TW201829409A

TW201829409A - 色氨酸羥化酶-１抑製劑製備方法

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Publication number: TW201829409A
Application number: TW106138813A
Authority: TW
Inventors: 史提芬德隆巴爾特; 丹尼爾芮戈柏
Original assignee: 瑞士商羅依凡特科學公司
Priority date: 2016-11-09
Filing date: 2017-11-09
Publication date: 2018-08-16
Also published as: US11708365B2; AR110150A1; DK3538530T3; CA3043442A1; CN110177790A; ES2911447T3; TWI762527B; JP7229917B2; CN115536661A; JP2023078126A; US20210139481A1; EP3538530A1; WO2018087602A1; US20190263815A1; CN110177790B; EP3538530B1; JP2019534313A

Abstract

本發明係一中間體與其鹽類。此中間體與其鹽類利於製備螺環化合物，而所述螺環化合物又為色胺酸羥化酶(TPH)，特別是同功型/異構體1(TPH1)的抑制劑。本發明也提供了中間體、鹽類、與TPH抑制劑之製備方法。

Description

色氨酸羥化酶-1抑製劑製備方法

本發明涉及一種製備用於製備螺環化合物的中間體的方法，所述螺環化合物是色氨酸羥化酶(TPH)，特別是同功型/異構體1(TPH1)的抑製劑，其可用於治療與末梢(外周)血清素相關的疾病或病症，例如包括胃腸道，心血管，肺部，炎症，代謝和低骨量疾病，以及血清素症候群和癌症。

血清素(5-羥色胺，5-HT)是一藉由在神經元、平滑肌和其他類型的細胞中作用，來調節中樞和末梢(外周)功能的神經傳導物質。5-HT參與了多項生理及心理作用的控制與調節。在中樞神經系統(CNS)中，5-HT具有調節心情、食慾及其他行為的功能。在腸胃系統中，5-HT扮演了促進腸胃蠕動的角色，並作為腸胃道及大腦間的感覺(如噁心感和飽腹感)的重要介質。有報導指出，末梢(外周)5-HT信號傳遞系統的失調涉及數種生理狀態，如骨質疏鬆症、癌症、心血管疾病、糖尿病、動脈粥樣硬化以及腸胃、肺部、炎症和肝臟疾病或病變等的病因相關。

現已確認存於脊椎動物體內有兩種TPH異構體(同功型)，即TPH1和TPH2。TPH1主要表達於松果體及非神經元組織，如位於腸胃道的腸親鉻細胞(EC細胞)。TPH2(在大腦中的主型)僅在神經元細胞中表達，如背側縫或腸肌神經叢細胞。與5-HT生物合成相關的末梢及中樞系統皆是隔離的，而5-HT無法通過血腦障壁。因此，5-HT的藥理作用可通過影響末梢(外周)TPH、即主要為腸道中TPH1的介質來調控。

近來有報導描述了新型螺環TPH1抑制因子的研發。此抑制因子有助於選擇性的降低腸道內5-HT含量，並藉以治療及預防與5-HT相關疾病(參閱如美國專利No.9,199,994，其內容全文於此做為參考文獻)。本發明之方法可用於製備美國專利No.9,199,994所描述之TPH1抑制因子，如(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-聯苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3-羧酸鹽((S)-ethyl 8-(2-amino-6-((R)-1-(5-chloro-[1,1'-biphenyl]-2-yl)-2,2,2-trifluoroethoxy)pyrimidin-4-yl)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3-carboxylate)。

本發明尤其提供了可增加I-(S)式異構化合物產量之方法：相對於I-(R)式異構化合物含量：本發明使用含I-(S)與I-(R)式兩種異構化合物的起始混合物，其方法包括：將起始混合物與2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)或其水合物進行反應。此反應於含醛環境下進行並產出混和鹽，即兩式異構化合物的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)；其中，與起始混和物中I-(S)與I-(R)式含量比例對照，產出的鹽混和物中，I-(S)式古洛糖酸鹽相對於I-(R)式古洛糖酸鹽的比例有所增高。本發明對其成分變項有所定義。

本發明進一步提供含有I-(S)與I-(R)式異構化合物的混和物，其所含之I(S)式異構化合物的鏡像異構物超越量約為90%或以上。

本發明更提供I-(S)或I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。

在隨附圖示與以下說明中描述了本發明的一個或多個實施例的細節。本發明的其他特色、宗旨及優點可於以下說明與隨附圖示及申請範圍中清楚顯見。

本發明尤其提供了可增加I-(S)式異構化合物產量之方法：

相對於I-(R)式異構化合物含量；其中R¹是C_1-6烷基，而Pg¹是氨基保護基。

把發明使用含I-(S)與I-(R)式兩種異構化合物的起始混合物，其方法包括：將起始混合物與2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)或其水合物進行反應。此反應於含醛環境下進行並產出混和鹽，即兩式異構化合物的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。

產出的鹽混和物中，與起始混和物中I-(S)與I-(R)式含量比例對照，I-(S)式古洛糖酸鹽相對於I-(R)式古洛糖酸鹽的比例有所增高。

在一些實施例中，使用於反應中的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽或其水合物是2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)。在一些實施例中，用約1莫耳當量的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸或其水合物進行反應；其莫耳當量是對比於在起始混和物中I-(S)與I-(R)式異構化合物相加的含量。

在一些實施例中所使用的醛是芳香族醛，如苯甲醛。相對於I-(S)與I-(R)式異構化合物相加，醛的使用量可為催化劑量。在一些實施例中，相對於起始混合物中的I-(S)與I-(R)式兩種異構體化合物相加的量，用小於1莫耳當量的醛進行反應，例如：小於1莫耳當量，小於0.8莫耳當量，小於0.6莫耳當量，小於0.4莫耳當量，或小於0.2莫耳當量或小於0.1莫耳當量。在一些實施例中，相對於起始混合物中的I-(S)與I-(R)式兩種異構體化合物相加的量，用約0.01~0.5莫耳當量的醛進行反應，例如：約0.01~0.5莫耳當量，約0.01~0.4莫耳當量，約0.01~0.3莫耳當量，約0.01~0.2莫耳當量，或約0.01~0.1莫耳當量或小於0.1莫耳當量。在進一步的實施例中，至少在反應過程中的某一步驟，反應作用可以在升高的溫度下進行。在一些實施例中，溫度可跨約35℃至45℃，約30℃至40℃，約25℃至35℃，約20℃至30℃，或約15℃至25℃。也可使用溶劑來進行反應，舉例而言，使用有機溶劑(如2-甲基四氫呋喃等類的乙醚溶劑)。

在一些實施例中，經純化後，I-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為90%或以上，約為95%或以上，約為96%或以上，約為97%或以上，約為98%或以上，或約為99%或以上。

在一些實施例中，經純化後，I-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量可跨約90%至99.9%，約95%至99.9%，約96%至99.9%，約97%至99.9%，約98%至99.9%，約99%至99.9%，或約99.5%至99.9%。

在一些實施例中，純化後的鹽混合物進一步與鹼反應，形成含I-(S)與I-(R)式異構化合物的游離基混合物：

在一些實施例中，游離鹼化反應時所使用的鹼含有鹼金屬，如碳酸鈉。相對於鹽混合物中古洛糖酸鹽的總和量，鹼的使用量可以是莫耳過量的(例如：相對於鹽混合物中古洛糖酸鹽總量，超過1莫耳當量)，或是任何可以將古洛糖酸鹽轉換為游離基的量。在一些實施例中，相對於鹽混合物中古洛糖酸鹽含量，鹼於游離鹼化反應中的使用量可為約1.1至約100莫耳當量，約1.1至約50莫耳當量，約1.1至約25莫耳當量，約1.1至約10莫耳當量，或約1.1至約5莫耳當量。在進一步的實施例中，鹼以水溶液形式混入，如10%水溶液，20%水溶液，30%水溶液，40%水溶液等等。游離鹼化反應可更進一步進行，並至少在反應過程中的某一步驟，在升高的溫度下進行。在一些實施例中，溫度可跨約10℃至約30℃，約15℃至約25℃，或約15℃至約20℃。也可使用溶劑來進行游離鹼化反應，例如含乙醚的有機溶劑(如呋喃類的2-甲基四氫呋喃)、烴類溶劑(如n-庚烷)，或兩種混合的溶劑。

在一些實施例中，游離鹼混合物裡I-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為90%或以上，約為95%或以上，約為97%或以上，約為98%或以上，約為99%或以上，或約為99.9%或以上。

在一些實施例中，游離鹼混合物裡I-(S)式異構化合物的鏡像異構物超越量可跨約90%至99.9%，約95%至99.9%，約96%至99.9%，約97%至99.9%，約98%至99.9%，約99%至99.9%，或約99.5%至99.9%。

本發明所述「C_i-j烷基」此一項式之單獨或組合使用，是指含有i至j個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基。在一些實施例中，烷基含有1至6，1至4，或1至3個碳原子。烷基部分的實例包括但不限於化學基團，如甲基、乙基、n-丙基、異丙基、n-丁基、s-丁基、t-丁基、n-戊基與n-己基。在一些實施例中，R¹為乙基。

本文所述之化合物與鹽類的製程可涉及各項化學基團的保護與去保護(如將氨基保護基用來保護和去保護胺基)。本領域的專業人員不需過於思索便可決定是否需要保護與去保護，以及選擇合適的保護基。保護基的化學作用理論，舉例而言，可見於由Wuts與Greene所著，約翰威立國際出版公司紐澤西分公司於2007年發行的「有機合成中的保護基」第四版等書中(Wuts and Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,4th ed.,John Wiley & Sons：New Jersey,2007)其內容全文於此做為參考文獻。根據各項取代基，可視需求調整本發明中所述保護基(選擇)以及構成與斷裂方法。

舉例而言，合適的Pg¹保護基包括但不限於Wuts與Greene所述之胺基保護基。此描述可見於約翰威立國際出版公司紐澤西分公司於2007年發行「有機合成中的保護基」第四版、第696~887頁中(尤其是872-887頁)；其內容全文於此做為參考文獻。氨基保護基的範例包括但不限於苄氧羰基(benzyloxycarbonyl,Cbz)、2,2,2-三氯乙氧基羰基(2,2,2-trichloroethoxycarbonyl,Troc)、2-三甲基甲矽烷基)乙氧基羰基(2-(trimethylsilyl)ethoxycarbonyl,Teoc))、2-(4-三氟甲基苯磺酰基)乙氧基羰基(2-(4-trifluoromethylphenylsulfonyl)ethoxycarbonyl,Tsc)、三級丁氧基羰基(tert-butoxycarbonyl,BOC)、1-金剛烷氧基羰基(1-adamantyloxycarbonyl,Adoc)、2-金剛烷基羰基(2-adamantylcarbonyl,2-Adoc)、2,4-二甲基戊-3-基氧基羰基(2,4-dimethylpent-3-yloxycarbonyl,Doc)、環己氧基羰基(cyclohexyloxycarbonyl,Hoc)、1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙氧基羰基 (1,1-dimethyl-2,2,2-trichloroethoxycarbonyl,TcBOC)、乙烯基(vinyl)、2-氯乙基(2-chloroethyl)、2-苯基磺酰基乙基(2-phenylsulfonylethyl)、烯丙基(allyl)、芐基(benzyl)，2-硝基芐基(2-nitrobenzyl)、4-硝基芐基(4-nitrobenzyl)、二苯基-4-吡啶基甲基(diphenyl-4-pyridylmethyl)、N’,N’-二甲肼基(N’,N'-dimethylhydrazinyl)、甲氧基(methoxymethyl)、三級丁氧基甲基(t-butoxymethyl，Bum)、芐氧甲基(benzyloxymethyl，BOM)、2-四氫吡喃基(2-tetrahydropyranyl，THP)、三(C1-4烷基)甲矽烷基(tri(C_1-4alkyl)silyl)(例如三(異丙基)甲矽烷基，tri(isopropyl)silyl)、1,1-二乙氧基甲基(1,1-diethoxymethyl)或N-新戊酰氧基甲基(N-pivaloyloxymethyl，POM)。在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

在一些實施例中，含有I-(S)與I(R)式異構化合物的起始混合物之製備，會根據與II式化合物反應之程序：

在有氫氣與氫化催化劑狀態下進行反應。其中R¹是C_1-6烷基，Pg¹是氨基保護基。在一些實施例中，R¹為乙基。在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

本文所述「氫化催化劑」一詞，是指適用於催化氫化反應(即，化合物與氫氣的反應)的金屬(如鈀、鎳或銠)催化劑。氫化催化劑的範例包括但不限於鈀碳、林德拉催化劑(沉積在碳酸鈣或硫酸鋇上的鈀)、阮內鎳(如阮內鎳A5000)、威爾金森催化劑、HRuCl(PPh₃)₃、RhCl(PPh₃)₃、[Rh(COD)Cl]₂、[Ir(COD)(PMePh₂)₂]⁺、[Rh(1,5-環辛二烯)(PPh₃)₂]⁺、PtO₂(亞當斯催化劑)、鈀碳及鈀黑等。氫化催化劑的其它實例可見於Nishimura所著、威立出版(西元2001年4月17日)之「異質觸媒氫化的有機合成」第1版(Nishimura,Heterogeneous Catalytic Hydrogenation for Organic Synthesis,Edition 1,Wiley，April 17,2001)和Chaloner所著、施普林格荷蘭分公司出版(西元2010年12月6日)之「同質氫化」第1版(Chaloner,Homogeneous Hydrogenation,Edition 1,Springer Netherlands，December 6,2010)兩文內容之全文於此做為參考文獻。

在一些實施例中，反應中使用的氫化催化劑是阮內鎳A5000。相對於II式化合物的使用量，氫化催化劑的使用量可為催化劑量。也可使用溶劑來進行氫化反應，例如質子性有機溶劑(如乙醇)、乙醚溶劑(例如四氫呋喃等呋喃溶劑)、或兩種混合的溶劑。在進一步的實施例中，至少在反應過程中的某一步驟，反應作用可以在升高的溫度下進行。在一些實施例中，溫度可跨約30℃至45℃，約30℃至40℃，或約35℃至40℃。

在一些實施例中，II式化合物的製備，會根據與III式化合物反應之程序：連同IV式的化合物：在含鹼環境中反應。其中R¹是C_1-6烷基，而Pg¹是氨基保護基。在一些實施例中，R¹為乙基。在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

在一些實施例中，與III式和IV式化合物反應所使用的鹼是胺鹼，如吡啶、三乙胺或N,N-二異丙乙胺。相對於IV式化合物的使用量，鹼的使用量可多於其莫耳數。在一些實施例中，相對於1莫耳當量的III式化合物，鹼的使用量可跨約1.1至約3莫耳當量，約1.1至約2莫耳當量，約1.4至約2莫耳當量，或約1.4至約1.8莫耳當量。在一些實施案中，使用約1莫耳當量的III式化合物相對於1莫耳當量的IV式化合物進行反應。在進一步的實施例中，至少在反應過程中的某一步驟，反應作用可以在約室溫或更低的溫度進行。在一些實施例中，溫度可跨約-10℃至約25℃，約-10℃至約20℃，約0℃至約20℃，約0℃至約15℃，或約10℃至約15℃。也可使用溶劑來進行反應，例如含烴類有機溶劑(如甲苯)、乙醚溶劑(如2-甲基四氫呋喃等呋喃溶劑)、或含兩種混合溶劑。

在一些實施例中，III式化合物的製備，會根據V式化合物反應之程序：與羥胺或其鹽反應。其中R¹是C_1-6烷基。在一些實施例中，R¹為乙基。

在一些實施例中，所使用的羥胺是羥胺鹽，例如羥胺鹽酸鹽。相對於1莫耳當量的V式化合物，羥基胺或其鹽的使用量可跨約1.1至約2莫耳等量，約1.1至約1.8莫耳等量，約1.1至約1.6莫耳等量，或約1.1至約1.4莫耳等量。在進一步的實施例中，至少在反應過程中的某一步驟，反應作用可以在約室溫或更低的溫度進行。在一些實施例中，溫度可跨約10℃至約30℃，約10℃至約25℃，或約15℃至約25℃。也可使用溶劑來進行反應，例如烴類有機溶劑(如甲苯)、質子性溶劑(如水)，或含兩種混合溶劑。

在一些實施例中，IV式化合物的製備，會根據與VI式化合物反應之程序：與吡咯烷(pyrrolidine)反應。其中Pg¹是氨基保護基。在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

相對於VI式合物的使用量，吡咯烷的使用量可多於其莫耳數。在一些實施例中，相對於1莫耳當量的VI式化合物，吡咯烷(pyrrolidine)的使用量可跨約1.1至約3莫耳當量，約1.1至約2莫耳當量，或約1.1至約1.8莫耳當量。反應的進行也可使用溶劑，舉例而言，使用有機溶劑(如甲苯等烴類溶劑)。在進一步的實施例中，至少在反應過程中的某一步驟，反應作用可以在升高的溫度下進行。在一些實施例中，反應可於溶劑沸點進行。

在一些實施例中，本發明提供了可增加I-(S)式異構化合物產量之方法：本發明提供了

相對於Ia-(R)式異構化合物：

本發明使用含Ia-(S)與Ia-(R)式兩種異構化合物的起始混合物，其製程包括：使起始混合物與2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)在含苯甲醛環境反應，並形成鹽混合物，其含有異構化合物的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。產出的鹽混和物中，與起始混和物中Ia-(S)與Ia-(R)式含量比例對照，I-a(S)式古洛糖酸鹽相對於Ia-(R)式古洛糖酸鹽的比例有所增高。

將所述的鹽混合物再結晶以製成純化的鹽混合物。與純化前之異構化合物的古洛糖酸鹽相對含量比例相比，純化後的Ia-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的含量較Ia-(R)式異構化合物的古洛糖酸鹽高。

純化後的鹽混合物在含碳酸鈉的環境下反應，形成包含Ia-(S)式和Ia-(R)式異構化合物的游離基混合物。此游離基混合物中，Ia(-(S)式異構體化合物的鏡像異構物超越量大於約90%。

含有I-(S)與I-(R)式異構化合物的起始混合物，可按上述數項實施例或按以下流程1為例的方法製備：

於此所述的鹽混合物中，相對於I-(R)式異構化合物的古洛糖酸鹽(即，富含I-(S)式的鹽混合物)總量，I-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽含量有所增加。而此鹽混合物可按上述實施例或按以下流程2為例[等方式]製備。

其中R¹是C_1-6烷基，而Pg¹是氨基保護基。

於此所稱之「反應」一詞為業內眾所周知，且通常是指彙集化學試劑以使其在分子層級上相互作用，藉此完成化學或物理變化。在一些實施例中，反應涉及兩項試劑，而相對於第一項試劑，第二項試劑使用量為1莫耳當量或以上。本發明所述多項程序中的反應步驟，可於合適的條件下進行一段時間以製備已知產物。

在一些實施例中，化合物或鹽類的製備可包含加入酸或鹼以影響[某些程序]，舉例而言，影響對於期望反應的催化作用，亦或是鹽形式的構成(如，形成2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽，2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。

舉例而言，使用的酸可以是無機或有機酸，包括但不限於強酸與弱酸。部分可使用的酸包括但不限於氫氯酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、對甲苯磺酸、4-硝苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、硝酸、2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)、乙酸、丙酸、丁酸、苯甲酸、酒石酸、戊酸、已酸、庚酸、辛酸、壬酸與癸酸。

部分可使用的鹼包括但不限於碳酸鹽(如碳酸鈉)、碳酸氫鹽(如碳酸氫鈉)、氫氧化物(如氫氧化鈉、氫氧化鉀)、烷氧化物、金屬醯胺、金屬氫化物、金屬二烷基酰胺(metal dialkylamide)與芳胺。其中，烷氧化物包括甲基、乙基和三級丁基氧化物的鋰鹽，鈉鹽和鉀鹽；金屬醯胺包括胺化鈉、胺化鉀與胺化鋰；金屬氫化物包括氫氧化鈉、氫氧化鉀與氫氧化鋰；而金屬二烷基酰胺包括含有取代基為甲基、乙基、正丙基(n-propyl)、異丙基(i-propyl)、正丁基(n-butyl)、三級丁基(t-butyl)、三甲矽基(trimethylsilyl)和環己基(cyclohexyl)的酰胺鋰鹽、鈉鹽和鉀鹽。

所有的化合物與其鹽，皆可與其他如水與溶劑等物質同時存在(如其水合物與溶劑合物)，或也可以分離物形式存在。

本發明所述「富含」一詞是指某一特定物質(如(S)-異構化合物或其鹽)在混合物中的含量，相對其(於反應前)有所增加。在一些實施例中，與起始混合物中(如構成富含混合物前)的比例相較，有些混合物所含之首項異構化合物或其鹽(如(S)-異構化合物或其鹽)相對於其含第二項異構化合物或其鹽(如(R)-異構化合物或其鹽)的比例有所增高。舉例而言，在一富含I-(S)式異構化合物的混合物中，相較起始混合物(如I-(S)與I-(R)異構化合物的消旋混合物)中I-(S)對I-(R)異構化合物的比例，此一混合物的I-(S)式異構化合物相對於I-(R)式異構化合物的比例有所增高。

本發明所述之程序反應，可於合適的溶劑中進行，而溶劑的選擇，於有機合成領域的專業人士不需過於思索便可決定。合適的溶劑，在反應進行的溫度下(如跨溶劑冷凍溫度至溶劑沸點溫度)，與起始物(反應物)、中間體或產物，實質上並不產生反應。任一反應可於單一溶劑或多溶劑混合物中進行。對某一反應步驟，可視此反應步驟所需，選擇合適的溶劑。在一些實施例中，可於無溶劑環境中進行反應，例如當各項反應物至少其中之一為液態或氣態時。

合適的鹵化溶劑包括但不限於四氯化碳、溴二氯甲烷(bromodichloromethane)、二溴氯甲烷(dibromochloromethane)、溴仿、氯仿、溴氯甲烷(bromochloromethane)、二溴甲烷(dibromomethane)、氯丁烷、二氯甲烷、四氯乙烯、三氯乙烯、1,1,1-三氯乙烷、1,1,2-三氯乙烷、1,1-二氯乙烷、2-氯丙烷、I,I,I-三氟甲苯、1,2-二氯乙烷、1,2-二溴乙烷、六氟苯、1,2,4-三氯苯、1,2-二氯苯、氯苯與氟苯。

合適的乙醚溶劑包括但不限於二甲氧甲烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、1,3-二烷、1,4-二烷、呋喃、二乙基醚(diethyl ether)、乙二醇二甲基醚(ethylene glycol dimethyl ether)、乙二醇二乙基醚(ethylene glycol diethyl ether)、二甘醇二甲基醚(diethylene glycol dimethyl ether，二甘二甲醚)，二甘醇二乙基醚(diethylene glycol diethyl ether)、三甘醇二甲醚(triethylene glycol dimethyl ether)、甲氧苯與t-丁基甲醚(t-butyl methyl ether)。

合適的質子性溶劑包括但不限於水、甲醇、乙醇、2-硝乙醇、2-氟乙醇、2,2,2-三氟乙醇(2,2,2-trifluoroethanol)、乙二醇、1-丙醇、2-丙醇、 2-甲氧基乙醇、1-丁醇、2-丁醇、i-丁醇、t-丁醇、2-乙氧乙醇、二甘醇以及1-、2-、或3-戊醇、新戊醇(neo-pentyl alcohol)、t-戊醇、二甘醇一甲基醚(diethylene glycol monomethyl ether)、二甘醇一乙基醚(diethylene glycol monoethyl ether)、環己醇、苯甲醇、苯酚與甘油。

合適的非質子性溶劑包括但不限於四氫呋喃(THF)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N,N-二乙基甲醯胺(DMA)、1,3-二甲-3,4,5,6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(1H)-pyrimidinone，DMPU)、1,3-二甲-2-咪唑啶酮(1,3-dimethyl-2-imidazolidinone，DMI)、N-甲基吡咯啶酮(N-methylpyrrolidinone，NMP)、甲醯胺、N-甲基乙醯胺、N-甲基甲醯胺、乙腈、二甲亞碸、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、環丁碸、N,N-二甲基丙醯胺(N,N-dimethylpropionamide)、四甲脲、硝甲烷、硝基苯與六甲基燐醯胺(hexamethylphosphoramide)。

合適的烴類溶劑包括但不限於苯、環己烷、戊烷、已烷、甲苯、環庚烷、甲環己烷、n-庚烷、乙苯以及m-,o-,或p-二甲苯、辛烷、茚烷、壬烷與萘。

本發明述之程序反應，可於空氣或惰性環境(如氮氣或氬氣)中進行。通常，當反應作用中涉及的反應物或產物，能夠實質的與空氣反應時，可使用專業人員熟知的空氣敏感化合技術。

在依據本發明所述之方法製備化合物與鹽時，可應用常見之分離與純化手續，如濃縮、過濾、萃取、固相萃取、再結晶、層析術、與其他類似方法以分離所欲產物。

本發明所述之程序反應，可於合適的溫度下進行，而溫度的選擇，專業人員不需過於思索便可決定。反應溫度取決於(如以下舉例的參數)：反應物與溶劑的熔點與沸點(若此特性存在時)，反應的熱力學(例如，劇烈的放熱反應可能需要在降低的溫度下進行)，以及反應的動力學(例如，具有高活化能的反應可能需要於提高的溫度下進行)。舉例而言，本發明中「室溫」一詞，在本領域中是通俗可理解的，並且通常是指某一溫度(例如反應溫度)約等於反應進行時所處室內的溫度，比如約為20℃至30℃。

反應可根據任何已知合適的方式進行監控。舉例而言，產物可藉由光譜分析監測[確認]，包括核磁共振(如¹H or ¹³C)、紅外線光譜法、光譜法(如紫外-可見光)、質譜、或層析法如高效液相色譜法(HPLC)或薄層層析法(TLC)。

本發明之化合物與鹽類：本發明更進一步提供了含有I-(S)與I-(R)式異構化合物的混合物：其中R¹是C_1-6烷基，而Pg¹是氨基保護基。並且，I-(S)式異構化合物的鏡像異構物超越量約為90%或以上，約為95%或以上，約為97%或以上，約為98% 或以上，約為99%或以上，或約為99.9%或以上。在一些實施例中，R¹為乙基。在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

在一些實施例中，I-(S)型異構化合物的鏡像異構物超越量可跨約90%至99.9%，約95%至99.9%，約96%至99.9%，約97%至99.9%，約98%至99.9%，約99%至99.9%，或約99.5%至99.9%。

在一些實施例中，含有I-(S)與I-(R)式異構化合物混合物，根據本發明中所提供之方法製備，此混合物中富含I-(S)式異構化合物。

本發明更提供了I-(S)或I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。

其中R¹是C_1-6烷基，而Pg¹是氨基保護基。在一些實施例中，R¹為乙基。

在一些實施例中，Pg¹為三級丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl)。

在一些實施例中所述之鹽為I-(S)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。

在一些實施例中所述之鹽為I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二 -O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。

在一些實施例中，I-(S)或I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)是根據本發明提供之方法程序製備。

本發明之化合物與鹽類也可包含互變異構體。互變異構體是由於單鍵與相鄰雙鍵交換並伴隨質子遷移而產生的。互變異構體包含質子互變異構體(prototropic tautomers)，其具有相同的實驗式和總電荷的異構質子化狀態。質子互變異構體(prototropic tautomers)的例子包括酮-烯醇對、醯胺-醯亞胺酸對、內醯胺-內醯亞胺對、醯胺-醯亞胺酸對以及烯胺-亞胺對，並包含環狀型，而其質子可佔據雜環系統中的兩個或多個位置，例如：1H-及3H-咪唑、1H-,2H-及4H-1,2,4-三氮唑、1H-及2H-異吲哚與1H-及2H-吡唑。

本發明中所述「化合物」一詞，包含所有立體異構物、幾何異構物、互變異構物與這些異構體的同位素結構。本發明中，以名稱或結構式明確指出之化合物與其鹽的特定互變異構形，若無特別指出，其意包含其他形的互變異構物。本發明中，以名稱或結構式明確指出之化合物與其鹽，若無明確指出特定其立構中心之構形，則意為包含所有可能之構型。舉例而言，若本發明中的某一物質的立構中心可為R或S，但其名稱或結構式並無特明指定其一，本發明中所述之此物質即可包含R或S。

本發明中所述之化合物與鹽類可為不對稱的(例如具有一個或多個立構中心)。若無特定指明，所有的立體異構物，如鏡相異構物與非鏡像異構物等，皆包含在內。本發明含有之不對稱取代的碳原子化合物與鹽類，可以旋光活性或外消旋形式分離。本發明所述之化合物或鹽類中，也可存有許多烯烴的幾何異構物、C=N雙鏈、及類似物，並且其所有穩定的異構體皆視為併入本發明中。本發明化合物之順式與反式幾何異構物，可以異構物混合物形式或以單獨形式分離。

在一些實施例中，在相當程度上，本發明之化合物與鹽類為分離的。「實質性分離」此一表述意指化合物至少部分或相當程度上與其形成或被偵測到的環境分離的。部分分離可包含，例如，某一成分內富含本發明的化合物。實質性分離可包括成分中含有重量比至少約50%，至少約60%，至少約70%，至少約80%，至少約90%，至少約95%，至少約97%，或至少約99%的本發明的化合物或鹽。於本領域中，化合物與其鹽的分離方式為例行常態。

本發明之化合物與鹽類也可包含所有中間體或產物的同位元素。同位素包括具有相同原子序但不同質量數的原子。舉例而言，氫的同位素包含三重氫與重氣。

TPH1抑制因子的合成：本發明所述富含I-(S)式異構化合物的鹽混合物，可進一步反應，利於製備如流程3所示的TPH 1抑制劑。舉例而言，依照本發明所述之一個或多個實施例，製備富含I-(S)式異構化合物的鹽混合物(步驟1)，隨後形成(例如經由與碳酸鈉反應)並分離I-(S)式異構化合物之游離基(步驟2)。I-(S)式異構化合物的游離胺，可用如步驟3中所示之標準胺保護條件加以保護。舉例而言，在含鹼(如三甲胺)的環境下與Pg²-X反應。其中Pg²是一氨基保護基(如三級丁氧基羰基(tert-butoxycarbonyl)、芐酯基(carbobenzyloxy)及類似物質)，而X為鹵素(如氯)。氨基保護基Pg¹(步驟4)的選擇性去保護進而形成所需的中間體1，此中間體可用於製備TPH 1抑制劑。

中間體1可用於製備TPH 1的抑制性化合物，例如以下流程4中所示，其中R¹是C_1-6烷基、Pg²為氨基保護基、而變項W,X,Y,R²,R³,R^A,R^B,R^C,R^D及A環於美國專利No.9,199,994中有所定義(其內容全文於此做為參考文獻)。舉例而言，將中間體1(如2-芐基3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3-二羧酸酯(2-benzyl 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3-dicarboxylate))在含鹼(如碳酸氫鈉)環境下加入含有化合物A的溶液(如二烷)，並加熱回流以產出形式C的化合物。在步驟2中，除去(例如經由與強酸-三甲基甲矽碘(TMSI)反應或與催化氫化的過渡金屬反應)C式的Pg²基團(例如芐酯基(CBZ))以形成所欲之TPH 1的抑制性化合物。

流程3中所示之中間體1，也可用於製備TPH 1的抑制性化合物，例如同以下流程5所示一般。舉例而言，將中間體1(如2-芐基3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3-二羧酸酯(2-benzyl 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3-dicarboxylate))在含鹼(如碳酸氫鈉)環境下加入含有化合物A的溶液(如二烷)，並加熱回流以產出形式B的化合物。其後，在一般芳基-芳基耦合條件下(例如在含有PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂般的鈀催化劑以及還含有碳酸氫鉀般的鹼的環境下)，與苯基硼酸反應以得化合物C。接著，移除(例如通過與TMSI反應)C式的氨基保護基Pg²(例如芐酯基(CBZ))以形成所欲之D式TPH-1抑制性化合物。

本發明中所述「氨基」一詞是指化學式為-NH₂之基團。

本發明中所述「鹵素」一詞是指選自氟、氯、碘與溴之一的鹵素原子。在一些實施例中，鹵素基團為氯。

本發明中所述「去保護」一詞是指適合將胺保護基斷裂的狀態條件。在一些實施例中，去保護可包含在含強酸、強鹼、還原劑或氧化劑的環境下將保護基斷裂。舉例而言，某一個胺保護基的去保護，可以經由本領域中已知的用於去除特定胺保護基的方法達成。如同Wuts與Greene所著，約翰威立國際出版公司紐澤西分公司於2007年發行的「有機合成中的保護基」第四版等書中第696-887頁(尤其是872-887頁)(2007年)所提及之方法(其內容全文於此做為參考文獻)。在一些實施例中，去保護包含使保護的化合物在酸性條件(例如氫氯酸或三氟乙酸)下反應。

本領域中的專業人員便能理解，所述之方法並非能夠合成本發明提出的化合物與鹽類的唯一方式，並且現有廣泛多樣的有機合成反應可用於合成本發明提出的化合物。本領域中的專業人員可以參考文獻中所述的而知曉如何選擇並執行適當的合成途徑。合適的合成方法的起始物、中間體與產物。參考文獻包括：Advances in Heterocyclic Chemistry, Vols. 1-107 (Elsevier, 1963-2012); Journal of Heterocyclic Chemistry Vols. 1-49 (Journal of Heterocyclic Chemistry, 1964-2012); Carreira, et al. (Ed.) Science of Synthesis, Vols. 1-48 (2001-2010) and Knowledge Updates KU2010/1-4; 2011/1-4; 2012/1-2 (Thieme, 2001-2012); Katritzky, et al. (Ed.) Comprehensive Organic Functional Group Transformations, (Pergamon Press, 1996); Katritzky et al. (Ed.); Comprehensive Organic Functional Group Transformations II (Elsevier, 2^nd Edition, 2004); Katritzky et al. (Ed.), Comprehensive Heterocyclic Chemistry (Pergamon Press, 1984); Katritzky et al., Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, (Pergamon Press, 1996); Smith et al., March's Advanced Organic Chemisrry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6^th Ed. (Wiley, 2007); Trost et al. (Ed.), Comprehensive Organic Synthesis (Pergamon Press, 1991)其內容全文於此做為參考文獻。

本發明會以具體的例子更詳細的描述。以下範例的揭露僅為說明之用，並非意圖以任何方式限制本發明。本領域中的專業人員能不需過於思索便可辨識可以改變或修改的各樣非關鍵參數，以產生基本相同的結果。

HPLC分析是以安捷倫1100儀器按以下條件進行：管柱：Altima C18，長150mm，直徑3.1mm與顆粒尺寸3μm。流動相A：0.1%蟻酸超純水(milli-q water)溶液。流動相B：0.1%蟻酸乙腈溶液。

鏡相異構物純度以下列條件測定：

鏡相異構物純度測定方式A：安捷倫1100 HPLC儀器配置YMC Chiral Amylose-SA管柱(長250mm，直徑4.6mm，顆粒尺寸5μm)，並使用正庚烷：異丙醇：乙醇：二乙胺(80：10：10：0.1,v：v：v：v%)作為溶析液。

鏡相異構物純度測定方式B：安捷倫111100 HPLC儀器配置YMC Chiral NEA[NR30S05-2546WT]管柱(長250mm，直徑4.6mm，顆粒尺寸5μm)，並使用濃度為150mmol/L過氯酸鈉(pH 2.5)超純水(milli-q water)與乙醇混合液作為溶析液。

第一實施例為，8-(三級丁基)3-乙基2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate，異構物混合物)

步驟一：(Z)-3-溴-2-(羥基亞氨基)丙酸乙酯(ethyl(Z)-3-bromo-2-(hydroxyimino)propanoate)

於反應爐中加入羥胺．HCl(13.4公斤，192.8莫耳，1.25當量)，飲用水(2.5容積)和甲苯(5容積)。攪拌混合物並冷卻至15℃。加入溴丙酮酸乙酯(29.9公斤，153.3莫耳，1.0當量)與甲苯(1.5容積)，並攪拌此混合物，於15-25℃攪拌16-20小時。靜置至少15分鐘後，將各相分離。將水層移除並保留有機層於反應爐中。隨後，將飲用水(0.5容積)充入反應爐，並攪拌此混合物至少15分鐘。將水層移除並保留有機層於反應爐中，並再進行兩次此水性萃取步驟。使用真空蒸餾於35-40℃將有機層濃縮(移除~3.5容積；剩餘3.6相對容積)。隨後，將正庚烷(3容積)充入反應爐，並使用真空蒸餾於35-40℃將此水溶液濃縮至剩餘約3.6相對容積。將正庚烷(3容積)再次充入反應爐，並使用真空蒸餾於35-40℃將此水溶液濃縮至剩餘約3.6相對容積。將其產生的混合物冷卻約10℃，並且攪拌20-25分鐘。過濾此混合物，並將產生的母液移除。將正庚烷(0.73容積)充入反應爐，並攪拌至少5分鐘。將產生出的濾餅以正庚烷潤洗並於環境溫度下乾燥5分鐘。重複潤洗與乾燥的步驟。後將濾餅在環境溫度以及真空通氮氣條件下乾燥0.5-2.5天。高效液相色譜法(HPLC)純度：批次1：93.21%(峰面積百分比)。批次2：93.76%(峰面積百分比)。氫核磁共振(¹H-NMR)純度(兩批次)：批次1：51.9%(重量百分比)；批次2：93.7%(重量百分比)。

步驟二：4-(吡咯烷-1-基亞甲基)哌啶-1-甲酸三級丁基羧酸酯(tert-butyl 4-(pyrrolidin-1-ylmethylene)piperidine-1-carboxylate)

將甲苯(16容積)與N-BOC-哌啶-4-甲醛(N-Boc-piperidine-4-carbaldehyde)(18.2公斤，85.3莫耳，1.0當量)充入反應並攪拌至溶解。加入吡咯啶(10.2公斤，143.3莫耳，1.6當量)與甲苯(0.5容積)，並將此混合物加熱回流(~111℃)以透過共沸蒸餾去除水分。使用真空蒸餾於35-40℃將產生的混合物濃縮至剩餘約12.2相對容積。加入甲苯(6容積)，於35-40℃將其產生之溶液濃縮至剩餘約12.2相對容積。將其產生的混合物冷卻至約20℃，並不純化而[直接]應用於下一步驟。批次1：84.1%(峰面積百分比)之4-(吡咯烷-1-基亞甲基)哌啶-1-甲酸三級丁基羧酸酯(tert-butyl 4-(pyrrolidin-1-ylmethylene)piperidine-1-carboxylate)；8.8%(峰面積百分比)之N-BOC-哌啶-4-甲醛(N-Boc-piperidine-4-carbaldehyde)；7.0%(峰面積百分比)之吡咯啶。KF：<0.1%(重量百分比)；批次2：86.6%(峰面積百分比)之4-(吡咯烷-1-基亞甲基)哌啶-1-甲酸三級丁基羧酸酯(tert-butyl 4-(pyrrolidin-1-ylmethylene)piperidine-1-carboxylate)；6.3%(峰面積百分比)之N-BOC-哌啶-4-甲醛(N-Boc-piperidine-4-carbaldehyde)；6.2%(峰面積百分比)之吡咯啶。KF：<0.1%(重量百分比)。

步驟三：9-(三級丁基)4-乙基1-羥基2-氧雜3,9-二氮雜螺[5,5]十一碳-3-烯-4,9-二羧酸酯(9-(tert-butyl)4-ethyl 1-hydroxy-2-oxa-3,9-diazaspiro[5.5]undec-3-ene-4,9-dicarboxylate)

於第一反應爐中充入(Z)-3-溴-2-(羥基亞氨基)丙酸乙酯(ethyl(Z)-3-bromo-2-(hydroxyimino)propanoate)(源自範例1的步驟1；批次1：18.81公斤，89.6莫耳，1.06當量；批次2：18.9公斤，90.0莫耳，1.06當量)；與2-甲基四氫呋喃(1.7-1.92容積)，並將產出之混合物攪拌及冷卻至-5℃。於第二反應爐中充入4-(吡咯烷-1-基亞甲基)哌啶-1-甲酸三級丁基羧酸酯(tert-butyl 4-(pyrrolidin-1-ylmethylene)piperidine-1-carboxylate)溶液(源自範例1的步驟2；批次1：22.7公斤，85.3莫耳，1.00當量；批次2：22.7公斤，85.3莫耳，1.00當量)；冷卻至-5℃，並且將N,N-二異丙乙胺(批次1：17.4公斤，134.2莫耳，1.6當量；批次2：17.5公斤，135.4莫耳，1.6當量)與甲苯(0.5容積)混入。隨後在約1-2小時內，於第二反應爐中加入(Z)-3-溴-2-(羥基亞氨基)丙酸乙酯(ethyl(Z)-3-bromo-2-(hydroxyimino)propanoate)以及2-甲基四氫呋喃溶液，並同時間維持溫度於10℃以下。以2-甲基四氫呋喃(0.22容積)潤洗第一反應爐，並將潤洗液加入第二反應爐。(Z)-3-溴-2-(羥基亞氨基)丙酸乙酯(ethyl(Z)-3-bromo-2-(hydtoxyimino)propanoate)加入第二反應爐後，隨即將混合物加熱至約15℃並攪拌約45分鐘。將氫氯酸水溶液(從2.2當量鹽酸與3.5容積的飲用水來製備30%HCl)加入反應混合物中。(批次1：24.2公斤，199.1莫耳，2.3當量；批次2：23.9公斤，196.7莫耳，2.3當量)，將其產生的混合物加熱至30℃，並且攪拌45分鐘。靜置至少15分鐘後，將有機相與水相分離，並將水層移除。用飲用水(1.0容積)洗滌有機層，並攪拌混合物至少5分鐘。靜置至少10分鐘後，將各相分離並移除水相，接著使用2-甲基四氫呋喃(5容積)進一步萃取。將有機層合併，另用飲用水(1容積)洗滌，並除去水相。使用真空蒸餾於35-40℃將合併的有機相濃縮至剩餘約5.4相對容積，後加入正庚烷，將此混合物於35-40℃濃縮至剩餘約5.4相對容積。重複加入正庚烷與真空蒸餾，後加入正庚烷(3容積)並將產生的混合物冷卻至約20℃。過濾此混合物，並將產生的濾餅以正庚烷(2.57容積)與甲苯(0.14容積)洗滌(兩次)。將濾餅乾燥並另以正庚烷(2.57容積)洗滌後攪拌。接著去除正庚烷，並於氮氣及環境溫度下將濾餅乾燥18-72小時，乾燥的濾餅不純化[直接]用於下一步驟。批次1：高效液相色譜法(HPLC)純度：98.37%(峰面積百分比)。氫核磁共振(¹H-NMR)：91.8%(重量百分比)；批次2：高效液相色譜法(HPLC)純度：99.52%(峰面積百分比)。氫核磁共振(1H-NMR)：90.7%(重量百分比)；

步驟四：8-(三級丁基)3-乙基2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate，異構物混合物)

於反應爐中充入9-(三級丁基)4-乙基1-羥基2-氧雜3,9-二氮雜螺[5,5]十一碳-3-烯-4,9-二羧酸酯(9-(tert-butyl)4-ethyl 1-hydroxy-2-oxa-3,9-diazaspiro[5.5]undec-3-ene-4,9-dicarboxylate)(源自範例1的步驟3，38.2公斤，111.8莫耳，1.0當量)，乙醇(4絕對容積)，與四氫呋喃(4容積)，並將此混合物攪拌。接著加入海綿催化劑A5000(28.9公斤)，並將反應爐用真空與氮氣驅淨(purge)幾次，之後用真空與氫氣驅淨(purge)。將產出的混合物加熱至約30℃，並將反應爐以氫氣加壓至4±0.5巴。接著在氫氣與30±5℃下，攪拌混合物約16-22小時。將反應爐降壓並充入氮氣。並將反應爐以真空與氫氣驅淨(purge)、以氫氣加壓至4±0.5巴、並持續在氫氣與30±5℃下攪拌46小時。接著將反應氣降壓，以矽藻土過濾反應混合物後，使用2-甲基四氫呋喃潤洗。收集濾液，另用2-甲基四氫呋喃洗滌，並在35-40℃之間減壓濃縮至剩餘約3.75相對容積。蒸餾過程再重複兩次後，將產出的混合物冷卻至約20℃，產物不純化[直接]用於下一步驟。高效液相色譜法(HPLC)純度：78.8%(峰面積百分比)。

第二A實施例為，8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)(富含(S)-異構體的異構混合物：

將反應爐充入2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)(32.65公斤，111.5莫耳，1.0當量)、2-甲基四氫呋喃(2容積)與苯甲醛(0.04容積)。接著，於8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate)(範例1之異構混合物)加入2-甲基四氫呋喃(1容積)。攪拌產生的混合物並從28℃開始加熱直到形成溶液。於40±3℃攪拌溶液至少30分鐘。將產出的混合物冷卻至30±3℃並繼續攪拌2小時。於混合物中加入8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)(2克)。將混合物於30±3℃攪拌約14-15小時。接著將反應混合物於4小時內冷卻至約20±3℃，之後再攪拌15小時。將混合物過濾並將濾液分離做後續反應備用。將產得的濾餅用2-甲基四氫呋喃(1容積，3次)洗滌，於每次加入2-甲基四氫呋喃之間乾燥5分鐘。後得一混合物其中包含8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid isomers)，並且此混合物富含8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。高效液相色譜法(HPLC)純度：95.67%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度：78.55%(峰面積百分比)。分離出的濾液，分別於35-40℃間濃縮至剩餘約3.5相對容積，並冷卻至27.5℃。於混合物中接種8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)，並於20±3℃攪拌至少16小時。過濾得到的混合物，去除濾液，將產得的濾餅用2-甲基四氫呋喃(0.57容積)洗滌並乾燥(3次)。第二次收成混合物其中包含8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid isomers)，並且富含8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。高效液相色譜法(HPLC)純度：98.29%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：93.60%(峰面積百分比)。提供的容積與莫耳比，是與範例1中製備的8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯 (8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate)異構混合物相比。

於反應爐中加入2-甲基四氫呋喃(16容積)以及所得的8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構混合物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid isomers)(23.2公斤，39.5莫耳，1.0當量)，並將混合物加熱回流(約80℃)直到固體溶解。將混合物於2小時內冷卻至40±3℃並且觀察到結晶。將混合物於35-40℃濃縮至剩餘約9相對容積。將混合物冷卻至20±3℃，並且持續攪拌2-3小時。將產得的混合物過濾並以2-甲基四氫呋喃潤洗(1.4容積，2次，並於每次潤洗間，將混合物於氮氣下乾燥5分鐘)。將產得的濾餅於氮氣下乾燥14-16小時。之後所欲得的混合物，其中包含8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid isomers)，其富含8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。批次1：高效液相色譜法(HPLC)純度：99.49%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：93.98%(峰面積百分比)。批次2：高效液相色譜法(HPLC)純度：>99.9%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：95.22%(峰面積百分比)。將8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)異構體進行第二次再結晶，此步驟進一步使異構混合物富含(S)-異構體。批次1：高效液相色譜法(HPLC)純度：99.49%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：99.02%(峰面積百分比)。批次2：高效液相色譜法(HPLC)純度：99.95%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：99.48%(峰面積百分比)。

第二B實施例為，用以製備8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)：將8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate)(1克，3.20毫莫耳)在室溫下溶解於THF(5容積，5毫升)。此溶液以1莫耳當量的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)處理，並緩慢升溫至40℃。二十分鐘後，於40℃開始形成沉澱物。此時，在混合物中加入TBME(5容積，5毫升)後，將反應以1℃/分鐘的速率冷卻至5℃。其後，過濾形成的固形物，並以冷卻的TBME洗滌。此固體在真空下乾燥後，產出8-(三級丁基)3-乙基-(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate,2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)(45%,>99%鏡像異構物超越量)，並且此產出物為適於接種的結晶固體。

第三實施例為，8-(三級丁基)3-乙基2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate)

於反應爐中充入混合物並於15±3℃攪拌，此混合物富含8-(三級丁基)3-乙基2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)(範例2，23.80公斤，40.5莫耳，1.0當量)、2-甲基四氫呋喃(2容積)以及正庚烷(8容積)。於15分鐘內，加入碳酸鈉(10%水溶液；125.8公斤)，同時將反應混合物的溫度保持於15-20℃，並攪拌至少35分鐘。將各相分離後，移除水相。將碳酸鈉(10%水溶液；27.4公斤)加入留下的有機相，同時將反應混合物的溫度保持於15-20℃之間，並攪拌至少35分鐘。分離各相、移除水相、且將有機相濃縮至乾燥以形成如標題所述之化合物。高效液相色譜法(HPLC)純度：97.65%(峰面積百分比)。(S)-異構體鏡像異構物純度(方式A)：98.89%(峰面積百分比)。提供的容積與莫耳比，是相對於範例2A中製備的8-(三級丁基)3-乙基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯,2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸異構物(8-(tert-butyl)3-ethyl 2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate 2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid isomers)。

第四實施例為，2-苯甲基8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3,8-三羧酸酯(2-benzyl 8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3,8-tricarboxylate)

於反應爐中充入8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3,8-二羧酸酯(8-(tert-butyl)3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3,8-dicarboxylate)(範例3，12.6公斤，32.2莫耳，1.0當量)、碳酸鈉(10%水溶液，86.4公斤)與2-甲基四氫呋喃(0.55相對容積)，並將混合物冷卻至0±3℃。後於40分鐘內，將混於2-甲基四氫呋喃(0.25容積)的氯甲酸苯酯(6.7公斤，38.76莫耳，1.0當量)加入，同時將反應混合物的溫度保持於-2-2℃之間。另外使用2-甲基四氫呋喃(0.25容積)將殘留的氯甲酸苯酯潤洗入反應混合物，並於0±3℃將產出的混合物攪拌5-10分鐘，接著將反應混合物加熱至30±3℃，之後再攪拌20-30分鐘。將各相分離後，移除水相。用一部分的飲用水(1容積)洗滌有機層，將混合物加熱至30±3℃並攪拌至少5分鐘。移除水相後，將留下的有機相以真空蒸餾於35-40°之間濃縮至剩餘約3相對容量。加入絕對乙醇(3容積)，以真空蒸餾於35-40℃將其產生之溶液濃縮至剩餘約3相對容積。再一次添加乙醇與進行第二次蒸餾，以形成如標題所述之產物。高效液相色譜法(HPLC)純度：65.58%(峰面積百分比)，得到去保護的2-苯甲基3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3-二羧酸酯(2-benzyl 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3-dicarboxylate)化合物。標題所述之產物與BOC-去保護產物的HPLC純度相加為80.45%(峰面積百分比)。

第五實施例為，2-苯甲基3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3-二羧酸鹽酸鹽(2-benzyl 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3-dicarboxylate hydrochloride)

於反應爐充入絕對乙醇(67公斤，3.75容積)並冷卻至約12.5℃。於55分鐘內加入乙醯氯(10.0公斤，6.00當量)，同時維持混合物溫度低於15℃。加入乙酸乙酯(10.2公斤，0.5容積)並攪拌15-25分鐘，同時升溫至17℃。接下來，於25分鐘內加入混入乙醇的2-苯甲基8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3,8-三羧酸酯(2-benzyl 8-(tert-butyl) 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3,8-tricarboxylate)(範例4，17.3公斤的2-苯甲基8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3,8-三羧酸酯；乙醇與2-苯甲基8-(三級丁基)3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3,8-三羧酸酯相加為：87公斤)，同時維持反應混合物的溫度於約16℃。另將絕對乙醇(0.5容積)加入反應混合物中，加熱至30±3℃並攪拌約16小時。將混合物於35-40℃以真空蒸餾濃縮至剩餘約4相對容積。加入2-甲基四氫呋喃(3容積)，於35-40℃以真空蒸餾將此溶液濃縮至剩餘約4相對容積。進行3次2-甲基四氫呋喃的添加與[混合物]的蒸餾，[此步驟]使用3容積的2-甲基四氫呋喃，並於最後一次使用2容積的2-甲基四氫呋喃。接著將反應混合物加熱至約30-35℃，後再攪拌約40分鐘。另加入2-甲基四氫呋喃(1.5容積)並同時維持溫度於約29℃。將混合物於1小時內冷卻至25±3℃，並攪拌約18小時。過濾混合物，以2-甲基四氫呋喃(1.0容積)洗滌濾餅，並攪拌至少5分鐘。重複洗滌步驟，並將濾餅於洗滌步驟間乾燥至少5分鐘。接著將濾餅於氮氣及環境溫度加下乾燥約19小時以得如標題所述之產物。高效液相色譜法(HPLC)純度：99.09%。手性純度([測定]方式B)：99.85%。(S)-異構體鏡像異構物超越量(方式B)：98%。

第六實施例為，(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-聯苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-4-基)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-3-羧酸((S)-ethyl8-(2-amino-6-((R)-1-(5-chloro-[1,1'-biphenyl]-2-yl)-2,2,2-trifluoroethoxy)pyrimidin-4-yl)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-3-carboxylate)

本例所述之化合物，是從2-苯甲基3-乙基(S)-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,3-二羧酸鹽酸鹽(2-benzyl 3-ethyl(S)-2,8-diazaspiro[4.5]decane-2,3-dicarboxylate hydrochloride)(範例5)製備而成。製備步驟如流程5所示，並可見於美國專利No.9,199,994(其內容全文於此做為參考文獻)。本例所述之化合物，根據美國專利No.9,199,994內描述之一或多個檢定，為TPH1的抑制劑。

本發明於此所述以外之多樣改良變化，對本領域之專業人員而言，可由前述事項顯見。此類的改良變化也亦涵蓋於所附申請範圍中。在本申請中引用的每一項文獻，包括所有專利、專利申請與出版品，其內容全文皆做為參考文獻併入於此。

Claims

一種增加I-(S)式異構體化合物的量的方法：其中相對於I-(R)式異構體化合物含量，R ¹是C _1-6烷基，而Pg ¹是氨基保護基：使用含I-(S)與I-(R)式兩種異構體化合物的起始混合物，其製程為：將起始混合物與2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid)或其水合物進行反應；此反應於含醛環境下進行並產出混和鹽，即兩式異構體化合物的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)；產出的鹽混和物中，與起始混和物中I-(S)與I-(R)式含量比例對照，I-(S) 式古洛糖酸鹽相對於I-(R)式古洛糖酸鹽的比例有所增高。
如申請專利範圍第1項所述的方法，其中該步驟中的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸或其水合物是2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)。
如申請專利範圍第1項或第2項，用約1莫耳當量的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸或其水合物進行反應；其莫耳當量是對比於在起始混和物中I-(S)與I-(R)式異構化合物相加的含量。
如申請專利範圍第1項至第3項所述的方法，其中該醛為苯甲醛。
如申請專利範圍第1項至第4項所述的方法，用少於1莫耳當量的醛進行反應；其莫耳當量是對比於在起始混和物中I-(S)與I-(R)式異構化合物相加的含量。
如申請專利範圍第1項至第5項所述的方法，用約0.01至約0.1莫耳當量的醛進行反應；其莫耳當量是對比於在起始混和物中I-(S)與I-(R)式異構化合物相加的含量。
如申請專利範圍第1項至第6項所述的方法，反應係於約30℃至約40℃下進行。
如申請專利範圍第1項至第7項所述的方法，反應係於含有有機溶劑環境下進行。
如申請專利範圍第1項至第7項所述的方法，反應係於含有醚溶劑環境下進行。
如申請專利範圍第1項至第7項所述的方法，反應係於含有2-甲基四氫呋喃的有機溶劑環境下進行。
如申請專利範圍第1項至第10項所述的方法，I-(S)式異構古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為75%或以上。
如申請專利範圍第1項至第10項所述的方法，I-(S)式異構古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為90%或以上。
如申請專利範圍第1項至第12項所述的方法，包括進一步將鹽混合物再結晶以製成純化的鹽混合物；與純化前之異構化合物的古洛糖酸鹽相對含量比例相比，純化後的I-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的含量比例較I-(R)式異構化合物的古洛糖酸鹽高。
如申請專利範圍第13項所述的方法，I-(S)式異構古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為90%或以上。
如申請專利範圍第13項所述的方法，I-(S)式異構古洛糖酸鹽的鏡像異構物超越量約為95%或以上。
如申請專利範圍第13項至第15項所述的方法，包含將純化後的鹽混合物進一步與鹼反應，形成含I-(S)與I-(R)式異構化合物的游離基混合物：
如申請專利範圍第16項所述的方法，鹼以水溶液形式存在。
如申請專利範圍第16項所述的方法，鹼溶液為碳酸鈉水溶液。
如申請專利範圍第16項至第18項所述的方法，用莫耳過量的鹼與純化後的鹽反應；其莫耳量是對比於在鹽混和物中I-(S)與I-(R)式異構化合物相加的含量。
如申請專利範圍第16項至第19項所述的方法，於含有有機溶劑環境下與純化後的鹽進行反應。
如申請專利範圍第16項至第19項所述的方法，於含有有機溶劑環境下與純化後的鹽進行反應；此有機溶劑由醚溶劑與烴類溶劑組成。
如申請專利範圍第16項至第19項所述的方法，於含有有機溶劑環境下與純化後的鹽進行反應；此有機溶劑由2-甲基四氫呋喃與正庚烷組成。
如申請專利範圍第16項至第22項所述的方法，於游離基混合物內I-(S)式異構物的鏡像異構物超越量約為90%或以上。
如申請專利範圍第16項至第22項所述的方法，於游離基混合物內I-(S)式異構物的鏡像異構物超越量約為95%或以上。
如申請專利範圍第1項至第24項所述的方法，R ¹為乙基。
如申請專利範圍第1項至第25項所述的方法，Pg ¹為三級丁氧基羰基。
在一含有I-(S)與I-(R)式異構化合物的混合物：其中R ¹是C _1-6烷基，而Pg ¹是氨基保護基，並且I-(S)異構物的鏡像異構物超越量為90%或以上。
如申請專利範圍第27項所述的混和物，I-(S)式異構物的鏡像異構物超越量約為95%或以上。
如申請專利範圍第27項或第28項所述的混和物，R ¹為乙基。
如申請專利範圍第27項至第29項所述的混和物，Pg ¹為三級丁氧基羰基。
I-(S)或I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)：其中R ¹是C _1-6烷基，而Pg ¹是氨基保護基。
如申請專利範圍第31項所述的鹽類，R ¹為乙基。
如申請專利範圍第31項或第32項所述的鹽類，Pg ¹為三級丁氧基羰基。
如申請專利範圍第31項至第33項所述的鹽，為I-(S)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。
含有I-(S)與I-(R)式異構化合物的混合物：是根據申請範圍16至26任一項所述的方式製備；其中R ¹是C _1-6烷基，而Pg ¹是氨基保護基，並且I-(S)異構物的鏡像異構物超越量為90%或以上。
如申請專利範圍第35項所述的混和物，I-(S)式異構物的鏡像異構物超越量約為95%或以上。
如申請專利範圍第35項或第36項所述的混和物，R ¹為乙基。
如申請專利範圍第35項至第37項所述的混和物，Pg ¹為三級丁氧基羰基。
I-(S)或I-(R)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)：是根據申請範圍1至15任一項所述的方式製備；而其中R ¹是C _1-6烷基，Pg ¹是氨基保護基。
如申請專利範圍第39項所述的鹽類，R ¹為乙基。
如申請專利範圍第39項或第40項所述的鹽類，Pg ¹為三級丁氧基羰基。
如申請專利範圍第39項至第41項所述的鹽，為I-(S)式異構化合物之2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salt)。
可增加Ia-(S)式異構化合物產量之方法：而此增加量是相對比於Ia-(R)式異構化合物：使用含Ia-(S)與Ia-(R)式兩種異構化合物的起始混合物，其製程包括：將起始混合物與2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮-L-古洛糖酸一水合物(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid monohydrate)在含苯甲醛環境反應，並形成鹽混合物，其含有異構化合物的2,3：4,6-二-O-亞異丙基-2-酮 -L-古洛糖酸鹽(2,3：4,6-di-O-isopropylidene-2-keto-L-gulonic acid salts)。產出的鹽混和物中，與起始混和物中Ia-(S)與Ia-(R)式含量比例對照，I-a(S)式古洛糖酸鹽相對於Ia-(R)式古洛糖酸鹽的比例有所增高；將所述的鹽混合物再結晶以製成純化的鹽混合物；與純化前之異構化合物的古洛糖酸鹽相對含量比例相比，純化後的Ia-(S)式異構化合物的古洛糖酸鹽的含量較Ia-(R)式異構化合物的古洛糖酸鹽高；以及，將純化後的鹽混合物在含碳酸鈉的環境下反應，形成包含Ia-(S)式和Ia-(R)式異構化合物的游離基混合物。此游離基混合物中，Ia(-(S)式異構體化合物的鏡像異構物超越量為約90%或以上。