[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

RU2229827C2 - Method for increasing productivity in cattle and improving production quality - Google Patents

Method for increasing productivity in cattle and improving production quality Download PDF

Info

Publication number
RU2229827C2
RU2229827C2 RU2002111437/13A RU2002111437A RU2229827C2 RU 2229827 C2 RU2229827 C2 RU 2229827C2 RU 2002111437/13 A RU2002111437/13 A RU 2002111437/13A RU 2002111437 A RU2002111437 A RU 2002111437A RU 2229827 C2 RU2229827 C2 RU 2229827C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
animals
increase
lactobacillus
plf
rabbits
Prior art date
Application number
RU2002111437/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2002111437A (en
Inventor
Б.В. Тараканов (RU)
Б.В. Тараканов
Т.А. Николичева (RU)
Т.А. Николичева
В.В. Алешин (RU)
В.В. Алешин
Н.М. Комкова (RU)
Н.М. Комкова
А.И. Манухина (RU)
А.И. Манухина
З.Н. Макар (RU)
З.Н. Макар
М.И. Сапунов (RU)
М.И. Сапунов
Г.Г. Черепанов (RU)
Г.Г. Черепанов
Original Assignee
Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных
Тараканов Борис Васильевич
Николичева Тамара Александровна
Алешин Владимир Вениаминович
Комкова Наталья Михайловна
Манухина Антонина Ивановна
Макар Зиновий Николаевич
Сапунов Михаил Иванович
Черепанов Геннадий Георгиевич
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных, Тараканов Борис Васильевич, Николичева Тамара Александровна, Алешин Владимир Вениаминович, Комкова Наталья Михайловна, Манухина Антонина Ивановна, Макар Зиновий Николаевич, Сапунов Михаил Иванович, Черепанов Геннадий Георгиевич filed Critical Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных
Priority to RU2002111437/13A priority Critical patent/RU2229827C2/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2229827C2 publication Critical patent/RU2229827C2/en
Publication of RU2002111437A publication Critical patent/RU2002111437A/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: animal science. SUBSTANCE: the present innovation deals with supplementing the diet with probiotic preparation manufactured based upon somatoliberin-expressing recombinant Lactobacillus sp. 8PA3 (pLF-SL2) strain in digestive tract. The method enables to increase milk and meat performance in animals and improve the quality of production, that is: increase protein concentration in milk, increase the portion of muscular tissue and decrease fat content in meat. EFFECT: higher performance and improved quality of production. 4 ex, 5 tbl

Description

Изобретение относится к области животноводства, в частности кормлению сельскохозяйственных животных, и может быть использовано во всех типах хозяйств с любой формой собственности.The invention relates to the field of animal husbandry, in particular the feeding of farm animals, and can be used in all types of farms with any form of ownership.

В последние годы в практике животноводства с целью повышения продуктивности животных с положительными результатами, хотя и вариабельными, были испытаны белковые и пептидные гормоны, среди которых наибольшую перспективность продемонстрировали соматотропный гормон роста (СТГ) и рилизинг-фактор соматотропного гормона роста - соматолиберин. При этом было показано, что они эффективны в молочном скотоводстве [Эрнст Л.К., Тореханов А.А. Молочная продуктивность и динамика метаболических процессов в организме коров при воздействии биосинтетическим соматотропином. Сельхоз. биология. 1995. №2. С.73-76; Pelletier G. et al. Biological effects of growth hormone releasing factor and level of feeding in lactating cows. J. Cell. Biol. 1990. V. 111. №5. P. 473; Dahl G.E. et al. Comparison of somatotropin and growth hormone-releasing factor on milk yield, serum hormones, and energy status. J. Dairy Sci. 1991. V. 74. №10. P. 3421-3428], свиноводстве [Горин О.В., Артеменков В.В. Влияние рекомбинантного свиного соматотропина на мясные и откормочные качества. Сб. научн. тр./ Всерос. н.-и. селекц.-генет. ин-т жив-ва. 1994. №1. С.155-156; Рябых В.П., Кальницкий Б.Д., Эрнст Л.К. К вопросу об использовании генов соматотропинового каскада для получения трансгенных свиней с заданным потенциалом продуктивности и качеством продукции. Генно-инж. с.-х. животные. 1995. Вып. 1. С.289-325; Bonneau M. Administration de GRF ou de somatotropine chez le pocr et les volailles: Effects sur les performances, la qualite des viandes et la function de reproduction. Prod. Anim. 1992. V. 5. №4. Р.257-267], овцеводстве [Sainz R.D. et al. Exogenous growth hormone releasing factor and cottonseed meal improve growth performance and gain in lambs fed lucerne chaff ad libitum. Austral. J. Agr. Res. l994. V. 45. №6. P.1111-1123] и звероводстве [Шульга Л.В., Казакова Т.И. Соматотропин. Кроликовод. и зверовод. 1994. №5. С.11]. Установлено также, что введение соматолиберина усиливает секрецию гормона роста у млекопитающих и вызывает такие же эффекты, что и введение экзогенного соматотропного гормона.In recent years, in the practice of animal husbandry, in order to increase the productivity of animals with positive results, although variable, protein and peptide hormones have been tested, among which somatotropic growth hormone (STH) and somatotropic growth hormone releasing factor - somatoliberin - have shown the greatest promise. It was shown that they are effective in dairy cattle breeding [Ernst L.K., Torekhanov A.A. Milk productivity and the dynamics of metabolic processes in the body of cows when exposed to biosynthetic somatotropin. Agricultural. biology. 1995. No. 2. S.73-76; Pelletier G. et al. Biological effects of growth hormone releasing factor and level of feeding in lactating cows. J. Cell. Biol. 1990. V. 111. No. 5. P. 473; Dahl G.E. et al. Comparison of somatotropin and growth hormone-releasing factor on milk yield, serum hormones, and energy status. J. Dairy Sci. 1991. V. 74. No. 10. P. 3421-3428], pig breeding [Gorin OV, Artemenkov VV The effect of recombinant porcine somatotropin on meat and fattening qualities. Sat scientific tr. / Vseros. N.-i. select.genet. institute is alive. 1994. No. 1. S.155-156; Ryabykh V.P., Kalnitsky B.D., Ernst L.K. To the question of the use of somatotropin cascade genes for producing transgenic pigs with a given productivity potential and product quality. Genetic engineer S.-kh. animals. 1995. Issue. 1. S. 289-325; Bonneau M. Administration de GRF ou de somatotropine chez le pocr et les volailles: Effects sur les performances, la qualite des viandes et la function de reproduction. Prod. Anim. 1992. V. 5. No. 4. R.257-267], sheep breeding [Sainz R.D. et al. Exogenous growth hormone releasing factor and cottonseed meal improve growth performance and gain in lambs fed lucerne chaff ad libitum. Austral. J. Agr. Res. l994. V. 45. No. 6. P.1111-1123] and animal husbandry [Shulga L.V., Kazakova T.I. Growth hormone. Rabbit breeder. and beast grower. 1994. No5. S.11]. It was also established that the introduction of somatoliberin enhances the secretion of growth hormone in mammals and causes the same effects as the introduction of exogenous somatotropic hormone.

В настоящее время разработаны технологии получения СТГ и соматолиберина (из желез внутренней секреции, рекомбинантных микроорганизмов) и предложены схемы их применения (ежедневные инъекции или препараты пролонгированного действия).Currently, technologies have been developed for the production of STH and somatoliberin (from the endocrine glands, recombinant microorganisms) and schemes for their use (daily injections or prolonged-action drugs) have been proposed.

Недостатком известных способов стимуляции продуктивности животных посредством введения СТГ или стимуляции его эндогенного образования соматолиберином является необходимость проведения периодических инъекций, высокая стоимость препаратов и трудоемкость этих способов. Поэтому практический интерес представляет разработка недорогих способов повышения секреции эндогенного соматотропина у продуктивных животных.A disadvantage of the known methods of stimulating animal productivity by introducing STH or stimulating its endogenous formation with somatoliberin is the need for periodic injections, the high cost of the preparations and the complexity of these methods. Therefore, of practical interest is the development of inexpensive ways to increase the secretion of endogenous growth hormone in productive animals.

Если использование белковых и пептидных гормонов путем парентерального их введения достаточно широко апробировано, то применение живых рекомбинантных штаммов бактерий, экспрессирующих образование этих гормонов, путем пероральной дачи до настоящего времени считается проблематичным. Сторонники этой точки зрения мотивируют свою позицию тем, что белковые молекулы и пептиды в интактном виде из кишечника молодняка и взрослых животных не всасываются. Однако это представление является устаревшим, поскольку в ряде исследований было показано, что овальбумин проходит кишечный барьер и обнаруживается в крови практически в неизменном виде. Всасывание белков из кишечника подкрепляется многочисленными экспериментами на животных и изолированных тканях, а некоторые исследователи продемонстрировали прохождение высокомолекулярного веса фрагментов белка через изолированную тощую кишку животных [Gardner M.L.G. Gastrointestinal absortion of intast proteins. Ann. Rev. Nutr. 1988. V. 8. P.329-350].If the use of protein and peptide hormones through parenteral administration has been widely tested, the use of live recombinant strains of bacteria expressing the formation of these hormones by oral administration is still considered problematic. Proponents of this point of view motivate their position by the fact that protein molecules and peptides in an intact form from the intestines of young animals and adult animals are not absorbed. However, this idea is outdated, since a number of studies have shown that ovalbumin passes the intestinal barrier and is found in the blood almost unchanged. The absorption of proteins from the intestines is supported by numerous experiments on animals and isolated tissues, and some researchers have demonstrated the passage of high molecular weight protein fragments through an isolated jejunum of animals [Gardner M.L.G. Gastrointestinal absortion of intast proteins. Ann. Rev. Nutr. 1988. V. 8. P.329-350].

Целью изобретения является создание способа повышения продуктивности животных и улучшения качества продукции.The aim of the invention is to provide a method for increasing animal productivity and improving product quality.

Указанная цель достигается тем, что животным перорально с кормом задают генно-инженерный рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), несущий ген соматолиберина и экспрессирующий его образование в пищеварительном тракте животных.This goal is achieved by the fact that animals are orally given a genetically engineered recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), carrying the somatoliberin gene and expressing its formation in the digestive tract of animals.

Штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером В-7495.Strain Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) was deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms under registration number B-7495.

Отличительными признаками патентуемого способа являются следующие: возможность замены трудоемких инъекций животным экзогенного соматотропина или соматолиберина пероральным применением рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего образование соматолиберина; использование препарата для ростстимулирующих целей и получения мяса с повышенным содержанием мышечной ткани и сниженным - жира; увеличение молочной продуктивности лактирующих животных и концентрации белка в молоке; стимуляция обменных процессов и иммунной системы в организме животных; возникновение толерантности к соматолиберину у нарождающегося молодняка, матери которого в период беременности получали рекомбинантный штамм, экспрессирующий образование рилизинг-фактора СТГ.Distinctive features of the patented method are the following: the possibility of replacing laborious animal injections of exogenous somatotropin or somatoliberin with oral administration of a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) expressing the formation of somatoliberin; the use of the drug for growth-promoting purposes and obtaining meat with a high content of muscle tissue and a reduced fat; increase in milk production of lactating animals and protein concentration in milk; stimulation of metabolic processes and the immune system in animals; the emergence of tolerance to somatoliberin in nascent young animals, whose mothers during pregnancy received a recombinant strain expressing the formation of STH releasing factor.

Нами впервые показано, что пероральное применение рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего эукариотический ген соматолиберина, обеспечивает ответную реакцию животных, идентичную той, которую обычно вызывают инъекции экзогенного соматотропина. Всосавшийся из кишечника в кровь соматолиберин стимулирует синтез и секрецию гипоталамических нонапептидов, которые, в свою очередь, увеличивают выработку СТГ в аденогипофизе. В ответ на повышенное поступление в кровь соматотропного гормона наблюдается интенсивная пролиферация клеток в органах и тканях, усиление синтеза белка в печени и мышцах, уменьшение диаметра адипоцитов в подкожной жировой ткани, а в костной ткани - увеличение митотической активности хондроцитов. Стимуляция клеточной активности в различных органах и тканях проявляется повышением до 30% (11-19% в среднем) прироста живой массы и изменением качества мяса в сторону увеличения в нем мышечной ткани и снижения содержания жира. У лактирующих коз увеличиваются среднесуточные удои на 20,2-26,5% и содержание белка в молоке на 6,1-11,0%.We have shown for the first time that oral administration of a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) expressing the eukaryotic somatoliberin gene provides an animal response identical to that usually induced by exogenous somatotropin injections. Somatoliberin, which has absorbed from the intestines into the blood, stimulates the synthesis and secretion of hypothalamic nonapeptides, which, in turn, increase the production of STH in the adenohypophysis. In response to the increased intake of somatotropic hormone in the blood, intensive proliferation of cells in organs and tissues, an increase in protein synthesis in the liver and muscles, a decrease in the diameter of adipocytes in the subcutaneous adipose tissue, and an increase in the mitotic activity of chondrocytes in the bone tissue are observed. Stimulation of cellular activity in various organs and tissues is manifested by an increase to 30% (11-19% on average) of the increase in live weight and a change in the quality of meat in the direction of increasing muscle tissue in it and reducing fat content. In lactating goats, the average daily milk yield increases by 20.2-26.5% and the protein content in milk by 6.1-11.0%.

В органах иммунной системы кроликов, получавших рекомбинантный штамм, выявлен комплекс изменений, свидетельствующих об усилении их иммунопоэтической функции. Во всех структурах лимфоидных органов наблюдается увеличение числа молодых форм лимфоцитов и клеток с фигурами митоза.A complex of changes was revealed in the organs of the immune system of rabbits receiving a recombinant strain, indicating an increase in their immunopoietic function. In all structures of lymphoid organs, an increase in the number of young forms of lymphocytes and cells with figures of mitosis is observed.

Введение в рацион крольчих в период беременности рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) сопровождалось увеличением на 41% живой массы нарождающегося молодняка. В последующем эти животные лучше растут и в ответ на пероральное введение штамма, продуцирующего соматолиберин, дают более высокие приросты живой массы, чем крольчата, полученные от матерей, которым препарат не скармливался. Таким образом, образуемый рекомбинантным штаммом соматолиберин после всасывания в кровь проникает через плацентарный и гематоэнцефалический барьеры и оказывает специфическое действие на формирующиеся у эмбрионов гормональную и иммунную системы, вызывая развитие толерантности у нарождающегося молодняка к этому гормону.Introduction to the diet of rabbits during pregnancy a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 times (pLF-SL2) was accompanied by an increase of 41% in the live weight of the nascent young. Subsequently, these animals grow better and, in response to the oral administration of a strain producing somatoliberin, give higher gains in live weight than rabbits obtained from mothers who did not feed the drug. Thus, after absorption, the somatoliberin formed by the recombinant strain penetrates the blood through the placental and blood-brain barriers and has a specific effect on the hormonal and immune systems that are formed in the embryos, causing the development of tolerance in the emerging young to this hormone.

Изобретение иллюстрируется примерами, которые характеризуют биологические особенности воздействия рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) на организм животных, их продуктивность и качество продукции.The invention is illustrated by examples that characterize the biological characteristics of the effects of the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) on the body of animals, their productivity and product quality.

Пример 1. Изучение воздействия штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), эксрессирующего образование соматолиберина, на организм кроликов.Example 1. The study of the effects of the strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), expressing the formation of somatoliberin, on the body of rabbits.

Проведено два опыта.Conducted two experiments.

Для проведения I опыта из 45-дневных крольчат одного помета было сформировано 3 группы из 3 голов в каждой. Первая группа служила контролем и получала основной рацион (ОР), а животным 2-й и 3-й групп дополнительно к ОР ежедневно задавали по 1 мл культур исходного пробиотического штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ и рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего образование соматолиберина, соответственно. Культуры выпаивали индивидуально каждому крольчонку из пипетки ежедневно в течение месяца. За животными вели систематические наблюдения, и после месячного применения изучаемых культур они были убиты для проведения гематологических, патологоанатомических и морфолого-гистологических исследований.To conduct the 1st experiment, out of 45-day-old rabbits of one litter, 3 groups of 3 goals in each were formed. The first group served as a control and received the main diet (RR), and animals of the 2nd and 3rd groups were additionally given daily 1 ml of cultures of the initial probiotic strain Lactobacillus sp. 8 times and the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) expressing the formation of somatoliberin, respectively. The cultures were individually soldered to each rabbit from a pipette daily for a month. The animals were systematically monitored, and after a monthly application of the studied cultures, they were killed for hematological, pathological and morphological and histological studies.

Для проведения II опыта из помесных крольчат (пород калифорнийская×советская шиншилла) 45-дневного возраста было сформировано 3 группы по 8 голов в каждой. Все животные были размещены в виварии в сетчатых клетках по 1-2 головы и получали ОР, который балансировался по основным питательным веществам в соответствии с нормами кормления. Животные 1-й группы, которым задавали только ОР, служили контролем. Крольчата 2-й и 3-й групп ежедневно дополнительно к ОР получали живые культуры исходного пробиотического и рекомбинантного с геном соматолиберина штаммов Lactobacillus sp. 8 РАЗ и Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) соответственно. Препараты скармливали в смеси с концентратами в дозе 1 мл на голову с титром 4-5×109 колонии образующих единиц (к.о.е.)/мл. Опыт продолжался 3 месяца. Для объективной оценки состояния подопытных животных исследовали кровь и мочу, а после 2 и 3-месячного скармливания препаратов убивали по 3 животных из каждой группы с целью оценки воздействия изучаемых штаммов на патологоанатомическое и гистологическое состояние органов, тканей и эндокринных желез, а также на соотношение в тушках мышечной ткани, костей и жира.For carrying out the II experiment, from crossbred rabbits (Californian × Soviet chinchilla breeds) of 45 days of age, 3 groups of 8 animals each were formed. All animals were placed in vivarium in mesh cells of 1-2 heads and received RR, which was balanced by the main nutrients in accordance with the norms of feeding. Animals of the 1st group, which were asked only PR, served as a control. Rabbits of the 2nd and 3rd groups daily, in addition to OR, received live cultures of the initial probiotic and recombinant strains of Lactobacillus sp. With the somatoliberin gene. 8 TIMES and Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) respectively. The preparations were fed in a mixture with concentrates at a dose of 1 ml per head with a titer of 4-5 × 10 9 colonies of forming units (cfu) / ml. The experiment lasted 3 months. For an objective assessment of the condition of the experimental animals, blood and urine were examined, and after 2 and 3-month feeding of the preparations, 3 animals from each group were killed in order to assess the effect of the studied strains on the pathological and histological state of organs, tissues and endocrine glands, as well as on the ratio of carcasses of muscle tissue, bones and fat.

Проведенные исследования не выявили каких-либо отклонений в функционировании у кроликов пищеварительной, сердечно-сосудистой, кровеносной, дыхательной и мочеполовой систем. Случаев отхода молодняка, получавшего препараты, не было.The studies did not reveal any deviations in the functioning of the digestive, cardiovascular, circulatory, respiratory and genitourinary systems in rabbits. There were no cases of withdrawal of young animals receiving the drugs.

Гематологические исследования показали, что в обоих опытах основные параметры крови животных (количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобин, гематокрит, СОЭ) не выходили за пределы физиологической нормы. Вместе с тем, в сыворотке крови кроликов, получавших исходный и рекомбинантный штаммы Lactobacillus sp. на 28-32% (Р<0,001) увеличивалась концентрация общего белка, возрастали фагоцитарная и бактерицидная активности (Р<0,05-0,001), и существенно повышалась концентрация лизоцима. Эти данные свидетельствуют о том, что изученные штаммы лактобацилл существенно повышают защитные возможности организма животных.Hematological studies showed that in both experiments, the main parameters of the blood of animals (the number of red blood cells, white blood cells, hemoglobin, hematocrit, ESR) did not go beyond the physiological norm. At the same time, in the blood serum of rabbits receiving the initial and recombinant strains of Lactobacillus sp. the concentration of total protein increased by 28-32% (P <0.001), the phagocytic and bactericidal activity increased (P <0.05-0.001), and the concentration of lysozyme increased significantly. These data indicate that the studied strains of lactobacilli significantly increase the protective capabilities of the animal organism.

Исследования мочи показали, что как у контрольных, так и у животных, получавших микробные препараты, ее физико-химические параметры находились в пределах нормы. Примеси крови, желчных пигментов в ней не обнаружены, не найдены сахар, белок, кетоновые тела и нитраты. Моча имела светло-коричневый цвет, была мутной, тягучей консистенции, имела характерный для грызунов запах, относительную плотность 1,01-1,03 и рН в пределах 6,5-8,0. В центрифугате мочи присутствовали кристаллы мочекислых солей и единичные эпителиальные клетки. Эти данные свидетельствуют о нормальной функции мочеполовой системы как у контрольных кроликов, так и у получавших микробные препараты.Urinalysis showed that both in the control and in animals treated with microbial preparations, its physicochemical parameters were within normal limits. Impurities of blood, bile pigments were not found in it, sugar, protein, ketone bodies and nitrates were not found. The urine was light brown in color, had a turbid, viscous consistency, had a characteristic odor for rodents, a relative density of 1.01-1.03, and a pH in the range of 6.5-8.0. Crystals of uric salts and single epithelial cells were present in the centrifugate of urine. These data indicate the normal function of the genitourinary system in both control rabbits and those receiving microbial preparations.

В обоих опытах кролики контрольных и опытных групп были клинически здоровыми, имели хороший аппетит, нормально росли и развивались. Существенной разницы в потреблении кормов между группами не было, и ежедневно животные полностью съедали концентраты и по 120-140 г сена.In both experiments, the rabbits of the control and experimental groups were clinically healthy, had good appetite, normally grew and developed. There was no significant difference in feed intake between the groups, and daily animals completely ate concentrates and 120-140 g of hay each.

В I-м опыте исходный пробиотический и рекомбинантный штаммы Lactobacillus sp. 8 РАЗ и Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) соответственно задавались индивидуально каждому крольчонку в течение месяца. Взвешивание животных показало, что исходный штамм не оказал существенного влияния на рост крольчат, тогда как рекомбинантный увеличивал их валовой прирост на 30,9% (табл.1).In the 1st experiment, the initial probiotic and recombinant strains of Lactobacillus sp. 8 TIMES and Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) were respectively set individually for each rabbit within a month. Weighing of the animals showed that the initial strain did not have a significant effect on the growth of rabbits, while the recombinant one increased their gross growth by 30.9% (Table 1).

Сходные результаты были получены и во II-м опыте, продолжавшемся три месяца. Прирост живой массы кроликов 3-й группы за первый и второй месяцы опыта превосходил контроль на 27,5% и 17,7% соответственно, а в целом за опыт - на 19,7% (табл.1). При этом высокие показатели наблюдались и при применении исходного пробиотического штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ, который увеличивал валовой прирост на 19%. Затраты кормовых единиц и переваримого протеина на 1 кг прироста у кроликов опытных групп снижалась на 16-17%.Similar results were obtained in the second experiment, which lasted three months. The increase in live weight of group 3 rabbits in the first and second months of the experiment exceeded the control by 27.5% and 17.7%, respectively, and in the experiment as a whole by 19.7% (Table 1). At the same time, high rates were also observed with the use of the initial probiotic strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES, which increased gross growth by 19%. The cost of feed units and digestible protein per 1 kg of growth in rabbits of the experimental groups decreased by 16-17%.

По убойному выходу тушек существенных различий между группами не было, и он варьировал в пределах 51-53%. Однако обвалка полутушек показала, что доля мышечной и жировой тканей не оставалась постоянной. После 2-месячного скармливания препаратов процент мышечной ткани с 69,4 в контроле увеличивался до 72,3 и 75,5 во 2-й и 3-й группах соответственно, а содержание жира снижалось с 7,4% до 4,8% в 3-й группе, получавшей добавку экспрессирующего соматолиберин штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), тогда как во 2-й группе, которой задавали исходный пробиотический штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ, процент жира в полутушке возрастал до 9,5% (табл.2). В мясе задних окорочков кроликов опытных групп статистически значимо (Р<0,002) возрастало содержание сухого вещества, а у животных 3-й группы четко прослеживалась тенденция к увеличению концентрации белка и снижению уровня жира (табл.2), что, хотя и косвенно, свидетельствует о стимуляции синтеза эндогенного соматотропина.There were no significant differences between groups in the slaughter yield of carcasses, and it varied within 51-53%. However, the deboning of half carcasses showed that the proportion of muscle and fatty tissue did not remain constant. After 2 months of feeding the preparations, the percentage of muscle tissue from 69.4 in the control increased to 72.3 and 75.5 in the 2nd and 3rd groups, respectively, and the fat content decreased from 7.4% to 4.8% in The 3rd group receiving the supplement expressing somatoliberin strain Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), while in the 2nd group, which was assigned the initial probiotic strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES, the percentage of fat in the carcass increased to 9.5% (Table 2). In the meat of the hind legs of rabbits of the experimental groups, the dry matter content was statistically significantly (P <0.002), and in animals of the 3rd group there was a clear tendency to an increase in protein concentration and a decrease in fat level (Table 2), which, although indirectly, indicates on stimulation of the synthesis of endogenous growth hormone.

При проведении послеубойного ветеринарно-санитарного осмотра тушек кроликов, убитых после 1, 2 и 3-месячного применения препаратов, в них не было обнаружено никаких видимых патологических изменений.When conducting a post-mortem veterinary-sanitary inspection of the carcasses of rabbits killed after 1, 2 and 3 months of use of the preparations, no visible pathological changes were found in them.

Гистологические исследования показали, что в нейронах супраоптического ядра гипоталамуса кроликов, получавших рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), наблюдались признаки усиления функциональной активности: преобладали крупные "светлые" нейроны, имеющие овальную или полигональную форму, большое пузырьковидное ядро и незначительное количество мелкозернистых гранул, расположенных узкой полосой вокруг ядра. Размеры ядер и клеток нейронов были несколько выше, чем у контрольных животных (табл.3).Histological studies showed that in neurons of the supraoptic nucleus of the hypothalamus of rabbits receiving the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), signs of increased functional activity were observed: large “bright” neurons with an oval or polygonal shape, a large vesicular nucleus and a small number of fine-grained granules located in a narrow strip around the nucleus predominated. The sizes of nuclei and cells of neurons were slightly higher than in control animals (Table 3).

Известно, что нонапептиды супраоптического ядра гипоталамуса стимулируют ДНК-синтетическую активность многих клеток, в том числе они усиливают пролиферативную активность аденогипофиза. В норме аденогипофиз характеризуется низким темпом пролиферации клеточных популяций, и поэтому следует полагать, что не все клетки участвуют в этом процессе. Результаты наших исследований свидетельствуют, что пероральное применение штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего образование соматолиберина, стимулирует пролиферацию эпителиоцитов в аденогипофизе (табл.3). При этом у кроликов 3-й группы было на 5% больше соматотропоцитов, чем у контрольных животных. Существенной чертой активизированных клеток аденогипофиза было увеличение в них пула свободных рибосом, наличие гипертрофии ядер и особенно ядрышек, которые приобретали разрыхленный вид за счет увеличения нитчатого компонента. Синтез и секреция секреторных гранул в соматотропоцитах были несколько выше, чем в контроле.Nonapeptides of the supraoptic nucleus of the hypothalamus are known to stimulate the DNA-synthetic activity of many cells, including those that enhance the proliferative activity of the adenohypophysis. Normally, the adenohypophysis is characterized by a low rate of proliferation of cell populations, and therefore it should be assumed that not all cells are involved in this process. The results of our studies indicate that the oral use of the strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), which expresses the formation of somatoliberin, stimulates the proliferation of epithelial cells in the adenohypophysis (Table 3). At the same time, rabbits of the 3rd group had 5% more somatotropocytes than control animals. An essential feature of activated adenohypophysis cells was an increase in their pool of free ribosomes, the presence of hypertrophy of nuclei, and especially nucleoli, which acquired a loosened appearance due to an increase in the filamentous component. Synthesis and secretion of secretory granules in somatotropocytes were slightly higher than in control.

Характерной особенностью печени кроликов, получавших рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), было наличие большого числа гипертрофированных гепатоцитов с полиплоидными ядрами. Цитоплазма клеток богата органеллами, хорошо выражена гранулярная и агранулярная эндоплазматическая сеть, что указывает на интенсивный синтез белка. Большинство гепатоцитов содержали по 2 или 3 ядра с хорошо развитыми ядрышками, которые имели нуклеолонемный характер, свойственный для незрелых (бластных) форм клеток. Подобные изменения в печени мышей наблюдались при введении СТГ [Geschwind J., Albert M., Schooley С. The effect of thyroxin and growth hormone on liver poliploidy. Biol. Bull. 1960. V. 117. №1. P.56].A characteristic feature of the liver of rabbits receiving a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), there was a large number of hypertrophied hepatocytes with polyploid nuclei. The cytoplasm of the cells is rich in organelles, a well-defined granular and agranular endoplasmic reticulum, which indicates intense protein synthesis. Most hepatocytes contained 2 or 3 nuclei with well-developed nucleoli, which had a nucleonemic character characteristic of immature (blast) cell forms. Similar changes in the liver of mice were observed with the introduction of STH [Geschwind J., Albert M., Schooley C. The effect of thyroxin and growth hormone on liver poliploidy. Biol. Bull. 1960. V. 117. No. 1. P.56].

Применение экспрессирующего образование соматолиберина штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) оказало статистически значимое (Р<0,05-0,01) стимулирующее влияние на рост четырехглавой мышцы бедра. Диаметр мышечных волокон и площадь ядра после 1, 2 и 3-месячной дачи препарата, в сравнении с контролем, возрастали на 296%, 45,2%, 21,2% и 54,9%, 48,9% и 33% соответственно. При этом в подкожной жировой ткани наблюдалось уменьшение диаметра адипоцитов на 11,2-15,8% (табл.3).The use expressing the formation of somatoliberin strain Lactobacillus sp. 8 times (pLF-SL2) had a statistically significant (P <0.05-0.01) stimulating effect on the growth of the quadriceps femoris. The diameter of muscle fibers and the area of the core after 1, 2 and 3 months of giving the drug, compared with the control, increased by 296%, 45.2%, 21.2% and 54.9%, 48.9% and 33%, respectively . Moreover, in the subcutaneous adipose tissue, a decrease in the diameter of adipocytes by 11.2-15.8% was observed (Table 3).

В эпифизарной ростовой пластинке бедренной кости кроликов 3-й группы наблюдалось увеличение митотической активности хондроцитов, а измерение трубчатых костей грудной и тазовой конечностей показало, что у животных, получавших рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), они были достоверно (Р<0,05-0,01) длиннее, чем у сверстников контрольной группы.An increase in the mitotic activity of chondrocytes was observed in the epiphyseal growth plate of the femur of the 3rd group rabbits, and measurement of the tubular bones of the chest and pelvic limbs showed that in animals treated with the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), they were significantly (P <0.05-0.01) longer than that of peers in the control group.

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют, что пероральное применение рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) обеспечивает такие же биологические эффекты, что и использование экзогенного СТГ, т.е. образуемый в кишечнике соматолиберин после всасывания в кровь инициирует повышенную выработку у животных собственного соматотропина, что приводит к повышению прироста живой массы, увеличению в мясе мышечной ткани и снижению содержания жира.Thus, studies indicate that the oral use of the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 times (pLF-SL2) provides the same biological effects as the use of exogenous GH, i.e. somatoliberin formed in the intestine after absorption into the blood initiates an increased production of own growth hormone in animals, which leads to an increase in live weight gain, an increase in muscle tissue in meat, and a decrease in fat content.

Пример 2. Исследование перорального введения штамма Laclobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) беременным крольчихам на иммунный ответ нарождающегося молодняка.Example 2. The study of the oral administration of a strain of Laclobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) to pregnant rabbits on the immune response of nascent young animals.

Для проведения опыта из крольчих пород калифорнийская и советская шиншилла было сформировано две группы по 3 самки каждой породы в группе. Животных покрыли в один день. Обе группы получали ОР в соответствии с рекомендуемыми нормами. Он состоял из сена и комбикорма или зерна, а в летние месяцы сено в рационе заменяли травой. Самкам 1-й опытной группы в период беременности (30 дней) ежедневно в смеси с концентратами дополнительно к ОР скармливали 1 мл культуры, содержащей 2,5×l09к.o.e/мл рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего образование соматолиберина. Вторая группа добавок не получала и служила контролем. После окрола народившихся крольчат взвешивали, и при достижении ими 45-дневного возраста из молодняка, полученного от опытной и контрольной групп крольчих, было сформировано по 3 группы из 9 животных каждая. Крольчата от матерей опытной группы были разбиты на 1-ю (контрольную), 2-ю и 3-ю опытные группы. Животные контрольной группы получали ОР. Молодняку 2-й и 3-й групп дополнительно к ОР ежедневно скармливали по 1 мл культур (2,5×109 к.о.е./мл) исходного пробиотического штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ и рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) соответственно. Из молодняка крольчат, родившихся от матерей контрольной группы, были созданы 4-я контрольная, 5-я и 6-я опытные группы, которые кормились аналогично 1-й, 2-й и 3-й группам соответственно. Скармливание микробных препаратов продолжалось 3 месяца.To conduct the experiment, two groups of 3 females of each breed in the group were formed from rabbit breeds, Californian and Soviet chinchilla. The animals were covered in one day. Both groups received PR in accordance with the recommended norms. It consisted of hay and compound feed or grain, and in the summer months the hay in the diet was replaced with grass. During pregnancy (30 days), females of the 1st experimental group were fed daily, in addition to OR, 1 ml of a culture containing 2.5 × 10 9 K. o / ml of the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) expressing the formation of somatoliberin. The second group of additives did not receive and served as a control. After the rounding, the born rabbits were weighed, and when they reached 45 days of age, the young animals received from the experimental and control groups of rabbits formed 3 groups of 9 animals each. The rabbits from the mothers of the experimental group were divided into the 1st (control), 2nd and 3rd experimental groups. Animals of the control group received OP. In addition to OR, young animals of the 2nd and 3rd groups were fed daily 1 ml of cultures (2.5 × 10 9 cfu / ml) of the initial probiotic strain Lactobacillus sp. 8 times and the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) respectively. From young rabbits born of mothers of the control group, the 4th control, 5th and 6th experimental groups were created, which were fed similarly to the 1st, 2nd and 3rd groups, respectively. Microbial preparations lasted 3 months.

Исследования показали, что ежедневное скармливание крольчихам в период беременности рекомбинантного штамма существенно увеличивало живую массу нарождающегося молодняка. Так, живая масса крольчат пород калифорнийская и советская шиншилла при рождении составила в контроле 65±5 г и 68±4 г, а в опыте 98±5г и 90±4 г (Р<0,01), т.е. превосходила молодняк контрольных групп на 51% и 32% соответственно, или в среднем на 41%. Эти данные свидетельствуют, что образуемый рекомбинантным штаммом соматолиберин после всасывания в кровь проникает через плацентарный и гематоэнцефалический барьеры и оказывает специфическое действие на формирующуюся у эмбрионов систему гормональной регуляции. Крольчата, родившиеся от матерей, получавших рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), росли лучше и в 40-дневном возрасте превосходили живую массу своих сверстников из контрольной группы на 26% (980 г против 777 г).Studies have shown that daily feeding of a recombinant strain to rabbits during pregnancy significantly increased the live weight of the nascent young. Thus, the live weight of rabbits of California and Soviet chinchilla breeds at birth was 65 ± 5 g and 68 ± 4 g in the control, and in the experiment 98 ± 5 g and 90 ± 4 g (P <0.01), i.e. exceeded the young growth of the control groups by 51% and 32%, respectively, or on average by 41%. These data indicate that, after absorption, the somatoliberin formed by the recombinant strain penetrates the blood through the placental and blood-brain barriers and has a specific effect on the hormonal regulation system formed in embryos. Rabbits born to mothers who received a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 times (pLF-SL2), they grew better and at 40 days of age exceeded the live weight of their peers from the control group by 26% (980 g versus 777 g).

Введение в рационы полученного от контрольных самок послеотъемного (45 дней) молодняка в течение трех месяцев исходного пробиотического и рекомбинантного штаммов Lactobacillus sp. повышало прирост живой массы на 2% и 4,4%, тогда как у крольчат, родившихся от матерей, которым давали рекомбинантный штамм, увеличение прироста составило 4,3% и 14,5% (Р<0,01) соответственно. Длина корпуса и обхват груди за лопатками у животных 1-й, 2-й и 3-й групп в среднем составили 36 см и 27,6 см против 34,2 см и 25,5 см у кроликов 4-й, 5-й и 6-й групп. По индексу сбитости крольчата, родившиеся от матерей, которым скармливали рекомбинантный штамм, и сами получавшие его с комбикормом в течение 3 месяцев, достоверно (Р<0,05) превосходили контроль. У этих животных в аденогипофизе отмечалось усиление кровотока, повышение числа митозов и увеличение выделения секреторных гранул в капилляры. В поджелудочной железе наблюдалось увеличение числа и размеров островков Лангерганса, а диаметр волокон в мышечной ткани повышался в 1,5 раза. В тимусе, лимфатических узлах и селезенке было отмечено повышение размеров герминативной зоны узелков, появление большого числа бластных форм лимфоцитов и кластерообразующих клеток.Introduction into the diets of post-weaning (45 days) young stock obtained from control females for three months of the initial probiotic and recombinant strains of Lactobacillus sp. increased live weight gain by 2% and 4.4%, while in rabbits born to mothers who were given a recombinant strain, the increase in growth was 4.3% and 14.5% (P <0.01), respectively. The body length and chest girth behind the shoulder blades in animals of the 1st, 2nd and 3rd groups averaged 36 cm and 27.6 cm versus 34.2 cm and 25.5 cm in rabbits of the 4th, 5th and 6th groups. According to the incidence index, rabbits born to mothers fed a recombinant strain and fed it with feed for 3 months, significantly (P <0.05) exceeded the control. In these animals, an increase in blood flow, an increase in the number of mitoses, and an increase in the secretion of granules into the capillaries were noted in the adenohypophysis. In the pancreas, an increase in the number and size of islets of Langerhans was observed, and the diameter of the fibers in muscle tissue increased 1.5 times. In the thymus, lymph nodes and spleen, an increase in the size of the germinal zone of nodules, the appearance of a large number of blast forms of lymphocytes and cluster-forming cells was noted.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что дача беременным крольчихам экспрессирующего ген соматолиберина штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) вызывает у нарождающегося молодняка развитие толерантности к этому гормону.Thus, the data obtained indicate that giving pregnant rabbits rabbits expressing the somatoliberin gene of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) induces tolerance to this hormone in nascent young animals.

Пример 3. Определение оптимальных дозировок применения штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2).Example 3. Determination of optimal dosages for the use of the strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2).

Для проведения опыта из 45-дневного молодняка крольчат калифорнийской породы было сформировано 5 групп по 5 голов в каждой. Первая группа служила контролем и получала ОР, идентичный таковому в примере 2. Крольчатам 2-й, 3-й и 4-й групп дополнительно к ОР ежедневно скармливали по 1 мл культуры рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) (2,5×109 к.о.е./голову), 0,5 и 1 мл десятикратного концентрата этой культуры (12,5×109 и 25×109 к.o.e./голову) соответственно, а животные 5-й группы получали концентрат в дозе 0,5 мл (12,5×109 к.о.е./голову) один раз в три дня. Опыт продолжался 3 месяца.For the experiment, 5 groups of 5 animals each were formed from a 45-day-old young rabbit of the Californian breed. The first group served as a control and received an OP identical to that in Example 2. Rabbits of the 2nd, 3rd, and 4th groups were additionally fed 1 ml of a culture of a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) (2.5 × 10 9 cfu / head), 0.5 and 1 ml of ten-fold concentrate of this culture (12.5 × 10 9 and 25 × 10 9 c.oe / head), respectively, and animals of the 5th group received a concentrate in a dose of 0.5 ml (12.5 × 10 9 cfu / head) once every three days. The experiment lasted 3 months.

Исследования показали, что за первый месяц дачи препарата прирост живой массы у кроликов 1-й и 2-й групп оказался одинаковым, тогда как в 3-й, 4-й и 5-й группах он превосходил контроль на 26; 12,4 и 15,7% соответственно (Р<0,05). После 2-месячного скармливания препарата максимальный прирост живой массы был у животных 3-й и 4-й групп, получавших Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) в дозах 12,5×109 и 25×l09 к.o.e. на голову ежедневно, и превышал контроль на 13,6 и 12% соответственно. В целом за опыт максимальное повышение прироста (20,8% и 13%) наблюдалось при скармливании препарата в дозе 12,5×109 к.о.е. на голову ежедневно и один раз в три дня (табл. 4).Studies have shown that in the first month of giving the drug, the increase in live weight in rabbits of the 1st and 2nd groups turned out to be the same, while in the 3rd, 4th and 5th groups it exceeded the control by 26; 12.4 and 15.7%, respectively (P <0.05). After 2 months of feeding, the maximum increase in live weight was in animals of the 3rd and 4th groups treated with Lactobacillus sp. 8 times (pLF-SL2) in doses of 12.5 × 10 9 and 25 × l0 9 K.oe per head daily, and exceeded the control by 13.6 and 12%, respectively. In general, for the experiment, the maximum increase in growth (20.8% and 13%) was observed when feeding the drug at a dose of 12.5 × 10 9 cfu on the head daily and once every three days (table. 4).

По убойному выходу тушек существенных различий между группами не было, и он варьировал в пределах 47,3-50,6%. Обвалка тушек показала, что процент мышечной ткани с 76,6 в контроле увеличивался до 78,5 и 79,3 у кроликов 2-й и 3-й групп, а содержание жира в них снижалось с 6,3% до 3,1 и 3,3% соответственно (табл. 4). В мясе задних окорочков наблюдалась тенденция к увеличению концентрации белка, а содержание жира при высоких дозах (12,5-25,0×109 к.о.е/голову) препарата снижалось более чем наполовину.There were no significant differences between groups in the slaughter yield of carcasses, and it varied within 47.3-50.6%. Boning of carcasses showed that the percentage of muscle tissue from 76.6 in the control increased to 78.5 and 79.3 in rabbits of the 2nd and 3rd groups, and the fat content in them decreased from 6.3% to 3.1 and 3.3%, respectively (table. 4). In the meat of the hind legs, there was a tendency to increase the concentration of protein, and the fat content at high doses (12.5-25.0 × 10 9 cfu / head) of the drug decreased by more than half.

Морфологические исследования желез внутренней секреции, органов и тканей, как и в примерах 1 и 2, выявили их реакцию на экзогенный соматолиберин.Morphological studies of endocrine glands, organs and tissues, as in examples 1 and 2, revealed their reaction to exogenous somatoliberin.

В нейронах супраоптического ядра гипоталамуса кроликов, получавших рекомбинантный штамм в дозах 2,5-12,5х109 к.о.е./голову ежедневно, наблюдались признаки усиления функциональной активности. Преобладали крупные ″светлые″ нейроны, имеющие полигональную или удлиненную форму, светлое, рыхлохроматиновое, пузырьковидное ядро, большое количество гранул в цитоплазме, и поэтому клетки были отчетливо видны среди нервных волокон. У животных, получавших препарат в дозе 25×109 к.о.е./голову, были отмечены дегенеративные явления как нейронов, так и нервных окончаний.In neurons of the supraoptic nucleus of the hypothalamus of rabbits receiving a recombinant strain at doses of 2.5-12.5 x 10 9 cfu / head daily, signs of increased functional activity were observed. Large “light” neurons with a polygonal or elongated shape, a light, friable, chromatin, vesicular nucleus, a large number of granules in the cytoplasm prevailed, and therefore cells were clearly visible among nerve fibers. In animals that received the drug at a dose of 25 × 10 9 cfu / head, degenerative phenomena of both neurons and nerve endings were noted.

В аденогипофизе кроликов, получавших препарат в дозах 2,5×109 и 12,5×109 к.о.е./голову, наблюдалось увеличение числа активизированных соматотропоцитов, а синтез и секреция секреторных гранул были выше, чем в контроле. У животных, которым культуру давали в дозе 25х109 к.о.е./голову, отмечена дискомплексация аденоцитов, набухание цитоплазмы, разрушение небольшого количества клеток, что указывает на нарушение структуры гипофиза и на снижение его функциональной активности.In the adenohypophysis of rabbits receiving the drug at doses of 2.5 × 10 9 and 12.5 × 10 9 cfu / head, an increase in the number of activated somatotropocytes was observed, and the synthesis and secretion of secretory granules were higher than in the control. In animals that were given a culture at a dose of 25x10 9 cfu / head, adenocyte discompletion, cytoplasm swelling, destruction of a small number of cells were observed, which indicates a violation of the structure of the pituitary gland and a decrease in its functional activity.

В печени подопытных животных было выявлено значительно большее, по сравнению с контролем, число гипертрофированных гепатоцитов с полиплоидными ядрами. Цитоплазма клеток богата органеллами, хорошо выражена гранулярная и агранулярная эндоплазматическая сеть, что указывает на интенсивный синтез белка.A significantly larger number of hypertrophied hepatocytes with polyploid nuclei was revealed in the liver of experimental animals. The cytoplasm of the cells is rich in organelles, a well-defined granular and agranular endoplasmic reticulum, which indicates intense protein synthesis.

У кроликов контрольной группы внешнесекреторная часть поджелудочной железы состояла из крупных ацинозных клеток, в зимогенной зоне которых просматривались гранулы секрета. Количество панкреатических островков было несколько ниже, чем у животных подопытных групп. Кролики, получавшие препарат в дозах 2,5×109 и 12,5×109 к.о.е./голову, превосходили молодняк контрольной и 4-й групп по количеству В-клеток в островной ткани, васкуляризации железы, размеру островков и их числу, т.е. инсулярная активность железы у них была выше.In rabbits of the control group, the exocrine part of the pancreas consisted of large acinous cells, in which the granules of secretion were visible in the zymogenic zone. The number of pancreatic islets was slightly lower than in the animals of the experimental groups. Rabbits receiving the drug in doses of 2.5 × 10 9 and 12.5 × 10 9 cfu / head exceeded the young growth of the control and 4th groups in the number of B-cells in the island tissue, vascularization of the gland, and the size of the islets and their number, i.e. their insular activity was higher.

В тимусе подопытных кроликов отмечены изменения как коркового, так и мозгового вещества. Наблюдалось увеличение числа средних лимфоцитов, лимфобластов и митотически делящихся клеток. В лимфоузлах и селезенке отмечено увеличение размеров герминативных центров, что следует рассматривать как повышение иммунной реактивности под влиянием экзогенного соматолиберина. В лимфоидной ткани слепой кишки подопытных кроликов наблюдалось повышение на 15% числа молодых форм лимфоцитов и увеличение плотности расположения клеток между узлами. Одновременно возрастало число плазматических и розеткообразующих клеток. Эти изменения в органах иммунной системы свидетельствуют о ее более высокой функциональной зрелости у подопытных животных.In the thymus of experimental rabbits, changes in both cortical and brain matter were noted. An increase in the number of secondary lymphocytes, lymphoblasts, and mitotically dividing cells was observed. In the lymph nodes and spleen, an increase in the size of germination centers was noted, which should be considered as an increase in immune reactivity under the influence of exogenous somatoliberin. In the lymphoid tissue of the cecum of experimental rabbits, there was a 15% increase in the number of young forms of lymphocytes and an increase in the density of the arrangement of cells between nodes. At the same time, the number of plasma and rosette-forming cells increased. These changes in the organs of the immune system indicate its higher functional maturity in experimental animals.

Таким образом, полученные данные позволяют констатировать, что наиболее эффективно применение препарата Lactobacillus sp. 8 PAЗ (pLF-SL2) в дозах 2,5-12,5×109 к.о.е./голову ежедневно и в дозе 12.5×109 к.о.е/голову один раз в три дня.Thus, the data obtained allow us to state that the most effective use of the drug Lactobacillus sp. 8 PAZ (pLF-SL2) in doses of 2.5-12.5 × 10 9 cfu / head daily and at a dose of 12.5 × 10 9 cfu / head once every three days.

Пример 4. Исследование воздействия штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) на молочную продуктивность коз.Example 4. The study of the effects of the strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) for goat milk production.

Опыт проведен на двух группах коз по 4 головы в каждой, находящихся на 3-м месяце лактации. Он состоял из двух периодов: предварительного (2 недели) и основного (6 недель). Группы аналогов по живой массе, продуктивности, возрасту и сроку лактации формировали в конце предварительного периода. Животные содержались в индивидуальных клетках. Козы контрольной и опытной групп получали основной рацион согласно существующим нормам. В основной период эксперимента опытной группе ежедневно скармливали в смеси с комбикормом 2,4-2,5×1010 к.о.е./голову препарата штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2).The experiment was conducted on two groups of goats with 4 heads in each, located at the 3rd month of lactation. It consisted of two periods: preliminary (2 weeks) and main (6 weeks). Groups of analogues in terms of live weight, productivity, age and lactation period were formed at the end of the preliminary period. Animals were kept in individual cages. Goats of the control and experimental groups received the main diet in accordance with existing standards. In the main period of the experiment, the experimental group was fed daily with a mixture of 2.4-2.5 × 10 10 cfu / head of the preparation of the strain Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2).

Исследования показали, что в ходе опыта живая масса животных обеих групп практически не различалась. Не было существенной разницы в потреблении энергии и сухого вещества корма между группами в обоих периодах опыта, но валовое потребление этих ингредиентов питания в ходе опыта уменьшалось как в контрольной, так и опытной группах коз. При этом у всех животных снижалась молочная продуктивность, однако применение рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2) тормозило ее падение. Если животные обеих групп не различались по величине среднесуточного удоя в предварительный период и в первые две недели основного периода, то в следующий двухнедельный период эксперимента проявилась четкая тенденция к увеличению суточного удоя на 20,2% у коз опытной группы, а в последние две недели опыта возрастание удоя стало еще более контрастным (26,5%) (табл. 5). Вместе с этим в молоке увеличивалось содержание белка. Если у животных контрольной группы его концентрация в период опыта непрерывно снижалась, то у коз опытной группы после двух недель применения препарата снижение концентрации белка в молоке прекратилось, а в конце опыта она превосходила таковую в контроле на 11% (Р<0,05). Животные, получавшие микробный препарат, лучше использовали корм на продуктивные цели. Если в первые две недели основного периода у коз опытной группы увеличение удоя, эффективности использования энергии и сухого вещества корма на молоко 4%-ной жирности было еще небольшим и варьировало в пределах 7,2-7,6%, то в последующие 4 недели основного периода опыта эти показатели достоверно (Р<0,05) возрастали и превосходили контроль на 27,2-28,3%, 24-27,4% и 23,4-26,9% соответственно.Studies have shown that during the experiment, the live weight of animals of both groups was practically the same. There was no significant difference in the energy and dry matter intake of the feed between the groups in both periods of the experiment, but the gross consumption of these food ingredients during the experiment decreased both in the control and experimental groups of goats. At the same time, milk production decreased in all animals, however, the use of the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2) slowed down its fall. If the animals of both groups did not differ in the average daily milk yield in the preliminary period and in the first two weeks of the main period, then in the next two-week period of the experiment there was a clear tendency to increase the daily milk yield by 20.2% in goats of the experimental group, and in the last two weeks of the experiment the increase in milk yield became even more contrasting (26.5%) (Table 5). Along with this, the protein content in milk increased. If in animals of the control group its concentration continuously decreased during the experiment, then in goats of the experimental group, after two weeks of using the drug, the decrease in protein concentration in milk stopped, and at the end of the experiment it exceeded that in the control by 11% (P <0.05). Animals that received the microbial preparation better used food for productive purposes. If in the first two weeks of the main period for goats of the experimental group, the increase in milk yield, energy efficiency and dry matter of feed for milk of 4% fat content was still small and varied within 7.2-7.6%, then in the next 4 weeks of the main during the experimental period, these indicators significantly (P <0.05) increased and exceeded the control by 27.2-28.3%, 24-27.4% and 23.4-26.9%, respectively.

Таким образом, установлено, что пероральное применение рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8 РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующего образование соматолиберина, является эффективным способом повышения белковомолочности и продуктивности коз и может быть реальной альтернативой использованию в животноводстве различных препаратов соматотропного гормона.Thus, it was found that oral administration of the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8 TIMES (pLF-SL2), which expresses the formation of somatoliberin, is an effective way to increase the milk yield and productivity of goats and can be a real alternative to using various somatotropic hormones in animal husbandry.

Claims (4)

1. Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и улучшения качества продукции, предусматривающий включение в рацион пробиотического препарата, содержащего молочнокислые бактерии, отличающийся тем, что в качестве пробиотического препарата используют рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8РАЗ (pLF-SL2), экспрессирующий соматолиберин в пищеварительном тракте.1. A method of increasing the productivity of farm animals and improving product quality, comprising the inclusion in the diet of a probiotic preparation containing lactic acid bacteria, characterized in that a recombinant strain of Lactobacillus sp. Is used as a probiotic preparation. 8RAZ (pLF-SL2) expressing somatoliberin in the digestive tract. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для повышения прироста живой массы, увеличения в мясе доли мышечной ткани и снижения содержания жира рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8РАЗ (pLF-SL2) задают в дозах 2,5-12,5·109 к.о.е./голову ежедневно или в дозе 12,5·109 к.о.е./голову один раз в три дня.2. The method according to claim 1, characterized in that to increase the gain in live weight, increase the proportion of muscle tissue in meat and reduce the fat content, the recombinant strain of Lactobacillus sp. 8RAZ (pLF-SL2) is given in doses of 2.5-12.5 · 10 9 cfu / head daily or in a dose of 12.5 · 10 9 cfu / head once every three days . 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что для улучшения качества продукции создают у нарождающегося молодняка толерантность к соматолиберину путем включения в рацион самкам в период беременности рекомбинантного штамма Lactobacillus sp. 8РАЗ (pLF-SL2) в дозе 2,5·109 к.о.е./голову ежедневно.3. The method according to claim 1, characterized in that, in order to improve the quality of the products, somatoliberin tolerance is created in the nascent young by including a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8RAZ (pLF-SL2) at a dose of 2.5 · 10 9 cfu / head daily. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что для повышения продуктивности и белковомолочности лактирующих животных рекомбинантный штамм Lactobacillus sp. 8PA3 (pLF-SL2) задают в дозах 2,4-2,5·1010 к.о.е./голову ежедневно.4. The method according to claim 1, characterized in that to increase the productivity and milk yield of lactating animals, a recombinant strain of Lactobacillus sp. 8PA3 (pLF-SL2) is given in doses of 2.4-2.5 · 10 10 cfu / head daily.
RU2002111437/13A 2002-04-30 2002-04-30 Method for increasing productivity in cattle and improving production quality RU2229827C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2002111437/13A RU2229827C2 (en) 2002-04-30 2002-04-30 Method for increasing productivity in cattle and improving production quality

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2002111437/13A RU2229827C2 (en) 2002-04-30 2002-04-30 Method for increasing productivity in cattle and improving production quality

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2229827C2 true RU2229827C2 (en) 2004-06-10
RU2002111437A RU2002111437A (en) 2004-06-20

Family

ID=32845616

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2002111437/13A RU2229827C2 (en) 2002-04-30 2002-04-30 Method for increasing productivity in cattle and improving production quality

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2229827C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2541646C1 (en) * 2013-10-09 2015-02-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный аграрный университет Method of improving quality of fur and production of rabbit husbandry
RU2800984C1 (en) * 2022-12-15 2023-08-01 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина). Method for improving amino acid content in rabbit meat with simultaneous prevention of oxidative stress in them

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2541646C1 (en) * 2013-10-09 2015-02-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный аграрный университет Method of improving quality of fur and production of rabbit husbandry
RU2800984C1 (en) * 2022-12-15 2023-08-01 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина). Method for improving amino acid content in rabbit meat with simultaneous prevention of oxidative stress in them

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mitchell et al. The effects of genetic selection for increased growth rate on mucosal and muscle weights in the different regions of the small intestine of the domestic fowl (Gallus domesticus)
Griel Jr et al. Milk production response to feeding methionine hydroxy analog to lactating dairy cows
CN107319211A (en) A kind of hirudinaria manillensis young perfect compound feed and preparation method thereof
Wen et al. Effects of early weaning on intestinal morphology, digestive enzyme activity, antioxidant status, and cytokine status in domestic pigeon squabs (Columba livia)
Płoszaj et al. Polyamines in goat's colostrum and milk
Baldinger et al. Effect of six 100% organic feeding strategies differing in external input demand on animal performance and production costs of piglets before and after weaning
CN108703264A (en) A kind of feed and preparation method thereof reducing Roll road discharge of methane
Zahradkova et al. Comparison of growth performance and slaughter characteristics of Limousin and Charolais heifers
RU2229827C2 (en) Method for increasing productivity in cattle and improving production quality
RU2714262C1 (en) Method of using activated coal fodder additive
NL2029094B1 (en) Composition for increasing feed intake
RU2739401C1 (en) Phytosynbiotic fodder additive for calves
RU2159558C1 (en) Method of feeding animals and birds
Rasskazova et al. The effectiveness of experimental herbal preparations in organic animal husbandry
RU2259198C1 (en) Method for increasing productivity in cattle
RU2723179C1 (en) Method for improving economic and useful qualities of ewes and lambs
RU2233099C1 (en) Fodder additive for farm animals and poultry
RU2767609C1 (en) Method for increasing the biological value of rabbit meat by increasing the content of essential amino acids therein
RU2813801C1 (en) Method of increasing meat productivity of cattle
RU2827831C1 (en) Method for correction of physiological and biochemical status, increase of milk productivity and quality of milk in holstein cows in winter stall period
RU2684331C1 (en) Method for stimulating productivity and hematopoiesis in rabbits at simultaneous improvement of meat
CN113040276B (en) Feed additive and preparation method and application thereof
RU2817831C1 (en) Method for increasing milk production of cows
Semenenko et al. New integrated system for raising poultry as a factor of increasing its productivity and metabolic status
Molyanova et al. Effect of the Bacillus subtilis-based drug on the morphobiochemical and productive parameters of young goats

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20110501