RU2657763C1 - Method for diagnostics of parkinson's disease - Google Patents
Method for diagnostics of parkinson's disease Download PDFInfo
- Publication number
- RU2657763C1 RU2657763C1 RU2017132048A RU2017132048A RU2657763C1 RU 2657763 C1 RU2657763 C1 RU 2657763C1 RU 2017132048 A RU2017132048 A RU 2017132048A RU 2017132048 A RU2017132048 A RU 2017132048A RU 2657763 C1 RU2657763 C1 RU 2657763C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- synuclein
- disease
- parkinson
- concentration
- alpha
- Prior art date
Links
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 102000003802 alpha-Synuclein Human genes 0.000 claims abstract description 30
- 108090000185 alpha-Synuclein Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims description 6
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 3
- 101100021877 Homo sapiens LRRK2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101150081013 LRRK2 gene Proteins 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005064 dopaminergic neuron Anatomy 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000035 BCA protein assay Methods 0.000 description 1
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 101000834898 Homo sapiens Alpha-synuclein Proteins 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010071390 Resting tremor Diseases 0.000 description 1
- 102000019355 Synuclein Human genes 0.000 description 1
- 108050006783 Synuclein Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 101150087698 alpha gene Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003518 presynaptic effect Effects 0.000 description 1
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 102220148494 rs356165 Human genes 0.000 description 1
- 102210007183 rs356219 Human genes 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000003523 substantia nigra Anatomy 0.000 description 1
- 230000015883 synaptic transmission, dopaminergic Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики болезни Паркинсона (БП).The invention relates to medicine, namely to neurology, clinical laboratory diagnostics, and can be used to diagnose Parkinson's disease (PD).
БП - наиболее распространенное нейродегенеративное заболевание после болезни Альцгеймера. На сегодняшний день ключевым звеном в патогенезе БП считается накопление и агрегация пресинаптического белка альфа-синуклеина в дофаминергических нейронах черной субстанции головного мозга, приводя к их гибели и развитию характерной симптоматики.PD is the most common neurodegenerative disease after Alzheimer's disease. To date, the key link in the pathogenesis of PD is the accumulation and aggregation of the presynaptic alpha-synuclein protein in dopaminergic neurons of the substantia nigra, leading to their death and the development of characteristic symptoms.
Было показано статистически значимое повышение олигомерного альфа-синуклеина плазмы крови пациентов с болезнью Паркинсона по сравнению с индивидуумами контрольной группы (p<0,002) (El-Agnaf ОМ, Salem SA, Paleologou KE, Curran MD, Gibson MJ, Court JA, Schlossmacher MG, Allsop D. Detection of oligomeric forms of alpha-synuclein protein in human plasma as a potential biomarker for Parkinson's disease. // FASEB J. – 2006. - №20(3). - P. 419-25.). Однако позднее показано отсутствие различий в уровне олигомерного альфа-синуклеина плазмы крови при сравнении группы пациентов с БП и контроля (Foulds PG, Mitchell JD, Parker A, Turner R, Green G, Diggle P, Hasegawa M, Taylor M, Mann D, Allsop D. Phosphorylated α-synuclein can be detected in blood plasma and is potentially a useful biomarker for Parkinson's disease. // FASEB J. – 2011. - №25 (12). - P. 4127-37).A statistically significant increase in the oligomeric alpha-synuclein of blood plasma of patients with Parkinson's disease compared with individuals of the control group (p <0.002) (El-Agnaf OM, Salem SA, Paleologou KE, Curran MD, Gibson MJ, Court JA, Schlossmacher MG, Allsop D. Detection of oligomeric forms of alpha-synuclein protein in human plasma as a potential biomarker for Parkinson's disease. // FASEB J. - 2006. - No. 20 (3). - P. 419-25.). However, later it was shown that there are no differences in the level of oligomeric alpha-synuclein of blood plasma when comparing a group of patients with PD and control (Foulds PG, Mitchell JD, Parker A, Turner R, Green G, Diggle P, Hasegawa M, Taylor M, Mann D, Allsop D. Phosphorylated α-synuclein can be detected in blood plasma and is potentially a useful biomarker for Parkinson's disease. // FASEB J. - 2011. - No. 25 (12). - P. 4127-37).
Противоречивость полученных результатов может быть обусловлена контаминацией олигомерным альфа-синуклеином целевых образцов плазмы крови в результате как внутреннего физиологического гемолиза эритроцитов, так и внешнего, связанного с процедурой забора материала. Это является существенным ограничением в применимости используемых в указанных исследованиях подходов, поскольку искажение конечных результатов может быть существенным в связи с тем, что содержание альфа-синуклеина в эритроцитах во много раз превышает его содержание в других фракциях клеток крови. Кроме того, используемые в указанных выше исследованиях методики по оценке олигомерного альфа-синуклеина не показали диагностической значимости по причине низкой чувствительности и специфичности.The inconsistency of the results can be due to contamination of the target blood plasma samples with oligomeric alpha-synuclein as a result of both internal physiological hemolysis of red blood cells and external, associated with the procedure of taking the material. This is a significant limitation in the applicability of the approaches used in these studies, since the distortion of the final results can be significant due to the fact that the content of alpha-synuclein in erythrocytes is many times higher than its content in other fractions of blood cells. In addition, the methods used in the above studies to evaluate oligomeric alpha-synuclein did not show diagnostic significance due to low sensitivity and specificity.
Известно исследование (П.А. Андоскин, Емельянов, М.А. Николаев, К.А. Сенкевич, В.П. Шилин, А.А. Тимофеева, А.Ф. Якимовский, С.Н. Пчелина. Влияние дофамина плазмы на уровень альфа-синуклеина CD45+ клеток крови при болезни Паркинсона. // Ученые записки СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова. Том XXII. №2. – 2015. - С. 14-17), в котором в качестве биомаркера БП рассматривался общий альфа-синуклеин гомогенной фракции клеток крови, полученной методом магнитного сортинга, а именно - CD45+ клеток, экспрессирующих основные белки дофаминергической нейротрансмиссии и, таким образом, отражающих процессы метаболизма альфа-синуклеина в дофаминергических нейронах. При оценке уровня общего альфа-синуклеина в CD45+ в клетках крови был обнаружен более высокий уровень у пациентов с БП (n=14) по сравнению с пациентами контрольной группы (n=17) (p=0,04). Однако при расширении исследуемых групп различий в уровне общего альфа-синуклеина между группой пациентов с БП (n=43) и контрольной группой (n=39) не получено (p=0,28) (Емельянов А.К., Андоскин П.А., Милюхина И.В., Тимофеева А.А., Якимовский А.Ф., Сенкевич К.А., Николаев М.А., Пчелина С.Н. Ассоциация rs356219 и rs356165 с Болезнью Паркинсона и повышенной экспрессией гена альфа-синуклеина в CD45+ клетках. // Цитология, 2016. - N 2. - С. 99-104.).A study is known (P.A. Andoskin, Emelyanov, M.A. Nikolaev, K.A. Senkevich, V.P. Shilin, A.A. Timofeeva, A.F. Yakimovsky, S.N. Pchelin. Effect of plasma dopamine on the level of alpha-synuclein of CD45 + blood cells in Parkinson's disease. // Scientific notes of St. Petersburg State Medical University named after academician IP Pavlov. Volume XXII. No. 2. - 2015. - P. 14-17), in which as a biomarker BP we examined the total alpha synuclein of a homogeneous fraction of blood cells obtained by magnetic sorting, namely, CD45 + cells expressing the main proteins of dopaminergic neurotransmission and, thus, property of reflecting the metabolic processes of alpha-synuclein in dopaminergic neurons. When assessing the level of total alpha-synuclein in CD45 + in blood cells, a higher level was found in patients with PD (n = 14) compared with patients in the control group (n = 17) (p = 0.04). However, with the expansion of the studied groups, differences in the level of total alpha synuclein between the group of patients with PD (n = 43) and the control group (n = 39) were not obtained (p = 0.28) (Emelyanov A.K., Andoskin P.A. ., Milyukhina I.V., Timofeeva A.A., Yakimovsky A.F., Senkevich K.A., Nikolaev M.A., Pchelina S.N. Association of rs356219 and rs356165 with Parkinson's disease and increased alpha gene expression synuclein in CD45 + cells. // Cytology, 2016. - N 2. - P. 99-104.).
Технический результат заявленного изобретения заключается в создании способа диагностики БП, обладающего высокой чувствительностью и специфичностью.The technical result of the claimed invention is to create a method for the diagnosis of BP with high sensitivity and specificity.
Заявленный технический результат достигается тем, что в способе диагностики болезни Паркинсона, включающем забор периферической крови, выделение однородной фракции CD45+ клеток и лизирование выделенной клеточной фракции, в лизате CD45+ клеток измеряют концентрацию олигомерного альфа-синуклеина и при концентрации более 2,7 пг/мл диагностируют болезнь Паркинсона.The claimed technical result is achieved by the fact that in a method for diagnosing Parkinson's disease, including peripheral blood sampling, isolating a homogeneous fraction of CD45 + cells and lysing the selected cell fraction, the concentration of oligomeric alpha synuclein is measured in a CD45 + cell lysate and diagnosed with a concentration of more than 2.7 pg / ml Parkinson's disease.
Способ разработан на основе проведенного исследования уровня олигомерного альфа-синуклеина в CD45+ клетках в группе пациентов с вновь диагностированной БП, не получавших лечения Л-ДОФА-содержащими препаратами (N=29, 12 муж., 17 жен., сред. возр. 61,11±7,20), по сравнению с соответствующей по возрасту и полу контрольной группой лиц, не имеющих неврологических расстройств (N=25, 11 муж., 14 жен., сред. возр. 59,56±8,01).The method is developed on the basis of a study of the level of oligomeric alpha-synuclein in CD45 + cells in a group of patients with newly diagnosed PD who did not receive treatment with L-DOPA-containing drugs (N = 29, 12 men, 17 women, medium age 61, 11 ± 7.20), compared with the corresponding age and gender of the control group of people without neurological disorders (N = 25, 11 men, 14 women, average age 59.56 ± 8.01).
При анализе концентрации олигомерного альфа-синуклеина в CD45+ клетках периферической крови (медиана (мин-макс), пг/мл), в группе пациентов с БП (3,29 (1,38-8,27), пг/мл) по сравнению с контрольной группой (2,014 (1,48-3,39), пг/мл) было установлено статистически значимое повышение уровня олигомерного альфа-синуклеина (p<0,0001).When analyzing the concentration of oligomeric alpha-synuclein in CD45 + peripheral blood cells (median (min-max), pg / ml), in the group of patients with PD (3.29 (1.38-8.27), pg / ml) compared with a control group (2.014 (1.48-3.39), pg / ml), a statistically significant increase in the level of oligomeric alpha-synuclein was found (p <0.0001).
Для оценки возможности использования уровня олигомерного альфа-синуклеина в CD45+ клетках в клинической практике, а именно для подтверждения диагноза БП, а также формирования групп риска среди лиц с отсутствием неврологических расстройств с повышенным уровнем олигомерного альфа-синуклеина в клетках, был проведен ROC-анализ с целью установления порога концентрации вышеуказанной формы белка. Точка отсечения концентрации олигомерного альфа-синуклеина составила 2,7 пг/мл. Чувствительность метода составила 69,0% (95% доверительный интервал 50,77-82,72%), специфичность метода - 91,7% (95% доверительный интервал 74,15-97,68%), индекс точности метода составил: 79,63%, площадь под ROC-кривой составила 0,84. Полученные данные позволили установить критерий диагностики БП.To assess the possibility of using the level of oligomeric alpha-synuclein in CD45 + cells in clinical practice, namely to confirm the diagnosis of PD, as well as the formation of risk groups among people with no neurological disorders with an increased level of oligomeric alpha-synuclein in the cells, an ROC analysis was performed with the purpose of establishing a threshold concentration of the above form of protein. The cut-off point for the concentration of oligomeric alpha synuclein was 2.7 pg / ml. The sensitivity of the method was 69.0% (95% confidence interval 50.77-82.72%), the specificity of the method was 91.7% (95% confidence interval 74.15-97.68%), the accuracy index of the method was: 79 , 63%, the area under the ROC curve was 0.84. The data obtained made it possible to establish a criterion for diagnosing BP.
На фигуре графически представлен уровень олигомерного альфа-синуклеина в CD45+ клетках периферической крови в группе пациентов с БП и контрольной группе.The figure graphically shows the level of oligomeric alpha-synuclein in CD45 + peripheral blood cells in the group of patients with PD and the control group.
Способ осуществляют, например, следующим образом.The method is carried out, for example, as follows.
Забор крови у пациентов проводят из вены в пробирку объемом 9 мл с ЭДТА. Выделение лимфоцитарной фракции периферической крови производят путем центрифугирования в градиенте плотности раствора фиколла (Ficoll-Paque PLUS, GE Healthcare). С целью получения фракции CD45+ клеток осуществляют магнитную сепарацию лимфоцитарной фракции путем смешивания с магнитными микрочастицами (CD45+ MicroBeads, human, Miltenyi Biotec, США), с дальнейшим использованием магнитного ручного сепаратора MACS (Miltenyi Biotec, США) и колонок для сортинга miniMACS типа MS (Miltenyi Biotec, США). В результате получают однородную фракцию CD45+ клеток крови, которую далее замораживают и хранят при температуре -80°C до выполнения иммуноферментного анализа (ИФА).Blood sampling in patients is carried out from a vein into a 9 ml tube with EDTA. The peripheral blood lymphocyte fraction is isolated by centrifugation in a density gradient ficoll solution (Ficoll-Paque PLUS, GE Healthcare). In order to obtain a fraction of CD45 + cells, magnetic separation of the lymphocytic fraction is carried out by mixing with magnetic microparticles (CD45 + MicroBeads, human, Miltenyi Biotec, USA), using MACS magnetic manual separator (Miltenyi Biotec, USA) and miniMACS sorting columns type MS (Miltenyi Biotec, USA). The result is a homogeneous fraction of CD45 + blood cells, which are then frozen and stored at -80 ° C until enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).
Перед выполнением ИФА осуществляют лизис CD45+ клеток крови с использованием набора Total Protein Extraction Kit (Chemicon (Millipore), США) согласно прилагаемой инструкции. Измерение уровня общего белка в клеточных лизатах проводят с использованием набора Pierce ВСА Protein Assay kit (Thermo Scientific, США) согласно прилагаемой инструкции. Для проведения ИФА могут быть использованы образцы клеточных лизатов с концентрацией общего белка 30-60 мкг. Определение концентрации олигомерного альфа-синуклеина в исследуемых образцах проводят на основе метода ИФА с использованием набора Human alpha-synuclein РАТНО ELISA (ajRoboscreen, Германия). В данном наборе используются моноклональные антитела 5G4, которые специфично связываются с олигомерным альфа-синуклеином, имеющим конформацию бета-складчатого листа. С целью построения стандартной кривой используют соответствующие разведения входящих в набор стандартов олигомеров альфа-синуклеина согласно инструкции. Аналитическая чувствительность вышеуказанного набора составляет 250-0,05 пг/мл. Концентрацию олигомерного альфа-синуклеина определяют путем детекции хемилюминесценции на планшетном спектрофлюориметре. При концентрации более 2,7 пг/мл диагностируют болезнь Паркинсона.Before ELISA, CD45 + blood cells are lysed using the Total Protein Extraction Kit (Chemicon (Millipore), USA) according to the attached instructions. Measurement of the level of total protein in cell lysates is carried out using the Pierce BCA Protein Assay kit (Thermo Scientific, USA) according to the attached instructions. For ELISA, samples of cell lysates with a total protein concentration of 30-60 μg can be used. Determination of the concentration of oligomeric alpha-synuclein in the studied samples is carried out on the basis of ELISA using the Human alpha-synuclein PATO ELISA kit (ajRoboscreen, Germany). This kit uses 5G4 monoclonal antibodies that specifically bind to an oligomeric alpha synuclein having a beta-folded conformation. In order to construct a standard curve, appropriate dilutions of the alpha-synuclein oligomers included in the set of standards are used according to the instructions. The analytical sensitivity of the above kit is 250-0.05 pg / ml. The concentration of oligomeric alpha synuclein is determined by detecting chemiluminescence on a plate spectrofluorimeter. At a concentration of more than 2.7 pg / ml, Parkinson's disease is diagnosed.
Способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.The method is illustrated by the following clinical examples.
1. Пациент 65 лет, со слов - отмечал смешанный тремор (покоя и постурально-кинетический) в левой руке более 10 лет, без нарастания характера, принимал пропанолол без выраженного эффекта, в течение последнего года появился тремор покоя с элементами постурально-кинетического в правой руке. Пациент также указал на изменение почерка, появление некоторой скованности, неловкости, замедленности движений в правой руке.1. A 65-year-old patient, according to his words, noted mixed tremor (resting and postural-kinetic) in his left hand for more than 10 years, without an increase in character, he took propanolol without a pronounced effect, during the last year there was a resting tremor with elements of postural-kinetic in the right hand. The patient also indicated a change in handwriting, the appearance of some stiffness, awkwardness, slow movement in the right hand.
У пациента был осуществлен забор периферической крови, методом магнитного сортинга выделена однородная фракция CD45+ клеток, в лизате CD45+ клеток измерена концентрация олигомерного альфа-синуклеина.A peripheral blood sampling was performed on the patient, a homogeneous fraction of CD45 + cells was isolated by magnetic sorting, and the concentration of oligomeric alpha-synuclein was measured in the CD45 + cell lysate.
Концентрация белка составила 4,2 пг/мл, что свидетельствует о диагнозе БП. На основании полученных данных врачом-неврологом назначена дофаминергическая терапия, при повторном осмотре через 1 месяц отмечается положительная динамика, уменьшение интенсивности тремора, снижение скованности.The protein concentration was 4.2 pg / ml, indicating a diagnosis of PD. On the basis of the data obtained, a neurologist prescribed dopaminergic therapy; upon repeated examination after 1 month, positive dynamics, a decrease in the intensity of tremor, and a decrease in stiffness are noted.
2. Пациент 43 лет, со слов пациента - отмечает скованность и легкий тремор покоя в правой руке в течение последних двух лет, также появились болевые ощущения в шейной области справа, элементы выраженного поворота головы вправо. С учетом выявленных клинических признаков необходимо было провести дифференциальный диагноз между дистонией и БП.2. The patient is 43 years old, according to the patient - notes stiffness and slight tremor of rest in the right hand for the last two years, pain also appeared in the cervical region on the right, elements of the pronounced turn of the head to the right. Given the identified clinical signs, it was necessary to conduct a differential diagnosis between dystonia and PD.
У пациента был осуществлен забор периферической крови, методом магнитного сортинга выделена однородная фракция CD45+ клеток, в лизате CD45+ клеток измерена концентрация олигомерного альфа-синуклеина.A peripheral blood sampling was performed on the patient, a homogeneous fraction of CD45 + cells was isolated by magnetic sorting, and the concentration of oligomeric alpha-synuclein was measured in the CD45 + cell lysate.
Концентрация белка составила 1,2 пг/мл, что является нормой. На основании полученных данных врачом-неврологом проведена инъекция ботулотоксина в шейную область, симптоматика полностью купировалась.The protein concentration was 1.2 pg / ml, which is the norm. Based on the data obtained, a neurologist performed an injection of botulinum toxin into the cervical region, the symptoms were completely stopped.
3. Пациентка 54 лет, с отягощенным анамнезом, мать больна БП, у тети тремор, к врачу не обращалась. В течение последних 5 лет отмечает появление запоров, незначительное снижение обоняния за последние несколько месяцев. Пациентке проведена генетическая диагностика, выявлена мутация G2019S в гене LRRK2. С учетом выявленного отягощенного анамнеза и известных данных о неполной пенетрантности в гене LRRK2 нельзя исключить премоторную стадию БП.3. A 54-year-old patient with a burdened anamnesis, her mother is sick with PD, aunt has tremor, did not consult a doctor. Over the past 5 years, the appearance of constipation, a slight decrease in smell over the past few months. The patient underwent genetic diagnosis, revealed a G2019S mutation in the LRRK2 gene. Considering the revealed burdened history and known data on incomplete penetrance in the LRRK2 gene, the premotor stage of PD cannot be ruled out.
У пациентки был осуществлен забор периферической крови, методом магнитного сортинга выделена однородная фракция CD45+ клеток, в лизате CD45+ клеток измерена концентрация олигомерного альфа-синуклеина.A peripheral blood sampling was performed on the patient, a homogeneous fraction of CD45 + cells was isolated by magnetic sorting, and the concentration of oligomeric alpha-synuclein was measured in the CD45 + cell lysate.
Концентрация белка составила 5,5 пг/мл, что свидетельствует о диагнозе БП. На основании полученных данных врачом-неврологом поставлена премоторная стадия БП, пациентке даны рекомендации по модификации образа жизни, рекомендован амбулаторный осмотр врачом неврологом 1 раз в 12 месяцев.The protein concentration was 5.5 pg / ml, indicating a diagnosis of PD. Based on the data obtained, the neurologist delivered the premotor stage of PD, the patient was given recommendations for lifestyle modification, an outpatient examination by a neurologist was recommended once every 12 months.
Заявленный способ обладает высокой точностью, чувствительностью и специфичностью, что позволяет устанавливать диагноз БП, а также формировать группы риска среди лиц с отсутствием неврологических расстройств.The claimed method has high accuracy, sensitivity and specificity, which allows you to establish a diagnosis of PD, as well as to form risk groups among people with no neurological disorders.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017132048A RU2657763C1 (en) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Method for diagnostics of parkinson's disease |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017132048A RU2657763C1 (en) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Method for diagnostics of parkinson's disease |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2657763C1 true RU2657763C1 (en) | 2018-06-15 |
Family
ID=62620424
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017132048A RU2657763C1 (en) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Method for diagnostics of parkinson's disease |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2657763C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2722666C1 (en) * | 2019-10-11 | 2020-06-02 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method for early diagnosis of parkinson's disease |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011104696A1 (en) * | 2010-02-26 | 2011-09-01 | Bioarctic Neuroscience Ab | Protofibril-binding antibodies and their use in therapeutic and diagnostic methods for parkinson's disease, dementia with lewy bodies and other alpha-synucleinopathies |
| RU2478209C1 (en) * | 2011-12-26 | 2013-03-27 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ УХА, ГОРЛА, НОСА И РЕЧИ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИИ (СПб НИИ ЛОР МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ) | Diagnostic technique for parkinson disease in patients with olfactory dysfunction |
| RU2606591C1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-01-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН | Method of early pre-clinical diagnosis of parkinson's disease |
-
2017
- 2017-09-12 RU RU2017132048A patent/RU2657763C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011104696A1 (en) * | 2010-02-26 | 2011-09-01 | Bioarctic Neuroscience Ab | Protofibril-binding antibodies and their use in therapeutic and diagnostic methods for parkinson's disease, dementia with lewy bodies and other alpha-synucleinopathies |
| RU2478209C1 (en) * | 2011-12-26 | 2013-03-27 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ УХА, ГОРЛА, НОСА И РЕЧИ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИИ (СПб НИИ ЛОР МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ) | Diagnostic technique for parkinson disease in patients with olfactory dysfunction |
| RU2606591C1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-01-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН | Method of early pre-clinical diagnosis of parkinson's disease |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| АНДОСКИН П.А. и др. Влияние дофамина плазмы на уровень альфа-синуклеина CD45+-клеток крови при болезни Паркинсона // Ученые записки СПбГМУ им. акакд. И.П. Павлова, 2015, Том XXII, N2, стр.14-17. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2722666C1 (en) * | 2019-10-11 | 2020-06-02 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method for early diagnosis of parkinson's disease |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tian et al. | Erythrocytic α-Synuclein as a potential biomarker for Parkinson’s disease | |
| JP5372213B2 (en) | Biomarker for depression, method for measuring biomarker for depression, computer program, and storage medium | |
| Mantovani et al. | Elevation of the terminal complement activation products C5a and C5b-9 in ALS patient blood | |
| Beers et al. | Elevated acute phase proteins reflect peripheral inflammation and disease severity in patients with amyotrophic lateral sclerosis | |
| CN106062559A (en) | Method for enriching cns-derived exosomes | |
| Mongan et al. | Peripheral complement proteins in schizophrenia: a systematic review and meta-analysis of serological studies | |
| Tanaka et al. | Identification of tuberculosis-associated proteins in whole blood supernatant | |
| WO2018221212A1 (en) | Biomarker for alzheimer's disease | |
| Mai et al. | Endotoxemia induces lung-brain coupling and multi-organ injury following cerebral ischemia-reperfusion | |
| CN111279193B (en) | Behcet's disease diagnosis kit and method for detecting metabolite difference in urine | |
| Yeh et al. | Higher senescence associated secretory phenotype and lower defense mediator in urinary extracellular vesicles of elders with and without Parkinson disease | |
| Lou et al. | Analysis of the value of serum biomarker LBP in the diagnosis of spinal tuberculosis | |
| Zhang et al. | The association between urinary Alzheimer-associated neuronal thread protein and cognitive impairment in late-life depression: a controlled pilot study | |
| RU2657763C1 (en) | Method for diagnostics of parkinson's disease | |
| Turck et al. | The quest for brain disorder biomarkers | |
| Cai et al. | Potential diagnostic value of PD‐1 in peripheral blood mononuclear cells of postmenopausal osteoporosis patients | |
| Eliseev et al. | Epidemiological analyses of tuberculosis in Archangelsk, Russia and implementation of a rapid assay for detection of resistance in this high burden setting | |
| JP2024529522A (en) | Peripheral blood mononuclear cell (PBMC) phenotypes as biomarkers in patients with Alzheimer's disease and/or mild cognitive impairment | |
| Soh et al. | Adipokines and the risk of active TB: a nested case-control study | |
| Triyani et al. | The relation of acid fast bacilli with Ziehl Neelsen staining and histopathologic examination of biopsy specimens in extrapulmonary TB suspected patients | |
| US20230025293A1 (en) | Methods and kits for diagnosing mild cognitive impairment | |
| Huebinger et al. | Comparison of protein concentrations in serum versus plasma from Alzheimer’s patients | |
| RU2764355C1 (en) | Method for predicting neurological recovery from the 14th to the 90th days of ischemic stroke of the brain | |
| CN113252910B (en) | Application of TIMP3 in anxiety and depression diagnosis | |
| JP7569552B2 (en) | Biomarkers for dementia diagnosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190913 |