RU2726801C1

RU2726801C1 - Tumour therapy agent

Info

Publication number: RU2726801C1
Application number: RU2019132871A
Authority: RU
Inventors: Мария Вячеславовна Дмитриева; Лариса Михайловна Борисова; Марина Петровна Киселева; Ирина Сергеевна Голубева; Лидия Владимировна Эктова; Вера Александровна Еремина; Надежда Ивановна Тихонова; Ольга Львовна Орлова; Людмила Леонидовна Николаева; Зоя Сергеевна Шпрах; Анна Владимировна Ланцова; Дмитрий Васильевич Гусев; Елена Владимировна Игнатьева; Наталия Александровна Оборотова; Наталия Юрьевна Кульбачевская; Ольга Ивановна Коняева; Надежда Павловна Ермакова
Priority date: 2019-10-16
Filing date: 2019-10-16
Publication date: 2020-07-15

Abstract

FIELD: medicine; pharmaceuticals.SUBSTANCE: invention refers to pharmaceutical industry and medicine, namely to an agent for tumour therapy, active against tumours of mice: lymphatic leukaemia P-388, Ehrlich tumours, Lewis lung epidermoid carcinoma, V-16 melanoma, cervical cancer cervix RShM-5, AKATOL intestinal cancer and adenocarcinoma Ca 755. Proposed agent contains (wt. %): 1.2 % n-{12-(β-d-xylopyranosyl)-5,7-dioxo-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazol-6-yl}pyridine-2-carboxamide; 13.0 % dimethylsulphoxide (DMSO); 47.4 % of Solidone 17PF, 38.4 % of ethyl alcohol (95 %).EFFECT: invention provides creating a new anticancer agent of precise dosing characterized by high cytostatic effect, good solubility and stability during storage.1 cl, 7 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к лекарственным средствам, обладающим противоопухолевым действием, и может найти применение при лечении злокачественных опухолей.The invention relates to medicine, namely to drugs with an antitumor effect, and can be used in the treatment of malignant tumors.

Создание новых отечественных противоопухолевых препаратов, избирательно разрушающих опухолевую ткань, является актуальной задачей современной российской науки [1]. Среди широкого спектра химических соединений особый интерес представляют препараты из группы производных индолокарбазола. N-Гликозиды замещенных индоло[2,3-а]карбазолов и родственных соединений - это быстро увеличивающаяся группа синтетических соединений, обладающих противоопухолевой, антибактериальной и иммуномодулирующей активностью [2, 3, 4].The creation of new domestic anticancer drugs that selectively destroy tumor tissue is an urgent task of modern Russian science [1]. Among a wide range of chemical compounds, drugs from the group of indolocarbazole derivatives are of particular interest. N-Glycosides of substituted indolo [2,3-a] carbazoles and related compounds are a rapidly growing group of synthetic compounds with antitumor, antibacterial and immunomodulatory activities [2, 3, 4].

Значительные успехи фундаментальной медицины в изучении механизма злокачественной трансформации клеток и процесса метастазирования новообразований позволили определить новые мишени воздействия потенциальных противоопухолевых средств. Способность взаимодействовать с несколькими мишенями и индуцировать различные пути гибели опухолевых клеток является отличительной особенностью механизма действия препаратов из группы производных индолокарбазола. Для этих соединений такими мишенями являются топоизомеразы, ДНК и протеинкиназы [5, 6].Significant advances in fundamental medicine in the study of the mechanism of malignant transformation of cells and the process of metastasis of neoplasms made it possible to determine new targets for the action of potential antitumor agents. The ability to interact with several targets and induce various pathways of tumor cell death is a distinctive feature of the mechanism of action of drugs from the group of indolocarbazole derivatives. For these compounds, such targets are topoisomerases, DNA, and protein kinases [5, 6].

Актуальность разработки определяется отсутствием в клинической практике отечественных ингибиторов топоизомеразы I и/или II, в то время как в онкологический портфель прочно вошла линейка химиотерапевтических препаратов данного действия, разработанных за границей: иринотекан, топотекан, этопозид и тенипозид [7].The relevance of the development is determined by the absence in clinical practice of domestic inhibitors of topoisomerase I and / or II, while the oncological portfolio firmly includes a line of chemotherapeutic drugs of this action, developed abroad: irinotecan, topotecan, etoposide and teniposide [7].

Ингибиторы топоизомераз - одни из наиболее эффективных индукторов апоптозя. т.е. само программируемой гибели опухолевых клеток. Соединения этого класса обладают также активностью в отношении циклин-зависимых киназ. Эти особенности механизма действия определяют широкий спектр цитотоксической и противоопухолевой активности N-гликозидов индоло[2,3-а]карбазолов [8].Topoisomerase inhibitors are among the most effective inducers of apoptosis. those. self-programmed death of tumor cells. Compounds of this class also have activity against cyclin-dependent kinases. These features of the mechanism of action determine a wide range of cytotoxic and antitumor activities of N-glycosides of indolo [2,3-a] carbazoles [8].

Первым противоопухолевым соединением из класса индолокарбазолов был антибиотик ребеккамицин - ингибитор топоизомеразы I, активный в отношении клеток меланомы В-16 и лимфоцитарной лейкемии Р-388 [9].The first antitumor compound from the class of indolocarbazoles was the antibiotic rebeccamycin, an inhibitor of topoisomerase I, which is active against B-16 melanoma cells and P-388 lymphocytic leukemia cells [9].

В связи с плохой растворимостью ребеккамицина синтезировано его водорастворимое производное бекатекарин. Бекатекарин прошел I-II фазу клинических исследований в монотерапии и при комбинированном лечении немелкоклеточного и мелкоклеточного рака легкого, рака молочной железы, рака почки, нейробластомы, колоректального рака, рака яичника, рака тонкой кишки, лейкозов, лимфом.Due to the poor solubility of rebeccamycin, its water-soluble derivative, becatecarin, was synthesized. Becatecarin has passed the I-II phase of clinical trials in monotherapy and in the combined treatment of non-small cell and small cell lung cancer, breast cancer, kidney cancer, neuroblastoma, colorectal cancer, ovarian cancer, small intestine cancer, leukemia, lymphoma.

Бекатекарин вошел в Перечень редких («сиротских») медицинских технологий Евросоюза как препарат для лечения опухолей желчных протоков.Bekatecarin entered the European Union's List of Rare (Orphaned) Medical Technologies as a drug for the treatment of bile duct tumors.

Синтетическим путем также получено другое производное ребеккамицина, также обладающее плохой растворимостью - препарат эдотекарин. Клинические исследования эдотекарина проводились при лечении глиобластомы (в комбинации с темозоломидом или ломустином), при распространенном раке желудка, рецидивирующем после ранее проведенной химиотерапии [10].Another derivative of rebeccamycin has also been synthesized, which also has poor solubility, the drug edothecarin. Clinical trials of edothecarin were carried out in the treatment of glioblastoma (in combination with temozolomide or lomustine), with advanced gastric cancer that recurs after previous chemotherapy [10].

Известным ингибитором PDK-1 (фермента активации киназы Akt, иначе называемая протеинкиназа В) является индолокарбазол стауроспорин, растворимый в спирте 95% и нерастворимый в воде [11]. Его 7-гидроксипроизводное UCN-01 проходило II фазу клинических испытаний для лечения гемобластозов [12]. UCN-01 является неселективным ингибитором многих протеинкиназ, в частности - семейства протеинкиназ С и циклинзависимых киназ [13]. Все вышеперечисленные препараты при проведении клинических исследований пациентам вводили внутривенно.A well-known inhibitor of PDK-1 (the enzyme activating Akt kinase, otherwise called protein kinase B) is indolocarbazole staurosporine, soluble in alcohol 95% and insoluble in water [11]. Its 7-hydroxy derivative UCN-01 was undergoing phase II clinical trials for the treatment of hematological malignancies [12]. UCN-01 is a nonselective inhibitor of many protein kinases, in particular, the family of protein kinases C and cyclin-dependent kinases [13]. All of the above drugs were administered intravenously to patients during clinical trials.

За рубежом из этого класса исследуются следующие соединения производные индолокарбазола в традиционных лекарственных формах: аналоги стауроспорина - ингибитора протеинкиназы В:Abroad, from this class, the following compounds, derivatives of indolocarbazole in traditional dosage forms, are being investigated: analogs of staurosporin, an inhibitor of protein kinase B:

- Мидостаурин (Rydapt), Novartis AG, Швейцария (перорально капсулы),- Midostaurin (Rydapt), Novartis AG, Switzerland (oral capsules),

- Энзастаурин, Eli Lilly and Company, США (перорально капсулы, таблетки),- Enzastaurin, Eli Lilly and Company, USA (oral capsules, tablets),

- Лестауртиниб, «Гилеад сайенсиз», США, (перорально раствор для приема внутрь), аналоги ребеккамицина - ингибитора топоизмеразы I:- Lestaurtinib, Gilead Science, USA, (oral solution for oral administration), analogs of rebeccamycin, a topoismerase I inhibitor:

- Бекатекарин, Швейцария (внутривенно болюсы),- Becatecarin, Switzerland (intravenous boluses),

- Эдотекарин, (внутривенно инфузия) препараты проходят различные фазы клинических исследований.- Edothecarin, (intravenous infusion) drugs undergo various phases of clinical trials.

В клинической практике отсутствуют отечественные ингибиторы топоизомеразы I и II.In clinical practice, there are no domestic inhibitors of topoisomerase I and II.

Известно средство «Производное класса n-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с] карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, обладающее цитотоксической и противоопухолевой активностью», (патент РФ №2667906), обладающее уникальным механизмом воздействия на опухоль.Known means "Derivative of the class of n-glycosides indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide, which has cytotoxic and antitumor activity "(RF patent No. 2667906), which has a unique mechanism of action on the tumor.

Концепция о том, что VEGF-индуцируемый ангиогенез действительно является фактором, лимитирующим рост опухоли, в настоящее время является общепринятой. По данным ряда клинических испытаний, антиангиогенная терапия достоверно увеличивает общую выживаемость онкологических больных. В то же время накапливаются факты, свидетельствующие о том, что большинство опухолей не отвечают на анти-VEGF терапию. Одной из причин выживаемости опухолевых клеток может быть гетерогенность кровеносных сосудов в опухоли. В кровоснабжении опухоли участвуют как сосуды, выстланные эндотелием, так и мозаичные сосуды, а также сосуды, выстланные опухолевыми клетками (так называемая васкулогенная мимикрия (ВМ)). Термин ВМ был введен для объяснения процесса кровоснабжения опухоли, имитирующего васкуляризацию эмбриона цитотрофобластами. Предполагается, что опухоль для выживания и прогрессии может индуцировать частичную транс дифференцировку опухолевых клеток в эндотелий-подобный фенотип, позволяющий формировать васкулярные каналы, необходимые для доставки питания и, возможно, метастазирования. Образование подобных структур - уникальная особенность клеток с высоко злокачественным фенотипом; менее агрессивные опухолевые клетки таких структур не формируют. Способность к трансдифференцировке в сочетании с высоким инвазивным, а, следовательно, метастатическим потенциалом ряда клеток позволяет им формировать сеть каналов внутри опухоли, которая может частично компенсировать недостаточно быстрое развитие в ней кровеносной микроциркуляторной сети и создать условия для выживания и пролиферации клеток, предотвращая некроз внутри опухоли. Высокая статистическая корреляция между способностью опухоли к ВМ и частотой метастазирования и плохим клиническим прогнозом подтверждает эту гипотезу [16].The concept that VEGF-induced angiogenesis is indeed a tumor growth-limiting factor is now generally accepted. According to a number of clinical trials, antiangiogenic therapy significantly increases the overall survival rate of cancer patients. At the same time, evidence is accumulating indicating that most tumors do not respond to anti-VEGF therapy. One of the reasons for the survival of tumor cells may be the heterogeneity of blood vessels in the tumor. The blood supply to the tumor involves both endothelium-lined and mosaic vessels, as well as vessels lined with tumor cells (the so-called vasculogenic mimicry (VM)). The term VM was coined to explain the process of tumor blood supply, which mimics the vascularization of the embryo by cytotrophoblasts. It is assumed that the tumor, for survival and progression, can induce partial trans-differentiation of tumor cells into an endothelium-like phenotype, allowing the formation of vascular channels necessary for nutritional delivery and, possibly, metastasis. The formation of such structures is a unique feature of cells with a highly malignant phenotype; less aggressive tumor cells do not form such structures. The ability to transdifferentiate in combination with the high invasive and, therefore, metastatic potential of a number of cells allows them to form a network of channels inside the tumor, which can partially compensate for the insufficiently rapid development of the circulatory microcirculatory network in it and create conditions for the survival and proliferation of cells, preventing necrosis inside the tumor ... The high statistical correlation between the ability of the tumor to accept VM and the frequency of metastasis and poor clinical prognosis confirms this hypothesis [16].

Нами было показано, что ВМ представлена неодинаково в разных типах опухолей. В меланоме более 60% кровоснабжения осуществляется через каналы ВМ; при тройном негативном раке молочной железы - более 50%, при саркоме мягких тканей - 35-37%; при раке почки - 30-32%), при раке яичника, раке молочной железы - 15-18%; и меньше всего при раке толстой кишки - 10-12%. На фоне крайнего несовершенства циркуляции крови в опухоли 10-12% васкулярных каналов, выстланных опухолевыми клетками, вряд ли может серьезно повлиять на опухолевую прогрессию, однако 40-60%) должны иметь существенное значение, и с этим необходимо считаться [17].We have shown that VM is represented differently in different types of tumors. In melanoma, more than 60% of the blood supply is through the VM channels; with triple negative breast cancer - more than 50%, with soft tissue sarcoma - 35-37%; with kidney cancer - 30-32%), with ovarian cancer, breast cancer - 15-18%; and least of all in colon cancer - 10-12%. Against the background of extreme imperfection of blood circulation in a tumor, 10-12% of vascular channels lined with tumor cells can hardly seriously affect tumor progression, but 40-60%) should be of significant importance, and this must be taken into account [17].

Современная антиангиогенная терапия базируется на блокировании пролиферации эндотелиальных клеток. Для формирования функционально активных кровеносных сосудов эндотелиальные клетки должны остановить пролиферацию и пройти терминальную дифференцировку. Терминальную дифференцировку эндотелиальных клеток контролирует сигнальный путь Notch. В наших ранних работах на экспериментальной модели человеческой меланомы, растущей в бестимусных мышах, было показано, что ингибитор сигнального пути Notch (DAPT), незначительно снижал объем опухоли, при этом плотность каналов ВМ заметно возрастала [18]. Гистологический анализ опухоли выявил большие зоны некроза в DAPT-леченых опухолях - результат антиангиогенной терапии. В тех областях опухоли, где наблюдалась высокая плотность каналов ВМ, отсутствовал некроз, что, несомненно подтверждает функциональную активность васкулярных каналов, высланный опухолевыми клетками. Мы показали также, что в результате анти-Notch терапии опухоль переходила в более агрессивную фазу роста: наблюдалось значительное увеличение экспрессии ММР-2 и VEGFR1 - маркеров метастазирования [18]. Антиангиогенная терапия направлена на снижение плотности сосудов в опухоли, что приводит к увеличению локальной гипоксии. Адаптация к условиям гипоксии сопровождается селекцией клеток с более высоко злокачественным фенотипом, которые, скорее всего, и формируют васкулярные каналы. Таким образом, антиангиогенная терапия активирует альтернативную, более агрессивную систему кровоснабжения опухоли. Убивать такие клетки сегодня мы не можем. Мы предположили, что противоопухолевый эффект антиангиогенной терапии будет более ярко выражен, если ее сочетать с ингибиторами ВМ.Modern antiangiogenic therapy is based on blocking the proliferation of endothelial cells. To form functionally active blood vessels, endothelial cells must stop proliferation and undergo terminal differentiation. Terminal differentiation of endothelial cells is controlled by the Notch signaling pathway. In our early works on an experimental model of human melanoma growing in athymic mice, it was shown that the Notch signaling pathway inhibitor (DAPT) slightly reduced tumor volume, while the density of BM channels increased markedly [18]. Histological analysis of the tumor revealed large areas of necrosis in DAPT-treated tumors - the result of anti-angiogenic therapy. In those areas of the tumor where a high density of VM channels was observed, there was no necrosis, which undoubtedly confirms the functional activity of the vascular channels expelled by tumor cells. We also showed that, as a result of anti-Notch therapy, the tumor passed into a more aggressive growth phase: a significant increase in the expression of MMP-2 and VEGFR1, markers of metastasis, was observed [18]. Antiangiogenic therapy is aimed at reducing the density of blood vessels in the tumor, which leads to an increase in local hypoxia. Adaptation to hypoxic conditions is accompanied by selection of cells with a higher malignant phenotype, which most likely form vascular channels. Thus, antiangiogenic therapy activates an alternative, more aggressive blood supply to the tumor. We cannot kill such cells today. We assumed that the antitumor effect of antiangiogenic therapy will be more pronounced if it is combined with BM inhibitors.

Среди протестированных нами четырех классов низкомолекулярных соединений [19-21], соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид обладало наибольшей активностью [22]. На пяти разных видах раках -меланоме, раке легкого Льюиса, раке шейки матки, раке толстой кишки, раке молочной железы - индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, снижал объем опухолевой массы на 65-80%. Подобное поведение ингибитора указывает на то, что мишень для ингибитора ВМ одна и та же в пяти исследованных опухолях. В этой серии экспериментов in vivo важным нам представляется также и другой аспект. После завершения лечения индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с] карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, опухоли практически не росли в последующие 20-25 дней. 19 месяцев жизни мыши приравнивается к 63 годам человека, и эти 20-25 дней, когда опухоль не увеличивалась в размерах, приравнивается к 3 годам жизни человека [23].Among the four classes of low molecular weight compounds tested by us [19-21], the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide had the greatest activity [22]. On five different cancers - melanoma, Lewis lung cancer, cervical cancer, colon cancer, breast cancer - indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide, reduced the volume of tumor mass by 65-80%. This behavior of the inhibitor indicates that the target for the BM inhibitor is the same in the five studied tumors. In this series of in vivo experiments, another aspect is also important to us. After completion of treatment with indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide, the tumors practically did not grow in the next 20-25 days. 19 months of a mouse's life is equal to 63 years of a human, and these 20-25 days, when the tumor did not increase in size, is equivalent to 3 years of a human's life [23].

Далее нами методом искусственной стимуляции апоптоза ДНК-алкилирующими агентами была получена стабильная клеточная линия меланомы, сохраняющая морфологические признаки родительской линии, но резистентная к индукции апоптоза. Не цитотоксические концентрации индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, снижали агрессивность резистентных клеток и восстанавливали чувствительность этих клеток к апоптозу, индуцированному ДНК-повреждающими агентами [24].Further, by the method of artificial stimulation of apoptosis with DNA alkylating agents, we obtained a stable melanoma cell line that retains the morphological features of the parental line, but is resistant to the induction of apoptosis. Non-cytotoxic concentrations of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide reduced the aggressiveness of resistant cells and restored the sensitivity of these cells to apoptosis induced by DNA damaging agents [24].

Нам удалось показать в экспериментах in vitro и подтвердить полученные результаты в экспериментальной модели опухоли, растущей в мышах C57/BL/6, что ВМ - это программа, которой можно обучить другие клетки [25].We were able to show in in vitro experiments and confirm the results obtained in an experimental model of a tumor growing in C57 / BL / 6 mice that BM is a program that can be taught to other cells [25].

Таким образом, полученные нами in vitro и подтвержденные in vivo результаты, позволяют поднять вопрос о возможности нового терапевтического подхода в лечении злокачественных заболеваний. Блокирование ВМ позволит повысить эффективность антиангиогенной терапии, преодолеть резистентность опухолевых клеток к цитотоксической терапии, будет препятствовать переходу опухоли в фазу более агрессивного роста, уменьшая ее пластичность, а также препятствовать рекруитированию опухолью нормальных клеток для построения дополнительных сосудов ВМ.Thus, the results obtained by us in vitro and confirmed in vivo allow us to raise the question of the possibility of a new therapeutic approach in the treatment of malignant diseases. Blocking the BM will increase the effectiveness of antiangiogenic therapy, overcome the resistance of tumor cells to cytotoxic therapy, prevent the tumor from moving into a more aggressive growth phase, reduce its plasticity, and prevent the tumor from recruiting normal cells to build additional vessels of the BM.

Исследована специфическая активность нового соединения - индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид. Показано, что он проявляет активность в отношении ряда экспериментальных опухолей мышей [26].The specific activity of a new compound - indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide. It has been shown to be active against a number of experimental tumors in mice [26].

Данное средство принято в качестве прототипа.This tool is accepted as a prototype.

Недостатки прототипа:Disadvantages of the prototype:

1. Не растворим в растворителях для инъекций.1. Insoluble in injection solvents.

2. Невозможность автоматического дозирования.2. Impossibility of automatic dosing.

3. Невозможно ввести в организм больного.3. It is impossible to enter the patient's body.

Задачей настоящего изобретения является создание нового отечественного противоопухолевого средства из группы производных индолокарбазолов для таргетной терапии опухолей, удобного в употреблении, обладающего хорошей растворимостью, стабильного в хранении при сохранении высокого цитостатического эффекта.The objective of the present invention is to create a new domestic antitumor agent from the group of indolocarbazole derivatives for targeted therapy of tumors, convenient in use, with good solubility, stable in storage while maintaining a high cytostatic effect.

Технический результат:Technical result:

1) хорошая растворимость;1) good solubility;

2) точность дозирования;2) dosing accuracy;

3) создание отечественного противоопухолевого препарата - ингибитора топомеразы.3) creation of a domestic antitumor drug - a topomerase inhibitor.

Поставленная задача достигается тем, что создано новое противоопухолевое средство, содержащее:The task is achieved by the creation of a new anticancer agent containing:

индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид; диметилсульфоксид (ДМСО); Kollidon 17PF (поливинилпирролидон, ПВП) и спирт этиловый 95% при следующем соотношении компонентов: Состав на 1 мл (мг):indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a ] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide; dimethyl sulfoxide (DMSO); Kollidon 17PF (polyvinylpyrrolidone, PVP) and ethyl alcohol 95% at the following ratio of components: Composition per ml (mg):

индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с] карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a ] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide, (4,75-5,25) мг(4.75-5.25) mg ДМСОDMSO (52,25-57,75) мг(52.25-57.75) mg Колидон 17PFColidon 17PF (190,0-210) мг(190.0-210) mg Спирт этиловый 95%Ethyl alcohol 95% (153,9-170,1) мг(153.9-170.1) mg

В процентном соотношении:Percentage:

Индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с] карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид (прототип)Indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a ] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) 1,2%1.2% ДМСОDMSO 13,0%13.0% Колидон 17PFColidon 17PF 47,4%47.4% Спирт этиловый 95%Ethyl alcohol 95% 38,4%38.4%

Способ получения заявляемого средстваMethod of obtaining the claimed funds

Брали точную навеску субстанции индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) и добавляли ДМСО. Получали прозрачный раствор желтого цвета. Отдельно готовили раствор Колидона 17 PF в спирте этиловом. Затем в полученный раствор субстанции в ДМСО приливали по каплям, постоянно перемешивая, раствор солюбилизатора. Затем проводили стерилизующую фильтрацию - готовый раствор фильтровали через фильтр с размером пор 0,22 мкм. Стерильный раствор разливали во флаконы вместимостью 20 мл с дозировкой действующего вещества 25 мг на единицу упаковки. Хранили в холодильнике.An exact sample of the substance indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) and DMSO was added. A clear yellow solution was obtained. A solution of Colidon 17 PF in ethyl alcohol was prepared separately. Then, the solution of the substance in DMSO was added dropwise, constantly stirring, the solution of the solubilizer. Then sterilizing filtration was carried out - the finished solution was filtered through a filter with a pore size of 0.22 μm. The sterile solution was poured into vials with a capacity of 20 ml with a dosage of the active substance of 25 mg per packaging unit. Stored in the refrigerator.

Биологическая активность. Животные.Biological activity. Animals.

Проведено изучение противоопухолевой активности соединения индоло [2,3-а]пирроло [3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил} пиридин-2-карбоксамида (прототип) на перевиваемых опухолях мышей.The study of the antitumor activity of the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [ 2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on transplanted tumors of mice.

Мышей получали из филиала «Столбовая» ФГБУН «Научного центра биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства». В опытах использовали мышей-гибридов первого поколения F₁(C₅₇Bl/₆xDBA/2) и Fl(CBA^xC57Bl/6) обоего пола, самок CBA/Lac, Balb/ с и линейных мышей самцов и самок C57Bl₆ и DBA/2 (доноры опухолевого материала) массой тела 20-25 г. Животных содержали в виварии с естественным освещением на брикетированном корме и постоянном доступе к воде [1, 2].The mice were obtained from the "Stolbovaya" branch of the Federal State Budgetary Institution Scientific Center for Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency. The experiments used hybrid mice of the first generation F ₁ (C ₅₇ Bl / ₆ xDBA / 2) and Fl (CBA ^x C57Bl / 6) of both sexes, females CBA / Lac, Balb / c and male and female linear mice C57Bl ₆ and DBA / 2 (donors of tumor material) weighing 20-25 g. The animals were kept in a vivarium with natural light on briquetted food and constant access to water [1, 2].

Перед лечением мышей распределяли по группам (n=7). Контрольные группы состояли из 10 животных (n=10).Before treatment, mice were divided into groups (n = 7). The control groups consisted of 10 animals (n = 10).

Опухолевые модели.Tumor models.

Изучение противоопухолевой активности исследуемых соединений проводили на моделях перевиваемых опухолей мышей: лимфолейкозе Р-388, асцитном варианте опухоли Эрлиха, эпидермоидной карциноме легкого Lewis (LLC), аденокарциноме молочной железы Са-755, раке шейки матки РШМ-5 и раке толстого кишечника АКАТОЛ. Штаммы экспериментальных опухолей получены из Банка опухолевых штаммов ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России и поддерживались стандартными серийными перевивками каждые 7-8 дней внутрибрюшинно (в/бр) на самках линейных мышей DBA/2 (Р-388) и самках мышей-гибридов F1(CBA^xC57Bl/6) (опухоль Эрлиха), подкожно каждые 11-13 дней на самках линейных мышей C57Bl/₆ (для Са-755), каждые 19-20 дней на самках мышей CBA/Lac (для РШМ-5) и каждые 19 дней на самках мышей Balb/c (для АКАТОЛ). Штамм LLC поддерживали внутримышечно на самцах линии C₅₇Bl/6 каждые 12-14 дней[3].The study of the antitumor activity of the compounds under study was carried out on models of transplanted tumors of mice: lymphocytic leukemia R-388, ascites variant of Ehrlich's tumor, epidermoid lung carcinoma Lewis (LLC), breast adenocarcinoma Ca-755, cervical cancer RShM-5, and colon cancer AKA. Experimental tumor strains were obtained from the Bank of Tumor Strains of the N.N. N.N. Blokhin ”of the Ministry of Health of Russia and were supported by standard serial inoculations every 7-8 days intraperitoneally (ip) on female DBA / 2 (P-388) linear mice and F1 (CBA ^x C57Bl / 6) female hybrid mice (Ehrlich's tumor), subcutaneously every 11-13 days on female linear mice C57Bl / ₆ (for Ca-755), every 19-20 days on female CBA / Lac mice (for RShM-5) and every 19 days on female Balb / c mice (for AKATOL ). The LLC strain was maintained intramuscularly on C ₅₇ Bl / 6 males every 12-14 days [3].

В опытах использованы 2-15-й пассажи in vivo. Трансплантацию опухолей выполняли по стандартной методике, принятой в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России [3, 4]. Р-388 и опухоль Эрлиха трансплантировали в/бр самкам гибридов F₁(C₅₇Bl/6хDBA/2) по 10⁶ клеток в 0,3 мл питательной среды 199 при подсчете опухолевых клеток в камере Горяева. В эксперименте LLC перевивали самцам гибридам F₁(C₅₇Bl/₆хDBA/2), Са-755 - мышам-самкам F₁(C₅₇Bl/6хDBA/2), РШМ-5 трансплантировали мышам-самкам линии CBA/Lac, АКАТОЛ трансплантировали мышам-самкам Balb/c. Солидные опухоли перевивали мышам подкожно в правую подмышечную область по 0,5 мл (50 мг) взвеси опухолевых клеток при разведении 1:10 в среде 199. Лечение начинали через 24 ч после трансплантации асцитных опухолей и через 48 ч - солидных опухолей [4]. Изучаемое соединение.The experiments used passages 2-15 in vivo. Tumor transplantation was performed according to the standard technique adopted at the N.N. N.N. Blokhin ”of the Ministry of Health of Russia [3, 4]. P-388 and Ehrlich tumor transplanted into / br female hybrids F ₁ (C ₅₇ Bl / 6hDBA / 2) of 10 ⁶ cells in 0.3 ml of medium 199 when counting of tumor cells in the Goryaev camera. In Experiment LLC transplanted to male hybrids F ₁ (C ₅₇ Bl / ₆ hDBA / 2), Ca-755 - female mice F ₁ (C ₅₇ Bl / 6hDBA / 2), CC-5 transplanted female mice lines CBA / Lac, AKATOL was transplanted into Balb / c female mice. Solid tumors were transplanted subcutaneously into the right axillary region of mice, 0.5 ml (50 mg) of suspension of tumor cells at a dilution of 1:10 in medium 199. Treatment began 24 hours after transplantation of ascites tumors and 48 hours after transplantation of solid tumors [4]. The compound under study.

Соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип).The compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3- a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype).

Противоопухолевая активность соединения индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) изучалась при разных способах и режимах введения в свежеприготовленной разработанной для экспериментов инъекционной лекарственной форме с концентрацией действующего вещества 5 мг/мл, содержащей в составе комплексный растворитель диметилсульфоксид (ДМСО) (5%), спирт этиловый (20%) и солюбилизатор-комплексообразователь коллидон 17PF (20%).Antitumor activity of the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) was studied with different methods and modes of administration in a freshly prepared injection dosage form developed for experiments with an active ingredient concentration of 5 mg / ml, containing a complex solvent dimethyl sulfoxide (DMSO) (5%), ethyl alcohol (20%) and a solubilizer complexing agent Kollidon 17PF (20%).

Оценка противоопухолевого эффекта.Assessment of the antitumor effect.

Критериями оценки противоопухолевой активности служили: торможение роста опухоли (ТРО %), увеличение продолжительности жизни подопытных животных по сравнению с контрольными животными (УПЖ %) [4].The criteria for assessing the antitumor activity were: inhibition of tumor growth (TPO%), an increase in the lifespan of experimental animals as compared with control animals (AL%) [4].

Торможение роста опухоли вычисляли по формуле:Tumor growth inhibition was calculated by the formula:

ТРО (%)=(Vк-Vo)/Vк×100, гдеSRW (%) = (Vк-Vo) / Vк × 100, where

ТРО - торможение роста опухоли,TPO - inhibition of tumor growth,

Vк - средний объем опухолей в контрольной группе (мм³),Vк - the average volume of tumors in the control group (mm ³ ),

Vo - средний объем опухолей в опытной группе (мм³).Vo is the average volume of tumors in the experimental group (mm ³ ).

Увеличение продолжительности жизни вычисляли по формуле:The increase in life expectancy was calculated by the formula:

УПЖ (%)=(СПЖо-СПЖк)/СПЖк×100, гдеUPZH (%) = (SPZHo-SPZhk) / SPZhk × 100, where

УПЖ - увеличение продолжительности жизни,UPZH - increase in life expectancy,

СПЖк - средняя продолжительность жизни животных в контрольной группе (дни),ALE is the average life span of animals in the control group (days),

СПЖо - средняя продолжительность жизни животных в опытной группе (дни).ALE is the average life span of animals in the experimental group (days).

Минимальные критерии активности - ТРО≥50%, УПЖ≥25%. Эффективными считали дозы препаратов, вызывающие ТРО≥70% продолжительностью не менее 7 дней после окончания лечения или УПЖ≥25% [4].The minimum criteria for activity is TPO≥50%, ALW≥25%. Doses of drugs that cause TPO ≥70% lasting at least 7 days after the end of treatment or LPL ≥25% were considered effective [4].

Статистическая обработка результатов.Statistical processing of results.

Полученные данные обрабатывали статистически с использованием компьютерной программы STATISTICA 6.0. Различия между сравниваемыми группами считались статистически достоверными при р<0,05.The data obtained were processed statistically using the STATISTICA 6.0 computer program. Differences between the compared groups were considered statistically significant at p <0.05.

Изобретение иллюстрируется таблицами 1-7.The invention is illustrated in tables 1-7.

В табл. 1 представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при внутрибрюшинном введении на лимфолейкозе Р-388.Table 1 shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when injected intraperitoneally on lymphocytic leukemia P-388.

В табл. 2 представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при внутрибрюшинном введении на асцитной модели опухоли Эрлиха.Table 2 shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered intraperitoneally in an Ehrlich ascites tumor model.

В табл. 3 представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на эпидермоидной карциноме легкого Lewis (LLC).Table 3 shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on Lewis epidermoid lung carcinoma (LLC).

В табл. 4 - представлена противоопухолевая активность ЛХС 1269 при внутрибрюшинном введении на меланоме В-16.Table 4 - shows the antitumor activity of LHS 1269 when administered intraperitoneally on B-16 melanoma.

В табл. 5 - представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при внутрибрюшинном введении на модели рака шейки матки РШМ-5.Table 5 - shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [ 2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered intraperitoneally on a model of cervical cancer RShM-5.

В табл. 6 представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при внутрибрюшинном введении на модели рака толстого кишечника АКАТОЛ.Table 6 shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered intraperitoneally on the model of colon cancer AKATOL.

В табл. 7 представлена противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при внутрибрюшинном введении на аденокарциноме молочной железы Са 755.Table 7 shows the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered intraperitoneally on adenocarcinoma of the mammary gland Ca 755.

На асцитных моделях опухолей мышей соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) изучалось при внутрибрюшинном введении в ежедневном пятикратном режиме в широком диапазоне доз от 20 мг/кг до 100 мг/кг.In ascites models of mouse tumors, the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) was studied with intraperitoneal administration in a daily five-fold regimen in a wide range of doses from 20 mg / kg to 100 mg / kg.

На лимфолейкозе Р-388 наилучший противоопухолевый эффект - увеличение продолжительности жизни животных 93% без гибели мышей отмечался в дозе 100 мг/кг (таблица 1).On lymphocytic leukemia R-388, the best antitumor effect - an increase in animal life expectancy of 93% without death of mice was noted at a dose of 100 mg / kg (Table 1).

Противоопухолевая активность индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на асцитной модели опухоли Эрлиха в дозе 80 мг/кг в ежедневном пятикратном (через 24 ч) режиме при внутрибрюшинном введении составила 337% увеличения продолжительности жизни животных без гибели мышей (таблица 2).Antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3 -а] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) in the ascites model of Ehrlich's tumor at a dose of 80 mg / kg in a daily five-fold (after 24 hours) regimen with intraperitoneal injection was 337 % increase in the life expectancy of animals without death of mice (table 2).

Изучение противоопухолевой активности соединения индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) было продолжено на перевиваемых солидных опухолях мышей: эпидермоидной карциноме легкого Lewis (LLC), меланоме В-16, раке шейки матки РШМ-5, раке толстого кишечника АКАТОЛ, аденокарциноме молочной железы Са 755.Study of the antitumor activity of the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) was continued on transplanted solid tumors of mice: Lewis epidermoid lung carcinoma (LLC), B-16 melanoma, cervical cancer uterus RShM-5, colon cancer AKATOL, breast adenocarcinoma Ca 755.

На LLC соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) изучали в широком диапазоне доз от 40 мг/кг до 150 мг/кг при разных путях и режимах введения. Наиболее эффективные результаты исследования противоопухолевой активности соединения индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на LLC представлены в таблице 3.On LLC, the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) was studied in a wide dose range from 40 mg / kg to 150 mg / kg with different routes and modes of administration. The most effective results of studying the antitumor activity of the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on LLC are presented in Table 3.

В дозе 60 мг/кг при пятикратном с интервалом 24 часа ежедневном подкожном введении соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) вызывало 78%) торможения роста опухоли на LLC непосредственно после окончания лечения, которое сохранялось на уровне 58% до 20 дня наблюдения с увеличением продолжительности жизни животных 34%. После повторного исследования индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в том же режиме, дозе и способе введения был подтвержден высокий уровень ТРО после окончания лечения (ТРО=82%, р<0,05), с сохранением терапевтического эффекта до 20 дня наблюдения (ТРО=50%). При подкожном способе применения в режиме введения 2 раза через 96 ч в дозах 100 и 120 мг/кг индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) также показал высокий противоопухолевый эффект (ТРО=80-86% до 68-63%) в течение 20 дней), как и в дозе 60 мг/кг при пятикратном ежедневном подкожном введении.Indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-) compound at a dose of 60 mg / kg with five times daily subcutaneous administration with an interval of 24 hours xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) caused 78%) inhibition of tumor growth on LLC immediately after the end of treatment, which remained at 58% until the 20th day of observation with an increase in the life expectancy of animals by 34%. After a second study of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) in the same regimen, dose and route of administration, a high level of TPO after the end of treatment was confirmed (TPO = 82%, p <0.05), with preservation of the therapeutic effect up to 20 days of observation (TPO = 50%). With the subcutaneous route of administration in the mode of administration 2 times after 96 hours at doses of 100 and 120 mg / kg indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- ( β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) also showed a high antitumor effect (TPO = 80-86% to 68-63%) within 20 days), as well as at a dose of 60 mg / kg with five times daily subcutaneous administration.

Изучение противоопухолевой активности индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при введении per os в пятикратном режиме с интервалом 24 ч в диапазоне доз 130, 150 и 200 мг/кг на LLC показало эффект ТРО=64-52% и 69-61% (р<0,05)продолжительностью до 8 дня наблюдения после лечения в дозах 130 и 150 мг/кг, соответственно.Study of the antitumor activity of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered per os in a five-fold regimen with an interval of 24 hours in a dose range of 130, 150 and 200 mg / kg per LLC showed the effect of TPO = 64-52% and 69-61% (p <0.05) lasting up to 8 days of observation after treatment at doses of 130 and 150 mg / kg, respectively.

Сравнение внутривенного способа введения в двух режимах - пятикратном ежедневном с интервалом 24 ч и однократном - позволяет выделить лучший режим для данного способа введения из изученных. Анализируя результаты исследования противоопухолевого эффекта индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в диапазоне доз 60, 70, 80 мг/кг (суммарные дозы 300, 350, 400 мг/кг, соответственно) при пятикратном ежедневном режиме и однократном - в дозах 150 и 180 мг/кг, выбран пятикратный ежедневный с интервалом 24 ч режим и доза 60 мг/кг, показавшая эффект ТРО=94% (р<0,05)с сохранением ТРО на уровне 51% до 20 дня наблюдения после окончания лечения при внутривенном пути введения (таблица 3). Следует отметить, что при однократном внутривенном введении индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в дозе 180 мг/кг отмечалась гибель от токсичности 6 из 7 мышей в группе.Comparison of the intravenous route of administration in two modes - five times daily with an interval of 24 hours and a single one - makes it possible to select the best mode for this route of administration from those studied. Analyzing the results of studies of the antitumor effect of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [ 2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) in the dose range 60, 70, 80 mg / kg (total doses 300, 350, 400 mg / kg , respectively) with a five-fold daily regimen and a single one - at doses of 150 and 180 mg / kg, a five-fold daily regimen with an interval of 24 h and a dose of 60 mg / kg was selected, which showed the effect of TPO = 94% (p <0.05) with the preservation of TPO at the level of 51% up to 20 days of observation after the end of treatment with the intravenous route of administration (table 3). It should be noted that with a single intravenous administration of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo -indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) at a dose of 180 mg / kg death from toxicity was noted in 6 out of 7 mice in the group.

При сравнении внутрибрюшинного способа введения в двух режимах - при пятикратном с интервалом 24 ч и в режиме 2 раза через 96 ч противоопухолевая активность соединения оказалась наиболее высокой в дозе 120 мг/кг в режиме - 2 раза через 96 ч. ТРО составило 61% с сохранением активности на уровне 67% (р<0,05) до 20 дня наблюдения после окончания лечения.When comparing the intraperitoneal route of administration in two modes - at five times with an interval of 24 h and in the mode 2 times after 96 hours, the antitumor activity of the compound was the highest at a dose of 120 mg / kg in the mode - 2 times after 96 hours. activity at the level of 67% (p <0.05) up to 20 days of observation after the end of treatment.

Индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на меланоме В-16 при ежедневном пятикратном внутрибрюшинном введении показал высокий противоопухолевый эффект в дозах 60 и 100 мг/кг: ТРО составило от 84-79% до 70-46%) (р<0,05), соответственно, в течение 18 дней после окончания лечения без гибели мышей (таблица 4).Indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a ] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on B-16 melanoma, with five daily intraperitoneal administration, showed a high antitumor effect at doses of 60 and 100 mg / kg: TPO ranged from 84 -79% to 70-46%) (p <0.05), respectively, within 18 days after the end of treatment without the death of the mice (table 4).

На РШМ 5 соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при ежедневном пятикратном внутрибрюшинном введении показало высокий продолжительный противоопухолевый эффект в дозе 60 мг/кг: от 89% до 62% (р<0,05) ТРО в течение 16 дней с сохранением эффекта 58%) до 24 дня после окончания лечения без гибели мышей (таблица 5). индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) проявил высокий противоопухолевый эффект при пероральном применении в режиме введения 2 раза через 96 ч в дозе 100 мг/кг: ТРО составило от 74-68% (р<0,05) в течение 22 дней с сохранением эффекта до 57% на 24 день после окончания лечения. Гибели мышей не наблюдалось (таблица 5).On RShM 5 compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype), when administered five times daily intraperitoneally, showed a high long-term antitumor effect at a dose of 60 mg / kg: from 89% to 62% (p <0.05) TPO for 16 days with a preservation of 58% effect) up to 24 days after the end of treatment without killing the mice (Table 5). indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a ] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) showed a high antitumor effect when administered orally 2 times after 96 hours at a dose of 100 mg / kg: TPO ranged from 74- 68% (p <0.05) within 22 days with the preservation of the effect up to 57% on the 24th day after the end of treatment. No death of mice was observed (table 5).

На раке толстого кишечника мышей АКАТОЛ соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) при ежедневном в течение 5 дней внутрибрюшинном введении показало высокий продолжительный противоопухолевый эффект: ТРО=90-62% до 26 дня после окончания лечения. Гибели мышей не наблюдалось (таблица 6).On colon cancer of AKATOL mice, the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) when administered intraperitoneally daily for 5 days showed a high long-term antitumor effect: TPO = 90-62% up to 26 days after the end of treatment. No death of mice was observed (table 6).

При изучении соединения индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на аденокарциноме молочной железы Са 755 в дозе 60 мг/кг при пятикратном ежедневном внутрибрюшинном введении мышам наблюдался высокий противоопухолевый эффект: ТРО=86-78% (р<0,05)в течение 8 дней после окончания лечения, которое сохранялось на уровне 68% до 20 дня наблюдения. Увеличение продолжительности жизни животных составило 21% (таблица 7).When studying the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on adenocarcinoma of the mammary gland Ca 755 at a dose of 60 mg / kg with five times daily intraperitoneal administration to mice, a high antitumor effect was observed: TPO = 86-78% (p <0.05) within 8 days after the end of treatment, which remained at 68% until the 20th day of observation. The increase in the life span of animals was 21% (table 7).

При пятикратном ежедневном подкожном введении мышам с Са 755 индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в дозе 60 мг/кг вызывал высокое ТРО=91%) непосредственно после окончания лечения, которое сохранялосьна уровне 64% (р<0,05) до 20 дня наблюдения с увеличением продолжительности жизни животных на 41%. Гибели мышей не наблюдалось (таблица 7).Indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7- in mice with Ca 755 five times daily dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) at a dose of 60 mg / kg caused a high TPO = 91%) immediately after the end of treatment, which remained at the level of 64% (p <0.05) until the 20th day of observation with an increase in the life expectancy of animals by 41%. No death of mice was observed (table 7).

Соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в экспериментальной лекарственной форме для инъекций показал высокую противоопухолевую эффективность на моделях опухолей мышей различного гистогенеза при разных способах и режимах введения, которые можно использовать для дальнейших доклинических испытаний.The compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3- a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) in an experimental dosage form for injection showed high antitumor efficacy in models of mouse tumors of various histogenesis with different methods and modes of administration that can be used for further preclinical testing.

На лимфолейкозе Р-388 установлено, что соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) в дозе 100 мг/кг при внутрибрюшинном введении в течение 5 дней увеличивает продолжительность жизни мышей на 93% (р<0,05). Гибели животных не наблюдается.On lymphocytic leukemia P-388 it was found that the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7- dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) at a dose of 100 mg / kg when administered intraperitoneally for 5 days increases the lifespan of mice by 93% (p <0.05). The death of animals is not observed.

Показано, что соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на асцитном варианте опухоли Эрлиха в дозе 80 мг/кг при ежедневном пятикратном внутрибрюшинном введении вызывает увеличение продолжительности жизни мышей на 337%. Гибели животных не отмечается.It was shown that the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) in the ascites variant of Ehrlich's tumor at a dose of 80 mg / kg with a daily five-fold intraperitoneal injection causes an increase in the lifespan of mice by 337 %. The death of animals is not noted.

Установлено, что на эпидермоидной карциноме легкого Lewis (LLC) соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) проявляет высокую противоопухолевую эффективность при внутривенном и подкожном способах введения и умеренную эффективность при пероральном применении. Так, при внутривенном способе применения наилучший противоопухолевый эффект установлен при ежедневном пятикратном (через 24 ч) введении в дозе 60 мг/кг (ТРО=94-51%, р<0,05 в течение 20 дней). При подкожном способе применения соединение эффективно в двух режимах: при введении ежедневно в течение 5 дней в дозе 60 мг/кг (ТРО=78-58%, р<0,05 в течение 20 дней, УПЖ=34%) и двукратном введении через 96 ч в дозе 100 мг/кг (ТРО=80-68%, р<0,05 в течение 20 дней). При применении индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) per os в режиме ежедневно пятикратно (через 24 ч) отмечается умеренный противоопухолевый эффект в дозе 150 мг/кг (ТРО=69-61%, р<0,05 до 8 дня наблюдения).It was found that on epidermoid lung carcinoma Lewis (LLC) the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-dione-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5 , 7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) exhibits high antitumor efficacy for intravenous and subcutaneous administration and moderate efficacy when administered orally application. Thus, with the intravenous route of administration, the best antitumor effect was established with a five-fold daily (after 24 hours) administration at a dose of 60 mg / kg (TPO = 94-51%, p <0.05 for 20 days). With the subcutaneous route of administration, the compound is effective in two modes: when administered daily for 5 days at a dose of 60 mg / kg (TPO = 78-58%, p <0.05 for 20 days, UPL = 34%) and twice 96 hours at a dose of 100 mg / kg (TPO = 80-68%, p <0.05 for 20 days). When using indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3 -a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) per os in a daily regimen five times (after 24 hours), there is a moderate antitumor effect at a dose of 150 mg / kg (TPO = 69 -61%, p <0.05 to 8 days of observation).

Обнаружено, что индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на меланоме В-16 при ежедневном пятикратном введении показал высокий противоопухолевый эффект в дозах 60 и 100 мг/кг: ТРО составляет от 84-79%) до 70-46%) (р<0,05), соответственно, в течение18 дней после окончания лечения без гибели мышей.It was found that indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2, 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on melanoma B-16 with daily five-fold administration showed a high antitumor effect at doses of 60 and 100 mg / kg: TPO is from 84-79%) to 70-46%) (p <0.05), respectively, within 18 days after the end of treatment without the death of mice.

Показано, что соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) на РШМ-5 проявляет высокую противоопухолевую активность при внутрибрюшинном и пероральном способах введения. Так, при ежедневном пятикратном (через 24 ч) внутрибрюшинном введении в дозе 60 мг/кг наблюдается ТРО=89-62% (р<0,05)в течение 16 дней с сохранением эффекта до 58% до 24 дня после окончания лечения. При пероральном применении в режиме введения 2 раза через 96 ч в дозе 100 мг/кг отмечается ТРО=74-68% (р<0,05) в течение 22 дней с сохранением эффекта до 57% на 24 день после окончания лечения.It was shown that the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) on RShM-5 exhibits high antitumor activity with intraperitoneal and oral routes of administration. Thus, with daily intraperitoneal injection of 60 mg / kg, five times (after 24 hours), TPO = 89-62% (p <0.05) is observed for 16 days with the effect remaining up to 58% until 24 days after the end of treatment. When administered orally in the mode of administration 2 times after 96 hours at a dose of 100 mg / kg, TPO = 74-68% (p <0.05) is noted for 22 days with the preservation of the effect up to 57% on the 24th day after the end of treatment.

На раке толстого кишечника мышей АКАТОЛ показано, что соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) вызывает высокий продолжительный противоопухолевый эффект при ежедневном в течение 5 дней внутрибрюшинном введении: ТРО=90-62% (р<0,05) до 26 дня после окончания лечения. Гибели мышей не наблюдается.On colon cancer in AKATOL mice, it was shown that the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7 -dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) causes a high long-term antitumor effect when administered intraperitoneally daily for 5 days: TPO = 90 -62% (p <0.05) up to 26 days after the end of treatment. No death of mice was observed.

Установлено, что соединение индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов-n-{12-(β-d-ксилопиранозил)-5,7-диоксо-индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамида (прототип) проявляет высокий противоопухолевый эффект на аденокарциноме молочной железы Са 755 мышей в дозе 60 мг/кг в режиме ежедневного в течение 5 дней введения при двух способах применения: внутрибрюшинном (ТРО=86-68%, р<0,05 до 20 дня наблюдения, УПЖ=21%) и подкожном (ТРО=91-64%, р<0,05 до 20 дня наблюдения, УПЖ=41%). Гибели мышей не наблюдается.It was found that the compound indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-diones-n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2 , 3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide (prototype) exhibits a high antitumor effect on adenocarcinoma of the mammary gland Ca 755 mice at a dose of 60 mg / kg daily for 5 days of administration with two methods of application: intraperitoneal (TPO = 86-68%, p <0.05 up to 20 days of observation, UPL = 21%) and subcutaneous (TPO = 91-64%, p <0.05 until 20 days of observation , UPL = 41%). No death of mice was observed.

ЛитератураLiterature

1. A.M. Гарин, И.С.Базин. - М.: ИНФОТЕХ; ЛЕКСРУС, 2015.-529 с.1. A.M. Garin, I. S. Bazin. - M .: INFOTECH; LEXRUS, 2015.-529 p.

2. Смирнова, З.С.Изучение связи структуры и противоопухолевой активности в ряду N-гликозидов, производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С.Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5. - №1. - C. 20.2. Smirnova, ZS Study of the relationship between structure and antitumor activity in a series of N-glycosides derived from indolo [2,3-a] carbazole / ZS Smirnova, I.Yu. Kubasova, L.M. Borisova [et al.] // Russian Biotherapeutic Journal. - 2006. - T. 5. - No. 1. - p. 20.

3. Смирнова, З.С. Корреляция цитотоксической и противоопухолевой активности в отношении лейкозов в ряду N-гликозилированных производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С.Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - Т. 6. - №1. - С. 50-51.3. Smirnova, Z.S. Correlation of cytotoxic and antitumor activity against leukemias in the series of N-glycosylated derivatives of indolo [2,3-a] carbazole / Z.S. Smirnova, I.Yu. Kubasova, L.M. Borisova [et al.] // Russian Biotherapeutic Journal. - 2007. - T. 6. - No. 1. - S. 50-51.

4. Голубева, И.С.Противоопухолевая активность гликозидов индолокарбазолов [Текст] / И.С. Голубева, Н.П. Яворская, В.А. Еремина, Н.И. Тихонова, Т.Д. Миникер, Л.В. Эктова, М.В. Дмитриева // Российский биотерапевтический журнал - 2016. - Т. 15, №1. - С. 23-24.4. Golubeva, IS Antitumor activity of indolocarbazole glycosides [Text] / IS. Golubeva, N.P. Yavorskaya, V.A. Eremina, N.I. Tikhonova, T.D. Miniker, L.V. Ektova, M.V. Dmitrieva // Russian Biotherapeutic Journal - 2016. - T. 15, №1. - S. 23-24.

5. А.А. Вартанян, М.А. Барышникова, О.С. Бурова [и др.] // Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина. - 2016. - Т. 27. - №2. - С. 165-17.], [Пат. №2548045 РФ, МКИ А61К 31/7008, А61Р 35/00, С07Н 19/04 N-гликозиды индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазолов, обладающие противоопухолевой активностью.5. A.A. Vartanyan, M.A. Baryshnikova, O.S. Burov [et al.] // Bulletin of the Russian Oncology Center. N.N. Blokhin. - 2016. - T. 27. - No. 2. - S. 165-17.], [Pat. No. 2548045 RF, MKI A61K 31/7008, A61P 35/00, S07H 19/04 N-glycosides of indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazoles, which have antitumor activity.

6. А. А. Вартанян, М.А. Барышникова, О.С.Бурова, Л.В. Эктова, 3.С.Шпрах. Блокатор васкулагенной мимикрии восстанавливает чувствительность резистентных клеток меланомы к ДНК-повреждающим агентам. Российский биотерапевтический журнал - 2016. - Т. 15, №1. - С. 19-20.6. A. A. Vartanyan, M. A. Baryshnikova, O.S. Burova, L.V. Ektov, 3.S. Sprah. The blocker of vasculagenic mimicry restores the sensitivity of resistant melanoma cells to DNA-damaging agents. Russian Biotherapeutic Journal - 2016. - T. 15, No. 1. - S. 19-20.

7. Л.М. Борисова, И.С. Голубева, О.В. Горюнова [и др.] - №2014107507/04; заявл. 27.02.2014; опубл. 10.04.2015. - 6 с.], [Пат. №2557554 РФ, МКИ А61К 31/7056, А61Р 35/00, С07Н 19/23 Производные индолокарбазолов, блокирующие васкулогенную мимикрию в опухоли / А.А. Вартанян, М.А. Барышникова, В.А. Еремина [и др.] - №2014136547/04; заявл. 09.09.2014; опубл. 27.07.2015. - 6 с.7.L.M. Borisova, I.S. Golubeva, O. V. Goryunova [and others] - No. 2014107507/04; declared 02/27/2014; publ. 10.04.2015. - 6 p.], [Pat. No. 2557554 RF, MKI A61K 31/7056, A61R 35/00, S07N 19/23 Indolocarbazole derivatives blocking vasculogenic mimicry in the tumor / А.А. Vartanyan, M.A. Baryshnikov, V.A. Eremina [and others] - No. 2014136547/04; declared 09.09.2014; publ. 27.07.2015. - 6 p.

8. Смирнова З.С. Изучение связи структуры и противоопухолевой активности в ряду N-гликозидов, производных индоло[2,3-а]карбазола / З.С. Смирнова, И.Ю. Кубасова, Л.М. Борисова [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5. - №1. - С. 20.8. Smirnova Z.S. Study of the relationship between the structure and antitumor activity in the series of N-glycosides, derivatives of indolo [2,3-a] carbazole / Z.S. Smirnova, I. Yu. Kubasova, L.M. Borisova [et al.] // Russian Biotherapeutic Journal. - 2006. - T. 5. - No. 1. - S. 20.

9. Реагсе С.J., Doyle T.W., Forenza S., Lam K.S., Schroeder D.R. The biosynthetic origins of rebeccamycin. Journal of Natural Products. 1988. 51, P. 937-940.9. Reagce C.J., Doyle T.W., Forenza S., Lam K.S., Schroeder D.R. The biosynthetic origins of rebeccamycin. Journal of Natural Products. 1988.51, P. 937-940.

10. Блохин, Д.Ю. Молекулярные мишени для противоопухолевой терапии: пути: пути передачи сигнала и эпигенетические модуляторы / Д.Ю. Блохин, Е.Ф. Чмутин, П.К. Иванов // Российский биотерапевтический журнал. - 2011. - Т. 10. - №4. - С. 81-88.10. Blokhin, D.Yu. Molecular targets for antitumor therapy: pathways: signal transduction pathways and epigenetic modulators / D.Yu. Blokhin, E.F. Chmutin, P.K. Ivanov // Russian Biotherapeutic Journal. - 2011. - T. 10. - No. 4. - S. 81-88.

11. Pereira Rodrigues, Е. Structure - activity relationships in a series of substituted indolocarbazoles: topoisomerase I and protein kinase С ingibition and antitumoral and antimicrobial properties / E. Pereira Rodrigues, L. Belin, M. Sancelme [et al.] // J. Med.Chem. - 1996. - Vol. 39. - P. 4471-4477.11. Pereira Rodrigues, E. Structure - activity relationships in a series of substituted indolocarbazoles: topoisomerase I and protein kinase C ingibition and antitumoral and antimicrobial properties / E. Pereira Rodrigues, L. Belin, M. Sancelme [et al.] // J. Med. Chem. - 1996. - Vol. 39. - P. 4471-4477.

12. Schwandt, A. Phase-II trial of rebeccamycin analog, a dual topoisomerase-I and -II inhibitor, in relapsed "sensitive" small cell lung cancer / A. Schwandt, T. Mekhail, B. Halmos [et al.] // J Thorac Oncol. - 2012 - Vol. 7. - №4. - P. 751-754.12. Schwandt, A. Phase-II trial of rebeccamycin analog, a dual topoisomerase-I and -II inhibitor, in relapsed "sensitive" small cell lung cancer / A. Schwandt, T. Mekhail, B. Halmos [et al.] // J Thorac Oncol. - 2012 - Vol. 7. - No. 4. - P. 751-754.

13. Nock, C.J. A phase I study of rebeccamycin analog in combination with oxaliplatin in patients with refractory solid tumors / C.J. Nock, J.M. Brell, J.A. Bokar [et al.] // Invest New Drugs.-2011.- Vol. 29. - P. 126-130.13. Nock, C.J. A phase I study of rebeccamycin analog in combination with oxaliplatin in patients with refractory solid tumors / C.J. Nock, J.M. Brell, J.A. Bokar [et al.] // Invest New Drugs.-2011.-Vol. 29. - P. 126-130.

14. Plas, D.R. Akt-dependent transformation: there is more to growth than just surviving / D.R. Plas, C.B. Thompson // Oncogene - 2005. - Vol. 24. - P. 7435-7442.14. Plas, D.R. Akt-dependent transformation: there is more to growth than just surviving / D.R. Plas, C.B. Thompson // Oncogene - 2005. - Vol. 24 .-- P. 7435-7442.

15. Senderowicz, A.M. Inhibitors of cyclin-dependent kinase modulators for cancer therapy / A.M. Senderowicz // Prog Drug Res. - 2005. - Vol. 63. - P. 183-206.15. Senderowicz, A.M. Inhibitors of cyclin-dependent kinase modulators for cancer therapy / A.M. Senderowicz // Prog Drug Res. - 2005. - Vol. 63. - P. 183-206.

16. Блохин, Д.Ю. Молекулярные мишени для противоопухолевой терапии: пути: пути передачи сигнала и эпигенетические модуляторы / Д.Ю. Блохин, Е.Ф. Чмутин, П.К. Иванов // Российский биотерапевтический журнал. - 2011. - Т. 10. - №4. - С. 81-88.16. Blokhin, D.Yu. Molecular targets for antitumor therapy: pathways: signal transduction pathways and epigenetic modulators / D.Yu. Blokhin, E.F. Chmutin, P.K. Ivanov // Russian Biotherapeutic Journal. - 2011. - T. 10. - No. 4. - S. 81-88.

17. Vartanian A. and Baryshnikov A. Molecular determinants of tumor vasculogenic mimicry. In "Cancer Etiology, Diagnosis and Treatments". NOVA Publisher, USA. Ed Jones A. 67-92.17. Vartanian A. and Baryshnikov A. Molecular determinants of tumor vasculogenic mimicry. In "Cancer Etiology, Diagnosis and Treatments". NOVA Publisher, USA. Ed Jones A. 67-92.

18. Vartanian A., et al. The involvement of Notch signaling in melanoma vasculogenic mimicry. Clin. Exp.Med. 2013; 13(3):201-209.18. Vartanian A., et al. The involvement of Notch signaling in melanoma vasculogenic mimicry. Clin. Exp.Med. 2013; 13 (3): 201-209.

19. Vartanian A., et al. VEGFR1 and PKCa signaling control melanoma vasculogenic mimicry in a VEGFR2 kinase-independent manner. Melanoma Res. 2011; 21(2): 91-98.19. Vartanian A., et al. VEGFR1 and PKCa signaling control melanoma vasculogenic mimicry in a VEGFR2 kinase-independent manner. Melanoma Res. 2011; 21 (2): 91-98.

20. Vartanian A. et al. Melanoma vasculogenic mimicry is strongly related to reactive pxygen species level. Melanoma Res. 2007; 17(6): 370-379.20. Vartanian A. et al. Melanoma vasculogenic mimicry is strongly related to reactive pxygen species level. Melanoma Res. 2007; 17 (6): 370-379.

21. Vartanian A. et al. Melanoma vasculogenic mimicry depends on integrin and calcium signaling. Microcirculation 2011; 18(5), 390-399.21. Vartanian A. et al. Melanoma vasculogenic mimicry depends on integrin and calcium signaling. Microcirculation 2011; 18 (5), 390-399.

22. Вартанян A.A. и др. Производные индолокарбозолов, блокирующие васкулогенную мимикрию в опухоли. Патент №2557554, 2015.22. Vartanyan A.A. et al. Indolocarbozole derivatives blocking vasculogenic mimicry in a tumor. Patent No. 2557554, 2015.

23. Vartanian A. et al. Is vasculogenic mimicry a hallmark of cancer? Horizons in Cancer Res. 2017, 65:13-34.23. Vartanian A. et al. Is vasculogenic mimicry a hallmark of cancer? Horizons in Cancer Res. 2017, 65: 13-34.

24. Vartanian A. et al. Inhibitor of vasculogenic mimicry restores sensitivity of resistant melanoma cells to DNA-damaging agents. Melanoma Res. 2017; 27 (1):8-16.24. Vartanian A. et al. Inhibitor of vasculogenic mimicry restores sensitivity of resistant melanoma cells to DNA-damaging agents. Melanoma Res. 2017; 27 (1): 8-16.

25. Vartanian A. et al. Melanoma educates mesenchymal stromal cells towards vasculogenic mimicry. Oncol Lett. 2016;11(6):4264-4268.25. Vartanian A. et al. Melanoma educates mesenchymal stromal cells towards vasculogenic mimicry. Oncol Lett. 2016; 11 (6): 4264-4268.

26. Яворская, Н.П. Противоопухолевая активность индолокарбазола ЛХС-1269 [Текст]/ Н.П. Яворская, И.С.Голубева, Л.В. Эктова, В.А. Еремина, Н.И. Тихонова, Т.Д. Миникер, М.В. Дмитриева // Российский биотерапевтический журнал - 2016. - Т. 15, №1. - С. 125-126.26. Yavorskaya, N. P. Antitumor activity of indolocarbazole LHS-1269 [Text] / N.P. Yavorskaya, I. S. Golubeva, L. V. Ektova, V.A. Eremina, N.I. Tikhonova, T.D. Miniker, M.V. Dmitrieva // Russian Biotherapeutic Journal - 2016. - T. 15, №1. - S. 125-126.

Claims

An agent for the therapy of tumors, active against tumors of mice: lymphocytic leukemia P-388, Ehrlich's tumor, epidermoid carcinoma of the Lewis lung, melanoma B-16, cervical cancer RShM-5, colon cancer AKATOL and adenocarcinoma of the breast Ca 755, containing indolo [ 2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazole-5,7-dione - n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide, characterized in that it additionally contains dimethyl sulfoxide (DMSO), Colidon 17PF, ethyl alcohol 95% in the following ratio of components in wt%:

n- {12- (β-d-xylopyranosyl) -5,7-dioxo-indolo [2,3-a] pyrrolo [3,4-c] carbazol-6-yl} pyridine-2-carboxamide 1.2% DMSO 13.0% Colidon 17PF 47.4% Ethyl alcohol 95% 38.4%