SK282197B6

SK282197B6 - Komplex gadolínia a zmesi na použitie v diagnostickom zobrazení

Info

Publication number: SK282197B6
Application number: SK1737-97A
Authority: SK
Inventors: Dominique Meyer; Olivier Rousseaux; Michel Schaefer; Christian Simonot
Original assignee: Guerbert S. A.
Priority date: 1995-06-29
Filing date: 1996-06-25
Publication date: 2001-12-03
Also published as: NZ312720A; CN1189778A; FR2736051A1; ATE207762T1; NO976098L; WO1997001359A2; KR19990028556A; FR2736051B3; HUP9900449A2; PL325531A1; TR199701716T1; JPH11508550A; EA000378B1; SK173797A3; HUP9900449A3; EP0835140A2; IL122621A0; EA199800101A1; EP0835140B1; BR9609519A

Abstract

Komplexy gadolínia vzorca (I), kde R je skupina vzorca (1). Tieto komplexy sú použiteľné v oblasti diagnostického zobrazenia.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka kovových komplexov polyaminokyselín, spôsobu ich prípravy a ich použitia v diagnostickom zobrazení.

Doterajší stav techniky

Tieto zlúčeniny sú rozvetvené deriváty kyseliny gadolejovej predávanej vo forme soli meglumínu pod značkou Dotarem® ako kontrastné činidlo na zobrazenie magnetickou rezonanciou. Gadolejan meglumínu je stabilný komplex, ktorého relaxivita spinovej siete pri 37 °C a 20 MHz je asi 3,5 mM^’s'¹ rovnakého rádu veľkosti ako iných kontrastných činidiel.

Komplexy gadolínia podľa predloženého vynálezu majú relaxivitu R vyššiu ako 20 mM 's¹. To umožňuje podávať kvôli získaniu rovnakej intenzity signálu diagnostickú zmes, ktorej moláma koncentrácia komplexu Gd3⁺, a teda i zlúčeniny podľa predloženého vynálezu je šesťkrát, pripadne až desaťkrát nižšia ako koncentrácie používané v súčasnosti na klinikách.

Tak ako osmolalita roztokov komplexov podľa predloženého vynálezu pre rovnakú relaxivitu je nižšia ako výrobku Dotarem® a hlavne ako pri neiónových zlúčeninách ako je gadodiamid, je možné používať roztoky, ktorých aktívny hmotnostný obsah je vyšší ako pri známych zlúčeninách kvôli dosiahnutiu obrázkov lepšej akosti bez dosiahnutia úrovne neprípustných sekundárnych javov.

Okrem iónov ťažkých kovov ako Gd’⁺ tieto komplexy obsahujú atómy brómu alebo jódu a neprepúšťajú lúče X a sú dostatočne rozpustné, hlavne vplyvom prítomnosti hydrofilných skupín okolo aromatických jadier na použitie v bežnej rádiológii alebo v dichromografíi.

Podstata vynálezu

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu majú vzorec (I)

R R

•OOC-CH-N-CHj—CHj—N-CH-COO'
CH,	CH,	íi),
1 Gď*	1
ch₂	CHj

OOC-CH-N—CHj—CH₂—H—CH-COOM R R v ktorom R je skupina vzorca (1):

-(CH^-CO-NH-CHrCO-NH

X CO-NR.R,

v ktorom

X je bróm alebo jód,

R! je vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka alebo mono- alebo polyhydroxyalkyl s 2 až 8 atómami uhlíka,

R₂ je mono- alebo polyhydroxyalkyl s 2 až 8 atómami uhlíka alebo

Rj je vodík a R₂ je skupina vzorca

x CO-NR/R,' kde

X je definované skôr a Ri, R₂ majú niektorý z významov definovaných pre R,, R₂ s výnimkou A, keď -CO-NR)R₂ alebo -CR'iR'₂ obsahujú aspoň dve hydroxylové skupiny a M predstavuje vodík alebo katión minerálnej alebo organickej bázy.

Ako farmaceutický prípustné katióny možno uviesť Na⁺ alebo katióny odvodené od lyzínu, arginínu, N-metylglykamínu alebo dietanolamínu.

Alkylové skupiny môžu byť lineárne alebo rozvetvené.

Prednosť sa dáva zlúčeninám, v ktorých -CONRjR₂ alebo -CONR'jR^ nesú aspoň šesť hydroxylových skupín a hlavne predstavujú -CON(CH₂(CHOH)₄-CH₂OH)₂.

Zlúčeniny vzorca (I) môžu byť pripravené reakciou amínu vzorca (II)

x co-nr,r₂ v ktorom X, R_t, R₂ majú uvedený význam s komplexom gadolínia vzorca (III) zodpovedajúcim forme vyvinutej I, v ktorej R = -(CH₂)₂COOH v prítomnosti činidla spojenia, hlavne také, aké sa používajú v syntéze peptidov, ako je karbodiimid, napríklad vo vodnom roztoku.

Amíny vzorca (II), pre ktoré je R₂ určené A, sa môžu získať reakciou NHR|R₂ so zlúčeninou vzorca (IV):

x CO-CI

x co-ci v ktorom funkcia NH₂ je chránená vo forme ftalimidu a ďalej hydrazinolýzou. Aminoalkoholy HNR]R₂ sú známe alebo môžu byť pripravené spôsobmi analogickými k tým, ktoré sú opísané v literatúre. Hlavne je možné uviesť aminoalkoholy dostupné obchodne, definované tým, že

i) R] = H a R₂ = CH(CH₂OH)₂, ii) R] = H a R₂ = CH₂-CHOH-CH₂OH iii) R, = CH₂(CHOH)₄CH₂OH a R₂ = CH₃, CH₂CH₂CH₂OH alebo R_b iv) glukózamín a všeobecnejšie zlúčeniny opísané v patentových spisoch EP-A 558395, EP-A-25083 a EP-A-33426.

Amíny vzorca (II), v ktorých R₂ znamená A a R] znamená H, sa jednoducho získajú reakciou aminu vzorca H₂NA so zlúčeninou vzorca (IV) predbežne N-chránenou. Treba poznamenať, že amín H₂NA, ktorý zodpovedá aminu vzorca (II), v ktorom R₂ znamená A, môže byť pripravený zhodne s navrhnutým spôsobom.

Zloženie kontrastných činidiel na zobrazenie magnetickou rezonanciou, ktoré zodpovedajú vzorcu (I) vo farmaceutický prípustnom spojive, je ďalším predmetom predloženého vynálezu.

Ich farmaceutická forma bude prispôsobená spôsobu podávania.

Prednostne budú zmesi kontrastných látok vodné roztoky fyziologicky prijateľných solí komplexu podľa vzorca (I). Zmesi podľa predloženého vynálezu môžu okrem iného obsahovať stabilizátory, rôzne prísady určené na to, aby udržiavali roztok izotonický alebo aby umožnili udržiavať jeho pH, ako i iné prísady bežne používané v technike.

Koncentrácia zmesí bude prispôsobená ceste a oblasti podávania. Všeobecne bude 0,01 M až 0,5 M, prednostne 0,05 M až 0,1 M.

Jednotná dávka bude zrejme funkciou štruktúry komplexu a povahy skúšky. Všeobecne sa podáva 0,005 mmól/kg až 0,1 mmól/kg.

SK 282197 Β6

Ďalej sú opísané spôsoby prípravy komplexu podľa vzorca (III) vo vodnom roztoku, amínu vzorca (II), v ktorom Rj = R₂ = CH₂(CHOH)₄CH₂OH, a komplexu, v ktorom R] = H a R₂ = A s R\ = R'₂ = CH₂(CHOH)₄CH₂OH.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príprava komplexu vzorca (III) Etapa a)

167 g dimetylbrómglutaranu sa pomaly vleje do suspenzie 30 g 1,4,7,10-tetracyklododekánu a 97 g uhličitanu draselného v 875 ml acetonitrílu. Zmes sa mieša pod inertnou atmosférou pri 60 °C 48 hodin, počas ktorých sa pridá 83 g dimetyl-2-brómglutaranu. Potom sa reakčné prostredie prefiltruje a koncentrovaný roztok sa skoncentruje do sucha. Zvyškový olej sa vyčistí chromatografiou na oxide kremičitom v eluente s gradientom dichlórmetán-metanolu (100/0 až 80/20) s výťažkom 43 g oktaesteru vo forme oleja.

Etapa b)

Uvedený olej v roztoku v 72 ml metanolu sa zavedie do vodného roztoku NaOH (68 g NaOH, 340 ml vody) a zmes sa pri miešaní udržiava na teplote 70 °C po 48 hodín.

Metanol sa odstráni pri zníženom tlaku a vodná fáza sa extrahuje metylénchloridom pred zavedením 800 ml katiónovej živice na výmenu iónov Amberlite® dodávanej spoločnosťou Rohm a Haas pod značkou IRC 50 (slabá kyselina).

Po 1 hodine styku sa živica odstráni a do roztoku sa zavedie 680 ml aniónovej živice Amberlite® na výmenu iónov označenej IRA 458 (silná zásada).

Po 12 hodinách sa živica oddeli a zavedie do kolóny, nájdený produkt sa izoluje eluáciou 41 vodného roztoku 3N kyseliny octovej, potom 41 roztoku 6N.

Po odstránení rozpúšťadla pri zníženom tlaku je výťažok 31 g bielych kryštálov.

RMN¹³C (200 MHz, DMSO-d6), T = 30 °C, 24, 31, 48, 62, 172,174.

Etapa c)

29,4 g oktakyseliny získanej opísaným spôsobom sa suspenduje v 530 ml vody s 15,8 g GdCl₃, 6 H₂O pri miešaní, pomaly sa pridá vodný roztok 1 N NaOH až do dosiahnutia stabilnej hodnoty pH = 6,5. Prostredie sa potom prefiltruje na filtri Millipore® s veľkosťou otvorov 0,45 pm a filtrát sa skoncentruje do sucha. Po desikácii sa získa výťažok 49,3 g sodnej soli komplexu gadolínia podľa vzorca (III), vo forme pevnej látky obsahujúcej NaCl vzniknutý počas tvorby komplexu.

Tento produkt môže byť vyčistený zrážaním vo vodnom etanole a spracovaním kvôli odstráneniu prebytku Gd³⁺, ktorý nebol skomplexovaný niektorou chelatujúcou živicou napríklad dodávanou spoločnosťou BioRad Laboratories pod značkou CHELEX.

Relaxivita R, (37 °C, 20 MHz) = 5,9 mM 's¹. Chromatografia: HPLC na kolóne Hibar Licrosorb® Diol 5 pm, 1= 25 cm, d = 4 mm (Merck), eluent CH₃CN/KH₂PO₄0,01 M (50/50 - v/v) Čas zotrvania: 2 minúty.

Príprava amínu vzorca (Π), v ktorom R, = R₂ = CH₂ - CHOH4 - CH₂OH a X = 1 (zlúčenina Ha)

Etapa a)

Pri miešaní sa zavedie po malých množstvách 179 g chloridu N-ftaloylglycínu do roztoku pri 0 °C, 119 g chloridu kyseliny 5-amino-2,4,6-trijodoizoftalovej v 500 ml dimetylacetamidu. Zmes sa mieša niekoľko hodín pri teplote 0 °C, potom sa nechá cez noc stáť pri izbovej teplote a zavedie sa pomaly do 10 1 vody, vytvorená zrazenina sa izoluje a rozpustí v 3 1 etylacetátu. Tento roztok sa premyje vodným roztokom uhličitanu sodného, potom vodou, usuší sa, potom sa skoncentruje. Výťažok je 125 g chloridu kyseliny 2,4,6-trijodo-5-ftalimidoacetamidoizoftalovej.

Etapa b)

Roztok 1000 ml dimetylacetamidu, 104 g chloridu uvedenej kyseliny, 208 g disorbitylamínu a 50 ml trietylamínu sa udržiava 5 hodín pri 80 °C. Vytvorená zrazenina sa oddelí a rozpúšťadlo sa odstráni destiláciou pod zníženým tlakom, zvyšok sa rozpustí vo vode pri pH = 3 a uvedie sa do styku so 750 ml živice kvôli výmene katiónov Amberlite® dodávanej spoločnosťou Rohm a Haas pod značkou IRN 77 (silná kyselina). Po dvoch hodinách miešania sa živica oddeli a zavedie do vodného roztoku (700 ml) vyčisteného diamidu 17 ml hydrátu hydrazlnu. Po piatich hodinách miešania pri 80 °C sa prostredie okyslí pri teplote miestnosti pridaním 26 ml vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej 10N. Zrazenina sa izoluje a roztok sa nechá prejsť kolónou 500 ml slabej aniónovej živice na výmenu iónov (Amberlite® IRA 67), potom 80 ml slabej katiónovej živice (Amberlite® IRC 50), získaný roztok sa spracuje 4 1 živice Amberlite® silne kyslej, na ktorej sa zachytí konečný produkt. Tento sa eluuje vodným roztokom NH₄OH. Amín vzorca (II) sa získa so 70 % výťažku vo forme pevnej látky.

Chromatografia HPLC: kolóna LiChrospher® 100 RP

18,5 pm (Merck)-h=25 cm, d = mm.

Eluent CHjCN/PICR B8 0,05 M (Waters) 5/95, výkon: 1 ml/min. Čas zotrvania izomérov: asi 8 min.

x. PIC B8: zmes: kyselina oktánsulfónová/metanol - (kalciumacetát)voda

Príprava amínu vzorca (II), v ktorom R] = R₂ = CH₂(CHOH)₄CH₂OH a X = Br (zlúčenina Ilb)

Použije sa rovnaký spôsob ako predchádzajúci na získanie žiadaného produktu. Molekulárne zloženie jeho spektra hmoty elektrickým naprašovaním je správne. V kvapalinovej chromatografii vysokého výkonu sú časy zotrvania izomérov asi 8 min. za rovnakých podmienok ako prv.

Kyselina 5-amino-2,4,6-tribrómizoftalová ako východisková látka sa pripraví s 85 % výťažku reakciou 100 ml brómu s roztokom v 1300 ml vody a 380 ml koncentrovanej chlorovodíkovej kyseliny a 87 g kyseliny 5-aminoizoftalovej. CCM: SiO₂Merck:

C_t,H_t/CH_JCOC₂H₅^CO₂H(60/2511) Rf = 0,8, (CH₃)₂CHOH/CH₃COOC₂H5/OH (35/35/40) Rf = 0,4.

Príslušný chlorid kyseliny sa pripraví klasickým spôsobom reakciou SOC1₂ so zodpovedajúcou dikyselinou s výťažkom 88 %.

CCM: SiO₂Merck: CH₂C1₂ Rf = 0,9.

Ftalimidy (chlorid kyseliny a amid) majú časy zotrvania 11 minút, prípadne 15 až 30 minút v kvapalinovej chromatografii vysokého výkonu, na kolóne LiChrospher® 100 RP18,5 pm (Merck) 1 = 250 mm, d = 4 mm, s výkonom 1 ml/min. v eluente v prvom prípade so zmesou 60/40 acetonitrílu a vodným roztokom 0,01 M KH₂PO₄ a v druhom prípade s rovnakou zmesou v pomeroch 7/97 (v/v).

Príprava amínu vzorca (II) s R, = H, R₂ = A, R| = R₂ = = CH₂(CHOH)₄CH₂OH, X = 1 (zlúčenina líc)

Počas 24 hodín pri 70 “C sa mieša roztok v 400 ml dimetylacetamidu, ktorý obsahuje 59 g chloridu kyseliny 2,4,6-trijodo-5-ftalimidacetamidizoftalovej, 200 g amínu vzorca (Ha) získaného reakciou predchádzajúcim spôsobom a 29,5 ml tributylamínu.

SK 282197 Β6

Potom sa odstráni rozpúšťadlo pri zníženom tlaku a zvyšok sa vyčistí chromatografiou na 4 kg adsorbentu XAD1600 (Rohm a Haas) v eluente so zmesou CH₃OH/H₂O.

Vodný roztok, ktoiý obsahuje ftalimid (80 % teória), sa spracuje ako pri príprave predchádzajúcim spôsobom hydrátom hydrazínu, aby sa získal amín vzorca (II) s výťažkom 85 %.

Chromatografia: gél. SuperdexR 30 v kolóne 16 mm/60 cm (Pharmacia).

Eluent: tampón NaCl 0,1 M/NaH₂PO₄ 0,05 M/NaN₃, 0,01 M, pH = 7,2.

Výkon: 1 ml/min. Objem eluácie: 102 ml na 1 mg v 250 pl.

HPLC kolóna Symmetry® C 18,5 pm (Waters) I = 25 cm, d = 4,6 mm.

Eluent: CH₃CN/KH₂PO₄ 0,01 M (15/85) (bez CH₃CN počas 5 min.).

Výkon: 1 ml/min.

Čas zotrvania izomérov: asi 18 min.

Príprava amínu vzorca (II) s R] = H, R₂ = A, R, = R₂ = = CH₂(CHOH)₄CH₂OH a X = Br (zlúčenina Ild)

Etapa a)

Pri teplote 70 °C sa zavedie 17,3 g chloridu kyseliny 5-ftalimidacetamido-2,4,6-tribrómizoftalovej v 185 ml dimetylacetamidu, 11,3 ml trietylamínu a 66,6 g zlúčeniny Ilb. Po 24 hodinách miešania sa prostredie pri teplote miestnosti vleje do 2 1 metylénchloridu a vytvorená zrazenina sa oddelí. Vyčistí sa chromatografiou vodného roztoku na 3 1 polystyrénovej živice typu XAD1600, dodávanej spoločnosťou Rohm a Haas.

Výťažok 90 %.

Etapa b)

Pri teplote 80 °C sa počas 5 hodín udržiava roztok 37,5 g zlúčeniny prv izolovanej v 130 ml vody a 2 ml 35 %-ného vodného roztoku hydrazínu. Po ochladení sa prostredie privedie na pH = 1 pridaním vodnej kyseliny chlorovodíkovej 10 N, potom sa chromatografuje postupne na 100 ml katiónovej živice Amberlite® (IRN77) a aniónovej živice (IRA67) a na 500 ml kyslej polystyrénovej živici kvôli výmene katiónov typu IMAC HP222 dodávanej spoločnosťou Rohm a Haas, potom sa produkt eluuje vodným roztokom NH₄OH 3M a po koncentrácii sa izoluje zrazením v etanole.

Chromatografia HPLC: kolóna LiChrospher® 100RP 18,5, 25 pm, 1 = 25 cm, d = 4 mm (Merck), eluent: vodná HC1 (pH 3,4, 4) /CH₃CN 97/3, výkon 1 m/min., čas zotrvania:

4,5 až 8 min.

Spektrum hmoty (elektrický postrek): konformný,

Príprava amínu vzorca (II), v ktorom R] = CH₃, R₂=CH₂(CHOH)₂CH₂OH a X = 1 (zlúčeniny íle)

Etapa a) g chloridu kyseliny 5-ftalimidacetamid-2,4,6-trijodoizoftalovej sa rozpustí v 170 ml dimetylacetamidu pri teplote miestnosti s 13 g 4-(N-metyl)aminobután-l,2,3-triolu a 22,8 ml tributylamínu, prostredie sa pri miešaní 8 hodín konzervuje pri teplote miestnosti, potom koncentruje pri zníženom tlaku. Zvyšok sa vyčistí chromatografiou z vodného roztoku na katiónovej živici H^4- Amberlite® IRN77. Výťažok >95%.

Etapa b) g predchádzajúceho produktu sa zavedie pri 80 °C do 50 ml vody obsahujúcej 1,43 ml vodného roztoku 35 %

-ného hydrazínu a zmes sa udržiava pri tejto teplote počas 5 hodín pred privedením na pH = 1 pridaním vodnej kyseliny chlorovodíkovej 10N. Zrazenina sa oddelí a vodná fáza sa chromatografuje na 100 ml katiónovej živice H* Amberlite® IRC50, potom na 200 ml aniónovej živice OH⁺ Amberlite® IRA67.

Koncentráciou sa získa výsledný produkt s 80 %-ným výťažkom.

CCM: na kremíkovej doske Merck 60F, eluent octan etylný/izopropanol/vodný roztok amoniaku 15N (35/35/40), Rf=0,7.

Príklad I

Zlúčenina vzorca (I), v ktorej M = Na a

I CO-NlCHrlCHOHUCHjOH),

R = .(CH^-CO-NH-CHj-CONH—f \—I

I CO-N(CH,-(CH OH),<H_rOH|j

Počas 48 hodín sa udržiava teplota miestnosti pri miešaní 1 g zlúčeniny gadolínia vzorca (III), 5 g zlúčeniny II a 6,8 g chlórhydrát l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etyl- karbodiimidu v 13 ml vody, pH reakčného prostredia sa udržiava na hodnote 7 opakovaným pridaním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej IN.

Reakčné prostredie, ku ktorému bolo pridaných 50 ml vody, je podrobené ultrafiltrácii s jednou kazetou minisette typu Nová predávanej spoločnosťou Sociéte Filtron (USA) obsahujúcou membránu z polyétersulfónu s prahom odrezania 5 KDa.

Získajú sa 2 g hrubého produktu vo forme sodnej soli, ktorá môže byť vyčistená chromatografiou sférickým vylúčením na kolóne gélu Superdex®, dodávanej spoločnosťou Pharmacia, v eluente z vody.

Chromatografia HPLC: kolóna Hibar Licrosorb® Diol 5 pm 1 = 25 cm, d = 4 mm (Merck)

Eluent: KH₂PO₄ 0,01 M/CHjCN (45/55) Výkon 1 ml/min.

Čas zotrvania: 6 min.

Príklad 2

Zlúčenina vzorca (I), v ktorej M = Na a

R = •(CHj)_!-CO-NH-CH_!-CONH

CO-N(CH_r(CH OHU-CHrOHIj

CO44(CHj-(CH OHU-CHj-OHIj g l-(3-dimetylamino-propyl)-3-etylkarbodiimidu sa zavedie po malých dávkach do roztoku pozostávajúceho zo 100 ml vody, 7,4 g komplexu gadolínia vzorca (III) a 37 g amínu vzorca (Ilb), pri udržiavaní prostredia na pH 7 pridaním kyseliny chlorovodíkovej 1 N. Po 48 hodinách miešania pri teplote miestnosti sa prostredie podrobí ultrafiltrácii ako v príklade 1, ale s membránou s prahom rozrezania 3 KDa, potom sa uvedie do styku s 500 ml aniónovej živice na výmenu iónov Amberlite® IRA 458 (zásaditá forma).

Po odstránení živice a odparení vody sa získa 14 g produktu vo forme pevnej látky.

Hrubý produkt môže byť tiež izolovaný z reakčného prostredia zrazením etylalkoholom.

Chromatografia: HPLC kolóna Hibar Licrosorb® Diol 5 pm 1 = 25 cm, d = 4 mm.

Eluent KH₂PO₄ 0,01 M/CH₃CN (45/55 - v/v). Výkon: 1 ml/min.

Čas zotrvania: 5 min.

SK 282197 Β6

Príklad 3

Zlúčenina vzorca (I), v ktorej M = Na a > CO-NH-CHj-CO-NH

CO NH-CHj CO-NH

I CO-NH-CH,CO-NH

I CO*(CHj-(CH OMh-CHj-OHIt 'íl·'

I CD-^CH_r(CH OH)₄-CHjOK|j

I CO NJCH_? (CH OH},-CH_rOH|_} 'O'

I COJ<CH_r(CH OHl.-CHj-CMI,

Použitím spôsobu podľa príkladu 1 sa získa z amínu íle a z komplexu vzorca (III) (sodná soľ) produkt.

HPLC: podmienky ako v príklade 2. Čas zotrvania: 3 min.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

Rozpustí sa 0,3 g komplexu gadolínia vzorca (III) a 3,5 g zlúčeniny vzorca (líc) v 10 ml vody a zavedie sa po kvapkách roztok kyseliny chlorovodíkovej 1 N až do pH 6,5, potom sa pridá 1,1 g chlórhydrátu l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu. Po 24 hodinách miešania pri teplote miestnosti sa pridá 80 ml vody a vykoná sa vyčistenie prostredia ako v predchádzajúcom príklade ultrafiltráciou s membránou s prahom rozrezania 8 KDa kvôli izolácii 125 g sodnej soli komplexu vo forme bieleho prášku.

Je tiež možné vykonať reakciu pri 40 °C, prípadne za prítomnosti katalytického množstva sodnej soli kyseliny (N-hydroxysukcínimidyl)-3-sulfónovej.

Produkt môže byť vyčistený zrážaním v izopropanole. Chromatografia sterického vylúčenia: 4 kolóny, dodávané spoločnosťou Shodex (JP) pod značkou OH Pak SB-0 HQ s priemerom 8 mm a dĺžkou 30 cm umiestnenej v sérii, naplnenej gélom polyhydroxymetakrylátu, medze vylúčenia vzhľadom na pullulan: 106 kDa (SB-804), 105 kDA (SB-803), 104 kDA (SB-802-5), 104 kDA (SB-802-5). Eluent vodný NaCl 0,16.

M/CH₃CN (70/30 V/V), výkon 0,8 ml/min., T = 30 ^eC. Čas zotrvania: 34,4 min.

1. Komplex gadolínia vzorca (I)

R R

I 1

OOC-CH-N-CH,—CH,—N-CH-COO' I

CH,

I

CH,

I

N—CH-COOM I R

I

CH,

I

CH,

I

OOC—CH—N—CH₂—CHj—I

R v ktorom R je skupina vzorca (1)

Gd³'

d)·

Príklad 4

Zlúčenina vzorca (I), v ktorej M = Na a

Br CONfCHitCHDHk-CHj-OHI:

CONH<H;CONH·

Br

ÍCHih-CO-NHCH-CO-NH-

Br :OKH-CKfCONH' •Br

CONICH^CHDHh-CHrOHh

Rozpustí sa 1,8 g sodnej soli komplexu vzorca (IIII) a 21,8 g amínu (zlúčenina vzorca (Ila)) v 45 ml vody, po okyslení vodnou kyselinou chlorovodíkovou 1 až do pH 6 sa prostredie uvedie na teplotu 40 °C pred zavedením 2,2 g chlórhydrátu l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu a 0,165 g sodnej soli kyseliny (N-hydroxysukcínimidylu)-3-sulfónovq. Po dvoch hodinách miešania sa zmes vleje do 600 ml etanolu a vytvorená zrazenina sa rozpustí v 270 ml vody.

Roztok sa podrobí ultrafiltrácii ako v predchádzajúcom príklade na membráne s prahom odrezania 1 kDA. Po odparení vody sa získa 15 g produktu vo forme bieleho prášku.

Chromatografia sterického vylúčenia, rovnaké podmienky ako v príklade 3. Čas zotrvania: 33,7 min.

Príklad 5

Zlúčenina vzorca (I), v ktorej M = Na cn,

I CO-N-CHj-ÍCHOHJj-CHjOH

R = -(CHjJj.CO-NH-CHj.CO-NH

I ΟΟ-Ν-ΟΗ,-ΙΟΗΟΗΙ,-ΟΗ,ΟΗ

I

CH, •(CHaíj-CO-NH-CHj-CO-NH

CO-NR,R₂

X je bróm alebo jód,

R₍ je vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka alebo mono- alebo polyhydroxyalkyl s 2 až 8 atómami uhlíka,

R₂ je mono- alebo polyhydroxyalkyl s 2 až 8 atómami uhlíka alebo R] je vodík a R₂ je skupina vzorca

X CO-NR/Rj' kde

X je definované a R'_b R'₂ majú niektorý z významov definovaných pre R_b R₂ s výnimkou A, keď -CO-NRjR₂ alebo -CR'_b R'₂ obsahujú aspoň dve hydroxylové skupiny a M predstavuje vodík alebo katión minerálnej alebo organickej bázy.
2. Komplex podľa nároku 1, vzorca (I), v ktorom -CONR^ alebo -CONR'|R'₂ obsahujú aspoň šesť hydroxylových skupín.
3. Komplex podľa aspoň jedného z nárokov 1 a 2 podľa vzorca (I), v ktorom M je organický alebo minerálny katión zvolený zo skupiny zahrnujúcej Na⁺ a katióny odvodené z lyzínu, arginínu, metylglukamínu a dietanolamínu.
4. Komplex podľa aspoň jedného z nárokov 1 až 3, vzorca (I), v ktorom R₁ a R₂ predstavujú CH₂(CHOH)₄CH₂OH a B je bróm.
5. Komplex podľa aspoň jedného z nárokov 1 až 4 vzorca (I), v ktorom R| je vodík, R, je A a R', a R'₂ predstavujú CH2(CHOH)₄-CH₂OH a X predstavuje bróm.
6. Zmes kontrastného činidla na zobrazenie magnetickou rezonanciou, vyznačujúca sa tým, že obsahuje komplex podľa aspoň jedného z nárokov 1 až 5 vo forme soli s farmaceutický prípustnou bázou v spojení s farmaceutickým spojivom.
7. Zmes kontrastného činidla na zobrazenie lúčmi X, vyznačujúca sa tým, že obsahuje komplex podľa aspoň jedného z nárokov 1 až 3, v ktorom X predstavuje I, vo forme soli farmaceutický prípustnej bázy v spojení s farmaceutickým spojivom.