SU1092174A1

SU1092174A1 - Method for preparing liquid culture medium for culturing microorganisms

Info

Publication number: SU1092174A1
Application number: SU823480979A
Authority: SU
Inventors: Владимир Александрович Варганов; Григорий Петрович Пинчук; Валерий Павлович Храповицкий; Людмила Ивановна Колупаева
Original assignee: Белорусский государственный университет им.В.И.Ленина
Priority date: 1982-08-09
Filing date: 1982-08-09
Publication date: 1984-05-15

Abstract

1. СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ЖИДКОЙ ПИТАТЕЛЬНрЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫРА- ЩИВАНИЯ .МИКРООРГАНИЗМОВ, предус- ;матривающий растворение ингредиентов , необходимых дл роста микроорганизмов , в воде с последующим выращиванием их в услови х аэрации, о тли чающийс тем, что, с целью повышени выхода биомассы, перед выращиванием питательную среду обрабатывают озоно-воздушной смесью до достижени концентрации озона 400 -2,6-10 мае.% от объема среды. 2. Способ поп., отличающийс тем, что перед растворением ингредиентов, нeoбxoди alIx дл рОста микроорганизмов, воду обрабатывают озоно-воздушной смесью при содержании в ней озона 1 10-2,410 «асЛ (Л от объема воды. с1. A METHOD FOR PREPARING A LIQUID FOOD MEDIUM FOR CULTIVATION. MICROORANISMS, providing for the dissolution of the ingredients necessary for the growth of microorganisms in water, followed by their cultivation under aeration conditions, in order to increase the biomass yield, in order to increase the biomass yield, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass yield, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass, in order to increase the biomass Before growing, the nutrient medium is treated with an ozone-air mixture until the ozone concentration reaches 400 -2.6-10% by weight of the volume of the medium. 2. Pop-up method, characterized in that before dissolving the ingredients, alIx for growth of microorganisms, the water is treated with an ozone-air mixture with an ozone content of 10-2.410 "acL (L of water volume

Description

Изобретение относитс к микробио логической промьшшенности, в частно сти к способам приготовлени жидкой питательной среды дл выращивани микроорганизмов. Известен способ приготовлени жидкой питательной среды, предусмат риванщий отвар разнообразных животных тканей l . Однако данный способ не обеспечи вает высокую скорость роста микроор ганизмов. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому эффекту вл етс способ подго товки жидкой питательной среды дл выращивани микроорганизмов, предусматривающий растворение ингредиентов , необходимых дл роста микроорганизмов в воде с последующим выращиванием их в услови х аэрации. Согласно известному способу углевод минеральные соли микроэлементы раст вор ют в воде 23 . Недостатком способа вл етс низ кий выход биомассы . микроорганизмов Цель изобретени - повьшение выхода биомассы. Поставленна цель достигаетс те что согласно способу подготовки жидкой питательной среды дл выращива ни микроорганизмов, предусматривающему растворение ингредиентов, нео ходимых дл роста микроорганизмов, в воде с последующим выращиваением их в услови х аэрации, перед вьфащиванием питательную среду обрабатывают озоно-воздушной смесью до достижени концентрации озона 410 2 ,610 мас.% от объема средь. При. этом перед растворением ингредиентов , необходимых дл роста микроорганизмов, воду обрабатывают, озоно-воздушной смесью при содержании в ней озона 1 10 - 2,4- 10 мае от объема воды. Сущность способа заключаетс в следующем. Жидка питательна среда после приготовлени и стерилизации подверг етс однократной озоно-воздушной обработке при концентраци х озона в ней - 2,6Ш мас.% от объема среды, после чего произ:водитс засев микроорганизмов и осуществ.л етс их культивирование. При обработке озоно-воздушной смесью воды, если процесс выращивани микробов идет в нестерильных услови х, не требуетс предварительной стерилизации воды и ингредиентов , если же процесс стерилен, то перед обработкой вода и ингредиенты стерилизуютс отдельно, а затем стерильно смешиваютс . В табл.1 показано вли ние концентрации озона на выход бактерий., В табл. 2 показано вли ние обработки озоно-воздушной смесью воды на выход биомассы. Пример 1. Бульон Хоттингера наливают в качалочную колбу объемом 50 мл и помещают дл стерилизации в автоклав. После стерилизации питательную среду однократно обрабатывают путем барботажа озоновоздушной смесью Через слой среды проходит 6.10 .мас.% озона от ее объема. Бульон Хоттингера после озоновоздушной обработки засевают культурой бактерий Pseudomonas seryngae культивирование провод т на качалке 320 об/мин при и рН 7,2. Через .2 ч число клеток в мл составл ет 232, через 4 ч роста - 901. Пример 2. 100 мл жидкой питательной среды, содержащей, г: 0,5; 0,1; Ma30 0,2; 0,3; 0,1; 0,01; глюкозы 2,5; H, - 100 мл, помещают в качалочную колбу, до засева в нее микроорганизмов обрабатывают путем барботажа озоном в концентрации 440 мас.% от объема среды. За тем в нее внос т суспензию бактерий Pseudomonas seryngae и культивируют их на качалке при и скорости вращени каретки качалки 250-280 об/ Ьшн. Бактерии культивируют 4 ч в ло гарифмической фазе-роста. Изменение количества клеток определ ют через каждые 2 ч путем высева на плотную питательную среду с последуюпщм /сче-. том колоний. Через 2 ч роста число клеток в мл составл ет 431, через 4 ч - 1683. Пример 3, 100 МП водопроводной воды (стерильной t, помещенной в колбу, однократно обрабатывают путем барботажа озоно-воздушной смесью. при этом суммарна концентраци озона в смеси составл ет мас.% от объема воды. После этого добавл ют в стерильных услови х,-НдС& 0,1; , 0,2; N 504-7115 0 0,05; NoCe. The invention relates to microbial industry, in particular, to methods for preparing a liquid nutrient medium for growing microorganisms. A known method of preparing a liquid nutrient medium, comprising a decoction of various animal tissues l. However, this method does not provide a high growth rate of microorganisms. The closest to the proposed technical essence and the achieved effect is the method of preparing a liquid nutrient medium for growing microorganisms, involving the dissolution of the ingredients necessary for the growth of microorganisms in water, followed by their growth under aeration conditions. According to a known method, the carbohydrate mineral salts of trace elements are dissolved in water 23. The disadvantage of this method is the low biomass yield. microorganisms The purpose of the invention is to increase the biomass yield. The goal is achieved by the fact that according to the method of preparing a liquid nutrient medium for growing microorganisms, involving the dissolution of the ingredients necessary for the growth of microorganisms in water, followed by growing them under aeration conditions, before feeding the nutrient medium is treated with an ozone-air mixture until ozone concentration is reached 410 2, 610 wt.% Of the volume among. At. This, before dissolving the ingredients necessary for the growth of microorganisms, the water is treated with an ozone-air mixture with an ozone content of 10 to 2.4 to 10 May, based on the volume of water. The essence of the method is as follows. The liquid nutrient medium after preparation and sterilization is subjected to a single ozone-air treatment at ozone concentrations in it - 2.6% by weight of the volume of the medium, after which the microorganisms are seeded and cultivated. When treating with an ozone-air mixture of water, if the process of growing microbes goes under non-sterile conditions, prior sterilization of water and ingredients is not required, if the process is sterile, the water and ingredients are sterilized separately before treatment, and then sterilely mixed. Table 1 shows the effect of ozone concentration on the yield of bacteria. In Table. Figure 2 shows the effect of ozone-air water treatment on biomass yield. Example 1. Hottinger broth is poured into a 50 ml rocking flask and placed in an autoclave for sterilization. After sterilization, the nutrient medium is treated once by sparging with an ozone-air mixture. 6.10.% Oz of its volume passes through the layer of the medium. After ozone-air treatment, Hotting broth was seeded with the Pseudomonas seryngae bacteria culture. The cultivation was carried out on a rocking chair of 320 rpm at a pH of 7.2. After .2 hours, the number of cells per ml is 232, after 4 hours of growth, 901. Example 2. 100 ml of liquid nutrient medium containing, g: 0.5; 0.1; Ma30 0.2; 0.3; 0.1; 0.01; glucose 2,5; H, - 100 ml, placed in a katalozhny flask, before seeding into it microorganisms are treated by bubbling with ozone at a concentration of 440 wt.% Of the volume of the medium. Then a suspension of bacteria Pseudomonas seryngae is introduced into it and cultivated on a rocking chair at a rocking speed of 250-280 vol / l. Bacteria are cultured for 4 hours in the log-phase growth phase. The change in the number of cells is determined every 2 hours by plating on a dense nutrient medium followed by / count. tom colonies. After 2 hours of growth, the number of cells in ml is 431, after 4 hours - 1683. Example 3, 100 MP of tap water (sterile t placed in a flask, are treated once by bubbling with an ozone-air mixture. The total ozone concentration in the mixture is wt.% of the volume of water. After that, under sterile conditions, -NdC &0.1;0.2; N 504-7115 0 0.05; NoCe.

0,2; СаСО 0,4; глюкозы 0,1. В приготовленную таким образом среду с рН 7,2 внос т 10 мг культуры PSeudomonas ,seryngae и культивируют при 30 С 4 ч на качалке. Изменение количества бактерий в процессе роста определ ют путем высева из сусупензии на плотную питательную среду с последующим подсчетомКОЛОНИЙ.0.2; CaCO 0.4; glucose 0,1. In the thus prepared medium with a pH of 7.2, 10 mg of PSeudomonas, seryngae culture is introduced and cultured at 30 ° C for 4 hours on a rocking chair. The change in the number of bacteria during growth is determined by sowing from suspension to a dense nutrient medium, followed by COLONY.

Число .клеток в мл увеличиваетс от 265 (контроль) до 317.The number of cells per ml increases from 265 (control) to 317.

П р и м е р 4. 100 мл дистиллированной воды, -помещенной в колбу, однократно обрабатывают озоно-воздуш ной смесью при суммарной концентрации озона в ней 840 мас.% отExample 4. 100 ml of distilled water, -filled in a flask, are treated once with an ozone-air mixture with a total concentration of ozone in it 840% by weight of

объема воды. Затем в колбу внос т 2 мл кукурузного экстракта, 10 мл 40%-ного раствора сахарозы и 10 мл пекарских дрож (ей. Культивированиеvolume of water. Then, 2 ml of corn extract, 10 ml of 40% sucrose solution and 10 ml of Baker's yeast (her. Cultivation

5 производ т .при 28 С и рН 4,5 в течение 4 ч. Изменение количества клеток при росте в жидкой среде определ ют путем высева сусйензии клеток на плотную питательную среду с5 is produced at 28 ° C and a pH of 4.5 for 4 hours. The change in the number of cells during growth in a liquid medium is determined by plating the suspension of the cells on a dense nutrient medium from

последующим счетом колоний. %сло клеток в 1 мл возрастает с 118 до 129. subsequent counting of the colonies. % layer of cells in 1 ml increases from 118 to 129.

Предлагаемый способ по сравнению с известным позвол ет увеличитьThe proposed method in comparison with the known allows to increase

5 выход биомассы микроорганизмов на 90-95%.5 microbial biomass yield by 90-95%.

, Т .а б л и ц а 1, Table 1

Бульон ХоттигераHottiger broth

Примечание. Врем культивировани 4 мин.Note. Cultivation time 4 min.

Таблица 2table 2

Claims

1. METHOD FOR PREPARING LIQUID

Nutrient medium for growing microorganisms, provided; matricing., · dissolving the ingredients necessary for the growth of microorganisms in water, followed by their cultivation under aeration conditions, characterized in that, in order to increase the biomass yield, the nutrient medium is treated with an ozone-air mixture before growing to reach an ozone concentration of 4 ΊΟ * ⁶ - '2.6 ΙΟ' ⁴ 'wt.% Of the volume of the medium.

2. The method according to claim 1, characterized in that before dissolving the ingredients necessary for the growth of microorganisms, the water is treated with an ozone-air mixture with an ozone content of 1 'TO ^{- <,} -2.4'10 "ac.% by volume of water.

1 1092174 2