RU2394837C2 - Контрастный агент, нацеленный на рецептор урокиназного активатора плазминогена - Google Patents
Контрастный агент, нацеленный на рецептор урокиназного активатора плазминогена Download PDFInfo
- Publication number
- RU2394837C2 RU2394837C2 RU2007111467/04A RU2007111467A RU2394837C2 RU 2394837 C2 RU2394837 C2 RU 2394837C2 RU 2007111467/04 A RU2007111467/04 A RU 2007111467/04A RU 2007111467 A RU2007111467 A RU 2007111467A RU 2394837 C2 RU2394837 C2 RU 2394837C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- group
- imaging
- peptide
- ser
- formula
- Prior art date
Links
- 108010042352 Urokinase Plasminogen Activator Receptors Proteins 0.000 title claims abstract description 34
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 title abstract description 39
- 102000004504 Urokinase Plasminogen Activator Receptors Human genes 0.000 title description 32
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 73
- 102000009816 urokinase plasminogen activator receptor activity proteins Human genes 0.000 claims abstract 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 18
- -1 superparamagnetic Chemical class 0.000 claims description 16
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 14
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 9
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 8
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 7
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 6
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 claims description 5
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 claims description 5
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 claims description 4
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 3
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000005293 ferrimagnetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000005294 ferromagnetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 claims description 3
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 claims description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 claims 3
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims 2
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 108040001269 urokinase plasminogen activator receptor activity proteins Proteins 0.000 abstract 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 21
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 19
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 14
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 13
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 13
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 13
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 11
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 9
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 7
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 6
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 6
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Chemical group 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 4
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M (4z)-1-(3-methylbutyl)-4-[[1-(3-methylbutyl)quinolin-1-ium-4-yl]methylidene]quinoline;iodide Chemical compound [I-].C12=CC=CC=C2N(CCC(C)C)C=CC1=CC1=CC=[N+](CCC(C)C)C2=CC=CC=C12 QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 3
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 3
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 3
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 3
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N β-cyclohexyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- NKIJBSVPDYIEAT-UHFFFAOYSA-N 1,4,7,10-tetrazacyclododec-10-ene Chemical compound C1CNCCN=CCNCCN1 NKIJBSVPDYIEAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 2.2.2-cryptand Chemical compound C1COCCOCCN2CCOCCOCCN1CCOCCOCC2 AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004964 sulfoalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 238000012285 ultrasound imaging Methods 0.000 description 2
- 238000007794 visualization technique Methods 0.000 description 2
- WJKZEQGDVZCGPZ-VIFPVBQESA-N (2s)-2-amino-3-cycloheptylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1CCCCCC1 WJKZEQGDVZCGPZ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KDYAKYRBGLKMAK-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-azaniumyl-3-cyclopentylpropanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CC1CCCC1 KDYAKYRBGLKMAK-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- XJAYIRLVNXHVIB-UHFFFAOYSA-N 1,6-diaminohexane-3,4-diol Chemical compound NCCC(O)C(O)CCN XJAYIRLVNXHVIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- GNTIRRQEPHPUCI-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethylamino]-2-oxoethoxy]acetic acid Chemical compound NCCOCCOCCOCCNC(=O)COCC(O)=O GNTIRRQEPHPUCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCNCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZESKRXOCXWCFX-UHFFFAOYSA-N 2-[bis[2-[carboxymethyl-[2-(methylamino)-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(=O)NC RZESKRXOCXWCFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDDWRLPTKIOUOF-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-9-ylmethyl n-[[4-[2-[bis(4-methylphenyl)methylamino]-2-oxoethoxy]phenyl]-(2,4-dimethoxyphenyl)methyl]carbamate Chemical compound COC1=CC(OC)=CC=C1C(C=1C=CC(OCC(=O)NC(C=2C=CC(C)=CC=2)C=2C=CC(C)=CC=2)=CC=1)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JDDWRLPTKIOUOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 229930195711 D-Serine Natural products 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 229930028154 D-arginine Natural products 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N D-histidine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 229930195721 D-histidine Natural products 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- 229910052692 Dysprosium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 1
- UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 101000638886 Homo sapiens Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NTWVQPHTOUKMDI-YFKPBYRVSA-N N-Methyl-arginine Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NTWVQPHTOUKMDI-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229930192627 Naphthoquinone Natural products 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229910052772 Samarium Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052771 Terbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010064390 Tumour invasion Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037354 amino acid metabolism Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004056 anthraquinones Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- ULLTUJJSCUPHDK-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde;trifluoromethanesulfonate;trimethylazanium Chemical compound C[NH+](C)C.[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F.O=CC1=CC=CC=C1 ULLTUJJSCUPHDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 239000000298 carbocyanine Substances 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- MUCZHBLJLSDCSD-UHFFFAOYSA-N diisopropyl fluorophosphate Chemical class CC(C)OP(F)(=O)OC(C)C MUCZHBLJLSDCSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 description 1
- KBQHZAAAGSGFKK-UHFFFAOYSA-N dysprosium atom Chemical compound [Dy] KBQHZAAAGSGFKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005672 electromagnetic field Effects 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N ethyl formate Chemical compound CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000003709 fluoroalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- RJOJUSXNYCILHH-UHFFFAOYSA-N gadolinium(3+) Chemical compound [Gd+3] RJOJUSXNYCILHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930004094 glycosylphosphatidylinositol Natural products 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N iohexol Chemical compound OCC(O)CN(C(=O)C)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- MBKDYNNUVRNNRF-UHFFFAOYSA-N medronic acid Chemical compound OP(O)(=O)CP(O)(O)=O MBKDYNNUVRNNRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 description 1
- 150000002791 naphthoquinones Chemical class 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 229910052755 nonmetal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 230000005258 radioactive decay Effects 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N samarium atom Chemical compound [Sm] KZUNJOHGWZRPMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N terbium atom Chemical compound [Tb] GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 150000004905 tetrazines Chemical class 0.000 description 1
- HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J tin(iv) chloride Chemical compound Cl[Sn](Cl)(Cl)Cl HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N tungsten Chemical compound [W] WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010937 tungsten Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к контрастным агентам для обнаружения рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR). Более конкретно, изобретение относится к контрастным агентам, содержащим пептидный вектор, связывающийся с uPAR, меченый визуализируемой группировкой. 2 н. и 4 з.п. ф-лы.
Description
Область изобретения
Изобретение относится к контрастным агентам для обнаружения рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR). Более конкретно, изобретение относится к контрастным агентам, содержащим пептидный вектор, связывающийся с uPAR, меченый визуализируемой группировкой. Контрастные агенты можно применять для идентификации сайтов, где экспрессируется uPAR, для диагностики заболеваний, связанных с этим рецептором.
Предшествующий уровень техники
Взаимодействие активатора плазминогена урокиназного типа (uРА) с клеточными поверхностями опосредовано исключительно его гликолипид-"заякоренным" рецептором (uPAR), с которым uРА связывается с высокой аффинностью.
uPAR локализован в наружном слое клеточных мембран посредством гликозил-фосфатидилинозитольной связи (GPI якорь). Он представляет собой богатый цистеином сильно гликозилированный белок, состоящий из трех гомологичных доменов. uРА состоит из каталитического С-концевого домена сериновой протеазы и модульного N-концевого участка, включающего домен, подобный фактору роста (GFD; ак 1-49), и "kringle"-домен (ак 50-135). Взаимодействие между uРА и uPAR главным образом опосредовано остатками 19-31 GFD uPA.
Поскольку установлено, что протеолитическая деградация внеклеточного матрикса играет роль в опухолевой инвазии и метастазировании, uPAR представляет собой потенциальную мишень для диагностических контрастных агентов. Оказывается, что uPAR обладает повышенными уровнями регуляции in vivo в большинстве карцином человека, исследованных к настоящему времени, и конкретно в самих опухолевых клетках, в связанных с опухолью эндотелиальных клетках, претерпевающих ангиогенез, и в макрофагах. Сверхэкспрессия uPAR у пациентов с раком присутствует при запущенном заболевании, и коррелирует с плохим прогнозом при различных карциномах человека. Тот факт, что экспрессия uPAR обладает повышенными уровнями регуляции только при патологических состояниях, в которые вовлечено ремоделирование внеклеточного матрикса и клеточная подвижность, таких как рак, делает его привлекательным маркером для диагностики.
В WO 01/25410 описаны меченые для диагностики или терапии белки и пептиды, нацеленные на uPAR. Этот пептид или белок содержит по меньшей мере 38 аминокислотных остатков, включая остатки 13-30 uPAR-связывающего сайта uРА.
В US 6277818 описаны циклические пептидные соединения, нацеленные на uPAR, которые можно конъюгировать с диагностической меткой. Эти пептиды основаны на аминокислотных остатках 20-30 uPA.
US 6514710 также направлен на циклические пептиды, обладающие аффинностью в отношении uPAR. Эти пептиды могут нести обнаруживаемую метку. Пептид содержит 11 аминокислот, соединенных связывающей единицей.
В Biochemistry (Ploug et al., 2001, 40, 12457-12168) описаны пептиды, нацеленные на uPAR, но не в контексте визуализации, включающие аминокислотные последовательности, которые описаны в настоящем документе.
Для эффективного нацеливания и визуализации uPAR необходим селективный вектор с высокой аффинностью, который является химически прочным и стабильным. Этим жестким условиям соответствуют контрастные агенты по изобретению.
Краткое изложение сущности изобретения
В свете нужд данной области техники в настоящем изобретении предложены контрастные агенты для обнаружения рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR). Более конкретно, изобретение относится к контрастному агенту, содержащему пептидную последовательность, связывающуюся с uPAR с высокой аффинностью, меченую визуализируемой группировкой. Ploug раскрыл, например, пептид, нацеленный на uPAR, с последовательностью X-Phe-X-X-Tyr-Leu-Trp-Ser, где использованы стандартные сокращения для аминокислот и где Х означает аминокислоту, выбранную из группы из 25 аминокислот.
Подробное описание изобретения
В свете первого аспекта в изобретении предложен контрастный агент, нацеленный на uPAR, формулы Iа,
где
Х0 представляет собой от 1 до 5 аминокислот,
X1, Х2, Х3, Х4 и Х5 независимо представляют собой одну аминокислоту,
Phe представляет собой фенилаланин,
Leu представляет собой лейцин,
Trp представляет собой триптофан,
Х6 представляет собой от 0 до 5 аминокислот или определен формулой (Ib),
где обозначения являются такими, как определено для формулы Ia,
и где
β-Ala представляет собой β-аланин,
Lys представляет собой лизин, и где
W1 и W2 представляют собой одинаковые или разные группировки, и индивидуально представляют собой спейсер, биомодификатор или отсутствуют, и по меньшей мере присутствует один Z1 или Z2, представляющий собой визуализируемую группировку, способную к обнаружению либо непосредственно, либо косвенно в процессе диагностической визуализации.
Все аминокислоты Х0, X1, Х2, Х3, Х4, Х5 и Х6 представляют собой природные или неприродные аминокислоты, и предпочтительно являются природными, за исключением X1, которая предпочтительно является неприродной. Все аминокислоты находятся либо в D-, либо в L-форме, где предпочтения приведены ниже.
X0-X1-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5-X6 компонент агента формулы Ia обладает аффинностью к uPAR и ниже обозначен как пептидный вектор. Пептидный вектор контрастного агента имеет гомологию с доменом фактора роста uРА, но отличается от векторов, нацеленных на uPAR, предшествующего уровня техники тем, что он не содержит аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности uРА человека.
Х0 представляет собой от 1 до 5 D- или L-аминокислот. Предпочтительно Х0 включает аминокислоты, выбранные из группы аланина (Ala), треонина (Thr), глицина (Gly), аспарагиновой кислоты (Asp) и глутаминовой кислоты (Glu). Аминокислоты предпочтительно находятся в L-форме, за исключением треонина, который предпочтительно находится в D-форме. Более предпочтительно Х0 представляет собой L-Asp, D-Thr или Gly-Gly-Asp.
X1 предпочтительно представляет собой β-циклоалкилаланин, более предпочтительно представляет собой β-циклопентилаланин, β-циклогексилаланин (Cha) или β-циклогептилаланин, и наиболее предпочтительно представляет собой β-циклогексилаланин.
Х2 предпочтительно представляет собой серин (Ser) или аланин (Ala), более предпочтительно серин и наиболее предпочтительно D-серин.
Х3 предпочтительно представляет собой аргинин (Arg) или миметик аргинина, такой как N-метиларгинин (mArg), тирозин (Туг) или аланин, более предпочтительно D-аргинин.
Х4 предпочтительно представляет собой тирозин, аланин, лейцин или циклогексилаланин, более предпочтительно тирозин, и наиболее предпочтительно L-тирозин.
Х5 предпочтительно представляет собой серин, гистидин (His), аланин, тирозин или лейцин, более предпочтительно L-серин или D-гистидин.
Х6 предпочтительно представляет собой от 0 до 5 D- или L-аминокислот.
Предпочтительно Х6 включает аминокислоты, выбранные из группы глицина, аспарагиновой кислоты, лизина, фенилаланина или β-аланина (β-Ala). Альтернативно, Х6 содержит группу формулы (Ib)
где все символы являются такими, как определено ранее, и где β-Ala формулы Ib связан с X5 формулы Ia. Пептидная цепь в скобках связана посредством ее Х5 с
ε-аминогруппой лизина. В этом варианте контрастный агент будет содержать димер, синтезированный на каркасе модифицированного лизина, в котором его
α-аминогруппа предварительно дериватизирована β-аланином с образованием, таким образом, псевдосимметричного димера в отношении α-атома углерода лизина. В этом варианте димер предпочтительно представляет собой гомодимер, где пептидные последовательности в двух мономерах являются одинаковыми. Наиболее предпочтительно Х6 отсутствует.
Неожиданно было обнаружено, что тирозин и серин, которые Ploug использует в положениях Х4 и Х5 пептидного вектора, соответственно, могут быть заменены другими аминокислотами, как изложено выше.
W1 и W2 индивидуально представляют собой группировку, действующую в качестве спейсера, биомодифицирующей группировки или их обоих, либо отсутствуют, и предпочтительно на основе монодисперсного полиэтиленгликолевого (ПЭГ) структурного элемента, содержащего от 1 до 10 единиц указанного структурного элемента. W1 или W2 также могут представлять собой от 1 до 10 аминокислотных остатков, предпочтительно включающих глицин, лизин, аспарагиновую кислоту, серин или аминогексановую кислоту. Более предпочтительно W1 или W2 содержит как аминокислотные остатки, так и структуру на основе ПЭГ, например 1-10 аминокислотных остатков в сочетании со структурой на основе ПЭГ. Предпочтительно либо W1, либо W2 представляет собой биомодификатор, и в предпочтительном воплощении по меньшей мере один из W1 или W2 представляет собой единицу, состоящую из монодисперсной структуры на основе ПЭГ, 17-амино-5-оксо-6-аза-3,9,12,15-тетраоксагептадекановой кислоты формулы (II)
где m равен целому числу от 1 до 10, и где С-конец представляет собой амидную или кислотную группировку. В качестве биомодификатора W1 или W2 обладает функцией модификации фармакокинетики и почечного клиренса соединений. Биомодификатор осуществляет меньший захват соединений в ткани, то есть в мышце, печени и так далее, предоставляя, таким образом, возможность для лучшей диагностической визуализации вследствие меньшей фоновой интерференции. Секреция осуществляется главным образом почками, что является дополнительным преимуществом биомодификатора.
В качестве биомодифицирующей группировки W1 или W2 предпочтительно является производным от глутаровой и/или янтарной кислоты и/или единицы на основе ПЭГ, например, включая группировку формулы II. Кроме того, W1 или W2 могут действовать в качестве спейсера со свойствами биомодификатора, связывающего визуализируемую группировку Z1 или Z2 с пептидным вектором. Другие репрезентативные спейсерные элементы включают в себя полисахариды структурного типа, полисахариды запасающего типа, полиаминокислоты и их метиловые и этиловые эфиры, а также полипептиды, олигосахариды и олигонуклеотиды, которые могут содержать или могут не содержать сайты ферментативного расщепления. Одна из ролей W1 или W2 как спейсерной группировки заключается в дистанцировании относительно объемной визуализируемой группировки от домена пептидного вектора, связывающего рецептор. Альтернативно, в наиболее простой форме W1 или W2 представляет собой функциональную связь или содержит функциональную группу, которая дает возможность легкой конъюгации визуализируемой группировки с пептидным вектором, и такие группы включают -NRa-, СO2, -N(C=S)-, -N(CO)-, -S, -O-, -O-NH2 и -СНО, где группа Ra независимо представляет собой Н, C1-10алкил, С3-10алкиларил, С2-10алкоксиалкил, C1-10гидроксиалкил, С1-10галогеноалкил и α-галогеноацетил.
Когда Z1 отсутствует, а W1 присутствует, W1 предпочтительно имеет N-конец со свободной аминогруппой или аминогруппой, содержащей группу, ингибирующую метаболизм. Под термином группа, ингибирующая метаболизм, подразумевают биосовместимую группу, которая ингибирует или подавляет метаболизм пептида или аминокислоты при амино-конце in vivo. Такие группы являются хорошо известными специалистам в данной области техники и их подходящим образом выбирают из группы ацетила, Воc (трет-бутилоксикарбонила), Fmoc (флуоренилметоксикарбонила), бензилоксикарбонила, трифторацетила и аллилоксикарбонила. Предпочтительными группами, ингибирующими метаболизм, являются ацетил и бензилоксикарбонил. Когда Z2 и W2 отсутствуют, С-конец пептидного вектора предпочтительно представляет собой амидную или карбоксильную группу и предпочтительно представляет собой амидную группу. Также, когда Z2 отсутствует, а W2, содержащий аминокислоты, присутствует, тогда W2 предпочтительно оканчивается амидной или карбоксильной группой; более предпочтительно амидной группой.
Контрастный агент по изобретению предпочтительно содержит линейный пептид, что означает отсутствие мостиков между какими-либо из аминокислот или между аминокислотами и другими группировками агента, которые образуют циклическую структуру. Следовательно, предпочтительно отсутствуют сульфидные, тиоэфирные мостики или другие мостики, образующие циклические пептидные структуры. Контрастный агент предпочтительно содержит максимально 20 аминокислот.
В предпочтительном воплощении пептидный вектор, представленный X0-X1-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5-X6 формулы Ia, содержит последовательность: X0-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser, так что контрастный агент имеет формулу Z1-W1-X0-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-X6-W2-Z2, где обозначения являются такими, как определено ранее.
Более предпочтительно пептидный вектор содержит последовательность:
Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser или
Thr-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser,
где курсивом обозначены D-аминокислоты, и где Х6 отсутствует.
Одним из примеров контрастного агента по изобретению является:
Z1-W1-Gly-Gly-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2,
где Z1 и W1 являются такими, как определено ранее, и где Х6, W2 и Z2 отсутствуют, и где С-конец представляет собой амидную группу.
По меньшей мере один из Z1 и Z2 присутствует и представляет собой визуализируемую группировку. Z ниже используют для обозначения либо Z1, либо Z2. Z может представлять собой любую визуализируемую группировку. Природа Z будет зависеть от метода визуализации, используемого при диагностике. Широкий ряд группировок, подходящих для обнаружения при визуализации in vivo, известен, например, из WO 98/47541, содержание которой включено здесь путем ссылки.
Z представляет собой группировку, способную к обнаружению либо непосредственно, либо косвенно в процессе диагностической визуализации in vivo, такой как радио- или ОЭКТ - (однофотонная эмиссионная компьютерная томография), ПЭТ - (позитронная эмиссионная томография), МР (магнитно-резонансная), рентгеновская, ультразвуковая или оптическая визуализация. Z содержит, например, группировку, которая испускает обнаруживаемое излучение, либо у которой можно вызвать испускание обнаруживаемого излучения (например, посредством радиоактивного распада, возбуждения флуоресценции, возбуждения спинового резонанса и так далее), группировку, которая воздействует на локальные электромагнитные поля (например, парамагнитного, сверхпарамагнитного, ферримагнитного или ферромагнитного типа), группировку, которая поглощает, испускает или рассеивает энергию излучения (например, хромофоры, частицы (включая пузырьки, содержащие газ или жидкость), тяжелый элемент и его соединения и так далее), и группировку, которая образует обнаруживаемое вещество (например, генераторы микропузырьков газа).
Визуализируемая группировка Z может быть представлена объектом М и группировкой Y1, где М представляет собой ионы металлов, парамагнитные металлы, радионуклиды металлов, тяжелые металлы и оксиды тяжелых металлов. Группировка Y1 должна быть способной к тому, чтобы нести одну или несколько группировок М. Под несением понимают любую форму ассоциации между группировкой Y1 и М, такую как химическая связь, например ковалентная связь, либо электровалентные или ионные связи, либо ассоциацию посредством абсорбции или любой другой тип ассоциации, и предпочтительно М хелатирован хелатирующей группировкой Y1.
Методы визуализации и визуализируемые группировки Z более подробно описаны ниже.
В первом воплощении данного аспекта Z содержит одну или более чем одну группировку М, полезную при методе радио- или ОЭКТ-визуализации, такую как ион радиоактивного металла или гамма-излучающий радиоактивный галоген, которую возможно несет группировка Y1. Предпочтительно М представляет собой гамма-излучатель с низкой или отсутствующей альфа- и бета-эмиссией и с периодом полураспада более одного часа. Предпочтительными группами М являются радионуклиды 67Ga, 111In, 123I, 125I, 131I, 81mKr 99Mo, 99mTc, 201TI и 133Xe. Наиболее предпочтительным является 99mТc.
Кроме того, М может быть представлена следующими изотопами или изотопными парами: 47Sc21; 141Ce58; 188Re75; 177Lu71; 199Au79; 47Sc21; 131I53; 67Сu29; 131I53 и 123I53, 188Rе75 и 99mТc43, 90Y39 и 87Y39; 47Sc21 и 44Sc21, 90Y39 и 123I53, 146Sm62 и 153Sm62; и 90Y39 и 111In49.
Когда М обозначает радионуклид металла для радио- или ОЭКТ-визуализации, тогда Y1 предпочтительно обозначает хелатирующий агент, подходящий для образования стабильного хелата с М. Такие хелатирующие агенты хорошо известны из уровня техники, и типичные примеры таких хелатирующих агентов описаны в Таблице I WO 01/77145.
В частности, предпочтительными являются хелатирующие агенты Y1 формулы (III)
где:
каждый R1, R2, R3 и R4 независимо представляет собой Н или С1-10алкил, С3-10алкиларил, С2-10алкоксиалкил, C1-10гидроксиалкил, С1-10алкиламин, C1-10фторалкил, либо 2 или более чем 2 группы R вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют карбоциклическое, гетероциклическое, насыщенное или ненасыщенное кольцо.
Более конкретно, предпочтительными являются хелатирующие агенты Y1 формулы (III), где R1, R2 и R3 представляют собой водород или метильные группы, а R4 представляет собой алкильную или алкиламино группу. Более предпочтительно Y1 представляет собой хелат формулы (IV), обозначенный здесь cPN216, и, наиболее предпочтительно визуализирующая группировка М представляет собой 99mТc. Знаком "звездочка" обозначен возможный сайт связывания.
Другие предпочтительные хелатирующие агенты имеют формулу (V)
где R1-R6 независимо представляют собой Н, алкил, арил или их комбинацию, где группы R1-R6 содержат одну или более чем одну функциональную группировку, такую, чтобы хелат можно было конъюгировать с W1 или W2 формулы (Ia). Подходящими функциональными группировками являются, например, алкиламин, алкилсульфид, алкоксиалкилкарбоксилат, ариламин, арилсульфид или альфа-галогеноацетил.
В тех случаях, когда Z представляет собой гамма-излучающий радиоактивный галоген, такой как 123I, 125I, 131I и 77Br, где 125I является предпочтительным, он может быть ковалентно связан c W1 или W2 посредством реакции замещения или присоединения, хорошо известной из уровня техники, или, альтернативно, с Х0 или Х6, если W1 или W2 отсутствует, либо непосредственно с X5, если Х6 отсутствует.
Во втором воплощении соединение формулы (Ia) содержит группировку Z, полезную при методе ПЭТ-визуализации. В таком случае Z содержит радиоактивный излучатель со свойствами излучения позитронов, предпочтительно - позитрон-излучающий радиоактивный неметалл. Предпочтительные группы Z содержат любой из излучателей позитронов 11С, 18F, 13N, 15O, 77F, 75Br, 76Br и 124I. Конкретно, 18F является предпочтительным. Подходящими металлическими излучателями позитронов являются 64Cu, 48V, 52Fe, 55Co, 94mTc, 68Ga или 82Rb, причем 68Ga является предпочтительным, которые могут быть хелатированы хелатирующим агентом Y1.
Неметаллические радионуклиды, такие как содержащие 18F, могут быть ковалентно связаны с группировкой W1 или W2, когда она присутствует, или, альтернативно, с Х0, Х5 или Х6 посредством реакции замещения или присоединения, хорошо известной из уровня техники.
Когда Z представляет собой 18F-меченую альдегидную, тиоловую или аминоокси-группу, тогда W1 или W2 предпочтительно имеет функциональную группу, содержащую альфа-галогеноацетильную группировку, альдегидную или аминоокси-группу. Химия сочетания тиолов, а также химия альдегидного или аминоокси-сочетания, 18F-синтоны и меченые пептиды, полученные с использованием этой химии, описаны в WO 03/080544 и WO 04/080492, содержание которых включено здесь путем ссылки. Альтернативно, 18F можно вводить посредством других группировок, содержащих 18F, таких как, например, 18F-фторбензальдегид. Тогда сайт связывания W1, W2, X0, X5 или Х6 предпочтительно должен содержать аминоокси-группу.
Когда М обозначает металлический излучатель позитронов для ПЭТ-визуализации, тогда Y1 обозначает хелатирующий агент, подходящий для образования стабильного хелата с М. Такие хелатирующие агенты хорошо известны из уровня техники, и типичные примеры таких хелатирующих агентов описаны в Таблице I WO 01/77145 и в предыдущем воплощении, относящемся к радио- и ОЭКТ-визуализации.
В предпочтительном воплощении Y1 представляет собой хелатирующий агент DOTA и М представляет собой 68Ga, который можно легко вводить в хелат с использованием методов микроволновой химии.
В третьем воплощении Z содержит группировку Y1, несущую одну или более чем одну группировку М, полезную при МР методе визуализации. М здесь обозначает парамагнитный металл; подходящие ионы таких металлов включают: Gd(III), Mn(II), Cu(II), Cr(III), Fe(III), Co(II), Er(II), Ni(II), Eu(III) или Dy(III). В частности, предпочтительными являются Gd(III), Dy(III), Fe(III) и Mn(II). Y1 обозначает хелатирующий агент, в частности такой хелатирующий агент, как ациклические или циклические полиаминокарбоксилаты (например, DTPA, DTPA-BMA, DOTA и DO3A), как описано, например, в US 4647447 и WO 86/02841. Также М может обозначать оксиды металлов, такие как оксиды металлов суперпарамагнитного, ферримагнитного или ферромагнитного типа, которые адсорбируются Y1 или связываются с Y1, например, таким образом, чтобы Y1 функционировала в качестве покрытия для оксида металла. Оксиды металлов для применения в качестве МР контрастных агентов описаны, например, в патенте США 6230777, который включен здесь путем ссылки.
В четвертом воплощении Z представляет собой визуализируемую группировку, полезную при рентгеновском методе визуализации. Z здесь содержит тяжелый металл, такой как вольфрам, золото и висмут, предпочтительно в форме оксидов. Также Z может быть представлен йодированными арильными производными, в частности, хорошо известными в качестве рентгеноконтрастных агентов, например, Lopamiron™ и Omnipaque™. Эти агенты могут быть связаны посредством их кислотной или аминной функциональных групп с пептидным вектором формулы (Iа), возможно посредством W1 или W2.
В следующем воплощении соединение формулы (Ia) содержит Z в форме микропузырьков, заполненных газом. Такие агенты ультразвуковой визуализации можно использовать при визуализации рецепторов, когда они, например, функционализированы для связывания с пептидом, как описано в уровне техники, например, в WO 98/18500.
В шестом и предпочтительном воплощении настоящего изобретения группировка Z формулы (Ia) может представлять собой любую группировку, способную к обнаружению либо непосредственно, либо косвенно в процессе оптической визуализации. Обнаруживаемая группировка может представлять собой светорассеиватель (например, окрашенную или неокрашенную частицу), светопоглотитель или светоизлучатель. Более предпочтительно Z представлен красителем, таким как хромофор, или флуоресцентным соединением. Группировкой Z может быть любой краситель, который взаимодействует со светом в электромагнитном спектре с длинами волн от ультрафиолетового света до ближнего инфракрасного света. В предпочтительном варианте Z обладает флуоресцентными свойствами.
Предпочтительные группировки органических красителей включают группы, имеющие обширную систему делокализованных электронов, например цианины, мероцианины, индоцианины, фталоцианины, нафталоцианины, трифенилметины, порфирины, пирилиевые красители, тиапирилиевые красители, скварилиевые красители, крокониевые красители, азулениевые красители, индоанилины, бензофеноксазиниевые красители, бензотиафеноксазиниевые красители, антрахиноны, нафтохиноны, индатрены, фталоилакридоны, трисфенохиноны, азокрасители, красители с внутримолекулярным и межмолекулярным переносом заряда и комплексы красителей, тропоны, тетразины, бис(дитиолен)овые комплексы, бис(бензол-дитиолат)ные комплексы, йоданилиновые красители и бис(S,O-дитиолен)овые комплексы. Из флуоресцентных красителей группа цианиновых красителей является предпочтительной. Еще более предпочтительными являются группы карбацианинов, оксацианинов, тиацианинов и азацианинов. Группы Су5- и Су7-красителей являются наиболее предпочтительными флуоресцентными красителями, и они могут быть связаны с пептидным вектором посредством N-гидроксисукцинимидного сложного эфира (NHS-сложного эфира). Флуоресцентные белки, такие как зеленый флуоресцентный белок (GFP) и модификации GFP, которые обладают различными абсорбционными/эмиссионными свойствами, также являются полезными. В определенных случаях применяют комплексы некоторых редкоземельных металлов (например, европия, самария, тербия или диспрозия), как и флуоресцентные нанокристаллы (квантовые точки).
Предпочтительные красители выбраны из группы карбацианинов; еще более предпочтительными являются карбацианиновые красители индольного типа. Предпочтительные красители данного типа проиллюстрированы формулой VI:
где группы Q1 являются одинаковыми или разными и представляют собой замещенные или незамещенные низшие алкильные группы, например C1-С6алкильные группы, которые являются возможно замещенными. Алкильные группы замещены, например, карбоксигруппами, группами сульфоновой кислоты, амино-, аммониевыми или сложноэфирными группами, такими как гетероциклические сложноэфирные группы (например, NHS-сложный эфир). Группы Q2 являются одинаковыми или разными и представляют собой низшие алкильные группы, такие как С1-С6алкилы, предпочтительно метильные группы, возможно замещенные, например, карбоксигруппами или группами сульфоновой кислоты. Возможные ароматические группы указаны пунктирными линиями, чтобы включить структуры, содержащие как конденсированные бензокольца, так и конденсированные нафтокольца. Любые кольца являются замещенными или незамещенными. Эти кольца могут быть замещены группой V, выбранной из групп сульфоновой кислоты, карбоксильных групп, гидроксильных групп, алкил(сульфоалкил)аминогрупп, бис(сульфоалкил)-аминогрупп, сульфоалкоксигрупп, сульфоалкилсульфонильных групп, алкильных, либо замещенных алкильных, либо сульфоалкиламиногрупп. р представляет собой положительное целое число 1, 2, 3 или 4. Предпочтительно цианиновый краситель представляет собой пентаметиновый или гептаметиновый краситель с углеродными мостиками из 5 и 7 атомов углерода, соответственно.
Q1, Q2 и V представляют собой потенциальные сайты связывания для связывания красителя с пептидным вектором, возможно посредством W1 и/или W2, причем группы Q1 и V являются предпочтительными сайтами связывания. В предпочтительном аспекте одна группа Q1 связана с пептидным вектором, в то время как другая группа Q1 представляет собой возможно замещенную низшую алкильную группу.
В свете второго аспекта в изобретении предложены соединения формулы (VII), нацеленные на uPAR:
где обозначения являются такими, как определено для формулы Ia, и где по меньшей мере один из W1 и W2 присутствует и представляет собой биомодификатор, как описано. Соединения формулы VII могут быть связаны с визуализируемой группировкой, как описано в первом аспекте, или могут иметь другие применения, такие как в терапии.
Соединения по настоящему изобретению могут быть синтезированы с использованием известных способов химического синтеза, но особенно полезна твердофазная методология по Меррифилду, использующая автоматизированный пептидный синтезатор (J. Am. Chem. Soc, 85: 2149 (1964)). Обычно с помощью твердофазного пептидного синтеза собирают целевые последовательности. Стандартные методики стратегии синтеза, используемые в примерах данного изобретения, описаны Е. Atherton & R.C. Sheppard в "Solid phase peptide synthesis: a practical approach", 1989, IRL Press, Oxford.
Например, используют смолы с разнообразными кислотолабильными линкерными группами, которые будут давать пептиды с С-концевой(ым) кислотой, амином или амидом. Затем удаляют амино-защитную группу, и, используя подходящий реагент конденсации, сочетают вторую аминокислоту в последовательности. Применяют аминокислоты с полустабильными (semipermanent) амино-защитными группами и стабильными защитными группами для функциональных боковых цепей. Затем циклы удаления амино-защитной группы и сочетания повторяют в чередующихся стадиях до тех пор, пока не собирают последовательность, представляющую интерес.
Альтернативно, пептиды можно синтезировать способами пептидного синтеза в растворе, хорошо известными в данной области техники, или ступенчатым способом от карбоксильного конца и/или посредством применения способов конденсации сегмента или сшивания, используя стратегии защиты в полном объеме или минимальной защиты. Также можно применять комбинированные подходы к конденсации сегментов "раствор - твердая фаза".
В целом присутствующие реакционноспособные группы боковых цепей (например, амино, гидроксильные, гуанидино и карбоксильные группы) будут защищены в процессе всего синтеза, как указано выше. Известен широкий набор защитных групп для аминокислот (смотри, например, Greene, T.W. & Wuts, P.G.M. (1991) Protective groups in organic synthesis, John Wiley & Sons, New York). Амино-защитные группы, которые можно использовать, включают 9-флуоренилметоксикарбонил (Fmoc) и трет-бутилоксикарбонил (Воc). Защитные группы боковых цепей, которые можно использовать, включают трет-бутил (tBu), тритил (Trt), Воc и 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил (Pmc). Очевидно, что в данной области техники известен широкий ряд других таких групп.
Наконец, стабильные защитные группы боковых цепей удаляют, и пептид отщепляют от смолы, обычно одновременно посредством обработки подходящим кислотным реагентом, например трифторуксусной кислотой (TFA).
W1 и/или W2 можно конъюгировать с пептидным вектором, используя известные способы химического синтеза. Особенно полезной является прямая конъюгация W1 и/или W2 с пептидным вектором путем образования амидной связи, как для получения пептидного вектора. Альтернативно, можно использовать реакцию нуклеофильного замещения, где уходящая группа на пептидном N-конце заменяется нуклеофильной группой W1 и/или W2. Такой уходящей группой может быть бромид, присоединенный в альфа-положении к карбонильной группе, и таким нуклеофилом может быть атом азота.
Z можно конъюгировать непосредственно с пептидом, используя такие же способы, как для конъюгации W1 и/или W2 с пептидным вектором. В случае, когда Z присоединен к пептиду посредством W1 и/или W2, любые способы химического синтеза можно использовать при конъюгации Z и W1 или W2. В частности, полезным является автоматическое сочетание Z с образованием, например, амидной связи между пептидом и визуализируемой группировкой. Способы для связывания репортерной группировки с пептидом хорошо известны в данной области техники, и они будут зависеть от выбранного репортера и используемых спейсеров.
Пептидный вектор и контрастный агент можно очистить с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и охарактеризовать с помощью масс-спектрометрии и аналитической ВЭЖХ.
Требования к соединениям по изобретению в функционировании в качестве эффективных контрастных агентов системы uPA/uPAR состоят в том, что, с одной стороны, пептидный вектор должен обладать высокой аффинностью к рецептору, а с другой стороны, что вектор должен "оставаться" на рецепторе до тех пор, пока это необходимо. Таким образом, система контрастный агент/uPAR предпочтительно должна проявлять медленную кинетику диссоциации (так называемую "скорость диссоциации" ("off-rate")), которую удобно выражать в виде константы скорости диссоциации Kdiss. Обнаружено, что контрастные агенты по изобретению обладают значительно улучшенной кинетикой связывания рецептора. На этом основании контрастные агенты по изобретению, которые являются особенно предпочтительными, имеют константу скорости диссоциации (Kdiss) относительно домена фактора роста uPA (GFD) предпочтительно менее 50, более предпочтительно менее 20, еще более предпочтительно менее 10, и наиболее предпочтительно менее 1.
Контрастные агенты по изобретению предпочтительно способны ингибировать связывание uPA с uPAR клеточной поверхности. Контрастный агент по изобретению предпочтительно является равносильным инактивированным диизопропилфторфосфатами uРА. Параметр IC50 дает концентрацию, где 50% uPA вытесняется. Предпочтительные контрастные агенты по изобретению имеют IC50 менее 50 нМ, предпочтительно менее 25 нМ, более предпочтительно менее 10 нМ, и даже более предпочтительно менее 3 нМ.
Контрастные агенты согласно изобретению предпочтительно применяют для идентификации сайтов, где экспрессируется uPAR, для диагностики заболеваний, связанных с повышенным уровнем регуляции рецептора. Предпочтительно рецептор представлен в больной ткани более чем на 50% по сравнению с окружающей тканью. Более предпочтительно рецептор является более чем в два раза более представленным в больной ткани, чем в окружающей ткани. Еще более предпочтительно, чтобы рецептор был по меньшей мере в 5 раз более представленным в больной ткани, чем в окружающей ткани.
В свете следующего аспекта изобретения предложен способ обнаружения присутствия uPAR на поверхности клетки, в ткани, в органе или в биологическом образце, подозреваемом на сверхэкспрессию uPAR вследствие патологического состояния. Этот способ включает стадии:
а) приведения в контакт клетки, ткани, органа или биологического образца с контрастным агентом по изобретению и
б) обнаружения присутствия визуализируемой группировки, связанной с клеткой, тканью, органом или образцом. При данном способе как приведение в контакт, так и обнаружение можно проводить in vitro; альтернативно приведение в контакт проводят in vivo, а обнаружение in vitro, предпочтительно приведение в контакт и обнаружение проводят in vivo.
Предпочтительный способ включает получение изображения организма человека или животного посредством диагностической визуализации, включающей введение контрастного агента, как описано, в указанный организм, например в сосудистую систему, и получение изображения по меньшей мере части указанного организма, в котором распределен указанный контрастный агент.
В свете еще одного следующего аспекта в изобретении предложен способ получения улучшенных изображений организма человека или животного путем визуализации, в который предварительно введена композиция контрастного агента, содержащая контрастный агент, как определено, при котором получают изображение по меньшей мере части указанного организма.
Новые контрастные агенты по изобретению можно применять в качестве контрастных агентов при любом методе визуализации в зависимости от выбранной визуализируемой группировки. Применение контрастных агентов при диагностической визуализации, следовательно, составляет аспект изобретения. Предпочтительный аспект составляют контрастные агенты, как описано, для применения при визуализации и диагностике различных форм рака и метастазирования, например рака молочной железы, кожи, ободочной и прямой кишки, поджелудочной железы, предстательной железы, легкого или яичника. Альтернативно контрастный агент можно применять для обнаружения заболеваний, где присутствуют активированные макрофаги, таких как чувствительные бляшки при атеросклерозе.
В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество, например количество, эффективное для улучшенной контрастности изображения при визуализации in vivo, контрастного агента по изобретению или его соли вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми адъювантами, эксципиентами или разбавителями.
В свете следующего аспекта в изобретении предложено применение контрастного агента по изобретению для изготовления агента, улучшающего контрастность, для применения в способе диагностики, включающем введение указанного агента, улучшающего контрастность, в организм человека или животного и получение изображения по меньшей мере части указанного организма.
Настоящее изобретение далее будет дополнительно проиллюстрировано с помощью не ограничивающих примеров, в которых использованы следующие сокращения:
BAEEG: бис-(аминоэтил)этиленгликоль
Воc: трет-бутилоксикарбонил
Cy: цианин
DEG: диэтиленгликоль
ДМФ: N,N-диметилформамид
Fmoc: 9-флуоренилметоксикарбонил
HATU: гексафторфосфат 2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония
ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография
Krytofix 222: 4,7,13,16,21,24-гексаокса-1,10-диазабицикло(8,8,8)гексакозан
ЖХ: жидкостная хроматография
МС: масс-спектрометрия
NHS: N-гидроксисукцинимид
NMM: N-метилморфолин
ПЭГ: полиэтиленгликоль
ФБ: фосфатный буфер
Pmc: 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил
РуАОР: гексафторфосфат (7-азабензотриазол-1-илокси)три-пирролидинофосфония
Смола Rink Amide MBHA: 4-метилбензгидриламин, связанный с полистирольной матрицей
ОФ-ВЭЖХ: ВЭЖХ с обращенной фазой
КT: комнатная температура
Sep-Pak: разделительная колонка со смолой С18
TFA: трифторуксусная кислота
TIS:триизопропилсилан
Пример 1:
Cy5(бис-SO3)-Thr-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-OH (2).
Синтез H-Thr-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-OH (1).
Пептид, соответствующий приведенной выше последовательности, синтезировали стандартными методами твердофазной пептидной химии.
Конъюгация Су5(бис-SO3)-моно-NНS сложного эфира с пептидом (1).
Су5(бис-SO3)-моно-NНS сложный эфир (1,18 мг, 0,0017 ммоль) растворяли в ДМФ и к раствору добавляли пептид (1) (2 мг, 0,0015 ммоль) в виде твердого вещества с последующим добавлением NMM (0,55 мкл, 0,005 ммоль). Реакционный сосуд заворачивали в фольгу и помещали в прибор для встряхивания на 16 часов. Целевой продукт подтверждали масс-спектрометрией (МС) с электрораспылением: значение [М+Н]+продукта ожидали при 1850,85 m/z, обнаружили при 1850,9 m/z.
Пример 2:
Cy5(бис-SO3)-Gly-Gly-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (3).
Синтез Cу5(бис-SO3)-Gly-Gly-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (3).
Стандартными методами твердофазной пептидной химии собирали аминокислоты в приведенной выше последовательности. Затем в ДМФ растворяли Су5(бис-SO3)-моно-NНS сложный эфир (0,5 экв.) и добавляли к Н-Gly-Gly-Asp(OtBu)-Cha-Phe-Ser(tBu)-Arg(Pmc)-Tyr(tBu)-Leu-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Rink Amide MBHA смоле (1 экв.) с последующим добавлением NMM (3 экв.).
Реакционный сосуд заворачивали в фольгу и помещали в прибор для встряхивания на 16 часов. С пептида, конъюгированного с красителем Су5, снимали защиту и путем обработки TFA, содержащей 2,5% воды и 2,5% TIS, в течение 1 часа отщепляли его от смолы. Целевой продукт подтверждали МС с электрораспылением: значение [M+H]+продукта ожидали при 1977,88 m/z, обнаружили при 1977,8 m/z.
Пример 3:
Cy5(бис-SO3)-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-βAla-Lys(Cy5(бис-SO3)-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser)-NH2 (5).
Синтез H-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-βAla-Lys(H-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser)-NH2 (4).
Пептид, соответствующий приведенной выше последовательности, собирали стандартными методами твердофазной пептидной химии.
Конъюгация Су5(бис-SO3)-моно-NНS сложного эфира с пептидом (4).
Су5(бис-SO3)-моно-NНS сложный эфир (2,2 экв.) растворяют в ДМФ и к раствору добавляют пептид (4) (1 экв.) в виде твердого вещества с последующим добавлением NMM (3 экв.). Реакционный сосуд заворачивают в фольгу и помещают в прибор для встряхивания на 24 часа с получением желаемого бис-конъюгированного продукта. Продукт анализируют ОФ-ВЭЖХ и МС с электрораспылением.
Пример 4
N-(4-18F-фторбензилиден)аминооксиацетил-ПЭГ(4)-дигликолоил-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (8).
Синтез N-Вос-аминооксиацетил-ПЭГ(4)-дигликолоил-Аsp-Сhа-Рhе-Sеr-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (7).
Вос-аминооксиацетил-ПЭГ(4)-дигликолевая кислота может быть получена специалистом в данной области техники с использованием активного сложного эфира Вос-аминооксиуксусной кислоты, который подвергают взаимодействию с соответствующей амино-ПЭГ(4)-дигликолевой кислотой. Полученный продукт Вос-аминооксиацетил-ПЭГ(4)-дигликолевую кислоту (1,4 экв.) и РуАОР (1,2 экв.) растворяют в ДМФ. Добавляют NMM (2 экв., 200 мкл), и смесь перемешивают в течение 5 мин. Добавляют раствор пептида (6) (1 экв.) и NMM (4 экв.) в ДМФ, и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин. ДМФ выпаривают в вакууме, и продукт очищают, используя препаративную ОФ-ВЭЖХ. Фракции, содержащие целевой продукт, доводят до рН 5, используя смесь 0,3% аммиак (NН3)/вода перед лиофилизацией с целью предотвращения удаления Вос-защитной группы. Продукт анализируют ОФ-ВЭЖХ и МС с электрораспылением.
Мечение пептида (7) 18F.
18F-Фторид азеотропно сушат в присутствии Kryptofix 222 (5 мг в 0,5 мл ACN) и карбоната калия (50 мкл 0,1 М раствора) путем нагревания до 110°С в потоке азота в течение 20 мин. В течение этого времени добавляют и удаляют 3×0,5 мл ACN. Смесь охлаждают до температуры менее 40°С и добавляют триметиламмония бензальдегида трифлат, синтезированный согласно методике, описанной Haka et al. в J. Labelled Cpds. & Radiopharms 1989 27(7) 823, (1 мг в 0,4 мл диметилсульфоксида). Реакционный сосуд герметично закрывают и нагревают до 90°С в течение 15 мин для осуществления мечения. Затем раствор сырого 4-18F-фторбензальдегида охлаждают до комнатной температуры. Тем временем пептид (7) (6 мг) обрабатывают 5% воды в TFA (200 Јл) в течение 5 мин при комнатной температуре для удаления Вос-защитной группы. Растворители удаляют в вакууме. Пептид с удаленной защитой Воc повторно растворяют в 0,1 М растворе ацетата аммония (рН 4, 0,4 мл) и объединяют с раствором сырого 4-18F-фторбензальдегида в реакционном сосуде. Этот сосуд герметично закрывают и нагревают до 70°С в течение 15 мин для осуществления конъюгации. После охлаждения до комнатной температуры сырой конъюгат очищают препаративной ВЭЖХ. Фракцию, содержащую целевой конъюгат, разбавляют 10 мл воды и наносят на С 18 Sep-Pak (предварительно подготовленную путем последовательной промывки 10 мл этанола и 20 мл воды). Sep-Pak ополаскивают 10 мл воды, затем элюируют 2 мл этанола. Этанол удаляют в вакууме и готовят препарат продукта (8) в ФБ.
Пример 5
Ацетил-ПЭГ(4)-дигликолоил-Аsp-Сhа-Рhе-Sеr-Arg-Tyr-Lеu-Тrp-Ser-Gly-BAEEG-Glut-cPN216 (10).
Синтез аиетил-ПЭГ(4)-дигликолоил-Аsр-Сhа-Рhе-Sеr-Arg-Тyr-Lеu-Тrp-Sеr-Gly-BAEEG-NH2 (9).
Пептидил-смолу, соответствующую приведенной выше последовательности, синтезируют стандартными методами твердофазной пептидной химии. Ацетил-ПЭГ(4)-дигликолевую кислоту (5 экв.) и РуАОР (4,5 экв.) растворяют в ДМФ. Добавляют NMM (10 экв., 200 мкл), и смесь перемешивают в течение 5 мин. Затем эту смесь добавляют к пептидной смоле, предварительно набухшей в ДМФ, и реакцию продолжают в течение ночи. Затем с пептида снимают защиту и, используя TFA, содержащую 2,5% воды и 2,5% TIS, в течение 1 часа отщепляют его от смолы. Продукт анализируют ОФ-ВЭЖХ и МС с электрораспылением.
Конъюгация CPN216 с пептидом (9).
Пептид (9) (1 экв.) растворяют в ДМФ и добавляют cPN216-глутарил-тетрафтортиофениловый сложный эфир (2 экв.), а затем NMM (3 экв.). После перемешивания в течение ночи реакционную смесь обрабатывают путем удаления растворителя при пониженном давлении, и продукт (10) очищают препаративной ОФ-ВЭЖХ. Продукт анализируют ОФ-ВЭЖХ и МС с электрораспылением.
Мечение пептида (10) 99mTс.
Пептид (10) (0,1 мг) восстанавливают в солевом растворе или в метаноле (0,1 мл) и переносят в лиофилизированный набор эксципиентов Toolbox. Набор Toolbox, предназначенный для обеспечения общих условий радиоактивного мечения для хелатов на основе амина, содержал дегидрат хлорида двухвалентного олова (16 мкг), метилендифосфоновую кислоту (25 мкг), гидрокарбонат натрия (4500 мкг), карбонат натрия (600 мкг), пара-аминобензоат натрия (200 мкг), рН набора = 9,2. Затем путем впрыска добавляют пертехнетат натрия (99mTc) (2,1 ГБк) в солевом растворе (3 мл), набор переворачивают несколько раз для растворения содержимого, а затем оставляют инкубироваться при комнатной температуре на 15-20 мин. Образец сразу анализируют с помощью ВЭЖХ и ITLC (instant thin-layer chromatography, быстрой тонкослойной хроматографией), и меченый 99 mТс пептид (11) нужно вводить испытуемому субъекту между 1-3 часами после восстановления набора.
Пример 6
Комплекс гадолиния(III) с ацетил-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-Gly-BAEG-Glut-DOTA (15).
Синтез Ацетил-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-Glv-DEG-NH2 (12).
Пептид, соответствующий приведенной выше последовательности, синтезируют стандартными методами твердофазной пептидной химии.
Синтез Три-tBu-DOTA (13).
Три-tBu-DO3A (три-трет-бутиловый эфир 1,4,7,10-тетраазациклододекан-N,N',N''-триуксусной кислоты, 10 ммоль) и бромуксусную кислоту (10 ммоль) растворяли в МеОН (50 мл). Добавляли K2CO3 (30 ммоль), растворенный в воде (50 мл) (рН 11 в смеси МеОН/вода), и реакционную смесь перемешивали в течение 24 часов, а затем нагревали при 40 градусах в течение следующих 24 часов. Сырой продукт очищали ОФ-ВЭЖХ (Phenomenex Luna 5 микрон, С18, 250×21,2 мм, градиент 5-50% В в течение 40 мин при 10 мл/мин). Целевой продукт подтверждали МС с электрораспылением ([М+Na]+продукта ожидали при 595,4 m/z, обнаружили при [М+Na]+595,3 m/z), а также 1H-ЯМР при 80 градусах.
Синтез DОТА-конъюгированного пептида (14).
Три-tBu-DOTA (13) (три-трет-бутиловый эфир 1,4,7,10-тетраазациклододекан-N,N',N'',N'''-тетрауксусной кислоты, 1 экв.) активировали HATU (1 экв.) в ДМФ в присутствии и NMM (3 экв.) в течение 5 мин. Смесь добавляли к пептиду (12), и реакцию продолжали в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и продукт подвергали снятию tBu-защиты в TFA, содержащей 5% воды. Продукт очищали ОФ-ВЭЖХ и анализировали ОФ-ВЭЖХ и МС с электрораспылением.
Образование комплекса с Gd(III).
DOTA-конъюгированный пептид (14) (1 экв.) подвергали взаимодействию с GdCl3 (1 экв.) в водном растворе при рН 6,5 и КГ. Gd(III), не вступивший в реакцию образования комплекса, удаляли центрифугированием раствора при щелочном рН. Продукт (15) выделяли путем лиофилизации.
Claims (6)
1. Агент визуализации рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR) формулы А
где Cha представляет собой циклогексилаланин,
Phe представляет собой фенилаланин,
Ser представляет собой серин,
Arg представляет собой аргинин,
Tyr представляет собой тирозин,
Leu представляет собой лейцин,
Trp представляет собой триптофан,
Х6 представляет собой от 0 до 5 аминокислот, выбранных из группы глицина, аспарагиновой кислоты, лизина, фенилаланина или β-аланина, или определен формулой (В)
где пептидная цепь, указанная в скобках, соединена с ε-аминогруппой лизина через сериновый остаток (Ser),
β-Ala представляет собой β-аланин,
Lys представляет собой лизин,
терминальный Ser формулы В связан с W2 Формулы А, и где
каждый Х0 представляет собой от 1 до 5 аминокислот, выбранных из группы аланина, треонина, глицина, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты,
W1 и W2 каждый представляют собой одинаковые или разные группировки или отсутствуют, где по меньшей мере один из W1 и W2 содержит от 1 до 10 единиц монодисперсного полиэтиленгликолевого (ПЭГ) структурного элемента или от 1 до 10 аминокислотных остатков, и по меньшей мере присутствует один Z1 или Z2 и представляет собой визуализируемую группировку, способную к обнаружению либо непосредственно, либо косвенно в процессе диагностической визуализации, для использования в диагностике in vivo, где указанная визуализация включает радио-, ОЭКТ- (однофотонная эмиссионная компьютерная томография), ПЭТ-(позитронная эмиссионная томография), МР (магнитно-резонансную) или оптическую визуализацию.
где Cha представляет собой циклогексилаланин,
Phe представляет собой фенилаланин,
Ser представляет собой серин,
Arg представляет собой аргинин,
Tyr представляет собой тирозин,
Leu представляет собой лейцин,
Trp представляет собой триптофан,
Х6 представляет собой от 0 до 5 аминокислот, выбранных из группы глицина, аспарагиновой кислоты, лизина, фенилаланина или β-аланина, или определен формулой (В)
где пептидная цепь, указанная в скобках, соединена с ε-аминогруппой лизина через сериновый остаток (Ser),
β-Ala представляет собой β-аланин,
Lys представляет собой лизин,
терминальный Ser формулы В связан с W2 Формулы А, и где
каждый Х0 представляет собой от 1 до 5 аминокислот, выбранных из группы аланина, треонина, глицина, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты,
W1 и W2 каждый представляют собой одинаковые или разные группировки или отсутствуют, где по меньшей мере один из W1 и W2 содержит от 1 до 10 единиц монодисперсного полиэтиленгликолевого (ПЭГ) структурного элемента или от 1 до 10 аминокислотных остатков, и по меньшей мере присутствует один Z1 или Z2 и представляет собой визуализируемую группировку, способную к обнаружению либо непосредственно, либо косвенно в процессе диагностической визуализации, для использования в диагностике in vivo, где указанная визуализация включает радио-, ОЭКТ- (однофотонная эмиссионная компьютерная томография), ПЭТ-(позитронная эмиссионная томография), МР (магнитно-резонансную) или оптическую визуализацию.
2. Агент визуализации по п.1, где один или оба Z1 и Z2 содержат группировку М, представляющую собой гамма-излучающую группировку для радио- или ОЭКТ-визуализации, представляющую собой 99mTc.
3. Агент визуализации по п.1, где один или оба Z1 и Z2 содержат группировку М, представляющую собой радиоактивный излучатель со свойствами испускания позитронов для ПЭТ-визуализации, представляющую собой 18F.
4. Агент визуализации по п.1, где один или оба Z1 и Z2 содержат группировку М, представляющую собой парамагнитный металл, выбранный из группы Gd(III), Mn(II), Cu(II), Cr(III), Fe(III), Co(II), Er(II), Ni(II), Eu(III) или Dy(III), либо оксид металла, такой как оксид металла суперпарамагнитного, ферримагнитного или ферромагнитного типа, для МР визуализации.
5. Агент визуализации по п.1, где по меньшей мере любой из Z1 и Z2 представляет собой цианиновый краситель для оптической визуализации.
6. Фармацевтическая композиция для связывания с uPAR, содержащая агент визуализации по любому из пп.1-5 в эффективном количестве вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми адъювантами, эксципиентами или разбавителями.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO20044139 | 2004-09-29 | ||
| NO20044139 | 2004-09-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007111467A RU2007111467A (ru) | 2008-11-10 |
| RU2394837C2 true RU2394837C2 (ru) | 2010-07-20 |
Family
ID=35930012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007111467/04A RU2394837C2 (ru) | 2004-09-29 | 2005-09-28 | Контрастный агент, нацеленный на рецептор урокиназного активатора плазминогена |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8568689B1 (ru) |
| EP (1) | EP1796733A2 (ru) |
| JP (1) | JP5122962B2 (ru) |
| KR (1) | KR101248350B1 (ru) |
| CN (1) | CN101065152A (ru) |
| AU (1) | AU2005287934B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0516168A (ru) |
| CA (1) | CA2580464A1 (ru) |
| MX (1) | MX2007003750A (ru) |
| RU (1) | RU2394837C2 (ru) |
| WO (1) | WO2006036071A2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720976C2 (ru) * | 2015-06-03 | 2020-05-15 | Сюржимаб С.А.С. | Флуоресцентные конъюгаты и их применение для диагностики опухоли |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070190068A1 (en) * | 2005-10-10 | 2007-08-16 | Richard Hart | uPAR-binding molecule-drug conjugates and uses thereof |
| EP2091570A1 (en) * | 2006-12-20 | 2009-08-26 | GE Healthcare AS | Contrast agents |
| GB0718957D0 (en) * | 2007-09-28 | 2007-11-07 | Ge Healthcare Ltd | Optical imaging agents |
| GB0718967D0 (en) * | 2007-09-28 | 2007-11-07 | Ge Healthcare Ltd | Peptide imaging agents |
| EP2598175B1 (en) | 2010-07-27 | 2020-05-20 | Serac Healthcare Limited | Radiopharmaceutical compositions |
| EP2846826B1 (en) * | 2012-05-08 | 2018-07-25 | TRT Innovations APS | 177-Lu LABELED PEPTIDE FOR SITE-SPECIFIC uPAR-TARGETING |
| HUE066607T2 (hu) * | 2012-12-03 | 2024-08-28 | Curasight As | Pozitront emittáló radionukliddal jelölt peptidek humán uPAR PET-tel történõ leképezésére |
| ES2828954T3 (es) * | 2014-09-17 | 2021-05-28 | Fluoguide As | Péptido de localización específica de uPAR para su uso en la formación peroperatoria de imágenes ópticas de cáncer invasivo |
| US20210138090A1 (en) * | 2014-09-17 | 2021-05-13 | Fluoguide A/S | uPAR targeting peptide for use in peroperative optical imaging of invasive cancer |
| EP3759121A1 (en) * | 2018-03-01 | 2021-01-06 | Trigemina, Inc. | Labeled oxytocin and method of manufacture and use |
| AU2020314065A1 (en) * | 2019-07-16 | 2022-02-17 | Fluoguide A/S | A urokinase plasminogen activator receptor-targeting peptide |
| EP3999123A1 (en) * | 2019-07-16 | 2022-05-25 | Fluoguide A/S | A receptor-targeting conjugate with an effective pharmacokinetic profile |
| KR20230173075A (ko) | 2020-12-01 | 2023-12-26 | 큐라사이트 에이/에스 | 우로키나아제 플라스미노겐 활성제 수용체 (Urokinase Plasminogen Activator Receptor) 표적화된 방사성 표지된 펩티드 접합체들 |
| EP4277666A1 (en) * | 2021-01-15 | 2023-11-22 | Fluoguide A/S | A upar (urokinase plasminogen activator receptor)-targeting conjugate |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6120765A (en) | 1993-04-02 | 2000-09-19 | Shiseido Co. Ltd. | Urokinase plasminogen activator fragments |
| US5942492A (en) * | 1996-11-12 | 1999-08-24 | Angstrom Pharmaceuticals, Inc. | Cyclic peptides that bind to urokinase-type plasminogen activator receptor |
| US6277818B1 (en) | 1998-10-29 | 2001-08-21 | Angstrom Pharmaceuticals, Inc. | Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor |
| GB9705521D0 (en) * | 1997-03-18 | 1997-05-07 | Univ Sheffield | The use of mononuclear phagocytes in the vivo imaging of hypoxic/ischaemic tissue |
| AR020101A1 (es) * | 1998-07-01 | 2002-04-10 | Cancerforskingsfonden Af 1989 | Un antagonista peptido del receptor de uroquinasa humana, composicion farmaceutica que lo contiene, su uso para la manufactura de un medicamento y metodopara seleccionar un antagonista peptido adecuado. |
| WO2001025410A2 (en) * | 1999-10-01 | 2001-04-12 | Angstrom Pharmaceuticals, Inc. | DIAGNOSTIC PROBES AND THERAPEUTICS TARGETING uPA AND uPAR |
| US6896870B1 (en) * | 1999-10-01 | 2005-05-24 | Angstrom Pharmaceuticals, Inc. | Diagnostic probes and therapeutics targeting uPA and uPAR |
| CN1925876A (zh) | 2004-03-04 | 2007-03-07 | 通用电气医疗集团股份有限公司 | 用于诊断和治疗的血管紧张素肽类似物和螯合剂的缀合物 |
-
2005
- 2005-09-28 MX MX2007003750A patent/MX2007003750A/es active IP Right Grant
- 2005-09-28 US US11/576,193 patent/US8568689B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-09-28 EP EP05788552A patent/EP1796733A2/en not_active Withdrawn
- 2005-09-28 CA CA002580464A patent/CA2580464A1/en not_active Abandoned
- 2005-09-28 CN CNA2005800408838A patent/CN101065152A/zh active Pending
- 2005-09-28 KR KR1020077007004A patent/KR101248350B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2005-09-28 WO PCT/NO2005/000362 patent/WO2006036071A2/en active Application Filing
- 2005-09-28 RU RU2007111467/04A patent/RU2394837C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-09-28 AU AU2005287934A patent/AU2005287934B2/en not_active Ceased
- 2005-09-28 BR BRPI0516168-1A patent/BRPI0516168A/pt not_active IP Right Cessation
- 2005-09-28 JP JP2007533418A patent/JP5122962B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| POETHKO Т; ЕТ AL JOURNAL OF NUCLEAR MEDICINE, 2004, v.45, №5, p.892-902. PLOUG M; ЕТ AL BIOCHEMISTRY, 2001 AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, v.40, p.12157-12168. PLOUG E A Photoaffinity Labeling of the Human Receptor for Urokinase-Type Plasminogen Activator Using a Decapeptide Antagonist. Evidence for a Composite Ligand-Binding Site and a Short Interdomain Separation BIOCHEMISTRY, 1998 AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, v.37, №11, p.3612-3622. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720976C2 (ru) * | 2015-06-03 | 2020-05-15 | Сюржимаб С.А.С. | Флуоресцентные конъюгаты и их применение для диагностики опухоли |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2007003750A (es) | 2007-11-07 |
| AU2005287934B2 (en) | 2009-03-26 |
| AU2005287934A1 (en) | 2006-04-06 |
| EP1796733A2 (en) | 2007-06-20 |
| WO2006036071A2 (en) | 2006-04-06 |
| JP2008514588A (ja) | 2008-05-08 |
| BRPI0516168A (pt) | 2008-08-26 |
| US8568689B1 (en) | 2013-10-29 |
| WO2006036071A3 (en) | 2007-02-15 |
| RU2007111467A (ru) | 2008-11-10 |
| KR101248350B1 (ko) | 2013-04-01 |
| KR20070083604A (ko) | 2007-08-24 |
| JP5122962B2 (ja) | 2013-01-16 |
| CA2580464A1 (en) | 2006-04-06 |
| CN101065152A (zh) | 2007-10-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2003299957B2 (en) | Improved gastrin releasing peptide compounds | |
| JP5784911B2 (ja) | ボンベシンアナログペプチドアンタゴニスト複合体 | |
| RU2394837C2 (ru) | Контрастный агент, нацеленный на рецептор урокиназного активатора плазминогена | |
| JP7195665B2 (ja) | 診断及び治療のための、改善された薬物動態及びコレシストキニン－２受容体（ｃｃｋ２ｒ）への標的化 | |
| JP4264263B2 (ja) | コレシストキニンアゴニストおよびアンタゴニストの調製ならびにそれらの治療および診断の使用 | |
| JP5116480B2 (ja) | 造影剤 | |
| WO2005044313A2 (en) | Conjugates of angiotensin ii and an imaging moiety | |
| Ishizaki et al. | Fundamental study of radiogallium-labeled aspartic acid peptides introducing octreotate derivatives | |
| JP5280682B2 (ja) | ペプチド系化合物 | |
| RU2505316C2 (ru) | Способ визуализации | |
| KR20230152698A (ko) | 진단 및 요법을 위한 개선된 콜레시스토키닌-2 수용체(cck2r) 표적화 | |
| Oliveira et al. | Supplemental data for | |
| US20060239923A1 (en) | Gastrin releasing peptide compounds |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140929 |