RU2667467C1 - Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе - Google Patents
Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе Download PDFInfo
- Publication number
- RU2667467C1 RU2667467C1 RU2017117200A RU2017117200A RU2667467C1 RU 2667467 C1 RU2667467 C1 RU 2667467C1 RU 2017117200 A RU2017117200 A RU 2017117200A RU 2017117200 A RU2017117200 A RU 2017117200A RU 2667467 C1 RU2667467 C1 RU 2667467C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dexamethasone
- liposomes
- hypertonic
- solution
- liposomal
- Prior art date
Links
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 title claims abstract description 70
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 title claims abstract description 66
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 title claims description 9
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 title abstract description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 64
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940036998 hypertonic sodium chloride Drugs 0.000 claims 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 45
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 14
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 abstract description 6
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 abstract description 4
- 239000000819 hypertonic solution Substances 0.000 abstract description 4
- 229940021223 hypertonic solution Drugs 0.000 abstract description 4
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 abstract description 4
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 abstract description 4
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 abstract description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 abstract description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 abstract description 3
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 abstract description 2
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 206010069351 acute lung injury Diseases 0.000 abstract 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 7
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 230000002727 hyperosmolar Effects 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 3
- BMXYSAJAHZRXDU-DRSQBWEGSA-H calcium magnesium potassium disodium ethanone (2S)-2-hydroxybutanedioic acid hexachloride undecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[Mg++].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca++].C[C-]=O.O[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BMXYSAJAHZRXDU-DRSQBWEGSA-H 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010005746 Blood pressure fluctuation Diseases 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 206010038678 Respiratory depression Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000000879 anti-atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000923 atherogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229960003403 betaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000036471 bradycardia Effects 0.000 description 1
- 208000006218 bradycardia Diseases 0.000 description 1
- HOPSCVCBEOCPJZ-UHFFFAOYSA-N carboxymethyl(trimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CC(O)=O HOPSCVCBEOCPJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N ceftriaxone Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC1=NC(=O)C(=O)NN1C VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N 0.000 description 1
- 229960004755 ceftriaxone Drugs 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012907 medicinal substance Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
- A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к новым лекарственным препаратам для лечения острых состояний с преимущественным поражением легких и дисфункцией сердечно-сосудистой системы. Липосомальный препарат представляет собой липосомы размером 320±20 нм, содержащие дексаметазон в концентрации 2,98 мг/мл в гипертонической водной среде 7,5%-ного раствора NaCl. При внутривенном введении липосомы высвобождают лекарственную субстанцию дексаметазона в результате изменения осмолярности среды, набухания и разрыва липосомальных везикул. Липосомальную взвесь получают обращением фаз из лецитина, холестерола, дексаметазона, гипертонического раствора 7,5%-ного раствора NaCl. Также раскрыт способ лечения острого повреждения легких на основе липосомального препарата, который включает внутривенное введение липосом в гипертонической водной среде 7,5%-ного раствора NaCl, содержащих дексаметазон. Группа изобретений обеспечивает снижение летальности, стабилизацию частоты сердечных сокращений и частоты дыхания, повышение артериального давления и сатурации гемоглобина. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 ил., 3 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к новым лекарственным препаратам для лечения острых состояний с преимущественным поражением легких и дисфункцией сердечно-сосудистой системы.
Примером патологии для эффективного использования предлагаемого липосомального препарата является острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) и его наиболее частая причина – острое повреждение легких (ОПЛ), сопровождающиеся высоким процентом летальности среди пациентов и в результате быстро нарастающей дыхательной недостаточности [1].
Существует 5 типов липосом, отличающихся составом и применением in vivo: простые липосомы; стерически стабилизированные липосомы; направленные липосомы (иммунолипосомы); катионные липосомы; липо-сомы, чувствительные к физическим и химическим стимулам, таким как температура, свет и изменения значения pH [2]. Однако исследователи не предлагают липосомальные препараты, способные высвобождать лекарственные субстанции при попадании в органы за счет изменения осмолярности среды, в которой они находятся.
Существуют липосомы с дексаметазоном для местного иньекционного применения в офтальмологии. Данная лекарственная форма по своему составу представляет изотоническую взвесь липосом с дексаметазоном. Эффективность включения препарата при создании известного препарата составляет 80 % при соотношении липиды/дексаметазон 40:1 [3].
Липосомы с дексаметазоном получают достаточно схожими способами. Например, получение липосом с иммунными и флуоресцентными метками. При этом изначальная методика получения препарата стандартная и включает в себя создание липидной пленки, гидратирования пленки и пропускание полученных мультиламеллярных везикул через поликарбонатный фильтр [4].
В настоящее время создание липосом для местного или системного введения происходит в изотонической водной среде. При этом многократно изучена осмотическая резистентность эритроцитов. Учитывая, что липосомальная мембрана есть не что иное, как липидный бислой, то при перемещении липосом из одной среды в другую, имеющих разную тоничность предполагается, что процессы будут происходить похожие. То есть, мембрана при перепаде осмолярности среды разрывается и содержимое эритроцита или липосомы высвобождается [5].
Недостатками предлагаемых решений являются: невозможность их использования для парентерального применения, отсутствие данных об эффективности при экстренных показаниях к интенсивной терапии, медленное и неполное высвобождение лекарственной субстанции из липосом.
Технический результат заключается в разработке новой липосомальной лекарственной формы дексаметазона с гипертонической водной средой, обусловленной раствором 7,5 %-ного хлорида натрия (NaCl) для лечения острого повреждения легких и шока на его основе, который обеспечивает снижение летальности, стабилизацию частоты сердечных сокращений (ЧСС) и частоты дыхания (ЧД), повышение артериального давления и сатурации гемоглобина (SpO2).
Новизна предлагаемого решения заключается в следующем:
1. Разработана новая липосомальная лекарственная форма дексаметазона с гипертонической водной средой, обусловленной раствором 7,5 %-ного NaCl. Проанализирована эффективность полученной лекарственной формы.
2. Предлагается способ оценки кинетики высвобождения дексаметазона из гипертонических липосом in vitro.
3. Предлагается способ оценки эффективности внутривенного введения гипертонических липосом с дексаметазоном, крысам спустя 5 мин после моделирования острого повреждения легких путем интратрахеального введения раствора ацидин-пепсина [6].
Сущность изобретения заключается в том, что липосомальный препарат представляет собой липосомы размером 320±20 нм, содержащие дексаметазон в концентрации 2,98 мг/мл в гипертонической водной среде 7,5 %-ного раствора NaCl. При внутривенном введении липосомы высвобождают лекарственную субстанцию дексаметазона в результате изменения осмолярности среды, набухания и разрыва липосомальных везикул. Липосомальную взвесь получают обращением фаз из лецитина, холестерола, дексаметазона, гипертонического раствора 7,5 %-ного раствора NaCl. Способ лечения острого повреждения легких и шока на основе липосомального препарата включает внутривенное введение липосом с дексаметазоном, находящихся в гипертонической водной среде 7,5 %-ного раствора NaCl.
Пример 1. Получение липосом с дексаметазоном в гипертонической среде 7,5 %-ного раствора NaCl:
Липосомы получают методом пассивной загрузки, смывая липидную пленку 7,5 %-ного раствора NaCl с дексаметазоном. Для количественного определения содержания дексаметазона в липосомах используют УФ-спектрофотомерию. Получение липосомальной дисперсии дексаметазона в 7,5 %-ном растворе NaCl: точную навеску лецитина (300 мг) и холестерина (3 мг) растворяют в хлороформе. Органический растворитель упаривают на роторном испарителе в течение 30 мин. После чего липидную пленку гидратируют 6,15 мл дексаметазона в 7,5 %-ном растворе NaCl, при температуре 40 °С. Образовавшуюся дисперсию мультиламеллярных везикул измельчают с помощью экструдера LIPEXTM с использованием поликарбонатного фильтра с диаметром пор 400 нм. Полученные липосомы собирают в приемную колбу. Размер липосомальных везикул определяют методом динамического светорассеяния при помощи наносайзера NANO-flex. Определение размеров проводят автоматически, с помощью программы Microtrac Flex 11.0.0.2. Средний диаметр липосом составляет 320±50 нм. Очистка липосомальной дисперсии от не включившегося в липосомы дексаметазона проводят методом диализа через мембрану с диаметром пор 12-14 кДа. Стакан с диализным фильтром устанавливают на магнитную мешалку. Для количественного определения используют УФ-спектрофотомерию. Для этого 0,5 мл дексаметазона, доводят до 25 мл 0,1 М раствором гидрокида натрия (NaOH). Оптическую плотность замеряют на спектрофотометре в диапазоне волн от 400 нм до 200 нм, в качестве раствора сравнения используют 0,1 М раствор NaOH. Максимум поглощения раствора дексаметазона находится в области 241 нм. Для количественного определения дексаметазона используют диализат, полученный при очистке липосом. Концентрация дексаметазона в очищеной липосомальной дисперсии составляет 2,9795±0,015 мг/мл; эффективность включения дексаметазона в липосомы: 74,5±0,37 %, отношение включившегося дексаметазона к лецитину: 2,9795мг/мл×6мл/300мг=0,05959.
Пример 2. Сравнительная кинетика высвобождения препарата из липосом:
Чтобы приблизить опыт к реальным условиям высвобождения препарата в изотонической среде крови рассчитывают дозу липосом и объем биорелевантной среды для высвобождения. Таким образом, объем липосом с дексаметазоном составляет 1 мл, а количество изотонической среды для высвобождения – 18 мл, что соответствует дозе препарата и объему циркулирующей крови для одной лабораторной крысы массой 250 г. Для исследования кинетики высвобождения удобнее использовать изотонический раствор объемом 250 мл, а для сохранения соотношения между объемом липосом и объемом этого раствора количество липосом увеличивают до 13,9 мл. Для контрольного опыта используют раствор дексаметазона в 7,5 %-ном растворе NaCl объемом 10,6 мл и изотонические липосомы объемом 13,9 мл, содержащие дексаметазон. Изотонические липосомы готовят с использованием изотонического раствора NaCl и они имеют одинаковую с опытными концентрацию дексаметазона на единицу объема взвеси. В качестве биорелевантной среды используют плазмозамещающий раствор «Стерофундин ISO», так как он наиболее напоминает плазму крови по ионному составу, осмолярности и значению рН.
В диализный мешок длиной 50 мм помещают исследуемый раствор и раствор «Стерофундин ISO» до заполнения мешка, после чего фиксируют его зажимами. Установку помещают в мерный стакан объемом 500 мл и заполняют его Стерофундином до метки 250 мл. Стакан устанавливают на магнитную мешалку и проводят исследование при температуре раствора 35,5 °С и частоте вращения мешалки 120 об/мин. Через определенные промежутки времени производят замер концентрации дексаметазона во внешнем растворе. Для определения концентрации извлекают из внешнего раствора 1 мл, помещают в колбу объемом 50 мл и доводят до метки 0,1 М NaOH в 7,5 %-ном растворе NaCl и производят спектрофотомерию, используя в качестве раствора сравнения 0,1 М NaOH в 7,5 %-ном растворе NaCl. В результате получен график нарастания концентрации дексаметазона в биорелевантной среде с течением времени (фиг.1).
Из фиг. 1 видно, что гипертонические липосомы, содержащие дексаметазон при введении в изотоническую среду высвобождают содержимое гораздо быстрее и в большей концетрации, чем изотонические липосомы с дексаметазоном. Данные особенности высвобождения гипертонических липосом могут быть использованы для создания высокой концентрации лекарственного вещества (дексаметазона) в близлежащем органе (легких) при их внутривенном введении.
Пример 3. Сравнительное исследование терапевтической эффективности гиперосмолярных липосом с дексаметазоном и комбинации раствора дексаметазона с гипертоническим раствором NaCl при остром повреждении легких у крыс:
Для эксперимента использовались белые беспородные крысы обоего пола массой 220-300 г (питомник «Столбовая», ФГБУ «Научный центр биомедицинских технологий» РАМН). Все исследования выполнялись с соблюдением норм и правил проведения экспериментов с участием животных (решение ЛЭК ФГБОУ ВПО «МГУ им. Н.П. Огарёва» от 12.07.2015 г., протокол № 72). В эксперимент были включены 24 крысы. Животных разделили на 2 группы по 12 особей в каждой. Всем крысам под уретановым внутрибрюшинным наркозом (400 мг/кг) производили моделирование острого повреждения легких путем интратрахеального (и/т) введения 0,03 мл предварительно приготовленного раствора ацидин-пепсина [6] (1 таблетка на 0,5 мл физ. раствора). Для эксперимента использовался препарат ацидин-пепсин (таблетки), содержащий бетаина гидрохлорид 200 мг и пепсин 50 мг (Белмедпрепараты, Республика Беларусь). Всем животным после моделирования ОПЛ/ОРДС с целью профилактики инфекционных осложнений вводили цефтриаксон (порошок во флаконах), 1 г для приготовления раствора для внутримышечного и внутривенного введения (ОАО «Биосинтез», Россия) в дозе 100 мг/кг внутримышечно 1 раз в сут в течение 6 дней. Животным 1-ой группы (опыт) внутривенно однократно через 5 мин после моделирования патологии вводили гиперосмолярные липосомы с дексаметазоном в дозе 6 мг/кг по дексаметазону в объеме липосомальной взвеси 0,5-0,6 мл. Животным 2-ой группы (контроль) внутривенно однократно вводили раствор дексаметазона (раствор для инъекций 0,4 %, КРКА, д.д., Ново место, Словения) в дозе 6 мг/кг и сразу после гипертонический 7,5 %-ный раствор NaCl в объеме 4 мл/кг.
При помощи аппарата BiopacSystems МР 150 (CША) у животных оценивали: ЧСС, ЧД, SpO2 и уровни систолического и диастолического артериального давления (сАД, дАД). Измерения производили за 20 мин до аспирационного повреждения легких, через 5 мин после ОПЛ и после внутривенного введения препаратов через 30, 60 мин, 2, 4, и 24 час.
В результате эксперимента через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина ЧСС крыс в группе с применением гиперосмолярных липосом с дексаметазоном достоверно снижалась с 212,8±9,6 до 123,6±15,9/мин. В группе, где вместо гиперосмолярных липосом (HNDEX) вводили последовательно дексаметазон и гипертонический 7,5 %-ный раствор NaCl (Д+ГР) ЧСС также достоверно снижалась после моделирования патологии до 142,5±10,4/мин, при 214±7,11 у здоровых.
На фиг. 2 показано изменение ЧСС после внутривенного введения гипертонических липосом с дексаметазоном (1) и дексаметазона в комбинации с гипертоническим раствором NaCl (2) на фоне аспирации ацидин-пепсина.
Из фиг. 2 видно, что введение HNDEX приводило к достоверному повышению ЧСС до 193±16,3/мин через 30 мин после инъекции. Спустя 1 час после в/в введения HNDEX ЧСС возросла до 221,9±18,8 в мин, что достоверно больше, чем через 30 мин. В дальнейшем ЧСС у крыс после введения HNDEX была стабильно выше, чем через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина. Для точек регистрации 2, 4 и 24 час данный показатель составил: 216±19,5, 248,8±19,8 и 233,9±13,2/мин соответственно. Через 30 мин после внутривенного введения дексаметазона и гипертонического раствора NaCl (Д+ГР) ЧСС крыс оставалась достоверно ниже исходного показателя здоровых особей и составила 168,2±16,3/мин, в дальнейшем, через 1 час, 2 и 4 час ЧСС у крыс составила 180,2±16,2, 189,7±20,5 и 176,9±18,0/мин соответственно. В этих временных точках ЧСС достоверно не превышала значения через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина.
На фиг. 3. показано изменение сАД после внутривенного введения гипертониеских липосом с дексаметазоном (1) и дексаметазона в комбинации с гипертоническим раствором NaCl (2) на фоне аспирации ацидин-пепсина.
Из фиг. 3 видно, что сАД через 30 мин после введения после введения HNDEX оставалось достоверно более низким, чем у крыс исходно до аспирации ацидин-пепсина и составило 122,2±9,5 мм рт. ст. При этом через 5 минут после аспирации ацидин-пепсина сАД составило 112,0±13,8 мм рт. ст., что достоверно меньше исходного значения здоровых животных – 156,8±8,8 мм рт. ст. Через 1 час после введения HNDEX сАД составила 131,5±5,26 мм рт. ст., что оставалось достоверно ниже исходного значения. Через 2, 4 и 24 час после в/в введения HNDEX сАД достоверно не отличалось от исходного значения и составило 148,0±11,9, 136,5±10,4, 148,1±7,8 мм рт. ст. При этом через 24 час сАД имело достоверно более высокое значение, чем через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина.
В группе контрольной терапии (сАД – 127,9±11,5 мм рт. ст.) Д+ГР после аспирации ацидин-пепсина не наблюдалось достоверного снижения сАД относительно исходного значения (133,5±6,4 мм рт. ст.). Достоверных изменений сАД не отмечалось и после в/в введения Д+ГР. сАД через 30 мин после в/в введения Д+ГР составило 119,7±11,5 мм рт. ст., через 1 час – 129,0±10,4 мм рт. ст., 2 часа – 134,5±9,1 мм рт. ст.; 4 час – 116,4±7,9 мм рт. ст., 24 час – 138,9±6,4 мм рт. ст.
На фиг. 4 показаны изменения дАД после внутривенного введения гипертониеских липосом с дексаметазоном (1) и дексаметазона в комбинации с гипертоническим раствором NaCl (2) на фоне аспирации ацидин-пепсина.
Из фиг. 4 видно, что диастолическое давление в результате моделирования аспирационного синдрома в группе с HNDEX снижалось с 124,7±6,8 мм рт. ст. у здоровых крыс до 91,7±11,9 мм рт. ст. Для точки 1 час дАД составило 100,5±6,6 мм рт. ст., что достоверно не отличалось от такового, через 30 мин после введения HNDEX (99,4±9,4 мм рт. ст.). Спустя 2 и 4 час дАД у крыс имело тенденцию к повышению до 118,5±10,1 и 119,7±6,3 мм рт. ст. и не отличалось достоверно от исходного значения. Через 24 час после в/в введения дАД соотносится с таковым у животных исходно, до моделирования патологии и составило 123,5±5,7 мм рт. ст. Аналогичная ситуация наблюдалась с дАД после введения Д+ГР, где тоже не было зафиксировано достоверных изменений. У животных данной группы, исходно дАД составило 107,3±7,7 мм рт. ст., 5 мин после аспирации - 91,4±17,5 мм рт. ст. Через 30 мин после в/в введения Д+ГР, через 1 час, 2 и 4 час дАД составило 94,2±7,8, 100,9±7,4, 120,6±13,1 мм рт. ст. и 97,1±7,1 мм рт. ст. соответственно. Через 24 час дАД после в/в инфузии Д+ГР составило 112,0±5,2 мм рт. ст.
После ОПЛ SpO2 в группе с HNDEX достоверно снизилась с 90,3±1,76 % до 79,4±3,7 %. После введения HNDEX, через 30 мин SpO2 была достоверно больше, чем через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина и составила 88,1±1,55 %.
На фиг. 5 показаны изменения сатурации гемоглобина после внутривенного введения гипертонических липосом с дексаметазоном (1) и дексаметазона в комбинации с гипертоническим раствором NaCl (2) на фоне аспирации ацидин-пепсина.
Из фиг. 5 видно, что в дальнейшем, через 1 час, 2 час, 4 и 24 час сатурация была достоверно выше, чем после аспирации и до введения HNDEX. Для вышеуказанных точек SpO2 составила 90,0±1,7, 89,6±1,35, 92,6±0,96, 86,6±1,3 % соответственно. Применение терапии контроля (Д+ГР) также способствовало коррекции SpO2 до нормального уровня. В группе с Д+ГР исходная сатурация составила 89,4±1,49, а через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина снизилась до 76,9±3,4 %. Спустя 30 мин после введения гипертонического раствора с дексаметазоном сатурация достоверно возростала до 87,9±1,7 % и в течении остального времени наблюдения и регистрации была выше, чем через 5 мин после аспирации ацидин-пепсина. Так для точки 1 час SpO2 составила 88,6±1,93 %, для точки 2 час – 89,0±1,4 % и для точек 4 и 24 час – 86,5±1,7 % и 90,0±1,44 % соответственно. Спустя 4 час после в/в введения HNDEX SpO2 была достоверно больше, чем в это же время, но после введения Д+ГР. ЧД исходно в группе с применением HNDEX была 85,3±7,0 дд/мин.
На фиг. 6 показаны изменения ЧД после внутривенного введения гипертонических липосом с дексаметазоном (1) и дексаметазона в комбинации с гипертоническим раствором NaCl (2) на фоне аспирации ацидин-пепсина.
Из фиг. 6 видно, что в результате аспирации ЧД достоверно не изменялась и составила 74,6±14,8 дд/мин. После в/в введения HNDEX через 30 минут и ч/з 1 час ЧД была 66,6±7,7 дд/мин и 66,9±6,3 дд/мин. К 2-м часам после в/в введения ЧД снизилась относительно исходного уровня до 61,4±5,4 дд/мин. После, на точке 4 и 24 часа ЧД составила 68,0±5,5 и 87,6±6,3 дд/мин. При использовании терапии сравнения исходно фиксировалась ЧД 65,4±6,3 дд/мин, а спустя 5 мин после аспирации ацидин-пепсина достоверно снижалась до 44,0±6,9 дд/мин. В последующем, через 30 мин, 1 час, 2 и 4 час, после в/в введения Д+ГР ЧД не имела значимых различий с таковой после аспирации, но без лечения и составила 53,9±9,8 дд/мин, 56,6±6,6, 58,1±4,6 и 54,0±6,5 дд/мин. Через 24 час после начала лечения ЧД была выше, чем после моделирования патологии (79,8±4,2 дд/мин). Исходные значения ЧД обоих групп достоверно не отличались, а через 24 час после введения HNDEX ЧД превышала таковую после применения Д+ГР. Летальность в группе с введением гипертонических липосом с дексаметазоном через 24 час составила 66,7 %, а в группе с введением дексаметазона и гипертонического раствора NaCl – 86,7 %.
Таким образом, разработанная липосомальная лекарственная форма дексаметазона представляет собой липосомальные везикулы с дексаметазоном в гипертонической среде, обусловленной 7,5 %-ным раствором NaCl. Данная липосомальная лекарственная форма высвобождает лекарственную субстанцию дексаметазона при попадании липосом в изотоническую среду в результате набухания и разрыва липосомальных везикул. При введении разработанных липосом лабораторным крысам на фоне модели аспирационного ОПЛ показана эффективность предлагаемой липосомальной лекарственной формы, как средства коррекции гипотонии, брадикардии, угнетения дыхания, гипоксии. Гипертонические липосомы оказывают быстрое и продолжительное действие в сравнении с комбинированным введением раствора дексаметазона и гипертонического раствора NaCl.
Источники информации
1. Новиков Н.Ю. Патоморфологические изменения аэрогематического барьера при остром респираторном дистресс-синдроме в эксперименте / Н.Ю. Новиков, Л.В. Тышкевич, К.Н. Джансыз // Таврический медико-биологический вестник. – 2012. – Т. 15. – № 1. – С. 169-175.
2. Барышников А.Ю. Наноструктурированные липосомальные системы как средство доставки противоопухолевых препаратов / А.Ю. Барышников // Вестник РАМН. – 2012 . – Т. 1. – № 3. – С. 297–315.
3. Лепарская Н.Л. Липосомы, содержащие дексаметазон: получение, характеристика и использование в офтальмологии / Н.Л. Лепарская, Г.М. Сорокоумова, Ю.В. Сычева [и др.] // Вестник МИТХТ. – 2011. - Т. 6, – № 2. – С. 37-42.
4. Chono S., Tauchi Y., Deguchi Y., Morimoto K. Efficient drug delivery to atherosclerotic lesions and the antiatherosclerotic effect by dexamethasone incorporated into liposomes in atherogenic mice. Journal of Drug Targeting. 2005. vol. 13, no. 4. pp. 267–276.
5. Прокопенко Н.В. Сохранение структурно-функциональной целостности эритроцитов человека в средах различной тоничности / Н.В. Прокопенко // Вестник ХНАДУ. – 2011. – № 52. – С. 174-177.
6. Мороз В.В. Морфологические признаки острого повреждения легких различной этиологии (экспериментальное исследование) / В.В. Мороз // Общая реаниматология. - М., 2010. – Т. 3. – № 6. – С. 29-34.
Claims (3)
1. Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия, представляющий собой липосомы размером 320±20 нм, содержащие дексаметазон в концентрации 2,98 мг/мл в 7,5%-ном растворе хлорида натрия, отличающийся тем, что липосомы находятся в гипертонической водной среде и при внутривенном введении высвобождают лекарственную субстанцию дексаметазона в результате изменения осмолярности среды, набухания и разрыва липосомальных везикул.
2. Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия по п. 1, отличающийся тем, что липосомальную взвесь получают методом обращения фаз с использованием гипертонического 7,5%-ного раствора хлорида натрия.
3. Способ лечения острого повреждения легких на основе липосомального препарата по п. 1, включающий внутривенное введение липосом с дексаметазоном, находящихся в гипертонической водной среде 7,5%-ного раствора хлорида натрия.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017117200A RU2667467C1 (ru) | 2017-05-17 | 2017-05-17 | Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017117200A RU2667467C1 (ru) | 2017-05-17 | 2017-05-17 | Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2667467C1 true RU2667467C1 (ru) | 2018-09-19 |
Family
ID=63580403
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017117200A RU2667467C1 (ru) | 2017-05-17 | 2017-05-17 | Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2667467C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4791067B2 (ja) * | 2005-03-30 | 2011-10-12 | テルモ株式会社 | リポソーム製剤の製造方法 |
| CN102366411A (zh) * | 2011-09-14 | 2012-03-07 | 海南灵康制药有限公司 | 一种地塞米松棕榈酸酯脂质体注射液 |
| RU2468797C2 (ru) * | 2005-06-09 | 2012-12-10 | Биолипокс Аб | Способ и композиция для лечения воспалительных нарушений |
| RU2015103538A (ru) * | 2012-07-05 | 2016-08-20 | Тайвэн Липосом Ко, Лтд. | Способы лечения артрита |
-
2017
- 2017-05-17 RU RU2017117200A patent/RU2667467C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4791067B2 (ja) * | 2005-03-30 | 2011-10-12 | テルモ株式会社 | リポソーム製剤の製造方法 |
| RU2468797C2 (ru) * | 2005-06-09 | 2012-12-10 | Биолипокс Аб | Способ и композиция для лечения воспалительных нарушений |
| CN102366411A (zh) * | 2011-09-14 | 2012-03-07 | 海南灵康制药有限公司 | 一种地塞米松棕榈酸酯脂质体注射液 |
| RU2015103538A (ru) * | 2012-07-05 | 2016-08-20 | Тайвэн Липосом Ко, Лтд. | Способы лечения артрита |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЛЕПАРСКАЯ Н.Л. и др. Липосомы, содержащие дексаметазон: получение, характеристика и использование в офтальмологии // Вестник МИТХТ. - 2011. - Т. 6 - N. 2. - C. 37-42. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7976743B2 (en) | Gas-containing liposomes | |
| WO2018177420A1 (zh) | 一种生物膜包载药物纳米晶体的制备方法及其用途 | |
| TWI309569B (en) | Biocompatible dialysis fluids containing icodextrins | |
| Wrobeln et al. | Albumin-derived perfluorocarbon-based artificial oxygen carriers: A physico-chemical characterization and first in vivo evaluation of biocompatibility | |
| Bertrand et al. | Transmembrane pH-gradient liposomes to treat cardiovascular drug intoxication | |
| CN105055446A (zh) | 逆转、防止、延迟或稳定软组织钙化的方法 | |
| CN103391768A (zh) | 治疗慢性炎症和炎性疾病的组合物和方法 | |
| BRPI0619475B1 (pt) | Composições farmacêuticas na forma de lipossomas compreendendo ciclosporina a, seu método de preparo e usos | |
| CN103781489A (zh) | 用于基于血红蛋白的氧载体的口服递送 | |
| CN104586885A (zh) | 一种复方碳酸氢钠电解质注射液组合物及其制备方法 | |
| CN109803724A (zh) | 用于治疗肺纤维化的色甘酸组合物 | |
| Qin et al. | Preparation and characterization of protein-loaded PFC nanoemulsions for the treatment of heart diseases by pulmonary administration | |
| US20080261902A1 (en) | Pharmaceutical composition containing polydatin and its application | |
| CN108143719B (zh) | 一种携载多肽的纳米脂质体及其制备方法和应用 | |
| CN105496959B (zh) | 具有大鼠肺主动靶向性的甲强龙免疫纳米脂质体及其制备方法 | |
| RU2667467C1 (ru) | Липосомальный препарат дексаметазона в гипертоническом растворе хлорида натрия и способ лечения острого повреждения легких на его основе | |
| Li et al. | Pressure-sensitive multivesicular liposomes as a smart drug-delivery system for high-altitude pulmonary edema | |
| CN106031710A (zh) | 一种富马酸氟呐普拉赞的注射剂及其制备方法 | |
| Kaipel et al. | Increased biological half-life of aerosolized liposomal recombinant human Cu/Zn superoxide dismutase in pigs | |
| JPS58502204A (ja) | 合成全血およびその製造方法 | |
| CN110464835A (zh) | 一种胰岛素柔性微粒及其制剂 | |
| EP4151206A1 (en) | Pharmaceutical composition used to treat subject in hypoxic state due to respiratory failure, etc | |
| RU2174843C2 (ru) | Липосомная композиция человеческого кальцитонинного генного пептида и способ ее получения | |
| Nayak et al. | Formulation and design optimization of repaglinide loaded transferosomes for management of type II diabetes mellitus | |
| KR19990022586A (ko) | 혈관 산화질소 저장기로서의 액체 플루오로카본에멀젼 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200518 |