RU2177277C1 - Preparation "aprerem" for animal semen sanation - Google Patents
Preparation "aprerem" for animal semen sanation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2177277C1 RU2177277C1 RU2000119030A RU2000119030A RU2177277C1 RU 2177277 C1 RU2177277 C1 RU 2177277C1 RU 2000119030 A RU2000119030 A RU 2000119030A RU 2000119030 A RU2000119030 A RU 2000119030A RU 2177277 C1 RU2177277 C1 RU 2177277C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sperm
- eremomycin
- preparation
- apramycin
- semen
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к животноводству, в частности к препаратам, которые используют для санации спермы производителей сельскохозяйственных животных в средах для ее разбавления и криоконсервации. The invention relates to animal husbandry, in particular to preparations that are used for sanitation of sperm of producers of farm animals in environments for its dilution and cryopreservation.
Известен препарат для санации спермы животных - полиген, в состав которого входят антибиотики: полимиксина сульфат и гентамицина сульфат [1], который наиболее близок по технической сущности к изобретению. Known drug for sanitation of animal sperm - polygen, which includes antibiotics: polymyxin sulfate and gentamicin sulfate [1], which is closest in technical essence to the invention.
Недостатком этого препарата является низкая широта полезного действия полимиксина, одного из компонентов этого санирующего препарата. Длительное применение полимиксина в практике ветеринарии (более 30 лет) привело к повышению устойчивости к нему микрофлоры. The disadvantage of this drug is the low breadth of the beneficial effects of polymyxin, one of the components of this sanitizing drug. Long-term use of polymyxin in the practice of veterinary medicine (over 30 years) has led to increased microflora resistance to it.
В опытах отечественных и зарубежных ученых чувствительность бактерий, выделенных из спермы быков, для полимиксина составила всего лишь 3-8% [2], чувствительность микрофлоры спермы к гентамицину является довольно высокой - 98,6-100%. Однако в некоторых опытах применение гентамицина для санации спермы быков снижало оплодотворяемость коров на 5% [2]. In the experiments of domestic and foreign scientists, the sensitivity of bacteria isolated from bull sperm for polymyxin was only 3-8% [2], the sensitivity of sperm microflora to gentamicin is quite high - 98.6-100%. However, in some experiments, the use of gentamicin for sanitation of bull sperm reduced the fertility of cows by 5% [2].
В целом, полиген как санирующий препарат не всегда в должной мере обеспечивает защиту разбавленной спермы от загрязнения и дальнейшего развития микрофлоры. Его эффективность находится в зависимости от начального осеменения микроорганизмами нативной спермы. In general, polygen as a sanitizing drug does not always adequately protect diluted semen from contamination and the further development of microflora. Its effectiveness depends on the initial insemination of native sperm by microorganisms.
Так, из наставления по применению полигена следует, что при наличии в сперме 100 тыс. микробных тел и более в 1 см3 следует внести 600 мкг препарата на 100 см3 разбавленной спермы, а при содержании менее 100 тыс. микроорганизмов в 1 см3 вносят 300 мкг препарата [1]. Эта рекомендация, очевидно, исходит из того факта, что повышенное содержание гентамицина отрицательно влияет на оплодотворяемость коров, о чем было показано выше [2].So, from the instruction for the use of polygen, it follows that if there are 100 thousand microbial bodies or more in sperm in 1 cm 3 , 600 μg of the drug per 100 cm 3 of diluted semen should be added, and if less than 100 thousand microorganisms are contained in 1
Кроме того, указание наставления о применении 300 мкг или 600 мкг препарата, исходя из различной обсемененности спермы, на практике не выполнимо, так как инструкцией работы племпредприятия предусматривается проводить ветеринарно-санитарную оценку спермы (количество микроорганизмов и коли-титр) один раз в квартал [3], а у неблагополучных производителей - 1 раз в 6-10 дней. In addition, the indication of the instruction on the use of 300 mcg or 600 mcg of the drug, based on different semen contamination, is not feasible in practice, since the instructions of the breeding enterprise provide for veterinary and sanitary assessment of sperm (the number of microorganisms and coli titer) once a quarter [ 3], and for dysfunctional manufacturers - 1 time in 6-10 days.
Целью изобретения является повышение эффективности препарата. The aim of the invention is to increase the effectiveness of the drug.
Поставленная цель достигается за счет увеличения бактерицидной активности санирующего препарата. The goal is achieved by increasing the bactericidal activity of the sanitizing drug.
Сущность способа заключается в использовании антибактериального препарата, содержащего апрамицин и эремомицин, обладающие высокой бактерицидной активностью, в равном соотношении - 350 мг каждый на 1 л среды. The essence of the method is to use an antibacterial drug containing apramycin and eremomycin, which have high bactericidal activity, in an equal ratio of 350 mg each per 1 liter of medium.
Предлагаемый способ позволит уменьшить бактериальную загрязненность разбавленной спермы, увеличить срок ее использования и повысить оплодотворяемость маток. Сухие заготовки лактозо-желточно-глицериновой среды готовят согласно наставлению по их применению [3]. В стерильную химическую колбу наливают необходимый объем прокипяченной дистиллированной воды (1 л) и добавляют лактозу. Для полного растворения препарата и его стерилизации колбу помещают в водяную баню и стерилизуют в течение 5-10 мин с момента закипания воды в бане, затем охлаждают до 35-40oC и добавляют желток куриного яйца, глицерин и антибиотики (спермосан апрэрем) в дозе: апрамицин - 350 мг и эремомицин - 350 мг.The proposed method will reduce the bacterial contamination of diluted semen, increase the period of its use and increase the fertility of the uterus. Dry preforms of lactose-yolk-glycerin medium are prepared according to the instructions for their use [3]. The required volume of boiled distilled water (1 l) is poured into a sterile chemical flask and lactose is added. To completely dissolve the drug and sterilize it, the flask is placed in a water bath and sterilized for 5-10 minutes from the moment of boiling water in the bath, then it is cooled to 35-40 o C and chicken egg yolk, glycerin and antibiotics (spermosan April) are added in a dose : apramycin - 350 mg and eremomycin - 350 mg.
Свежеприготовленная среда представляет собой однородную эмульсию без осадка, слабо-желтого цвета, pH 6,8±0,2, осмотическое давление без глицерина при 0oC 7,8±0,3 атм.Freshly prepared medium is a homogeneous emulsion without precipitate, slightly yellow in color, pH 6.8 ± 0.2, osmotic pressure without glycerol at 0 ° C. 7.8 ± 0.3 atm.
Показатель абсолютной выживаемости спермиев (Sa) при температуре 2-4oC составляет не менее 900 условных единиц.The absolute survival rate of sperm (S a ) at a temperature of 2-4 o C is at least 900 conventional units.
Готовый препарат спермосана - апрэрем представляет собой сыпучий однородный порошок белого цвета, хорошо растворимый в воде. Сохраняет свою активность в течение 2-лет в сухом помещении при температуре не выше 20oC.Ready-made spermosan preparation - April is a loose homogeneous white powder, readily soluble in water. It remains active for 2 years in a dry room at a temperature not exceeding 20 o C.
Пример 1. Для экспериментальной проверки на токсичность составляют 22 варианта доз препарата с различными концентрациями апрамицина и эремомицина. Каждый вариант препарата испытывают на безвредность для спермиев по их показателю абсолютной выживаемости - Sa, в условных единицах (у.е.). Для этого испытуемые антибиотики в разных дозах вносят в ЛГЖ среду для разбавления и криоконсервации спермы из расчета 100-600 мкг/мл.Example 1. For experimental toxicity testing, 22 dose versions of the drug with various concentrations of apramycin and eremomycin are made up. Each variant of the drug is tested for harmlessness for sperm according to their absolute survival indicator - S a , in arbitrary units (cu). For this, the tested antibiotics in different doses are added to the LVH medium for dilution and cryopreservation of sperm at the rate of 100-600 μg / ml.
Далее, свежеполученную и смешанную от 1-2 быков сперму с подвижностью не ниже 7,5 баллов и концентрацией не ниже 0,8 млрд/мл разбавляют из расчета 1: 15-20 указанной средой с проверяемыми вариантами антибиотиков и с базовым прототипом - спермосаном полиген (контроль). Further, sperm freshly obtained and mixed from 1-2 bulls with a mobility of at least 7.5 points and a concentration of at least 0.8 billion / ml are diluted at a rate of 1: 15-20 with the indicated medium with the tested antibiotic options and with the basic prototype spermosane polygen (the control).
После разбавления спермы определяют подвижность спермиев, которую в последующем оценивают через каждые 24 часа, до момента их гибели при условии хранения в холодильнике при температуре +2 - +4oC. На основе полученных данных подсчитывают показатель абсолютной выживаемости (Sa) спермиев. Каждый вариант препарата оценивают по 5 опытам, с последующей статистической обработкой полученных данных.After sperm dilution, sperm motility is determined, which is subsequently evaluated every 24 hours, until they die, if stored in a refrigerator at a temperature of +2 - +4 o C. Based on the data obtained, the absolute survival rate (S a ) of sperm is calculated. Each version of the drug is evaluated by 5 experiments, followed by statistical processing of the data.
Влияние различных доз апрамицина и эремомицина на выживаемость сперматозоидов показано в табл. 1. The effect of various doses of apramycin and eremomycin on sperm survival is shown in Table. 1.
В исследованиях наиболее высокий абсолютный показатель выживаемости сперматозоидов быков в среде с апрамицином был равен 880 y.e., а в среде с эремомицином - 900 y.e. при содержании в каждом варианте антибиотиков соответственно 350 мкг/мл и 400 мкг/мл. Это на статистически достоверную величину выше, соответственно на 112,2 и 114,8%, чем в контроле (табл. 1). In studies, the highest absolute survival rate of bull sperm in an environment with apramycin was 880 y.e., and in an environment with eremomycin - 900 y.e. when each antibiotic contains 350 μg / ml and 400 μg / ml, respectively. This is a statistically significant value higher, respectively, by 112.2 and 114.8% than in the control (Table 1).
Пример 2. В табл. 2 представлены результаты подбора оптимального сочетания компонентов нового бактериального комплекса, произведенного по методу встречных рядов (табл. 2). Example 2. In the table. 2 presents the results of selecting the optimal combination of components of a new bacterial complex produced by the method of oncoming rows (table. 2).
В опытах было установлено, что на статистически достоверную величину - 46-96 у.е. показатель абсолютной выживаемости спермиев 4-8 вариантов был выше контроля. In experiments, it was found that a statistically significant value of 46-96 cu the absolute sperm survival rate of 4-8 variants was higher than the control.
Наиболее высокий показатель выживаемости сперматозоидов быков был у шестого варианта и равнялся 912 ед., т.е. на 14,8% выше контроля, в котором для санаций спермы использовали полиген. Шестой вариант на 100 мл воды содержал по 350 мкг апрамицина и эремомицина. The sixth option was the highest survival rate of bull sperm and amounted to 912 units, i.e. 14.8% higher than the control in which polygen was used for sperm sanitation. The sixth option per 100 ml of water contained 350 μg of apramycin and eremomycin.
Пример 3. Проведено сравнительное испытание прототипа - полигена и нового антибактериального комплекса с оптимальным соотношением компонентов - по 350 мкг апрамицина и эремомицина. Example 3. A comparative test of the prototype - polygen and a new antibacterial complex with an optimal ratio of components - 350 μg of apramycin and eremomycin was carried out.
Для этого разбавленную ЛГЖ средой, смешанную от 2-3 быков сперму делят на 5 равных частей (по 100 мл) и добавляют туда антибиотики - 5-7 вариант, показавшие наиболее высокий результат сочетанного воздействия на выживаемость сперматозоидов. В первую часть спермы антибиотики не добавляют. Во вторую часть пробы вносят спермосан - прототип 300 мкг полигена. В третью часть вносят пятый вариант - 300 мкг апрамицина и 400 мкг эремомицина, в четвертую - вносят по 350 мкг апрамицина и эремомицина. В пятую часть вносят 400 мкг апрамицина и 300 мкг эремомицина. To do this, the sperm diluted with LGH medium mixed from 2-3 bulls is divided into 5 equal parts (100 ml each) and antibiotics are added there - the 5-7 option, which showed the highest result of the combined effect on sperm survival. Antibiotics are not added to the first part of sperm. Spermosan, a prototype of 300 micrograms of polygen, is added to the second part of the sample. In the third part, the fifth variant is introduced - 300 μg of apramycin and 400 μg of eremomycin, and in the fourth - 350 μg of apramycin and eremomycin are added. In the fifth part, 400 μg of apramycin and 300 μg of eremomycin are added.
Далее указанные пробы спермы эквилибрируют в течение 4-х часов и замораживают на фторопластовой пластине гранулами по 0,2 мл в парах жидкого азота. Замороженную сперму хранят в течение 2-х месяцев в азоте, после чего гранулы размораживают и каждую пробу высевают в 5-ти чашках с 2% МПА и 1% глюкозы. Посевы инкубируют при температуре 37-30oC в течение 72 час. Подсчитывают среднее число выросших колоний.Further, these semen samples are equilibrated for 4 hours and frozen on a fluoroplastic plate with 0.2 ml granules in liquid nitrogen vapor. Frozen semen is stored for 2 months in nitrogen, after which the granules are thawed and each sample is sown in 5 cups with 2% MPA and 1% glucose. Crops are incubated at a temperature of 37-30 o C for 72 hours. The average number of colonies grown is calculated.
Данные по микробной контаминации замороженно-оттаянной спермы быков в зависимости от каждого санирующего препарата показаны в табл. 3. Data on the microbial contamination of frozen thawed semen of bulls, depending on each sanitizing preparation, are shown in Table. 3.
Опыты показывают, что каждый испытанный вариант нового антибактериального комплекса проявляет более высокое бактерицидное действие (в 2,5-9,9 раз) при различной обсемененности разбавленной спермы. Experiments show that each tested version of the new antibacterial complex exhibits a higher bactericidal effect (2.5–9.9 times) with different seeding of diluted semen.
Наибольшей бактерицидной активностью (в 6,5-9,9 раз по сравнению с базовым вариантом) обладает шестой вариант рекомендуемого комплекса, в котором содержалось по 350 мкг/100 мл апрамицина и эремомицина. The sixth variant of the recommended complex, which contained 350 μg / 100 ml of apramycin and eremomycin, had the highest bactericidal activity (6.5–9.9 times compared with the basic version).
Пример 4. Проведено сравнительное испытание бактерицидного действия прототипа - полигена и нового антибактериального комплекса - апрэрема, содержащего оптимальное количество апрамицина и эремомицина - по 350 мкг/100 мл каждого. Example 4. A comparative test of the bactericidal action of the prototype - polygen and a new antibacterial complex - Aprilerem, containing the optimal amount of apramycin and eremomycin - 350 μg / 100 ml each.
Для анализа использовали кровяной мясопептонный агар (5% крови КРС), разлитый в чашки Петри, в которые высевали образцы спермы с известной микробной контаминацией. Инкубацию посевов проводили при 37oC в течение 24 часов. Расчет количества микроорганизмов осуществляли путем подсчета колоний (КОЕ/мл) на питательной среде в чашке.For analysis, blood meat-peptone agar (5% cattle blood) was used, poured into Petri dishes into which sperm samples with known microbial contamination were seeded. The incubation of crops was carried out at 37 o C for 24 hours. The calculation of the number of microorganisms was carried out by counting colonies (CFU / ml) on a nutrient medium in a cup.
Эффективность санирования разбавленной спермы быков в зависимости от средней (КОЕ/мл = 15500), большой (КОЕ/мл= 86 тыс.) и очень большой (КОЕ/мл = 210 тыс.) начальной обсемененности представлена в табл.4. The efficiency of sanitation of diluted semen of bulls depending on the average (CFU / ml = 15500), large (CFU / ml = 86 thousand) and very large (CFU / ml = 210 thousand) of the initial seeding is presented in Table 4.
В исследованиях было установлено, что спермосан полиген (контр.) снизил обсемененность образцов разбавленной спермы на 95,3-95,7%. Однако расчеты показывают, что такое снижение является недостаточным, так как инструкция допускает наличие в 1 дозе (0,2- 0,5 мл) не более 500 микробных тел. In studies, it was found that spermosan polygen (control) reduced the seeding of diluted semen samples by 95.3-95.7%. However, calculations show that such a decrease is insufficient, since the instruction allows for the presence of no more than 500 microbial bodies in 1 dose (0.2-0.5 ml).
Санирующая способность рекомендуемого (опытного) комплекса удовлетворяет требованиям инструкций при каждом из рассмотренных уровней обсемененности спермы. The sanitizing ability of the recommended (experimental) complex meets the requirements of the instructions for each of the considered levels of semen dissemination.
Пример 5. Комплексный санирующий препарат - спермосан апрэрем испытан в производственных условиях на оплодотворяющую способность спермиев быков после искусственного осеменения коров и телок в хозяйствах Белгородской области. Example 5. A comprehensive sanitizing preparation - spermosan was tested in April on production conditions for the fertilizing ability of bull sperm after artificial insemination of cows and heifers in the farms of the Belgorod region.
Результаты производственных испытаний представлены в табл. 5. The results of production tests are presented in table. 5.
Исследованиями установлено, что в опытной группе нетелей после осеменения телок было больше, чем в контрольной группе на 10,2%, а стельных коров - на 7,2%. Это свидетельствует о более высокой оплодотворяющей способности спермы быков, санированной предлагаемым спермосаном апрэрем. Studies have found that in the experimental group of heifers after insemination, there were more heifers than in the control group by 10.2%, and pregnant cows - by 7.2%. This indicates a higher fertilizing ability of bull sperm sanitized by the proposed spermosan in April.
Таким образом, применение нового антибактериального препарата, состоящего из апрамицина (350 мг/л) и эремомицина (350 мг/л) обеспечивает снижение бактериальной загрязненности в 9,1-14,6 раз, повышение абсолютного показателя выживаемости спермиев на 14,8%, и повышение оплодотворяемости телок и коров соответственно на 10,2 и 7,2% по сравнению со спермосаном полиген. Thus, the use of a new antibacterial drug consisting of apramycin (350 mg / l) and eremomycin (350 mg / l) provides a reduction of bacterial contamination of 9.1-14.6 times, an increase in the absolute sperm survival rate of 14.8%, and increased fertility of heifers and cows by 10.2 and 7.2%, respectively, compared to spermosan polygen.
Источники информации
1. Наставление по применению препарата "Поливен" для санации спермы и эмбрионов сельскохозяйственных животных. Москва, 1997.Sources of information
1. Instruction for the use of the drug "Polyven" for the rehabilitation of sperm and embryos of farm animals. Moscow, 1997.
2. В. Г. Семаков. Криоконсервация спермы быков и баранов: Обзорная информация. Информ/ВНИИТЭагропром. М., 1991. 2. V. G. Semakov. Sperm Cryopreservation of Bulls and Sheep: Overview. Inform / VNIITEgroprom. M., 1991.
3. Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1981. 3. Instructions on the organization and technology of stations and enterprises for the artificial insemination of farm animals. M .: Kolos, 1981.
Claims (1)
Апрамицин - 350
Эремомицин - 350оPreparation for animal sperm sanitation, including antibiotics, characterized in that the drug contains apramycin and eremomycin as antibiotics in the following ratio of components per 1 liter of sperm dilution and cryopreservation, mg:
Apramycin - 350
Eremomycin - 350o
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000119030A RU2177277C1 (en) | 2000-07-19 | 2000-07-19 | Preparation "aprerem" for animal semen sanation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000119030A RU2177277C1 (en) | 2000-07-19 | 2000-07-19 | Preparation "aprerem" for animal semen sanation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2177277C1 true RU2177277C1 (en) | 2001-12-27 |
Family
ID=20238013
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000119030A RU2177277C1 (en) | 2000-07-19 | 2000-07-19 | Preparation "aprerem" for animal semen sanation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2177277C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019073071A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-18 | Biodesiv Efnium | Antimicrobial polymer for animal semen |
-
2000
- 2000-07-19 RU RU2000119030A patent/RU2177277C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СЕМАКОВ В.Г. Криоконсервация спермы быков и баранов: Обзорная информация. Информ / ВНИИТЭагропром. - М., 1991. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019073071A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-18 | Biodesiv Efnium | Antimicrobial polymer for animal semen |
| FR3072247A1 (en) | 2017-10-13 | 2019-04-19 | Biodesiv Efnium | ANTIMICROBIAL POLYMER FOR ANIMAL SEED |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105994251B (en) | A kind of dilution preservation liquid for killing animal semen virus and bacteria | |
| CN110172416B (en) | Composite lactobacillus fermentation liquor for improving environment of colony house of farm as well as preparation method and application thereof | |
| US20130344172A1 (en) | Antimicrobial acid formulation | |
| US9107418B2 (en) | Animal lesion treatment and prevention formulations and methods | |
| Mahmood et al. | Prevalence of Salmonella in diarrheic adult goats in field conditions. | |
| Jørgensen et al. | Spread of infective Dictyocaulus viviparus larvae in pasture and to grazing cattle: experimental evidence of the role of Pilobolus fungi | |
| Gray et al. | Some observations on the faecal carriage of mesophilic Aeromonas species in cows and pigs | |
| RU2177277C1 (en) | Preparation "aprerem" for animal semen sanation | |
| Boonthai et al. | In vitro inoculation of Aeromonas hydrophila and Pseudomonas fluorescens in cryopreserved silver barb (Barbodes gonionotus) milt: effect on fertilization capacity and transmission potential to embryos | |
| Khalid et al. | Comparison of Gentamicin and Ciprofloxacin in Dromedary Camels” Semen Extender | |
| Tanbayeva et al. | The results of the application of a probiotic as a therapeutic and prophylactic agent in the early form of mastitis in dairy cows | |
| JP4052535B2 (en) | Animal drugs and animal feed | |
| RU2177761C1 (en) | Apragen preparation to conduct spermatic sanitation in animals | |
| Oladele et al. | Mortality of Clarias gariepinus caused by Aeromonas caviae and nitrite toxicity in a fish farm | |
| Sitepu et al. | Total Bacteria of Post-Thawing Boer Buck Semen with Addition of Sweet Orange Essential Oil to Tris Yolk Extender | |
| Mitiku et al. | Epidemiology of cystic bovine hydatidosis. Emphasis on abattoir findings in Ethiopia | |
| KR102568296B1 (en) | Animal Food Composition comprising Turmeric, Glasswort and Artemisia princeps and Methods for Manufacturing the same | |
| RU2203947C1 (en) | Strain of bacterium bacillus licheniformis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and fishes | |
| Kučević et al. | Effect of post-milking teat dipping on hygienic quality of cow's milk | |
| Castro et al. | Honey or pineapple juice as extender components for Quezon native and Duroc boar semen at different storage temperatures | |
| RU2115386C1 (en) | Medium "san-lact" for sheep sperm freezing | |
| RU2824629C1 (en) | Agent for disinfection and disinfestation of environmental objects | |
| RU2709138C1 (en) | Method for preventing respiratory infections of broiler chickens | |
| Omodewu et al. | PREVALENT BACTERIA ISOLATED FROM BOAR SEMEN EXTENDED WITH THE INCLUSION OF MORINGA LEAF EXTRACT (MLE) IN BELTSVILLE THAWING SOLUTION. | |
| Sirohi et al. | Biochemical and Microbiological Characteristics of Indigenous and Crossbred Fresh Cow Urine |