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TW201904964A - 作為ｈｐｋ1之抑制劑的啶 - Google Patents

作為ｈｐｋ1之抑制劑的啶

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Publication number
TW201904964A
TW201904964A TW107111421A TW107111421A TW201904964A TW 201904964 A TW201904964 A TW 201904964A TW 107111421 A TW107111421 A TW 107111421A TW 107111421 A TW107111421 A TW 107111421A TW 201904964 A TW201904964 A TW 201904964A
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TW
Taiwan
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alkyl
group
compound
heteroaryl
cycloalkyl
Prior art date
Application number
TW107111421A
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English (en)
Inventor
嘉業 陳
布萊克 丹尼爾斯
喬伊 朵羅伯尼
李維斯 賈亞德
提摩西 希佛朗
瑪科倫 哈斯堤司
軍 梁
蘇山特 梅爾荷朵拉
洛罕 曼多卡
諾米 拉賈帕克沙
麥克 休
克雷格 史迪瓦拉
約翰 泰利斯
維路 王
斌清 魏
愛和 周
馬修 Ｗ 卡特萊特
伊曼紐拉 甘西亞
葛萊漢 瓊斯
麥可 藍克貝瑞
安德魯 馬迪恩
艾蓮 賽華德
大衛 菲佛
建朝 方
永漢 胡
安德魯 古德
白華 胡
陸愛軍
Original Assignee
瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 filed Critical 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
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Abstract

描述
Figure TW201904964A_A0001
啶化合物及其作為HPK1之抑制劑之用途。該等化合物用於治療HPK1依賴性病症且增強免疫反應。亦描述抑制HPK1之方法、治療HPK1依賴性病症之方法、用於增強免疫反應之方法、及用於製備該等

Description

作為HPK1之抑制劑的 啶
本發明係關於調節HPK1之功能且用於治療HPK1介導之疾病及病症(諸如癌症)之化合物。
由腫瘤學家使用以治療癌症之主要治療形式為手術切除、放射療法及經典化療藥物。遺憾的是，手術切除不是許多腫瘤或癌症形式之可行性選擇。此外，放射療法及化療藥物不僅僅靶向患病細胞，因此最終損害健康細胞。更特異性靶向腫瘤細胞之治療劑正在藉由利用腫瘤特異性抗原表現或腫瘤細胞內特異性蛋白質之不適當過表現或活化來開發，但是腫瘤細胞易於發生突變且可能對特異性靶向腫瘤細胞之藥物變得有抗性。
已出現一種新的癌症治療模範，該癌症治療模範利用患者自身免疫系統來克服由許多癌症所利用之免疫策略且增強抗腫瘤免疫性。一種此類策略為抑制通常用於維持周邊耐受性之免疫反應之負調節劑，使得腫瘤抗原被識別為非自身實體。
造血先驅細胞激酶1(HPK1)為樹突細胞活化之負調節劑之實例，且T細胞及B細胞反應可靶向增強抗腫瘤免疫性。HPK1主要由造血細胞表現，該等造血細胞包括早期先驅細胞。在T細胞中，據信HPK1藉由磷酸化Ser376處之SLP76(Di Bartolo等人(2007)JEM 204：681-691)及Thr254處之Gads來減少信號傳導微群集之持久性來負調控T細胞活化，此導致結合至磷酸化SLP76及Gads之14-3-3蛋白之募集，自含LAT之微群集釋放SLP76-Gads-14-3-3複合體(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5)：839-853)。HPK1亦可回應於前列腺素E2 而變得活化，該前列腺素E2通常由腫瘤分泌，有助於腫瘤細胞自免疫系統中逃脫。
本文提供酶HPK1之拮抗劑。該等化合物具有式I或Ia所陳述之結構，或為其醫藥學上可接受之鹽、代謝物、前藥或衍生物。進一步提供製備式I或Ia化合物之方法。
該化合物可用於抑制HPK1激酶活性，增強免疫反應，且用於治療HPK1依賴性病症。因此，亦提供包含式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物以及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組成物。提供抑制HPK1之方法，其包含使HPK1與有效量之式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物接觸。提供治療HPK1依賴性病症之方法，其包含向有需要之受試者投與式I或Ia化合物或其醫藥調配物。亦提供一種用於治療HPK1依賴性病症之套組，該套組包含：包含式I或Ia化合物之醫藥組成物；及使用說明書。
 相關申請案之交叉引用
本申請要求2017年3月30日申請之國際專利申請案第PCT/CN2017/078792號及2018年2月15日申請之國際專利申請案第PCT/CN2018/076909號之優先權權益，該等申請案之內容特此以全文引用的方式併入。
序列表
本申請案含有已以ASCII格式電子提交且據此以全文引用的方式併入本文中之序列表。2018年3月26日創建之該ASCII副本名為P34139_WO_2_SL.TXT，且大小為21KB。
本文揭示作為HPK1(造血先驅細胞激酶1)之抑制劑或調節劑之式I或Ia化合物及其醫藥組成物。因此，該化合物及組成物可用於治療由HPK1介導之疾病及病症。治療方法之實例係在罹患癌症之受試者之情形中。該化合物不僅可用於抗擊癌症，而且亦可有利地用於增強有需要之受試者中之免疫反應。
現在將在下文中更充分地描述目前揭示之主題。然而，熟習目前揭示之主題所屬技術者將想到本文所陳述之目前揭示之主題之許多修改及其他實施例，其具有在前面的描述中提出之教導之益處。因此，應理解，目前揭示之主題不限於所揭示之具體實施例，且修改及其他實施例意欲包括在所附申請專利範圍之範疇內。換言之，本文所述之主題囊括所有替代方案、修改及等效物。若一或多個所併入之文獻、專利及類似材料與本申請案(包括但不限於定義之術語、術語用法、所述技術或類似物)不同或矛盾，則以本申請案為準。除非另外定義，否則本文中所使用之所有科技術語均具有與一般熟習此項技術者通常所理解之意義相同的意義。本文提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻皆以全文引用的方式併入本文中。
定義
術語「取代基」係指置換分子上之氫原子之原子或一組原子。術語「經取代之」表示指定分子帶有一或多個取代基。術語「式之化合物(a compound of the formula或a compound of formula或compounds of the formula或compounds of formula)」係指選自如由式I或Ia所定義之化合物類之任何化合物。
如本文所使用，術語「烷基」係指含有1至12個碳原子之直鏈或分支鏈烴基。術語「低碳烷基」係指C1 -C6 烷基鏈。烷基之實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、第三丁基及正戊基。烷基可視情況經一或多個取代基取代。
術語「烯基」係指具有二至八個碳原子(C2 -C8 )，較佳(C2-6 )之直鏈或分支鏈單價烴基，其具有至少一個不飽和位點，亦即碳-碳sp2 雙鍵，其中烯基 可視情況獨立地經一或多個本文所述之取代基取代，且包括具有「順式」及「反式」取向或可替代地「E」及「Z」取向之基團。實例包括但不限於乙烯基(ethylenyl或vinyl)(-CH=CH2 )、烯丙基(-CH2 CH=CH2 )及類似物。
術語「伸烯基」係指具有二至八個碳原子(C2 -C8 )，較佳(C2-6 )之直鏈或分支鏈二價烴基，其具有至少一個不飽和位點，亦即碳-碳sp2 雙鍵，其中伸烯基可視情況獨立地經一或多個本文所述之取代基取代，且包括具有「順式」及「反式」取向或可替代地「E」及「Z」取向之基團。實例包括但不限於伸乙烯基(ethylenylene或vinylene)(-CH=CH-)、烯丙基(-CH2 CH=CH-)及類似物。
術語「烷氧基」係指-O-烷基。烷氧基可視情況經一或多個取代基取代。
術語「鹵烷氧基」係指經一或多個鹵基取代基取代之-O-烷基。鹵烷氧基之實例包括三氟甲氧基及2,2,2-三氟乙氧基。
術語「鹵烷基」係指經一或多個鹵基取代基取代之烷基。鹵烷基之實例包括二氟甲基(CHF2 )、三氟甲基(CF3 )及2,2,2-三氟乙基。
如本文所使用，術語「鹵素」、「鹵」或「鹵基」意指-F、-Cl、-Br或-I。
如本文所使用，名稱「(CO)」及「C(O)」用於指示羰基部分。合適羰基部分之實例包括但不限於酮及醛部分。
術語「環烷基」係指具有3至8員或3至7員或3至6員或3至5員或3至4員之烴，且可為單環或雙環。該環可為飽和的或可具有一些不飽和度。環烷基可視情況經一或多個取代基取代。在一個實施例中，環烷基之各環之0、1、2、3或4個原子可經取代基取代。環烷基之代表性實例包括環丙基、環戊基、環己基、環丁基、環庚基、環戊烯基、環戊二烯基、環己烯基、環己二烯基及類似物。
術語「芳基」係指烴單環、雙環或三環芳族環系統。芳基可視情況經一或多個取代基取代。在一個實施例中，芳基之各環之0、1、2、3、4、5或6個原子可經取代基取代。芳基之實例包括苯基、萘基、蒽基、茀基、茚基、薁基及類似物。
術語「雜芳基」係指雜原子選自O、N或S且其餘環原子為碳(具有適當的氫原子，除非另外指示)之芳族5至10員環系統。雜芳基可視情況經一或多個取代基取代。在一個實施例中，雜芳基之各環之0、1、2、3或4個原子可經取代基取代。雜芳基之實例包括吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、異噁唑基、喹啉基、吡唑基、異噻唑基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、異喹啉基、吲唑基及類似物。
術語「雜環基」或「雜環烷基」係指非芳族3至8員單環、7至12員雙環或10至14員三環系統，其若為單環，則包含1至3個雜原子，若為雙環，則包含1至6個雜原子，或若為三環，則包含1至9個雜原子，該等雜原子選自O、N、S、B、P或Si，其中該非芳族環系統為完全飽和的。雜環烷基可視情況經一或多個取代基取代。在一個實施例中，雜環烷基之各環之0、1、2、3或4個原子可經取代基取代。代表性雜環烷基包括哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫嗎啉基、1,3-二氧雜戊環烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、噻吩基及類似物。
術語「烷基胺基」係指進一步經一或兩個烷基取代之胺基取代基。術語「胺基烷基」係指進一步經一或多個胺基取代之烷基取代基。術語「羥烷基」係指進一步經一或多個羥基取代之烷基取代基。烷基胺基、胺基烷基、巰基烷基、羥基烷基、巰基烷氧基、磺醯基烷基、磺醯基芳基、烷基羰基及烷基羰基烷基之烷基或芳基部分可視情況經一或多個取代基取代。
術語「羥烷基」係指進一步經一或多個羥基取代之烷基取代基。烷基部分可進一步視情況經一或多個取代基取代。
取代基及/或變數之組合僅在此類組合產生正確的化合價時方為允許的。除非由上下文另外指示，否則連字符(-)表示側基之連接點。
術語「互變異構物」或「互變異構形式」係指可經由低能量阻障相互轉化的具有不同能量之結構異構物。例如，質子互變異構物(亦稱為質子異變的互變異構物)包括經由質子遷移發生之相互轉化，諸如酮基-烯醇及亞胺-烯胺異構化。價態互變異構物包括藉由一些鍵接電子之重排發生之相互轉化。
術語「掌性」係指具有鏡像配偶體之不重疊性之性質的分子，而術語「非掌性」係指可重疊在其鏡像配偶體上之分子。
術語「非鏡像異構物」係指具有二或更多個不對稱中心且其分子不為彼此之鏡像之立體異構物。
術語「鏡像異構物」係指化合物之為彼此之不可重疊鏡像之兩個立體異構物。兩種鏡像異構物之等莫耳混合物係稱為「外消旋混合物」或「外消旋物」。
術語「異構物」或「立體異構物」係指具有相同化學組成，但在原子或基團於空間中之排列方面不同之化合物。
關於掌性中心之命名，術語「d」及「1」(或正及負)組態如由IUPAC推薦所定義。
此外，本文所述之化合物可包括具有任一幾何結構之烯烴：「Z」係指被稱為「順式」(同側)組態之組態，而「E」係指被稱為「反式」(對側)組態之組態。
「溶劑合物」係指一或多種溶劑分子及本發明化合物之締合物或複合物。形成溶劑合物的溶劑之實例包括但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。術語「水合物」係指溶劑分子為水之複合物。
「代謝物」為由指定化合物或其鹽在體內代謝產生之產物。化合物之代謝物可使用此項技術中已知之常規技術鑒別，且其活性可使用諸如本文所述者之測試判定。此等產物可例如由投予之化合物之氧化、羥基化、還原、水解、胺化、脫胺、酯化、脫酯、酶促裂解及類似反應產生。因此，本發明包括本發明化合物(包括藉由包含使本發明化合物與哺乳動物接觸一段足以產生其代謝產物之時間之方法而產生的化合物)之代謝物。
片語「醫藥學上可接受之」表示物質或組成物必須與構成調配物之其他成分及/或用其治療之受試者在化學上及/或毒理學上相容。
如本文所使用之片語「醫藥學上可接受之鹽」係指本發明化合物之醫藥學上可接受之有機或無機鹽。示範性鹽包括但不限於硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異菸鹼酸鹽、乳酸鹽、柳酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、丹寧酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、順丁烯二酸鹽、龍膽酸鹽(gentisinate)、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、蔗糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲烷磺酸鹽「甲磺酸鹽」、乙烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、帕莫酸鹽(pamoate)(亦即，1,1' -亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘酸鹽))、鹼金屬(例如，鈉及鉀)鹽、鹼土金屬(例如，鎂)鹽及銨鹽。醫藥學上可接受之鹽可涉及包括另一分子，諸如乙酸根離子、琥珀酸根離子或其他相對離子。該相對離子可為使母體化合物上之電荷穩定的任何有機或無機部分。此外，醫藥學上可接受之鹽之結構中可具有一個以上帶電原子。多個帶電原子為醫藥學上可 接受之鹽之一部分的情況可具有多個相對離子。因此，醫藥學上可接受之鹽可具有一或多個帶電原子及/或一或多個相對離子。
如本文所使用，「載劑」包括在所用劑量及濃度下對暴露於其之細胞或哺乳動物無毒的醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑。通常，生理學上可接受之載劑為pH緩衝水溶液。生理學上可接受之載劑之非限制性實例包括緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖醇，諸如甘露糖醇或山梨糖醇；成鹽相對離子，諸如鈉；及/或非離子界面活性劑，諸如TWEENTM 、聚乙二醇(PEG)及PLURONICSTM 。在某些實施例中，醫藥學上可接受之載劑為非天然存在之醫藥學上可接受之載劑。
本文中之詞語「抑制劑」之使用意指抑制HPK1活性之分子。本文中之「抑制」意指相較於不存在抑制劑之情況下酶之活性降低該靶酶之活性。在一些實施例中，術語「抑制」意指HPK1活性降低至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約95%。在其他實施例中，抑制意指HPK1活性降低約5%至約25%、約25%至約50%、約50%至約75%或約75%至100%。在一些實施例中，抑制意指HPK1活性降低約95%至100%，例如活性降低95%、96%、97%，98%、99%或100%。此類降低可使用將由熟習此項技術者識別之多種技術(包括活體外激酶檢定)來量測。
如本文所使用，「HPK1拮抗劑」或「HPK1抑制劑」為降低、抑制或以其他方式減少HPK1之一或多種生物活性(例如，絲胺酸/蘇胺酸激酶活性、 在TCR活化時募集至TCR複合體、與蛋白質結合配偶體諸如SLP76相互作用)。使用HPK1拮抗劑之拮抗作用不一定指示HPK1活性之完全消除。相反，活性可降低統計學上顯著量，包括例如相較於適當對照降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、95%或100%之HPK1活性。在一些實施例中，HPK1拮抗劑降低、抑制或以其他方式減少HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在此等實施例之一些中，HPK1拮抗劑降低、抑制或以其他方式減少HPK1介導之SLP76及/或Gad之磷酸化。目前揭示之化合物直接結合至HPK1且抑制其激酶活性。
「特異性拮抗劑」意指使所定義標靶之活性降低、抑制或以其他方式減少大於不相關標靶之活性的藥劑。例如，HPK1特異性拮抗劑將HPK1之至少一種生物活性降低一定量，該量在統計學上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制作用。在一些實施例中，拮抗劑對標靶之IC50 為拮抗劑對非標靶之IC50 之約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、5%、1%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。目前揭示之化合物可或可不為特異性HPK1拮抗劑。特異性HPK1拮抗劑將HPK1之生物活性降低一定量，該量在統計學上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制作用。在某些實施例中，HPK1拮抗劑特異性抑制HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在此等實施例之一些中，HPK1拮抗劑對HPK1之IC50 為HPK1拮抗劑對另一種絲胺酸/蘇胺酸激酶或其他類型之激酶(例如，酪胺酸激酶)之IC50 之約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。
術語「治療(treat及treatment)」係指治療性治療及防治性或預防性措施，其中目標係防止或減緩(減輕)不需要之生理學改變或病症，諸如癌症之發展或擴散。出於本發明之目的，有益或需要之臨床結果包括但不限減輕解症狀、 減少疾病程度、疾病狀態穩定(亦即，未惡化)、延遲或減緩疾病進展、改善或緩和疾病狀態及緩解(無論是部分還是全部)，無論是可偵測的還是不可偵測的。「治療」亦可意指與在不接受治療情況下預期之存活相比使存活延長。需要治療者包括已患有病狀或病症者、以及傾向於患有病狀或病症者或欲預防病狀或病症者。
術語「投與(administration或administering)」包括將化合物引入至受試者以進行其預期功能之途徑。可使用之投與途徑之實例包括注射(皮下、靜脈內、非經腸、腹膜內、鞘內)、局部、口服、吸入、直腸及經皮。
術語「有效量」包括在各種劑量下且持續一段所需要之時間有效達成所要結果之量。有效量之化合物可根據諸如受試者之疾病狀態、年齡及體重之因素以及化合物在受試者中引發所要反應之能力而變化。可調整劑量方案以提供最佳治療反應。
如本文所用，片語「全身性投與」、「周邊投與」及「外周地投與」意謂化合物、藥物或其他材料之投與，以致其進入患者之系統且因此經受代謝及其他類似過程。
片語「治療有效量」意謂本發明化合物之以下量：(i)治療或預防特定疾病、病狀或病症，(ii)削弱、改善或消除特定疾病、病狀或病症之一或多種症狀，或(iii)預防或延遲本文所述之特定疾病、病狀或病症之一或多種症狀的發作。在癌症之情形下，治療有效量之藥物可減少癌細胞之數目；降低腫瘤大小；抑制(亦即在某種程度上減緩且較佳地停止)癌細胞浸潤至周邊器官中；抑制(亦即在某種程度上減緩且較佳地停止)腫瘤轉移；在某種程度上抑制腫瘤生長；及/或在某種程度上減輕與癌症相關之一或多種症狀。倘若藥物可預防生長及/或殺傷現有癌細胞，則其可為細胞抑制性的及/或細胞毒性的。對於癌症療法，可例如藉由分析疾病進展時間(TTP)及/或判定反應率(response rate，RR)來量測功效。
術語「受試者」係指動物，諸如哺乳動物，包括但不限於靈長類動物(例如人類)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠及類似動物。在某些實施例中，受試者為人類。
術語「異常細胞生長」、「不受調控之細胞生長」及「過度增生性病症」在本申請案中可互換使用。除非另作指示，否則如本文中所用，「異常細胞生長」係指細胞生長不依賴於正常調控機制(例如喪失接觸抑制)。
術語「癌症」係指受試者中特徵在於不受調控之細胞生長之病狀，其中癌性細胞能夠局部侵入及/或轉移至非鄰接部位。如本文所使用，「癌細胞」、「癌性細胞」或「腫瘤細胞」係指特徵在於此不受調控之細胞生長及侵入性特性之細胞。術語「癌症」涵蓋所有類型之癌症，包括但不限於所有形式之癌、黑色素瘤、胚細胞瘤、肉瘤、淋巴瘤及白血病，包括但不限於膀胱癌、膀胱癌、腦瘤、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮內膜癌、肝細胞癌、喉癌、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、腎癌及甲狀腺癌、急性淋巴球性白血病、急性骨髓性白血病、室管膜瘤、尤英氏肉瘤、神經膠質母細胞瘤、神經管胚細胞瘤、成神經細胞瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、橫紋肌樣癌及腎胚細胞瘤(威爾姆氏瘤)。
「化療劑」為用於治療癌症之化合物或生物製劑。化療劑之實例包括烷化劑諸如塞替派及環磷醯胺(CYTOXAN®)；磺酸烷基酯諸如白消安、英丙舒凡及哌泊舒凡；氮丙啶類諸如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌、美妥替派(meturedopa)及烏瑞替派(uredopa)；乙烯亞胺及甲基密胺，包括六甲蜜胺、三亞乙基密胺、三亞乙基磷醯胺、三亞乙基硫代磷醯胺及三羥甲基密胺；番荔枝內酯(acetogenin)(尤其是布拉他辛(bullatacin)及布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氫大麻酚(屈大麻酚，MARINOL®)；β-拉帕醌；拉帕醇；秋水仙鹼；樺木酸；喜樹鹼(包括合成類似物托泊替康(HYCAMTIN®)、CPT-11(伊立替康， CAMPTOSAR®)；乙醯基喜樹鹼、莨菪素及9-胺基喜樹鹼)；苔蘚抑素；培美曲塞；callystatin；CC-1065(包括其合成類似物阿多來新、卡澤來新及比澤來新)；鬼臼毒素；鬼臼酸；替尼泊苷；念珠藻環肽(尤其是念珠藻環肽1及念珠藻環肽8)；多拉司他汀；多卡米星(包括合成類似物KW-2189及CB1-TM1)；艾榴塞洛素；水鬼蕉鹼；TLK-286；CDP323，口服α-4整合素抑制劑；sarcodictyin；海綿抑素；氮芥類諸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、膽磷醯胺(cholophosphamide)、雌莫司汀、異環磷醯胺、氮芥、鹽酸氧氮芥、美法侖、新氮芥、苯芥膽甾醇、潑尼莫司汀、曲磷胺、烏拉莫司汀；硝基脲類諸如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀；抗生素類諸如烯二炔抗生素(例如刺孢黴素，尤其是刺孢黴素γ1I及刺孢黴素ΩI1(參見，例如Nicolaou等人 ，Angew.Chem Intl.Ed.Engl .,33：183-186(1994))；達內黴素，包括達內黴素A；埃斯培拉黴素；以及新制癌菌素生色團及有關色蛋白烯二炔抗生素生色團)、阿克拉黴素(aclacinomysin)、放線菌素、氨茴黴素(authramycin)、偶氮絲胺酸、博來黴素、放線菌素、carabicin、洋紅黴素、嗜癌黴素、色黴素、更生黴素、柔紅黴素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正白胺酸、多柔比星(包括ADRIAMYCIN®、嗎啉代-多柔比星、氰基嗎啉代-多柔比星、2-吡咯啉代-多柔比星、多柔比星HCl脂質體注射劑(DOXIL®)及脫氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊達比星、麻西羅黴素、絲裂黴素類諸如絲裂黴素C、麥考酚酸、諾拉黴素、橄欖黴素、培洛黴素、泊非黴素、嘌羅黴素、三鐵阿黴素、羅多比星、鏈黑黴素、鏈佐星、殺結核菌素、烏苯美司、淨司他丁、佐柔比星；抗代謝藥諸如甲氨蝶呤、吉西他賓(GEMZAR®)、喃氟啶(UFTORAL®)、卡培他濱(XELODA®)、埃博黴素及5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物諸如二甲葉酸、甲胺蝶呤、蝶羅呤、三甲曲沙；嘌呤類似物諸如氟達拉濱、6-巰嘌呤、硫咪嘌呤、硫鳥嘌呤；嘧啶類似物諸如安西他濱、阿紮胞苷、6-氮雜尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脫氧尿苷、去氧氟尿苷、依 諾他濱及氟尿苷；抗腎上腺類諸如氨魯米特、米托坦、曲洛司坦；葉酸補充劑諸如亞葉酸(frolinic acid)；醋葡醛內酯；醛磷醯胺糖苷；胺基酮戊酸；恩尿嘧啶；安吖啶；bestrabucil；比生群；依達曲沙(edatraxate)；地磷醯胺(defofamine)；秋水仙胺；地吖醌；elfornithine；依利醋銨；依託格魯；硝酸鎵；羥基脲；香菇多糖；氯尼達明；美登素類化合物諸如美坦辛及安絲菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌達醇；尼曲吖啶；噴司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；2-乙基醯肼；丙卡巴肼；PSK®多醣複合物(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生；根黴素；西佐喃(sizofiran)；鍺螺胺；替奴佐酸；三亞胺醌；2,2',2”-三氯三乙胺；單端孢黴烯類(尤其為T-2毒素、疣孢菌素A、桿孢菌素A及蛇形菌素)；烏拉坦；長春地辛(ELDISINE®、FILDESIN®)；達卡巴嗪；甘露氮芥；二溴甘露醇；二溴衛矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；阿糖胞苷(「Ara-C」)；塞替派；紫杉烷，例如紫杉醇(TAXOL®)、紫杉醇之白蛋白工程化奈米顆粒調配物(ABRAXANETM )，及多西紫杉醇(TAXOTERE®)；苯丁酸氮芥；6-硫鳥嘌呤；巰基嘌呤；甲胺蝶呤；鉑類似物諸如順鉑及卡波鉑；長春花鹼(VELBAN®)；鉑；依託泊苷(VP-16)；異環磷醯胺；米托蒽醌；長春新鹼(ONCOVIN®)；奧克賽鉑；亞葉酸；長春瑞濱(NAVELBINE®)；諾安托；依達曲沙；道諾黴素；胺基蝶呤；伊班膦酸鹽；拓撲異構酶抑制劑RFS 2000；二氟甲基鳥胺酸(DMFO)；類視色素，諸如視黃酸；上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物；以及上述二或更多者之組合諸如CHOP，環磷醯胺、多柔比星、長春新鹼與潑尼龍之混合療法之縮寫；及FOLFOX，具有奧克賽鉑(ELOXATINTM )與5-FU及亞葉酸組合之治療方案之縮寫。
化療劑之額外實例包括用於調控、減少、阻斷或抑制可促進癌症生長之激素作用之抗激素劑，且通常呈全身(systemic或whole-body)治療之形式。其自身可為激素。實例包括抗雌激素及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)，包括 例如它莫昔芬(包括NOLVADEX®它莫昔芬)、雷洛昔芬(EVISTA®)、屈洛昔芬、4-羥基它莫昔芬、曲沃昔芬、克昔芬、LY117018、奧那司酮及托瑞米芬(FARESTON®)；抗孕酮；雌激素受體下調劑(ERD)；雌激素受體拮抗劑，諸如氟維司群(FASLODEX®)；用於遏制或關閉卵巢之藥劑，例如釋黃體素(LHRH)促效劑，諸如乙酸亮丙瑞林(LUPRON®及ELIGARD®)、乙酸戈舍瑞林、乙酸布舍瑞林及曲普瑞林；抗雄激素，諸如氟他胺、尼魯米特及比卡魯胺；及抑制調控腎上腺中雌激素產生之芳香酶的芳香酶抑制劑，諸如4(5)-咪唑、胺魯米特、乙酸甲地孕酮(MEGASE®)、依西美坦(AROMASIN®)、福美司坦(formestanie)、法倔唑、伏氯唑(RIVISOR®)、來曲唑(FEMARA®)及阿那曲唑(ARIMIDEX®)。此外，化療劑之此類定義包括雙膦酸鹽，諸如氯膦酸鹽(例如，BONEFOS®或OSTAC®)、依替膦酸鹽(DIDROCAL®)、NE-58095、唑來膦酸/唑來膦酸鹽(ZOMETA®)、阿侖膦酸鹽(FOSAMAX®)、帕米膦酸鹽(AREDIA®)、替魯膦酸鹽(SKELID®)或利塞膦酸鹽(ACTONEL®)；以及曲沙他濱(troxacitabine)(1,3-二氧戊環核苷胞嘧啶類似物)；反義寡核苷酸，尤其抑制涉及異常細胞增殖之信號傳導途徑中之基因表現者，諸如，例如PKC-α、Raf、H-Ras及表皮生長因子受體(EGF-R)；疫苗，諸如THERATOPE®疫苗及基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN®疫苗、LEUVECTIN®疫苗及VAXID®疫苗；拓撲異構酶1抑制劑(例如LURTOTECAN®)；抗雌激素，諸如氟維司群；EGFR抑制劑，諸如埃羅替尼或西妥昔單抗；抗VEGF抑制劑，諸如貝伐單抗；arinotecan；rmRH(例如，ABARELIX®)；17AAG(格爾德黴素衍生物，其為熱休克蛋白(Hsp)90毒藥)及上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物。
「化療劑」之定義中亦包括：(i)用於調控或抑制針對腫瘤之激素作用的抗激素劑，諸如抗雌激素及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)，包括例如它莫昔芬(包括NOLVADEX®；檸檬酸它莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羥基 它莫昔芬、曲沃昔芬、克昔芬、LY117018、奧那司酮及FARESTON®(檸檬酸托瑞米芬)；(ii)抑制調控腎上腺中雌激素產生之芳香酶的芳香酶抑制劑，諸如4(5)-咪唑、胺魯米特、MEGASE®(乙酸甲地孕酮)、AROMASIN®(依西美坦；Pfizer)、福美司坦、法倔唑、RIVISOR®(伏氯唑)、FEMARA®(來曲唑；Novartis)及ARIMIDEX®(阿納曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，諸如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、亮丙瑞林及戈舍瑞林；以及曲沙他濱(1,3-二氧雜環戊烷胞嘧啶核苷類似物)；(iv)蛋白激酶抑制劑；(v)脂質激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，尤其抑制異常細胞增殖所涉及之信號傳導路徑中基因表現者，例如PKC-α、Ralf及H-Ras；(vii)核糖酶，諸如VEGF表現抑制劑(例如ANGIOZYME®)及HER2表現抑制劑；(viii)疫苗，諸如基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN®、LEUVECTIN®及VAXID®；PROLEUKIN® rIL-2；拓撲異構酶1抑制劑，諸如LURTOTECAN®；ABARELIX® rmRH；(ix)抗血管生成劑，諸如貝伐單抗(AVASTIN®，Genentech)；及(x)上述任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸及衍生物。
在一些實施例中，化療劑為免疫治療劑。如本文所使用，「免疫治療劑」為增強免疫系統以特異性或非特異性幫助對抗癌症之化合物。免疫治療劑包括增強免疫系統之單株抗體及非特異性免疫療法，諸如細胞介素、白細胞介素(例如IL-2、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21)、干擾素(例如IFN-α、IFN-β、IFN-γ)、GM-CSF、沙利度胺(THALOMID®，Celgene)、來那度胺((REVLIMID®，Celgene)、泊馬度胺(POMALYST®，Celgene)、咪喹莫特(ZYCLARA®，Valeant)。可用作化療劑之單株抗體之非限制性實例包括曲妥珠單抗(HERCEPTIN®，Genentech)、貝伐單抗(AVASTIN®，Genentech)、西妥昔單抗(ERBITUX®，Bristol-Myers Squibb)、帕尼單抗(VECTIBIX®，Amgen)、伊匹單抗(YERVOY®，Bristol-Myers Squibb)、利妥昔單抗(RITUXAN®，Genentech)、阿侖珠單抗 (CAMPATH®，Genzyme)、奧法木單抗(ARZERRA®，Genmab)、吉妥珠單抗奧佐米星(MYLOTARG®，Wyeth)、本圖希單抗維度汀(brentuximab vedotin)(ADCETRIS®，Seattle Genetics)、經90 Y標記之替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)(ZEVALIN®，Biogen Idec)、經131 I標記之托西莫單抗(BEXXAR®，GlaxoSmithKline)、ado-曲妥珠單抗emtansine(KADCYLA®，Genentech)、蘭妥莫單抗(BLINCYTO®，Amgen)、培妥珠單抗(PERJETA®，Genentech)、阿托珠單抗(obinutuzumab)(GAZYVA®，Genentech)、納武單抗(OPDIVO®，)Bristol-Myers Squibb)、派姆單抗(KEYTRUDA®，Merck)、皮地利珠單抗(CureTech)、MPDL3280A(描述於WO2010/077634中，其以全文引用的方式併入本文中)、MDX-1105(描述於WO2007/005874中，其以全文引用的方式併入本文中)及MEDI4736(描述於WO2011/066389及US2013/034559中，其各者以全文引用的方式併入本文中)。另一種有用的免疫治療劑為AMP-224(描述於WO2010/027827及WO2011/066342中，其各者以全文併入本文中)。
其他定義亦在本文別處提供。
化合物
本發明之化合物為式I或Ia化合物或其鹽(例如醫藥學上可接受之鹽)、前藥、代謝物或衍生物。此類化合物為HPK1之有用抑制劑。
在一個態樣中，提供一種式I化合物： 或其鹽(例如醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中：R1 為C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基、C6-10 芳基、-C≡C-C2-9 雜芳基、-C(O)N(Rj’ )(C2-9 雜芳基)、-C(O)N(Rj’ )(C2-9 雜環基)、-CH(Rj’ )-O-(C2-9 雜芳基)、C3-9 環烷基、C1-6 烷基或氫；其中各Rj’ 獨立地為氫或C1-6 烷基；其中R1 之該C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基獨立地具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中R1 之該C1-6 烷基、C3-9 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；其中R1 之該C6-10 芳基、C2-9 雜芳基或C2-9 雜環基與該等取代基之兩者一起可形成視情況經取代之雙環；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；R1’ 為氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-6 環烷基、C2-9 雜芳基或鹵素，其中該烷基、烯基、環烷基及雜芳基視情況經取代(例如，經羥基、鹵素及/或胺基取代)；其條件為R1 及R1’ 之至少一者不為氫；R2 為A-C(O)-或D；A為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基、(C3-7 環烷基)-(C1-6 伸烷基)-、(C6-10 芳基)-(C1-6 伸烷基)-、(C2-9 雜芳基)-(C1-6 伸烷基)-、(C2-9 雜環基)-(C1-6 伸烷基)-、-NRg Rh 或-ORh ；其中A之該C1-6 烷基、C3-9 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；Rg 為H或視情況經一至四個取代基取代之C1-6 烷基，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基；-CHF2 及-CF3 ； Rh 為C1-6 烷基、C3-7 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基、(C3-7 環烷基)-(C1-6 伸烷基)-、(C6-10 芳基)-(C1-6 伸烷基)-、(C2-9 雜芳基)-(C1-6 伸烷基)-或(C2-9 雜環基)-(C1-6 伸烷基)-；其中Rh 之該C1-6 烷基、C3-7 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；D為H、C1-6 烷基、C3-7 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基、(C3-7 環烷基)-(C1-6 伸烷基)-、(C6-10 芳基)-(C1-6 伸烷基)-、(C2-9 雜芳基)-(C1-6 伸烷基)-、(C2-9 雜環基)-(C1-6 伸烷基)-或(C3-7 環烷基)-S(O)2 -；其中D之該C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基獨立地具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中D之該C1-6 烷基、C3-7 環烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；其中連接至不同原子之該等取代基之兩者與其所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環視情況經取代；且其中該雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；且R2’ 為H或視情況經取代之C1-6 烷基。
在式(I)之一般結構之一個態樣中：R1 為：C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基或C6-10 芳基，其中該雜芳基或雜環基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、雜芳基及雜環基可視情況經一、二、三或四個取代基R6 、R7 、R8 及R8’ 取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：i. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基及C3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧 基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”取代，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；ii. NRa Rb -C(O)-，其中Ra 及Rb 各自獨立地為氫或C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 或-CF3 取代；iii. C1-6 烷氧基；iv. 鹵素；v. 氰基；vi. 羥基；vii. 胺基；viii. 二(C1-6 )烷基胺基；ix. 單(C1-6 )烷基胺基；x. -NRc (CO)Rd ，其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；xi. -CF3 ；xii. -CF2 ；xiii. -SO2 R’，其中R’如上所述；xiv. -SO2 NR’R”，其中R’及R”如上所述；xv. -(CO)NRc Rd ；其中Rc 及Rd 如上所述；xvi. -(CO)ORe ；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xvii. 經取代之或未經取代之C3-5 雜環基；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；R1’ 為：H、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-6 環烷基、C2-9 雜芳基或鹵素，其中該烷基、烯基、環烷基及雜芳基可視情況經羥基、鹵素或胺基取代； R2 為A-C(O)-，其中A為：i. C3-7 環烷基(C1-6 )j 烷基-或C2-9 雜環基(C1-6 )j 烷基-，其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R5 之一、二、三或四者取代，其中R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 )烷基-、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、胺基(C1-6 )烷基、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”、-NR’(CO)R”，其中在各情況下，R’及R”如以上所述，為視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 或羥基取代；且k為1或0；或，該環烷基或雜環基與R5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環；ii. -NRg Rh ，其中Rg 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基；-CF2 或-CF3 取代；Rh 係選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、-CF2 、-CF3 或NRe’ Rf’ -C(O)-取代，其中Re’ 及Rf’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基； 及b. C3-7 環烷基(C1-6 烷基)m -、C2-9 雜芳基(C1-6 烷基)m -、C6-10 芳基(C1-6 烷基)m -或C2-9 雜環基(C1-6 烷基)m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R5’ 之一或兩者取代，其中R5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、胺基(C1-6 )烷基及NRi Rj -C(O)-(C1-6 烷基)k’ -，其中Ri 及Rj 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且k’為1或0；iii. R9 -(C1-6 烷基)-，其中R9 係選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、-NRo Rp ，其中Ro 及Rp 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基、NRo’ Rp’ -CO-，其中Ro’ 及Rp’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；iv. B-(C1-6 烷基)t -，其中B為C3-9 雜芳基或C3-7 雜環基，其中該雜芳基或雜環基具有1至3個選自O、S及N之雜原子；且其中該雜芳基或雜環基可視情況經R10 、R10’ 及R10” 之一、二或三者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-4 環烷基，其中該烷基或環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、-(CO)NRq Rr 或-NRq (CO)Rr 取代，其中Rq 及Rr 獨立地為H或C1-6 烷基；b. C3-7 環烷基；及c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF2 ；g. -CF3 ； h. 胺基；i. 二(C1-6 )烷基胺基；j. 單(C1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -(CO)NRs Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；及m. -NRs (CO)Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；且t為1或0；v. (C6-10 芳基)q’ -(C1-6 烷基)n -O-或吡咯啶基-O-，其中該芳基可視情況經R11 、R12 及R13 之一、二或三者取代，其各者係選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基及NRu Rv -，其中Ru 及Rv 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0，q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1；vi. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基，其中該烷基、烯基及伸烯基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；或R2 為D，其中D為：i. C6-10 芳基-(C1-6 烷基)z -或C3-9 雜芳基-(C1-6 烷基)z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基或雜芳基可視情況經R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NRw Rx 或-NRw (CO)Rx 取代，其中Rw 及Rx 獨 立地為H或C1-6 烷基，其中連接至不同原子之R14 、R15 、R16’ 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環；b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 )烷基胺基；j. 單(C1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -NRy (CO)Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；m. -(CO)NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；n. -SO2NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；及o. -(CO)ORy ，其中Ry 為H或C1-6 烷基；且z為1或0；ii. C3-7 環烷基-(SO2 )-，其中該環烷基可視情況經R6’ 之一或兩者取代，其中R6’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、C1-6 烷氧基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、胺基(C1-6 )烷基及NRe’ Rf’ -C(O)-(C1-6 烷基)n -，其中Re’ 及Rf’ 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0；及iii. C1-6 烷基或吡咯啶，其中該烷基視情況經鹵素取代； 且R2’ 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基。
在一個態樣中，提供式Ia化合物： 或其鹽(例如醫藥學上可接受之鹽)、溶劑合物(例如水合物)、前藥、代謝物或衍生物，其中：R1 為：C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基、C6-10 芳基、-C≡C-C2-9 雜芳基、C(O)N(Rj’ )(C2-9 雜芳基)、-C(O)N(Rj’ )(C2-9 雜環基)、-CH(Rj” )-O-(C2-9 雜芳基)或C1-6 烷基；其中各Rj’ 獨立地為氫或C1-6 烷基；其中R1 之該C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基獨立地具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中R1 之該C1-6 烷基、C6-10 芳基、C2-9 雜芳基及C2-9 雜環基視情況經一、二、三或四個取代基R6 、R7 R8 及R8’ 取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：i. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基及C3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-S(O)R’、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”及-NR’C(O)R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；ii. NRa Rb -C(O)-，其中Ra 及Rb 各自獨立地為氫或C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 或-CF3 取代； iii. C1-6 烷氧基；iv. 鹵素；v. 氰基；vi. 羥基；vii. 胺基；viii. 二(C1-6 烷基)胺基；ix. 單(C1-6 烷基)胺基；x. -NRc C(O)Rd ，其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；xi. -CF3 ；xii. -CHF2 ；xiii. -SO2 R’，其中R’為H或C1-6 烷基；xiv. -SO2 NR’R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；xv. -C(O)NRc Rd ；其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；xvi. -C(O)ORe ；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xvii. C3-5 雜環基、C6-10 芳基、-(C1-6 烷基)(C6-10 芳基)或C2-9 雜芳基，其中該雜環基、芳基或雜芳基可視情況經C1-6 烷基、C6-10 芳基或-C(O)ORe 取代；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xviii. -O-(C2-9 雜芳基)；xix. -NR’S(O)k’ R”其中k’為1或2，且R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；其中R1 之該C6-10 芳基、C2-9 雜芳基或C2-9 雜環基與R6 、R7 、R8 及R8’ 之兩者一起可形成雙環；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；R1’ 為： 氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-6 環烷基、C2-9 雜芳基或鹵素，其中該烷基、烯基、環烷基及雜芳基可視情況經羥基、鹵素或胺基取代；R2 為A-C(O)-或D，其中A為：i. (C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)j -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)j -，其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R5 之一、二、三或四者取代，其中R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、-(C1-6 烷基)-NHC(O)-(C1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-NR’SO2 R”、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C3-9 環烷基-C(O)-及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -，其中該C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基及C6-10 芳基可視情況經C1-6 烷基或(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-取代，其中該(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 或羥基取代；且k為1或0；或，該環烷基或雜環基與R5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環，其中該雙環或螺環可經如上所述之R5 之一、二、三或四者取代； ii. -NRg Rh ，其中Rg 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基；-CHF2 及-CF3 ；Rh 係選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、-CHF2 、-CF3 或NRe’ Rf’ -C(O)-取代，其中Re’ 及Rf’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；及，b. (C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)m -、(C2-9 雜芳基)(C1-6 烷基)m -、(C6-10 芳基)(C1-6 烷基)m -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R5’ 之一或兩者取代，其中R5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、胺基(C1-6 烷基)及NRi Rj -C(O)-(C1-6 烷基)k’ -，其中Ri 及Rj 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且k’為1或0；iii. R9 -(C1-6 烷基)-，其中R9 係選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、-NRo Rp 、NRo’ Rp’ -C(O)-；其中Ro 、Rp 、Ro’ 及Rp’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；iv. B-(C1-6 烷基)t -，其中B為C3-9 雜芳基或C3-7 雜環基，其中該雜芳基或雜環基具有1至3個選自O、S及N之雜原子；且其中該雜芳基或雜環基可視情況經R10 、R10’ 及R10” 之一、二或三者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組： a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-4 環烷基，其中該烷基或環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、-C(O)NRq Rr 或-NRq C(O)Rr 取代，其中Rq 及Rr 獨立地為H或C1-6 烷基；b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 烷基)胺基；j. 單(C1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -C(O)NRs Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；及m. -NRs C(O)Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；且t為1或0；v. (C6-10 芳基)q’ -(C1-6 烷基)n -O-或(C2-7 雜環基)-O-，其中該芳基或雜環基可視情況經R11 、R12 及R13 之一、二或三者取代，其各者係選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、乙醯基及NRu Rv -；其中Ru 及Rv 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；其中若存在，則該雜環基中嵌入之硫與一個氧一起可形成亞碸，或與兩個氧一起可形成碸；且n為1或0，q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1； vi. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基，其中該烷基、烯基及伸烯基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”取代，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；D為：i. (C6-10 芳基)(C1-6 烷基)z -、(C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)z -或(C3-9 雜芳基)(C1-6 烷基)z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、環烷基或雜芳基可視情況經R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C2-6 烯基，其中該烷基或烯基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NRw Rx 及-NRw C(O)Rx ，其中Rw 及Rx 獨立地為H或C1-6 烷基；其中連接至不同原子之R14 、R15 、R16’ 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環可經如上所述之R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代；b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基，其中該雜環基可視情況經羥基、乙醯基或氧雜環丁烷取代；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF2 ；g. -CF3 ；h.胺基；i. 二(C1-6 烷基)胺基； j. 單(C1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -NRy C(O)Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；m. -C(O)NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；n. -SO2NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；及o. -C(O)ORy ，其中Ry 為H或C1-6 烷基；且z為1或0；ii. C3-7 環烷基-SO2 -，其中該環烷基可視情況經R6’ 之一或兩者取代，其中R6’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、C1-6 烷氧基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)及NRe’ Rf’ -C(O)-(C1-6 烷基)n -，其中Re’ 及Rf’ 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0；或iii. H、C1-6 烷基或吡咯啶，其中該烷基視情況經鹵素取代；且R2’ 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基。
在所有其他變數如以上所定義之實施例中，有用值之R1 為視情況經取代之C2-9 雜芳基或視情況經取代之C3-7 雜環基。在一些實施例中，R1 為視情況經取代之C2-9 雜芳基或視情況經取代之C2-9 雜環基。在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1 係選自由以下所組成之群組： ；及；其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R6 、R7 及R8 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之R1 係選自由以下所組成之群組： ；其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R6 、R7 及R8 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之R1 係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R6 、R7 及R8 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之R1 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，其中R1 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，其中R1 為：
在一些實施例中，R6 、R7 及R8 各自獨立地選自由以下所組成之群組：i. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基及C3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-S(O)R’、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”及-NR’C(O)R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；ii. NRa Rb -C(O)-，其中Ra 及Rb 各自獨立地為氫或C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 或-CF3 取代；iii. C1-6 烷氧基；iv. 鹵素；v. 氰基；vi. 羥基；vii. 胺基；viii. 二(C1-6 烷基)胺基；ix. 單(C1-6 烷基)胺基；x. -NRc C(O)Rd ，其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；xi. -CF3 ；xii. -CHF2 ；xiii. -SO2 R’，其中R’為H或C1-6 烷基；xiv. -SO2 NR’R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基； xv. -C(O)NRc Rd ；其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；xvi. -C(O)ORe ；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xvii. C3-5 雜環基、C6-10 芳基、-(C1-6 烷基)(C6-10 芳基)或C2-9 雜芳基，其中該雜環基、芳基或雜芳基可視情況經C1-6 烷基、C6-10 芳基或-C(O)ORe 取代；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xviii. -O-(C2-9 雜芳基)；xix. -NR’S(O)k’ R”其中k’為1或2，且R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；其中R1 之該C6-10 芳基、C2-9 雜芳基或C2-9 雜環基與R6 、R7 及R8 之兩者一起可形成雙環；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基。
在一些實施例中，R6 、R7 及R8 之一或多者獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基及C3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、C3-7 環烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、C1-6 烷氧基、-S(O)R’、-SO2 R’、-SO2 NR’”R”、-C(O)NR”’R”及-NR’C(O)R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR”R’”、-NR’SO2 NR”R’”或-NR’S(O)R” ，其中R’及R”’獨立地為H或C1-6 烷基，且R”獨立地為C1-6 烷基、鹵基(C1-6 烷基)或視情況僅經C1-6 烷基取代之C6-10 芳基；或，R”及R’”與其所連接之氮一起形成經取代之或未經取代之雜環基。在一些實施例中，R6 、R7 及R8 之一或多者獨立地為C1-6 鹵基烷基(例如，CHF2 或CF3 )。
在一些實施例中，R6 、R7 及R8 之一或多者獨立地為-C(O)NRa Rb 、-NRc C(O)Rd 、-C(O)ORe ；-NRc C(O)ORe ；-NRc C(O)Ra Rb ；其中Ra 及Rb 各自獨 立地為氫、視情況經取代之C1-6 烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基或視情況經取代之C2-9 雜芳基；或Ra 及Rb 與其所連接之氮一起形成視情況經取代之雜環基；其中Rc 及Rd 獨立地為H、視情況經取代之C1-6 烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基或視情況經取代之C2-9 雜芳基；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基。可選取代基之實例包括但不限於羥基、鹵素、-CHF2 及-CF3 。
在一些實施例中，R6 、R7 及R8 之一或多者獨立地選自由以下所組成之群組：iii.鹵素、氰基、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、單(C1-6 烷基)胺基或二(C1-6 烷基)胺基。
在一些實施例中，R6 、R7 及R8 之一或多者獨立地為-SO2 R’、-SO2 NR”R’”、-NR’SO2 NR”R’”、-NR’S(O)R” 或-NR’SO2 R” ；其中R’及R’”獨立地為H或視情況經取代之C1-6 烷基；且R”獨立地為C1-6 烷基、鹵基(C1-6 烷基)或視情況經C1-6 烷基取代之C6-10 芳基；或，R”及R’”與其所連接之氮一起形成視情況經取代之C2-9 雜環基。
在一些實施例中，R1 為，其中R6 、R7 及R8 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫、羥基、胺基、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基及單(C1-6 烷基)胺基；或，R6 、R7 及R8 之兩者可形成雙環。
在此等實施例之一些中，R6 為C1-6 烷基；R7 為氫、胺基、或單(C1-6 烷基)胺基；且R8 為氫、羥基、或C1-6 烷氧基；或，R6 及R7 一起形成雙環；或，R7 及R8 一起形成雙環。在一些實施例中，R6 為甲基。在一些實施例中，R7 為胺基。在一些實施例中，R6 為甲基且R7 為胺基。
在一些實施例中，R1 為，其中R6 及R7 係選自由以下所組成之群組：氫、胺基及C1-6 烷基。在一些實施例中，R6 為C1-6 烷基(例如甲基)。在一些實施例中，R7 為氫或胺基。在一些實施例中，R7 為氫。在一些實施例中，R7 為胺基。在一些實施例中，R6 為C1-6 烷基(例如甲基)，且R7 為氫或胺基。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1 為，其中R6 為C1-6 烷基，其視情況經羥基、-CF2 、-CF3 或鹵素取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R6 為甲基。
在一些實施例中，R1 為 或。在一些實施例中，R1 為或。在一些實施例中，R1 為。在一些實施例中，R1 為。在一些實施例中，R1 為
在所有其他變數如以上任何實施例中所述之實施例中，R2 為-A-C(O)-。在一些實施例中，A為視情況經取代之C1-6 烷基、視情況經取代之 C3-9 環烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、-NRg Rh 或-ORh 。
在一些實施例中，A為：i. (C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)j -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)j -；其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R5 之一、二、三或四者取代，其中R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、-(C1-6 烷基)-NHC(O)-(C1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-NR’SO2 R”、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C3-9 環烷基-C(O)-及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -，其中該C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基及C6-10 芳基可視情況經C1-6 烷基或(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-取代，其中該(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 或羥基取代；且k為1或0；或，該環烷基或雜環基與R5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環，其中該雙環或螺環可經如上所述之R5 之一、二、三或四者取代； ii. -NRg Rh ，其中Rg 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基；-CHF2 及-CF3 ；Rh 係選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、-CHF2 、-CF3 或NRe’ Rf’ -C(O)-取代，其中Re’ 及Rf’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；及，b. (C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)m -、(C2-9 雜芳基)(C1-6 烷基)m -、(C6-10 芳基)(C1-6 烷基)m -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R5’ 之一或兩者取代，其中R5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、胺基(C1-6 烷基)及NRi Rj -C(O)-(C1-6 烷基)k’ -，其中Ri 及Rj 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且k’為1或0；iii. R9 -(C1-6 烷基)-，其中R9 係選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、-NRo Rp 、NRo’ Rp’ -C(O)-；其中Ro 、Rp 、Ro’ 及Rp’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；iv. B-(C1-6 烷基)t -，其中B為C3-9 雜芳基或C3-7 雜環基，其中該雜芳基或雜環基具有1至3個選自O、S及N之雜原子；且其中該雜芳基或雜環基可視情況經R10 、R10’ 及R10” 之一、二或三者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組： a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-4 環烷基，其中該烷基或環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、-C(O)NRq Rr 或-NRq C(O)Rr 取代，其中Rq 及Rr 獨立地為H或C1-6 烷基；b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 烷基)胺基；j. 單(C1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -C(O)NRs Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；及m. -NRs C(O)Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；且t為1或0；v. (C6-10 芳基)q’ -(C1-6 烷基)n -O-或(C2-7 雜環基)-O-，其中該芳基或雜環基可視情況經R11 、R12 及R13 之一、二或三者取代，其各者係選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、乙醯基及NRu Rv -；其中Ru 及Rv 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；其中若存在，則該雜環基中嵌入之硫與一個氧一起可形成亞碸，或與兩個氧一起可形成碸；且n為1或0，q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1；或 vi. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基，其中該烷基、烯基及伸烯基可視情況經羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”取代，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基。
在一些實施例中，A為(C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)j -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)j -，其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R5 之一、二、三或四者取代，其中R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、-(C1-6 烷基)-NHC(O)-(C1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-NR’SO2 R”、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C3-9 環烷基、視情況經取代之C3-9 環烷基-C(O)-及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -；其中該C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基及C6-10 芳基可視情況經C1-6 烷基或(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-取代，其中該(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經取代(例如，經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 或羥基取代)；且k為1或0； 或，該環烷基或雜環基與R5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環，其中該雙環或螺環可經一、二、三或四個取代基(例如，如上在未在一起時所述之R5 )取代。
在一些實施例中，A為-NRg Rh 或-ORh ，其中Rg 為H或視情況經取代之C1-6 烷基；且Rh 為視情況經取代之C1-6 烷基、視情況經取代之C3-9 環烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜芳基或視情況經取代之C2-9 雜環基。
在一些實施例中，Rg 之該C1-6 烷基視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基；-CHF2 及-CF3 。
Rh 之實例包括但不限於a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經取代羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、-CHF2 、-CF3 、-S(O)R’、-SO2 R’、-SO2 NR’”R”、-C(O)NR”’R”、-NR’C(O)R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR”R’”、-NR’SO2 NR”R’”或-NR’S(O)R” ，其中R’及R”’獨立地為H或C1-6 烷基，且R”獨立地為C1-6 烷基、鹵基(C1-6 烷基)或視情況經C1-6 烷基取代之C6-10 芳基；或，R”及R’”與其所連接之氮一起形成經取代之或未經取代之雜環基；及b. (C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)m -、(C2-9 雜芳基)(C1-6 烷基)m -、(C6-10 芳基)(C1-6 烷基)m -或(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R5’ 之一或兩者取代；其中R5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、胺基(C1-6 烷基)及NRi Rj -C(O)-(C1-6 烷基)k’ -；其中Ri 及Rj 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且k’為1或0。
在一些實施例中，A為(C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)j -、(C2-9 雜環基)(C1-6 烷基)j -、(C6-10 芳基)q’ -(C1-6 烷基)n -O-或(C2-7 雜環基)-O-，其中該環烷基、烷基、芳基或雜環基可視情況經取代；j為1或0；且n為1或0，且q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1。在一些實施例中，A為視情況經取代之C3-7 環烷基(例如，環丙基)。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，A為i(如上所列)。在此實施例中，有用值之A包括視情況經取代之C3-7 環烷基(C1-6 )j 烷基-。在實施例中，j為0。
在一些實施例中，R2 為： 其中v為零、一、二、三或四；X、Y及Z各自獨立地為不存在的或-CH2 -，且其中若存在，則X、Y及Z之各者上之H之零、一或兩者可為R5 。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為： 其中v為零、一、二、三或四；X、Y及Z各自獨立地為不存在的或-CH2 -，且其中若存在，則X、Y及Z之各者上之H之零、一或兩者可為R5 。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為，其中v為0、1、2或3；且R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 烷基)-、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、-(C1-6 烷基)-NHC(O)-(C1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-NR’SO2 R”、-SO2 R’、-SO2 NR’R”，-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C3-9 環烷基、視情況經取代之C3-9 環烷基-C(O)-及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -，其中該C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基及C6-10 芳基可視情況經C1-6 烷基或(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-取代，其中該(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經取代(例如，經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 或羥基取代)；且k為1或0。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為且v為零、一或二：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R5 不為氫，且R2 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R5 不為氫，且R2 為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，當A為環烷基時，該環烷基可為雙環、螺環或未飽和的。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R5 係選自由以下所組成之群組：氫、氟、氰基、NH2 -C(O)-、烷基-(C1-6 )烷氧基-、視情況經取代之C2-9 雜芳基及氰基(C1-6 )烷基。在此等實施例中，R5 為氟或氰基。在此 等實施例中，R5 為氫。在此等實施例中，R5 為視情況經取代之C2-9 雜芳基或氰基(C1-6 )烷基。在此等實施例中，R5 為氰基-CH2 -。在一些實施例中，至少一個R5 為C1-6 烷基(例如，甲基)。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，至少一個R5 為視情況經取代之C2-9 雜芳基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，至少一個R5 為視情況經取代之C2-9 雜芳基之化合物為含有1或2個氮原子之視情況經取代之5員雜芳基。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之5員雜芳基為視情況經取代之吡唑之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之吡唑為之化合物，其中波形線表示與環丙基環之連接點；且其中RB1 為分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中烷基可視情況經一至四個羥基、鹵素、腈、胺基、-O-(C1-6 )烷基、-O-(C1-6 )烷基胺基-、二(C1-6 )烷基胺基-或-NRy (CO)Rz 取代，其中Ry 及Rz 在各情況下獨立地為氫或C1-6 烷基；或-SO2 R’，其中R’為C1-6 烷基。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，RB1 為視情況經取代之直鏈C1-6 烷基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之直鏈C1-6 烷基為甲基之化合物。
在一些實施例中，R2 為，其中v為2，一個R5 為甲基且第二個R5 為1-甲基吡唑-4-基。
在一些實施例中，R2 為 。在一些實施例中，R2 為。在一些實施例中，R2 為。在一些實施例中，R2 為。在一些實施例中，R2 為或
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，A為-NRg Rh 。在一些實施例中，Rg 為H或甲基。在特定實施例中，Rg 為H。在特定實施例中，m為0。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，A為R9 -(C1-6 烷基)-。在一些實施例中，特定值之R9 -(C1-6 烷基)-為R9 -(C1-4 烷基)-，其中烷基為直鏈或分支鏈且可視情況經取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，A為B-(C1-6 烷基)t -。在一些實施例中，t之特定值為0。在一些實施例中，特定值之B為C3-9 雜芳基。在一些實施例中，B係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R10 、R10’ 及R10” 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之B係選自由以下所組成之群組：及；其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R10 、R10’ 及R10” 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，B係選自由以下所組成之群組：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，B為： 其中R10 為C1-6 烷基。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R2 為D。在一些實施例中，D為：i. (C6-10 芳基)(C1-6 烷基)z -、(C3-7 環烷基)(C1-6 烷基)z -或(C3-9 雜芳基)(C1-6 烷基)z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、環烷基或雜芳基可視情況經R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C2-6 烯基，其中該烷基或烯基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、氰基C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、NR”SO2 R’、鹵基烷基、雜芳基、芳基、側氧基、螺烷基、稠合烷基、-C(O)NRw Rx 及-NRw C(O)Rx ，其中Rw 及Rx 獨立地為H或C1-6 烷基或一起形成環；其中連接至不同原子之R14 、R15 、R16’ 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環可經如上所述之R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代；b. C3-7 環烷基；c. 視情況經取代之C3-7 雜環基[例如，雜環基可視情況經羥基、乙醯基、或氧雜環丁烷取代]；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF2 ； g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 烷基)胺基；j. 單(C1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -NRy C(O)Rz 或-NRy SO2 Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基或一起形成環；m. -C(O)NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基或一起形成環；n. -SO2NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；及o. -C(O)ORy ，其中Ry 為H或C1-6 烷基或一起形成環；且z為1或0；ii. C3-7 環烷基-SO2 -，其中該環烷基可視情況經R6’ 之一或兩者取代，其中R6’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CHF2 、羥基(C1-6 烷基)、鹵基(C1-6 烷基)、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、C1-6 烷氧基、胺基、二(C1-6 烷基)胺基、單(C1-6 烷基)胺基、胺基(C1-6 烷基)及NRe’ Rf’ -C(O)-(C1-6 烷基)n -。其中Re’ 及Rf’ 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0；及iii. H、視情況經取代之C1-6 烷基(例如，鹵基烷基)或視情況經取代之C3-9 環烷基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C2-9 雜芳基、或視情況經取代之C2-9 雜環基(例如，吡咯啶)。
在一些實施例中，D為C3-9 雜芳基-(C1-6 烷基)z -。在一些實施例中，z之特定值為0。在一些實施例中，特定值之雜芳基為： 其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R14 、R15 及R16 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之D係選自由以下所組成之群組：及；其各者可視情況經一、二、三或四個取代基取代。在一些實施例中，以上部分之各者可視情況經一、二或三個取代基R14 、R15 及R16 取代。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，有用值之D係選自由以下所組成之群組：及；其各者可視情況經一、二、三個取代基取代。在一些實施例中，三個取代基為R14 、R15 及R16 。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，D之雜芳基為或。在一些實施例中， D為
在此等實施例之一些中，R14 、R15 及R16 之各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NRw Rx 或-NRw (CO)Rx 取代，其中Rw 及Rx 獨立地為H或C1-6 烷基，或其中如本文所述之R14 、R15 及R16 之兩者在連接至不同原子時與其各自所連接之原子一起形成雙環；b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 )烷基胺基；j. 單(C1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -NRy (CO)Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；m. -(CO)NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；n. -SO2 NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；及o. -(CO)ORy ，其中Ry 為H或C1-6 烷基；其中連接至不同原子之R14 、R15 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環；其中該雙環或三環視情況經取代。
在此等實施例之一些中，連接至不同原子之R14 、R15 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環。在一些實施例中，D為雙環(或三環，其中存在進一步環稠合)，其為 其中X’及Y’各自獨立地為C、N、S或O；且其中該雙環視情況經R17 、R18 、R19 及R20 取代，其中R17 、R18 、R19 及R20 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫、羥基、胺基及C1-6 烷基，且其中R17 、R18 、R19 及R20 之兩者與其所連接之碳一起可形成C3 -C5 螺環或C2-9 雜芳基環。在此等實施例之一些中，X’或Y’之至少一者為N。
在一些實施例中，D為雙環，其為或
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，D之雜芳基為：
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，D為視情況經取代之C6-10 芳基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之C6-10 芳基為視情況經取代之苯基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之苯基經視情況經取代之分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-7 雜環基取代之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，D為具有式之5員雜芳基或具有式之6員雜芳基之化合物，其中：Q為NR20 、CR20 、O或S；各T獨立地為N或CR21 ；各Z獨立地為N或C，其條件為僅一個Z為N；各R20 及R21 獨立地為氫、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵素、羥基或氰基；且R22 及R23 與其所連接之原子一起形成雙環；其中該雙環可含有一或多個選自N、S及O之雜原子；且其中該雙環視情況經一、二、三、四或五個R30 取代；其中各R30 獨立地為C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-7 環烷基、C3-7 雜環基、鹵素、氰基、側氧基、-NR31 R32 、-SO2 NR31 R32 、-C(O)NR31 R32 、-C(O)OR33 、-OR33 、-NR33 C(O)R34 、-NR33 SO2 R35 或-SO2 R35 ；其中R30 之該C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-7 環烷基及C3-7 雜環基視情況經一至四個R40 取代；或，兩個R30 基與其所連接之母部分一起形成視情況經一至四個R40 取代之環；各R31 及R32 獨立地為氫或C1-6 烷基；或，R31 及R32 與其所連接之氮原子一起形成視情況經一至四個R40 取代之C3-7 雜環基；各R33 及R34 獨立地為氫或C1-6 烷基；R35 為C1-6 烷基； 各R40 獨立地選自由以下所組成之群組：鹵素、氰基、側氧基、-NR41 R42 、-SO2 NR41 R42 、-C(O)NR41 R42 、-C(O)OR43 、-OR43 、-NR43 C(O)R44 、-NR43 SO2 R45 或-SO2 R45 ；C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基[例如，-CHF2 或-CF3 ]、C2-9 雜芳基、C6-10 芳基、側氧基；或，兩個R40 基與其所連接之母部分一起形成視情況經一至三個取代基取代之環，該等取代基選自C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、羥基及側氧基；各R41 及R42 獨立地為氫或C1-6 烷基；或，R41 及R42 與其所連接之氮原子一起形成視情況經一至三個取代基取代之C3-7 雜環基，該等取代基選自C1-6 烷基、C1-6 鹵烷基、羥基及側氧基；各R33 及R34 獨立地為氫或C1-6 烷基；且R35 為C1-6 烷基。
在一些實施例中，D為： 其中q為0、1、2、3、4、5或6；R36 獨立地為氫或R30 ；且R20 及R30 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，R20 為氫、C1-6 烷基(例如甲基)、鹵素(例如氟)、羥基或C1-6 烷氧基(例如甲氧基)。在一些實施例中，R20 為H、Me、F或OH。在此等實施例之一些中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)。在此等實施例之一些中，q為0。
在一些實施例中，D為： 其中q為0、1、2、3、4、5或6；且R20 及R30 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，q為0。在此等實施例之一些中，R20 為氫、C1-6 烷基(例如甲基)、鹵素(例如氟)、羥基或C1-6 烷氧基(例如甲氧基)。在一些實施例中，R20 為H、Me、F或OH。
在一些實施例中，D為： 其中R36 獨立地為氫或R30 ；且R20 及R30 如本文所詳述。在一些實施例中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)；且R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為 其中p為0、1、2、3或4；R36 獨立地為氫或R30 ；且R20 及R30 如本文所詳述。在一些實施例中，p為0。在一些實施例中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)；且R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為 其中X為CH2 、N、O或S；n為1、2、3或4；p為0、1、2、3或4；R36 為氫或R30 ；且R20 及R30 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，X為CH2 且n為1。在一些實施例中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)；且R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為 其中q為0、1、2、3、4、5或6；G獨立地為C或N；G’獨立地為N、NR46 、CR47 、S或O；R46 及R47 獨立地為氫或R40 ，且R20 及R40 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，G之一者為C，且G之另一者為N。在一些實施例中，各G為C。在一些實施例中，G’之至少一者為N。在一些實施例中，G’之至少一者為CR47 。在一些實施例中，R47 為H。在一些實施例中，R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為，其中R20 及R46 如本文所詳述。在一些實施例中，R46 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)；且R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為
在一些實施例中，其中D為 其中Q為NR20 、O或S；X為CR38a R38b 、NR36 、S或O；X’為CR39a R39b 、NR36 、S、SO2 或O；R36 、R37a 、R37b 、R38a 及R38b 獨立地為氫或R30 ；R39a 及R39b 獨立地為氫或R30 ，或R39a 及R39b 與其所連接之碳原子一起形成C3-7 環烷基或C3-7 雜環基；且R20 及R30 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，Q為NR20 。在此等實施例之一些中，Q為S。在一些實施例中，X為CH2 或NR36 。在一些實施例中，X’為CH2 。在一些實施例中，X’為SO2 。在一些實施例中，X’為CR39a R39b ，其中R39a 及R39b 與其所連接之碳原子一起形成環丙基。在一些實施例中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)；且R20 為氫。
在一些實施例中，其中D為或，其中X、X’、R20 及R36 如本文所詳述。在此等實施例之一些中，X為CH2 或NR36 。在一些實施例中，X’為CH2 。在一些實施例中，X’為SO2 。在一些實施例中，X’為CR39a R39b ，其中R39a 及R39b 與其所連接之碳原子一起形成環丙基。在一些實施例中，R36 為氫或C1-6 烷基(例如甲基)。在一些實施例中，R20 為氫。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為視情況經取代之C2-9 雜芳基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之C2-9 雜芳基為含有1或2個氮原子之視情況經取代之5員雜芳基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，5員雜芳基為吡唑之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為鹵素之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，鹵素為氟或氯之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為視情況經取代之C1-6 烷基、C2-6 烯基或C3-6 環烷基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為視情況經取代之C1-6 烷基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為視情況經取代之甲基或乙基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1’ 為甲基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，R1 為視情況經取代之C6-10 芳基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之C6-10 芳基為視情況經取代之苯基之化合物。
在所有其他變數如以上任何實施例中所定義之實施例中，視情況經取代之苯基經視情況經取代之分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、鹵素、氰基、羥基、胺基、-CF3 或-(CO)NRc Rd 取代之化合物；其中Rc 及Rd 如上所述。
在所有其他變數如任何實施例中所定義之實施例中，化合物包括化合物號1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、 219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347及348。
在一些實施例中，本揭露提供一種式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中化合物係選自由以下所組成之群組：表1、表2及表3中之一或多種化合物。在一些實施例中，化合物係選自表1中之化合物號1至348或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，化合物係選自表2中之化合物號349至429或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，化合物係選自表3中之化合物號430至572或其醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，化合物係選自由以下所組成之群組：表1中之化合物號1至348或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，化合物係選自由以下所組成之群組：表2中之化合物號349至429或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，化合物係選自由以下所組成之群組：表3中之化合物號430至572或其醫藥學上可接受之鹽。
本文所述之式I或Ia化合物或其鹽可以立體異構形式存在(例如，其含有一或多個不對稱碳原子)。個別立體異構物(鏡像異構物及非鏡像異構物)及其混合物係包括在本文揭示之主題之範疇內。同樣地，應理解，式I或Ia化合物或鹽可以不同於式中所示之互變異構形式的互變異構形式存在，且此等互變異構形式亦可包括在本文揭示之主題之範疇內。應理解，本文揭示之主題包括本文所述之特定組之組合及子集。本文揭示之主題之範疇包括立體異構物之混合物以及純化之鏡像異構物或鏡像異構/非鏡像異構富集之混合物。應理解，本文揭示之主題包括本文所定義之特定組之組合及子集。
本文揭示之主題亦包括本文所述之化合物之經同位素標記之形式，但是事實上，一或多個原子經原子質量或質量數不同於通常在自然界中所見之原子質量或質量數的原子置換。可摻入本文所述之化合物及其醫藥學上可接受之鹽之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘及氯之同位素，諸如2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、15 N、17 O、18 O、31 P、32 P、35 S、18 F、36 Cl、123 I及125 I。
在實施例中，醫藥組成物包含所有變數如以上任何實施例中所定義之化合物及醫藥學上可接受之載劑。
本文揭示之主題包括式I或Ia化合物之前藥、代謝物、衍生物及醫藥學上可接受之鹽。式I或Ia化合物之代謝物包括藉由包含使式I或Ia化合物與哺乳動物接觸一段足以產生其代謝產物之時間之方法而產生的化合物。
若式I或Ia化合物為鹼，則所要醫藥學上可接受之鹽可藉由此項技術中可用之任何適合方法製備，例如用諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、甲烷磺酸、磷酸及類似酸之無機酸或用諸如乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、哌喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(諸如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(諸如天冬胺酸或麩胺酸)、芳族酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(諸如對甲苯磺酸或乙烷磺酸)或類似酸之有機酸處理遊離鹼。
若式I或Ia化合物為酸，則所要醫藥學上可接受之鹽可藉由任何適合之方法製備，例如用諸如胺(第一、第二或第三胺)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物或類似鹼之無機或有機鹼處理遊離酸。合適之鹽之說明性實例包括但不限於衍生自胺基酸(諸如甘胺酸及精胺酸)、氨、第一胺、第二胺、及第三胺、及環狀胺(諸如哌啶、嗎啉、及哌嗪)之有機鹽，以及衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁、及鋰之無機鹽。
式I或Ia化合物可呈「前藥」之形式，其包括具有可在活體內 代謝之部分的化合物。通常，前藥藉由酯酶或藉由其他機制來在活體內 代謝為活性藥物。前藥及其用途之實例為此項技術中熟知的(參見，例如，Berge等人(1977)「Pharmaceutical Salts」,J.Pharm.Sci.66：1-19)。前藥可在化合物之最終分離及純化過程中原位 製備，或藉由使游離酸形式之純化之化合物或羥基與合適之酯化劑單獨反應來製備。羥基可經由用羧酸處理轉換成酯。前藥部分之實例包括 經取代之及未經取代之分支鏈或非分支鏈低碳烷基酯部分(例如，丙酸酯)、低碳鏈烯基酯、二低碳烷基胺基低碳烷基酯(例如，二甲基胺基乙基酯)、醯胺基低碳烷基酯(例如，乙醯氧基甲基酯)、醯氧基低碳烷基酯(例如，特戊醯氧基甲基酯)、芳基酯(苯基酯)、芳基低碳烷基酯(例如，苄基酯)、經取代之(例如，經甲基、鹵素或甲氧基取代基取代之)芳基及芳基低碳烷基酯、醯胺、低碳烷基醯胺、二低碳烷基醯胺及羥基醯胺。亦包括透過活體內 其他機制轉換為活性形式之前藥。在一些態樣中，本發明之化合物為具有本文任何式之前藥。
組成物
目前揭示之化合物可連同醫藥學上可接受之載劑一起調配成醫藥組成物。
式I或Ia化合物可根據標準醫藥實踐調配為醫藥組成物。根據此態樣，提供包含與醫藥學上可接受之稀釋劑或載劑結合之式I或Ia化合物之醫藥組成物。
典型調配物藉由混合式I或Ia化合物及載劑、稀釋劑或賦形劑來製備。合適的載劑、稀釋劑及賦形劑為熟習此項技術者熟知的，且包括諸如碳水化合物、蠟、水溶性及/或可溶脹聚合物、親水性或疏水性材料、明膠、油、溶劑、水及類似者之材料。所使用之特定載劑、稀釋劑或賦形劑將取決於式I或Ia化合物所應用之手段及目的。溶劑通常係基於由熟習此項技術者認為投與至哺乳動物是安全(GRAS)的溶劑來選擇。一般而言，安全溶劑為無毒性水性溶劑，諸如水及可溶於或可混溶於水的其他無毒性溶劑。合適之水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG 400、PEG 300)等及其混合物。調配物亦可包括一或多種緩衝液、穩定劑、界面活性劑、濕潤劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、滑動劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、芳香 劑、調味劑及其他已知添加劑以提供藥物(亦即式I或Ia化合物或其醫藥組成物)之精緻外觀或有助於製造醫藥產品(亦即藥物)。
調配物可使用習知溶解及混合程序來製備。例如，在上述一或多種賦形劑之存在下將散裝藥物物質(亦即，式I或Ia化合物或穩定化形式之式I或Ia化合物(例如，與環糊精衍生物或其他已知錯合劑之錯合物)溶於合適的溶劑中。式I或Ia化合物通常調配成醫藥劑型以提供易可控劑量之藥物，且實現患者與處方方案之依從性。
應用之醫藥組成物(或調配物)可以多種方式封裝，該等方式取決於用於投與藥物之方法。通常，用於分佈之物品包括其中沈積有適當形式之醫藥調配物的容器。合適容器為熟習此項技術者所熟知且包括諸如瓶子(塑膠及玻璃)、藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬圓筒及類似物之材料。該容器亦可包括防開啟總成以防止輕率接近封裝之內含物。此外，容器上亦沈積有描述容器內含物之標籤。該標籤亦可包括適當警示。
醫藥調配物可製備用於各種投與途徑及類型。例如，具有所要純度之式I或Ia化合物可視情況與醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑或穩定劑(Remington’s Pharmaceutical Sciences(1980)第16版，Osol,A.編)以凍乾調配物、研磨粉末或水溶液之形式混合。調配可藉由在環境溫度下，在適當pH下，且以所要純度與生理上可接受之載劑(亦即在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒之載劑)混合來進行。調配物之pH主要取決於特定用途及化合物濃度，但範圍可為約3至約8。在pH 5之乙酸鹽緩衝液中調配為合適之實施例。
式I或Ia化合物可為無菌的。具體而言，用於活體內 投與之調配物應為無菌的。此類滅菌可藉由透過無菌過濾膜過濾來輕易完成。
該化合物通常可作為固體組成物、凍乾調配物或作為水溶液儲存。
包含式I或Ia化合物之醫藥組成物可以符合良好醫學實踐之方式(亦即，量、濃度、時程、進程、媒劑及投與路徑)來調配、給藥及投與。在此情形下考慮之因素包括所治療之特定病症、所治療之特定哺乳動物、個別患者之臨床病狀、病症起因、藥劑傳遞位點、投與方法、投與時程及醫學從業者已知之其他因素。欲投與之化合物之「治療有效量」將受此類考慮因素支配，且為預防、改善、治療凝血因子介導之病症所必需的最小量。該量較佳低於對宿主有毒或使宿主顯著更易出血之量。
可接受之稀釋劑、載劑、賦形劑及穩定劑在所採用之劑量及濃度下對接受者無毒，且包括：緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如氯化十八烷基二甲基苯甲基銨；氯化六羥季銨；氯化苄烷銨；氯化本索寧；苯酚、丁醇、或苯甲醇；對羥基苯甲酸烷基酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠、或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸、或離胺酸；單醣、二醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖、或山梨糖醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬錯合物(例如Zn-蛋白質錯合物)；及/或非離子界面活性劑，諸如TWEENTM 、PLURONICSTM 或聚乙二醇(PEG)。活性醫藥成分亦可截留於微膠囊中，例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合法所製備之微膠囊，例如分別為羥甲基纖維素或明膠微膠囊及聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊；截留於膠態藥物遞送系統(例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊)中或巨乳液中。此類技術揭示於Remington’s Pharmaceutical Sciences第16版，Osol,A.編(1980)中。
可製備式I或Ia化合物之持續釋放製劑。持續釋放製劑之合適實例包括含有式I或Ia化合物之固體疏水性聚合物之半滲透基質，該等基質呈成形物件例如膜、或微膠囊之形式。持續釋放基質之實例包括聚酯；水凝膠(例如聚(甲基丙烯酸2-羥基乙酯)或聚(乙烯醇))；聚丙交酯(US 3773919)；L-麩胺酸與L-麩胺酸γ-乙酯之共聚物；非可降解之乙烯-乙酸乙烯酯；可降解之乳酸-乙醇酸共聚物，諸如LUPRON DEPOTTM (由乳酸-乙醇酸共聚物及乙酸亮丙瑞林構成之可注射微球體)；及聚-D-(-)-3-羥基丁酸。
調配物包括適於本文中詳述之投與路徑的彼等調配物。調配物宜以單位劑型提供且可藉由製藥技術中熟知之任何方法製備。技術及調配物一般可見於Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co.,Easton,PA)中。此類方法包括使活性成分與構成一或多種配合成分之載劑締合的步驟。一般而言，藉由使活性成分與液體載劑或精細分開之固體載劑或兩者進行均勻及密切地締合，且必要時隨後使產物成形來製備調配物。
適於口服投與之式I或Ia化合物之調配物可製備成離散單位，諸如各自包含預定量之式I或Ia化合物之藥丸、膠囊、扁囊劑或錠劑。
經壓縮之錠劑可藉由於適合的機器中將視情況與黏合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑混合的呈諸如粉末或顆粒之自由流動形式之活性成分壓縮來製備。模製錠劑可藉由在合適機器中模製以惰性液體稀釋劑沾濕之粉末狀活性成分的混合物來製成。錠劑可視情況塗佈或刻痕且視情況配製以使得提供活性成分從中之緩慢或受控釋放。
錠劑、片劑、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散粉末或顆粒劑、乳液、硬膠囊或軟膠囊(例如，明膠膠囊)、糖漿或酏劑可製備用於口服用途。用於口服用途之式I或Ia化合物之調配物可根據此項技術已知之用於製造醫藥組成物的任何方法來製備，且此類組成物可含有一或多種藥劑，包括甜味劑、調 味劑、著色劑及防腐劑，以提供美味製劑。含有適於製造錠劑之與無毒醫藥學上可接受之賦形劑混合之活性成分的錠劑為可接受的。此等賦形劑可為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；粒化劑及崩解劑，諸如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，諸如澱粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑可為未塗佈的，或可藉由包括微囊封之已知技術來塗佈以延遲在胃腸道中之崩解及吸收，且從而在較長時期內提供持續的作用。例如，可單獨或與蠟一起採用時間延遲型材料，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
為了治療眼或其他外部組織(例如，口腔及皮膚)，調配物較佳作為含有量為例如0.075至20% w/w的活性成分之局部軟膏劑或乳膏劑來應用。當調配成軟膏劑時，活性成分可與石蠟或水混溶性軟膏劑基材一起使用。或者，活性成分可用水包油乳膏劑基材調配成乳膏劑。
若需要，乳膏劑基材之水相可包括多元醇，亦即具有二或更多個羥基之醇，諸如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露醇、山梨醇、甘油及聚乙二醇(包括PEG 400)及其混合物。局部調配物可理想地包括增強活性成分透過皮膚或其他受影響區域吸收或穿透的化合物。此類皮膚穿透增強劑之實例包括二甲基亞碸及相關的類似物。
乳液之油相可由已知成分以已知方式構成。雖然該相可僅包含乳化劑，其亦可包含至少一種乳化劑及脂肪或油或脂肪及油兩者之混合物。親水性乳化劑與可用作穩定劑之親脂性乳化劑包括在一起。總之，具有或沒有穩定劑之乳化劑構成所謂的乳化蠟，且蠟與油脂一起構成所謂的乳化軟膏劑基材，其形成乳膏劑調配物之油性分散相。適用於調配物之利泄劑及乳液穩定劑包括Tween® 60、Span® 80、鯨蠟硬脂醇、苄醇、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油酯及月桂基硫酸鈉。
式I或Ia化合物之水性懸浮液含有與適於製備水懸浮液之賦形劑混合的活性材料。此類賦形劑包括：懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、交聯羧甲基纖維素、聚維酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯樹膠；及分散劑或潤濕劑，諸如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)、環氧烷與脂肪酸之縮合產物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、環氧乙烷與長鏈脂肪醇之縮合產物(例如，十七碳乙烯氧基鯨蠟醇)、環氧乙烷與衍生自脂肪酸的偏酯及己糖醇酐之縮合產物(例如，聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯)。水性懸浮液還可含有一或多種防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯；一或多種著色劑；一或多種調味劑；及一或多種甜味劑，諸如蔗糖或糖精。
式I或Ia化合物之醫藥組成物可呈無菌可注射製劑形式，諸如作為無菌可注射水性或油性懸浮液。此懸浮液可根據已知技術使用以上提及之彼等合適分散劑或潤濕劑及懸浮劑來調配。無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，諸如1,3-丁二醇。無菌可注射製劑亦可製備作為凍乾粉末。可採用之可接受之媒劑及溶劑尤其為水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液。此外，無菌、非揮發性油可習慣上用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和不揮發性油，包括合成單酸甘油酯或二酸甘油酯。此外，諸如油酸之脂肪酸可同樣用於製備可注射劑。
可與載劑材料組合以產生單一劑型之活性成分之量將視所治療宿主及特定投與模式而變化。例如，意欲用於向人類口服投與之時間釋放調配物可含有與適當及方便量的載劑材料混合之約1至1000mg活性材料，該載劑材料可由總組成物之約5%變化至約95%(重量：重量)。可製備醫藥組成物以提供容易測量的投與量。例如，意欲用於靜脈內輸注的水溶液可含有每毫升溶液約3至500μg活性成分，以便可發生約30mL/hr之速率的合適體積之輸注。
適於非經腸投與之調配物包括水性及非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與預定接受者之血液等張之溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑。
適於局部投與至眼之調配物亦包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮於合適載劑中，尤其是用於活性成分之水性溶劑。活性成分較佳以約0.5至20% w/w，例如約0.5至10% w/w，例如約1.5% w/w之濃度存在於此類調配物中。
適於局部投與至口之調配物包括：口含錠，其在調味基材(通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)中包含活性成分；糖錠，其在惰性基材(諸如明膠及甘油)或蔗糖及阿拉伯膠中包含活性成分；及漱口劑，其在合適之液體載劑中包含活性成分。
用於直腸投與之調配物可作為具有包含例如可可脂或水楊酸鹽之合適基材的栓劑來提供。
適於肺內或鼻投與之調配物具有的粒子大小之範圍例如為0.1至500微米(包括以諸如0.5、1、30微米、35微米等之增量微米介於0.1與500微米之間範圍內的粒度)，其係藉由透過鼻通道快速吸入或藉由透過口吸入以便達到肺泡囊來投與。合適之調配物包括活性成分之水性或油性溶液。適於氣溶膠或乾粉投與之調配物可根據習知方法製備，且可與其他治療劑諸如迄今用於治療或預防如下所述之病症的化合物一起遞送。
適於陰道投與之調配物可作為子宮托、棉塞、乳膏劑、凝膠劑、糊劑、泡沫或噴霧調配物來提供，該等調配物除活性成分外亦含有此項技術中已知為適當之此類載劑。
調配物可包裝在單位劑量或多劑量容器，例如密封安瓿和小瓶中，並且可在冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，僅需要在使用之前立即添加無菌液體載 劑，例如注射用水。臨時注射溶液及懸浮液由先前描述種類的無菌粉末、顆粒及錠劑來製備。較佳單位劑量調配物為含有如以上所述之日劑量或單位日亞劑量或其適當分數之活性成分的彼等調配物。
本主題進一步提供包含至少一種如上文所定義之活性成分以且用於其之獸醫學載劑的獸醫學組成物。獸醫學載劑為用於投與該組成物之目的的材料且可為固體、液體或氣態材料，該等材料在其他方面為惰性的或為獸醫學領域中可接受的且可與活性成分相容。此等獸醫學組成物可非經腸、經口服或藉由任何其他所要途徑投與。
在特定實施例中，包含目前揭示之化合物之醫藥組成物進一步包含化療劑。在此等實施例之一些中，化療劑為免疫治療劑。
方法
目前揭示之化合物可用於抑制酶HPK1之活性。HPK1，亦被稱為促分裂原活化蛋白激酶1(mitogen activated protein kinase kinase kinase kinase 1)或MAP4K1，為Ste20相關絲胺酸/蘇胺酸激酶之生發中心激酶次家族之成員。HPK1藉由磷酸化及活化MAP3K蛋白(包括MEKK1、MLK3及TAK1)發揮MAP4K之功能，導致活化MAPK Jnk。
在一實施例中，本文揭示之主題係關於抑制HPK1之方法，該方法包含使HPK1與有效量之本文所述之式I或Ia化合物或醫藥組成物接觸。
在一實施例中，本文揭示之主題係關於一種用於增強有需要之受試者中之免疫反應的方法，其中該方法包含向該受試者投與有效量之本文所述之式I或Ia化合物或醫藥組成物。在此實施例之某些態樣中，相對於投與該化合物或醫藥組成物之前，該受試者中之T細胞具有以下之至少一者：促發增強、活化增強、遷移增強、增殖增強、存活增強及細胞溶解活性增強。在此實施例之某些態樣中，T細胞活化之特徵在於相對於投與該化合物或醫藥組成物之前， γ-IFN+ CD8 T細胞頻率升高或由T細胞產生之IL-2或顆粒酶B水準增加。在此實施例之某些態樣中，相對於投與化合物或醫藥組成物之前，T細胞之數目升高。在此實施例之某些態樣中，T細胞為抗原特異性CD8 T細胞。在此實施例之某些態樣中，相對於投與該化合物或醫藥組成物之前，該受試者中之抗原呈現細胞之成熟及活化增強。在此實施例之某些態樣中，抗原呈現細胞為樹突細胞。在此實施例之某些態樣中，抗原呈現細胞之成熟之特徵在於CD83+樹突細胞之頻率增加。在此實施例之某些態樣中，抗原呈現細胞活化之特徵在於樹突細胞上CD80及CD86之表現升高。
在本文所述之方法中，向患有本文在別處所述之癌症的受試者投與式I或Ia化合物或其醫藥組成物。
在一實施例中，本文揭示之主題係關於一種用於治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包含向有需要之受試者投與有效量之本文所述之式I或Ia化合物或醫藥組成物。在此實施例之某些態樣中，HPK1依賴性病症為癌症。在此實施例之某些態樣中，癌症包含至少一種選自由以下所組成之群組之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰腺癌、血液學惡性腫瘤及腎細胞癌。在此實施例之某些態樣中，癌症之T細胞浸潤水準升高。在此實施例之某些態樣中，相對於投與該化合物或組成物之前，該受試者中之該癌細胞之MHC I類抗原表現選擇性地升高。
在本文所述之方法中，該方法可進一步包含向該受試者投與化療劑。在此實施例之某些態樣中，化療劑與化合物或組成物同時向受試者投與。在此實施例之某些態樣中，化療劑在投與化合物或組成物之前向受試者投與。在此實施例之某些態樣中，化療劑在投與化合物或該組成物之後向受試者投與。
HPK1多核苷酸及多肽為此項技術中已知的(Hu等人(1996)Genes Dev. 10：2251-2264，其以全文引用的方式併入本文中)。HPK1多核苷酸及多肽 之非限制性實例包含如SEQ ID NO：1所陳述之人類HPK1多核苷酸(GenBank登錄號NM_007181.5之核苷酸141至2642)及如SEQ ID NO：2中所陳述之編碼之人類HPK1多肽(登錄號NP_009112.1)。人類中存在較短之821胺基酸HPK1同功型，其編碼序列及胺基酸序列分別在SEQ ID NO：3及1中陳述(分別為GenBank登錄號NM_001042600.2之核苷酸141至2606及GenBank登錄號NP_001036065.1)。
HPK1多肽包含多種保守結構模體。為了便於參考，將討論此等模體，因為此等模體涉及較長人類HPK1同功型，其在SEQ ID NO：2中陳述，包含833個胺基酸殘基。HPK1多肽包含跨越胺基酸殘基17至293之胺基端Ste20樣激酶域，其包括胺基酸殘基23至46之ATP結合位點。激酶結構域之後為四個脯胺酸富集(PR)模體，其充當含SH3蛋白(諸如CrkL、Grb2、HIP-55、Gads、Nck及Crk)之結合位點。四個PR模體分別跨越胺基酸殘基308至407、394至402、432至443及468至477。HPK1回應於TCR或BCR刺激而變得磷酸化及活化。位於PR1與PR2之間之位置381處之酪胺酸之TCR及BCR誘導之磷酸化介導經由SLP-76或BLNK SH2域結合至T細胞中之SLP-76或B細胞中之BLNK，且為活化激酶所需的。HPK1之C端中所見之香櫞同源性域(citron homology domain)，約跨越殘基495至800，可充當調控域且可參與巨分子相互作用。
目前揭示之化合物直接結合至HPK1且抑制其激酶活性。在一些實施例中，目前揭示之化合物降低、抑制或以其他方式減少HPK1介導之SLP76及/或Gads之磷酸化。
目前揭示之化合物可或可不為特異性HPK1拮抗劑。特異性HPK1拮抗劑將HPK1之生物活性降低一定量，該量在統計學上大於拮抗劑對任何其他蛋白質(例如，其他絲胺酸/蘇胺酸激酶)之抑制作用。在某些實施例中，目前 揭示之化合物特異性抑制HPK1之絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。在此等實施例之一些中，HPK1拮抗劑對HPK1之IC50 為HPK1拮抗劑對另一種絲胺酸/蘇胺酸激酶或其他類型之激酶(例如，酪胺酸激酶)之IC50 之約90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%、0.1%、0.01%、0.001%或更少。
目前揭示之化合物可用於抑制HPK1之方法中。此類方法包含使HPK1與有效量之目前揭示之化合物接觸。「接觸」意欲使化合物足夠接近經分離HPK1酶或表現HPK1之細胞(例如，T細胞、B細胞、樹突細胞)內部，使得化合物能夠結合且抑制HPK1活性。該化合物可經由向受試者投與該化合物來在活體外 或在活體內 與HPK1接觸。
此項技術中已知量測HPK1之激酶活性的任何方法可用於判定HPK1是否已經抑制，該等方法包括活體外 激酶檢定、具有對HPK1之磷酸化標靶(諸如SLP76及Gads)特異性之抗體的特免疫墨點、或HPK1激酶活性之下游生物效應(諸如將14-3-3蛋白募集至磷酸化SLP7及Gads、自含LAT微群集釋放SLP76-Gads-14-3-3複合體、或T細胞或B細胞活化)之量測。
目前揭示之化合物可用於治療HPK1依賴性病症。如本文所使用，「HPK1依賴性病症」為病理學病狀之發生或維持需要HPK1活性之病理學病狀。在一些實施例中，HPK1依賴性病症為癌症。
目前揭示之化合物亦可用於增強有需要之受試者中之免疫反應。此類方法包含投與有效量之目前揭示之化合物(亦即，式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物)。
如本文所使用，「增強免疫反應」係指對抗原之任何免疫原性反應改善。對抗原之免疫原性反應改善之非限制性實例包括樹突細胞之成熟或遷移增強、T細胞(例如，CD4 T細胞、CD8 T細胞)活化增強、T細胞(例如，CD4 T細胞、CD8 T細胞)增殖增強、B細胞增殖增強、T細胞及/或B細胞存活增加、 抗原呈現細胞(例如，樹突細胞)之抗原呈現改善、抗原清除改善、T細胞之細胞介素(例如，白細胞介素-2)產生增加、對前列腺素E2誘導之免疫遏制之抗性增加及CD8 T細胞之促發及/或細胞溶解活性增強。
在一些實施例中，相對於投與式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，受試者中之CD8 T細胞之促發、活化、增殖及/或細胞溶解活性增強。在一些實施例中，CD8 T細胞促發之特徵在於CD8 T細胞中CD44表現升高及/或細胞溶解活性增強。在一些實施例中，CD8 T細胞活化之特徵在於γ-IFN+ CD8 T細胞頻率升高。在一些實施例中，CD8 T細胞為抗原特異性T細胞。
在一些實施例中，相對於投與式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，受試者中之抗原呈現細胞之成熟及活化增強。在一些實施例中，抗原呈現細胞為樹突細胞。在一些實施例中，抗原呈現細胞之成熟之特徵在於CD83+ 樹突細胞之頻率增加。在一些實施例中，抗原呈現細胞活化之特徵在於樹突細胞上CD80及CD86之表現升高。
在一些實施例中，相對於投與式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之前，受試者中之細胞介素IL-10及/或趨化介素IL-8(鼠類KC之人類同系物)之血清水準降低。
TCR之參與導致HPK1活化，其發揮TCR誘導之AP-1反應途徑之負調控劑的作用。據信HPK1藉由磷酸化Ser376處之SLP76(Di Bartolo等人(2007)JEM 204：681-691)及Thr254處之Gads來減少信號傳導微群集之持久性來負調控T細胞活化，此導致結合至磷酸化SLP76及Gads之14-3-3蛋白之募集，自含LAT之微群集釋放SLP76-Gads-14-3-3複合體，這導致T細胞功能障礙，包括無反應性及耗乏(Lasserre等人(2011)J Cell Biol 195(5)：839-853)。
在免疫功能障礙之情況下，術語「功能障礙」係指對抗原刺激之免疫反應性降低之狀態。該術語包括可能發生抗原識別之耗乏及/或無反應性兩者之共同因素，但是隨後的免疫反應對控制感染或腫瘤生長無效。
如本文所使用，術語「功能障礙的」亦包括對抗原識別具有難治性或無反應性，具體而言，將抗原識別轉譯成下游T細胞效應子功能(諸如，增殖、細胞介素產生(例如IL-2、γ-IFN)及/或靶細胞殺傷之能力受損。
術語「無反應性」係指由於透過T細胞受體遞送之信號不完全或不足而引起之對抗原刺激之無反應性之狀態(例如，不存在ras活化之情況下之細胞內Ca+2 增加)。T細胞無反應性亦可在不存在共刺激之情況下用抗原刺激時產生，導致細胞對隨後抗原之活化變得具有難治性，即使在共刺激之情況下亦然。無反應狀態通常可由白細胞介素-2之存在來改寫。無反應性T細胞未經歷殖株擴增且/或獲得效應子功能。
術語「耗乏」係指作為由許多慢性感染及癌症期間發生之持續TCR信號傳導引起的T細胞功能障礙狀態之T細胞耗乏。其與無反應性之區別在於，其不是透過不完整或不足信號傳導引起，而是由持續信號傳導引起。其定義為效應子功能差、抑制性受體表現持續及與功能性效應子或記憶T細胞不同之轉錄狀態。耗乏阻止感染及腫瘤之最優控制。耗乏可由外在負調控途徑(例如免疫調控細胞介素)以及細胞內在負調控(共刺激)途徑(PD-1、B7-H3、B7-H4等)產生。
在一些實施例中，向受試者投與式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物導致T細胞功能增強。
「增強T細胞功能」意指誘導、引起或刺激T細胞具有持續或擴增生物功能，或更新或再活化耗乏或失活之T細胞。增強T細胞功能之實例包括：相對於介入之前之此類水準，細胞介素(例如，γ-干擾素、IL-2、IL-12及TNFα)分泌增加、增殖增加、抗原反應性(例如，病毒、病原體或腫瘤清除)增加、及由 CD8 T細胞產生之效應子顆粒(諸如，顆粒酶B)增加。在一個實施例中，增強水準為至少50%、或者60%、70%、80%、90%、100%、120%、150%、200%。量測此增強之方式為一般技藝人士已知的。
因此，目前揭示之式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物可用於治療T細胞功能障礙性病症。「T細胞功能障礙性病症」為特徵在於對抗原刺激之反應性降低的T細胞病症或病狀。在一特定實施例中，T細胞功能障礙性病症為與HPK1之激酶活性增加特異性相關之病症。在另一實施例中，T細胞功能障礙性病症為T細胞是無反應性的或分泌細胞介素、增殖或執行細胞溶解活性之能力降低的病症。在一具體態樣中，反應性降低導致對病原體或表現免疫原之腫瘤的無效控制。特徵在於T細胞功能障礙之T細胞功能障礙性病症之實例包括未解決之急性感染、慢性感染及腫瘤免疫性。
因此，目前揭示之化合物可用於治療需要增強之免疫原性(諸如，增加用於治療癌症之腫瘤免疫原性)之病狀。
「免疫原性」係指特定物質激發免疫反應之能力。腫瘤為免疫原性的，且增強腫瘤免疫原性有助於藉由免疫反應清除腫瘤細胞。
「腫瘤免疫性」係指腫瘤逃避免疫識別及清除之過程。因此，作為治療概念，腫瘤免疫性在此類逃避減弱時得以「治療」，且腫瘤由免疫系統識別且攻擊。腫瘤識別之實例包括腫瘤結合、腫瘤縮小及腫瘤清除。
在一個態樣中，本文提供一種用於治療有需要之受試者中之癌症的方法，其包含向受試者投與有效量之式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物。在一些實施例中，受試者患有黑色素瘤。黑色素瘤可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有結腸直腸癌。結腸直腸癌可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有非小細胞肺癌。非小細胞肺癌可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有胰腺癌。胰腺癌可處於早期或 晚期狀態。在一些實施例中，受試者患有血液學惡性腫瘤。血液學惡性腫瘤可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有卵巢癌。卵巢癌可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有乳癌。乳癌可處於早期或晚期。在一些實施例中，受試者患有腎細胞癌。腎細胞癌可處於早期或晚期。在一些實施例中，癌症之T細胞浸潤水準升高。
目前揭示之化合物可以此項技術中已知之任何合適方式來投與。在一些實施例中，式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物係以靜脈內方式、以肌肉內方式、以皮下方式、以局部方式、以口服方式、以經皮方式、以腹膜內方式、以眶內方式、藉由植入、藉由吸入、以鞘內方式、以心室內方式、以瘤內方式或以鼻內方式投與。
在一些實施例中，HPK1拮抗劑係連續投與。在其他實施例中，HPK1拮抗劑係間歇投與。此外，用有效量之HPK1拮抗劑治療受試者可包括單一治療或可包括一系列治療。
應理解，活性化合物之適當劑量取決於普通技術人員或獸醫之知識內的許多因素。活性化合物之劑量將例如根據受試者之年齡、體重、一般健康狀況、性別及飲食、投與時間、投與途徑、排泄速率及任何藥物組合而變化。
亦應理解，用於治療之式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物之有效劑量可在特定治療過程中增加或減少。劑量變化可由診斷檢定之結果產生且從其中變得顯而易見。
在一些實施例中，HPK1拮抗劑以約0.001μg/kg與約1000mg/kg之間之劑量向受試者投與，該劑量包括但不限於約0.001μg/kg、0.01μg/kg、0.05μg/kg、0.1μg/kg、0.5μg/kg、1μg/kg、10μg/kg、25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg、250μg/kg、500μg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg及200mg/kg。
在一些實施例中，提供一種用於治療有需要之受試者中之癌症的方法，其包含向受試者投與有效量之式I或Ia化合物或其醫藥學上可接受之鹽、前藥、代謝物或衍生物，進一步包含投與額外療法。額外療法可為輻射療法、手術(例如，乳房腫瘤切除術及乳房切除術)、化療、基因療法、DNA療法、病毒療法、RNA療法、免疫療法、骨髓移植術、奈米療法、單株抗體療法或前述之組合。該額外療法可呈輔助或新輔助療法之形式。在一些實施例中，額外療法為投與抗轉移藥劑。在一些實施例中，額外療法為投與副作用限制劑(例如，意欲減輕治療副作用之發生及/或嚴重性之藥劑，諸如抗噁心劑等)。在一些實施例中，額外療法為輻射療法。在一些實施例中，額外療法為手術。在一些實施例中，額外療法為輻射療法與手術之組合。在一些實施例中，額外療法為伽馬輻照。在一些實施例中，額外療法為靶向PI3K/AKT/mTOR途徑、HSP90抑制劑、微管蛋白抑制劑、凋亡抑制劑及/或化學預防劑之療法。
額外療法可為一或多種化療劑。因此，治療癌症之方法可包含將目前揭示之HPK1拮抗劑與至少一種化療劑聯合投與。
如本文所使用，「與...聯合」係指除了另一治療形式之外亦投與一種治療形式。因此，「與...聯合」係指在向受試者投與另一治療形式之前、期間或之後投與一種治療形式。
例如，HPK1拮抗劑及化療劑可依序(在不同時間)或同時(在同一時間)投與。HPK1拮抗劑及化療劑可藉由相同投與途徑或藉由不同投與途徑來投與。
在某些實施例中，HPK1拮抗劑與另一免疫療法聯合投與。例如，HPK1拮抗劑可與靶向PDL1/PD1途徑之化療劑或生物製劑組合。已知的抑制性檢查點途徑涉及透過PD-1受體之信號傳導。程式化死亡1(PD-1)受體及其配體PD-L1及PD-L2為與CTLA-4相同之共調控分子家族之一部分。-參見更多訊息： http：//www.onclive.com/web-exclusives/the-role-of-anti-pd-l1-immunotherapy-in-cancer/2#sthash.cGfYa1T1.dpuf，阻斷PD-L1結合至PD-1及CD80之化療劑或生物製劑可阻止PD-L1介導之T細胞活化之抑制/遏制。程式化細胞死亡配體-1(PD-L1)在抗原呈現細胞(APC)及其他免疫細胞上廣泛表現。其在來自廣泛人類癌症之腫瘤細胞中上調，且涉及抑制抗腫瘤T細胞免疫性。PD-L1為結合至活化T細胞、B細胞及其他骨髓細胞上之受體PD-1及CD80之細胞表面蛋白。已發現結合至活化T細胞上之PD-1之PD-L1干擾T細胞增殖且抑制免疫反應。癌細胞上PD-L1之過表現可能允許此等細胞避免免疫偵測及消除。腫瘤細胞上高水準之PD-L1表現與腫瘤侵襲性增加及預後不良相關。阻斷PD-L1結合至PD-1之化療劑或生物製劑包括抗PD-L1抗體，諸如德瓦魯單抗(durvalumab)、納武單抗(nivolumab)、pidlizumab、MPDL3280A、MK-3475及BMS-936559及其他抗體。
在另一實例中，HPK1拮抗劑可與靶向OX40及其配體OX40L(其為TNF超家族之成員)之化療劑或生物製劑組合。OX40在活化之CD4(+)及CD8(+)T細胞以及許多其他淋巴球及非淋巴球上表現。OX40至習知T細胞之共刺激信號促進分裂及存活、增大效應子及記憶群體之殖株擴增，因為其產生抗原。OX40額外遏制T調控細胞之分化及活性，進一步擴增此過程。OX40及OX40L亦調控T細胞、抗原呈現細胞、天然殺手細胞及天然殺手T細胞之細胞介素產生，且調節細胞介素受體信號傳導。作為已知控制T細胞之最顯著共刺激分子之一，刺激性OX40已顯示為癌症治療性免疫策略之標靶。某些OX40促效劑包括GBR 830及Linch等人，Frontiers in Oncology，第5卷，第1至10頁(2015)中揭示者，該文獻以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物，其用於在如本文所述之用於抑制HPK1之方法、如本文所 述之用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法及/或如本文所述之用於治療HPK1依賴性病症之方法中使用。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物，其用於在如本文所述之用於抑制HPK1之方法中使用。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物，其用於在如本文所述之用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法中使用。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物，其用於在如本文所述之用於治療HPK1依賴性病症之方法中使用。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物用於製造用於抑制HPK1之藥物、用於增強有需要之受試者中之免疫反應之藥物及/或用於治療HPK1依賴性病症之藥物的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物用於製造用於抑制HPK1之藥物的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物用於製造用於增強有需要之受試者中之免疫反應之藥物的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物用於製造治療HPK1依賴性病症之藥物的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物在如本文所述之用於抑制HPK1之方法、如本文所述之用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法及/或如本文所述之用於治療HPK1依賴性病症之方法中的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物在如本文所述之用於抑制HPK1之方法中的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物在如本文所述之用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法中的用途。
在一些實施例中，本發明亦提供本文所述之式I或Ia化合物或本文所述之醫藥組成物在如本文所述之用於治療HPK1依賴性病症之方法中的用途。
在一些實施例中，治療導致停止治療後之受試者中之持續反應。「持續反應」係指停止治療後對減少腫瘤生長之持續作用。例如，相較於投與階段開始時之大小，腫瘤大小可保持相同或更小。在一些實施例中，持續反應之持續時間至少與治療持續時間相同，為治療持續時間長度之至少1.5倍、2.0倍、2.5倍或3.0倍。
本文揭示之治療方法可導致部分反應或完全反應。如本文所使用，「完全反應」或「CR」係指所有靶病灶消失；「部分反應」或「PR」係指將基線SLD作為參考，靶病灶之最長直徑(SLD)之總和減少至少30%；且「穩定疾病」或「SD」係指將自治療開始以來之最小SLD作為參考，靶病灶即沒有足夠的收縮以符合PR之資格，也沒有足夠的增加以符合PD之資格。如本文所使用，「總反應率」(ORR)係指完全反應(CR)率及部分反應(PR)率之總和。
本文揭示之治療方法可導致投與HPK1拮抗劑之受試者之無進展存活及總體存活增加。如本文所使用，「無進展存活」(PFS)係指治療期間及之後的所治療之疾病(例如癌症)未變得惡化之時間長度。無進展存活可包括患者經歷完全反應或部分反應之時間量以及患者經歷穩定疾病之時間量。
如本文所使用，「總體存活」係指可能在特定持續時間之後存活之一組中之受試者之百分比。
在一些實施例中，投與HPK1拮抗劑之受試者為哺乳動物，諸如馴養動物(例如，母牛、綿羊、貓、狗及馬)、靈長類動物(例如，人類及非人類靈長類動物，諸如猴)、兔及齧齒動物(例如，小鼠及大鼠)。在一些實施例中，所治療之受試者為人類。
需要癌症治療之受試者可為表現癌症症狀之人、已經診斷患有癌症之人、處於癌症緩解中之受試者或發展癌症之風險(例如，遺傳傾向、某些飲食或環境暴露)增加之受試者。
以下實例藉助於說明且非藉助於限制來提供。
實例 材料及方法
方法A：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1100 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent SunFire-C18 3.5um，4.6x50管柱及2.0ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.05% TFA之95%水(溶劑A)及含0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.3分鐘快速上升至100%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.2分鐘。
方法B：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent SunFire-C18 3.5um，4.6x50管柱及2.0ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.01% TFA之95%水(溶劑A)及含0.01% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.4分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法C：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent Xbridge-C18，3.5um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5% 乙腈(溶劑B)起始，歷經1.3分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.2分鐘。
方法D：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent Xbridge-C18，3.5um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.6分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法E：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent SunFire-C18 3.5um，4.6x50管柱及2.0ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.01% TFA之95%水(溶劑A)及含0.01% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.5分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法F：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent Xbridge-C18，3.5um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之90%水(溶劑A)及10%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.5分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法G：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Agilent Xbridge-C18，3.5um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.4分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法H：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用Gemini-Nx 3u，C18，3um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分 鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之90%水(溶劑A)及10%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.5分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法I：在連接至具有PDA偵測器之Waters Acquity H-Class UPLC系統之Waters QDa質譜儀上進行實驗。該光譜儀具有以陽離子及陰離子模式操作之電噴霧源。此系統使用在50℃及1.0mL/分鐘流速下維持之Acquity BEH C18 1.7um，50 x 2.1mm管柱。溶劑系統為自含0.1%甲酸之97%水(溶劑A)及含0.1%甲酸之3%乙腈(溶劑B)歷經1.5分鐘至1%溶劑A及99%溶劑B之梯度。將此維持0.4分鐘，之後經歷下一個0.1分鐘返回至97%溶劑A及3%溶劑B。總運行時間為2.5分鐘。
方法I-1：在具有Agilent MSD質譜儀之Agilent 1200 HPLC上，使用ESI作為電離源，使用XBridge-C18，3.5um，4.6x50mm管柱及1.8ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含10mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)起始，歷經1.6分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續1.0分鐘。
方法J：在連接至具有PDA偵測器之Waters Acquity UPLC系統之Waters Micromass ZQ質譜儀上進行實驗。該光譜儀具有以陽離子及陰離子模式操作之電噴霧源。此系統使用在40℃及0.4mL/分鐘流速下維持之Acquity BEH C18 1.7um 100 x 2.1mm管柱。起始溶劑系統為含0.1%甲酸之95%水(溶劑A)及含0.1%甲酸之5%乙腈(溶劑B)達第一個0.4分鐘，接著為歷經下一個5.6分鐘至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。將此維持0.8分鐘，之後經歷下一個0.2分鐘返回至95%溶劑A及5%溶劑B。總運行時間為8分鐘。
方法K：在連接至具有PDA偵測器之Agilent HP1100 HPLC系統之Waters Micromass ZQ質譜儀上進行實驗。該光譜儀具有以陽離子及陰離子模式 操作之電噴霧源。此系統使用Phenomenex Luna C18 3um，30 x 4.6mm管柱及2.0mL/分鐘流速。起始溶劑系統為含0.1%甲酸之95%水(溶劑A)及含0.1%甲酸之5%乙腈(溶劑B)達第一個0.3分鐘，接著為歷經下一個4分鐘至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。將此維持1.0分鐘，之後經歷下一個0.5分鐘返回至95%溶劑A及5%溶劑B。總運行時間為6分鐘。
方法K-1：在具有LCMS-2020質譜儀之Shimadzu LC-20AD上，使用ESI作為電離源，使用Shim-Pack XR-ODS 2.2um，3.0x50管柱及1.2ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.05% TFA之95%水(溶劑A)及含0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法L：在具有LCMS-2020質譜儀之Shimadzu LC-30AD上，使用ESI作為電離源，使用Ascentis Express C18 2.7um，3.0x50mm管柱及1.0ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.05% TFA之95%水(溶劑A)及含0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法M：在具有LCMS-2020質譜儀之Shimadzu LC-20ADXR上，使用ESI作為電離源，使用poroshell HPH-C18，2.7um，3.0x50管柱及1.2ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含5mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法N：在具有LCMS-2020質譜儀之Shimadzu LC-30AD上，使用ESI作為電離源，使用CAPCELL CORE C18，2.7um，2.1x50mm管柱及1.0ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.1% FA之95%水(溶劑A)及含0.1% FA 之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法O：在具有LCMS-2020質譜儀之Shimadzu LC-30AD上，使用ESI作為電離源，使用kinetex EVO C18，2.7um，2.1x50管柱及1.2ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含6.5mM NH4 HCO3 之95%水(溶劑A)及5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法P：在具有LCMS-2010質譜儀之Shimadzu LC-20AD上，使用ESI作為電離源，使用Shim-Pack XR-ODS 2.2um，3.0x50管柱及1.2ml/分鐘流速進行實驗。溶劑系統為以含0.05% TFA之95%水(溶劑A)及含0.05% TFA之5%乙腈(溶劑B)起始，歷經2.0分鐘快速上升至5%溶劑A及95%溶劑B之梯度。最終溶劑系統保持恆定並再持續0.7分鐘。
方法Q：在與AgilentMSD(6140)質譜儀連接之Agilent 1290 UHPLC上，使用ESI作為電離源進行實驗。LC分離使用Phenomenex XB-C18，1.7μm，50×2.1mm管柱，流速為0.4ml/分鐘。溶劑A是含0.1% FA之水，且溶劑B為含0.1% FA之乙腈。梯度經歷7min由2至98%溶劑B組成且在平衡1.5min後保持98% B達1.5min。LC管柱溫度為40℃。在220nm及254nm處收集UV吸光度，且將質譜全掃描應用於所有實驗。
化合物之製備 實例1：合成中間物 實例I.1 中間物1：N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯
步驟1：2,6-二氯-4-碘菸鹼酸
在-78℃在N2 下向2,6-二氯-3-碘-吡啶(13.69g，50mmol)於無水THF(150mL)中之溶液中滴加LDA(2.0M於THF中，27.5mL，55mmol)。添加完成後，將反應溶液在-78℃攪拌2小時。在將CO2 鼓泡透過5min後，將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將反應溶液用濃HCl淬滅且用二氯甲烷萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈淡黃色固體狀之2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-羧酸(8.1g，51%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =317.8。
步驟2：(2,6-二氯-4-碘吡啶-3-基)甲醇
將2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-羧酸(6g，18.87mmol)於THF(10mL)中之混合物冷卻至0℃。緩慢添加BH3 -THF(1M於THF中，94mL，94.37mmol)，且隨後在85℃攪拌16小時。將混合物傾入冰水中，且添加K2 CO3 以將pH調整至8。將混合物用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取。有合併之機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將粗產物藉由急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=10/1)純化，得到呈黃色固體狀之(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲醇(4g，69%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =303.9。
步驟3：2,6-二氯-4-碘菸鹼甲醛
向(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲醇(2.5g，8.23mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加PCC(5g，23.26mmol)。將反應混合物在25℃攪拌1小時。將反應混合物透過矽膠管柱過濾且濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術(石油醚/乙酸 乙酯=20/1)純化，得到呈黃色固體狀之2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲醛(1.6g，64%收率)。1 H NMR(400MHz,CDCl3 )δ 10.17(s,1H),7.99(s,1H)。
步驟4：(E)-N-第三丁基-1-(2,6-二氯-4-碘吡啶-3-基)甲亞胺
將2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲醛(6.2g，20mmol)及第三丁胺(7.51g，103mmol)於水(50mL)中之混合物在室溫下攪拌18小時。將反應混合物用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀之N-第三丁基-1-(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲亞胺(7.2g，96%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =356.9。
步驟5：6-((第三丁基二甲基矽基氧基)甲基)-1,3-二氯-2,7-啶
將N-第三丁基-1-(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲亞胺(7.2g，20mmol)、第三丁基二甲基(丙-2-炔基氧基)矽烷(3.78g，22mmol)、NiCl2 (DPPP)(546mg，1.01mmol)、Zn(196mg，3.03mmol)於乙腈(40mL)中之混合物N2 下加熱至85℃達18小時。將反應混合物過濾。將濾液用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將粗品藉由急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=15/1)純化，得到呈淡黃色固體狀之第三丁基-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)甲氧基]-二甲基-矽烷(4g，44%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =343.0。
步驟6：(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)甲醇
將第三丁基-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)甲氧基]-二甲基-矽烷(4g，11.65mmol)於HCl於乙醇(20mL，40mmol)中之溶液中之溶液在25℃攪拌4小時。將反應混合物過濾。將固體收集，溶於水性NaHCO3 中，且用二氯甲烷萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)甲醇(2.5g，81%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =343.0。
步驟7：6,8-二氯-2,7-啶-3-甲醛
在0℃下向(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)甲醇(2.8g，12mmol)於二氯甲烷(100mL)及DMSO(25mL)中之溶液中添加IBX(5.13g，18mmol)。將反應溶液在室溫下攪拌18小時。將反應混合物用二氯甲烷稀釋，用10%水性K2 CO3 及鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體狀之6,8-二氯-2,7-啶-3-甲醛(2.2g，78%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =226.9。
步驟8：6,8-二氯-2,7-啶-3-羧酸
在室溫下向6,8-二氯-2,7-啶-3-甲醛(2.2g，9.69mmol)於1,4-二噁烷(80mL)及水(30mL)中之溶液中添加NH2 SO3 H(1.13g，11.63mmol)及NaClO2 (1.05g，11.63mmol)。將反應溶液在室溫下攪拌18小時。隨後添加水。將沉澱物藉由過濾收集，用水及丙酮洗滌，得到呈白色固體狀之6,8-二氯-2,7-啶-3-羧酸(2.2g，74%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =242.9。
步驟9：N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯
在90℃在N2 下向6,8-二氯-2,7-啶-3-羧酸(230mg，0.94mmol)、t-BuOH(1.4g，18.93mmol)及DIPEA(158mg，1.23mmol)於甲苯(20mL)中之溶液中添加DPPA(338mg，1.23mmol)於甲苯(2mL)中之溶液。將反應溶液回流2小時。將反應溶液冷卻至室溫且添加甲醇(40mL)。將所得溶液在室溫下攪拌20分鐘，隨後濃縮。將殘餘物用甲醇洗滌且乾燥，得到呈白色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(250mg，75%收率)。LCMS(ESI)[M-55]+ =257.9。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.56(s,1H),9.37(s,1H),8.23(s,1H),8.10(s,1H),1.52(s,9H)。
實例I.2 中間物2：6,8-二氯-2,7- 啶-3-胺
向小瓶中添加N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(1.05g，3.34mmol)、1,4-二噁烷中之HCl(10mL，4N,40mmol)及二氯甲烷(5mL)。將混合物在40℃攪拌4小時。將混合物濃縮且在真空下乾燥，得到呈黃色固體狀之6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(823mg，96%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =214.1。
實例I.3 中間物3：3-氯-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-2,7- 啶-1,6-二胺
向微波管中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(800mg，3.19mmol)、1-(4-甲氧基苯基)-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲胺(2.47g，9.58mmol)、DIPEA(1.0mL，6.39mmol)及1,4-二噁烷(4mL)。將混合物在140℃攪拌48小時。將混合物冷卻，濃縮且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇/7N NH3 -甲醇，200/5/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(1.02g，73%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =435.1。
實例I.4 中間物4：(±)-順式-N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向(±)-順式-2-氟環丙烷羧酸(200mg，1.92mmol)於二氯甲烷(10mL)及DMF(0.10mL)中之溶液中滴加草醯二氯(489mg，3.84mmol)。將混合物在20℃攪拌1小時。隨後將反應混合物在真空中濃縮，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-2-氟環丙烷羰基氯之粗產物。
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(400mg，1.6mmol)於二氯甲烷(15mL)及吡啶(3mL)中之溶液中添加(±)-順式-2-氟環丙烷羰基氯(220mg，1.8mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將反應混合物用水(50mL)洗滌，且用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。將有機萃取物合併且濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=10：1至3：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(350mg，66%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =300.2。
實例I.5 中間物5：(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向密封管中添加N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(100mg，0.33mmol)、NH4 OH(1.0mL)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在80℃攪拌6小時。隨後將反應混合物在真空中濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：5)純化，得到呈白色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =281.1。
實例I.6 中間物6：(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(250mg，1.0mmol)於吡啶(5mL)中之溶液中滴加(±)-反式-2-氰基環丙烷羰基氯(200mg，1.8mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液。將混合物在20℃攪拌2小時，且隨後將溶劑在減壓下除去。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至1：2)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(255mg，79%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =307.2。
實例I.7 中間物7：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
向密封管中添加(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(150mg，0.49mmol)、1,4-二噁烷(8mL)及氫氧化銨(6mL)。將混合物在100℃攪拌4小時，且隨後濃縮，得到呈白色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(220mg，94%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =288.2。
實例I.8 中間物8：(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向(1S,2S)-2-氟環丙烷羧酸(200mg，1.92mmol)於二氯甲烷(15mL)及DMF(3mL)中之溶液中滴加草醯二氯(0.24mL，2.88mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將反應混合物在真空下濃縮，得到黃色殘餘物，其隨後直接用於下一步驟中。
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(300mg，1.2mmol)於二氯甲烷(15mL)及吡啶(3mL)中之溶液中添加(1R,2S)-2-氟環丙烷羰基氯(220mg，1.8mmol)溶於二氯甲烷(2mL)中之溶液。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應混合物用水(50mL)洗滌，且用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，在真空中濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=10：1至1：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(330mg，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =300.2。
實例I.9 中間物9：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向密封管中添加(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(80mg，0.27mmol)、NH4 OH(1.0mL)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在85℃攪拌16小時。隨後將反應混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：5)純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(51mg，63%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =281.2。
實例I.10 中間物10：反式-N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向(±)-反式-2-氟環丙烷羧酸(250mg，2.4mmol)於二氯甲烷(5mL)及DMF(0.1mL)中之溶液中滴加草醯二氯(375mg，2.95mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將反應混合物在真空下濃縮，得到黃色殘餘物，其隨後直接用於下一步驟中。
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(250mg，1.0mmol)於吡啶(5mL)中之溶液中添加(±)-反式-2-氟環丙烷羰基氯(240mg，1.96mmol)溶於二氯甲烷(2mL)中之溶液。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將反應物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=10：1至3：1)純化，得到呈淡黃色 固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(225mg，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =300.0。
實例I.11 中間物11：反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺。
向密封管中添加(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(125mg，0.42mmol)、NH4 OH(1.0mL)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在90℃攪拌16小時。16小時後，將反應混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：5)純化，得到呈白色固體狀之(1S,2R)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(75mg，64%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =281.2。
實例I.12 中間物12：N-(6,8-二氯-2,7- 啶-3-基)-2,2-二氟環丙烷羧醯胺
向2,2-二氟環丙烷羧酸(200mg，1.64mmol)於二氯甲烷(3mL)及DMF(0.05mL)中之溶液中滴加草醯二氯(0.21mL，2.46mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。反應混合物不經純化即直接用於下一步驟中。
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(200mg，0.80mmol)於吡啶(3mL)中之溶液中添加溶於DMA(1mL)中之2,2-二氟環丙烷羰基氯(200mg，1.42 mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將反應混合物濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=20：1至3：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2,2-二氟-環丙烷羧醯胺(150mg，58%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =318.2。
實例I.13 中間物13：N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2,2-二氟環丙烷羧醯胺。
向密封管中添加N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2,2-二氟-環丙烷羧醯胺(100mg，0.31mmol)、NH4 OH(1.0mL)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在95℃攪拌6小時。6小時後，將反應混合物在真空中濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：5)純化，得到呈白色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2,2-二氟-環丙烷羧醯胺(55mg，59%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =299.2。
實例I.14 中間物14：4-乙基吡啶-3-基硼酸
在-78℃下經0.5h將n-BuLi(2.5M於己烷中，25mL，62.5mmol)之溶液滴加至3-溴-4-乙基-吡啶(9.8g，52.69mmol)及硼酸三異丙酯(12.0g，63.81mmol)於THF(150mL)中之溶液中。將反應混合物在-78℃下再攪拌0.5h，隨後緩慢溫熱至室溫且攪拌0.5小時。將反應用水(120mL)淬滅。將水層分離，用乙酸乙酯(150mL)萃取，且用3N HCl酸化至pH 4至5。淡黃色固體沉澱。將沉澱 物藉由過濾收集且乾燥，得到呈淡黃色固體狀之(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(1.8g，23%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =152.1。
實例I.15 中間物15：4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
將3-溴-4-乙基-吡啶(5.0g，26.88mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(8.5g，33.47mmol)、PdCl2 dppf(1.0g，1.37mmol)、乙酸鉀(8.0g，81.63mmol)於1,4-二噁烷(150mL)中之混合物在90℃在Ar下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至室溫。隨後添加雙(頻哪醇合)二硼(12.0g，47.26mmol)、PdCl2 dppf(1.0g，1.37mmol)及1,4-二噁烷(150mL)，且將反應混合物在90℃在Ar下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至室溫且蒸發。將殘餘物用矽石層析術(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到呈黑色油狀之4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(4.3g，69%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =234.1。
實例I.16 中間物16：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-2,7- 啶-1,6-二胺
將3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(2.8g，6.44mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(2.5g，10.73 mol)、XPhos Pd G2(250mg，0.32mmol)、XPhos(250mg，0.53mmol)、K2 CO3 (2g，14.49mmol)於1,4-二噁烷(100mL)及水(25mL)中之混合物在100℃在Ar下攪拌2小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(200mL)稀釋，且用鹽水(100mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物用矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯=1：2)純化，得到呈褐色固體狀之3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(1g，31%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =506.2。
實例I.17 中間物17：N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-1,6-二胺
向小瓶中添加XPhos Pd G2(120mg，0.15mmol)、X-phos(100mg，0.21mmol)、3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(600mg，1.38mmol)、乙酸鉀(300mg，3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(360mg，1.64mmol)、水(5mL)及1,4-二噁烷(50mL)。將反應混合物用N2 鼓泡且在100℃攪拌6小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，30：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(340mg，50%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =492.1。
實例I.18 中間物18：N-(6-氯-8-(二苯基亞甲基胺基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺
步驟1：N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(270mg，1.26mmol)於吡啶(5mL)中之混合物中添加環丙烷羰基氯(197mg，1.89mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。添加水(10mL)，且將混合物用二氯甲烷(10mL x 2)萃取。將有機層用水(20mL x 3)、鹽水(20mL x 1)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將粗產物藉由急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3/1)純化，得到呈黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(240mg，59%收率)。LCMS(ESI)[M-55]+ =282.0。
步驟2：N-(6-氯-8-(二苯基亞甲基胺基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(200mg，0.71mmol)、二苯甲酮亞胺(benzophenone immine)(128mg，0.71mmol)、Pd(OAc)2 (15mg，0.07mmol)、Xantphos(40mg，0.07mmol)、Cs2 CO3 (462mg，1.42mmol)、DMF(1mL)及甲苯(1mL)之混合物在微波反應器中加熱至145℃達1小時。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且透過矽藻土過濾。將濾液用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(正相矽膠，二氯甲烷/甲醇=50/1) 純化，得到呈黃色固體狀之N-(6-氯-8-(二苯基亞甲基胺基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(45mg，12%收率)。LCMS(ESI)[M-55]+ =427.1。
實例I.19 中間物19：3-氯-N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7- 啶-1,6-二胺
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(2.5g，9.98mmol)、雙(2,4-二甲氧基苄基)胺(12.67g，39.92mmol)及Et3 N(5.04g，49.9mmol)於1,4-二噁烷(100mL)中之混合物在120℃攪拌24小時。將混合物濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/己烷=2：3)純化，得到呈白色固體狀之3-氯-N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(3.8g，73%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =495.1。
實例I.20 中間物20：N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-1,6-二胺
將3-氯-N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(2.6g，5.25mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(1.42 g，5.78mmol)、XPhos Pd G2(0.41g，0.53mmol)、乙酸鉀(1.03g，10.51mmol)及XPhos(0.5g，1.05mmol)於1,4-二噁烷(100mL)及水(10mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌3小時。將混合物濃縮且藉由逆相製備型HPLC(C-18，乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 )純化，得到呈白色固體狀之N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(1.1g，27%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =566.3。
實例I.21 中間物21：1-羥基-3H-氧雜硼雜戊環并[3,4-c]吡啶
向冷卻(-78℃)(3-溴-4-吡啶基)甲醇(960mg，5.11mmol)於THF(40mL)中之溶液中滴加n-BuLi(2.5M於己烷中，7.5mL，12mmol)。將混合物在-78℃攪拌2小時，之後添加硼酸三異丙酯(1.6mL，6.91mmol)。將混合物在-78℃攪拌30分鐘，隨後使其緩慢溫熱至室溫，且再攪拌1小時。隨後將反應物再冷卻至-78℃，且藉由添加水(10mL)淬滅。將混合物用2N HCl酸化至pH=5，且用乙酸乙酯(30ml x 2)洗滌。將水相在真空中濃縮，得到呈淺褐色固體狀之粗品1-羥基-3H-氧雜硼雜戊環并[3,4-c]吡啶(1.8g，52%收率)，其直接用於下一步驟。LCMS(ESI)[M+H]+ =136.2。
實例I.22 中間物22：(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
步驟1：(±)-順式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-2-氰基環丙烷羧酸(1500.0mg，13.5mmol)及草醯二氯(2.0mL，23.48mmol)於二氯甲烷(30mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。將過量草醯二氯藉由旋轉蒸發在室溫下除去。隨後添加二氯甲烷(30mL)、6,8-二氯-2,7- 啶-3-胺(850.0mg，3.97mmol)及吡啶(5.0mL，61.82mmol)。將反應混合物在0℃攪拌1小時。隨後將溶劑藉由旋轉蒸發除去，且將殘餘物用水洗滌且過濾，得到呈黃色固體狀之粗品(±)-順式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(1100mg，80%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =307.0。
步驟2：(±)-順式-N-(6-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基胺基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(1.0g，3.26mmol)、2,4-二甲氧基苄基胺(1.5g，8.97mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在80℃攪拌4小時。將反應物濃縮至乾燥。將粗產物藉由矽膠管柱層析術(二氯甲烷：甲醇，15：1)純化，得到粗(±)-順式-N-(6-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基胺基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(1.5g)LCMS(ESI)：[M+H]+ =438.1。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-N-[6-氯-8-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基胺基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(400mg，0.91mmol)於三氟乙酸(2.0mL)中之溶液在室溫下攪拌4小時。將反應物濃縮至乾燥，且將粗產物藉由矽膠管柱層析術(乙酸乙酯)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(170mg，58%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =288.1。
實例I.23 中間物23 ：2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯
步驟1：四氟硼酸乙基二苯基鋶(ethyldiphenylsulfanium tetrafluoroboranuide)
在氮下向AgBF4 (37.48g，192.53mmol)於二氯甲烷(450mL)中之溶液中添加碘乙烷(30g，192.35mmol)。將溶液在室溫下攪拌30分鐘。添加苯基磺醯基)苯(106.92g，573.99mmol)，且隨後在35℃攪拌16小時。過濾混合物，且在真空下濃縮濾液。將殘餘物用二氯甲烷/乙醚(1/1)洗滌，得到呈灰白色固體狀之四氟硼酸乙基二苯基鋶(25g，116.28mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =215。
步驟2：反式 -2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三 丁酯
在-78℃下向乙基(二苯基)鋶(1.55g，7.2mmol)於二氯甲烷(2mL)及1,2-二甲氧基乙烷(20mL)中之溶液中添加二異丙基胺基鋰(4.2mL，8.4mmol)。將所得溶液在-78℃攪拌1小時。在-78℃下添加(E )-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三 丁酯(500mg，2.4mmol)。將混合物在25℃攪拌6小時。將反應用水淬滅，且隨後用二氯甲烷萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮，得到呈黃色油狀之反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三 丁酯(550mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+ =237。
步驟3：反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三 丁酯
將反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三 丁酯(500mg，粗品)於二氯甲烷(3mL)及2,2,2-三氟乙酸(4mL)中之溶液在25℃攪拌2小時。隨後將溶劑在真空下濃縮。用甲醇中之氨(7mol/L)將反應混合物調整至pH 7。將殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% HCl於水中)純化，得到4種呈黃色油狀之2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸(180mg，0.99mmol)之立體異構物。LCMS(ESI)[M+H]+ =181。(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與羧酸成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)
實例I.24 中間物24 ：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸
步驟1：四氟硼酸二苯基(丙基)鋶
在0℃下向四氟硼酸銀(2g，10.31mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加1-碘丙烷(1.75g，10.31mmol)及二苯基硫醚(5.76g，30.93mmol)。將反應物在35℃攪拌15小時。過濾混合物，且在真空下濃縮濾液。經殘餘物用二氯甲烷-乙醚洗滌，得到呈白色固體狀之四氟硼酸二苯基(丙基)鋶(2g，6.32mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =229。
步驟2：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯
在-78℃下向四氟硼酸二苯基(丙基)鋶(1.50g，4.75mmol)於1,2-二甲氧基乙烷(30mL)及二氯甲烷(3mL)中之溶液中添加二異丙基胺基鋰(5.54ml，11.09mmol)。將所得混合物在-78℃攪拌1小時。隨後添加(Z )-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三 丁酯(330mg，1.58mmol)，且在-78℃至25℃攪拌15小時。將反應用水淬滅。所得混合物用二氯甲烷萃取且用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮，得到呈褐色油狀之2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三 丁酯(350mg，1.40mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =251。
步驟3：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸
將2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸反式-第三 丁酯(350mg，1.4mmol)及2,2,2-三氟乙酸(8mL)於二氯甲烷(3mL)中之溶液在25℃攪拌1小時。將混合物在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% HCl於水中)純化，得到呈褐色油狀之2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸(260mg，1.34mmol)。產物混合物由吡唑與羧酸成反式之4種立體異構物及作為污染 物之2,2-二甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸組成。LCMS(ESI)[M+H]+ =195。
實例I.25 中間物25 ：2-溴-6-異丙基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮
將2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(3.0g，13.04mmol)及NaH(1.56g，39.12mmmol)於N,N -二甲基甲醯胺(75mL)中之溶液在0℃攪拌10min。隨後添加2-碘丙烷(11.08g，65.2mmol)。將混合物在25℃攪拌1小時。將反應用水淬滅。將混合物在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之2-溴-6-異丙基-5,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(2.1g，7.7166mmol，59.2%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =272。
實例I.26 中間物26 ：2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
步驟1：2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈
將3,5-二溴-1H-吡唑(1.0g，4.43mmol)及碳酸鉀(1.22g，8.85mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中之混合物在25℃攪拌10min。添加溴乙腈(796.59mg，6.64mmol)且將反應物在25℃攪拌2h。過濾後，將濾液用乙酸乙酯(30mL) 稀釋。將反應物用水洗滌。將有機相用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用石油醚/二氯甲醇(1/1)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈(950mg，3.59mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =264。
步驟2：2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈
將2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈(1.0g，3.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基丙-1-烯-1-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(687.29mg，3.77mmol)、Pd(dppf)Cl2 (552.64mg，0.75mmol)及碳酸鉀(1.56g，11.32mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(2mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌1h。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術用乙酸乙酯/石油醚(1/3)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈(700mg，2.92mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =240。
步驟3：2-溴-5,5-二甲基-6,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈(700mg，2.92mmol)於甲基磺酸(15mL)中之混合物在65℃攪拌3d。將反應用冰水淬滅。將反應混合物用氫氧化鈉水溶液調整至pH 9至10。將所得溶液用二氯甲烷萃取且用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之2-溴-5,5-二甲基-6,8-二 氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(300mg，1.16mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =258。
步驟4：2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將2-溴-5,5-二甲基-6,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(100mg，0.39mmol)及第三丁醇鉀(52.07mg，0.46mmol)於四氫呋喃(10mL)中之溶液在25℃攪拌10min。添加碘甲烷(82.52mg，0.58mmol)。將反應物在25℃攪拌1h。將反應物在真空下濃縮，且藉由急驟層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(95/5)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(80mg，0.29mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =272。
實例I.27 中間物27 ：2-溴-4-亞甲基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮
步驟1：3,5-二溴-1H-吡唑
在N2 下向3L 3頸圓底燒瓶中添加二甲基四氫呋喃(1000mL)中之化合物1 (200g，656mmol，1.0當量)，隨後將溶液冷卻至-78℃。在-78℃下將n-BuLi(2.5M，525mL，2.0當量)滴加至以上溶液中1小時，且將混合物在-78℃攪拌3小時。TLC(石油醚/乙酸乙酯=3/1，Rf =0.51)顯示反應完成，且形成一個主要的 新斑點。將兩種反應物合併，且將反應混合物在0℃下傾入水(1000mL)中，且用2N HCl將溶液之pH值酸化至4至5。將所得溶液用乙酸乙酯(1000mL，800mL，400mL)萃取。將合併之有機相用鹽水(800mL)洗滌，用無水Na2 SO4 乾燥且在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之標題化合物(284g，1.26mol，95.8%收率)。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟2：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸第三丁酯
向3,5-二溴-1H-吡唑(137g，607mmol，1.0當量)於MeCN(959mL)中之溶液中添加2-氯乙酸第三丁酯(137g，910mmol，131mL，1.5當量)、K2 CO3 (137g，989mmol，1.63當量)及TBAI(11.0g，29.7mmol，0.049當量)。將所得溶液在25℃攪拌12小時。TLC(石油醚/乙酸乙酯=5/1，Rf =0.74)顯示反應完成，且形成一個主要的新斑點。將反應混合物過濾，將濾餅用EtOAc(500mL x3，300mL，200mL)洗滌。將合併之濾液濃縮，得到殘餘物。將殘餘物溶於EtOAc(2.0L)中，用水(1.0L)、鹽水(1.0L)洗滌。將有機相用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈褐色油狀之標題化合物(744g，粗品)。1 H NMR：(400MHz,CDCl3 )：δ 6.35(s,1 H),4.80(s,2 H),1.46(s,9 H)。
步驟3：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸
向化合物2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸第三丁酯(248g，729mmol，1.0當量)於DCM(140mL)中之溶液中添加TFA(2.08kg，18.2mol，1.35L，25當量)，且將所得溶液加熱至80℃且攪拌2小時。TLC(石油醚/乙酸乙酯=5/1，Rf =0.03)顯示反應完成，且形成一個主要的新斑點。將反應重複兩次。將合併之反應混合物在減壓下濃縮，得到粗產物。將粗產物用石油醚/乙酸乙酯(4/1，1.0L)稀釋，且將所得懸浮液在25℃攪拌1小時，隨後過濾。將濾餅收集且在真空中乾燥，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(471g，1.66mol，75.8%收率)。 1 H NMR： (400MHz,DMSO)δ 13.3(br s,1 H),6.70(s,1 H),4.96(s,2 H)。
步驟4：N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙醯胺
向2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(157g，553mmol，1.0當量)於DMF(1.10L)中之溶液中添加DIPEA(357g，2.77mol，482mL，5.0當量)及EDCI(138g，719mmol，1.3當量)，將所得溶液在0℃攪拌30min。隨後添加HOBt(97.1g，719mmol，1.3當量)，且將混合物在0℃下再攪拌30min。隨後在0℃下添加丙-2-烯-1-胺(47.4g，830mmol，62.2mL，1.5當量)，且將混合物溫熱至25℃且攪拌16小時。TLC(石油醚/乙酸乙酯=1/1，Rf =0.60)顯示反應完成，且形成一個主要的新斑點。將反應再重複兩次。將三批反應物合併，且將反應混合物傾入冰水(12.0L)中，用乙酸乙酯(2.00L，2.00L，1.00L)萃取。將合併之有機相用鹽水(2.0L)洗滌，隨後在真空中濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上(石油醚/乙酸乙酯=3/1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(340g，1.05 mol，63.5%收率)。1 H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 6.41(s,1 H),5.89(br s,1 H),5.79(m,1 H),5.08-5.17(m,2 H),4.85(s,2 H),3.86-3.93(m,2 H)。
步驟5：N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-(4-甲氧基苄基)乙醯胺
向N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙醯胺(103g，319mmol，1.0當量)於THF(721mL)中之溶液中添加KOH(32.2g，574mmol，1.8當量)、18-冠-6(3.37g，12.8mmol，0.04當量)及1-(氯甲基)-4-甲氧基-苯(64.9g，415mmol，56.5mL，1.3當量)，隨後將混合物在25℃攪拌64h。TLC(石油醚/乙酸乙酯=2/1，Rf =0.50)顯示，一個主要的新斑點形成。將反應再重複兩次。將三批反應物合併，且向反應混合物中添加水(1.00L)，用1M HCl將pH值調整至7至8，隨後用EtOAc(1.00L，800mL x 3)萃取。將合併之有機相用鹽水(800mL)洗滌，用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上(石油醚/乙酸乙酯=2/1)純化，得到呈褐色油狀之標題化合物(320g，722mmol，75.5%收率)。
步驟6：2-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-亞甲基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮
在Ar下向N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-(4-甲氧基苄基)乙醯胺(50.0g，113mmol，1.0當量)於DMF(1.0L)中之溶液中添加K2 CO3 (31.2g， 226mmol，2.0當量)、Pd(PPh3 )4 (17.0g，14.7mmol，0.13當量)，隨後將混合物在120℃攪拌16小時。將反應再重複六次。將七批反應物合併，且將反應混合物在真空中濃縮以除去溶劑，得到殘餘物。隨後向殘餘物中添加水(2.0L)，用乙酸乙酯(2.0L，1.0L，1.0L)萃取。將合併之有機相用鹽水(1.0L)洗滌，隨後濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上(石油醚/乙酸乙酯=2/1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(74.1g，204mmol，25.9%收率，98.7%純度)。1 H NMR：(400MHz,CDCl3 )δ 7.21(d,J =8.8Hz,2 H),6.86-6.92(m,2 H),6.52(s,1 H),5.50(s,1 H),5.20(s,2 H),5.02(s,1 H),4.58(s,2 H),4.13(s,2 H),3.83(s,3 H)。
步驟7：2-溴-4-亞甲基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮
將2-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-亞甲基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮(3.90g，10.8mmol，1.0當量)、TFA(38.4g，336mmol，24.9mL，31.3當量)及三氟甲烷磺酸(16.2g，108mmol，9.5mL，10當量)於DCM(28mL)中之溶液在25℃攪拌12小時。將反應混合物濃縮，得到殘餘物。向殘餘物中添加水(100mL)，隨後用飽和NaHCO3 水溶液將pH值調整至6至7，用EtOAc(100mL x 3，60mL x 3)萃取。將合併之有機相用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上(石油醚/乙酸乙酯=1/1)純化，得到呈灰色固體狀之標題化合物(1.90g，7.85mmol，72.9%收率)。1 H NMR：(400MHz,CDCl3 )δ 6.88(s,1 H),6.54(s,1 H),5.55(s,1 H),5.21(s,1 H),5.08(s,2 H),4.15(d,J =6.0Hz,2 H)。
實例I.28 中間物28 ：2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
步驟1：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺
將2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(15g，52.84mmol)、甲基(丙-2-烯-1-基)胺(5.7g，80.15mmol)、N,N -二異丙基乙胺(27g，208.9mmol)及HATU(30g，78.9mmol)於N,N -二甲基甲醯胺(500mL)中之溶液在室溫下攪拌16小時。將所得混合物用乙酸乙酯稀釋，隨後用氯化鈉溶液洗滌。將有機相用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用乙酸乙酯/石油醚(2/3)溶離來純化，得到呈黃色油狀之2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺(16.3g，92%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =338.0。
步驟2：2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
在80℃下將2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺(5g，14.84mmol)、乙酸鈀(166mg，0.74mmol)、三苯基膦(388mg，1.48mmol)、TBAB(4.8g，14.890mmol)及乙酸鉀(4.2g，42.80mmol)於N,N -二甲基甲醯胺(100mL)中之溶液攪拌10h。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物在矽膠管柱上純化，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)溶離，得到呈褐色油狀之2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(3.2g，84%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =258.1。
中間物XX：2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氫螺[環丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯]-7'(8'H)-酮
將碘化三甲基氧化鋶(1.29g，5.86mmol)及第三丁醇鉀(656mg，5.85mmol)於二甲基亞碸(30mL)中之混合物在室溫下攪拌30min。隨後添加2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(500mg，1.95mmol)於二甲基亞碸(3mL)中之溶液。隨後將混合物在50℃攪拌12h。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋，隨後用水洗滌。將有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱用二氯甲烷/甲醇(10/1)純化，得到呈白色固體狀之2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氫螺[環丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯]-7'(8'H)-酮(120mg，23%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =270。
實例I.29 中間物29 ：8-溴-5,6-二氫-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯
步驟1：2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-硫酮
將2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(314mg，1.36mmol)及勞森試劑(551.4mg，1.36mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在90 ℃攪拌1h。將反應物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(96/4)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-硫酮(265mg，78.9%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =246.0。
步驟2：2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基)-5,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7- 胺將2-溴-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-硫酮(265.0mg，1.07mmol)、2,2-二乙氧基乙-1-胺(1.42g，10.7mmol)及碳酸銀(590mg，2.14mmol)於四氫呋喃(10mL)中之混合物在80℃攪拌1h。將溶劑在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相管柱用水(0.05%TFA)/CH3 CN(85/15)溶離來純化，得到呈褐色油狀之2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基)-5,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-胺(295mg，80%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =345.0。
步驟3：8-溴-5,6-二氫-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯
將2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基)-5,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-胺(228mg，0.66mmol)及濃鹽酸(0.17mL，0.66mmol)於乙酸(5mL)中之溶液在80℃攪拌1h。將反應物在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相管柱用水(0.05%TFA)/ACN(85/15)溶離來純化，得到呈褐色油狀之8-溴-5,6-二氫-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯(150mg，89.7%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =253.0。
實例I.30 中間物30 ：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯
步驟1：7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯
在0℃下向7-溴-8-甲基-2,3-二氫-1H-吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪(1g，4.37mmol)於四氫呋喃(2mL)中之溶液中滴加LiHMDS(8.73mL，8.73mmol，1mol/L)。將所得溶液在0℃在氮下攪拌0.5h。隨後添加二碳酸二第三丁酯(2.85g，13.07mmol)，且將反應物在室溫下攪拌2h。將反應藉由甲醇(50mL)淬滅。隨後將溶劑在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(乙酸乙酯/石油醚，1/4)純化，得到呈黃色油狀之7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯(800mg，2.43mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =329.2。
步驟2：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯
將7-溴-8-甲基-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯(6.2g，18.83mmol)、二頻哪醇二硼(23.93g，94.22mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(2.76g，3.77mmol)及乙酸鉀(5.55g，56.62mmol)於1,4-二噁烷 (2mL)中之混合物在90℃在氮下攪拌2.5h。隨後將溶劑在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用乙酸乙酯/石油醚(30%)溶離來純化，得到呈黃色油狀之8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2,3-二氫吡啶 并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-羧酸第三丁酯(5g，13.29mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =376.3。
實例2： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物1)
向密封管中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(50mg，0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)、Xphos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀(52mg，0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.2mL)。將混合物在100℃攪拌2小時。隨後將反應混合物過濾。將濾液濃縮，得到黃色殘餘物，將其藉由矽石急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度為20：1至10：1)純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(21mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.974，[M+H]+ =338.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1 H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.99-4.80(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.15(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例3： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物2)
向密封管中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(30mg，0.11mmol)、1,5-二甲基-1H-吡唑-4-硼酸頻哪醇酯(31mg，0.14mmol)、XphosPdG2(8mg，0.01mmol)、Xphos(10mg，0.02mmol)、乙酸鉀(31mg，0.32mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.4mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至10：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之順式-N-[8-胺基-6-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(8mg，21%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.051，[M+H]+ =341.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.18(s,1H),8.23(s,1H),7.85(s,1H),7.00(s,1H),4.99-4.83(m,1H),3.86(s,3H),2.64(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.25-1.20(m,1H)。
實例4 ：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物3)
向密封管中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(20mg，0.07mmol)、1,3,5-三甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(22mg，0.09mmol)、Xphos Pd G2(6mg，0.01mmol)、Xphos(7mg， 0.01mmol)、乙酸鉀(21mg，0.21mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌5小時。隨後將反應混合物過濾且濃縮，得到黃色殘餘物，將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至8：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,ODS,50g管柱，uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之順式-N-[8-胺基-6-(1,3,5-三甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(9mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.055，[M+H]+ =355.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.21(s,1H),8.24(s,1H),6.82(s,1H),4.98-4.80(m,1H),3.78(s,3H),2.42(s,3H),2.33(s,3H),2.19-2.13(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.27-1.18(m,1H)。
實例5： N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物4)
向密封管中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(20mg，0.07mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(19mg，0.09mmol)、Xphos Pd G2(6mg，0.01mmol)、Xphos(7mg，0.01mmol)、乙酸鉀(21mg，0.21mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.2mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。隨後將反應混合物過濾且濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽石急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至10：1)純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(9mg，37%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.027，[M+H]+ =327.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.16(s,1 H),8.22(s,1H),8.14(s,1H),8.03(s,1H),7.13(s,1H), 4.99-4.82(m,1H),3.96(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例6： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物5)
向小瓶中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(220mg，0.46mmol)、X-phos(43mg，0.09mmol)、XPhos Pd G2(54mg，0.07mmol)、乙酸鉀(135mg，1.38mmol)、(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(69mg，0.46mmol)、水(1mL)及1,4-二噁烷(10mL)。將反應混合物藉由N2鼓泡脫氣，且隨後在100℃攪拌6小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(102mg，64%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.112，[M+H]+ =359.0，方法=B；1 H-NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.50(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.20(s,1H),7.38-7.36(m,2H),7.35(d,J =5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.80-2.72(m,1H),2.78(q,J =7.6Hz,2H),2.20-2.12(m,1H),1.65-1.57(m,1H),1.48-1.39(m,1H),1.09(t,J =7.6Hz,3H)。
實例7： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物6)
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(51mg，0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)、Xphos(178mg，0.04mmol)、乙酸鉀(52mg，0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌2小時，且隨後過濾。將濾液濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,ODS,40.0g管柱，uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(12mg，20%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.990，[M+H]+ =338.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1 H),8.54(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.34(s,1H),7.40(d,J =4.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.98-4.80(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例8： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物7)
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2- 基)-1H-吡唑(48mg，0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)、Xphos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀(52mg，0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物過濾且濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(29mg，50%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.038，[M+H]+ =327.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.16(s,1 H),8.22(s,1H),8.14(s,1H),8.03(s,1H),7.12(s,1H),4.99-4.79(m,1H),3.96(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.27-1.19(m,1H)。
實例9： 反式-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物8)
向密封管中添加(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(75mg，0.27mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(72mg，0.35mmol)、Xphos Pd G2(21mg，0.03mmol)、Xphos(25mg，0.05mmol)、乙酸鉀(79mg，0.80mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物過濾且濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，梯度=20：1至10：1)純化，得到黃色固體。將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用 甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(32mg，37%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.063，[M+H]+ =327.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.16(s,1 H),8.17(s,1H),8.13(s,1H),8.02(s,1H),7.10(s,1H),4.97-4.79(m,1H),3.96(s,3H),2.49-2.40(m,1H),1.59-1.50(m,1H),1.49-1.38(m,1H)。
實例10： 1-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-3-甲基脲(化合物9)
步驟1：1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基脲
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(200mg，0.8mmol)於THF(15mL)中之溶液中添加Et3 N(403mg，3.99mmol)及三光氣(308mg，1.04mmol)。將混合物在20℃攪拌0.5小時。添加甲胺鹽酸鹽(108mg，1.6mmol)。將所得混合物在20℃再攪拌1小時。將反應混合物藉由水(10mL)淬滅，且藉由二氯甲烷(80mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，濃縮且藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=5：1至1：2)純化，得到呈淡黃色固體狀之1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(120mg，55%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =271.1。
步驟2：1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基脲
向密封管中添加1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(120mg，0.44mmol)、NH4 OH(0.5mL)及1,4-二噁烷(1.5mL)。將混合物在80℃攪拌6小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：5)純化，得到呈白色固體狀之1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(80mg，62%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =252.2。
步驟3：1-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基脲。
第三丁基
向密封管中添加1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(50mg，0.20mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(54mg，0.26mmol)、Xphos Pd G2(16mg，0.02mmol)、Xphos(19mg，0.04mmol)、乙酸鉀(58mg，0.60mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物過濾且濃縮，得到黃色殘餘物，將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至8：1)純化，得到黃色固體。將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,50g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈淡黃色固體狀之1-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-3-甲基-脲(19mg，32%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.934，[M+H]+ =298.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.10(s,1H),8.12(s,1H),8.00(s,1H),7.32(s,1H),7.02(s,1H),3.96(s,3H),2.90(s,3 H)。
實例11： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物10)
步驟1：4-甲氧基吡啶-3-基硼酸
向密封管中添加3-溴-4-甲氧基-吡啶(350mg，1.86mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(709mg，2.79mmol)、Pd(dppf)Cl2 (136mg，0.19mmol)、乙酸鉀(548mg，5.58mmol)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物在微波反應器中在130℃下加熱2小時。將反應混合物直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =154.2。
步驟2：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、粗品4-甲氧基吡啶-3-基硼酸(35mg，0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)、Xphos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀(52mg，0.53mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)及水(0.20mL)。將混合物在95℃攪拌5小時。將反應混合物過濾且在真空中濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟 層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈灰白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-甲氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(4mg，6.4%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.790，[M+H]+ =354.1，方法=B；1 H NMR(CD3 OD,400MHz)δ 9.24(s,1H),8.78(s,1H),8.43(d,J =5.6Hz,1H),7.35(s,1H),7.19(d,J =4.2Hz,1H),4.97-4.77(m,1H),4.00(s,3H),2.17-2.15(m,1H),1.90-1.78(m,1H),1.28-1.18(m,1H)。
實例12： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2,2-二氟環丙烷羧醯胺(化合物11)
向密封管中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2,2-二氟-環丙烷羧醯胺(55mg，0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(52mg，0.24mmol)、XphosPdG2 (14mg，0.02mmol)、Xphos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀(54mg，0.55mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)及水(0.20mL)。將反應混合物在95℃攪拌4小時。將反應混合物過濾且在真空中濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2,2-二氟-環丙烷羧醯胺(23mg，34%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.074，[M+H]+ =356.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1 H),8.55(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.41(d,J = 5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.95-2.87(m,1H),2.47(s,3H),2.19-2.13(m,1H),1.93-1.86(m,1H)。
實例13： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物12)
步驟1：4-甲基嘧啶-5-基硼酸
向密封管中添加雙(頻哪醇合)二硼(220mg，0.87mmol)、5-溴-4-甲基-嘧啶(100mg，0.58mmol)、Pd(dppf)Cl2 (42mg，0.06mmol)、乙酸鉀(170mg，1.73mmol)及1,4-二噁烷(1.5mL)。將混合物在90℃攪拌2小時。LCMS顯示反應完成。將反應混合物直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =139.2。
步驟2：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，0.25mmol)、(4-甲基嘧啶-5-基)硼酸(45mg，0.32mmol)(將反應混合物)、Xphos Pd G2(20mg，0.02mmol)、Xphos(24mg，0.05mmol)、乙酸鉀 (73mg，0.75mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)及水(0.20mL)。將混合物在95℃攪拌2小時。將反應混合物過濾且在真空中濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體。將該固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，矽膠，uv 254nm)用甲醇/水溶離來純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(32mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.973，[M+H]+ =339.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),9.05(s,1H),8.80(s,1H),9.36(s,1H),7.09(s,1H),4.97-4.81(m,1H),2.63(s,3H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例14： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物13)
步驟1：4-乙基嘧啶-5-基硼酸
向密封管中添加雙(頻哪醇合)二硼(203mg，0.80mmol)、5-溴-4-乙基-嘧啶(100mg，0.53mmol)、Pd(dppf)Cl2 (39mg，0.05mmol)、乙酸鉀(157mg，1.6mmol)及1,4-二噁烷(1.5mL)。將混合物在100℃攪拌2小時。LCMS顯示反應完成。將反應混合物過濾，且直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =153.1。
步驟2：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(60mg，0.21mmol)、粗品(4-乙基嘧啶-5-基)硼酸(49mg，0.32mmol)、Xphos Pd G2(17mg，0.02mmol)、Xphos(20mg，0.04mmol)、乙酸鉀(63mg，0.64mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物過濾且在真空中濃縮，得到黃色殘餘物，隨後將其藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(22mg，27%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.065，[M+H]+ =353.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),9.09(s,1H),8.76(s,1H),8.35(s,1H),7.05(s,1H),4.98-4.81(m,1H),2.98(q,J =7.6Hz,2H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.29-1.21(m,4H)。
實例15： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物14)
步驟1：3-溴-4-(二氟甲基)吡啶。
在0℃下向3-溴異菸鹼甲醛(200mg，1.08mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中滴加DAST(693mg，4.3mmol)。將混合物在0℃攪拌2小時。將反應混合物用水性飽和NaHCO3 (5mL)淬滅，且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，濃縮且藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯=10：1至3：1)純化，得到呈無色油狀之3-溴-4-(二氟甲基)吡啶(150mg，67%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =208.2。
步驟2：4-(二氟甲基)吡啶-3-基硼酸。
向密封管中添加雙(頻哪醇合)二硼(183mg，0.72mmol)、3-溴-4-(二氟甲基)吡啶(100mg，0.48mmol)、乙酸鉀(141mg，1.44mmol)、Pd(dppf)Cl2 (35mg，0.05mmol)及1,4-二噁烷(1.5mL)。將混合物在100℃攪拌2小時。將反應混合物過濾，且將濾液直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =174.1。
步驟3：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺。
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、粗品[4-(二氟甲基)-3-吡啶基]硼酸(46mg，0.27mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)、Xphos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀 (52mg，0.53mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)及水(0.20mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物在真空中濃縮，且藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體。隨後將該黃色固體藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-[4-(二氟甲基)-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(18mg，26%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.142，[M+H]+ =374.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.89(s,1H),8.77(d,J =5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.79(d,J =5.2Hz,1H),7.54(t,J =14.8Hz,1H),7.15(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.19-2.14(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.28-1.21(m,1H)。
實例16： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-氰基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物15)
向密封管中添加(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-1,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(60mg，0.21mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-4-甲腈(59mg，0.26mmol)、Xphos Pd G2(17mg，0.02mmol)、乙酸鉀(63mg，0.64mmol)、Xphos(20mg，0.04mmol)、1,4-二噁烷(3.0mL)及水(0.50mL)。將混合物在100℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-氰基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(8mg，10.7%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.603，[M+H]+ =349.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),9.18 (s,1H),8.80(d,J =5.2Hz,1H),8.40(s,1H),7.87(d,J =4.8Hz,1H),7.40(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.21-2.15(m,1H),1.89-1.79(m,1H),1.30-1.19(m,1H)。
實例17： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物16)
步驟1：5-溴-4-甲基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁酯
向5-溴-4-甲基-2-吡啶胺(2.0g，10.69mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加Boc2 O(2.8g，12.83mmol)及DMAP(3.26g，26.73mmol)。將混合物在20℃攪拌16小時。將反應混合物在真空中濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯，20：1至5：1)純化，得到呈白色固體狀之N-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(1.6g，47%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =289.1。
步驟2：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-基胺基甲酸第三丁酯
向密封管中添加N-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(1.0g，3.48mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1.06g，4.18mmol)、Pd(dppf)Cl2 (254mg，0.35mmol)、乙酸鉀(682mg，6.97mmol)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物在100℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠急驟層析術(石油醚/乙酸乙酯，20：1 至5：1)純化，得到呈白色固體狀之N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(800mg，52%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =335.2。
步驟3：(±)-5-(1-胺基-6-(順式-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁酯
向密封管中添加N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(200mg，0.60mmol)、Pd(PPh3 )4 (69mg，0.06mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(184mg，0.66mmol)、K3 PO4 (117mg，1.2mmol)、水(0.2mL)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在100℃攪拌4小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，50：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(151mg，42%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =453.0。
步驟4：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(150mg，0.33mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中添加TFA(2.0mL，0.33mmol)。將混合物在20℃攪拌3小時。將反應混合 物在真空中濃縮，且藉由添加NH3 溶液(7M於甲醇中)將殘餘物調整至pH 8.0。將所得混合物在真空中濃縮，且將殘餘物藉由矽膠急驟層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到黃色固體，隨後將其藉由逆相急驟層析術(Biotage,40.0g管柱，ODS,uv 254nm)用甲醇/水(+0.5% NH4 HCO3 )溶離來純化，得到呈白色固體狀之順式-N-[8-胺基-6-(6-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(60mg，49%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.408，[M+H]+ =353.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.94(s,1H),9.31(s,1H),8.18(s,1H),8.02(s,1H),7.17(s,2H),6.84(s,1H),6.31(s,1H),5.96(s,2H),5.03-4.86(m,1H),2.30(s,3H),2.28-2.24(m,1H),1.70-1.63(m,1H),1.21-1.14(m,1H)。
實例18： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(5-氟-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物17)
將(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(184mg，0.66mmol)、3-氟-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(120mg，0.51mmol)、XPhos Pd G2(40mg，0.05mmol)、X-phos(48mg，0.1mmol)及乙醯氧基鉀(149mg，1.52mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及水(0.5mL)中之混合物在100℃在N2 下攪拌8小時。將混合物濃縮，且將殘餘物藉由逆相急驟層析術(C18膠，0至30%乙腈於含0.1%甲酸之水中)純化，得到呈黃色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(5-氟-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(42mg，23%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.099，[M+H]+ =356.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.05(s,1H),8.52(s,1H),8.48(s,1H),8.27(s,1H),8.15(s,1H),7.40(s,2H),7.03(s,1H),5.09-4.83(m,1H),4.35(d,J =2.0Hz,3H),2.32-2.21(m,1H),1.75-1.62(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
實例19： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物18)
將(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(150mg，0.53mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸頻哪醇酯(166mg，0.8mmol)、乙酸鉀(157mg，1.6mmol)、X-phos(51mg，0.11mmol)及XPhos Pd G2(42mg，0.05mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及水(0.5mL)中之混合物在100℃在N2 下攪拌4小時。將混合物濃縮，且將殘餘物藉由逆相製備型HPLC(C-18)用0至33%乙腈於水(含0.1%甲酸)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之所要產物(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(2-甲基吡唑-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(27mg，15%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.055，[M+H]+ =327.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.02(s,1H),8.24(s,1H),8.15(s,1H),7.45(d,J =2.0Hz,1H),7.40(s,2H),7.21(s,1H),6.73(d,J =2.0Hz,1H),5.07-4.84(m,1H),4.19(s,3H),2.32-2.21(m,1H),1.75-1.62(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
實例20： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物19)
將順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(50mg，0.18mmol)、6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯并咪唑-1-羧酸第三丁酯(70mg，0.20mmol)、Pd(dppf)Cl2 (13mg，0.02mmol)及K2 CO3 (73mg，0.53mmol)於1,4-二噁烷(6mL)及水(1mL)中之混合物加熱至110℃達16小時。將反應混合物濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(正相矽膠，二氯甲烷/甲醇，10/1)純化，得到黃色油，將其藉由製備型HPLC(管柱Xbridge 21.2*250mm c18,10um流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )B：乙腈)進一步純化，得到呈白色固體狀之(±)--N-[8-胺基-6-(6-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(17mg，25%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.269，[M+H]+ =377.1，方法=A；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.66(s,1H),7.53(s,1H),6.95(s,1H),4.95-4.84(m,1H),2.45(s,3H),2.22-2.14(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.26-1.18(m,1H)。
實例21： N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]環丁烷羧醯胺(化合物20)
步驟1：N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丁烷羧醯胺
在0℃下將環丁烷羰基氯(60mg，0.51mmol)於二氯甲烷(0.3mL)中之溶液滴加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(300mg，0.59mmol)、三乙胺(200.0mg，1.98mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中，且在0℃攪拌1小時。將反應混合物蒸發，得到殘餘物，將其用矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯=1：1至1：2)純化，得到呈褐色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丁烷羧醯胺(90mg，25%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =588.3。
步驟2：N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丁烷羧醯胺
將N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丁烷羧醯胺(90mg，0.15mmol)於TFA(3mL)中之混合物在25℃攪拌1小時，且在80℃下再攪拌2小時。將反應混合物蒸發。將殘餘物懸浮於甲醇(1mL)中，且添加7N NH3 -甲醇直至pH=10至11(褐色懸浮液)。將該固體藉由過濾收集，且將粗產物藉由逆相急驟層析術(C18，甲醇/水至甲酸/甲醇/水)純化，得到呈褐色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丁烷羧醯胺之甲酸鹽(21mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.752，[M+H]+ =348.2，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.51-8.49(m,2H),8.37(s,1H), 8.30(brs,1H),7.46(d,J =5.2Hz,1H),7.00(s,1H),3.45-3.41(m,1H),2.85(q,J =7.6Hz,2H),2.43-2.36(m,2H),2.31-2.23(m,2H),2.12-2.05(m,1H),1.98-1.93(m,1H),1.20(t,J =7.6Hz,3H)。
實例22： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物21)
步驟1：1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸
將4-溴-1h-吡咯并[2,3-c]吡啶(500mg，2.54mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(6.4g，25.2mmol)、PdCl2 dppf(371mg，0.51mmol)及乙酸鉀(746mg，7.61mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物在Ar下在120℃下加熱16小時。將反應物過濾且濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於乙酸乙酯(10mL)中，且用NaOH調整至pH 7至8。用濃HCl將水層之pH調整至3至4，且添加乙酸乙酯(20mL)。隨後將水層分離，且濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於乙酸乙酯：乙醇(1：1)中且過濾。將所得液體濃縮至乾燥。此得到呈褐色固體狀之標題化合物(350mg，85%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =163.1。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸(200mg，1.23mmol)、順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.35mmol)、Pd(PPh3 )4 (40mg，0.03mmol)、K2 CO3 (144mg，1.04mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3小時。將反應物濃縮至乾燥。將殘餘物用矽石層析術(乙酸乙酯至乙酸乙酯/甲醇=10：1)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(14.7mg，11.4%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.035，[M+H]+ =370.1，方法=B。1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.91(s,1H),8.67(s,1H),8.03(s,1H),7.47(s,1H),7.32(s,1H),7.31(s,1H),2.56-2.54(m,1H),2.19-2.17(m,1H),1.72-1.70(m,1H),1.55-1.53(m,1H)。
實例23： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(3-甲基吡啶-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物22)
步驟1：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
將4-溴-3-甲基-吡啶(5.0g，29.07mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(7.38g，29.06mmol)、PdCl2 dppf(2.12g，2.9mmol)及乙酸鉀(8.54g，87.14mmol)於1,4- 二噁烷(100mL)中之混合物在Ar下在110℃下加熱3小時。將反應混合物過濾且濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於水(40mL)中，且用NaOH水溶液將pH調整至11至12。將液體用乙酸乙酯(100ml)洗滌。用HCl將水層之pH調整至5至6。隨後將有機物分離且乾燥(NaSO4 )，之後濃縮至乾燥。最終產物為褐色固體(4g，60%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =220.2。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(3-甲基吡啶-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(100mg，0.46mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(128mg，0.46mmol)、XPhos Pd G2(36mg，0.05mmol)、XPhos(22mg，0.05mmol)及乙酸鉀(134mg，1.37mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在110℃下加熱3小時。將反應物濃縮至乾燥，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化。此得到呈白色固體狀之標題化合物(25.1mg，16%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.059，[M+H]+ =338.1，方法=B。1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 8.51(s,1H),8.47(s,1H),8.35(s,1H),8.21(s,1H),7.51(d,J =4.8Hz,1H),7.03(s,1H),2.43(s,3H),4.99-4.97(m,0.5 H),4.83-4.80(m,0.5H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.28-1.21(m,1H)。
實例24： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物24)
將N-(6-氯-8-(二苯基亞甲基胺基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(45mg，0.11mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(34mg，0.16mmol)、Pd(PPh3 )4 (12mg，0.01mmol)及Cs2 CO3 (68mg，0.21mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在手套箱中加熱至100℃達18小時。將反應混合物冷卻至室溫，且透過矽藻土過濾。隨後將濾液濃縮，且將所得殘餘物溶於THF(5mL)中。添加二噁烷中之HCl溶液(4mL，4M，16mmol)，且將反應混合物在25℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮。將殘餘物用乙酸乙酯稀釋，用甲醇中之7N NH3 溶液將pH調整至>7且濃縮。將殘餘物用二氯甲烷萃取/甲醇(25/1)純化，得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之產物N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(12mg，30%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.580，[M+H]+ =320.1，方法=F；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,1H,J =5.2Hz),8.31(s,1H),7.39(d,1H,J =5.2Hz),6.98(s,1H),2.46(s,3H),1.92-2.00(m,1H),1.01-1.06(m,2H),0.92-0.97(m,2H)。
實例25： N-(8-胺基-6-(6-(羥基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物25)
步驟1：N-(8-(二苯基亞甲基胺基)-6-(6-(羥基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(78mg，0.18mmol)、[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]甲醇(200mg，0.80mmol)、X-phos(8.7mg，0.02mmol)、Xphos Pd G2(14mg，0.02mmol)及乙酸鉀(53mg，0.55mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(1mL)中之混合物在N2 下加熱至100℃達16小時。隨後將反應混合物濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(正相矽膠，二氯甲烷/甲醇=25/1)純化，得到呈黃色固體狀之產物N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-[6-(羥基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3基]環丙烷羧醯胺(30mg，23.3%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =514.2。
步驟2：N-(8-胺基-6-(6-(羥基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-[6-(羥基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(30mg，0.06mmol)於HCl/二噁烷(4mL，4M，16mmol)中之溶液在室溫下攪拌2h。將反應混合物濃縮。藉由添加甲醇中之7N NH3 將殘餘物之pH調整至>7，隨後濃縮。將殘餘物藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之產物N-[8-胺基-6-[6-(羥基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3- 基]環丙烷羧醯胺(6mg，27.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.627，[M+H]+ =350.1，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.49(s,1H),8.30(s,1H),7.52(s,1H),6.99(s,1H),4.74(s,2H),2.48(s,3H),1.92-2.03(m,1H),1.01-1.04(m,2H),0.88-0.90(m,2H)。
實例26： N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物26)
步驟1：N-(8-(二苯基亞甲基胺基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(200mg，0.47mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(655mg，2.81mmol)、Pd(PPh3 )4 (54mg，0.05mmol)及Cs2 CO3 (305mg，0.94mmol)於1,4-二噁烷(1mL)中之混合物在100℃下在手套箱中加熱18小時。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到粗產物，其不經純化即用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =498.3。
步驟2：N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(150mg，0.17mmol)於HCl/二噁烷(3.3mL，4M，13.2mmol)中之溶液在25℃攪拌2小時，隨後濃縮。用甲醇中之7N NH3 將殘餘物之pH調整至>7，隨後濃縮。將殘餘物藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(10mg，18.1%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.623，[M+H]+ =334.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.18(s,1H),8.39(s,1H),8.37(d,1H,J =5.6Hz),8.17(s,1H),7.33(d,1H,J =5.6Hz),6.81(s,1H),2.72(q,2 H,J =7.6Hz),1.78-1.88(m,1H),1.07(t,3H,J =7.6Hz),0.87-0.95(m,2H),0.74-0.82(m,2H)。
實例27： N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基]環丙烷羧醯胺(化合物27)
步驟1：N-(8-(二苯基亞甲基胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(50mg，0.12mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(36mg，0.18mmol)、Pd(PPh3 )4 (14mg，0.01mmol)及Cs2 CO3 (76mg，0.23mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在手套箱中加熱至100℃達4小時。添加乙酸乙酯(50mL)，將混合物過濾且濃縮，得到呈黃色油狀之N-(8-(二苯基亞甲基胺基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(68mg，59%收率)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =473.2。
步驟2：N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺
向N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(68mg，0.10mmol)於THF(5mL)中之溶液中添加1,4-二噁烷中之HCl(1mL，4M，4mmol)。將混合物攪拌1小時。將反應混合物濃縮，且藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(18mg，59%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.646，[M+H]+ =309.1，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD-d4 )δ 9.15(s,1H),8.19(s,1H),8.14(s,1H),8.02(s,1H),7.11(s,1H),3.96(s,3H),1.98-1.92(m,1H),1.05-1.02(m,2H),0.96-0.91(m,2H)。
實例28： N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺(化合物28)
步驟1：N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺
在0℃下向3-氰基丙酸(64mg，0.64mmol)及DMF(1滴)於二氯甲烷(6mL)中之溶液中添加草醯氯(125mg，0.98mmol)，且隨後在室溫下攪拌1小時。將混合物濃縮且溶於二氯甲烷(3mL)中。隨後將混合物在0℃下添加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(216mg，0.43mmol)及Et3 N(216mg，2.14mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中，且在室溫下攪拌1小時。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用乙酸乙酯/己烷(1：1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺(160mg，29%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =587.3。
步驟2：N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺及N'-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]丁二醯胺
將N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺(160mg，0.13mmol)於TFA(10mL)中之混合物在80℃攪拌1小時。將反應混合物濃縮，且用NH4 OH(37%收率)中和至pH=7至8。將 混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺(24mg，55%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.57，[M+H]+ =347.2，方法=F。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.85(s,1H),9.39(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.36(s,1H),7.34(s,2H),6.98(s,1H),2.86-2.74(m,6H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例29： N'-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]丁二醯胺(化合物29)
將N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氰基-丙醯胺(160mg，0.13mmol)於TFA(10mL)中之混合物在80℃攪拌1小時。將反應混合物濃縮，且用NH4 OH(37%收率)中和至pH 7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈白色固體狀之N'-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]丁二醯胺(11mg，22%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.372，[M+H]+ =365.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.65(s,1H),9.36(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J =4.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.35(s,1H),7.34(d,J =5.2Hz,1H),7.31(s,2H),6.93(s,1H),6.79(s,1H),2.78(q,J =7.6Hz,2H),2.65(t,J =7.0Hz,2H),2.41(t,J =7.0Hz,2H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例30： 1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(化合物30)
步驟1：1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲
向三光氣(183mg，0.62mmol)於THF(8mL)中之溶液中添加THF(3ml)中之3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(260mg，0.31mmol)及Et3 N(1.24g，12.34mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時。添加噻唑-5-基甲胺鹽酸鹽(930mg，6.17mmol)，且溫熱至室溫隔夜。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術用二氯甲烷/甲醇(20：1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(35mg，15%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =646.3。
步驟2：1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲
將1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(35mg，0.05mmol)於TFA(5mL)中之混合物在80℃攪拌3小時。將混合物濃縮，且用NH4 OH(純度：37%收率)中和至pH 7至8。將混合物藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(13mg，59%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.56，[M+H]+ =406.1，方法=C。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.41(s,1H),9.28(s,1H),8.99(d,J =0.8Hz,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),7.83(s,1H),7.82(s,1H),7.80(s,1H),7.34(d,J =5.2Hz,1H),7.27(s,2H),6.87(s,1H),4.61(d,J =6.0Hz,2H),2.79(q,J =7.6Hz,2H),2.65(t,J =7.6Hz,3H)。
實例31： 1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-異丙基-脲(化合物31)
步驟1：1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-異丙基-脲
將3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(150mg，0.15mmol)、異氰酸異丙酯(114mg，1.34mmol)及DBU(113mg，0.74mmol)於1,4-二噁烷(8mL)中之混合物在110℃攪拌16小時。將混合物濃縮且藉由逆相製備型HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-異丙基-脲(50mg，43%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =591.3。
步驟2：1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-異丙基-脲
將1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-異丙基-脲(50mg，0.08mmol)於TFA(8mL)中之混合物在80℃攪拌3小時。將反應混合物濃縮，且用NH4 OH(37%收率)中和至pH 7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-異丙基-脲(17mg，57%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.581，[M+H]+ =351.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.33(s,1H),9.11(s,1H),8.55(s,1H),8.54(d,J =5.2Hz,1H),7.86(s,1H),8.39(d,J =5.2Hz,1H),7.30(s,2H),7.16(d,J =6.8Hz,1H),6.89(s,1H),3.91-3.83(m,1H),2.84(q,J =7.6Hz,2H),1.20(d,J =6.4Hz,6H),1.15(t,J =7.6Hz,3H)。
實例32： N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-氰基-乙醯胺(化合物32)
步驟1：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺
在0℃下向氰基乙酸(340mg，3.99mmol)及DMF(1滴)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加草醯氯(0.34mL，3.99mmol)且在室溫下攪拌2h。在0℃下將混合物添加至6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(500mg，2mmol)於吡啶(10mL)及二氯甲烷(20mL)中之溶液中。將反應混合物在0℃攪拌1小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術用THF溶離來純化，得到呈黃色固體狀之2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(600mg，60%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =281.0。
步驟2：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-乙醯胺
將2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(600mg，1.19mmol)於0.5M NH3 於二噁烷(40mL，20mmol)中之混合物在110℃攪拌24小時。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-乙醯胺(130mg，32%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =262.3。
步驟3：N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-乙醯胺
將N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-乙醯胺(100mg，0.38mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(216mg，0.76mmol)、XPhos Pd G2(45mg，0.06mmol)、乙酸鉀(75mg，0.76mmol)及XPhos(55mg，0.11mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(0.4mL)中之混合物在100℃在Ar下攪拌8小時。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-乙醯胺(5mg，4%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.568，[M+H]+ =333.1，方法=C。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.02(s,1H),9.39(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.19(s,1H),7.36(s,2H),7.35(s,1H),7.01(s,1H),4.04(s,2H),2.79(q,J =7.6Hz,2H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例33： 3-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-1,1-二甲基-脲(化合物33)
步驟1：3-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-1,1-二甲基-脲
向三光氣(293mg，0.99mmol)於THF(6mL)中之溶液中添加THF(10ml)中之3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(500mg，0.49mmol)及Et3 N(10.0g，9.89mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時。添加N,N-二甲胺(446mg，9.89mmol)。隨後將反應物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(乙酸乙酯/己烷，9：1)純化，得到呈黃色固體狀之3-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-1,1-二甲基-脲(42mg，13%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =577.3。
步驟2：3-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-1,1-二甲基-脲
將3-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-1,1-二甲基-脲(42mg，0.07mmol)於TFA(8mL)中之混合物在80℃攪拌3小時。將混合物濃縮，且用NH4 OH(37%收率)中和至pH 7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之3-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-1,1-二甲基-脲(15mg，57%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.567，[M+H]+ =337.1，方法=C。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.33(s,1H),8.98(s,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J =4.8Hz, 1H),7.96(s,1H),7.34(d,J =4.8Hz,1H),7.25(s,2H),6.87(s,1H),2.98(s,6H),2.78(q,J =7.6Hz,2H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例34： 2-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺(化合物34)
步驟1：2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺
向三光氣(210mg，0.71mmol)於THF(6mL)中之溶液中添加THF(10ml)中之N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.35mmol)及Et3 N(714mg，7.07mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時。添加2-胺基丙醯胺鹽酸鹽(881mg，7.07mmol)，且在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術用乙酸乙酯溶離來純化，得到呈黃色固體狀之2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺(57mg，18%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =680.3。
步驟2：2-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺
將2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺(57mg，0.06mmol)於TFA(5mL)中之混合物在26℃攪拌6小時。將反應混合物濃縮，且用NH4 OH(37%收率)中和至pH 7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型逆相HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之2-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]丙醯胺(10mg，46%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.378，[M+H]+ =380.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.33(s,1H),9.28(s,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),7.78(s,1H),7.58(s,1H),7.53(s,1H),7.30(d,J =1.2Hz,1H),7.25(s,2H),7.06(s,1H),6.84(s,1H),4.29-4.22(m,1H),2.78(q,J =7.6Hz,2H),1.28(d,J =6.8Hz,3H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例35： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基-2-甲基丙醯胺(化合物35)
步驟1：2-氰基-2-甲基丙酸
向小瓶中添加2-氰基-2-甲基丙酸乙酯(1.0g，7.08mmol)、水(5mL)及KOH(795mg，14.1mmol)。將混合物在40℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮以除去甲醇，用1N HCl酸化至pH 5，且用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。將合併之有機層用鹽水(10mL)，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈淺黃色固體狀之2-氰基-2-甲基-丙酸(600mg，73%收率)。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 13.59(br,1H),1.52(s,6H)。
步驟2：2-氰基-2-甲基丙醯氯
向小瓶中添加2-氰基-2-甲基-丙酸(600mg，5.3mmol)及二氯甲烷(20mL)。在0℃下滴加草醯氯(1mL，11.72mmol)。隨後添加DMF(0.01mL)。將混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物在真空中濃縮，得到粗產物，且直接用於下一步驟。
步驟3：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基丙醯胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(200mg，0.80mmol)、2-氰基-2-甲基-丙醯氯(720mg，4.38mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將混合物傾入水(10mL)中，且用1N HCl調整至pH=6，用乙酸乙酯(80mL x 2)萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(230mg，93%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =309.1。
步驟4：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-2-甲基丙醯胺
向微波管中添加2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(130mg，0.42mmol)及NH3 (0.5N於二噁烷中，15mL，7.5mmol)。將混合物在80℃攪拌40小時。隨後將混合物在真空中濃縮，且藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，1：1至0：100)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-2-甲基-丙醯胺(86mg，70%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =290.1。
步驟5：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基-2-甲基丙醯胺
向小瓶中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-2-甲基-丙醯胺(86mg，0.3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(84mg，0.39mmol)、XPhos Pd G2(35mg，0.04mmol)、X-phos(28mg，0.06mmol)、乙酸鉀(87mg，0.89mmol)、水(0.5mL)及1,4-二噁烷(20mL)。將反應混合物藉由用氮鼓泡脫氣，且隨後在100℃攪拌6小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-2-甲基-丙醯胺(73mg，71%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.041，[M+H]+ =347.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.53,(s,1H),8.41(d,J =5.2Hz,1H),8.09(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.44(s,3H),1.74(s,6H)。
實例36： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲氧基-2-甲基丙醯胺(化合物36)
步驟1：2-甲氧基-2-甲基丙酸
向小瓶中添加2-甲氧基-2-甲基-丙酸甲酯(3.6g，27.24mmol)、甲醇(5mL)、水(3mL)及NaOH(1.28g，31.97mmol)。將混合物在40℃攪拌2小時，且在真空中濃縮以除去甲醇。隨後用2N HCl將混合物酸化至pH 4至5，用乙酸乙酯(100ml x 2)萃取、用鹽水(30ml)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈淺黃色油狀之2-甲氧基-2-甲基-丙酸(2.5g，77%收率)。1 H NMR(400MHz,CDCl3 )δ 3.35(s,3H),1.47(s,6H)。
步驟2：2-甲氧基-2-甲基丙醯氯
向小瓶中添加2-甲氧基-2-甲基-丙酸(300mg，2.54mmol)及二氯甲烷(10mL)。隨後將混合物冷卻至0℃，且滴加草醯氯(0.5mL，5.61mmol)。隨後添加DMF(0.01mL，0.07mmol)。將混合物在40℃攪拌1小時。將反應混合物在真空中濃縮，得到粗產物，將其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲氧基-2-甲基丙醯胺
向小瓶中添加N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(70mg，0.14mmol)、2-甲氧基-2-甲基-丙醯氯(300mg，2.2mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時，且隨後濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙醯胺(300mg，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =592.1。
步驟4：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲氧基-2-甲基丙醯胺
向小瓶中添加N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙醯胺(300mg，0.10mmol)及TFA(5mL)。將混合物在80℃攪拌2小時。隨後將混合物濃縮，且添加NH3 (7N於甲醇中，5mL)。隨後將混合物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙醯胺(26mg，73%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.071，[M+H]+ =352.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.6Hz,1H),8.37(s,1H),7.28(d,J =5.6Hz,1H),6.99(s,1H),3.41(s,3H),2.45(s,3H),1.49(s,6H)。
實例37： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)異丁醯胺(化合物37)
步驟1：N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)異丁醯胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(310.0mg，1.24mmol)、異丁醯氯(0.2mL，1.9mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。隨後將混合物傾入水(10mL)中，且用1N HCl將pH調整至6。將混合物用二氯甲烷(50ml x 2)萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(345mg，98%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =284.1。
步驟2：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)異丁醯胺
向微波管中添加N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(150mg，0.53mmol)及氫氧化銨(5mL，130mmol)。將混合物在100℃攪拌6小時。 將混合物在真空中濃縮，得到呈淺黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(180mg，96%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =265.1。
步驟3：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)異丁醯胺
向小瓶中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-丙醯胺(139mg，0.53mmol)、XPhos Pd G2 (50mg，0.06mmol)、X-phos(45mg，0.1mmol)、乙酸鉀(124mg，1.27mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(172mg，0.79mmol)、1,4-二噁烷(5mL)及水(0.3mL)。將反應物在N2 下在110℃攪拌16小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至100：7)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-丙醯胺(82mg，49%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.221，[M+H]+ =322.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CDCl3 )δ 9.00(s,1H),8.65(s,1H),8.50(d,J =5.2Hz,1H),8.47(s,1H),8.05(br,1H),7.21(d,J =5.2Hz,1H),7.06(s,1H),5.42(br,2H),2.62(heptet,J =6.8Hz,1H),2.43(s,3H),1.31(d,J =6.8Hz,6H)。
實例38： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基丙醯胺(化合物38)
步驟1：2-氰基丙酸
向小瓶中添加2-氰基丙酸乙酯(1.0g，7.87mmol)、甲醇(4mL)及水(4mL)。隨後將混合物冷卻至0℃，且添加KOH(882mg，16mmol)。將混合物在40℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮以除去甲醇，用1N HCl酸化至pH 5，且用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈紫羅蘭色油狀之2-氰基丙酸(660mg，85%收率)。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 13.59(br,1H),4.03(q,J =7.2Hz,1H),1.41(d,J =7.2Hz,3H)。
步驟2：2-氰基丙醯氯
向小瓶中添加2-氰基丙酸(660mg，6.66mmol)及二氯甲烷(20mL)。將溶液冷卻至0℃。滴加草醯氯(1.3mL，14.72mmol)，且隨後添加DMF(0.01mL)。將混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物在真空中濃縮，得到粗產物，且直接由於下一步驟。
步驟3：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)丙醯胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(400mg，1.6mmol)、2-氰基丙醯氯(1.6g，10.89mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將混合物傾入水(10mL)中，且用1N HCl將pH調整至6，用乙酸乙酯(50ml x 2) 萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)丙醯胺(450mg，96%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =295.1。
步驟4：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基丙醯胺
向微波管中添加2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)丙醯胺(150mg，0.51mmol)及二噁烷(12.5mL，6.25mmol)中之0.5N NH3 。將混合物在80℃攪拌40小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，1：1至0：100)純化，得到呈黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-丙醯胺(50mg，36%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =276.1。
步驟5：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基丙醯胺
向小瓶中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-丙醯胺(50mg，0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(52mg，0.24mmol)、XPhos Pd G2(21mg，0.03mmol)、X-phos(17mg，0.04mmol)、乙酸鉀(53mg，0.54mmol)、水(2mL)及1,4-二噁烷(20mL)。將反應混合物用氮鼓泡透過，且隨後在100℃攪拌6小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-丙醯胺(15mg，25%收率)。LCMS(ESI)：RT (min) =1.541，[M+H]+ =333.2，方法=F；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.45(s,3H),1.64(s,3H)。
實例39： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-羥基-2-甲基丙醯胺(化合物39)
步驟1：1-氯-2-甲基-1-側氧基丙-2-基甲酸酯
向小瓶中添加2-羥基-2-甲基-丙酸(0.5g，4.8mmol)及二氯甲烷(20mL)，且將溶液冷卻至0℃。滴加草醯氯(0.61mL，7.2mmol)及DMF(0.1mL，1.30mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物在高真空中濃縮，得到粗產物，且直接由於下一步驟。
步驟2：1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺基)-2-甲基-1-側氧基丙-2-基甲酸酯
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(200mg，0.80mmol)、(2-氯-1,1-二甲基-2-側氧基-乙基)甲酸酯(1.3mL，2.16mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將混合物傾入水(10mL)中，用1N HCl將pH調整至6，用二氯甲烷(50ml x 2)萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠 層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基]-1,1-二甲基-2-側氧基-乙基]甲酸酯(160mg，61%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =328.0。
步驟3：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基-2-甲基丙醯胺
向微波管中添加[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基]-1,1-二甲基-2-側氧基-乙基]甲酸酯(150mg，0.46mmol)及氫氧化銨(17mL，112mmol)。將混合物在80℃攪拌6小時。隨後將混合物在真空中濃縮，得到呈淺黃色固體狀之粗產物N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基-2-甲基-丙醯胺(100mg，57%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =281.1。
步驟4：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-羥基-2-甲基丙醯胺
向小瓶中添加N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基-2-甲基-丙醯胺(150mg，0.53mmol)、XPhos Pd G2(54mg，0.07mmol)、X-phos(49mg，0.1mmol)、乙酸鉀(134mg，1.37mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(175mg，0.80mmol)、1,4-二噁烷(5mL)及水(0.3mL)。隨後將反應物在氮下在110℃攪拌16小時。隨後將反應物冷卻至0℃，且添加二噁烷中之HCl(10mL，4M，40mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物濃縮，且添加NH3 (7N於甲醇中，30mL)。隨後將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4- 甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-羥基-2-甲基-丙醯胺(7mg，4%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.9660，[M+H]+ =338.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz 1H),8.38(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),6.99(s,1H),2.45(s,3H),1.50(s,6H)。
實例40： N-(8-胺基-6-(2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物40)
向小瓶中添加N-[8-(二苯亞甲基胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(100mg，0.23mmol)、Pd2 (dba)3 (21.45mg，0.0200mmol)、Xantphos(20mg，0.04mmol)、Cs2 CO3 (152mg，0.47mmol)、1,3-噁唑啶-2-酮(30mg，0.35mmol)及1,4-二噁烷(5mL)。將反應物在氮下在110℃攪拌8小時。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(45mg，60%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.092，[M+H]+ =314.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：10.86(s,1H),9.24(s,1H),8.05(s,1H),7.36-7.33(m,3H),4.42(t,J =8.0Hz,2H),4.17(t,J =8.0Hz,2H),2.08-2.01(m,1H),0.85-0.80(m,4H)。
實例41： N-(8-胺基-6-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物42)
步驟1：2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基硼酸
將3-溴-1H-吡啶-2-酮(0.5g，2.87mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(0.77g，3.02mmol)、乙酸鉀(0.83g，8.49mmol)及Pd(dppf)2 Cl2 (0.23g，0.29mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在微波反應器中在130℃攪拌2小時。將混合物直接用於下一步驟。LCMS(ESI)[M+H]+ =140.1。
步驟2：N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(165mg，0.38mmol)、環丙烷羰基氯(0.1mL，1.13mmol)及吡啶(5mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將混合物濃縮。將殘餘物藉由矽石層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(188mg，97%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =503.1。
步驟3：N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加XPhos Pd G2(24mg，0.03mmol)、X-phos(21mg，0.04mmol)、N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺 (150mg，0.3mmol)、乙酸鉀(150mg，1.53mmol)、(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)硼酸(300mg，1.08mmol)、水(2mL)及1,4-二噁烷(20mL)。將反應混合物藉由用氮鼓泡脫氣，且隨後在100℃攪拌16小時。隨後將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(乙酸乙酯)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(180mg，43%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =562.2。
步驟4：N-(8-胺基-6-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(180mg，0.1300mmol)及TFA(5mL)。將混合物在80℃攪拌48小時，且隨後在真空中濃縮。向此中添加NH3 (7N於甲醇中，3mL)，且將反應混合物在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇/NH3 -水，100：5：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(24mg，58%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.034，[M+H]+ =322.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.01(br,1H),10.95(s,1H),9.31(s,1H),8.60(d,J =6.4Hz,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),7.52(br,1H),7.15(br,2H),6.47-6.35(m,1H),2.12-2.02(m 1H),0.91-076(m,4H)。
實例42： 反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物43)
向小瓶中添加(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(78mg，0.27mmol)、K2 CO3 (60mg，0.61mmol)、Pd(dppf)Cl2 (30mg，0.04mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(89mg，0.41mmol)、水(1mL)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物用氮鼓泡透過20min，且隨後在100℃攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，接著藉由逆向層析術(Boston 40g ODS管柱，用NaHCO3 10mmol/L：乙腈溶離，100：0至1：4,uv 254nm,214nm)純化，得到呈淺黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(25mg，29%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.094，[M+H]+ =345.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J =5.2Hz,1H),8.28(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.68-2.59(m,1H),2.44(s,3H),2.14-2.07(m,1H),1.63-1.51(m,2H)。
實例43： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-(羥基甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物44)
步驟1：(3-(6-胺基-1-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-2,7-啶-3-基)吡啶-4-基)甲醇
向小瓶中添加Pd(Ph3 P)4 (80mg，0.07mmol)、Cs2 CO3 (300mg，0.92mmol)、3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.46mmol)、1-羥基-3H-氧雜硼雜戊環并[3,4-c]吡啶(1.0g，2.22mmol)、水(1mL)及1,4-二噁烷(10mL)。將反應混合物藉由用氮鼓泡透過來脫氣20min，且隨後在100℃攪拌16小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之[3-[6-胺基-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-吡啶基]甲醇(205mg，88%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =508.2。
步驟2：(1S,2S)-N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-(羥基甲基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加[3-[6-胺基-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-吡啶基]甲醇(150mg，0.3mmol)、二氯甲烷(3mL)及吡啶(2mL)。滴加(1S,2S)-2-氟環丙烷羰基氯(181mg，1.48mmol)之溶液。將混合物在室溫下攪拌2h。將混合物濃縮，溶於甲醇(10mL)中，且添加K2 CO3 (300mg，2.17mmol)。將混合物在80℃攪拌30分鐘。隨後將混合物在真空中濃縮，得到粗產物(1S,2S)-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[4-(羥基甲基)-3-吡啶基]-2,7-啶 -3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(560mg，96%收率)，其直接用於下一步驟。LCMS(ESI)[M+H]+ =594.2。
步驟3：(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-(羥基甲基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(1S,2S)-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[4-(羥基甲基)-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(560mg，0.28mmol)及TFA(5mL)。將混合物在80℃攪拌16小時，且隨後在真空中濃縮。將殘餘物溶於NH3 (7N於甲醇中，10mL)中，濃縮，且藉由製備型TLC(矽膠，二氯甲烷/甲醇/NH3 -水，100：10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-[4-(羥基甲基)-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(95mg，90%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.414，[M+H]+ =354.2，方法=F；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：11.08(s,1H),9.45(s,1H),8.70(s,1H),8.64(d,J =5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.67(d,J =5.2Hz,1H),7.44(br,2H),7.11(s,1H),5.52(t,J =5.6Hz,1H),5.13-4.90(m,1H),4.74(d,J =5.6Hz,2H),2.40-2.29(m,1H),1.80-1.68(m,1H),1.32-1.20(m,1H)。
實例44： (±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物45)
步驟1：3-(2-乙基吡咯啶-1-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-2,7-啶-1,6-二胺
向密封管中添加3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.46mmol)、1-甲基-2-吡咯啶酮(3mL)及(±)-2-乙基吡咯啶(400mg，4mmol)。將反應物在微波反應器中加熱至200℃達8小時。將反應混合物傾入水(30mL)中，且用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。將合併之有機萃取物用鹽水(30ml)、1N HCl(5mL)、鹽水(20mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至20：1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-3-(2-乙基吡咯啶-1-基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(130mg，57%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =498.2。
步驟2：(1S,2S)-N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-3-(2-乙基吡咯啶-1-基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(130mg，0.24mmol)、吡啶(96mg，1.22mmol)及二氯甲烷(5mL)。滴加(1S,2S)-2-氟環丙烷羰基氯(89mg，0.7300mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇/NH3 -水，100：5：1)純化，得到呈黃色油狀之(1S,2S)-N-[8-[雙[(4-甲氧 基苯基)甲基]胺基]-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(60mg，40%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =584.3。
步驟3：(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(1S,2S)-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(60mg，0.1mmol)及TFA(5mL)。將混合物在80℃攪拌16小時。將混合物濃縮，且添加NH3 (7N於甲醇中，10mL)。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(矽石，二氯甲烷/甲醇/NH3 水=100：10：1,uv 254nm)純化，得到呈淺黃色固體狀之(±)-(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(2-乙基吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(20mg，60%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.223，[M+H]+ =344.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3OD)δ：8.68(s,1H),7.69(s,1H),5.57(s,1H),4.87-4.63(m,1H),3.93-3.84(m,1H),3.45-3.37(m,1H),3.35-3.27(m,1H),2.03-1.81(m,4H),1.80-1.60(m,3H),1.36-1.23(m,1H),1.14-1.03(m,1H),0.84(t,J =7.6Hz,3H)。
實例45： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-環丙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物46)
步驟1：3-溴-4-環丙基吡啶
向圓底燒瓶中添加LiCl(644mg，15mmol)及溴化環丙基鎂(30mL，15mmol)。將混合物在氮下在室溫下攪拌30min。在另一燒瓶中，將3-溴吡啶(2.0g，12.66mmol)、THF(50mL)及乙醚合三氟化硼(1.8mL，14mmol)在0℃混合。將混合物在室溫下攪拌30min。隨後將溶液再冷卻至-55℃，之後滴加溴化環丙基鎂及LiCl錯合物之溶液。將混合物在-55℃攪拌30分鐘，且隨後使其緩慢溫熱至室溫。在室溫下攪拌隔夜後，將反應物用水性NaHCO3 (10mL)及水(20mL)淬滅。將混合物用乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈無色油狀之3-溴-4-環丙基-吡啶(220mg，9%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =198.0。
步驟2：4-環丙基吡啶-3-基硼酸
向小瓶中添加3-溴-4-環丙基-吡啶(120mg，0.61mmol)、硼酸三異丙酯(230mg，1.22mmol)及THF(5mL)。隨後將混合物冷卻至-78℃，之後滴加n-BuLi(2.5M於己烷中，0.5mL，1.25mmol)。使混合物緩慢溫熱至室溫。在室溫下攪拌2h後，將混合物藉由水(10mL)淬滅，用乙酸乙酯(20mL x 2)洗滌，用2N HCl酸化至pH 5且在真空中濃縮。將殘餘物再懸浮於乙醇(30mL)中，過濾且在真空中濃縮，得到呈淺黃色油狀之(4-環丙基-3-吡啶基)硼酸(120mg，97%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =164.2
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-環丙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(120mg，0.43mmol)、X-phos(40mg，0.09mmol)、XPhos Pd G2(50mg，0.06mmol)、乙酸鉀(126mg，1.28mmol)、(4-環丙基-3-吡啶基)硼酸(80mg，0.39mmol)、水(1mL)及1,4-二噁烷(10mL)。將反應混合物藉由用氮鼓泡脫氣20min，且隨後在100℃攪拌6小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(4-環丙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(39mg，24%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.104，[M+H]+ =364.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ：9.38(s,1H),8.47(s,1H),8.39(d,J =5.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.04(s,1H),6.97(d,J =5.6Hz,1H),4.98--4.76(m,1H),2.22-2.11(m,2H),1.89-1.77(m,1H),1.24-1.18(m,1H),1.11-1.04(m,2H),0.92-0.85(m,2H)。
實例46： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺(化合物47)
步驟1：(±)-反式-2-甲基環丙烷羰基氯
向小瓶中添加(±)-反式-2-甲基環丙烷羧酸(200mg，2.0mmol)及二氯甲烷(10mL)。將混合物冷卻至0℃，之後滴加草醯氯(0.3mL，4mmol)及DMF(0.01mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應混合物在真空中濃縮，得到粗產物，且直接由於下一步驟。
步驟2：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(60mg，0.28mmol)、吡啶(2mL)及(±)-反式-2-甲基環丙烷羰基氯(166mg，1.4mmol)於二氯甲烷(3mL)中之溶液。將反應物在室溫下攪拌2小時。將混合物在真空中濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1)純化，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(80mg，93%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =296.0。
步驟3：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
向10mL微波管中添加(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(80mg，0.27mmol)、NH3 -水(2mL，13.51mmol)及1,4-二噁烷(2mL)。將混合物在80℃攪拌16小時。將混合物在真空中濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇/NH3 -水，100：5：1)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(80mg，99%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =277.1。
步驟4：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加XPhos Pd G2(20mg，0.03mmol)、X-phos(18mg，0.04mmol)、N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(80mg，0.26mmol)、乙酸鉀(51mg，0.52mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1h-吡唑(81mg，0.39mmol)、水(0.5mL)及1,4-二噁烷(5mL)。將反應物藉由用N2 鼓泡透過來脫氣，且隨後在100℃攪拌16小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，30：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-環丙烷羧醯胺之(±)-順式及(±)-反式異構物之混合物(42mg，50%收率，1H NMR顯示3：1反式：順式)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.661，[M+H]+ =323.2，方法=F；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：10.77(s,1H),9.24(s,1H),8.15(s,1H),8.11(s,1H),7.96(s,1H),7.12(br,2H),7.04(s,1H),3.88(s,3H),2.12-2.02(m,0.3H),1.86-1.77(m,0.7H),1.34-1.20(m,1H),1.18-0.94(m,4H),0.85-0.79(m,0.3H),0.72-0.63(m,0.7H)。
實例47： (±)-4-(1-胺基-6-((順式)-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-3-甲基苯甲醯胺(化合物48)
步驟1：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺
向密封管中添加4-溴-3-甲基-苯甲醯胺(1.0g，4.67mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1.4g，5.61mol)、乙酸鉀(1.4g，14.01mmol)、Pd(dppf)Cl2 (341mg，0.47mmol)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物用N2 鼓泡透過2分鐘，且在100℃攪拌3小時。將混合物在真空中濃縮，且藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，1：1至0：100)純化，得到呈白色固體狀之3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(920mg，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =262.2。
步驟2：(±)-4-(1-胺基-6-((順式)-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基苯甲醯胺
向小瓶中添加(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，0.25mmol)、K2 CO3 (49mg，0.5mmol)、Pd(dppf)Cl2 (30mg，0.04mmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(98mg，0.37mmol)、水(0.5mL)及1,4-二噁烷(5mL)。將反應物用N2 鼓泡透過20分鐘，且隨後在90℃攪拌5小時。隨後將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，且隨後藉由逆向層析術(Boston 40g ODS管柱，用NaHCO3 10mmol/L：乙腈溶離，100：0至1：4,uv 254nm,214nm)純化，得到呈白色固體狀之(±)-4-[1-胺基-6-[[(順式)-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-3-甲基-苯甲醯胺(35mg，37%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.086，[M+H]+ =380.2， 方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.24(s,1H),7.97(s,1H),7.79(s,1H),7.75(d,J =8.0Hz,1H),7.48(d,J =8.0Hz,1H),7.35(br,1H),7.28(br,2H),6.92(s,1H),5.07-4.83(m,1H),2.41(s,3H),2.32-2.22(m,1H),1.74-1.61(m,1H),1.24-1.14(m 1H)。
實例48： 4-(1-胺基-6-((順式)-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-N,3-二甲基苯甲醯胺(化合物49)
步驟1：4-溴-N,3-二甲基苯甲醯胺
向小瓶中添加4-溴-3-甲基苯甲酸(1.0g，4.65mmol)、二氯甲烷(10mL)及DMF(0.1mL，4.65mmol)。滴加草醯氯(1.2mL，13.95mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應物在真空中濃縮且再溶於二氯甲烷(10mL)中。添加甲胺(30%於乙醇中，10mL)，且在室溫下攪拌30分鐘。將混合物在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，1：1至0：100)純化，得到呈白色固體狀之4-溴-N,3-二甲基-苯甲醯胺(1g，94%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =228.0。
步驟2.N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺
向密封管中添加4-溴-N,3-二甲基-苯甲醯胺(0.99g，4.34mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1.32g，5.21mmol)、乙酸鉀(1.28g，13mmol)、及Pd(dppf)Cl2 (317mg，0.43mmol)及1,4-二噁烷(100mL)。將混合物用N2 鼓泡透過來脫氣2分鐘，且在100℃攪拌3小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，3：1至1：1)純化，得到呈灰白色固體狀之N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(1.05g，77%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =276.2。
步驟3：(±)-4-(1-胺基-6-((順式)-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-N,3-二甲基苯甲醯胺
向小瓶中添加(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，0.25mmol)、K2 CO3 (50mg，0.51mmol)、Pd(dppf)Cl2 (40mg，0.05mmol)、N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(150mg，0.55mmol)、水(0.5mL)及1,4-二噁烷(5mL)。將混合物用N2 鼓泡透過來脫氣2分鐘，且隨後在100℃攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)及逆向層析術(Boston 40g ODS管柱，用NaHCO3 10mmol/L：乙腈溶離，2：1至1：2)純化，得到呈白色固體狀之4-[1-胺基-6-[[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-N,3-二甲基-苯甲醯胺(35mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.124，[M+H]+ =394.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.44(q,J =4.4Hz,1H),8.23(s,1H),7.75(s,1H),7.71(d,J =8.0Hz,1H),7.48(d,J =8.0Hz,1H),7.28(br,2H),6.92(s,1H), 5.06-4.83(m,1H),2.80(d,J =4.4Hz,3H),2.41(s,3H),2.32-2.22(m,1H),1.73-1.60(m,1H),1.24-1.15(m,1H)。
實例49： 反式-N-(8-胺基-6-(4-異丙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物50)
步驟1：3-溴-4-異丙基吡啶
向燒瓶中滴加3-溴吡啶(3.0g，18.99mmol)及乙醚合三氟化硼(3mL，23.55mmol)。在N2 下在室溫下攪拌30min後，將混合物冷卻至-55℃，且滴加氯(異丙基)鎂氯鋰錯合物(18mL，23.4mmol)。將混合物在-55℃攪拌2小時。使反應物溫熱至室溫，且在室溫下攪拌2小時。將反應用水性NaHCO3 (10mL)淬滅，添加水(20mL)，用乙酸乙酯(50ml x 3)萃取，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯，10：1至3：1)純化，得到呈淺黃色油狀之3-溴-4-異丙基-吡啶(600mg，16%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =200.0。
步驟2：4-異丙基吡啶-3-基硼酸
向小瓶中添加硼酸三異丙酯(1.2g，6.38mmol)、3-溴-4-異丙基-吡啶(600mg，3mmol)及THF(20mL)。將混合物冷卻至-78℃。滴加n-BuLi(1.5mL，3.75mmol，2.5M於己烷中)之溶液。使混合物緩慢溫熱至室溫，且室溫下攪拌2小時。將混合物藉由水(10mL)淬滅，用乙酸乙酯(20mL x 2)洗滌，用2N HCl酸化至pH=5且在真空中濃縮。將殘餘物用乙醇(30mL)萃取，過濾且在真空中濃縮，得到呈淺黃色固體狀之(4-異丙基-3-吡啶基)硼酸(600mg，36%收率)，且直接由於下一步驟。LCMS(ESI)[M+H]+ =166.1。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-異丙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(120mg，0.42mmol)、X-phos(40mg，0.08mmol)、XPhos Pd G2(49mg，0.06mmol)、(4-異丙基-3-吡啶基)硼酸(70mg，0.42mmol)、水(1mL)及1,4-二噁烷(10mL)。將反應物藉由用氮鼓泡脫氣2min，且隨後在100℃攪拌6小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，100：1至10：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-異丙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(17mg，11%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.696，[M+H]+ =373.2，方法=F；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ：9.30(s,1H),8.50(d,J =5.6Hz,1H),8.44(s,1H),8.28(s,1H),7.49(d,J =5.6Hz,1H),6.91(s,1H),3.40-3.20(m,1H),2.70-2.60(m,1H),2.15-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,2H),1.22(d,J =6.8Hz,6H)。
實例50： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物51)
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(500mg，1.78mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(450mg，2.05mmol)、X-Phos(90mg，0.19mmol)、X-Phos-Pd-G2(90mg，0.11mmol)、K2 CO3 (800mg，5.8mmol)於1,4-二噁烷(6mL)及水(1mL)中之混合物在惰性Ar氣氛下在110℃攪拌2小時。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由逆相層析術(甲醇45至55/0.05%甲酸於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(57mg，9.5%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.440，[M+H]+ =338.1，方法=E；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.13(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.19(s,1H),7.34(s,2H),7.30(d,J =5.2Hz,1 H),6.97(s,1H),5.00-4.83(m,1H),2.66-2.57(m,1H),2.41(s,3H),1.60-1.51(m,1H),1.31-1.23(m,1H)。
實例51： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(7-甲基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物52)
步驟1：7-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶
將6-溴-7-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(320mg，1.51mmol)、Pd(dppf)Cl2 (100mg，0.14mmol)、乙酸鉀(600mg，6.12mmol)及雙(頻哪醇合)二硼(3.8g，14.96mmol)於DMF(10mL)中之混合物在氮氣氛下在100℃攪拌3小時。向此中添加鹽水(40L)，且將混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。將合併之有機層用MgSO4 乾燥，且濃縮至乾燥。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上用乙酸乙酯溶離來純化，得到呈白色固體狀之7-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(180mg，35%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =260.2。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(7-甲基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將7-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(60mg，0.23mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(60mg，0.21mmol)、Pd(dppf)Cl2 (15mg，0.02mmol)、K2 CO3 (100mg，0.72mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及水(1mL)中之混合物在Ar氣氛下在110℃攪拌3小時。將反應物濃縮至乾燥。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至45/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到(±)-順式-N-[8-胺基-6-(7-甲基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶 -6-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(10.6mg，13.1%收率)。LCMS：(ESI)：RT (min)=1.03，[M+H]+ =378.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.48(s,1H),8.44(s,1H),8.34(s,1H),7.05(s,1H),5.00-4.80(m,1H),2.71(s,3H),2.20-2.16(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例52： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物53)
步驟1：(±)-反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸乙酯
在室溫下向(±)-反式-2-(羥基甲基)環丙烷羧酸乙酯(1.4g，9.71mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加氫化鈉(60%於礦物油中，350mg，8.75mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌20分鐘。隨後添加碘甲烷(1.0mL，15.5mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌3h且藉由LCMS監測。將反應用飽和NaCl溶液淬滅。將反應混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，經無水硫酸鈉乾燥，且在真空中濃縮，得到呈黃色液體狀之反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸乙酯(1.0g，91%收率)。LCMS：(ESI)[M+H]+ =159.1。
步驟2：(±)-反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸乙酯(1.0g，6.32mmol)、氫氧化鈉(800mg，20mmol)於THF(20mL)及水(5mL)中之混合物在70℃攪拌6小時。將THF藉由旋轉蒸發除去，且用2M HCl將pH調整至1。將混合物用乙酸乙酯(20 x 3mL)萃取。將有機萃取物合併，經無水硫酸鈉乾燥，且隨後在真空中濃縮，得到呈無色液體狀之(±)-反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸(700mg，85%收率)。
步驟3：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺
向(±)-反式-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧酸(700mg，5.38mmol)及DMF(1滴)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加過量草醯氯。將混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物濃縮以除去過量草醯氯，且添加二氯甲烷(10mL)。將溶液滴加至6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(400mg，1.87mmol)、三乙胺(2.0mL，14.85mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌1小時。隨後將反應混合物濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(400mg，17.1%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =326.0。
步驟4：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(400.0mg，0.3200mmol)及氨(25%於水中)(2.0mL，105.88mmol)於1,4-二噁烷(4mL)中之混合物在110℃攪拌2小時。將反應物濃縮至乾燥。將粗產物隨後藉由管柱層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(10：1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(90mg，71%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =307.1。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺
向壓力反應管中添加(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(84mg，0.27mmol)、(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(60mg，0.4mmol)、Pd(PPh3 )4 (40mg，0.03mmol)、K2 CO3 (120mg，0.87mmol)、1,4-二噁烷(5mL)及水(1mL)。將反應混合物在Ar氣氛下在110℃攪拌6小時，且隨後濃縮至乾燥。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(甲氧基甲基)環丙烷羧醯胺(12mg，11.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.16，[M+H]+ =378.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.18(s,1H),8.38 (s,1H),8.36(s,1H),8.17(s,1H),7.32(d,J =4.0Hz,1H),6.83(s,1H),3.42-3.39(m,1H),3.22-3.18(m,4H),2.72(q,J =6.0Hz,2H),1.80-1.79(m,1H),1.64-1.60(m,1H),1.17-1.13(m,1H),1.06(t,J =6.0Hz,3H),0.86-0.82(m,1H)。
實例53： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物54)
步驟1：(±)-2-(1-(6-胺基-1-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-2,7-啶-3-基)吡咯啶-2-基)乙醇
向微波管中添加3-氯-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.46mmol)、(±)-2-吡咯啶-2-基乙醇(450mg，3.91mmol)及1-甲基-2-吡咯啶酮(3mL)。將混合物在200℃下在微波反應器中加熱4小時。將混合物傾入水20mL中，且用乙酸乙酯(30ml x 2)萃取。將合併之萃取物用1N HCl(10mL)、鹽水(20ml x 2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇/NH3 -水，100：5：1)純化，得到呈淺黃色固體狀之2-[1-[6-胺基-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]吡咯啶-2-基]乙醇(140mg，56%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =514.2。
步驟2：(±)-2-[1-[6-[雙[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]吡咯啶-2-基]乙基順式-2-氟環丙烷羧酸酯
向小瓶中添加2-[1-[6-胺基-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]吡咯啶-2-基]乙醇(140mg，0.27mmol)、二氯甲烷(5mL)及吡啶(215mg，2.73mmol)。滴加2-[1-[6-胺基-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]吡咯啶-2-基]乙醇(140mg，0.27mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物在真空中濃縮，得到粗產物，將其直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =772.2。
步驟3：(±)-順式-N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向微波管中添加2-[1-[6-[雙[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-1-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]吡咯啶-2-基]乙基順式-2-氟環丙烷羧酸酯(300mg，0.27mmol)、1,4-二噁烷(4mL)及氫氧化銨(3.6mL，47.62mmol)。將混 合物在100℃下加熱48小時。將混合物在真空中濃縮，且藉由製備型TLC(矽膠，二氯甲烷/甲醇，10：1)純化，得到呈黃色油狀之(±)-順式-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(180mg，55%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =600.3。
步驟4：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-順式-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(180mg，0.15mmol)及TFA(5mL)。將反應物在90℃攪拌16小時。將混合物濃縮且溶於NH3 之溶液(7N於甲醇中，10mL)中。添加K2 CO3 (200mg)。將反應物在60℃攪拌30分鐘，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(矽膠，二氯甲烷/甲醇=10：1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-[2-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(35mg，65%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.100，[M+H]+ =360.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ：8.80(s,1H),7.84(s,1H),5.75(s,1H),4.96-4.73(m,1H),4.45-4.35(m,1H),3.65-3.55(m,2H),3.53-3.45(m,1H),3.39-3.31(m,1H),2.16-1.93(m,4H),1.93-1.73(m,3H),1.70-1.58(m,1H),1.24-1.12(m,1H)。
實例54： 順式-N-(8-胺基-6-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物55)
步驟1：4-碘-2-甲氧基-5-甲基吡啶
將2-氟-4-碘-5-甲基吡啶(2.37g，10mmol)、甲醇鈉(1.0g，18.51mmol)於二甲亞碸(10mL)中之混合物在室溫下攪拌2小時。向此混合物中添加飽和NaCl溶液(20mL)，且隨後將混合物用乙酸乙酯(15mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，用MgSO4 乾燥且濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上用石油醚：乙酸乙酯(10：1)溶離來純化，得到呈無色固體狀之4-碘-2-甲氧基-5-甲基-吡啶(2.3g，81%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =249.9。
步驟2：2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
將4-碘-2-甲氧基-5-甲基-吡啶(830mg，3.33mmol)、Pd(dppf)Cl2 (200mg，0.27mmol)、乙酸鉀(1.0g，10.2mmol)及雙(頻哪醇合)二硼(6.0g，23.63mmol)於無水1,4-二噁烷(30mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌5小時。將反應物濃縮至乾燥。將粗產物藉由管柱層析術在矽膠上用石油醚：乙酸乙酯(10：1)溶離來純化，得到呈黃色液體狀之粗品2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(1.1g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =250.1。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(600mg，2.41mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(280mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2 (70mg，0.10mmol)、K2 CO3 (420mg，3.04mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在110℃攪拌3小時。將反應物濃縮至乾燥。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至45/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(2-甲氧基-5-甲基-4-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(55mg，14.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.20，[M+H]+ =368.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.02(s,1H),9.38(s,1H),8.25(s,1H),8.05(s,1H),7.34(s,2H),6.98(s,1H),6.85(s,1H),5.04-4.86(m,1H),3.85(s,3H),2.30-2.23(m,4H),1.70-1.64(m,1H),1.22-1.17(m,1H)。
實例55： (±)-順式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-1H-吡啶-4-基)-2,7- 啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(化合物56)
將(±)-順式-N-[8-胺基-6-(2-甲氧基-5-甲基-4-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(45mg，0.12mmol)、碘三甲基矽烷(200mg，1.0mmol)於乙腈(5mL)中之溶液在80℃攪拌2小時。將反應物濃縮，且藉由逆相層析術(乙 腈0至40/0.1%甲酸於水中)純化，得到呈黃色固體狀、作為甲酸鹽之順式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-1H-吡啶-4-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(13.3mg，30.7%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.02，[M+H]+ =354.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.34(s,1H),7.35(s,1H),6.98(s,1H),6.63(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.19-2.16(m,1H),2.114(s,3H),1.87-1.80(m,1H),1.28-1.19(m,1H)。
實例56： 8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基甲酸苄酯(化合物57)
步驟1：6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺基甲酸苄酯
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(100mg，0.47mmol)、氯甲酸苄酯(1.0mL，7.33mmol)及吡啶(1.0mL，12.36mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在室溫下攪拌隔夜。將反應物濃縮，且將所得殘餘物用水洗滌且過濾，得到呈黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸苄酯(120mg，53%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =348.0。
步驟2：8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺基甲酸苄酯
將N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸苄酯(120mg，0.34mmol)及氨(25%於水中，2.0mL，105.88mmol)於1,4-二噁烷(2mL)中之混合物在110℃攪拌2小時。將反應物濃縮，得到呈黃色固體狀之N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸苄酯(110mg，89%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =329.1。
步驟3：8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基甲酸苄酯
將N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸苄酯(105mg，0.32mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(150mg，0.64mmol)、X-Phos(20mg，0.04mmol)、XPhos Pd G2(20mg，0.03mmol)及K2 CO3 (150mg，1.09mmol)於1,4-二噁烷(6mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在110℃攪拌2小時。將反應物濃縮，且藉由逆相層析術(甲醇45至55/0.05%甲酸於水中)純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苄酯(9mg，7%收率)(甲酸鹽)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.53，[M+H]+ =400.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.26(s,1H),8.48(s,1H),8.50(s,1H),8.10(s,1H),7.48-7.34(m,6H),6.97(s,1H),5.27(s,2H),2.83(q,J =7.6Hz,2H),1.19(t,J =7.6Hz,3H)。
實例57： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-甲基-2-側氧基吲哚-5-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物58)
步驟1：5-溴-6-甲基吲哚-2-酮
將5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(500mg，3.35mmol)及1-溴-2,5-吡咯啶二酮(656mg，3.69mmol)於乙酸(10mL)中之混合物在20℃攪拌16小時。將反應混合物用水(25mL)稀釋，且再攪拌15分鐘。隨後將混合物過濾且用水(5mL x 2)洗滌，得到呈白色固體狀之6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(600mg，77%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =228.2。
步驟2：6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚-2-酮
將5-溴-6-甲基-吲哚-2-酮(200mg，0.88mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧雜硼雜戊環)(336mg，1.33mmol)、Pd(dppf)Cl2 (64mg，0.09mmol)、乙酸鉀(86mg，0.88mmol)及1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在100℃在N2 下攪拌3小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠層析術用0至30%乙酸乙酯於石油醚中溶離來純化，得到呈黃色固體狀之6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚-2-酮(150mg，56%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =274.2。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-甲基-2-側氧基吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚-2-酮(100mg，0.33mmol)、順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(93mg，0.33mmol)、Pd(PPh3 )4 (38mg，0.03mmol)、K2 CO3 (91mg，0.67mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(1mL)中之混合物在105℃在N2 下攪拌5小時。將反應混合物濃縮，且藉由矽膠層析術用0至10%甲醇於二氯甲烷中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(6-甲基-2-側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(20mg 15%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.535，[M+H]+ =392.1，方法=C；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),10.42(s,1H),9.33(s,1H),8.19(s,1H),7.28(s,1H),7.20(s,2H),6.82(s,1H),6.70(s,1H),5.05-4.83(m,1H),3.46(s 2H),2.35(s,3H),2.30-2.21(m,1H),1.71-1.59(m,1H),1.23-1.13(m,1H)。
實例58： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-(2-羥基丙-2-基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物59)
步驟1：2-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)丙-2-醇
在-78℃在N2 下向2,5-二溴-4-甲基吡啶(2g，7.97mmol)於甲苯(30mL)中之溶液中添加n-BuLi(2.5M於己烷中，4.8mL，11.96mmol)之溶液。將混合物在-78℃攪拌30min。在-78℃下滴加丙酮(1.85g，31.88mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應混合物用飽和NH4 Cl水溶液(100mL)洗滌，且將混合物用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠急驟層析術用石油醚/乙酸乙酯(20：1至3：1)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(1.5g，82%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =230.2。
步驟2：2-(4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-基)丙-2-醇
向壓力反應管中添加2-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(200mg，0.87mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(264mg，1.04mmol)、Pd(dppf)Cl2 (63mg，0.09mmol)、乙酸鉀(170mg，1.74mmol)及1,4-二噁烷(8mL)。將混合物在95℃攪拌4小時。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =278.2。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-甲基-2-側氧基吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將2-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]丙-2-醇(100mg，0.36mmol)、Pd(t-Bu3 P)2 (18mg，0.04mmol)、(±)-順式-N-(8- 胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(101mg，0.36mmol)及K2 CO3 (99mg，0.72mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(1mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌3小時。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術用0至100%乙酸乙酯於石油醚中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-[6-(1-羥基-1-甲基-乙基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(61mg，43%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.309，[M+H]+ =396.1，方法=A；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.48(s,1H),8.32(s,1H),7.65(s,1H),6.98(s,1H),4.99-4.78(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.59(s 6H),1.26-1.20(m,1H)。
實例59： 順式-N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物60)
步驟1：(±)-順式-N-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
向(±)-順式-2-氰基環丙烷羧酸(100mg，0.77mmol)及DMF(0.01mL)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加乙烷二醯二氯(0.09mL，0.93mmol)，將混合 物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且在0℃下將殘餘物滴加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(390mg，0.77mmol)及吡啶(2mL)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中。將所得混合物在室溫下攪拌2小時，隨後用二氯甲烷(40mL)稀釋，且用水(10mL x 2)洗滌。將合併之有機層合併，濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術用0至100%乙酸乙酯於石油醚中溶離來純化，得到呈褐色固體狀之(±)-反式-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(200mg，43%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+=599.2。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(200mg，0.33mmol)及TFA(8mL)中之混合物在80℃攪拌1小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7N)鹼化。將殘餘物藉由矽膠層析術用0至100%乙酸乙酯於石油醚中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(60mg，50%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.593，[M+H]+ =359.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.44(d,J =5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.83(q,J =7.6Hz,2H),2.56-2.50(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.71-1.67(m,1H),1.55-1.50(m,1H),1.19(t,J =7.2Hz,3H)。
實例60： (±)-順式-N1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷-1,2-二羧醯胺(化合物61)
將(±)-順式-N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(200mg，0.33mmol)及TFA(8mL)中之混合物在80℃攪拌1小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7N)鹼化。將殘餘物藉由矽膠層析術用0至100%乙酸乙酯於石油醚中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷-1,2-二羧醯胺(23mg，18.4%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.449，[M+H]+ =377.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.49(s,1H),8.47(d,J =5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.44(d,J =5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.83(q,J =7.6Hz,2H),2.35-2.29(m,1H),2.19-2.13(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.37-1.32(m,1H),1.18(t,J =7.2Hz,3H)。
實例61： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(2,4-二甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物62)
步驟1：2,4-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
將3-溴-2,4-二甲基-吡啶(500mg，2.69mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-聯(1,3,2-二氧雜硼雜戊環)(1023mg，4.03mmol)、Pd(dppf)Cl2 (219mg，0.27mmol)及乙酸鉀(526mg，5.37mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在110℃在N2 下攪拌5小時。混合物不經任何純化即直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =234.1。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(2,4-二甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將2,4-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(100mg，0.43mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(120mg，0.43mmol)、Pd(PPh3 )4 (49mg，0.04mmol)及K2 CO3 (118mg，0.86mmol)於含水(1mL)之1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在110℃在N2 下攪拌5小時。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術用0至15%甲醇於二氯甲烷中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(25mg，16.6%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.556，[M+H]+ =352.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.32(d,J =5.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.25(d,J =5.2Hz,1H),6.86(s,1H),4.98-4.80(m,1H),2.35(s,3H),2.20(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.26-1.20(m,1H)。
實例62： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物63)
步驟1：7-溴-1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向7-溴-1H-吡咯并[3,2-C]吡啶(700mg，3.55mmol)於DMF(7mL)中之溶液中添加氫化鈉(171mg，4.26mmol)。將所得混合物在25℃攪拌0.5小時。添加甲基碘(656mg，4.62mmol)且攪拌1小時。將反應混合物用水(30mL)淬滅，且用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取。將合併之乙酸乙酯層用水及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，且在真空中濃縮，得到呈黃色固體狀之7-溴-1-甲基-吡咯并[3,2-c]吡啶(640mg，81%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =211.0。
步驟2：1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基硼酸
在-78℃下向7-溴-1-甲基-吡咯并[3,2-c]吡啶(640mg，3.03mmol)於THF(15mL)中之溶液中添加n-BuLi(2.5M於己烷中)(1.8mL，4.55mmol)。將所得混合物攪拌0.5小時。添加硼酸三異丙酯(855mg，4.55mmol)，且使反應物緩慢溫熱至室溫。將反應混合物用水淬滅。在真空中除去THF。將混合物用乙酸乙酯洗滌。用1M HCl將水相調整至pH=5且過濾。將濕濾餅用水及乙酸乙酯 洗滌，且在真空中乾燥，得到呈米色固體狀之(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)硼酸(520mg，97%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =177.1。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，0.25mmol)、(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)硼酸(110mg，0.62mmol)、XPhos Pd G2(10mg，0.01mmol)、X-phos(12mg，0.02mmol)及乙酸鉀(73mg，0.75mmol)於1,4-二噁烷(2mL)及水(0.2mL)中之混合物在100℃攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋且過濾。將濾液濃縮，且將殘餘物藉由製備型TLC及逆相急驟層析術(ODS，乙腈/水+0.5% NH4 HCO3 ，0：1至1：1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(9mg，9.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.58，[M+H]+ =377.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：9.28(s,1H),8.84(s,1H),8.35(s,1H),8.25(d,J =6.0Hz,1H),7.55(d,J =6.0Hz,1H),7.32(s,1H),7.06(s,1H),4.99-4.82(m,1H),4.07(s,3H),2.20-2.16(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.27-1.23(m,1H)。
實例63： (±)-順式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-1-甲基-6-側氧基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(化合物64)
步驟1：5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺
在0℃下經15分鐘向經攪拌之2-胺基-4-乙基吡啶(5.0g，40.9mmol)於氯仿(200mL)中之溶液中逐份添加NBS(8.7g，48.9mmol)。反應完成後，將混合物藉由矽膠層析術(乙酸乙酯：石油醚=1：5至1：2)直接純化，得到呈淡黃色固體狀之5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(7g，72%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =201.1。
步驟2：5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇
在-20℃下向5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(7.0g，33.8mmol)於濃鹽酸(70mL)中之溶液中逐份添加NaNO2 (4.8g，69.6mmol)於水中之水溶液。攪拌1小時後，經3小時之時期將反應混合物溫熱至室溫。添加10M NaOH水溶液(16g NaOH於40mL水中)以將pH調整至12，同時將溫度維持在0℃。將反應混合物用二氯甲烷(3 x 25mL)萃取。隨後將合併之萃取物用水洗滌，乾燥且濃縮，得到呈白色固體狀之5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(2.0g，24%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =202.1。
步驟3：5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮
在燒瓶中，將K2 CO3 (1.4g，10.1mmol)及甲基碘(1.1g，7.8mmol)添加至5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(1.0g，4.9mmol)於乙腈(20mL)中之溶液中。將反應混合物在25℃攪拌隔夜，且隨後過濾。將濾液分配在H2 O(15mL)與CH2 Cl2 (2 x 10mL)之間。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚：乙酸乙酯=9：1)純化，得到呈白色固體狀之5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮(754mg，71%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =216.1。
步驟4：4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-酮
將5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮(700mg，3.2mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(2060mg，8.1mmol)、Pd(dppf)Cl2 (470mg，0.6mmol)及乙酸鉀(1270mg，13mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之溶液加熱至70℃達2小時。隨後將混合物過濾且藉由矽膠層析術(乙酸乙酯：石油醚=1：4)純化，得到呈白色固體狀之4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-酮(600mg，70%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =264.1。
步驟5：(±)-順式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-1-甲基-6-側氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(100mg，0.4mmol)、Pd(PPh3 )4 (41mg，0.04mmol)及K3 PO4 (151mg，0.7mmol)依序添加至4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-酮 (375mg，1.4mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(1.5mL)中之溶液中。將反應混合物在100℃攪拌2小時。將反應混合物在真空中濃縮，且在矽膠層析術(甲醇/二氯甲烷，1：9)上純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(4-乙基-1-甲基-6-側氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(6mg，4.4%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+ =382.1，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.16(s,1H),8.19(s,1H),7.65(s,1H),6.84(s,1H),6.40(s,1H),4.88-4.67(m,1H),3.50(s,3H),2.64(q,J =7.6Hz,2H),2.12-1.99(m,1H),1.79-1.63(m,1H),1.12-1.10(m,1H),0.98(t,J =7.6Hz,3H)。
實例64： (R)-1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲(化合物65)
步驟1：(R)-1-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲
在0℃下向三光氣(108mg，0.36mmol)於THF(4mL)中之溶液中添加THF(5mL)中之3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶 -1,6-二胺(180mg，0.18mmol)及Et3 N(0.5mL，3.56mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時。向此中添加(3R)-3-胺基-1-甲基-吡咯啶-2-酮(450mg，3.94mmol)。將混合物溫熱至室溫隔夜。將混合物藉由矽膠層析術(二氯甲烷/甲醇，20：1)直接純化，得到呈淡黃色固體狀之1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(32mg，28%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =646.3。
步驟2：(R)-1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲
將1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(27mg，0.04mmol)於TFA(3mL)中之溶液加熱回流3小時。將混合物蒸發且藉由甲醇中之銨來中和。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(5.5mg，33%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.501，[M+H]+ =406.2，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.29(s,1H),8.50(s,2H),7.52(s,1H),7.45(d,J =5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.49(t,J =9.2Hz,1H),3.47(dd,J =4.0,9.2Hz,2H),2.93(s,3H),2.83(q,J =7.6Hz,2H),2.62-2.57(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.19(t,J =7.6Hz,3H)。
實例65： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-乙基-6-甲氧基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物66)
步驟1：4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-胺
將5-溴-4-乙基-2-甲氧基-吡啶(400mg，1.85mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(940mg，3.7mmol)、Pd(dppf)Cl2 (270mg，0.37mmol)及乙酸鉀(560mg，5.71mmol)於1,4-二噁烷(30mL)中之溶液加熱至70℃達2小時。將混合物過濾且蒸發後，得到呈黑色固體狀之4-乙基-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(400mg，82%收率)，其直接用於下一反應中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =264.2。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-乙基-6-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將4-乙基-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(380mg，1.44mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(100mg，0.36mmol)、K3 PO4 (630mg，2.99mmol)、Pd2 (dba)3 (140mg，0.15mmol)及X-phos(76mg，0.16mmol)於1,4-二噁烷(24mL)及水(4mL)中之溶液在 Ar氣氛下加熱至80℃達3小時。將混合物藉由逆相層析術(乙腈17至47/0.05%碳酸氫銨)純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-乙基-6-甲氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(6mg，1.1%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.782，[M+H]+ =382.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.29(s,1H),8.30(s,1H),8.11(s,1H),6.94(s,1H),6.79(s,1H),4.98-4.87(m,1H),3.96(s,3H),2.81(q,J =6.0Hz,2H),2.19-2.16(m,1H),1.86-1.81(m,1H),1.26-1.22(m,1H),1.14(t,J =6.0Hz,3H)。
實例66： 順式-N-(8-胺基-6-(6-胺基-4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物67)
步驟1：4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-胺
將5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(500mg，2.49mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(750mg，2.95mmol)、Pd(dppf)Cl2 (200mg，0.27mmol)及乙酸鉀(750mg，7.65mmol)於1,4-二噁烷(30mL)中之溶液加熱至120℃達2小時。將混合物過濾且蒸發，得到呈黑色漿料狀之4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-胺(500mg，35%收率)，其直接用於下一反應中。LCMS(ESI)[M+H]+ =249.1。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(6-胺基-4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-胺(400mg，0.64mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(100mg，0.36mmol)、Pd(PPh3 )4 (80mg，0.07mmol)及K3 PO4 (280mg，1.33mmol)於1,4-二噁烷(24mL)及水(4mL)中之溶液加熱至100℃達3小時。將混合物藉由矽膠層析術(二氯甲烷：甲醇，10：1)純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(6-胺基-4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(30mg，13%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.476，[M+H]+ =367.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.26(s,1H),8.28(s,1H),7.90(s,1H),6.90(s,1H),6.57(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.74(q,J =7.6Hz,2H),2.19-2.13(m,1H),1.88-1.80(m,1H),1.29-1.19(m,1H),1.11(t,J =7.6Hz,3H)。
實例67： N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]環丙烯-1-羧醯胺(化合物68)
步驟1：N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-硝基-環丙烷羧醯胺
在25℃下將草醯氯(0.2mL，2.35mmol)滴加至2-硝基環丙烷羧酸(200mg，1.53mmol)及DMF(20mg，0.27mmol)於二氯甲烷(4mL)中之懸浮液，且將混合物在25℃攪拌1小時。將反應混合物由懸浮液變為溶液。將混合物在室溫下濃縮，以除去過量草醯氯。將殘餘物溶於二氯甲烷(1mL)中，且在0℃下滴加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(800mg，1.58mmol)及三乙胺(700mg，6.93mmol)於二氯甲烷(8mL)中之溶液中，且在0℃攪拌1小時。將反應混合物蒸發，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(石油醚/乙酸乙酯=1：1至1：2，Rf=0.8，在石油醚/乙酸乙酯1/2下)純化，得到呈褐色固體狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-硝基-環丙烷羧醯胺(240mg，25%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =619.2。
步驟2：N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-硝基-環丙烷羧醯胺
將N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-硝基-環丙烷羧醯胺(230mg，0.37mmol)及鐵(400mg，7.14mmol)於乙酸(5mL)中之混合物在50℃攪拌1小時。將反應混合物冷卻至室溫。添加乙酸乙酯及/甲醇之5：1混合物(150mL)。隨後將混合物過濾且濃縮。向殘餘物中添加水(20mL)，藉由飽和NaHCO3 調整至pH 7至8，且用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。將乙酸乙酯層合併，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用製備型TLC(石油醚/乙酸乙酯1/2，Rf=0.2，在石油醚/乙酸乙酯1/2下)純化，得到呈褐色固體 狀之N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-羥基-環丙烷羧醯胺(45mg，20%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =590.2。
步驟3：N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丙烯-1-羧醯胺
將N-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-羥基-環丙烷羧醯胺(42mg，0.071mmol)於TFA(4mL)中之混合物在80℃攪拌1.5小時，且隨後蒸發。將殘餘物懸浮於甲醇(1mL)中。添加7N NH3 -甲醇溶液直至pH介於9至10之間。隨後將混合物用急驟層析術(C18，甲醇/水至甲酸/甲醇/水)純化，得到呈淡褐色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]環丙烯-1-羧醯胺之甲酸鹽(15mg，56%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.336，[M+H]+ =332.1，方法=A；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.42(s,1H),8.52-8.48(m,3H),8.4(brs,1H),7.58(dd,J =1.6,5.6Hz,1H),7.39(s,2H),7.35(d,J =4.8Hz,1H),7.01(s,1H),6.34(dd,J =1.6,4.4Hz,1H),4.79(s,2H),2.80(q,J =7.6Hz,2H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例68： 5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物70)
步驟1：5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
向5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(126mg，1mmol)於無水二氯甲烷(5mL)中之懸浮液中添加草醯氯(0.423mL，5mmol)及DMF(2滴)。將混合物在室溫下攪拌4.5小時，且隨後濃縮。將殘餘物用無水氯仿共沸兩次，隨後在真空下濃縮，得到粗品酸性氯化物。將此溶於無水二氯甲烷(2mL)中。將此溶液之一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(126mg，0.25mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中，接著添加吡啶(0.1mL，1.24mmol)。將混合物在室溫下攪拌4.5小時，隨後添加水(約5mL)且分離各相。將水相用二氯甲烷(3x)萃取。將合併之有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物藉由矽膠層析術(50至100%乙酸乙酯/環己烷)純化，得到標題化合物(47mg，31%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.51，[M+H]+ =614，方法=I。
步驟2：5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3基)-[2,7]啶-3-基]醯胺(47mg，0.077mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃加熱2.5小時，隨後蒸發。將殘餘物在2M氨/甲醇溶液中漿化。添加額外甲醇以溶解所有材料。將此溶液吸收至Isolute® HM-N上，上樣至矽膠管柱上，且用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到標題化合物(27mg，94%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.47，[M+H]+ =374，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 13.28(寬 s,1H),9.65(寬s,1H),9.43(s,1H),8.54(s,1H),8.52(d,J =5.1Hz,1H),8.35,(s,1H),7.49(寬s,2H),7.38(d,J =5.1Hz,1H),7.04(s,1H),6.62(s,1H),2.80(q,J =7.2Hz,2H),2.31(s,3H),1.11(t,J =7.2Hz,3H)。
實例69： 2H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物71)
步驟1：2H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
向1H-吡唑-3-羧酸(224mg，2mmol)於無水二氯甲烷(10mL)中之懸浮液中添加草醯氯(0.846mL，10mmol)及DMF(2滴)。將混合物在室溫下攪拌4.5小時，且隨後蒸發。將殘餘物用無水氯仿共沸兩次，隨後在真空下乾燥，得到粗品酸性氯化物。向此材料(80mg，0.6mmol)及3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)於二氯甲烷(2.5mL)中之混合物中添加吡啶(0.12mL，1.44mmol)。將混合物在室溫下攪拌5小時，隨後添加水且分離各相。將水相用二氯甲烷萃取三次。將合併之有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽膠(用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(66mg，38%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.10，[M+H]+ =600，方法=K。
步驟2：2H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將2H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺(66mg，0.11mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱3.5小時，隨後蒸發。將殘餘物在2M氨/甲醇之溶液中漿化。添加額外二氯甲烷及甲醇以溶解所有材料。將此溶液蒸發至Isolute® HM-N上，上樣至矽膠管柱上，且用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離。將所獲產物用水濕磨，且將固體過濾掉，用水洗滌且乾燥(真空，60℃)，得到標題化合物(17mg，43%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.28，[M+H]+ =360，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.05(寬，s,1H),9.59(s,1H),8.65(m,2H),8.47,(s,1H),8.31(寬，s,1H),7.94(s,1H),7.58(d,J =5.2Hz,1H),7.25(s,1H),6.96(s,1H),2.80(q,J =7.2Hz,2H),1.16(t,J =7.2Hz,3H)。
實例70： 2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物72)
步驟1：2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
向2-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(126mg，1mmol)於無水二氯甲烷(5mL)中之懸浮液中添加草醯氯(0.423mL，5mmol)及DMF(2滴)。將混合物在室溫下攪拌4.5小時且蒸發。將殘餘物用無水氯仿共沸兩次，隨後在真空下乾燥，得到粗品酸性氯化物。將此溶於無水二氯甲烷(2mL)中。將此溶液之一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(126mg，0.25mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中，接著添加吡啶(0.1mL，1.24mmol)。將混合物在室溫下攪拌4.5小時，隨後添加水(約5mL)且分離各相。將水相用二氯甲烷(3x)萃取。將合併之有機級份乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽膠上層析，用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離，得到標題化合物(61mg，40%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.26，[M+H]+ =614，方法=K。
步驟2：2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將2-甲基-1H-吡唑-3-羧酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3基)-[2,7]啶-3-基]醯胺(61mg，0.1mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃加熱2.5小時，隨後蒸發。將殘餘物用2M氨/甲醇漿化。添加額外甲醇以溶解所有材料。將此溶液蒸發至Isolute® HM-N上，上樣至矽膠管柱上，且用0至7%甲醇/二氯甲烷溶離，得到標題化合物(35mg，94%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.44，[M+H]+ =374，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.06(s,1H),9.52(s,1H),8.56(s,1H),8.55(d,J =5.4Hz,1H),8.42(s,1H),7.69(寬s,2H),7.55(d,J =2.1Hz, 1H),7.43(d,J =5.4Hz,1H),7.38(d,J =2.1Hz,1H),7.10(s,1H),4.14(s,3H),2.81(q,J =7.5Hz,2H),1.13(t,J =7.5Hz,3H)。
實例71： 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物73)
步驟1：1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[8-雙(4-甲氧基苄基)胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
向1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(126mg，1mmol)於無水二氯甲烷(3mL)中之懸浮液中添加草醯氯(0.43mL，5mmol)及DMF(2滴)。將混合物在室溫下攪拌16小時，且隨後蒸發。將殘餘物用甲苯共沸兩次，得到粗品酸性氯化物。將此溶於無水二氯甲烷(1mL)中。將此溶液之一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(100mg，0.20mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中，接著添加吡啶(0.1mL，1.24mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時且隨後蒸發。將殘餘物再溶於二氯甲烷中，且用水洗滌。將有機相乾燥(PTFE芯子)且蒸發。將粗產物在矽膠(用0至100%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離)上層析，得到標題化合物(100mg，80%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.57，[M+H]+ =614，方法=I。
步驟2：1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[8-雙(4-甲氧基苄基)胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺(98mg，0.155mmol)於TFA(3mL)中之溶液在80℃下加熱1小時，隨後蒸發。將殘餘物吸收於2M氨/甲醇中。隨後將混合物蒸發。將殘餘物溶於熱氯仿/甲醇中，且將溶液蒸發至Isolute® HM-N上，上樣至矽石管柱上，且用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到標題化合物，將其從乙酸乙酯中重結晶。LCMS(ESI)：RT (min)=2.21，[M+H]+ =374，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.64(s,1H),9.43(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J =5.1Hz,1H),8.47(s,1H),8.36(s,1H),8.18(s,1H),7.35(d,J =5.1Hz,1H),7.33(寬，2H),6.97(s,1H),3.90(s,3H),2.80(q,J =7.3Hz,2H),1.11(t,J =7.3Hz,3H)。
實例72： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物74)
步驟1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(126mg，0.25mmol)、4-溴-1-甲基-1H-吡唑(56mg，0.35mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(3.5mg，0.007mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(6mg，0.007mmol)於無水THF(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，0.77mL，0.77mmol)，且將混合物在80℃下加熱18小時。添加進一步量之4-溴-1-甲基-1H-吡唑(56mg)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(7mg)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(12mg)，且繼續加熱24小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石上層析，用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離，得到標題化合物(27mg，18%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.88，[M+H]+ =586，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺(27mg，0.046mmol)於TFA(1.5mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將含氨級份蒸發，得到標題化合物(14mg，88%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.10，[M+H]+ =346，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.21(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H & d,J =5.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.45(s,1H),7.32(d,J =5.0Hz,1H),7.07(寬，2H),6.72(s,1H),6.62(s,1H),3.83(s,3H),2.78(q,J =7.1Hz,2H),1.10(t,J =7.1Hz,3H)。
實例73： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物75)
步驟1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(126mg，0.25mmol)、4-溴-1H-吡唑(74mg，0.50mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(12mg，0.025mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(21mg，0.025mmol)於無水1,4-二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.0mL，1.0mmol)，且將混合物在100℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用0至5%甲醇/乙酸乙酯溶離)上層析，得到標題化合物(63mg，44%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.72，[M+H]+ =572，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺(63mg，0.11mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱3h，隨後蒸發。將殘餘物用甲醇中之2M氨漿化。添加額外甲醇以溶解所有固體。將溶液蒸發至Isolute® HM-N上，上樣至矽石管柱上，且用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到固體，將其用水濕磨，過濾掉且乾燥(真空，50℃)，得到標題化合物(23mg，63%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.92，[M+H]+ =332，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.83(v.寬，1H),9.66(寬，1H),9.47(s,1H),8.65(d,J =5.3Hz,1H),8.58(s,1H),7.79(寬，2H),7.50(d,J =5.3Hz,1H),6.99(s,1H),6.78(s,1H),2.68(q,J =7.4Hz,2H),1.14(t,J =7.4Hz,3H)。
實例74： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物76)
步驟1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(126mg，0.25mmol)、3-溴-1-甲基-1H-吡唑(81mg，0.50mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(12mg，0.025mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(21mg，0.025mmol)於無水1,4-二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.0mL，1.0mmol)，且將混合物在100℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用0至5%甲醇/乙酸乙酯溶離)上層析，得到標題化合物(60mg，41%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.94，[M+H]+ =586，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]啶-1,6-二胺(60mg，0.10mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4.25小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將含氨級份蒸發，得到標題化合物(23mg，67%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.24，[M+H]+ =346，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.37(s,1H),9.22(s,1H),8.48(s,1H),8.47(d,J =5.1Hz,1H),7.55(d,J =2.1Hz,1H),7.49(s,1H),7.32(d,J =5.1Hz,1H),7.07(寬，2H),6.74(s,1H),6.10(d,J =2.1Hz,1H),3.80(s,3H),2.79(q,J =7.0Hz,2H),1.10(t,J =7.0Hz,3H)。
實例75： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物77)
步驟1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(140mg，0.28mmol)、3-溴-1-甲基-1H-吡唑(82mg，0.56mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(13mg，0.028mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(24mg，0.028mmol)於無水二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.16mL，1.16mmol)，且將混合物在100℃下加熱16小時。添加進一步部分之3-溴-1-甲基-1H-吡唑(82mg，0.56mmol)及雙(三甲基矽基)胺化鋰(1.16mL，1.16mmol)，且將混合物在100℃下加熱22小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且分離各相。將水相用乙酸乙酯萃取三次。將有機級份乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用0至5%甲醇/乙酸乙酯溶離)上層析，得到輕微不純之產物，將其藉由質譜定向之HPLC(C18管柱，10至95%乙腈/水+0.1%甲酸)純化，得到標題化合物(44mg，28%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.57，[M+H]+ =572，方法=I。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]啶-1,6-二胺(44mg，0.077mmol)於TFA(0.5mL)中之溶液在80℃下加熱1小時。將用甲醇及二氯甲烷稀釋之冷卻之混合物上樣至2g SCX-2芯子，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物用二乙醚濕磨，得到標題化合物(20mg，80%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.09，[M+H]+ =332，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.17(寬，1H),9.40(s,1H),9.23(s,1H),8.49(s,1H),8.47(d,J =5.2Hz,1H),7.61(寬，2H),7.33(d,J =5.2Hz,1H),7.10(寬s,2H),6.74(s,1H),6.12(d,J =2.1Hz,1H),2.79(q,J =7.5Hz,2H),1.10(t,J =7.5Hz,3H)。
實例76： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物78)
步驟1：4-{4-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸第三丁酯
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、4-(4-溴吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(195mg，0.59mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(14mg，0.029mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(24mg，0.029mmol)於無水1,4-二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.16mL，1.16mmol)，且將混合物在100℃下加熱5.5小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石上層析，用0至100%乙酸乙酯/環己烷溶離，得到標題化合物(89mg，41%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.50，[M+H]+ =755，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將4-{4-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸第三丁酯(89mg，0.118mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用 甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，得到標題化合物(43mg，88%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.72，[M+H]+ =415，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.21(s,1H),8.87&8.82(2x s*,1H),8.46(m,2H),7.94&7.93(2x s*,1H),7.52 & 7.49(2x s*,1H),7.32(d,J =5.1Hz,1H),7.06(寬，2H),6.72(s,1H),6.64(s,1H),4.32 & 4.13(2x m*,1H),3.23 & 3.10(2x m*,2H),2.84(m,2H),2.79(q,J =7.5Hz,2H),2.08(m,2H),1.97(m,2H)1.09(t,J =7.5Hz,3H)。*=主要及次要構形異構物。
實例77： 環丙烷磺酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物79)
步驟1：4-溴-1-環丙烷磺醯基-1H-吡唑
將三乙胺(0.21mL，1.50mmol)添加至4-溴-1H-吡唑(200mg，1.36mmol)及環丙烷磺醯氯(0.15mL，1.50mmol)於無水二氯甲烷(2mL)中之混合物中。將混合物在室溫下攪拌19小時，添加隨後進一步部分之環丙烷磺醯氯(0.075mL)及三乙胺(0.105mL)，且繼續攪拌6.5小時。添加水分離各相。將水相用二氯甲烷萃取兩次。將有機級份乾燥(Na2 SO4 )且蒸發，且將粗產物在矽膠(用0至20%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(226mg，66%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.79，[M+H]+ =251/253，方法=K。
步驟2：環丙烷磺酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、4-溴-1-環丙烷磺醯基-1H-吡唑(149mg，0.59mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(14mg，0.029mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(24mg，0.029mmol)於無水二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.16mL，1.16mmol)，且將混合物在100℃下加熱17.5小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取五次。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽膠(用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(45mg，25%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.75，[M+H]+ =572，方法=K。
步驟3：環丙烷磺酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將環丙烷磺酸[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺(45mg，0.074mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物用甲醇中之2M氨漿化，隨後添加甲醇及二氯甲烷以溶解所有固體。將溶液蒸發至Isolute® HM-N上，上樣至矽石管柱上，且用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到標題化合物(26mg，95%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.23，[M+H]+ =370，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.84(寬s,1H),9.38 (s,1H),8.52(s,1H & d,J =5.1Hz,1H),7.58(寬，2H),7.38(d,J =5.1Hz,1H),7.23(s,1H),6.97(s,1H),3.08(m,1H),2.78(q,J =7.2Hz,2H),1.10(m,5H),1.03(m,2H)。
實例78： 3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7] 啶-1,6-二胺(化合物80)
步驟1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、4-氯-6-甲基嘧啶(58mg，0.45mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(13mg，0.015mmol)、X-Phos(15mg，0.03mmol)及碳酸銫(189mg，0.58mmol)於無水1,4-二噁烷(2mL)中之混合物用氬吹掃，且在120℃下加熱18小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取五次。將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物藉由質譜定向之HPLC(C18管柱，10至95%乙腈/水+0.1%氨)純化，得到標題化合物(40mg，23%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.64，[M+H]+ =598，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]啶-1,6-二胺(40mg，0.067mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4.5小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，得到標題化合物(25mg，100%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.86，[M+H]+ =358，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.33(s,1H),9.39(s,1H),8.65(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J =5.1Hz,1H),8.19(s,1H),7.35(d,J =5.1Hz,1H),7.31(寬，2H),7.28(s,1H),6.92(s,1H),2.80(q,J =7.5Hz,2H),2.36(s,3H),1.10(t,3H)。
實例79： 2-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基胺基]-N-乙基-N-甲基異菸醯胺(化合物81)
步驟1：2-氯-N-乙基-N-甲基異菸醯胺
向2-氯異菸鹼酸(0.29g，1.85mmol)於DMF(15mL)中之溶液中添加O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲六氟磷酸酯(1.06g，2.78mmol)、N-乙基甲胺(0.24mL，2.78mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(1,25mL，7.4mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時，隨後用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取四次。將萃 取物用水及鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石上層析，用0至50%乙酸乙酯/環己烷溶離，得到標題化合物(273mg，75%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.99，[M+H]+ =199，方法=K。
步驟2：2-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]-N-乙基-N-甲基異菸醯胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、2-氯-N-乙基-N-甲基異菸醯胺(115mg，0.58mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(13mg，0.015mmol)、X-Phos(15mg，0.03mmol)及碳酸銫(189mg，0.58mmol)於無水二噁烷(2mL)中之混合物用氬吹掃，且在120℃下加熱18小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取三次。將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(85mg，44%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.67，[M+H]+ =668，方法=K。
步驟3：2-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]-N-乙基-N-甲基異菸醯胺
將2-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]-N-乙基-N-甲基異菸醯胺(85mg，0.13mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離， 隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物在矽石(用0至7%甲醇/二氯甲烷溶離)上層析，得到標題化合物(46mg，83%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.30，[M+H]+ =428，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 ,80℃)δ 9.73(寬s,1H),9.32(s,1H),8.50(s,1H),8.46(d,J =5.5Hz,1H),8.31(d,J =5.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.43(s,1H),7.29(d,J =5.5Hz,1H),6.91(寬，2H),6.84(s,1H),6.82(d,J =5.1Hz,1H),3.34(寬，2H),2.93(s,3H),2.80(q,J =7.5Hz,2H),1.12(m,6H)。
實例80： (±)-1-{2-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基胺基]-吡啶-4-基}丙-1-醇(化合物82)
步驟1：(±)-1-(2-氯吡啶-4-基)丙-1-醇
向2-氯吡啶-4-甲醛(0.71g，5.06mmol)於無水THF(16mL)中之溶液中添加氯化鑭(III)雙(氯化鋰)錯合物(0.6M於THF中，16.7mL，10.03mmol)之溶液，且將混合物在室溫下攪拌0.75小時，隨後冷卻至0℃。經5至10分鐘滴加溴化乙基鎂(3M於二乙醚中，3.34mL，10.03mmol)。將混合物在0℃攪拌80分鐘，隨後用水性氯化銨淬滅，用水稀釋且用乙酸乙酯(3x)萃取。將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽膠(用0至50%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(423mg，49%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.14，[M+H]+ =172，方法=K。進一步溶離得到(2-氯吡啶-4-基)甲醇(191mg，26%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.46，[M+H]+ =144，方法=K。
步驟2：(±)-1-{2-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡啶-4-基}丙-1-醇
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、(±)-1-(2-氯吡啶-4-基)丙-1-醇(100mg，0.58mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(13mg，0.015mmol)、X-Phos(15mg，0.03mmol)及碳酸銫(189mg，0.58mmol)於無水二噁烷(2mL)中之混合物用氬吹掃，且在120℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯(5x)萃取。將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物藉由質譜定向之HPLC(C18管柱，10至95%乙腈/水+0.1%甲酸)純化，得到標題化合物(68mg，36%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.47，[M+H]+ =641，方法=K。
步驟3：(±)-1-{2-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]-吡啶-4-基}丙-1-醇
將(±)-1-{2-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡啶-4-基}丙-1-醇(68mg，0.106mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4.5小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物在矽石(用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離)上層析，得到標題化合物(26mg，61%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.04，[M+H]+ =401，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.94(寬 s,1H),9.35(s,1H),8.51(s,1H),8.50(d,J =5.1Hz,1H),8.25(s,1H),8.20(d,J =5.1Hz,1H),7.35(寬m,4H),6.87(寬m,2H),5.33(d,J =4.2Hz,1H),4.43(m,1H),2.79(q,J =7.5Hz,2H),1.61(m,2H),1.11(t,J =7.5Hz,3H),0.87(t,J =7.3Hz,3H)
實例81： {6-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基胺基]吡啶-2-基}甲醇(化合物83)
步驟1：{6-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡啶-2-基}甲醇
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)、(6-氯吡啶-2-基)甲醇(83mg，0.58mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(13mg，0.015mmol)、X-Phos(15mg，0.03mmol)及碳酸銫(189mg，0.58mmol)於無水二噁烷(2mL)中之混合物用氬吹掃，且在120℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯萃取四次。將有機萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用50至100%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(56mg，32%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.36，[M+H]+ =613，方法=K。
步驟2：{6-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡啶-2-基}甲醇
將{6-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡啶-2-基}甲醇(56mg，0.092mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物在矽石(用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離)上層析，得到標題化合物(25mg，73%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.81，[M+H]+ =373，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.86(s,1H),9.31(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J =5.1Hz,1H),8.27(s,1H),7.66(t,J =7.7Hz,1H),7.34(d,J =5.1Hz,1H),7.25(d,J =7.7Hz,1H),7.16(寬，2H),6.97(d,J =5.1Hz,1H)),6.86(s,1H),5.34(t,J =6.0Hz,1H),4.55(d,J =6.0Hz,2H),2.80(q,J =7.5Hz,2H),1.11(t,J =7.5Hz,3H)。
實例82： 1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基]醯胺(化合物84)
步驟1：4-(4-乙氧基羰基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將1H-吡唑-4-羧酸乙酯(0.20g，1.40mmol)及4-甲烷磺醯基氧基哌啶-1-羧酸第三丁酯(0.36g，1.30mmol)於無水DMF(5mL)中之混合物冷卻至0℃。添加氫化鈉(60%於礦物油中，78mg，1.95mmol)，且將混合物在0℃攪拌0.5小時，隨後在50℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用二乙醚及水稀釋，且分離各相。將水相用醚再次萃取。將合併之有機級份用水(4x)及鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用0至50%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(0.183g，44%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.27，[M+H]+ -C4 H8 -乙醇=222，方法=K。
步驟2：4-(4-羧基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將4-(4-乙氧基羰基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(0.183g，0.57mmol)及氫氧化鉀(0.127g，2.27mmol)於甲醇(2mL)及水(0.5mL)中之混合物在室溫下攪拌16小時。隨後將溶劑在真空下除去，且將殘餘物用5%水性硫酸氫鉀處理以酸化，隨後用乙酸乙酯(5x)萃取。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發，得到標題化合物(0.158g，94%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.58，[M+H]+ -C4 H8 =240，[M-H]- =294，方法=K。
步驟3：4-{4-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺甲醯基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸第三丁酯
向4-(4-羧基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(158mg，0.54mmol)於無水二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加草醯氯(0.091mL，1.07mmol)及DMF(2滴)。將混合物在室溫下攪拌3小時。添加進一步部分之草醯氯(0.09mL)，且繼續攪拌2小時。隨後將混合物蒸發。將殘餘物用無水氯仿共沸兩次，隨後在真空下乾燥，得到粗品酸性氯化物。將此材料(0.54mmol粗品)、3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(150mg，0.29mmol)及吡啶(0.12mL，1.44mmol)於無水二氯甲烷(2.5mL)中之混合物在室溫下攪拌22小時，隨後添加水且分離各相。將水相用二氯甲烷(4x)萃取。將合併之有機級份用甲醇處理，乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物藉由質譜定向之HPLC(C18管柱，10至95%乙腈/水+0.1%甲酸)純化，得到標題化合物(34mg，8%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.69，[M+H]+ =783，方法=K。
步驟4：1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-羧酸[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基]醯胺
將4-{4-[8-[雙(4-甲氧基苄基)胺基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺甲醯基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸第三丁酯(34mg，0.043mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱2.5小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物用二氯甲烷濕磨，且在真空下乾燥，得到標題化合物(12mg，63%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.81，[M+H]+ =443，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.28(寬s,1H),9.40(s,1H),8.55(s,1H),8.51(s,1H),8.47(d,J =5.1Hz,1H),8.32(s,1H), 8.11(s,1H),7.30(d,J =5.1Hz,1H),7.04(寬，2H),6.95(s,1H),4.25(m,1H),3.07(m,2H，藉由水掩蔽)，2.80(q,J =7.5Hz,2H),2.64(m,2H),2.02(m,2H),1.80(m,2H),1.11(t,J =7.5Hz,3H)。
實例83： 2-{4-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 啶-3-基胺基]吡唑-1-基}乙醇(化合物85)
步驟1：4-溴-1-[2-(四氫吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑
在0℃下將氫化鈉(60%於礦物油中，0.65g，16.3mmol)添加至4-溴-1H-吡唑(0.80g，5.44mmol)於無水DMF(20mL)中之溶液中。將混合物在0℃攪拌0.5小時，隨後滴加2-(2-溴乙氧基)四氫吡喃(1.71g，8.16mmol)。將混合物在0℃再攪拌1小時，隨後使其溫熱至室溫隔夜。謹慎添加水，接著添加乙酸乙酯及更多水。分離各相，且將水相用乙酸乙酯(2x)萃取。將合併之有機級份用鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將殘餘物在矽石(用0至50%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(1.40g，94%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.96，[M+H-THP]+ =191/193，方法=K。
步驟2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-{1-[2-(四氫吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-[2,7]啶-1,6-二胺
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-[2,7]啶-1,6-二胺(160mg，0.32mmol)、4-溴-1-[2-(四氫吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(176mg，0.64mmol)、2-(二第三丁基膦基)-2',4',6'-三異丙基-3,6-二甲氧基聯苯(15mg，0.03mmol)及t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(27mg，0.03mmol)於無水1,4-二噁烷(3mL)中之混合物用氬吹掃。添加雙(三甲基矽基)胺化鋰(1M於甲苯中，1.32mL，1.32mmol)，且將混合物在100℃下加熱16小時。將冷卻之混合物用水稀釋，且用乙酸乙酯(5x)萃取。將萃取物乾燥(Na2 SO4 )且蒸發。將粗產物在矽石(用0至100%乙酸乙酯/環己烷溶離)上層析，得到標題化合物(70mg，31%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=3.14，[M+H]+ =700，方法=K。
步驟3：2-{4-[8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]啶-3-基胺基]吡唑-1-基}乙醇
將3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-雙(4-甲氧基苄基)-N6-{1-[2-(四氫吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-[2,7]啶-1,6-二胺(70mg，0.10mmol)於TFA(2mL)中之溶液在80℃下加熱4小時，隨後蒸發。將殘餘物上樣至2g SCX-2芯子上，且用甲醇溶離，隨後用甲醇中之2M氨溶離。將氨級份蒸發，且將殘餘物在矽石(用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離)上層析，得到標題化合物(22mg，59%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.93，[M+H]+ =376，方法=J；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.21(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H & d,J =5.1Hz,1H),7.91(s,1H), 7.49(s,1H),7.32(d,J =5.1Hz,1H),7.04(寬，2H),6.71(s,1H),6.63(s,1H),4.89(t,J =5.5Hz,1H),4.12(t,J =5.8Hz,2H),3.74(q,J =5.8Hz,2H),2.78(q,J =7.5Hz,2H),1.09(t,J =7.5Hz,3H)。
實例84： (±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯啶-3-基-2,7- 啶-1,6-二胺(化合物120)
步驟1：3-羥基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯
將NaBH4 (0.3g，7.9mmol)逐份添加至N-Boc-3-吡咯啶酮(1.2g，6.48mmol)於甲醇(15mL)中之溶液中。將所得混合物在25℃攪拌1h。向反應混合物中添加H2 O(3mL)且將混合物濃縮。將殘餘物用矽膠層析術(PE：EA=1：1至EA)純化，得到呈無色油狀之(±)-3-羥基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(1.1g，91%收率)。LCMS(ESI)[M+23]+ =210.1。
步驟2：(±)-3-[第三丁氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯
將DIAD(550mg，2.72mmol)添加至N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(300mg，0.95mmol)、(±)-3-羥基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(400mg，2.14mmol)及PPh3 (550mg，2.1mmol)於四氫呋喃(15mL)中之混合物中。將所得混合物在50℃在Ar下攪拌18h。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層 析術(PE：EA=4：1)純化，得到呈黃色油狀之(±)-3-[第三丁氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(粗品，600mg，混有一些DIAD+2)。LCMS(ESI)[M-Boc]+ =383.1。
步驟3：(±)-3-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯
將(±)-3-[第三丁氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(600mg，粗品)於氫氧化銨(10mL)、1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在90℃在密封管中攪拌3h。將反應混合物冷卻至室溫且蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(PE：EA=1：2至1：3)純化，得到呈無色油狀之(±)-3-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(310mg，70%收率，對於兩個步驟)。LCMS(ESI)[M+H]+ =464.2。
步驟4：(±)-3-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯
將(±)-3-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(310mg，0.67mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(170mg，0.78mmol)、XPhos Pd G2(70mg，0.09mmol)、XPhos(70mg，0.15mmol)及K2 CO3 (310mg，2.25mmol)於1,4-二噁烷(16mL)及水(4mL)中之混合物在100℃在Ar下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(100mL)稀釋，且用鹽水(30mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且 蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(EA至EA：MeOH=20：1)純化，得到呈褐色固體狀之(±)-3-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(250mg，72%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =521.3。
步驟5：(±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯啶-3-基-2,7-啶-1,6-二胺
將(±)-3-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-第三丁氧基羰基-胺基]吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(250mg，0.48mmol)於2,2,2-三氟乙酸(4mL)、二氯甲烷(12mL)中之混合物在25℃攪拌1h。將反應混合物蒸發。將殘餘物溶於MeOH(2mL)中，且藉由添加7N NH3 /MeOH將pH調整至9至10。將混合物藉由急驟層析術(C18，HCOOH/MeOH/H2 O)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯啶-3-基-2,7-啶-1,6-二胺之雙甲酸鹽(140mg，71%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.34，[M+H]+ =321.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.20(s,1H),8.52(s,1H),8.47(d,J =5.2Hz,1H),8.41(brs,2H),7.42(d,J =5.2Hz,1H),6.78(s,1H),6.65(s,1H),4.69-4.66(m,1H),3.66-3.54(m,2H),3.48-3.37(m,2H),2.48-2.41(m,1H),2.44(s,3H),2.20-2.15(m,1H)。
實例85： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1H-吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物121)
步驟1：3-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑
將3-碘-1H -吡唑(5g，25.78mmol)、3,4-二氫-2H -吡喃(10g，118.88mmol)、p-TsOH(900mg，5.23mmol)於四氫呋喃(100mL)中之混合物回流隔夜。將反應混合物冷卻至室溫，且用飽和NaHCO3 (20mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠管柱層析術(PE：EA=20：1至10：1)純化，得到呈淡黃色油狀之3-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑(7g，98%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =300.9。1 H NMR(400MHz,CDCl3 )δ 7.45(d,J =2.4Hz,1H),6.46(d,J =2.4Hz,1H),5.39-5.36(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.72-3.66(m,1H),2.10-2.01(m,2H),1.73-1.54(m,4H)。
步驟2：(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲酯
將3-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑(6.6g，23.73mmol)、丙烯酸甲酯(7.5mL，83.29mmol)、Pd(OAc)2(660mg，2.95mmol)、三(鄰甲苯基)膦(2g，6.58mmol)、TEA(7g，69.31mmol)於乙腈(80mL)中之混合物在Ar下在110 oC劇烈回流2h。將反應混合物冷卻至室溫且蒸發。將殘餘物用矽膠管柱層析術(PE：EA=8：1至6：1至4：1)純化，得到呈褐色油狀之(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲酯(4.6g，82%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=237.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.71(d,J=16.0Hz,1H),7.61(d,J=2.4Hz,1H),6.55(d,J=2.4Hz,1H),6.44(d,J=16.0Hz,1H),5.42-5.38(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.76-3.69(m,1H),2.15-2.04(m,2H),1.74-1.62(m,4H)。
步驟3：(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸甲酯
在25℃下將t-BuOK(3.87g，34.55mmol)逐份添加至碘化三甲基氧化鋶(7.74g，35.17mmol)於二甲亞碸(50mL)中之溶液中。將混合物在25℃攪拌0.5h。在25℃下隨後將(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲酯(3.87g，16.38mmol)於二甲亞碸(10mL)中之溶液滴加至反應混合物中。將混合物在25℃攪拌2h。將反應混合物用飽和NH4 Cl(150mL)中和，且用EA(50mL x 3)萃取。將合併之EA層合併，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠管柱層析術(PE：EA=4：1)純化，得到呈淡黃色油狀之反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸甲酯(1.1g，27%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =251.1。
步驟4：(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸甲酯(1.07g，4.28mmol)及LiOH H2 O(1.07g，25.48mmol)於四氫呋喃(20mL)及水(20mL)中之混合物在20℃攪拌3h。將反應混合物蒸發以除去有機溶劑。將殘餘物水層用濃HCl酸化至pH=4，且用EA(50mL x 3)萃取。將合併之EA層合併，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發，得到呈淡黃色油狀之粗品(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸(1g，99%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =259.1。
步驟5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下將POCl3 (500mg，3.27mmol)滴加至(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧酸(350mg，1.48mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(250mg，1mmol)及吡啶(2mL，24.73mmol)於二氯甲烷(40mL)中之混合物中。將混合物在20℃攪拌1h。將反應混合物用H2 O(15mL)稀釋。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(PE：EA：DCM=4：2：1至2：2：1)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(340mg，79%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =454.0。
步驟6：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(340mg，0.79mmol)及氫氧化銨(10mL)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在90℃在密封管中攪拌3.5h。將反應混合物冷卻至室溫且蒸發，產生呈淡黃色固體狀之粗品(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(320mg，99%收率)。將粗產物直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =413.1。
步驟7：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(320mg，0.78mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(200mg，0.91mmol)、XPhos Pd G2(50mg，0.06mmol)、XPhos(60mg，0.13mmol)及K2 CO3 (350mg，2.54mmol)於1,4-二噁烷(16mL)、水(4mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫，且用EA(50mL)稀釋。將混合物用鹽水(20mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(EA至EA：MeOH=10：1)純化，得到呈褐色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(340mg，93%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =470.2。
步驟8：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(340mg，0.72mmol)及2,2,2-三氟乙酸(2mL)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在20℃攪拌3h。將反應混合物濃縮。將殘餘物再溶於MeOH(3mL)中。添加7N NH3 於MeOH中之溶液直至pH=9至10。將 混合物用急驟層析術(C18，NH4 HCO3 /MeOH/H2 O)純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-3-基)環丙烷羧醯胺(110mg，39%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.54，[M+H]+ =386.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.54(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.99(s,1H),6.16(d,J =1.6Hz,1H),2.62-2.57(m,1H),2.46(s,3H),2.31-2.27(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
實例86： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物122)
步驟1：4-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑
向經攪拌之4-碘吡唑(5.0g，25.8mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加TsOH H2O(0.5g，2.9mmol)及3,4-二氫-2h-吡喃(4.5g，53.5mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌2h。將反應混合物在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱純化，用乙酸乙酯/石油醚(1：3)溶離，得到呈無色油狀之所要產物4-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑(7g，93%收率)。LCMS(ESI)：[M-84+H]+=195.1。
步驟2：(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲酯
將4-碘-1-四氫吡喃-2-基-吡唑(6.7g，24.1mmol)、丙烯酸甲酯(7.0g，81.3mmol)、TEA(4mL，28.8mmol)、Pd(OAc)2 (550mg，2.5mmol)及亞磷酸三甲酯(600mg，4.8mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(50mL)中之溶液在N2 下在110℃攪拌3h。將反應物過濾且濃縮。將反應混合物用H2 O(50mL)及EtOAc(100ml)稀釋。隨後將有機層用水及鹽水溶液洗滌，乾燥(MgSO4 )且濃縮。將粗品隨後藉由急驟管柱層析術用50% EtOAc於異己烷中溶離來純化，得到呈黃色油狀之(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲酯(4g，70%收率)。LCMS(ESI)：[M+23]+ =259.1。
步驟3：(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧酸甲酯
將碘化三甲基側氧基鋶(2.7g，12.3mmol)、NaH(500mg，12.5mmol，60%於油中)於二甲亞碸(25mL)中之混合物在N2 下在室溫下攪拌0.5h。添加二甲亞碸(50ml)中之(E)-3-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲酯(2.5g，10.6mmol)。在N2 下在起始烯烴完全消失之情況下攪拌混合物。添加飽和氯化銨水溶液及水且將產物用乙酸乙酯萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥且過濾，且濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(己烷-乙酸乙酯100：0至60：40)純化，得到呈無色油狀之2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧酸甲酯(750mg，25.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+23]+ =273.1。
步驟4：(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧酸
在室溫下向2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧酸甲酯(300mg，1.2mmol)於四氫呋喃(27mL)及水(9mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(300mg，7.2mmol)，且將反應混合物攪拌8h。將所得反應混合物濃縮至乾燥，用水(10mL)稀釋且用EtOAc(3×80mL)洗滌。用濃HCl水溶液將水相酸化至pH=4，且用DCM(3×20mL)萃取。將DCM萃取物合併，且在減壓下乾燥，得到呈無色油狀之標題化合物(270mg，95%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =237.2。
步驟5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(270mg，1.3mmol)及(±)-反式-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧酸(270mg，1.1mmol)於吡啶(10mL)中之混合物中添加氧氯化磷(270mg，1.8mmol)。將所得混合物在0℃攪拌1h。隨後將反應飽和NaHCO3 水溶液淬滅，且用EA(20mL×2)萃取。將合併之EA萃取物在真空中濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(PE：EA=3：1至1：3)純化，得到呈無色油狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(300mg，61%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+=432.1。
步驟6：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(300mg，0.69mmol)及NH4 OH(8mL，0.69mmol)於1,4-二噁烷(8mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱4h。將反應物濃縮至乾燥。粗材料不經進一步純化即直接使用。LCMS(ESI)：[M+H]+ =413.1。
步驟7：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(240mg，0.58mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(160mg，0.73mmol)、Pd(dppf)Cl2 (80mg，0.11mmol)及Na2 CO3 (200mg，1.89mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱1h。粗品(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(300mg，88%收率)不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =470.2。
步驟8：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(300mg，0.64mmol)及TFA(10mL，134.6mmol)於二氯甲烷(20mL)中之混合物在室溫下攪拌1h。將混合物藉由MeOH中之NH3 中和且濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(68mg，28%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.240，[M+H]+ =386.1，方法=G；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.62(s,1H),10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.62(s,1H),7.37(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.97(s,1H),2.41(s,3H),2.27-2.19(m,2H),1.50-1.36(m,1H),1.27-1.11(m,1H)。
實例87： 外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(2-甲氧基乙基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物124)
向外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(100mg，0.28mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中之混合 物中添加2-溴乙基甲醚(50mg，0.36mmol)及DIPEA(107mg，0.83mmol)。將混合物在25℃攪拌3d。將混合物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-甲氧基乙基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(39mg，34%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.775，[M+H]+ =419.2，方法=I-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.27(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.96(s,1H),3.51(t,J =5.6Hz,2H),3.37(s,3H),3.20-3.18(m,2H),2.70(t,J =5.6Hz,2H),2.56-2.63(m,2H),2.45(s,3H),2.24-2.22(m,1H),2.05(s,2H)。
實例88： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物125)
步驟1：(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(270mg，1.26mmol)、5-第三丁氧基羰基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧酸(365mg，1.51mmol)及吡啶(1.0mL，12.61mmol)於DCM(5mL)中之混合物中添加POCl3 (212mg，1.39mmol)。添加完成後，將反應溶液在室溫下攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由急驟管柱層析 術用20% EA於PE中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(290mg，52%收率)。LCMS(ESI)：[M-56]+ =381.1。
步驟2：(±)-反式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯
將(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(290mg，0.66mmol)及NH4 OH(2mL)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在密封管中在80℃下加熱3h。將混合物濃縮，且將粗產物中用水及PE洗滌，得到呈白色固體狀之反式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(213mg，77%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =418.2。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺
向密封管中添加(±)-反式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(340mg，)、K2 CO3 (3當量)、Pd(dppf)Cl2 (0.2當量)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(1.3當量)、1,4-二噁烷(20mL)及水(1mL)。將混合物用N2 鼓泡2min且在110℃攪拌3h。將反 應物濃縮，且向所得殘餘物中添加DCM(3mL)及TFA(0.5mL)。將混合物在室溫下攪拌2h。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(47mg，37%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.390，[M+H]+ =375.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J =4.8Hz,1H),6.97(s,1H),3.29-3.20(m,4H),2.45(s,3H),2.25-2.22(m,1H),2.11-2.04(m,1H),2.00-1.1.94(m,1H),1.45-1.43(m,1H),1.34-1.31(m,1H)。
實例89： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物126)
步驟1：(±)-順式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(270mg，1.26mmol)、5-第三丁氧基羰基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧酸(365mg，1.51mmol)及吡啶(1.0mL，12.61mmol)於DCM(5mL)中之混合物中添加POCl3 (212mg，1.39mmol)。將反應溶 液在室溫下攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由急驟管柱層析術用20% EA於PE中溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(210mg，38%收率)。LCMS(ESI)：[M-56]+ =381.1。
步驟2：(±)-順式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯
將(±)-順式-1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(210mg，0.48m(±)-mol)及NH4 OH(2mL)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在密封管中加熱至80℃達3h。將混合物濃縮，且將粗產物用水及PE洗滌，得到呈白色固體狀之(±)-順式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(155mg，77%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =418.2。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺
向密封管中添加(±)-順式-1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-羧酸第三丁酯(340mg，)、K2 CO3 (3當量)、Pd(dppf)Cl2 (0.2 當量)及4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(1.3當量)、1,4-二噁烷(20mL)及水(1mL)。將混合物用N2 鼓泡2min且在110℃攪拌3h。將反應混合物濃縮，且向殘餘物中添加DCM(3mL)及TFA(0.5mL)。將混合物在室溫下攪拌2h。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(44mg，31%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.413，[M+H]+ =375.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.15-3.08(m,2H),3.03-2.91(m,2H),2.46(s,3H),2.16-2.13(m,1H),2.03-1.98(m,2H),1.48-1.45(m,1H),1.26-1.24(m,1H)。
實例90： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物127)
向(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(30mg，0.08mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中之混合物中添加2-溴乙基甲醚(14mg，0.10mmol)及DIPEA(31mg，0.24mmol)。將混合物在25℃攪拌3天。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(13mg，38%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.723， [M+H]+ =433.2，方法=I-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.53-3.50(m,2H),3.33(s,3H),2.87-2.69(m,6H),2.45(s,3H),2.13-1.92(m,3H),1.43-1.41(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。
實例91： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物128)
向(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(30mg，0.08mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中之混合物中添加2-溴乙基甲醚(14mg，0.10mmol)及DIPEA(31mg，0.24mmol)。將混合物在25℃攪拌3天。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(22mg，64%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.763，[M+H]+ =433.3，方法=I-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.97(s,1H),3.56-3.53(m,2H),3.36(s,3H),2.91-2.60(m,6H),2.45(s,3H),2.12-1.96(m,3H),1.40-1.37(m,1H),1.21-1.18(m,1H)。
實例92： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(化合物129)
步驟1：(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸
在-78℃下將n-BuLi(2.5M於己烷中，1.1mL，2.75mmol)之溶液滴加至3-溴-4-乙氧基-吡啶(500mg，2.47mmol)、硼酸三異丙酯(930mg，4.94mmol)於四氫呋喃(5mL)中之溶液中。將混合物在-78℃攪拌0.5h，隨後溫熱至20℃，且攪拌0.5h。將反應混合物用H2 O(5mL)淬滅，且將水層分離且用EA(10mL)洗滌。將水層藉由濃HCl酸化至pH 4至5，且用EA(10mL x 3)洗滌。將水層分離且蒸發，且將殘餘物用急驟層析術(C18,HCOOH/MeOH/H2 O)純化，得到呈白色固體狀之(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸(110mg，27%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =168.1。
步驟2：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.35mmol)、(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸(110mg，0.66mmol)、XPhos Pd G2(30mg，0.04mmol)、XPhos(40mg，0.08mmol)及K2 CO3 (150mg，1.09mmol)於1,4-二噁烷(16mL)及水(4mL)中之混合物在100℃在Ar下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫且用EA(100mL)稀釋。將混合物用鹽水(20mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(EA至EA：MeOH=10：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(75mg，58%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.639，[M+H]+ =375.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ11.28(brs,1H),9.37(s,1H),8.95(s,1H),8.42(d,J =5.6Hz,1H),8.15(s,1H),7.42(s,1H),7.31(brs,2H),7.14(d,J =5.6Hz,1H),4.23(q,J =7.2Hz,2H),2.78-2.74(m,1H),2.19-2.15(m,1H),1.64-1.59(m,1H),1.47-1.42(m,1H),1.39(t,J =7.2Hz,3H)。
實例93： 1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-甲基-脲(化合物130)
步驟1：1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲
向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(500mg，2.0mmol)於四氫呋喃(30mL)中之混合物中添加三乙胺(8mL，57.4mmol)及三光氣(600mg，2.02mmol)。將混合物在室溫下攪拌10min，之後添加甲胺鹽酸鹽(1400mg，20.73mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術 用乙酸乙酯/石油醚(1/1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(190mg，31%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =271.0。
步驟2：1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲
將1-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(170mg，0.63mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及氫氧化銨(25%，4mL，212.71mmol)中之混合物在90℃攪拌4h。將混合物濃縮至乾燥，得到呈黃色固體狀之粗品1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(220mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =252.1。
步驟3：1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-甲基-脲
將1-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-甲基-脲(220mg，0.87mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(176mg，0.80mmol)、X-Phos-Pd-G2(48mg，0.06mmol)、X-Phos(56mg，0.12mmol)及K2 CO3 (180mg，1.3mmol)於1,4-二噁烷(6mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在90℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術在矽膠上用乙基甲醇/二氯甲烷(1/10至1/7)純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-甲基-脲(64mg，24%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =309.2，RT (min)=1.35，方法=E；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.26(s,2H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.30(d,J =4.8Hz,1H),7.26(s,2H),7.13(d,J =4.4Hz,1H),6.88(s,1H),2.72(d,J =4.8Hz,3H),2.41(s,3H)。
實例94： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(化合物131)
步驟1：(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸第三丁酯
將丙烯酸第三丁酯(12mL，81.92mmol)、3-碘吡啶(6.15g，30mmol)、三(鄰甲苯基)膦(2.1g，6.91mmol)、Pd(OAc)2 (767mg，3.42mmol)及三乙胺(12mL，86.1mmol)於乙腈(50mL)中之混合物在Ar下在95℃攪拌2h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油1/3至1/1)純化，得到呈黃色固體狀之(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸第三丁酯(5.55g，90%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =206.1。
步驟2：(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸第三丁酯
在室溫下將第三丁醇鈉(520mg，5.41mmol)添加至碘化三甲基氧化鋶(1.1g，5mmol)於二甲亞碸(10mL)中之溶液中。將混合物在Ar下在室溫下攪拌20min。將反應混合物緩慢滴加至(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸第三丁酯(1.0g，4.87mmol)於二甲亞碸(10mL)中之溶液中。將混合物在Ar下在室溫下攪拌1h。 將反應混合物用飽和NH4 Cl稀釋，且用乙酸乙酯萃取。將有機層濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色液體狀之(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸第三丁酯(550mg，43%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =220.2。
步驟3：(±)-反式-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸
將(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸第三丁酯(550mg，2.51mmol)於三氟乙酸(2mL，25.96mmol)中之溶液在室溫下攪拌1h。將溶液濃縮至乾燥，得到呈無色液體狀之粗品(±)-反式-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸(300mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =164.1。
步驟4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-(3-吡啶基)環丙烷羧酸(300mg，1.84mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(400mg，1.87mmol)及吡啶(3mL，37.09mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在室溫下攪拌。在室溫下將POCl3 (0.5mL，5.36mmol)滴加至混合物中。將混合物在室溫下攪拌1h，且隨後用1ml水稀釋。將混合物濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚，30至100%)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(220mg，31%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =359.0。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(220mg，0.61mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及氫氧化銨(25%，3mL，159.53mmol)中之混合物在95℃攪拌3h。將混合物濃縮至乾燥，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(250mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =340.1。
步驟6：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(250mg，0.74mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(180mg，0.82mmol)、X-Phos-Pd-G2(46mg，0.06mmol)、X-Phos(68mg，0.14mmol)及K2 CO3 (266mg，1.93mmol)於1,4-二噁烷(7mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌1h。將反應物濃縮且藉由管柱層析術(乙基甲醇/二氯甲烷，1/10至1/7)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(3-吡啶基)環丙烷羧醯胺(130mg，45%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =397.2，RT (min)=1.27，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.51(d,J =2.0Hz,1H),8.45-8.42(m,2H),8.28(s,1H),7.57(d,J=8.0Hz,1H),7.35-7.31(m,4H),6.99(s, 1H),2.48-2.46(m,1H),2.46-2.45(m,1H),2.42(s,3H),1.59-1.54(m,1H),1.50-1.46(m,1H)。
實例95： (±)-反式-N-[8-胺基-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-2,7- 啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(化合物132)
將含(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(120mg，0.42mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑(130mg，0.50mmol)、X-Phos-Pd-G2(22mg，0.03mmol)、X-Phos(27mg，0.06mmol)及乙酸鉀(100mg，1.02mmol)之密封管在微波反應器中加熱至130℃達1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由逆相層析術(甲醇0至60/0.1%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(28mg，17%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =388.0，RT (min)=1.76，方法=E；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.11(s,1H),8.09(s,2H),6.93(s,1H),2.55-2.50(m,1H),2.06-2.01(m,1H),1.52-1.42(m,2H)。
實例96： 1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-[(1R,2R)-2-羥基環戊基]脲(化合物133)
步驟1：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲
將三光氣(110mg，0.37mmol)於四氫呋喃(5mL)中之溶液添加至3-氯-N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(100mg，0.2mmol)及三乙胺(0.5mL，3.59mmol)之混合物中。將混合物在室溫下攪拌10min，之後添加(3R)-3-羥基吡咯啶-2-酮(200mg，1.98mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(乙酸乙酯，隨後為甲醇/二氯甲烷，1/15)純化，得到呈黃色固體狀之[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯(52mg，31%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =622.2。
步驟2：[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯
將含[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯(52mg，0.08mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(30mg，0.14mmol)、X-Phos-Pd-G2(8.0mg，0.01mmol)、X-Phos(10.0mg，0.02mmol)及乙酸鉀(30mg，0.31mmol)之密封管在Ar下在100℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(甲醇/二氯甲烷，1/15)純化，得到呈黃色固體狀之[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯(47mg，44.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =679.3。
步驟3：[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯
將[(3R)-2-側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯(47mg，0.07mmol)於三氟乙酸(3.0mL，38.94mmol)中之溶液在55℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由逆相層析術(甲醇50%於0.05%氨於水中)純化，得到呈白色固體狀之[(3R)-2- 側氧基吡咯啶-3-基]N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基甲酸酯(8mg，30%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =379.2，RT (min)=1.45，方法=F；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.50(s,1H),9.33(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.97(s,1H),7.32-7.27(m,3H),6.99(s,1H),5.24(t,J =4.4Hz,1H),3.29-3.24(m,2H),2.42(s,3H),2.06-1.88(m,2H)。
實例97： 1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲(化合物134)
步驟1：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲
將N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(500mg，0.81mmol)、(1S,2S)-2-胺基環戊醇(300mg，2.97mmol)及三乙胺(1.0mL)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之溶液在90℃甲苯2h。向反應混合物中添加20mL鹽水，且將混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。隨後將有機物分離， 濃縮至乾燥，且將所得殘餘物藉由管柱層析術(乙基乙酸乙酯)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲(148mg，25%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =622.2。
步驟2：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲
將含1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲(148mg，0.24mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(70mg，0.32mmol)、X-Phos-Pd-G2(20mg，0.03mmol)、X-Phos(24mg，0.05mmol)及K2 CO3 (100.0mg，0.72mmol)之密封管在Ar下在100℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(甲醇/二氯甲烷，1/10)純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲(140mg，59%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =679.3。
步驟3：1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲(140mg，0.21mmol)於三氟乙酸(3.0mL，38.94mmol)中之溶液在55℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由製備型HPLC(乙腈/0.1% HCOOH於水中)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羥基環戊基]脲之甲酸鹽(14mg，18%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =379.1，RT (min)=1.64，方法=E；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.26(s,1H),9.09(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.20(s,1H),7.79(s,1H),7.30(d,J =4.8Hz,1H),7.24(s,3H),3.87-3.83(m,1H),3.78-3.72(m,1H),2.41(s,3H),2.05-2.00(m,1H),1.85-1.78(m,1H),1.71-1.60(m,2H),1.53-1.46(m,1H),1.42-1.35(m,1H)。
實例98： (±)-((反式-)-N-(8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-6-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物135)
步驟1：(±)-(反式-)-N-(8-胺基-6-(3-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(130mg，0.45mmol)、3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(178mg，0.45mmol)、K2 CO3 (146mg，0.45mmol)及Pd(dppf)Cl2 (33mg，0.045mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(1mL)中之混合物在100℃攪拌2h。將混合物濃縮且藉由急驟管柱層析術(0至100% EA於PE中)純化，得到呈褐色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(120mg，51%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =521.2
步驟2：(±)-(反式-)-N-(8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-胺基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.19mmol)、TFA(1mL)及TfOH(1mL)中之混合物在25℃攪拌2小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7M)鹼化。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈17至47%於0.05% HCOOH於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(18mg，24%收 率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.419，[M+H]+ =401.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.24(s,1H),9.37(s,1H),8.17(s,1H),8.15(s,1H),7.31(s,1H),7.27(s,2H),6.98(s,1H),6.88(s,1H),2.78-2.73(m,1H),2.37(s,3H),2.17-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.45-1.41(m,1H)。
實例99： (±)-順式-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺(化合物136)
步驟1：(±)-順式-2-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙烷羧酸甲酯
向(±)-順式-2-(甲氧基羰基)環丙烷羧酸(263mg，1.83mmol)及DMF(10mg)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加乙烷二醯二氯(278mg，2.2mmol)。將混合物在25℃攪拌1h。將混合物濃縮，且添加至N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(900mg，1.83mmol)及吡啶(2mL)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中。將混合物在25℃攪拌1h。將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(0至100% EA於PE中)純化，得到呈褐色固體狀之N1,N1-雙[(4- 甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(700mg，75%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =618.2
步驟2：(±)-順式-2-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙烷羧酸
向(±)-順式-2-[[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸甲酯(100mg，0.16mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加1N NaOH(0.32mL)。將混合物在25℃攪拌16小時。將混合物用2N HCl酸化，用EA(30mLx2)萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品(±)-順式-2-[[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸(70mg，72%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =604.2
步驟3：(±)-(順式)-N1-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺
向(±)-順式-2-[[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸(200mg，0.33mmol)、HATU(125mg，0.33mmol)及DIPEA(128mg，0.99mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加 N,N-二甲胺鹽酸鹽(135mg，1.66mmol)。將混合物在25℃攪拌16小時。將混合物用水(5mL)洗滌且濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品(±)-順式-N2-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N1,N1-二甲基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(160mg，51%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =631.3
步驟4：(±)-(順式)-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺
將(±)-順式-N2-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N1,N1-二甲基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(80mg，0.13mmol)於TFA(3mL)中之混合物在25℃攪拌4小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7M)鹼化。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至70於0.05% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N2-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N1,N1-二甲基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(3mg，6.1%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.402，[M+H]+ =391.2，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.26(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.28(s,1H),7.40(d,J =4.8Hz,1H),6.98(s,1H),3.18(s,3H),2.93(s,3H),2.45(s,3H),2.43-2.41(m,1H),2.35-2.29(m,1H),1.73-1.69(m,1H),1.38-1.33(m,1H)。
實例100： (±)-(順式)-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-N2-乙基環丙烷-1,2-二羧醯胺(化合物137)
步驟1：(±)-順式-N1-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2-乙基環丙烷-1,2-二羧醯胺
向(±)-順式-2-[[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸(200mg，0.33mmol)、HATU(125mg，0.33mmol)及DIPEA(128mg，0.99mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加乙胺鹽酸鹽(135mg，1.66mmol)。將混合物在25℃攪拌16小時。將混合物用水洗滌，且用DCM(15mLx2)萃取。將有機物濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品(±)-順式-N1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N2-乙基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(150mg，72%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =631.2
步驟2：(±)-順式-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2-乙基環丙烷-1,2-二羧醯胺
將(±)-順式-N1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N2-乙基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(80mg，0.13mmol)及TFA(2mL)中之混合物在60℃攪拌2小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7M)鹼化。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至70%於0.05% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N2-乙基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(6mg，12.1%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.428，[M+H]+ =391.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.24-3.18(m,2H),2.45(s,3H),2.30-2.26(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.72-1.69(m,1H),1.34-1.30(m,1H),1.11(t,J =7.2Hz,3H)。
實例101： (±)-反式-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺(化合物138)
步驟1：(±)-反式-2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙烷羧酸甲酯
向(±)-反式-2-甲氧基羰基環丙烷羧酸(109mg，0.76mmol)及DMF(10mg)於二氯甲烷(15mL)中之溶液中添加乙烷二醯二氯(120mg，0.95mmol)。將混合物在25℃攪拌1小時，且隨後濃縮。將殘餘物添加至N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(350mg，0.63mmol)及吡啶(0.5mL)於二氯甲烷(15mL)中之溶液中。將混合物在25℃再攪拌1h。將混合物濃縮，得到(±)-反式-2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸甲酯(560mg，29%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =678.3。
步驟2：(±)-反式-2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙烷羧酸
將(反式)-2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸甲酯(560mg，0.18mmol)及1N LiOH(0.73mL)於四氫呋喃(10mL)中之混合物在25℃攪拌16小時。將混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋。將水層用1N HCl酸化，且用乙酸乙酯(15mLx2)萃取。有機層濃縮，得到呈褐色固體狀之(±)-(反式-)-2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸(120mg，40%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =664.3。
步驟3：(±)-反式-N1-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺
將(±)-反式-2-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙烷羧酸(120mg，0.07mmol)、N,N-二甲胺鹽酸鹽(29mg，0.36mmol)、HATU(27mg，0.07mmol)及DIPEA(27mg，0.22mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在25℃攪拌16h。將混合物用H2 O(10mL)洗滌，濃縮，且殘餘物不經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS(ESI)：[M+H]+ =691.3
步驟4：(±)-反式-N1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-N2,N2-二甲基環丙烷-1,2-二羧醯胺
將(±)-反式-N2-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N1,N1-二甲基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(150mg，0.22mmol)於TFA(8mL)中之混合物在50℃攪拌3小時。將混合物濃縮且用甲醇中之NH3 (7M)鹼化。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至70/0.5% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N2-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-N1,N1-二甲基-環丙烷-1,2-二羧醯胺(40mg，47%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.522，[M+H]+ =391.2，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.05(s, 1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.32(d,J =4.8Hz,1H),7.30(s,2H),6.97(s,1H),3.12(s,3H),2.86(s,3H),2.48-2.45(m,1H),2.41(s,3H),2.39-2.35(m,1H),1.28-1.25(m,1H)。
實例102： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺(化合物139)
步驟1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.93mmol)、(±)-(反式)-2-甲基環丙烷羧酸(113mg，1.13mmol)於吡啶(0.5mL)及二氯甲烷(4mL)中之混合物在0℃攪拌0.5h。逐份添加POCl3 (0.1mL，1.07mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h。將反應物用EtOAc(10mL)稀釋，且用飽和NaHCO3 將pH調整至7至8。隨後將有機物分離，乾燥(NaSO4 )，且濃縮至乾燥。將殘餘物用矽膠管柱層析術(PE：EA=10：1至PE：EA=4：1)純化，得到呈固體狀之標題化合物(200mg，70%收率。LCMS(ESI)[M+H]+ =296.1。
步驟2：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(195mg，0.66mmol)、NH4 OH(2mL，0.66mmol)於1,4-二噁烷(2mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=2：1至PE：EA=1：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(150mg，82%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =277.1。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(80mg，0.29mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(76mg，0.35mmol)、XPhos Pd G2(23mg，0.03mmol)、XPhos(14mg，0.03mmol)及K2 CO3 (120mg，0.87mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1至EA)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(67.3mg，70%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.39，[M+H]+ =334.2，方法=B。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.87(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.22(s,1H),7.31-7.30(m,3H),6.95(s,1H),2.40(s,3H),1.85-1.81(m,1H),1.29-1.24(m,1H),1.10(d,J =6.0Hz,3H),1.07-1.02(m,1H),0.71-0.66(m,1H)。
實例103： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(化合物140)
步驟1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.93mmol)、(±)-反式-2-(三氟甲基)環丙烷羧酸(173mg，1.12mmol)於吡啶(0.5mL)及二氯甲烷(4mL)中之混合物在0℃攪拌0.5h。隨後將POCl3 (0.1mL，1.07mmol)添加至反應混合物中，且將混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物用EtOAc(20mL)稀釋，且用飽和NaHCO3 將pH調整至7至8。將有機物分離，乾燥(NaSO4 )，且濃縮至乾燥。將殘餘物用矽石管柱層析術(PE：EA=10：1至PE：EA=4：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(220mg，65%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =350.0。
步驟2：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(215mg，0.61mmol)及NH4 OH(2mL，0.61mmol)於1,4-二噁烷(2mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱3h。將反應物濃縮且用矽石管柱層析術(PE：EA=4：1 PE：EA=2：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(180mg，88%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =331.1。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(64mg，0.29mmol)、(反式)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(80mg，0.24mmol)、XPhos Pd G2(19mg，0.02mmol)、XPhos(12mg，0.03mmol)及K2 CO3 (101mg，0.73mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=3：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(50.3mg，54%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.46，[M+H]+ =388.2，方法=B。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.20(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.35(s,2H),7.31(d,J =4.8Hz,1H),6.99(s,1H),2.32-2.59(m,1H),2.41(s,3H),2.33-2.30(m,1H),1.35-1.31(m,2H)。
實例104： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺(化合物141)
步驟1：(±)-順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.93mmol)、(±)-順式-2-甲基環丙烷羧酸(113mg，1.13mmol)於吡啶(0.5mL)及二氯甲烷(4mL)中之混合物在0℃攪拌0.5h。隨後逐份添加POCl3 (0.1mL，1.07mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物用EtOAc(10ml)稀釋，且用飽和NaHCO3 將pH調整至7至8。隨後將有機物分離，乾燥(Na2 SO4 )，濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=10：1至PE：EA=4：1)純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(200mg，72%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =296.1。
步驟2：(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(180mg，0.61mmol)、NH4 OH(4mL，0.61mmol)於1,4-二噁烷(4mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=2：1至PE：EA=1：1)純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(150mg，89%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =277.1。
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丙烷羧醯胺
將(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(130mg，0.47mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(124mg，0.57mmol)、XPhos Pd G2 (74mg，0.09mmol)、XPhos(90mg，0.19mmol)及K2 CO3 (195mg，1.41mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1至EA至DCM：MeOH=20))純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-環丙烷羧醯胺(71mg，46%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.72，[M+H]+ =334.1，方法=C；1 H NMR(CD3 OD,400MHz)：δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.41(d,J =5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.46(s,3H),2.03-1.98(m,1H),1.45-1.38(m,1H),1.22(d,J =6.0Hz,3H),1.10-1.05(m,1H),1.02-0.98(m,1H)。
實例105： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(3,5-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-6-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物142)
步驟1：6-溴-5-甲基苯并[d]噁唑-2(3H)-酮
將5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(1.0g，6.70mmol)及1-溴-2,5-吡咯啶二酮(1.3g，7.30mmol)於乙酸(15mL)中之混合物在20℃攪拌16小時。將混合物用水(50mL)稀釋，且再攪拌15分鐘。隨後將混合物過濾且用水(10mL)洗滌，得到呈白色固體狀之6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(1.2g，79%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =228.1。
步驟2：6-溴-3,5-二甲基苯并[d]噁唑-2(3H)-酮
在0℃下向6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(200mg，0.88mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(4mL)中之溶液中添加氫化鈉(60%於礦物油中，50mg，1.25mmol)。將混合物在0℃攪拌15min。添加碘甲烷(0.1mL，1.61mmol)。將反應混合物在0℃攪拌1h，之後用20mL鹽水稀釋。將混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取，且將有機物用鹽水洗滌。將有機物分離，濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(EA：PE=1：4)純化，得到呈白色固體狀之6-溴-3,5-二甲基-1,3-苯并噁唑-2-酮(190mg，0.78mmol，89.5%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =242.1。
步驟3：3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯并[d]噁唑-2(3H)-酮
向密封管中添加6-溴-3,5-二甲基-1,3-苯并噁唑-2-酮(180mg，0.74mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(220mg，0.87mmol)、Pd(dppf)Cl2 (52mg，0.07mmol)、乙醯氧基鉀(220mg，2.24mmol)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物用N2 鼓泡2 min，且在100℃攪拌3h。隨後將混合物藉由矽膠管柱層析術(EA：PE=1：4)直接純化，得到呈白色固體狀之3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(180mg，84%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =290.1。
步驟4：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(3,5-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.35mmol)、3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(207.0mg，0.72mmol)、XPhos Pd G2 (60mg，0.08mmol)、AcOK(80mg，0.82mmol)及XPhos(70mg，0.15mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌2h。將混合物藉由矽膠管柱層析術(EA：PE=1：1至EA至DCM：MeOH=20：1)直接純化，接著藉由逆相層析術(乙腈0至50/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(3,5-二甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(7.7mg，5.3%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.76，[M+H]+ =415.1，方法=C；1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 11.24(s,1H),9.37(s,1H),8.18(s,1H),7.36(s,1H),7.29(s,2H),7.17(s,1H),6.89(s,1H),3.36(s,3H),2.79-2.73(m,1H),2.42(s,3H),2.18-2.13(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
實例106： 外-3-乙醯基-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物143)
將外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(80mg，0.22mmol)、TEA(67mg，0.66mmol)及CH3 COCl(22mg，0.28mmol)於二氯甲烷(6mL)中之混合物在25℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型HPLC(管柱Xbridge 21.2x250mm C18，10um，流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )B：ACN)純化，得到呈白色固體狀之外-3-乙醯基-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(4mg，4.5%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.436，[M+H]+ =403.1，方法=H；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.82(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.22(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.95(s,1H),3.70-3.66(m,2H),3.38-3.33(m,2H),2.41(s,3H),2.14-2.12(m,1H),2.07-2.05(m,1H),1.95-1.93(m,4H)。
實例107： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物144)
步驟1：(±)-反式-N-[8-胺基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(280mg，0.7mmol)、X-phos-Pd-G2(98mg，0.12mmol)、K2 CO3 (280mg，2mmol)及3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(280mg，0.7mmol)於1,4-二噁烷(2mL)及水(0.5mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮且藉由急驟管柱層析術純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(180mg，33%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =645.1。
步驟2：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-胺基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-側氧基-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(140mg，0.2mmol)、TFA(3mL，0.2mmol)及TfOH(3mL，0.2mmol)中之混合物在25℃攪拌2h。將混合物藉由MeOH中之NH3 中和，濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-甲基-2-側氧基-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(7mg，7.3%收 率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.504，[M+H]+ =442.1，方法=E；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.27(s,1H),8.30(s,1H),7.27(s,1H),7.03(s,1H),6.91(s,1H),2.46-2.41(m,1H),2.38(s,3H),2.15-2.13(m,1H),1.63-1.56(m,1H),1.31-1.28(m,1H)。
實例108： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺(化合物145)
步驟1：(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲酯
在0℃下向(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸(5g，36mmol)於甲醇(50mL)中之溶液中添加亞硫醯氯(5.5mL，75mmol)。使混合物加熱至70℃且回流隔夜。隨後將混合物濃縮，且將所得殘餘物溶於乙酸乙酯中，且用水洗滌。有機層濃縮，得到呈白色固體狀之(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲酯(6g，98%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =153.1。
步驟2：(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲酯
在0℃下向(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲酯(6g，39mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(50mL)中之混合物中添加NaH(1.6g，40mmol)。將反應物攪拌 0.5h，之後添加4-甲氧基苄基氯(6.2g，39mmol)。將反應物在25℃攪拌隔夜。將混合物用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用鹽水(10mLx3)洗滌，且將有機物乾燥且濃縮。將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(10% EtOAc於PE中)純化，得到呈白色固體狀之(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲酯(10g，74%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =273.1。
步驟3：(±)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸甲酯
向碘化三甲基側氧基鋶(10.5g，47mmol)於二甲亞碸(100mL)中之混合物中添加NaH(2g，50mmol)。將混合物在N2 下在室溫下攪拌0.5h，之後添加二甲亞碸(150mL)中之(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲酯(10g，36mmol)。將混合物在N2 下在室溫下攪拌1h。將飽和氯化銨水溶液及水添加至反應混合物中，且將混合物用乙酸乙酯萃取。有機層用水及飽和鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(己烷-乙酸乙酯100：0至60：40，v/v)純化，得到呈無色油狀之2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸甲酯(1.8g，10%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =287.1。
步驟4：(±)-反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸
在室溫下向2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸甲酯(2g，7mmol)於四氫呋喃(60mL)及水(20mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(2g，47mmol)。將反應物攪拌3h。將所得反應物濃縮至乾燥。將殘餘物用水(10mL) 稀釋，且隨後用EtOAc(3×80mL)萃取。將水相用濃HCl水溶液酸化至pH=4，且在減壓下乾燥，得到呈白色固體狀之標題化合物2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸(1.6g，73%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =272.2，步驟5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.9mmol)及氧氯化磷(120mg，0.8mmol)於吡啶(8mL)中之混合物中添加(±)-反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧酸(200mg，0.7mmol)。將所得混合物在0℃攪拌1h。隨後將反應物用飽和NaHCO3 水溶液稀釋，且用乙酸乙酯(20mLx2)萃取。將合併之乙酸乙酯層濃縮，且藉由急驟管柱層析術(PE：EA=3：1至1：3)純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺(400mg，81%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =467.1。
步驟6：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(300mg，0.69mmol)、NH4 OH(8mL，0.69mmol)於1,4-二噁烷 (8mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱4h。將反應物濃縮至乾燥。粗品不經進一步純化即直接使用。LCMS(ESI)：[M+H]+ =449.1
步驟7：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺
將4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(175mg，0.8mmol)、(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺(250mg，0.5mmol)、XPhos Pd G2(50mg，0.06mmol)、XPhos(60mg，0.1mmol)及K2 CO3 (250mg，1.8mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應混合物濃縮，且在矽膠管柱(乙酸乙酯/石油醚，1：1)上純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]環丙烷羧醯胺(69mg，24.5%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.40，[M+H]+ =506.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.63(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),7.23(d,J =8.5Hz,2H),7.01-6.89(m,4H),5.09(s,2H),3.80(s,3H),2.54-2.39(m,4H),2.26-2.15(m,1H),1.57-1.52(m,1H),1.42-1.38(m,1H)。
實例109： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物146)
步驟1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
向(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-四氫吡喃-2-基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(290mg，0.6mmol)於二氯甲烷(5mL)中之混合物中添加TFA(5mL，67.3mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h。粗品不經進一步純化即直接使用。LCMS(ESI)：[M+H]+ =348.1。
步驟2：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
向乙烷磺醯氯(2mL)及(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(190mg，0.5mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加 NEt3 (2mL，0.5mmol)。將混合物在20℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且在矽膠管柱層析術上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1：1)溶離，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(150mg，56%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+=440.1。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將NH4 OH(8mL，0.6mmol)、(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(290mg，0.6mmol)於1,4-二噁烷(8mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱4h。將反應物濃縮，且不經進一步純化即直接使用。LCMS(ESI)：[M+H]+=329.1。
步驟4：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
向乙烷磺醯氯(2mL)及(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(140mg，0.4mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中添加NEt3 (2mL，0.5mmol)。將混合物在20℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且藉由急驟層析術純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶 -3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(100mg，50%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+=420.1。
步驟5：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(80mg，0.3mmol)、XPhos Pd G2(20mg，0.03mmol)、XPhos(30mg，0.06mmol)、K2 CO3 (110mg，0.8mmol)及(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(100mg，0.2mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-乙基磺醯基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(40mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.560，[M+H]+ =478.1，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),8.12(s,1H),7.85(s,1H),7.41(d,J =5.2Hz,1H),7.00(s,1H),3.56(q,J =7.6Hz,2H),2.48-2.47(m,4H),2.28-2.13(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.39-1.34(m,1H),1.21(t,J =7.6Hz,3H)。
實例110： (±)-反式- N -(8-胺基-6-(5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物147)
步驟1：3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶
在氬下向5-溴-4-甲基-吡啶-3-甲醛(300mg，1.50mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加三氟化二乙胺基硫(290mg，1.80mmol)，將反應混合物在氬下攪拌16h。將混合物用飽和NaHCO3 (5mL)淬滅且分離各相。有機層收集，用鹽水(5mL×3)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(EtOAc/PE=1：5)純化，得到呈黃色油狀之3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基-吡啶(220mg，63%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =221.7。
步驟2：3-(二氟甲基)-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
向反應管中添加3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基-吡啶(80mg，0.36mmol)、KOAc(70mg，0.72mmol)、Pd(dppf)Cl2 (13mg，0.02mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(183mg，0.72mmol)及1,4-二噁烷(10mL)。將混合物在N2 下在100℃攪拌16h。將反應混合物過濾且在真空中濃縮。粗材料不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =187.7。
步驟3：(±)-反式-N -(8-胺基-6-(5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
向3-(二氟甲基)-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(84mg，0.31mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物中添加(±)-反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(60mg，0.21mmol)、XphosPdG2(16mg，0.02mmol)、Xphos(20mg，0.04mmol)及KOAc(61mg，0.63mmol)。將混合物加熱至100℃達2h。將此反應混合物在真空中濃縮，且藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化，接著藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N -[8-胺基-6-[5-(二氟甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7- 啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(14mg，16.8%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =394.7，RT (min)=1.591，方法=G；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.29(s,1H),9.42(s,1H),8.69(s,1H),8.68(s,1H),8.22(s,1H),7.21-7.48(m,3H),7.00(s,1H),2.74-2.79(m,1H),2.40(s,3H),2.13-2.18(m,1H),1.59-1.64(m,1H),1.41-1.46(m,1H)。
實例111： (±)-反式- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-(甲基磺醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物148)
在0℃下向N ,N -二乙胺(0.50mL，4.65mmol)於二氯甲烷(15mL)中之懸浮液中添加甲烷磺醯氯(0.17mL，2.20mmol)及(±)-反式-N -[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧醯胺鹽酸鹽(50mg，0.12mmol)。 將混合物在0℃攪拌30min。在0℃下將甲烷磺醯氯(84mg)添加至混合物中。將反應混合物再攪拌30min，且隨後用水(3mL)稀釋。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N -[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-5-甲基磺醯基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧醯胺(29mg，51%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =452.7，RT (min)=1.494，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.30-7.32(m,3H),6.99(s,1H),3.33-3.39(m,4H),2.84(s,3H),2.41(s,3H),2.26-2.30(m,1H),1.88-2.01(m,2H),1.22-1.29(m,2H)。
實例112： (±)-順式- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-(甲基磺醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-1-羧醯胺(化合物149)
在0℃下向(±)-順式-N -[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧醯胺鹽酸鹽(25mg，0.06mmol)於二氯甲烷(10mL)中之懸浮液中添加N ,N -二乙胺(0.29mL，2.79mmol)及甲烷磺醯氯(140mg)。將混合物在0℃攪拌30min。在0℃下將甲烷磺醯氯(84mg)添加至混合物中，且將反應混合物在0℃下再攪拌30min。將反應混合物用水(3mL)稀釋且濃縮。將粗材料藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(±)-順式-N -[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-5-甲基磺醯基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-2-羧醯胺(9mg，33%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =452.7，RT (min)=1.504，方法=G。1 HNMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.40(d,J = 4.8Hz,1H),6.99(s,1H),3.35-3.54(m,4H),2.94(s,3H),2.46(s,3H),2.12-2.23(m,3H),1.45-1.48(m,1H),1.28-1.32(m,1H)。
實例113： N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧醯胺(化合物150)
步驟1：5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧酸鹽酸鹽
將5-第三丁氧基羰基-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧酸(590mg，2.6mmol)於HCl/二噁烷(5mL，20mmol)中之溶液在25℃攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，且將殘餘物溶於MeOH中。將產物藉由添加EtOA來沉澱，且藉由過濾收集，得到呈白色固體狀之5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧酸鹽酸鹽(420mg，99%)：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.60(bs,1H),4.09-3.96(m,4H),1.94-1.92(m,1H),1.37-1.29(m,1H),1.09-1.05(m,1H)。
步驟2：5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧酸
向5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧酸(400mg，3.15mmol)、3-氰基-2-氟吡啶(640mg，5.24mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(3ml)中之混合物中添加K2 CO3 (1.6g，11.59mmol)。將混合物在85℃攪拌15h。藉由添加1N HCl溶液將pH調整至約6。將產物用乙酸乙酯(20ml x 3)萃取。將有機層乾燥，濃縮，且藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化，得到呈黃色固體狀之5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧酸(400mg，55%收率)：LCMS(ESI)[M+H]+ =230.1
步驟3：5-(3-氰基吡啶-2-基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧醯胺
在0℃下向吡啶(0.76mL，9.34mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.93mmol)及5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧酸(350mg，1.53mmol)於二氯甲烷(5mL)中之混合物中添加POCl3 (186mg，1.21mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h，用飽和NaHCO3 淬滅，且用DCM(50mL x 3)萃取。將合併之有機物乾燥，濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型TLC(EA/PE=1/1)純化，得到呈黃色固體狀之5-(3-氰基-2-吡啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧醯胺(200mg，50%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =425.2。1 H NMR(400MHz,CDCl3 )δ 9.39(s,1H),8.50-8.46(m,2H),8.28(d,J =4.8Hz,1H),7.69-7.59(m,2H),6.66-6.63(m,1H),4.58-4.48(m,4H),3.19-3.18(m,1H),1.42-1.26(m,2H)。
步驟4：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧醯胺
將5-(3-氰基-2-吡啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧醯胺(180mg，0.42mmol)於NH3 .H2 O(5mL，18mmol)及1,4-二噁烷(5mL)中之溶液在90℃攪拌3h。將溶液濃縮。將粗混合物用乙酸乙酯(3mL)及PE(10mL)洗滌，得到呈黃色固體狀之粗品N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧醯胺(200mg，37%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =406.2
步驟5：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-1-羧醯胺
向密封管中添加1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之Na2 CO3 (50mg，0.47mmol)、Pd(dppf)Cl2 (23mg，0.03mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(69mg，0.32mmol)及N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧醯胺(200mg，0.16mmol)。將混合物用N2 鼓泡2min，且在100℃攪拌4h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由製備型HPLC(C18)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮雜螺[2.3]己烷-2-羧醯胺(15mg，21%收率)。(ESI)：RT (min)=1.641，[M+H]+ =463.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.05(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.32(dd,J =2.0,4.8Hz,1H),8.28(s,1H),7.96(dd,J =1.6,7.6Hz,1H),7.32-7.31(m,3H),7.00(s,1H),6.78(dd,J =4.8,7.6Hz,1H),4.39-4.30(m,4H),2.41-2.36(m,4H),1.39-1.27(m,2H)。
實例114： 外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-甲基磺醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物151)
將外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(78mg，0.22mmol)、TEA(110mg，1.09mmol)及MsCl(28mg，0.25mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在25℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由製備型HPLC(C18)純化，得到呈白色固體狀之外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-甲基磺醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(27mg，29%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.467，[M+H]+ =439.1，方法=H；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1 H),9.37(s,1 H),8.56(s,1 H),8.43(d,J =5.2Hz,1 H),8.22(s,1 H),7.32-7.30(m,3 H),6.96(s,1 H),3.45-3.43(m,4 H),2.95(s,3 H),2.41(s,3 H),2.19-2.17(m,1H),2.11-2.09(m,2H)。
實例115： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(異噻唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物152)
步驟1：(E)-3-異噻唑-4-基丙-2-烯酸第三丁酯
將4-溴-異噻唑(4.7g，28.66mmol)、丙烯酸第三丁酯(13mL，96.96mmol)、Pd(OAc)2 (700mg，3.13mmol)、三(鄰甲苯基)膦(2.1g，6.91mmol)及TEA(10g，99.01mmol)於1,4-二噁烷(100mL)中之混合物在Ar下在125℃劇烈回流2h。將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=15：1至10：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之(E)-3-異噻唑-4-基丙-2-烯酸第三丁酯(2.7g，44.6%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =212.1。1 H NMR(400MHz,CDCl3 )：δ 8.72(s,1H),8.69(s,1H),7.63(d,J =16.0Hz,1H),6.36(d,J =16.0Hz,1H),1.55(s,9H)。
步驟2：(±)-反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸第三丁酯
在25℃下將t-BuOK(3g，26.79mmol)逐份添加至碘化三甲基氧化鋶(6.1g，27.72mmol)於二甲亞碸(30mL)中之溶液中，且將混合物在25℃攪拌0.5h。在25℃下將(E)-3-異噻唑-4-基丙-2-烯酸第三丁酯(2.7g，12.78mmol)於二甲 亞碸(10mL)中之溶液滴加至反應混合物中。將混合物在25℃攪拌1h。將反應混合物用飽和NH4 Cl(150mL)稀釋，且用EA(50mLx3)萃取。將乙酸乙酯層合併，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(PE：EA=10：1)純化，得到呈淡黃色油狀之反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸第三丁酯(1.94g，67.4%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =226.1。
步驟3：(±)-反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸第三丁酯(1.94g，8.61mmol)於2,2,2-三氟乙酸(15mL)中之混合物在20℃攪拌1h。將反應混合物蒸發，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1至1：2)純化，得到呈淡褐色油狀之(±)-反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸(1.37g，94%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =170.0。
步驟4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺
在0℃下將POCl3 (150mg，0.98mmol)滴加至6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(200mg，0.80mmol)、(±)-反式-2-異噻唑-4-基環丙烷羧酸(250mg，1.48mmol)及吡啶(1mL，12.36mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中。隨後將反應混合物溫熱至20℃，且攪拌1h。向反應混合物中添加DCM(20mL)，且將混合物用H2 O(10mL)洗滌。將DCM層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=3：1 PE：EA：THF=3：1：1)純化，得到呈淡黃色固體 狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺(220mg，75%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =365.0。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺(220mg，0.60mmol)於氫氧化銨(10mL)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在90℃在密封管中攪拌3h。將反應混合物冷卻至室溫且蒸發，得到呈褐色固體狀之反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺(230mg)。將粗產物直接用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+Na]+ =346.1/348.1。
步驟6：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺(粗品230mg，約0.60mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(250mg，1.14mmol)、XPhos Pd G2(50mg，0.06mmol)、XPhos(60mg，0.13mmol)及K2 CO3 (250mg，1.81mmol)於1,4-二噁烷(16mL)及水(4mL)中之混合物在100℃在Ar下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(100mL)稀釋。有機層用鹽水(30mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(PE：THF=1：3)純化，接著用急驟層析術 (C18，NH4 HCO3 /MeOH/H2 O)純化，得到呈淡黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-異噻唑-4-基-環丙烷羧醯胺(45mg，18.6%收率，兩個步驟)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.67，[M+H]+ =403.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 11.00(brs,1H),9.37(s,1H),8.77(s,1H),8.57(s,1H),8.53(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.32(brs,2H),7.31(s,1H),6.98(s,1H),2.60-2.55(m,1H),2.41(s,3H),2.44-2.40(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.47-1.44(m,1H)。
實例116： (±)-反式-N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物153)
向密封管中添加(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(160mg，0.46mmol)、乙腈(20mL)及Selectfluor(105mg，0.28mmol)。將混合物在75℃攪拌2小時。將混合物過濾，濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(用DCM/MeOH=30：1至10：1溶離)純化，接著藉由製備型HPLC(乙腈30至80%/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(25mg，15%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.546，[M+H]+ =363.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.51(s,1H),8.47(s,1H),8.45(d,J =5.2Hz,1H),7.41(d,J =5.2Hz,1H),2.70-2.62(m,1H),2.37(s,3H),2.15-2.09(m,1H),1.65-1.52(m,2H)。
實例117： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(羥基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物154)
步驟1：(±)-反式-2-(羥基甲基)環丙烷羧酸
向小瓶中添加(反式)-2-(羥基甲基)環丙烷羧酸甲酯(520mg，4mmol)、水(5mL)、四氫呋喃(5mL)、甲醇(5mL)及NaOH(728mg，18.2mmol)。將混合物在40℃攪拌2小時。將反應物濃縮以除去有機溶劑，且用2N HCl酸化至pH=3至4。將產物用乙酸乙酯A(50mL x2)萃取，將合併之萃取物用鹽水(20mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈淺黃色油狀之(±)-反式-2-(羥基甲基)環丙烷羧酸(320mg，69%收率)。
步驟2：(±)-反式-2-(乙醯氧基甲基)環丙烷羧酸
向小瓶中添加(±)-反式-2-(羥基甲基)環丙烷羧酸(320mg，2.76mmol)、二氯甲烷(20mL)及乙醯氯(1.5mL，21mmol)。將混合物在40℃攪拌2小時。將混合物在真空中濃縮，得到呈淺黃色油狀之粗品標題化合物。
步驟3：(±)-反式-2-(氯羰基)環丙基)甲基乙酸酯
向小瓶中添加(±)-反式-2-(乙醯氧基甲基)環丙烷羧酸(430mg，2.7mmol)及DCM(30mL)。在0℃下滴加草醯氯(0.5mL，5.4mmol)。添加N,N-二 甲基甲醯胺(0.01mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應混合物濃縮，得到標題化合物。
步驟4：(±)-反式-2-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)甲基乙酸酯
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(300mg，1.2mmol)、吡啶(1mL，12mmol)及DCM(5mL)。滴加(±)-[反式-2-氯羰基環丙基]甲基乙酸酯(430mg，2.43mmol)於DCM(5mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠層析術(用PE/EA溶離，1：1至0：100)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-[反式-2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(430mg，61%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =354.0。
步驟5：(±)-反式-2-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)甲基乙酸酯
向密封管中添加(±)-[反式-2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(430mg，0.73mmol)、NH3 (0.5N於二噁烷中，18mL，9mmol)及氫氧化銨(14mL)。將混合物在90℃攪拌4小時。將混合物濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品(±)-[反式-2-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(440mg，90%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =335.1。
步驟6：(±)-反式-2-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)甲基乙酸酯
向密封管中添加Na2 CO3 (215mg，2.0mmol)、Pd(dppf)Cl2 (112mg，0.15mmol)、(±)-[反式-2-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(440mg，0.66mmol)及4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(292mg，1.33mmol)、1,4-二噁烷(10mL)及水(1mL)。將混合物用N2 鼓泡2min，且在100℃攪拌4h。將混合物過濾且濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品(±)-[反式-2-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(500mg，58%收率)。將粗產物直接用於下一步驟。LCMS(ESI)[M+H]+ =392.2。
步驟7：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(羥基甲基)環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-[反式-2-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]環丙基]甲基乙酸酯(500mg，0.38mmol)、Na2 CO3 (500mg，4.7mmol)及MeOH(10mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱層析術(DCM/MeOH，50：1至10：1)純化，接著藉由製備型HPLC(流動相：A：水(10mmol NH4 HCO3 )，B：乙腈)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(羥基甲基)環丙烷羧醯胺(21mg，16%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.285，[M+H]+ =350.2，方法=B；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.27(s,1H),8.52(s,1H),8.41(d,J =5.2Hz,1H),8.28(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),6.94(s,1H),3.64(dd,J =6.0,11.6Hz,1H),3.46(dd,J =6.4,11.6Hz,1H),2.44(s,3H),1.90-1.84(m,1H),1.76-1.68(m,1H),1.29-1.21(m,1H),0.97-0.91(m,1H)。
實例118： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(胺基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物155)
步驟1：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲醯基環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(230mg，0.67mmol)及二氯甲烷(20mL)。將混合物冷卻至-30℃，之後滴加DIBAL-H(1N於甲苯中，4mL，4mmol)。將混合物在-30℃攪拌2小時。將反應藉由在-30℃下添加飽和NH4 Cl水溶液(2mL)淬滅，且隨後濃縮。將該固體再溶於DCM/MeOH=10：1(50mL)中，過濾且濃縮，得到粗品(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲醯基-環丙烷羧醯胺(300mg，26%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =348.1。
步驟2：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(胺基甲基)環丙烷羧醯胺
向小瓶中添加(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲醯基-環丙烷羧醯胺(300mg，0.17mmol)及NH3 (7N於MeOH中，10mL， 70mmol)。將混合物在室溫下攪拌60min。之後冷卻至0℃，逐份添加NaBH4 (200mg，5.29mmol)，且攪拌10min。將混合物藉由添加飽和NH4 Cl水溶液(1mL)淬滅。添加Na2 SO4 (5g)，將反應混合物在室溫下攪拌5min，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH/NH4 OH=100：10：1)純化，得到呈褐色固體狀之(±)-反式-2-(胺基甲基)-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(23mg，36%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.373，[M+H]+ =349.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ：9.18(s,1H),8.42(s,1H),8.31(d,J =5.2Hz,1H),8.17(s,1H),7.28(d,J =5.2Hz,1H),6.86(s,1H),2.66(dd,J =6.8,13.2Hz,1H),2.55(dd,J =7.2,13.2Hz,1H),2.34(s,3H),1.77-1.71(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.20-1.15(m,1H),0.86-0.79(m,1H)。
實例119： N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)乙醯胺(化合物156)
步驟1：N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(615mg，2.45mmol)、1,2-二氯乙烷(30mL)、吡啶(2mL，24.93mmol)及乙醯氯(1mL，14.18mmol)，將混合物在室溫下攪拌2小時。將混合物濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(PE/EA，1：1至0：100)純化，得到呈黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(780mg，99%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =256.0。
步驟2：N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺
向密封管中添加NH3 (0.5N於二噁烷中，6mL，3mmol)、NH3 .H2 O(6mL，39mmol)及N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(780mg，2.44mmol)。將混合物在90℃攪拌4小時。將混合物濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(810mg，98%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =237.1。
步驟3：N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)乙醯胺
向小瓶中添加Pd(dppf)Cl2 (120mg，0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(606mg，2.77mmol)、Na2 CO3 (746mg，7mmol)、N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)乙醯胺(810mg，2.4mmol)、1,4-二噁烷(50mL)及水(5mL)，將混合物在N2 下在100℃攪拌1.5h。將混合物濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(DCM/MeOH，100：1至10：1)純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]乙醯胺(665mg，85%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =294.1。
步驟4：N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)乙醯胺
向小瓶中添加N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]乙醯胺(600mg，2.05mmol)、乙腈(70mL)及Selectfluor(600mg，1.61mmol)。將混合物在60℃攪拌16小時。將混合物過濾且濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC(乙腈30至70%/0.1% NH4 OH於水中)純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-5-氟 -6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]乙醯胺(120mg，17%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.489，[M+H]+ =312.0，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.88(s,1H),9.42(s,1H),8.52(s,1H),8.49(d,J =4.8Hz,1H),8.37(s,1H),7.37(d,J =4.8Hz,1H),7.30(br,2H),2.28(s,3H),2.17(s,3H)。
實例120： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物157)
步驟1：(±)-反式-2-(氰基甲基)環丙烷羧酸
向反式-2-(氰基甲基)環丙烷羧酸乙酯(500mg，3.26mmol)於四氫呋喃(8mL)、水(8mL)中之溶液中添加LiOH．H2 O(268mg，6.53mmol)。將反應混合物在25℃攪拌隔夜。將溶液濃縮，且將殘餘物用H2 O(20mL)稀釋，且用乙酸乙酯(20mL)洗滌。將水層用4N HCl酸化至pH=3，且用乙酸乙酯(30mLx3)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，且在減壓下濃縮，得到呈無色油狀之(±)-反式-2-(氰基甲基)環丙烷羧酸(380mg，3.04mmol，95%收率)。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.28(s,1H),2.67-2.64(m,2H),1.59-1.50(m,2H),1.07-1.03(m,1H),0.91-0.88(m,1H)。
步驟2：(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下(±)-反式-2-(氰基甲基)環丙烷羧酸(342mg，2.73mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(450mg，2.1mmol)及吡啶(1.7mL，21.02mmol)於二氯甲烷(20mL)中之混合物中添加POCl3 (419mg，2.73mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h。將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(EtOAc/PE=1/1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(536mg，79%收率)。LCMS(ESI)：[M+H-100]+ =321.0；步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(486mg，1.51mmol)及NH3 ．H2 O(5mL，1.51mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物在密封管中加熱至80℃達5h。將溶液濃縮，且將粗產物用EA/PE=1：1洗滌，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(435mg，95%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =302.0。
步驟4：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)
環丙烷羧醯胺(250mg，0.83mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(236mg，1.08mmol)、Pd(dppf)Cl2 (61mg，0.08mmol)及Na2 CO3 (263mg，2.49mmol)於1,4-二噁烷(12mL)及水(3mL)中之混合物在110 ℃攪拌2h。將混合物用水(20ml)稀釋且用EA(30mLx3)萃取。將有機物用飽和NaCl溶液(50ml)洗滌，用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC(流動相：A水(0.01% NH3 )+10mm(NH4 HCO3 )，B乙腈)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(62mg，20.9%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.543，[M+H]+ =359.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.45(s,1H),8.58(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.45(s,2H),7.32(d,J =4.8Hz,1H),7.08(s,1H),5.04(d,J =3.6Hz,1H),3.14-3.11(m,2H),2.91-2.86(m,1H),2.59-2.55(m,1H),2.47-2.45(m,4H),2.01-2.00(m,1H)。
實例121： 外-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物158)
步驟1：外-3-(第三丁氧基羰基)-2-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸
將外-3-第三丁氧基羰基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(360mg，1.58mmol)、NaIO4 (847mg，3.96mmol)及RuCl3 ．3H2 O(36mg，0.17mmol)於乙酸乙酯(10mL)及水(10mL)中之混合物在25℃攪拌隔夜。隨後將混合物過濾，添加乙酸乙酯(30mL)。將混合物用水(30mLx1)、鹽水(30mLx1)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且藉由旋轉蒸發濃縮，得到呈黃色油狀之粗品外-3-第三丁氧基羰基 -4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(287mg，75%收率)。LCMS(ESI)：[M+H-56]+ =186.1。
步驟2：外-6-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-2-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯
向經冷卻至0℃之6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(45mg，0.21mmol)、外-3-第三丁氧基羰基-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(80mg，0.33mmol)及吡啶(0.34mL，4.2mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物中添加POCl3 (97mg，0.63mmol)。將混合物在室溫下攪拌1h。隨後將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(用EtOAc/PE=1/1溶離)純化，得到呈黃色固體狀之外-6-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-2-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(90mg，98%收率)。LCMS(ESI)：[M+H-100]+ =337.0。
步驟3：外-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將外-6-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(52mg，0.12mmol)及NH3 ．H2 O(2.0mL，0.12mmol)於1,4-二噁烷(6mL)中之混合物在密封管中加熱至80℃隔夜。將混合物濃縮。將 殘餘物吸收於EtOAc(20mL)中，且用水(10mLx2)、飽和NaCl溶液(10mL)洗滌，用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。粗產物外-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(35mg，94%收率)不經純化即用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =318.0。
步驟4：外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將外-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(35mg，0.11mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(31mg，0.14mmol)、Pd(dppf)Cl2 (8.0mg，0.011mmol)、K2 CO3 (46mg，0.33mmol)於1,4-二噁烷(4.0mL)及水(0.8mL)中之混合物在110℃攪拌2小時。將反應物透過矽膠墊過濾，且將濾液在真空中濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC(流動相：A水(0.01% NH3 )+10mm(NH4 HCO3 )，B乙腈)進一步純化，得到呈白色固體狀之外-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-4-側氧基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(6mg，14.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.326，[M+H]+ =375.1，方法=G；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.08(s,1H),9.38(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =4.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.43(s,1H),7.34-7.31(m,3H),6.98(s,1H),3.51-3.48(m,2H),2.41-2.40(m,4H),2.18-2.16(m,1H),2.09-2.08(m,1H)。
實例122： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物159)
步驟1：(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯
將1-甲基-4-碘-1h-吡唑(12g，57.69mmol)、丙烯酸第三丁酯(30g，234.06mmol)、Pd(OAc)2 (0.9g，4.02mmol)、三對甲苯基膦(3.45g，11.35mmol)及TEA(58g，574.26mmol)於乙腈(100mL)中之混合物在Ar下在110℃攪拌3h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用EtOAc/己烷=1：2溶離來純化，得到呈褐色油狀之(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(4.6g，21.87mmol，38%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =209.2。
步驟2：(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯
向碘化三甲基氧化鋶(5.96g，27.08mmol)於二甲亞碸(60mL)中之溶液中添加第三丁醇鈉(2.71g，28.23mmol)。將混合物在25℃攪拌0.5h。將DMSO(40mL)中之(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(4.7g，22.57mmol)添加至混合物中，且在室溫下攪拌隔夜。添加飽和NH4 Cl(80mL)。將混合物用EtOAc(3 x 200mL)萃取。將合併之萃取物用鹽水(3 x 100mL)洗滌，用Na2 SO4 乾燥， 過濾且濃縮，得到呈褐色油狀之粗品(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯(3.2g，13.25mmol，59%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =223.1。
步驟3：(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯(3.2g，14.4mmol)於2,2,2-三氟乙酸(30mL)中之混合物在25℃攪拌1h。將反應混合物用飽和NaHCO3 (水性)中和至pH=8。將混合物再調整至pH 4。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC逆相(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸(1.7g，10.23mmol，71%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =167.1。
步驟4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
在0℃下向(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧酸(300mg，1.81mmol)、吡啶(3mL，37.09mmol)及6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(452mg，1.8mmol)於二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加POCl3 (900mg，5.88mmol)。將混合物溫熱升至室溫，且在室溫下攪拌2h。添加H2 O(100mL)且將混合物用DCM(3 x 150mL)萃取。將合併之萃取物用鹽水(150mL)洗滌，用Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品(±)-(反式)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基 吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(700mg，1.39mmol，77%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =362.1。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基吡唑4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(500mg，1.38mmol)及NH4 OH(12mL，1.38mmol)於1,4-二噁烷(12mL)中之混合物在90℃攪拌3h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用EtOAc溶離來純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(500mg，1.38mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =343.1。
步驟6：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(180mg，0.53mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(138mg，0.63mmol)、x-Phos-Pd-G2(83mg，0.11mmol)、X-Phos(100mg，0.21mmol)及K2 CO3 (145mg，1.05mmol)於1,4-二噁烷(7mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌1h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用DCM/MeOH=10：1溶離來純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4- 甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(105mg，0.26mmol，50%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.497，[M+H]+=400.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.56(s,1H),7.32(s,2H),7.31(d,J =5.2Hz,1H),7.30(s,1H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
實例123： 反式-N-[8-胺基-6-(3-羥基-6-甲基-2-側氧基-吲哚-5-基)-2,7- 啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(化合物160)
步驟1：5-溴-3-羥基-6-甲基-吲哚-2-酮
在0℃下向5-溴-6-甲基-吲哚啉-2,3-二酮(980mg，4.08mmol)於四氫呋喃(50mL)中之溶液中添加NaBH4 (124mg，3.26mmol)。將混合物在0℃攪拌10min。添加H2 O(50mL)且將混合物用EtOAc(3 x 200mL)萃取。將合併之萃取物用鹽水(100mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品5-溴-3-羥基-6-甲基-吲哚-2-酮(650mg，2.5mmol，61%收率)。LCMS(ESI)[M+Na]+ =265.9。
步驟2：6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚啉-2,3-二酮
將5-溴-3-羥基-6-甲基-吲哚-2-酮(630mg，2.6mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(331mg，13.01mmol)、Pd(dppf)Cl2 (380mg，0.52mmol)及AcOK(510mg，5.2mmol)於1,4-二噁烷(12mL)中之混合物在Ar下在95℃攪拌2h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用EtOAc/己烷=5：1溶離來純化，得到呈褐色固體狀之6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚啉-2,3-二酮(650mg，1.45mmol，56%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =288.1。
步驟3：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(6-甲基-2,3-二側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(300mg，1.04mmol)、6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吲哚啉-2,3-二酮(449mg，1.56mmol)、X-Phos(199mg，0.42mmol)、X-Phos-Pd-G2(164mg，0.21mmol)及K2 CO3 (288mg，2.09mmol)於1,4-二噁烷(12mL)及水(1mL)中之混合物在Ar氣氛下在100℃攪拌1h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用DCM/MeOH=10：1溶離來純化，得到呈褐色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(6-甲基-2,3-二側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(300mg，0.27mmol，26%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =413.2。
步驟4：反式-N-[8-胺基-6-(3-羥基-6-甲基-2-側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺
在0℃下向反式-N-[8-胺基-6-(6-甲基-2,3-二側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(300mg，0.27mmol)於四氫呋喃(15mL)中之溶液中添加NaBH4 (4mg，0.11mmol)。將混合物在0℃攪拌10min。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用DCM/MeOH=10：1溶離來純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(3-羥基-6-甲基-2-側氧基-吲哚-5-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(38mg，0.085mmol，32%收率)。LCMS(ESI)RT (min)=1.437，[M+H]+ =415.1，方法=C。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.23(s,1H),10.3(s,1H),9.35(s,1H),8.16(s,1H),7.37(s,1H),7.26(s,2H),6.84(s,1H),6.68(s,1H),6.16(d,J =7.6Hz,1H),4.84(d,J =7.6Hz,1H),2.78-2.74(m,1H),2.36(s,3H),2.17-2.13(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
實例124： 1-[3-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮(化合物161)
步驟1：3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯
在0℃下向4-溴-1H-吡唑(2.0g，13.61mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(40mL)中之溶液中添加NaH(1.63g，40.75mmol)。將混合物在0℃攪拌0.5h。添 加1-Boc-3-碘氮雜環丁烷(5.0g，17.66mmol)且在0℃攪拌1h。將混合物溫熱升至環境溫度且攪拌隔夜。添加H2 O(100mL)。將混合物用EtOAc(3 x 200mL)萃取。將合併之萃取物用鹽水(3 x 100mL)洗滌，用Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下蒸發。將殘餘物藉由管柱層析術用EtOAc/己烷=1：5溶離來純化，得到呈無色油狀之3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(1.8g，4.38mmol，32%收率)。LCMS(ESI)[M+H-56]+ =247.9。
步驟2：1-(氮雜環丁-3-基)-4-溴-吡唑
將3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(1.8g，4.35mmol)及2,2,2-三氟乙酸(8mL)於二氯甲烷(15mL)中之混合物在25℃攪拌2h。將反應混合物用飽和NaHCO3 (水性)中和至pH=7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC逆相(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈白色固體狀之1-(氮雜環丁-3-基)-4-溴-吡唑(875mg，3.55mmol，82%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =202.0。
步驟3：1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁-1-基]乙酮
向1-(氮雜環丁-3-基)-4-溴-吡唑(400mg，1.98mmol)及吡啶(1.61mL，19.85mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加乙醯氯(466mg，5.94mmol)。將混合物在0℃攪拌3h，將混合物濃縮且藉由管柱層析術用DCM/MeOH =20：1溶離來純化，得到呈褐色固體狀之1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁-1-基]乙酮(400mg，1.27mmol，64%收率)。LCM(ESI)[M+H]+ =244.0。
步驟4：1-[3-[4-[[8-[雙[2,4-二甲氧基苄基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苄基)]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(250mg，0.45mmol)、1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮雜環丁-1-基]乙酮(359mg，1.13mmol)、t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(82mg，0.09mmol)、t-BuBrettPhos(44mg，0.09mmol)及LiHMDS(1.8mL，1.8mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌20h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用MeOH/DCM=1：25溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[3-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮(120mg，0.12mmol，26%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =715.4。
步驟5：1-[3-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮
將1-[3-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮(120mg，0.12mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之混合物在50℃攪拌1h。將反應混合物濃縮，且用MeOH中之7N NH3 中和至pH=7至8。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC逆相(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[3-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]氮雜環丁-1-基]乙酮(35mg，0.084mmol，73%收率)。LC-MS(ESI)RT (min)=1.413，[M+H]+ =415.2，方法=C。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.23(s,1H),8.98(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =4.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.63(s,1H),7.29(d,J =5.2Hz,1H),7.10(s,2H),6.77(s,1H),6.68(s,1H),5.27-5.21(m,1H),4.55(t,J =13.8Hz,1H),4.41(q,J =4.8Hz,1H),4.29(t,J =9.0Hz,1H),4.14-4.09(m,1H),2.40(s,3H),1.83(s,3H)。
實例125： 1-[8-胺基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(化合物162)
步驟1：N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯
在0℃下向3-氯-N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苄基)]-2,7-啶-1,6-二胺(2.0g，4.04mmol)及吡啶(10mL，123.64mmol)於二氯甲烷(40mL)中之溶液添加氯甲酸苯酯(0.65mL，5.18mmol)。將混合物在0℃攪拌2h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用EtOAc/己烷=1：2溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(1.8g，2.9mmol，72%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =615.2。
步驟2：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲
將N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(1.8g，2.93mmol)、1-甲基-1h-吡唑-4-胺(1.42g，14.62mmol)及Et3 N(3.0g，29.7mmol)於1,4-二噁烷(80mL)中之混合物在90℃攪拌2h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用EtOAc/己烷=4：1溶離來純化，得到呈白色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.6g，2.59mmol，89%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =618.1。
步驟3：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-吡唑-4-基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.6g，2.59mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(0.68g，3.1mmol)、x-Phos-Pd-G2(407mg，0.52mmol)、x-Phos(493mg，1.04mmol)及K2 CO3 (0.74g，5.36mmol)於1,4-二噁烷(80mL)及水(10mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌1.5h。將混合物濃縮且藉由管柱層析術用DCM/MeOH=20：1溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g，2.29mmol，89%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =675.3。
步驟4：1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g，2.29mmol)於2,2,2-三氟乙酸(30mL)中之混合物在50℃攪拌1h。將混合物濃縮，且用MeOH中之7N NH3 中和至pH=9至10。將混合物濃縮，過濾，用DCM(200ml)及H2 O(100ml)洗滌且乾燥，得到呈黃色固體狀之粗品1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g)。LCMS(ESI)[M+H]+ =375.2。
步驟5：1-[8-胺基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲
向1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(300mg，0.8mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中之溶液中添加Selectfluor (149mg，0.4mmol)。將混合物在50℃攪拌3h。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-胺基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(2.7mg，0.0063mmol，0.8%收率)。LC-MS(ESI)RT (min)=1.713，[M+H]+=393.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.48(s,1H),9.27(s,1H),9.19(s,1H),8.43(s,1H),8.40(d,J =5.2Hz,1H),7.97(s,1H),7.77(s,1H),7.34(s,1H),7.29(d,J =4.8Hz,1H),7.19(s,2H),3.71(s,3H),2.20(s,3H)。
實例126： 1-[8-胺基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(化合物163)
向1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(100mg，0.27mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加NCS(178mg，1.34mmol)。將混合物在25℃攪拌隔夜。將混合物藉由製備型HPLC(C-18)用乙腈/水+0.05% NH4 HCO3 溶離來純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-胺基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(44mg，0.11mmol，40%收率)。LC-MS(ESI)RT (min)=1.765，[M+H]+=409.2，方法=G。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.57(s,1H),9.38(s,1H),9.26(s,1H),8.49(d,J =4.8Hz,1H),8.42(s,1H),8.26(s,1H),7.90(s,1H),7.56(s,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),3.81(s,3H),2.19(s,3H)。
實例127： (±)-反式-4-(1-胺基-6-((反式)-2-氰基環丙烷羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺)(化合物164)
步驟1：4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺
在0℃下向4-溴-3-甲基苯甲酸(500.0mg，2.33mmol)及2,2,2-三氟乙基胺(210.0mg，2.12mmol)於吡啶(5mL)中之溶液中添加氧氯化磷(1300mg，8.48mmol)。將所得混合物攪拌1h。將反應用飽和NaHCO3 (水性)淬滅，且用乙酸乙酯(40mLx2)萃取。將合併之乙酸乙酯萃取物在真空中濃縮，且藉由急驟管柱層析術(PE：EA=3：1至1：3)純化，得到呈黃色固體狀之4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺(490mg，72.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =296.0。
步驟2：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺
將4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺(200mg，0.680mmol)、KOAc(133mg，1.35mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(206mg，0.810mmol)及Pd(dppf)Cl2 (49mg，0.07mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在80℃攪拌3hr。將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(PE/EA=10%至50%)純化，得到呈白色固體狀之 3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺(200mg，86%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =344.1。
步驟3：4-(1-胺基-6-((反式)-2-氰基環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺)
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(168mg，0.58mmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺(100mg，0.29mmol)、乙醯氧基鉀(86mg，0.87mmol)、XphosPdG2 (23mg，0.03mmol)及Xphos(28mg，0.06mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及H2 O(0.4mL)中之混合物在100℃攪拌48h。將混合物濃縮，且藉由逆相層析術(乙腈10至45%於0.05% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈黃色固體狀之4-[1-胺基-6-[[(反式)-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲醯胺(6.2mg，4.5%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.75，[M+H]+ =469.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：9.30(s,1H),8.29(s,2H),7.31(s,1H),7.79(dd,J =1.2,8.0Hz,1H),7.53(d,J =8.0Hz,1H),4.16(q,J =9.2Hz,2H),2.66-2.64(m,1H),2.16-2.11(m,1H),1.62-1.55(m,2H)。
實例128： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物165)
步驟1：5-溴-4-甲基吡啶-3-胺
將鐵(3.1g，55.3mmol)及3-溴-4-甲基-5-硝基吡啶(2.0g，9.22mmol)於乙醇(20mL)及飽和NH4 Cl(4mL)中之混合物在70℃攪拌4h。將反應物冷卻至室溫，且用乙酸乙酯(200mL)稀釋。添加Na2 SO4 且將反應物攪拌0.5h，之後過濾。將濾液濃縮，得到呈黃色固體狀之5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(1.4g，74.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =187.1。
步驟2：(5-溴-4-甲基吡啶-3-基胺基甲酸第三丁酯
向5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(600mg，3.21mmol)於四氫呋喃(10mL)中之溶液中添加NaHMDS(6.5mL，6.5mmol)，且在0℃攪拌0.5h。添加二碳酸二第三丁酯(770mg，3.53mmol)。將混合物在室溫下攪拌2hr。隨後將反應物用水(0.5mL)稀釋且濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(PE/EA=20%)純化，得到呈白色固體狀之N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(710mg，66.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =287.0。
步驟3：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-3-基胺基甲酸第三丁酯
將N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(710mg，2.47mmol)、乙醯氧基鉀(486mg，4.95mmol)及雙(頻哪醇合)二硼(756mg，2.98mmol) 及Pd(dppf)Cl2 (91mg，0.12mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在90℃攪拌18h。將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(PE/EA=30%至70%)純化，得到呈黃色固體狀之N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(510mg，56.9%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =335.2。
步驟4：(±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-氰基環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶-3-基胺基甲酸第三丁酯
將N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(140mg，0.42mmol)、(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.35mmol)、Pd(dppf)Cl2 (13mg，0.02mmol)及Na2 CO3 (74.0mg，0.7mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及H2 O(0.4mL)中之混合物在100℃攪拌18h。將混合物冷卻至室溫，且用水(10mL)稀釋。隨後將混合物用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取。將合併之乙酸乙酯萃取物經Na2 SO4 乾燥，且在真空中濃縮，得到呈褐色油狀之(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(160mg，41.6%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =460.2。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(160mg，0.14mmol)於二氯甲烷(1mL)及2,2,2-三氟乙酸(1mL)中之溶液在25℃攪拌4h。將混合物濃縮，且藉由製備型HPLC(乙腈5至40%於0.05% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(34.5mg，66.4%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+ =360.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：9.30(s,1H),8.23(s,1H),8.00(s,1H),7.85(s,1H),6.95(s,1H),2.66-2.64(m,1H),2.17(s,3H),2.15-2.11(m,1H),1.62-1.55(m,2H)。
實例129： (±)-反式-2-(1-乙醯基哌啶-4-基)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物166)
步驟1：(E)-4-(3-第三丁氧基-3-側氧基丙-1-烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
在0℃下向二乙基膦醯基乙酸第三丁酯(2.6g，10.32mmol)於四氫呋喃(20mL)中之溶液中添加溴化甲基鎂(3.44mL，10.32mmol)。將混合物攪拌0.5h。隨後向反應溶液中添加4-甲醯基-1-哌啶羧酸第三丁酯(2.0g，9.38mmol)。將混合物在25℃攪拌5h。將混合物用飽和NH4 Cl稀釋且濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(PE/EA=1%-10%)純化，得到呈黃色固體狀之4-[(E)-3-第三丁氧基-3-側氧基-丙-1-烯基]哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.4g，82.2%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =334.2。
步驟2：(±)-4-((反式)-2-(第三丁氧基羰基)環丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
向碘化三甲基氧化鋶(1979mg，8.99mmol)於二甲亞碸(10mL)中之溶液中添加第三丁氧基鉀(1009mg，8.99mmol)。將混合物攪拌0.5h。添加4-[(E)-3-第三丁氧基-3-側氧基-丙-1-烯基]哌啶-1-羧酸第三丁酯(1.4g，4.5mmol)，且將混合物在25℃攪拌4h。將混合物用水(50mL)稀釋，且用PE(50mLx3)萃取。將合併之PE經Na2 SO4 乾燥，且在真空中濃縮，得到呈無色油狀之4-[(反式)-2-第三丁氧基羰基環丙基]哌啶-1-羧酸第三丁酯(830mg，56.7%收率)。
步驟3：(±)-反式-2-(哌啶-4-基)環丙烷羧酸
將(±)-4-[(反式)-2-第三丁氧基羰基環丙基]哌啶-1-羧酸第三丁酯(830mg，1.99mmol)於5mL 4M HCl於二噁烷中之混合物在25℃攪拌18h。將反應物濃縮，得到呈白色固體狀之(±)-反式-2-(4-哌啶基)環丙烷羧酸(640mg，90%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =170.1
步驟4：(±)-反式-2-(1-乙醯基哌啶-4-基)環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-(4-哌啶基)環丙烷羧酸(640mg，3.78mmol)、Ac2 O(1158.0mg，11.35mmol)及TEA(574mg，5.67mmol)於甲醇(5mL)中之混合物在25℃攪拌18h。隨後將混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(MeOH 5%至40%/0.02% HCOOH於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)環丙烷羧酸(450mg，56.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =212.2
步驟5：(±)-反式-2-(1-乙醯基哌啶-4-基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
向(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)環丙烷羧酸(430mg，2.04mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(436mg，2.04mmol)、吡啶(644mg，8.14mmol)於二氯甲烷(4mL)中之混合物中添加POCl3 (1248mg，8.14mmol)。將反應物在25℃攪拌1h。將混合物用飽和NaHCO3 稀釋，且用乙酸乙酯(30mLx2)萃取。將合併之乙酸乙酯萃取物經Na2 SO4 乾燥，且在真空中濃縮，得到呈粗品黃色固體狀之(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(720mg，54.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =407.1。
步驟6：(±)-反式-2-(1-乙醯基哌啶-4-基)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(700mg，1.72mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及氫氧化銨(25%，10mL)中之混合物在90℃攪拌2h。將混合物用2mL MeOH及乙酸乙酯(20mL)稀釋。將懸浮液在室溫下攪拌0.5h。隨後將懸浮液過濾。將濕濾餅用乙酸乙酯洗滌且在真空中乾燥，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(580mg，82.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =288.2。
步驟7：(±)-反式-2-(1-乙醯基哌啶-4-基)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(380mg，0.98mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(322mg，1.47mmol)、Pd(dppf)Cl2 (36mg，0.05mmol)及Na2 CO3 (312mg，2.94mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(2mL)中之混合物在100℃攪拌5h。隨後將混合物冷卻至室溫且過濾。將濾液濃縮，且藉由製備型HPLC(乙腈10至60%/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-2-(1-乙醯基-4-哌啶基)-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(169mg，38.8%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.49，[M+H]+ =445.3，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.29(s,1H),7.40(d,J =4.8Hz,1H),6.97(s,1H),6.26(s,1H),4.54-4.52(m,1H),3.96-3.94(m,1H),3.09-3.07(m,1H),2.63-2.61(m,1H),2.45(s,3H),2.12(s,3H),1.90-1.86(m,3H),1.31-1.14(m,5H),1.01-0.99(s,1H)。
實例130： (±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物167)
步驟1：(3-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)吡啶-2(1H)-酮
將2,5-二溴-4-甲基吡啶(500mg，1.99mmol)、(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)硼酸(415mg，2.99mmol)、Na2 CO3 (422mg，3.99mmol)及Pd(dppf)Cl2 (73mg， 0.10mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(0.4mL)中之混合物在90℃攪拌18h。將混合物冷卻至室溫，且用水稀釋。將產物用乙酸乙酯(50mLx3)萃取。將合併之乙酸乙酯經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(PE/EA=50%至80%)純化，得到呈白色固體狀之3-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)-1H-吡啶-2-酮(320mg，60.6%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =267.0。
步驟2：3-(4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-2-基)吡啶-2(1H)-酮
將3-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)-1H-吡啶-2-酮(350mg，1.32mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(402mg，1.58mmol)、乙醯氧基鉀(259mg，2.64mmol)及Pd(dppf)Cl2 (48mg，0.070mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在110℃攪拌18h。將反應物冷卻至室溫且用水稀釋。將混合物用乙酸乙酯(50mLx3)萃取。將合併之乙酸乙酯層經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮。將殘餘物用PE(20mL)洗滌且過濾。將收集之固體濾餅在真空中乾燥，得到呈黑色固體狀之3-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]-1H-吡啶-2-酮(620mg，48.3%收率)。此粗材料不經純化即用於下一步驟中。LCMS(ESI)：[M+H]+ =313.2
步驟3：(±)-順式-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將3-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]-1H-吡啶-2-酮(620mg，0.87mmol)、(±)-順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(180mg，0.64mmol)、Na2 CO3 (170mg，1.6mmol)及Pd(dppf)Cl2 (23mg，0.030mmol)於1,4-二噁烷(2mL)及H2 O(0.2mL)中之混合物在100℃攪拌4h。間反應物冷卻至室溫且過濾。將濾液濃縮藉由製備型HPLC(乙腈10至70%/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-[4-甲基-6-(2-側氧基-1H-吡啶-3-基)-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(42.5mg，14.7%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+ =431.2，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：11.99(s,1H),10.02(s,1H),9.39(s,1H),8.65(s,1H),8.56(s,1H),8.51(d,J =5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.54(d,J =5.2Hz,1H),7.34(s,1H),7.03(s,2H),6.43-6.40(m,0.5H),5.05-4.87(m,0.5H),2.40(s,3H),2.28-2.45(m,1H),1.71-1.64(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
實例131： 2-[4-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇(化合物168)
步驟1：N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(600mg，1.06mmol)、4-溴-1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(1200mg，4.36mmol)、t-BuBrettPhos Pd G3(150mg，0.18mmol)、t-BuBrettPhos(120mg，0.25mmol)、t-BuONa(400mg，4.17mmol)於甲苯(20mL)中之混合物在Ar下在密封管中在100℃攪拌24h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(100mL)稀釋。將混合物用飽和NH4 Cl(20mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽石層析術(PE：EA=1：3)純化，得到呈褐色固體狀之N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺(470mg，58.3%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =760.3。
步驟2：2-[4-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺(470mg，0.62mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之混合物在80℃攪拌1h。將反應混合物濃縮。將殘餘物再溶於MeOH(3mL)中，且用7N NH3 /MeOH鹼化至pH 9至10。將材料用急驟 層析術(C18，NH4 HCO3 /MeOH/H2 O)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇(125mg，53.8%收率)。 LCMS(ESI)：RT (min)=1.45，[M+H]+ =376.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 9.22(s,1H),8.85(brs,1H),8.47-8.46(m,2H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.32(d,J =5.2Hz,1H),7.06(brs,2H),6.71(s,1H),6.64(s,1H),4.92-4.89(m,1H),4.14-4.09(m,2H),3.76-3.72(m,2H),2.79(q,J =7.6Hz,2H),1.10(t,J =7.6Hz,3H)。
實例132： 2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇(化合物169)
步驟1：4-溴-1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑
在0℃下將NaH(60%於油中，580mg，14.5mmol)逐份添加至4-溴-1H-吡唑(2g，13.61mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(25mL)中之溶液中。將混合物在0℃攪拌2h。將2-(2-溴乙氧基)四氫-2h-吡喃(3g，14.35mmol)添加至反應混合物中。將所得混合物在15℃攪拌2h。將反應混合物用水(20mL)及NH4 Cl(50mL)稀釋。將產物用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。將乙酸乙酯層合併，用鹽水(100mL x 2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽石層析術(PE：EA=4： 1)純化，得到呈無色油狀之4-溴-1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(3g，80.1%收率)。LCMS(ESI)[M+23]+ =297.0。
步驟2：N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.36mmol)、4-溴-1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(400mg，1.45mmol)、t-BuBrettPhos Pd G3(40mg，0.05mmol)、t-BuBrettPhos(40mg，0.08mmol)、t-BuONa(120mg，1.25mmol)於甲苯(10mL)中之混合物在100℃在Ar下在密封管中攪拌16h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(30mL)稀釋。將混合物用飽和NH4 Cl(10mL)洗滌。將有機層分離，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物藉由矽石層析術(PE：EA=1：3至EA)純化，得到呈褐色固體狀之N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺(90mg，33.3%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =746.4。
步驟3：2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氫吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-啶-1,6-二胺(90mg，0.12mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之混合物在80℃攪拌1h。將反應混合物蒸發。將殘餘物用CH3 CN(1mL)及DMF(1mL)稀釋，之後藉由製備型HPLC純化，得到呈淡黃色固體狀之2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]乙醇(23.4mg，53.7%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.39，[M+H]+ =362.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.14(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.93(s,1H),7.60(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.75(s,1H),6.71(s,1H),4.24(t,J =5.2Hz,2H),3.93(t,J =5.2Hz,2H),2.44(s,3H)。
實例133： 4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮(化合物170)
步驟1：4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(300mg，0.54mmol)、4-溴-1-甲基-吡啶-2-酮(300mg，1.6mmol)、Pd2 dba3 (100mg，0.11mmol)、t-BuBrettPhos(140mg，0.29mmol)及Cs2 CO3 (300mg，0.92mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在100℃在Ar下在密封管中攪拌16h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(50mL)稀釋。將混合物用鹽水(20mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(EA至EA：MeOH=10：1)純化，得到呈褐色固體狀之4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮(140mg，39.1%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =659.3。
步驟2：4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮
將4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮(140mg，0.21mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之混合物在80℃攪拌1h。將反應混合物濃縮，且藉由急驟層析術(C18，NH4 HCO3 /MeOH/H2 O)純化，產生呈白色固體狀之4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1-甲基-吡啶-2-酮(48mg，63%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.36，[M+H]+ =359.2，方法=G；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 +D2 O)：δ 9.34(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J =4.8Hz,1H),7.52(d,J =7.6Hz,1H),7.32(d,J =4.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.91(s,1H),6.89(d,J =2.0Hz,1H),6.38(dd,J =2.0,7.6Hz,1H),3.34(s,3H),2.40(s,3H)。
實例134： 1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(化合物171)
步驟1：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲
在15℃下將Me3 Al 2M於甲苯中，0.8mL，1.6mmol)滴加至2-胺基苯甲腈(200mg，1.69mmol)於甲苯(10mL)中之溶液中。將混合物在15℃攪拌1h。N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(170mg，0.28mmol)逐份添加至反應混合物，將混合物在15℃攪拌1h。將反應混合物用H2 O(1mL)及乙酸乙酯(100mL)稀釋。有機層用飽和NH4 Cl(30mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物用矽膠層析術(PE：EA=2：1至EA)純化，得到呈淡黃色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(130mg，73.6%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =639.3。
步驟2：1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(110mg，0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(110mg，0.50mmol)、XPhos Pd G2(40mg，0.05mmol)、XPhos(40mg，0.08mmol)及K2 CO3 (110mg，0.80mmol)於1,4-二噁烷(16mL)及水(4mL)中之混合物在100℃在Ar下在密封管中攪拌3h。將反應混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(100mL)稀釋。有機層用鹽水(20mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=1：2至EA至EA：MeOH=10：1)純化，得到呈褐色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(80mg，66.8%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =696.3。
步驟3：1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(80mg，0.11mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之混合物在50℃攪拌1h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型HPLC(NH4 HCO3 /CH3 CN/H2 O)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(12.4mg，27.3%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+ =396.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)：δ 9.60(s,1H),8.60(s,1H),8.45(d,J =4.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.84(s,1H),7.65-7.61(m,1H),7.42(d,J =4.0Hz,1H),7.28-7.19(m,3H),2.50(s,3H)。
實例135： (±)-反式-N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物172)
向(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(190mg，0.49mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加Selectfluor(95mg，0.25mmol)。將混合物在50℃攪拌3h。將混合物藉由逆相層析術(乙腈17至47%於0.05%氨於水中)直接純化，得到(±)-反式-N-[8-胺基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(33mg，16.6%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.538，[M+H]+ =404.1，方法=C；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 12.64(s,1H),11.19(s,1H),9.43(s,1H),8.52(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.63(s,1H),7.38(s,1H),7.37(d,J =5.2Hz,1H),7.32(s,2H),2.28(s,3H),2.25-2.21(m,2H),1.45-1.40(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。
實例136： (±)-反式-N-(8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物173)
向經攪拌之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(100mg，0.26mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(8 mL)中之溶液中添加N-氯琥珀醯亞胺(180mg，1.35mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。將混合物藉由逆相層析術(乙腈17至47%於0.05%氨於水中)直接純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(38mg，35%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.486，[M+H]+ =420.1，方法=G；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 12.65(s,1H),11.19(s,1H),9.44(s,1H),8.61(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.60(br,4H),7.36(d,J =5.2Hz,1H),2.30-2.21(m,2H),2.17(s,3H),1.45-1.42(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
實例137： 1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基)脲(化合物174)
步驟1：1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基胺基甲酸第三丁酯
將3-boc-胺基氮雜環丁烷鹽酸鹽(900mg，4.31mmol)、2-溴乙基甲醚(1.26g，9.07mmol)及碳酸鉀(1.26g，9.13mmol)於乙腈(50mL)中之溶液加熱至80℃達24h。將混合物過濾且在真空中濃縮，得到呈橙色固體狀之N-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]胺基甲酸第三丁酯(800mg，81%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =231.1。
步驟2：1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-胺鹽酸鹽
將N-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]胺基甲酸第三丁酯(800mg，3.47mmol)於HCl/二噁烷(4M，16.mL，64mmol)中之溶液在室溫下攪拌1h。將混合物蒸發，且將所得固體用(EA：PE=1：1)洗滌，得到呈黃色固體狀之1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-胺鹽酸鹽(600mg，51.8%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =261.2。
步驟3：1-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基)脲
將N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(800mg，30%純度，0.39mmol)、1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-胺鹽酸鹽(600mg，1.8mmol)及Et3 N(0.8g，7.92mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15mL)中之混合物在90℃下攪拌3h。將混合物用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用水(30mLx3)及鹽水(30mLx2)洗滌。將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱(EA：PE=1：1至DCM：MeOH=20：1)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]脲(150mg，39.6%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =651.3。
步驟4：1-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]脲(140mg，0.14mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(60mg，0.27mmol)、Pd(dppf)Cl2 (25mg，0.03mmol)及K2 CO3 (50mg，0.36mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之溶液加熱至105℃達3h。將混合物藉由矽膠管柱(EA至DCM：MeOH=10：1)直接純化，得到呈灰色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]脲(80mg，75%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =708.3。
步驟5：1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基)脲
將1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]脲(80mg，0.12mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之溶液加熱至45℃達1h。溶劑蒸發後，將殘餘物藉由MeOH中之氨(ammona)中和。將所得混合物藉由逆相層析術(乙腈17至47%於0.05%氨於水中)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮雜環丁-3-基]脲(23.1mg，46%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.473，[M+H]+ =408.3，方法=F；1 HNMR(400MHz,CD3OD)：δ 9.24(s,1H),8.52(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.54(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.50(t,J =6.8Hz,1H),3.79(dt,J =2.0,6.8Hz,2H),3.45(t,J =5.6Hz,2H),3.35(s,3H),3.15(dt,J =2.0,6.8Hz,2H),2.74(t,J =5.6Hz,2H),2.45(s,3H)。
實例138： 1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(氮雜環丁-3-基)脲(化合物175)
步驟1：3-(3-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)脲基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯
將N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(240mg，0.39mmol)、1-Boc-3-(胺基)氮雜環丁烷(400mg，2.32mmol)及Et3 N(0.8g，7.92mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(15mL)中之混合物在90℃攪拌3h。將混合物用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用水(30mLx3)及鹽水(30mLx2)洗滌。將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱(EA：PE=1：2至1：1)純化，得到呈白色固體狀之3-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(110mg，27%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =693.3。
步驟2：3-(3-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)脲基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯
將3-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(100mg，0.10mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(28mg，0.13mmol)、XPhos Pd G2(12mg，0.02mmol)、AcOK(23mg，0.23mmol)及XPhos(18mg，0.04mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌2h。將混合物濃縮，且藉由矽膠管柱(EA：PE=1：1至100% EA至DCM：MeOH=10：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之3-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基胺基]氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(80mg，88%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =750.3。
步驟3：1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(氮雜環丁-3-基)脲
將3-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺甲醯基胺基]氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯(75mg，0.08mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之溶液加熱至45℃達1h。溶劑蒸發後，將混合物藉由MeOH中之氨中和。將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈17至47%於0.05%碳酸氫銨(ammonia bicarbonate)於水中)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(氮雜環丁-3-基)脲(14.3mg，51%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.366，[M+H]+ =350.1，方法=C；1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.26(s,1H),9.17(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.80(s,1H),7.67(d,J =5.2Hz,1H),7.30(d,J =5.2Hz,1H),7.26(s,2H),6.88(s,1H),4.5-4.47(m,1H),3.63-3.59(m,2H),3.40-3.32(m,2H),2.41(s,3H)。
實例139： (R)-1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲(化合物176)
步驟1：(R)-1-(8-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲
在0℃下向三光氣(108mg，0.36mmol)於四氫呋喃(4mL)中之溶液中添加四氫呋喃(5mL)中之3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(180mg，0.18mmol)及Et3 N(0.5mL，3.56mmol)。將混合物在0℃攪拌1h。添加(3R)-3-胺基-1-甲基-吡咯啶-2-酮(450mg，3.94mmol)。將混合物溫熱升至室溫隔夜。將混合物藉由矽膠管柱層析術(DCM：MeOH=20：1)直接純化，得到呈淡黃色固體狀之1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(32mg，28%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =646.3。
步驟2：(R)-1-(8-胺基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-甲基-2-側氧基吡咯啶-3-基)脲
將1-[8-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(27mg，0.0400mmol)於2,2,2-三氟乙酸(3mL)中之溶液加熱回流3h。將混合物蒸發，且藉由MeOH中之氨中和。 將所得殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-側氧基-吡咯啶-3-基]脲(5.5mg，33%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.50，[M+H]+ =406.2，方法=C；1 HNMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.50(s,2H),7.52(s,1H),7.45(d,J =5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.49(t,J =9.2Hz,1H),3.47(dd,J =4.0,9.2Hz,2H),2.93(s,3H),2.83(q,J =7.6Hz,2H),2.62-2.57(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.19(t,J =7.6Hz,3H)。
實例140： 1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(1-羥基丙-2-基)脲(化合物177)
步驟1：1-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-(1-羥基丙-2-基)脲
將N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(150mg，0.24mmol)、DL-丙胺醇(75mg，1mmol)及Et3 N(500mg，4.95mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之混合物在90℃攪拌2h。將混合物用乙酸乙酯(80mL)稀釋，用水(30mL x 3)及鹽水(30mL x2)洗滌。將有機層經硫酸鈉 乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱(EA：PE=1：1至4：1)純化，得到呈白色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(2-羥基-1-甲基-乙基)脲(110mg，0.18mmol，76%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =596.2。
步驟2：1-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-羥基丙-2-基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-(2-羥基-1-甲基-乙基)脲(100mg，0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(50mg，0.23mmol)、XPhos Pd G2(20mg，0.03mmol)、AcOK(40mg，0.41mmol)及XPhos(30mg，0.06mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌2h。將混合物濃縮，且藉由矽膠管柱層析術(DCM：MeOH=10：1)純化，得到呈淡黃色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-羥基-1-甲基-乙基)脲(85mg，78%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =653.3。
步驟3：1-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(1-羥基丙-2-基)脲
將1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-(2-羥基-1-甲基-乙基)脲(80mg，0.12mmol)於2,2,2-三氟乙酸(5mL)中之溶液加熱至45℃達1h。溶劑蒸發後，將殘餘物藉由甲醇中之氨中和。將混合物藉由逆相HPLC(乙腈17至47%於0.05%碳酸氫銨(ammonia bicarbonate)於水中)直接純化，得到呈白色固體狀之1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-(2-羥基-1-甲基-乙基)脲(28.9mg，67%收率)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.432，[M+H]+ =353.1，方法=C；1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.26(s,1H),9.16(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.78(s,1H),7.29(d,J =5.2Hz,1H),7.23-7.21(m,3H),6.87(s,1H),4.83(t,J =5.2Hz,1H),3.79-3.70(m,1H),3.43-3.32(m,2H),2.41(s,3H),1.11(d,J =6.8Hz,3H)。
實例141： 1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(化合物178)
步驟1：(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈
將4-硝基-1H -吡唑(500mg，4.42mmol)、2-溴丙腈(1185mg，8.85mmol)及碳酸鉀(610mg，4.42mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(15mL)中之混合物在80℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術用PE/EA(5 /1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈(720mg，4.334mmol，98%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =167.1。
步驟2：(±)-2-(4-胺基吡唑-1-基)丙腈
將(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈(720mg，4.33mmol)及鐵(1230mg，21.96mmol)於乙酸(20mL)中之混合物在25℃攪拌隔夜。將反應混合物過濾且濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術用DCM/MeOH(20/1)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之(±)-2-(4-胺基吡唑-1-基)丙腈(200mg，33.9%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =137.1。
步驟3：(±)-1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲
將(±)-2-(4-胺基吡唑-1-基)丙腈(176mg，1.29mmol)、N -[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]胺基甲酸苯酯(160mg，0.26mmol)及三乙胺(100mg，0.99mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在110℃攪拌隔夜。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，得到呈黃色固體狀之1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(165mg，96.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =657.1。
步驟4：(±)-1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲
將(±)-1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(200mg，0.3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(80mg，0.37mmol)、Xphos-Pd-G2(24mg，0.030mmol)、Xphos(28mg，0.06mmol)及碳酸鉀(84mg，0.61mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(0.8mL)中之混合物在100℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(200mg，92.1%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =714.1。
步驟5：(±)-1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲
將(±)-1-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(220mg，0.31mmol)於2,2,2-三氟乙酸(10mL)中之溶液在50℃攪拌3h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型 HPLC(流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )B：ACN)純化，得到呈白色固體狀之(±)-1-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(60mg，47.1%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.532，[M+H]+ =414.1，方法=H；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.44(s,2H),9.32(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.07(s,1H),7.87(s,1H),7.65(s,1H),7.32-7.31(m,2H),6.94(s,1H),5.82-5.83(m,1H),2.42(s,3H),1.78(d,J =6.8Hz,3H)。
實例142： (±)-順式- N -[8-胺基-6-[6-[(3S)-3-胺基吡咯啶-1-基]-4-甲基-3-吡啶基]-2,7- 啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(化合物179)
步驟1：N -[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三 丁酯
將5-溴-2-氟-4-甲基-吡啶(1000mg，5.26mmol)、(3S)-3-吡咯啶基胺基甲酸第三丁酯(1200mg，6.44mmol)及碳酸鉀(2200mg，15.94mmol)於二甲亞碸(15mL)中之混合物在100℃攪拌隔夜。將反應混合物用水(30mL)稀釋，且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術用PE/EA(10/1)溶離來純化，得到呈白色固體狀之N -[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三 丁酯(1700mg，90.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =356.1。
步驟2：N -[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三 丁酯
將N-[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三丁酯(1000mg，2.81mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(3500mg，13.78mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(229mg，0.28mmol)及乙酸鉀(835mg，8.52mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物在90℃攪拌隔夜。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(PE/EA=1/1)純化，得到呈黃色油狀之N-[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三丁酯(1000mg，1.24mmol，44.2%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =404.1。
步驟3：(±)-N -[(3S)-1-[5-[1-胺基-6-[[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三 丁酯
將(±)-順式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟-環丙烷羧醯胺(70mg，0.25mmol)、N -[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三丁酯(100mg，0.25mmol)、Xphos-Pd-G2(19mg，0.02mmol)、Xphos(24mg，0.05mmol)及碳酸鉀(68mg，0.49mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在100℃攪拌2h。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(PE/EA=1/1)純化，得到呈黃色油狀之N -[(3S)-1-[5-[1-胺基 -6-[[(1R,2R)-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三 丁酯(100mg，77.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =522.1。
步驟4：(±)-順式-N -[8-胺基-6-[6-[(3S)-3-胺基吡咯啶-1-基]-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺
將N-[(3S)-1-[5-[1-胺基-6-[[順式-2-氟環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯啶-3-基]胺基甲酸第三丁酯(100mg，0.19mmol)及氯化氫於1,4-二噁烷(4N，0.5mL，1.9mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之溶液在25℃攪拌1h。將反應混合物濃縮，之後添加甲醇中之氨。將溶液濃縮，且藉由製備型HPLC(流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )B：ACN)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-順式-N-[8-胺基-6-[6-[(3S)-3-胺基吡咯啶-1-基]-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氟-環丙烷羧醯胺(45mg，55.7%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.407，[M+H]+ =422.1，方法=H；1 HNMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.24(s,1H),8.26(s,1H),8.07(s,1H),6.88(s,1H),6.41(s,1H),4.98-4.95(m,1H),4.81-4.79(m,1H),3.72-3.63(m,3H),3.54-3.48(m,1H),3.27-3.25(m,1H),2.38(s,3H),2.30-2.25(m,1H),2.18-2.15(m,1H),1.96-1.80(m,2H),1.26-1.20(m,1 H)。
實例143： (±)-反式-4-[1-胺基-6-[[反式-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7- 啶-3-基]-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺(化合物180)
步驟1：4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯
在0℃下將N-溴琥珀醯亞胺(385mg，2.16mmol)逐份添加至3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(350mg，2.09mmol)及碳酸鉀(307mg，2.22mmol)於乙腈(20mL)中之混合物中。將混合物溫熱至室溫，用水稀釋，且隨後攪拌30min。將沉澱物藉由真空過濾收集，用乙醇：水(1：2)洗滌且乾燥，得到呈白色固體狀之4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(450mg，1.8285mmol，87.4%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =246.1。
步驟2：4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸乙酯
將4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(450mg，1.83mmol)於四氫呋喃(20mL)中之混合物在0℃攪拌10min。在0℃下添加氫化鈉(60mg，2.5mmol)。將反應混合物在0℃攪拌10min。隨後添加碘甲烷(312mg，2.2mmol)。將反應混合物溫熱至25℃且攪拌2h。將反應混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(PE/EA=20/1)純化，得到呈黃色固體狀之4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸乙酯(320mg，1.23mmol，67.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =260.1。
步驟3：4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸
將4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸乙酯(320mg，1.23mmol)及氫氧化鉀(138mg，2.46mmol)於乙醇(10mL)及水(5mL)中之混合物在100℃攪拌4h。將反應物濃縮，且隨後用水(20mL)稀釋。將混合物用乙酸乙酯(2×20mL)洗滌。將水相調整至pH 4，且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮為呈白色固體狀之4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸(270mg，1.1634mmol，94.6%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =232.1。
步驟4：4-溴-N ,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺
將4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-羧酸(260mg，1.12mmol)、2-(7-Aza-1H -苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯(0.64g，1.68mmol)、碳酸鉀(462.0mg，3.35mmol)及甲胺(105.0mg，3.38mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在25℃攪拌1h。將反應混合物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(50%乙酸乙酯於石油醚中)純化，得到呈白色固體狀之4-溴-N ,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺(250mg，1.02mmol，91%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =245.1。
步驟5：N,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡咯-2-羧醯胺
將4-溴-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺(100mg，0.41mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(510mg，2.01mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(34mg，0.04mmol)及磷酸鉀(260mg，1.23mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在85℃攪拌隔夜。將反應混合物濃縮，且藉由製備型TLC(PE/EA，1/1)純化，得到 呈黃色固體狀之N,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡咯-2-羧醯胺(120mg，49.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =245.1。
步驟6：(±)-反式-4-[1-胺基-6-[[反式-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-N ,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺
將(±)-反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(95mg，0.33mmol)、N ,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡咯-2-羧醯胺(100mg，0.34mmol)、Xphos-Pd-G2(27mg，0.03mmol)、Xphos(32mg，0.07mmol)及碳酸鉀(95mg，0.69mmol)於1,4-二噁烷(5mL)及水(1mL)中之溶液在82℃攪拌隔夜。將反應混合物濃縮，且藉由製備型HPLC(流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )B：ACN)純化，得到呈黃色固體狀之4-[1-胺基-6-[[(1S,2S)-2-氰基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-N ,1,3,5-四甲基-吡咯-2-羧醯胺(11mg，0.0250mmol，7.3%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.47，[M+H]+=418.1，方法=H；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.23(s,1H),8.21(s,1H),6.75(s,1H),6.41(s,2H),3.68(s,3H),2.93(s,3H),2.63-2.62(m,1H),2.31(s,3 H),2.22(s,3H),2.16-2.11(m,1H),1.62-1.54(m,2H)。
實例144： (±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-胺基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-環丙烷羧醯胺(化合物181)
步驟1：N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯
將3,5-二溴-2,4-二甲基-吡啶(670mg，2.53mmol)、胺基甲酸第三丁酯(300mg，2.56mmol)、Pd2 (dba)3 (183mg，0.2mmol)、xantphos(235mg，0.41mmol)、Cs2 CO3 (1500mg，4.62mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在90℃攪拌16hr。將反應混合物濃縮且藉由管柱層析術在矽膠(乙酸乙酯/石油醚，1/5)上純化，得到呈黃色固體狀之N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(470mg，60.4%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =303.0。
步驟2：N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯
將N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(600mg，1.99mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1000mg，3.94mmol)、乙酸鉀(400mg，4.08mmol)、Pd(dppf)Cl2 (150mg，0.2mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌2h。將反應混合物濃縮且藉由管柱層析術在矽膠(乙酸乙酯/石油醚20=50%)上純化，得到呈黃色固體狀之N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二 氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(620mg，63.6%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =349.2。
步驟3：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺
將6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(320mg，1.49mmol)、吡啶(2mL，24.73mmol)及POCl3 (0.4mL，5.87mmol)中之混合物在室溫下攪拌。隨後添加(±)-反式-2-甲基環丙烷羧酸(160mg，1.6mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物濃縮，藉由逆相層析術(甲醇0至80%於0.05%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(270mg，59%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =296.0。
步驟4：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(270mg，0.91mmol)於氫氧化銨(25%，4mL)及1,4-二噁烷(4mL)中之混合物在90℃攪拌4h。將混合物濃縮至乾燥，得到呈黃色液體狀之粗品(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(310mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =277.1。
步驟5：(±)-反式-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-甲基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯
將X-Phos-Pd-G2(40mg，0.05mmol)、K2 CO3 (200mg，1.45mmol)、X-Phos(50mg，0.11mmol)、N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(300mg，0.86mmol)及(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-環丙烷羧醯胺(150mg，0.54mmol)於1,4-二噁烷(6mL)及水(1mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌1h。將反應物濃縮且藉由管柱層析術(甲醇/二氯甲烷，1/10)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-甲基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(80mg，21.8%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =463.3。
步驟6：(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-胺基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-環丙烷羧醯胺
將(±)-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-甲基環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(80mg，0.17mmol)於HCl於二噁烷(4M，2mL，8mmol)中之溶液在室溫下攪拌1h。將反應溶液濃縮，且藉由逆相層析術(甲醇0至30%%於0.05%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-(5-胺基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-環丙烷羧醯胺(27mg，42.6%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =363.2，RT (min)=1.56，方法=F；1 HNMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.25(s,1H),7.92(s,1H),6.78(s,1H),2.19(s, 3H),1.97(s,3H),1.72-1.67(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.25-1.22(m,1H),1.19(d,J =6.0Hz,3H),0.79-0.75(m,1H)。
實例145： 2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺(化合物182)
步驟1：2-溴-N,2-二甲基-丙醯胺
在0℃下向甲胺(2M於THF中，10.mL，20mmol)之溶液中添加2-溴-2-甲基丙醯溴(1mL，8.09mmol)。將混合物溫熱至室溫達30min。將反應物濃縮且用1N碳酸氫鈉洗滌。將水層用二氯甲烷(15mLx2)萃取且分離。將有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈無色晶體狀之2-溴-N,2-二甲基-丙醯胺(1.2g，82.4%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =182.0。
步驟2：2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙醯胺
將4-溴-1H-吡唑(735mg，5mmol)、NaH(60%於礦物油中，310mg，7.75mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之混合物在室溫下攪拌10min。添加2-溴-N,2-二甲基-丙醯胺(1130mg，6.28mmol)於N,N-二甲醯胺(5mL)中之溶液。 將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應物用飽和NH4 Cl水溶液(5ml)及50mL鹽水稀釋。將混合物用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。將有機物分離且用Na2 SO4 乾燥，濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚1/1)純化，得到呈無色液體狀之2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙醯胺(1400mg，92.9%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =246.0。
步驟3：2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(220mg，0.4mmol)、t-BuONa(250mg，2.6mmol)、t-BuXPhos(200mg，0.42mmol)、Pd2 (dba)3 (183mg，0.2mmol)、2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙醯胺(600mg，2.44mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在130℃攪拌16hr。將反應混合物濃縮且藉由管柱層析術(甲醇/二氯甲烷，1/10)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺(130mg，41.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =717.4。
步驟4：2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺
將2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺(130mg，0.18mmol)於三氟乙酸(2mL)中之溶液在80℃攪拌1h。將反應物濃縮，且藉由逆相層析術(乙腈26至35%於0.05%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙醯胺(40mg，48.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =417.2，RT (min)=1.40，方法=F；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.16(s,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.05(s,1H),7.68(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.77(s,1H),6.75(s,1H),2.74(s,3H),2.45(s,3H),1.83(s,6H)。
實例146： 2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺(化合物183)
步驟1：2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲酯
在0℃下向4-溴-1H-吡唑(3.0g，20.4mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加NaH(60%於礦物油中，1.0g，25mmol)。將反應混合物在0℃攪拌10min。添加2-溴-2-甲基丙酸甲酯(5mL，38.67mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1h，之後添加50mL鹽水。將混合物用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。將有機物用Na2 SO4 乾燥，濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚，1：3)純化，得到呈無色液體狀之2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲酯(4.7g，93.2%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =249.0。
步驟2：2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸
將2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲酯(2.0g，8.09mmol)、NaOH(600mg，15mmol)於甲醇(10mL)及水(1mL)中之混合物在室溫下攪拌4h。將反應物用HCl溶液(3mL，36mmol)中和。將反應物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚30至50%)純化，得到呈白色固體狀之2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸(1.42g，75.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =233.1。
步驟3：2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙醯胺
將2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸(700mg，3mmol)、N,N-二甲胺(2M於THF中，6mL，12mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液在0℃攪拌。滴加POCl3 (0.5mL，5.38mmol)，且將反應混合物在室溫下攪拌隔夜。將反應混合物用20mL水稀釋。隨後將有機物分離，濃縮且藉由管柱層析術(乙酸乙酯/石油醚，30至50%)純化，得到呈白色固體狀之2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙醯胺(400mg，51.2%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =262.0。
步驟4：2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺
將N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.36mmol)、t-BuONa(150mg，1.56mmol)、t-BuXPhos(150mg，0.31mmol)、Pd2 (dba)3 (140mg，0.15mmol)及2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙醯胺(370mg，1.42mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在130℃攪拌7h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(乙酸乙酯至5%甲醇/二氯甲烷)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺(220mg，70.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =731.4。
步驟5：2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺
將2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺(220mg，0.3mmol)於三氟乙酸(2mL)中之溶液在80℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由逆相層析術(甲醇45至55%%於0.05%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙醯胺(73mg，56.3%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =431.2，RT (min)=1.29，方法=A；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.18(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),8.06(s,1H),7.67(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.77(s,1H),6.72(s,1H),2.99(s,3H),2.54(s,3H),2.45(s,3H),1.82(s,6H)。
實例147： 2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺(化合物184)
步驟12-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙醯胺
將4-溴-1H-吡唑(735mg，5mmol)、NaH(60%於礦物油中，330mg，8.25mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之混合物在室溫下攪拌10min。隨後添加2-溴-N-甲基-乙醯胺(910mg，5.99mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之溶液。將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應物用飽和NH4 Cl溶液(5ml)及鹽水(50mL)稀釋。將混合物用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。將有機物分離且用Na2 SO4 乾燥。將有機物濃縮至乾燥，且藉由管柱層析術(甲醇/DCM，1：10)純化，得到呈白色固體狀之2-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙醯胺(870mg，79.8%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =220.0。
步驟2：2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺
將t-BuONa(500mg，5.2mmol)、t-BuXPhos(180mg，0.37mmol)、Pd2 (dba)3 (183.0mg，0.2mmol)、2-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙醯胺(440mg，2.02mmol)及N1,N1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-1,6-二胺(220mg，0.4mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar氣氛下在130℃攪拌7h。將反應物濃縮至乾燥，且隨後將粗殘餘物藉由管柱層析術在矽膠上用乙酸乙酯/甲醇1/10溶離來純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺(40mg，10.7%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =689.4。
步驟3：2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺
將2-[4-[[8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺(40mg，0.06mmol)於三氟乙酸(1mL)中之溶液在80℃攪拌1h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由逆相層析術(甲醇45至55%%於0.05%氨於水中)純化，得到呈黃色固體狀之2-[4-[[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙醯胺(8mg，35.5%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =389.2，RT (min)=1.18，方法=A；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.15(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.98(s,1H),7.64(s,1H),7.39(d,J =5.2Hz,1H),6.76(s,1H),6.75(s,1H),4.86(s,2H),2.80(s,3H),2.44(s,3H)。
實例148： (±)-反式-2-氰基-N-(6-((S)-4-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)異喹啉-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物185)
步驟1：5-溴-2,4-二甲基苯甲酸
將5-溴-2,4-二甲基-苯甲酸甲酯(400mg，1.65mmol)、LiOH(197mg，8.21mmol)於四氫呋喃(3mL)及水(3mL)中之混合物在N2 下在70℃攪拌3h。隨後將反應物用30mL水及20mL EtOAc稀釋。隨後用1N HCl將混合物之pH調整至4至5。有機層濃縮至乾燥，得到呈白色固體狀之標題化合物(350mg，92.9%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=230.9。
步驟2：5-溴-2,4-二甲基苯甲醯胺
將5-溴-2,4-二甲基-苯甲酸(350mg，1.53mmol)、氯化銨(162mg，3.03mmol)、DIEA(798mg，6.19mmol)、HATU(754mg，1.98mmol)於二氯甲烷(20mL)中之混合物在室溫下攪拌2h。將反應物濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於EtOAc(10mL)中，用150mL鹽水洗滌，乾燥(NaSO4 )且濃縮。將殘餘物用管柱層析術(PE：EA=5：1至PE：EA=1：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(340mg，92%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=230.1。
步驟3：2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺
將5-溴-2,4-二甲基-苯甲醯胺(340mg，1.49mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(567mg，2.23mmol)、PdCl2 dppf(218mg，0.3mmol)、KOAc(438mg，4.47mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽石層析術(PE：EA=4：1至PE：EA=2：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(370mg，62.1%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=276.2。
步驟4：(±)-5-(1-胺基-6-(反式-2-氰基環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-2,4-二甲基苯甲醯胺
將2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(300mg，1.09mmol)、反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(100mg，0.35mmol)、PdCl2 dppf(80mg，0.11mmol)、K2 CO3 (450mg，3.26mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar氣下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮至乾燥。將殘餘物用矽石層析術(PE：EA=4：1至PE：EA=1：1，Rf=0.4，在PE/EA 1/1下)純化。產物為白色固體(50.9mg，11.7%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.45，[M+H]+ =401.2，方法=B。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.25(s,1H),9.37(s,1H),8.18(s,1H),7.69(s,1H),7.50(s,1H),7.28-7.26(m,3H),7.12(s,1H),6.94(s,1H),2.77-2.75(m,1H),2.38(s,6H),2.15-2.13(m,1H),1.61-1.57(m,1H),1.43-1.41(m,1H)。
實例149： 反式-N-(8-胺基-6-((S)-4-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物186)
步驟1：(±)-反式-N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(1g，3.26mmol)、雙(2,4-二甲氧基苄基)胺(5g，15.75mmol)、TEA(2.5mL，18.07mmol)於1,4-二噁烷(40mL)中之混合物在Ar下在120℃攪拌16h。將反應物濃縮至乾燥，且藉由矽膠層析術(PE：EA=4：1至PE：EA=2：1)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(520mg，21.8%收率。LCMS(ESI)[M+H]+=588.2。
步驟2：反式-N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]胺基]-6-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-噁唑啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(470mg，0.8mmol)、(4S)-4-甲基噁唑啶-2-酮(300mg，2.97mmol)、Xantphos(200mg，0.35mmol)、Pd2 (dba)3 (300mg，0.33mmol)及K2 CO3 (330mg，2.39mmol)於1,4-二噁烷(40mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=4：1)純化，接著藉由製備型HPLC(溶離劑：5%至95%甲醇及0.1mL/L%TFA於水中)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(190mg，24.3%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=653.3。
步驟3：反式-N-(8-胺基-6-((S)-4-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-N-[8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-噁唑啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(180mg，0.28mmol)於TFA(4mL，0.28mmol)中之混合物在Ar下在70℃下加熱4h。將反應物濃縮，且藉由製備型HPLC(溶離劑：5%至95%甲醇及0.8g/L NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(43.3mg，42.6%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.60，[M+H]+ =353.2，方法=B。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.17(s,1H),9.26(s,1H),8.01(s,1H),7.38(s,2H),7.30(s,1H),4.85-4.81(m,1H),4.50(t,J =8.4Hz,1H),4.06-4.03(m,1H),2.76-2.71(m,1H),2.17-2.13(m,1H),1.61-1.57(m,1H),1.45-1.40(m,1H),1.38(d,J =6.4Hz,3H)。
實例150： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(化合物187)
步驟1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-(三氟甲基)環丙烷羧酸(734mg，4.76mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(850mg，3.97mmol)於吡啶(1mL)及二氯甲烷(20mL)在室溫下攪 拌0.5h。在室溫下逐份添加POCl3 (0.4mL，4.29mmol)。將混合物攪拌1h。將反應物用飽和NaHCO3 中和。隨後將有機物分離且乾燥(NaSO4 )，之後濃縮且藉由矽膠層析術(PE：EA=10：1至PE：EA=4：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(1.1g，76.7%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=350.0。
步驟2：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(1.1g，3.14mmol)、NH4 OH(10mL，3.14mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在Ar下在90℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=4：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(0.9g，85.3%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=331.1。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(150mg，0.45mmol)、5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(113mg，0.54mmol)、XPhos(22mg，0.05mmol)、XPhos Pd G2(36mg，0.05mmol)及K2 CO3 (187mg，1.36mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在120℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(58.1mg，33.8%收率)。LCMS(ESI)： RT(min)=1.56，[M+H]+ =377.2，方法=B。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.64(s,1H),11.09(s,1H),9.26(s,1H),8.12(s,1H),7.96(d,J =8.4Hz,1H),7.12(s,2H),6.98(s,1H),2.62-2.56(m,4H),2.33-2.27(m,1H),1.32-1.30(m,2H)。
實例151： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(化合物188)
將1,3,5-三甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1h-吡唑(161mg，0.68mmol)、(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(150mg，0.45mmol)、Pd(PPh3 )4 (104mg，0.09mmol)及K2 CO3 (186mg，1.35mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1至EA：DCM=4：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(72.3mg，39.1%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.57，[M+H]+ =405.2，方法=B。1 HNMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.21(s,1H),8.23(s,1H),6.81(s,1H),3.77(s,3H),2.46--2.43(m,1H),2.41(s,3H),2.33(s,3H),2.30-2.26(m,1H),1.45-1.41(m,1H),1.37-1.32(m,1H)。
實例152： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧醯胺(化合物189)
步驟1：(E)-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸第三丁酯
將二乙基膦醯基乙酸第三丁酯(4.5g，17.84mmol)、NaH(0.84g，35mmol)於四氫呋喃(50mL)中之混合物在0℃攪拌0.5h。在室溫下添加2-吡啶羧醛(1.9g，17.58mmol)。將混合物攪拌2h。將反應物用EtOAc(50mL)稀釋，且用飽和NH4 Cl將pH調整至7至8。隨後將有機物分離，乾燥(NaSO4 )，且濃縮至乾燥。將殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=2：1)純化，得到呈無色油狀之標題化合物(2.5g，67.9%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=207.1。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.88(s,1H),8.87(s,1H),7.48(t,J =4.8Hz,1H),7.41(d,J =15.6Hz,1H),6.94(d,J =15.6Hz,1H),1.48(s,9H)。
步驟2：(±)-反式-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧酸第三丁酯
將碘化三甲基側氧基鋶(2.7g，11.64mmol)及tBuOK(1.3g，11.61mmol)於二甲亞碸(50mL)中之混合物在室溫下攪拌0.5h。隨後添加(E)-3-嘧啶-2-基丙-2-烯酸第三丁酯(2.4g，11.64mmol)。將混合物攪拌2h。將反應物用EtOAc(50mL)稀釋，且用飽和NH4 Cl將pH調整至7至8。隨後將有機物分離，乾燥(NaSO4 )且濃縮至乾燥。將殘餘物用矽膠層析術(PE：EA=10：1至PE：EA=4：1)純化，得到呈無色油狀之標題化合物(370mg，14.4%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=165.2。
步驟3：(±)-反式-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧酸
將(±)-反式-2-嘧啶-2-基環丙烷羧酸第三丁酯(370mg，1.68mmol)於HCl於二噁烷(4mL，1.68mmol)及一滴水中之混合物在室溫下攪拌1h。將反應物濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物(380mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+=165.1。
步驟4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-2-嘧啶-2-基環丙烷羧酸(370mg，2.25mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(200mg，0.93mmol)於吡啶(1.5mL)於二氯甲烷(20mL)中之混合物在室溫下攪拌0.5h。在室溫下將POCl3 (0.3mL，2.25mmol)逐份添加至反應物中。將混合物在室溫下攪拌1h。將反應物用EtOAc(50mL)稀釋，且用飽和NaHCO3 將pH調整至7至8。隨後將有機物分離，乾燥(Na2 SO4 )且濃縮至乾燥。將殘餘物藉由矽膠層析術(PE：EA=2：1至PE：EA=1：1)純化，得到標題化合物白色固體(330mg，39.8%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=360.0。
步驟5：(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-嘧啶-2-基-環丙烷羧醯胺(330mg，0.92mmol)及NH4 OH(5mL，0.92mmol)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在Ar下在90℃下加熱3h。將反應物濃縮至乾燥，得到呈黃色固體狀之標題化合物(380mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+=341.1。
步驟6：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(嘧啶-2-基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-嘧啶-2-基-環丙烷羧醯胺(187mg，0.55mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(144mg，0.66mmol)、XPhos Pd G2(45mg，0.06mmol)、XPhos(27mg，0.06mmol)及K2 CO3 (228mg，1.65mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下在100℃攪拌3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=2：1至PE：EA=1：2)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(92.1mg，42.2%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.38，[M+H]+ =398.2，方法=B。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.09(s,1H),9.36(s,1H),8.72(s,1H),8.71(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.37-7.31(m,4H),6.99(s,1H),2.76-2.71(m,1H),2.65-2.61(m,1H),2.41(s,3H),1.59-1.57(m,2H)。
實例153： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(化合物190)
步驟1：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶-3-基胺基甲酸第三丁酯
將雙(頻哪醇合)二硼(2.2g，8.66mmol)、N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)胺基甲酸第三丁酯(500mg，1.74mmol)、PdCl2 dppf(254mg，0.35mmol)及KOAc(340mg，3.47mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在Ar下在85℃下加熱16h。將反應物過濾且濃縮，得到呈黑色固體狀之標題化合物(3.2g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+=335.2。
步驟2：(±)-反式-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶-3-基胺基甲酸第三丁酯
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺(200mg，0.6mmol)、N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(1.5g，4.49mmol)、Pd(PPh3 )4 (140mg，0.12mmol)及K2 CO3 (250mg，1.81mmol)於1,4-二噁烷(16mL)及水(4mL)中之混合物在Ar下在100℃下加熱3h。將反應物濃縮，且藉由矽膠層析術(PE：EA=1：1至 EA：MeOH=20：1)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(190mg，40.8%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+=503.2。
步驟3：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(三氟甲基)環丙烷羧醯胺
將(±)-反式-N-[5-[1-胺基-6-[[(反式)-2-(三氟甲基)環丙烷羰基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]胺基甲酸第三丁酯(190mg，0.38mmol)、TFA(1mL，0.38mmol)於二氯甲烷(4mL)中之混合物在室溫下攪拌2h。將反應物濃縮至乾燥。將殘餘物吸收於MeOH(2mL)中，且用飽和NaHCO3 將pH調整至7至8。將混合物藉由製備型HPLC(溶離劑：5%至95%甲醇及0.8g/L NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(92.8mg，57.4%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.57，[M+H]+ =403.2，方法=G。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.19(s,1H),9.37(s,1H),8.19(s,1H),7.93(s,1H),7.77(s,1H),7.30(s,2H),6.85(s,1H),5.16(s,2H),2.60-2.58(m,1H),2.32-2.30(m,1H),2.06(s,3H),1.33-1.30(m,2H)。
實例154： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物191)
步驟1：3,4-二氫-1H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇
在-78℃下向經攪拌之2-(3-溴-4-吡啶基)乙醇(1.0g，4.95mmol)及硼酸三異丙酯(1.1g，5.85mmol)於四氫呋喃(30mL)中之溶液中滴加n-BuLi(4mL，10mmol)。將所得混合物在-78℃攪拌0.5h。將混合物緩慢溫熱至室溫且攪拌1h。隨後將反應混合物用水(10mL)稀釋，且用EA(10mLx2)洗滌。將水層藉由添加6N HCl酸化至pH 4至5，且濃縮至乾燥。將殘餘物懸浮於乙酸乙酯及EtOH之1：1溶液(10mL)中且過濾。將濾液濃縮，得到呈黃色油狀之1-羥基-3,4-二氫氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶(700mg，95%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =150.1。
步驟2：(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將1-羥基-3,4-二氫氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶(700mg，4.7mmol)、(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基-環丙烷羧醯胺(140mg，0.49mmol)、XPhos Pd G2(56mg，0.07mmol)、XPhos(65mg，0.14mmol)及K2 CO3 (140mg，1.01mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在Ar下加熱至100℃達3h。將混合物藉由逆相HPLC(乙腈0至40/0.1% NH4 HCO3 於水中)直接純化，得到呈白色固體狀之(±)-反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)-3-吡啶基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(72mg，39.5%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.169，[M+H]+ =375.1，方法=A。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.29(s,1H),9.41(s,1H),8.51(s,1H),8.47(d,J =5.2Hz,1H),8.20(s,1H),7.36(d,J =5.2Hz,1H), 7.34(s,2H),6.98(s,1H),4.77(t,J =4.8Hz,1H),3.57-3.55(m,2H),2.93(t,J =6.8Hz,2H),2.78-2.74(m,1H),2.18-2.14(m,1H),1.64-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
實例155： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物192)
將(±)-反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(140mg，0.46mmol)、1-羥基-3,4-二氫-2H-硼環己烯并[2,3-c]吡啶(800mg，5.44mmol)、XPhos(56mg，0.12mmol)、XPhos Pd G2(56mg，0.07mmol)及K2 CO3 (140mg，1.01mmol)於水(2mL)及1,4-二噁烷(10mL)中之溶液在Ar下在100℃下加熱3h。將混合物藉由矽膠管柱層析術(DCM：MeOH=10：1)及逆相HPLC(乙腈17至47%於0.05%氨於水中)直接純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(36mg，20%收率)。LCMS(ESI)：RT(min)=1.404，[M+H]+ =389.0，方法=C。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.08(s,1H),9.39(s,1H),8.52(s,1H),8.47(d,J =5.2Hz,1H),8.23(s,1H),7.36(d,J =5.2Hz,1H),7.34(s,2H),6.97(s,1H),4.80(t,J =4.8Hz,1H),3.60-3.56(m,2H),2.93(t,J =6.8Hz,2H),2.76-2.73(m,2H),2.12-2.09(m,1H),1.59-1.58(m,1H),1.16-1.13(m,1H),0.99-0.96(m,1H)。
實例156： (1S,2R)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物193)及(1R,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物194)
根據對於(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物157)所述之程序製備標題化合物。將單一立體異構物藉由掌性SFC來分離。(化合物193)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.04(s,1 H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.30-7.31(m,3H),6.97(s,1H),3.74(m,2 H),2.41(s,3H),2.11(m,1H),1.58(m,1H),1.13(m,1H),0.96(m,1H)。(化合物194)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.04(s,1 H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.30-7.31(m,3H),6.97(s,1H),3.74(m,2 H),2.41(s,3H),2.11(m,1H),1.58(m,1H),1.13(m,1H),0.96(m,1H)。
實例157： (1S,2S)-N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物195)及(1R,2R)-N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物196)
根據對於(±)-反式-N-(8-胺基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物172)所述之程序製備標題化合物。將單一立體異構物藉由掌性SFC來分離。(化合物195)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.63(br s,1 H),11.19(s,1H),9.42(s,1H),8.51(s,1H),8.48(d,J =5.1 Hz,1H),8.40(s,1H),7.61(br s,1H),7.38(d,J =5.1Hz,2H),7.32(br s,2H),2.27(s,3H),2.19-2.26(m,2H),1.41(m,1H),1.26(m,1H)。(化合物196)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.63(br s,1 H),11.19(s,1H),9.42(s,1H),8.51(s,1H),8.48(d,J =5.1Hz,1H),8.40(s,1H),7.61(br s,1H),7.38(d,J =5.1Hz,2H),7.32(br s,2H),2.27(s,3H),2.19-2.26(m,2H),1.41(m,1H),1.26(m,1H)。
實例158： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物197)及(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物198)
根據對於(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物159)所述之程序製備標題化合物。將單一立體異構物藉由掌性SFC來分離。(化合物197)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1 H),9.36(s,1H),8.57(br s,1H),8.43(br s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.32(m,4H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.19-2.22(m,2H),1.39(m,1H),1.19(m,1H)。(化合物198)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1 H),9.36(s,1H),8.57(br s,1H),8.43(br s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.32(m,4H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.19-2.22(m,2H),1.39(m,1H),1.19(m,1H)。
實例159： (1R,2R)-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物199)及(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物200)
根據對於(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物165)所述之程序製備標題化合物。將單一立體異構物藉由掌性SFC來分離。(化合物199)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.24(s,1 H),9.38(s,1H),8.17(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.29(s,2H),6.84(s,1H),5.13(br s,2H),2.76(m,1 H),2.15(m,1 H),2.06(s,3H),1.61(m,1H),1.43(m,1H)。(化合物200)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.24(s,1 H),9.38(s,1H),8.17(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.29(s,2H),6.84(s,1H),5.13(br s,2H),2.76(m,1 H),2.15(m,1 H),2.06(s,3H),1.61(m,1H),1.43(m,1H)。
實例160： (±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物201)
以類似於(±)-反式-N-[8-胺基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基-環丙烷羧醯胺(化合物129)之方式製備標題化合物。LCMS(ESI)：RT(min)=1.55，[M+H]+ =399.1，方法=B。1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.3(s,1H),9.43(s,1H),8.89(d,1H),8.83(s,1H),8.20(s,1H),7.85(d,1H),7.42(s,2H), 6.97(s,1H),2.74-2.79(m,1H),2.13-2.18(m,1H),1.59-1.64(m,1H),1.41-1.46(m,1H)。
實例161： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物202)及(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物203)
根據對於(±)-反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(化合物43)所述之程序製備標題化合物。將單一立體異構物藉由掌性SFC來分離。(化合物202)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.26(s,1H),9.39(s,1 H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.34(br s,2H),7.30(d,J =5.0Hz,1H),6.98(s,1H),2.76(m,1H),2.40(s,3H),2.15(m,1H),1.61(m,1H),1.44(m,1H)。(化合物203)：1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.26(s,1H),9.39(s,1 H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.34(br s,2H),7.30(d,J =5.0Hz,1H),6.98(s,1H),2.76(m,1H),2.40(s,3H),2.15(m,1H),1.61(m,1H),1.44(m,1H)。
實例162： N -(8-胺基-5-(3-羥基環戊-1-烯基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物204)
步驟1：3-側氧基環戊-1-烯基三氟甲烷磺酸酯
在0℃下將環戊烷-1,3-二酮(3g，30.58mmol)、Tf2 O(8.6g，30.48mmol)及TEA(9.3g，91.90mmol)於二氯甲烷(30mL)中之溶液攪拌1h。將反應物用水稀釋，且用DCM萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術用PE/EA(10：1)溶離來純化，得到呈微黃色油狀之3-側氧基環戊-1-烯-1-基三氟甲烷磺酸酯(2.8g，40%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =231.1。
步驟2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)環戊-2-烯酮
將3-側氧基環戊-1-烯-1-基三氟甲烷磺酸酯(2.5g，10.86mmol)於二噁烷(50mL)中之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(5.5g，21.65mmol)、Pd(dppf)Cl2 (720mg，0.98mmol)、KOAc(2.1g，21.39mmol)。將所得溶液在100℃在氮下攪拌1h。將溶液冷卻至室溫，用水稀釋且用二氯甲烷萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱純化，用PE/EA(10/1)溶離，得到呈黃色油狀之3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)環戊-2-烯酮(2g，粗產物)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =127.1。
步驟3：N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-側氧基環戊-1-烯基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(500mg，1.25mmol)於二噁烷(10mL)/水(2mL)中之溶液添加至3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)環戊-2-烯酮(320mg，2.54mmol)、Pd(dppf)Cl2 (280mg，0.38mmol)及碳酸氫鈉(220mg，2.61mmol)之混合物中。將混合物在100℃在氮下攪拌。6h後，將反應混合物濃縮。將殘餘物用矽膠層析術純化，用DCM/MeOH(10：1)溶離。此產生呈黃色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-側氧基環戊-1-烯-1-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(200mg，40%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =400.1。
步驟4：N -(8-胺基-5-(3-羥基環戊-1-烯基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
在室溫下將NaBH4 (50mg，1.32mmol)添加至N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-側氧基環戊-1-烯-1-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(50mg，0.12mmol)於甲醇(10mL)中之溶液中。1h後，將反應混合物濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術純化，用DCM/MeOH(10：1)溶離，得到呈黃色固體狀之N-[8-胺基-5-(3-羥基環戊-1-烯-1-基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(2.8mg，6%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.52，[M+H]+ =402.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.96(s,1H),9.38(s,1H),8.37(d,J =4.8Hz,1H),8.31(s,1H),8.24(s, 1H),7.30(s,2H),7.25(d,J =4.8Hz,1H),5.49(s,1H),4.71(d,J =4.5Hz,1H),4.65(s,1H),2.30(s,1H),2.14(s,3H),2.07-2.03(m,3H),1.48-1.45(m,1H),0.85-0.80(m,4H)。
實例163： (+/-)-反式- N -(8-胺基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物205)
步驟1：反式-N -(8-胺基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(120mg，0.27mmol)、三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼環己烷(52mg，0.41mmol)、Pd(PPh3 )4 (32mg，0.03mmol)及K3 PO4 (175mg，0.82mmol)於二噁烷(5mL)/水(1mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌15h。將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-(8-胺基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(3.0mg，3%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.69，[M+H]+ =373.3，方法=K-1-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.48(s,1H),8.46(d,J =5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.45(d,J =5.2Hz,1H),2.78-2.65(m,2H),2.23(s,3H),2.14(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.41-1.30(m,1H),1.12-1.02(m,1H)。
實例164： (+/-)- N -(8-胺基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物206)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(10mg，0.03mmol)、4-甲基-2-苯基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(20mg，0.07mmol)、Pd(amphos)Cl2 (3mg，0.01mmol)、K3 PO4 (21mg，0.10mmol)於二噁烷(0.9mL)/水(0.3mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌20min。將固體過濾，且將濾液濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術純化，用二氯甲烷/甲醇(15：1)溶離。將收集之級份合併且濃縮。將產物用藉由製備型HPLC進一步純化，得到呈綠色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(3mg，21%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.14，[M+H]+ =435.3，方法=K-1-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.01(s,1H),9.33(s,1H),8.54(d,J =4.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.48-7.28(m,5H),7.23-7.10(m,3H),6.48(s,1H),2.81-2.71(m,2H),2.17(s,3H),2.11-2.03(m,1H),1.61-1.51(m,1H),1.10-1.06(m,1H),1.03-0.93(m,1H)。
實例165： ((1 S ,2 S )-2-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(化合物207) ((1 R ,2 S )-2-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(化合物208) N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(羥基甲基)-2-甲基環丙烷羧醯胺(化合物209)
步驟1：2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯
將2-甲基丙-2-烯-1-基乙酸酯(10g，87.61mmol)、Cu(OAc)2 (950mg，5.23mmol)及2-重氮乙酸第三丁酯(20g，140.69mmol)於甲苯(300mL)中之混合物在95℃攪拌3h。將固體過濾，且將濾液濃縮，得到呈褐色油狀之2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯(18g，粗品)。
步驟2：2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸
將2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯(18g，78.85mmol)於二氯甲烷(80mL)/三氟乙酸(150mL)中之溶液攪拌16小時。將所得混合物濃縮。將殘餘物溶於水中，且用20%氫氧化鈉水溶液將溶液之pH調整至11。將所得混合物用乙酸乙酯萃取。用鹽酸(2M)將水層之pH調整至3。將所得溶液用乙酸乙酯萃取，且將有機層經Na2 SO4 乾燥且在真空下濃縮，得到呈紅色油狀之2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸(10g，74%)。LCMS(ESI)：[M-H]+ =171.1。
步驟3：(2-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯
在室溫下在氮下將POCl3 (4g，26.09mmol)滴加至6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(2g，9.34mmol)、2-[(乙醯基氧基)甲基]-2-甲基環丙烷-1-羧酸(4g，23.23mmol)於吡啶(5mL)/二氯甲烷(50mL)中之溶液中。30min後，將反應物用冰水稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷萃取。將收集之有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術純化，用乙酸乙酯/石油醚(1：3)溶離，得到呈紅色油狀之[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-1-甲基環丙基]甲基乙酸酯(2.2g，64%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =368.1。
步驟4：(2-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯
將[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-1-甲基環丙基]甲基乙酸酯(2.2g，5.98mmol)於氫氧化銨(20mL)及1,4-二噁烷(27mL)中之溶液在90℃下加熱。3h後，將反應混合物在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之(2-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(2.4g，粗品)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =349.1。
步驟5：(±)-((1S ,2S )-2-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(化合物207)
(±)-((1R ,2S )-2-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(化合物208)
將[2-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-1-甲基環丙基]甲基乙酸酯(2.4g，6.88mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(1.8g，13.14mmol)、Pd(dppf)Cl2 (600 mg，0.82mmol)及碳酸鈉(1.6g，15.10mmol)於1,4-二噁烷(80mL)/水(13mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。2h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由製備型HPLC及掌性SFC純化，得到兩種非鏡像異構物。(化合物207)：LCMS(ESI)：RT (min)=1.13，[M+H]+ =406.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.99(s,1H),4.07-3.95(m,2H),2.46(s,3H),2.11(s,3H),2.09-2.04(m,1H),1.31(s,3H),1.27-1.24(m,1H),1.06-1.01(m,1H)。(化合物208)：LCMS(ESI)：RT (min)=1.28，[M+H]+ =406.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.99(s,1H),4.38(d,J =11.4Hz,1H),4.19(d,J =11.4Hz,1H),2.46(s,3H),2.03-1.99(m,1H),1.94(s,3H),1.42-1.39(m,1H),1.32(s,3H),1.06-1.01(m,1H)。
步驟6：N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(羥基甲基)-2-甲基環丙烷羧醯胺(化合物209)
在室溫下將LiOH‧H2 O(930mg，22.16mmol)於水(50mL)滴加至(2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]-1-甲基環丙基)甲基乙酸酯(3g，7.40mmol)於四氫呋喃(150mL)中之溶液中。4h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(羥基甲基)-2-甲基環丙烷-1-羧醯胺(282.5mg，11%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.13，[M+H]+=364.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.69(s,1H),9.35(s,1H),8.56(s,1H), 8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.25(s,1H),7.31(d,J =5.1Hz,1H),7.30(s,2H),6.97(s,1H),4.65(t,J =9.0Hz,1H),3.31-3.29(m,2H),2.41(s,3H),2.06-1.95(m,1H),1.18(s,3H),0.99-0.91(m,2H)。
實例166： (+/-)- N -(8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物210)
將反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(160mg，0.44mmol)及NBS(210mg，1.18mmol)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在室溫下在氮下攪拌2h。將反應溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由急驟製備型HPLC純化，得到呈褐色固體狀之反式-N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(31mg，16%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.54，[M+H]+=437.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.25(s,1H),9.40(s,1H),8.58(s,1H),8.47(d,J =6.0Hz,1H),8.36(s,1H),7.59(s,2H),7.35(d,J =6.0Hz,1H),2.76-2.73(m,2H),2.14-2.10(m,4H),1.64-1.58(m,1H),1.19-1.14(m,1H),1.02-0.95(m,1H)。
實例167： (+/-)-順式- N -(8-胺基-6-(2,3-二氫-1 H -吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物211)
步驟1：1-(第三丁氧基羰基)-2,3-二氫-1H -吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸
向4-[(三氟甲烷)磺醯基氧基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(1g，2.71mmol((J.Med.Chem. 2014,57 ,2462)於二噁烷(40mL)中之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(2g，7.87mmol)、Pd(dppf)Cl2 (400mg，0.54mmol)及KOAc(800mg，8.15mmol)。將反應物在100℃在氮下攪拌3h，且隨後冷卻至室溫。用氫氧化鈉將所得混合物之pH調整至14。將所得溶液用乙酸乙酯洗滌，且將水層收集。用2N HCl將水層之pH調整至1。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之[1-[(第三丁氧基)羰基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基]硼酸(500mg，70%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =265.1。
步驟2：順式-4-(1-胺基-6-((1S ,2S )-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-2,3-二氫吡咯并[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯
將順式-N(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.71mmol)、1-[(第三丁氧基)羰基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸(200mg，0.75mmol)、Pd(PPh3 )4 (164mg，0.14mmol)及Cs2 CO3 (464mg，1.42mmol)於二噁烷(10mL)/水(1mL)中之懸浮液在100℃攪拌。3h後，將反應混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品順式-4-(1-胺基-6-[[(1S,2S)-2-氟環丙烷]胺 基]-2,7-啶-3-基)-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(200mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =253.1。
步驟3：順式-N -(8-胺基-6-(2,3-二氫-1H -吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將順式-4-(1-胺基-6-[[(1S,2S)-2-氟環丙烷]胺基]-2,7-啶-3-基)-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-羧酸第三丁酯(200mg，0.43mmol)及三氟乙酸(10mL)於二氯甲烷(50mL)中之溶液在室溫下攪拌3h。隨後將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之順式-N-(8-胺基-6-[1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基]-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺甲酸鹽(9.1mg，5%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.68，[M+H]+ =365.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.07(s,1H),9.41(s,1H),8.41(s,1H),8.35(s,1H),7.83(s,1H),7.48(s,2H),7.31(s,1H),6.54(s,1H),5.08-5.11(m,1H),4.86-4.89(m,1H),3.66-3.49(m,4H),2.32(s,1H),1.76-1.62(m,1H),1.21-1.26(m,1H)。
實例168： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物212)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(250mg，0.83mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(170mg，1.24mmol)、Pd(dppf)Cl2 (61mg，0.08mmol)及碳酸鉀(343mg，2.48mmol)於二噁烷(8mL)/水(2mL)中之懸浮液在110℃在氮下攪拌2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(101mg，34%)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.96，[M+H]+ =359.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.30(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.99(s,1H),2.80-2.63(m,2H),2.46(s,3H),2.02-1.98(m,1H),1.81-1.69(m,1H),1.35-1.20(m,1H),1.10-0.98(m,1H)。
實例169： (+/-)-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1 H -吡唑-1-基)丙-1-醇(化合物213)
步驟1：2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙酸甲酯
將4-溴-1H-吡唑(5g，34.02mmol)、2-溴丙酸甲酯(6.82g，40.85mmol)及碳酸鉀(9.43g，68.30mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之懸浮液在80℃攪拌5h。將反應藉由水(30mL)淬滅，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有 機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈無色油狀之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙酸甲酯(7.1g，90%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =233.1。
步驟2：2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙-1-醇
在25℃將NaBH4 (489mg，12.92mmol)逐份添加至經攪拌之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙酸甲酯(1g，4.29mmol)於甲醇(10mL)中之溶液中。3h後，將反應藉由水(30mL)淬滅，且將所得溶液用乙酸乙酯(100mL)萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈無色油狀之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(716mg，81%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =205.2。
步驟3：2-(4-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)丙-1-醇
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(300mg，0.54mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(223mg，1.09mmol)、Cs2 CO3 (1.062g，3.26mmol)、t-BuBrettPhos(131mg，0.27mmol)及第3代t-BuBrettPhos預催化劑(232mg，0.27mmol)於二噁烷(5mL)中之懸浮液在120℃在氮下攪拌2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(20：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色固體狀之2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲 氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(288mg，8%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =676.2。
步驟4：2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇
將2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(278mg，0.41mmol)於三氟乙酸(8mL)中之溶液在50℃加熱。2h後，將反應物在真空下濃縮。將殘餘物用氫氧化銨稀釋至pH=13，且將所得溶液藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(3mg，2%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.58，[M+H]+ =376.4，方法=N；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.22(s,1H),8.83(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.50(s,1H),7.29(d,J =5.0Hz,1H),7.06(s,2H),6.75(s,1H),6.64(s,1H),4.92(t,J =5.5Hz,1H),4.45-4.32(m,1H),3.73-3.55(m,2H),2.40(s,3H),1.40(d,J =6.8Hz,3H)。
實例170： (1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物214)及(1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物215)
步驟1：反式-N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
在0℃下將草醯氯(1.16g，9.14mmol)滴加至反式-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(1.00g，6.01mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(3滴，催化劑)於2：1二氯甲烷/吡啶(30mL)中之溶液中。將反應物在室溫下攪拌30min。隨後在0℃下將反應溶液滴加至經攪拌之6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(1.25g，4.99mmol)於二氯甲烷(50mL)中之溶液中。將混合物在氮下溫熱至室溫達2h。將反應物用水(30mL)稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷(100mL)萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠管柱層析術(20：1 DCM/MeOH)純化，得到呈灰白色固體狀之反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(800mg，40%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =362.0。
步驟2：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(300mg，0.83mmol)及氫氧化銨(8mL)於二噁烷(8mL)中之溶液在氮下在100℃下加熱。16h後，將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術(10：1 DCM/MeOH)純化，得到呈灰白色固體狀之反式-N-(8-胺基-6- 氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(250mg，88%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =343.0。
步驟3：反式-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物214)及反式-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物215)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(300mg，0.87mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(390.05mg，2.61mmol)、XPhos(83.86mg，0.17mmol)、XPhos-PdCl-第2代(71.81mg，0.09mmol)及KOAc(258.02mg，2.62mmol)於10：1二噁烷/水(16.5mL)中之懸浮液在100℃在氮下攪拌2h。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠管柱層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(70mg，18%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物214：LCMS(ESI)：RT (min)=1.04，[M+H]+ =430.0，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.52(s,1H),8.48(d,J =4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.37(d,J =4.8Hz,1H),7.32(s,2H),7.29(s,1H),6.97(s,1H),4.78(t,J =5.2Hz,1H),3.77(s,3H),3.60-3.55(m,2H),2.95-2.91(m,2H),2.23-2.19(m,2H),1.41-1.37(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。化合物215：LCMS(ESI)：RT (min)=1.04，[M+H]+ =430.0，方法=M；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.52(s,1H),8.48(d,J =4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.37(d,J =4.8Hz,1H),7.32(s,2H),7.29(s,1H),6.97(s,1H),4.78(t,J =5.2Hz,1H),3.77(s,3H), 3.60-3.55(m,2H),2.95-2.91(m,2H),2.23-2.19(m,2H),1.41-1.37(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。
實例171： (+/-)-順式- N -(8-胺基-6-(4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物216)
步驟1：5-溴-N ,4-二甲基吡啶-3-胺
將3,5-二溴-4-甲基吡啶(1g，3.98mmol)、Cu(52mg，0.81mmol)及CH3 NH2 (8mL)於二噁烷(5mL)中之混合物在100℃下加熱。5h後，將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-胺(400mg，50%)。LCMS(ESI)：M+H+ =201.0。
步驟2：[4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基]硼酸
將5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-胺(1.648g，8.19mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(8.3g，32.68mmol)、Pd(dppf)Cl2 (599mg，0.81mmol)、KOAc(2.41g，24.55mmol)於二噁烷(80mL)中之懸浮液在100℃在氮下攪拌3h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物用水(30mL)稀釋，且用NaOH水溶液將溶液之pH調整至10。 將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。將水層收集且用HCl酸化至pH=3。將酸性溶液用乙酸乙酯萃取，且將收集之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於1：1乙酸乙酯/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈褐色油狀之[4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基]硼酸(595mg，44%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =167.1。
步驟3：順式-N -[8-胺基-6-[4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氟環丙烷-1-羧醯胺
將順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(506mg，1.80mmol)、[4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基]硼酸(1.09g，6.56mmol)、X-Phos(86mg，0.18mmol)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(142mg，0.18mmol)及碳酸鉀(745mg，5.39mmol)於4：1二噁烷/水(25mL)中之懸浮液在100℃在氮下攪拌2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將粗產物藉由急驟製備型HPLC純化，得到呈淡褐色固體狀之順式-N-[8-胺基-6-[4-甲基-5-(甲基胺基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(60mg，9%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.46，[M+H]+ =367.2，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d6 )δ 10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.21(s,1H),7.87(s,1H),7.83(s,1H),7.28(s,2H),6.85(s,1H),5.33-5.03(m,1H),5.09-4.82(m,1H),2.82(d,J =6.0Hz,3H),2.30-2.23(m,1H),2.09(s,3H),1.76-1.61(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
實例172： (+/-)-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1 H -吡唑-1-基)丙腈(化合物217)
步驟1：2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙腈
將4-溴-1H-吡唑(1g，6.80mmol)、2-氯丙腈(612mg，6.83mmol)、Cs2 CO3 (2.43g，7.45mmol)於四氫呋喃(10mL)中之懸浮液在100℃下加熱。2h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(952mg，70%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =200.0。
步驟2：2-(4-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙腈
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(552mg，1.00mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(800mg，3.99mmol)、t-BuBrettPhos(97mg，0.20mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(171mg，0.20mmol)及碳酸鉀(828mg，5.99mmol)於二噁烷(15mL)中之懸浮液在120℃加熱。5h後，將反應物在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二 氯甲烷/甲醇)純化，產生呈褐色油狀之2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(302mg，45%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =671.3。
步驟3：2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)丙腈
將2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(248mg，0.37mmol)於TFA(20mL)中之溶液在80℃下加熱。45min後，將反應物在真空下濃縮，且將殘餘物用甲醇稀釋。將溶液用氫氧化銨鹼化至pH=8，且藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之2-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)丙腈(65.4mg，48%)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.00，[M+H]+ =371.2，方法=M；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J =6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J =6.0Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J =6.0Hz,3H)。
實例173： (+/-)-1-(3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1 H -吡唑-1-基)吡咯啶-1-基)乙酮(化合物218)
步驟1：3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)吡咯啶-1-羧酸第三丁酯
將4-溴-1H-吡唑(200mg，1.36mmol)、3-溴吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(409mg，1.64mmol)及碳酸鉀(567mg，4.10mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(4mL)中之懸浮液在100℃下加熱。12h後，將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(100：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(310mg，72%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =316.2
步驟2：4-溴-1-(吡咯啶-3-基)-1H -吡唑
將3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(3.0g，9.49mmol)於三氟乙酸(5mL)及二氯甲烷(15mL)中之溶液在25℃攪拌2h。將所得混合物在真空下濃縮，得到粗品4-溴-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑(2.6g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =216.1。
步驟3：1-(3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)吡咯啶-1-基)乙酮
向冰冷4-溴-1-(吡咯啶-3-基)-1H-吡唑(2g，9.25mmol)及三乙胺(5mL，35.97mmol)於二氯甲烷(15mL)中之溶液中滴加乙醯氯(1.1g，14.01mmol)。將反應物溫熱至25℃。1h後，將反應物用水(30mL)稀釋，且將溶液用乙酸乙酯萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(98：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之1-[3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯啶-1-基]乙-1-酮(1.2g，50%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =258.2。
步驟4：1-(3-(4-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)吡咯啶-1-基)乙酮
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(350mg，0.63mmol)、1-[3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯啶-1-基]乙-1-酮(409mg，1.58mmol)、碳酸鉀(525mg，3.79mmol)、t-BuBrettPhos(154mg，0.32mmol)及第3代t-BuBrettPhos預催化劑(271mg，0.32mmol)於二噁烷(5mL)中之懸浮液在120℃加熱。2h後，將反應物冷卻至室溫且過濾。將濾液在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(25：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色固體狀之1-(3-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]吡咯啶-1-基)乙-1-酮(349mg，30%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =729.8。
步驟5：1-(3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)吡咯啶-1-基)乙酮
將1-(3-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]吡咯啶-1-基)乙-1-酮(299mg，0.41mmol)於三氟乙酸(6ml)中之溶液在50℃下加熱。2h後，將反應溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於甲醇中，且用水性氫氧化銨將溶液鹼化至pH=9。藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-(3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)吡咯啶-1-基)乙酮(40mg，23%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.51，[M+H]+ =429.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.22(s,1H),8.91(d,J =6.6Hz,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.0Hz,1H),8.00(d,J =11.7Hz,1H),7.55(d,J =5.0Hz,1H),7.29(d,J =6.6Hz,1H),7.08(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.10-4.90(m,0.5H),3.98-3.90(m,1H),3.81-3.71(m,1H),3.71-3.58(m,1.5H),3.54-3.40(m,1H),2.40(s,4H),2.34-2.26(m,1H),1.97(d,J =5.3Hz,3H)。
實例174： (+/-)-反式-3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1 H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇(化合物219)及(+/-)-反式-4-(4-(8-胺基-6-(4-甲基 吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1 H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇(化合物220)
步驟1：反式-4-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-3-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯及反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯
向冰冷4-溴-1H-吡唑(10.0g，68.04mmol)於四氫呋喃(100mL)中之溶液中逐份添加氫化鈉(2.28g，95.01mmol)。將反應物溫熱至室溫。1h後，將7-氧雜-3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-3-羧酸第三丁酯(20.0g，100.38mmol)添加至反應物中，且將所得溶液在70℃下加熱16h。將反應物用水稀釋，且將混合物用二氯甲烷萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(1：2乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之反式-4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯及反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯(1.4g，6%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =346.1。
步驟2：反式-4-(4-溴-1H -吡唑-1-基)哌啶-3-醇及反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-4-醇
在室溫下將1,4-二噁烷(20mL)中之4M氯化氫滴加至4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯及反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸第三丁酯(650mg，1.88mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中。2h後，將反應物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-3-醇鹽酸鹽及3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-4-醇鹽酸鹽(670mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =248.0。
步驟3：反式-4-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇及反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇
在室溫下將NaBH3 CN(250mg，3.98mmol)添加至以上混合物4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-3-醇及3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-4-醇(650mg，2.64mmol)及氧雜環丁-3-酮(250mg，3.47mmol)於甲醇(20mL)中之溶液中。16h後，將反應物用水稀釋，且在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色油狀之4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇及3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇(600mg，75%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =302.2。
步驟4：4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苄基)]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H -吡唑-1-基]-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇及3-(4-((8-(雙(3,4-二甲基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(100mg，0.18mmol)、4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇/3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇(218mg，0.72mmol)、LiHMDS(226mg，1.35mmol)、第3代t-BuBrett Phos預催化劑(80mg，0.09mmol)及t-BuBrettPhos(43mg，0.09mmol)於1,4-二噁烷(3.5mL)中之混合物在135℃下在微波輻射之情況下加熱2h。將固體過濾，且將濾液濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇及3-(4-((8-(雙(3,4-二甲基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇(72.5mg，52%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =773.0。
步驟5：(±)-反式-4-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇及(±)-反式-3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇
將4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-3-醇/3-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H -吡唑-1-基)-1-(氧雜環丁-3-基)哌啶-4-醇(300mg，0.39mmol)於三氟乙酸(15mL)中之溶液在80℃下加熱。2h後，將反應溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於甲醇，用氫氧化銨將溶液之pH調整至9。藉由製備型HPLC純化，得到區域異構物(32mg)。將區域異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物219：LCMS(ESI)：RT (min)=2.12，[M+H]+ =473.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.15(s,1H),8.50(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.00(s,1H),7.61(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),4.88-4.60(m,4H),4.18-4.11(m,1H),4.05-3.96(m,1H),3.66-3.55(m,1H),3.04-3.00(m,1H),2.87-2.84(m,1H),2.44-2.38(m,4H),2.14-2.07(m,2H),1.78-1.73(m,1H)。化合物220：LCMS(ESI)：RT (min)=0.92，[M+H]+ =473.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.15(s,1H),8.51(s,1H),8.45(d,J =5.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.62(s,1H),7.41(d,J =5.1Hz,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),4.88-4.60(m,4H),4.07-4.00(m,1H),3.98-3.94(m,1H),3.65-3.55(m,1H),3.09-3.03(m,1H),2.92-2.89(m,1H),2.44(s,3H),2.23-2.20(m,1H),2.13-2.06(m,2H),1.95-1.88(m,1H)。
實例175： (+/-)-1-(3-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1-甲基-1 H -吡唑-5-基)乙醇(化合物221)
步驟1：1-(3-溴-1-甲基-1H -吡唑-5-基)乙-1-醇
在-70℃在氮下將n-BuLi(3.1mL，2.5M於己烷中)滴加至3,5-二溴-1-甲基-1H-吡唑(1.70g，7.09mmol)於四氫呋喃(30mL)中之溶液中。1h後，添加乙醛(374mg，8.49mmol)。將反應物之溫度緩慢升至室溫。1h後，將反應物用水稀釋，且將所得混合物用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(1：1二氯甲烷/乙酸乙酯)純化，得到呈黃色油狀之1-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙-1-醇(370mg，25%)。1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 6.25(s,1H),5.38(d,J =5.7Hz,1H),4.82-4.74(m,1H),3.77(s,3H),1.38(d,J =6.6Hz,3H)。
步驟2：1-[3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1-甲基-1H -吡唑-5-基]乙-1-醇
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(200mg，0.36mmol)、1-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙-1-醇(185mg，0.90mmol)、LiHMDS(450mg，2.69mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(155mg，0.18mmol)及t-BuBrettPhos(87mg，0.18mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在130℃下在微波輻射之情況下加熱2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之1-[3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1-甲基-1H-吡唑-5-基]乙-1-醇(170mg，69%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =676.3。
步驟3：1-(3-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1-甲基-1H -吡唑-5-基)乙醇
將1-[3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1-甲基-1H-吡唑-5-基]乙-1-醇(250mg，0.37mmol)於三氟乙酸(12mL)中之溶液在80℃攪拌2h。隨後將反應溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於甲醇，用氫氧化銨將溶液之pH調整至9。藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之1-(3-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙醇(32.5mg，23%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.72，[M+H]+ =376.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.34(s,1H),9.21(s,1H),8.54(s,1H),8.41(d,J =4.8Hz,1H),7.48(s,1H),7.29(d,J =4.8Hz,1H),7.08(s,2H),6.76 (s,1H),6.06(s,1H),5.30(d,J =6.6Hz,1H),4.82-4.74(m,1H),3.74(s,3H),2.40(s,3H),1.41(d,J =6.6Hz,3H)。
實例176： (+/-)-順式- N -(8-胺基-6-(3-側氧基-3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物222)
步驟1：3-側氧基-3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸
將8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(500mg，2.18mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(1.7g，6.69mmol)、Pd(dppf)Cl2 (320mg，0.43mmol)及KOAc(640mg，6.52mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱12h。將固體過濾，且用NaOH將濾液之pH調整至約9。將所得溶液用乙酸乙酯洗滌。用HCl水溶液將水層酸化至pH值約3。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈黃色油狀之[3-側氧基-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(300mg，71%)。
步驟2：順式-N -(8-胺基-6-(3-側氧基-3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.71mmol)、[3-側氧基-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(277mg，1.42mmol)、Pd(dppf)Cl2 (104mg，0.14mmol)及碳酸鉀(197mg，1.42mmol)於二噁烷(10mL)及水(1mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術及製備型HPLC依序純化，得到呈黃色固體狀之順式-N-(8-胺基-6-[3-側氧基-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(4.9mg，2%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.08，[M+H]+ =395.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.02(s,1H),10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.72(s,1H),8.23(s,1H),8.09(s,1H),7.42(s,1H),7.33(s,2H),4.86(s,3H),2.36-2.17(m,1H),1.79-1.59(m,1H),1.32-1.11(m,1H)。
實例177： (+/-)-順式- N -(8-胺基-6-(3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺(化合物223)
步驟1：8-溴-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮
將3-胺基-5-溴吡啶-4-醇(1g，5.29mmol)、2-氯乙醯氯(658mg，5.82mmol)、碳酸鉀(1.82g，13.16mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(25mL)中之混合物在室溫下在氮下攪拌隔夜。將反應物用水稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之8-溴-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮(500mg，39%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =230.0、232.0。
步驟2：8-溴-3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪
將1M硼烷-四氫呋喃溶液(19.6mL，19.6mmol)滴加至8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(1.5g，6.54mmol)於四氫呋喃(30mL)及甲醇(10mL)中之溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h，且在65℃再攪拌1h。將反應混合物在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於水中，且用NaOH水溶液(1mol/L)將溶液之pH調整至8至9。將鹼性溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪(900mg，64%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =215.0、217.0。
步驟3：3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸
將8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪(400mg，1.86mmol)、Pd(dppf)Cl2 (272mg，0.37mmol)、KOAc(547mg，5.57mmol)及4,4,5,5-四甲基 -2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(1.42g，5.59mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌12h。將固體過濾，且用NaOH水溶液將濾液之pH調整至9至10。將所得溶液用乙酸乙酯洗滌。用HCl水溶液將水層之pH調整至3至4。隨後將酸性溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈褐色固體狀之3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸(350mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =181.0、183.0。
步驟4：順式-N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
在氮下將草醯氯(414mg，3.26mmol)滴加至冰冷順式-2-氟環丙烷-1-羧酸(228mg，2.19mmol)、吡啶(3mL)及N,N-二甲基甲醯胺(0.05mL)於二氯甲烷(15mL)中之溶液中。30min後，在室溫下將反應物(reactopm)添加至6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(500mg，2.33mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中。2h後，隨後將反應物藉由水稀釋，且將所得混合物用二氯甲烷萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(300mg，39%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =301.1。
步驟5：順式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將順式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(100mg，0.33mmol)及氫氧化銨(2mL)於1,4-二噁烷(4mL)中之溶液在90℃下加熱16h。將反應混合物在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(8：1二氯甲烷/ 甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(60mg，58%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =281.6。
步驟6：順式-N -(8-胺基-6-(3,4-二氫-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷羧醯胺
將順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.71mmol)、[2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(258mg，1.43mmol)、Pd(PPh3 )4 (165mg，0.14mmol)及Cs2 CO3 (466mg，1.43mmol)於10：1 1,4-二噁烷/水(11mL)中之懸浮液在氮下在100℃下加熱12h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之順式-N-(8-胺基-6-[2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(18.4mg，7%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.16，[M+H]+ =381.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.24(s,1H),8.32-8.22(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.34(s,1H),5.02-4.97(m,1H),4.80-4.75(m,1H),4.45-4.33(m,2H),3.51-3.41(m,2H),2.21-2.11(m,1H),1.90-1.76(m,1H),1.28-1.17(m,1H)。
實例178： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(2-氰基苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物224)
步驟1：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺
將反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.65mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及氫氧化銨(6mL)中之溶液在氮下在100℃下加熱1h。將反應溶液在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(208mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =288.1。
步驟2：反式-N -(8-胺基-6-(2-氰基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
在氮下將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.70mmol)、(2-氰基苯基)硼酸(256mg，1.74mmol)、第2代XPhos預催化劑(82mg，0.11mmol)、XPhos(66mg，0.14mmol)及KOAc(204mg，2.08mmol)於5：1 1,4-二噁烷/水(12mL)中之混合物在100℃下加熱6h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(2-氰基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(40.5mg，16%)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.32，[M+H]+ =355.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.32(s,1H),9.43(s,1H),8.24(s,1H),7.94-7.89(m,2H),7.87-7.81(m,1H),7.63-7.58(m,1H),7.43(s,2H),7.22(s,1H),2.79-2.72(m,1H),2.20-2.13(m,1H),1.65-1.61(m,1H),1.60-1.47(m,1H)。
實例179： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基-2-甲基苯基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物225)
步驟1：1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇
在-78℃下將四氫呋喃中之LDA(4.3mL，31.71mmol)滴加至3-溴-4-甲基吡啶(1g，5.81mmol)於四氫呋喃(30mL)中之溶液中。30min後，在-78℃下添加丙酮(405mg，6.973mmol)，且將反應混合物在氮下再攪拌2小時。將反應物用水稀釋，且將所得混合物用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色固體狀之1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇(1.0g，74%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =230.1。
步驟2：3,3-二甲基-3,4-二氫-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇
在氮下將1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇(500mg，2.17mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環、Pd(dppf)Cl2 (360mg，0.44mmol)及KOAc(660mg，6.72mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物在100℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮，且將殘餘物溶於水中。用氫氧化鈉水溶液(1mol/L)將溶液之pH調整至約10。隨後將所得溶液用 乙酸乙酯洗滌。將鹼性水層用HCl水溶液(1mol/L)酸化至pH=4。將所得酸性溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之3,3-二甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(260mg，68%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =178.1。
步驟3：反式-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基-2-甲基苯基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.69mmol)、3,3-二甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(600mg，3.39mmol)、Pd(PPh3 )4 (120mg，0.10mmol)及Cs2 CO3 (452mg，1.38mmol)於10：1二噁烷/水(11mL)中之懸浮液在氮下在100℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基-2-甲基苯基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(13.3mg 5%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.85，[M+H]+ =403.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.34(s,1H),8.56(s,1H),8.50(d,J =1.8Hz,1H),8.30(s,1H),7.46(d,J =1.8Hz,1H),7.00(s,1H),3.02(s,2H),2.70-2.59(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.67-1.53(m,2H),1.26(s,6H)。
實例180： 順式-5-(1-胺基-6-(-2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)- N ,4-二甲基菸鹼醯胺(化合物226)
步驟1：5-溴-4-甲基菸鹼酸
在-78℃下在氮下將n-BuLi(0.72mL，7.64mmol，11M於己烷中)滴加至3,5-二溴-4-甲基吡啶(500mg，1.99mmol)於四氫呋喃(10mL)中之溶液中。1h後，在-78℃下將CO2 (g)引入溶液中，且將所得溶液溫熱至室溫。1h後，將反應物用1M HCl水溶液稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之5-溴-4-甲基吡啶-3-羧酸(0.23g，53%)。
步驟2：5-溴-N ,4-二甲基菸鹼醯胺
將5-溴-4-甲基吡啶-3-羧酸(1g，4.62mmol)、HATU(2.64g，6.94mmol)、三乙胺(1.4g，13.83mmol)及甲胺(2.6mL，167.43mmol)於二氯甲烷(50mL)中之溶液在室溫下攪拌8h。將反應物用水稀釋，且將所得混合物用二氯甲烷萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-羧醯胺(0.6g，57%)。
步驟3：4-甲基-5-(甲基胺甲醯基)吡啶-3-基硼酸
將5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-羧醯胺(400mg，1.74mmol)、Pd(dppf)Cl2 (255mg，0.34mmol)、KOAc(513mg，5.22mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(2.22g，8.74mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱5h。將固體過濾，且將濾液用HCl水溶液酸化至pH=3至4。將酸性溶液用乙酸乙酯萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之[4-甲基-5-(甲基胺甲醯基)吡啶-3-基]硼酸(280mg，粗品)。
步驟4：順式-5-(1-胺基-6(2-氟環丙烷羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-N ,4-二甲基菸鹼醯胺
將順式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氟環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.71mmol)、[4-甲基-5-(甲基胺甲醯基)吡啶-3-基]硼酸(277mg，1.42mmol)、Pd(dppf)Cl2 (104mg，0.14mmol)及碳酸鉀(197mg，1.42mmol)於10：1 1,4-二噁烷/水(16.5mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱2h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之順式-5-(1-胺基-6-[[-2-氟環丙烷]胺基]-2,7-啶-3-基)-N,4-二甲基吡啶-3-羧醯胺(35.6mg，13%)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.95，[M+H]+ =395.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.38(s,1H),8.58(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H), 6.98(s,1H),5.02-4.97(m,1H),4.80-4.75(m,1H),2.96(s,3H),2.44(s,3H),2.21-2.12(m,1H),1.89-1.76(m,1H),1.30-1.17(m,1H)。
實例181： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-(氰基甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物227)
步驟1：3-溴-4-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽
將(3-溴吡啶-4-基)甲醇(3.0g，15.95mmol)及亞硫醯氯(3.8g，31.94mmol)於二氯甲烷(80mL)中之混合物在室溫下攪拌2h。將反應混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品3-溴-4-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽(3.7g，95%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =206.0。
步驟2：2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈
將3-溴-4-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽(4.1g，16.88mmol)、KCN(2.2g，33.79mmol)於1：1乙醇/水(100mL)中之混合物在100℃下加熱3h。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物用H2 O(50mL)溶解。將水溶液用乙酸乙酯萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(1：2乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈(2.4g，72%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =197.0。
步驟3：[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸
將2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈(1g，5.08mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(1.93g，7.6mmol)、Pd(dppf)Cl2 (371mg，0.51mmol)及KOAc(1.49g，15.18mmol)於二噁烷(30mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱3h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於H2 O中，且用NaOH水溶液將溶液鹼化至pH=10。將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。用HCl水溶液將水層酸化至pH=5至6，且在高真空下濃縮。將所得殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈褐色固體狀之[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸(658mg，80%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =163.1。
步驟4：反式-N -[8-胺基-6-[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(440mg，1.53mmol)、[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸(495mg，3.06mmol)、XPhos(73mg，0.15)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(121mg，0.15)、碳酸鉀(633mg，4.58)及5：1二噁烷/水(12mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱1h。將反應物濃縮，且將粗產物藉由急驟製備型HPLC純化，得到呈褐色固體狀之反式-N-[8-胺基 -6-[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(160，28%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.12，[M+H]+=370.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.77(s,1H),8.64(d,J =6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.54(d,J =6.0Hz,1H),7.44(s,2H),7.16(s,1H),4.48(s,2H),2.80-2.74(m,1H),2.21-2.14(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.48-1.42(m,1H)。
實例182： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物228)
步驟1：3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶
向冰冷氫化鈉(255mg，10.62mmol)於四氫呋喃(30mL)中之溶液中添加(3-溴吡啶-4-基)甲醇(1g，5.31mmol)。30min後，在0℃下添加CH3 I(0.336mL，5.39mmol)，且將反應溫度維持在0℃達30min，之後溫熱至室溫。12h後，將反應物用水稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(5：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶(500mg，47%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =202.1。
步驟2：4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基硼酸
將3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶(500mg，2.47mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(1.8g，7.08mmol)、Pd(dppf)Cl2 (406mg，0.49mmol)及KOAc(731mg，7.44mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱4h。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物溶於H2 O中。用NaOH水溶液將溶液之pH調整至10，且將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。隨後將水層用HCl水溶液酸化至pH=5至6，且在真空下濃縮。將殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]硼酸(400,mg 97%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =168.1。
步驟3：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.65mmol)及氫氧化銨(6mL)於二噁烷(8mL)中之溶液在100℃下加熱1h。將反應混合物濃縮，得到呈白色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =288.1。
步驟4：反式-N -(8-胺基-6-(4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.69mmol)、[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]硼酸(139mg，0.83mmol)、XPhos-PdCl-第2代(55mg，0.07mmol)、XPhos(32mg，0.06mmol)及碳酸鉀(200mg，1.44mmol)於10：1二噁烷/水(11mL)中之懸浮液在氮下在100℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(54.7mg，18%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.02，[M+H]+ =375.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.69(s,1H),8.59(d,J =5.1Hz,1H),8.23(s,1H),7.54(d,J =5.2Hz,1H),7.40(s,2H),7.06(d,J =2.2Hz,1H),4.69(s,2H),3.31(s,3H),2.78-2.75(m,1H),2.22-2.13(m,1H),1.68-1.55(m,1H),1.52-1.34(m,1H)。
實例183： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物229)
步驟1：3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶
向冰冷2-(3-溴吡啶-4-基)乙-1-醇(4.83g，23.91mmol)於四氫呋喃(100mL)中之溶液中添加氫化鈉(1.44g，60.0mmol)。將反應物溫熱至室溫。4h後，添加CH3 I(5.11g，36.0)，且將反應物維持在室溫下12h。將過量氫化鈉用甲醇 淬滅，且將反應混合物濃縮。藉由急驟管柱層析術(1：5乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色油狀之3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶(2.3g，45%)。LCMS：(ESI)[M+H]+ =216.0
步驟2：[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸
將3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶(2.11g，9.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(7.44g，29.29)、Pd(dppf)Cl2 (715mg，0.98mmol)及KOAc(2.87g，29.24mmol)於二噁烷(50mL)中之混合物在100℃下加熱12h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於H2 O中，且用NaOH水溶液將溶液鹼化至pH=7至8。將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。隨後將水層用HCl酸化至pH=3至4。將酸性溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈淡黃色固體狀之[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸(1.6g，91%)。LCMS：(ESI)[M+H]+ =182.1。
步驟3：反式-N -[8-胺基-6-[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺：
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(205mg，0.71mmol)、[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸(155mg，0.86mmol)、XPhos(34mg，0.07mmol)、碳酸鉀(209mg，1.51mmol)及XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化 物(56mg，0.07mmol)於4：1二噁烷/水(5mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱3h。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由急驟製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]-2,7- 啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(70.9mg，26%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.14，[M+H]+ =389.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.29(s,1H),9.41(s,1H),8.53(s,1H),8.48(d,J =6.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.37-7.36(m,3H),6.98(s,1H),3.50(t,J =6.0Hz,2H),3.15(s,3H),3.03(t,J =6.0Hz,2H),2.80-2.74(m,1H),2.20-2.13(m,1H),1.65-1.59(m,1H),1.48-1.41(m,1H)。
實例184： (1 R ,5 R ,6 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物230)
步驟1：(外)-N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在室溫下將NaBH4 (550mg，14.54mmol)逐份添加至(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(1.5g，2.43mmol)於甲醇(20mL)、二氯甲烷(10mL)及四氫呋喃(5mL)中之溶液中。1h後，將過量硼氫化鈉用H2 O淬滅，且將懸浮液在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之 (外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(1.3g，86%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =619.3。
步驟2：(外)-N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在室溫下向(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(600mg，0.96mmol)、三乙胺(980mg，9.691mmol)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中添加MsCl(555mg，4.84mmol)。30min後，將反應物用水稀釋，且將溶液用二氯甲烷萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。向粗品甲磺酸鹽於四氫呋喃(5mL)中之溶液中添加KCN(504mg，7.75mmol)及18-冠-6(256mg，0.96mmol)。將反應物在60℃下加熱16h，之後濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠層析術(1：3石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈褐色固體狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(100mg，16%)。LCMS：(ESI)[M+H]+ =628.3。
步驟3：(外)-N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(100mg，0.16mmol)、4-甲基吡啶-3-基)硼 酸(65mg，0.47mmol)、X-phos G2 Pd(25mg，0.03mmol)、X-phos(22mg，0.05mmol)及KOAc(78mg，0.79mmol)於9：1 1,4-二噁烷/水(2mL)中之混合物在100℃下加熱。2.5h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色固體狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(80mg，73%)。LCMS：(ESI)[M+H]+ =685.4。
步驟4：(外)-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在室溫下向(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(60mg，0.08mmol)於二氯甲烷(2mL)中之溶液中添加三氟乙酸(4mL)。4h後，將反應物在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，接著藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之(外)-N-[8-胺基-6-(4-吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-氰基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(6mg，18%)。LCMS(ESI)：RT (min)=2.34，[M+H]+ =385.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.80(s,1H),9.35(s,1H),8.55(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.40-7.22(m,3H),6.97(s,1H),3.36(d,J =5.0Hz,1H),2.40(s,3H),2.14-2.02(m,2H),2.02-1.80(m,4H),1.55-1.45(m,1H)。
實例185： 反式- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-((S)-2-側氧基噁唑啶-5-基)環丙烷羧醯胺(化合物231)
步驟1：5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
將5-(羥基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮(3g，25.61mmol)、咪唑(3.49g，51.26mmol)及TBSCl(4.65g，30.85mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(120mL)中之混合物在室溫下攪拌4h。將反應物用H2 O稀釋，且將所得混合物用乙酸乙酯萃取。將收集之有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈淡黃色油狀之5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(5.03g，85%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =232.1。
步驟2：5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
在室溫下在氮下將氫化鈉(2.4g，100.01mmol)添加至5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(4.6g，19.88mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中之溶液中達30min。將對甲氧基苄基氯(PMBCl)(3.1g，19.79mmol)添加至反應物中，且將混合物在室溫下攪拌2h。將過量氫化鈉藉由水淬滅，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色油狀之5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(6.3g，90%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =352.2。
步驟3：5-(羥基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
將5-[[(第三丁基二甲基矽基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(6.2g，17.63mmol)及TBAF(9.12g，34.88mmol)於四氫呋喃(100mL)中之混合物在室溫下攪拌3h。將反應物用H2 O稀釋，且將所得混合物用二氯甲烷萃取。將有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色油狀之5-(羥基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(93.7g，88%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =238.1。
步驟4：3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲醛
在-78℃下將DMSO(1.56g，19.96mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液滴加至二氯甲烷(20mL)中之草醯氯(1.27g，10.00mmol)中。30min後，在-78℃下將5-(羥基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮(1.98g，8.34mmol)添加至反應物中。1h後，添加三乙胺(1.69g，16.70mmol)，且將反應混合物溫熱至室溫達16h。將混合物在真空下濃縮，得到呈淡黃色固體狀之3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲醛(1.2g，粗品)。
步驟5：(2E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]丙-2-烯酸乙酯
將3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲醛(1.2g，5.10mmol)及2-(三苯基亞膦基)乙酸乙酯(2.67g，7.66mmol)於四氫呋喃(50mL)中之混合物在室溫下攪拌12h。將反應混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色固體狀之(2E)-3-[3-[(4-甲氧 基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]丙-2-烯酸乙酯(1.14g，73%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =306.1。
步驟6：反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸乙酯
將碘化三甲基氧化鋶(1.5g，6.81mmol)及t-BuOK(762mg，6.79mmol)於DMSO(15mL)中之混合物在室溫下攪拌30min。添加(2E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]丙-2-烯酸乙酯(1.04g，3.40mmol)。使混合物在室溫下反應12h，之後用水稀釋。將溶液用乙酸乙酯萃取，且將萃取物合併且濃縮。藉由矽膠層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈無色油狀之反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸乙酯(278mg，26%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =320.1；步驟7：反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸
將反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸乙酯(241mg，0.75mmol)及LiOH(55mg，2.29mmol)於1：1四氫呋喃/水(10mL)中之混合物在室溫下攪拌1h。將反應溶液用水稀釋，且用2M氯化氫水溶液酸化至pH 5。將溶液用DCM萃取。將萃取物用Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈淡黃色固體狀之粗品反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸(260mg)。
步驟8：反式-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧醯胺
向冰冷反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧酸(216mg，0.74mmol)、1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(341mg，0.62mmol)及吡啶(1mL)於二氯甲烷(5mL)中之溶液中滴加POCl3 (285mg，1.85mmol)。1h後，將反應混合物用水稀釋，且將溶液用二氯甲烷萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品反式-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧醯胺(200mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =825.4。
步驟9：反式-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]環丙烷-1-羧醯胺(241mg，0.29mmol)於三氟乙酸(5mL)中之混合物在80℃下加熱1h。隨後將溶液冷卻至室溫。添加CF3 SO3 H(3mL)，且將反應混合物在室溫下再攪拌一小時。將混合物在真空下濃縮，得到殘餘物，將其溶於MeOH中。將溶液用氫氧化銨鹼化至pH 8至9，且藉由製備型HPLC純化，得到呈淡黃色固體狀 之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基)環丙烷-1-羧醯胺(7.7mg，7%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.40，[M+H]+ =405.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.07-11.0(m,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =6.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.55(s,1H),7.34(s,2H),7.30(d,J =6.0Hz,1H),6.98(s,1H),4.42-4.18(m,1H),3.64-3.58(m,1H),3.32-3.23(m,1H),2.41(s,3H),2.25-2.12(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.17-0.96(m,2H)。
實例186： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基苯基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物232)
步驟1：1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇
在-78℃下將LDA(4.4mL，32.44mmol)滴加至3-溴-4-甲基吡啶(1g，5.81mmol)於四氫呋喃(30mL)中之溶液中。1h後，添加乙醛(386mg，8.762mmol)，且將反應溶液在-78℃再攪拌2h。隨後將反應物用水稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇(100mg，8%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =216.1。
步驟2：3-甲基-3,4-二氫-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇
將1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇(500mg，2.31mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(2.9g，10.74mmol)、Pd(dppf)Cl2 (380mg，0.46mmol)、KOAc(684mg，6.96mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物溶於H2 O中。用NaOH水溶液將水溶液鹼化至pH至10，且隨後用乙酸乙酯洗滌。將水層用HCl酸化至pH 5至6，且在真空中濃縮。將殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品3-甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(300mg，80%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =164.1。
步驟3：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.65mmol)及氫氧化銨(0.17mmol)於二噁烷(8mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱1h。將反應混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =288.1。
步驟4：反式-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基苯基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.69mmol)、3-甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(546mg，3.35mmol)、Pd(PPh3 )4 (120mg，0.10mmol)及Cs2 CO3 (452mg，1.38mmol)於10：1二噁烷/水(11mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基苯基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(80.1mg 30%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.71，[M+H]+=389.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.69(s,1H),8.59(d,J =2.2Hz,1H),8.23(s,1H),7.54(d,J =2.2Hz,1H),7.40(s,2H),7.06(s,1H),4.82-4.80(m,1H),3.81-3.79(m,1H),2.92-2.77(m,3H),2.22-2.13(m,1H),1.68-1.55(m,1H),1.52-1.34(m,1H),0.98(d,J =4.8Hz,3H)。
實例187： (1 S ,2 S )- N -(8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物233)及(1 R ,2 R )- N -(8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物234)
步驟1：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(1.8g，4.97mmol)及氫氧化銨(36mL)於1,4-二噁烷(36mL)中之混合物 在100℃下加熱15h。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(1.7g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+ =343.1。
步驟2：反式-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(280mg，0.82mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(168mg，1.23mmol)、XPhos(78mg，0.16mmol)、XPhos-PdCl-第2代(62mg，0.08mmol)及碳酸鉀(339mg，2.45mmol)於10：1 1,4-二噁烷/水(11mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱1h。將固體過濾，且將濾液濃縮。藉由急驟管柱層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(122mg，37%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =400.2。
步驟3：(1S ,2S )-N -(8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺及(1R ,2R )-N -(8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
在室溫下以2部分向反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(50mg，0.125mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加NCS(20.06mg，0.150mmol)。5h後，將反應物 在真空下濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(20：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之外消旋產物(15mg，26%收率)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物233：LCMS(ESI)：RT (min)=1.15，[M+H]+ =434.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.34(d,J =0.9Hz,1H),8.72(d,J =0.9Hz,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.51(s,1H),7.44(d,J =5.3Hz,1H),7.38(d,J =0.8Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.39(m,1H),2.29(s,3H),2.14-2.11(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。化合物234：LCMS(ESI)：RT (min)=1.16，[M+H]+ =434.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.34(d,J =0.9Hz,1H),8.72(d,J =0.9Hz,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.51(s,1H),7.44(d,J =5.3Hz,1H),7.38(d,J =0.8Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.39(m,1H),2.29(s,3H),2.14-2.11(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
實例188： (1 R ,2 R )- N -(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物235)及(1 S ,2 S )- N -(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7- 啶 -3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物236)
步驟1：3-溴-4-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶
將1-(噁烷-2-基)-4-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1H-吡唑(2.94g，10.57mmol)、3-溴-4-碘吡啶(2.00g，7.05mmol)、碳酸鉀(2.92g，21.12mmol)及Pd(dppf)Cl2 .CH2 Cl2 (580mg，0.710mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)/水(4mL)中之混合物在氮下在80℃下加熱6h。將所得溶液用乙酸乙酯萃取，且將合併之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(7：3乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之3-溴-4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶(2.75g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =308.2。
步驟2：4-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基硼酸
將3-溴-4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶(2.70g，8.76mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(8.90g，35.04mmol)、Pd(dppf)Cl2 二氯甲烷(720mg，0.88mmol)及KOAc(3.44g，35.05mmol)於1,4-二噁烷(40mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱4h。將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(9：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黑色固體狀之[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1,3-氮雜硼環己烯-5-基]硼酸(1.5g，63%收率)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =274.1。
步驟3：反式-N -(8-胺基-6-(4-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(400mg，1.39mmol)、[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]硼酸(1139.07mg，4.17mmol)、X-Phos(66.28mg，0.13mmol)、XPhos-PdOMs(111.14mg，0.13mmol)及碳酸鉀(576mg，4.17mmol)於5：1二噁烷/水(36mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱6h。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(9：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色油狀之反式-N-(8-胺基-6-[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(510mg，76%收率)。LCMS53(ESI)：[M+H]+ =481.1
步驟4：(1R ,2R )-N -(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺及(1S ,2S )-N -(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺
將(1S,2S)-N-(8-胺基-6-[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷-1-羧醯胺(510mg，1.06mmol)及三氟乙酸(4mL)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在25℃攪拌5h。將所得混合物在真空下濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC及掌性SFC純化，得到兩種鏡像異構物。化合物235：LCMS(ESI)：[M+H]+ =397.15，RT (min)=1.46，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 12.91(s,1H),11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.52(d,J =5.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.12(s,1H),7.61-7.58(m,3H),7.40(s,2H),6.83(s,1H),2.81-2.69(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.42-1.40(m,1H)。化合物236：LCMS(ESI)：[M+H]+ =397.15，RT (min)=0.92，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 12.91(s,1H),11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.52(d,J =5.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.12 (s,1H),7.61-7.58(m,3H),7.40(s,2H),6.83(s,1H),2.81-2.69(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.42-1.40(m,1H)。
實例189： (1 R ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物237)及(1 S ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物238)
使用如對於(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物235)所述之程序製備標題化合物。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物237：LCMS(ESI)：RT (min)=1.09,[M+H]+ =439.2，方法=M；1 HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.05(s,1H),9.37(s,1H),8.51(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.59(s,1H),7.31(s,1H),6.98(s,2H),3.97(s,3H),2.74(d,J =9.0Hz,2H),2.45(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.17-1.11(m,1H),1.00-0.94(m,1H)。化合物238：LCMS(ESI)：RT (min)=1.09，[M+H]+ =439.2，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.05(s,1H),9.37(s,1H),8.51(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.59(s,1H),7.31(s,1H), 6.98(s,2H),3.97(s,3H),2.74(d,J =9.0Hz,2H),2.45(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.17-1.11(m,1H),1.00-0.94(m,1H)。
實例190： (1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(2-甲氧基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物239)及(1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(2-甲氧基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物240)
使用如對於(1R,2R)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物241)所述之程序製備標題化合物。化合物239)：LCMS(ESI)：RT (min)=1.08，[M+H]+ =392.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.98(s,1H),3.28(s,3H),2.46(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.67-1.58(m,1H),1.24(s,3H),1.21(s,3H),1.24-1.15(m,1H),1.10-1.01(m,1H)。化合物240：LCMS(ESI)：RT (min)=1.08，[M+H]+ =392.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.98(s,1H),3.28(s,3H),2.46(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.67-1.58(m,1H),1.24(s,3H),1.21(s,3H),1.24-1.15(m,1H),1.10-1.01(m,1H)。
實例191： (1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物241)及(1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物242)
步驟1：2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙烷-1-羧酸甲酯
向冰冷反式-2-(甲氧基羰基)環丙烷-1-羧酸(210mg，1.46mmol)、吡啶(3mL，37.271mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(0.05mL)於二氯甲烷(6mL)中之溶液中添加草醯氯(320mg，2.521mmol)。將反應混合物溫熱至室溫達30min。添加1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.5g，0.906mmol)。1.5h後，將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(1：6乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色固體狀之2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙烷-1-羧酸甲酯(0.56g，91%)。LCMS(ESI)[M+H]+ 402.1。
步驟2：N -(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(2-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺
向冰冷2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙烷-1-羧酸甲酯(650mg，0.959mmol)於四氫呋喃 (15.00mL)中之溶液中添加甲基鋰(1.51mL，2.405mmol)。將反應物溫熱至25℃達3h，且隨後在真空中濃縮。藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(2-甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.36g，58%)。LCMS(ESI)[M+H]+ 402.2。
步驟3：(1R ,2R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺及(1S ,2S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺
將N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(100mg，0.148mmol)於三氟乙酸(4mL)中之溶液在50℃下加熱。1h後，將反應物在真空下濃縮，且將粗產物(70mg)藉由掌性製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(1S,2S)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(18.7mg，27%)及呈白色固體狀之(1R,2R)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(2-羥基丙-2-基)環丙烷-1-羧醯胺(19.6mg，28%)。化合物241：LCMS(ESI)：RT (min)=0.98，[M+H]+ =378，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.39(d,J =5.1Hz,1H),6.97(s,1H),2.45(s,3H),2.04-1.95(m,1H),1.65-1.55(m,1H),1.28(d,J =3.0Hz,6H),1.17-1.06(m,2H)。化合物242：LCMS(ESI)：RT (min)=0.98，[M+H]+ =378，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.1Hz,1H),8.29(s,1H), 7.39(d,J =5.1Hz,1H),6.97(s,1H),2.45(s,3H),2.04-1.95(m,1H),1.65-1.55(m,1H),1.28(d,J =3.0Hz,6H),1.17-1.06(m,2H)。
實例192： (1 R ,2 R )- N -(6-(4-(1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物243)及(1 S ,2 S )- N -(6-(4-(1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7- 啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物244)
使用如對於(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-胺基-2,7-啶-3-基)-2-氰基環丙烷羧醯胺(化合物235)所述之程序製備標題化合物。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物243：LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =397.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 13.02(s,1H),11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.73-8.45(m,2H),8.08(s,1H),7.81(d,J =5.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.35(s,2H),6.77(s,1H),5.80(d,J =2.5Hz,1H),2.75-2.73(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.49-1.32(m,1H)。化合物244：LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =397.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 13.02(s,1H),11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.73-8.45(m,2H),8.08(s,1H),7.81(d,J =5.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.35(s,2H),6.77(s,1H),5.80(d,J =2.5Hz,1H),2.75-2.73(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.49-1.32(m,1H)。
實例193： (1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(異噻唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物245)及(1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(異噻唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物246)
步驟1：(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯
向4-溴-1,2-噻唑(5.0g，30.5mmol)於二噁烷(100mL)中之溶液中添加丙-2-烯酸第三丁酯(13.7g，107mmol)、Pd(OAc)2 (67mg，0.298mmol)、P(o-Tol)3 (2.3g，7.6mmol)及三乙胺(9.3g，91.9mmol)。將反應物在125℃下加熱2h，且隨後在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色固體狀之(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(2.7g 42%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =212.1。
步驟2：反式-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯
在25℃向(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(1.3g，6.2mmol)於DMSO(10mL)中之溶液中添加碘化三甲基側氧基鋶(3g，13.6mmol)及t-BuOK(1.5g，13.368mmol)。1h後，將所得溶液用乙酸乙酯萃取，且將萃取物在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之反式-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(510mg，37%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =226.1。
步驟3：反式-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸
將反式-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(0.50g，2.22mmol)於三氟乙酸(4mL)中之溶液在25℃攪拌1h。將所得混合物濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈褐色油狀之反式-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(346mg，92%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =170.1
步驟4：反式-N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
在25℃向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(232mg，1.08mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加(1R,2R)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(290mg，1.71mmol)、POCl3 (174mg，1.14mmol)及吡啶(1mL，12mmol)。1h後，將反應物在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色固體狀之(反式)-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(330mg，83%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =365.1。
步驟5：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(110mg，0.301mmol)及氫氧化銨(5mL)於1,4-二噁烷(5mL)中之混合物在90 ℃下加熱3h。將混合物在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(120mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =346.1。
步驟6：(1S,2S)-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(異噻唑-4-基)環丙烷羧醯胺及(1R ,2R )-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(異噻唑-4-基)環丙烷羧醯胺
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(350mg，1.01mmol)於10：1二噁烷/水(11mL)中之溶液中添加1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(605mg，4.06mmol)、第2代XPhos預催化劑(84mg，0.107mmol)、XPhos(50mg，0.105mmol)及碳酸鉀(420mg，3.039mmol)。將所得懸浮液在100℃下加熱。1h後，將反應物在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到外消旋產物。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物245：LCMS(ESI)：RT (min)=1.17，[M+H]+ =433.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.76(s,1H),8.49(d,J =18.5Hz,3H),8.26(s,1H),7.40-7.28(m,3H),6.97(s,1H),4.77-4.66(m,1H),3.58-3.52(m,2H),2.93-2.85(m,2H),2.57-2.50(m,1H),2.48-2.35(m,1H),1.59-1.39(m,2H)。化合物246：LCMS(ESI)：RT (min)=1.17，[M+H]+ =433.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.76(s,1H),8.49(d,J =18.5Hz,3H),8.26(s,1H),7.40-7.28(m,3H),6.97(s,1H),4.77- 4.66(m,1H),3.58-3.52(m,2H),2.93-2.85(m,2H),2.57-2.50(m,1H),2.48-2.35(m,1H),1.59-1.39(m,2H)。
實例194： (1 S ,2 R )- N -[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物247)及(1 R ,2 S )- N -[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物248)
步驟1：N -(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯
向冰冷5-溴-4-甲基吡啶-3-胺(8.10g，43.31mmol)於四氫呋喃(165mL)中之溶液中添加NaHMDS(94.5mL，1M於四氫呋喃中)。30min後，添加Boc2 O(12.2g，55.90mmol)，且將反應物溫熱至室溫達3.5h。隨後將反應物用甲醇稀釋且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(3：1二氯甲烷/乙酸乙酯)純化，得到呈淡黃色固體狀之N-(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(8.0g，64%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =287.0。
步驟2：(5-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸
向N-(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(5g，17.41mmol)於1,4-二噁烷(200mL)中之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜 戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(39g，153.58mmol)、Pd(dppf)Cl2 (3.77g，5.15mmol)及KOAc(5.1g，51.97mmol)。將所得溶液在100℃下加熱。6h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。將殘餘物溶於水中，且用NaOH水溶液將水溶液鹼化至pH 10。將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。用1N HCl將水層酸化至pH=4。將水溶液在真空下濃縮，且將所得殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯/乙醇中。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮，得到呈微紅色油狀之(5-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(2.5g，57%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =253.2。
步驟3：(1S ,2R )-N -[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺及(1R ,2S )-N -[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(200mg，0.66mmol)於1,4-二噁烷(12mL)/水(2mL)中之溶液中添加(5-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(834mg，3.31mmol)、碳酸鉀(320mg，2.32mmol)及Pd(dppf)Cl2 (120mg，0.16mmol)。將所得溶液在120℃攪拌3h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化，得到鏡像異構純產物。化合物247：LCMS(ESI)：RT (min)=0.99，[M+H]+ =374.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.03(s,1H),9.35(s,1H),8.20(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.26(s,2H),6.82(s,1H),5.14(s,2H),2.73(d,J =6.9Hz,2H),2.13-2.06(m,4H),1.60-1.54(m,1H),1.15-1.11(m,1H),0.98-0.95(m,1H)。化合物248：LCMS(ESI)：RT (min)=1.58，[M+H]+ =374.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 11.03(s,1H),9.35(s,1H),8.20(s,1H), 7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.26(s,2H),6.82(s,1H),5.14(s,2H),2.73(d,J =6.9Hz,2H),2.13-2.06(m,4H),1.60-1.54(m,1H),1.15-1.11(m,1H),0.98-0.95(m,1H)。
實例195： (3 R )-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(化合物249)及(3 S )-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(化合物250)
步驟1：3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮
將4-溴-1H-吡唑(1.00g，6.80mmol)、3-溴-1-甲基吡咯啶-2-酮(1.33g，7.47mmol)及碳酸鉀(1.88g，13.60mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(12mL)中之懸浮液在60℃下加熱。1h後，將反應物用水(35mL)稀釋，且將溶液用乙酸乙酯(3×70mL)萃取。將合併之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈灰白色固體狀之3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(930mg，56%)。LCMS(ESI)[M+H]+ 244,246。
步驟2：3-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯啶-2-酮
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.40g，0.725mmol)、3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(360mg，1.47mmol)、Cs2 CO3 (1.42g，4.36mmol)、t-BuBrettPhos(179.95mg，0.37mmol)及第3代t-BuBrettPhos預催化劑(300mg，0.35mmol)於二噁烷(16.00mL，188.86mmol)中之溶液在100℃下加熱。2h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之3-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯啶-2-酮(470mg，45%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =715。
步驟3：3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮
將3-[4-[(8-[[(3,4-二甲氧基苯基)甲基][(3,5-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯啶-2-酮(250mg，0.35mmol)於三氟乙酸(25mL)中之溶液在70℃下加熱2h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(110mg，74%)。LCMS(ESI)[M+H]+ 415.2。
步驟4：(3R )-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮及(3S)-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮
將外消旋3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮藉由掌性SFC分離。化合物249：LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =415.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.23(s,1H),8.94(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.99(s,1H),7.54(s,1H),7.29(d,J =5.2Hz,1H),6.76(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.11-5.07(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.44-3.38(m,1H),2.82(s,3H),2.60-2.57(m,1H),2.50-2.43(m,1H),3.40(m,3H)。化合物250：LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =415.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.23(s,1H),8.94(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),7.99(s,1H),7.54(s,1H),7.29(d,J =5.2Hz,1H),6.76(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.11-5.07(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.44-3.38(m,1H),2.82(s,3H),2.60-2.57(m,1H),2.50-2.43(m,1H),3.40(m,3H)。
實例196： (3 R )-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基哌啶-2-酮(化合物251)及(3 S )-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基哌啶-2-酮(化合物252)
使用如對於(3R)-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(化合物249)所述之程序製備標題化合物。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物251：LCMS(ESI)：[M+H]+ =429.3，RT (min)=1.04，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.22(s,1H),8.92(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J =5.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.29(d,J =5.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.76(s,1H),6.65(s,1H),4.95-4.92(m,1H),3.44-3.42(m,1H),3.32(s,1H),2.87(s,3H),2.41(s,3H),2.37-2.27(m,1H),2.25-2.13(m,1H),2.02-2.00(m,1H),1.92-1.90(m,1H)。化合物252：LCMS(ESI)：[M+H]+ =429.2，RT (min)=1.05，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d6 )δ 9.22(s,1H),8.92(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J =5.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.29(d,J =5.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.76(s,1H),6.65(s,1H),4.95-4.92(m,1H),3.44-3.42(m,1H),3.32(s,1H),2.87(s,3H),2.41(s,3H),2.37-2.27(m,1H),2.25-2.13(m,1H),2.02-2.00(m,1H),1.92-1.90(m,1H)。
實例197： (1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7- 啶-3-基]-2-(吡啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物253)及(1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7- 啶-3-基]-2-(吡啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物254)
步驟1：1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇
將2-(2-溴吡啶-3-基)乙-1-醇(5.0g，24.7mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(25.1g，98.8mmol)、KOAc(7.28g，74.17mmol)、Pd(dppf)Cl2 (1.8g，2.46mmol)於二噁烷(120mL)中之混合物在100℃下加熱。1h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物溶於水中，且用NaOH水溶液將溶液之pH調整至7至8。將鹼性溶液用乙酸乙酯洗滌。隨後用HCl將水層酸化至pH 5至6。將酸性溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物懸浮於1：1乙酸乙酯(ethyl acetae)/乙醇中且過濾。將濾液在真空下濃縮，得到呈褐色油狀之粗品1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(3.34g，91%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =150.1
步驟2：(1R ,2R )-N -[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(吡啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺及(1S ,2S )-N -[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(吡啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(吡啶-3-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.40g，1.17mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1-醇(701mg，4.70mmol)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(93mg，0.11mmol)、X-Phos(56mg，0.11mmol)及碳酸鉀(489mg，3.53mmol)於5：1二噁烷(dixoane)/水(12mL)中之混合物在100℃下加熱1h。將反應混合物在真空下濃縮，且將粗材料藉由急驟製備型HPLC純化，得到外消旋產物。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合 物253：LCMS(ESI)：[M+H]+ =427.2，RT (min)=1.88，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.03(s,1H),9.38(s,1H),8.53(s,1H),8.52-8.51(m,1H),8.48(d,J =6Hz,1H),8.45-8.42(m,1H),8.28(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.99(s,1H),4.79(t,J =6Hz,1H),3.62-3.55(m,2H),2.94(t,J =6Hz,2H),2.55-2.45(m,2H),1.60-1.46(m,2H)。化合物254：LCMS(ESI)：[M+H]+ =427.2，RT (min)=1.24，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.03(s,1H),9.38(s,1H),8.53(s,1H),8.52-8.51(m,1H),8.48(d,J =6Hz,1H),8.45-8.42(m,1H),8.28(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.99(s,1H),4.79(t,J =6Hz,1H),3.62-3.55(m,2H),2.94(t,J =6Hz,2H),2.55-2.45(m,2H),1.60-1.46(m,2H)。
實例198： (外)- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物255)
步驟1：(外)-6-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯
將(外)-3-[(第三丁氧基)羰基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(2.0g，8.8mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(1.8g，7.2mmol)、吡啶(10mL)及POCl3 (1.67g，10.891mmol)於二氯甲烷(100mL)中之混合物在室溫下攪拌1h。將反應 藉由緩慢添加飽和碳酸氫鈉水溶液來淬滅。將所得溶液用二氯甲烷萃取，且將合併之有機物在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之(外)-6-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(2g，66%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =423.1。
步驟2：(1R ,5S ,6R )-6-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯
將(1R,5S,6R)-6-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(2g，4.725mmol)及氫氧化銨(20mL)於二噁烷(20mL)中之混合物在90℃下加熱3h。將反應物濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品(外)-6-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(2g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =404.1。
步驟3：(外)-6-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯
將(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(510mg，3.72mmol)、(外)-6-[(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(0.50g，1.24mmol)、Pd(dppf)Cl2 (90mg，0.12mmol)及碳酸鈉(400mg，3.77mmol)於10：1二噁烷/水(16.5mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱12h。將反應物過濾，且將 濾液濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之(外)-6-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(380mg，67%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =461.2。
步驟4：(外)-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(外)-6-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺甲醯基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-羧酸第三丁酯(380mg，0.825mmol)及CF3 COOH(4mL)於二氯甲烷(20mL)中之溶液在室溫下攪拌1h。將反應物濃縮，得到呈黃色油狀之粗品(外)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.3g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =361.2。
步驟5：(外)-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在室溫下向(外)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.30g，0.83mmol)、氧雜環丁-3-酮(180mg，2.5mmol)於甲醇(20mL)中之溶液中添加NaBH3 CN(157mg，2.5mmol)。2h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之(外)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(氧雜環丁-3-基)-3-氮雜 雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(125mg，36%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.25，[M+H]+ =417.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.79(s,1H),9.35(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J =5.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.48-7.21(m,3H),6.96(s,1H),4.56(t,J =6.6Hz,2H),4.44(t,J =6.0Hz,2H),3.73(m,1H),3.05(d,J =8.9Hz,2H),2.47-2.42(m,3H),2.41(s,3H),1.95(t,J =2.2Hz,2H)。
實例199： 2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-6-甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(化合物256)
步驟1：3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯
將3-溴-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(10.0g，48.8mmol)、TsOH(830mg，4.82mmol)、3,4-二氫-2H-吡喃(12.2g，145mmol)於乙酸乙酯(150mL)中之混合物回流4h。將反應混合物濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟層析術(1：3乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈油狀之3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(8g，57%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =289.0。
步驟2：[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇
在氮下向冰冷3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯(7.4g，25.6mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中滴加二異丁基氫化鋁(102mL，608mmol)。1h後，將反應物用H2 O(100mL)稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷萃取。將合併之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈淡黃色油狀之粗品[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(5.2g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =261.0。
步驟3：[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基甲烷磺酸酯
向冰冷[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(5.5g，21mmol)、三乙胺(6.38g，63.0mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加MsCl(5.3g，46mmol)。15min後，將反應物用水稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷萃取。將收集之有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，產生呈無色油狀之粗品[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基甲烷磺酸酯(6.3g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =339.0。
步驟4：2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈
將[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基甲烷磺酸酯(4.0g，11.8mmol)及KCN(2.3g，35mmol)於DMSO(100mL)中之混合物在50℃下加熱。2h後，將反應物用H2 O(500mL)稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈無色油狀之2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈(2.1g，66%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =270.0。
步驟5：2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈
在室溫下向2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈(2.2g，8.1mmol)於二氯甲烷(30mL)中之溶液中添加三氟乙酸(6mL)。2h後，將反應物濃縮，且將所得殘餘物用二氯甲烷(20mL)稀釋。用甲醇中之7M NH3 將溶液鹼化至pH=8。將溶液在真空下濃縮，且將粗產物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色油狀之2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈(1.44g，95%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =186.0。
步驟6：2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲酯
在室溫下向2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈(1.66g，8.92mmol)、碘化四丁銨(328mg，0.88mmol)、碳酸鉀(1.2g，8.68mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(80mL)中之懸浮液中添加2-氯乙酸甲酯(961mg，8.85mmol)。1h後，將反應混合物用H2 O(100mL)稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機物濃縮。藉由急驟製備型HPLC純化，得到呈無色油狀之2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲酯(760mg，33%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =258.0。
步驟7：2-溴-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲酯(394mg，1.52mmol)及PtO2 (173mg，0.762mmol)於甲醇(20mL)中之混合物在室溫下在氫(2atm)下攪拌2h。將反應物過濾，且將濾液濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之2-溴-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(155mg，44%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =230.0。
步驟8：2-溴-6-甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
在室溫下向2-溴-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(105mg，0.45mmol)及t-BuOK(56mg，0.50mmol)於四氫呋喃(5mL)中之混合物中添加CH3 I(98mg，0.69mmol)。2h後，將溶液在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之2-溴-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(90mg，81%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =244.0
步驟9：2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(380mg，0.68mmol)、2-溴-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(112mg，0.45mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(157mg，0.18mmol)、 t-BuBrettPhos(87mg，0.17mmol)及Cs2 CO3 (747mg，2.29mmol)於二噁烷(8mL)中之懸浮液在130℃下加熱4h。將反應混合物在真空下濃縮，且將粗產物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色油狀之2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(0.20g，41%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =715.3。
步驟10：2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(190mg，0.26mmol)及三氟乙酸(5mL)中之溶液在80℃下加熱30min。將混合物在真空下濃縮，且將所得混合物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(36.7mg，33%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.10，[M+H]+ =415.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.43(s,1H),9.22(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J =6.0Hz,1H),7.55(s,1H),7.30(d,J =6.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.82(s,1H),6.05(s,1H),4.99(s,2H),3.84(t,J =6.0Hz,2H),3.06(t,J =6.0Hz,2H),2.96(s,3H),2.42(s,3H)。
實例200： 6- N -[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-1,6-二胺(化合物257)
使用如對於(3R)-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(化合物249)所述之程序製備標題化合物，LCMS(ESI)：RT (min)=1.05，[M+H]+ =382.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.22-9.15(m,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.04(s,1H),7.67(d,J =0.8Hz,1H),7.44-7.36(m,1H),6.75(dd,J =13.6,0.9Hz,2H),6.49-5.95(m,1H),4.58(td,J =14.4,3.9Hz,2H),2.45(s,3H)。
實例201： N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7- 啶-3-基)環丙烷羧醯胺(化合物258)
步驟1：N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺(0.50g，1.9mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(391mg，2.86mmol)、XPhos(181mg，0.38mmol)、XPhos-PdCl-第2代(144mg，0.19mmol)及碳酸鉀(787mg，5.69mmol)於10：1 1,4-二噁烷/水(11mL)中之混合物在100℃下加熱1h。將反應物過濾，且將濾液在真 空下濃縮。藉由矽膠層析術(20：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(534mg，88%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =320.1。
步驟2：N -(8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(524mg，1.64mmol)、NBS(350mg，1.97mmol)及二氯甲烷(20mL)中之混合物在25℃攪拌30min。將反應混合物用二氯甲烷萃取，且將合併之萃取物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(20：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色固體狀之N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(427mg，65%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =398.2。
步驟3：N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基)環丙烷羧醯胺
將N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(0.10g，0.25mmol)、(1H-吡唑-4-基)硼酸(42mg，0.38mmol)、Pd(dppf)Cl2 (19mg，0.03mmol)及碳酸鉀(104mg，0.75mmol)於4：1二噁烷/水(10mL)中之混合物在100℃下加熱。15h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，得到呈綠色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7-啶-3-基]環丙烷羧醯胺(27.6mg，29%)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.91， [M+H]+ =386.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.72(s,1H),10.95(s,1H),9.41(d,J =0.9Hz,1H),8.39-8.22(m,2H),8.20(s,1H),7.45(s,1H),7.33(s,2H),7.14(d,J =4.4Hz,2H),2.03(s,4H),1.01-0.51(m,4H)。
實例202： 2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)
步驟1：3-環丙基-5-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑
向冰冷3-環丙基-5-碘-1H-吡唑(950mg，4.06mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液中添加氫化鈉(292mg，12.168mmol)。2h後，將2-(2-溴乙氧基)噁烷(1.242g，5.940mmol)添加至反應物中，且將反應混合物溫熱至25℃達3h。將反應物用水稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(1：4乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之3-環丙基-5-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(1.30g，89%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =363.0。
步驟2：6-N -[5-環丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.30g，0.54mmol)、5-環丙基-3-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(394mg，1.09mmol)、Cs2 CO3 (1.06g，3.25mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(93mg，0.11mmol)及t-BuBrettPhos(132mg，0.27mmol)於二噁烷(8mL)中之懸浮液在110℃下在氮下加熱12h。將反應混合物冷卻至室溫且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(25：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之6-N-[5-環丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.24g，56%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =786.4。
步驟3：2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇
將6-N-[5-環丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(320mg，0.41mmol)於三氟乙酸(10mL)中之溶液在50℃下加熱。1h後，將反應物在真空下濃 縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(0.136g，83%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.07，[M+H]+ =402.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.56(s,1H),8.54(d,J =5.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.47(d,J =5.4Hz,1H),6.85(s,1H),6.71(s,1H),4.15(t,J =5.2Hz,2H),3.87(t,J =5.2Hz,2H),2.44(s,3H),1.84-1.75(m,1H),0.85-0.83(m,4H)。
實例203： 1-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(化合物260)
使用如對於2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)所述之程序製備標題化合物，LCMS(ESI)：RT (min)=1.50，[M+H]+ =390.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.20(s,1H),8.86(s,1H),8.52(s,1H),8.40(d,J =5.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.48(s,1H),7.28(d,J =5.0Hz,1H),7.06(s,2H),6.73(s,1H),6.62(s,1H),4.69(s,1H),3.98(s,2H),2.39(s,3H),1.07(s,6H)。
實例204： 2-(5-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物261)
使用如對於以下所述之程序製備標題化合物：2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)，LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =376.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.17(t,J =0.9Hz,1H),8.51(s,1H),8.42(d,J =5.1Hz,1H),7.49-7.30(m,1H),6.84(dd,J =7.3,0.9Hz,2H),6.16(d,J =0.6Hz,1H),4.16(t,J =5.4Hz,2H),3.89(dd,J =5.7,5.0Hz,2H),2.44(d,J =0.6Hz,3H),2.27(d,J =0.5Hz,3H)。
實例205： 2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-5-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物262)
使用如對於以下所述之程序製備標題化合物：2-(3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-5-環丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)，LCMS(ESI)：RT (min)=1.01，[M+H]+ =376.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.16(t,J =0.8Hz,1H),8.52(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),7.48-7.34(m,2H),6.89-6.78(m,1H),6.03(d,J =0.8Hz,1H),4.13(t,J =5.4Hz,2H),3.93(t,J =5.4Hz,2H),2.46(s,3H),2.36(d,J =0.8Hz,3H)。
實例206： 3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]- N ,1-二甲基-1 H -吡唑-5-羧醯胺(化合物263)
步驟1：3-溴-N ,1-二甲基-1H -吡唑-5-羧醯胺
在25℃下向3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸(0.50g，2.44mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(8mL)中之溶液中依序添加甲胺鹽酸鹽(0.30g，4.44mmol)、二異丙基乙基胺(2.5mL，15mmol)及HATU(1.1g，2.9mmol)。12h後，將反應混合物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(1：3乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之3-溴-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺(480mg，90%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =218.1。
步驟2：3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.50g，0.906mmol)、3-溴-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺(0.50g，2.293mmol)、t-BuBrettPhos(225mg，0.464mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(120 mg，0.140mmol)及Cs2 CO3 (1.78g，5.463mmol)於二噁烷(12mL)中之懸浮液在氮下在110℃下加熱2h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺(0.58g，93%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =689.3。
步驟3：3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺
將3-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺(0.50g，0.73mmol)於三氟乙酸(8mL)中之溶液在50℃下加熱。2h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之3-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-羧醯胺(75.1mg，27%)。LCMS(ESI)：RT (min)=0.91，[M+H]+ =389.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.19(s,1H),8.52(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),7.42(s,1H),7.39(d,J =5.1Hz,1H),6.85(s,1H),6.72(s,1H),4.07(s,3H),2.89(s,3H),2.45(s,3H)。
實例207： (4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]苯基)甲烷磺醯胺(化合物264)
步驟1：(4-溴苯基)甲烷磺醯胺
將NH3 於1,4-二噁烷(80mL，0.5M)中之溶液滴加至冰冷(4-溴苯基)甲烷磺醯氯(2.00g，7.42mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中。將所得混合物溫熱至室溫達30min。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物用10：1二氯甲烷/乙酸乙酯(20mL)懸浮，且將固體藉由過濾收集，得到呈白色固體狀之(4-溴苯基)甲烷磺醯胺(1.6g，86%)。1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 7.58(d,J =8.4Hz,2H),7.32(d,J =8.4Hz,2H),6.85(s,2H),4.25(s,2H)。
步驟2：[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]苯基]甲烷磺醯胺
向1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.25g，0.45mmol)於1,4-二噁烷(12.5mL)中之溶液中依序添加(4-溴苯基)甲烷磺醯胺(453mg，1.81mmol)、Pd2 (dba)3 (41.5mg，0.045mmol)、XPhos (43mg，0.091mmol)及t-BuONa(261mg，2.72mmol)。將反應混合物在微波輻射之情況下在110℃下加熱1h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]苯基]甲烷磺醯胺(160mg，49%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =721.0。
步驟3：(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]苯基)甲烷磺醯胺
將[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基]苯基]甲烷磺醯胺(130mg，0.18mmol)於三氟乙酸(10mL)中之溶液在45℃下加熱5h。將反應混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]苯基)甲烷磺醯胺(36.6mg，48%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.07，[M+H]+ =421.1，方法=M；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 13.07-12.83(m,1H),9.97(s,1H),9.58(s,1H),8.98-8.42(m,3H),7.60(d,J =8.4Hz,2H),7.54(s,1H),7.48(d,J =4.8Hz,2H),7.07(s,1H),7.01(s,1H),6.82(s,2H),4.24(s,2H),2.38(s,3H)。
實例208： 1-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]苯基)哌嗪-2-酮(化合物265)
步驟1：4-(4-溴苯基)-3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯
將1-溴-4-碘苯(5.0g，17.7mmol)、3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(3.53g，17.6mmol)、甲基[2-(甲基胺基)乙基]胺(310mg，3.52mmol)、CuI(670mg，3.52mmol)及K3 PO4 (11.2g，52.8mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中之懸浮液在100℃下加熱。3h後，將反應物冷卻至室溫且用水稀釋。將所得溶液用乙酸乙酯萃取，且將合併之有機萃取物在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之4-(4-溴苯基)-3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(2.8g，45%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =355.1。
步驟2：4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]苯基]-3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(20mg，0.036mmol)、4-(4-溴苯基)-3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(32mg，0.090mmol)、Pd2 (dba)3 (1.6mg，0.002mmol)、XPhos(1.7mg，0.004mmol)及Cs2 CO3 (23.6mg，0.072mmol)於二噁烷(2mL)中之混合物在100℃下加熱12h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，產生呈黃色固體狀之4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]苯基]-3-側氧基哌嗪-1-羧酸酯(10mg，34%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =826.9。
步驟3：1-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]苯基)哌嗪-2-酮
將4-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]苯基]-3-側氧基哌嗪-1-羧酸第三丁酯(0.20g，0.242mmol) 於三氟乙酸(5mL)中之溶液在80℃下加熱2h。將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之1-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]苯基)哌嗪-2-酮(57.1mg，55%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.67，[M+H]+ =426.2，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.19(t,J =0.9Hz,1H),8.50(s,1H),8.41(d,J =5.1Hz,1H),7.65-7.55(m,2H),7.38(d,J =5.2Hz,1H),7.31-7.23(m,2H),6.95(d,J =0.9Hz,1H),6.79(d,J =0.8Hz,1H),3.72(t,J =5.5Hz,2H),3.57(s,2H),3.19(t,J =5.5Hz,2H),2.44(s,3H)。
實例209： 2-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇(化合物266)
使用如對於(3R)-3-(4-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯啶-2-酮(化合物249)所述之程序製備標題化合物，LCMS(ESI)：RT (min)=1.83，[M+H]+ =390.2，方法=M；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.21(s,1H),8.78(s,1H),8.52(s,1H),8.42-8.40(m,1H),7.91(s,1H),7.51(s,1H),7.29-7.27(m,1H),7.04(m,2H),6.74(s,1H),6.62(s,1H),4.97(t,J =5.7Hz,1H),5.58(d,J =5.7Hz,2H),2.39(s,3H),1.47(s,6H)。
實例210： (+/-)-反式- N -(8-胺基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物267)
步驟1：反式-N -(8-胺基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(0.20g，0.58mmol)、5-氟-2-甲基苯基硼酸(269mg，1.75mmol)、Pd(PPh3 )4 (135mg，0.11mmol)及K3 PO4 (372mg，1.75mmol)於4：1 1,4-二噁烷/水(10mL)中之混合物在100℃下加熱6h。將所得混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(乙酸乙酯)純化，接著藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-(8-胺基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(3mg)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.67，[M+H]+ =417.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.27(t,J =0.9Hz,1H),8.32-8.26(m,1H),7.50(s,1H),7.36(d,J =0.8Hz,1H),7.30-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),7.05-7.03(m,1H),6.90(d,J =0.8Hz,1H),3.84(s,3H),2.37-2.35(m,1H),2.32(s,3H),2.15-2.03(m,1H),1.56-1.53(m,1H),1.25-1.22(m,1H)。
實例211： (+/-)-反式- N -[8-胺基-6-(5-羥基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物268)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.58mmol)於5：1 1,4-二噁烷/水(12mL)中之溶液中依序添加(5-羥基-2-甲基苯基)硼酸(134mg，0.88mmol)、Pd(PPh3 )4 (135mg，0.12mmol)及K3 PO4 (372mg，1.75mmol)。將所得溶液在100℃下加熱。5h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(5-羥基-2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(120mg，50%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.26，[M+H]+ =415.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J =8.0Hz,1H),6.84(d,J =8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m,1H)。
實例212： (1 R ,2 S )- N -[8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物269)及(1 S ,2 R )- N -[8-胺基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物270)
在25℃下向反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(210mg，0.59mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(7mL)中之溶液中添加NCS(156mg，1.17mmol)。15h後，將反應物濃縮，且藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之外消旋產物(0.10g，43%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物269：LCMS(ESI)：RT (min)=2.06，[M+H]+=393，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.34(s,1H),8.69(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.44(d,J =5.2Hz,1H),2.81-2.62(m,2H),2.29(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.75(m,1H),1.39-1.33(m,1H),1.09-1.05(m,1H)。化合物270：LCMS(ESI)：RT (min)=1.14，[M+H]+=393，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.34(s,1H),8.69(s,1H),8.48(d,J =5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.44(d,J =5.2Hz,1H),2.81-2.62(m,2H),2.29(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.75(m,1H),1.39-1.35(m,1H),1.10-1.05(m,1H)。
實例213： (1 R ,2 S )- N -[8-胺基-5-乙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物271)及(1 R ,2 S )- N -[8-胺基-5-乙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物272)
將反式-N-[8-胺基-5-乙烯基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(68mg，0.18mmol)(化合物275)及鈀/碳(50mg，0.47mmol)於甲醇(6mL)中之懸浮液在25℃在氫(1atm)下攪拌30min。將反應混合物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之外消旋產物(11mg，16%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物271：LCMS(ESI)：RT (min)=1.06，[M+H]+ =387，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.34(s,1H),8.57(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.46(d,J =5.2Hz,1H),2.78-2.68(m,3H),2.52-2.39(m,1H),2.22(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.74(m,1H),1.39-1.36(m,1H),1.12-1.02(m,4H)。化合物272：LCMS(ESI)：RT (min)=1.05，[M+H]+=387，方法=K-1；1 H NMR(300MHz, CD3 OD)δ 9.34(s,1H),8.58(s,1H),8.49(d,J =5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.46(d,J =5.2Hz,1H),2.78-2.68(m,3H),2.52-2.39(m,1H),2.22(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.74(m,1H),1.39-1.36(m,1H),1.12-1.02(m,4H)。
實例214： ( R )-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙腈(化合物273)及( S )-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙腈(化合物274)
步驟1：2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈
將4-溴-1H-吡唑(1g，6.80mmol)、2-氯丙腈(612mg，6.83mmol)、Cs2 CO3 (2.43g，7.45mmol)於四氫呋喃(10mL)中之懸浮液在100℃下加熱。2h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(952mg，70%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =200.0。
步驟2：2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙腈
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(552mg，1.00mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(800mg，3.99mmol)、t-BuBrettPhos(97mg，0.20mmol)、第3代t-BuBrettPhos預催化劑(171mg，0.20mmol)及碳酸鉀(828mg，5.99mmol)於二噁烷(15mL)中之混合物在氮下在120℃下加熱。5h後，將混合物在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈褐色油狀之2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(302mg，45%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =671.3。
步驟3：(R )-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙腈及(S )-2-(4-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺基)-1H-吡唑-1-基)丙腈
將2-[4-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(248mg，0.37mmol)及CF3 COOH(20mL)中之溶液在80℃下加熱45min。將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物用DCM(10mL)溶解。用甲醇中之NH3 將溶液調整至pH=8。藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之外消旋產物(65.4mg，48%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物273：LCMS(ESI)：RT (min)=1.62，[M+H]+ =371，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J =6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J =6.0Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J =6.0Hz,3H)。化合物274：LCMS(ESI)： RT (min)=1.61，[M+H]+=371，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J =6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J =6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J =6Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J =6Hz,3H)。
實例215： (+/-)-反式- N -[8-胺基-5-乙烯基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物275)
向反式-N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(0.050g，0.11mmol)於二噁烷(2mL)及水(0.1mL)中之溶液中依序添加乙烯基三氟硼酸鉀(23mg，0.17mmol)、Pd(PPh3 )4 (13mg，0.01mmol)及碳酸鈉(37mg，0.35mmol)。將所得混合物在85℃達加熱15h。將反應物過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，接著藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之外消旋產物(2.5mg，6%)。化合物275：LCMS(ESI)：RT (min)=1.86min[M+H]+ =385.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.34(s,1H),8.71(s,1H),8.44(d,J =5.2Hz,1H),8.35(s,1H),7.40(d,J =5.2Hz,1H),6.59-6.52(m,1H),5.40-5.37(m,1H),5.25-5.21(m,1H),2.82-2.63(m,2H),2.23(s,3H),2.05-2.01(m,1H),1.77-1.72(m,1H),1.37-1.34(m,1H),1.08-1.03(m,1H)。
實例216： (1 S ,2 S ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(化合物276)、(1 R ,2 R ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶 -3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(化合物277)(1 S ,2 S ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(化合物278)及(1 R ,2 R ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(化合物279)。
步驟1：(2E )-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸第三丁酯
將2-(苄基氧基)乙醛(10.0g，66.6mmol)、2-(二乙氧基磷醯基)乙酸第三丁酯(16.8g，66.6mmol)、LiCl(16.7g，394mmol)、THF(200mL)及二異丙基乙基胺(8.5g，66mmol)中之混合物在室溫下攪拌1天。將反應物用水(10mL)稀釋，且在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(100：1至10：1石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈淡黃色固體狀之(2E)-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸第三丁酯(3.5g，21%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =249.3。
步驟2：2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯
在-30℃下向四氟硼酸乙基二苯基鋶(10.5g，34.75mmol)於1,2-二甲氧基乙烷(250mL)及二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加LDA(41mL，2M於THF)。1h後，添加(2E)-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸第三丁酯(2.9g，11.68mmol)，且將反應物溫熱至室溫達16h。將反應物用水(100mL)稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物濃縮。藉由矽膠層析術(100：1至10：1石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯(1.5g，46%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =277.0。
步驟3：2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸
將2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸第三丁酯(1.2g，4.34mmol)於二氯甲烷(5mL)及三氟乙酸(5mL)中之溶液在室溫下攪拌16h。將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術純化，得到呈淡黃色油狀之2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸(700mg，73%)。
步驟4：2-[(苄基氧基)甲基]-N -(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺
2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基環丙烷-1-羧酸(1.1g，4.99mmol)、1-N,1-N-雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(0.390g，0.71mmol)、吡啶(2mL)及POCl3 (2mL)於二氯甲烷(20mL)中之混合物在室溫下攪拌1h。將反應物用水稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將有機層合併且在真 空下濃縮。藉由矽膠層析術純化，用(100：1至1：1石油醚/乙酸乙酯)溶離，得到呈淡黃色固體狀之2-[(苄基氧基)甲基]-N-(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(700mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =754.4。
步驟5：N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(羥基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺
將2-[(苄基氧基)甲基]-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(0.60g，0.80mmol)及鈀/碳(3g，28.19mmol)於甲醇(30mL)中之懸浮液在室溫下在氫(2atm)下攪拌。16h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術100：1石油醚/乙酸乙酯至乙酸乙酯純化，得到呈淡黃色固體狀之N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(羥基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(0.50g，95%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =664.8。
步驟6：[反式-2-[(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺甲醯基]-3-甲基環丙基]甲基甲烷磺酸酯
向冰冷N-(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(羥基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(0.10g，0.15mmol)及三乙胺(45mg，0.45mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加MsCl(34mg，0.30 mmol)。將所得溶液溫熱至室溫。1h後，將反應物用水稀釋，且將溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機層在真空下濃縮，得到呈淡黃色油狀之粗品[2-[(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-3-甲基環丙基]甲基甲烷磺酸酯(90mg，81%)。
步驟7：反式-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺
將N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(羥基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(550mg，0.83mmol)及KCN(234mg，3.59mmol)於DMSO(15mL)中之混合物在50℃下加熱3h。將反應物用H2 O稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈淡黃色固體狀之N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(0.50g，90%)。
步驟8：(1S ,2S ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺、(1R ,2R ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺、(1S ,2S ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺、(1R ,2R ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺
將N-[8-[1,3-雙(2,4-二甲氧基苯基)丙-2-基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.30mmol)於三氟乙酸(10mL)中之溶液在室溫下攪拌16h。將反應混合物在真空下濃縮。藉由製備型HPLC，接著藉由掌性SFC依序純化，得到4化合物。化合物276：LCMS(ESI)：RT (min)=3.24，[M+H]+ =372，方法=M；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.42(d,J =5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.74-2.68(m,2H),2.46(s,3H),2.07-2.03(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.51-1.44(m,1H),1.27(d,J =8.0Hz,3H)。化合物277：LCMS(ESI)：RT (min)=0.85，[M+H]+ =372，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J =5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.42(d,J =5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.74-2.68(m,2H),2.46(s,3H),2.07-2.03(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.51-1.44(m,1H),1.27(d,J =8.0Hz,3H)。化合物278：LCMS(ESI)：RT (min)=0.99，[M+H]+ =372，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.30(s,1H),7.41(d,J =5.2Hz,1H),6.98(s,1H),2.74-2.67(m,2H),2.46(s,3H),1.88-1.81(m,1H),1.73-1.68(m,2H),1.28(d,J =8.0Hz,3H)。化合物279：LCMS(ESI)：RT (min)=1.79，[M+H]+ =372，方法=M；1 H NMR(300MHz, CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J =5.2Hz,1H),8.30(s,1H),7.41(d,J =5.2Hz,1H),6.98(s,1H),2.74-2.67(m,2H),2.46(s,3H),1.88-1.81(m,1H),1.73-1.68(m,2H),1.28(d,J =8.0Hz,3H)。
實例217： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物280)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物281)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.58mmol)於4：1二噁烷/水(10mL)中之溶液中依序添加(2-氟-6-甲基苯基)硼酸(0.270g，1.75mmol)、Pd(PPh3 )4 (135mg，0.117mmol)及K3 PO4 (371.55mg，1.75mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱16h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(乙酸乙酯)純化。將產物用藉由製備型HPLC，接著藉由掌性SFC進一步純化，得到標題化合物。化合物280：LCMS(ESI)：RT (min)=2.89，[M+H]+ =417.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.28(s,1H),7.48(s,1H),7.35-7.27(m,2H),7.12(d,J =7.8Hz,1H),7.01(t,J =9.0Hz,1H),6.85(s,1H),3.83(s,3H),2.39-2.32(m,1H),2.22(s,3H),2.12-2.06(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.27-1.20(m,1H)。化合物281：LCMS(ESI)：RT (min)=1.67，[M+H]+=417.20，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.28(s,1H),7.48(s,1H),7.35-7.27(m,2H),7.12(d,J =7.8Hz,1H),7.01(t,J =9.0Hz,1H),6.85(s,1H),3.83(s,3H),2.39-2.32(m,1H),2.22(s,3H),2.12-2.06(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.27-1.20(m,1H)。
實例218： 1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-[5-(羥基甲基)-2-甲基苯基]-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物282)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-[5-(羥基甲基)-2-甲基苯基]-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物283)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(150mg，0.44mmol)於5：1二噁烷/水(12mL)依序添加[4-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯基]甲醇(162.87mg，0.66mmol)、K3 PO4 (278.66mg，1.31mmol)及Pd(PPh3 )4 (101.13mg，0.09mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱2h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物依序藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)、製備型HPLC及掌性SFC純化，得到標題化合物。化合物282：LCMS(ESI)：RT (min)=1.59，[M+H]+ =429.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.28(s,1H),7.50(s,1H),7.38-7.37(m,2H),7.34-7.27(m,2H),6.89(s,1H),4.64(s,2H),3.85(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.35(s,3H),2.13-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。化合物283：LCMS(ESI)：RT (min)=1.52，[M+H]+ =429.3，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.28(s,1H),7.50(s,1H),7.38-7.37(m,2H),7.34-7.27(m,2H),6.89(s,1H),4.64(s,2H),3.85(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.35(s,3H),2.13-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。
實例219： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(3-胺基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物284)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(3-胺基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物285)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(250mg，0.729mmol)於5：1二噁烷/水(12mL)中之溶液中依序添加2-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯胺(425mg，1.82mmol)、Pd(PPh3 )4 (170mg，0.147mmol)及K3 PO4 (465mg，2.19mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱12h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(30：1二氯甲烷/甲醇)、製備型HPLC及掌性SFC依序純化，得到標題化合物。化合物284：LCMS(ESI)：RT (min)=2.09，[M+H]+ =414.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.89(s,1H),9.32(s,1H),8.18(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.17(s,2H),6.92(t,J =7.8Hz,1H),6.72(s,1H),6.65(d,J =7.2Hz,1H),6.57(t,J =7.2Hz,1H),4.87(s,2H),3.76(s,3H),2.22-2.17(m,2H),2.00(s,3H),1.41-1.35(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。化合物285：LCMS(ESI)：RT (min)=2.09，[M+H]+ =414.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.89(s,1H),9.32(s,1H),8.18(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.17(s,2H),6.92(t,J =7.8Hz,1H),6.72(s,1H),6.65(d,J =7.2Hz,1H),6.57(t,J =7.2Hz,1H),4.87(s,2H),3.76(s,3H),2.22-2.17(m,2H),2.00(s,3H),1.41-1.35(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。
實例220： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(5-羥基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物286)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(5-羥基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物287)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.58mmol)於5：1 1,4-二噁烷/水(12mL)中之溶液中依序添加(5-羥基-2-甲基苯基)硼酸(134mg，0.88mmol)、Pd(PPh3 )4 (135mg，0.12mmol)及K3 PO4 (372mg，1.75mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱5h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化，得到標題化合物。化合物286：LCMS(ESI)：RT (min)=2.22，[M+H]+ =415.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J =8.0Hz,1H),6.84(d,J =8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m, 1H)。化合物287：LCMS(ESI)：RT (min)=1.26，[M+H]+=415.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J =8.0Hz,1H),6.84(d,J =8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m,1H)。
實例221： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物288)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物289)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(216mg，0.63mmol)於5：1 1,4-二噁烷/水(12mL)中之溶液中添加2-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(0.20g，0.81mmol)、Pd(PPh3 )4 (136mg，0.12mmol)及K3 PO4 (372mg，1.75mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱12h。將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化，得到標題化合物。化合物288：LCMS(ESI)：RT (min)=2.29，[M+H]+ =429.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1H),9.34(s,1H),8.22(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.16(m,4H),6.96(d,J =2.7Hz,1H), 6.88-6.85(m,2H),3.76(d,J =3.9Hz,6H),2.27(s,3H),2.22-2.17(m,2H),1.40- 1.38(m,1H),1.19-1.18(m,1H)。化合物289：LCMS(ESI)：RT (min)=2.30，[M+H]+ =429.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1H),9.34(s,1H),8.22(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.16(m,4H),6.96(d,J =2.7Hz,1H),6.88-6.85(m,2H), 3.76(d,J =3.9Hz,6H),2.27(s,3H),2.22-2.17(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.19-1.18(m,1H)。
實例222： 3-(1-胺基-6-[[(1 S ,2 S )-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷]胺基]-2,7- 啶-3-基)- N , N ,4-三甲基苯甲醯胺(化合物290)及3-(1-胺基-6-[[(1 R ,2 R )-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷]胺基]-2,7- 啶-3-基)- N , N ,4-三甲基苯甲醯胺(化合物291)
步驟1：3-溴-N ,N ,4-三甲基苯甲醯胺
在室溫下向3-溴-4-甲基苯甲酸(5.00g，23.2mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加二異丙基乙基胺(12.02g，93.00mmol)、HATU(13.26g，34.87mmol)及二甲胺(2.10g，46.6mmol)。16h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(1：1乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈白色固體狀之3-溴-N,N,4-三甲基苯甲醯胺(4.7g，83%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =242.1
步驟2：N ,N ,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺
向3-溴-N,N,4-三甲基苯甲醯胺(2.50g，10.3mmol)於二噁烷(100mL)中之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(5.24g，20.6mmol)、KOAc(3.04g，30.97mmol)及Pd(dppf)Cl2 (755.54mg，1.03mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱。16h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化， 得到呈橙色油狀之N,N,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(1.1g，37%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =290.2。
步驟3：3-(1-胺基-6-[[(1S ,2S )-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷]胺基]-2,7-啶-3-基)-N ,N ,4-三甲基苯甲醯胺及3-(1-胺基-6-[[(1R ,2R )-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷]胺基]-2,7-啶-3-基)-N ,N ,4-三甲基苯甲醯胺
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.58mmol)於5：1二噁烷/水(12mL)中之溶液中添加K3 PO4 (372mg，1.75mmol,)、N,N,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲醯胺(506mg，1.75mmol)及Pd(PPh3 )4 (134.84mg，0.11mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱2h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(20：1二氯甲烷/甲醇及掌性SFC依序純化，得到標題化合物。化合物290：LCMS(ESI)：RT (min)=1.25，[M+H]+=470.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.33(s,1H),7.55-7.47(m,2H),7.46-7.36(m,3H),6.95(s,1H),3.86(s,3H),3.12(d,J =10.1Hz,6H),2.43-2.30(m,4H),2.18-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,1H),1.35-1.20 (m,1H)。化合物291：LCMS(ESI)：RT (min)=1.25，[M+H]+ =470.3，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.33(s,1H),7.55-7.47(m,2H),7.46-7.36(m,3H),6.95(s,1H),3.86(s,3H),3.12(d,J =10.1Hz,6H),2.43-2.30(m,4H),2.18-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,1H),1.35-1.20(m,1H)。
實例223： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(化合物292)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(化合物293)
步驟1：4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑
將4-碘-1H-吡唑(50.0g，258mmol)、3,4-二氫-2H-吡喃(65.05g，773.3mmol)及對 甲苯磺酸(3.11g，18.1mmol)於乙酸乙酯(300mL)中之溶液在90℃下加熱。2h後，將反應物濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術(95：5石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈黃色油狀之4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑(65g，91%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =279.1。
步驟2：(2E )-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸乙酯
將4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑(50.0g，180mmol)、丙-2-烯酸乙酯(72g，720mmol)、Pd(OAc)2 (6.05g，27.0mmol)、P(o-Tol)3 (16.4g，54mmol)及三乙胺(109g，1.08mol)於CH3 CN(250mL)中之混合物在氮下在110℃下加熱3h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(9：1石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈黃色油狀之(2E)-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸乙酯(35g，78%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =251.3。
步驟3：反式-2-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸乙酯
在室溫下向碘化三甲基氧化鋶(21g，95mmol)於DMSO(300mL)中之溶液中添加氫化鈉(3.68g，153.35mmol)。30min後，添加(2E)-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸乙酯(20.0g，79.9mmol)，且將所得溶液維持在25℃下達16h。將反應物用H2 O稀釋，且將溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機層濃縮。藉由急驟管柱層析術(99：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之反式 -2-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸乙酯(5.7g，27%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =265.3。
步驟4：(1S ,2S )-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸乙酯
將反式-2-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸乙酯(5.7g，21.6mmol)於三氟乙酸(10mL)及二氯甲烷(50mL)中之溶液在25℃攪拌3h。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(97：3二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之反式-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸乙酯(2.4g，62%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =181.2
步驟5：N -[2-[2-(甲烷磺醯基氧基)乙氧基]乙基]胺基甲酸第三丁酯
向冰冷N-[2-(2-羥基乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(12.0g，58.5mmol)及三乙胺(17.8g，175mmol)於二氯甲烷(100mL)中之溶液中添加MsCl(10.05g，87.73mmol)。15min後，將反應混合物用H2 O洗滌。將水層用二氯甲烷萃取。將合併之有機層在真空下濃縮，得到呈黃色油狀之粗品N-[2-[2-(甲烷磺醯基氧基)乙氧基]乙基]胺基甲酸第三丁酯(20g)。
步驟6：反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H -吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸乙酯
將N-[2-[2-(甲烷磺醯基氧基)乙氧基]乙基]胺基甲酸第三丁酯(16.04g，56.61mmol)、反式-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(6.80g，37.7 mmol)、Cs2 CO3 (12.29g，37.72mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(120mL)中之懸浮液在80℃下加熱。4h後，將所得混合物用H2 O稀釋。將水溶液用乙酸乙酯萃取，且將合併之有機萃取物濃縮。藉由急驟管柱層析術(96：4二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸乙酯(12.2g，88%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =368.4。
步驟7：反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸
在25℃下向反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸乙酯(12.2g，33.2mmol)於四氫呋喃(100mL)/乙醇(100mL)/水(40mL)中之溶液中添加LiOH˙H2 O(9.75g，232mmol)。16h後，將反應混合物用H2 O洗滌。將水溶液用二氯甲烷洗滌。用12%氯化氫水溶液將水層酸化至pH=5。將酸性溶液用乙酸乙酯萃取，且將萃取物濃縮，得到呈黃色油狀之粗品反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸(4g，35%)。LCMS(ESI)：[M-H]- =338.1。
步驟8：2-(2-(4-((1S ,2S )-2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基胺基甲酸第三丁酯
將1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(55mg，0.10mmol)、反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸(0.040g，0.12mmol)、吡啶(1mL)及POCl3 (30mg，0.196mmol)於二氯甲烷(5mL)中之混合物在室溫下攪拌30min。隨後將反應物用水稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機物濃縮，且藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-2-(2-(4-(2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基胺基甲酸第三丁酯(60mg)。LCMS(ESI)：[M-H]- =873.6
步驟9：(1S ,2S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺及(1R ,2R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺
將N-[2-(2-[4-[(1S,2S)-2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(0.20g，0.23mmol)於三氟乙酸(4mL)及二氯甲烷(4mL)中之溶液在25℃攪拌6h。將所得混合物在真空下濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化，得到標題化合物。化合物292：LCMS(ESI)：RT (min)=1.94，[M+H]+ =473.3，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J =5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.61(s,1H),7.48-7.36(m,2H),6.99(m,1H),4.30-4.28(m,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.49(m,2H),2.85-2.82(m,2H),2.46(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m, 1H),1.29-1.26(m,1H)。化合物293：LCMS(ESI)：RT (min)=1.94，[M+H]+=473.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J =5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.61(s,1H),7.48-7.36(m,2H),6.99(m,1H),4.30-4.28(m,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.49(m,2H),2.85-2.82(m,2H),2.46(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
實例224： (1 S ,3 r ,5 R ,6 r )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物294)
步驟1：(1S ,3r ,5R ,6r )-N -(8-(2,4-二甲氧基苄基胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(1R,5S,6R)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g，0.29mmol)(參見實例226)、3-甲氧基氮雜環丁烷鹽酸鹽(183mg，1.48mmol)、NaBH3 CN(55.96mg，0.89mmol)及AcOH(0.89mg，0.01mmol)於甲醇(10mL)中之混合物在60℃下加熱。16h後，將反應混合物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(92：8二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之(1R,3r,5S,6S)-N-[8-[(2,4-二甲氧基苯基)胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =595.4。
步驟2：(1S ,3r ,5R ,6r )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(1R,3r,5S,6S)-N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g，0.33mmol)於三氟乙酸(10mL)/二氯甲烷(5mL)中之溶液在25℃攪拌6h。將反應混合物濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之(1R,3r,5S,6S)-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(3-甲氧基氮雜環丁-1-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺甲酸鹽(4.4mg，3%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.91，[M+H]+ =445.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.44(d,J =5.1Hz,1H),8.26(s,1H),7.40(d,J =5.1Hz,1H),6.97(s,1H),4.08-4.02(m,1H),3.69-3.49(m,2H),3.32(s,3H),3.24(s,1H),3.18-3.07(m,2H),2.46(s,3H),2.30(t,J =3.0Hz,1H),2.18-2.16(m,2H),2.01-1.92(m,2H),1.73-1.69(m,2H)。
實例225： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(化合物295)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(化合物296)
步驟1：N -[2-(2-[4-[(1S ,2S )-2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸2-羥基丙-2-酯
向冰冷反式-2-[1-[2-(2-[[(第三丁氧基)羰基]胺基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸(1.73g，5.09mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(1.28g，5.98mmol)及吡啶(5mL)於二氯甲烷(25mL)中之溶液中添加POCl3 (2.34g，15.26mmol)。將所得溶液溫熱至室溫達30min。將反應物用水緩慢稀釋，且將水溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物在真空下濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之反式-N-[2-(2-[4-[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸2-羥基丙-2-酯(2.0g，73%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =535.4。
步驟2：反式-N -[2-(2-[4-[2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯
將反式-N-[2-(2-[4-[2-[(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(2.0g，3.73mmol)、雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺(4.74g，14.9mmol)及三乙胺(1.89g，18.7mmol)於二噁烷(40mL)中之混合物在110℃下加熱。12h後，將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯 基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(2.5g，82%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =816.3。
步驟3：反式-2-(2-(4-(2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基胺基甲酸第三丁酯
將反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(2.28g，2.79mmol)、(2,6-二氯苯基)硼酸(6.39g，33.48mmol)、Pd(PPh3 )4 (645mg，0.55mmol)及碳酸氫鈉(2.81g，33.45mmol)於乙醇(60mL)/水(6mL)/甲苯(60mL)中之混合物在氮下在100℃下加熱。12h後，將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，產生呈褐色油狀之2-(2-(4-((1S,2S)-2-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-啶-3-基胺甲醯基)環丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基胺基甲酸第三丁酯(2.0g，77%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =926.9。
步驟4：(1S ,2S )-N -[8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺及(1R ,2R )-N -[8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-啶-3-基]-2-[1-[2-(2-胺基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]環丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]胺基甲酸第三丁酯(2.55g，2.75mmol)於三氟乙酸(10mL)中之溶液在80℃下加熱。20min後，將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物用二氯甲烷稀釋。將溶液用7M NH3 /甲醇鹼化至pH=8，且濃縮。藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化，得到標題化合物。化合物295：LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+ =526.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.38(s,1H),8.23(s,1H),7.62(s,1H),7.58-7.55(m,2H),7.48-7.42(m,3H),7.32(s,1H),6.80(s,1H),4.19(t,J =6.0Hz,2H),3.71(t,J =6.0Hz,2H),3.35-3.26(m,2H),2.62(t,J =6.0Hz,2H),2.22(t,J =6.0Hz,2H),2.00-1.80(m,2H),1.42-1.36(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。化合物296：LCMS(ESI)：RT (min)=1.43，[M+H]+=526.1，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.38(s,1H),8.23(s,1H),7.62(s,1H),7.58-7.55(m,2H),7.48-7.42(m,3H),7.32(s,1H),6.80(s,1H),4.19(t,J =6.0Hz,2H),3.71(t,J =6.0Hz,2H),3.35-3.26(m,2H),2.62(t,J =6.0Hz,2H),2.22(t,J =6.0Hz,2H),2.00-1.80(m,2H),1.42-1.36(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。
實例226： (外)- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物297)
步驟1：(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸
在25℃向(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸乙酯(3.20g，7.83mmol)於乙醇(30mL)及水(30mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(1.88g，47.0mmol)。6h後，將有機物在真空下除去。將剩餘水溶液用乙酸乙酯洗滌。將水溶液用濃鹽酸酸化至pH=3，且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(3g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =379.2。
步驟2：(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在25℃下將(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸(3.00g，7.88mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺(1.69g，7.90mmol)、POCl3 (3.63g，23.67mmol)及吡啶(4mL)於二氯甲烷(40mL)中之混合物攪拌30min。將反應物用水緩慢稀釋，且將所得混合物用二氯甲烷萃取。將有機萃取物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(1：9乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之(1R,5S,6R)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(3.7g，81%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =576.3。
步驟3：(外)-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(外)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(3.60g，6.24mmol)、雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺(7.93g，25.0mmol)、三乙胺(3.16g，31.2mmol)及二噁烷(100mL)中之混合物在110℃下加熱。16h後，將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(3：7乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(4.0g，75%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =857.5。
步驟4：(外)-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
向(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-氯-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(4.0g，4.7mmol)於二噁烷(50mL)/水(8mL)中之溶液中添加(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(1.15g，8.40mmol)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(730mg，0.93mmol)、XPhos(670mg，1.41mmol)及KOAc(1.60g，16.3mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱。2h後，將反應物過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(20：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(4g，94%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =913.5。
步驟5：(外)-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在25℃下向(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-[(第三丁基二苯基矽基)氧基]雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(3.2g，3.5mmol)於四氫呋喃(40mL)中之溶液中添加TBAF三水合物(5.5g，17.5mmol)。4h後，將反應物用水稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷萃取。將合併之有機物用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由矽膠(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈淡黃色固體狀之(1R,5S,6R)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(2.1g，89%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =676.4。
步驟6：(外)-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在室溫下向(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.80g，1.18mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(3.51g，8.29mmol)。將所得溶液溫熱至45℃。3h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(95：5二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.80g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =674.4。
步驟7：(外)-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g，0.30mmol)、嗎啉(129mg，1.48mmol)、NaBH3 CN(56mg，0.89mmol)及AcOH(0.89mg，0.02mmol)於甲醇(10mL)中之混合物在60℃下加熱。6h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(95：5二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g，90%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =745.5。
步驟8：(外)-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將(外)-N-(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(0.20g，0.27mmol)於三氟乙酸(10mL)及二氯甲烷(10mL)中之溶液在25℃攪拌6h。將所得混合物在真空下濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之(外)-N-[8- 胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-3-(嗎啉-4-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(17.2mg，14%)。LCMS(ESI)：RT (min)=1.75，[M+H]+ =445.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.87(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.1Hz,1H),8.21(s,1H),7.31(d,J =5.3Hz,3H),6.95(s,1H),3.59-3.57(m,4H),2.89-2.72(m,1H),2.41(s,3H),2.32(d,J =5.5Hz,4H),2.16-2.06(m,3H),1.77-1.74(m,2H),1.59-1.56(m,2H)。
實例227： (1 R ,2 R )-N-[8-胺基-6-(2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物298)及(1 S ,2 S )-N-[8-胺基-6-(2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物299)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.10g，0.29mmol)於二噁烷(5mL)及水(1mL)中之溶液中添加(2-甲基苯基)硼酸(0.060g，0.44mmol)、Pd(PPh3 )4 (68mg，0.06mmol)及K3 PO4 (186mg，0.87mmol)。將溶液在100℃下在氮下加熱。12h後，將反應物在真空下濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(50mg，43%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物298：LCMS(ESI)：RT (min)=1.33[M+H]+ =399.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.35-7.25(m,3H),6.89(d,J =0.9Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.36(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.33-1.23(m,1H)。化合物299：LCMS(ESI)：RT (min)=1.84[M+H]+ =399.1， 方法=K；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.35-7.25(m,3H),6.89(d,J =0.9Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.36(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.33-1.23(m,1H)。
實例228： (1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(5-氰基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物300)及(1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(5-氰基-2-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物301)
向反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.15g，0.44mmol)於二噁烷(5mL)及水(1mL)中之溶液中添加4-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)苯甲腈(532mg，2.19mmol)、Cs2 CO3 (428mg，1.31mmol)、XPhos(21mg，0.04mmol)及XPhos-PdCl-第2代(33mg，0.04mmol)。將混合物在100℃下在氮下加熱。12h後，將溶液在真空下濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(5-氰基-2-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(68mg，37%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物300：LCMS(ESI)：RT (min)=1.33[M+H]+ =424.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.27(s,1H),7.87(s,1H),7.77(d,J =9.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.52(d,J =9.0Hz,1H), 7.35(s,2H),7.31(s,1H),6.99(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.20(m,2H), 1.43-1.37(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。化合物301：LCMS(ESI)：RT(min)=1.33，[M+H]+ =424.2，方法=K；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.27(s,1H),7.87(s,1H),7.77(d,J =9.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.52(d,J =9.0 Hz,1H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),6.99(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.20 (m,2H),1.43-1.37(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
實例229： (1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物302)及(1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物303)
將KHF2 (91mg，1.17mmol)、(2-氯-6-氟苯基)硼酸(122mg，0.70mmol)於水(1.5mL)及第三丁醇(6mL)中之混合物在25℃在氮下攪拌15min。將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.20g，0.58mmol)、Pd(PPh3 )4 (68mg，0.06mmol)及K3 PO4 (149mg，0.70mmol)中之混合物中添加至以上溶液中，且將合併之混合物在氮下加熱至120℃。45min後，將反應物在真空下濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(50mg，20%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物302：LCMS(ESI)：RT (min)=1.34，[M+H]+ =437.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.55(s,1H),8.55(s,1H),7.68-7.62(m,1H),7.55-7.51(m,2H),7.40-7.33(m,2H),7.24(s,1H),3.86(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.34-1.27(m,1H)。化合物303：LCMS(ESI)：RT (min)=1.35，[M+H]+ =437.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.55(s,1H),8.55(s,1H),7.68-7.62(m,1H),7.55-7.51(m,2H),7.40-7.33(m,2H),7.24(s,1H),3.86(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.34-1.27(m,1H)。
實例230： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(2-氯苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物304)及(1 R ,2 R )-N-[8-胺基-6-(2-氯苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物305)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(190mg，0.55mmol)、(2-氯苯基)硼酸(433mg，2.76mmol)、Pd(PPh3 )4 (63mg，0.06mmol)及碳酸鉀(117mg，0.84mmol)於二噁烷(3mL)/水(0.3mL)中之懸浮液在100℃在氮下加熱。3h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈淡黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(2-氯苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(60mg，23%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物304：LCMS(ESI)：RT (min)=0.95，[M+H]+ =419，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.39(s,1H),8.25(s,1H),7.61-7.54(m,3H),7.45-7.42(m,2H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),7.00(s,1H),3.78(s,3H),2.24-2.18(m,2H),1.14-1.37(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。化合物305：LCMS(ESI)：RT (min)=1.31[M+H]+ =419，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.39(s,1H),8.25(s,1H),7.61-7.54(m,3H),7.45-7.42(m,2H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),7.00(s,1H),3.78(s,3H),2.24-2.18(m,2H),1.14-1.37(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。
實例231： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物306)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物307)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(455mg，1.32mmol)、(2,6-二氟苯基)硼酸(0.20g，1.26mmol)、X-Phos(27mg，0.08mmol)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(45mg，0.05mmol)及AcOK(171mg，1.74mmol)於二噁烷(5mL)/水(0.5mL)中之混合物在110℃下在氮下加熱。3h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化，得到呈淡黃色固體狀之外消旋(反式)-N-[8-胺基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(60mg，11%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物306：LCMS(ESI)：RT (min)=1.280，[M+H]+ =421，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.52-7.44(m,2H),7.37(s,1H),7.13-7.05(m,2H),6.99(s,1H),3.02(s,3H),2.41-2.34(m,1H),2.13-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.25(m,1H)。化合物307：LCMS(ESI)：RT (min)=1.272，[M+H]+ =421，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.52-7.44(m,2H),7.37(s,1H),7.13-7.05(m,2H),6.99(s,1H),3.02(s,3H),2.41-2.34(m,1H),2.13-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.25(m,1H)。
實例232： (1 S ,2 S )- N -[8-胺基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物308)及(1 R ,2 R )- N -[8-胺基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7- 啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物309)
步驟1：5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶
將2,5-二溴-4-甲基吡啶(0.60g，2.39mmol)、2-(三丁基錫烷基)-1,3-噁唑(1.02g，2.86mmol)及Pd(PPh3 )4 (276.32mg，0.23mmol)於二噁烷(15mL)中之混合物在90℃在氮下加熱。16h後，將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(1：3乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色固體狀之5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶(0.20g，35%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =239.0。
步驟2：4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶
將5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶(0.10g，0.41mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(1.06g，4.18mmol)、Pd(dppf)Cl2 (31mg，0.04mmol)及KOAc(103mg，1.05mmol)於二噁烷(5mL)中之混合物在90℃下在氮下加熱。2h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之粗品4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(0.10g)。LCMS(ESI)[M+H]+ =287.0。
步驟3：(1R ,2R )-N -[8-胺基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺及(1S ,2S )-N -[8-胺基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
將4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(167mg，0.58mmol)、反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.10g，0.29mmol)、第2代XPhos預催化劑(22mg，0.028mmol)、X-Phos(13mg，0.03mmol)及碳酸鉀(80mg，0.57mmol)於水(1mL)/二噁烷(5mL)中之混合物在90℃下在氮下加熱。2h後，將混合物在真空下濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈褐色固體狀之外消旋(反式)-N-[8-胺基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(45mg，17%)。將鏡像異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物308：LCMS(ESI)：[M+H]+ =467，RT (min)=1.272，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.33(s,1H),8.70(s,1H),8.38(s,1H),8.15-8.14(m,2H),7.51(s,1H),7.45-7.44(m,1H),7.38(s,1H),7.09(s,1H),3.86(s,3H),2.57(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.34-1.25(m,1H)。化合物309：LCMS(ESI)：[M+H]+ =467，RT (min)=1.280，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.33(s,1H),8.70(s,1H),8.38(s,1H),8.15-8.14(m,2H),7.51(s,1H),7.45-7.44(m,1H),7.38(s,1H),7.09(s,1H),3.86(s,3H),2.57(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.34-1.25(m,1H)。
實例233： (1 S ,2 R )- N -(8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物310)及(1 R ,2 S )- N -(8-胺基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物311)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(160mg，2.7mmol)、(2,6-二氯苯基)硼酸(2.52g，13.2mmol)、Pd(PPh3 )4 (310mg，0.23mmol)及碳酸氫鈉(1.12g，13.30mmol)於水(2mL)/乙醇(20mL)/甲苯(20mL)中之混合物在110℃下在氮下加熱。15h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之外消旋產物(110mg，10%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物310：LCMS(ESI)：RT =2.46min，[M+H]+ =412.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.33(s,1H),8.29(s,1H),7.56-7.48(m,2H),7.42(dd,J =8.0,8.0Hz,1H),6.86(s,1H),2.79-2.64(m,2H),2.03(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.35(m,1H),1.06(m,1H)。化合物311：LCMS(ESI)：RT =1.37min，[M+H]+ =412.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.33(s,1H),8.29(s,1H),7.56-7.48(m,2H),7.42(dd,J =8.0,8.0Hz,1H),6.86(s,1H),2.79-2.64(m,2H),2.03(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.35(m,1H),1.06(m,1H)。
實例234： (1 R ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺(化合物315)、(1 S ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺(化合物314)、(1 S ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺(化合物313)及(1 R ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺(化合物312)
步驟1：1-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸第三丁酯
向冰冷6-[(第三丁氧基)羰基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧酸(740mg，2.74mmol)及1-N,1-N-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(1.16g，2.10mmol)於吡啶(3mL)/二氯甲烷(15mL)中之溶液中添加POCl3 (643mg，4.19mmol)。30min後，將過量POCl3 用水淬滅。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈褐色固體狀之粗品1-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺甲醯基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸第三丁酯(660mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =803.4。
步驟2：(1R ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺、(1S ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺、(1S ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺及(1R ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-1-羧醯胺
將1-[(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺甲醯基]-5-側氧基-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸第三丁酯(660mg，0.82mmol)及三氟乙酸(10mL)中之混合物在80℃下加熱。40min後，將混合物濃縮，且將所得殘餘物用MeOH(10mL)稀釋。用NH3 甲醇溶液(7mol/L)將溶液鹼化至pH=8。將粗產物藉由製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC純化。化合物315：LCMS(ESI)：RT (min)=1.007，[M+H]+ =403.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J =6.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.41(d,J =6.0Hz,1H),6.99(s,1H),3.27-3.21(m,2H),2.46-2.30(m,5H),2.06-1.99(m,3H),1.47-1.39(m,1H),1.11-1.07(m,1H)。化合物314：LCMS(ESI)：RT =1.014min，[M+H]+ =403.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.96(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J =6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.58(s,1H),7.32-7.30(m,3H),6.97(s,1H),3.15-3.12(m,1H),3.02-2.99(m,1H),2.41(s,3H),2.31-2.25(m,1H),2.11-2.04(m,2H),1.92-1.78(m,2H),1.19-1.16(m,1H),1.10-0.96(m,1H)。化合物313：LCMS(ESI)：RT (min)=0.903，[M+H]+ =403.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.39(s,1H),8.58(s,1H),8.45(d,J =6.0Hz,1H),8.27(s,1H),7.53(s,1H),7.41(s,2H),7.33(d,J =6.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.21-3.16(m,2H),2.42(s,3H),2.38-2.36(m,2H),2.12-2.08(m,1H),1.97-1.70(m,1H),1.53-1.45(m,1H),1.12-1.05(m,2H)。化合物312：LCMS(ESI)：RT (min) =0.903，[M+H]+ =403.2，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J =6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.53(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.99(s,1H),3.22-3.20(m,2H),2.42(s,3H),2.38-2.36(m,2H),2.12-2.08(m,1H),1.76-1.74(m,1H),1.52-1.49(m,1H),1.10-1.06(m,2H)。
實例235： (1 R ,2 S )- N -(8-胺基-5-環丙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物316)及(1 S ,2 R )- N -(8-胺基-5-環丙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷羧醯胺(化合物317)
將反式-N-[8-胺基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(0.30g，0.69mmol)、環丙基三氟硼酸鉀(153mg，1.03mmol)、Pd(OAc)2 (15mg，0.07mmol)、PCy3 (39mg，0.14mmol)及碳酸鉀(285mg，2.06mmol)於水(0.5mL)/甲苯(5mL)中之混合物在90℃下在氮下加熱。15h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-5-環丙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺甲酸(20mg，7%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物316：LCMS(ESI)：RT (min)=2.182，[M+H]+ =399.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.39(s,1H),9.04(s,1H),8.51(d,J =4Hz,1H),8.50(s,1H),8.51(d,J =4Hz,1H),2.81-2.66(m,2H),2.34(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.90-1.75(m,2H),1.41-1.36(m,1H),1.11-1.07(m,1H),0.88-0.77(s,2H),0.17-0.07(m,2H)。化合物317：LCMS(ESI)：RT (min)=1.079，[M+H]+ =399.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.39(s,1H),9.04(s,1H),8.51(d,J=4Hz,1H),8.50 (s,1H),8.51(d,J=4Hz,1H),2.81-2.66(m,2H),2.34(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.90-1.75(m,2H),1.41-1.36(m,1H),1.11-1.07(m,1H),0.88-0.77(s,2H),0.17-0.07(m,2H)。
實例236： (1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物318)及(1 R ,2 R )-N-(8-胺基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物319)
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(311mg，0.91mmol)、4-甲基-2-苯基-3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(402mg，1.36mmol)、Pd-AMPHOS(64mg，0.09mmol)及K3 PO4 (577mg，2.72mmol)於水(2mL)/二噁烷(6mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。20min後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之N-[8-胺基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(2.4mg，1%)。將鏡像異構物藉由掌性SFC來分離。化合物318；LCMS(ESI)：RT (min)=1.196，[M+H]+ =476.3，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.22(s,1H),8.52(d,J =4Hz,1H),8.05(s,1H),7.48(s,1H),7.42(d,J =4.0Hz,1H),7.40-7.38(m,2H),7.35(s,1H),7.23-7.20(m,3H),6.57(s,1H),3.85(s,3H),2.37-2.33(m,1H),2.31(s,3H),2.09-2.058(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。化合物319：LCMS(ESI)：[M+H]+ =476.3，RT (min)=1.197，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.22(s,1H), 8.52(d,J =4Hz,1H),8.05(s,1H),7.48(s,1H),7.42(d,J =4.0Hz,1H),7.40-7.38(m,2H),7.35(s,1H),7.23-7.20(m,3H),6.57(s,1H),3.85(s,3H),2.37-2.33(m,1H),2.31(s,3H),2.09-2.06(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
實例237： (1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺(化合物320)、(1 S ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺(化合物321)、(1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺(化合物322)、(1 R ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺(化合物323)。
步驟1：N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺
在0℃下向6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(847mg，3.38mmol)及2-甲基環丁烷-1-羧酸(0.50g，4.38mmol)於吡啶(8mL)/二氯甲烷(40mL)中之混合物中添加POCl3 (1.03g，6.72mmol)。將反應物在室溫下攪拌30min且用水稀釋。將溶液用二氯甲烷萃取。將合併之有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下 濃縮，得到呈黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷-1-羧醯胺(890mg，85%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =310.2。
步驟2：N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺
將N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷-1-羧醯胺(490mg，1.58mmol)於氫氧化銨(10mL，257mmol)及二噁烷(10mL)中之混合物在80℃下加熱2h。將反應物在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷-1-羧醯胺(910mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =291.1步驟3：(1S ,2S )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺、(1S ,2R )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺、(1R ,2R )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺、(1R ,2S )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷羧醯胺。
將N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基環丁烷-1-羧醯胺(440mg，1.51mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(311mg，2.27mmol)、XPhos(144mg，0.30mmol)、XPhos-PdCl-第2代(115mg，0.15mmol)及碳酸鉀(626mg，4.53mmol)於10：1二噁烷水(11mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。1h後，將固體過濾， 且將濾液在真空下濃縮。將粗產物藉由掌性製備型HPLC純化，接著藉由掌性SFC村花化合物320：LCMS(ESI)：RT (min)=1.29，[M+H]+ =348.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J =4.0Hz,1H),8.37(s,1H),7.41(d,J =4Hz,1H),7.01(s,1H),2.99-2.92(m,1H),2.76-2.68(m,1H),2.47(s,3H),2.25-2.05(m,3H),1.69-1.60(m,1H),1.19(d,J =8.0Hz,3H)。化合物321：LCMS(ESI)：RT (min)=1.42，[M+H]+ =348.1，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J =4.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.41(d,J =4.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.51-3.45(m,1H),2.96-2.89(m,1H),2.55-2.48(m,1H),2.47(s,3H),2.27-2.18(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.73-1.65(m,1H),1.11(d,J =8.0Hz,3H)。化合物322：LCMS(ESI)：[M+H]+ =348.1，RT (min)=0.98，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J =4.0Hz,1H),8.37(s,1H),7.41(d,J=4.0Hz,1H),7.01(s,1H),2.99-2.92(m,1H),2.76-2.68(m,1H),2.47(s,3H),2.25-2.05(m,3H),1.69-1.60(m,1H),1.19(d,J =8.0Hz,3H)。化合物323：LCMS(ESI)：[M+H]+ =348.1，RT (min)=0.98，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J =4.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.41(d,J =4.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.51-3.45(m,1H),2.96-2.89(m,1H),2.55-2.48(m,1H),2.47(s,3H),2.27-2.18(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.73-1.65(m,1H),1.11(d,J =8.0Hz,3H)。
實例238： (1 S ,2 R )-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物324)及(1 R ,2 S )-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物325)
步驟1：(E )-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)丙烯酸第三丁酯
將噁烷-4-甲醛(2.0g，17.5mmol)及2-(三苯基亞膦基)乙酸第三丁酯(7.2g，19mmol)於四氫呋喃(100mL)中之溶液在室溫下攪拌6h。將所得混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(3：1石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈白色固體狀之(2E)-3-(噁烷-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(3g，81%)。
步驟2：反式-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯
將碘化三甲基鋶(5.5g，24.99mmol)、t-BuOK(2.78g，24.77mmol)、(2E)-3-(噁烷-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(2.5g，11.77mmol)於DMSO(30mL)中之混合物在室溫下在N2 下攪拌3h。將反應物用水稀釋，且將水層用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之反式-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧酸第三丁酯(1.5g，56%)。
步驟3：反式-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧酸
將反式-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(1.5g，6.62mmol)於二氯甲烷(20mL)/三氟乙酸(20mL)中之溶液在室溫下攪拌6h。用1M NaOH水溶液將反應溶液鹼化至pH 8。將水溶液用乙酸乙酯洗滌，且用HCl水溶液酸化至 pH 2至3。將酸性溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈油狀之粗品反式-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧酸(1g，89%)。
步驟4：反式-N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧醯胺冰冷
將POCl3 (1.49g，9.71mmol)滴加至冰冷反式-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧酸(1.0g，5.87mmol)及6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(1.23g，4.91mmol)及吡啶(2mL，24.84mmol)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中。將反應混合物溫熱至室溫達1h。將反應物用H2 O(15mL)洗滌，且將有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(1：1石油醚/乙酸乙酯)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.60g，28%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =367.2。
步驟5：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(500mg，1.36mmol)於氫氧化銨(6mL)及二噁烷(6mL)中之溶液在100℃下加熱。1h後，將反應混合物在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(550mg，93%)。
步驟6：(1S ,2R )-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺及(1R ,2S )-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.50g，1.44mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(590mg，4.30mmol)、Pd(dppf)Cl2 (110mg，0.15mmol)及碳酸鈉(460mg，4.34mmol)於10：1二噁烷/水(16.5mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。4h後，將反應混合物在真空下濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(10：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(噁烷-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(200mg，34%)。將鏡像異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物324：LCMS(ESI)：[M+H]+ =404.2，RT (min)=1.10，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.46(d,J =5.1Hz,1H),8.32(s,1H),7.43(d,J =5.1Hz,1H),7.01(s,1H),4.03-3.92(m,2H),3.47-3.37(m,2H),2.47(s,3H),1.87-1.83(m,1H),1.76(t,J =14.6Hz,2H),1.57-1.42(m,2H),1.38-1.31(m,1H),1.25-1.21(m,1H),1.19-1.07(m,1H),0.93-0.89(m,1H)。化合物325：LCMS(ESI)：[M+H]+ =404.2，RT (min)=1.08min，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.46(d,J =5.1Hz,1H),8.32(s,1H),7.43(d,J =5.1Hz,1H),7.01(s,1H),4.03-3.92(m,2H),3.47-3.37(m,2H),2.47(s,3H),1.87-1.83(m,1H),1.76(t,J =14.6Hz,2H),1.57-1.42(m,2H),1.38-1.31(m,1H),1.25-1.21(m,1H),1.19-1.07(m,1H),0.93-0.89(m,1H)。
實例239： (1 R ,2 S ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物326)、 (1 S ,2 R ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物327)、(1 S ,2 S ,3 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物328)及(1 R ,2 R ,3 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物329)
步驟1：四氟硼酸乙基二苯基鋶
向碘乙烷(3.00g，19.23mmol)於二氯甲烷(45mL)中之溶液中添加二苯基硫(10.69g，57.39mmol)及AgBF4 (3.75g，19.26mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌30min，且在35℃攪拌隔夜。將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。將所得殘餘物用二氯甲烷/乙醚(3×50mL)濕磨，得到呈灰白色固體狀之四氟硼酸乙基二苯基鋶(ethyldiphenylsulfanium tetrafluoroboranuide)(2.5g，34%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =215.0；步驟2：(2E )-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯
向4-碘-1-甲基-1H-吡唑(5.0g，24mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中之溶液中添加丙-2-烯酸第三丁酯(9.23g，72.0mmol)、三乙胺(2.91g，28.8mmol)、Pd(OAc)2 (538mg，2.40mmol)及P(o-Tol)3 (1.46g，4.80mmol)。將所得混合物在110℃在氮下加熱隔夜。將反應物濃縮，且將所得殘餘物藉由急驟管柱層析術(1：3乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色油狀之(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(3.9g，74%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =209.0。
步驟3：2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯
在-78℃下向四氟硼酸二苯基乙基鋶(diphenylehylsulfonium tetrafluoroborate)(1.45g，4.80mmol)於1,2-二甲氧基乙烷(75mL)及二氯甲烷(12.5mL)中之溶液中滴加LDA(1.06mL，19.79mmol)。30min後，添加(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三丁酯(0.50g，2.4mmol)，且將所得溶液在室溫下攪拌隔夜。將反應物用水稀釋且用二氯甲烷萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(0.60g)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =237.0。
步驟4：2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸
向2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(0.60g，2.5mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加三氟乙酸(10mL)。將所得溶液在室 溫下攪拌5h。將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物溶於水(45mL)中。用10M氫氧化鈉水溶液將水溶液鹼化至pH=9至10。將鹼性溶液用乙醚洗滌。隨後用1M鹽酸水溶液將水層酸化至pH=3至4。將酸性溶液(acific solution)用乙酸乙酯萃取，且將有機物在真空下濃縮，得到呈灰白色固體狀之粗品2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(0.50g)。LCMS[M+H]+ =181.0。
步驟5：N -(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
向冰冷6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(0.50g，2.0mmol)及反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(432mg，2.39mmol)於吡啶(8.00mL)/二氯甲烷(45mL)中之溶液中添加POCl3 (612mg，3.99mmol)。將反應物溫熱至室溫。30min後，將反應物用水(30mL)稀釋，且將所得溶液用二氯甲烷(3×70mL)萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟管柱層析術(1：2乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡黃色固體狀之N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(350mg，42%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =376.0。
步驟6：N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
向N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(0.60g，1.59mmol)於二噁烷(10mL)中之溶液中添加氫氧化銨(10mL)。將溶液在100℃下加熱。2h後，將混合物在真空下濃縮，得到呈灰白色固體狀之粗品N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(550mg，77%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =357.0。
步驟7：(1R ,2S ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺、(1S ,2R ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺、(1S ,2S ,3S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺及(1R ,2R ,3R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
向N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(550mg，1.54mmol)於二噁烷(16mL)/水(4mL)中之溶液中添加(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(422mg，3.08mmol)、KOAc(454mg，4.62mmol)、第2代XPhos預催化劑(121mg，0.15mmol)及XPhos(147mg，0.31mmol)。將所得溶液在氮下在100℃下加熱。2h後，將反應物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，接著藉由掌性製備型HPLC純化。
化合物326：LCMS(ESI)：RT (min)=1.98，[M+H]+ =414.2，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.32(s,1H),7.50(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.87(s,3H),2.54-2.49(m,1H),2.45(s,3H),2.00-1.97(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.06-1.04(m,3H)。(吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之甲基相對立體化學；任意指定之絕對立體化學)。
化合物327：LCMS(ESI)：[M+H]+ =414.2；RT (min)=1.09min，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.34(s,1H),7.45(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.99(s,1H),3.84(s,3H),2.45(s,3H),2.31-2.35(m,1H),2.14-2.18(m,1H),1.63-1.67(m,1H),1.33-1.35(m,3H)。(吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之甲基相對立體化學；任意指定之絕對立體化學)。
化合物328：LCMS(ESI)：[M+H]+ =414.2；RT (min)=1.08，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.32(s,1H),7.50(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.93(s,3H),2.54-2.49(m,1H),2.45(s,3H),2.00-1.97(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.06-1.04(m,3H)。(吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之甲基相對立體化學；任意指定之絕對立體化學)。
化合物329：LCMS(ESI)：[M+H]+ =414.2；RT (min)=1.07，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.34(s,1H),7.45(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.84(s,3H),2.45(s,3H),2.31-2.35(m,1H),2.14-2.18(m,1H),1.63-1.67(m,1H),1.33-1.35(m,3H)。(吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之甲基相對立體化學；任意指定之絕對立體化學)。
實例240： (1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物330)及(1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物331)
步驟1：4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑
將4-碘-1H-吡唑(10.00g，51.553mmol)、1-氯-2-甲氧基乙烷(14.62g，154.64mmol)、氫氧化鉀(5.78g，103.02mmol)及KBr(610mg，5.12mmol)於乙醇(200mL)中之混合物在100℃下加熱。16h後，將混合物在真空下濃縮，且將所得殘餘物藉由矽膠層析術(95：5二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色油狀之4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑(12g，92%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =292.95。
步驟2：(E)-3-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸甲酯
將4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑(11.0g，43.6mmol)、丙-2-烯酸甲酯(15.03g，174.5mmol)、Pd(OAc)2 (1.47g，6.54mmol)、P(p-Tol)3 (3.98g，13.1mmol)及三乙胺(26.5g，262mmol)於CH3 CN(200mL)中之混合物在110℃下在氮下加熱。2h後，將反應物在真空下濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析術3：2乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈黃色油狀之(2E)-3-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸甲酯(6.95g，76%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =211.15。
步驟3：反式-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸甲酯
將新鮮製備之重氮甲烷於乙醚中之溶液中添加至冰冷(2E)-3-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸酯(0.50g，2.37mmol)、Pd(OAc)2 (53mg，0.23mmol)於二氯甲烷(40mL)中之混合物中。30min後，將反應物用乙酸(1mL)淬滅且濃縮。將所得殘餘物用水稀釋，且將水溶液用乙酸乙酯萃取。將收集之有機物用飽和NaHCO3 水溶液洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈淡褐色油狀之粗品反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸甲酯(230mg)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =225.2。
步驟4：反式-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧酸
將反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸酯(1.3g，5.8mmol)、LiOH˙H2 O(1.46g，34.8mmol)於四氫呋喃(5mL)/水(5mL)中之混合物在25℃攪拌3h。將反應物在真空下濃縮，且將殘餘物用水溶解。用鹽酸將水溶液酸化至pH=3。將酸性溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之有機層在真空下濃縮，得到呈黃色固體狀之粗品反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸(1.0g，82%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =211.10。
步驟5：反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
向冰冷反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧酸(0.90g，4.28mmol)、6,8-二氯-2,7-啶-3-胺鹽酸鹽(896mg，3.58mmol)及吡啶(4mL)於二氯甲烷(20mL)中之溶液中添加POCl3 (2.73g，17.8mmol)。將溶液溫熱至25℃。1h後，將飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)添加至反應物中，且將混合物用二氯甲烷萃取。將合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(97：3二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(0.70g，48%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =405.9。
步驟6：反式-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將N-(6,8-二氯-2,7-啶-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(0.60g，1.47mmol)及NH4 OH(18mL)於二噁烷(18mL)中之混合物在100℃下加熱。4h後，將混合物在真空下濃縮，得到呈淡黃色固體狀之粗品反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(0.60g)，LCMS(ESI)：[M+H]+ =387.10。
步驟7：(1S ,2S )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺及(1R ,2R )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧 醯胺(550mg，1.42mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(389mg，2.84mmol)、碳酸鉀(786mg，5.68mmol)、Pd(dppf)Cl2 (116mg，0.14mmol)於二噁烷(20mL)/水(4mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。3h後，將混合物在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]環丙烷-1-羧醯胺(270mg)。將鏡像異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物330：LCMS(ESI)：[M+H]+ =444.2；RT (min)=1.06，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.45(d,J =6.0Hz,1H),8.26(s,1H),7.59(s,1H),7.41(s,2H),7.38-7.22(m,2H),6.99(s,1H),4.17(t,J =6.0Hz,2H),3.64(t,J =6.0Hz,2H),3.22(s,3H),2.41(s,3H),2.22(t,J =6.0Hz,2H),1.52-1.33(m,1H),1.23-1.27(m,1H)。 化合物331：LCMS(ESI)：[M+H]+ =444.2；RT (min)=1.05，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.45(d,J =6.0Hz, 1H),8.26(s,1H),7.59(s,1H),7.41(s,2H),7.38-7.22(m,2H),6.99(s,1H),4.17(t,J =6.0Hz,2H),3.64(t,J =6.0Hz,2H),3.22(s,3H),2.41(s,3H),2.22(t,J =6.0Hz, 2H),1.52-1.33(m,1H),1.23-1.27(m,1H)。
實例241： (1 S ,2 S )- N -(8-胺基-5-氯-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物332)及(1 R ,2 R )- N -(8-胺基-5-氯-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物333)
步驟1：反式-N -(8-胺基-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(280mg，0.82mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧雜硼環己烯并[3,4-c]吡啶-1- 醇(183mg，1.23mmol)、XPhos(78mg，0.16mmol)、XPhos-PdCl-第2代(63mg，0.08mmol)及KOAc(241mg，2.46mmol)於二噁烷(10mL)/水(1mL)中之混合物在110℃下在氮下加熱。15h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由矽膠層析術(15：1二氯甲烷/甲醇)純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(61mg，17%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =430.3。
步驟3：(1S ,2S )-N -(8-胺基-5-氯-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺及(1R ,2R )-N -(8-胺基-5-氯-6-(4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將反式-N-[8-胺基-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(79mg，0.18mmol)及NCS(49mg，0.37mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(6mL)中之混合物在25℃攪拌5h。將反應物濃縮，且將粗產物藉由製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之反式-N-[8-胺基-5-氯-6-[4-(2-羥基乙基)吡啶-3-基]-2,7-啶-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(3mg，4%)。將鏡像異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物332：LCMS(ESI)：[M+H]+ =464.2，RT (min)=1.09，方法=K-1；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.36(s,1H),8.74(s,1H),8.59(d,J =8.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.65(d,J =8.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.38(s,1H),3.86(s,3H),3.75(t,J =8.0Hz,2H),2.89(t,J =8.0Hz,2H),2.44-2.39(m,1H),2.16-2.12(m,1H),162-1.58(m,1H),1.32-1.27(m,1H)。化合物333：LCMS(ESI)：[M+H]+ =464.2，RT (min)=1.09，方法=K-1。1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.36(s,1H),8.74(s,1H),8.59(d,J =8.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.65(d,J =8.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.38(s,1H),3.86(s,3H),3.75(t,J =8.0Hz,2H),2.89(t,J =8.0Hz,2H),2.44-2.39(m,1H),2.16-2.12(m,1H),1.62-1.58(m,1H),1.32-1.27(m,1H)。
實例242： (1 R ,2 S )- N -[8-胺基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物334)及(1 S ,2 R )- N -[8-胺基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物335)。
步驟1：5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶
將2,5-二溴-4-甲基吡啶(2.0g，8.0mmol)、苯基硼酸(1.069g，8.77mmol)、Pd(PPh3 )4 (921mg，0.79mmol)及碳酸鉀(3.3g，23.87mmol)於水(10mL)/1,2-二甲氧基乙烷(40mL)中之混合物在90℃下在氮下加熱。12h後，將反應混合物用H2 O稀釋，且將所得溶液用乙酸乙酯萃取。將合併之萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(1%乙酸乙酯於石油醚中)純化，得到呈無色油狀之5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶(1.78g，90%)。LCMS(ESI)：[M+H]+ =248.0。
步驟2：(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸
將5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶(1.68g，6.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜戊環(5.16g，20.3mmol)、Pd(dppf)Cl2 (494g，675mmol)及KOAc(1.99g，20.3mmol)於二噁烷(30mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。3h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(1：5乙酸乙酯/石油醚)純化，得到呈淡褐色固體狀之(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸(1.25g，87%)。
LCMS(ESI)：M+H+ =214.1。
步驟3：(1R ,2S )-N -[8-胺基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺及(1S ,2R )-N -[8-胺基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺
將反式-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(0.30g，0.99mmol)、(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸(852mg，3.99mmol)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(79mg，0.10mmol)、X-Phos(48mg，0.10mmol)及碳酸鉀(414mg，2.99mmol)於水(2mL)/二噁烷(10mL)中之混合物在100℃下在氮下加熱。1h後，將固體過濾，且將濾液在真空下濃縮。藉由製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀之反式-N-[8-胺基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]-2-(氰基甲基)環丙烷-1-羧醯胺(50mg，12%)。將鏡像異構物藉由掌性製備型HPLC分離。化合物334：LCMS(ESI)：[M+H]+ =435.2；RT (min)=1.37，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.62(s,1H),8.32(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.82(s,1H),7.56-7.54(m,3H),7.03(s,1H),2.79-2.69(m,2H),2.54(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.97-1.72(m,1H),1.39-1.31(m,1H),1.09-1.02(m,1H)。化合物335：LCMS(ESI)：[M+H]+ =435.2；RT (min)=1.37，方法=K-1；1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.62(s,1H),8.32(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.82(s,1H),7.56-7.54(m,3H),7.03(s,1H),2.79-2.69(m,2H),2.54(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.97-1.72(m,1H),1.39-1.31(m,1H),1.09-1.02(m,1H)。
實例243： (±)-N-(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)螺[2.2]戊烷-1-羧醯胺(化合物336)
向螺[2.2]戊烷-1-羧酸(32mg，0.0272mmol)、N1,N1-雙(2,4-二甲氧基苄基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(150mg，0.272mmol)於吡啶(2.7mL)中之溶液中添加POCl3 (0.050mL，0.54mmol)。2天后，將飽和碳酸氫鈉水溶液添加至反應物中，且將混合物用二氯甲烷萃取。將合併之有機物經MgSO4 乾燥，過濾且在真空下濃縮。藉由急驟管柱層析術(100：0至95：5二氯甲烷/甲醇)純化，得到中間化合物，將其溶於將二氯甲烷(3mL)及TFA(0.2mL)中。將反應物攪拌20h，用甲醇中之氨(7M)中和，將溶劑除去，且將殘餘物藉由HPLC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(7.9mg，5%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.75(s,1H),9.35(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),8.26(s,1H),7.28(br s,2H),7.33-7.21(m,1H),6.95(s,1H),2.43-2.40(m,1H),2.41(s,3H),1.42(t,J =3.8Hz,1H),1.35(dd,J =7.4,3.4Hz,1H),0.95-0.73(m,4H)。
實例244： (±)-N6-((2,2-二氟環丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-1,6-二胺(化合物337)
步驟1：(±)-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)((2,2-二氟環丙基)甲基)胺基甲酸第三丁酯
向(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(200mg，0.336mmol)於DMF(1.7mL)中之溶液中添加1-溴甲基-2,2-二氟環丙烷(182mg，1.01mmol)。將反應混合物在氮下在80℃攪拌3h。將反應混合物用二氯甲烷稀釋且過濾。濃縮後，向粗品中間物殘餘物上稱量4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)吡啶(81.0mg，0.370mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(14.2mg，0.0168mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(8.2mg，0.018mmol)及碳酸鉀(139mg，1.01mmol)。將小瓶用氮氣吹掃，填充有脫氣之四氫呋喃(1.7mL)、蒸餾水(0.3mL)，隨後密封，且將反應混合物在80℃攪拌1h。冷卻至室溫，將混合物濃縮至乾燥。將因此獲得之反應殘餘物藉由急驟管柱層析術(庚烷/iPrOAc，100：0至0：100)純化，得到呈黃色泡沫狀之標題化合物(175mg，70%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,氯仿-d )δ 9.25(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J =5.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.24-7.19(m,2H),7.11(d,J =5.1Hz,1H),7.08(s,1H),6.45-6.37(m,4H), 4.78(s,4H),4.24-4.11(m,2H),3.79(s,6H),3.64(s,6H),2.21(s,3H),2.15-2.04(m,1H),1.56(s,9H),1.44-1.26(m,2H)。
步驟2：(±)-N6-((2,2-二氟環丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺
向(±)-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)((2,2-二氟環丙基)甲基)胺基甲酸第三丁酯(175mg，0.236mmol)於二氯甲烷(0.7mL)中之溶液中添加三氟乙酸(0.7mL)，且將混合物在室溫下攪拌22h。隨後添加0.4mL三氟乙酸，且將混合物40℃攪拌22h。將混合物濃縮至乾燥，且隨後藉由HPLC純化，得到呈黃色固體狀之目標化合物(60.3mg，75%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.20(s,1H),8.54(s,1H),8.46(d,J =5.0Hz,1H),7.33(d,J =5.0Hz,1H),7.25(br s,2H),6.75(s,1H),6.51(s,1H),3.53-3.39(m,2H),2.38(s,3H),2.14-1.98(m,1H),1.66-1.52(m,1H),1.39-1.28(m,1H)。
實例245： N6-(2,2-二氟乙基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-1,6-二胺(化合物338)
程序與(±)-N6-((2,2-二氟環丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(化合物337)之程序相同，例外之處為將1,1-二氟-2-碘乙烷用作烷基化劑，且反應直接向前進行成鈴木反應(Suzuki reaction)及保護。因此，使(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)胺基甲酸第三丁酯(162mg，0.272mmol) 反應，得到呈白色固體狀之目標化合物(58.9mg，68%，經3個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.14(s,1H),8.52(s,1H),8.41(d,J =5.0Hz,1H),7.28(d,J =5.0Hz,1H),7.14(t,J =6.4Hz,1H),7.04(br s,2H),6.69(s,1H),6.56(s,1H),6.13(tt,J =56.3,4.0Hz,1H),3.84-3.69(m,2H),2.39(s,3H)。
實例246： (±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(7-甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物339)
步驟1：5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-羧酸甲酯
向N-溴琥珀醯亞胺(20.89g，117.4mmol)及苯甲醯基過氧化物(2.84g，11.74mmol)於四氯化碳(150mL)中之溶液中添加5-溴-3-甲基-吡啶-2-羧酸甲酯(9.0g，39mmol)。將混合物在氮下在80C攪拌16h。隨後將溶液濃縮，且將殘餘物藉由急驟層析術(5%至10%至20%乙酸乙酯於石油醚中)純化，得到呈黃色油狀之5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-羧酸甲酯(12g，79%收率)；LCMS(ESI)[M+H]+ =385.8。
步驟2：3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮
向5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-羧酸甲酯(1.0g，2.58mmol)於乙醇(15mL)中之溶液中添加水合肼(0.77mL，15.47mmol)。將反應混合物在80℃攪拌1.5h，且隨後冷卻至15℃。將固體過濾，用MeOH洗滌且乾燥，得到一批所要產物。將濾液濃縮且用MeOH濕磨。將固體過濾，用MeOH沖洗且乾燥，得到另一批所要產物。將該兩批合併，得到呈黃色固體狀之3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮(500mg，2.2121mmol，86%收率)；LCMS(ESI)[M+H]+ =226.0。
步驟3：3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮
在0℃下向3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮(500mg，2.21mmol)及碳酸銫(2.52g，7.74mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之懸浮液中添加碘甲烷(0.59mL，9.51mmol)。將反應混合物在15℃攪拌16h。隨後將溶劑除去，且將殘餘物用水(15mL)稀釋。將懸浮液用乙酸乙酯(15mL x 4)萃取。將有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮(140mg，26%收率)；LCMS(ESI)[M+H]+ =240.0。
步驟4：(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(7-甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
向小瓶中稱量3-溴-7-甲基吡啶并[2,3-d]噠嗪-8(7H)-酮(80.0mg，0.333mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(13.9mg， 0.0167mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(102mg，0.400mmol)及乙酸鉀(98.1mg，1.00mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(1.7mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌3天。冷卻至室溫後，在氮下，向反應容器中添加(±)-(反式)-N-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(214mg，0.333mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(14.1mg，0.0168mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(8.1mg，0.0168mmol)及磷酸三鉀單水合物(237mg，1.00mmol)及水(0.3mL)。將小瓶密封且在100℃攪拌2h。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至90：10)純化。隨後將因此獲得之粗化合物溶於茴香硫醚(0.4mL)中，且添加三氟乙酸(1.7mL)。攪拌18h後，將混合物濃縮，且藉由HPLC純化，得到呈黃色固體狀之目標化合物(68.0mg，44%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.01(s,1H),9.77(d,J =2.3Hz,1H),9.41(s,1H),9.00(d,J =2.3Hz,1H),8.50(s,1H),8.37(s,1H),7.75(s,1H),7.57(s,1H),7.50(s,2H),7.30(s,1H),3.78(s,3H),3.77(s,3H),2.28-2.18(m,2H),1.46-1.36(m,1H),1.28-1.15(m,1H)。
實例247： (±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-N,N,4-三甲基吡啶甲醯胺(化合物340)
步驟1：(±)-5-(1-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸
向小瓶中稱量5-溴-4-甲基吡啶甲酸甲酯(1.00g，4.35mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(181mg，0.217mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(1.21g，4.78mmol)及乙酸鉀(1.28g，13.0mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(11mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌18h。冷卻至室溫，將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至90：10)純化，得到756mg粗品頻哪醇硼酸芳酯中間物(被頻那醇硼烷污染，藉由1H NMR)。將此中間物(323mg，約1.17mmol)與(±)-(1S,2S)-N-(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(500mg，0.777mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(32.8mg，0.0389mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(18.9mg，0.0389mmol)及磷酸三鉀單水合物(554mg，2.33mmol)於小瓶中合併，在氮下添加四氫呋喃(3.9mL)及水(0.7mL)，且將小瓶密封且在80℃攪拌19h。反應混合物仍含有起始材料，因此添加平等整除之催化劑、配位體及水、以及磷酸三鉀單水合物(184mg，0.777mmol)及粗品頻哪醇硼酸芳酯(215mg，約0.77mmol)，且在80℃攪拌3天。將混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管 柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至90：10)純化。因此獲得之粗化合物為黃色油狀，其根據HPLC-MS含有產物。
步驟2：(±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-N,N,4-三甲基吡啶甲醯胺
向粗品(±)-5-(1-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸(100mg，約0.13mmol)及HATU(104mg，0.269mmol)於DMF(0.5mL)中之溶液中添加二甲胺鹽酸鹽(16.4mg，0.201mmol)及三乙胺(0.094mL，0.672mmol)。將反應混合物攪拌18h，之後用iPrOAc稀釋，用飽和NaHCO3 洗滌且經MgSO4 乾燥。濃縮後，將獲得之反應殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至90：10)純化，得到44mg粗品醯胺，隨後將其溶於茴香硫醚(0.033mL)中。向該溶液中添加TFA(0.300mL)且攪拌22h，之後濃縮，且藉由HPLC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(9.6mg，36%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.96(s,1H),9.38(s,1H),8.58(s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.48(s,1H),7.34(br s,2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),3.76(s,3H),3.02(s,3H),2.99(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.16(m,2H),1.44-1.33(m,1H),1.24-1.12(m,1H)。
實例248： (±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸甲酯(化合物341)
向小瓶中稱量5-溴-4-甲基吡啶甲酸甲酯(300mg，1.30mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(54.3mg，0.0652mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(364mg，1.43mmol)及乙酸鉀(384mg，3.91mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(6.5mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在120℃攪拌18h。冷卻至室溫，在氮下，向反應容器中添加(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(447mg，1.30mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(54.3mg，0.0652mmol)及碳酸鉀(540mg，3.91mmol)及水(1.3mL)。將小瓶密封且在100℃攪拌23h。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)純化，得到呈褐色固體狀之目標化合物(126mg，21%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.71(s,1H),8.28(s,1H),8.01(s,1H),7.56(s,1H),7.37(br s,2H),7.29(s,1H),7.05(s,1H),3.91(s,3H),3.77(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.90(s,3H),1.43-1.34(m,1H),1.24-1.14(m,1H)。
實例249： (±)-反式-5-(1-胺基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸(化合物342)
將(±)-5-(1-胺基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸甲酯(95.6mg，0.209mmol)及氫氧化鋰水合物(29.4mg，0.700mmol)於四氫呋喃(2.1mL)及水(0.7mL)中之溶液攪拌2天。添加二噁烷中之鹽酸(0.162mL，0.648mmol，4.0M)，且將產物自反應混合物中國沉澱，且藉由過濾收集，用iPrOAc及1,4-二噁烷沖洗，得到灰色固體(92.5mg，99%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.59(s,1H),8.27(s,1H),7.90(s,1H),7.56(s,1H),7.34(br s,2H),7.29(s,1H),7.01(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.43-1.34(m,1H),1.23-1.13(m,1H)。
實例250： (±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基氮雜環丁-1-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物343)
步驟1：1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)氮雜環丁-2-酮
向小瓶中稱量2,5-二溴-4-甲基吡啶(1.22g，4.84mmol)、2-氮雜環丁酮(421mg，5.81mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(111mg，0.121mmol)、4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基(140mg，0.242mmol)、3Å分子篩(600mg)及碳酸銫(3.16g，9.69mmol)。在氮氣流下，將容器填充有無水甲苯(16mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在120℃攪拌19.5h，之後冷卻至室溫。將反應混合物透過矽藻土過濾，用二氯甲烷沖洗。濃縮後，將粗殘餘物藉由急驟層析術(100：0至70：30庚烷/i PrOAc)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(828mg，71%)；1 H NMR(400MHz,氯仿-d )δ 8.31(s,1H),7.66(s,1H),3.77(dd,J =4.7,4.7Hz,2H),3.12(dd,J =4.7,4.7Hz,2H),2.39(s,3H)。
步驟2：(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基氮雜環丁-1-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
向小瓶中稱量1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)氮雜環丁-2-酮(50mg，0.207mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(8.6mg，0.0103mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(52.7mg，0.207mmol)及乙酸鉀(61.1mg，0.622mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(1.0mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌17h。冷卻至室溫，在氮下，向反應容器中添加(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(71.1mg，0.207mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(8.8mg，0.0104mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(5.0mg，0.0104 mmol)、碳酸鉀(86mg，0.622mmol)及水(0.2mL)。將小瓶密封且在100℃攪拌19h。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)純化，且隨後藉由HPLC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(29.6mg，31%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.92(s,1H),9.35(s,1H),8.34(s,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.52(s,1H),7.29(s,1H),7.28(br s,2H),6.93(s,1H),3.77(s,3H),3.73(dd,J =4.7,4.7Hz,2H),3.12(dd,J =4.7,4.7Hz,2H),2.44(s,3H),2.24-2.17(m,2H),1.43-1.33(m,1H),1.23-1.14(m,1H)。
實例251： (±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物344)
步驟1：5-溴-4-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶
向小瓶中稱量2,5-二溴-4-甲基吡啶(300mg，1.20mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-硼酸頻哪醇酯(251mg，1.20mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(49.3mg，0.0600mmol)及碳酸鈉(380mg，3.59mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(6.0mL)及水(1.2mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌18h。冷卻至室溫，將反應混合物濃縮，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(100：0至40：60庚烷/i PrOAc)純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(144 mg，48%)；1 H NMR(400MHz,氯仿-d )δ 8.62(s,1H),7.81(s,1H),7.40(d,J =2.4Hz,1H),6.84(d,J =2.4Hz,1H),3.97(s,3H),2.43(s,3H)。
步驟2：(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
程序與(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基氮雜環丁-1-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物343)之程序相同，例外之處為將5-溴-4-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶(53mg，0.210mmol)用作起始材料，得到呈白色固體狀之目標化合物(27.3mg，27%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.26(s,1H),7.83(s,1H),7.78(d,J =2.1Hz,1H),7.56(s,1H),7.30(br s,2H),7.29(d,J =2.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.81(s,1H),3.93(s,3H),3.77(s,3H),2.47(s,3H),2.26-2.14(m,2H),1.45-1.32(m,1H),1.28-1.15(m,1H)。
實例252： (±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物345)
步驟1：5-溴-4-甲基-2-(1H-吡唑-1-基)吡啶
向攪拌之吡唑(81.4mg，1.20mmol)於無水DMF(2.4mL)中之溶液中添加氫化鈉(71.7mg，1.79mmol，[60%於礦物油中])。20min後，添加2,5-二溴-4-甲基吡啶(300mg，1.19mmol)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌20.5h，且隨後冷卻至室溫，用乙酸異丙酯稀釋，用水(1x)、鹽水(1x)洗滌且經硫酸鎂乾燥。濃縮後，使粗殘餘物進行急驟管柱層析術(100：0至95：5庚烷/i PrOAc)，得到呈白色固體狀之標題化合物(141mg，49%)；1 H NMR(400MHz,氯仿-d )δ 8.51(d,J =2.7Hz,1H),8.42(s,1H),7.90(s,1H),7.73(d,J =1.8Hz,1H),6.46(dd,J =2.7,1.8Hz 1H),2.47(s,3H)。
步驟2：(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
程序與(±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基氮雜環丁-1-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物343)之程序相同，例外之處為將5-溴-4-甲基-2-(1H-吡唑-1-基)吡啶(50mg，0.210mmol)用作起始材料，得到呈白色固體狀之目標化合物(32.4mg，33%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.65(d,J =3.0Hz,1H),8.48(s,1H),8.27(s,1H),7.88(s,1H),7.85(d,J =3.0Hz,1H),7.56(s,1H),7.33(br s, 2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),6.60(s,1H),3.77(s,3H),2.54(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.43-1.34(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。
實例253： (±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-N,4-二甲基吡啶甲醯胺(化合物346)
向(±)-5-(1-胺基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸(37.1mg，0.0837mmol)及HATU(64.9mg，0.167mmol)於DMF(0.8mL)中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽(11.3mg，0.167mmol)及三乙胺(0.070mL，0.50mmol)。將反應混合物攪拌18h，之後用二氯甲烷稀釋，用飽和NaHCO3 洗滌且經MgSO4 乾燥。濃縮後，將所獲得之反應殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)及HPLC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(10.2mg，27%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.79(q,J =4.9Hz,1H),8.61(s,1H),8.27(s,1H),7.96(s,1H),7.56(s,1H),7.36(br s,2H),7.29(s,1H),7.04(s,1H),3.77(s,3H),2.84(d,J =4.9Hz,3H),2.26-2.16(m,2H),1.43-1.32(m,1H),1.23-1.15(m,1H)。
實例254： (±)-(反式)-N-(8-胺基-6-(6-胺基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物347)
向小瓶中稱量(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(60.0mg，0.175mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(50.4mg，0.175mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(7.4mg，0.0088mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(4.3mg，0.0088mmol)及碳酸鉀(73mg，0.53mmol)。在氮下，添加無水四氫呋喃(0.9mL)及水(0.2mL)且將小瓶密封。將反應混合物在80℃攪拌17h。冷卻至室溫，將反應混合物透過矽藻土過濾，用二氯甲烷及甲醇沖洗。濃縮至乾燥後，將殘餘物藉由HPLC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(17.2mg，21%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.87(s,1H),9.28(s,1H),8.98(d,J =2.3Hz,1H),8.47(d,J =2.3Hz,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.42(s,1H),7.29(s,1H),7.28(br s,2H),6.75(br s,2H),3.77(s,3H),2.26-2.15(m,2H),1.44-1.30(m,1H),1.24-1.16(m,1H)。
實例255： (±)-5-(1-胺基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸苄酯(化合物348)
向(±)-5-(1-胺基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶甲酸(33.3mg，0.0751mmol)於無水二甲基亞碸(0.8mL)中之懸浮液中添加碳酸鉀(21mg，0.11mmol)及苄基溴(0.013mL，0.11mmol)。將反應容器密封，且在80℃攪拌24h。將混合物過濾且濃縮。將獲得之殘餘物藉由HPLC純化，得到呈黃色固體狀之目標化合物(8.3mg，21%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),8.04(s,1H),7.56(s,1H),7.53-7.47(m,2H),7.45-7.34(m,5H),7.29(s,1H),7.04(s,1H),5.41(s,2H),3.77(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.45-1.33(m,1H),1.26-1.16(m,1H)。
實例256： (1 S ,2 R ,3 S )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物357)(1 R ,2 R ,3 R )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物356)(1 S ,2 S ,3 S )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物355)及(1 R ,2 S ,3 R )- N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物354)
步驟1：(2E )-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三 丁酯
向4-碘-1-甲基-1H -吡唑(20g，96.15mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(100mL)中之溶液中添加丙-2-烯酸第三 丁酯(40.6g，316.77mmol)、三乙胺(13.6g，134.40mmol)、二乙酸鈀(3.23g，14.39mmol)及三(2-甲基苯基)膦(5.85g，19.22mmol)。將反應物攪拌在110℃攪拌16h。將所得混合物冷卻至室溫且隨後在真空下濃縮。將殘餘物在矽膠管柱上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)溶離，得到呈紅色油狀之(2E )-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三 丁酯(14.5g，69.38mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =209.1。
步驟2：反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三 丁酯
在-65℃下經10min向四氟硼酸乙基二苯基鋶(13.7g，45.34mmol)於乙二醇二甲醚(150mL)及二氯甲烷(10mL)中之溶液中滴加LDA(23ml，2mmol於THF中)。將反應物在-65℃攪拌1h。在-65℃下滴加(2E )-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸第三 丁酯(3g，14.41mmol)於乙二醇二甲醚(5mL)中之溶液達5min。將所得溶液在室溫下攪拌5h。將反應藉由添加水淬滅。所得混合物用二氯甲烷萃取且用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮，得到呈褐色油狀之反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三 丁酯(4.5g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+ =237.1。
步驟3：反式 -2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸
將反式 -2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸第三 丁酯(4.5g，19.04mmol)於三氟乙酸(10mL)及二氯甲烷(10mL)中之溶液在室溫下攪拌3h。將所得混合物在真空下濃縮。用12%氫氧化鈉水溶液將溶液之pH調整至pH 11。將所得溶液用二氯甲烷萃取，且用12%氯化氫水溶液將水層調整至pH 3。將所得溶液用乙酸乙酯萃取，用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮，得到呈淡黃色油狀之反式 -2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(3g，16.57mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =181.1。
步驟3：反式 -N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7- 啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
在0℃下經5min向1-N ,1-N -雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-1,6-二胺(600mg，1.05mmol)、反式 -2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧酸(247mg，1.37mmol)於二氯甲烷(20mL)及吡啶(4mL)中之溶液中添加POCl3 (323mg，2.10mmol)。將反應物在25℃攪拌30min。隨後將反應藉由添加水淬滅。將所得溶液用3x100mL二氯甲烷萃取，且將有機層合併且經無水硫酸鈉乾燥，且在真空下濃縮，得到呈褐色固體狀之反式 -N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(700mg，0.96mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =731。
步驟4：(1S ,2R ,3S )-N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物357)(1R ,2R ,3R )-N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合 物356)(1S ,2S ,3S )-N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物355)及(1R ,2S ,3R )-N-[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物354)
將反式 -N -(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(3,5-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(700mg，0.96mmol)於三氟乙酸(10mL)中之混合物在25℃攪拌1h。將混合物在真空下濃縮。用甲醇中之氨(7mol/L)將反應混合物調整至pH 10。將粗產物藉由製備型HPLC(C18 OBD管柱；0.5% NH4 HCO3 於水：ACN=30%至60%，9min內)純化，得到呈白色固體狀之反式 -N -[8-胺基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-啶-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(400mg，0.93mmol)。將外消旋物藉由掌性SFC分離，得到四種異構物：(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之甲基相對立體化學；任意指定之所有絕對立體化學)
呈白色固體狀之異構物1：(109.1mg，0.25mmol)。滯留時間：1.823min(Lux 3u Cellulose-3 100*4.6mm,2um；MeOH(20nM NH3 )；4mL/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =431；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.40(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.13(d,J =7.6Hz,1H),7.03(t,J =8.9 Hz,1H),6.86(s,1H),3.88(s,3H),2.53-2.50(m,1H),2.23(s,3H),2.01-2.00(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.06(d,J =6.3Hz,3H)；呈白色固體狀之異構物2：(19.4mg，0.045mmol)。滯留時間：2.833min(CHIRALPAK AD-3,3*100mm,3um；ACN：EtOH=1：1(0.1%DEA)；2mL/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =431；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.47(s,1H),7.35-7.30(m,2H),7.14(d,J =7.6Hz,1H),7.04(t,J =8.8Hz,1H),6.87(s,1H),3.85(s,3H),2.35-2.32(m,1H),2.24(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.69-1.63(m,1H),1.35(d,J =6.2Hz,3H)；呈白色固體狀之異構物3：(26.5mg，0.061mmol)。滯留時間：2.031min(Lux 3u Cellulose-3 100*4.6mm,2um；MeOH(20nM NH3)；4mL/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =431；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.47(s,1H),7.35-7.30(m,2H),7.14(d,J =7.6Hz,1H),7.04(t,J =8.8Hz,1H),6.87(s,1H),3.85(s,3H),2.35-2.32(m,1H),2.24(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.69-1.63(m,1H),1.35(d,J =6.2Hz,3H)；呈白色固體狀之異構物4：(93.7mg，0.22mmol)。滯留時間：3.994min(CHIRALPAK AD-3,3*100mm,3um；ACN：EtOH=1：1(0.1%DEA)；2mL/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =431；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.31(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.40(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.13(d,J =7.6Hz,1H),7.03(t,J =8.9Hz,1H),6.86(s,1H),3.88(s,3H),2.53-2.50(m,1H),2.23(s,3H),2.01-2.00(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.06(d,J =6.3Hz,3H)。
實例257：
以類似於實例256之方式製備化合物號349、350、351、352、353、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、 372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、421、422、423、424、425、428及429。
實例258： (1 R ,2 R )- N -(8-胺基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物392)及(1 S ,2 S )- N -(8-胺基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1 H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺(化合物391)
步驟1：4-甲基-3-((三甲基矽基)乙炔基)吡啶
將3-溴-4-甲基吡啶(3g，17.44mmol)、乙炔基三甲基矽烷(2.56g，26.06mmol)、Pd(PPh3 )2 Cl2 (612mg，0.87mmol)、CuI(165mg，0.86mmol)、TEA(7g，69.17mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(200mL)中之混合物在100℃在氮下攪拌12h。將所得溶液用乙酸乙酯(300mL)稀釋，且隨後用鹽水洗滌。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠管柱上純化，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶離，得到呈無色油狀之4-甲基-3-[2-(三甲基矽基)乙炔基]吡啶(1g，5.26mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =190。
步驟2：3-乙炔基-4-甲基吡啶
將4-甲基-3-[2-(三甲基矽基)乙炔基]吡啶(1g，5.28mmol)及碳酸鉀(2.2g，15.91mmol)於甲醇(30mL)中之混合物在室溫下攪拌3h。過濾後，將濾 液在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠管柱上純化，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)溶離，得到呈無色油狀之3-乙炔基-4-甲基吡啶(500mg，4.23mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =118。
步驟3：(1R ,2R )-N -(8-胺基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺及(1S ,2S )-N -(8-胺基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷羧醯胺
將3-乙炔基-4-甲基吡啶(855mg，7.30mmol)、(1R ,2R )-N -(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(500mg，1.46mmol)、碳酸鉀(404mg，2.92mmol)、Pd(AcO)2 (33mg，0.15mmol)及PPh3 (77mg，0.29mmol)於N ,N -二甲基甲醯胺(10mL)中之混合物在110℃在氮下攪拌12h。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC(XBridge Prep C18 OBD,19x150mm 5um；水(0.05% NH3 H2 O)：ACN=0% ACN至50%，7min內)純化，得到外消旋產物(40mg)。將外消旋產物藉由掌性HPLC分離，得到兩種異構物：(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)
呈黃色固體狀之異構物1：(51.4mg，0.1215mmol，8%收率)(假定)。滯留時間：2.527min(CHIRALPAK IC-3.0.46*5cm；3um；Hex(0.1%DEA)：EtOH=50：50；1.0ml/min)；LCMS(53)[M+H]+=424.3，1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.01(s,1H)、9.34(s,1H)、8.67(s,1H)、8.47(d,J =5.0Hz, 1H)、8.23(s,1H)、7.57(s,1H)、7.48-7.37(m,3H)、7.30(s,1H)、7.20(s,1H)、3.77(s,3H)、2.49(s,3H)、2.28-2.12(m,2H)、1.50至1.36(m,1H)、1.26-1.12(m,1H)；呈黃色固體狀之異構物2：(51.2mg，0.1210mmol，8%收率)(假定)。滯留時間：3.588min(CHIRALPAK IC-3.0.46*5cm；3um；Hex(0.1%DEA)：EtOH=50：50；1.0ml/min)；LCMS(53)[M+H]+=424.2，1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.01(s,1H),9.34(s,1H),8.67(s,1H),8.47(d,J =5.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.57(s,1H),7.48-7.37(m,3H),7.30(s,1H),7.20(s,1H),3.77(s,3H),2.49(s,3H),2.28-2.12(m,2H),1.50-1.36(m,1H),1.26-1.12(m,1H)。
實例259： N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-(甲基磺醯胺基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(化合物412)
步驟1：3-胺基-N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
將N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-側氧基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(200.00mg，0.29mmol)、NH4 OAc(228.81mg，2.96mmol)、NaBH3 CN(27.98mg，0.44mmol)於甲醇(5mL)中之混 合物在60℃攪拌2h。將反應混合物在真空下濃縮。將殘餘物用矽膠層析術(DCM：MeOH=10：1)純化，得到呈褐色油狀之3-胺基-N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(80mg，40%)，LCMS(ESI)[M+H]+ =675.3
步驟2N -(8-(雙(2,4-二甲氧基苄基)胺基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(甲基磺醯胺基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
在0℃下向3-胺基-N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(80.00mg，0.12mmol)及TEA(59.98mg，0.59mmol)於二氯甲烷中之混合物中添加Ms2 O。將反應溶液在0℃攪拌10min。將反應藉由添加水淬滅，用二氯甲烷萃取，且將有機層合併且在烘箱中在減壓下乾燥為黃色固體。將此固體用於下一步驟中。LCMS(ESI)[M+H]+ =753.3。
步驟3：N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(甲基磺醯胺基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺
向N -(8-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-3-甲烷磺醯胺基雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺(60mg，0.08mmol)於二氯甲烷中之溶液中添加三氟乙酸(2.5mL)。將反應溶液在25℃攪拌4h，隨後在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC(XBridge Prep C18 OBD,19x150mm 5um；水(0.05% NH3 H2 O)：CH3 CN=0% ACN至50%，7min內)純化，得到呈白色固體狀之(1R ,5S ,6R )-N -(8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-3-(甲基磺醯胺基)雙環[3.1.0]己烷-6-羧醯胺。LCMS(ESI)[M+H]+ =453.3，1 H NMR(300MHz,CD3 OD)δ 9.35(s,1H),8.52(s,1H),8.46-8.40(m,2H),7.38(d,J =5.1Hz,1H),7.01(s,1H),5.32-5.00(m,1H),3.98-3.72(m,1H),3.22-3.02(m,1H),3.01-2.94(m,1H),2.92(s,3H),2.90-2.71(m,1H),2.62-2.49(m,1H),2.41(s,3H),2.19-1.98(m,1H),1.70-1.50(m,1H)。
實例260： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(2,4,7-三甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物410)、(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(2,4,7-三甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物411)；(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4,7-二甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物408)、(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(4,7-二甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物409)；(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(2,7-二甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物406)及(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(2,7-二甲基-8-側氧基-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]噠嗪-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物407)
向壓力燒瓶中稱重3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]噠嗪-8-酮(400mg，1.67mmol)及(4,4'-二第三丁基-2,2'-二吡啶)雙[(2-吡啶基)苯基]銥(III)六氟磷酸鹽[Ir(ppy)2(dtbpy)]PF6(27.7mg，2mol%)。在氮氣流下添加乙腈(8.3mL)、三氟乙酸(8.3mL)及過氧乙酸第三丁酯(0.640mL，2.00mmol)，且將燒瓶密封。將反應混合物攪拌20h，同時用具有定向在光與混合物之間之空域的扇子之Kessil H150B藍色LED光照射。將混合物用二氯甲烷稀釋，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，隨後加將有機物乾燥(MgSO4 )且濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至95：5)純化，得到單甲基化及二甲基化產物(410mg粗品)。向小瓶中之此混合物上稱量[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(63.7mg，0.0764mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(388mg，1.53mmol)及乙酸鉀(450mg，4.59mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(5.1mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌25h。冷卻至室溫，在氮下，向反應容器中添加(±)-(1R,2R)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(524mg，1.53mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(61.4mg，0.0765mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(37.2mg，0.0765mmol)及碳酸鉀(634mg，4.59mmol)及水(1.5mL)。將小瓶密封且在80℃攪拌69h。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)純化，且藉由鏡像分辨SFC純化，得到作為紅色固體狀之二甲基靶化合物(3.1mg，0.4%，經3個步驟；以及3.4mg，0.4%，經3個步驟)及呈白色及紅色固體狀之C5-及C7-單甲基化產物(8.0mg， 1.0%，經3個步驟；8.8mg，1.0%，經3個步驟；6.9mg，0.8%，經3個步驟；6.6mg，0.8%，經3個步驟)。未判定5-及7-指定且任意指定)(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)。
二甲基之資料：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.97(s,1H),9.40(s,1H),8.57(s,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.45(br s,2H),7.29(s,1H),6.85(s,1H),3.77(s,3H),3.77(s,3H),2.45(s,3H),2.41(s,3H),2.20(dd,J =6.9,6.9Hz,2H),1.42-1.33(m,1H),1.22-1.15(m,1H)。
5-之資料(任意指定)：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.41(s,1H),8.45(s,1H),8.40(s,1H),8.29(s,1H),7.56(s,1H),7.44(br s,2H),7.29(s,1H),7.12(s,1H),3.77(s,6H),2.78(s,3H),2.26-2.17(m,2H),1.45-1.34(m,1H),1.27-1.13(m,1H)。
7-之資料(任意指定)：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.98(s,1H),9.41(s,1H),9.03(s,1H),8.67(s,1H),8.30(s,1H),7.56(s,1H),7.45(br s,2H),7.29(s,1H),7.08(s,1H),3.79(s,3H),3.77(s,3H),2.71(s,3H),2.21(dd,J =7.2,7.2Hz,2H),1.44-1.36(m,1H),1.23-1.14(m,1H)。
實例261： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺((化合物395)、(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物396))
向小瓶中稱量(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(100.0mg，0.292mmol)、(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(51.3mg，0.292mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(12.3mg，0.0146mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(7.1mg，0.0146mmol)及碳酸鉀(121mg，0.875mmol)。在氮下，添加無水四氫呋喃(1.5mL)及水(0.3mL)且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌17h。冷卻至室溫，將反應混合物透過矽藻土過濾，用二氯甲烷及甲醇沖洗。濃縮至乾燥後，將殘餘物藉由HPLC及掌性SFC純化，得到呈白色固體狀之目標化合物(23.9mg，19%及29.4mg，24%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.91(s,1H),9.34(s,1H),8.23(s,1H),8.19(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.24(br s,2H),6.91(s,1H),6.74(s,1H),3.87(s,3H),3.77(s,3H),2.38(s,3H),2.26-2.14(m,2H),1.46-1.32(m,1H),1.27-1.05(m,1H)。(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)。
實例262： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(5-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺((化合物393)、(1R,2R)-N-(8-胺基-6-(5-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物394))
向小瓶中稱量3-溴-5-甲氧基-4-甲基吡啶(120mg，0.594mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(24.7mg，0.0297mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(151mg，0.594mmol)及乙酸鉀(175mg，1.78mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(3.0mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌40.5h。冷卻至室溫，在氮下，向反應容器中添加(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(447mg，1.30mmol)、[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(24.7mg，0.0297mmol)及碳酸鉀(246mg，1.78mmol)及水(0.6mL)。將小瓶密封且在80℃攪拌4.5天。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)純化，得到呈褐色固體狀之目標化合物(85mg，33%，經2個步驟)。將鏡像異構物藉由掌性SFC進一步分離，得到呈白色固體狀之目標化合物；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.29(s,1H),8.24(s,1H),8.23(s,1H),7.56(s,1H),7.31(br s,2H),7.29(s,1H),6.91(s,1H),3.94(s,3H),3.77(s,3H),2.25-2.14(m,2H),2.21(s,3H),1.45-1.33(m,1H),1.23-1.12(m,1H)。(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)。
實例263： (1S,2S)-N-(8-胺基-6-(6-(甲氧基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺((化合物387)、 (1R,2R)-N-(8-胺基-6-(6-(甲氧基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物388))
程序與(±)-(1S,2S)-N-(8-胺基-6-(4-甲基-6-(2-側氧基氮雜環丁-1-基)吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺((化合物343))之程序相同，例外之處為將5-溴-4-甲基-吡啶-2-羧酸甲酯(140mg，0.648mmol)用作起始材料，在管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)及掌性SFC分離之後得到呈白色固體狀之目標化合物(28.0mg，10%，經2個步驟及24.5mg，9%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.51(s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.35-7.21(m,4H),6.96(s,1H),4.51(s,2H),3.77(s,3H),3.39(s,3H),2.43(s,3H),2.24-2.13(m,2H),1.44-1.32(m,1H),1.24-1.13(m,1H)。(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)。
實例264： (S)-2-(5-(1-胺基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氫噁唑-4-羧酸甲酯(化合物385)、(S)-2-(5-(1-胺基-6-((1R,2R)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7- 啶-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氫噁唑-4-羧酸甲酯(化合物386)
步驟1：(5-溴-4-甲基甲吡啶基)-L-絲胺酸
在氮下且在0℃下向5-溴-4-甲基吡啶甲酸(3.00g，13.9mmol)於無水四氫呋喃(46mL)中之溶液中添加無水DMF(0.10mL，1.4mmol)，接著經10min滴加草醯氯(1.80mL，20.8mmol)。5分鐘攪拌後，將冰浴除去，使混合物回到室溫。19h後，將混合物濃縮至乾燥。在分離燒瓶中，將L-絲胺酸甲酯鹽酸鹽(2.38g，15.3mmol)於無水四氫呋喃(25mL)中之溶液填充有三乙胺(2.3mL，17mmol)且攪拌1h，之後傾至以上製備之乾燥醯氯上。將合併之反應混合物再攪拌1.5h，且隨後傾入飽和碳酸氫鈉水溶液中，且用乙酸異丙酯萃取。將有機物用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，且隨後濃縮至乾燥。將因此獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至95：5)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.457g，33%)；1 H NMR(400MHz,氯仿-d )δ 8.69(br d,J =7.9Hz,1H),8.60(s,1H),8.04(s,1H),4.85(dt,J =7.9,3.9Hz,1H),4.17-3.98(m,2H),3.83(s,3H),2.57(t,J =6.1Hz,1H),2.47(s,3H)。
步驟2：(S)-2-(5-(1-胺基-6-(反式 -2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺基)-2,7-啶-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氫噁唑-4-羧酸甲酯
在氮下且在-78℃下向(5-溴-4-甲基甲吡啶基)-L-絲胺酸(400mg，1.26mmol)於無水二氯甲烷(6.3mL)中之溶液中添加無水三氟化二乙胺基硫(0.33 mL，2.5mmol)，且使其溫熱至室溫。攪拌1h後，將反應藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液小心淬滅且用二氯甲烷萃取。將有機物經硫酸鎂乾燥，且濃縮為粗品橙色固體。向小瓶中之此固體上稱量[1,1' -雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)-二氯甲烷錯合物(52.5mg，0.0630mmol)、雙(頻哪醇合)二硼(320mg，1.26mmol)及乙酸鉀(371mg，3.78mmol)。在氮下，添加無水1,4-二噁烷(6.3mL)，且將小瓶密封。將反應混合物在100℃攪拌22h。冷卻至室溫，在氮下，向反應容器中添加(±)-(1R,2R)-N-(8-胺基-6-氯-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(432mg，1.26mmol)、氯(2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基-1,1' -聯苯)[2-(2' -胺基-1,1' -聯苯)]鈀(II)(53.2mg，0.0630mmol)、2-二環己基膦基-2' ,4' ,6' -三異丙基聯苯(30.7mg，0.0630mmol)及碳酸鉀(523mg，3.78mmol)及水(1.3mL)。將小瓶密封且在100℃攪拌18.5h。將反應混合物濃縮至乾燥，且將殘餘物藉由急驟管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)純化，得到呈白色固體狀之外消旋化合物(62.2mg，9%，經3個步驟)。將鏡像異構物藉由掌性SFC進一步分離，得到呈白色固體狀之目標化合物；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.96(s,1H),10.36(s,1H),9.39(s,1H),8.71(s,1H),8.28(s,1H),8.08(s,1H),7.56(s,1H),7.37(br s,2H),7.29(s,1H),7.07(s,1H),6.63(s,1H),5.90(d,J =1.5Hz,1H),3.86(s,3H),3.77(s,3H),2.54(s,3H),2.24-2.17(m,2H),1.44-1.34(m,1H),1.29-1.06(m,1H)。(吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之所有絕對立體化學)。
實例265： 反式 -N-(8-胺基-6-(6-((S)-4-異丙基-4,5-二氫噁唑-2-基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺(化合物384)
步驟1：(S)-5-溴-N-(1-羥基-3-甲基丁-2-基)-4-甲基吡啶甲醯胺
在氮下且在0℃下經10min向5-溴-4-甲基吡啶甲酸(2.00g，9.26mmol)及無水DMF(0.14mL，1.9mmol)於無水四氫呋喃(31mL)中之溶液中添加草醯氯(1.61mL，18.5mmol)。將冰浴除去，使混合物回到室溫。42h後，將混合物濃縮至乾燥。隨後將粗酸性氯化物溶於無水四氫呋喃(31mL)中且添加L-valinol(1.1mL，9.3mmol)。將反應混合物攪拌7天，且隨後傾入飽和碳酸氫鈉水溶液中，且用乙酸異丙酯萃取。將有機物用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，且隨後濃縮至乾燥。將因此獲得之殘餘物藉由急驟管柱層析術(庚烷/iPrOAc，100：0至0：100)純化，得到呈黃色液體狀之標題化合物(1.08g，39%)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.73(s,1H),8.24(br d,J =9.7Hz,1H),8.03(s,1H),4.73(t,J =5.4Hz,1H),3.78-3.70(m,1H),3.63-3.54(m,1H),3.54-3.44(m,1H),2.46(s,3H),1.96-1.87(m,1H),0.91(d,J =6.6Hz,3H),0.86(d,J =6.9Hz,3H)。
步驟2：反式 -N-(8-胺基-6-(6-((S)-4-異丙基-4,5-二氫噁唑-2-基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)環丙烷-1-羧醯胺
程序與實例264之程序相同，例外之處為將(S)-5-溴-N-(1-羥基-3-甲基丁-2-基)-4-甲基吡啶甲醯胺(118mg，0.417mmol)用作起始材料，管柱層析術(CH2 Cl2 /MeOH，100：0至85：15)及HPLC純化之後得到呈白色固體狀之目標化合 物(10.8mg，5%，經2個步驟)；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.65(s,1H),8.27(s,1H),7.93(s,1H),7.56(s,1H),7.36(br s,2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),4.54-4.37(m,1H),4.22-4.05(m,2H),3.77(s,3H),2.25-2.13(m,2H),1.87-1.71(m,1H),1.45-1.30(m,1H),1.24-1.10(m,1H),0.98(d,J =6.7Hz,3H),0.91(d,J =6.7Hz,3H)。(異構物之環丙烷立體化學：吡唑與醯胺成反式 ；任意指定之絕對立體化學)。
實例266：
以類似於實例263或實例265中程序之方式製備化合物號397、398、399、400、401、402、403、404、405、413、419、420及427。
實例267： 2'-((8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基)-6'-甲基-5',6'-二氫螺[環丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯]-7'(8'H)-酮(化合物414)
步驟1：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺
將2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(15g，52.84mmol)、甲基(丙-2-烯-1-基)胺(5.7g，80.15mmol)、N,N -二異丙基乙胺(27g，208.9mmol)及HATU(30g，78.9mmol)於N,N -二甲基甲醯胺(500mL)中之溶液在室溫下攪拌16小時。將所得混合物用乙酸乙酯稀釋。將有機層用氯化鈉溶液洗滌，用無水硫酸鈉乾燥， 過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用乙酸乙酯/石油醚(2/3)溶離來純化，得到呈黃色油狀之2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺(16.3g，92%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =338.0。
步驟2：2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
在80℃下將2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙醯胺(5g，14.84mmol)、乙酸鈀(166mg，0.74mmol)、三苯基膦(388mg，1.48mmol)、TBAB(4.8g，14.890mmol)及乙酸鉀(4.2g，42.80mmol)於N,N -二甲基甲醯胺(100mL)中之溶液攪拌10h。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物在矽膠管柱上純化，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)溶離，得到呈褐色油狀之2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(3.2g，84%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =258.1。
步驟3：2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氫螺[環丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯]-7'(8'H)-酮
將碘化三甲基氧化鋶(1.29g，5.86mmol)及第三丁醇鉀(656mg，5.85mmol)於二甲基亞碸(30mL)中之混合物在室溫下攪拌30min。隨後添加2-溴-6-甲基-4-亞甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(500mg，1.95mmol)於二甲基亞碸(3mL)中之溶液。隨後將混合物在50℃攪拌12h。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋，且隨後用水洗滌。將有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾且 在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱用二氯甲烷/甲醇(10/1)純化，得到呈白色固體狀之2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氫螺[環丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯]-7'(8'H)-酮(120mg，23%)。LCMS(ESI)[M+H]+ =270。
步驟4：N-[5-[6-胺基-1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-第三丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯
將3-氯-N 1,N 1-雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-啶-1,6-二胺(560mg，1.13mmol)、N -第三 丁氧基羰基-N -[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜戊環-2-基)-3-吡啶基]胺基甲酸第三 丁酯(737mg，1.7mmol)、XPhosPdG2(171mg，0.23mmol)、XPhos(215mg，0.45mmol)及KOAc(332mg，3.39mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(1.5mL)中之混合物在100℃攪拌1小時。將混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相層析術用水/CH3 CN(15/85)純化，得到呈褐色固體狀之N -[5-[6-胺基-1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(220mg,0.28mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =767。
步驟5：N -[5-[1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯
將N -[5-[6-胺基-1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(215.0mg，0.2800mmol)、2-溴-6-甲基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-7-酮(90mg，0.34mmol)、t-BuBrettphos Pd G3(95mg，0.11mmol)、t-BuBrettphos(54mg，0.11mmol)及Cs2 CO3 (456mg，1.4mmol)於1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在130℃攪拌2小時。將反應物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用DCM/MeOH(97/3)溶離來純化，得到呈褐色固體狀之N -[5-[1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三丁酯(140mg,0.14mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =956。
步驟6：2-[[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-7-酮
將N -[5-[1-[雙[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(140mg，0.15mmol)及TFA (5mL)於二氯甲烷(0.5mL)中之溶液在80℃攪拌0.5小時。將混合物在真空下濃縮。將反應混合物用NH3 .H2 O調整至pH 10。將粗產物藉由製備型HPLC用以下條件純化：管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱30*150mm,5um；流動相A：水(10mmol/L NH4 HCO3 )，流動相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：20% B至27% B，7min內；254nm；Rt：5.9min，得到呈白色固體狀之2-[[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-螺[5,8-二氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-4,1'-環丙烷]-7-酮(20.4mg，0.044mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =456.3；1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 9.31(s,1H),9.19(s,1H),7.92(s,1H),7.75(s,1H),7.45(s,1H),7.02(s,2H),6.68(s,1H),5.67(s,1H),5.10-5.06(m,4H),3.72(s,2H),2.99(s,3H),2.06(s,3H),1.23-1.16(m,2H),0.96-0.92(m,2H)。
實例268： 2-((8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基)-6-甲基-5,6-二氫-4 H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮(化合物415)
步驟1：2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲酯
向3-溴-5-甲基-1H-吡唑(100g，621.12mmol)、2-氯乙酸甲酯(101.11g，931.68mmol)及K2 CO3 (154.29g，1118mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(1L)中之溶液中添加TBAI(11.46g，31.06mmol)。將所得溶液在20℃攪拌12h。將反應混合物用EA(5000mL)稀釋。將溶液用水(300mLx3)洗滌且合併有機層。將有 機層用無水硫酸鈉乾燥，且在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用PE/DCM(60/40)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲酯(120g，82.9%收率)。
步驟2：2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲酯
將2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲酯(50.0g，214.54mmol)及AIBN(3.52g，21.45mmol)於四氯化碳(1500mL)中之溶液在室溫下攪拌5min。添加1-溴-2,5-吡咯啶二酮(40.09g，225.26mmol)。將混合物在80℃攪拌1小時。將反應混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用PE/EA(92/8)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲酯(35.5g，53%收率)。
步驟3：2-(3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酸甲酯
將2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲酯(35.4g，113.48mmol)及氰化鈉(8.87g，181.02mmol)於二甲亞碸(550mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時。將反應溶液用EA(2.5L)稀釋。將溶液用水(200mLx5)洗滌且合併有機層。將有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用DCM/MeOH(99/1)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-(3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酸甲酯(17.6g，60%收率)。
步驟4：2-(5-(2-胺基乙基)-3-溴-1H-吡唑-1-基)乙酸甲酯
向2-[3-溴-5-(氰基甲基)吡唑-1-基]乙酸甲酯(3.0g，11.62mmol)於甲醇(600mL)中之溶液中添加PtO2 (600mg，2.64mmol)。將混合物在10atm氫氣下在25℃攪拌15小時。將混合物過濾。濾液將不經純化即直接用於下一步驟中。
步驟5：2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
向2-[5-(2-胺基乙基)-3-溴-吡唑-1-基]乙酸甲酯溶液(600mL)中添加TEA(70mL)。將混合物在25℃攪拌15小時。將所得溶液在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用DCM/MeOH(98/2)溶離來純化，得到呈白色固體狀之2-溴-4,5,6,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(1.12g，41.9%收率，在兩個步驟中)。
步驟6：2-溴-6-甲基-5,6-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7(8H)-酮
在20℃下向2-溴-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯(469.53mg，2.17mmol)及第三丁醇鉀(365.74mg，3.26mmol)於四氫呋喃(20mL)中之混合物中添加碘甲烷(616.86mg，4.35mmol)。將所得溶液在20℃攪拌1小時。將混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(20/1)溶離來純化，得到2-溴-6-甲基-4,5,7,8-四氫吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯(400mg，1.74mmol，80%收率)。LCMS(ESI)[M+H]+ =244。
步驟7：N -[5-[1-[雙[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-5,8-二氫-4H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯
將N -[5-[6-胺基-1-[雙[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(130mg，0.17mmol)、2-溴-6-甲基-5,8-二氫-4H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(67mg，0.26mmol)、tBuBrettphos Pd G3(60mg，0.07mmol)、tBuBrettphos(41mg，0.09mmol)及Cs2 CO3 (166mg，0.51mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在120℃攪拌1小時。將混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用MeOH/DCM(1/10)溶離來純化，得到呈黃色固體狀之N -[5-[1-[雙[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-5,8-二氫-4H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(50mg，0.05mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =931。
步驟8：2-[[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-5,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮
將N -[5-[1-[雙[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-[(6-甲基-7-側氧基-5,8-二氫-4H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-2-基)胺基]-2,7-啶-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N -第三 丁氧基羰基-胺基甲酸第三 丁酯(50.0mg，0.05mmol)於CF3 COOH(1.0mL)中之混合物在80℃攪拌30min。將混合物在真空下濃縮。用NH3 於甲醇中之溶液將反應混合物調整至pH=8。將粗產物藉由製備型HPLC用以下條件純化：管柱，XBridge Prep C18 OBD管柱19x150mm；流動相：水(0.05% NH3 H2 O)及ACN(10%至50%)；偵測器，UV 254nm.RT ：[7min]，得到呈黃色固體狀之2-[[8-胺基-6-(5-胺基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-啶-3-基]胺基]-6-甲基-5,8-二氫-4H -吡唑并[1,5-d][1,4]二氮呯-7-酮(10mg，0.023mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =430.2。1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.37(s,1H),9.20(s,1H),7.93(s,1H),7.77(s,1H),7.51(s,1H),7.03(s,2H),6.68(s,1H),6.06(s,1H),5.11(s,2H),4.99(s,2H),3.84(t,J =6Hz,2H),3.06(t,J =6Hz,2H),2.96(s,3H),2.08(s,3H)。
實例269： ( S )-2-((8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基)-6,7-二氫-4 H -吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(化合物416)及( R )-2-((8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基)-6,7-二氫-4 H -吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(化合物417)
步驟1：3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-羧酸甲酯
將3-溴-1H -吡唑-5-羧酸甲酯(10g，48.77mmol)、4-甲基苯-1-磺酸(500mg，2.90mmol)及3,4-二氫-2H-吡喃(12.2g，145.03mmol)於乙酸乙酯(150mL)中之混合物攪拌在80℃攪拌4h。將反應物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱用二氯甲烷/甲醇(10/1)純化，得到呈黃色油狀之3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-羧酸甲酯(9g，31.14mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =289。
步驟2：[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲醇
在0℃下向3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-羧酸甲酯(7.5g，25.94mmol)於二氯甲烷(200mL)中之溶液中添加DIBALH(103mL，51.88mmol)。將所得溶液在0℃在水/冰浴中攪拌1h。將反應用冰水淬滅。過濾後，將所得溶液用二氯甲烷萃取，且將有機層合併且經無水硫酸鈉乾燥。將固體過濾出來。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈無色油狀之[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(6g，23.07mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =261。
步驟3：3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸
將[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲醇(200mg，0.76mmol)、氫化鈉(62mg，2.58mmol)、環氧乙烷-2-羧酸乙酯(134mg，1.15mmol)於四氫呋喃(10mL)中之混合物在室溫下在氮下攪拌12h。隨後將反應用水淬滅。用氯化氫將反應混合物調整至pH 4。將所得溶液用乙酸乙酯萃取且用無水硫酸鈉乾燥。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至40/0.1% HCl於 水中)純化，得到呈白色固體狀之3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸(130mg，0.37mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =349。
步驟4：3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯
向3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸(130mg，0.37mmol)於四氫呋喃(10mL)及甲醇(2mL)中之溶液中添加TMSCHN2 (0.22mL，3.852mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌2h。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯(140mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+ =363。
步驟5：3-[(3-溴-1H -吡唑-5-基)甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯
將3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H -吡唑-5-基]甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯(130mg，0.35mmol)於二氯甲烷(4mL)及三氟乙酸(2mL)中之混合物在室溫下攪拌3h。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之3-[(3-溴-1H -吡唑-5-基)甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯(50mg，0.18mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =279。
步驟6：3-[(3-溴-1H -吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲酯
將3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-羥基丙酸甲酯(100mg，0.35mmol)及亞硫醯氯(1mL)於二氯甲烷(10mL)中之混合物在70℃攪拌5h。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之3-[(3-溴-1H -吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲酯(80mg，0.27mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =297。
步驟7：2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧酸甲酯
將3-[(3-溴-1H -吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲酯(650mg，2.18mmol)及碳酸鉀(909mg，6.57mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中之混合物在室溫下攪拌12h。將所得溶液用H2 O稀釋且用乙酸乙酯萃取，且將有機層合併且在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(10/1)溶離來純化，得到呈灰色固體狀之2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧酸甲酯(300mg，1.15mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =261。
步驟8：2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧醯胺
將2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧酸甲酯(300mg，1.15mmol)及NH3 於甲醇(10mL，7M)中之混合物在90℃攪拌6h。將所得混合物在真空下濃縮，得到呈白色固體狀之2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧醯胺(200mg，0.81mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =246。
步驟9：2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈
在0℃下向2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-羧醯胺(200mg，0.81mmol)及TEA(247mg，2.44mmol)於二氯甲烷(10mL)中之溶液中添加TFAA(343mg，1.63mmol)，且隨後在室溫下攪拌2h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠管柱用二氯甲烷/甲醇(98/2)純化，得到呈白色固體狀之2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(100mg，0.44mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =228。
步驟10：2-[(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈
將1-N ,1-N -雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-1,6-二胺(242mg，0.44mmol)、2-溴-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(100mg，0.44mmol)、BrettPhos Pd G3(75mg，0.08mmol)、t-BuBrettPhos(85mg，0.17mmol)及Cs2 CO3 (575mg，1.76mmol)於二噁烷(10mL)中之混合物在120℃攪拌0.5h。過濾後，將濾液在真空下濃縮。將殘餘物藉由急驟層析術在矽膠上用二氯甲烷/甲醇(10/1)純化，得到呈白色固體狀之2-[(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基)胺基]-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(100mg，0.25mmol)。LCMS(ESI)[M+H]+ =699。
步驟11：(7S )-2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈及(7R )-2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈
將2-[(8-[雙[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 啶-3-基)胺基]-4H ,6H ,7H -吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(100mg，0.14mmol)於三氟乙酸(5mL)中之混合物在80℃攪拌30min。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由逆相層析術(乙腈0至50/0.1% NH4 HCO3 於水中)純化，得到呈黃色固體狀之2-[[8-胺基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-啶-3-基]胺基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲腈(50mg，0.12mmol)。將外消旋物藉由掌性HPLC分離，得到兩種異構物：異構物1：滯留時間：3.37min(CHIRAL Cellulose-SB,0.46*15cm；5um；100% MeOH(0.1%DEA)；1ml/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =399；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.17(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J =4Hz,1H),7.67(s,1H),7.37(d,J =8Hz,1H),6.85(s,1H),6.14(s,1H),5.33-5.32(m,1H),4.98(d,J =12Hz,1H),4.77(s,1H),4.45(d,J =4Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),2.44(s,3H)；異構物2：滯留時間：4.13min(CHIRAL Cellulose-SB,0.46*15cm；5um；100% MeOH(0.1%DEA)；1ml/min)；LCMS(ESI)[M+H]+ =399；1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ 9.17(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J =4Hz,1H),7.67(s,1H),7.37(d,J =8Hz,1H),6.85(s,1H),6.14(s,1H),5.33-5.32(m,1H),4.98(d,J =12Hz,1H),4.77(s,1H),4.45(d,J =4Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),2.44(s,3H)。
實例270：
以類似於實例166中程序之方式製備化合物號418及426。
實例271：
使用類似於本文所述者之程序或此項技術中已知之方法製備化合物號430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、567、568、569、570、571及572。
實例272：
使用類似於本文所述者之程序或此項技術中已知之方法製備化合物號86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、123、160及389。
化合物評估 化學分析
示範性式I或Ia化合物。表A-1及表A-2包括某些化合物之製備及表徵。
「-」係指未經報告之資料。
生物學評估
測試示範性式I或Ia化合物以評定HPK-1之化合物抑制。判定各示範性化合物之Ki 。
實例B1：HPK1 Ki判定
實例B1A：HPK1-FL HTRF酶促檢定(「HTRF」)
檢定原理： 在1mM ATP及不同濃度之測試化合物之存在下，HPK-FL酶使生物素-SLP-76受質磷酸化。藉由FRET使用Eu-anti-pSLP76抗體及SA-XL665偵測產物。
文獻： 對於額外HTRF技術訊息，參見www.cisbio.com/HTRF。
儀器配置： Echo555化合物分配器
Agilent Bravo
Perkin Elmer Envision
最終檢定條件：
材料： 檢定板：白色ProxiPlate 384 F(PerkinElmer目錄號6008289)
激酶：HPK全長雙突變體
受質：生物素-SLP76
ATP：100mM ATP
BSG：2% BSG
DMSO：DMSO(Sigma目錄號34869-100ML)
反應緩衝液：H2 O/50mM HEPES，pH 7.5/10mM MgCl2 /2mM TCEP/0.01% Brij-35/0.01% BSG
偵測混合物：Eu-anti-pSLP76/SA-XL665(Cisbio,#610SAXAC)
檢定程序Ki判定： 向具有點樣之80nL化合物或DMSO之384孔Proxiplate中添加4μl/孔激酶混合物。將混合物預培育30分鐘，且隨後添加4μl/孔受質混合物。將溶液培育60min，且隨後添加4μl/孔偵測混合物。將溶液再培育60min。隨後將板上樣至Perkin Elmer Envision上，且在615及665nm處量測TR-FRET信號。使用665/620之比率來計算各化合物濃度下之活性%。
實例B1B：HPK1 Lantha結合檢定(「Lanth」)
材料：
程序：
I. 化合物稀釋： 藉由使用Bravo液體處理平台製備第2列及第13列中之12.5uL/孔之5mM化合物(100X)、及第3列至第12列、第14列至第23列及複合板之孔A1至H1及I24至P24之10ul/孔之DMSO來稀釋欲測試之化合物。對於參考化合物，最高濃度為1mM。在孔J1至P1及A24至H24中向板中添加10ul 2mM十字孢鹼。使用Bravo液體處理平台進行11點5倍化合物連續稀釋。從板中將 2.5ul溶液從第2列及第13列轉移至第3列及第14列等等中之10ul DMSO中。將複合板以2500rpm離心1min。使用Echo液體處理器系統將80nl化合物從複合板轉移至檢定板中。一個複合板製成兩個檢定板。將各檢定板密封且儲存在N2 櫃中。
II. 檢定條件： 使用以下檢定濃度及時間：2nM HPK1、2nM Eu-Anti-GST抗體及15nM示蹤劑222，60min培育時間。
III. HPK Lantha結合檢定： 對於結合檢定，使用Multidrop試劑分配器將4ul 2X HPK1及Eu-anti-GST抗體添加至檢定板之各孔中。將溶液在23C培育箱中培育1h。使用Multidrop試劑分配器向檢定板之各孔中添加4ul 2X示蹤劑-222。將溶液再次在23C培育箱中培育1h。使用具有以下參數之Envision板讀取器讀取檢定結果：TR_FRET，340ex/615及665em；100usec延遲；及200usec積分。
IV. 分析：
1. 使用XL-擬合中之Morrison ki擬合模型來分析化合物Ki
a. 擬合=(1-((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))-(((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))^2)-((4*E)*x))^0.5))/(2*E)))
res=(y-擬合)
b. 參數：E=酶濃度
S=示蹤劑222濃度，Kd=示蹤劑222Kd
所有量測值使用相同單位(uM)報告
在結合檢定中測試示範性式I或Ia化合物。所判定之Ki值列於表B1-1及B1-2中。表B1-1中之Ki資料係基於「Lanth」檢定。
實例B2：人類T細胞IL2誘導檢定
檢定原理： 抗CD3及抗CD28活化原代人類泛T細胞中之TCR信號傳導，從而導致IL-2啟動子誘導。藉由電化學發光，使用抗IL-2之捕獲抗體及用SULFO標籤標記之抗IL-2抗體偵測細胞培養物上清液中分泌的IL-2。
文獻： 對於額外電化學發光技術訊息，參見www.mesoscale.com。
檢定程序： 在潮濕培育箱中在37℃及5% CO2 下用不同濃度之測試化合物培育原代人類泛T細胞30分鐘。將細胞轉移至用固定濃度之抗人類CD3(對於各供體批進行單獨判定)預塗佈之板，且添加可溶性抗人類CD28(最終濃度=1μg/ml)。在潮濕培育箱中在37℃及5% CO2 下刺激細胞4小時。將25μl上清液轉移至用抗人類IL-2抗體預塗佈之MSD單斑點板上。在4℃在溫和振盪之情況下培育MSD板隔夜。用洗滌緩衝液洗滌MSD板4次。以1：50稀釋度添加SULFO標記之偵測抗體，且在室溫下振盪培育2小時。用洗滌緩衝液洗滌MSD板4次，且添加150μl MSD讀取緩衝液2次。在MSD儀器上讀取。將資料相對於經刺激/未經處理之對照正規化以計算各化合物濃度下之活性%。
材料： 冷凍之原代人類泛T細胞(StemCell Technologies #70024)
抗人類CD3(OKT3殖株)(eBioscience #16-0037-81)
抗人類CD28(CD28.2殖株)(BD #555725)
96孔人類IL-2組織培養套組(MSD #K151AHB-4)
儀器配置： 用於液體處理之Biomek FX(Beckman Coulter)
MSD SECTOR S 600(Meso Scale Discovery)
在人類T細胞IL-2誘導檢定中測試示範性式I或Ia化合物。對於某些化合物(如示出具有HPK1 Ki值之結構)，在表B2中提供由測試化合物處理之細胞中之IL-2相對於未經處理之細胞中之IL-2所量測之增加%。
應注意，術語「一(個/種)」實體係指一或多個(種)該實體；例如，「一個多肽」應理解為表示一或多個多肽。因此，術語「一(個/種)」、「一或多個(種)」及「至少一個(種)」可在本文中互換使用。
本文中使用之所有技術及科學術語具有相同含義。已努力確保關於所用數值(例如，量、溫度、等)之準確性，但應慮及一些實驗誤差及偏差。
除非上下文另外要求，否則在整個本說明書及申請專利範圍書中，詞語「包含(comprise/comprises/comprising)」以非排他性意義使用。應理解本文所述之實施例包括「由實施例組成」及/或「基本上由實施例組成」。
如本文所使用，當提及數值時，術語「約」意在涵蓋自指定量之其變化，在一些實施例中為±50%，在一些實施例中為±20%，在一些實施例中為±10%，在一些實施例中為±5%，在一些實施例中為±1%，在一些實施例中±0.5%，且在一些實施例中為±0.1%，因為此類變化適於進行所揭示之方法或採用所揭示之組成物。
當提供數值範圍時，應理解在該範圍之上限與下限之間的直至下限之十分之一單位之各間插值(除非上下文另外明確規定)以及在該陳述之範圍內之任何其他陳述值或間插值皆涵蓋在本發明內。可獨立地包括在較小範圍中之此等小範圍之上限及下限亦涵蓋在本發明內，屬於陳述之範圍內之任何明確排 除之界限。在所陳述範圍包括界限之一者或兩者時，排除彼等包括之界限之任一者或兩者的範圍亦可包括在本發明內。
本文陳述之本發明之許多修改及其他實施例將會由熟習此等發明所屬技術者想到，其具有前面的描述及相關附圖中提出之教導之益處。因此，應理解，本發明不限於所揭示之具體實施例，且修改及其他實施例意欲包括在所附申請專利範圍之範疇內。雖然在本文中採用特定術語，但是其僅用於一般性及描述性意義，且不為了限制目的。
進一步實施例
實施例1. 一種式I化合物： 或其醫藥學上可接受之鹽，其中，R1 為：C2-9 雜芳基、C2-9 雜環基或C6-10 芳基，其中該雜芳基或雜環基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、雜芳基及雜環基可視情況經一、二、三或四個取代基R6 、R7 、R8 及R8’ 取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：i. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基及C3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”取代，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基； ii. NRa Rb -C(O)-，其中Ra 及Rb 各自獨立地為氫或C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 或-CF3 取代；iii. C1-6 烷氧基；iv. 鹵素；v. 氰基；vi. 羥基；vii. 胺基；viii. 二(C1-6 )烷基胺基；ix. 單(C1-6 )烷基胺基；x. -NRc (CO)Rd ，其中Rc 及Rd 獨立地為H或C1-6 烷基；Xi. -CF3 ；xii. -CF2 ；xiii. -SO2 R’，其中R’如上所述；xiv. -SO2 NR’R”，其中R’及R”如上所述；xv. -(CO)NRc Rd ；其中Rc 及Rd 如上所述；xvi. -(CO)ORe ；其中Re 為H、C1-6 烷基或CH2 -芳基；xvii. 經取代之或未經取代之C6-10 芳基或C3-5 雜環基；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；R1’ 為：C1-6 烷基、C2-6 烯基、C3-6 環烷基、C2-9 雜芳基或鹵素，其中該烷基、烯基、環烷基及雜芳基可視情況經羥基、鹵素或胺基取代；R2 為A-C(O)-，其中A為： i. C3-7 環烷基(C1-6 )j 烷基-或C2-9 雜環基(C1-6 )j 烷基-，其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R5 之一、二、三或四者取代，其中R5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C1-6 )烷基-、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、胺基(C1-6 )烷基、C1-6 烷氧基、CH3 CO2 -(C1-6 烷基)-、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”、-NR’(CO)R”，其中在各情況下，R’及R”如以上所述，為視情況經取代之C2-9 雜芳基、視情況經取代之C2-9 雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及NRe Rf -C(O)-(C1-6 烷基)k -，其中Re 及Rf 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，或Re 及Rf 與其各自所結合之氮一起可形成C3-7 環烷基，該C3-7 環烷基可視情況經分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 或羥基取代；且k為1或0；或，該環烷基或雜環基與R5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環；ii. -NRg Rh ，其中Rg 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基；-CF2 或-CF3 取代；Rh 係選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、-CF2 、-CF3 或NRe’ Rf’ -C(O)-取代，其中Re’ 及Rf’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；及 b. C3-7 環烷基(C1-6 烷基)m -、C2-9 雜芳基(C1-6 烷基)m -、C6-10 芳基(C1-6 烷基)m -或C2-9 雜環基(C1-6 烷基)m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R5’ 之一或兩者取代，其中R5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、C1-6 烷氧基、胺基、胺基(C1-6 )烷基及NRi Rj -C(O)-(C1-6 烷基)k’ -，其中Ri 及Rj 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且k’為1或0；iii. R9 -(C1-6 烷基)-，其中R9 係選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基、-NRo Rp ，其中Ro 及Rp 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基、NRo’ Rp’ -CO-，其中Ro’ 及Rp’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C1-6 烷基；iv. B-(C1-6 烷基)t -，其中B為C3-9 雜芳基或C3-7 雜環基，其中該雜芳基或雜環基具有1至3個選自O、S及N之雜原子；且其中該雜芳基或雜環基可視情況經R10 、R10’ 及R10” 之一、二或三者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-4 環烷基，其中該烷基或環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、-(CO)NRq Rr 或-NRq (CO)Rr 取代，其中Rq 及Rr 獨立地為H或C1-6 烷基；b. C3-7 環烷基；及c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基； i. 二(C1-6 )烷基胺基；j. 單(C1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -(CO)NRs Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；及m. -NRs (CO)Rt ，其中Rs 及Rt 獨立地為H或C1-6 烷基；且t為1或0；v. (C6-10 芳基)q’ -(C1-6 烷基)n -O-或吡咯啶基-O-，其中該芳基可視情況經R11 、R12 及R13 之一、二或三者取代，其各者係選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、氰基、C1-6 烷氧基及NRu Rv -，其中Ru 及Rv 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0，q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1；vi. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烯基、C1-6 伸烯基，其中該烷基、烯基及伸烯基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基、C3-7 環烷基、C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’及R”獨立地為H或C1-6 烷基；或R2 為D，其中D為：i. C6-10 芳基-(C1-6 烷基)z -或C3-9 雜芳基-(C1-6 烷基)z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基或雜芳基可視情況經R14 、R15 、R16’ 及R16 之一、二、三或四者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF2 、-CF3 、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、氰基C1-6 烷氧基、-SO2 R’、-SO2 NR’R”、-(CO)NRw Rx 或-NRw (CO)Rx 取代，其中Rw 及Rx 獨立地為H或C1-6 烷基，其中連接至不同原子之R14 、R15 、R16’ 及R16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環； b. C3-7 環烷基；c. C3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF2 ；g. -CF3 ；h. 胺基；i. 二(C1-6 )烷基胺基；j. 單(C1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -NRy (CO)Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；m. -(CO)NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；n. -SO2NRy Rz ，其中Ry 及Rz 獨立地為H或C1-6 烷基；及o. -(CO)ORy ，其中Ry 為H或C1-6 烷基；且z為1或0；ii. C3-7 環烷基-(SO2 )-，其中該環烷基可視情況經R6’ 之一或兩者取代，其中R6’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF3 、-CF2 、羥基(C1-6 )烷基、鹵基(C1-6 )烷基、羥基、(C1-6 烷基)-O-(C1-6 烷基)-、C1-6 烷氧基、胺基、二(C1-6 )烷基胺基、單(C1-6 )烷基胺基、胺基(C1-6 )烷基及NRe’ Rf’ -C(O)-(C1-6 烷基)n -，其中Re’ 及Rf’ 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C1-6 烷基，且n為1或0；及iii. C1-6 烷基或吡咯啶，其中該烷基視情況經鹵素取代；且R2’ 為H或分支鏈或直鏈C1-6 烷基。
實施例2. 如實施例第1項之化合物，其中R1 為視情況經取代之C2-9 雜芳基或C3-7 雜環基。
實施例3. 如實施例第2項之化合物，其中R1 係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二或三個取代基R6 、R7 及R8 取代。
實施例4. 如實施例第3項之化合物，其中R1 係選自由以下所組成之群組： ；其各者可視情況經一、二或三個取代基R6 、R7 及R8 取代。
實施例5. 如實施例第4項之化合物，其中R1 為：
實施例6. 如實施例第5項之化合物，其中R1 為：
實施例7. 如實施例第6項之化合物，其中R1 為：
實施例8. 如實施例第7項之化合物，其中R1 為： 其中R6 為C1-6 烷基，其視情況經羥基、-CF2 、-CF3 或鹵素取代。
實施例9. 如實施例第7項之化合物，其中R6 為甲基。
實施例10. 如實施例第2項之化合物，其中A為i。
實施例11. 如實施例第10項之化合物，其中A為視情況經取代之C3-7 環烷基(C1-6 )j 烷基-。
實施例12. 如實施例第11項之化合物，其中j為0。
實施例13. 如實施例第12項之化合物，其中R2 為： 其中v為零、一、二、三或四；X、Y及Z各自獨立地為不存在的或-CH2 -，且其中若存在，則X、Y及Z之各者上之H之零、一或兩者可為R5 。
實施例14. 如實施例第12項之化合物，其中R2 為： 其中v為零、一、二、三或四；X、Y及Z各自獨立地為不存在的或-CH2 -，且其中若存在，則X、Y及Z之各者上之H之零、一或兩者可為R5 。
實施例15. 如實施例第12項之化合物，其中R2 為：，其中v為零、一或二。
實施例16. 如實施例第15項之化合物，其中R2 為：，其中v為零、一或二。
實施例17. 如實施例第16項之化合物，其中R5 不為氫，且R2 為：
實施例18. 如實施例第15項之化合物，其中R2 為：，其中v為零、一或二。
實施例19. 如實施例第18項之化合物，其中R5 不為氫，且R2 為：
實施例20. 如實施例第11項之化合物，其中該環烷基為雙環、螺環或不飽和的。
實施例21. 如實施例第13項之化合物，其中R5 係選自由以下所組成之群組：氫、氟、氰基、NH2 -C(O)-、烷基-(C1-6 )烷氧基-、視情況經取代之C2-9 雜芳基及氰基(C1-6 )烷基。
實施例22. 如實施例第21項之化合物，其中R5 為氟或氰基。
實施例23. 如實施例第21項之化合物，其中R5 為氫。
實施例24. 如實施例第12項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例25. 如實施例第21項之化合物，其中至少一個R5 為視情況經取代之C2-9 雜芳基或氰基(C1-6 )烷基。
實施例26. 如實施例第25項之化合物，其中至少一個R5 為氰基(C1-6 )烷基。
實施例27. 如實施例第26項之化合物，其中至少一個R5 為氰基-CH2 -。
實施例28. 如實施例第27項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例29. 如實施例第21項之化合物，其中至少一個R5 為視情況經取代之C2-9 雜芳基。
實施例30. 如實施例第29項之化合物，其中該視情況經取代之C2-9 雜芳基為含有1或2個氮原子之視情況經取代之5員雜芳基。
實施例31. 如實施例第30項之化合物，其中該視情況經取代之5員雜芳基為視情況經取代之吡唑。
實施例32. 如實施例第31項之化合物，其中該視情況經取代之吡唑為 其中波形線表示與環丙基環之連接點；且其中RB 為：i. 分支鏈或直鏈C1-6 烷基，其中該烷基可視情況經一至四個羥基、鹵素、腈、胺基、-O-(C1-6 )烷基、-O-(C1-6 )烷基胺基-、二(C1-6 )烷基胺基-或-NRy (CO)Rz 取代，其中Ry 及Rz 在各情況下獨立地為氫或C1-6 烷基；ii. 或-SO2 R’，其中R’為C1-6 烷基。
實施例33. 如實施例第32項之化合物，其中RB1 為視情況經取代之直鏈C1-6 烷基。
實施例34. 如實施例第33項之化合物，其中該視情況經取代之直鏈C1-6 烷基為甲基。
實施例35. 如實施例第32項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例36. 如實施例第2項之化合物，其中A為-NRg Rh 。
實施例37. 如實施例第36項之化合物，其中Rg 為H或甲基。
實施例38. 如實施例第37項之化合物，其中Rg 為H。
實施例39. 如實施例第38項之化合物，其中m為0。
實施例40. 如實施例第39項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例41. 如實施例第37項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例42. 如實施例第2項之化合物，其中A為R9 -(C1-6 烷基)-。
實施例43. 如實施例第42項之化合物，其中該R9 -(C1-6 烷基)-為R9 -(C1-4 烷基)-，其中該烷基為直鏈或分支鏈且可視情況經取代。
實施例44. 如實施例第43項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例45. 如實施例第2項之化合物，其中A為B-(C1-6 烷基)t -。
實施例46. 如實施例第45項之化合物，其中t為0。
實施例47. 如實施例第46項之化合物，其中B為C3-9 雜芳基。
實施例48. 如實施例第47項之化合物，其中該雜芳基係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二或三個取代基R10 、R10’ 及R10” 取代。
實施例49. 如實施例第48項之化合物，其中該雜芳基為：
實施例50. 如實施例第49項之化合物，其中該雜芳基為：，其中R10 為C1-6 烷基。
實施例51. 如實施例第50項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例52. 如實施例第2項之化合物，其中R2 為D。
實施例53. 如實施例第52項之化合物，其中z為0。
實施例54. 如實施例第53項之化合物，其中該雜芳基係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二或三個取代基R14 、R15 及R16 取代。
實施例55. 如實施例第54項之化合物，其中該雜芳基為：
實施例56. 如實施例第55項之化合物，其中該雜芳基為：
實施例57. 如實施例第56項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例58. 如實施例第53項之化合物，其中D為視情況經取代之C6-10 芳基。
實施例59. 如實施例第58項之化合物，其中該視情況經取代之C6-10 芳基為視情況經取代之苯基。
實施例60. 如實施例第59項之化合物，其中該視情況經取代之苯基經視情況經取代之分支鏈或直鏈C1-6 烷基或C3-7 雜環基取代。
實施例61. 如實施例第60項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例62. 如實施例第2項之化合物，其中R1’ 為視情況經取代之C2-9 雜芳基。
實施例63. 如實施例第62項之化合物，其中該視情況經取代之C2-9 雜芳基為含有1或2個氮原子之視情況經取代之5員雜芳基。
實施例64. 如實施例第63項之化合物，其中該5員雜芳基為吡唑。
實施例65. 如實施例第2項之化合物，其中R1’ 為鹵素。
實施例66. 如實施例第65項之化合物，其中該鹵素為氟或氯。
實施例67. 如實施例第2項之化合物，其中R1’ 為視情況經取代之C1-6 烷基、C2-6 烯基或C3-6 環烷基。
實施例68. 如實施例第67項之化合物，其中R1’ 為視情況經取代之C1-6 烷基。
實施例69. 如實施例第68項之化合物，其中R1’ 為視情況經取代之甲基或乙基。
實施例70. 如實施例第69項之化合物，其中R1’ 為甲基。
實施例71. 如實施例第64項、第66項或第67項中任一項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例72. 如實施例第1項之化合物，其中R1 為視情況經取代之C6-10 芳基。
實施例73. 如實施例第72項之化合物，其中該視情況經取代之C6-10 芳基為視情況經取代之苯基。
實施例74. 如實施例第73項之化合物，其中該視情況經取代之苯基經視情況經取代之分支鏈或直鏈C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、鹵素、氰基、羥基、胺基、-CF3 或-(CO)NRc Rd 取代；其中Rc 及Rd 如上所述。
實施例75. 如實施例第74項之化合物，其具有以下結構之一者：
實施例76. 一種醫藥組成物，其包含如實施例第1項至第75項中任一項之化合物及醫藥學上可接受之載劑。
實施例77. 如實施例第76項之醫藥組成物，其中該組成物進一步包含化療劑。
實施例78. 如實施例第77之醫藥組成物，其中該化療劑為免疫治療劑。
實施例79. 一種用於抑制HPK1之方法，該方法包含使HPK1與有效量之如實施例第1項至第75項中任一項之化合物或如實施例第76項至第78項中任一項之醫藥組成物接觸。
實施例80. 一種用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法，其中該方法包含向該受試者投與有效量之如實施例第1項至第75項中任一項之化合物或如實施例第76項至第78項中任一項之醫藥組成物。
實施例81. 如實施例第80項之方法，其中相對於投與該化合物或醫藥組成物之前，該受試者中之T細胞具有以下之至少一者：促發增強、活化增強、遷移增強、增殖增強、存活增強及細胞溶解活性增強。
實施例82. 如實施例第81項之方法，其中該T細胞活化之特徵在於相對於投與該化合物或醫藥組成物之前，γ-IFN+ CD8 T細胞頻率升高或由T細胞產生之IL-2或顆粒酶B水準增加。
實施例83. 如實施例第81項之方法，其中相對於投與化合物或醫藥組成物之前，T細胞之數目升高。
實施例84. 如實施例第81項至第83項中任一項之方法，其中該T細胞為抗原特異性CD8 T細胞。
實施例85. 如實施例第84項之方法，其中相對於投與該化合物或醫藥組成物之前，該受試者中之抗原呈現細胞之成熟及活化增強。
實施例86. 如實施例第85項之方法，其中該抗原呈現細胞為樹突細胞。
實施例87. 如實施例第85項之方法，其中該抗原呈現細胞之成熟之特徵在於CD83+ 樹突細胞之頻率增加。
實施例88. 如實施例第85項之方法，其中該抗原呈現細胞之活化之特徵在於樹突細胞上CD80及CD86之表現升高。
實施例89. 如實施例第79項至第88項中任一項之方法，其中該受試者患有癌症。
實施例90. 一種用於治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包含向有需要之受試者投與有效量之如實施例第1項至第75項中任一項之化合物或如實施例第76項至第78項中任一項之醫藥組成物。
實施例91. 如實施例第90項之方法，其中該HPK1依賴性病症為癌症。
實施例92. 如實施例第89項或第91項之方法，其中該癌症包含至少一種選自由以下所組成之群組之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰腺癌、血液學惡性腫瘤及腎細胞癌。
實施例93. 如實施例第89項、第91項或第92項中任一項之方法，其中該癌症之T細胞浸潤水準升高。
實施例94. 如實施例第89項、第91項、第92項或第93項中任一項之方法，其中相對於投與該化合物或組成物之前，該受試者中之該癌細胞之MHC I類抗原表現選擇性地升高。
實施例95. 如實施例第89項、第91項、第92項、第93項或第94項中任一項之方法，其中該方法進一步包含向該受試者投與化療劑。
實施例96. 如實施例第95項之方法，其中該化療劑與該化合物或該組成物同時向該受試者投與。
實施例97. 如實施例第95項之方法，其中該化療劑在投與該化合物或該組成物之前向該受試者投與。
實施例98. 如實施例第95項之方法，其中該化療劑在投與該化合物或該組成物之後向該受試者投與。
<110> 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
<120> 作為HPK1之抑制劑的啶
<130> P34139-WO-2
<140> 欲指定
<141>
<150> PCT/CN2017/078792
<151> 2017-03-30
<150> PCT/CN2018/076909
<151> 2018-02-15
<160> 4
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 2502
<212> DNA
<213> 智人
<400> 1
<210> 2
<211> 833
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
<210> 3
<211> 2466
<212> DNA
<213> 智人
<400> 3
<210> 4
<211> 821
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4

Claims (62)

  1. 一種式I化合物： 或其醫藥學上可接受之鹽，其中，R 1 為C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基、C 6-10 芳基、-C≡C-C 2-9 雜芳基、-C(O)N(R j’ )(C 2-9 雜芳基)、-C(O)N(R j’ )(C 2-9 雜環基)、-CH(R j’ )-O-(C 2-9 雜芳基)、C 3-9 環烷基、C 1-6 烷基或氫；其中各R j’ 獨立地為氫或C 1-6 烷基；其中R 1 之該C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基獨立地具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中R 1 之該C 1-6 烷基、C 3-9 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；其中R 1 之該C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基或C 2-9 雜環基與該等取代基之兩者一起可形成視情況經取代之雙環；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；R 1’ 為氫、C 1-6 烷基、C 2-6 烯基、C 3-6 環烷基、C 2-9 雜芳基或鹵素，其中該烷基、烯基、環烷基及雜芳基可視情況經羥基、鹵素或胺基取代；其條件為R 1 及R 1’ 之至少一者不為氫；R 2 為A-C(O)-或D； A為C 1-6 烷基、C 2-6 烯基、C 2-6 炔基、C 3-7 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基、(C 3-7 環烷基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 6-10 芳基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 2-9 雜芳基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 2-9 雜環基)-(C 1-6 伸烷基)-、-NR g R h 或-OR h ；其中A之該C 1-6 烷基、C 3-9 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；R g 為H或視情況經一至四個取代基取代之C 1-6 烷基，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基；-CHF 2 及-CF 3 ；R h 為C 1-6 烷基、C 3-7 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基、(C 3-7 環烷基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 6-10 芳基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 2-9 雜芳基)-(C 1-6 伸烷基)-或(C 2-9 雜環基)-(C 1-6 伸烷基)-；其中R h 之該C 1-6 烷基、C 3-7 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；D為H、C 1-6 烷基、C 3-7 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基、(C 3-7 環烷基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 6-10 芳基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 2-9 雜芳基)-(C 1-6 伸烷基)-、(C 2-9 雜環基)-(C 1-6 伸烷基)-或(C 3-7 環烷基)-S(O) 2 -；其中D之該C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基獨立地具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中D之該C 1-6 烷基、C 3-7 環烷基、C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基及C 2-9 雜環基視情況獨立地經一、二、三、四或五個取代基取代；其中連接至不同原子之該等取代基之兩者與其所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環視情況經取代；且其中該雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基；且R 2’ 為H或視情況經取代之C 1-6 烷基。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R 1 為視情況經取代之C 2-9 雜芳基或C 2-9 雜環基。
  3. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R 1 係選自由以下所組成之群組： 其各者視情況經取代。
  4. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R 1 係選自由以下所組成之群組： 及 ；其各者視情況經取代。
  5. 如申請專利範圍第4項之化合物，其中R 1 為： 其中R 6 、R 7 及R 8 各自獨立地選自由以下所組成之群組：i. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、C 1-6 烯基、C 1-6 伸烯基及C 3-9 環烷基，其中該烷基、烯基、伸烯基及環烷基視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、氰基、C 3-7 環烷基、C 1-6 烷氧基、-S(O)R’、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”、-C(O)NR’R”及-NR’C(O)R”，其中R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基；ii. NR a R b -C(O)-，其中R a 及R b 各自獨立地為氫或C 1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF 2 或-CF 3 取代；iii. C 1-6 烷氧基；iv. 鹵素；v. 氰基； vi. 羥基；vii. 胺基；viii. 二(C 1-6 烷基)胺基；ix. 單(C 1-6 烷基)胺基；x. -NR c C(O)R d ，其中R c 及R d 獨立地為H或C 1-6 烷基；xi. -CF 3 ；xii. -CHF 2 ；xiii. -SO 2 R’，其中R’為H或C 1-6 烷基；xiv. -SO 2 NR’R”，其中R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基；xv. -C(O)NR c R d ；其中R c 及R d 獨立地為H或C 1-6 烷基；xvi. -C(O)OR e ；其中R e 為H、C 1-6 烷基或CH 2 -芳基；xvii. C 3-5 雜環基、C 6-10 芳基、-(C 1-6 烷基)(C 6-10 芳基)或C 2-9 雜芳基，其中該雜環基、芳基或雜芳基可視情況經C 1-6 烷基、C 6-10 芳基或-C(O)OR e 取代；其中R e 為H、C 1-6 烷基或CH 2 -芳基；xviii. -O-(C 2-9 雜芳基)；xix. -NR’S(O) k’ R”其中k’為1或2，且R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基；其中R 1 之該C 6-10 芳基、C 2-9 雜芳基或C 2-9 雜環基與R 6 、R 7 及R 8 之兩者一起可形成雙環；且其中該芳基、雜芳基或雜環基中嵌入之碳與其所結合之氧一起可形成羰基。
  6. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中R 1 為：
  7. 如申請專利範圍第6項之化合物，其中R 1 為：
  8. 如申請專利範圍第7項之化合物，其中R 1 為： 其中R 6 、R 7 及R 8 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫、羥基、胺基、C 1-6 烷基、C 1-6 烷氧基及單(C 1-6 烷基)胺基；或，R 6 、R 7 及R 8 之兩者可形成雙環。
  9. 如申請專利範圍第8項之化合物，其中R 6 為C 1-6 烷基；R 7 為氫、胺基或單(C 1-6 烷基)胺基；且R 8 為氫、羥基或C 1-6 烷氧基；或，R 6 及R 7 一起形成雙環；或，R 7 及R 8 一起形成雙環。
  10. 如申請專利範圍第9項之化合物，其中R 6 為甲基。
  11. 如申請專利範圍第9項或第10項之化合物，其中R 7 為胺基。
  12. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R 1 為
  13. 如申請專利範圍第1項至第12項中任一項之化合物，其中R 2 為-A-C(O)-。
  14. 如申請專利範圍第13項之化合物，其中A為： i. (C 3-7 環烷基)(C 1-6 烷基) j -或(C 2-9 雜環基)(C 1-6 烷基) j -，其中j為1或0；且其中該環烷基或雜環基可視情況經R 5 之一、二、三或四者取代，其中R 5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C 1-6 烷基)-、-CF 3 、-CHF 2 、羥基(C 1-6 烷基)、鹵基(C 1-6 烷基)、羥基、(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-、-(C 1-6 烷基)-NHC(O)-(C 1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、胺基(C 1-6 烷基)、C 1-6 烷氧基、CH 3 CO 2 -(C 1-6 烷基)-、-NR’SO 2 R”、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、視情況經取代之C 2-9 雜芳基、視情況經取代之C 2-9 雜環基、視情況經取代之C 6-10 芳基、視情況經取代之C 3-9 環烷基-C(O)-及NR e R f -C(O)-(C 1-6 烷基) k -，其中該C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基及C 6-10 芳基可視情況經C 1-6 烷基或(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-取代，其中該(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基，其中R e 及R f 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，或R e 及R f 與其各自所結合之氮一起可形成C 3-7 環烷基，該C 3-7 環烷基可視情況經分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、C 3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF 3 、-CHF 2 或羥基取代；且k為1或0；或，該環烷基或雜環基與R 5 之兩者一起形成雙環或螺環，其中連接至不同碳之R 5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成雙環，或連接至同一碳之R 5 之兩者與其各自所連接之碳一起形成螺環，其中該雙環或螺環可經如上所述之R 5 之一、二、三或四者取代；ii. -NR g R h ，其中 R g 為H或分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，其中該烷基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基；-CHF 2 及-CF 3 ；R h 係選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、氰基、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、-CHF 2 、-CF 3 或NR e’ R f’ -C(O)-取代，其中R e’ 及R f’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C 1-6 烷基；及b. (C 3-7 環烷基)(C 1-6 烷基) m -、(C 2-9 雜芳基)(C 1-6 烷基) m -、(C 6-10 芳基)(C 1-6 烷基) m -或(C 2-9 雜環基)(C 1-6 烷基) m -，其中m為1或0；且其中該環烷基、雜芳基、芳基或雜環基可視情況經R 5’ 之一或兩者取代，其中R 5’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C 1-6 烷基)-、-CF 3 、-CHF 2 、羥基(C 1-6 烷基)、鹵基(C 1-6 烷基)、羥基、C 1-6 烷氧基、胺基、胺基(C 1-6 烷基)及NR i R j -C(O)-(C 1-6 烷基) k’ -，其中R i 及R j 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，且k’為1或0；iii. R 9 -(C 1-6 烷基)-，其中R 9 係選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、氰基、C 1-6 烷氧基、-NR o R p 、NR o’ R p’ -C(O)-；其中R o 、R p 、R o’ 及R p’ 各自獨立地為氫或分支鏈或直鏈C 1-6 烷基；iv. B-(C 1-6 烷基) t -，其中B為C 3-9 雜芳基或C 3-7 雜環基，其中該雜芳基或雜環基具有1至3個選自O、S及N之雜原子；且其中該雜芳基或雜環基可視情況經R 10 、R 10’ 及R 10” 之一、二或三者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組： a. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基或C 3-4 環烷基，其中該烷基或環烷基可視情況經羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、氰基、-C(O)NR q R r 或-NR q C(O)R r 取代，其中R q 及R r 獨立地為H或C 1-6 烷基；b. C 3-7 環烷基；c. C 3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF 2 ；g. -CF 3 ；h. 胺基；i. 二(C 1-6 烷基)胺基；j. 單(C 1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -C(O)NR s R t ，其中R s 及R t 獨立地為H或C 1-6 烷基；及m. -NR s C(O)R t ，其中R s 及R t 獨立地為H或C 1-6 烷基；且t為1或0；v. (C 6-10 芳基) q’ -(C 1-6 烷基) n -O-或(C 2-7 雜環基)-O-，其中該芳基或雜環基可視情況經R 11 、R 12 及R 13 之一、二或三者取代，其各者係選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、氰基、C 1-6 烷氧基、乙醯基及NR u R v -；其中R u 及R v 各自獨立地為H或分支鏈或直鏈C 1-6 烷基；其中若存在，則該雜環基中嵌入之硫與一個氧一起可形成亞碸，或與兩個氧一起可形成碸；且n為1或0，q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1；或 vi. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、C 1-6 烯基、C 1-6 伸烯基，其中該烷基、烯基及伸烯基可視情況經羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、氰基、C 3-7 環烷基、C 1-6 烷氧基、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”取代，其中R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基。
  15. 如申請專利範圍第14項之化合物，其中A為(C 3-7 環烷基)(C 1-6 烷基) j -、(C 2-9 雜環基)(C 1-6 烷基) j -、(C 6-10 芳基) q’ -(C 1-6 烷基) n -O-或(C 2-7 雜環基)-O-，其中該環烷基、烷基、芳基或雜環基可視情況經取代；j為1或0；且n為1或0，且q’為1或0，其條件為n及q’之一者為1。
  16. 如申請專利範圍第13項之化合物，其中A為視情況經取代之C 3-7 環烷基。
  17. 如申請專利範圍第1項至第12項中任一項之化合物，其中R 2 為： 其中v為0、1、2或3；且R 5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：C 1-6 烷基、鹵素、氰基、氰基(C 1-6 烷基)-、-CF 3 、-CHF 2 、羥基(C 1-6 烷基)、鹵基(C 1-6 烷基)、羥基、(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-、-(C 1-6 烷基)-NHC(O)-(C 1-6 烷基)、胺基、-NR’C(O)R”、乙醯基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、胺基(C 1-6 烷基)、C 1-6 烷氧基、CH 3 CO 2 -(C 1-6 烷基)-、-NR’SO 2 R”、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”，-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、視情況經取代之C 2-9 雜芳基、視情況經取代之C 2-9 雜環基、視情況經取代之C 6-10 芳基、視情況經取代之C 3-9 環烷基、視情況經取代之C 3-9 環烷基-C(O)-及NR e R f -C(O)-(C 1-6 烷基) k -， 其中該C 2-9 雜芳基、C 2-9 雜環基及C 6-10 芳基可視情況經C 1-6 烷基或(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-取代，其中該(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-可視情況經胺基取代，其中在各情況下，R’及R”獨立地為H或C 1-6 烷基，其中R e 及R f 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，或R e 及R f 與其各自所結合之氮一起可形成C 3-7 環烷基，該C 3-7 環烷基可視情況經取代(例如，經分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、C 3-4 環烷基、鹵素、氰基、-CF 3 、-CHF 2 或羥基取代)；且k為1或0。
  18. 如申請專利範圍第17項之化合物，其中R 5 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：C 1-6 烷基、氟、氰基、NH 2 -C(O)-、烷基-(C 1-6 )烷氧基-、C 2-9 雜芳基及氰基(C 1-6 )烷基；其中各烷基及C 2-9 雜芳基視情況經取代。
  19. 如申請專利範圍第18項之化合物，其中至少一個R 5 為C 1-6 烷基。
  20. 如申請專利範圍第19項之化合物，其中至少一個R 5 為甲基。
  21. 如申請專利範圍第19項或第20項之化合物，其中R 5 之一者為視情況經取代之C 2-9 雜芳基。
  22. 如申請專利範圍第21項之化合物，其中該視情況經取代之C 2-9 雜芳基為視情況經取代之吡唑。
  23. 如申請專利範圍第22項之化合物，其中該視情況經取代之吡唑為 其中波形線表示與環丙基環之連接點；且其中R B1 為C 1-6 烷基。
  24. 如申請專利範圍第18項之化合物，其中R 2 為：
  25. 如申請專利範圍第1項至第12項中任一項之化合物，其中R 2 為D。
  26. 如申請專利範圍第25項之化合物，其中D為i. (C 6-10 芳基)(C 1-6 烷基) z -、(C 3-7 環烷基)(C 1-6 烷基) z -或(C 3-9 雜芳基)(C 1-6 烷基) z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、環烷基或雜芳基可視情況經R 14 、R 15 、R 16’ 及R 16 之一、二、三或四者取代，其各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基或C 2-6 烯基，其中該烷基或烯基可視情況經一至四個取代基取代，該等取代基獨立地選自由以下所組成之群組：羥基、鹵素、-CHF 2 、-CF 3 、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、氰基C 1-6 烷氧基、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”、-C(O)NR w R x 及-NR w C(O)R x ，其中R w 及R x 獨立地為H或C 1-6 烷基；其中連接至不同原子之R 14 、R 15 、R 16’ 及R 16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環可經如上所述之R 14 、R 15 、R 16’ 及R 16 之一、二、三或四者取代；b. C 3-7 環烷基；c. C 3-7 雜環基，其中該雜環基可視情況經羥基、乙醯基或氧雜環丁烷取代； d. 羥基；e. 鹵素；f. -CHF 2 ；g. -CF 3 ；h. 胺基；i. 二(C 1-6 烷基)胺基；j. 單(C 1-6 烷基)胺基；k. 氰基；l. -NR y C(O)R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；m. -C(O)NR y R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；n. -SO2NR y R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；及o. -C(O)OR y ，其中R y 為H或C 1-6 烷基；且z為1或0；ii. C 3-7 環烷基-SO 2 -，其中該環烷基可視情況經R 6’ 之一或兩者取代，其中R 6’ 在各情況下獨立地選自由以下所組成之群組：分支鏈或直鏈C 1-6 烷基、鹵素、氰基、-CF 3 、-CHF 2 、羥基(C 1-6 烷基)、鹵基(C 1-6 烷基)、羥基、(C 1-6 烷基)-O-(C 1-6 烷基)-、C 1-6 烷氧基、胺基、二(C 1-6 烷基)胺基、單(C 1-6 烷基)胺基、胺基(C 1-6 烷基)及NR e’ R f’ -C(O)-(C 1-6 烷基) n -，其中R e’ 及R f’ 獨立地選自由以下所組成之群組：氫及分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，且n為1或0；或iii. H、C 1-6 烷基或吡咯啶，其中該烷基視情況經鹵素取代；
  27. 如申請專利範圍第26項之化合物，其中D為(C 6-10 芳基)(C 1-6 烷基) z -、(C 3-7 環烷基)(C 1-6 烷基) z -或(C 3-9 雜芳基)(C 1-6 烷基) z -，其中該雜芳基具有1至4個選自O、S及N之雜原子；且其中該芳基、環烷基或雜芳基可視 情況經一、二、三或四個取代基取代；其中連接至不同原子之該等取代基之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環，其中該雙環或三環視情況經取代。
  28. 如申請專利範圍第27項之化合物，其中D為視情況經取代之(C 3-9 雜芳基)(C 1-6 烷基) z -，且z為0或1。
  29. 如申請專利範圍第27項之化合物，其中該C 3-9 雜芳基係選自由以下所組成之群組： 其各者可視情況經一、二或三個取代基取代。
  30. 如申請專利範圍第27項之化合物，其中該C 3-9 雜芳基係選自由 及 組成之群組；其各者可視情況經一、二或三個取代基取代。
  31. 如申請專利範圍第30項之化合物，其中該C 3-9 雜芳基為： 其中R 14 、R 15 及R 16 之各者獨立地選自由以下所組成之群組：a. 分支鏈或直鏈C 1-6 烷基，其中該烷基可視情況經羥基、鹵素、-CF 2 、-CF 3 、胺基、二(C 1-6 )烷基胺基、單(C 1-6 )烷基胺基、氰基C 1-6 烷氧 基、-SO 2 R’、-SO 2 NR’R”、-(CO)NR w R x 或-NR w (CO)R x 取代，其中R w 及R x 獨立地為H或C 1-6 烷基，或其中如本文所述之R 14 、R 15 及R 16 之兩者在連接至不同原子時與其各自所連接之原子一起形成雙環；b. C 3-7 環烷基；c. C 3-7 雜環基；d. 羥基；e. 鹵素；f. -CF 2 ；g. -CF 3 ；h. 胺基；i. 二(C 1-6 )烷基胺基；j. 單(C 1-6 )烷基胺基；k. 氰基；l. -NR y (CO)R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；m. -(CO)NR y R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；n. -SO 2 NR y R z ，其中R y 及R z 獨立地為H或C 1-6 烷基；及o. -(CO)OR y ，其中R y 為H或C 1-6 烷基；其中連接至不同原子之R 14 、R 15 及R 16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環；其中該雙環或三環視情況經取代。
  32. 如申請專利範圍第31項之化合物，其中連接至不同原子之R 14 、R 15 及R 16 之兩者與其各自所連接之原子一起形成雙環或三環。
  33. 如申請專利範圍第32項之化合物，其中該雙環為 其中X’及Y’各自獨立地為C、N、S或O；且其中該雙環視情況經R 17 、R 18 、R 19 及R 20 取代，其中R 17 、R 18 、R 19 及R 20 各自獨立地選自由以下所組成之群組：氫、羥基、胺基及C 1-6 烷基，且其中R 17 、R 18 、R 19 及R 20 之兩者與其所連接之碳一起可形成C 3 -C 5 螺環或C 2-9 雜芳基環。
  34. 如申請專利範圍第33項之化合物，其中X’或Y’之至少一者為N。
  35. 如申請專利範圍第34項之化合物，其中該雙環為：
  36. 如申請專利範圍第25項之化合物，其中D為具有式 之5員雜芳基或具有式 之6員雜芳基，其中：Q為NR 20 、CR 20 、O或S；各T獨立地為N或CR 21 ； 各Z獨立地為N或C，其條件為僅一個Z為N；各R 20 及R 21 獨立地為氫、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵素、羥基或氰基；且R 22 及R 23 與其所連接之原子一起形成雙環；其中該雙環可含有一或多個選自N、S及O之雜原子；且其中該雙環視情況經一、二、三、四或五個R 30 取代；其中各R 30 獨立地為C 1-6 烷基、C 2-6 烯基、C 3-7 環烷基、C 3-7 雜環基、鹵素、氰基、側氧基、-NR 31 R 32 、-SO 2 NR 31 R 32 、-C(O)NR 31 R 32 、-C(O)OR 33 、-OR 33 、-NR 33 C(O)R 34 、-NR 33 SO 2 R 35 或-SO 2 R 35 ；其中R 30 之該C 1-6 烷基、C 2-6 烯基、C 3-7 環烷基及C 3-7 雜環基視情況經一至四個R 40 取代；或，兩個R 30 基與其所連接之母部分一起形成視情況經一至四個R 40 取代之環；各R 31 及R 32 獨立地為氫或C 1-6 烷基；或，R 31 及R 32 與其所連接之氮原子一起形成視情況經一至四個R 40 取代之C 3-7 雜環基；各R 33 及R 34 獨立地為氫或C 1-6 烷基；R 35 為C 1-6 烷基；各R 40 獨立地選自由以下所組成之群組：鹵素、氰基、側氧基、-NR 41 R 42 、-SO 2 NR 41 R 42 、-C(O)NR 41 R 42 、-C(O)OR 43 、-OR 43 、-NR 43 C(O)R 44 、-NR 43 SO 2 R 45 或-SO 2 R 45 ；C 1-6 烷基、C 1-6 鹵烷基[例如，-CHF 2 或-CF 3 ]、C 2-9 雜芳基、C 6-10 芳基、側氧基；或，兩個R 40 基與其所連接之母部分一起形成視情況經一至三個取代基取代之環，該等取代基選自C 1-6 烷基、C 1-6 鹵烷基、羥基及側氧基；各R 41 及R 42 獨立地為氫或C 1-6 烷基；或，R 41 及R 42 與其所連接之氮原子一起形成視情況經一至三個取代基取代之C 3-7 雜環基，該等取代基選自C 1-6 烷基、C 1-6 鹵烷基、羥基及側氧基； 各R 33 及R 34 獨立地為氫或C 1-6 烷基；且R 35 為C 1-6 烷基。
  37. 如申請專利範圍第36項之化合物，其中D為 其中q為0、1、2、3、4、5或6；R 36 獨立地為氫或R 30 ；且R 20 及R 30 如在申請專利範圍第36項中所定義。
  38. 如申請專利範圍第378項之化合物，其中D為 其中R 36 獨立地為氫或C 1-6 烷基；且R 20 為氫。
  39. 如申請專利範圍第36項之化合物，其中D為 其中p為0、1、2、3或4；R 36 獨立地為氫或R 30 ；且R 20 及R 30 如在申請專利範圍第36項中所定義。
  40. 如申請專利範圍第36項之化合物，其中D為 其中X為CH 2 、N、O或S；n為1、2、3或4；p為0、1、2、3或4；R 36 為氫或R 30 ；且R 20 及R 30 如在申請專利範圍第36項中所定義。
  41. 如申請專利範圍第36項之化合物，其中D為 其中q為0、1、2、3、4、5或6；G獨立地為C或N；G’獨立地為N、NR 46 、CR 47 、S或O；R 46 及R 47 獨立地為氫或R 40 ，且R 20 及R 40 如在申請專利範圍第36項中所定義。
  42. 如申請專利範圍第41項之化合物，其中D為
  43. 如申請專利範圍第36項之化合物，其中D為 其中Q為NR 20 、O或S；X為CR 38a R 38b 、NR 36 、S或O；X’為CR 39a R 39b 、NR 36 、S、SO 2 或O；R 36 、R 37a 、R 37b 、R 38a 及R 38b 獨立地為氫或R 30 ；R 39a 及R 39b 獨立地為氫或R 30 ，或R 39a 及R 39b 與其所連接之碳原子一起形成C 3-7 環烷基或C 3-7 雜環基；且R 20 及R 30 如在申請專利範圍第36項中所定義。
  44. 如申請專利範圍第43項之化合物，其中D為
  45. 如申請專利範圍第1項至第44項中任一項之化合物，其中R 1’ 為氫、鹵素或C 1-6 烷基。
  46. 如申請專利範圍第45項之化合物，其中R 1’ 為氫。
  47. 如申請專利範圍第1項至第46項中任一項之化合物，其中R 2’ 為氫。
  48. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係選自表1中之化合物號1至348或其醫藥學上可接受之鹽。
  49. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係選自表2中之化合物號349至429或其醫藥學上可接受之鹽。
  50. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係選自表3中之化合物號430至572或其醫藥學上可接受之鹽。
  51. 一種醫藥組成物，其包含如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；及醫藥學上可接受之載劑。
  52. 如申請專利範圍第51項之醫藥組成物，其中該組成物進一步包含化療劑。
  53. 一種抑制HPK1之方法，該方法包含使受試者中之HPK1與有效量之如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物接觸。
  54. 一種用於增強有需要之受試者中之免疫反應之方法，其中該方法包含向該受試者投與有效量之如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物。
  55. 如申請專利範圍第53項或第54項之方法，其中該受試者患有癌症。
  56. 一種用於治療HPK1依賴性病症之方法，該方法包含向有需要之受試者投與有效量之如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物。
  57. 如申請專利範圍第56項之方法，其中該HPK1依賴性病症為癌症。
  58. 如申請專利範圍第55項或第57項之方法，其中該癌症包含至少一種選自由以下所組成之群組之癌症：結腸直腸癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、卵巢癌、乳癌、胰腺癌、血液學惡性腫瘤及腎細胞癌。
  59. 如申請專利範圍第53項至第58項中任一項之方法，其中該方法進一步包含向該受試者投與化療劑。
  60. 如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物；其用於如申請專利範圍第53項至第59項中任一項之方法中。
  61. 如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物用於製造用於如申請專利範圍第53項至第59項中任一項之方法中的藥物之用途。
  62. 如申請專利範圍第1項至第50項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或如申請專利範圍第51項或第52項之醫藥組成物在如申請專利範圍第53項至第59項中任一項之方法中之用途。
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Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3601284B1 (en) * 2017-03-30 2023-12-27 F. Hoffmann-La Roche AG Naphthyridines as inhibitors of hpk1
US11312715B2 (en) * 2017-09-28 2022-04-26 Cstone Pharmaceuticals (Suzhou) Co., Ltd. Fused ring derivative as A2A receptor inhibitor
JP7167146B2 (ja) 2017-11-06 2022-11-08 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｐｋ１阻害剤として有用なイソフラノン化合物
PT3752501T (pt) 2018-02-13 2023-07-12 Gilead Sciences Inc Inibidores de pd-1/pd-l1
CN112041311B (zh) 2018-04-19 2023-10-03 吉利德科学公司 Pd-1/pd-l1抑制剂
SI3820572T1 (sl) 2018-07-13 2023-12-29 Gilead Sciences, Inc. Inhibitorji pd-1/pd-l1
TW202012405A (zh) * 2018-07-24 2020-04-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 萘啶化合物及其用途
CN113454070A (zh) * 2018-09-30 2021-09-28 豪夫迈·罗氏有限公司 噌啉化合物及用于hpk1依赖性疾患诸如癌症的治疗
TWI721623B (zh) 2018-10-31 2021-03-11 美商基利科學股份有限公司 經取代之6-氮雜苯并咪唑化合物
JP7273172B2 (ja) 2018-10-31 2023-05-12 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｐｋ１阻害活性を有する置換６－アザベンゾイミダゾール化合物
US20220047603A1 (en) 2018-12-11 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrrolopyridine-derivatives
WO2020193511A1 (en) 2019-03-26 2020-10-01 Janssen Pharmaceutica Nv Hpk1 inhibitors
MA55478A (fr) 2019-03-26 2022-02-09 Janssen Pharmaceutica Nv Inhibiteurs bicycliques de hpk1
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
CA3142513A1 (en) 2019-06-25 2020-12-30 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
WO2021004535A1 (en) * 2019-07-11 2021-01-14 Nanjing Zhengxiang Pharmaceuticals Co., Ltd. Cinnolines as inhibitors of hpk 1
CN110483402B (zh) * 2019-08-12 2021-07-23 上海毕得医药科技股份有限公司 一种3-溴-5-苯基-1h-吡唑的合成方法
US20220289712A1 (en) * 2019-08-21 2022-09-15 Beigene, Ltd. Aminopyrazine compounds as hpk1 inhibitor and the use thereof
US20210078996A1 (en) 2019-09-13 2021-03-18 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
JP2022549601A (ja) 2019-09-18 2022-11-28 武田薬品工業株式会社 ヘテロアリール血漿カリクレインインヒビター
JP2022548696A (ja) 2019-09-18 2022-11-21 武田薬品工業株式会社 血漿カリクレインインヒビター及びその使用
MX2022004370A (es) 2019-10-18 2022-05-06 Forty Seven Inc Terapias de combinacion para tratar sindromes mielodisplasicos y leucemia mieloide aguda.
JP2022552748A (ja) 2019-10-31 2022-12-19 フォーティ セブン， インコーポレイテッド 抗ｃｄ４７及び抗ｃｄ２０による血液癌の治療
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
CN115362003B (zh) 2019-12-24 2024-03-22 卡尔那生物科学株式会社 二酰基甘油激酶调节化合物
US11534441B2 (en) 2020-01-15 2022-12-27 Blueprint Medicines Corporation MAP4K1 inhibitors
CN115087488A (zh) 2020-02-14 2022-09-20 震动疗法股份有限公司 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途
CN113336747A (zh) * 2020-03-03 2021-09-03 轶诺(浙江)药业有限公司 新型hpk1抑制剂及其制备方法和应用
US12110294B2 (en) 2020-05-01 2024-10-08 Gilead Sciences, Inc. CD73 compounds
WO2021249913A1 (en) 2020-06-09 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft 2'-(quinolin-3-yl)-5',6'-dihydrospiro[azetidine-3,4'-pyrrolo[1,2-b]pyrazole]-1-carboxylate derivatives and related compounds as map4k1 (hpk1) inhibitors for the treatment of cancer
CN111965367A (zh) * 2020-07-23 2020-11-20 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院） Hip-55在作为gpcr偏向药物靶点中的应用
TW202220999A (zh) * 2020-09-28 2022-06-01 南韓商福斯特生物股份有限公司 作為造血前驅細胞激酶１（ｈｐｋ１）抑制劑的吲唑及其使用方法
US20240174683A1 (en) 2021-02-05 2024-05-30 Bayer Aktiengesellschaft Map4k1 inhibitors
EP4301756A1 (en) 2021-03-05 2024-01-10 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
CN115073308A (zh) * 2021-03-15 2022-09-20 苏州信礼发医药技术有限公司 1-氨甲基-1-环丙醇的合成方法
JP2024512497A (ja) * 2021-03-17 2024-03-19 武田薬品工業株式会社 血漿カリクレインの阻害剤
JP2024513011A (ja) 2021-03-29 2024-03-21 ニンバス サターン， インコーポレイテッド Ｈｐｋ１アンタゴニスト及びその使用
CN116888100A (zh) * 2021-04-08 2023-10-13 杭州阿诺生物医药科技有限公司 一种高活性的hpk1激酶抑制剂
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
CN117136190A (zh) * 2021-04-22 2023-11-28 浙江海正药业股份有限公司 芳香稠合环类衍生物及其制备方法和用途
TW202313094A (zh) 2021-05-18 2023-04-01 美商基利科學股份有限公司 使用ＦＬＴ３Ｌ—Ｆｃ融合蛋白之方法
US11926628B2 (en) 2021-06-23 2024-03-12 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
US11976072B2 (en) 2021-06-23 2024-05-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglycerol kinase modulating compounds
AU2022298639B2 (en) 2021-06-23 2024-11-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3220923A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3234909A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
IL312107A (en) 2021-10-29 2024-06-01 Gilead Sciences Inc CD73 compounds
WO2023107954A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibodies targeting 5t4 and uses thereof
US20230203202A1 (en) 2021-12-08 2023-06-29 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding nkg2d, cd16 and 5t4
EP4452415A1 (en) 2021-12-22 2024-10-30 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
CN118488946A (zh) 2021-12-22 2024-08-13 吉利德科学公司 Ikaros锌指家族降解剂及其用途
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
IL315083A (en) 2022-03-17 2024-10-01 Gilead Sciences Inc The IKAROS family of zinc fingers degrades and uses them
AU2023240346A1 (en) 2022-03-24 2024-09-19 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
WO2023193759A1 (en) * 2022-04-07 2023-10-12 Insilico Medicine Ip Limited Hpk1 antagonists and uses thereof
AU2023256670A1 (en) 2022-04-21 2024-10-17 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
WO2024006929A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2024003773A1 (en) * 2022-07-01 2024-01-04 Pfizer Inc. 2,7-naphthyridine compounds as mastl inhibitors
WO2024064668A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPα DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
WO2024064214A2 (en) * 2022-09-21 2024-03-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Synthesis of cyclopropane carboxylic acids
US20240254118A1 (en) 2022-12-22 2024-08-01 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2024215754A1 (en) 2023-04-11 2024-10-17 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
WO2024220917A1 (en) 2023-04-21 2024-10-24 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
SG163554A1 (en) 2005-07-01 2010-08-30 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
NZ583351A (en) 2007-08-15 2012-05-25 Cytokinetics Inc Modulate smooth muscle myosin and/or non-muscle myosin
BRPI0917891A2 (pt) 2008-08-25 2015-11-24 Amplimmune Inc antagonistas de pd-1 e métodos de utilização dos mesmos
KR101782570B1 (ko) 2008-12-09 2017-09-27 제넨테크, 인크. 항-ｐｄ-ｌ１ 항체 및 ｔ 세포 기능을 향상시키기 위한 그의 용도
WO2011066342A2 (en) 2009-11-24 2011-06-03 Amplimmune, Inc. Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
CA2992770A1 (en) 2009-11-24 2011-06-03 Medimmune Limited Targeted binding agents against b7-h1
EP2770998B1 (en) * 2011-10-27 2020-04-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Factor ixa inhibitors
MX359146B (es) * 2012-06-15 2018-09-17 Curegenix Inc Compuesto como inhibidor de señalización wnt, composición y uso de los mismos.
CN105142641A (zh) * 2013-03-12 2015-12-09 广州源生医药科技有限公司 用于治疗癌症的化合物
LT3322711T (lt) * 2015-06-25 2021-05-10 University Health Network Hpk1 inhibitoriai ir jų panaudojimo būdai
EP3601284B1 (en) * 2017-03-30 2023-12-27 F. Hoffmann-La Roche AG Naphthyridines as inhibitors of hpk1

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