TW201622715A

TW201622715A - 治療自發性肺纖維化之方法

Info

Publication number: TW201622715A
Application number: TW104114462A
Authority: TW
Inventors: 松田和子; 岩城裕一
Original assignee: 梅迪西諾瓦股份有限公司
Priority date: 2014-05-08
Filing date: 2015-05-06
Publication date: 2016-07-01
Also published as: KR20170005810A; JP6594899B2; KR102445077B1; EP3763362A1; BR112016025080A2; US20180021275A1; CN106232108B; CN106232108A; EP3139912A4; US20170065544A1; JP2017514849A; CA2946594A1; WO2015171749A2; EP3139912A2; EP3763362B1; US20150321989A1; ES2941628T3; CA2946594C; ES2792850T3; EP3139912B1

Abstract

具化學式(I)之一化合物： □ 或其代謝物，或具化學式(I)的化合物之酯類或其代謝物，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中m、n、X1及X2係如本申請案中所界定，其係適用於抑制或治療自發性肺纖維化、導致自發性肺纖維化或由其產生之病況及/或其中各者的負面影響。

Description

治療自發性肺纖維化之方法

相關申請案之交互引述

本申請案主張於2014年5月8日提出申請之第61/990,603號美國暫准申請案、於2014年6月2日提出申請之第62/006,692號美國暫准申請案及於2014年9月18日提出申請之第14/490,623號美國申請案之優先權，其中各者在此完整地併入本案以為參考資料。

領域

該技術係有關於藉由投予苯氧烷基羧酸類諸如MN-001與MN-002，而抑制或治療肺纖維化、導致自發性肺纖維化或由其產生之病況及/或其中各者的負面影響之方法。

背景

肺纖維化(PF)係指肺組織增厚、變得僵硬及結疤之一種病況。在一些案例中，可判定引發纖維化(結疤)的原因；但在其他一些情況下，原因仍然不明。當發生肺纖維化的原因不明(並符合肺纖維化的特定放射線攝影及/或病理學標準時)，該疾病係稱為自發性肺纖維化或IPF。

稱為間質性肺病(ILD)的肺部相關疾病有200種以上，其等亦稱為彌漫性實質肺病或DPLD。因為該等疾病影響間質，亦即肺泡周圍的空間，故將ILD歸類為同一群組。然而，ILD亦可影響肺的其他部分。多種間質性肺病具有類似於自發性肺纖維化的特徵，及大部分造成肺纖維化。

根據最近一項研究之估計，在美國的所有間質性肺病之盛行率約為500,000，其中以自發性肺纖維化最為常見。在美國，132,000至200,000人患有自發性肺纖維化。每年大約有50,000個新診斷病例，而每年死於自發性肺纖維化的美國人高達40,000名。歐盟(EU)目前的自發性肺纖維化盛行率之資訊有限。目前對於歐盟的自發性肺纖維化發病率之估計為37,000至40,000人；英國每年的新診斷病例超過5,000個。預期被診斷出患有自發性肺纖維化的個體數目將持續增加。這很可能是由於人們活得更長、臨床上對於自發性肺纖維化的瞭解增加以及可更早期與更準確診斷出之結果。

自發性肺纖維化並無特定的人口廓型，其發生在城市與鄉村環境之比例相當。已發現長期吸煙及某些遺傳因素與自發性肺纖維化風險之增加相關，及在已發表的不同研究中均表明，在罹患自發性肺纖維化的個體中，約有三分之二長期吸煙。自發性肺纖維化影響男性多於女性，及通常發生在50至70歲之間。

概要

本揭露內容提供治療經診斷出患有自發性肺纖維化(IRF)的一病患之一種方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(I)的一化合物、具化學式(I)的化合物之代謝物、具化學式(I)的化合物之酯類或具化學式(I)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類，其中m為自2至5的整數及包括2與5在內，n為自3至8的整數及包括3與8在內，X¹與X²各獨立地代表硫、氧、亞磺醯基(-S(O)-)或磺醯基(-S(O)₂-)，前提在於X¹與X²並非同時為氧。

在一實施例中，具化學式(I)的化合物係具有化學式(IA)：

在另一實施例中，具化學式(I)的化合物之代謝物係具化學式(IB)的化合物：

該化合物較佳係以口服方式投予。該化合物係以固態劑型提供，諸如錠劑或膠囊；該化合物更佳係以斜方晶體多晶型存在。該化合物亦能以液態劑型提供。就該等方法的一方面而言，該化合物的投藥量係約100至約4,000毫克/日，分成一份、二份或三份投予。

就該等方法的一方面而言，係抑制自發性肺纖維化病患的肺部結疤作用。亦可降低及/或抑制自發性肺纖維化病患之升高的肺部羥脯胺酸水平。有時，降低了自發性肺纖維化病患之升高的肺密度；及在其他時候，降低了自發性肺纖維化病患之支氣管肺泡灌洗液(BALF)中較高的總細胞數(TCC)。

在此說明用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之一種方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(IA)的一化合物、具化學式(IA)的化合物之代謝物、具化學式(IA)的化合物之酯類或具化學式(IA)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類。

亦提供一種用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(IB)的一化合物、具化學式(IB)的化合物之酯類：或前述各者之藥學上可接受的鹽類。

所提供的又一種方法係用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之一種方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(IA)的一化合物、具化學式(IA)的化合物之代謝物、具化學式(IA)的化合物之酯類、具化學式(IA)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類，其中前述各者係以包含斜方晶體的一種固態劑型形式提供。該固態劑型較佳以口服方式投予。

應注意到本揭露內容提供治療肺纖維化之方法，一方面是自發性肺纖維化及另一方面是非自發性肺纖維化。

就另一方面而言，本揭露內容對於有需要的病患提供抑制肺部結疤之方法。該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(I)的一化合物，或其酯類，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中具化學式(I)的化合物係如上所界定。

就另一方面而言，本發明對於有需要的病患提供減少及/或抑制肺部羥脯胺酸生成作用或膠原蛋白生成作用之一種方法。該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(I)的一化合物，或其酯類，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中具化學式(I)的化合物係如上所界定。在一實施例中，該病患係罹患肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係自發性肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係非自發性肺纖維化。

就另一方面而言，本發明對於有需要的病患提供使升高的肺密度降低之一種方法。該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(I)的一化合物，或其酯類，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中具化學式(I)的化合物係如上所界定。在一實施例中，該病患係罹患肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係自發性肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係非自發性肺纖維化。

就另一方面而言，本發明對於有需要的病患提供使支氣管肺泡灌洗液(BALF)中之較高的總細胞數(TCC)降低之一種方法。該方法包括對於該病患投予一有效量之具化學式(I)的一化合物，或其酯類，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中具化學式(I)的化合物係如上所界定。在一實施例中，該病患係罹患肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係自發性肺纖維化。在另一實施例中，該肺纖維化係非自發性肺纖維化。

在一些實施例中，本申請案中所提供之方法可與皮質類固醇(諸如潑尼松(prednisone))、環磷醯胺、阿托品硫唑嘌呤(azathioprine)、N-乙醯半胱胺酸、吡非尼酮(pirfenidone)的投藥作用以及補充氧氣療法中之一或多者組合進行。

圖1.1係以圖示方式說明對照組、載劑組及治療組在第0日的肺密度。

圖1.2係以圖示方式說明對照組、載劑組及治療組在第7日的肺密度。

圖1.3係以圖示方式說明對照組、載劑組及治療組在第20日的肺密度。

圖2係以圖示方式說明對照組、載劑組及治療組的肺部羥脯胺酸含量。

圖3係以圖示方式說明對照組、載劑組及治療組的阿士克羅夫特(Ashcroft)評分。

詳細說明

如說明書中及所附申請專利範圍中所用之單數形式“一(a)”、“一(an)”及“該”係包括複數的提述對象，除非上下文另有明確說明。

對於一病患“投予”一藥物或一藥物的“投藥作用”(及該詞的文法等效用語)係包括直接投藥作用，其包括自行給藥在內；及包括間接投藥作用，其包括開立藥物處方的行為。例如，如本申請案中所用，指示病患自行投予藥物及/或開立藥物處方給一病患之醫生，係將該藥物投予病患。

置於一基團之前的“CX”係指該基團中的碳原子數目為X。

“烷基”係指具有1至12個碳原子之單價非環化烴基。烷基之非限制性實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、三級丁基、戊基、己基等。

“芳基”係指具有至多10個碳原子之單價芳香族烴基。芳基的非限制性實例包括苯基與萘基。

“雜芳基”係指在芳香族環內具有1至10個碳原子及1至4個選自由氧、氮、硫所組成之群組的雜原子之芳香族基，其中雜芳基的氮及/或硫原子係選擇性地經氧化(如N-氧化物、-S(O)-或-S(O)₂-)。該等雜芳基可具有一個單環(如吡啶基或呋喃基)或多個縮合環(如吲基或苯并噻吩基)，其中該縮合環可為芳香族或非芳香族及/或含有一個雜原子，前提在於連接點係經由芳香族雜芳基的一個原子。雜芳基的非限制性實例包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯硫基及呋喃基。

“環烷基”係指具有3至12個碳原子之單價非芳香族環狀烴基。環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基等。

“雜環基”係指在芳香族環內具有1至10個碳原子及1至4個選自由氧、氮、硫所組成之群組的雜原子之-種單價非芳香族環基，其中雜芳基的氮及/或硫原子係選擇性地經氧化(如N-氧化物、-S(O)-或-S(O)₂-)。該等雜芳基可具有一個單環(如哌啶基或四氫呋喃基)或多個縮合環，其中該縮合環可為芳香族或非芳香族及/或含有一個雜原子，前提在於連接點係經由非芳香族雜環基的一個原子。雜環基的非限制性實例包括吡咯啶基、哌啶基、哌基等。

“胺基”係指-NH₂。

“烷基胺基”係指-NHR_B，其中R_B係選擇性地經1至3個芳基、雜芳基、環烷基或雜環基取代之C₁-C₆烷基。

“二烷基胺基”係指-N(R_B)₂，其中R_B係如上所界定。

“包含”應指該等方法與組成物包括所引述元素，但不排除其他。當“實質上由...所組成”係用於界定方法與組成物時，應指排除就所述目的而言對於該組合具有任何實質重要性之其他元素。因而，實質上由本申請案中所界定的元素所組成之一組成物將不排除來自分離與純化方法及藥學上可接受的載體諸如磷酸鹽緩衝鹽水、防腐劑等之微量污染物。“由...所組成”應指所排除的不只是其他成分的微量元素，也排除用於投予本發明的組成物之實質方法步驟或產生一組成物或達到一預期結果之製程步驟。由該等轉折詞彙所界定的實施例係位於本發明的範圍內。

在本申請案中所用之一化合物的“有效量”係當投藥至如本申請案所治療的一病患時，將具有所預期的治療效應之一量，該治療效應如減輕、改善、緩解或消除該病患的醫學病況之一或多種表現。完全的治療效應不一定在投予一劑量(dose)(或劑量(dosage))之後出現，也可能在投予一系列劑量之後出現。因而，一有效量可在一或多次的投藥作用中投予。

“肺纖維化(PF)”係指肺組織增厚、變得僵硬及結疤之一種病況。肺泡(氣囊)與肺內的血管係負責將氧氣輸送至身體。當肺組織結疤與增厚時，肺更難將氧氣輸送進入血流中。結果，腦部、心臟及其他器官無法獲得讓其等正常運作所需的氧氣。在許多病例中，造成纖維化(結疤)的原因不明。當發生肺纖維化的原因不明(並符合特定的放射線攝影及/或病理學標準時)，該疾病係稱為“自發性肺纖維化”或IPF。在一些情況下，自發性肺纖維化之特徵在於原因不明的慢性、進行性、纖維化間質性肺炎。在一些情況下，自發性肺纖維化影響老年人。在一些情況下，自發性肺纖維化係與普通型間質性肺炎的組織病理學及/或放射學模式相關聯。

自發性肺纖維化的特徵亦在於正常的肺區域、纖維化區域及影響周圍與胸膜下薄壁組織之間質性發炎的區域之相間交錯。纖維化的標記包括上皮下肌纖維母細胞/纖維母細胞性病灶及膠原蛋白與細胞外基質之沉積作用增加。過多的瘢痕組織使得肺泡壁變僵硬及降低順應性，其導致肺總容量之不可逆的損失及降低將氧氣輸送至微血管中之能力。

自發性肺纖維化的特徵係與多種間質性肺病(ILD)類似，多種間質性肺病皆導致肺纖維化。稱為間質性肺病的肺部相關疾病有200種以上，其等亦稱為彌漫性實質肺病或DPLD。因為該等疾病影響間質，亦即肺泡周圍的空間，故將ILD歸類為同一群組。然而，間質性肺病亦可影響肺的其他部分。

有一亞類的間質性肺病稱作自發性間質性肺炎(IIP)，其中肺組織發炎，也可能發生結疤。如本申請案中所用之“肺炎”係指發炎，而非諸如細菌性肺炎之感染。自發性間質性肺炎可分為若干病理亞型。該等亞型包括普通型間質性肺炎(UIP)、非特異性間質性肺炎(NSIP)、落屑性間質性肺炎(DIP)、呼吸性細枝氣管炎相關型間質性肺病(RB-IIP)、急性間質性肺炎(AIP)、隱原型機化性肺炎(COP)及淋巴細胞型間質性肺炎(LIP)。自發性肺纖維化係自發性間質性肺炎之亞型，在自發性肺纖維化中所見的病理模式，實質上是普通型間質性肺炎的病理模式。

若纖維化與另一疾病有明確關聯，或者肺部結疤(纖維化)係用藥的副作用或為暴露於已知引起肺纖維化的一種藥劑之結果，則纖維化的病因不再被視為自發性，而該等纖維化係稱為非自發性肺纖維化。當肺纖維化與另一疾病諸如硬皮症或類風濕性關節炎有明確關聯時，則可稱為硬皮症繼發型或類風濕性關節炎繼發型肺纖維化。

促成肺纖維化的因子中之若干非限制性實例包括吸煙；長時間暴露於職業或環境污染物或粉塵；病毒性或細菌性肺部感染；特定藥物，諸如一些抗生素、抗心律不整劑、抗痙攣劑、化療藥物或治療性輻射；胃食道逆流疾病(GERD)；及遺傳傾向性。

大部分肺纖維化病患的肺功能隨著時間逐漸惡化，但也有一些病患維持穩定。有些患者在沒有明顯的臨床感染或其他原因之情況下，可能出現肺功能急性惡化事件；該等急性惡化事件稱為“急性加重”。一個常見的症狀是呼吸短促，又稱作呼吸困難，許多病患提及喘不過氣來的感覺。隨著病情惡化與肺部受損加劇，輕微的身體活動如淋浴與穿衣即可能引發呼吸困難。約50%的肺纖維化病患可能由於血中缺氧而有指尖“杵狀膨大”現象。杵狀膨大是指甲下的肉增厚，導致指甲向下彎曲。其他常見的症狀包括慢性乾燥、乾咳、疲勞與虛弱、胸部不適、食慾不振及不明原因的體重減輕。

下列的一或多項試驗係適用於辨識罹患肺纖維化或自發性肺纖維化的病患：病史與身體檢查、胸部X射線、高解析度電腦斷層掃描攝影術(HRCT)、肺功能檢查、脈搏血氧飽和度測定、測定動脈血中含氣量(ABG)、支氣管鏡、支氣管肺泡灌洗(BAL)、外科手術肺部活組織檢查、運動試驗、食道攝影、心臟超音波檢查(ECHO)。

在一些情況下，可以根據三項因素進行自發性肺纖維化之診斷：排除間質性肺病的其他已知病因；在未進行外科手術肺部活組織檢查的病患之高解析度電腦斷層掃描攝影術(HRCT)上出現普通型間質性肺炎模式；及在進行外科手術肺部活組織檢查的病患之HRCT與外科手術肺部活組織檢查模式的特定組合。

“藥學上可接受的”係指無毒性及適合投藥至一病患，包括人類病患在內。

“藥學上可接受的鹽類”係指無毒性及適合投藥至病患之鹽類。非限制性實例包括鹼金屬；鹼土金屬；及各種的一級、二級與三級銨鹽。當具化學式(I)的化合物之酯類包括一個陽離子部分，例如當該酯包括一種胺基酸酯時，其鹽類可包括各種羧酸鹽類、磺酸鹽類及礦酸鹽類。特定的非限制性之鹽類實例包括鈉鹽、鉀鹽及鈣鹽。

“保護基”係指眾所周知的官能基，當其與一官能基結合時，將使得所產生之受保護的官能基對於在化合物的其他部分待進行之反應及對應的反應條件具有惰性；及其可在去保護的條件下進行反應，而再生其原有的官能性。所選擇的保護基係與分子的其餘部分相容。“羧酸保護基”係在苯氧烷基羧酸的合成作用期間保護其等的羧基官能度。羧酸保護基的非限制性實例包括苄基、對甲氧苄基、對硝基苄基、烯丙基、二苯甲基及三苯甲基。羧酸保護基的其他實例可見於標準參考文獻中，諸如約翰威利父子(John Wiley & Sons)公司於1991年出版及由Greene與Wuts所著之“有機合成作用中之保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)”乙書第二版；及普列南(Plenum Press)出版公司於1975年出版及由McOmie所著之“有機化學中之保護基(Protective Groups in Organic Chemistry)”乙書。在技藝中可找到用於進行本申請案所揭露的羧酸保護作用與去保護作用之方法，特別在上文所提及之Greene與Wuts所著乙書及其中所引用的文獻中。

“治療”一醫學病況或一病患係指採取步驟以獲致有益或所欲的結果，包括臨床結果在內。就本發明的不同方面與實施例之目的而言，有益或所欲的臨床結果包括但不限於降低、減輕或改善肺纖維化的一或多種表現或負面影響；改善一或多項臨床結果；減少纖維化的程度；延遲或減緩纖維化的惡化；改善、緩解或穩定纖維化狀態；以及在本申請案中所述的其他有益結果。

在本申請案中提供用於投予一有效量之具化學式(I)的一化合物之方法：或其代謝物，或具化學式(I)的化合物或其代謝物之酯類，或其中各者之藥學上可接受的鹽類，其中該等變項係如本申請案所界定。

如本申請案中所用之“其代謝物”，係指所顯示的治療活性係與具化學式(I)的一化合物實質上類似之一種代謝物。該等代謝物的非限制性實例所包括之化合物，係其中具化學式(I)的化合物之-COCH₃基係經代謝成為1-羥基乙基(-CH(OH)Me)基，而-COCH₃基係與含有-O-(CH₂)_nCO₂H基團的苯基連接。

含有1-羥基乙基之代謝物係在1-羥基乙基的位置1上具有一個不對稱中心。對應的鏡相異構物及其混合物，及包括外消旋混合物在內，係涵蓋在本申請案中所用之具化學式(I)的化合物之代謝物之內。

如本申請案中所用之“其酯類”，係指具化學式(I)的化合物中所示之酚式羥基的酯類及/或羧酸的酯類，及具化學式(I)的化合物之代謝物的1-羥基乙基(一種脂族羥基)之酯類。酚式羥基及/或脂族羥基之酯類可包括但不限於羧酸R_A-CO₂H作為對應的酸，其中R_A為C₁-C₆烷基、芳基、雜芳基、C₃-C₁₂環烷基或C₂-C₈雜環基，其中該烷基、芳基、雜芳基、環烷基或雜環基係選擇性地被1至4個C₁-C₃烷基、芳基、CO₂H、胺基、烷基胺基或二烷基胺基取代。亦可考慮其他的酸，諸如單磷酸、二磷酸或三磷酸。羧酸的酯類可包括但不限於具化學式R_A-OH的化合物作為對應的醇，其中R_A係如上所界定。在一實施例中，僅化學式(I)中的羧酸被酯化。在另一實施例中，僅化學式(I)中的酚式羥基被酯化。在另一實施例中，R_A為C₁-C₄烷基。如嫻熟的技術人員所顯而易見的，該等酯類係作用為前驅藥，而在活體內水解釋出具化學式(I)的化合物或其鹽類。

在一實施例中，具化學式(I)的化合物係具化學式(IA)的一化合物：在另一實施例中，具化學式(I)與(IA)的化合物之代謝物係具化學式(IB)的一化合物：

在另一實施例中，該化合物係以口服方式投予。在另一實施例中，該化合物係以錠劑或膠囊之形式投予。在另一實施例中，具化學式(IA)的化合物係以多晶型A存在，其實質上不含其他的多晶型。在另一實施例中，該化合物係以液態劑型之形式投予。在另一實施例中，該化合物的投藥量係約100至約4,000毫克/日，分成一份、二份或三份投予。

可藉由嫻熟的技術人員眾所周知的方法，如在博萊黴素(bleomycin)誘發的小鼠肺纖維化模式中，試驗本申請案中所用之化合物的功效。

合成作用

具化學式(I)的化合物之合成作用與特定的生物活性係述於第4,985,585號美國專利，其在此完整地併入本案以為參考資料。例如，具化學式(IA)的化合物之製備係藉由將具化學式(II)的苯酚：其中，R係一個羧酸保護基，與具化學式(III)的一化合物反應：而提供具化學式(IC)的一化合物：酸保護基或R基的非限制性實例係包括C₁-C₆烷基、苄基、二苯甲基及三苯甲基，其中該苄基、二苯甲基或三苯甲基係選擇性地被1至6個C₁-C₆烷基、鹵代基及/或C₁-C₆烷氧基取代。嫻熟的技術人員將明瞭，可使用溴基以外之具化學式(III)的脫離基。該等其他脫離基之非限制性實例係包括氯基或甲苯磺酸鹽。

藉由受保護之具化學式(IC)的羧酸之去保護作用，而提供具化學式(IA)的化合物。基於本揭露內容將明瞭，如本發明之具化學式(IC)的化合物係適用於一些實施例。去保護方法之非限制性實例，係包括鹼性水解作用及在氫氣與一種催化劑諸如鈀/碳或鉑/碳下之氫解作用。

該等反應係在一種惰性有機溶劑中進行，例如及不限於丙酮、甲基乙基酮、二乙基酮或二甲基甲醯胺。可在低於室溫至高達溶劑的回流溫度之一溫度，在一種無機鹼諸如碳酸鉀或碳酸鈉之存在下，及選擇性地在碘化鉀之存在下，進行親核性置換反應。該等反應之進行時間，係足以提供藉由眾所周知的方法諸如薄層層析法與¹H-NMR所測定之大量產物。本申請案中所用的其他化合物係藉由本申請案中所述的程序及起始原料的適當取代作用而製備，及/或遵循嫻熟的技術人員眾所周知的方法而製備。亦見第5,290,812號美國專利(在此完整地併入本案以為參考資料)。

具化學式(IA)的化合物係在受控條件下再結晶，而得實質上純的斜方晶型，稱作晶型A晶體(如90%以上及較佳至少95%為晶型A)。多晶型A及其製造方法係述於第7,060,854號與第7,064,146號美國專利；其等在此完整地併入本案以為參考資料。具化學式(I)的化合物之所有多晶型物皆具有活性，但以多晶型A為較佳者。在特定的條件下，該多晶型物的溶解度與生物可利用性係優於其他的多晶型物，及因而晶型A可提供改善的固體調配物或固態劑型。

例如，可在25℃至40℃，藉由將具化學式(IA)的化合物溶於5至10重量份的乙醇，產生一種黃色至橘色的溶液，而製得晶型A晶體。在乙醇溶液中加入1至10份的水，及在20℃至25℃攪拌約15至60分鐘，然後在5℃至10℃再攪拌1至4小時，較佳2.0至3.0小時，而產生灰白色懸浮液。在該懸浮液中添加5至15份的水，該混合物在5至10℃再攪拌1至4小時，較佳1.5至2.0小時。藉由真空過濾作用分離出白色至灰白色的產物，用水清洗濾餅及於25℃至40℃的真空中乾燥12至24小時。

就本申請案中所用之以鏡相異構形式存在的化合物而言，諸如具化學式(I)的化合物之特定代謝物(例如具化學式IB的化合物)，能以光學方式解析該二種鏡相異構物。例如及不限於藉由形成諸如(S)-(-)-1-(1-萘基)乙基胺之一鹼與對應的羧酸化合物之非鏡像異構鹽，或藉由使用掌性管柱層析法而將鏡相異構物分離，而進行該解析作用。當該等化合物的中間產物亦以鏡相異構形式存在時，能以類似方式解析中間產物。

投藥作用與調配物

本申請案中所用之化合物能以口服方式投予，或藉由靜脈內、肌內及皮下注射投予，或藉由經皮膚方法投予。有效劑量水平可有很大的變化，如每日自約100至約4000毫克。在一實施例中，每日劑量範圍係250至2,000毫克，分成一份、二份或三份給予。在一實施例中，每日劑量範圍係100至500毫克，諸如100、200、300、400或500毫克，分成一份、二份或三份給予。在一實施例中，每日劑量範圍係250至2,000毫克，諸如250、500、750、1,000、1,250、1,500、1,750或2,000毫克，分成一份、二份或三份給予。在一實施例中，每日劑量範圍係1000至4,000毫克，諸如1,000、2,000、3,000或4,000毫克，分成一份、二份或三份給予。在另一實施例中，該劑量係每日投予1000毫克二次。在其他實施例中，適宜的劑量係包括每日1000毫克一次，每日1000毫克二次，及每日750毫克三次。

實際量將依所治療病患的情況而定。如本領域的嫻熟技術人員所認知的，主治醫師會將改變活性物質的作用之眾多因素納入考量，諸如年齡、體重、性別、患者的飲食與病況、投藥時間、投藥率及投藥途徑。本領域的嫻熟技術人員藉由使用常規的劑量測定試驗，可確定供一個特定病況組合所用的最佳劑量。

可將本申請案中所用之化合物配製成任一藥學上可接受的形式，包括液體、散劑、乳膏劑、乳劑、丸劑、片劑、栓劑、懸液劑、溶液劑等。含有本申請案中所用化合物之治療性組成物，一般係依據已知的既定慣例而與一或多種藥學上可接受的成分一起配製。一般而言，使用一載體諸如改質澱粉本身或與例如約10重量%的羧甲基纖維素(艾維素(Avicel))組合，而形成錠劑。在製錠過程中，用1000至3000磅的壓力壓製調配物。錠劑較佳展現約1.5至8.0公斤力/平方公分的平均硬度，較佳為5.0至7.5公斤力/平方公分。崩散時間係自約30秒至約15或20分鐘不等。

供口服用的調配物能以硬質明膠膠囊形式提供，其中本申請案中所用之治療上的活性化合物係與一種惰性固態稀釋劑諸如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或以軟質明膠膠囊形式提供，其中該等化合物係與一種油性介質如液態石蠟或橄欖油混合。適宜的載體包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉鹽、一種低熔點蠟、可可脂等。

可將本申請案中所用之化合物配製成摻有藥學上可接受的賦形劑之含水懸浮液，藥學上可接受的賦形劑諸如懸浮劑，如羧甲基纖維素鈉鹽、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或潤濕劑，諸如天然存在磷脂質如卵磷脂，或鹼性氧化物與脂肪酸的縮合產物如聚氧乙烯硬脂酸酯，或環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物如十七烷乙烯-氧化鯨蠟醇，或環氧乙烷與從脂肪酸與一種已醣醇所衍生的偏酯之縮合產物如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或環氧乙烷與從脂肪酸與已醣醇酐所衍生的偏酯之縮合產物如聚氧乙烯去水山梨醇單油酸酯。該等含水懸浮液亦含有一或多種防腐劑，如對羥苯甲酸乙酯或對羥苯甲酸正丙酯；一或多種著色劑；一或多種調味劑及一或多種甜味劑，諸如甘油、山梨糖醇、蔗糖、糖精或環乙烷胺基磺酸鈉或環乙烷胺基磺酸鈣。

適宜的調配物亦包括緩釋劑型，諸如該等述於第4,788,055號、第4,816,264號、第4,828,836號、第4,834,965號、第4,834,985號、第4,996,047號、第5,071,646號及第133,974號美國專利中者，其內容在此完整地併入本案以為參考資料。

適用於口服投藥的其他形式包括液體形式製劑，包括乳劑、糖漿劑、酏劑、水溶液劑，或意欲在使用之前轉變成液體形式製劑之固體形式製劑。可在溶液中製備乳劑，例如在丙二醇水溶液中；或可含有乳化劑，例如諸如卵磷脂、山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠。可藉由將有效成分溶於水中，及添加適宜的著色劑、調味劑、安定劑及增稠劑，而製備水溶液劑。除了有效成分之外，固體形式製劑可含有著色劑、調味劑、安定劑、緩衝劑、人工與天然甜味劑、分散劑、增稠劑、助溶劑等。

本申請案中所用之化合物可配製供非經腸投藥用(如藉由例如推注或連續輸注之注射作用)，及可能以安瓿、預充填式注射劑、小容量輸液之單位劑量形式呈現，或以多次劑量容器呈現及添加一種防腐劑。該等組成物可能以位於油性或水性載劑中的懸浮液、溶液或乳劑形式呈現，例如位於含水的聚乙二醇中之溶液形式。油性或非水性載體、稀釋劑、溶劑或載劑之實例係包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(如橄欖油)及可注射性有機酯類(如油酸乙酯)，及可含有調配劑諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑或懸浮劑、安定劑及/或分散劑。任擇地，有效成分可為粉末形式，其係藉由滅菌固體的無菌分離作用或藉由溶液的冷凍乾燥作用而獲得，供在使用前用一種適宜載劑如滅菌的無熱原水重新組成。

本申請案中所用之化合物可配製供經鼻投藥之用。溶液劑或懸液劑係經由常規方式，例如用滴管、吸量管或噴劑，直接施用至鼻腔。可提供單一或多次劑量形式的調配物。病患可經由一滴管或吸量管投予一適當的預定量之溶液劑或懸液劑。例如可藉由一種計量型霧化噴霧幫浦投予噴劑。

本申請案中所用之化合物可配置供氣霧劑投藥之用，特別是投藥至呼吸道及包括鼻內投藥作用。該化合物一般將具有微小粒徑，例如5微米或更小的量級。可藉由技藝中所知的方式，例如藉由微米化，達到該量級的粒徑。有效成分係以加壓包裝提供，其中具有一種適宜的推進劑諸如氟氯碳化物(CFC)(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷)、二氧化碳或其他適宜的氣體。氣霧劑亦可含有一種表面活性劑，諸如卵磷脂。可藉由計量閥來控制藥物的劑量。任擇地，可用乾燥粉末的形式提供有效成分，例如化合物係位於適宜的粉末基質中，如乳糖、澱粉、澱粉衍生物諸如羥丙基甲基纖維素與聚乙烯氫吡咯酮中之一種粉末混合物。粉末載體將在鼻腔中形成凝膠。粉末組成物可用位於膠囊或藥匣中的單位劑量形式呈現，例如明膠或泡鼓包裝，其中之粉末可藉由吸入器進行投藥。

本申請案中所用之化合物可配製供局部投藥至表皮之用，如以軟膏劑、乳膏劑或洗劑之形式，或以一種透皮貼劑之形式。例如可用一種水性或油性基質配製軟膏劑與乳膏劑，及添加適宜的增稠劑及/或膠凝劑。可用一種水性或油性基質配製洗劑，及一般亦含有一或多種乳化劑、安定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。適合供局部投藥至口中的調配物係包括含片，其包括位於調味基質中之活性劑，調味基質通常為蔗糖與阿拉伯膠或黃蓍膠；包括軟錠，其包括位於惰性基質中之有效成分，惰性基質諸如明膠與甘油或蔗糖與阿拉伯膠；及包括漱口液，其包括位於適宜的液態載體中之有效成分。

本申請案中所用之化合物可配製供以栓劑形式投藥之用。在該種調配物中，首先將一種低熔點蠟諸如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂熔化，及例如藉由攪拌作用，讓有效成分均勻地分散於其中。然後將熔化的均質混合物倒入適宜大小的模具中，讓其冷卻及固化。

本申請案中所用之化合物可配製供陰道投藥之用。子宮托、衛生棉、乳膏劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴劑除了含有有效成分之外，尚含有本技術領域所知的適當載體。

視需要，可製備具有腸溶膜衣的調配物，腸溶膜衣係適於有效成分的緩釋與控釋型投藥作用。可供用於本發明的目的之一種常見的控釋型調配物類型，係包含一個惰性核心諸如一個糖球；一個第一層；在第一層上塗覆含有藥物的一個內側第二層；及控制藥物從內層釋出之一層外膜或第三層。

該等核心較佳由水溶性或遇水膨脹性材料製成，而且可為常規用於作為核心的任何此類材料，或製成球狀或丸狀的任何其他藥學上可接受的水溶性或遇水膨脹性材料。該等核心可為由諸如蔗糖/澱粉(糖球NF)、蔗糖晶體等材料製成的球狀物，或為典型包含賦形劑諸如微晶纖維素與乳糖之經擠出與乾燥的球狀物。

第一層之實質上不溶於水的材料一般為一種形成“GI不溶性”或“GI部分不溶性”膜之聚合物(分散或溶於一溶劑中)。可提及的實例為乙基纖維素、醋酸纖維素、醋酸丁酸纖維素、聚甲基丙烯酸酯類諸如丙烯酸乙酯/甲基丙烯酸甲酯共聚物(尤特奇(Eudragit)NE-30-D)及甲基丙烯酸銨共聚物A型與B型(尤特奇(Eudragit)RL30D與RS30D)及聚矽氧彈性體。通常，塑化劑係與聚合物一起使用。例示性塑化劑包括：癸二酸二丁酯、丙二醇、檸檬酸三乙酯、檸檬酸三丁酯、蓖麻油、乙醯化單酸甘油酯類、乙醯基檸檬酸三乙酯、乙醯基檸檬酸丁酯、磷苯二甲酸二乙酯、磷苯二甲酸二丁酯、三乙酸甘油酯、分餾椰子油(中等鏈長的三酸甘油酯)。

含有有效成分的第二層可由有效成分(藥物)連同或不連同作為黏合劑之一種聚合物所組成。當使用黏合劑時，該黏合劑通常是親水性，但也可能是水溶性或水不溶性。待用於含有活性藥物的第二層之例示性聚合物係親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；聚伸烷基二醇，諸如聚乙二醇、明膠、聚乙烯醇、澱粉及其衍生物；纖維素衍生物，諸如羥基丙基甲基纖維素(HPMC)、羥基丙基纖維素、羧甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥基乙基纖維素、羧乙基纖維素、羧甲基羥基乙基纖維素、丙烯酸聚合物、聚甲基丙烯酸酯或其他任何藥學上可接受的聚合物。第二層中之藥物相對於親水性聚合物的比例係通常位於1：100至100：1(重量/重量)之範圍。

適合在第三層中用於控制藥物釋出之適宜的聚合物或膜可選自水不溶性聚合物或或其溶解度取決於pH值之聚合物，諸如例如乙基纖維素、鄰苯二甲酸羥基丙基甲基纖維素、醋酸鄰苯二甲酸纖維素、醋酸偏苯三酸纖維素、聚甲基丙烯酸酯或其混合物，選擇性地與塑化劑組合使用，諸如上文所提及者。

選擇性地，控釋層除了包含上述的聚合物之外，尚包括具有不同的溶解度特性之另一種或多種物質，以調節該控釋層的滲透性，及從而調節該控釋層的釋出率。可與例如乙基纖維素一起作為調節劑之例示性聚合物係包括：HPMC、羥基乙基纖維素、羥基丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯啶酮(PVP)、聚乙烯醇、其溶解度取決於pH值之聚合物諸如醋酸鄰苯二甲酸纖維素或甲基丙烯酸銨共聚物及甲基丙烯酸共聚物，或其混合物。若需要，控釋層中亦可包括添加劑，諸如蔗糖、乳糖及醫藥級表面活性劑。

在本申請案中亦提供單位劑型的調配物。在該等形式中，將調配物再分成含有適當量的有效成分(例如及不限於具化學式(I)的一化合物或其酯類，或其中各者的鹽類)之單位劑量。單位劑型可為包裝製劑，該包裝中含有個別量的製劑，諸如包裝錠劑、膠囊及裝在小瓶或安瓿中的粉末。同時，單位劑型可為膠囊、錠劑、扁囊劑或其含片，或者可為其中任一者之適當數量的包裝形式。

其他適宜的藥學載體及其等的調配物係述於美國賓州伊斯頓(Easton)之麥克(Mack)出版公司於1995年出版及由E.W.Martin編輯之“雷明頓：藥劑學之科學與應用(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)”乙書第 19版。

至此整體說明了本發明，當參考下列實例時，將更容易瞭解理解本發明；該等實例之提供係為了說明之用，而非意欲限制本發明。

實例

在實例中使用下列縮寫。

BAL：支氣管肺泡灌洗

BALF：支氣管肺泡灌洗液

BLM：博萊黴素(bleomycin)

CT：電腦斷層掃描攝影術

FLAP：5-脂肪加氧酶活化蛋白

IP：腹膜內

LTC4：白三烯C4

PBS：磷酸鹽緩衝鹽水

ROI：重點區域

SD：標準差

例1：MN-001在博萊黴素(bleomycin)(BLM)誘發型肺纖維化中之治療上的有益效應

從日本SLC有限公司取得無病原體、七星期大的雌性C57BL/6J小鼠。在第0日，使用微型噴霧器(美國的賓州世紀(Penn-Century)公司)，藉由單次氣管內投藥作用投予位於磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中的硫酸博萊黴素(BLM，日本的日本化藥株式會社(Nippon Khyaku))，每隻動物的投予體積為50微升及劑量為3毫克/公斤，而使得40隻小鼠誘發肺纖維化。基於治療開始前一天的體重，將BLM誘發型肺纖維化模式小鼠隨機分成四組，各有10隻小鼠。在實驗期間，每日測量個別體重。每日監測小鼠的存活與否、臨床症狀及行為。在第0日(BLM投藥之前)、第7日(治療之前)及第20日(治療之後)進行電腦斷層掃描(CT)。

組別：

第1組(PBS，對照組)：以氣管內方式對於八隻正常小鼠投予體積為50微升的PBS，無任何治療。

第2組(載劑)：自第7日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予體積為10毫升/公斤的載劑(0.3%羧甲基纖維素(CMC))。

第3組(30毫克/公斤的MN-001)：自第0日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為30毫克/公斤。

第4組(100毫克/公斤的MN-001)：自第0日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為100毫克/公斤。

第5組(300毫克/公斤的MN-001)：自第0日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為300毫克/公斤。

在第21日犧牲所有組別中的小鼠，以進行下列分析。BALF(支氣管肺泡灌洗液)之分析：用血球計計數BALF中的細胞。

生化分析：藉由一種水解方法量化肺羥脯胺酸。肺切片的組織病理學分析(根據常規方法)：進行馬森氏(Masson)三色染色法及估算阿士克羅夫特(Ashcroft)評分。使用肺的總RNA進行基因表現分析：可進行TIMP-1、膠原蛋白第1型、α-SMA、5-脂肪加氧酶、FLAP及LTC4合成酶之即時RT-PCR分析。統計檢定：使用邦弗洛尼氏(Bonferroni)多重比較檢定，進行統計檢定。使用卡本-麥爾(Kaplan-Meier)存活率法來建立存活率曲線，及使用對數秩檢定進行比較。當P值<0.05時，視為統計上顯著。

例2：自發性肺纖維化之治療

以40名罹患自發性肺纖維化的病患進行一項隨機、雙盲、安慰劑對照研究。病患隨機領受MN-001或MN-002(每日劑量各為500毫克及持續長達6個月)或安慰劑。

病患接受下列檢測：1)自基線至第12星期之6分鐘步行距離(6MWD)之變化，2)自基線至第12星期之休息時的血液動力學參數(RHC)之變化，及3)自基線至第12星期之紐約心臟協會(NYHA)級別。該項研究中所提供的其他檢測為：1)第6星期與第12星期於6分鐘步行距離期間之去飽和度測量的量與基線氧氣去飽和度之間的變化，2)第6星期與第12星期的用力肺活量(FVC)及擴散能力(DLCO)與基線之間的變化，3)第6星期與第12星期使用波氏(Borg)量表所測量的呼吸困難程度與基線之間的變化，及4)採用週期幾何學之運動血液動力學(RHC)自基線至第12星期之變化。

對於個體進行下列程序，這是醫療常規的一部分：在右側心臟插入導管、經胸心臟超音波檢查、行走六分鐘、全肺功能測試、胸部HRCT及一組血液檢驗(B型排鈉肽(BNP)、D-D雙合試驗、CRP、肌鈣蛋白I型及肝功能檢測)。

在插入導管當天進行醫療常規的血液檢查，檢驗BNP、C反應蛋白、D-D雙合試驗、肌鈣蛋白I型及肝功能檢測。研究用的血液檢查包括在4根試管中各置入4西西血液，4根試管各包括深綠色蓋、紫色蓋、紅色蓋及黃色蓋。血液檢查(醫療常規與研究用血液皆然)係按所排定的期程，在納入研究的所有病患重複進行。

在最初的6MW測量波氏(Borg)呼吸困難評分，之後按排定的期程(見下表)在後續的6MW進行。在開始進入研究時測定NYHA功能級別，之後按排定的期程測定。

數據的時間點流程圖

例3：自發性肺纖維化之治療及其各種症狀

本實例表明MN-001對於博萊黴素(bleomycin)(BLM)誘發型肺纖維化之效應。如阿士克羅夫特(Ashcroft)評分與肺部羥脯胺酸含量所證明，在所有經BLM處理的小鼠中發生肺纖維化。在第21日，相較於載劑，MN-001之治療顯示阿士克羅夫特(Ashcroft)評分與肺部羥脯胺酸含量顯著降低或呈現下降趨勢。在本研究中，在BLM投藥後之第7日，投予MN-001。因為BLM在第7日已誘發纖維化反應，本研究中之治療被視為一種“治療方案”。當在小鼠的博萊黴素誘發型肺纖維化模式中檢測出纖維化之後投予MN-001時，MN-001的治療作用具有顯著的抗纖維化效應。

材料與方法試驗物質

為製備給藥溶液，將MN-001稱重及溶於載劑(0.3% CMC)中。

動物

從日本SLC公司(日本)取得七星期大的雌性C57BL/6小鼠(17至21克)。在常規條件下眷養動物及餵食普通飼料(CE-2；日本CLEA公司)。本研究所用的所有動物之照料係遵循適當準則。

環境

動物持續眷養在常規條件下的動物房中。

動物籠舍

將動物眷養於聚碳酸酯籠KN-600(日本株式會社夏目製作所(Natsume Seisakusho))中，每籠最多5隻小鼠。使用無菌的紙清潔(日本SLC公司)作為動物墊料，每星期更換一次。

食物與飲水

提供無菌的普通飼料供自由取用，飼料係放置在籠子頂部的金屬蓋上及地板上，俾方便取用。亦從配備有橡皮塞與一個吸管的水瓶提供蒸餾水供自由取用。水瓶每星期更換一次，經清洗、在高壓釜中滅菌後再供使用。

動物與籠舍之識別

藉由耳環上所刻的數字而識別小鼠。各籠也有特定的識別代碼。

BLM誘發型肺纖維化模式之製備與隨機化

在第0日，使用微型噴霧器^®(美國的賓州世紀(Penn-Century)公司)，以氣管內方式對於20隻小鼠投予博萊黴素(日本的日本化藥(Nippon Kayaku)公司)，每隻動物投予50微升體積之位於0.9%鹽水中的博萊黴素。

藥物投藥途徑

藉由口服途徑，投予一體積之10毫升/公斤的MN-001與載劑。

治療劑量

每日以30、100、300毫克/公斤之劑量投予MN-001一次。

電腦斷層掃描之評估

在第0日(BLM投藥之前)、第7日及第20日(犧牲的前一天)進行CT掃描。在戊巴比妥鈉(日本的共立製藥株式會社(Kyoritsu Seiyaku))麻醉下，將小鼠放在一個夾持具中，及放入X光CT系統(日本的阿洛卡(Aloka)公司型號LCT-200)中。將影像轉換成DICOM格式，及用歐尼斯檢視器(Onis Viewer)(日本數位核心(DigitalCore)公司)進行分析。從各掃描數據組決定兩個切片(上：第四胸椎，下：第七胸椎)，及在下列區域界定八個重點區(ROI)：右上胸椎前方與後方區域、左上胸椎前方與後方區域。將八個重點區的強度平均值界定為個體的肺密度水平。

支氣管肺泡灌洗液(BALF)之收集與分析

藉由用無菌PBS(每次0.8毫升)經由氣管沖洗肺三次，而收集BALF試樣。將第一次的灌洗液與另外二次分開。BALF在4℃及1,000xg離心3分鐘，收集上清液及在使用前儲存於-80℃。將來自第一次及其餘次的灌洗液之細胞片狀沈澱物匯集在一起。用血球計計數BALF的細胞總數。

肺部羥脯胺酸含量之測量

為量化肺部羥脯胺酸含量，藉由如下的鹼-酸水解法處理冷凍的左肺試樣(15至25毫克)。在121℃，用400微升的6N鹽酸進行肺試樣的酸水解作用達20分鐘，及用含有10毫克/毫升的活性碳之400微升的4N氫氧化鈉加以中和。在試樣中添加AC緩衝液(400微升的2.2M醋酸/0.48M檸檬酸)，接著進行離心作用，收集上清液。從16微克/毫升開始，藉由反-4-羥基-L-脯胺酸(美國西克瑪艾爾迪希(Sigma-Aldrich)公司)的連續稀釋作用建構標準曲線。所製備的試樣與標準品(各400微升)係與400微升的氯胺T溶液(日本和光(Wako)純藥工業株式會社)混合，及於室溫培養25分鐘。然後將試樣與艾利希氏(Ehrlich)溶液(400微升)混合，及於65℃加熱20分鐘，以讓顏色產生。當試樣在冰上冷卻及離心除去沉澱物之後，在560奈米測量各上清液的光學密度。由羥脯胺酸標準曲線計算羥脯胺酸的濃度。肺部羥脯胺酸水平係以每片左肺的微克數之方式呈現。

組織病理學分析

將在10%中性緩衝型甲醛中預先固定的右肺組織包埋於石蠟中，及在馬森氏(Masson)三色染色作用中進行切片，及依據製造商的說明書，用馬森氏(Masson)三色染色套組(美國西克瑪(Sigma)公司)進行切片的染色作用。使用阿士克羅夫特(Ashcroft)評分(Ashcroft,T.等人於1988年期刊“J Clin Pathol”第41期第467-70頁乙文)來評估肺纖維化程度，以供定量組織分析之用。

統計檢定

使用GraphPad Prism 4(美國GraphPad Software軟體公司)上的邦弗洛尼氏(Bonferroni)多重比較檢定，進行統計分析。當P值<0.05時，視為統計上顯著。當一個單側t檢驗所得的P值<0.10時，則認為存在一趨勢或傾向。結果係以平均值±標準差之形式呈現。

實驗設計與治療治療組第1組(PBS對照組)：

以氣管內方式對於八隻正常小鼠投予體積為50微升的PBS，無任何治療。

第2組(載劑)：

自第7日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予體積為10毫升/公斤的載劑(0.3%羧甲基纖維素)。

第3組(30毫克/公斤的MN-001)：

自第7日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為30毫克/公斤。

第4組(100毫克/公斤的MN-001)：

自第7日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為100毫克/公斤。

第5組(300毫克/公斤的MN-001)：

自第7日至第20日，以口服方式對於10隻BLM誘發型肺纖維化模式小鼠投予MN-001，劑量為300毫克/公斤。

治療期程係歸納於下列表1。

每日監測存活與否、臨床症狀及行為。在開始BLM投藥(第0日)之後，每日記錄體重。在戊巴比妥鈉(日本的共立製藥株式會社(Kyoritsu))麻醉下，藉由從腹部大動脈放血而犧牲動物。

結果體重變化與整體狀況

體重係示為相較於基線(第0日)之體重變化百分比。

在PBS對照組中，平均體重在研究期間逐漸增加。從第9日至第20日，載劑組的平均體重損失係顯著大於PBS對照組。不論在任何一天，載劑組與任一治療組的體重變化之間並無顯著差異。

就犧牲當天的平均體重損失而言，載劑組與PBS對照組、MN-001治療組中任一者之間並無顯著差異(PBS對照組：112.4±4.5%，載劑：106.9±6.4%；30毫克/公斤的MN-001：104.8±3.7%；100毫克/公斤的MN-001：100.9±10.6%；300毫克/公斤的MN-001：104.2±4.1%)(表2)。

存活率分析

在載劑組中，10隻小鼠中有2隻在實驗期間死亡。載劑組與PBS對照組、MN-001治療組中任一者的存活率之間並無顯著差異。

在治療期間，在第21日前即死亡的小鼠如下；在載劑組中，10隻小鼠中有2隻死亡。在30毫克/公斤的MN-001組中，10隻小鼠中有2隻死亡。

CT分析

相較於PBS對照組，載劑組在第21日的肺密度顯著增加。雖然載劑組與MN-001治療組中任一者之第0日、第7日及第21日的肺密度之間並無顯著差異(表3)，在對應的圖(見圖1.1至1.3)中，肉眼可見肺密度呈現下降趨勢。

BALF分析中之細胞分析

相較於PBS對照組，載劑組之BALF中的細胞總數有增加之趨勢。在載劑組與MN-001治療組中任一者的細胞總數之間並無顯著差異(PBS對照組：3.4±1.0(x10⁵個細胞)，載劑組：82.9±63.0(x10⁵個細胞)，30毫克/公斤的MN-001組：65.1±26.1(x10⁵個細胞)，100毫克/公斤的MN-001組：124.4±127.3(x10⁴個細胞)，300毫克/公斤的MN-001組：76.0±35.0(x10⁵個細胞))。

肺部羥脯胺酸含量

相較於PBS對照組，載劑組之肺部羥脯胺酸含量有增加之趨勢。相較於載劑組，30毫克/公斤的MN-001組與100毫克/公斤的MN-001組之肺部羥脯胺酸含量顯著降低。相較於載劑組，300毫克/公斤的MN-001治療組之肺部羥脯胺酸含量亦有降低之趨勢(PBS對照組：30.8±9.8微克/左肺；載劑：70.0±13.5微克/左肺；30毫克/公斤的MN-001：49.8±7.9 微克/左肺；100毫克/公斤的MN-001：56.1±10.1微克/左肺；300毫克/公斤的MN-001：56.4±12.7微克/左肺)。(圖2與表4)。

組織分析

基於馬森氏(Masson)三色染色法與阿士克羅夫特(Ashcroft)評分，載劑組的阿士克羅夫特評分係顯著高於PBS對照組。相較於載劑組，300毫克/公斤的MN-001組中的阿士克羅夫特評分係顯著降低。相較於載劑組，30毫克/公斤的MN-001與100毫克/公斤的MN-001之治療組中的阿士克羅夫特評分有降低之趨勢(PBS對照組：0.2±0.1；載劑：3.1±0.3，30毫克/公斤的MN-001：2.0±0.7；100毫克/公斤的MN-001：2.2±0.8；300毫克/公斤的MN-001：1.8±0.6)。(表5與圖3)。

雖然已說明與述及特定實施例，但應理解依據本領域中的一般技術可在其中進行變化與修改，而不偏離下列申請專利範圍中所界定之技術的更廣泛方面。

在本申請案中以例示性方式述及的實施例，可在缺乏任一或多種元素、一或多項限制之情況下適當地實施，這在本申請案中並未明確揭露。因此，例如“包含”、“包括”、“含有”等詞應以廣泛及不限於之方式解讀。此外，在本申請案中所用的詞彙與表達用語係作為說明性而非限制性詞彙之用，在使用該等詞彙與表達用語時，並無意排除所示與所述特徵的任一等效物或其部分，而是認知到可能在申請專利範圍的技術範疇類進行不同的修改。此外，應理解“實質上由...所組成”一詞係包括所明確引述的該等元素，以及對於申請專利範圍的技術之基本與新穎特徵並無實質影響的附加元素。“由...所組成”一詞則排除未指定的任何元素。

本揭露內容並非侷限於本申請案中所述的特定實施例。本領域的嫻熟技術人員將理解，可進行眾多修改與變化而不偏離其精神與範圍。除了本申請案中所列舉者，本領域的嫻熟技術人員自上述說明將明瞭位於揭露內容範圍內之功能上等效的方法與組成物。該等修改與變化係意欲位於所附申請專利範圍的範疇內。本揭露內容僅受限於所附申請專利範圍以及該申請專利範圍有權請求之等效物的完整範疇。應暸解本揭露內容不侷限於特定方法、試劑、化合物組成物或生物系統，其等當然可以有所不同。應瞭解本申請案所用的詞彙僅為了說明特定實施例之用，而非意在限制。

此外，當揭露內容的特性或方面係按馬庫西群組方式說明時，本領域的嫻熟技術人員將明瞭，揭露內容亦從而按馬庫西群組的任何個別成員或成員的子群組織方式說明。

如本領域的嫻熟技術人員所明瞭，就任何及所有目的而言，尤其就提供書面說明而言，本申請案中所揭露的所有範圍亦涵蓋其任何及所有可能的子範圍以及子範圍之組合。即可明瞭所列出的任何範圍係充分說明及可使得同一範圍被細分為至少相等的兩份、三份、四份、五份、十份等。就一個非限制性實例而言，本申請案所論及的各即可細分成較低的三分之一、中間的三分之一及較高的三分之一等。本領域的嫻熟技術人員亦將瞭解諸如“至多”、“至少”、“大於”、“小於”等用語，係包括所陳述的數值，及係指該等範圍後續可如上述細分為子範圍。最後，如本領域的嫻熟技術人員所明瞭，一範圍係包括其中各個別成員。

在本申請案中所提及之所有的出版物、專利申請案、授權專利及其他文件係在此併入本案以為參考資料，猶如各個別出版物、專利申請案、授權專利或其他文件係明確與個別地表明在此完整地併入本案以為參考資料。併入本案以為參考資料之內文中所含有的定義若與本揭露內容中的定義相抵觸時，則予以排除。

其他實施例係闡述於下列的申請專利範圍。

Claims

一種用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化(IPF)的一病患之方法，該方法包括對該病患投予一有效量之一具化學式(I)的化合物、該具化學式(I)的化合物之代謝物、該具化學式(I)的化合物之酯類或該具化學式(I)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類，其中m為自2至5的整數且包括2與5在內，n為自3至8的整數且包括3與8在內，X¹與X²各獨立地代表硫、氧、亞磺醯基或磺醯基，前提在於X¹與X²非同時為氧。
如請求項1之方法，其中該具化學式(I)的化合物係具有化學式(IA)：
如請求項1之方法，其中該具化學式(I)的化合物之代謝物係具化學式(IB)的一化合物：
如請求項1之方法，其中該化合物係以口服方式投予。
如請求項4之方法，其中該化合物係以錠劑或膠囊之形式投予。
如請求項2之方法，其中該化合物係以斜方晶體多晶型存在。
如請求項1之方法，其中該化合物係以液態劑型之形式投予。
如請求項1之方法，其中該化合物的投藥量係約100至約4,000毫克/日，分成一份、二份或三份投予。
如請求項1之方法，其中該病患的肺部結疤被抑制。
如請求項1之方法，其中該病患升高的肺部羥脯胺酸水平被降低及/或被抑制。
如請求項1之方法，其中該病患升高的肺密度被降低。
如請求項1之方法，其中該病患的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中之升高的總細胞數(TCC)被降低。
一種用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之一具化學式(IA)的化合物、該具化學式(IA)的化合物之代謝物、該具化學式(IA)的化合物之酯類或該具化學式(IA)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類。
如請求項13之方法，其中該化合物係以口服方式投予。
如請求項13之方法，其中該化合物係以錠劑或膠囊之形式投予。
如請求項13之方法，其中該化合物係以液態劑型之形式投予。
如請求項13之方法，其中該化合物的投藥量係約100至約4,000毫克/日，分成一份、二份或三份投予。
如請求項13之方法，其中該病患的肺部結疤被抑制。
如請求項13之方法，其中該病患升高的肺部羥脯胺酸水平被降低及/或被抑制。
如請求項13之方法，其中該病患升高的肺密度被降低。
如請求項13之方法，其中該病患的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中之升高的總細胞數(TCC)被降低。
一種用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之一具化學式(IB)的化合物、該具化學式(IB)的化合物之酯類：或前述各者之藥學上可接受的鹽類。
如請求項22之方法，其中該化合物係以口服方式投予。
一種用於治療經診斷出患有自發性肺纖維化的一病患之方法，該方法包括對於該病患投予一有效量之一具化學式(IA)的化合物、該具化學式(IA)的化合物之代謝物、恐具化學式(IA)的化合物之酯類、該具化學式(IA)的化合物之酯類的代謝物：或前述各者之藥學上可接受的鹽類，其中前述各者係以包含斜方晶體的一種固態劑型形式提供。
如請求如請求項24之方法，其中該化合物的投藥量係約100至約4,000毫克/日，分成一份、二份或三份投予。
如請求如請求項24之方法，其中該病患的肺部結疤被抑制。
如請求如請求項24之方法，其中該病患升高的肺部羥脯胺酸水平被降低及/或被抑制。
如請求如請求項24之方法，其中該病患升高的肺密度被降低。
如請求如請求項24之方法，其中該病患的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中之升高的總細胞數(TCC)被降低。
如請求如請求項24之方法，其中該固態劑型係以口服方式投予。