RU2680220C1 - Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте - Google Patents
Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2680220C1 RU2680220C1 RU2017142206A RU2017142206A RU2680220C1 RU 2680220 C1 RU2680220 C1 RU 2680220C1 RU 2017142206 A RU2017142206 A RU 2017142206A RU 2017142206 A RU2017142206 A RU 2017142206A RU 2680220 C1 RU2680220 C1 RU 2680220C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hours
- ozone
- pdt
- ops
- tumor
- Prior art date
Links
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 title claims abstract description 76
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 75
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 87
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 25
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 17
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 claims abstract description 6
- RKFMOTBTFHXWCM-UHFFFAOYSA-M [AlH2]O Chemical compound [AlH2]O RKFMOTBTFHXWCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 5
- IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine Chemical class N1C(N=C2C3=CC=CC=C3C(N=C3C4=CC=CC=C4C(=N4)N3)=N2)=C(C=CC=C2)C2=C1N=C1C2=CC=CC=C2C4=N1 IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 23
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 claims description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 6
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241001415849 Strigiformes Species 0.000 claims 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 abstract description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 14
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 14
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 14
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 4
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 3
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000003562 morphometric effect Effects 0.000 description 2
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008832 photodamage Effects 0.000 description 1
- 208000007578 phototoxic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000018 phototoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N5/00—Radiation therapy
- A61N5/06—Radiation therapy using light
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/02—Halogenated hydrocarbons
- A61K31/025—Halogenated hydrocarbons carbocyclic
- A61K31/03—Halogenated hydrocarbons carbocyclic aromatic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M5/00—Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
- A61M5/178—Syringes
- A61M5/31—Details
- A61M5/32—Needles; Details of needles pertaining to their connection with syringe or hub; Accessories for bringing the needle into, or holding the needle on, the body; Devices for protection of needles
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине и онкологии и может быть использовано для фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте. Для этого осуществляют внутрибрюшинное введение озонированного физиологического раствора и проводят два сеанса фотодинамической терапии. Перед первым сеансом ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения озонированного физиологического раствора (ОФР) с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л из расчета 0,5 мл ОФР на животное массой 200±25 г. Интервал между процедурами введения ОФР составляет 48 часов. Через 20 часов после последней процедуры внутрибрюшного введения ОФР осуществляют введение в три точки злокачественного новообразования 0,3% раствора фотосенсибилизатора (ФС), в частности на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия, из расчета 0,3 мл/смновообразования. Через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек облучают в течение 10 минут светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/сми плотностью энергии 60 Дж/см. Затем через 24 часа после первого сеанса ФДТ проводят 2 процедуры внутрибрюшинного введения ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л из расчета 0,5 мл на животное массой 200±25 г, с интервалом между введением ОФР - 24 часа. Перед вторым сеансом ФДТ после 2-й процедуры введения ОФР через 48 часов в опухоль вводят 0,3% раствор ФС в три точки злокачественного новообразования из расчета 0,3 мл/смновообразования. Через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек в течение 10 минут облучают светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/сми плотностью энергии 60 Дж/см. Через 24 часа после второго сеанса ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л, с интервалом между процедурами введения ОФР 24 часа. Способ обеспечивает повышение эффективности ФДТ за счёт оптимизации выбора концентрации озона и режима ведения ОФР после сеансов ФДТ. 1 табл., 3 пр.
Description
Предлагаемый способ относится к экспериментальной медицине в области онкологии, а именно к фотодинамической терапии (ФДТ) местнораспространенных онкологических заболеваний, и на сегодняшнем этапе изучения проблемы может быть практически использован для лечения животных.
Фотодинамическая терапия, заключающаяся в местном или системном введении фотосенсибилизатора (ФС) с последующим облучением пораженного участка неионизирующим излучением определенной длины волны, вызывает окислительное фотоповреждение и последующую гибель клеток-мишеней (1)
ФДТ активно применяется при лечении новообразований, особенно наружной локализации, и является перспективным направлением в практической онкологии.
Преимущества ФДТ заключаются в возможности избирательного поражения опухолевой ткани, отсутствии серьезных осложнений, которые могут возникнуть при хирургическом вмешательстве и применении других методов лечения, традиционно используемых в онкологии, хорошем косметическом эффекте, а также возможности сочетания флуоресцентной диагностики и лечебного воздействия. Существование таких побочных эффектов как кожная фототоксичность и болевой эффект, который возникает при лазерном воздействии, ограничивают повышение терапевтической эффективности за счет увеличения доз ФС и/или интенсивности лазерного облучения. В связи с этим актуальным является поиск других подходов в повышении лечебного действия этого метода. Одним из таких подходов является сочетание с терапией, направленной на усиление одного из предполагаемых механизмов действия ФДТ.
При этом считают, что основной механизм, определяющий цитотоксическое действие, связан с образованием активных форм кислорода (АФК) (2) Озонотерапия, как дополнительный источник АФК, является наиболее физиологическим, эффективным, доступным и подходящим для данной цели методом, обладающим и собственным противоопухолевым действием (3). Так известен способ предоперационной фотодинамической терапии, включающий введение фотосенсибилизатора и облучение низкоэнергетическим лазером бронхиального дерева, при этом раствор ФС непосредственно перед облучением озонируют (4). Однако в известном способе не учитывается возможное окисление фотосенсибилизатора и связанное с этим изменение его свойств в виду того, что озон - один из самых сильных окислителей (5) Известен способ озоно-фотодинамической терапии злокачественных новообразований, включающий введение фотосенсибилизатора (ФС), облучение лазером опухоли, при этом предварительно осуществляют введение озонированного раствора, при этом доза озона для системного применения составляет от 0,8 до 25 мкг/кг, а доза озона для местного использования от 8 до 50 мкг/кг (6).
Однако в данном способе не учитывается возможность использования озона как интоксикационного средства в отношении веществ, которые образуются в результате некротических процессов опухоли после фотодинамической терапии.
Наиболее близким к предлагаемому способу по совокупности существенных признаков и достигаемому техническому результату является способ лечения опухолей на основе фотодинамической терапии с использованием озонированного физиологического раствора, который выбран авторами в качестве прототипа (7).
Способ включает проведение двух сеансов фотодинамической терапии (ФДТ) с интервалом в 3 суток, при ФДТ интратуморально вводят фотосенсибилизатор - 03% раствор препарата на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия («Фотосенс») и в течение 6-12 часов после введения осуществляют десятиминутное воздействие светодиодным лазером с длиной волны λ=660±10 нм, плотностью мощности излучения Р=100 мВт/см2, при этом перед проведением первого сеанса фотодинамического воздействия осуществляют 3 процедуры внутрибрюшинной инъекции 0,5 мл озонированного физиологического раствора с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л через день, перед вторым сеансом фотодинамического воздействия - 2 процедуры введения ОФР с такой же концентрацией через день.
Данный способ фотодинамической терапии обладает противоопухолевым действием.
Однако данный способ недостаточно эффективен, за счет слабого детоксикационного действия в отношении эндогенных токсинов, образующихся после разрушения неоплазии в результате терапии, что снижает и замедляет репаративные процессы в организме. Задачей предлагаемого изобретения является разработка эффективного способа фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте.
Поставленная задача решается предлагаемым способом фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте, включающем два сеанса фотодинамической терапии, для этого предварительно перед первым сеансом ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения озонированного физиологического раствора (ОФР) с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л из расчета 0,5 мл ОФР на животное массой 200±25 г, с интервалом между введением ОФР - 48 часов, через 20 часов после последней процедуры внутрибрюшного введения ОФР осуществляют введение в несколько точек злокачественного новообразования 0,3% раствора фотосенсибилизатора (ФС), в частности препарата на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия, из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек облучают в течение 10 минут светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, затем через 24 часа после первого сеанса ФДТ проводят 2 процедуры внутрибрюшинного введения по 0,5 мл ОФР перед вторым сеансом ФДТ, после 2-ого введения ОФР в опухоль вводят 0,3% раствор ФС в несколько точек злокачественного новообразования из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек в течение 10 минут облучают светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, СОГЛАСНО ИЗОБРЕТЕНИЯ, после первого сеанса ФДТ проведение 2-х процедур внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР осуществляют с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л и с интервалом между введением ОФР 24 часа, а проведение второго сеанса ФДТ осуществляют через 48 часов после проведения 2-ой процедуры внутрибрюшинного введения ОФР, и дополнительно через 24 часа после второго сеанса ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л с интервалом между процедурами ОФР 24 часа.
Предпочтительно, что введение раствора ФС осуществляют в три точки злокачественного новообразования.
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение эффективности фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте.
Данный технический результат достигается тем, что после первого сеанса ФДТ проведение 2-х процедур внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР осуществляют с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л и с интервалом между введением ОФР 24 часа, а проведение второго сеанса ФДТ осуществляют через 48 часов после проведения 2-ой процедуры внутрибрюшинного введения ОФР, и дополнительно через 24 часа после второго сеанса ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л с интервалом между процедурами ОФР 24 часа.
Предпочтительно, что введение раствора ФС осуществляют в три точки злокачественного новообразования.
Такой технический результат обусловлен оптимизацией выбора концентрации озона и режима введения ОФР после сеансов ФДТ. Использование озона после первого сеанса ФДТ в более высокой концентрации (500 мкг/л), по сравнению со способом-прототипом, обосновано более выраженным деструктивным эффектом на опухолевые клетки с отсутствием риска создания канцерофильных условий для нормальных тканей (8).
Уменьшение интервала после первого сеанса ФДТ между 2-мя процедурами введениями ОФР до 24 часов обусловлено временем жизни биологически активных соединений, образующихся в результате взаимодействия озона с внутренней средой организма. Необходимость использования дополнительного после второго сеанса ФДТ проведения 3 процедур внутрибрюшинного введения ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л обусловлено тем, что воздействие ОФР низких концентраций останавливает дезорганизацию метаболизма, вызванную развитием, ростом и разрушением в результате терапии злокачественного новообразования, за счет снижения уровня эндогенной интоксикации.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом
Животному со злокачественным новообразованием, проводят два сеанса фотодинамической терапии (ФДТ), для этого предварительно перед первым сеансом ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного
введения озонированного физиологического раствора (ОФР) с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л из расчета 0,5 мл ОФР на животное массой 200±25 г, с интервалом между введением ОФР - 48 часов, через 20 часов после последней процедуры внутрибрюшного введения ОФР осуществляют введение в несколько точек злокачественного новообразования, предпочтительно в 3 точки, 0,3% раствора фотосенсибилизатора (ФС), в частности фотосенсибилизатор на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия, из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек облучают в течение 10 минут светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, затем через 24 часа после первого сеанса ФДТ проводят 2 процедуры внутрибрюшинного введения по 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л перед вторым сеансом ФДТ, и с интервалом между введением ОФР 24 часа, проведение второго сеанса ФДТ осуществляют через 48 часов после проведения 2-ой процедуры внутрибрюшинного введения ОФР, для этого в опухоль вводят 0,3% раствор ФС предпочтительно в 3 точки злокачественного новообразования из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек введения в течение 10 минут облучают светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, через 24 часа после второго сеанса ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л с интервалом между процедурами ОФР 24 часа.
Предлагаемым способом была осуществлена фотодинамическая терапия злокачественного новообразования группе из 6-ти лабораторных животных (белым нелинейным крысам-самцам) в возрасте 2 месяцев с начальной массой 200±25 г.
Кроме того, по прототипу была осуществлена фотодинамическая терапия злокачественного новообразования группе из 5-ти лабораторных животных (белым нелинейным крысам-самцам) в возрасте 2 месяцев с начальной массой 200±25 г.
Также в качестве контроля была использована группа из 6-ти лабораторных животных (белые нелинейные крысы-самцы) в возрасте 2 месяцев с начальной массой 200±25 г, которым фотодинамическая терапия злокачественного новообразования не проводилась.
Для постановки эксперимента была использована модель неоплазии, создаваемая путем перевивки опухолевого штамма - карцинома почки (РА). Штамм перевиваемых опухолей был получен из банка опухолевых штаммов РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Опухоли перевивали лабораторным животным по стандартным методикам (9) Штаммы пассировались на крысах в возрасте 2,5 месяца. Опухоль РА брали на 9 сутки развития.
Трансплантация опухолевых клеток крысам проводилась подкожно в область левого бедра по 0,5 мл опухолевой взвеси в растворе Хенкса в разведении 1:3.
Эффект после проведения ФДТ злокачественных новообразований по прототипу оценивали на 20-е сутки после трансплантации опухолевых клеток, а по предлагаемому способу на 23-е сутки, по коэффициенту абсолютного прироста опухоли (К) и проценту торможения роста опухоли (ТРО %).
Коэффициент абсолютного прироста опухоли для каждого животного рассчитывали по формуле:
где: V0 - объем опухоли до воздействия;
Vt - объем опухоли на срок наблюдения.
При К>0 - оценивали как продолженный рост опухоли, при -1<К<0 - торможение роста опухоли, К=-1 - полная регрессия опухоли. Заключение о полной регрессии неоплазии делали при отсутствии видимого и пальпируемого очага.
Для расчета объема опухоли использовали формулу:
где: d1 d2 - два взаимно перпендикулярных поперечных сечения опухоли (10).
Торможение роста опухоли (ТРО) вычисляли по формуле для каждой экспериментальной группы:
где: Vk - средний объем опухоли в контрольной группе на определенный срок измерения;
Vо - средний объем опухоли в опытной группе на определенный срок измерения.
В качестве положительного эффекта учитывается торможение роста опухоли более 50% (11)
Результаты проведенной фотодинамической терапии злокачественного новообразования группам лабораторных животных по прототипу и по предлагаемому способу приведены в таблице.
**р=0,004 - U-критерий Манна-Уитни по сравнению с группой «Контроль»
Поскольку полученные данные коэффициента прироста новообразования и его объем не подчиняются нормальному распределению, для их описания использовали медиану (Me) и интерпроцентильный размах (Me [25%; 75%]), а обработку осуществляли с использованием методов непараметрической статистики. При статистической обработке результатов эксперимента использовали U-критерий Манна-Уитни. Данные обрабатывали с помощью программы STATISTICA 8.
Анализ полученных результатов показал, что фотодинамическая терапия злокачественного новообразования по прототипу лишь затормозила рост карциномы почки РА. Медиана коэффициента прироста опухоли в этой опытной группе составила 0,42, что указывает на замедление темпов роста злокачественного новообразования).
При этом фотодинамическая терапия предлагаемым способом привела почти к полной деградации опухолевых узлов во всех случаях. Медиана коэффициента прироста опухоли в этой опытной группе составила -0,46. Что говорит о подавлении развития злокачественного новообразования. При сравнении эффективности фотодинамической терапии по проценту ТРО получили, что предлагаемый способ фотодинамической терапии эффективнее на 10% по сравнению с прототипом.
Примеры конкретного использования предлагаемого способа Пример 1.
Крысе №61, самцу весом 180 г в возрасте 2 месяцев ввели подкожно в область левого бедра инокулюм опухолевого штамма РА в растворе Хенкса (1:3) объемом 0,5 мл.
На десятые сутки развития злокачественного новообразования при размере опухоли d1=2 d2=1 см, животному была проведена фото динамическая терапия предлагаемым способом.
Животному были проведены два сеанса фотодинамической терапии, для этого предварительно перед первым сеансом ФДТ провели 3 процедуры внутрибрюшинного введения озонированного физиологического раствора (ОФР) с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л 0,5 мл ОФР на массу животного 180 г, с интервалом между введением ОФР - 48 часов, через 20 часов после последней процедуры внутрибрюшного введения ОФР осуществили введение в 3 точки злокачественного новообразования 0,53 мл 0,3% раствора фотосенсибилизатора «Фотосенс» на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек облучили в течение 10 минут светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, затем через 24 часа после первого сеанса ФДТ провели 2 процедуры внутрибрюшинного введения по 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л перед вторым сеансом ФДТ, и с интервалом между процедурами ОФР 24 часа, проведение второго сеанса ФДТ осуществили через 48 часов после проведения 2-ой процедуры внутрибрюшинного введения ОФР, для этого в опухоль ввели 0,11 мл 0,3% раствор ФС в три точки злокачественного новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек введения в течение 10 минут облучали светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см, через 24 часа после второго сеанса ФДТ были проведены 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л с интервалом между процедурами ОФР 24 часа.
На 23 сутки после перевивки опухолевого штамма РА наркотизированное животное декапитировали. Масса животного на тот момент составила 185 г, а опухолевый очаг не обнаруживался визуально и при пальпировании. Для крысы №61 величина К прироста на 23-е сутки роста РА составила - 1, что говорит о полной деградации опухолевого узла.
Пример 2.
Крысе №62, самцу весом 207 г, в возрасте 2 месяцев ввели подкожно в область левого бедра инокулюм опухолевого штамма РА в растворе Хенкса (1:3) объемом 0,5 мл.
На десятые сутки развития новообразования при размере его d1=d2=2 см, животному была проведена фото динамическая терапия, как в примере 1, при этом объем вводимого в опухоль раствора 0,3% ФС, составил 1,25 мл при первом сеансе ФДТ и 0,92 мл при втором (из расчета 0,3 мл/см3 опухоли).
На 23 сутки после перевивки опухолевого штамма РА наркотизированное животное декапитировали. Масса животного на тот момент составила 210 г, а морфометрические характеристики опухоли: d1=1,65 см, d2=1,60 см.
Для крысы №62 величина К прироста на 23-е сутки роста РА составила - 0,47, что говорит о частичной деградации опухолевого узла.
Пример 3.
Крысе №63, самцу весом 198 г в возрасте 2 месяцев ввели подкожно в область левого бедра инокулюм опухолевого штамма РА в растворе Хенкса (1:3) объемом 0,5 мл.
На десятые сутки развития новообразования при размере опухоли d1=d2=1,5 см животному была проведена фото динамическая терапия как в примере 1, при этом объем вводимого в опухоль раствора 0,3% ФС при втором сеансе ФДТ, составил 0,27 мл (из расчета 0,3 мл/см3 опухоли). На 23 сутки после перевивки опухолевого штамма РА наркотизированное животное декапитировали. Масса животного на тот момент составила 203 г, а морфометрические характеристики опухоли: d1=1,2 см, d2=1,2 см. Для крысы №63 К прироста на 23-е сутки роста РА составил - 0,72, что говорит о почти полной деградации опухолевого узла.
Как видно из полученных результатов, предлагаемый способ является эффективным при проведении фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Shirasu N., Nam S.O., Kuroki M. Tumor-targeted photodynamic therapy. Anticancer Res. 2013, Jul, 33(7), p. 2823.
2. Миронов А.Ф. Фотодинамическая терапия - новый эффективный метод диагностики и лечения злокачественных опухолей. Соросовский образовательный журнал. 1996, №8, с. 32.
3. Щербатюк Т.Г. Озонотерапия злокачественных новообразований: за и против. Нижегородский медицинский журнал. 2003, №1, с. 52.
4. Патент РФ №2160615, заявка №2000102465/14 от 03.02.2000 на «Способ предоперационной фотодинамической терапии», авт. Аблицов Ю.А. и др.
5. Лунин В.В., Попович М.П., Ткаченко С.Н. Физическая химия озона. М, МГУ. 1998, с. 480.
6. Заявка РФ №96112516 от 19.06.1996 на «Способ озоно-фотодинамической терапии злокачественных новообразований», авт. Логинов Л.Е. и др.
7. Прототип. Щербатюк Т.Г., Плеханова Е.С., Чернигина И.А., Терентюк Г.С., Бучарская А.Б. Новая экспериментальная схема лечения опухолей на основе фотодинамической терапии. Российский биотерапевтический журнал. 2016, №1, т. 15, с. 123.
8. Алехина С.П., Щербатюк Т.Г. Озонотерапия: клинические и экспириментальные аспекты. Н. Новгород. Изд-во «Литера». 2003, с. 240.
9. Практикум по патологической физиологии. Под редакцией проф. С.М. Павленко. Издание третье. М. Медицина. 1966, с. 220.
10. Ярославцева-Исаева Е.В., Каплан М.А., Романко Ю.С. и др. Разработка методики фотодинамической терапии экспериментальной опухоли (саркома M1) при локальном введении фотосенсибилизатора. Российский биотерапевтический журнал. 2003, т. 2, №4, с. 19.
11. Трещалина Е.М., Жукова О.С., Герасимова Г.К. и др. «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ». М. Медицина. Изд. 2, 2005.
Claims (1)
- Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте, включающий внутрибрюшинное введение озонированного физиологического раствора и проведение двух сеансов фотодинамической терапии (ФДТ), отличающийся тем, что предварительно перед первым сеансом ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения озонированного физиологического раствора (ОФР) с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 400 мкг/л из расчета 0,5 мл ОФР на животное массой 200±25 г, с интервалом между процедурами введения ОФР - 48 часов, через 20 часов после последней процедуры внутрибрюшного введения ОФР осуществляют введение в три точки злокачественного новообразования 0,3% раствора фотосенсибилизатора (ФС), в частности на основе сульфинированного фталоцианина гидроксиалюминия, из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек облучают в течение 10 минут светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, затем через 24 часа после первого сеанса ФДТ проводят 2 процедуры внутрибрюшинного введения ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 500 мкг/л из расчета 0,5 мл на животное массой 200±25 г, с интервалом между введением ОФР - 24 часа, перед вторым сеансом ФДТ после 2-й процедуры введения ОФР через 48 часов в опухоль вводят 0,3% раствор ФС в три точки злокачественного новообразования из расчета 0,3 мл/см3 новообразования, через 6-12 часов после введения ФС каждую из точек в течение 10 минут облучают светодиодным лазером с длиной волны 660±10 нм, плотностью мощности излучения 100 мВт/см2 и плотностью энергии 60 Дж/см2, через 24 часа после второго сеанса ФДТ проводят 3 процедуры внутрибрюшинного введения 0,5 мл ОФР с концентрацией озона в озоно-кислородной смеси 200 мкг/л, с интервалом между процедурами введения ОФР 24 часа.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142206A RU2680220C1 (ru) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142206A RU2680220C1 (ru) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2680220C1 true RU2680220C1 (ru) | 2019-02-18 |
Family
ID=65442581
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017142206A RU2680220C1 (ru) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2680220C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2137481C1 (ru) * | 1996-12-24 | 1999-09-20 | Нижегородская государственная медицинская академия | Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте |
| WO2005110388A1 (en) * | 2004-05-10 | 2005-11-24 | Hofmann Robert F | Use of targeted oxidative therapeutic formulation in treatment of cancer |
| UA69296U (ru) * | 2011-10-06 | 2012-04-25 | Омелян Іванович Лищишин | Способ удаления онкологических опухолей |
| RU2527345C1 (ru) * | 2013-04-05 | 2014-08-27 | ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ (ГБОУ ВПО "НижГМА" МИНЗДРАВА РОССИИ) | Cпособ индуцированных повреждений днк в индивидуальных неделимых ядросодержащих клетках |
-
2017
- 2017-12-04 RU RU2017142206A patent/RU2680220C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2137481C1 (ru) * | 1996-12-24 | 1999-09-20 | Нижегородская государственная медицинская академия | Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте |
| WO2005110388A1 (en) * | 2004-05-10 | 2005-11-24 | Hofmann Robert F | Use of targeted oxidative therapeutic formulation in treatment of cancer |
| UA69296U (ru) * | 2011-10-06 | 2012-04-25 | Омелян Іванович Лищишин | Способ удаления онкологических опухолей |
| RU2527345C1 (ru) * | 2013-04-05 | 2014-08-27 | ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ (ГБОУ ВПО "НижГМА" МИНЗДРАВА РОССИИ) | Cпособ индуцированных повреждений днк в индивидуальных неделимых ядросодержащих клетках |
Non-Patent Citations (5)
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Schuller et al. | Photodynamic therapy in head and neck cancer | |
| DE69327972T2 (de) | Aktivierung von photoempfindlichen mitteln | |
| Tardivo et al. | New photodynamic therapy protocol to treat AIDS-related Kaposi's sarcoma | |
| Fingar et al. | Drug and light dose dependence of photodynamic therapy: a study of tumor and normal tissue response | |
| Bown et al. | Photodynamic therapy with porphyrin and phthalocyanine sensitisation: quantitative studies in normal rat liver | |
| JP6639398B2 (ja) | 座瘡のパルス光力学的処置 | |
| JP2010163445A (ja) | 組織病変部の診断または治療のための溶液 | |
| RU2704202C1 (ru) | Способ фотодинамической терапии перевивной поверхностной солидной соединительнотканной саркомы м-1 крыс | |
| Oseroff | Photodynamic therapy | |
| Tsutsui et al. | Optimisation of illumination for photodynamic therapy with mTHPC on normal colon and a transplantable tumour in rats | |
| Xue et al. | Optimal light dose and drug dosage in the photodynamic treatment using PHOTOCYANINE | |
| Kim et al. | Hairless mouse epidermal antioxidants and lipid peroxidation assessed by He‐Ne laser | |
| US6495585B2 (en) | Method for treating hyperproliferative tissue in a mammal | |
| Schaffer et al. | Photofrin II as an efficient radiosensitizing agent in an experimental tumor | |
| RU2680220C1 (ru) | Способ фотодинамической терапии злокачественных новообразований в эксперименте | |
| Harvey et al. | Killing tumor cells: the effect of photodynamic therapy using mono-L-aspartyl chlorine and NS-398 | |
| Wilson et al. | Photodynamic therapy for cutaneous malignancies | |
| McCaw et al. | Treatment of canine hemangiopericytomas with photodynamic therapy | |
| KR20130011162A (ko) | Ｐｄｔ를 이용한, 포유동물의 종양 또는 피부질환 치료방법 | |
| Jocham et al. | Integral laser-photodynamic treatment of multifocal bladder carcinoma photosensitized by hematoporphyrin derivative | |
| Brauer et al. | Convergence of anatomy, technology, and therapeutics: a review of laser-assisted drug delivers | |
| Tomio et al. | Effect of hematoporphyrin and red light on AH-130 solid tumors in rats | |
| Matzi et al. | Photodynamic therapy enhanced by hyperbaric oxygenation in palliation of malignant pleural mesothelioma: clinical experience | |
| Hampton et al. | Photodynamic therapy: a new modality for the treatment of cancer | |
| Bedwell et al. | Enhanced tumour selectivity of photodynamic therapy in the rat colon using a radioprotective agent |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191205 |