RU2036233C1 - Nutrient medium for primary and transplantable cells growing - Google Patents
Nutrient medium for primary and transplantable cells growing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2036233C1 RU2036233C1 SU5013324A RU2036233C1 RU 2036233 C1 RU2036233 C1 RU 2036233C1 SU 5013324 A SU5013324 A SU 5013324A RU 2036233 C1 RU2036233 C1 RU 2036233C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- nutrient medium
- medium
- growth
- primary
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и касается новых составов питательных сред (ПС) для выращивания in vitro культуры первичных и перевиваемых клеток. ПС может быть использована для вирусологических исследований с вирусами, медленно проявляющими цитопатическое действие в культуре клеток (например, микствирусы). The invention relates to biotechnology and relates to new compositions of nutrient media (PS) for growing in vitro cultures of primary and transplanted cells. PS can be used for virological studies with viruses that slowly exhibit a cytopathic effect in cell culture (for example, mycoviruses).
Известна ПС для выращивания растений in vitro способом тканевых культур или из мерисистем (авт. св. СССР N 1558984, 1988), в которой мазоинозит, обычно используемый при добавлении в ПС для последующего синтеза из него в растения карбоновых кислот, заменен введенными непосредственно в среду солями яблочной лимонной и изо-лимонной кислот. Кроме того, в ПС дополнительно вводят соли итаконовой и α -кето-глутаровой кислот. Known PS for growing plants in vitro by the method of tissue culture or from merisystems (ed. St. USSR N 1558984, 1988), in which masoinositol, which is usually used when carboxylic acids are added to PS for subsequent synthesis from it into plants, is replaced by those introduced directly into the medium salts of apple citric and iso-citric acids. In addition, salts of itaconic and α-keto-glutaric acids are additionally introduced into the PS.
Известна ПС для культивирования клеток животных и человека, необходимых для производства вирусных вакцин, моноклональных антител, биологически активных веществ (БАВ) и проведения диагностических исследований (авт. св. СССР N 1520095, 1987), содержащая в качестве стимулятора роста 1-5% экстракта цветочной пыльцы, а также 0,5-10% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота (КРС) и 85-90% синтетической ПС РРМ1-1640. Known PS for the cultivation of animal and human cells necessary for the production of viral vaccines, monoclonal antibodies, biologically active substances (BAS) and diagnostic tests (ed. St. USSR N 1520095, 1987), containing as a growth stimulator 1-5% extract pollen, as well as 0.5-10% of the embryonic serum of cattle (cattle) and 85-90% of synthetic PS PPM1-1640.
Известно использование в качестве ростового фактора концентрата сывороточных белков молочной сыворотки, полученных ультрафиксацией, или смесь концентрата сывороточных белков молочной сыворотки с сывороткой крови КРС в соотношении (5-20): 1 (авт. св. СССР N 1507790, 1986). Изобретение может быть использовано в вирусологии и биотехнологии для получения клеток в большом количестве. It is known to use as a growth factor a whey protein whey protein concentrate obtained by ultrafixation, or a mixture of whey protein whey protein concentrate with cattle serum in the ratio (5-20): 1 (ed. St. USSR N 1507790, 1986). The invention can be used in virology and biotechnology to obtain cells in large quantities.
Известна ПС для культивирования растительных клеток и протопластов (авт. св. СССР N 1331892, 1986), которую готовят путем растворения в бидистиллированной воде 28 компонентов, в том числе в качестве стимуляторов роста аммоний хлористый, калий фосфорнокислый, натрий ЭДТА, глютамин, гидролизат казеина, α -нафтилуксусную кислоту, ксилозу и глюкозу. Known PS for the cultivation of plant cells and protoplasts (ed. St. USSR N 1331892, 1986), which is prepared by dissolving 28 components in bidistilled water, including ammonium chloride, potassium phosphate, sodium EDTA, glutamine, casein hydrolyzate as growth stimulants , α-naphthylacetic acid, xylose and glucose.
Известен способ определения пролиферативной активности клеток (их способности к размножению) (авт. св. СССР N 1331891, 1985), предусматривающий инкубирование клеток в изотоническом растворе. A known method for determining the proliferative activity of cells (their ability to reproduce) (ed. St. USSR N 1331891, 1985), providing for the incubation of cells in an isotonic solution.
Известен способ культивирования клеток человека и животных путем засева клеточной суспензии на синтетическую ПС, дополнительно содержащую сыворотку крови млекопитающих и сыворотку крови овцематок 130-135 дн суягности (авт. св. СССР N 1257086, 1985). Способ может быть использован для культивирования клеток для производства вирусных вакцин, моноклональных антител, БАВ, диагностических исследований. Способ повышает пролиферативную активность клеток за счет улучшения ростовых и адгезивных свойств среды. A known method of cultivating human and animal cells by seeding a cell suspension on a synthetic PS, additionally containing mammalian blood serum and ewes blood serum 130-135 days of coherence (ed. St. USSR N 1257086, 1985). The method can be used for cell cultivation for the production of viral vaccines, monoclonal antibodies, biologically active substances, diagnostic studies. The method increases the proliferative activity of cells by improving the growth and adhesive properties of the medium.
Известен способ культивирования островковых клеток поджелудочной железы (авт. св. СССР N 1063830, 1982), в котором суспензию клеток обрабатывают средой 199, содержащей 50% бычьей сыворотки, и инкубируют в питательной смеси, содержащей среду 199, 0,5%-ный раствор гидролизата лактальбумина, бычью сыворотку в соотношении 1:1:0,5 и 300-500 мг. глюкозы. A known method of culturing islet cells of the pancreas (ed. St. USSR N 1063830, 1982), in which a suspension of cells is treated with medium 199 containing 50% bovine serum, and incubated in a nutrient mixture containing medium 199, a 0.5% solution lactalbumin hydrolyzate, bovine serum in a ratio of 1: 1: 0.5 and 300-500 mg. glucose.
Известна ПС для выращивания культур клеток животных (авт. св. СССР N 1025722, 1981), включающая гидролизат белка, cолевой раствор и сыворотку крови. Known PS for growing animal cell cultures (ed. St. USSR N 1025722, 1981), including protein hydrolyzate, saline and blood serum.
Известна культуральная среда, применяемая в бактериологии для культивирования in vitro (заявка Франции N 2630456, кл. С 12 N 5/02, 1989) состоящая из твердого геля, содержащего 70-80% воды, возможно с питательными добавками. Known culture medium used in bacteriology for in vitro cultivation (French application N 2630456, CL 12
Известен способ культивирования микроорганизмов (эк. патент ГДР N 270320, кл. С 12 N 1/00, 1989), при биотехнических процессах превращения веществ, которые проводят при помощи растущих клеток. Микроорганизмы культивируют по способу турбидостата при оптимальной для роста температуре. A known method of cultivating microorganisms (ec. Patent GDR N 270320, class C 12 N 1/00, 1989), in biotechnological processes of transformation of substances that are carried out using growing cells. Microorganisms are cultured by the turbidostat method at an optimum temperature for growth.
Известна питательная среда (эк. патент ГДР N 257644, кл. С 12 N 1/00, 1988), которую применяют, в частности в медицине и ветеринарии, фармацевтической промышленности и пищевой промышленности, для выращивания бактерий типа Campylo, Bordetella и Legionella. При добавлении гуминовой кислоты получают ПС, которая является достаточной без добавок (таких как кровь и/или активированный уголь), связывает или нейтрализует все токсины, прозрачна и дает возможность поставить точный диагноз. A nutrient medium is known (ec. Patent GDR N 257644, class C 12 N 1/00, 1988), which is used, in particular, in medicine and veterinary medicine, the pharmaceutical industry and the food industry, for the cultivation of bacteria such as Campylo, Bordetella and Legionella. When humic acid is added, PS is obtained that is sufficient without additives (such as blood and / or activated charcoal), binds or neutralizes all toxins, is transparent and makes it possible to make an accurate diagnosis.
Известна твердая ПС (заявка Японии N 62-186784, кл. С 12 N 1/00, 1987) содержащая воду для выращивания растительных и животных клеток или микроорганизмов, которая в качестве коллоидообразователя содержит ксантан и смолу рожкового дерева в соотношении 1:1. Known solid PS (Japanese application N 62-186784, class C 12 N 1/00, 1987) containing water for growing plant and animal cells or microorganisms, which as a colloid former contains xanthan gum and locust bean gum in a 1: 1 ratio.
Известен способ получения in vitro инфекционных бактериальных спор (международная заявка (РСТ) N 87/05928, кл. С 12 N 3/00, 1987) в жидких средах, содержащих крахмал, трегалозу, дрожжевые экстракты дикалийфосфат, карбонат кальция и ионообменную смолу. A known method for producing in vitro infectious bacterial spores (international application (PCT) N 87/05928, class C 12
Известна недорогая ПС (заявка Японии N 62-166883 кл. С 12 N 5/00, 1987), для культивирования животных клеток. Основой среды являются питательные вещества, например, сахариды, сыворотка крови (например, теленка). Known inexpensive PS (Japanese application N 62-166883 C. With 12
Известен способ культивирования клеток (международная заявка (РСТ) N 88/08448, кл. С 12 N 5/00, 1988) предусматривающий рост клеток в присутствии водной среды на поверхности слоя синтетического полимерного геля. Указанным способом культивируют, например, фибробласты и/или эпителиальные клетки. Среда содержит факторы роста, например фактор роста фибробластов. Продукт применяют в качестве повязок на раны, в частности в качестве заменителя кожи, например, при лечении ожогов. A known method of culturing cells (international application (PCT) N 88/08448, class C 12
Известен способ культивирования растительной ткани (заявка ЕР N 0282164, кл. С 12 N 5/00, 1988) в жидкой среде, в которую периодически подают фитогормон. A known method of cultivating plant tissue (application EP N 0282164, CL 12
Недостатками рассмотренных питательных сред являются либо относительная дороговизна используемых добавок, либо недостаточная эффективность воздействия таких добавок на ростовую активность. The disadvantages of the considered nutrient media are either the relative high cost of the additives used, or the insufficient effectiveness of the effects of such additives on growth activity.
Целью изобретения является повышение эффективности ПС путем стимулирующего действия на пролиферативную активность клеток и выживаемость клеточной культуры. The aim of the invention is to increase the efficiency of PS by stimulating the proliferative activity of cells and the survival of cell culture.
Для этого в известную ПС, содержащую питательную основу, введены новые компоненты, а именно: в качестве стимулятора роста использован экстракт растительный конденсированный (Эраконд). To do this, new components have been introduced into the well-known PS containing a nutrient base, namely: condensed plant extract (Herakond) was used as a growth stimulator.
Существенность отличий предлагаемого изобретения заключается в следующем:
предлагаемое техническое решение соответствует критерию изобретения "новизна", так как содержит новую совокупность существенных признаков.The significance of the differences of the invention is as follows:
the proposed technical solution meets the criteria of the invention of "novelty", as it contains a new set of essential features.
Дополнительный (сверхсуммарный) эффект заключается в обеспечении нового положительного эффекта повышении эффективности ПС. An additional (super-total) effect is to provide a new positive effect to increase the efficiency of PS.
ПС изготавливается следующим образом. PS is made as follows.
Смоловидная форма Эраконда с активностью 46 ед. растворяется в бидистиллированной воде в течение 1 сут при 20-22оС для получения 5%-ного раствора, разливается в емкости (например, флаконы) и центрифугируется в течение 15 мин при 3000 об/мин. Надосадочная жидкость пропускается через фильтрующие (0,45 мк) и стерилизующие (0,22 мк) фильтры (например, фильтры фирмы "Миллипор") и ампулируется.The resinous form of Heraconda with an activity of 46 units. dissolved in double distilled water for 1 day at 20-22 ° C for 5% solution, is filled into containers (e.g. vials) and centrifuged for 15 min at 3000 rev / min. The supernatant is passed through filtering (0.45 microns) and sterilizing (0.22 microns) filters (for example, Millipor filters) and is amplified.
В качестве объекта исследования используется культура перевиваемых клеток Л-41, в среду культивирования которой (среда 199) вносится стерильный раствор Эраконда до получения конечной концентрации 0,01-0,25% (для определения влияния на ростовую линию Л-41) и до получения конечной концентрации 0,01-0,1% (для изучения пролиферативной активности клеток перевиваемой линии Л-41). Клетки Л-41, обработанные Эракондом, выращиваются с добавлением 5% НБС. Стандартная методика выращивания клеток Л-41 предполагает использование НБС в конечной концентрации 10%
Определено (см. чертеж), что через 24 ч инкубации в среде роста с 0,05% -ным содержанием Эраконда монослой клеток был полностью сформирован. Клетки имели крупные размеры, отчетливо выраженную архитектонику, светлую цитоплазму. Монослой был ровным. На вторые сутки роста клетки линий Л-410,1, Л-410,25, Л-410,05, Л-410,01 образовывали ровный плотный монослой из молодых прозрачных клеток. Отмечено большое количество делящихся клеток. Нарастание пролиферативной активности наблюдалось на 3 и 4 сут инкубирования. В культуре линии Л-410,25 наблюдалось небольшое отслоение клеток от стекла. На 7 сут отмечено появление дегенерировавших клеток в монослое всех культур, обработанных Эракондом, кроме клеток линии Л-410,01, где клетки сохраняли сплошной монослой, границы клеток были отчетливы, цитоплазма прозрачной, наблюдались клетки в состоянии деления. Такой монослой культура линии Л-410,01 сохраняла 10 сут. Инкубация клеток в термостате при 37оС была возможна до 22 сут, после чего клетки были пересажены в отношении 1:2.As an object of study, a culture of transplantable L-41 cells is used, in the cultivation medium of which (medium 199) sterile Erakonda solution is introduced until a final concentration of 0.01-0.25% is obtained (to determine the effect on the L-41 growth line) and until final concentration of 0.01-0.1% (to study the proliferative activity of cells of the transplanted line L-41). L-41 cells treated with Herakond are grown with 5% NBS. The standard method for growing L-41 cells involves the use of NBS in a final concentration of 10%
It was determined (see the drawing) that after 24 hours of incubation in a growth medium with 0.05% Heraconda content, the cell monolayer was completely formed. The cells were large in size, clearly expressed architectonics, light cytoplasm. The monolayer was even. On the second day of growth, cells of lines L-41 0.1 , L-41 0.25 , L-41 0.05 , L-41 0.01 formed an even dense monolayer of young transparent cells. A large number of dividing cells was noted. An increase in proliferative activity was observed on the 3rd and 4th day of incubation. In the culture of the L-41 0.25 line , a slight detachment of cells from glass was observed. On the 7th day, the appearance of degenerated cells in the monolayer of all cultures treated with Herakond was noted, except for cells of the L-41 0.01 line , where the cells maintained a continuous monolayer, the cell boundaries were distinct, the cytoplasm was transparent, and cells were observed in the state of division. Such a monolayer culture of the L-41 0.01 line retained 10 days. Incubation of cells in an incubator at 37 ° C was possible up to 22 days, after which the cells were transplanted in a 1: 2.
Таким образом, определено, что клеточная культура линий Л-41, обработанная 0,01-0,1% -ным раствором Эраконда, в отличие от контрольной линии (без Эраконда) формировала ровный монослой, не содержащий трехмерных структур. Клетки имели выраженную цитоархитектонику, прозрачную цитоплазму, отсутствие зернистости в ядре и цитоплазме. Отмечено удлинение продолжительности жизни клеток в пределах одного пассажа. Thus, it was determined that the cell culture of the L-41 lines treated with a 0.01-0.1% solution of Heraconda, in contrast to the control line (without Heraconda), formed an even monolayer that did not contain three-dimensional structures. The cells had pronounced cytoarchitectonics, transparent cytoplasm, and lack of granularity in the nucleus and cytoplasm. Marked lengthening of the lifespan of cells within one passage.
При изучении пролиферативной активности клеток перевиваемой линии Л441 с 0,01-0,1% -ным содержанием Эраконда наблюдалось увеличение роста клеток. Кратность прироста изучалась в динамике посуточно. Максимальный индекс пролиферации клеток достигал на 4-5 сут 4,0 в сравнении с контролем (un=2,5). Наибольшая пролиферативная активность клеток наблюдалась в среде роста с 0,1% -ным содержанием Эраконда. На 6-7 сут как в контроле, так и в опыте происходило снижение пролиферативной активности, однако в ПС с Эракондом снижение было значительно меньшим, чем в контроле. When studying the proliferative activity of cells of the transplanted line L441 with 0.01-0.1% Erakond content, an increase in cell growth was observed. The multiplicity of growth was studied in dynamics by the day. The maximum cell proliferation index reached 4.0 on day 4-5 in comparison with the control (un = 2.5). The highest proliferative activity of cells was observed in a growth medium with 0.1% Herakonda content. At 6-7 days, both in the control and in the experiment, a decrease in proliferative activity occurred, however, in PS with Heracond the decrease was much smaller than in the control.
Влияние различных концентраций Эраконда на пролиферативную активность было изучено на моделях клеток фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ) и легкого эмбриона человека (ЛЭЧ). The effect of various concentrations of Herakond on proliferative activity was studied on models of human embryo fibroblast cells (PEF) and human lung embryo (LEC).
Контрольную культуру клеток выращивали во флаконах на 250 мл в среде Игла с добавлением 10% нативной бычьей сыворотки. The control cell culture was grown in 250 ml vials in Eagle's medium supplemented with 10% native bovine serum.
В опытных культурах ФЭЧ и ЛЭЧ было установлено, что при посевной концентрации клеток 200-250 тыс/мл и содержании Эраконда 0,01, 0,5 и 0,1% в присутствии 3% нативной бычьей сыворотки (контроль 10%) адгезивная активность этих клеток увеличивалась на 20% по сравнению с контролем. Клетки прикреплялись к стеклу, распластывались в течение нескольких часов таким образом, что через 24 ч плотность опытной культуры была выше контрольной, а через 48 ч формировался сплошной монослой. Увеличивалась пролиферативная активность клеток на 2 сут роста в 2 раза при содержании 0,01 и 0,05% Эраконда и в 1,5 раза при 0,5% содержании Эраконда. In experimental cultures of PEF and LEC it was found that when the inoculum concentration of cells is 200-250 thousand / ml and the content of Herakond is 0.01, 0.5 and 0.1% in the presence of 3% of native bovine serum (10% control), the adhesive activity of these cells increased by 20% compared to control. Cells were attached to the glass, spread over several hours in such a way that after 24 hours the density of the experimental culture was higher than the control, and after 48 hours a continuous monolayer was formed. The proliferative activity of cells increased by 2 times at 2 days of growth at a content of 0.01 and 0.05% Herakonda and 1.5 times at 0.5% Herakonda.
Без смены ПС при комнатной температуре клетки ФЭЧ и ЛЭЧ, выращенные с 0,01 и 0,05%-ным содержанием Эраконда, сохраняли монослой в течение 24 сут, а с 0,1%-ным содержанием Эраконда до 21 сут. Without changing the PS at room temperature, the cells of the PEC and LEC grown with 0.01 and 0.05% Eraconds kept the monolayer for 24 days, and with 0.1% Eraconds up to 21 days.
Экстракт растительный конденсированный (Эраконд) представляет собой препарат, полученный из люцерны (сена люцерны) при обработке экстрагентом, содержащим в своем составе растворимые соли металлов в мг на 1 кг растительной массы, например, в следующем соотношении: Мо 8,0, Ва 10,0, Рb 20,0; Со 1,05; V 1,0; Cz 0,5; Zn 200,0, Fe 300,0; Sn 40. Condensed plant extract (Herakond) is a preparation obtained from alfalfa (alfalfa hay) when treated with an extractant containing soluble metal salts in mg per 1 kg of plant mass, for example, in the following ratio: Mo 8.0,
Таким образом, изучение влияния различных концентраций Эраконда на перевиваемых клетках СПЭВ показало, что при концентрации 0,01; 0,05 и 0,1% клетки сохраняли монослой без смены ПС при 37оС в течение 28 сут (контроль 20 сут). При этом клетки имели четкие границы и светлую цитоплазму.Thus, a study of the effect of various concentrations of Herakond on transplanted SPEV cells showed that at a concentration of 0.01; 0.05 and 0.1% cell monolayer remained without change of PS at 37 ° C for 28 days (control 20 days). In this case, the cells had clear boundaries and a light cytoplasm.
Claims (1)
Нативная бычья сыворотка 3 5
Среда роста 199 ОстальноеCondensed Alfalfa Extract 0.01 0.05
Native bovine serum 3 5
Growth medium 199 Else
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5013324 RU2036233C1 (en) | 1991-11-27 | 1991-11-27 | Nutrient medium for primary and transplantable cells growing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5013324 RU2036233C1 (en) | 1991-11-27 | 1991-11-27 | Nutrient medium for primary and transplantable cells growing |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2036233C1 true RU2036233C1 (en) | 1995-05-27 |
Family
ID=21589916
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5013324 RU2036233C1 (en) | 1991-11-27 | 1991-11-27 | Nutrient medium for primary and transplantable cells growing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2036233C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2612355C2 (en) * | 2005-05-31 | 2017-03-07 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Nutrient medium for suspension culturing of mammal cells |
| RU2673718C1 (en) * | 2018-01-22 | 2018-11-29 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Nutrient medium for cultivation of transplanted mammalian cell lines |
-
1991
- 1991-11-27 RU SU5013324 patent/RU2036233C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1063830, кл. C 12N 5/00, 1982. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2612355C2 (en) * | 2005-05-31 | 2017-03-07 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Nutrient medium for suspension culturing of mammal cells |
| RU2673718C1 (en) * | 2018-01-22 | 2018-11-29 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Nutrient medium for cultivation of transplanted mammalian cell lines |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101491229B (en) | Vitro culturing method of pearl shell mantle tissue and culture medium | |
| CN101491228A (en) | Sea no-nucleus pearl incubation method | |
| CN106190853B (en) | A kind of red algae cultural method of high yield phycocyanin | |
| CN104073463A (en) | Serum-free protein-free culture medium supporting CHO (Chinese Hamster Ovary Cell) high density suspension culture | |
| RU2433170C1 (en) | Nutrient liquid medium for culturing plague microbe of vaccine strain eb | |
| EP0049632B1 (en) | Cell culture method | |
| RU2036233C1 (en) | Nutrient medium for primary and transplantable cells growing | |
| CN109430251A (en) | A kind of store method of the preservation liquid of adipose tissue and preparation method thereof with adipose tissue | |
| RU2415923C1 (en) | Method for production of fermentative hydrolysate of fresh white cabbage and nutritive medium for cultivation lactobacteria based thereon | |
| CN104726400B (en) | Non-animal derived component cultural method of the human pluripotent stem cells to germline | |
| CN111040971A (en) | Enrichment culture medium for swine plague vaccine | |
| JPS62500001A (en) | cell proliferation | |
| RU2518282C1 (en) | Nutrient medium for submerged cultivation of tularemia microbe | |
| RU2506309C2 (en) | Method of culturing myoblasts in vitro for producing myoblast biomass for nutrition purposes | |
| Evans et al. | The Nutrition of C. diphtheriæ. Pantothenic Acid as an Essential Growth Factor for Certain Strains of C. diphtheriæ gravis: the Synthesis of some Physiologically Active Compounds by C. diphtheriæ Cultures in Synthetic Media | |
| Kim | Outdoor mass culture of Spirulina platensis in Vietnam | |
| JPS6225974A (en) | Gelatinous composition consisting of collagen | |
| CN105695385B (en) | Recombinant human insulin genetically engineered bacterium high expression strain selection culture medium and preparation method | |
| RU2201958C2 (en) | Dry sterile low-serum nutrient medium for mammalian cells culturing | |
| RU2333948C2 (en) | Nutritional medium for growing causative agent of tularemia | |
| RU2301256C1 (en) | Liquid nutrient medium for culturing cholera vibrio | |
| RU2644248C2 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and growing of tularemic microbe | |
| RU2202608C2 (en) | Method of leptospira culturing | |
| RU2074249C1 (en) | Method of preparing enzyme hydrolyzate from the web-footed muscle tissue and nutrient medium "celat" for eucaryotic cell cultivation | |
| RU2104014C1 (en) | Composition of nutrient medium for bifidobacterium culturing |