPVVVIQYDTDRPSGIPERFSGSKSGDTASLTISGVEAGDEADYYCQLWDSDSDDFAFGTGTKLTVL BCMA-47 scFv序列(aa)
581 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQPVLTQPPSVSVAPGKTATITCGGNNIGSKSVHWYQRKPGQGPVVVIQYDTDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEGDYYCQVWDSSSDHWVFGGGTKLTVL BCMA-48 scFv序列(aa)
582 QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSLPVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGDQIGRKSVHWYQQKPGQAPVLVMSYDSDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEAAYYCQVWDSSTGQYVVFGGGTKLTVL BCMA-49 scFv序列(aa)
583 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFRQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSAIQLTQSPSTLSASVGDRVAITCRASQNIGDWLAWYQQKPGKAPKLLIFGASILESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVAVYYCQKYDGAPPWTFGQGTKVEIK BCMA-51 scFv序列(aa)
584 CAGGTGCAGCTGGTGCAATCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAATACCATATACTACGCAGACTCTGTAAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAAAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAAGTGGACGGTGACTACGTCGATGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGCGGTTCAGGCGGAGGTGGCTCTGGCGGTGGCGGATCGCAGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCCCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAGGTAACTCTGTAGACTGGTTCCAGGAGGTCCCAGGGACGGCCCCCAAACTCCTCATCTACGCTAATGATCGGCGGCCCTCGGGTGTCCCTGACCGCTTCTCTGGCACCAAGTCGGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGGGGGCTCCAGTCTGACGATGACGCTCATTATTACTGTGAATCCTGGGACGATGCCCTGAACGGTCACGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA BCMA-41 scFv序列(nt)
585 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDYSINWVKRAPGKGLKWMGWINTETREPAYAYDFRGRFAFSLETSASTAYLQINNLKYEDTATYFCALDYSYAMDYWGQGTSVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIHWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIK BCMA-C1 VH-VL scFv (aa)
586 DVVMTQSHRFMSTSVGDRVSITCRASQDVNTAVSWYQQKPGQSPKLLIFSASYRYTGVPDRFTGSGSGADFTLTISSVQAEDLAVYYCQQHYSTPWTFGGGTKLDIKGGGGSGGGGSGGGGSQIQLVQSGPDLKKPGETVKLSCKASGYTFTNFGMNWVKQAPGKGFKWMAWINTYTGESYFADDFKGRFAFSVETSATTAYLQINNLKTEDTATYFCARGEIYYGYDGGFAYWGQGTLVTVSA BCMA-C2 VL-VH scFv (aa)
587 IIYPGDSDTR BCMA-52 CDR-H2 (aa) - AbM編號
588 gaagtgcagctggtgcagtctggcgccgaagtgaagaagcctggcgagagcctgaagatcagctgcaaaggcagcggctacagcttcaccagctactggatcggctgggtccgacagatgcctggcaaaggccttgagtggatgggcatcatctaccccggcgacagcgacaccagatacagccctagctttcagggccacgtgaccatcagcgccgacaagtctatcagcaccgcctacctgcagtggtccagcctgaaggcctctgacaccgccatgtactactgcgccagatactctggcagcttcgacaattggggccagggcacactggtcaccgtgtccagc BCMA-52 VH鏈(nt) (O/SSE)
589 SGTSSNIGSHSVN BCMA-52 CDR-L1 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
590 TNNQRPS BCMA-52 CDR-L2 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
591 AAWDGSLNGLV BCMA-52 CDR-L3 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
592 tcctatgagctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatgtcttgttctggaaccagctccaacatcggaagtcactctgtaaactggtaccagcagctcccaggaacggcccccaaactcctcatctatactaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtggcctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatggcagcctgaatggtctggtattcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt BCMA-52 VL鏈(nt)
593 DYYVY BCMA-55 CDR-H1 (aa) - Kabat編號
594 WINPNSGGTNYAQKFQG BCMA-55 CDR-H2 (aa) - Kabat編號
595 SQRDGYMDY BCMA-55 CDR-H3 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
596 GYTFIDY BCMA-55 CDR-H1 (aa) - Chothia編號
597 NPNSGG BCMA-55 CDR-H2 (aa) - Chothia編號
598 GYTFIDYYVY BCMA-55 CDR-H1 (aa) - AbM編號
599 WINPNSGGTN BCMA-55 CDR-H2 (aa) - AbM編號
600 agctatgagctgacacagcctccaagcgcctctggcacacctggacagcgagtgacaatgagctgtagcggcaccagcagcaacatcggcagccacagcgtgaactggtatcagcagctgcctggcacagcccctaaactgctgatctacaccaacaaccagcggcctagcggcgtgcccgatagattttctggcagcaagagcggcacaagcgccagcctggctatttctggactgcagagcgaggacgaggccgactattattgtgccgcctgggacggctctctgaacggccttgtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctggga BCMA-52 VL鏈(nt) (O/SSE)
601 TGTSSDVG BCMA-55 CDR-L1 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
602 EDSKRPS BCMA-55 CDR-L2 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
603 SSNTRSSTLV BCMA-55 CDR-L3 (aa) - Kabat、Chothia及AbM編號
604 GYSFTSYW BCMA-52 CDR-H1 (aa)
605 IYPGDSDT BCMA-52 CDR-H2 (aa)
606 ARYSGSFDN BCMA-52 CDR-H3 (aa)
607 SSNIGSHS BCMA-52 CDR-L1 (aa)
608 TNN BCMA-52 CDR-L2 (aa)
609 EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGHVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYSGSFDNWGQGTLVTVSS BCMA-52 VH鏈(aa)
610 SYELTQPPSASGTPGQRVTMSCSGTSSNIGSHSVNWYQQLPGTAPKLLIYTNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNGLVFGGGTKLTVLG BCMA-52 VL鏈(aa)
611 GYTFIDYY BCMA-55 CDR-H1 (aa)
612 INPNSGGT BCMA-55 CDR-H2 (aa)
613 ARSQRDGYMDY BCMA-55 CDR-H3 (aa)
614 ISCTGTSSD BCMA-55 CDR-L1 (aa)
615 EDS BCMA-55 CDR-L2 (aa)
616 tcaattggtacgtgg 所預測之剪接供體位點
617 EVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSS BCMA-55 VH鏈(aa)
618 QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLG BCMA-55 VL鏈(aa)
619 atggtgctgcagacccaggtgttcatcagcctgctgctgtggatctccggagcatacgga 人類IgG-κ信號序列(nt)
620 MVLQTQVFISLLLWISGAYG 人類IgG-κ信號肽(aa)
621 gaatctaagtacggaccgccctgccctccctgccctgctcctcctgtggctggaccaagcgtgttcctgtttccacctaagcctaaagataccctgatgatttcccgcacacctgaagtgacttgcgtggtcgtggacgtgagccaggaggatccagaagtgcagttcaactggtacgtggacggcgtggaagtccacaatgctaagactaaaccccgagaggaacagtttcagtcaacttaccgggtcgtgagcgtgctgaccgtcctgcatcaggattggctgaacgggaaggagtataagtgcaaagtgtctaataagggactgcctagctccatcgagaaaacaattagtaaggcaaaagggcagcctcgagaaccacaggtgtataccctgccccctagccaggaggaaatgaccaagaaccaggtgtccctgacatgtctggtcaaaggcttctatccaagtgacatcgccgtggagtgggaatcaaatgggcagcccgagaacaattacaagaccacaccacccgtgctggactctgatggaagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctcgctggcaggagggcaacgtgttctcttgcagtgtcatgcacgaagccctgcacaatcattatacacagaagtcactgagcctgtccctgggcaaa IgG4/IgG2鉸鏈- IgG2/IgG4 CH 2- IgG4 CH 3間隔子(nt)
622 gagtctaaatacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaag 經最佳化之SSE IgG4/IgG2鉸鏈- IgG2/IgG4 CH 2- IgG4 CH 3間隔子(nt)
623 atgttttgggtgctggtcgtggtcggaggggtgctggcctgttacagcctgctggtgacagtcgctttcatcatcttctgggtg CD28跨膜域(nt)
624 MFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV CD28跨膜域(aa)
625 aagcgggggagaaagaaactgctgtatattttcaaacagccctttatgagacctgtgcagactacccaggaggaagacggatgcagctgtaggtttcccgaggaagaggaaggaggctgtgagctg 4-1BB源性細胞內共同信號傳導序列(nt)
626 KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL 4-1BB源性細胞內共同信號傳導序列(aa)
627 agagtcaagttttccaggtccgccgacgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctgtacaacgagctgaacctgggcagaagggaagagtacgacgtcctggataagcggagaggccgggaccctgagatgggcggcaagcctcggcggaagaacccccaggaaggcctgtataacgaactgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggcatgaagggcgagcggaggcggggcaagggccacgacggcctgtatcagggcctgtccaccgccaccaaggatacctacgacgccctgcacatgcaggccctgcccccaagg CD3-ζ源性細胞內信號傳導域(nt)
628 RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR CD3-ζ源性細胞內信號傳導域(aa)
629 attgaagttatgtatcctcctccttacctagacaatgagaagagcaatggaaccattatccatgtgaaagggaaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagccc CD28胞外域間隔子(nt)
630 IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP CD28胞外域間隔子(aa)
631 EGRGSLLTCGDVEENPGP T2A肽(aa)
632 atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgatcccacgcaaagtgtgtaacggaataggtattggtgaatttaaagactcactctccataaatgctacgaatattaaacacttcaaaaactgcacctccatcagtggcgatctccacatcctgccggtggcatttaggggtgactccttcacacatactcctcctctggatccacaggaactggatattctgaaaaccgtaaaggaaatcacagggtttttgctgattcaggcttggcctgaaaacaggacggacctccatgcctttgagaacctagaaatcatacgcggcaggaccaagcaacatggtcagttttctcttgcagtcgtcagcctgaacataacatccttgggattacgctccctcaaggagataagtgatggagatgtgataatttcaggaaacaaaaatttgtgctatgcaaatacaataaactggaaaaaactgtttgggacctccggtcagaaaaccaaaattataagcaacagaggtgaaaacagctgcaaggccacaggccaggtctgccatgccttgtgctcccccgagggctgctggggcccggagcccagggactgcgtctcttgccggaatgtcagccgaggcagggaatgcgtggacaagtgcaaccttctggagggtgagccaagggagtttgtggagaactctgagtgcatacagtgccacccagagtgcctgcctcaggccatgaacatcacctgcacaggacggggaccagacaactgtatccagtgtgcccactacattgacggcccccactgcgtcaagacctgcccggcaggagtcatgggagaaaacaacaccctggtctggaagtacgcagacgccggccatgtgtgccacctgtgccatccaaactgcacctacggatgcactgggccaggtcttgaaggctgtccaacgaatgggcctaagatcccgtccatcgccactgggatggtgggggccctcctcttgctgctggtggtggccctggggatcggcctcttcatgtga 截短之EGFR (tEGFR)序列(nt)
633 atgctgctcctcgtgacaagcctgctcctgtgtgaactccctcatccagcttttctgctcattcctcggaaagtgtgcaacggcatcggcatcggagagttcaaggacagcctgagcatcaatgccaccaacatcaagcacttcaagaattgcaccagcatcagcggcgacctgcacattctgcctgtggcctttagaggcgacagcttcacccacacacctccactggatccccaagagctggatatcctgaaaaccgtgaaagagattaccggattcctcctgatccaagcctggccagagaacagaaccgatctgcacgccttcgagaacctcgagatcatcagaggccggaccaaacagcacggccagtttagcctggctgtggtgtctctgaacatcaccagtctgggcctgagaagcctgaaagaaatctccgacggcgacgtgatcatctccggaaacaagaacctgtgctacgccaacaccatcaactggaagaagctgttcggcacctccggccagaaaacaaagatcatctctaaccggggcgagaacagctgcaaggccaccggacaagtttgtcacgccctgtgtagccctgaaggctgttggggacccgaacctagagactgtgtgtcctgccggaatgtgtcccggggcagagaatgtgtggataagtgcaacctgctggaaggcgagccccgcgagtttgtggaaaacagcgagtgcatccagtgtcaccccgagtgtctgccccaggccatgaacattacatgcaccggcagaggccccgacaactgtattcagtgcgcccactacatcgacggccctcactgcgtgaaaacatgtccagctggcgtgatgggagagaacaacaccctcgtgtggaagtatgccgacgccggacatgtgtgccacctgtgtcaccctaattgcacctacggctgtaccggacctggcctggaaggatgccctacaaacggccctaagatccccagcattgccaccggaatggttggagccctgctgcttctgttggtggtggccctcggaatcggcctgttcatgtga 截短之EGFR (tEGFR)序列(nt) (O/SSE)
634 MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIPRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFM 截短之EGFR (tEGFR)序列(aa)
635 ggatctgcgatcgctccggtgcccgtcagtgggcagagcgcacatcgcccacagtccccgagaagttggggggaggggtcggcaattgaaccggtgcctagagaaggtggcgcggggtaaactgggaaagtgatgtcgtgtactggctccgcctttttcccgagggtgggggagaaccgtatataagtgcagtagtcgccgtgaacgttctttttcgcaacgggtttgccgccagaacacagctgaagcttcgaggggctcgcatctctccttcacgcgcccgccgccctacctgaggccgccatccacgccggttgagtcgcgttctgccgcctcccgcctgtggtgcctcctgaactgcgtccgccgtctaggtaagtttaaagctcaggtcgagaccgggcctttgtccggcgctcccttggagcctacctagactcagccggctctccacgctttgcctgaccctgcttgctcaactctacgtctttgtttcgttttctgttctgcgccgttacagatccaagctgtgaccggcgcctac 具有HTLV1增強子之EF1α啟動子
636 aatcaacctctggattacaaaatttgtgaaagattgactggtattcttaactatgttgctccttttacgctatgtggatacgctgctttaatgcctttgtatcatgctattgcttcccgtatggctttcattttctcctccttgtataaatcctggttgctgtctctttatgaggagttgtggcccgttgtcaggcaacgtggcgtggtgtgcactgtgtttgctgacgcaacccccactggttggggcattgccaccacctgtcagctcctttccgggactttcgctttccccctccctattgccacggcggaactcatcgccgcctgccttgcccgctgctggacaggggctcggctgttgggcactgacaattccgtggtgttgtcggggaaatcatcgtcctttccttggctgctcgcctgtgttgccacctggattctgcgcgggacgtccttctgctacgtcccttcggccctcaatccagcggaccttccttcccgcggcctgctgccggctctgcggcctcttccgcgtcttcgccttcgccctcagacgagtcggatctccctttgggccgcctccccgc 土撥鼠肝炎病毒(WHP)轉錄後調控元件(WPRE)
637 QNEYF BCMA-52-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基1
638 CIPCQL BCMA-52-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基2
639 CQRYC BCMA-52-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基3
640 MLMAG BCMA-55-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基1
641 YFDSLL BCMA-55-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基2
642 QLRCSSNTPPL BCMA-55-scFV-mFc BCMA結合抗原決定基3
643 gaagtgcagctggtgcagtctggggctgagatgaagaagcctggggcctcactgaagctctcctgcaaggcttctggatacaccttcatcgactactatgtatactggatgcgacaggcccctggacaagggcttgagtccatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcagggcagggtcaccatgaccagggacacgtccatcagcacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacaccgccatgtattactgtgcgcgctcccagcgtgacggttacatggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca BCMA-55 VH鏈(nt)
644 gaagtgcagctggtgcagtctggcgccgagatgaagaaacctggcgcctctctgaagctgagctgcaaggccagcggctacaccttcatcgactactacgtgtactggatgcggcaggcccctggacagggactcgaatctatgggctggatcaaccccaatagcggcggcaccaattacgcccagaaattccagggcagagtgaccatgaccagagacaccagcatcagcaccgcctacatggaactgagccggctgagatccgacgacaccgccatgtactactgcgccagatctcagcgcgacggctacatggattattggggccagggaaccctggtcaccgtgtccagc BCMA-55 VH鏈(nt) (O/SSE)
645 caatctgccctgactcagcctgcctccgtgtctgcgtctcctggacagtcgatcgccatctcctgcactggaaccagcagtgacgttggttggtatcaacagcacccaggcaaagcccccaaactcatgatttatgaggacagtaagcggccctcaggggtttctaatcgcttctctggctccaagtctggcaacacggcctccctgaccatctctgggctccaggctgaggacgaggctgattattactgcagctcaaatacaagaagcagcactttggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtccta BCMA-55 VL鏈(nt)
646 cagtctgccctgacacagcctgccagcgttagtgctagtcccggacagtctatcgccatcagctgtaccggcaccagctctgacgttggctggtatcagcagcaccctggcaaggcccctaagctgatgatctacgaggacagcaagaggcccagcggcgtgtccaatagattcagcggcagcaagagcggcaacaccgccagcctgacaattagcggactgcaggccgaggacgaggccgattactactgcagcagcaacacccggtccagcacactggtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctg BCMA-55 VL鏈(nt) (O/SSE)
647 tcctatgagctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatgtcttgttctggaaccagctccaacatcggaagtcactctgtaaactggtaccagcagctcccaggaacggcccccaaactcctcatctatactaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtggcctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatggcagcctgaatggtctggtattcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggttctagaggtggtggtggtagcggcggcggcggctctggtggtggtggatccctcgagatggccgaggtgcagctggtgcagtctggagcagaggtgaaaaagcccggggagtctctgaagatctcctgtaagggttctggatacagctttaccagctactggatcggctgggtgcgccagatgcccgggaaaggcctggagtggatggggatcatctatcctggtgactctgataccagatacagcccgtccttccaaggccacgtcaccatctcagctgacaagtccatcagcactgcctacctgcagtggagcagcctgaaggcctcggacaccgccatgtattactgtgcgcgctactctggttctttcgataactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca BCMA-52 scFv
648 caatctgccctgactcagcctgcctccgtgtctgcgtctcctggacagtcgatcgccatctcctgcactggaaccagcagtgacgttggttggtatcaacagcacccaggcaaagcccccaaactcatgatttatgaggacagtaagcggccctcaggggtttctaatcgcttctctggctccaagtctggcaacacggcctccctgaccatctctgggctccaggctgaggacgaggctgattattactgcagctcaaatacaagaagcagcactttggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggttctagaggtggtggtggtagcggcggcggcggctctggtggtggtggatccctcgagatggccgaagtgcagctggtgcagtctggggctgagatgaagaagcctggggcctcactgaagctctcctgcaaggcttctggatacaccttcatcgactactatgtatactggatgcgacaggcccctggacaagggcttgagtccatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcagggcagggtcaccatgaccagggacacgtccatcagcacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacaccgccatgtattactgtgcgcgctcccagcgtgacggttacatggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca BCMA-55 scFv
649 ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK IgG4/IgG2鉸鏈- IgG2/IgG4 CH 2- IgG4 CH 3間隔子(aa)
650 ggatctgcgatcgctccggtgcccgtcagtgggcagagcgcacatcgcccacagtccccgagaagttggggggaggggtcggcaattgaaccggtgcctagagaaggtggcgcggggtaaactgggaaagtgatgtcgtgtactggctccgcctttttcccgagggtgggggagaaccgtatataagtgcagtagtcgccgtgaacgttctttttcgcaacgggtttgccgccagaacacagctgaagcttcgaggggctcgcatctctccttcacgcgcccgccgccctacctgaggccgccatccacgccggttgagtcgcgttctgccgcctcccgcctgtggtgcctcctgaactgcgtccgccgtctaggtaagtttaaagctcaggtcgagaccgggcctttgtccggcgctcccttggagcctacctagactcagccggctctccacgctttgcctgaccctgcttgctcaactctacgtctttgtttcgttttctgttctgcgccgttacagatccaagctgtgaccggcgcctacggctagcgcc 經修飾之EF1α啟動子
651 tttatttagtctccagaaaaaggggggaatgaaagaccccacctgtaggtttggcaagctaggatcaaggttaggaacagagagacagcagaatatgggccaaacaggatatctgtggtaagcagttcctgccccggctcagggccaagaacagttggaacagcagaatatgggccaaacaggatatctgtggtaagcagttcctgccccggctcagggccaagaacagatggtccccagatgcggtcccgccctcagcagtttctagagaaccatcagatgtttccagggtgccccaaggacctgaaatgaccctgtgccttatttgaactaaccaatcagttcgcttctcgcttctgttcgcgcgcttctgctccccgagctcaataaaagagccca MND啟動子
652 agagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga CD3-ζ源性細胞內信號傳導域(nt)
653 GSGEGRGSLLTCGDVEENPGP T2A肽(aa)
654 LEGGGEGRGSLLTCGDVEENPGPR T2A肽(aa)
655 ATNFSLLKQAGDVEENPGP P2A肽(aa)
656 GSGATNFSLLKQAGDVEENPGP P2A肽(aa)
657 QCTNYALLKLAGDVESNPGP E2A肽(aa)
658 GSGQCTNYALLKLAGDVESNPGP E2A肽(aa)
659 VKQTLNFDLLKLAGDVESNPGP F2A肽(aa)
660 GSGVKQTLNFDLLKLAGDVESNPGP F2A肽(aa)
661 agtctaaatacggac 經最佳化之剪接供體位點
662 tcaactggtatgtgg 經最佳化之剪接供體位點
663 accatctccaaggcc 經最佳化之剪接供體位點
664 gccccaggtttacac 經最佳化之剪接供體位點
665 tcagcagatccgccg 經最佳化之剪接供體位點
666 ctcctgtgtgaactc 經最佳化之剪接供體位點
667 tcggaaagtgtgcaa 經最佳化之剪接供體位點
668 cagcacggccagttt 經最佳化之剪接供體位點
669 aaccggggcgagaac 經最佳化之剪接供體位點
670 ctggaaggcgagccc 經最佳化之剪接供體位點
671 tgttcatgtgagcgg 經最佳化之剪接供體位點 (編碼區之外的最後4個nt)
672 cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa 經最佳化之剪接受體位點
673 gggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgc 經最佳化之剪接受體位點
674 cggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggcct 經最佳化之剪接受體位點
675 gctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcct 經最佳化之剪接受體位點
676 acacctccactggatccccaagagctggatatcctgaaaac 經最佳化之剪接受體位點
677 accggattcctcctgatccaagcctggccagagaacagaac 經最佳化之剪接受體位點
678 acggccagtttagcctggctgtggtgtctctgaacatcacc 經最佳化之剪接受體位點
679 aggagtaagaggagcaggctcctgcacagtgactacatgaacatgactccccgccgccccgggcccacccgcaagcattaccagccctatgccccaccacgcgacttcgcagcctatcgctcc CD28胞內域(nt)
680 RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS CD28胞內域(aa)
681 aagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctg 4-1BB源性細胞內共同信號傳導序列(nt)
682 atggtgctgcagacccaggtgttcatcagcctgctgctgtggatctctggcgcctacggc 人類IgG-κ信號序列(nt)
683 atggtgctgcagacccaggtgttcatcagcctgctgctgtggatctctggcgcctatgga 人類IgG-κ信號序列(nt)
684 atggtgctgcagacacaggtgttcatctccctgctgctgtggatctctggagcatacgga 人類IgG-κ信號序列(nt)
685 atggtgctgcagacacaggtgttcatcagcctgctgctgtggatctccggagcatacgga 人類IgG-κ信號序列(nt)
686 ctcgagggcggcggagagggcagaggaagtcttctaacatgcggtgacgtggaggagaatcccggccctagg T2A肽(nt)
687 cttgaaggtggtggcgaaggcagaggcagcctgcttacatgcggagatgtggaagagaaccccggacctaga T2A肽(nt)
688 atgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtc CD28跨膜域(nt)
689 cgtctaggtaagttt 所預測之剪接供體位點
690 gaccaaggtgaccgt 所預測之剪接供體位點
691 tgcactggtaccagc 所預測之剪接供體位點
692 taaactggtaccagc 所預測之剪接供體位點
693 atctcctgtaagggt 所預測之剪接供體位點
694 ggtcaaggtactctg 所預測之剪接供體位點
695 gaggacagtaagcgg 所預測之剪接供體位點
696 ggtcaaggtactctg 所預測之剪接供體位點
697 tgcctccgtgtctgc 所預測之剪接供體位點
698 caccaaggtgaccgt 所預測之剪接供體位點
699 tgaactggtatcagc 所預測之剪接供體位點
700 atctcttgaaatggt 所預測之剪接供體位點
701 ggccagggcacactg 所預測之剪接供體位點
702 gaggacagcaagagg 所預測之剪接供體位點
703 ggccagggaaccctg 所預測之剪接供體位點
704 tgccagcgttagtgc 所預測之剪接供體位點
705 aatctaagtacggac 所預測之剪接供體位點
706 tcaactggtacgtgg 所預測之剪接供體位點
707 acaattagtaaggca 所預測之剪接供體位點
708 accacaggtgtatac 所預測之剪接供體位點
709 tttccaggtccgccg 所預測之剪接供體位點
710 ctgctctgtgagtta 所預測之剪接供體位點
711 acgcaaagtgtgtaa 所預測之剪接供體位點
712 caacatggtcagttt 所預測之剪接供體位點
713 aacagaggtgaaaac 所預測之剪接供體位點
714 ctggagggtgagcca 所預測之剪接供體位點
715 gaggtgcagctggtggagtccggaggaggcctggtgaagccaggaggctccctgaggctgtcttgcgcagccagcggcttcacctttagcgactactatatgtcctggatcagacaggcacctggcaagggcctggagtgggtgagctacatcagctcctctggctccacaatctactatgccgactctgtgaagggccggtttaccatcagcagagataacgccaagaattccctgtatctgcagatgaacagcctgagggccgaggacacagccgtgtactattgcgccaaggtggacggcgattacaccgaggattattggggccagggcacactggtgaccgtgagctccggcggcggcggctctggaggaggaggcagcggcggaggaggctcccagtctgccctgacacagccagccagcgtgtccggctctcccggacagtccatcacaatctcttgtaccggctctagctccgacgtgggcaagtacaacctggtgtcctggtatcagcagccccctggcaaggcccctaagctgatcatctacgatgtgaacaagaggccatctggcgtgagcaatcgcttcagcggctccaagtctggcaataccgccacactgaccatcagcggcctgcagggcgacgatgaggcagattactattgttctagctacggcggcagcagatcctacgtgttcggcacaggcaccaaggtgaccgtgctg BCMA-23 scFv (nt)
716 gaggtgcagctggtgcagagcggaggaggcctggtgcagcctggcaggtccctgcgcctgtcttgcaccgccagcggcttcacatttggcgactatgccatgtcctggttcaggcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgggctttatccgctctaaggcctacggcggcaccacagagtatgccgccagcgtgaagggccggttcaccatcagccgggacgactctaagagcatcgcctacctgcagatgaactctctgaagaccgaggacacagccgtgtactattgcgcagcatggagcgccccaaccgattattggggccagggcaccctggtgacagtgagctccggcggcggcggctctggaggaggaggaagcggaggaggaggatccgacatccagatgacacagtcccctgcctttctgtccgcctctgtgggcgatagggtgaccgtgacatgtcgcgcctcccagggcatctctaactacctggcctggtatcagcagaagcccggcaatgcccctcggctgctgatctacagcgcctccaccctgcagagcggagtgccctcccggttcagaggaaccggctatggcacagagttttctctgaccatcgacagcctgcagccagaggatttcgccacatactattgtcagcagtcttacaccagccggcagacatttggccccggcacaagactggatatcaag BCMA-25 scFV(nt)
717 gaggtgcagctggtgcagagcggaggaggcctggtgcagcctggcaggtccctgcgcctgtcttgcaccgccagcggcttcacatttggcgactatgccatgtcctggttcaagcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgggctttatccgctctaaggcctacggcggcaccacagagtatgccgccagcgtgaagggccggttcaccatcagccgggacgactctaagagcatcgcctacctgcagatgaactctctgaagaccgaggacacagccgtgtactattgcgcagcatggagcgccccaaccgattattggggccagggcaccctggtgacagtgagctccggcggcggcggctctggaggaggaggaagcggaggaggaggatccgacatccagatgacacagtcccctgcctttctgtccgcctctgtgggcgatagggtgaccgtgacatgtcgcgcctcccagggcatctctaactacctggcctggtatcagcagaagcccggcaatgcccctcggctgctgatctacagcgcctccaccctgcagagcggagtgccctcccggttcagaggaaccggctatggcacagagttttctctgaccatcgacagcctgcagccagaggatttcgccacatactattgtcagcagtcttacaccagccggcagacatttggccccggcacaagactggatatcaag BCMA-25 scFV(nt) (O/SSE)
718 gaggtgcagctggtggagtccggaggaggcctggtgaagccaggaggctctctgaggctgagctgcgcagcctccggcttcaccttttctgactactatatgagctggatcaggcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgtcttacatcagctcctctggcagcacaatctactatgccgactccgtgaagggcaggttcaccatctctcgcgataacgccaagaatagcctgtatctgcagatgaactccctgcgggccgaggatacagccgtgtactattgcgccaaggtggacggccccccttcctttgatatctggggccagggcacaatggtgaccgtgagctccggaggaggaggatccggcggaggaggctctggcggcggcggctctagctatgtgctgacccagccaccatccgtgtctgtggcacctggacagacagcaaggatcacctgtggagcaaacaatatcggcagcaagtccgtgcactggtaccagcagaagcctggccaggccccaatgctggtggtgtatgacgatgacgatcggcccagcggcatccctgagagattttctggcagcaactccggcaataccgccacactgaccatctctggagtggaggcaggcgacgaggcagattacttctgtcacctgtgggaccggagcagagatcactacgtgttcggcacaggcaccaagctgaccgtgctg BCMA-26 scFV(nt)
719 gaggtgcagctggtggagtccggaggaggcctggtgaagccaggaggctctctgaggctgagctgcgcagcctccggcttcaccttttctgactactatatgagctggatcaggcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgtcttacatcagctcctctggcagcacaatctactatgccgactccgtgaagggcaggttcaccatctctcgcgataacgccaagaatagcctgtatctgcagatgaactccctgcgggccgaggatacagccgtgtactattgcgccaaggtggacggccccccttcctttgatatctggggccagggcacaatggtgaccgtgagctccggaggaggaggatccggcggaggaggctctggcggcggcggctctagctatgtgctgacccagccaccatccgtgtctgtggcacctggacagacagcaaggatcacctgtggagcaaacaatatcggcagcaagtccgtgcactggtaccagcagaagcctggccaggccccaatgctggtggtgtatgacgatgacgatcggcccagcggcatccctgagagattttctggcagcaactccggcaataccgccacactgaccatctctggagtggaggcaggcgacgaggcagattacttctgtcacctgtgggaccggagcagagatcactacgtgttcggcacaggcaccaagctgaccgtgctg BCMA-26 scFV(nt) (O/SSE)
720 tcttcatgtgagcgg 截短之標記物預測的剪接供體位點
721 tggctccgcctttttcccgagggtgggggagaaccgtatat 啟動子預測之剪接受體位點
722 tgaactgcgtccgccgtctaggtaagtttaaagctcaggtc 啟動子預測之剪接受體位點
723 ttctgttctgcgccgttacagatccaagctgtgaccggcgc 啟動子預測之剪接受體位點
724 ctactacatgagctggatccgccaggctccagggaaggggc BCMA-23預測之剪接受體位點
725 ggctgattattattgtagctcatatggaggtagtaggtctt BCMA-23預測之剪接受體位點
726 ctatgccatgtcctggttcaggcaggcaccaggcaagggcc BCMA-25預測之剪接受體位點
727 gtccgcctctgtgggcgatagggtgaccgtgacatgtcgcg BCMA-25預測之剪接受體位點
728 gtgggctttatccgctctaaggcctacggcggcaccacaga BCMA-25預測之剪接受體位點
729 gtgacatgtcgcgcctcccagggcatctctaactacctggc BCMA-25預測之剪接受體位點
730 tacagcgcctccaccctgcagagcggagtgccctcccggtt BCMA-25預測之剪接受體位點
731 ctggccatcagtggcctccagtctgaggatgaggctgatta BCMA-52預測之剪接受體位點
732 agatacagcccgtccttccaaggccacgtcaccatctcagc BCMA-52預測之剪接受體位點
733 cgaggctgattattactgcagctcaaatacaagaagcagca BCMA-55預測之剪接受體位點
734 gccctcaggggtttctaatcgcttctctggctccaagtctg BCMA-55預測之剪接受體位點
735 ctactatatgtcctggatcagacaggcacctggcaagggcc BCMA-23預測之剪接受體位點 (O/SSE)
736 ggcagattactattgttctagctacggcggcagcagatcct BCMA-23預測之剪接受體位點 (O/SSE)
737 ctatgccatgtcctggttcaagcaggcaccaggcaagggcc BCMA-25預測之剪接受體位點 (O/SSE)
738 ctggctatttctggactgcagagcgaggacgaggccgacta BCMA-52預測之剪接受體位點 (O/SSE)
739 agatacagccctagctttcagggccacgtgaccatcagcgc BCMA-52預測之剪接受體位點 (O/SSE)
740 cgaggccgattactactgcagcagcaacacccggtccagca BCMA-55預測之剪接受體位點 (O/SSE)
741 gcccagcggcgtgtccaatagattcagcggcagcaagagcg BCMA-55預測之剪接受體位點 (O/SSE)
742 aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc 間隔子預測之剪接受體位點
743 gggcaacgtgttctcttgcagtgtcatgcacgaagccctgc 間隔子預測之剪接受體位點
744 aggggtgctggcctgttacagcctgctggtgacagtcgctt CD28TM預測之剪接受體位點
745 gctgagagtcaagttttccaggtccgccgacgctccagcct 4-1BB/CD3ζ預測之剪接受體位點
746 actcctcctctggatccacaggaactggatattctgaaaac 截短之標記物預測的剪接受體位點
747 acagggtttttgctgattcaggcttggcctgaaaacaggac 截短之標記物預測的剪接受體位點
748 atggtcagttttctcttgcagtcgtcagcctgaacataaca 截短之標記物預測的剪接受體位點
749 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDISVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 人類IgG2 Fc (Uniprot P01859)
750 ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 人類IgG4 Fc (Uniprot P01861)
751 gaggtgcagctggtggagtccggaggaggcctggtgaagccaggaggctccctgaggctgtcttgcgcagccagcggcttcacctttagcgactactatatgtcctggatcagacaggcacctggcaagggcctggagtgggtgagctacatcagctcctctggctccacaatctactatgccgactctgtgaagggccggtttaccatcagcagagataacgccaagaattccctgtatctgcagatgaacagcctgagggccgaggacacagccgtgtactattgcgccaaggtggacggcgattacaccgaggattattggggccagggcacactggtgaccgtgagctccggcggcggcggctctggaggaggaggcagcggcggaggaggctcccagtctgccctgacacagccagccagcgtgtccggctctcccggacagtccatcacaatctcttgtaccggctctagctccgacgtgggcaagtacaacctggtgtcctggtatcagcagccccctggcaaggcccctaagctgatcatctacgatgtgaacaagaggccatctggcgtgagcaatcgcttcagcggctccaagtctggcaataccgccacactgaccatcagcggcctgcagggcgacgatgaggcagattactattgttctagctacggcggcagcagatcctacgtgttcggcacaggcaccaaggtgaccgtgctggaatctaagtacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
752 gaggtgcagctggtgcagagcggaggaggcctggtgcagcctggcaggtccctgcgcctgtcttgcaccgccagcggcttcacatttggcgactatgccatgtcctggttcaagcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgggctttatccgctctaaggcctacggcggcaccacagagtatgccgccagcgtgaagggccggttcaccatcagccgggacgactctaagagcatcgcctacctgcagatgaactctctgaagaccgaggacacagccgtgtactattgcgcagcatggagcgccccaaccgattattggggccagggcaccctggtgacagtgagctccggcggcggcggctctggaggaggaggaagcggaggaggaggatccgacatccagatgacacagtcccctgcctttctgtccgcctctgtgggcgatagggtgaccgtgacatgtcgcgcctcccagggcatctctaactacctggcctggtatcagcagaagcccggcaatgcccctcggctgctgatctacagcgcctccaccctgcagagcggagtgccctcccggttcagaggaaccggctatggcacagagttttctctgaccatcgacagcctgcagccagaggatttcgccacatactattgtcagcagtcttacaccagccggcagacatttggccccggcacaagactggatatcaaggagtctaaatacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
753 gaggtgcagctggtggagtccggaggaggcctggtgaagccaggaggctctctgaggctgagctgcgcagcctccggcttcaccttttctgactactatatgagctggatcaggcaggcaccaggcaagggcctggagtgggtgtcttacatcagctcctctggcagcacaatctactatgccgactccgtgaagggcaggttcaccatctctcgcgataacgccaagaatagcctgtatctgcagatgaactccctgcgggccgaggatacagccgtgtactattgcgccaaggtggacggccccccttcctttgatatctggggccagggcacaatggtgaccgtgagctccggaggaggaggatccggcggaggaggctctggcggcggcggctctagctatgtgctgacccagccaccatccgtgtctgtggcacctggacagacagcaaggatcacctgtggagcaaacaatatcggcagcaagtccgtgcactggtaccagcagaagcctggccaggccccaatgctggtggtgtatgacgatgacgatcggcccagcggcatccctgagagattttctggcagcaactccggcaataccgccacactgaccatctctggagtggaggcaggcgacgaggcagattacttctgtcacctgtgggaccggagcagagatcactacgtgttcggcacaggcaccaagctgaccgtgctggaatctaagtacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
754 agctatgagctgacacagcctccaagcgcctctggcacacctggacagcgagtgacaatgagctgtagcggcaccagcagcaacatcggcagccacagcgtgaactggtatcagcagctgcctggcacagcccctaaactgctgatctacaccaacaaccagcggcctagcggcgtgcccgatagattttctggcagcaagagcggcacaagcgccagcctggctatttctggactgcagagcgaggacgaggccgactattattgtgccgcctgggacggctctctgaacggccttgtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctgggatctagaggtggcggaggatctggcggcggaggaagcggaggcggcggatctcttgaaatggctgaagtgcagctggtgcagtctggcgccgaagtgaagaagcctggcgagagcctgaagatcagctgcaaaggcagcggctacagcttcaccagctactggatcggctgggtccgacagatgcctggcaaaggccttgagtggatgggcatcatctaccccggcgacagcgacaccagatacagccctagctttcagggccacgtgaccatcagcgccgacaagtctatcagcaccgcctacctgcagtggtccagcctgaaggcctctgacaccgccatgtactactgcgccagatactctggcagcttcgacaattggggccagggcacactggtcaccgtgtccagcgagtctaaatacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
755 cagtctgccctgacacagcctgccagcgttagtgctagtcccggacagtctatcgccatcagctgtaccggcaccagctctgacgttggctggtatcagcagcaccctggcaaggcccctaagctgatgatctacgaggacagcaagaggcccagcggcgtgtccaatagattcagcggcagcaagagcggcaacaccgccagcctgacaattagcggactgcaggccgaggacgaggccgattactactgcagcagcaacacccggtccagcacactggtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctgggatctagaggtggcggaggatctggcggcggaggaagcggaggcggcggatctcttgaaatggctgaagtgcagctggtgcagtctggcgccgagatgaagaaacctggcgcctctctgaagctgagctgcaaggccagcggctacaccttcatcgactactacgtgtactggatgcggcaggcccctggacagggactcgaatctatgggctggatcaaccccaatagcggcggcaccaattacgcccagaaattccagggcagagtgaccatgaccagagacaccagcatcagcaccgcctacatggaactgagccggctgagatccgacgacaccgccatgtactactgcgccagatctcagcgcgacggctacatggattattggggccagggaaccctggtcaccgtgtccagcgagtctaaatacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaagcggggcagaaagaagctgctctacatcttcaagcagcccttcatgcggcccgtgcagaccacacaagaggaagatggctgctcctgcagattccccgaggaagaagaaggcggctgcgagctgagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
756 cagtctgccctgacacagcctgccagcgttagtgctagtcccggacagtctatcgccatcagctgtaccggcaccagctctgacgttggctggtatcagcagcaccctggcaaggcccctaagctgatgatctacgaggacagcaagaggcccagcggcgtgtccaatagattcagcggcagcaagagcggcaacaccgccagcctgacaattagcggactgcaggccgaggacgaggccgattactactgcagcagcaacacccggtccagcacactggtttttggcggaggcaccaagctgacagtgctgggatctagaggtggcggaggatctggcggcggaggaagcggaggcggcggatctcttgaaatggctgaagtgcagctggtgcagtctggcgccgagatgaagaaacctggcgcctctctgaagctgagctgcaaggccagcggctacaccttcatcgactactacgtgtactggatgcggcaggcccctggacagggactcgaatctatgggctggatcaaccccaatagcggcggcaccaattacgcccagaaattccagggcagagtgaccatgaccagagacaccagcatcagcaccgcctacatggaactgagccggctgagatccgacgacaccgccatgtactactgcgccagatctcagcgcgacggctacatggattattggggccagggaaccctggtcaccgtgtccagcgagtctaaatacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaagatgttctgggtgctcgtggtcgttggcggagtgctggcctgttacagcctgctggttaccgtggccttcatcatcttttgggtcaggagtaagaggagcaggctcctgcacagtgactacatgaacatgactccccgccgccccgggcccacccgcaagcattaccagccctatgccccaccacgcgacttcgcagcctatcgctccagagtgaagttcagcagatccgccgacgctccagcctatcagcagggccaaaaccagctgtacaacgagctgaacctggggagaagagaagagtacgacgtgctggataagcggagaggcagagatcctgaaatgggcggcaagcccagacggaagaatcctcaagagggcctgtataatgagctgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggaatgaagggcgagcgcagaagaggcaagggacacgatggactgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggatacctatgacgcactgcacatgcaggccctgccacctaga 抗BMCA CAR
757 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGDYTEDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGKYNLVSWYQQPPGKAPKLIIYDVNKRPSGVSNRFSGSKSGNTATLTISGLQGDDEADYYCSSYGGSRSYVFGTGTKVTVLESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
758 EVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFGDYAMSWFKQAPGKGLEWVGFIRSKAYGGTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCAAWSAPTDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPAFLSASVGDRVTVTCRASQGISNYLAWYQQKPGNAPRLLIYSASTLQSGVPSRFRGTGYGTEFSLTIDSLQPEDFATYYCQQSYTSRQTFGPGTRLDIKESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
759 EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSYISSSGSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKVDGPPSFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSSYVLTQPPSVSVAPGQTARITCGANNIGSKSVHWYQQKPGQAPMLVVYDDDDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGVEAGDEADYFCHLWDRSRDHYVFGTGTKLTVLESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
760 SYELTQPPSASGTPGQRVTMSCSGTSSNIGSHSVNWYQQLPGTAPKLLIYTNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNGLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGHVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYSGSFDNWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
761 QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
762 QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR 抗BMCA CAR
763 ctttttcgcaacgggtttgc EF1a/HTLV啟動子正向引子
764 gatatcgaattcctgcagcc 恰處於WPRE 5'位之反向引子
765 cgccttgtcctccttgtccagctcctcctgttgccggacct 所預測之剪接受體位點
766 cgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggacct 經最佳化之剪接受體位點
767 cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa 所預測之剪接受體位點
768 accggattcctcctgattcaggcctggccagagaacagaac 所預測之剪接受體位點
769 LPVLTQPPSTSGTPGQRVTVSCSGSSSNIGSNVVFWYQQLPGTAPKLVIYRNNQRPSGVPDRFSVSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTMTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSGYSKSIVSYMDYWGQGTLVTVSS 抗BMCA scFv
770 QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNYVFWYQQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSASYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSGYGSYRWEDSWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFV
771 QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGFDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMHWVRQAPGQRLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQDRITVTRDTSSNTGYMELTRLRSDDTAVYYCARSPYSGVLDKWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFV
772 EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTMTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSGYSKSIVSYMDYWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
773 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSGYGSYRWEDSWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
774 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMHWVRQAPGQRLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQDRITVTRDTSSNTGYMELTRLRSDDTAVYYCARSPYSGVLDKWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
775 LPVLTQPPSTSGTPGQRVTVSCSGSSSNIGSNVVFWYQQLPGTAPKLVIYRNNQRPSGVPDRFSVSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGYVFGTGTKVTVLG 抗BCMA VL
776 QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNYVFWYQQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSASYVFGTGTKVTVLG 抗BMCA VL
777 QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGFDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGYVFGTGTKVTVLG 抗BMCA VL
778 SRGGGGSGGGGSGGGGSLEMA 連接子
779 YFDSL BCMA抗原決定基
780 QNEYFDSLL BMCA抗原決定基
781 LPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGRSSNIGSNSVNWYRQLPGAAPKLLIYSNNQRPPGVPVRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEATYYCATWDDNLNVHYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGYYSHDMWSEDWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
782 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARAEMGAVFDIWGQGTMVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRISWPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
783 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRISWPFTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARAEMGAVFDIWGQGTMVTVSS 抗BCMA scFv
784 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGTYLGGLWYFDLWGRGTLVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGDIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGLGLPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
785 DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGLGLPLTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGTYLGGLWYFDLWGRGTLVTVSS 抗BCMA scFv
786 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPGGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARESWPMDVWGQGTTVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYAAYPTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
787 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYAAYPTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPGGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARESWPMDVWGQGTTVTVSS 抗BCMA scFv
788 QLQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSSSYYWGWIRQPPGKGLEWIGSISYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGRGYATSLAFDIWGQGTMVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRHVWPPTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
789 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRHVWPPTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQLQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSSSYYWGWIRQPPGKGLEWIGSISYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGRGYATSLAFDIWGQGTMVTVSS 抗BCMA scFv
790 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSTISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSQEHLIFDYWGQGTLVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRFYYPWTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
791 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRFYYPWTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSTISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSQEHLIFDYWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
792 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTDFWSGSPPGLDYWGQGTLVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGDIQLTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQIYTFPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
793 DIQLTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQIYTFPFTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTDFWSGSPPGLDYWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
794 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARTPEYSSSIWHYYYGMDVWGQGTTVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQFAHTPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
795 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQFAHTPFTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARTPEYSSSIWHYYYGMDVWGQGTTVTVSS 抗BCMA scFv
796 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGPLQEPPYDYGMDVWGQGTTVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYSASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHHVWPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
797 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYSASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHHVWPLTFGGGTKVEIKRGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGPLQEPPYDYGMDVWGQGTTVTVSS 抗BCMA scFv
798 DIVLTQSPASLAVSLGERATINCRASESVSVIGAHLIHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDAAIYYCLQSRIFPRTFGQGTKLEIKGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYSINWVRQAPGQGLEWMGWINTETREPAYAYDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARDYSYAMDYWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
799 DIVLTQSPASLAVSLGERATINCRASESVSVIGAHLIHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDAAIYYCLQSRIFPRTFGQGTKLEIKGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYSINWVRQAPGQGLEWMGWINTETREPAYAYDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARDYSYAMDYWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
800 DIVLTQSPASLAVSLGERATINCRASESVSVIGAHLIHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDAAIYYCLQSRIFPRTFGQGTKLEIKGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYSINWVRQAPGQGLEWMGWINTETREPAYAYDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARDYSYAMDYWGQGTLVTVSS 抗BCMA scFv
801 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSSASGGGGSGGRASGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPYTFGQGTKVEIK 抗BCMA scFv
802 QVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFSNYAMSWVRQAPGKGLGWVSGISRSGENTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRDEDTAVYYCARSPAHYYGGMDVWGQGTTVTVSSASGGGGSGGRASGGGGSDIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSISSSFLAWYQQKPGQAPRLLIYGASRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDSAVYYCQQYHSSPSWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
803 QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSSASGGGGSGGRASGGGGSDIRLTQSPSPLSASVGDRVTITCQASEDINKFLNWYHQTPGKAPKLLIYDASTLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLQPEDIGTYYCQQYESLPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA scFv
804 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSSASGGGGSGGRASGGGGSEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSIGSSSLAWYQQKPGQAPRLLMYGASSRASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYAGSPPFTFGQGTKVEIK 抗BCMA scFv
805 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDYSINWVKRAPGKGLKWMGWINTETREPAYAYDFRGRFAFSLETSASTAYLQINNLKYEDTATYFCALDYSYAMDYWGQGTSVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPASLAMSLGKRATISCRASESVSVIGAHLIHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTIDPVEEDDVAIYSCLQSRIFPRTFGGGTKLEIK 抗BCMA scFv
806 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFRHYSMNWVKQAPGKGLKWMGRINTESGVPIYADDFKGRFAFSVETSASTAYLVINNLKDEDTASYFCSNDYLYSLDFWGQGTALTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIYWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIK 抗BCMA scFv
807 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTHYSMNWVKQAPGKGLKWMGRINTETGEPLYADDFKGRFAFSLETSASTAYLVINNLKNEDTATFFCSNDYLYSCDYWGQGTTLTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIYWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIK 抗BCMA scFv
808 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSINTAYMELSSLTSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGIYYCSQSSIYPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
809 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSINTAYMELSSLTSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGIYYCSQSSIYPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
810 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSINTAYMELSSLTSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGIYYCSQSSIYPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
811 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSSSTAYMELSSLRSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGEPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGADFTLKISRVEAEDVGVYYCAETSHVPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
812 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSSSTAYMELSSLRSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGEPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGADFTLKISRVEAEDVGVYYCAETSHVPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
813 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSSSTAYMELSSLRSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGEPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGADFTLKISRVEAEDVGVYYCAETSHVPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA scFv
814 QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCEASGFTLDYYAIGWFRQAPGKEREGVICISRSDGSTYYADSVKGRFTISRDNAKKTVYLQMISLKPEDTAAYYCAAGADCSGYLRDYEFRGQGTQVTVSS 抗BCMA VH
815 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGYYSHDMWSEDWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
816 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARAEMGAVFDIWGQGTMVTVSS 抗BMCA VH
817 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGTYLGGLWYFDLWGRGTLVTVSS 抗BMCA VH
818 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPGGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARESWPMDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
819 QLQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSSSYYWGWIRQPPGKGLEWIGSISYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGRGYATSLAFDIWGQGTMVTVSS 抗BMCA VH
820 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSTISSSSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSQEHLIFDYWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
821 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTDFWSGSPPGLDYWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
822 QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARTPEYSSSIWHYYYGMDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
823 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGPLQEPPYDYGMDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
824 QVQLVQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTDYSINWVRQAPGQGLEWMGWINTETREPAYAYDFRGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARDYSYAMDYWGQGTLVTVSS 抗BMCA VH
825 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
826 QVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFSNYAMSWVRQAPGKGLGWVSGISRSGENTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRDEDTAVYYCARSPAHYYGGMDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
827 QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
828 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFALSNHGMSWVRRAPGKGLEWVSGIVYSGSTYYAASVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRPEDTAIYYCSAHGGESDVWGQGTTVTVSS 抗BMCA VH
829 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFRHYSMNWVKQAPGKGLKWMGRINTESGVPIYADDFKGRFAFSVETSASTAYLVINNLKDEDTASYFCSNDYLYSLDFWGQGTALTVSS 抗BMCA VH
830 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTHYSMNWVKQAPGKGLKWMGRINTETGEPLYADDFKGRFAFSLETSASTAYLVINNLKNEDTATFFCSNDYLYSCDYWGQGTTLTVSS 抗BMCA VH
831 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSINTAYMELSSLTSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSS 抗BMCA VH
832 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFPDYYINWVRQAPGQGLEWMGWIYFASGNSEYNQKFTGRVTMTRDTSSSTAYMELSSLRSEDTAVYFCASLYDYDWYFDVWGQGTMVTVSS 抗BMCA VH
833 LPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGRSSNIGSNSVNWYRQLPGAAPKLLIYSNNQRPPGVPVRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEATYYCATWDDNLNVHYVFGTGTKVTVLG 抗BCMA VL
834 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRISWPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
835 DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGLGLPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
836 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYAAYPTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
837 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRHVWPPTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
838 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSRYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRFYYPWTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
839 DIQLTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYGASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQIYTFPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
840 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQFAHTPFTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
841 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYSASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHHVWPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
842 DIVLTQSPASLAVSLGERATINCRASESVSVIGAHLIHWYQQKPGQPPKLLIYLASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDAAIYYCLQSRIFPRTFGQGTKLEIK 抗BCMA VL
843 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPYTFGQGTKVEIK 抗BCMA VL
844 DIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSISSSFLAWYQQKPGQAPRLLIYGASRRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDSAVYYCQQYHSSPSWTFGQGTKLEIK 抗BCMA VL
845 DIRLTQSPSPLSASVGDRVTITCQASEDINKFLNWYHQTPGKAPKLLIYDASTLQTGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLQPEDIGTYYCQQYESLPLTFGGGTKVEIK 抗BCMA VL
846 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSIGSSSLAWYQQKPGQAPRLLMYGASSRASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYAGSPPFTFGQGTKVEIK 抗BCMA VL
847 DIVLTQSPPSLAMSLGKRATISCRASESVTILGSHLIYWYQQKPGQPPTLLIQLASNVQTGVPARFSGSGSRTDFTLTIDPVEEDDVAVYYCLQSRTIPRTFGGGTKLEIK 抗BCMA VL
848 DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGIYYCSQSSIYPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA VL
849 DIVMTQTPLSLSVTPGEPASISCKSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGADFTLKISRVEAEDVGVYYCAETSHVPWTFGQGTKLEIK 抗BCMA VL
850 atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgatccca GMCSFRα鏈信號序列
851 MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIP GMCSFRα鏈信號肽
852 MALPVTALLLPLALLLHA CD8α信號肽
853 MPLLLLLPLLWAGALA CD33信號肽
854 aagtttctttctgtattccagactgaccgtggataaatctc 經最佳化之剪接受體位點
855 GAGTCTAAATACGGACCGCCTTGTCCTCCTTGTCCAGCTCCTCCTGTTGCCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTTCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGATGATCAGCAGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCCCAAGAGGATCCCGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTTCCAGAGCACCTACAGAGTGGTGTCCGTGCTGACAGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGGCCTGCCTAGCAGCATCGAGAAAACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCAAGAGAGCCCCAGGTTTACACACTGCCTCCAAGCCAAGAGGAAATGACCAAGAATCAGGTGTCCCTGACATGCCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAATGGGAGAGCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACCACACCTCCTGTGCTGGACAGCGACGGCAGTTTCTTCCTGTATAGTAGACTCACCGTGGATAAATCAAGATGGCAAGAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAAAGCCTGAGCCTGTCTCTGGGCAAA 經密碼子最佳化之間隔子(nt)
856 gaatctaagtacggaccgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggaccttccgtgttcctgtttcctccaaagcctaaggacaccctgatgatcagcaggacccctgaagtgacctgcgtggtggtggatgtgtcccaagaggatcccgaggtgcagttcaactggtatgtggacggcgtggaagtgcacaacgccaagaccaagcctagagaggaacagttccagagcacctacagagtggtgtccgtgctgacagtgctgcaccaggattggctgaacggcaaagagtacaagtgcaaggtgtccaacaagggcctgcctagcagcatcgagaaaaccatctccaaggccaagggccagccaagagagccccaggtttacacactgcctccaagccaagaggaaatgaccaagaatcaggtgtccctgacatgcctggtcaagggcttctacccctccgatatcgccgtggaatgggagagcaatggccagcctgagaacaactacaagaccacacctcctgtgctggacagcgacggcagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaagatggcaagagggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgcacaaccactacacccagaaaagcctgagcctgtctctgggcaag 替代性替代性CO/SSE間隔子(nt)
圖 1A 及1B 描繪如藉由瓊脂糖凝膠電泳所評定，評定RNA異質性的分析之結果。圖 1A 描繪若干抗BCMA-CAR之RNA異質性，該等抗BCMA-CAR含有長間隔子(LS)區或較短CD28間隔子區。圖 1B 描繪三種不同的含有長間隔子(LS)區之編碼抗BCMA CAR之序列在進行編碼序列最佳化及剪接位點消除(O/SSE)之前及之後的RNA異質性，
圖 2 描繪評定在對編碼序列進行最佳化及剪接位點消除之前(非SSE)及之後(O/SSE)，BCMA-LS CAR在經轉導T細胞之表面上的表現量的分析之結果。
圖 3 描繪對編碼BMCA-LS CAR構築體之慢病毒載體與編碼已經密碼子最佳化且經修飾以消除所預測之剪接位點(O/SSE)的BCMA-LS CAR構築體之慢病毒載體的轉導效率之比較。
圖 4A 描繪評定在若干效應細胞:靶細胞(E:T)比率下，BMCA-LS CAR表現性T細胞針對表現較高(K562/BCMA)或較低(RPMI 8226) BCMA量之細胞株的溶胞活性的分析之結果。圖 4B 描繪在3:1之E:T比率下，若干BMCA-LS CAR表現性T細胞針對RPMI-8226細胞之溶胞活性。圖 4C 及圖 4D 描繪非最佳化BCMA-LS CAR表現性T細胞及經最佳化(O/SSE) BCMA-LS CAR表現性T細胞對各種BCMA表現性細胞株之溶胞活性。
圖 5A 描繪評定在若干效應細胞:靶細胞(E:T)比率(在圖中，5:1、2.5:1、1.25:1及0.6:1分別表示為a、b、c及d)下，BMCA-LS CAR表現性T細胞響應於與表現較高(K562/BCMA)或較低(RPMI 8226) BCMA量之細胞株一起培育的IFNγ、IL-2及TNFα細胞介素釋放的分析之結果。圖 5B 描繪在不同E:T比率(在圖中，3:1、1.5:1、0.75:1及0.375:1分別表示為a、b、c及d)下，非最佳化BMCA-LS CAR表現性T細胞及經最佳化(O/SSE) BCMA-LS CAR表現性T細胞響應於與BCMA表現性K562/BCMA及RPMI 8226細胞一起培育的IFNγ、IL-2及TNFα細胞介素釋放。
圖 6 描繪評定在將來自兩個供體之BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性T細胞與表現不同BCMA量之BCMA表現性細胞一起培育後的溶胞活性的分析之結果。
圖 7 描繪評定在將來自兩個供體之BCMA-55-LS CAR O/SSE表現性T細胞與表現不同BCMA量之BCMA表現性細胞一起培育後的IFNγ釋放的分析之結果。
圖 8 描繪評定表現含有不同間隔子區之CAR的抗BCMA表現性CAR T細胞對OPM2靶細胞之溶胞活性的分析之結果。
圖 9A 及9B 描繪評定在將抗BCMA CAR表現性T細胞與OPM2靶細胞一起在可溶性BCMA-Fc存在下培育後的抗BCMA CAR表現性T細胞之溶胞活性的分析之結果。
圖 10A 描繪評定經最佳化之(O/SSE)抗BCMA CAR表現性T細胞在來自H929多發性骨髓瘤細胞株之上清液存在下之溶胞活性的分析之結果。圖 10B 描繪評定最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR表現性T細胞在重組B細胞活化因子(BAFF)存在下之溶胞活性的分析之結果。
圖 11A 及11B 描繪評定在將抗BCMA CAR表現性T細胞與OPM2靶細胞一起在不同濃度(在圖中，0 ng/mL、111 ng/mL、333 ng/mL及1000 ng/mL分別表示為a、b、c及d)的可溶性BCMA-Fc (圖 11A )或來自多發性骨髓瘤細胞株H929之上清液(圖 11B )存在下培育後的IFNγ、IL-2及TNFα細胞介素釋放的分析之結果。
圖 12A 描繪評定在單次靜脈內注射表現經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR之CAR T細胞後，OPM2人類多發性骨髓瘤異種移植物小鼠模型中之腫瘤生長的分析之結果。圖 12B 描繪評定在單次靜脈內注射表現經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR之CAR T細胞後，OPM2人類多發性骨髓瘤異種移植物小鼠模型中之存活率的分析之結果。
圖 13A 描繪評定在單次靜脈內注射表現經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR之CAR T細胞後，RPMI-8226 (皮下)異種移植物小鼠模型中之腫瘤生長的分析之結果。圖 13B 描繪在單次靜脈內注射表現經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR之CAR T細胞後，RPMI-8226 (皮下)異種移植物小鼠模型中之存活率。
圖 14A 及14B 描繪評定來自用來源於單一供體(供體2)之經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR T細胞處理之RPMI-8226 (皮下)異種移植物小鼠的血液中的CD4+ (圖 14A )及CD8+ (圖 14B ) CAR陽性T細胞之數目的分析之結果。
圖 15A 及15B 描繪評定來自用來源於單一供體(供體1)之經最佳化(O/SSE)抗BCMA CAR T細胞處理之RPMI-8226 (皮下)異種移植物小鼠的血液中的CD4+ (圖 15A )及CD8+ (圖 15B ) CAR陽性T細胞之數目的分析之結果。
圖 16A 描繪在於經(0.008 µg/mL、0.04 µg/mL、0.2 µg/mL、1 µg/mL及5 µg/mL)之BCMA-Fc (在其C端處與IgG之Fc區融合的可溶性人類BCMA)融合多肽塗佈隔夜之96孔細胞培養盤中培育6小時的BCMA-55-LS-O/SSE CAR表現性細胞中，評定如藉由流式細胞量測術所偵測的tdTomato及截短之受體(CAR表現之替代性標記物)之表現量的分析之結果。重組Fc多肽用作對照物(Fc對照物)。
圖 16B 描繪在與BCMA-Fc之十(10)個2倍連續稀釋液一起培育的表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR及BCMA-25-LS-O/SSE CAR之報導細胞中，評定tdTomato+細胞在表現截短之受體的細胞當中之百分比的分析之結果。表現對不同抗原具特異性之CAR (抗CD19 CAR)的細胞用作對照物。
圖 17 描繪在於各種E:T比率下與人類BCMA表現性K562靶細胞(BCMA.K562靶細胞)共同培養後，tdTomato+細胞在表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR或BCMA-55-SS CAR之報導細胞當中的百分比。
圖 18 描繪在於無抗原刺激下培育3天(以用於評定與抗原無關之(滋養型)信號傳導之程度)的表現抗CD19 CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR或BCMA-52-LS-O/SSE CAR之報導細胞中，如藉由流式細胞量測術所偵測的tdTomato及GFP (CAR表現之替代性標記物)之表現量。
圖 19A 及19B 描繪在於無抗原刺激下培育(以用於評定與抗原無關之(滋養型)信號傳導之程度)的表現含有來源於4-1BB或CD28之細胞內域的抗CD19 CAR、BCMA-55-LS-O/SSE CAR、BCMA-26-LS-O/SSE CAR、BCMA-23-LS-O/SSE CAR或BCMA-52-LS-O/SSE CAR的報導細胞中，如藉由流式細胞量測術所偵測的tdTomato及截短之受體(CAR表現之替代性標記物)的表現量。
圖 20A 描繪在於2:1或5:1之E:T比率下，與表現人類BCMA (huBCMA)、鼠類BCMA (muBCMA)或食蟹獼猴BCMA (cynoBCMA)之K562人類骨髓性白血病細胞共同培養的經工程改造以表現對人類BCMA具特異性之BCMA-55-LS -O/SSE CAR的Nur77-tdTomato報導細胞當中，如藉由流式細胞量測術所偵測的tdTomato+細胞之百分比。圖 20B 及20C 描繪在與在96孔平底培養盤上塗佈的濃度增加(0、0.1、0.25、1、2.5、10、25及100 µg/mL)之huBCMA及cynoBCMA一起培育的表現BCMA-55-LS-O/SSE CAR之報導細胞當中，如藉由流式細胞量測術所偵測的tdTomato+細胞之百分比(圖 20B )及平均螢光強度(MFI；圖 20C )。
圖 21A 描繪用於轉錄本及所預測之擴增產物的例示性擴增策略。圖 21B 描繪由剪接位點已知及未知(隱蔽)之轉錄本的擴增產生之例示性擴增產物。圖 21C 描繪使用巢式引子對的轉錄本之例示性滑動窗擴增。

Claims (223)

  1. 一種嵌合抗原受體，其包含(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
  2. 如請求項1之嵌合抗原受體，其中該間隔子包含免疫球蛋白之一部分。
  3. 如請求項1或2之嵌合抗原受體，其中該間隔子包含鉸鏈區、CH 2區及CH 3區之序列。
  4. 如請求項3之嵌合抗原受體，其中 該鉸鏈區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之鉸鏈的全部或一部分； 該CH 2區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之CH 2的全部或一部分；且/或 該CH 3區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之CH 3的全部或一部分。
  5. 如請求項3或4之嵌合抗原受體，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3包含來自IgG4之鉸鏈、CH 2及CH 3的全部或一部分。
  6. 如請求項3或4之嵌合抗原受體，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且包含來自IgG4及IgG2之鉸鏈、CH 2及CH 3。
  7. 如請求項1至6中任一項之嵌合抗原受體，其中該間隔子包含IgG4/2嵌合鉸鏈或與人類IgG4鉸鏈相比包含至少一個胺基酸置換的經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區。
  8. 如請求項1至4、6及7中任一項之嵌合抗原受體，其中該間隔子為或包含(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。
  9. 如請求項1至3及6至8中任一項之嵌合抗原受體，其中該間隔子為或包含SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
  10. 一種嵌合抗原受體，其包含：(a)特異性識別B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域；(b) SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
  11. 如請求項1至10中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域為包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。
  12. 如請求項11之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區為或包含與SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且 該VL 區為或包含與SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  13. 如請求項11或12之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；或 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  14. 如請求項11至13中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  15. 如請求項11至13中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)、重鏈互補決定區2 (CDR-H2)及重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且 該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)、輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)及輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
  16. 如請求項11至15中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且 該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  17. 如請求項11至13及15中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1、2、507或593中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含選自SEQ ID NO:4、5、513或594中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及(c)包含選自SEQ ID NO:7、10、157、517或595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3；且 該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:33、178、380、589或601中之任一者之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含選自SEQ ID NO:43、183、400、590或602中之任一者之胺基酸序列的CDR-L2；及(c)包含選自SEQ ID NO:194、416、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的CDR-L3。
  18. 如請求項11至13、15及17中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  19. 如請求項11至18中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  20. 如請求項11至13、15、17及18中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者中所闡述的胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
  21. 如請求項11至13、15、17、18及20中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:256中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:267中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:519中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:535中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:115中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:536中所闡述之胺基酸序列；或 該VH 區為或包含SEQ ID NO:609中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:610中所闡述之胺基酸序列。
  22. 如請求項11至21中任一項之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且 該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  23. 如請求項11至22中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。
  24. 如請求項11至23中任一項之嵌合抗原受體，其中該片段包含scFv。
  25. 如請求項11至24中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區及該VL 區由柔性連接子接合。
  26. 如請求項25之嵌合抗原受體，其中該scFv包含有包含胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。
  27. 如請求項11至26中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區處於該VL 區之胺基端。
  28. 如請求項11至27中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:478、128-139、268-278、329、442、558-576、578-583、585或769-771中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:478、128-139、268-278、329、442、558-576、578-583、585或769-771中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  29. 如請求項1至28中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:478、278、559、560或442中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:478、278、559、560或442中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  30. 如請求項1至29中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  31. 如請求項1至30中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域包含SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列。
  32. 如請求項1至31中任一項之嵌合抗原受體，其中編碼該抗原結合域之核酸包含(a) SEQ ID NO:648、352、647、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:648、352、647、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。
  33. 如請求項1至32中任一項之嵌合抗原受體，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:460、440、715、717或719中之任一者中所闡述的核苷酸序列。
  34. 如請求項1至33中任一項之嵌合抗原受體，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:460中所闡述之核苷酸序列。
  35. 如請求項11至26中任一項之嵌合抗原受體，其中該VH 區處於該VL 區之羧基端。
  36. 一種嵌合抗原受體，其包含： (1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含： (i)包含與SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈(VH )；及 (ii)包含與SEQ ID NO:618中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈(VL )區； (2)包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸的間隔子；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子； (3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及 (4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。
  37. 如請求項36之嵌合抗原受體，其中： 該VH 區包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且該VL 區包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  38. 一種嵌合抗原受體，其包含： (1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含： 包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的可變重鏈(VH )區；及包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的可變輕鏈(VL )區；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； (2)包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸的間隔子；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子； (3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及 (4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。
  39. 如請求項36至38中任一項之嵌合抗原受體，其中該細胞外抗原結合域包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列及SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列。
  40. 如請求項1至35中任一項之嵌合抗原受體，其中該細胞內信號傳導區包含活化性細胞質信號傳導域。
  41. 如請求項40之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包括基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。
  42. 如請求項40或41之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質信號傳導域為或包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。
  43. 如請求項40至42中任一項之嵌合抗原受體，其中該活化性細胞質域為人類的或來自人類蛋白質。
  44. 如請求項36至39、42及43中任一項之嵌合抗原受體，其中該細胞質信號傳導域為或包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
  45. 如請求項40至44中任一項之嵌合抗原受體，其中該細胞內信號傳導區進一步包含共刺激信號傳導區。
  46. 如請求項45之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
  47. 如請求項36至39、45及46中任一項之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
  48. 如請求項36至39及45至47中任一項之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
  49. 如請求項36至39及45至48中任一項之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區為人類的或來自人類蛋白質。
  50. 如請求項36至39及45至49中任一項之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區為或包含SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。
  51. 如請求項36至50中任一項之嵌合抗原受體，其中該共刺激信號傳導區處於該跨膜域與該細胞內信號傳導區之間。
  52. 如請求項1至51中任一項之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含來自CD4、CD28或CD8之跨膜域。
  53. 如請求項52之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含來自CD28之跨膜域。
  54. 如請求項1至53中任一項之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為人類的或來自人類蛋白質。
  55. 如請求項1至54中任一項之嵌合抗原受體，其中該跨膜域為或包含SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
  56. 如請求項1至55中任一項之嵌合抗原受體，其中該嵌合抗原受體自其N端至C端依序包含：該抗原結合域、該間隔子、該跨膜域及該細胞內信號傳導域。
  57. 如請求項1至56中任一項之嵌合抗原受體，其中該抗原結合域及或該嵌合抗原受體或指示該嵌合抗原受體在暴露於表現表面BCMA之細胞後之功能或活性的量度在可溶性或脫落形式之BCMA存在下不減小或受阻斷或不顯著減小或受阻斷。
  58. 如請求項57之嵌合抗原受體，其中該可溶性或脫落形式之BCMA的濃度或量對應於存在於個體或多發性骨髓瘤患者之血清或血液或血漿中的濃度或量或在該疾病或病症之患者群體中的平均濃度或量，或該可溶性或脫落形式之BCMA所處的濃度或量使得在相同分析中，表現參考抗BCMA重組受體(視情況，參考抗BCMA CAR)之細胞的結合或量度減小或受阻斷或顯著減小或受阻斷。
  59. 如請求項1至58中任一項之嵌合抗原受體，其中該嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列或與SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、1%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。
  60. 如請求項1至59中任一項之嵌合抗原受體，其中該嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列或與SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、1%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。
  61. 如請求項1至60中任一項之嵌合抗原受體，其中該嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列或與其展現至少85%、86%、87%、88%、1%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之序列的聚核苷酸序列編碼。
  62. 如請求項1至61中任一項之嵌合抗原受體，其中該嵌合抗原受體係由包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列的聚核苷酸序列編碼。
  63. 一種聚核苷酸，其編碼如請求項1至62中任一項之嵌合抗原受體。
  64. 如請求項63之聚核苷酸，其中在於人類細胞(視情況，人類T細胞)中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
  65. 如請求項63或64之聚核苷酸，其中所編碼之該嵌合抗原受體包含有包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸的間隔子；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子，與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體。
  66. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)長度至少125個胺基酸之間隔子；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區，其中在於人類細胞(視情況，人類T細胞)中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
  67. 如請求項63-66中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子包含免疫球蛋白之一部分。
  68. 如請求項63至67中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子包含鉸鏈區、CH 2區及CH 3區之序列。
  69. 如請求項63、64及66至68中任一項之聚核苷酸，其中 該鉸鏈區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之鉸鏈的全部或一部分； 該CH 2區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之CH 2的全部或一部分；且/或 該CH 3區包含來自IgG4或IgG2，視情況來自人類IgG4或人類IgG2之CH 3的全部或一部分。
  70. 如請求項63、64及66至69中任一項之聚核苷酸，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3包含來自IgG4之鉸鏈、CH 2及CH 3的全部或一部分。
  71. 如請求項63、64及66至69中任一項之聚核苷酸，其中該鉸鏈、CH 2及CH 3中之一或多者為嵌合的且包含來自IgG4及IgG2之鉸鏈、CH 2及CH 3。
  72. 如請求項63、64及66至71中任一項之聚核苷酸，其中該間隔子包含IgG4/2嵌合鉸鏈或與人類IgG4鉸鏈相比包含至少一個胺基酸置換的經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區。
  73. 如請求項63、64及66至72中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子為或包含(i) SEQ ID NO:649中所闡述之序列；(ii)與SEQ ID NO:649具有至少95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的SEQ ID NO:649之功能變異體；或(iii)長度至少125個胺基酸的(i)或(ii)之連續部分。
  74. 如請求項63至73中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該間隔子為或包含SEQ ID NO:649中所闡述之序列。
  75. 如請求項63至74中任一項之聚核苷酸，其中編碼該間隔子之核酸包含至少一個經修飾之剪接供體及/或剪接受體(acceptor)位點，該經修飾之剪接供體及/或受體位點包含對應於SEQ ID NO:621中所闡述之序列中所含有之參考剪接供體位點及/或參考剪接受體位點的一或多個核苷酸修飾。
  76. 如請求項75之聚核苷酸，其中該一或多個核苷酸修飾包含核苷酸取代。
  77. 如請求項75或76之聚核苷酸，其中該等參考剪接供體及/或參考剪接受體位點為典型、非典型或隱蔽之剪接位點。
  78. 如請求項75至77中任一項之聚核苷酸，其中： 該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.4、0.5、0.6、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或 該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
  79. 如請求項75至78中任一項之聚核苷酸，其中： 該參考剪接供體位點包含序列aatctaagtacggac (SEQ ID NO:705)、tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)、acaattagtaaggca (SEQ ID NO:707)及/或accacaggtgtatac (SEQ ID NO:708)；且/或 該參考剪接受體位點包含序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)及/或gggcaacgtgttctcttgcagtgtcatgcacgaagccctgc (SEQ ID NO:743)。
  80. 如請求項75至78中任一項之聚核苷酸，其中： 該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點之剪接位點預測得分為至少或約0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、0.99或1.0；且/或 該(等)參考剪接供體及/或參考剪接受體位點涉及剪接事件之機率預測為至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
  81. 如請求項75至78及80中任一項之聚核苷酸，其中： 該參考剪接供體位點包含序列tcaactggtacgtgg (SEQ ID NO:706)；且/或 該參考剪接受體位點包含序列aagtttctttctgtattccaggctgaccgtggataaatctc (SEQ ID NO:742)。
  82. 如請求項75至81中任一項之聚核苷酸，其中該一或多個核苷酸修飾中之至少一者處於該參考剪接受體及/或參考剪接供體位點之剪接位點接合處(junction)的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基內。
  83. 如請求項75至82中任一項之聚核苷酸，其中該一或多個核苷酸修飾為靜默的，及/或產生與SEQ ID NO:621相比簡併之密碼子，及/或不改變所編碼之該間隔子的胺基酸序列。
  84. 如請求項75至83中任一項之聚核苷酸，其中： 經修飾之該剪接供體位點闡述於agtctaaatacggac (SEQ ID NO:661)、tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)、accatctccaaggcc (SEQ ID NO:663)及/或gccccaggtttacac (SEQ ID NO:664)中；且/或 經修飾之該剪接受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)、gggcaacgtgttcagctgcagcgtgatgcacgaggccctgc (SEQ ID NO:673)及/或cgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggacct (SEQ ID NO:766)中。
  85. 如請求項75至84中任一項之聚核苷酸，其中該經修飾之剪接供體位點闡述於tcaactggtatgtgg (SEQ ID NO:662)中，且/或該經修飾之受體位點闡述於cagtttcttcctgtatagtagactcaccgtggataaatcaa (SEQ ID NO:672)及/或cgccttgtcctccttgtcccgctcctcctgttgccggacct (SEQ ID NO:766)中。
  86. 如請求項63至85中任一項之聚核苷酸，其中該間隔子係由SEQ ID NO:622中所闡述之核苷酸序列或其一部分編碼。
  87. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸為或包含SEQ ID NO:622中所闡述之序列或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
  88. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含編碼以下之核酸：(a)特異性識別抗原之細胞外抗原結合域；(b)間隔子，其中該編碼核酸由SEQ ID NO:622中所闡述之序列組成或基本上由其組成或編碼SEQ ID NO:649中所闡述之胺基酸序列；(c)跨膜域；及(d)細胞內信號傳導區。
  89. 如請求項87或88之聚核苷酸，其中在於細胞中表現該聚核苷酸時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
  90. 如請求項63至89中任一項之聚核苷酸，其中，在於人類細胞(視情況，人類T細胞)中表現時，來自該聚核苷酸之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現其異質性與自參考聚核苷酸轉錄之mRNA的異質性相比減小，該參考聚核苷酸編碼與該聚核苷酸相同之胺基酸序列，其中該參考聚核苷酸與該聚核苷酸相比的不同之處在於在該編碼該間隔子之核酸中存在一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點及/或與該聚核苷酸相比包含一或多個核苷酸修飾及/或包含SEQ ID NO:621中所闡述之序列。
  91. 如請求項90之聚核苷酸，其中該RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。
  92. 如請求項90或91之聚核苷酸，其中來自該參考聚核苷酸之該經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。
  93. 如請求項63至92中任一項之聚核苷酸，其中該RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。
  94. 如請求項63至93中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸經密碼子最佳化以用於在人類細胞中表現。
  95. 如請求項63至94中任一項之聚核苷酸，其中該抗原與疾病或病狀相關聯或在與疾病或病狀相關聯之病灶之環境的細胞中進行表現。
  96. 如請求項63至95中任一項之聚核苷酸，其中該疾病或病狀為癌症。
  97. 如請求項63至96中任一項之聚核苷酸，其中該疾病或病狀為骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。
  98. 如請求項63至97中任一項之聚核苷酸，其中該抗原為B細胞成熟抗原(BCMA)、ROR1、碳酸酐酶9 (CAIX)、tEGFR、Her2/neu (受體酪胺酸激酶erbB2)、L1-CAM、CD19、CD20、CD22、間皮素、CEA及B型肝炎表面抗原、抗葉酸受體、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、EGFR、上皮醣蛋白2 (EPG-9)、上皮醣蛋白40 (EPG-40)、EPHa2、erb-B2、erb-B3、erb-B4、erbB二聚體、EGFR vIII、葉酸結合蛋白(FBP)、FCRL5、FCRH5、胎兒乙醯膽鹼受體、GD2、GD3、G蛋白偶聯受體C類5族成員D (GPRC5D)、HMW-MAA、IL-92R-α、IL-13R-α2、激酶插入域受體(kdr)、κ輕鏈、Lewis Y、L1細胞黏附分子(L1-CAM)、黑素瘤相關抗原(MAGE)-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、優先表現之黑素瘤抗原(PRAME)、存活素、TAG72、B7-H6、IL-13受體α2 (IL-13Ra2)、CA9、GD3、HMW-MAA、CD171、G250/CAIX、HLA-AI MAGE Al、HLA-A2 NY-ESO-1、PSCA、葉酸受體-a、CD44v6、CD44v7/8、avb6整合素、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒AchR、NKG2D配位體、CD44v6、雙重抗原、睪丸癌抗原、間皮素、鼠類CMV、黏蛋白1 (MUC1)、MUC16、PSCA、NKG2D、NY-ESO-1、MART-1、gp100、癌胚抗原(oncofetal antigen)、ROR1、TAG72、VEGF-R2、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、Her2/neu、雌激素受體、孕酮受體、肝配蛋白B2、CD123、c-Met、GD-9、O-乙醯化GD2 (OGD2)、CE7、威爾姆斯腫瘤1 (WT-1)、週期蛋白、週期蛋白A2、CCL-1、CD138、病原體特異性抗原。
  99. 如請求項98之聚核苷酸，其中該抗原為B細胞成熟抗原(BCMA)。
  100. 如請求項63至99中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該抗原結合域為包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )區之抗體片段。
  101. 如請求項100之聚核苷酸，其中： 該VH 區為或包含與SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列；且 該VL 區為或包含與SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  102. 如請求項100或101之聚核苷酸，其中： 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:256及267中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:256及267具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:519及535中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:519及535具有至少90%一致性之胺基酸序列； 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:115及536中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:115及536具有至少90%一致性之胺基酸序列；或 該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:609及610中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:609及610具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  103. 如請求項100至102中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區及該等VL 區包含SEQ ID NO:617及618中分別闡述之胺基酸序列或分別與SEQ ID NO:617及618具有至少90%一致性之胺基酸序列。
  104. 如請求項100至102中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區為或包含選自SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者之VH 區胺基酸序列內所含有的重鏈互補決定區1 (CDR-H1)、重鏈互補決定區2 (CDR-H2)及重鏈互補決定區3 (CDR-H3)；且 該VL 區為或包含選自SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者之VL 區胺基酸序列內所含有的輕鏈互補決定區1 (CDR-L1)、輕鏈互補決定區2 (CDR-L2)及輕鏈互補決定區3 (CDR-L3)。
  105. 如請求項100至104中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且 該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  106. 如請求項100至102及104中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:1、2、507或593中之任一者之胺基酸序列的CDR-H1；(b)包含選自SEQ ID NO:4、5、513或594中之任一者之胺基酸序列的CDR-H2；及(c)包含選自SEQ ID NO:7、10、157、517或595中之任一者之胺基酸序列的CDR-H3；且 該VL 區為或包含(a)包含選自SEQ ID NO:33、178、380、589或601中之任一者之胺基酸序列的CDR-L1；(b)包含選自SEQ ID NO:43、183、400、590或602中之任一者之胺基酸序列的CDR-L2；及(c)包含選自SEQ ID NO:194、416、421、591或603中之任一者之胺基酸序列的CDR-L3。
  107. 如請求項100至102、104及106中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及157之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:178、183及194之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:1、4及7之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:380、400及416之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:2、5及10之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:33、43及421之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:507、513及517之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:589、590及591之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  108. 如請求項100至107中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  109. 如請求項100至102、104、106及107中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617、115、256、519或609中之任一者中所闡述的胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618、267、535、536或610中之任一者中所闡述的胺基酸序列。
  110. 如請求項100至102、104、106、107及109中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:256中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:267中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:519中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:535中所闡述之胺基酸序列； 該VH 區為或包含SEQ ID NO:115中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:536中所闡述之胺基酸序列；或 該VH 區為或包含SEQ ID NO:609中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:610中所闡述之胺基酸序列。
  111. 如請求項100至110中任一項之聚核苷酸，其中： 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；或該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且 該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  112. 如請求項110至111中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區為或包含SEQ ID NO:617中所闡述之胺基酸序列；且該VL 區為或包含SEQ ID NO:618中所闡述之胺基酸序列。
  113. 如請求項100至112中任一項之聚核苷酸，其中該片段包含scFv。
  114. 如請求項100至113中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區及該VL 區由柔性連接子接合。
  115. 如請求項114之聚核苷酸，其中該scFv包含有包含胺基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:361)之連接子。
  116. 如請求項100至115中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區處於該VL 區之胺基端。
  117. 如請求項100至116中任一項之聚核苷酸，其中該抗原結合域包含選自SEQ ID NO:478、278、559、560或442中之任一者的胺基酸序列或與選自SEQ ID NO:478、278、559、560或442中之任一者之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  118. 如請求項100至117中任一項之聚核苷酸，其中該抗原結合域包含SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列或與SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  119. 如請求項100至118中任一項之聚核苷酸，其中該抗原結合域包含SEQ ID NO:478中所闡述之胺基酸序列。
  120. 如請求項100至119中任一項之聚核苷酸，其中編碼該抗原結合域之核酸包含(a) SEQ ID NO:648、352、647、716或718中之任一者中所闡述的核苷酸序列；(b)與SEQ ID NO:648、352、647、716或718中之任一者具有至少90%序列一致性的核苷酸序列；或(c) (a)或(b)之簡併序列。
  121. 如請求項100至120中任一項之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:460、440、715、717或719中之任一者中所闡述的核苷酸序列。
  122. 如請求項100至121中任一項之聚核苷酸，其中該編碼該抗原結合域之核酸包含SEQ ID NO:460中所闡述之核苷酸序列。
  123. 如請求項100至116中任一項之聚核苷酸，其中該VH 區處於該VL 區之羧基端。
  124. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸： (1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含： (i)包含與SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈(VH )；及 (ii)包含與SEQ ID NO:618中之任一者中所闡述之VL 區胺基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈(VL )區； (2)包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸的間隔子；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子； (3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及 (4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。
  125. 如請求項124之聚核苷酸，其中： 該VH 區包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3；且該VL 區包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3。
  126. 一種編碼嵌合抗原受體之聚核苷酸，其包含編碼以下之核酸： (1)特異性結合人類B細胞成熟抗原(BCMA)之細胞外抗原結合域，其中該細胞外抗原結合域包含： 包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列內所含有之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3的可變重鏈(VH )區；及包含SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列內所含有之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3的可變輕鏈(VL )區；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:593、594及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:596、597及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:598、599及595之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:601、602及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3；或 該VH 區包含分別包含SEQ ID NO:611、612及613之胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3，且該VL 區包含分別包含SEQ ID NO:614、615及603之胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3； (2)包含IgG4/2嵌合鉸鏈或經修飾之IgG4鉸鏈；IgG2/4嵌合CH 2區；及IgG4 CH 3區，且為長度約228個胺基酸的間隔子；或SEQ ID NO:649中所闡述之間隔子； (3)跨膜域，視情況，來自人類CD28之跨膜域；及 (4)細胞內信號傳導區，其包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域及T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域。
  127. 如請求項124至126中任一項之聚核苷酸，其中該細胞外抗原結合域包含SEQ ID NO:617中所闡述之VH 區胺基酸序列及SEQ ID NO:618中所闡述之VL 區胺基酸序列。
  128. 如請求項63至123中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區包含活化性細胞質信號傳導域。
  129. 如請求項128之聚核苷酸，其中該活化性細胞質信號傳導域能夠在T細胞中誘導初級活化信號，為T細胞受體(TCR)組分且/或包含基於免疫受體酪胺酸之活化模體(ITAM)。
  130. 如請求項128或129之聚核苷酸，其中該活化性細胞質信號傳導域為或包含CD3-ζ (CD3ζ)鏈之細胞質信號傳導域或其功能變異體或信號傳導部分。
  131. 如請求項128-130中任一項之聚核苷酸，其中該活化性細胞質域為人類的或來自人類蛋白質。
  132. 如請求項124至127、130及131中任一項之聚核苷酸，其中該細胞質信號傳導域為或包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%序列一致性之胺基酸序列。
  133. 如請求項124至127及130至132中任一項之聚核苷酸，其中編碼該細胞質信號傳導域之核酸為或包含SEQ ID NO:627中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
  134. 如請求項124至127及130至133中任一項之聚核苷酸，其中該編碼該細胞質信號傳導域之核酸為或包含SEQ ID NO:652中所闡述之序列。
  135. 如請求項128至134中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區進一步包含共刺激信號傳導區。
  136. 如請求項135之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含T細胞共刺激分子之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
  137. 如請求項124至127、135及136之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含CD28、4-1BB或ICOS之細胞內信號傳導域或其信號傳導部分。
  138. 如請求項124至127及135至137中任一項之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含4-1BB之細胞內信號傳導域。
  139. 如請求項124至127及135至138中任一項之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區為人類的或來自人類蛋白質。
  140. 如請求項124至127及135至139中任一項之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區為或包含SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%序列一致性的胺基酸序列。
  141. 如請求項124至127及135至140中任一項之聚核苷酸，其中編碼該共刺激區之核酸為或包含SEQ ID NO:625中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
  142. 如請求項124至127及135至141中任一項之聚核苷酸，其中該編碼該共刺激信號傳導區之核酸包含SEQ ID NO:681中所闡述之序列。
  143. 如請求項63至139中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列，及SEQ ID NO:626中所闡述之序列或與SEQ ID NO:626中所闡述之序列展現至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  144. 如請求項63至139及143中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區為或包含SEQ ID NO:628及SEQ ID NO:626中所闡述之序列。
  145. 如請求項124至127、135至137、139及145中任一項之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區包含CD28之細胞內信號傳導域。
  146. 如請求項63至139及145中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區包含SEQ ID NO:628中所闡述之序列或與SEQ ID NO:628具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性之胺基酸序列，及SEQ ID NO:680中所闡述之序列或與SEQ ID NO:680中所闡述之序列展現至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的胺基酸序列。
  147. 如請求項63至139、145及146中任一項之聚核苷酸，其中該細胞內信號傳導區為或包含SEQ ID NO:628及SEQ ID NO:680中所闡述之序列。
  148. 如請求項135至147中任一項之聚核苷酸，其中該共刺激信號傳導區處於該跨膜域與該細胞內信號傳導區之間。
  149. 如請求項63至148中任一項之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含來自CD4、CD28或CD8之跨膜域。
  150. 如請求項149之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含來自CD28之跨膜域。
  151. 如請求項63至150中任一項之聚核苷酸，其中該跨膜域為人類的或來自人類蛋白質。
  152. 如請求項63至151中任一項之聚核苷酸，其中該跨膜域為或包含SEQ ID NO:624中所闡述之序列或與SEQ ID NO:624展現至少90%序列一致性之胺基酸序列。
  153. 如請求項63至152中任一項之聚核苷酸，其中編碼該跨膜域之核酸為或包含SEQ ID NO:623中所闡述之序列或為其經密碼子最佳化之序列及/或簡併序列。
  154. 如請求項153之聚核苷酸，其中該編碼該跨膜域之核酸包含SEQ ID NO:688中所闡述之序列。
  155. 如請求項63至154中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該嵌合抗原受體自其N端至C端依序包含：該抗原結合域、該間隔子、該跨膜域及該細胞內信號傳導區。
  156. 如請求項63至155中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸進一步編碼截短之受體。
  157. 如請求項63至156中任一項之聚核苷酸，其中所編碼之該抗原結合域及/或所編碼之該嵌合抗原受體的結合或指示所編碼之該嵌合抗原受體在暴露於表現表面BCMA之細胞後之功能或活性的量度在可溶性或脫落形式之BCMA存在下不減小或受阻斷或不顯著減小或受阻斷。
  158. 如請求項157之聚核苷酸，其中該可溶性或脫落形式之BCMA的濃度或量對應於存在於個體或多發性骨髓瘤患者之血清或血液或血漿中的濃度或量或在該疾病或病症之患者群體中的平均濃度或量，或該可溶性或脫落形式之BCMA所處的濃度或量使得在相同分析中，表現參考抗BCMA重組受體(視情況，參考抗BCMA CAR)之細胞的結合或量度減小或受阻斷或顯著減小或受阻斷。
  159. 如請求項63至158中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述的序列或與SEQ ID NO:751-756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
  160. 如請求項63至159中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述的序列或與SEQ ID NO:755及756中之任一者中所闡述之序列展現至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
  161. 如請求項63至160中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列或與其展現至少或至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
  162. 如請求項63至161中任一項之聚核苷酸，其中該聚核苷酸包含SEQ ID NO:755中所闡述之序列，且保留結合於BCMA之功能且保留減小之RNA異質性。
  163. 一種載體，其包含如請求項63至162中任一項之聚核苷酸。
  164. 如請求項163之載體，其中該載體為病毒載體。
  165. 如請求項164之載體，其中該病毒載體為反轉錄病毒載體。
  166. 如請求項164或165之載體，其中該病毒載體為慢病毒載體。
  167. 一種嵌合抗原受體，其由如請求項63至162中任一項之聚核苷酸編碼。
  168. 一種經工程改造之細胞，其包含如請求項1至62及167中任一項之嵌合抗原受體。
  169. 一種經工程改造之細胞，其包含如請求項63至162中任一項之聚核苷酸或如請求項163至166中任一項之載體。
  170. 如請求項168或169之經工程改造之細胞，其中該細胞為免疫細胞。
  171. 如請求項168至170中任一項之經工程改造之細胞。其中該免疫細胞為獲自個體之初代細胞。
  172. 如請求項170或171之經工程改造之細胞，其中該免疫細胞為NK細胞或T細胞。
  173. 如請求項170至172中任一項之經工程改造之細胞，其中該免疫細胞為T細胞，且該T細胞為CD4+及/或CD8+ T細胞。
  174. 如請求項168至173中任一項之經工程改造之細胞，其中該細胞包含編碼該嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現至少70%、75%、80%、85%、90%或95% RNA同質性。
  175. 如請求項168至174中任一項之經工程改造之細胞，其中該細胞包含編碼該嵌合抗原受體之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現其異質性與處於編碼參考嵌合抗原受體之細胞中之經轉錄mRNA的異質性相比減小，該參考嵌合抗原受體包含與該嵌合抗原受體相同之胺基酸序列，但由在編碼該等CAR之聚核苷酸中包含一或多個核苷酸差異的不同聚核苷酸序列編碼，且/或其中該參考嵌合抗原受體係由在該編碼該間隔子之核酸中包含一或多個剪接供體位點及/或一或多個剪接受體位點的聚核苷酸編碼。
  176. 如請求項175之經工程改造之細胞，其中該RNA異質性減小大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50%。
  177. 如請求項175或176之經工程改造之細胞，其中編碼該參考CAR之聚核苷酸包含編碼該參考CAR之經轉錄RNA (視情況，信使RNA (mRNA))，該RNA展現大於或大於約10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%或超過50% RNA異質性。
  178. 如請求項174至177中任一項之經工程改造之細胞，其中該RNA同質性及/或異質性係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或液相層析來加以測定。
  179. 如請求項168至178中任一項之經工程改造之細胞，其中，在複數個該等經工程改造之細胞當中，在該複數個細胞中少於或少於約10%、9%、8%、7%、5%、4%、3%、2%或1%之細胞包含展現滋養型(tonic)信號傳導及/或與抗原無關之活性或信號傳導的嵌合抗原受體。
  180. 一種組合物，其包含如請求項1至62及167中任一項之嵌合抗原受體、如請求項63至162中任一項之聚核苷酸或如請求項163至166中任一項之載體。
  181. 一種組合物，其包含如請求項168至179中任一項之經工程改造之細胞。
  182. 如請求項181之組合物，其中該組合物包含CD4+及CD8+ T細胞，且CD4+與CD8+ T細胞之比率為自或自約1:3至3:1，視情況，1:2至2:1。
  183. 如請求項180至182中任一項之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之賦形劑。
  184. 一種治療方法，其包含向患有疾病或病症之個體投與如請求項168至179中任一項之經工程改造之細胞或如請求項180至183中任一項之組合物。
  185. 一種如請求項168至179中任一項之經工程改造之細胞或如請求項180至183中任一項之組合物的用途，其用於製造用於治療疾病或病症之藥劑。
  186. 如請求項184之方法或如請求項185之用途，其中該疾病或病症與B細胞成熟抗原(BCMA)之表現相關聯，視情況為B細胞相關病症。
  187. 如請求項184至186中任一項之方法或用途，其中該與BCMA相關聯之疾病或病症為自體免疫疾病或病症。
  188. 如請求項185至187中任一項之方法或用途，其中該與BCMA相關聯之疾病或病症為癌症。
  189. 如請求項188之方法或用途，其中該癌症為BCMA表現性癌症。
  190. 如請求項188或189之方法或用途，其中該癌症為B細胞惡性病。
  191. 如請求項188至190中任一項之方法或用途，其中該癌症為淋巴瘤、白血病或漿細胞惡性病。
  192. 如請求項191之方法或用途，其中該癌症為淋巴瘤，且該淋巴瘤為伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)、濾泡性淋巴瘤、小無裂細胞淋巴瘤、黏膜相關淋巴組織淋巴瘤(MALT)、邊緣區淋巴瘤、脾淋巴瘤、結節單核細胞樣B細胞淋巴瘤、免疫母細胞淋巴瘤、大細胞淋巴瘤、瀰漫性混合細胞淋巴瘤、肺部B細胞血管中心性淋巴瘤、小淋巴球性淋巴瘤、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL)或套細胞淋巴瘤(MCL)。
  193. 如請求項192之方法或用途，其中該癌症為白血病，且該白血病為慢性淋巴球性白血病(CLL)、漿細胞白血病或急性淋巴球性白血病(ALL)。
  194. 如請求項191之方法或用途，其中該癌症為漿細胞惡性病，且該漿細胞惡性病為多發性骨髓瘤(MM)或漿細胞瘤。
  195. 如請求項188至191及194中任一項之方法或用途，其中該癌症為多發性骨髓瘤(MM)。
  196. 一種測定轉殖基因之經轉錄核酸之異質性的方法，該方法包含： a)使用至少一種5′及3′引子對使經轉錄核酸擴增，其中至少一對包含與該經轉錄核酸之5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與該經轉錄核酸之3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子，以產生一或多種擴增產物；及 b)偵測該等擴增產物，其中存在來自至少一種5′及3′引子對的兩種或超過兩種擴增產物指示該等擴增產物中之異質性。
  197. 如請求項196之方法，其中在b)中所偵測之該等差異為該等擴增之轉錄本的不同長度。
  198. 如請求項196之方法，其中在b)中之該等差異為在該等擴增之轉錄本之層析概況中的差異。
  199. 如請求項196至198中任一項之方法，其中該等擴增產物中之差異係藉由瓊脂糖凝膠電泳、基於晶片之毛細電泳、分析型超速離心、場流動分級分離或層析來加以測定。
  200. 如請求項196至199中任一項之方法，其中該5′引子對自該經轉錄核酸之啟動子區轉錄的序列具特異性。
  201. 如請求項196至200中任一項之方法，其中該經轉錄核酸係使用對該聚核苷酸之胺基酸編碼序列內之序列及/或經轉錄前驅mRNA之3′非轉譯區具特異性的3′引子來加以擴增。
  202. 如請求項196至201中任一項之方法，其中該3引子對該經轉錄前驅mRNA之該3′非轉譯區的聚腺苷酸化序列或增強子區具特異性。
  203. 如請求項196至202中任一項之方法，其中步驟a)係藉由單個擴增反應使用單個5′及3′引子對來實現，該引子對包含與該經轉錄核酸之該5′非轉譯區(5′ UTR)內之核酸序列互補的5′引子及與該3′非轉譯區(3′ UTR)內之核酸序列互補的3′引子。
  204. 如請求項196至203中任一項之方法，其中步驟a)係藉由平行或後續擴增反應使用第一5′及3′引子對、第二5′及3′引子對及視情況另外之5′及3′引子對來實現，其中： 該第一5′及3′引子對含有與該經轉錄核酸之該5′ UTR內之核酸序列互補的5′引子及與該經轉錄核酸之該3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子； 該第二5′及3′引子對含有其序列與該核酸轉錄本之經轉譯序列之一部分互補的5′引子及其序列與該轉錄本之該3′ UTR內之核酸序列互補的3′引子；且 該視情況另外之5′及3′引子對各自含有與該轉錄本之經轉譯區內之序列互補的序列。
  205. 如請求項204之方法，其中該等平行或後續擴增反應使該轉錄本之重疊部分擴增。
  206. 如請求項196至205中任一項之方法，其中該等擴增產物預測為長度約1.5千鹼基、2千鹼基、2.5千鹼基、3千鹼基、3.5千鹼基、4千鹼基、4.5千鹼基、5千鹼基、5.5千鹼基、6千鹼基、7千鹼基或8千鹼基。
  207. 如請求項196至206中任一項之方法，其中偵測為具有異質性之經轉錄核酸鑑別為用於一或多個剪接位點之移除的轉殖基因候選者。
  208. 如請求項207之方法，其中該轉殖基因候選者之該經轉錄核酸在於細胞中表現時展現至少或至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或超過75%異質性。
  209. 一種減小所表現轉殖基因轉錄本之異質性的方法，該方法包含： a)根據如請求項207或208之方法來鑑別用於剪接位點移除之轉殖基因候選者； b)鑑別一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點；及 c)對在b)中所鑑別之該一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點處或附近的核酸序列進行修飾，藉此產生經修飾之聚核苷酸。
  210. 如請求項209之方法，其進一步包含：d)如同步驟a)中，評定用於剪接位點移除之轉殖基因候選性。
  211. 如請求項210之方法，其進一步包含e)重複步驟b)-d)，直至步驟d)中之轉錄本的異質性與如在步驟a)中所測定之轉錄本異質性相比減小為止。
  212. 如請求項209至211中任一項之方法，其中該一或多個潛在之剪接供體及/或剪接受體位點展現剪接事件之得分為約或至少約0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95或1.0，且/或該/該等位點涉及剪接事件之機率預測為至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或100%。
  213. 如請求項209至212中任一項之方法，其中剪接供體位點及剪接受體位點獨立地加以鑑別。
  214. 如請求項209至213中任一項之方法，其中該(等)剪接受體及/或供體位點為典型、非典型及/或隱蔽之剪接受體及/或供體位點。
  215. 如請求項209至214中任一項之方法，其中該轉殖基因為嵌合抗原受體或嵌合抗原受體之一部分。
  216. 如請求項215之方法，其中該CAR多肽包含抗原結合域、間隔子區、跨膜區及細胞內信號傳導區，該抗原結合域包含有包含可變重鏈(VH )及可變輕鏈(VL )之抗體片段，視情況，單鏈抗體片段(scFv)。
  217. 如請求項215或216之方法，其中該經修飾之聚核苷酸不在所編碼之該CAR多肽之該抗原結合域的編碼序列內經修飾。
  218. 如請求項209至217中任一項之方法，其中在該聚核苷酸之修飾後，該轉殖基因的所編碼之胺基酸序列不變。
  219. 如請求項209至218中任一項之方法，其中自該經修飾之聚核苷酸轉錄的RNA展現在於細胞中表現未經修飾之聚核苷酸時的至少或至少約70%、75%、80%、85%、90%或95%同質性。
  220. 如請求項196至219中任一項之方法，其中該細胞為人類細胞。
  221. 如請求項196至220中任一項之方法，其中該細胞為T細胞。
  222. 如請求項196至221中任一項之方法，其中該方法為電腦實施之方法，且其中一或多個步驟a)-c)在包含一或多個處理器及記憶體之電子裝置處進行。
  223. 一種包含處理器及記憶體之電腦系統，該記憶體包含可操作以使該處理器進行如請求項196至222中任一項之方法中之任何一或多個步驟的指令。
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