RU2011140006A

RU2011140006A - Способ детекции вещества в биологическом образце

Info

Publication number: RU2011140006A
Application number: RU2011140006/15A
Authority: RU
Inventors: Йосимицу ТАКАКУРА; Наоми ОКА; Кадзухиро КОНДО
Original assignee: Джапан Тобакко Инк.
Priority date: 2009-03-02
Filing date: 2010-03-02
Publication date: 2013-04-10
Also published as: SG174217A1; JPWO2010101157A1; EP2405268A4; KR20120001741A; CA2753873A1; WO2010101157A1; BRPI1005173A2; EP2405268A1; US20120064543A1; IL214895A0; AU2010219698A1; CN102439447A; JP5647599B2

Abstract

1. Способ детекции вещества в биологическом образце, который предусматривает:1) наличие носителя, к которому присоединен биотин, и слитого белка, содержащего белок, специфически связывающийся с обнаруживаемым веществом, и биотин-связывающий белок;2) присоединение слитого белка к носителю стадии 1), посредством связывания биотина с биотин-связывающим белком с получением носителя, содержащего слитый белок;3) смешивание(а) биологического образца(b-i) с экстрактом клеточного гомогената, полученным из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии 1), и биотин-связывающим белком, или(b-ii) с экстрактом клеточного гомогената, полученным из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии 1) и измененные методами генной инженерии для экспрессии биотин-связывающего белка,и добавление смеси к носителю, содержащему слитый белок, полученный на стадии 2); и4) обнаружение вещества, связанного с белком, специфически связывающимся с обнаруживаемым веществом и входящим в состав слитого белка.2. Способ детекции вещества в биологическом образце, который предусматривает:1) наличие носителя, к которому присоединен биотин, и слитого белка, содержащего белок, специфически связывающийся с обнаруживаемым веществом, и биотин-связывающий белок;2) присоединение слитого белка к носителю стадии 1), посредством связывания биотина и биотин-связывающего белка с получением носителя, содержащего слитый белок;3) приведение в контакт биотин-связывающего белка и полученного на стадии 2) носителя, содержащего слитый белок, для блокирования носителя;4) после блоки�

Claims

1. Способ детекции вещества в биологическом образце, который предусматривает:

1) наличие носителя, к которому присоединен биотин, и слитого белка, содержащего белок, специфически связывающийся с обнаруживаемым веществом, и биотин-связывающий белок;

2) присоединение слитого белка к носителю стадии 1), посредством связывания биотина с биотин-связывающим белком с получением носителя, содержащего слитый белок;

3) смешивание

(а) биологического образца

(b-i) с экстрактом клеточного гомогената, полученным из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии 1), и биотин-связывающим белком, или

(b-ii) с экстрактом клеточного гомогената, полученным из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии 1) и измененные методами генной инженерии для экспрессии биотин-связывающего белка,

и добавление смеси к носителю, содержащему слитый белок, полученный на стадии 2); и

4) обнаружение вещества, связанного с белком, специфически связывающимся с обнаруживаемым веществом и входящим в состав слитого белка.

2. Способ детекции вещества в биологическом образце, который предусматривает:

2) присоединение слитого белка к носителю стадии 1), посредством связывания биотина и биотин-связывающего белка с получением носителя, содержащего слитый белок;

3) приведение в контакт биотин-связывающего белка и полученного на стадии 2) носителя, содержащего слитый белок, для блокирования носителя;

4) после блокирования на стадии 3) добавление биологического образца к носителю, содержащему слитый белок; и

5) обнаружение вещества, связанного с белком, специфически связывающимся с обнаруживаемым веществом и входящим в состав слитого белка.

3. Способ детекции вещества в биологическом образце, который предусматривает:

4) после блокирования на стадии 3) смешивание

(а) биологического образца

(b-ii) с экстрактом клеточного гомогената, полученным из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии 1) и измененные методами генной инженерии для экспрессии биотин-связывающего белка, добавление смеси к носителю, содержащему слитый белок; и

4. Способ по п.1 или 3, где стадия 3(b-i) по п.1 или стадия 4 (b-i) по п.3 предусматривает добавление экстракта клеточного гомогената, экстрагированного из клеток, содержащих любой вектор, в качестве экстракта клеточного гомогената.

5. Способ по любому из пп.1-3, где биотин-связывающий белок представляет собой тамавидин или его вариант.

6. Способ по п.1 или 3, где стадия 3(b-i) по п.1 или стадия 4 (b-i) по п.3 предусматривает добавление экстракта клеточного гомогената, экстрагированного из клеток, содержащих любой вектор, в качестве экстракта клеточного гомогената, и где биотин-связывающий белок представляет собой тамавидин или его вариант.

7. Способ по любому из пп.1-3, где биологический образец выбран из группы, состоящей из крови, сыворотки, спинномозговой жидкости, слюны, пота, мочи, слезы, лимфы и материнского молока.

8. Способ по п.1 или 3, где стадия 3(b-i) по п.1 или стадия 4(b-i) по п.3 предусматривает добавление экстракта клеточного гомогената, экстрагированного из клеток, содержащих любой вектор, в качестве экстракта клеточного гомогената, и где биологический образец выбран из группы, состоящей из крови, сыворотки, спинномозговой жидкости, слюны, пота, мочи, слез, лимфы и материнского молока.

9. Способ по п.1 или 3, где стадия 3(b-i) по п.1 или стадия 4(b-i) по п.3 предусматривает добавление экстракта клеточного гомогената, экстрагированного из клеток, содержащих любой вектор, в качестве экстракта клеточного гомогената, и где биотин-связывающий белок представляет собой тамавидин или его вариант, и где биологический образец выбран из группы, состоящей из крови, сыворотки, спинномозговой жидкости, слюны, пота, мочи, слез, лимфы и материнского молока.

10. Носитель для детекции вещества в биологическом образце, где

слитый белок, содержащий белок, специфически связывающийся с обнаруживаемым веществом, и биотин-связывающий белок присоединяют к носителю путем взаимодействия биотина и биотин-связывающего белка, где

слитый белок присоединяют к носителю способом, предусматривающим:

2) присоединение слитого белка к носителю стадии 1), посредством связывания биотина с биотин-связывающим белком с получением носителя, содержащего слитый белок; и

3) приведение в контакт биотин-связывающего белка и полученного на стадии 2) носителя, содержащего слитый белок, для блокирования носителя.

11. Набор для детекции вещества в биологическом образце, который содержит:

А) носитель, к которому присоединен слитый белок, содержащий белок, специфически связывающийся с обнаруживаемым веществом, и биотин-связывающий белок, путем взаимодействия биотина и биотин-связывающего белка; и

средство для разведения биологического образца, содержащее

B-i) экстракт клеточного гомогената, полученного из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии А), и биотин-связывающий белок, или

B-ii) экстракт клеточного гомогената, полученного из клеток того же вида, что и клетки-хозяева, используемые для экспрессии слитого белка на стадии А) и измененные методами генной инженерии для экспрессии биотин-связывающего белка; и/или

С) блокирующее средство, содержащее биотин-связывающий белок.