RU2678802C2 - Гуманизированные антитела к фактору d и их применения - Google Patents
Гуманизированные антитела к фактору d и их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2678802C2 RU2678802C2 RU2012147286A RU2012147286A RU2678802C2 RU 2678802 C2 RU2678802 C2 RU 2678802C2 RU 2012147286 A RU2012147286 A RU 2012147286A RU 2012147286 A RU2012147286 A RU 2012147286A RU 2678802 C2 RU2678802 C2 RU 2678802C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- factor
- amino acid
- variable domain
- Prior art date
Links
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 89
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 54
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 230000004154 complement system Effects 0.000 claims abstract description 23
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 22
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 208000022873 Ocular disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 abstract description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 60
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 52
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 41
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 33
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 33
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 30
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 26
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 26
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 25
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 24
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 22
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 19
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 15
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 12
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 12
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 10
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 9
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 8
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- -1 for example Proteins 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 8
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 8
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 7
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 241001146702 Candidatus Entotheonella factor Species 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 5
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 3
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 3
- 230000002612 cardiopulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 3
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 3
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 3
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 3
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 2
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 206010013700 Drug hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 208000032456 Hemorrhagic Shock Diseases 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 206010021138 Hypovolaemic shock Diseases 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 206010022680 Intestinal ischaemia Diseases 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 2
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010036303 Post streptococcal glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010049771 Shock haemorrhagic Diseases 0.000 description 2
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N Vinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC=C XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 201000005638 acute proliferative glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 2
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 2
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 201000005311 drug allergy Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 2
- 206010040560 shock Diseases 0.000 description 2
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 2
- UPMFZISCCZSDND-JJKGCWMISA-M sodium gluconate Chemical compound [Na+].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O UPMFZISCCZSDND-JJKGCWMISA-M 0.000 description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-5-ethoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N (R)-lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCC[C@@H]1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NNC(=O)C2=C1 KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-2-phenylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)(C)C1=CC=CC=C1 HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- 241000256111 Aedes <genus> Species 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108010089414 Anaphylatoxins Proteins 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000351920 Aspergillus nidulans Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 108090000363 Bacterial Luciferases Proteins 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- 241000409811 Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108700031361 Brachyury Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100031609 Complement C2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000955 Complement C2 Proteins 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 208000025962 Crush injury Diseases 0.000 description 1
- 102100037579 D-3-phosphoglycerate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 241000588698 Erwinia Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001522878 Escherichia coli B Species 0.000 description 1
- 241001302160 Escherichia coli str. K-12 substr. DH10B Species 0.000 description 1
- 241001302584 Escherichia coli str. K-12 substr. W3110 Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- 241000221961 Neurospora crassa Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N Stachyose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O2)O1 UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 241001149964 Tolypocladium Species 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N alpha-Lipoic acid Natural products OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 229960001716 benzalkonium Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 125000001314 canonical amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- KNKDZWFHOIKECV-UHFFFAOYSA-L dipotassium 2,3,4-trihydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound [K+].[K+].OC(=O)C(O)C(O)C(O)=O.[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O KNKDZWFHOIKECV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- WGFMTHGYKYEDHF-UHFFFAOYSA-L disodium 2-hydroxy-2-oxoacetate Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)C(O)=O.[O-]C(=O)C([O-])=O WGFMTHGYKYEDHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MYSDBRXBYJKGLB-WOGKQDBSSA-L disodium;(e)-but-2-enedioate;(e)-but-2-enedioic acid Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)\C=C\C(O)=O.[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O MYSDBRXBYJKGLB-WOGKQDBSSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 229920001038 ethylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 108010029942 microperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 1
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000004224 potassium gluconate Substances 0.000 description 1
- 229960003189 potassium gluconate Drugs 0.000 description 1
- LCPMNMXCIHBTEX-UHFFFAOYSA-M potassium;2-hydroxypropanoate;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound [K+].CC(O)C(O)=O.CC(O)C([O-])=O LCPMNMXCIHBTEX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 201000008171 proliferative glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- KYOYLUVYCHVYGC-BUOKYLHBSA-M sodium (E)-but-2-enedioic acid (E)-4-hydroxy-4-oxobut-2-enoate Chemical compound [Na+].OC(=O)\C=C\C(O)=O.OC(=O)\C=C\C([O-])=O KYOYLUVYCHVYGC-BUOKYLHBSA-M 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000176 sodium gluconate Substances 0.000 description 1
- 229940005574 sodium gluconate Drugs 0.000 description 1
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M sodium thioglycolate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CS GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940046307 sodium thioglycolate Drugs 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- LLVQEXSQFBTIRD-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3,4-trihydroxy-4-oxobutanoate;hydrate Chemical compound O.[Na+].OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O LLVQEXSQFBTIRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KMPHTYSTEHXSTL-UHFFFAOYSA-M sodium;2-hydroxypropanoate;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound [Na+].CC(O)C(O)=O.CC(O)C([O-])=O KMPHTYSTEHXSTL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VDZDAHYKYRVHJR-UHFFFAOYSA-M sodium;2-hydroxypropanoate;hydrate Chemical compound [OH-].[Na+].CC(O)C(O)=O VDZDAHYKYRVHJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OESFSXYRSCBAQJ-UHFFFAOYSA-M sodium;3-carboxy-3,5-dihydroxy-5-oxopentanoate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC([O-])=O OESFSXYRSCBAQJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DGPIGKCOQYBCJH-UHFFFAOYSA-M sodium;acetic acid;hydroxide Chemical compound O.[Na+].CC([O-])=O DGPIGKCOQYBCJH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VBGUQBPWJMPQBI-UHFFFAOYSA-M sodium;butanedioic acid;4-hydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound [Na+].OC(=O)CCC(O)=O.OC(=O)CCC([O-])=O VBGUQBPWJMPQBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JISIBLCXFLGVJX-UHFFFAOYSA-M sodium;butanedioic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OC(=O)CCC(O)=O JISIBLCXFLGVJX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KIJIBEBWNNLSKE-UHFFFAOYSA-M sodium;oxalic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OC(=O)C(O)=O KIJIBEBWNNLSKE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N stachyose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)O2)O)O1 UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 230000003685 thermal hair damage Effects 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical class CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- JYXKLAOSCQDVIX-NFMYELBMSA-K trisodium (E)-but-2-enedioate (E)-4-hydroxy-4-oxobut-2-enoate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)\C=C\C([O-])=O.[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O JYXKLAOSCQDVIX-NFMYELBMSA-K 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 229940045136 urea Drugs 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/38—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against protease inhibitors of peptide structure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21046—Complement factor D (3.4.21.46)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/54—F(ab')2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Neurology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Oncology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к иммунологии. Предложены гуманизированное моноклональное антитело к фактору D человека или его антигенсвязывающий фрагмент, его нуклеотидная последовательность, клетка и вектор, которые несут эти антитела, способ его получения и применение для получения композиций для лечения заболеваний и нарушений, ассоциированных с избыточной или неконтролируемой активацией системы комплемента. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент содержит (i) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO:5, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 6; или (ii) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO:7, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 8; или (iii) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO:9, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 10; или (iv) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO:11, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 12. Способ получения антитела к фактору D или его антигенсвязывающего фрагмента включает культивирование клетки-хозяина, включающей вектор экспрессии, несущий нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Композиция, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, пригодна для лечения нарушений, опосредованных системой комплемента, где нарушение представляет собой глазное заболевание, такое как возрастная дегенерация желтого пятна или диабетическая ретинопатия. 7 н. и 7 з.п. ф-лы, 13 ил., 4 табл., 6 пр.
Description
Уровень техники
Система комплемента играет центральную роль в процессах клиренса иммунных комплексов и иммунного ответа на инфекционные агенты, чужеродные агенты, инфицированные вирусом клетки и опухолевые клетки. Однако комплемент также вовлечен в патологическое воспаление и в аутоиммунные заболевания. Таким образом, ингибирование избыточной или неконтролируемой активации каскада комплемента могло бы принести клиническую пользу пациентам с такими заболеваниями и состояниями.
Система комплемента охватывает два отдельных пути активации, называемых классическим и альтернативным путями (V.M. Holers, In Clinical Immunology: Principles and Practice, ed. R.R. Rich, Mosby Press; 1996, 363-391). Классический путь представляет собой кальций/магний-зависимый каскад, который обычно активируется за счет образования комплексов антиген-антитело. Альтернативный путь представляет собой магний-зависимый каскад, который активируется путем депонирования и активации C3 на определенных чувствительных поверхностях (например, на полисахаридах клеточной стенки дрожжей и бактерий, и на определенных биополимерных материалах). Активация пути комплемента генерирует биологически активные фрагменты белков комплемента, например, анафилатоксинов C3a, C4a и C5a и мембраноатакующих комплексов C5b-9 (MAC), которые опосредуют активности воспаления, включающие хемотаксис лейкоцитов, активацию макрофагов, нейтрофилов, тромбоцитов, тучных клеток и эндотелиальных клеток, проницаемость сосудов, цитолиз и повреждение тканей.
Фактор D представляет собой высокоспецифичную сериновую протеазу, необходимую для активации альтернативного пути комплемента. Она расщепляет фактор B, связанный с C3b, генерируя фермент C3b/Bb, который является активным компонентом конвертаз C3/C5 альтернативного пути. Фактор D может представлять собой подходящую мишень для ингибирования, поскольку его концентрация в плазме людей является очень низкой (1,8 мкг/мл), и было показано, что он является ограничивающим ферментом для активации альтернативного пути комплемента (P.H. Lesavre and H.J. Müller-Eberhard. J. Exp. Med., 1978; 148: 1498-1510; J.E. Volanakis et al., New Eng. J. Med., 1985; 312: 395-401).
Было продемонстрировано на животных-моделях и в исследованиях ex vivo, что подавление (даун-регуляция) активации системы комплемента является эффективным при лечении некоторых симптомов заболеваний, например, при системной красной волчанке и гломерулонефрите (Y. Wang et al., Proc. Natl. Acad. Sci.; 1996, 93: 8563-8568), ревматоидном артрите (Y. Wang et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 1995; 92: 8955-8959), искусственном кровообращении и гемодиализе (C.S. Rinder, J. Clin. Invest, 1995; 96: 1564-1572), сверхостром отторжении при трансплантации органов (T.J. Kroshus et al., Transplantation, 1995; 60: 1194-1202), инфаркте миокарда (J.W. Homeister et al., J. Immunol., 1993; 150: 1055-1064; H.F. Weisman et al., Science, 1990; 249: 146-151 ), реперфузионном повреждении (E.A. Amsterdam et al., Am. J. Physiol., 1995; 268: H448-H457) и при синдроме нарушения дыхания у взрослых (R. Rabinovici et al., J. Immunol., 1992; 149: 1744-1750). Кроме того, другие воспалительные состояния и заболевания аутоиммунного/иммунного комплекса также тесно ассоциированы с активацией системы комплемента (V.M. Holers, ibid., B.P. Morgan. Eur. J. Clin. Invest, 1994: 24: 219-228), включая термическое повреждение, тяжелое астматическое состояние, анафилактический шок, воспаление кишечника, крапивницу, агниоэдему, васкулит, рассеянный склероз, миастению гравис, мембранопролиферативный гломерулонефрит и синдром Шегрена.
Существует потребность в терапии с помощью антител в области нарушений, опосредованных системой комплемента, и гуманизированные антитела по настоящему изобретению представляют собой высокоаффинные антитела, используемые для удовлетворения этой потребности.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится, в основном, к антителам, включающим последовательности вариабельных доменов тяжелой цепи и легкой цепи мышиного антитела 166-32, которое представляет собой антитело, способное к ингибированию биологических активностей, ассоциированных с фактором D. Например, можно наблюдать существенное ингибирование активности альтернативного пути комплемента при концентрации, составляющей 18 мкг/мл (эквивалентно примерно превышению в 1,5 раза молярной концентрации фактора D в крови; молярное соотношение антитела к фактору D и фактора D составляет примерно 1,5:1) (см., например, патент США № 6956107).
Настоящее изобретение также относится к гуманизированным антителам мышиного антитела MAb 166-32. Изобретение включает аминокислотные последовательности вариабельных участков тяжелой и легкой цепи антител и их соответствующие нуклеотидные последовательности. Другой вариант осуществления изобретения включает последовательности CDR этих антител.
Другой вариант осуществления настоящего изобретения включает композиции, включающие антитело по изобретению. В другом варианте осуществления изобретение представляет клеточные линии и векторы, несущие последовательности антител по настоящему изобретению. В одном аспекте изобретение включает способ получения антител и композиций по изобретению.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является применение этих гуманизированных антител для получения лекарственного средства или композиции для лечения нарушений, ассоциированных с избыточной или неконтролируемой активацией системы комплемента. Они включают активацию системы комплемента во время операций искусственного кровообращения; активацию системы комплемента по причине ишемии-реперфузии после острого инфаркта миокарда, аневризмы, инсульта, геморрагического шока, повреждения с размозжением тканей, полиорганной недостаточности, гиповолемического шока, кишечной ишемии или других событий, вызывающих ишемию. Также было показано, что активация системы комплемента ассоциирована с воспалительными состояниями, такими как тяжелые ожоги, эндотоксемия, септический шок, синдром нарушения дыхания у взрослых, гемодиализ; анафилактический шок, тяжелое астматическое состояние, ангиоэдема, болезнь Крона, серповидно-клеточная анемия, постстрептококковый гломерулонефрит и панкреатит. Нарушение может быть результатом побочного действия лекарственного средства, аллергии на лекарственное средство, индуцированного с помощью IL-2 синдрома просачивания из сосудов или аллергии на рентгеноконтрастные средства. Нарушение также включает аутоиммунное заболевание, такое как системная красная волчанка, миастения гравис, ревматоидный артрит, болезнь Альцгеймера и рассеянный склероз. Активация системы комплемента также ассоциирована с отторжением трансплантата. Активация системы комплемента также ассоциирована с глазными заболеваниями, такими как возрастная дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1A и 1B изображена аминокислотная последовательность вариабельного участка тяжелой цепи мышиного антитела MAb 166-32 (фиг. 1A) и вариабельного участка легкой цепи (фиг.1B).
На фиг. 2A и 2B изображена нуклеотидная последовательность вариабельного участка тяжелой цепи мышиного антитела MAb 166-32 (фиг. 2A) и вариабельного участка легкой цепи (фиг.2B).
На фиг. 3 изображено сравнение легких цепей мышиного антитела MAb 166-32.
На фиг. 4 изображено сравнение тяжелых цепей мышиного антитела MAb 166-32.
На фиг. 5 изображены аминокислотные последовательности вариабельного участка тяжелой цепи и вариабельного участка легкой цепи для каждого клона #56, #111, #250 и #416 гуманизированного антитела.
На фиг. 6 изображены результаты гемолитического анализа для клонов #56, #111, #250 и #416 гуманизированного антитела Fab.
На фиг. 7 изображено ингибирование активности альтернативного пути комплемента с помощью клонов #56, #111, #250 и #416 гуманизированного антитела Fab.
На фиг. 8A-B (консенсусные каркасные участки вариабельных участков тяжелой цепи (VH)) и фиг. 9A-B (консенсусные каркасные участки вариабельных участков легкой цепи (VL)) изображены характерные акцепторные человеческие консенсусные каркасные последовательности, которые могут быть использованы в практическом применении настоящего изобретения со следующими признаками последовательностей: (фиг. 8A-B) подгруппа I человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 28), подгруппа I человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 29-31), подгруппа II человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 32), подгруппа II человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 33-35), подгруппа III человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 36), подгруппа III человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 37-39), подгруппа VII человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 55), подгруппа VII человеческих консенсусных каркасных последовательностей VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 56-58), подгруппа человеческого акцепторного каркасного участка VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 40), подгруппа человеческого акцепторного каркасного участка VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 41-42), подгруппа 2 человеческого акцепторного каркасного участка VH в отсутствие CDR-участков по Kabat (SEQ ID NO: 43) и подгруппа 2 человеческого акцепторного каркасного участка VH в отсутствие протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 44-46) и (Фиг.9A-B) подгруппа I человеческого консенсусного каркасного участка цепи VL каппа (SEQ ID NO: 47), подгруппа человеческого консенсусного каркасного участка цепи VL каппа (SEQ ID NO: 48), подгруппа III человеческого консенсусного каркасного участка цепи каппа (SEQ ID NO: 49) и подгруппа IV человеческого консенсусного каркасного участка цепи каппа (SEQ ID NO: 50).
Подробное описание изобретения
Определения
Термины, используемые по всему тексту заявки, следует истолковывать с помощью обычного и типичного значения для специалистов в данной области. Однако авторам настоящего изобретения желательно, чтобы следующим терминам были даны конкретные определения, как определено ниже.
Фраза "по существу идентичный" по отношению к полипептидной последовательности цепи антитела может быть истолкована как цепь антитела, идентичная эталонной полипептидной последовательности, по меньшей мере, на 70% или на 80%, или на 90% или на 95%. Термин «по отношению к нуклеотидной последовательности» может быть истолкован как последовательность нуклеотидов, идентичная эталонной нуклеотидной последовательности, по меньшей мере, примерно на 85% или на 90%, или на 95%, или на 97%.
Термин "идентичность" или "гомология" следует истолковывать как обозначение процента аминокислотных остатков в кандидатной последовательности, которые идентичны остатку соответствующей последовательности, с которой ее сравнивают, после выравнивания последовательностей и введения пробелов, если необходимо, для достижения максимального процента идентичности с цельной последовательностью, и не рассматривая никаких консервативных замен в виде части идентичности последовательности. Ни N-концевые, ни C-концевые удлинения, ни вставки не следует истолковывать как уменьшающие идентичность или гомологию. Методы и компьютерные программы для выравнивания хорошо известны в данной области. Идентичность последовательности может быть измерена с использованием пакета программного обеспечения для анализа последовательностей.
Термин "антитело" используется в широком смысле и, конкретно, охватывает моноклональные антитела (включая полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела и мультиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела). Антитела (Ab) и иммуноглобулины (Ig) представляют собой гликопротеины, обладающие одинаковыми структурными характеристиками. В то время как антитела демонстрируют специфичность связывания со специфичной мишенью, иммуноглобулины включают как антитела, так и другие антитело-подобные молекулы, которые лишены специфичности к мишени. Нативные антитела и иммуноглобулины обычно представляют собой гетеротетрамерные гликопротеины молекулярной массы, составляющей примерно 150000 дальтон, состоящие из двух идентичных легких (L) цепей и двух идентичных тяжелых (H) цепей. Каждая тяжелая цепь содержит на одном конце вариабельный домен (VH), за которым следуют константные домены. Каждая легкая цепь содержит на одном конце вариабельный домен (VL) и константные домены на ее другом конце.
Как используется в данном описании, термин "антитело к фактору D человека" обозначает антитело, которое специфично связывается с фактором D человека таким образом, чтобы ингибировать или по существу уменьшать активацию системы комплемента.
Термин "вариабельный" в контексте вариабельного домена антител означает тот факт, что определенные участки вариабельных доменов существенно отличаются среди антител по последовательности и используются при связывании и определении специфичности каждого конкретного антитела для его конкретной мишени. Однако вариабельность не распределена равномерно по вариабельным доменам антител. Она концентрируется в трех сегментах, называемых участками, определяющими комплементарность (CDR), также известными как гипервариабельные участки (HVR) в вариабельных доменах как легкой цепи, так и тяжелой цепи. Более высококонсервативные участки называют каркасными участками (FR). Каждый из вариабельных доменов нативных тяжелых и легких цепей включает четыре FR-участка, по большей части принимающих конфигурацию β-листа, связанных тремя участками CDR, которые образуют петли, связывающие и, в некоторых случаях, образующие часть структуры β-листа. Участки CDR в каждой цепи содержатся вместе в тесной близости с участками CDR из другой цепи с помощью FR-участков, способствуя образованию сайта связывания антител с мишенью (см. публикацию Kabat et al.). Как используется в данном описании, нумерацию аминокислотных остатков иммуноглобулинов проводят согласно системе нумерации аминокислотных остатков иммуноглобулинов по Kabat et al., (Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institute of Health, Bethesda, Md. 1987), если не указано иначе.
Термин "гипервариабельный участок", "HVR" или "HV", при использовании в данном описании, относится к участкам вариабельного домена антитела, которые являются гипервариабельными по последовательности и/или образуют определенные структурой петли. Как правило, антитела включают шесть гипервариабельных участков: три в области VH (H1, H2, H3) и три в области VL (L1, L2, L3). Используется ряд описаний гипервариабельных участков, которые включены в данный документ. Участки, определяющие комплементарность по Kabat (CDR), определяются на основе вариабельности последовательности и имеют широкое применение (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). Chothia вместо этого использует обозначение локализации структурных петель (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Гипервариабельные участки антитела AbM представляют собой компромисс между определением CDR по Kabat и определением структурных шпилек по Chothia и используются в Оксфордском пакете программного обеспечения для молекулярного моделирования антител AbM. "Контактные" гипервариабельные участки определяются на основе анализа доступных кристаллических структур комплексов. Остатки каждого из этих гипервариабельных участков указаны ниже.
Петля | Kabat | AbM | Chothia | Контакт |
L1 | L24-L34 | L24-L34 | L26-L32 | L30-L36 |
L2 | L50-L56 | L50-L56 | L50-L52 | L46-L55 |
L3 | L89-L97 | L89-L97 | L91-L96 | L89-L96 |
H1 | H31-H35B | H26-H35B | H26-H32 | H30-H35B |
(Нумерация по Kabat) | ||||
H1 | H31-H35 | H26-H35 | H26-H32 | H30-H35 |
(Нумерация по Chothia) | ||||
H2 | H50-H65 | H50-H58 | H53-H55 | H47-H58 |
H3 | H95-H102 | H95-H102 | H96-H101 | H93-H101 |
Гипервариабельные участки могут включать следующие "протяженные гипервариабельные участки": 24-36 или 24-34 (L1), 46-56 или 50-56 (L2) и 89-97 (L3) в VL и 26-35 (H1), 50-65 или 49-65 (H2) и 93-102, 94-102 или 95-102 (H3) в VH. Остатки вариабельных доменов пронумерованы согласно Kabat et al., как описано выше, для каждого из этих классов.
Остатки "каркасного участка" или "FR-участка" представляют собой остатки вариабельного домена, отличные от остатков гипервариабельного участка или от остатков участка CDR, определенных в данном описании.
Термин "нумерация по Kabat остатков вариабельного домена" или "нумерация по Kabat положения аминокислоты" и их вариации означает систему нумерации, используемую для вариабельных доменов тяжелой цепи или вариабельных доменов легкой цепи в компиляции антител по Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991). При использовании этой системы нумерации действительная линейная аминокислотная последовательность может содержать меньшее количество аминокислот или дополнительные аминокислоты, соответствующие укороченным FR- или CDR-участкам вариабельного домена или вставкам в FR- или CDR-участки вариабельного домена. Например, вариабельный домен тяжелой цепи может включать одну аминокислотную вставку (остаток 52a согласно Kabat) после остатка 52 из H2 и вставленные остатки (например, остатки 82a, 82b, и 82c и т.д. согласно Kabat) после остатка 82 FR-участка тяжелой цепи. Нумерация остатков по Kabat может быть определена для данного антитела путем сравнения гомологичных участков последовательности антитела со "стандартной" последовательностью с нумерацией по Kabat.
Систему нумерации по Kabat, как правило, используют при обозначении остатка в вариабельном домене (приблизительно остатки 1-107 легкой цепи и остатки 1-113 тяжелой цепи) (например, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991 )). "EU-система нумерации" или "EU-индекс", как правило, используется для обозначения остатка в константном участке тяжелой цепи иммуноглобулина (например, EU-индекс, описанный выше у Kabat et al.; шарнирный участок в константном домене тяжелой цепи приблизительно представляет собой остатки 216-230 (EU-нумерация) тяжелой цепи). "EU-индекс по Kabat" обозначает нумерацию остатков человеческого антитела IgG1 EU. Если в данном описании не указано иначе, обозначения номеров остатков в вариабельном домене антител означают нумерацию остатков по системе нумерации Kabat. Если в данном описании не указано иначе, обозначения номеров остатков в константном домене антител означают нумерацию остатков по EU-нумерации (например, см. предварительную заявку США No. 60/640323, фигуры для EU-нумерации).
Термин "фрагмент антитела" обозначает часть полноразмерного антитела, как правило, участок связывания с мишенью или вариабельный участок. Примеры фрагментов антител включают Fab, Fab', F(ab')2 и Fv-фрагменты. Фраза "функциональный фрагмент или аналог" антитела относится к соединению, обладающему качественной биологической активностью подобно полноразмерному антителу. Например, функциональный фрагмент или аналог антитела к фактору D человека представляет собой фрагмент, который может связываться с фактором D таким образом, чтобы предотвратить или по существу уменьшить активацию системы комплемента. Как используется в данном описании, "функциональный фрагмент" по отношению к антителам относится к фрагментам Fv, F(ab) и F(ab')2. Фрагмент "Fv" представляет собой минимальный фрагмент антитела, который содержит полный сайт распознавания и связывания с мишенью. Этот участок состоит из димера одного вариабельного домена тяжелой цепи и одного вариабельного домена легкой цепи, которые находятся в тесной нековалентной ассоциации (димер VH-VL). Он находится в такой конфигурации, что три CDR-участка каждого вариабельного домена взаимодействуют с установлением сайта связывания с мишенью на поверхности димера VH-VL. Суммарно, шесть участков CDR придают антителу специфичность связывания с мишенью. Однако даже один вариабельный домен (или половина фрагмента Fv, включающего только три участка CDR, специфичных для мишени) обладает способностью распознавать мишень и связываться с ней. "Одноцепочечный фрагмент Fv" или фрагмент "sFv" антитела включает домены VH и VL антитела, где эти домены присутствуют в одной полипептидной цепи. Как правило, Fv-полипептид дополнительно включает полипептидный линкер между доменами VH и VL, который дает возможность фрагменту sFv образовывать целевую структуру для связывания с мишенью.
Fab-фрагмент содержит константный домен легкой цепи и первый константный домен (CH1) тяжелой цепи. Fab'-фрагменты отличаются от Fab-фрагментов несколькими добавленными остатками на карбоксильном конце домена CH1 тяжелой цепи, включающего один или более цистеинов из шарнирного участка антитела. F(ab')-фрагменты получают путем расщепления дисульфидной связи шарнирных цистеинов продукта гидролиза пепсином F(ab')2. Дополнительные химические связывания фрагментов антитела известны специалистам в данной области.
Используемый в данном описании термин "моноклональное антитело" относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, т.е. индивидуальные антитела, включенные в популяцию, являются идентичными, за исключением возможных естественных мутаций, которые могут присутствовать в минорных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, причем направлены против одного целевого сайта. Кроме того, в отличие от традиционных препаратов антител (поликлональных), которые обычно включают различные антитела, направленные против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одной детерминанты на мишени. В дополнение к их специфичности, преимущество моноклональных антител заключается в том, что они могут быть синтезированы с помощью гибридомной культуры, не содержащей примесей других иммуноглобулинов. Обозначение "моноклональное" указывает на характер антитела, которое было получено из по существу гомогенной популяции антител, и не должно быть истолковано как необходимость получения антитела каким-либо конкретным методом. Например, моноклональные антитела, предназначенные для применения по настоящему изобретению, могут быть выделены из фаговых библиотек антител с использованием хорошо известных методов. Родительские моноклональные антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, могут быть получены гибридомным методом, впервые описанным в публикации Kohler and Milstein, Nature 256, 495 (1975), или могут быть получены рекомбинантными методами.
"Гуманизированные" формы отличных от человеческих (например, мышиных) антител представляют собой иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие фрагменты последовательностей антител, связывающиеся с мишенью), которые содержат минимальную последовательность, выделенную из отличного от человеческого иммуноглобулина. Как правило, гуманизированное антитело включает по существу все из, по меньшей мере, одного, а обычно из двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все из участков CDR соответствуют участкам CDR отличного от человеческого иммуноглобулина, и все или по существу все из участков FR представляют собой консенсусную последовательность человеческого иммуноглобулина. Гуманизированное антитело также может включать, по меньшей мере, часть константного участка (Fc) иммуноглобулина, обычно из выбранного в качестве матрицы человеческого иммуноглобулина.
Методы гуманизации отличных от человеческих антител хорошо известны в данной области. Как правило, гуманизированное антитело содержит один или более аминокислотных остатков, введенных в него из источника, отличного от человека. Эти отличные от человеческих аминокислотные остатки часто обозначаются как "импортированные" остатки, которые обычно берутся из "импортированного" вариабельного домена. Гуманизацию можно по существу осуществлять согласно методу Винтера и сотрудников [Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988)], путем замены участков CDR грызунов или последовательностей CDR на соответствующие последовательности человеческого антитела. Соответственно, такие "гуманизированные" антитела являются химерными антителами (патент США № 4816567), где участок, по существу меньший, чем человеческий интактый вариабельный домен, заменяли на соответствующую последовательность из отличного от человека вида. На практике гуманизированные антитела обычно представляют собой человеческие антитела, в которых некоторые остатки участка CDR и, возможно, некоторые остатки участка FR заменяют на остатки из аналогичных сайтов антител грызунов.
Выбор человеческих вариабельных доменов обеих цепей, легкой и тяжелой, которые будут использовать при получении гуманизированных антител, в некоторых случаях может быть важным с точки зрения уменьшения антигенности и/или реакции на HAMA (человеческое анти-мышиное антитело), когда антитело предназначено для использования в терапии человека. Уменьшение или исключение реакции на HAMA, как правило, представляет собой существенный аспект клинической разработки подходящих терапевтических агентов. См., например, Khaxzaeli et al., J. Natl. Cancer Inst. (1988), 80:937; Jaffers et al., Transplantation (1986), 41:572; Shawler et al., J. Immunol. (1985), 135:1530; Sears et al., J. Biol. Response Mod. (1984), 3:138; Miller et al., Blood (1983), 62:988; Hakimi et al., J. Immunol. (1991), 147:1352; Reichmann et al., Nature (1988), 332:323; Junghans et al., Cancer Res. (1990), 50:1495. Как описано в данном документе, в изобретении предлагаются антитела, которые гуманизированы так, чтобы реакция на HAMA была уменьшена или исключена. Варианты этих антител дополнительно могут быть получены с использованием обычных способов, известных в данной области, некоторые из которых дополнительно описаны ниже. Согласно так называемому "оптимизированному" методу, последовательность вариабельного домена антитела грызуна скринировали против полной библиотеки известных человеческих последовательностей вариабельных доменов. Идентифицировали последовательность человеческого V-домена, которая является близкой такой последовательности грызуна, и человеческий каркасный участок (FR) внутри нее акцептировали для гуманизированного антитела (Sims et al., J. Immunol. 151:2296 (1993); Chothia et al., J. Mol. Biol., 196:901 (1987)). В другом методе используют конкретный каркасный участок, выделенный из консенсусной последовательности всех человеческих антител конкретной подгруппы легкой и тяжелой цепей. Такой же каркасный участок может быть использован для нескольких различных гуманизированных антител (Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol. 151:2623 (1993)).
Например, как описано в данном документе, аминокислотная последовательность из антитела служит в качестве стартовой (родительской) последовательности для разнообразия каркасных и/или гипервариабельных последовательностей. Выбранная каркасная последовательность, с которой связывается стартовая гипервариабельная последовательность, обозначается в данном описании как человеческий акцепторный каркасный участок. В то время как человеческие акцепторные каркасные участки могут быть из человеческого иммуноглобулина или могут быть выделены из человеческого иммуноглобулина (его участков VL и/или VH), человеческие акцепторные каркасные участки могут быть из консенсусной последовательности человеческого каркасного участка или могут быть выделены из консенсусной последовательности человеческого каркасного участка, в качестве таковых были продемонстрированы каркасные участки, которые обладают минимальной иммуногенностью, или она отсутствует у пациентов-людей. "Человеческий акцепторный каркасный участок", предназначенный для целей настоящего изобретения, представляет собой каркасный участок, включающий аминокислотную последовательность каркасного участка VL или VH, выделенного из каркасного участка человеческого иммуноглобулина или из консенсусной последовательности человеческого каркасного участка. Акцепторный человеческий каркасный участок, "выделенный из" каркасного участка человеческого иммуноглобулина или из консенсусной последовательности человеческого каркасного участка, может включать их аминокислотную последовательность, или может содержать ранее существующие аминокислотные замены. Там где присутствуют ранее существующие аминокислотные замены, они присутствуют в количестве, составляющем, предпочтительно, не более чем 5 и, предпочтительно, 4 или менее, или 3 или менее. В одном варианте осуществления человеческий акцепторный каркасный участок VH идентичен последовательности каркасного участка VH человеческого иммуноглобулина или консенсусной последовательности человеческого каркасного участка. В одном варианте осуществления человеческий акцепторный каркасный участок VL идентичен последовательности каркасного участка VL человеческого иммуноглобулина или консенсусной последовательности человеческого каркасного участка. "Консенсусная последовательность человеческого каркасного участка" представляет собой каркасный участок, который представляет собой наиболее часто встречающиеся аминокислотные остатки в выборке каркасных последовательностей VL или VH человеческого иммуноглобулина. Как правило, выборка последовательностей VL или VH человеческого иммуноглобулина представлена из подгруппы последовательностей вариабельного домена. Как правило, подгруппа последовательностей представляет собой подгруппу по Kabat et al. В одном варианте осуществления, для VL, подгруппа представляет собой подгруппу каппа I по Kabat et al. В одном из вариантов осуществления, для VH, подгруппа представляет собой подгруппу III по Kabat et al.
Там где акцепторная последовательность выделена из человеческого иммуноглобулина, специалист необязательно может выбрать последовательность человеческого каркасного участка, которая выбирается на основе ее гомологии с донорной последовательностью каркасного участка путем сравнения донорной последовательности каркасного участка с разнообразными последовательностями человеческого каркасного участка из коллекции последовательностей человеческого каркасного участка, и выбрать наиболее гомологичную последовательность каркасного участка в качестве акцептора. Акцепторная последовательность человеческого каркасного участка может быть из зародышевых последовательностей человеческого антитела или может быть выделена из зародышевых последовательностей человеческого антитела, доступных из общих баз данных.
В одном варианте осуществления представленные в данном описании человеческие консенсусные последовательности каркасного участка представляют собой последовательности из подгруппы VH VII и/или из подгруппы VL каппа I консенсусных последовательностей каркасного участка, или представляют собой последовательности, выделенные из подгруппы VH VII и/или из подгруппы VL каппа I консенсусных последовательностей каркасного участка.
В одном варианте осуществления матрица человеческого каркасного участка, используемая для получения антитела к фактору D, может включать последовательности каркасного участка из матрицы, включающие комбинацию VI-4.1 b+ (семейство VH7) и JH4d для VH цепи (фиг. 3) и/или комбинацию DPK4 (семейство VκI) и JK2 для VL цепи (фиг. 4).
Таким образом, акцепторный человеческий каркасный участок VH может включать одну, две, три или все из следующих последовательностей каркасного участка: FR1, включающий QX1QLVQSGX2ELKKPGASVKVSCKAS (аминокислоты 1-25 последовательности SEQ ID NO: 27), где X1 представляет собой I или V, X2 представляет собой P или S; FR2, включающий WVX3QAPGQGLE (аминокислоты 36-46 последовательности SEQ ID NO: 27), где X3 представляет собой K или R; FR3, включающий RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAX4YYCX5R (аминокислоты 67-98 последовательности SEQ ID NO: 27), где X4 представляет собой T или V, X5 представляет собой E или A; FR4,включающий WGQGTLVTVSS (аминокислоты 105-115 последовательности SEQ ID NO: 8 или аминокислоты 105-115 последовательности SEQ ID NO: 27)
Примеры консенсусных каркасных участков VH включают:
подгруппу VH I консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 28);
подгруппу VH I консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 29-31);
подгруппу VH II консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 32);
подгруппу VH II консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 33-35);
подгруппу VH III консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 36);
подгруппу VH III консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 37-39);
подгруппу VH VII консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 55);
подгруппу VH VII консенсусной последовательности человеческого каркасного участка без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 56-58);
акцепторный человеческий каркасный участок VH без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 40);
акцепторный человеческий каркасный участок VH без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 41-42);
акцепторный человеческий каркасный участок VH 2 без участков CDR по Kabat (SEQ ID NO: 43); или акцепторный человеческий каркасный участок VH 2 без протяженных гипервариабельных участков (SEQ ID NO: 44-45).
В одном варианте осуществления акцепторный человеческий каркасный участок VH включает одну, две, три или все из следующих последовательностей каркасного участка:
FR1, включающий QVQLVQSGPELKKPGASVKVSCKAS (аминокислоты 1-25 последовательности SEQ ID NO: 8),
FR2, включающий WVRQAPGQGLE (аминокислоты 36-46 последовательности SEQ ID NO: 8),
FR3, включающий RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCER (аминокислоты 67-98 последовательности SEQ ID NO: 8),
RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCE (аминокислоты 67-97 последовательности SEQ ID NO:8),
RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYC (аминокислоты 67-96 последовательности SEQ ID NO: 8),
RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCS (SEQ ID NO: 51) или
RFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCSR (SEQ ID NO: 52);
FR4, включающий WGQGTLVTVSS (аминокислоты 105-115 последовательности SEQ ID NO: 8 или аминокислоты 105-115 последовательности SEQ ID NO: 27).
Акцепторный человеческий каркасный участок VL может включать одну, две, три или все из следующих последовательностей каркасного участка:
FR1, включающий DIQX6TQSPSSLSX7SVGDRVTITC (аминокислоты 1-23 последовательности SEQ ID NO: 26), где X6 представляет собой V или M, X7 представляет собой M или A;
FR2, включающий WYQQKPGKX8PKLLIX9 (аминокислоты 35-49 последовательности SEQ ID NO: 26), где X8 представляет собой P или V, X9 представляет собой S или Y;
FR3, включающий GVPSRFSX10SGSGX11DFTLTISSLQPEDVATYYC (аминокислоты 57-88 последовательности SEQ ID NO: 26), где X10 представляет собой S или G, X11 представляет собой A или T;
FR4, включающий FGQGTKX12EIK (SEQ ID NO: 54), где X12 представляет собой V или L.
Примеры консенсусных последовательностей каркасных участков VL включают:
подгруппу VL каппа I консенсусной последовательности человеческого каркасного участка (SEQ ID NO: 47);
подгруппу VL каппа II консенсусной последовательности человеческого каркасного участка (SEQ ID NO: 48);
подгруппу VL каппа III консенсусной последовательности человеческого каркасного участка (SEQ ID NO: 49); или
подгруппу VL каппа IV консенсусной последовательности человеческого каркасного участка (SEQ ID NO: 50).
В одном варианте осуществления акцепторная последовательность человеческого каркасного участка может включать одну, две, три или все из следующих последовательностей каркасного участка:
FR1, включающий DIQVTQSPSSLSASVGDRVTITC (аминокислоты 1-23 последовательности SEQ ID NO: 7),
FR2, включающий WYQQKPGKVPKLLIS (аминокислоты 35-49 последовательности SEQ ID NO: 7),
FR3, включающий GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYC (аминокислоты 57-88 последовательности SEQ ID NO: 7),
FR4, включающий FGQGTKLEIK (аминокислоты 98-107 последовательности SEQ ID NO: 7) или FGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 53).
В то время как акцепторная последовательность может быть идентична выбранной последовательности человеческого каркасного участка или той, которая из человеческого иммуноглобулина, или той, которая из консенсусной последовательности человеческого каркасного участка, в настоящем изобретении предполагается, что акцепторная последовательность может включать ранее существующие аминокислотные замены по отношению к последовательности человеческого иммуноглобулина или к консенсусной последовательности человеческого каркасного участка.
Ранее существующие замены предпочтительно являются минимальными; имеют обычно четыре, три, два или одно отличие по аминокислотам только по отношению к последовательности человеческого иммуноглобулина или к консенсусной последовательности каркасного участка.
Остатки гипервариабельного участка отличного от человеческого антитела вводят в акцепторные последовательности VL и/или VH человеческого каркасного участка. Например, специалист может ввести остатки, соответствующие остаткам участка CDR по Kabat, остаткам гипервариабельной петли по Chothia, остаткам Abm и/или остаткам контактного участка. Необязательно вводятся следующие остатки протяженного гипервариабельного участка: 24-34 (L1), 50-56 (L2) и 89-97 (L3), 26-35 (H1), 50-65 или 49-65 (H2) и 93-102, 94-102 или 95-102 (H3).
В одном аспекте изобретения предлагается антитело, включающее, по меньшей мере, один, два, три, четыре, пять или шесть участков HVR, выбранных из (a) участка HVR-H 1, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 25; (b) участка HVR-H2, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; (c) участка HVR-H3, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 20; (d) участка HVR-L1, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16; (e) участка HVR-L2, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO; 21 и SEQ ID NO: 23; и (f) участка HVR-L3, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24.
В одном аспекте изобретения предлагается антитело к фактору D, включающее, по меньшей мере, один, два, три, четыре, пять или шесть участков HVR, выбранных из (a) участка HVR-H1, включающего аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 25; (b) участка HVR-H2, включающего аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 14; (c) участка HVR-H3, включающего аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 20; (d) участка HVR-L1, включающего аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16; (e) участка HVR-L2, включающего аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO; 21 и SEQ ID NO: 23; и (f) участка HVR-L3, включающего аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления участок HVR, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую, по меньшей мере, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности последовательности, содержит замены, вставки или делеции по отношению к эталонной последовательности, но при этом антитело, включающее эту аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с фактором D. В некоторых вариантах осуществления заменяют, вставляют или делетируют аминокислоты общим количеством, составляющим 1-10, в эталонной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается антитело, включающее, по меньшей мере, один, два, три, четыре, пять или шесть участков HVR, выбранных из (a) участка HVR-H1, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 25; (b) участка HVR-H2, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14; (c) участка HVR-H3, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 20; (d) участка HVR-L1, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16; (e) участка HVR-L2, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO; 21 и SEQ ID NO: 23; и (f) участка HVR-L3, включающего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24.
В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, выбранный из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен легкой цепи, выбранный из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 11. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 6. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 5. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 6, и вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 5. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 8. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 7. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 8, и вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 7. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 10. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 9. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 10, и вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 9. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 12. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 11. В одном аспекте изобретения предлагается антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий SEQ ID NO: 12, и вариабельный домен легкой цепи, включающий SEQ ID NO: 11.
В одном аспекте изобретения предлагается антитело к фактору D, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи, включающий аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, 8, 10 и 12. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность, имеющая, по меньшей мере, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности последовательности, содержит замены, вставки или делеции по отношению к эталонной последовательности, но при этом антитело, включающее эту аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с фактором D. В некоторых вариантах осуществления заменяют, вставляют или делетируют аминокислоты общим количеством, составляющим 1-10, в эталонной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, 8, 10 или 12. В некоторых вариантах осуществления замены, вставки или делеции осуществляются в участках, которые расположены вне HVR (т.е. в участках FR). В некоторых вариантах осуществления антитело к фактору D содержит вариабельный домен тяжелой цепи, включающий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, 8, 10 или 12.
В некоторых вариантах осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, содержащее вариабельный домен легкой цепи, включающий аминокислотную последовательность, идентичную, по меньшей мере, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, 7, 9 и 11. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность, имеющая, по меньшей мере, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности последовательности, содержит замены, вставки или делеции по отношению к эталонной последовательности, но при этом антитело, включающее эту аминокислотную последовательность, сохраняет способность связываться с фактором D. В некоторых вариантах осуществления заменяют, вставляют или делетируют аминокислоты общим количеством, составляющим 1-10, в последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, 7, 9 и 11. В некоторых вариантах осуществления замены, вставки или делеции осуществляются в участках, которые расположены вне HVR (т.е. в участках FR). В некоторых вариантах осуществления антитело к фактору D содержит вариабельный домен легкой цепи, включающий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, 7, 9 и 11.
Антитело к фактору D может включать любую подходящую последовательность каркасного участка вариабельного домена при условии, что антитело сохраняет способность связывания с фактором D. Например, в некоторых вариантах осуществления, антитела к фактору D по изобретению включают последовательность каркасного участка вариабельного домена тяжелой цепи, которая представляет собой комбинацию Vl.4.1 b+ и JH4d (см. фиг. 3). В некоторых вариантах осуществления антитело к фактору D по изобретению включает консенсусную последовательность человеческого каркасного участка тяжелой цепи подгруппы VII. В некоторых вариантах осуществления антитела к фактору D по изобретению включают последовательность человеческого каркасного участка вариабельного домена тяжелой цепи, содержащую участок FR1, включающий аминокислоты 1-25 последовательности SEQ ID NO: 8, участок FR2, включающий аминокислоты 36-46 последовательности SEQ ID NO: 8, участок FR3, включающий аминокислоты 67-98 последовательности SEQ ID NO: 8, и участок FR4, включающий аминокислоты 105-115 последовательности SEQ ID NO: 8. В одном варианте осуществления этих антител последовательность вариабельного домена тяжелой цепи включает замену(ы) в положении 40 и/или 88 (нумерация по Kabat). В одном варианте осуществления этих антител аминокислота в положении 40 представляет собой цистеин (C) или аланин (A), и/или аминокислота в положении 88 представляет собой цистеин (C) или аланин (A). В некоторых вариантах осуществления антитела к фактору D по изобретению включают последовательность каркасного участка вариабельного домена легкой цепи, которая представляет собой комбинацию DPK4 и JK2 (см. фиг.4). В некоторых вариантах осуществления антитела к фактору D по изобретению включают консенсусную последовательность человеческого каркасного участка легкой цепи каппа I (κI). В некоторых вариантах осуществления антитела к фактору D по изобретению включают последовательность каркасного участка вариабельного домена легкой цепи, содержащую участок FR1, включающий аминокислоты 1-23 последовательности SEQ ID NO: 7, участок FR2, включающий аминокислоты 35-49 последовательности SEQ ID NO: 7, участок FR3, включающий аминокислоты 57-88 последовательности SEQ ID NO: 7, и участок FR4, включающий аминокислоты 98-107 последовательности SEQ ID NO: 7. В одном варианте осуществления этих антител последовательность каркасного участка вариабельного домена легкой цепи включает одну или более замен в положении 15, 43 и/или 104 (нумерация по Kabat). В одном варианте осуществления этих антител аминокислота в положении 15 представляет собой цистеин (C) или валин (V), аминокислота в положении 43 представляет собой цистеин (C) или аланин (A) и/или аминокислота в положении 104 представляет собой валин (V) или лейцин (L).
Кроме того, антитело к фактору D может включать любую подходящую последовательность константного домена при условии, что антитело сохраняет способность связывания с фактором D. Например, в некоторых вариантах осуществления, антитела к фактору D по изобретению включают, по меньшей мере, часть константного домена тяжелой цепи. В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению включают константный домен тяжелой цепи любого из типов тяжелой цепи α, β, ε, γ и μ или их комбинации. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена их тяжелых цепей (CH), иммуноглобулины могут быть отнесены к различным классам или изотипам. Существует пять классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, имеющих тяжелые цепи, обозначенные α, β, ε, γ и μ, соответственно. Классы γ и α дополнительно подразделяются на подклассы на основании относительно минорных различий в последовательности CH и в функции, например, у людей экспрессируются следующие подклассы: IgG1, lgG2, lgG3, lgG4, IgA1 и lgA2. В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен тяжелой цепи, включающий замены в положениях аминокислот, которые приводят в результате к получению целевого эффекта, влияющего на эффекторную функцию (например, аффинность связывания). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен тяжелой цепи, включающий замены в положениях аминокислот, которые не приводят в результате к получению эффекта, влияющего на эффекторную функцию (например, аффинность связывания). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина типа IgG (например, IgG1, lgG2, lgG3 или lgG4) и дополнительно включают замену в положении 114 (нумерация по Kabat; эквивалентно положению 118 в EU-нумераци), 168 (нумерация по Kabat; эквивалентно положению 172 в EU-нумераци), 172 (нумерация по Kabat; эквивалентно положению 176 в EU-нумераци) и/или 228 (EU-нумерация). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина типа IgG (например, IgG1, lgG2, lgG3 или lgG4) и дополнительно включают замену в положении 114, где аминокислота в положении 114 представляет собой цистеин (C) или аланин (A), в положении 168, где аминокислота в положении 168 представляет собой цистеин (C) или аланин (A), в положении 172, где аминокислота в положении 172 представляет собой цистеин (C) или аланин (A), и/или в положении 228, где аминокислота в положении 228 представляет собой пролин (P), аргинин (R) или серин (S).
Кроме того, например, в некоторых вариантах осуществления, антитела к фактору D по изобретению включают, по меньшей мере, часть константного домена легкой цепи. В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению включают константный домен легкой цепи любого из типов легкой цепи - каппа или лямбда, или их комбинацию, поскольку легкая цепь из любого вида позвоночных может быть отнесена к одному из двух абсолютно различных типов, называемых каппа и лямбда, на основании аминокислотных последовательностей их константных доменов. В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен легкой цепи, включающий замены в положениях аминокислот, которые приводят в результате к получению целевого эффекта, влияющего на эффекторную функцию (например, аффинность связывания). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен легкой цепи, включающий замены в положениях аминокислот, которые не приводят в результате к получению эффекта, влияющего на эффекторную функцию (например, аффинность связывания). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен легкой цепи типа каппа и дополнительно включают замену в положении 110, 144, 146 и/или 168 (нумерация по Kabat). В одном варианте осуществления антитела к фактору D по изобретению содержат константный домен легкой цепи типа каппа и дополнительно включают замену в положении 110, где аминокислота в положении 110 представляет собой цистеин (C) или валин (V), в положении 144, где аминокислота в положении 144 представляет собой цистеин (C) или аланин (A), в положении 146, где аминокислота в положении 146 представляет собой изолейцин (I) или валин (V), и/или в положении 168, где аминокислота в положении 168 представляет собой цистеин (C) или серин (S).
В одном аспекте изобретения предлагаются антитела, которые конкурируют с мышиным антителом 166-32 и/или с клонами #56, #111, #250 или #416 гуманизированного антитела к фактору D, и/или с антителом, включающим вариабельный домен или HVR-последовательности клонов #56, #111, #250 или #416 гуманизированного антитела к фактору D. Также предлагаются антитела, которые связываются с тем же эпитопом, что и мышиное антитело 166-32, и/или клоны #56, #111, #250 или #416 гуманизированного антитела к фактору D, и/или антитело, включающее вариабельный домен или HVR-последовательности клонов #56, #111, #250 или #416 гуманизированного антитела к фактору D.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где моновалентная аффинность антитела к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) ниже, например, по меньшей мере, в 1 или в 2 раза, чем моновалентная аффинность химерного антитела (например, аффинность химерного антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), включающего, состоящего из или по существу состоящего из вариабельного домена легкой цепи последовательности SEQ ID NO: 2 и вариабельного домена тяжелой цепи последовательности SEQ ID NO: 1.
В одном варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где бивалентная аффинность антитела к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) ниже, например, по меньшей мере, в 1 или в 2 раза, чем бивалентная аффинность химерного антитела (например, аффинность химерного антитела в виде IgG к фактору D), включающего, состоящего из или по существу состоящего из вариабельного домена легкой цепи последовательности SEQ ID NO: 2 и вариабельного домена тяжелой цепи последовательности SEQ ID NO: 1.
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где моновалентная аффинность антитела к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) больше, например, по меньшей мере, в 1 или в 2 раза, чем моновалентная аффинность химерного антитела (например, аффинность химерного антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), включающего, состоящего из или по существу состоящего из вариабельного домена легкой цепи последовательности SEQ ID NO: 2 и вариабельного домена тяжелой цепи последовательности SEQ ID NO: 1.
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где бивалентная аффинность антитела к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) больше, например, по меньшей мере, в 1 или в 2 раза, чем бивалентная аффинность химерного антитела (например, аффинность химерного антитела в виде IgG к фактору D), включающего, состоящего из или по существу состоящего из вариабельного домена легкой цепи последовательности SEQ ID NO: 2 и вариабельного домена тяжелой цепи последовательности SEQ ID NO: 1.
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет 1,0 нМ (1×10-9 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет 0,5 нМ (0,5×10-9 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет 1,0 пМ (1×10-12 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет 0,5 пМ (0,5×10-12 M) или лучше.
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет 1,0 пМ (1,0×10-9 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет 0,5 пМ (0,5×10-9 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет 1,0 пМ (1×10-12 M) или лучше. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет 0,5 пМ (0,5×10-12 M) или лучше.
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) находится в интервале между 0,5 мМ (0,5×10-6 M) и 0,5 пМ (0,5×10-12 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) находится в интервале между 15 нМ (15×10-9 M) и 0,1 нМ (0,1×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) находится в интервале между 5,5 нМ (5,5×10-9 M) и 1 нМ (1×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) находится в интервале между 0,5 пМ (0,5×10-12 M) и 2 пМ (2×10-12 M).
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) находится в интервале между 0,5 мМ (0,5×10-6 M) и 0,5 пМ (0,5×10-12 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) находится в интервале между 10 нМ (10×10-9 M) и 0,05 нМ (0,05×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) находится в интервале между 5,5 нМ (5,5×10-9 M) и 1 нМ (1×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) находится в интервале между 0,5 пМ (0,5×10-12 M) и 2 пМ (2×10-12 M).
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 3,7 нМ (3,7×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 3,3 нМ (3,3×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 5,1 нМ (5,1×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 2,7 нМ (2,7×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 1,4 нМ (1,4×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 1,4 пМ (1,4×10-12 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 1,1 пМ (1,1×10-12 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 0,19 нМ (0,19×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 0,08 нМ (0,08×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 12,3 нМ (12,3×10-9 M). В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 9 нМ (9×10-9 M).
В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 1,4 пМ (1,4×10-12 M) +/- 0,5. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 1,1 пМ (1,1×10-12 M) +/- 0,6. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 0,19 нМ (0,19×10-9 M) +/- 0,01. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 0,08 нМ (0,08×10-9 M) +/- 0,01. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D) составляет примерно 12,3 нМ (12,3×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления изобретения предлагается антитело к фактору D, где аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D) составляет примерно 9,0 нМ (9,0×10-9 M) +/- 1.
В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 3,7 нМ (3,7×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 3,3 нМ (3,3×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 5,1 нМ (5,1×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 2,7 нМ (2,7×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 1,4 нМ (1,4×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 1,4 пМ (1,4×10-12 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D), составляющую примерно 1,1 пМ (1,1×10-12 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 0,19 нМ (0,19×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D), составляющую примерно 0,08 нМ (0,08×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его моновалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде Fab-фрагмента к фактору D), составляющую примерно 12,3 нМ (12,3×10-9 M) +/- 2. В другом варианте осуществления антитело к фактору D может иметь аффинность антитела в его бивалентной форме к фактору D (например, аффинность антитела в виде IgG к фактору D), составляющую примерно 9,0 НМ (9,0×10-9 M) +/- 2.
Как хорошо известно из области техники, аффинность связывания лиганда с его рецептором может быть определена с использованием любого из разнообразных анализов и может выражаться разнообразными количественными величинами. Соответственно, в одном варианте осуществления, аффинность связывания выражается в виде величин Kd и отражает истинную аффинность связывания (например, с минимизированными эффектами авидности). Как правило и предпочтительно, аффинность связывания измеряется in vitro, либо в бесклеточной системе или в системе, ассоциированной с клетками. Как описано в данном документе более подробно, кратное различие в аффинности связывания может быть количественно определено с помощью соотношения величины моновалентной аффинности связывания гуманизированного антитела (например, в форме Fab) и величины моновалентной аффинности связывания эталонного/сравнительного антитела (например, в форме Fab) (например, мышиного антитела, содержащего донорные последовательности гипервариабельного участка), где величины аффинности связывания определяются при одинаковых условиях анализа. Таким образом, в одном варианте осуществления, кратное различие в аффинности связывания определяется как соотношение величин Kd гуманизированного антитела в форме Fab и указанного эталонного/сравнительного антитела Fab. Например, в одном варианте осуществления, если антитело по изобретению (A) имеет аффинность, которая представляет собой величину "в 3 раза ниже", чем аффинность эталонного антитела (M), затем, если величина Kd для A составляет 3×, то величина Kd для M будет составлять 1×, и соотношение Kd для A к Kd для M составит 3:1. Наоборот, в одном варианте осуществления, если антитело по изобретению (C) имеет аффинность, которая представляет собой величину "в 3 раза больше", чем аффинность эталонного антитела (R), затем, если величина Kd для C составляет 1×, то величина Kd для R будет составлять 3×, и соотношение Kd для C и Kd для R составит 1:3. Любой из ряда анализов, известных в данной области, включая те, что описаны в данном документе, может быть использован для получения измерений аффинности связывания, включая, например, анализ Biacore, радиоиммуноанализ (RIA) и ELISA.
Кроме того, величины Kd для антитела по изобретению могут изменяться в зависимости от условий конкретного используемого анализа. Например, в одном варианте осуществления, измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где Fab или антитело являются иммобилизованными, и измеряется связывание лиганда, т.е. фактора D, или, альтернативно, лиганд, т.е. фактор D, для Fab или антитела является иммобилизованным, и измеряется связывание Fab или антитела. В одном варианте осуществления измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где условия регенерации могут включать (1) 10мМ глицин или 4M MgCl2 при pH 1,5 и (2) значение pH, которое находится в интервале между 1 и 7,5, включая значения pH 1,5, pH 5,0, pH 6,0 и pH 7,2. В одном варианте осуществления измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где условия связывания могут включать (1) солевой раствор с буфером PBS или HEPES и (2) Tween-20, т.е. 0,1% Tween-20. В одном варианте осуществления измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где источник лиганда, т.е. фактора D, может быть получен из коммерчески доступных источников. В одном варианте осуществления измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где (1) Fab или антитело иммобилизованы, и измеряется связывание лиганда, т.е. фактора D, (2) условия регенерации включают 4M MgCl2 при pH 7,2 и (3) условия связывания включают солевой раствор с буфером HEPES, pH 7,2, содержащий 0,1% Tween-20. В одном варианте осуществления измерения аффинности связывания могут быть получены с помощью анализа, где (1) лиганд, т.e. фактор D, иммобилизован, и измеряется связывание Fab или антитела, (2) условия регенерации включают 10мМ глицин при pH 1,5 и (3) условия связывания включают буфер PBS.
Термины "клетка", "клеточная линия" и "культура клеток" включают потомство. Также понятно, что все потомство не может быть в точности идентичным по содержимому ДНК из-за намеренных или случайных мутаций. Также включен вариант потомства, которое имеет такую же функцию или биологическое свойство, какие имели место у исходно трансформированной клетки. "Клетки-хозяева", используемые в настоящем изобретении, как правило, представляют собой прокариотические или эукариотические клетки-хозяева.
Термин "вектор" означает ДНК-конструкцию, содержащую последовательность ДНК, которая функционально связана с подходящей контрольной последовательностью, способной воздействовать на экспрессию ДНК в подходящем хозяине. Такие контрольные последовательности включают промотор для воздействия на транскрипцию, необязательную последовательность оператора для контроля такой транскрипции, последовательность, кодирующую подходящие сайты связывания мРНК с рибосомой, и последовательности, которые контролируют терминацию транскрипции и трансляции. Вектор может представлять собой плазмиду, фаговую частицу или просто потенциальную геномную вставку. Трансформированный в подходящего хозяина вектор может реплицироваться и функционировать независимо от генома хозяина или может, в некоторых случаях, интегрироваться в сам геном. В настоящем описании "плазмида" и "вектор" иногда используются взаимозаменяемо, поскольку плазмида представляет собой наиболее используемую форму вектора. Однако подразумевается, что изобретение включает такие другие формы векторов, выполняющие эквивалентную функцию, которые являются, или становятся, известными в данной области.
Используемое в данном описании слово "метка" обозначает детектируемое соединение или композицию, которые могут быть конъюгированы непосредственно или косвенно с молекулой или белком, например, антителом. Метка может быть детектирована сама по себе (например, радиоизотопные метки или флуоресцентные метки) или, в случае ферментной метки, может катализировать химическое изменение соединения субстрата или композиции, которые могут быть детектированы.
Используемый в данном описании термин "твердая фаза" означает безводную форму, с которой может сцепляться антитело по настоящему изобретению. Примеры твердых фаз, охваченных данным описанием, включают твердые фазы, образованные частично или полностью из стекла (например, стекло с контролируемым размером пор), полисахаридов (например, агарозы), полиакриламидов, полистирола, поливинилового спирта и силиконов. В определенных вариантах осуществления, в зависимости от контекста, твердая фаза может включать лунку аналитического планшета; в других случаях она представляет собой колонку для очистки (например, колонку для аффинной хроматографии).
Получение АНТИТЕЛ
СЕЛЕКЦИЯ И ТРАНСФОРМАЦИЯ КЛЕТОК-ХОЗЯЕВ
Представленные в данном описании подходящие клетки-хозяева для клонирования или экспрессии ДНК в векторах представляют собой прокариотические, дрожжевые клетки или клетки высших эукариот. Подходящие для этих целей прокариоты включают как грамположительные, так и грамотрицательные организмы, например, энтеробактерии, такие как E. coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, Serratia и Shigella, а также Bacilli, Pseudomonas и Streptomyces. Предпочтительным хозяином для клонирования типа E. coli является E. coli 294 (ATCC 31,446), хотя другие штаммы, такие как E. coli B, E. coli X1776 (ATCC 31,537) и E. coli W3110 (ATCC 27,325) также являются подходящими. Эти примеры являются больше иллюстративными, чем ограничивающими.
Кроме прокариот, эукариотические микробы, такие как мицелиальные грибы или дрожжи, являются подходящими хозяевами для клонирования или экспрессии векторов, кодирующих антитело. Saccharomyces cerevisiae является наиболее широко используемым среди низших эукариотических микроорганизмов-хозяев. Однако ряд других родов, видов и штаммов широко доступен и используется в настоящем изобретении, например, Schizosaccharomyces pombe; Kluyveromyces; Candida; Thchoderma; Neurospora crassa; и мицелиальные грибы, такие как, например, Neurospora, Penicillium, Tolypocladium, и организмы-хозяева Aspergillus, такие как A. nidulans и A. niger.
Подходящие клетки-хозяева для экспрессии гликозилированных антител выделены из многоклеточных организмов. В принципе, любая культура высших эукариотических клеток является работоспособной, будь то культура клеток от позвоночного или беспозвоночного. Примеры клеток беспозвоночного включают клетки растений и насекомых, Luckow et al., Bio/Technology 6, 47-55 (1988); Miller et al., Genetic Engineering, Setlow et al. eds. Vol. 8, pp. 277-279 (Plenam publishing 1986); Mseda et al., Nature 315, 592-594 (1985). Были идентифицированы многочисленные бакуловирусные штаммы и варианты и соответствующие пермиссивные клетки-хозяева насекомых от хозяев, таких как Spodoptera frugiperda (гусеница), Aedes (комар), Drosophila melanogaster (плодовая мушка) и Bombyx mori. Разнообразные вирусные штаммы являются общедоступными, например, L-1 вариант Autographa californica NPV и штамм Bm-5 Bombyx mori NPV, и такие вирусы могут быть в данном описании использованы в качестве вируса согласно настоящему изобретению, конкретно, для трансфекции клеток Spodoptera frugiperda. Кроме того, культуры растительных клеток хлопка, кукурузы, картофеля, сои, петунии, томата и табака также могут быть использованы в качестве клеток-хозяев.
Клетки позвоночных и рост и размножение клеток позвоночных в культуре (тканевой культуре) является обычной процедурой. См. публикацию Tissue Culture, Academic Press, Kruse and Patterson, eds. (1973). Примерами подходящих для использования клеточных линий млекопитающих, выступающих в роли клеток-хозяев, являются клетки почек обезьяны; линия эмбриональных клеток почки; клетки почки новорожденного хомяка; клетки яичника китайского хомячка/-DHFR (CHO, Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); мышиные клетки Сертоли (Sertoli); клетки карциномы шейки матки человека (HELA); клетки почки собаки; клетки легкого человека; клетки печени человека; опухолевые клетки молочной железы; и клетки NSO.
Клетки-хозяева трансформируются вышеописанными векторами для продуцирования антитела и культивируются в подходящей питательной среде, модифицированной подходящим образом для индуцирования промоторов, селекции трансформантов или амплификации генов, кодирующих целевые последовательности.
Клетки-хозяева, используемые для продуцирования варианта антитела по настоящему изобретению, можно культивировать в разнообразных средах. Коммерчески доступные среды, такие как Ham F10 (Sigma), минимальная поддерживающая среда (MEM, Sigma), RPMI-1640 (Sigma) и модифицированная Дульбекко среда Игла (DMEM, Sigma), являются подходящими для культивирования клеток-хозяев. Кроме того, любая из сред, описанных в публикации Ham et al., Meth. Enzymol. 58: 44 (1979), Barnes et al., Anal. Biochem. 102: 255 (1980), патент США № 4767704; 4657866; 4560655; 5122469; 5712163; или 6048728, может быть использована в качестве культуральной среды для клеток-хозяев. Любая из этих сред может быть по необходимости снабжена гормонами и/или другими факторами роста (такими как инсулин, трансферрин или фактор роста эпидермиса), солями (такими как X-хлориды, где X представляет собой натрий, кальций, магний; и фосфаты), буферами (такими как HEPES), нуклеотидами (такими как аденозин и тимидин), антибиотиками (такими как лекарственное средство ГЕНТАМИЦИН.TM.), следовыми элементами (определенными как неорганические соединения, которые обычно присутствуют в конечной концентрации, которая находится в микромолярном диапазоне) и глюкозой или эквивалентным источником энергии. Любые другие необходимые добавки также включены в подходящих концентрациях, которые известны специалисту в данной области. Условия культивирования, такие как температура, pH и тому подобное, представляют собой условия, которые ранее использовались для клеток-хозяев, выбранных для экспрессии, и эти условия очевидны специалисту в данной области.
ОЧИСТКА АНТИТЕЛ
При использовании рекомбинантных методов антитело может продуцироваться внутриклеточно в периплазматическом пространстве или может непосредственно секретироваться в среду. Если вариант антитела продуцируется внутриклеточно, в качестве первой стадии может удаляться нерастворимый дебрис либо в виде клеток-хозяев, либо лизированных фрагментов путем центрифугирования или ультрафильтрации. В публикации Carter et al., Bio/Technology 10: 163-167 (1992) описана методика выделения антител, которые секретируются в периплазматическое пространство E. coli. В кратком изложении, клеточная масса размораживается в присутствии ацетата натрия (pH 3,5), EDTA и фенилметилсульфонилфторида (PMSF) в течение примерно 30 минут. Клеточный дебрис может быть удален центрифугированием. В случае, где вариант антитела секретируется в среду, супернатанты из таких экспрессирующих систем, как правило, сначала концентрируют с использованием коммерчески доступного фильтра для концентрации белка, например, установки для ультрафильтрации фирмы Amicon или Millipore Pellicon. Протеазный ингибитор, такой как PMSF, может быть включен на любой из вышеописанных стадий для ингибирования протеолиза, и антибиотики могут быть включены для предотвращения роста случайных загрязнений.
Композиция, содержащая антитела, полученная из клеток, может быть очищена с использованием, например, хроматографии с гидроксилапатитом, гель-электрофореза, диализа и аффинной хроматографии, причем аффинная хроматография является предпочтительным методом очистки. Пригодность белка A в качестве аффинного лиганда зависит от вида и изотипа любого иммуноглобулинового Fc-домена, который присутствует в варианте антитела. Белок A может быть использован для очистки антител на основе тяжелых цепей IgGI, IgG2 или IgG4 человека (Lindmark et al., J. Immunol Meth. 62: 1-13 (1983)). Белок G рекомендован для всех мышиных изотипов и для IgG3 человека (Guss et al., EMBO J. 5: 1567-1575 (1986)). Форма, к которой присоединяется аффинный лиганд, наиболее часто представляет собой агарозу, но другие формы также доступны. Механически стабильные формы, такие как стекло с контролируемым размером пор или поли(стиролдивинил)бензол, допускают более высокие скорости потока и меньшее время процессирования, чем те, что могут быть достигнуты с использованием агарозы. В случае, где вариант антитела включает домен CH3, для очистки используется смола Bakerbond ABXTM (J. T. Baker, Phillipsburg, N.J.). В зависимости от получаемого варианта антитела также доступны другие методы очистки белка, такие как фракционирование на ионообменной колонке, осаждение этанолом, обращенно-фазная ВЭЖХ, хроматография на силикагеле, хроматография на гепарин-СЕФАРОЗЕ™, хроматография на анионообменной или катионообменной смоле (такая как с использованием колонки с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусирование, SDS-PAGE и осаждение сульфатом аммония.
После любой предварительной стадии(й) очистки смесь, содержащая вариант интересующего антитела, и примеси могут быть подвергнуты хроматографии гидрофобного взаимодействия при низком pH с использованием буфера для элюирования, имеющего значение pH примерно 2,5-4,5, причем хроматографию предпочтительно осуществляют при низких концентрациях соли (например, примерно от 0-0,25M соли).
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
Терапевтические композиции, содержащие полипептид или антитело, могут быть получены для хранения в виде лиофилизованных композиций или водных растворов путем смешивания полипептида, имеющего целевую степень чистоты, с необязательными "фармацевтически приемлемыми" носителями, эксципиентами или стабилизаторами, обычно используемыми в данной области (все из которых обозначаются термином "эксципиенты"). Например, буферные агенты, стабилизирующие агенты, консерванты, изотонические агенты, неионные детергенты, антиоксиданты и другие разнообразные добавки. (См. публикацию Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th edition, A. Osol, Ed. (1980)). Такие добавки должны быть нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях.
Буферные агенты помогают поддерживать уровень pH в интервале, который приближен к физиологическим условиям. Они предпочтительно присутствуют в концентрации, которая находится в интервале примерно от 2 мМ до примерно 50 мМ. Подходящие буферные агенты для использования по настоящему изобретению включают как органические, так и неорганические кислоты, и их соли, такие как цитратные буферы (например, смесь мононатрия цитрата-динатрия цитрата, смесь лимонной кислоты-тринатрия цитрата, смесь лимонной кислоты-мононатрия цитрата и т.д.), сукцинатные буферы (например, смесь янтарной кислоты-мононатрия сукцината, смесь янтарной кислоты-натрия гидроксида, смесь янтарной кислоты-динатрия сукцината и т.д.), тартратные буферы (например, смесь винной кислоты-натрия тартрата, смесь винной кислоты-калия тартрата, смесь винной кислоты-натрия гидроксида и т.д.), фумаратные буферы (например, смесь фумаровой кислоты-мононатрия фумарата, смесь фумаровой кислоты-динатрия фумарата, смесь мононатрия фумарата-динатрия фумарата и т.д.), глюконатные буферы (например, смесь глюконовой кислоты-натрия глюконата, смесь глюконовой кислоты-натрия гидроксида, смесь глюконовой кислоты-калия глюконата, и т.д.), оксалатный буфер (например, смесь щавелевой кислоты-натрия оксалата, смесь щавелевой кислоты-натрия гидроксида, смесь щавелевой кислоты-калия оксалата и т.д.), лактатные буферы (например, смесь молочной кислоты-натрия лактата, смесь молочной кислоты-натрия гидроксида, смесь молочной кислоты-калия лактата и т.д.) и ацетатные буферы (например, смесь уксусной кислоты-натрия ацетата, смесь уксусной кислоты-натрия гидроксида и т.д.). Дополнительно, можно отметить фосфатные буферы, гистидиновые буферы и соли триметиламина, такие как Tris.
Для задержки микробного роста могут быть добавлены консерванты в количествах, которые находятся в интервале, составляющем 0,2%-1% (масс./об.). Подходящие консерванты для использования по настоящему изобретению включают фенол, бензиловый спирт, метакрезол, метилпарабен, пропилпарабен, октадецилдиметилбензиламмония хлорид, бензалкония галогениды (например, хлорид, бромид, йодид), гексаметония хлорид, алкилпарабены, такие как матилпарабен или пропилпарабен, катехин, резорцин, циклогексанол и 3-пентанол.
Изотонические агенты, иногда известные как "стабилизаторы", могут быть добавлены для гарантии изотоничности жидких композиций по настоящему изобретению и включают многоатомные сахарные спирты, предпочтительно трехатомные или высшие сахарные спирты, такие как глицерин, эритрит, арабит, ксилит, сорбит и маннит.
Стабилизаторы обозначают широкий спектр эксципиентов, функциональный интервал которых может представлять собой от наполнителя до добавки, которая солюбилизирует терапевтический агент или помогает предотвратить денатурацию или адгезию на стенке контейнера. Типичные стабилизаторы могут представлять собой многоатомные сахарные спирты (перечисленные выше); аминокислоты, такие как аргинин, лизин, глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аланин, орнитин, L-лейцин, 2-фенилаланин, глутаминовая кислота, треонин и т.д., органические сахара или сахарные спирты, такие как лактоза, трегалоза, стахиоза, маннит, сорбит, ксилит, рибит, миоинизит, галактит, глицерин и тому подобное, включая циклиты, такие как инозит; полиэтиленгликоль; полимеры аминокислот; серосодержащие восстанавливающие агенты, такие как мочевина, глутатион, тиоктовая кислота, натрия тиогликолят, тиоглицерин, альфа-монотиоглицерин и натрия тиосульфат; низкомолекулярные полипептиды (т.e. <10 остатков); белки, такие как человеческий сывороточный альбумин, бычий сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон, моносахариды, такие как ксилоза, манноза, фруктоза, глюкоза; дисахариды, такие как лактоза, мальтоза, сахароза, и трисахариды, такие как раффиноза; полисахариды, такие как декстран. Стабилизаторы могут присутствовать в количестве, которое находится в интервале от 0,1 до 10000 весовых частей на часть веса активного белка.
Неионные поверхностно-активные вещества или детергенты (также известные как "увлажняющие агенты") могут быть добавлены для того, чтобы помочь солюбилизировать терапевтический агент, а также чтобы защитить терапевтический белок против агрегации, индуцированной при встряхивании, которые допускают воздействие на композицию напряжения сдвига поверхностного слоя, не вызывая при этом денатурации белка. Подходящие неионные поверхностно-активные вещества включают полисорбаты (20, 80 и т.д.), полоксамеры (184, 188 и т.д.), плюроник.RTM. полиолы, моноэфиры полиоксиэтиленсорбитана (Tween.RTM.-20, Tween.RTM.-80 и т.д.). Неионные поверхностно-активные вещества могут присутствовать в количестве, которое находится в интервале, составляющем примерно от 0,05 мг/мл до 1 мг/мл, предпочтительно примерно от 0,07 мг/мл до 0,2 мг/мл.
Дополнительные разнообразные эксципиенты включают наполнители (например, крахмал), хелатирующие агенты (например, EDTA), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, метионин, витамин E) и сорастворители. Композиция, представленная в настоящем описании, может также по необходимости содержать более одного активного соединения для лечения конкретного симптома, предпочтительно, соединения с комплементарными активностями, которые не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Например, может быть целесообразным дополнительно предоставлять иммуноподавляющий агент. Такие молекулы подходящим образом представлены в комбинации в количествах, которые эффективны для предназначенной цели. Активные ингредиенты также могут быть заключены в микрокапсулу, полученную, например, методами коацервации или полимеризацией на границе фаз, например, в гидроксиметилцеллюлозную или желатиновую микрокапсулу и в поли(метилметакрилатную) капсулу, соответственно, в коллоидных системах доставки лекарственного средства (например, липосомах, альбуминовых микросферах, микроэмульсиях, наночастицах и нанокапсулах) или в макроэмульсиях. Такие методы описаны в публикации Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th edition, A. Osal. Ed. (1980).
Композиции, используемые для введения in vivo, должны быть стерильными. Это легко выполнимо, например, с помощью фильтрации через стерильные фильтрационные мембраны. Могут быть получены препараты с длительным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с длительным высвобождением включают полупроницаемые формы твердых гидрофобных полимеров, содержащие вариант антитела, которые представлены в форме штампованных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры форм с длительным высвобождением включают сложные полиэфиы, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды (патент США № 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и этил-L-глутамата, недеградируемый сополимер этилена и винилацетата, деградируемые сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты и лейпролида ацетата), и поли-D-(-)-3-оксимасляная кислота. В то время как полимеры, такие как сополимер этилена и винилацетата и сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты, дают возможность высвобождения молекул в течение времени до 100 дней, определенные гидрогели высвобождают белки за более короткие периоды времени. Когда инкапсулированные антитела сохраняются в организме в течение продолжительного времени, они могут денатурировать или агрегировать в результате воздействия влажности при 37°C, приводя к потере биологической активности и возможным изменениям в иммуногенности. Могут быть разработаны рациональные стратегии для стабилизации в зависимости от вовлеченных механизмов. Например, если обнаружено, что механизм агрегации представляет собой образование внутримолекулярной связи S-S за счет тио-дисульфидного взаимообмена, то стабилизации можно достичь путем модификации остатков сульфгидрила, лиофилизации из кислых растворов, контроля содержания влажности, использования подходящих добавок и разработки композиций, содержащих специфическую полимерную форму.
Количество терапевтического полипептида, антитела или его фрагмента, которое будет эффективно для лечения конкретного нарушения или состояния, будет зависеть от природы нарушения или состояния и может быть определено стандартными клиническими методами. Где возможно, целесообразно перед тестированием на людях определять кривую зависимости дозы-реакции фармацевтической композиции по изобретению сначала in vitro, а затем в подходящих системах животных-моделей.
В предпочтительном варианте осуществления водный раствор терапевтического полипептида, антитела или его фрагмента вводят путем подкожной инъекции. Каждая доза может находиться в интервале, составляющем примерно от 0,5 мкг до примерно 50 мкг на килограмм веса тела или, более предпочтительно, примерно от 3 мкг до примерно 30 мкг на килограмм веса тел.
Режим дозирования для подкожного введения может изменяться от введения раз в месяц до ежедневного введения в зависимости от ряда клинических факторов, включающих тип заболевания, тяжесть заболевания и чувствительность субъекта к терапевтическому агенту.
ПРИМЕНЕНИЯ ГУМАНИЗИРОВАННЫХ АНТИТЕЛ
Гуманизированные антитела по настоящему изобретению могут быть использованы в диагностических анализах, например, для детекции экспрессии интересующей мишени в специфических клетках, тканях или сыворотке. Для диагностических применений вариант антитела обычно метят детектируемым компонентом. Многочисленные метки являются доступными. Методы количественной оценки изменения флуоресценции описаны выше. Хемилюминесцентный субстрат становится электронно-возбужденным за счет химической реакции и может затем испускать свет, который может быть измерен (например, с использованием хемилюминометра), или передает энергию флуоресцентному акцептору. Примеры ферментных меток включают люциферазы (например, люциферазу светляка и бактериальную люциферазу; патент США № 4737456), люциферин, 2,3-дигидрофталазиндионы, малатдегидрогеназу, уреазу, пероксидазу, такую как пероксидаза хрена (HRPO), щелочную фосфатазу, бета-галактозидазу, глюкоамилазу, лизоцим, оксидазы сахаридов (например, глюкозоксидазу, галактозоксидазу и глюкоза-6-фосфатдегидрогеназу), гетероциклические оксидазы (такие как уриказа и ксантиноксидаза), лактопероксидазу, микропероксидазу и тому подобное. Методы конъюгации ферментов с антителами описаны в публикации O’Sullivan et al., Methods for the Preparation of Enzyme-Antibody Conjugates for Use in Enzyme Immunoassay, in Methods in Enzym. (Ed. J. Langone & H. Van Vunakis), Academic press, New York, 73: 147-166 (1981).
Иногда метка опосредованно конъюгируется с вариантом антитела. Специалисту в данной области известны разнообразные методы для достижения этой цели. Например, вариант антитела может быть конъюгирован с биотином, и любая из трех широких категорий меток, описанных выше, может быть конъюгирована с авидином или наоборот. Биотин связывается селективно с авидином и, таким образом, метка может быть конъюгирована с вариантом антитела таким опосредованным способом. Альтернативно, для достижения опосредованной конъюгации метки с вариантом антитела, вариант антитела конъюгируют с коротким гаптеном (например, диглоксином), и один из различных типов меток, описанных выше, конъюгируют с вариантом антитела к гаптену (например антителом к диглоксину). Таким образом, может быть достигнута опосредованная конъюгация метки с вариантом антитела.
В другом варианте осуществления изобретения нет необходимости в мечении варианта антитела, и его присутствие можно детектировать с использованием меченого антитела, которое связывается с вариантом антитела.
Антитела по настоящему изобретению могут быть использованы в любом известном методе анализа, таком как анализы конкурентного связывания, прямой и косвенный сэндвич-анализы и анализы иммунопреципитации. Zola, Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques, pp. 147-158 (CRC Press, Inc. 1987).
Анализы конкурентного связывания основаны на способности меченого стандарта конкурировать с тестируемым образцом за связывание с ограниченным количеством варианта антитела. Количество мишени в тестируемом образце обратно пропорционально количеству стандарта, который связывается с антителами. Для облегчения определения количества стандарта, который становится связанным, антитела, как правило, переводят в нерастворимую форму перед или после анализа конкуренции. В результате, стандарт и тестируемый образец, которые связаны с антителами, могут быть легко отделены от стандарта и тестируемого образца, которые остались не связанными.
Сэндвич-анализ включает использование двух антител, каждое из которых способно к связыванию с различными иммуногенными частями или эпитопами, или детектируемыми белками. В сэндвич-анализе тестируемый образец, подлежащий анализу, связывается с первым антителом, которое иммобилизовано на твердой подложке, и затем второе антитело связывается с тестируемым образцом, таким образом, образуя нерастворимый комплекс из трех частей. См., например, патент США № 4376110. Второе антитело может быть само мечено детектируемым компонентом (прямые сэндвич-анализы), или может быть измерено с использованием антитела к иммуноглобулину, которое является меченным детектируемым компонентом (косвенный сэндвич-анализ). Например, один тип сэндвич-анализа представляет собой анализ ELISA, в случае которого детектируемым компонентом является фермент.
Для иммуногистохимии образец опухоли может быть свежим или замороженным, или может быть помещен в парафин и фиксирован консервантом, таким как, например, формалин.
Антитела также могут быть использованы для in vivo диагностических анализов. Как правило, вариант антитела является меченным радионуклеотидом (таким как 111In, 99Tc, 14C, 131I, 3H, 32P или 35S) так, чтобы опухоль можно было локализовать с использованием иммуносцинтиграфии. Например, высокоаффинное антитело к IgE по настоящему изобретению можно использовать для детекции количества IgE, присутствующего, например, в легких пациентов-астматиков.
Антитело по настоящему изобретению может быть представлено в наборе, т.е. упакованной комбинации реагентов в определенных количествах вместе с инструкциями по проведению диагностического анализа. В случае, где вариант антитела является меченным ферментом, набор может включать субстраты и кофакторы, необходимые для фермента (например, предшественник субстрата, который обеспечивает получение детектируемого хромофора или флуорофора). Кроме того, могут быть включены другие добавки, такие как стабилизаторы, буферы (например, блокирующий буфер или лизирующий буфер) и тому подобное. Относительные количества разнообразных реагентов могут широко варьироваться с получением концентраций в растворе реагентов, которые по существу оптимизируют чувствительность анализа. Конкретно, реагенты могут быть представлены в виде сухих порошков, обычно лиофилизованных, включающих эксципиенты, которые при растворении обеспечивают получение раствора реагентов, имеющего подходящую концентрацию.
IN VIVO-ПРИМЕНЕНИЯ АНТИТЕЛА
Предполагается, что антитела по настоящему изобретению можно применять для лечения млекопитающего. В одном варианте осуществления антитело вводят отличному от человека млекопитающему в целях получения, например, доклинических данных. Типичные отличные от человека млекопитающие, подвергаемые лечению, включают отличных от человека приматов, собак, кошек, грызунов и других млекопитающих, для которых осуществляют доклинические исследования. Такие млекопитающие могут представлять собой признанных животных моделей для заболевания, подлежащего лечению с помощью антитела, или могут использоваться для исследования токсичности интересующего антитела. В каждом из этих вариантов осуществления исследования повышения дозы можно осуществлять на млекопитающем.
Антитело или полипептид вводят любыми подходящими средствами, включающими парентеральное введение, подкожное, внутрибрюшинное, внутрилегочное и интраназальное, и, если целесообразно для местного иммуноподавляющего лечения, введение внутрь пораженных тканей. Парентеральные инфузии включают внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное или подкожное введение. Кроме того, вариант антитела вводят подходящим образом путем импульсной инфузии, конкретно, с уменьшением доз варианта антитела. Предпочтительно, дозирование осуществляют путем инъекций, наиболее предпочтительно, путем внутривенных или подкожных инъекций, зависящих частично от того, является ли введение кратким или продолжительным.
Предотвращение или лечение заболевания, подходящее дозирование антитела или полипептида будут зависеть от типа заболевания, подлежащего лечению, тяжести и стадии заболевания, от того, водится ли вариант антитела в профилактических целях или в терапевтических целях, от предыдущей терапии, от клинической истории пациента и реакции на антитело, и от выбора лечащего врача.
В зависимости от типа и тяжести заболевания доза, составляющая примерно от 0,1 мг/кг до 150 мг/кг (например, 0,1-20 мг/кг) антитела, представляет собой исходную кандидатную дозу для введения пациенту, либо, например, путем одного или более отдельных введений, либо путем продолжительной инфузии. Обычная ежедневная доза может находиться в интервале, составляющем примерно от 1 мг/кг до 100 мг/кг или более, в зависимости от факторов, указанных выше. Для повторных введений в течение нескольких дней или более, в зависимости от состояния, лечение продолжается до желательного подавления наблюдаемых симптомов заболевания. Однако можно применять и другие режимы дозирования. Мониторинг прогресса этой терапии легко осуществляется подходящими методами и анализами. Обычный режим дозирования описан в WO 94/04188.
Композиции, содержащие антитело, могут быть составлены в лекарственную форму, разделены на дозы и введены способом, соответствующим надлежащей медицинской практике. Факторы для обсуждения в этом контексте включают конкретное нарушение, подвергнутое лечению, конкретное млекопитающее, подвергнутое лечению, клиническое состояние индивидуального пациента, причину нарушения, место доставки агента, способ введения, схему введения и другие факторы, известные клиницистам. "Терапевтически эффективное количество" антитела для введения будет регулироваться такими соображениями и является минимальным количеством, необходимым пациенту для предотвращения, улучшения или лечения заболевания или нарушения. В этом нет необходимости, но антитело необязательно включено в состав лекарственной формы с одним или более агентами, в настоящее время используемыми для предотвращения или лечения рассматриваемого нарушения. Эффективное количество таких других агентов зависит от количества антитела, присутствующего в композиции, типа нарушения или лечения и других факторов, обсуждаемых выше. Они как правило, используются в таких же дозах и вводятся такими же путями, какие использовались выше, или в количестве, составляющем примерно от 1 до 99% от ранее используемых доз.
Антитела по настоящему изобретению, которые распознают фактор D в качестве их мишени, могут применяться для лечения опосредованных системой комплемента нарушений. Эти нарушения ассоциированы с избыточной или неконтролируемой активацией системы комплемента. Они включают: активацию системы комплемента во время операций искусственного кровообращения; активацию системы комплемента по причине ишемии-реперфузии после острого инфаркта миокарда, аневризмы, инсульта, геморрагического шока, повреждения с размозжением тканей, полиорганной недостаточности, гиповолемического шока и кишечной ишемии. Эти нарушения также могут включать заболевание или состояние, ассоциированное с воспалительным состоянием, таким как тяжелые ожоги, эндотоксемия, септический шок, синдром нарушения дыхания у взрослых, гемодиализ; анафилактический шок, тяжелое астматическое состояние, ангиоэдема, болезнь Крона, серповидно-клеточная анемия, постстрептококковый гломерулонефрит и панкреатит. Нарушение может быть результатом побочного действия лекарственного средства, аллергии на лекарственное средство, индуцированного с помощью IL-2 синдрома просачивания из сосудов или аллергии на рентгеноконтрастные средства. Нарушение также включает аутоиммунное заболевание, такое как системная красная волчанка, миастения гравис, ревматоидный артрит, болезнь Альцгеймера и рассеянный склероз. Активация системы комплемента также ассоциирована с отторжением трансплантата. Недавно было показано наличие существенной корреляции между активацией системы комплемента и глазными заболеваниями, такими как возрастная дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры предлагаются с целью иллюстрации, но не с целью ограничения.
Пример 1: Гуманизация мышиного антитела MAb 166-32 к фактору D
Последовательности вариабельного участка тяжелой цепи (VH) и вариабельного участка легкой цепи (VL) мышиного антитела mAb 166-32 сравнивали с зародышевыми последовательностями человеческого антитела, представленными в общедоступных базах данных. Использовали несколько критериев при выборе матрицы, как описано на стадии 1 выше, включая полную длину, подобные положения участков CDR внутри каркасного участка, полную гомологию, размер участка CDR и т.д. Все из этих критериев, взятые вместе, обеспечили результат для выбора оптимальной человеческой матрицы, как показано путем сравнения последовательностей между последовательностями тяжелой и легкой цепи антитела 166-32 MAb и соответствующими последовательностями человеческой матрицы, как изображено на фиг.3 и 4.
В этом случае, для создания этого антитела использовали более чем одну матрицу человеческого каркасного участка. Человеческая матрица, выбранная для цепи VH, представляла собой комбинацию VI-4.1 b+ (7-04.1 локус)(# X62110)(семейство VH7) и JH4d (см. фиг.3). Человеческая матрица, выбранная для цепи VL, представляла собой комбинацию DPK4 (семейство VK I), объединенную с JK2 (см. фиг.4).
После выбора матрицы конструировали Fab-библиотеку с помощью синтеза ДНК и перекрывающей реакции ПЦР. Библиотека состояла из синтезированных участков MAb 166-32 CDR, синтезированных с соответствующими выбранными человеческими матрицами. Перекрывающие нуклеотиды, кодирующие частичные последовательности VH и VL были синтезированы с размером в интервале, составляющем примерно 63-76 нуклеотидов с перекрыванием в 18-21 нуклеотид. Конструировали векторы, экспрессирующие библиотеку гуманизированных Fab против антигена в виде фактора D, и трансформировали в клетки E. coli DH10B, затем сажали на бактериальный газон XL-1B.
Качество библиотеки оценивали по размеру (ряд независимых клонов) и разнообразию (распределение мутаций). Индивидуальные клоны с двойной вставкой обеих цепей, тяжелой и легкой, составили примерно 14 из 20 определенных последовательностей. Мутации качания в области каркасного участка были равномерно распределены.
ПЦР-амплификацию генов VL и VH осуществляли с использованием биотинилированного прямого праймера, содержащего специфичную последовательность для каркасного участка FR1, и выступающая последовательность отжигается с концом лидерной последовательности (генIII) и обратным праймером из консервативного константного участка (CK или CH1) при стандартных условиях ПЦР. ПЦР-продукт очищали с помощью электрофореза на агарозном геле или с помощью коммерческого набора реагентов для очистки ПЦР-продуктов, чтобы удалить не введенные биотинилированные праймеры и неспецифичные продукты ПЦР.
ПРИМЕР 2: Скрининг библиотеки
Анализ с использованием фильтра, содержащего ловушку, (Capture Filter Lift) использовали для первичного скрининга. Действительный объем скрининга был более чем в три раза больше, чем теоретический размер библиотеки. Кандидаты дополнительно скринировали с помощью анализа ELISA одной точки. Лучшие связывающие агенты дополнительно подтверждали прямым антигенным титрованием с использованием фактора D на основе концентрации Fab.
Скрининг с использованием ловушки (Capture lift)
Анализ с использованием фильтра, содержащего ловушку, (Capture Filter Lift) использовали для первичного скрининга на связывание Fab с фактором D. Фаг с высоким титром высевали и инкубировали при 37°C до момента использования (примерно 6-8 ч). Козьи антитела к каппа-цепи человека разводили до 10 мкг/мл в 10 мл PBST; Нитроцеллюлозные фильтры для переноса и роста бляшек получали согласно стандартным процедурам переноса и роста бляшек и затем погружали в 10 мл блокирующего буфера на 2 часа на шейкере. Фильтры промывали 3× с помощью PBST. Фильтры применяли для газона бляшек и инкубировали при комнатной температуре приблизительно в течение 15-24 часов. Фильтры затем удаляли из планшетов и промывали 3× с помощью TBST.
Фактор D (50 мкг/мл) разводили в PBST до 0,1 мкг/мл и добавляли по 4мл на фильтр. Фильтры инкубировали в растворе в течение 2 часов на шейкере при комнатной температуре с последующим промыванием 3×, каждое по 5 минут. Разведенное антитело 166-222-HRP (1:10000 в PBST) добавляли до конечного объема, составляющего 4 мл на фильтр, и фильтры инкубировали в течение 1 часа на шейкере. Фильтры промывали 4×. Фильтры сушили и затем погружали в TMB-субстрат с последующим погружением в воду для остановки реакции. Идентифицировали позитивные клоны.
ПРИМЕР 3: Скрининг с использованием ELISA одной точки
Анализ ELISA одной точки использовали для вторичного скрининга. На планшеты lmmulon II наносили покрытие в виде козьего антитела к Fab человека (1:12000, 50 мкл/на лунку) в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день планшеты промывали 4× с использованием машины для промывания планшетов. Блокирующий буфер добавляли в объеме 100 мкл на лунку и планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем планшеты промывали 4×.
Каждое антитело Fab, которое следует подвергнуть скринингу, добавляли в объеме 50 мкл на лунку (либо из 15 мл периплазматического препарата или из супернатанта) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали 4× с последующим добавлением 50 мкл/на лунку биотинилированного фактора D в концентрации 0,01 мкг/мл. Планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре и затем промывали 4×. Добавляли стрептавидин-HRP (1:10000 в PBST) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали 5× и затем проявляли путем добавления TMB-субстрата в количестве 50 мкл/на лунку. Стоп-буфер добавляли в объеме 50 мкл, когда сигнал проявлялся надлежащим образом (10-45 мин), и планшеты считывали при 450 нм.
Пример 4: Секвенирование клонов гуманизированных антител к фактору D
Секвенировали шестнадцать гуманизированных клонов с надлежащей аффинностью связывания с фактором D человека (см. таблицу 1). Среди них, положение 2 (100% человеческий участок) и положение 49 (100% мышиный участок) в легкой цепи, и положение 93 (100% мышиный участок) в тяжелой цепи представляют собой высококонсервативные участки, что указывает на их важность в поддержании способности связывания антитела.
Таблица 1 | |||||||||||||
Анализ аминокислотных последовательностей гуманизированных клонов из гуманизированной библиотеки | |||||||||||||
VK | 2 | 4 | 13 | 43 | 49 | 64 | 69 | VH | 2 | 9 | 38 | 93 | 97 |
Мышь | T | V | M | P | S | S | A | I | P | K | T | E | |
Человек | I | M | A | V | Y | G | T | V | S | R | V | A | |
7 | I | M | M | V | S | S | T | I | P | K | V | E | |
30 | I | V | A | V | S | S | A | V | P | K | T | E | |
45 | I | V | M | V | S | G | A | I | S | R | V | E | |
46 | I | V | M | V | S | S | T | I | S | R | V | E | |
47 | I | V | A | V | S | S | T | I | S | R | V | E | |
48 | I | V | M | V | S | S | T | V | P | R | V | E | |
50 | I | V | M | V | S | G | A | V | P | R | T | E | |
51 | I | M | M | V | S | G | T | I | S | K | T | E | |
56 | I | V | A | V | S | G | T | V | P | K | T | E | |
57 | I | M | M | V | S | S | A | V | S | R | V | E | |
58 | I | V | M | P | S | G | A | V | P | R | V | E | |
59 | I | V | A | P | S | S | T | V | P | K | V | E | |
60 | I | V | M | P | S | G | T | V | P | R | V | E | |
63 | I | V | M | V | S | S | T | V | S | R | T | E | |
74 | I | V | M | V | S | S | T | I | S | R | V | E |
Клон #56 оценивали с помощью анализа BIAcore и анализа гемолитического ингибирования. Анализ BIAcore показал, что клон #56 обладает аффинностью к фактору D человека, подобной аффинности химерного антитела 166-32 Fab (см. таблицу 4). Анализ гемолитического ингибирования показал, что клон #56 является чуть более активным, чем химерное антитело 166-32 Fab (см. фиг.6). Клон #56 содержит два мышиных аминокислотных остатка в каркасном участке легкой цепи и четыре мышиных аминокислотных остатка в тяжелой цепи, (см. таблицу 1). На основе этих результатов проводили дополнительную оптимизацию.
Таблица 2 Анализ аминокислотной последовательности оптимизированных антител из гуманизированной/CDR3-оптимизированной библиотеки |
|||||||||||||||
VK положения | 2 | 4 | 13 | 43 | 49 | 64 | 69 | CDR-L3 | 92 | 93 | 97 | ||||
166-32 | T | V | M | P | S | S | A | D | N | T | |||||
Человеческая матрица | I | M | A | V | Y | G | T | ||||||||
104 | I | V | M | P | S | S | T | D | S | T | |||||
109 | I | V | A | V | S | G | A | M | N | T | |||||
111 | I | V | A | V | S | G | T | D | S | T | |||||
112 | I | V | A | V | S | G | T | D | S | T | |||||
114 | I | V | A | V | S | G | T | D | C | T | |||||
121 | I | V | A | V | S | S | A | D | N | T | |||||
125 | I | V | A | P | S | S | T | D | N | T | |||||
130 | I | V | A | V | S | S | T | D | N | S | |||||
VH Положения | 2 | 9 | 38 | 93 | 97 | CDR-H3 | 98 | 99 | 100 | ||||||
166-32 | I | P | K | T | E | V | D | N | |||||||
Человеческая Матрица | V | S | R | V | A | ||||||||||
104 | V | S | R | V | E | V | D | T | |||||||
109 | V | S | R | V | E | V | N | N | |||||||
111 | V | S | R | V | E | V | N | N | |||||||
112 | V | S | R | V | E | V | N | N | |||||||
114 | V | S | K | V | E | V | N | N | |||||||
121 | I | S | R | V | E | V | N | T | |||||||
125 | V | S | R | V | E | P | D | N | |||||||
130 | V | S | R | V | E | V | D | H |
Клоны #111 и #114 характеризовали с помощью анализа BIAcore (см. таблицу 4). Клоны #104, #111, #114 и #130 также характеризовали с помощью анализа гемолитического ингибирования (см. фиг.6). Эти клоны обладали более высокими значениями аффинности связывания, чем химерное антитело 166-32, и были более активными, чем химерное антитело Fab в ингибировании альтернативного пути, как показано анализом гемолитического ингибирования (фиг.7). Клон #111 содержит те же мышиные аминокислотные остатки в легкой цепи (положение 4 и 49), что и клон #56. Он также содержит консервативный мышиный аминокислотный остаток в положении 97 тяжелой цепи, какой также обнаружен в клоне #56. Существует одна полезная мутация в участке CDR3 обеих цепей, легкой и тяжелой, в клоне #111. На основании результатов, полученных из скрининга двух независимых библиотек (гуманизированной библиотеки и гуманизированной/CDR3-оптимизированной библиотеки), обнаружено, что лучшие клоны содержат подобные консенсусные аминокислотные остатки.
Для дополнительной оптимизации аффинности клона #111 сконструировали библиотеку антител путем введения единичных мутаций одновременно в участки CDR-H1 и CDR-L2. В кратком изложении, способ сайт-направленного мутагенеза использовали для конструирования таких библиотек путем отжига олигонуклеотидов, кодирующих единичные мутации, на матрице клона #111. В целом были секвенированы 24 клона с очень высокой аффинностью к фактору D. Среди этих 24 клонов было идентифицировано несколько новых полезных мутаций. Клоны #250, #315, #345 и #416 были выбраны для анализа BIAcore (см. таблицу 4). Данные, полученные с помощью анализа BIAcore, показали, что эти клоны обладают более высокой аффинностью к фактору D человека, чем исходный клон #111. Клоны #250, #315, #348 и #416 также тестировали с помощью анализа гемолитического ингибирования (см. фиг.6) и ингибирования альтернативного пути (фиг.7).
Пример 5: Анализ гемолиза AP
Биологическую функцию гуманизирванных клонов определяли с использованием анализа гемолитического ингибирования и анализа BIAcore (см. пример 6 ниже). Гемолитический анализ осуществляли согласно следующей методике. 20 мкл разведенных 1:20 кроличьих эритроцитов (RRBC) (0,5 мл + 9,5 мл буфера GVB/Mg-EGTA) в 20 мл солевого раствора (0,9% NaCl) с разведением, составляющим приблизительно 1:2×104, считывали с помощью прибора Coulter Counter. Концентрацию клеток затем доводили до концентрации примерно 2-5×104 клеток/мл. В каждый планшет добавляли примерно 500×106 RRBC/на планшет или примерно 1 мл RRBC/на планшет (500×106/2-5×104).
Клетки разводили в 6 мл буфера GVB/Mg-EGTA/на планшет, смешивали и промывали 3 раза путем центрифугирования при 1360 об/мин в течение 4 минут при 4°C. Осадок RRBC суспендировали в 3 мл буфера GVB/Mg-EGTA/на планшет и держали на льду.
Человеческую сыворотку, замороженную до -80°C, размораживали непосредственно перед использованием. Сыворотку разводили до концентрации, составляющей 20% сыворотки в буфере GVB/Mg-EGTA, 5 мл/на планшет (до конечной концентрации 10%) и держали на льду.
Таблица 3 | ||||||||
1 | 2 | 3 | S | SB | ||||
GVB/Mg-EGTA: | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | |||
mAb: 50мкл-смесь | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | - | - | |||
20% человеческая сыворотка | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | 50 мкл | |||
Встряхнуть 30 сек при 5-6°C, затем держать при комнатной температуре в течение 7 мин | ||||||||
Кроличьи RBC | 30 мкл | 30 мкл | 30 мкл | 30 мкл |
Образцы встряхивали в течение 30 сек при 5-6°C и затем в течение 40 минут при 37°C. Образцы охлаждали до 5-6°C во время встряхивания и затем центрифугировали при 2000 об/мин в течение 3 мин при 4°C. Приблизительно 80 мкл супернатанта переносили на дно 96-луночного планшета и считывали OD-величину при 590 нм с использованием стандартного прибора для считывания планшетов. Процент ингибирования рассчитывали следующим образом: % ингибирования = {[(S-SB)-(U-SB)]/(S-SB)}×100%. (U = образец 1, 2 или 3 (колонки 1, 2 или 3 таблицы 3, соответственно).
Пример 6: Кинетический анализ антитела Fab к фактору D человека с помощью анализа BiaCore
Иммобилизация - Фактор D человека (Advanced Research Inc, 0,1 мг/мл) непосредственно иммобилизовали на чип CM5 (BiaCore) с использованием метода аминокислотной конденсации. Методика кратко описывается следующим образом: (1) Непрерывный поток (PBS) составляет 5 мкл/мин. (2) Инъекция 35 мкл EDC/NHS (1:1). (3) Инъекция 35 мкл фактора D человека в ацетатном буфере, pH 4,5. (4) Блокирование активной группы путем инъекции 35 мкл этиламина. (5) Очистка поверхности с помощью 5 мкл 10 мМ глицина pH 1,5. Уровень иммобилизации лиганда (фактора D человека) составляет примерно 1000 RU. Тестовым прогоном с использованием α-фактора D человека (huDi, 40 мкл, 31,5 мкг/л) получили относительный результат, составляющий примерно 900 RU.
Кинетический анализ - Все антитела Fab к фактору D человека разводили в буфере PBS. Каждый образец получали с серией концентраций: 12,5 нМ, 25 нМ, 50 нМ, 75 нМ, 100 нМ, 125 нМ и 150 нМ, с помощью 40 мкл импульсной инъекции с высокой скоростью обегания. Регенерацию выполняли путем применения импульсной инъекции 5 мкл 10 мМ глицина при рН 1,5. Кинетические параметры получали путем подбора следов связывания Fab к модели связывания 1:1 при условиях кинетики псевдо-первого порядка с использованием программы BIAvaluation версии 3.0. Результаты представлены в таблице 2 ниже. Все данные получены с помощью всеобъемлющего анализа подбора.
Таблица 4 Результаты анализа BIAcore |
|||
Fab-клон | ka (M-1s-1) | kd (s-1) | Kd (M) |
Клон 315 антитела Fab к фактору D | 7,1×105 | 2,7×10-4 | 3,7×10-10 |
Клон 416 антитела Fab к фактору D | 8,2×105 | 1,8×10-4 | 3,3×10-10 |
Клон 345 антитела Fab к фактору D | 6,8×105 | 3,5×10-4 | 5,1×10-10 |
Клон 250 антитела Fab к фактору D | 5,7×105 | 1,9×10-4 | 3,3×10-10 |
Клон 56 антитела Fab к фактору D | 3,6×105 | 9,8×10-4 | 2,7×10-9 |
Химерное антитело | 4,4×105 | 1,2×10-3 | 2,7×10-9 |
Клон 111 антитела Fab к фактору D | 3,3×105 | 3,7×10-4 | 1,14×10-9 |
Специалисты в данной области смогут распознать, или они смогут обнаружить множество эквивалентов определенным вариантам осуществления описанного здесь изобретения с использованием не более чем обычных экспериментов. Подразумевается, что такие эквиваленты охвачены следующими пунктами формулы изобретения.
Claims (20)
1. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие:
(i) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 5, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 6;
(ii) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 7, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 8;
(iii) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 9, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 10; или
(iv) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 11, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 12.
2. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 5, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 6.
3. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 7, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 8.
4. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 9, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 10.
5. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 11, и вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность с по меньшей мере 97% идентичности с SEQ ID NO: 12.
6. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1 или 3, содержащие вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, в котором аминокислота в положении 104 последовательности SEQ ID NO: 7 представляет собой валин или лейцин.
7. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-6, где идентичность последовательности составляет по меньшей мере 98%.
8. Антитело к фактору D или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-6, где идентичность последовательности составляет по меньшей мере 99%.
9. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-8.
10. Вектор экспрессии, включающий нуклеиновую кислоту по п. 9.
11. Клетка-хозяин для продуцирования антитела к фактору D или его антигенсвязывающего фрагмента, включающая вектор по п. 10.
12. Композиция для лечения нарушений, ассоциированных с избыточной или неконтролируемой активацией системы комплемента, включающая эффективное количество антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-8.
13. Применение композиции, содержащей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-8 для лечения нарушений, опосредованных системой комплемента, где нарушение представляет собой глазное заболевание, такое как возрастная дегенерация желтого пятна или диабетическая ретинопатия.
14. Способ получения антитела к фактору D или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий:
(i) культивирование клетки-хозяина по п. 11 в среде; и
(ii) очистку экспрессированного антитела или его фрагмента.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US85650506P | 2006-11-02 | 2006-11-02 | |
US60/856,505 | 2006-11-02 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009120699A Division RU2474589C9 (ru) | 2006-11-02 | 2007-10-31 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019102393A Division RU2019102393A (ru) | 2006-11-02 | 2019-01-29 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012147286A RU2012147286A (ru) | 2014-05-20 |
RU2678802C2 true RU2678802C2 (ru) | 2019-02-01 |
Family
ID=39345075
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009120699A RU2474589C9 (ru) | 2006-11-02 | 2007-10-31 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
RU2012147286A RU2678802C2 (ru) | 2006-11-02 | 2012-11-06 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
RU2019102393A RU2019102393A (ru) | 2006-11-02 | 2019-01-29 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009120699A RU2474589C9 (ru) | 2006-11-02 | 2007-10-31 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019102393A RU2019102393A (ru) | 2006-11-02 | 2019-01-29 | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения |
Country Status (35)
Country | Link |
---|---|
US (10) | US8067002B2 (ru) |
EP (4) | EP3466971A1 (ru) |
JP (6) | JP2010508819A (ru) |
KR (6) | KR20140101873A (ru) |
CN (7) | CN105085682A (ru) |
AR (2) | AR063760A1 (ru) |
AU (1) | AU2007313685C1 (ru) |
BR (1) | BRPI0716299A2 (ru) |
CA (2) | CA2667997C (ru) |
CL (1) | CL2007003161A1 (ru) |
CO (1) | CO6190543A2 (ru) |
CR (1) | CR10827A (ru) |
DK (2) | DK2097455T3 (ru) |
EC (1) | ECSP099379A (ru) |
ES (2) | ES2700609T3 (ru) |
HK (4) | HK1138018A1 (ru) |
HR (1) | HRP20181969T1 (ru) |
IL (3) | IL198512A (ru) |
LT (1) | LT2907827T (ru) |
MA (1) | MA30962B1 (ru) |
MX (1) | MX2009004665A (ru) |
MY (2) | MY157948A (ru) |
NO (1) | NO20092121L (ru) |
NZ (3) | NZ596042A (ru) |
PE (2) | PE20121034A1 (ru) |
PH (1) | PH12015501763A1 (ru) |
PL (2) | PL2097455T3 (ru) |
PT (2) | PT2097455E (ru) |
RS (1) | RS58233B1 (ru) |
RU (3) | RU2474589C9 (ru) |
SI (2) | SI2097455T1 (ru) |
TW (5) | TW201534620A (ru) |
UA (2) | UA101603C2 (ru) |
WO (1) | WO2008055206A2 (ru) |
ZA (2) | ZA200903088B (ru) |
Families Citing this family (69)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK2026073T3 (en) * | 2000-04-29 | 2016-07-25 | Univ Iowa Res Found | Diagnosis and treatment of macular degeneration-related disorders |
JP2009514888A (ja) | 2005-11-04 | 2009-04-09 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 眼疾患を処置するための補体経路の阻害剤の使用 |
SI2044111T1 (sl) | 2006-06-21 | 2015-02-27 | Musc Foundation For Research Development | Ciljanje komplementa faktorja H za zdravljenje bolezni |
CA2667997C (en) | 2006-11-02 | 2016-10-11 | Genentech, Inc. | Humanized anti-factor d antibodies and uses thereof |
AR066660A1 (es) * | 2007-05-23 | 2009-09-02 | Genentech Inc | Prevencion y tratamiento de condiciones del ojo asociadas con su complemento |
CR20170001A (es) * | 2008-04-28 | 2017-08-10 | Genentech Inc | Anticuerpos anti factor d humanizados |
US20100260668A1 (en) * | 2008-04-29 | 2010-10-14 | Abbott Laboratories | Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof |
NZ588554A (en) * | 2008-04-29 | 2013-03-28 | Abbott Lab | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
PE20100092A1 (es) * | 2008-06-03 | 2010-03-12 | Abbott Lab | Inmunoglobulina con dominio variable dual y usos de la misma |
AU2009256246B2 (en) * | 2008-06-03 | 2013-07-18 | Abbvie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
NZ603698A (en) * | 2008-07-08 | 2014-03-28 | Abbvie Inc | Prostaglandin e2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
GB2476606B (en) | 2008-09-08 | 2012-08-08 | Virginia Tech Intell Prop | Systems, devices, and methods for managing energy usage |
PE20120586A1 (es) | 2009-01-29 | 2012-06-17 | Abbott Lab | Proteinas de union a il-1 |
AU2010266127B2 (en) | 2009-07-02 | 2015-11-05 | Musc Foundation For Research Development | Methods of stimulating liver regeneration |
UY32808A (es) * | 2009-07-29 | 2011-02-28 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas como dominio variable dual y usos de las mismas |
KR20110020642A (ko) | 2009-08-24 | 2011-03-03 | 삼성전자주식회사 | 사용자 접근을 인식하여 반응하는 gui제공 장치 및 방법 |
US8586714B2 (en) * | 2009-09-01 | 2013-11-19 | Abbvie, Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
BR112012007365A2 (pt) * | 2009-10-15 | 2016-11-22 | Abbott Lab | proteínas de ligação à il-1 |
RU2012119756A (ru) * | 2009-10-15 | 2013-11-20 | Эбботт Лэборетриз | Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение |
UY32979A (es) | 2009-10-28 | 2011-02-28 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas |
US20110165648A1 (en) * | 2009-11-04 | 2011-07-07 | Menno Van Lookeren Campagne | Co-crystal structure of factor D and anti-factor D antibody |
EA201290286A1 (ru) | 2009-11-05 | 2013-01-30 | Алексион Кембридж Корпорейшн | Лечение пароксизмальной ночной гемоглобинурии, гемолитических анемий и патологических состояний с вовлечением внутрисосудистого и внесосудистого гемолиза |
KR20130080443A (ko) | 2010-05-14 | 2013-07-12 | 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 콜로라도, 어 바디 코포레이트 | 개선된 보체 수용체 2(cr2) 표적 그룹들 |
CA2803588A1 (en) | 2010-06-22 | 2011-12-29 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Antibodies to the c3d fragment of complement component 3 |
SG188190A1 (en) | 2010-08-03 | 2013-04-30 | Abbott Lab | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
KR20130139884A (ko) | 2010-08-26 | 2013-12-23 | 애브비 인코포레이티드 | 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
KR20130133247A (ko) | 2010-12-21 | 2013-12-06 | 애브비 인코포레이티드 | Il-1-알파 및 -베타 이특이적 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
MX347391B (es) | 2011-01-04 | 2017-04-25 | Novartis Ag | Compuestos de indol o análogos de los mismos útiles para el tratamiento de degeneración macular relacionada con la edad (amd). |
CN104159920A (zh) | 2011-12-30 | 2014-11-19 | 艾伯维公司 | 针对il-13和/或il-17的双重可变结构域免疫球蛋白 |
JP6273274B2 (ja) | 2012-06-28 | 2018-01-31 | ノバルティス アーゲー | 補体経路モジュレーターおよびその使用 |
JP6154897B2 (ja) | 2012-06-28 | 2017-06-28 | ノバルティス アーゲー | ピロリジン誘導体、および補体経路調節因子としてのその使用 |
ES2712190T3 (es) | 2012-06-28 | 2019-05-09 | Novartis Ag | Moduladores de la vía del complemento y sus usos |
JP6155332B2 (ja) | 2012-06-28 | 2017-06-28 | ノバルティス アーゲー | ピロリジン誘導体、および補体経路調節因子としてのその使用 |
WO2014002053A1 (en) | 2012-06-28 | 2014-01-03 | Novartis Ag | Pyrrolidine derivatives and their use as complement pathway modulators |
ES2687983T3 (es) | 2012-07-12 | 2018-10-30 | Novartis Ag | Moduladores de la ruta del complemento y usos de los mismos |
TW201402608A (zh) | 2012-07-12 | 2014-01-16 | Abbvie Inc | Il-1結合蛋白質 |
US10413620B2 (en) | 2012-08-17 | 2019-09-17 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Light-emitting versions of the monoclonal antibody to C3D (MAB 3D29) for imaging |
WO2014028865A1 (en) | 2012-08-17 | 2014-02-20 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Compositions and methods for detecting complement activation |
WO2014047311A1 (en) | 2012-09-19 | 2014-03-27 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for preventing norleucine misincorporation into proteins |
MY194330A (en) | 2012-11-01 | 2022-11-28 | Abbvie Inc | Anti-dll4/vegf dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
MX2015013166A (es) | 2013-03-15 | 2015-12-11 | Abbvie Inc | Proteinas de union especificas duales dirigidas contra il-1 beta y/o il-17. |
EP4300103A3 (en) | 2013-08-07 | 2024-02-28 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Atypical hemolytic uremic syndrome (ahus) biomarker proteins |
WO2015023596A1 (en) | 2013-08-12 | 2015-02-19 | Genentech, Inc. | Compositions and method for treating complement-associated conditions |
EP3137503A1 (en) | 2014-05-01 | 2017-03-08 | Genentech, Inc. | Anti-factor d antibody variants and uses thereof |
US9840553B2 (en) | 2014-06-28 | 2017-12-12 | Kodiak Sciences Inc. | Dual PDGF/VEGF antagonists |
US10093733B2 (en) | 2014-12-11 | 2018-10-09 | Abbvie Inc. | LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins |
TW201710286A (zh) | 2015-06-15 | 2017-03-16 | 艾伯維有限公司 | 抗vegf、pdgf及/或其受體之結合蛋白 |
US10591481B2 (en) | 2015-10-30 | 2020-03-17 | Genentech, Inc. | Methods of measuring factor D activity and potency of factor D inhibitors |
CN108472382A (zh) * | 2015-10-30 | 2018-08-31 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗-因子d抗体变体缀合物及其用途 |
AU2016344133A1 (en) * | 2015-10-30 | 2018-05-17 | Genentech, Inc. | Anti-Factor D antibody formulations |
RU2021117293A (ru) | 2015-10-30 | 2021-06-23 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ HtrA1 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ |
CN108289951A (zh) * | 2015-10-30 | 2018-07-17 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗-因子d抗体和缀合物 |
US11066465B2 (en) | 2015-12-30 | 2021-07-20 | Kodiak Sciences Inc. | Antibodies and conjugates thereof |
CN108934169A (zh) | 2016-01-20 | 2018-12-04 | 维特里萨医疗公司 | 用于抑制因子d的组合物和方法 |
SG11201808821WA (en) | 2016-04-18 | 2018-11-29 | Celldex Therapeutics Inc | Agonistic antibodies that bind human cd40 and uses thereof |
CA3024359A1 (en) | 2016-06-23 | 2017-12-28 | Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | Lag-3 antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical application thereof |
WO2018075474A1 (en) | 2016-10-17 | 2018-04-26 | Medical University Of South Carolina | Compositions and methods for treating central nervous system injury |
WO2018136827A1 (en) | 2017-01-20 | 2018-07-26 | Vitrisa Therapeutics, Inc. | Stem-loop compositions and methods for inhibiting factor d |
IL268601B2 (en) | 2017-02-10 | 2024-07-01 | Univ Pennsylvania | Antibodies against factor D and their uses |
CN106905431B (zh) * | 2017-04-10 | 2020-01-17 | 旭华(上海)生物研发中心有限公司 | 抗人补体d因子的单克隆抗体及其用途 |
EP3610010A4 (en) * | 2017-04-14 | 2021-02-24 | Kodiak Sciences Inc. | COMPLEMENT D-FACTOR ANTAGONIST ANTIBODIES AND THEIR CONJUGATES |
FR3071483B1 (fr) * | 2017-09-27 | 2020-11-27 | Airbus Operations Sas | Systeme de surveillance de braquage d'une roulette de train d'atterrissage d'un aeronef |
WO2019109238A1 (en) * | 2017-12-05 | 2019-06-13 | Lyvgen Biopharma Co., Ltd. | Anti-cd137 antibodies and uses thereof |
GB201800620D0 (en) | 2018-01-15 | 2018-02-28 | Univ Manchester | C3b Binding Polypeptide |
EP3758737A4 (en) | 2018-03-02 | 2022-10-12 | Kodiak Sciences Inc. | IL-6 ANTIBODIES AND FUSION CONSTRUCTS AND CONJUGATES THEREOF |
GB2583560A (en) | 2018-12-11 | 2020-11-04 | Admirx Inc | Fusion protein constructs for complement associated disease |
US11166910B2 (en) | 2019-01-25 | 2021-11-09 | Nordiccan A/S | Cannabinoid chewing gum with sugar alcohols |
CN110240652B (zh) * | 2019-06-05 | 2022-09-06 | 百奥泰生物制药股份有限公司 | 抗补体d因子抗体及其应用 |
EP4041312A4 (en) | 2019-10-10 | 2023-12-20 | Kodiak Sciences Inc. | METHOD FOR TREATING AN EYE DISORDER |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999042133A1 (en) * | 1998-02-20 | 1999-08-26 | Tanox, Inc. | Inhibitors of complement activation |
US20020081293A1 (en) * | 1998-02-20 | 2002-06-27 | Tanox, Inc., Delaware Corporation | Inhibitors of complement activation |
RU2232991C1 (ru) * | 2003-04-09 | 2004-07-20 | Государственное учреждение "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" | Способ определения функциональной активности фактора d комплемента человека |
Family Cites Families (72)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US4560655A (en) | 1982-12-16 | 1985-12-24 | Immunex Corporation | Serum-free cell culture medium and process for making same |
US4657866A (en) | 1982-12-21 | 1987-04-14 | Sudhir Kumar | Serum-free, synthetic, completely chemically defined tissue culture media |
US4816567A (en) * | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4767704A (en) | 1983-10-07 | 1988-08-30 | Columbia University In The City Of New York | Protein-free culture medium |
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US5256642A (en) * | 1988-04-01 | 1993-10-26 | The Johns Hopkins University | Compositions of soluble complement receptor 1 (CR1) and a thrombolytic agent, and the methods of use thereof |
US6048728A (en) | 1988-09-23 | 2000-04-11 | Chiron Corporation | Cell culture medium for enhanced cell growth, culture longevity, and product expression |
IL94611A (en) | 1989-06-05 | 1994-12-29 | Organogenesis Inc | Medium for cell cultures containing insulin or growth factor similar to insulin, transferrin or iron ion, triiodothyronine or thyroxine and method of use |
US5122469A (en) | 1990-10-03 | 1992-06-16 | Genentech, Inc. | Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins |
EP0940468A1 (en) | 1991-06-14 | 1999-09-08 | Genentech, Inc. | Humanized antibody variable domain |
US5456909A (en) * | 1992-08-07 | 1995-10-10 | T Cell Sciences, Inc. | Glycoform fractions of recombinant soluble complement receptor 1 (sCR1) having extended half-lives in vivo |
EP0656789B1 (en) | 1992-08-21 | 1997-12-17 | Genentech, Inc. | Method for treating a lfa-1-mediated disorder |
US5861156A (en) * | 1993-01-08 | 1999-01-19 | Creative Biomolecules | Methods of delivering agents to target cells |
US5856300A (en) * | 1994-05-12 | 1999-01-05 | T Cell Sciences, Inc. | Compositions comprising complement related proteins and carbohydrates, and methods for producing and using said compositions |
US5679546A (en) * | 1993-09-24 | 1997-10-21 | Cytomed, Inc. | Chimeric proteins which block complement activation |
US5627264A (en) * | 1994-03-03 | 1997-05-06 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric complement inhibitor proteins |
AU2191795A (en) * | 1994-03-23 | 1995-10-09 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Method for reducing immune and hemostatic dysfunctions during extracorporeal circulation |
US5534615A (en) * | 1994-04-25 | 1996-07-09 | Genentech, Inc. | Cardiac hypertrophy factor and uses therefor |
US6074642A (en) | 1994-05-02 | 2000-06-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis |
US5679564A (en) * | 1994-10-05 | 1997-10-21 | Antex Biologics, Inc. | Methods for producing enhanced antigenic campylobacter bacteria and vaccines |
WO1999046281A2 (en) | 1998-03-10 | 1999-09-16 | Genentech, Inc. | Novel polypeptides and nucleic acids encoding the same |
WO1999040100A1 (en) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Human Genome Sciences, Inc. | 45 human secreted proteins |
US20050197285A1 (en) * | 1997-03-07 | 2005-09-08 | Rosen Craig A. | Human secreted proteins |
US6472520B2 (en) * | 1997-03-21 | 2002-10-29 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Rat PEG-3 promoter |
US6410708B1 (en) * | 1997-11-21 | 2002-06-25 | Genentech, Inc. | Nucleic acids encoding A-33 related antigen polypeptides |
US6333034B1 (en) * | 1997-08-26 | 2001-12-25 | Gliatech, Inc. | Process for inhibiting complement activation via the alternative pathway |
DE69840105D1 (de) | 1997-11-21 | 2008-11-20 | Genentech Inc | Plättchen-spezifische antigene und deren pharmazeutische verwendung |
US7192589B2 (en) * | 1998-09-16 | 2007-03-20 | Genentech, Inc. | Treatment of inflammatory disorders with STIgMA immunoadhesins |
US7282565B2 (en) * | 1998-03-20 | 2007-10-16 | Genentech, Inc. | PRO362 polypeptides |
US8007798B2 (en) * | 1997-11-21 | 2011-08-30 | Genentech, Inc. | Treatment of complement-associated disorders |
US7419663B2 (en) * | 1998-03-20 | 2008-09-02 | Genentech, Inc. | Treatment of complement-associated disorders |
US8088386B2 (en) | 1998-03-20 | 2012-01-03 | Genentech, Inc. | Treatment of complement-associated disorders |
US7112327B2 (en) | 1998-02-20 | 2006-09-26 | Tanox, Inc. | Inhibition of complement activation |
AU5587799A (en) | 1998-08-27 | 2000-03-21 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Protein transport-associated molecules |
EP1141285A2 (en) | 1998-12-16 | 2001-10-10 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
DK1484338T3 (da) | 1998-12-22 | 2007-06-11 | Genentech Inc | Fremgangsmåder og sammensætninger til inhibition af neoplastisk cellevækst |
HUP0104865A3 (en) | 1999-01-15 | 2004-07-28 | Genentech Inc | Polypeptide variants with altered effector function |
AU3514400A (en) | 1999-03-08 | 2000-09-28 | Genentech Inc. | Compositions and methods for the treatment of immune related diseases |
MXPA01009110A (es) | 1999-03-11 | 2002-08-20 | Rmf Dictagene Sa | Moleculas de adhesion vascular y modulacion de su funcion. |
US6642353B1 (en) * | 1999-03-17 | 2003-11-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Peptide ligands for the erythropoietin receptor |
AU2883900A (en) | 1999-07-07 | 2001-01-30 | Genentech Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
AU1604401A (en) | 1999-11-19 | 2001-05-30 | Human Genome Sciences, Inc. | 18 human secreted proteins |
CA2490853A1 (en) | 1999-12-01 | 2001-06-07 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
ES2329010T3 (es) * | 2000-03-23 | 2009-11-20 | Genentech, Inc. | Inhibidores anti-c2/c2a de la activacion del complemento. |
DK2026073T3 (en) * | 2000-04-29 | 2016-07-25 | Univ Iowa Res Found | Diagnosis and treatment of macular degeneration-related disorders |
JP2004506413A (ja) | 2000-06-23 | 2004-03-04 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 血管形成に関与する疾患の診断と治療のための組成物と方法 |
AU2001271973A1 (en) | 2000-07-20 | 2002-02-05 | Kevin P. Baker | Compositions and methods for the diagnosis and treatment of disorders involving angiogenesis |
ES2333775T3 (es) | 2000-10-10 | 2010-03-01 | Genentech, Inc. | Inhibicion de la activacion del complemento c5 para el tratamiento y la prevencion de rechazo de xenoinjerto retrasado o rechazo vascular agudo. |
NZ525793A (en) | 2000-10-13 | 2008-04-30 | Biogen Idec Inc | Humanized anti-LT-beta-R antibodies |
US7432356B2 (en) * | 2001-08-17 | 2008-10-07 | Genentech, Inc. | Complement pathway inhibitors binding to C5 and C5a without preventing formation of C5b |
TWI323265B (en) | 2002-08-06 | 2010-04-11 | Glaxo Group Ltd | Antibodies |
WO2004022594A2 (en) | 2002-09-06 | 2004-03-18 | Cytos Biotechnology Ag | Immune modulatory compounds and methods |
US7816497B2 (en) * | 2002-10-30 | 2010-10-19 | University Of Kentucky | Compositions and methods for inhibiting drusen complement components C3a and C5a for the treatment of age-related macular degeneration |
US7709610B2 (en) | 2003-05-08 | 2010-05-04 | Facet Biotech Corporation | Therapeutic use of anti-CS1 antibodies |
WO2005014849A2 (en) * | 2003-07-03 | 2005-02-17 | Euro-Celtique, S.A. | Genes associated with responses to neuropathic pain |
WO2005025509A2 (en) | 2003-09-11 | 2005-03-24 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and materials for treating autoimmune diseases and conditions |
US20050169921A1 (en) * | 2004-02-03 | 2005-08-04 | Leonard Bell | Method of treating hemolytic disease |
US7794713B2 (en) | 2004-04-07 | 2010-09-14 | Lpath, Inc. | Compositions and methods for the treatment and prevention of hyperproliferative diseases |
JP2008520242A (ja) | 2004-11-18 | 2008-06-19 | イェール ユニバーシティ | 視覚障害を処置するための方法および組成物 |
WO2006071856A2 (en) | 2004-12-23 | 2006-07-06 | Glycofi, Inc. | Immunoglobulins comprising predominantly a man5glcnac2 glycoform |
KR20130100207A (ko) | 2005-02-14 | 2013-09-09 | 유니버시티 오브 아이오와 리써치 파운데이션 | 연령관련 황반 변성의 치료 및 진단용 방법 및 시약 |
FI118793B (fi) * | 2005-07-11 | 2008-03-31 | Olli Friman | Rullaluistimen pyörän vierintälaakerin suojalevy |
DK1951279T3 (en) | 2005-10-08 | 2017-07-31 | Apellis Pharmaceuticals Inc | COMPSTATIN AND ANALOGUES THEREOF FOR EYE DISEASES |
JP2009514888A (ja) * | 2005-11-04 | 2009-04-09 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 眼疾患を処置するための補体経路の阻害剤の使用 |
US20070190057A1 (en) | 2006-01-23 | 2007-08-16 | Jian Wu | Methods for modulating mannose content of recombinant proteins |
US7941135B2 (en) | 2006-03-22 | 2011-05-10 | Alcatel-Lucent Usa Inc. | Methods of performing live monitoring of a wireless communication network |
CA2667997C (en) * | 2006-11-02 | 2016-10-11 | Genentech, Inc. | Humanized anti-factor d antibodies and uses thereof |
AR066660A1 (es) | 2007-05-23 | 2009-09-02 | Genentech Inc | Prevencion y tratamiento de condiciones del ojo asociadas con su complemento |
CR20170001A (es) | 2008-04-28 | 2017-08-10 | Genentech Inc | Anticuerpos anti factor d humanizados |
-
2007
- 2007-10-31 CA CA2667997A patent/CA2667997C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-31 CN CN201510511513.3A patent/CN105085682A/zh active Pending
- 2007-10-31 CN CN201610569910.0A patent/CN106188303A/zh active Pending
- 2007-10-31 PL PL07868632T patent/PL2097455T3/pl unknown
- 2007-10-31 PT PT78686326T patent/PT2097455E/pt unknown
- 2007-10-31 SI SI200731587T patent/SI2097455T1/sl unknown
- 2007-10-31 CN CN200780048936.XA patent/CN101589063B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-31 EP EP18190268.5A patent/EP3466971A1/en not_active Withdrawn
- 2007-10-31 TW TW103141058A patent/TW201534620A/zh unknown
- 2007-10-31 UA UAA200905597A patent/UA101603C2/ru unknown
- 2007-10-31 NZ NZ596042A patent/NZ596042A/xx not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 ES ES15151317T patent/ES2700609T3/es active Active
- 2007-10-31 AU AU2007313685A patent/AU2007313685C1/en not_active Ceased
- 2007-10-31 PT PT15151317T patent/PT2907827T/pt unknown
- 2007-10-31 MX MX2009004665A patent/MX2009004665A/es active IP Right Grant
- 2007-10-31 KR KR1020147019915A patent/KR20140101873A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-31 PE PE2012000037A patent/PE20121034A1/es active IP Right Grant
- 2007-10-31 RU RU2009120699A patent/RU2474589C9/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 KR KR1020167020466A patent/KR20160092061A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-31 KR KR1020197000043A patent/KR20190003860A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-31 CN CN201610570520.5A patent/CN106188299A/zh active Pending
- 2007-10-31 SI SI200732083T patent/SI2907827T1/sl unknown
- 2007-10-31 PL PL15151317T patent/PL2907827T3/pl unknown
- 2007-10-31 LT LTEP15151317.3T patent/LT2907827T/lt unknown
- 2007-10-31 EP EP07868632.6A patent/EP2097455B1/en active Active
- 2007-10-31 WO PCT/US2007/083172 patent/WO2008055206A2/en active Application Filing
- 2007-10-31 JP JP2009535444A patent/JP2010508819A/ja not_active Withdrawn
- 2007-10-31 CN CN201610570102.6A patent/CN106084054A/zh active Pending
- 2007-10-31 KR KR1020157009721A patent/KR101645144B1/ko active IP Right Grant
- 2007-10-31 EP EP15151317.3A patent/EP2907827B1/en active Active
- 2007-10-31 TW TW105127533A patent/TW201716437A/zh unknown
- 2007-10-31 NZ NZ609813A patent/NZ609813A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 TW TW100142121A patent/TWI472535B/zh not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 CA CA2939806A patent/CA2939806A1/en not_active Abandoned
- 2007-10-31 ES ES07868632.6T patent/ES2525477T3/es active Active
- 2007-10-31 TW TW107108695A patent/TW201843170A/zh unknown
- 2007-10-31 BR BRPI0716299-5A2A patent/BRPI0716299A2/pt active Search and Examination
- 2007-10-31 DK DK07868632.6T patent/DK2097455T3/en active
- 2007-10-31 TW TW096141085A patent/TWI391401B/zh not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 UA UAA201214158A patent/UA116614C2/uk unknown
- 2007-10-31 MY MYPI20091788A patent/MY157948A/en unknown
- 2007-10-31 RS RS20181476A patent/RS58233B1/sr unknown
- 2007-10-31 EP EP12152860A patent/EP2471818A1/en not_active Ceased
- 2007-10-31 KR KR1020097011297A patent/KR20090078364A/ko not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 KR KR1020177026557A patent/KR20170110727A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-31 NZ NZ576812A patent/NZ576812A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-10-31 MY MYPI2013002530A patent/MY183804A/en unknown
- 2007-10-31 DK DK15151317.3T patent/DK2907827T3/da active
- 2007-10-31 CN CN201610570481.9A patent/CN106188304A/zh active Pending
- 2007-10-31 PE PE2007001490A patent/PE20081259A1/es active IP Right Grant
- 2007-10-31 CN CN201610570104.5A patent/CN106084055A/zh active Pending
- 2007-10-31 US US11/931,060 patent/US8067002B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-31 AR ARP070104846A patent/AR063760A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-10-31 CL CL200703161A patent/CL2007003161A1/es unknown
-
2009
- 2009-05-03 IL IL198512A patent/IL198512A/en active IP Right Review Request
- 2009-05-05 ZA ZA2009/03088A patent/ZA200903088B/en unknown
- 2009-05-26 CR CR10827A patent/CR10827A/es unknown
- 2009-05-29 NO NO20092121A patent/NO20092121L/no not_active Application Discontinuation
- 2009-05-29 CO CO09055632A patent/CO6190543A2/es active IP Right Grant
- 2009-06-01 MA MA31941A patent/MA30962B1/fr unknown
- 2009-06-02 EC EC2009009379A patent/ECSP099379A/es unknown
-
2010
- 2010-05-10 HK HK10104514.7A patent/HK1138018A1/zh not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-01-14 US US13/007,061 patent/US8193329B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-01-14 US US13/007,142 patent/US8187604B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-05-01 US US13/461,253 patent/US8372403B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-10-25 JP JP2012235324A patent/JP5474158B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-10-25 JP JP2012235325A patent/JP2013027404A/ja active Pending
- 2012-11-06 RU RU2012147286A patent/RU2678802C2/ru not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-02-05 ZA ZA2013/00949A patent/ZA201300949B/en unknown
- 2013-02-05 US US13/759,613 patent/US8753826B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-03-12 JP JP2014049395A patent/JP5918794B2/ja active Active
- 2014-05-20 US US14/282,063 patent/US20140303355A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-04-29 IL IL238517A patent/IL238517B/en active IP Right Grant
- 2015-04-29 AR ARP150101290A patent/AR100225A2/es unknown
- 2015-07-06 US US14/792,197 patent/US20150376295A1/en not_active Abandoned
- 2015-07-06 US US14/792,236 patent/US20160002353A1/en not_active Abandoned
- 2015-07-06 US US14/792,213 patent/US20160002352A1/en not_active Abandoned
- 2015-08-12 PH PH12015501763A patent/PH12015501763A1/en unknown
- 2015-09-01 JP JP2015171685A patent/JP2015214591A/ja not_active Withdrawn
-
2016
- 2016-02-18 HK HK16101860.7A patent/HK1213920A1/zh not_active IP Right Cessation
- 2016-03-29 HK HK16103589.3A patent/HK1215712A1/zh unknown
- 2016-07-29 US US15/224,366 patent/US20170166630A1/en not_active Abandoned
- 2016-12-23 HK HK16114632A patent/HK1226417A1/zh unknown
-
2017
- 2017-08-17 JP JP2017157499A patent/JP2017200492A/ja active Pending
- 2017-08-24 IL IL254137A patent/IL254137A0/en unknown
-
2018
- 2018-11-23 HR HRP20181969TT patent/HRP20181969T1/hr unknown
-
2019
- 2019-01-29 RU RU2019102393A patent/RU2019102393A/ru not_active Application Discontinuation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999042133A1 (en) * | 1998-02-20 | 1999-08-26 | Tanox, Inc. | Inhibitors of complement activation |
US20020081293A1 (en) * | 1998-02-20 | 2002-06-27 | Tanox, Inc., Delaware Corporation | Inhibitors of complement activation |
US20060240020A1 (en) * | 1998-02-20 | 2006-10-26 | Fung Michael S C | Inhibition of complement activation |
RU2232991C1 (ru) * | 2003-04-09 | 2004-07-20 | Государственное учреждение "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" | Способ определения функциональной активности фактора d комплемента человека |
Non-Patent Citations (4)
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2678802C2 (ru) | Гуманизированные антитела к фактору d и их применения | |
AU2013200988A1 (en) | Humanized anti-Factor D antibodies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20171108 |
|
FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20181031 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191101 |