RU2746616C1

RU2746616C1 - Method for prevention of nodular dermatitis in cattle

Info

Publication number: RU2746616C1
Application number: RU2020126180A
Authority: RU
Inventors: Павел Валерьевич Бурков; Павел Николаевич Щербаков; Татьяна Борисовна Щербакова; Сергей Романович Слободянский
Priority date: 2020-08-03
Filing date: 2020-08-03
Publication date: 2021-04-19

Abstract

FIELD: veterinary science.

SUBSTANCE: invention refers to veterinary medicine, particularly to methods for prevention of nodular dermatitis in cattle. Method for prevention of nodular dermatitis in cattle involves using viral vaccine against smallpox and sheep nodular dermatitis cattle culture dry "ShipPox-LSD Vak", simultaneous introduction with subcutaneous or intramuscular transmission factor in dose of 1.4-1.6 ml per head for animals up to 12 months of age, for animals older than 12 months, the volume of the transfer factor is 5.9-6.1 ml per head, wherein simultaneously intramuscularly Imsidivit preparation is administered intramuscularly in dose of 5-6 ml for animals up to 12 months and 10-15 ml for animals older than 12 months.

EFFECT: invention provides preventive maintenance of nodular dermatitis in cattle with expressed hepatoprotective effect.

1 cl, 1 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.The invention relates to veterinary medicine, in particular to methods for the prevention of lumpy dermatitis in cattle.

Известен способ профилактики и лечения нодулярного дерматита (Кривонос Р.А., Джаилиди Г.А., Мищенко А.В., Мищенко В.А., Черных О.Ю., Шевкопляс В.Н., Дресвянникова С.Г., Коломиец Д.В., Тихонов С.В. Проблема профилактики и ликвидации очагов нодулярного дерматита крупного рогатого скота // Ветеринария сегодня. - №1(20). - 2017. - С. 38-44.), включающий обработку кожного покрова животных, на котором были выявлены нодулы, препаратом АСД (фракция 3); инъекции всем животным внутримышечно «Бициллин-5» в дозе 10000 ЕД/кг массы тела; витаминизация всех животных препаратом «Тривитамин А, Д, Е», обработку животных инсектицидами и репелентами, а также дезинфекцию помещений, иммунизация вакциной против оспы овец всех животных после снятия карантина.A known method for the prevention and treatment of nodular dermatitis (Krivonos R.A., Jailidi G.A., Mishchenko A.V., Mishchenko V.A., Chernykh O.Yu., Shevkoplyas V.N., Dresvyannikova S.G., Kolomiets D.V., Tikhonov S.V. The problem of prevention and elimination of foci of lumpy dermatitis in cattle // Veterinary medicine today. - No. 1 (20). - 2017. - P. 38-44.), Including the treatment of the skin of animals , on which nodules were identified, with ASD (fraction 3); intramuscular injections of Bitsillin-5 to all animals at a dose of 10,000 U / kg of body weight; fortification of all animals with the preparation "Trivitamin A, D, E", treatment of animals with insecticides and repellents, as well as disinfection of premises, immunization with sheep pox vaccine of all animals after quarantine has been lifted.

Недостатком описанного способа является использование антибиотика «Бициллин-5», который может быть обнаружен в готовой продукции - мясе и молоке.The disadvantage of the described method is the use of the antibiotic "Bitsillin-5", which can be found in finished products - meat and milk.

Известен способ профилактики нодулярного дерматита при помощи использования вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак» (Инструкция по ветеринарному применению вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Номер регистрационного удостоверения 12-1-10.17-3883 № ПВР-1-1.9/00012).. Вакцина вызывает формирование иммунного ответа против заразного узелкового дерматита крупного рогатого скота не менее чем у 70% привитого поголовья, через 21 сутки после однократного применения в одной прививной дозе (не менее 4 lg ТЦД₅₀/см³ вируса оспы овец штамм «ВНИИЗЖ») продолжительностью не менее 12 месяцев. При плановой вакцинации для профилактики прививают животных с 3-месячного возраста, телят от не вакцинированных коров возможно прививать с 7 дневного возраста. Ревакцинацию животных проводят каждые 12 месяцев. В неблагополучном пункте и в угрожаемой зоне вакцинируют животных всех возрастных групп не зависимо от сроков предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Молодняк ревакцинируют через 6 месяцев. Взрослых животных ревакцинируют через 12 месяцев. Вакцину вводят подкожно, с соблюдением правил антисептики, в дозе 1 см³.A known method for the prevention of lumpy disease by using a virus vaccine against sheep pox and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD vac" certificates 12-1-10.17-3883 No. PVR-1-1.9 / 00012) .. The vaccine induces the formation of an immune response against infectious nodular dermatitis of cattle in at least 70% of the vaccinated livestock, 21 days after a single use in one inoculated dose (not less than 4 lg TCD ₅₀ / cm ³ of sheep pox virus strain "ARRIAH") for at least 12 months. With routine vaccination, for prevention, animals are vaccinated from 3 months of age, calves from unvaccinated cows can be vaccinated from 7 days of age. Revaccination of animals is carried out every 12 months. In a disadvantaged area and in a threatened area, animals of all age groups are vaccinated, regardless of the timing of the previous vaccination. In this case, young animals under the age of 6 months are vaccinated twice with an interval of 14 days. Young animals are revaccinated after 6 months. Adult animals are revaccinated after 12 months. The vaccine is administered subcutaneously, in compliance with the rules of antiseptics, in a dose of 1 cm ³ .

Недостатком указанного способа является то, что вакцина не обладает лечебными свойствами, что делает невозможным применение ее в очаге инфекции во время массового заболевания животных нодулярным дерматитом.The disadvantage of this method is that the vaccine does not have medicinal properties, which makes it impossible to use it in the focus of infection during a massive disease of animals with lumpy dermatitis.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является «Способ профилактики и лечения нодулярного дерматита у крупного рогатого скота» (Патент на изобретение РФ №2705571 от 08.11.2019, МПК A61K 35/14, А61Р 37/02), включающий применение вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой "ШипПокс-ЛСД вак", при этом дополнительно одновременно с вакциной подкожно или внутримышечно применяют трансфер-фактор в дозе 1,4-1,6 мл на голову для животных до 12-месячного возраста и в дозе 5,9-6,1 мл для животных старше 12 месяцев.The closest in technical essence to the claimed method is "Method for the prevention and treatment of lumpy dermatitis in cattle" (Patent for invention of the Russian Federation No. 2705571 dated 08.11.2019, IPC A61K 35/14, A61P 37/02), including the use of a virus vaccine against smallpox sheep and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD vac", while additionally simultaneously with the vaccine, transfer factor is used subcutaneously or intramuscularly at a dose of 1.4-1.6 ml per head for animals up to 12 months of age and at a dose 5.9-6.1 ml for animals over 12 months old.

Достоинством данного способа профилактики нодулярного дерматита (заразного узелкового дерматита) является отсутствие реактогенности у вакцины и осложнений после вакцинации в виде сыпей, снижение продуктивности и рецидивов заболевания, а также возможность стимуляции клеточного звена иммунитета за счет использования траснфер-фактора при применении вакцины.The advantage of this method for the prevention of nodular dermatitis (contagious nodular dermatitis) is the absence of reactogenicity in the vaccine and complications after vaccination in the form of rashes, a decrease in productivity and relapses of the disease, as well as the possibility of stimulating the cellular link of immunity due to the use of a transfer factor when using the vaccine.

Недостатком прототипа является отсутствие гепатопротекторного эффекта при профилактике нодулярного дерматита у крупного рогатого скота, поскольку печень участвует в формировании полноценного иммунитета при использовании вакцины, проводит обеззараживание и утилизацию продуктов обмена веществ, образующихся при выработке иммунитета у животных.The disadvantage of the prototype is the lack of hepatoprotective effect in the prevention of lumpy dermatitis in cattle, since the liver participates in the formation of full-fledged immunity when using the vaccine, disinfects and utilizes metabolic products formed during the development of immunity in animals.

Целью изобретения является создание гепатопротекторного эффекта при профилактике нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.The aim of the invention is to create a hepatoprotective effect in the prevention of lumpy dermatitis in cattle.

Поставленная цель достигается тем, что для профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота животным вводят вирусвакцину против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак», в дозе, согласно инструкции по применению, с одновременным введением с вирусвакциной подкожно или внутримышечно трансфер-фактора в дозе 1,4-1,6 мл на голову для животных до 12 месячного возраста, для животных старше 12 месяцев объем трансфер-фактора составляет 5,9-6,1 мл на голову, и препарата Айсидивит внутримышечно в дозе 5-6 мл для животных до 12 месяцев и 10-15 мл для животных старше 12 месяцев.This goal is achieved by the fact that for the prevention of lumpy skin disease in cattle, animals are injected with a virus vaccine against sheep pox and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD vacc", in a dose, according to the instructions for use, with simultaneous administration with a virus vaccine subcutaneously or intramuscularly transfer factor at a dose of 1.4-1.6 ml per head for animals under 12 months of age, for animals over 12 months of age, the volume of transfer factor is 5.9-6.1 ml per head, and Isidivit intramuscularly at a dose of 5 -6 ml for animals up to 12 months old and 10-15 ml for animals over 12 months old.

Айсидивит в 1 мл в качестве действующих веществ содержит АСД-2Ф субстанцию - 0,04 г, янтарную кислоту - 0,05 г, витамин А (ретинола ацетат) -15000 ЕД, витамин Е (альфа-токоферола ацетат) - 10 мг, а в качестве вспомогательного вещества воду для инъекций - до 1 мл.Isidivit in 1 ml contains ASD-2F substance as active ingredients - 0.04 g, succinic acid - 0.05 g, vitamin A (retinol acetate) - 15,000 U, vitamin E (alpha-tocopherol acetate) - 10 mg, and as an auxiliary substance, water for injection - up to 1 ml.

Ретинол (витамин А) регулирует функцию и регенерацию эпителиальных тканей, тем самым повышая защитную функцию организма животных.Retinol (vitamin A) regulates the function and regeneration of epithelial tissues, thereby increasing the protective function of the animal body.

Токоферол (витамин Е), являясь сильным антиоксидантом, регулирует окислительно-восстановительные процессы, усиливает действие витамина А. Витамин Е в составе препарата выполняет основную гепатопротекторную функцию, повышая прочность клеточной мембраны, защищая ее от воздействия активных форм кислорода.Tocopherol (vitamin E), being a strong antioxidant, regulates redox processes, enhances the effect of vitamin A. Vitamin E in the composition of the drug performs the main hepatoprotective function, increasing the strength of the cell membrane, protecting it from the effects of reactive oxygen species.

Янтарная кислота обладает свойством нормализовывать окислительно-восстановительные процессы в организме. В результате применения янтарной кислоты восстанавливается кислотно-щелочной баланс в организме.Succinic acid has the ability to normalize redox processes in the body. As a result of the use of succinic acid, the acid-base balance in the body is restored.

АСД 2-Ф субстанция обладает широким спектром биологической активности, повышает активность тканевых и пищеварительных ферментов, обладает антисептическим действием, стимулирует активность ретикуло-эндотелиальной и эндокринной систем, нормализует трофику, ускоряет регенерацию поврежденных тканей, участвует в процессах фосфорилирования и синтеза белков.ASD 2-F substance has a wide spectrum of biological activity, increases the activity of tissue and digestive enzymes, has an antiseptic effect, stimulates the activity of the reticuloendothelial and endocrine systems, normalizes trophism, accelerates the regeneration of damaged tissues, participates in the processes of phosphorylation and protein synthesis.

Биологически активные вещества, входящие в состав препарата, оказывают активизирующее действие на центральную, вегетативную нервную систему и обменные процессы, обладают антиоксидантными и мембранопротекторными свойствами. Способствуя улучшению всех форм иммунной реактивности, обеспечивают повышение сопротивляемости организма животного к неблагоприятным факторам внешней среды и заболеваниям различной этиологии, стимулируют моторную деятельность желудочно-кишечного тракта, секрецию пищеварительных желез, повышают активность тканевых ферментов, способствуют ускорению роста и развития молодняка и повышению продуктивности сельскохозяйственных животных.The biologically active substances that make up the drug have an activating effect on the central, autonomic nervous system and metabolic processes, have antioxidant and membrane-protective properties. By contributing to the improvement of all forms of immune reactivity, they provide an increase in the animal's body resistance to adverse environmental factors and diseases of various etiologies, stimulate the motor activity of the gastrointestinal tract, the secretion of the digestive glands, increase the activity of tissue enzymes, promote the acceleration of the growth and development of young animals and increase the productivity of farm animals ...

Трансфер-фактор получают по методике, предложенной Г. Фримелем (Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля, Пер. с нем. А.П. Тарасова. - М.: Медицина, 1987. - С. 451-457).The transfer factor is obtained according to the method proposed by G. Frimel (Immunological methods / Under the editorship of G. Frimel, Translated from German A. P. Tarasov. - M .: Medicine, 1987. - S. 451-457).

Кровь отбирают в стерильных условиях и разделяют на порции по 20 мл (на каждые 100 мл крови добавляют 500 ME гепарина). Кровь разливают в стерильные пробирки (25×155 мм), добавляют 2 мл раствора декстрана 250 (60 г/л) в 0,15 М NaCl или раствор инфуколла. Пробирки закрывают, несколько раз встряхивают и инкубируют при 37°С. Эритроциты осаждаются в течение 30-45 мин. Желтоватый или слегка красноватый слой надосадочной жидкости переносят при помощи пастеровской пипетки в конические центрифужные пробирки. Закрытые пробирки центрифугируют в течение 10 мин при 1500g. Плазму осторожно сливают. Осевшие лейкоциты образуют слой над осадкой эритроцитов.Blood is collected under sterile conditions and divided into 20 ml portions (500 IU of heparin is added for every 100 ml of blood). Blood is poured into sterile test tubes (25 × 155 mm), 2 ml of a solution of dextran 250 (60 g / l) in 0.15 M NaCl or infucoll solution is added. The tubes are closed, shaken several times and incubated at 37 ° C. Erythrocytes are deposited within 30-45 minutes. The yellowish or slightly reddish supernatant layer is transferred with a Pasteur pipette into conical centrifuge tubes. The closed tubes are centrifuged for 10 min at 1500g. The plasma is carefully decanted. Settled leukocytes form a layer above the erythrocyte sediment.

Осадок состоит из 70% из лимфоцитов. Самая нижняя часть конуса пробирки заполнена эритроцитами. На слой лейкоцитов наслаивают 0,1 мл стерильного апирогенного 0,15 М раствора NaCl. Кончик пастеровской пипетки осторожно проводят сквозь слой раствора соли и осторожно отсасывают лейкоциты в виде суспензии в изотоническом растворе NaCl. Можно объединять полученные суспензии лейкоцитов. Для получения диализата необходимо полное разрушение лейкоцитов. Оно достигается 10-кратным замораживанием и оттаиванием суспензии. Пробирки с суспензией клеток замораживают смесью сухого льда с этанолом, а размораживают на водяной бане при 37°С. Процесс повторяют до тех пор, пока жидкость не станет вязкой. При полном разрушении лейкоцитов высвобождается ДНК, делающая раствор чрезвычайно вязким и затрудняющая его дальнейшую обработку. Для деполимеризации ДНК в раствор вносят несколько кристаллов ДНКазы и небольшое количество ионов Mg²⁺ (несколько кристаллов MgSO₄). Гидролиз протекает в течение 30 мин при 37°С.The sediment consists of 70% lymphocytes. The lowermost part of the cone of the tube is filled with red blood cells. On a layer of leukocytes layered 0.1 ml of sterile pyrogen-free 0.15 M NaCl solution. The tip of a Pasteur pipette is carefully passed through a layer of salt solution and leukocytes in the form of a suspension in isotonic NaCl solution are carefully aspirated. You can combine the resulting suspensions of leukocytes. To obtain dialysate, complete destruction of leukocytes is necessary. It is achieved by freezing and thawing the suspension 10 times. Tubes with cell suspension are frozen with a mixture of dry ice and ethanol, and thawed in a water bath at 37 ° C. The process is repeated until the liquid becomes viscous. With the complete destruction of leukocytes, DNA is released, making the solution extremely viscous and complicating its further processing. To depolymerize DNA, several DNase crystals and a small amount of Mg ^{2+ ions} (several MgSO ₄ crystals) are introduced into the solution. The hydrolysis proceeds for 30 min at 37 ° C.

Если ДНКазу, которая отличается чрезвычайной стабильностью, добавлять прямо к суспензии лейкоцитов, то деполимеризация ДНК происходит в процессе замораживания и оттаивания и не требует дополнительной инкубации. Для удаления высокомолекулярных компонентов проводят диализ. Обработанный ДНКазой экстракт лейкоцитов осторожно переносят в завязанный с одного конца диализный мешок, стараясь не испачкать экстрактом наружный слой мешка, после чего его завязывают, ополаскивают стерильным апирогенным изотоническим раствором NaCl и переносят мешок в стерильный сосуд с дистиллированной водой. На 0,1 мл экстракта используют 5 мл дистиллированной воды. Диализ проходит в течение 24 ч при 4°С. Полученный диализат растворяют в стерильной физиологическом растворе, консервированном фенолом до 0,5%-ной концентрации.If DNase, which is extremely stable, is added directly to the leukocyte suspension, then DNA depolymerization occurs during freezing and thawing and does not require additional incubation. Dialysis is performed to remove high molecular weight components. The leukocyte extract treated with DNase is carefully transferred into a dialysis bag tied at one end, trying not to stain the outer layer of the bag with the extract, after which it is tied, rinsed with sterile pyrogen-free isotonic NaCl solution and transferred to a sterile vessel with distilled water. For 0.1 ml of the extract, 5 ml of distilled water are used. Dialysis takes place within 24 hours at 4 ° C. The resulting dialysate is dissolved in sterile physiological saline preserved with phenol to a 0.5% concentration.

Пример выполнения способа профилактики нодулярного дерматита у крупного рогатого скота:An example of the implementation of the method for the prevention of lumpy dermatitis in cattle:

В неблагополучном пункте телят разделили на 2 группы по 40 голов в каждой - опытную и контрольную. Всех животных привили вирусвакциной против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак». Вакцину применяли согласно наставлению. Телятам опытной группы дополнительно провели инъекцию трансфер-фактора в дозе 1,5 мл на голову и препарата Айсидивит в дозе 5 мл на голову. При наблюдении за животными в опытной группе заболевания телят нодулярным дерматитом не наблюдалось. В контрольной группе заболело 3 теленка.In a dysfunctional area, the calves were divided into 2 groups of 40 heads in each - experimental and control. All animals were vaccinated with a virus vaccine against sheep pox and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD Vac". The vaccine was administered as directed. Calves of the experimental group were additionally injected with transfer factor at a dose of 1.5 ml per head and Isidivit at a dose of 5 ml per head. When observing animals in the experimental group, no disease of calves with lumpy dermatitis was observed. In the control group, 3 calves fell ill.

Для изучения гепатопротекторного эффекта предлагаемого способа профилактики нодулярного дерматита крупного рогатого скота у животных контрольной и опытной групп до начала опыта и по истечении 5 недель был произведен забор крови для изучения количества холестерина и биллирубина. Результаты отражены в таблице.To study the hepatoprotective effect of the proposed method for the prevention of lumpy dermatitis in cattle in animals of the control and experimental groups, before the start of the experiment and after 5 weeks, blood was taken to study the amount of cholesterol and bilirubin. The results are shown in the table.

Динамика изменения содержания холестерина и биллирубина в сыворотке крови телятDynamics of changes in the content of cholesterol and bilirubin in the blood serum of calves

Согласно данным таблицы вакцинация животных против нодулярного дерматита оказывает неблагоприятное воздействие на печень животных. Так, у телят контрольной группы произошло увеличение содержания биллирубина на 39,3%, холестерина на 20,5%. У телят опытной группы также произошло увеличение содержания биллирубина в сыворотке крови, но лишь на 8,4%, а содержание холестерина, напротив снизилось на 5,5%.According to the table, vaccination of animals against lumpy skin disease has an adverse effect on the liver of animals. Thus, in the calves of the control group there was an increase in the content of bilirubin by 39.3%, cholesterol by 20.5%. The calves of the experimental group also had an increase in the content of bilirubin in the blood serum, but only by 8.4%, and the content of cholesterol, on the contrary, decreased by 5.5%.

Таким образом, применение вирусвакцины против оспы овец и заразного узелкового дерматита КРС культуральной сухой «ШипПокс-ЛСД вак», трансфер-фактора и препарата Айсидивит позволяет профилактировать нодулярный дерматит у крупного рогатого скота с выраженным гепатопротекторным эффектом.Thus, the use of a virus vaccine against sheep pox and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD vac", a transfer factor and the drug Isidivit makes it possible to prevent lumpy dermatitis in cattle with a pronounced hepatoprotective effect.

Экономическая эффективность заявляемого способа на 1 рубль затрат составляет 170 рублей.The economic efficiency of the proposed method per 1 ruble of costs is 170 rubles.

Claims

A method for the prevention of lumpy dermatitis in cattle, including the use of a virus vaccine against sheep pox and infectious nodular dermatitis of cattle cultured dry "ShipPox-LSD vacc", simultaneous administration with a virus vaccine subcutaneously or intramuscularly transfer factor at a dose of 1.4-1.6 ml per head for animals up to 12 months of age, for animals older than 12 months the volume of the transfer factor is 5.9-6.1 ml per head, characterized in that at the same time the animals are injected intramuscularly with Isidivit at a dose of 5-6 ml for animals up to 12 months and 10-15 ml for animals over 12 months old.