RU1779256C - Способ получени нуклеозидов или их фармацевтически приемлемых сложных эфиров - Google Patents
Способ получени нуклеозидов или их фармацевтически приемлемых сложных эфировInfo
- Publication number
- RU1779256C RU1779256C SU884355537A SU4355537A RU1779256C RU 1779256 C RU1779256 C RU 1779256C SU 884355537 A SU884355537 A SU 884355537A SU 4355537 A SU4355537 A SU 4355537A RU 1779256 C RU1779256 C RU 1779256C
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mmol
- product
- dideoxyribofuranoside
- methanol
- mixture
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к химии природных соединений, в частности к получению нуклеозидов ф-лы У IN 1 Ян где Ri-H или амино; Р2-С2-Се-алкокси - или метокси замещенный Сз-Се-циклоалкилом Сз-Св-циклоалкокси, лирролидинил, или аминогруппа, замещенна С2-Се-алкилом, Сз Сб-Циклоалкилом, или дизамещенна и Сз-Сб-циклоалкил - С2-Се-алкилом или ди- Ci-Ce-алкилом, или их фармацевтически приемлемых сложных эфиров. Цель - разработка способа получени более активных соединений. Получение ведут рекцией пуринового основани ф-лы ВН, где В - соответствующий остаток пурина с 3-деок- ситимидином в апротонном пол рном растворителе в фосфатном буфере в присутствии смеси ферментов переноса пентозила с последующим в случае необходимости переводом полученного соединени в его фармацевтически приемлемый сложный эфир, обработкой соответствующим галоидангидридом, 1 табл. СО С
Description
Изобретение относитс к 6-замещен- ным 21, 3 -дидеоксинуклеозидам, их фармацевтическим производным, пригодным дл лечени и профилактики некоторых вирусных инфекций.
СПИД относитс к иммуносупрессивно- му или иммунодеструктивному заболеванию , которое предрасполагает лиц к инфекци м с возможным смертельным исходом . В сущности, СПИД св зан с прогрессирующим истощением Т-клеток, особенно субсистемы помощник-индуктор, несущей поверхностный маркер -OKI4.
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) репродуцивно выделен от больных СПИД или больных с симптомами, которые часто
предшествуют СПИД. ВИЧ цитопатичен, и по-видимому, преимущественно -инфицирует и разрушает Т-клетки. несущие ОКТ - маркер, причем теперь общепризнано, что ВИЧ вл етс этилогическим фактором СПИДа.
С момента открыти того, что иммуноде- фицитный вирус вл етс этиологическим агентом СПИД, сделано множество предложений по созданию химиотерапевтических средств против вируса иммунодефицита человека , которые могут быть эффективны при лечении больных СПИД. Так, например, в описании на Европатент № 196185, раскрываетс З1 азидо-З -деокситими- дин/апробированный над названием
х| х| о ю ел о
W
зидовудин/, его фармацевтически приемлемые производные и использование их при лечении ретровирусных инфекций у человека , в том числе СПИД, и ассициированные клинические состо ни .
Опубликовани за вка на Европатент № 0206497 относитс в основном к пурино- вым нуклеозидам, примен емым при лечении вирусных инфекций, вызывающих иммунодефицит у человека и аналогичные состо ни . В частности, в указанной за вке описан 2.6-диаминпурин-9-/Ј-0-2 , з -диде- оксирибофураноэид, предназначенный дл лечени вирусных инфекций, привод щих к иммунодефициту человека.
В ходе данной работы, найдено, что некоторые 6-замещенные 21, 3 -дидеоксинук- леозиды, упоминаемые ниже, пригодны дл лечени или профилактики вирусных инфекций , в частности раствор ретровирусных инфекций и особенно СПИД.
Ранее были описаны некоторые 6-замещенные пуриновые нуклеозиды, и в частности , в журнале Bioorg. Chem. 9/1/ стр. 52 - 59,1983 г., описан 6-метиламинопурин-9-/3-0 21-, з -дидеоксирибофуранозид, примен емый далее в данном описании дл лечени вирусных инфекций, вызывающих иммунодефицит человека и аналогичные состо ни .
Цель изобретени - изыскание способа получени новых соединений, описываемых указанной ниже структурной формулой, обладающих более высокими лечебными свойствами при лечении и профилактике вирусных инфекций.
Согласно изобретению предлагаетс способ получени нуклеозидов формулы
/i/.R2
Хх
1 N N
H0n(°j
где Ri - водород или амино: Rz Са - Се-ал- кокси- или метокси замещенный Сз Се- циклоалкилом, Сз - Св-циклоалкокси, пирролидинил, или аминогруппа, замещенна С2 - Се-алкилом, Сз-Сб-циклоалкилом, или ди-замещенна Сз - Се-цикло- алкил-С2 - Се-алкилом или ди-Ci - Се-алкилом, или их фармацеватически приемлемых сложных эфиров.
Согласно изобретению нуклеозиды формулы I получают путем взаимодействи пуринового основани формулы (II) ВН, где В - соответствующий, остаток пурина, с 3- деокситимидином в апротонном пол рном растворителе в фосфатном буфере в присуствии смеси ферментов переноса пентози- ла, такой как смесь тимидинфосфорилазы и пуринуклеозидфосфорилазы с последующим в случае необходимости переводом
полученного соединени формулы (I) в его фармацевтически приемлемый сложный эфир обработкой соответствующим галои- дангиридом.
К примерам ретровирусных инфекций,
0 которые можно лечить или предупреждать способом в соответствии с насто щим изобретением , относ тс такие как вирус, вызывающий иммунодефицит человека (ВИЧ), ВИЧ-2 и лимфотропный вирус Т-клеток у
5 человека (HLTV), например, инфекции HTLV-I или HTLV-IV. Предлагаемые соединени особенно пригодны дл лечени или профилактики СПИД и родственных клинических состо ний, например как СПИД 0 св занного комплекса (АРС), прогрессируе- ма обща лимфаденопати (PGL), СПИД - св занных неврологических состо ний, таких как рассе нныйчжлероз или тропические парапарезы, анти-ВИЧ-антитело положи5 тельные и ВИЧ-положительные состо ни , саркома Капоши и системна волчанка. Предлагаемые соединени можно также использовать дл лечени и профилактики псориаза. Предлагаемые соединени , указывае0 мые в данном описании также как активное вещество, можно принимать при лечении любым подход щим способом, включа оральный, ректальный, назальный местный (в т.ч, в ротовой полости и под зыком), ва5 гинальный и парентеральный (в т.ч. подкожное , внутримышечное, внутривенное и внутрикожное введение).
Требума доза обычно будет колебатьс в интвервале от 3,0 до 120 мг на кг массы
0 тела больного в сутки, предпочтительно от 6 до 90, а в наиболее предпочтительном варианте от 15 до 60 мг на кг массы тела в сутки. Требуемую дозу предпочтительно распредел ть на две. три, четыре, п ть,
5 шесть или более дробных доз, принимаемых в течение суток через соответствующие интервалы . Указанные дробные дозы можно принимать в единичных дозированных формах , например, содержащих 10 - 1500 мг,
0 предпочтительно 20 - 1000 мг и в наиболее предпочтительном варианте 50 - 700 мг активного вещества на одноразовую дозу.
В идеальном варианте, активное вещество следует вводить дл достижени в кро5 ви максимальных концентраций активного соединени примерно от 1 до 75 мкМ и предпочтительно примерно от 2 до 50 мкМ, а в наиболее предпочтительном варианте примерно от 3 до 30 мкМ. Такие концентрации можно получить, например, путем введени внутривенно 0,1 -5% раствора активного вещества, не об зательно растворенного в физиологическом растворе, или при оральном приеме в виде пилюли, содержащей примерно от 1 до 100 мг/кг активного ингредиента. Требуемую концентрацию в крови можно поддерживать непрерывным вливанием дл подачи примерно 0,01 до 5,0 мг/кг/ч или периодическими вливани ми, содержащими примерно от 0,4 до 15 мг/кг активного вещества.
Хот можно активное вещество вводить в чистом виде, предпочтительно его назначать в виде фармацевтического состава.
Рецептуры изобретени содержат хот бы один активный ингредиент, как указано выше, в комбинации с одним или несколькими его приемлемыми носител ми и в необ зательном варианте другие лекарственные средства, Каждый носитель должен быть приемлемым в смысле совместимости с другими компонентами лекарственного состава и безвредности его больному. В рецептуры вход т носители, пригодные дл орального, ректального, назального, местного (в т.ч. i ротового и подъ зычного), вагинального или парентерального (в т.ч. подкожного, внутривенного , внутримышечного и внутрикожного) введени . Дл удобства лекарственные составы можно представл ть в единичной дозированной форме и приготавливать любыми известными в фармации методами. Такие методы включают операцию св зывани активного вещества с носителем, кото- рый составл ет один или несколько вспомогательных ингредиентов. Обычно лекарственные составы приготавливают посредством равномерного и тщательного соединени активного вещества с жидкими носител ми или тонкоизмельченными твердыми носител ми, или с обоими, а затем при необходимости формовани целевого продукта .
Лекарственные составы предлагаемого изобретени , предназначенные дл орального введени , можно приготавливать в виде дискретных единиц, например, как капсулы, пилюли или таблетки, кажда из, которых содержит дозированное количество активного вещества, в виде порошка или гранул, в виде раствора или суспензии в водном или безводном жидком веществе или в виде жидкой эмульсии типа масло-вода или вода-масло. Активный ингредиент может быть также представлен в виде шарика , или пасты.
Таблетки можно получать путем уплотнени или прессовани , по желанию с одним или несколькими вспомогательными
компонентами Спрессованные таблетки можно получать путем уплотнени в соответствующей машине активного вещества в свободнотекущем виде, например как поро- 5 шок или гранулы, при желании смешанного со св зующим (например, повидоном, желатином , оксипропилметилцеллюлозой), за- масливателем, инертным разбавителем, консервантом, дезинтегрантом (например,
0 . натрийгликол гом крахмала, сшитым повидоном , сшитой нзтрийкарбоксиметилцел- люлозой), поверхностно-активным или диспергирующим веществом. , Сформованные таблетки можно получить путем
5 формовани в соответствующей машине смеси из порошкообразного соединени , увлажненного инертным жидким разбавителем . По желанию на таблетки можно нанести покрытие или надрез и их можно
0 составл ть так, чтобы обеспечить медленное или регулируемое высвобождение активного вещества, содержащегос в таблетке, использу , например, оксипро- пилметилцеллюлозу в различных соотноше5 ни х дл получени требуемого профил высвобождени . По желанию, таблетки можно выполнить с энтеральной оболочкой дл выделени частично из кишечника помимо желудка. Указанное особенно имеет
0 преимущество дл производных пуриновых нуклеозидов, поскольку такие соединени подвержены кислотному разложению.
Лекарственные препараты, пригодные дл местного применени в ротовой поло5 сти, включают лепешки с активным веществом в ароматизированной основе, обычно сахаре и акации или астрагале, пастилки с активным веществом в инертном носителе, например как желатин и глицерин, или саха0 ре и акации, и растворы дл полоскани ротовой полости, содержащие активное вещество в соответствующем жидком носителе .
Лекарственные составы дл ректально5 го приема могут быть представлены в виде свечей с соответствующей основой, содержащей , например, масло какао или салици- лат.
Прописи, пригодные дл вагинального
0 применени , могут быть представлены в виде писсариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пены или спрэйев, содержащих дополнительно к активному веществу такие носители , которые известны в данной области
5 дл этих целей.
В рецептуры, предназначенные дл парентерального введени , вход т водные и безводные изотонические стерильные растворы , которые могут содержать противо- окислители, буферы, бактериостаты и
растворенные вещества, которые перевод т состав в изотоничный с кровью предполагаемого больного, и водные и безводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие вещества и загустители . Указанные лекарственные препараты могут быть представлены в герметичных емкост х с одноразовой или многоразовой дозой, например, ампулах или флаконах, причем их можно хранить в суб- лимированно-высушенном (лиофилизован- ном) состо нии, необходимо только непосредственно перед употреблением добавление стерильного жидкого носител , например, воды дл инъекций. Моментально приготавливаемые инъекционные растворы и суспензии можно получать из стерильных порошков, гранул и таблеток типа , описываемого выше в данном описании. Предпочтительными препаратами, используемыми в единичной дозировке, вл ютс такие, которые содержат, как ранее указывалось в данном описании, суточную дозу или единицу, суточную дробную дозу или ее соответствующую долю активного вещества .
Предлагаемые соединени можно также представл ть дл использовани в форме ветеринарных препаратов, которые можно получать, например, традиционными в данной области способами.
Следует иметь в виду, что при добавлении к ингредиентам, особенно указываемым выше, предлагаемые препараты могут включать другие вещества, общеприн тые в данной области, имеющие отношение к типу рассматриваемого лекарственного препарата. Например, вещества, пригод- ные дл орального введени , могут включать такие вспомогательные агенты, как подслащивающие добавки, загустители и ароматизированные вещества.
П р и м е р 1. 6-1М-пиперидинопурин-9- /2-D-2 ,3 -дидеоксирибофуранозид.
6-М-пиперидинпурин. (2,41 ммоль, 0,5 г Sigma Chemicals St Louis МО)раствор ют в 10 мл диметилсульфоксида при нагревании .
После охлаждени до комнатной темпе- ратуры прибавл ют з -деокситимидина (3,62 ммоль, 0,82 г) вместе с 30 мл 10 м М калийфосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% азида кали .
Прибавл ют очищенную тимидинфос- фатную (10,000 м.ед) и пуриннуклеозидфос- форилазу (20,000 м.ед), абсорбированные в 10 мл DEAE-целлюлозе, и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 8 часов реакционную смесь фильтруют и фильтрат нанос т на систему из сопр женных колонок. Перва колонка заполнена гидроксидной смолой AGI-X2 (2,5 х 10 см), а втора - смолой из Амберлита XAD -2 (2,5 - 20 см). После нанесени образца колонку
промывают большим объемом воды, и полученный продукт элюируют метанолом. После удалени растворител и повторного растворени в смеси хлороформ-метанол (9: : 1 по объему), дополнительно хроматографируют на колонке с силикагелем (5 х 20).
Подвижную фазу представл ют смесь
хлороформ: метанол (9 : 1 по объему).
Продуктсодержащие фракции соедин ют,
повторно раствор ют в этаноле и фильтруют
через 0,22 мкм фильтр. Этанол упаривают, а продукт раствор ют вводе. После лиофили- зации 6-Ы-пиперидинопурин-9- -0-2 ,з -ди- деоксиробофуранозид (0,265 г) анализируют в виде 0,1 гидрата, содержащего 0,3 этанола .
Вычислено, %: С 58,74; Н 727; N 21,96
С15Н21№02
Найдено, %: С 58,86; Н 7,14; N 21,82
ЯМР д 8,36 /с.1Н, На/. 8,19 /С, 1Н,
Н2/ 6,23/дд, 1Н, Hi 5,01 /т, 1Н, J 5,54, ОН5/, 4,12 /м, ЗН, Н4 СН2/ 3,52 /м, 2Н. Н5/, 2,37 /м, 2Н/ Н2/2.04 /м, 2Н, Нз /, 1,61 / б, 2Н. СН2/.
П р и м е р 2. 6-хлоропурин-9-у#-0-2 ,
з -дидеоксирибофуранозид
Синтез 6-хлоропурин-9-/3-О-2|,3|-диде- оксирибофуранозида осуществл ют по методике примера 1, за исключением того, что 6-хлопурин (Sigma Chemicals, St Louis
М0)раствор ют в 5 мл каждого из диметил- формамида и диметоксиэтана.
После отфильтровывани твердого вещества фильтрат довод т до примерно 5 мл в вакууме с последующим растворением в
100 мл воды. Полученный продукт хроматог- рафируют на колонке со смолой XAD-2 (2,5 х х20 см). После лромывки колонки 500 мл воды, продукт элюируют метанолом. Про- дуктосодержание фракции объедин ют и
прибавл ют 20 мл сухого силикагел . Весь раствор удал ют в вакууме. Сухой силика- гель нанос т на верхнюю часть колонки с силикагелем, доведенную до равновесного состо ни смесью хлороформ; метанол (9 ;
;1 по объему), продуктсодержащие фракции , в которых нет диокситимидина, обьеди- н ют. После удалени растворител в вакууме осадок раствор ют в этаноле, филь- 1 труют с дальнейшим растворением в воде и
лиофилизуют. Полученный продукт дополнительно очищают хроматографией на колонке , содержащей полигосильную Cm смолу, в смеси из метанола и воды (8 ; 2 по объему). После удалени растворител в вакууме продукт раствор ют в воде и лиофилзуют с выходом 0,199 г б-хлоропурин-9-p-D- 2, З -дидеоксирибофуранозида (т.пл. 100°С)
Вычислено, %: С 47,16; Н 4,35; N 22,00; CI 13,92,
CioHnCIN402
Найдено, %: С 47,10; Н 4,35; N21,94;CI 13,86.
П р и м е р 3. 6-Этиламинопурин-9-/Й 21, з -дидеоксирибофуранозид .
(2,69 ммоль, 0,5 г) 6-этиламинопурина (приготовленного нуклеофильным замещением хлорной группы у 6-хлорпурина (Sigma Chemicals, St Louis МО) аминогруппой эти- ламина) и 3,33 ммоль, 0,755 г (3-детоксити- мидина) соедин ют вместе с 50 мл 10 мМ калиевофосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют очищенную тимидинфосфорилазу (400 м.ед.), и пуриннуклеозидфосфорилазу (700 м.ед) и полученную суспензию перемешивают при 37°С. Через 48 часов добавл ют еще 700 ед. пириннуклеозидфосфорилазы и 400 ед. тимидинфосфорилазы, и реакционную смесь перемешивают при 37°С. Через 5 дней реакционную смесь фильтруют и нанос т на колонку с гидроксидной смолой AG-I- Х2 (2,5 х 10 см). Полученный продукт элюируют водной промывкой и хроматогра- фируют на амберлитовой смоле XAD-2 (2,5 - 20 см). После нанесени образца колонку промывают большим объемом воды. Продукт элюируют метанолом. После удалени растворител продукт повторно раствори- ют в воде и ацетоне, затем лиофилизуют с выходом 0,299 г 6-этиламинопурин-9-/ -О- 2,3 -дидеоксирибофуранозида. который анализируют как 0,2 М воды и 0,1 оцетона.
(т.пл. ,45°С/0,5ДМФ/)
Вычислено, %: С 57,17; Н 6,64; N 25, 68
Ci2Hi7N502 0,2H20 0,1СзН60
Найдено, %: С 54,13; Н 6,69; N 25,75.
П р и м е р 4. 6-этилметиламинопурин-9- /3-D-21, З -дидеоксирибофуранозид .
Методика синтеза 6-этилметиламино- пурин-9-/ -0-2 ,3 , дидеоксирибофуранозида аналогична примеру 2. Реакционную смесь фильтруют, фильтрат нанос т на колонку с дауэкс 1-гидроксидом (2,5 - 10 см). Продукт элюируют 90% раствором метанола в воде (по объему) и хроматографируют на амберлитовой смоле XAD-2 (2,5 х 20 см) после удалени растворител до примерно 5 мл и повторного растворени в 100 мл воды. По- еле нанесени образца .колонку промывают большим объемом воды, полученный продукт элюируют 95% раствором этанол-вода (по объему). Продуктсодержащие фракции
объедин ют и 20 мл сухого силикагел при- бавл ют. Весь растворитель удал ют в вак- куме. Сухой силикагель нанос т на верхнюю часть колонки с силикагелем (4.8 х 20 см), доведенную до равновесного состо ни смесью хлороформ:метанол (98 ; 2, по объему ). Продуктсодержащие. фракции объедин ют и после упаривани растворител в вакууме раствор ют первоначально в этаноле и фильтруют. После удалени растворител и повторного растворени в воде раствор лиофилизуют с получением 0,3 6- этилметиламино-9-Д-0-2 , з -дидеоксирибо- фуранозилпурина, который анализируют как 0,05 гидрат (т.пл. 30°С).
Вычислено, %:С 56,12; Н 6,92; N 25,17.
Ci3HigN502 0,05Н20
Найдено, %: С 56,12; Н 6,94; N 25,14.
ЯМР: d 8,36/с, 1Н, Н8/, 8.19/с. 1Н,Н2/ 6,23 /дд. 1Н, Н1/5.05/Т. 1Н, ,58, ОН5/ 4,09/м. 1Н, Н4/ 4,08 /м, 2Н, СН2/ 3,51/м, 2Н, Н5/, 3,33 /с, ЗН, СНз/, 2,41 м. 2Н, Н2/, 2,03/м, 2Н, Нз/ 1,14 т, ЗН, J 7,01. СНз/
П р и м е р 5. 6-иодопурин-9-/ -О-2 ,3 -ди- деоксирибофуранозид .
6-иодопурин (0,624 г, 2,54 ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и 3 -диокситимидин (0,71 г, 3,13 ммоль) смешивали с 700 мл 10 мМ калийфосфатного буфера с рН 6,68, содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют очищенную тимидинфосфорилазу (2,000 ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазу (7,000 м.ед), и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 48 ч реакционную смесь фильтруют, и фильтрат сушат в вакууме. Полученный осадок раствор ют в 95% растворе этанола с водой (по объему), и после прибавлени до примерно 20 мл силикагел , растворитель удал ют в вакууме. Сухую двуокись кремни нанос т на верхнюю часть колонки с силикагелем (2,8 X 50 см), и полученный продукт элюируют смесью метанол: хлороформ (5 ; 95, по всему объему). Фракции, содержащие только продукт, соедин ют , а растворитель удал ют в вакууме Осадок повторно раствор ют в этаноле и фильтруют через 0,22 мкм фильтр. После удалени большей части этанола и прибавлени примерно 25 мл воды, полученное вещество лиофилизуют с выходом 0,088 г 6-иодопурин-9-/3-0-2 , З -дидеоксирибофу- ранозида, который анализируют как 0,2 гидрат (т.пл. 151 - 153°С).
Вычислено, %:С35,15; Н 3,46; N 15,77.
СюНц1 ЬЮ2 0,2 Н20
Найдено %: С 35,31; Н 3.31; N 15,83.
Примерб. 6-Циклопропилметилами- нопурин-9-/3-0-2 , З -дидеоксирибофуранозид .
6-Циклопропилметиламинопурин получают нуклеофильным замещением хлорной группы 4 6-хлоропурина (Sigma Chemicals, St Louis МО) аминогруппой цик- лопропилметиламина (Sigma Chemicals, St Louis МО) 6-циклопропилметиламинопу- рин (2,64 ммоль, 0,50 г) раствор ют в 5 мл диметилформамида. После охлаждени до комнатной температуры прибавл ют з -де- окситимидин (3,98 ммоль, 0,90 г) вместе с 30 мл 10 мМ калийфосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% азид кали . Прибавл ют очищенную тимидинфосфорилазу (10,000м.ед)ипуриннуклеозидфосфорилазу (20,000 м.ед.), абсорбируемых в 10 мл DEAE целлюлозе (Whatman). Полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 8 часов реакционную смесь фильтруют, фильтрат нанос т на систему из сопр женных колонок . В первой колонке находитс смола AG- I-X2 (ОН-форма), 2,5 х 10 см, в то врем как во второй колонке - амберлитова смола XAD-2 (2,5 х 20 см). После нанесени образца колонку промывают 500 мл воды и продукт элюируют метанолом. Затем продукт подвергают флэшхроматографии в колонке с силикагелем, 5 х 20 см, использу смесь хлороформ: метанол (9 : 1 по объему). Растворитель удал ют в вакууме, и полученную смолу помещают во флакон с ацетоном. После лиофилизации получают 0,588 г 6-цикло- пропилметиламинопурин-9-/3-0-2 , 3-дидеоксирибофуранозида, который ана- лизи- руют как 0,15 воды и 0,15 ацетона.
Вычислено, %: С 57,71, Н 6,77; N 23.29.
CnHigNsOa 0,15Н2-0,15СзН60
Найдено, %: С 57,73, Н 6,94; N 23,39
П р и м е р 7. 6-Изопропиламинопурин- 9-/3-D-21, З -дидеоксирибофуранозид.
Синтез 6-изопропиламинопурин-9-/2-0- 21, з -дидеоксирибофуранозида осуществл ют по методике примера 1, за исключением того, что 6-изопропиламинопурин (приготовленный из 6-хлоропурина, Sigma Chemicals. St Louis МО и изопропиламина) раствор ют в 5 мл каждого из диметилформамида и диметилсульфоксида.
После лиофилизации, 6-изопропилами- нопурин-9- -0-21, з -дидеоксирибофурано- зид(0,52 г) анализируют как 0,2 гидрат(т.пл. 55 - 57°С)
Вычислено, %: С 55,58; Н 6,96; N 24,93.
Ci3Hi9N502 0,2Н20.
Найдено, %: С 55,54; Н 6,96; N 25,01.
ПримерЗ. Тиамиприн-9-/Ј-О-2 , з -ди- деоксирибофуранозид
Тиамиприн (Burroughs Wellcome Co, Research Triangle Park NC) (0,05 г) раствор ют в 2,5 мл диметилсульфоксида и 15 мл диметоксиэтана и смешивают с 3 -диокситимиди- ном (0,8 г) в 30 мл калийфосфатного буфера с рН 6,8. Прибавл ют очищенную тимидинфосфорилазу (1600 м.ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазу (70,000 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 96 часов реакционную смесь фильтруют и объем сгущают в вакууме до сиропа Прибавл ют воду (25 мл) и раствор выдерживают в течение ночи при 3°С. Преципитат собирают фильтрацией, затем суспендируют в 5 мл диметилформамида и фильтруют. К фильтрату прибавл ют 15 мл метанола, а затем раствор выдерживают при температуре - 20°С. Через 5 дней твердое вещество собирают фильтрованием, раствор ют в 65% растворе метанола с водой (по объему) и хроматографируют на гидроксидной смоле AG-I-X2. Продукт элюируют 65% раствором метанол: вода (по объему). После удалени растворител в вакууме, твердое вещество раствор ют в 20 мл смеси хлороформ: метанол (9 : 1) и хроматографируют на пластинке из силикагел (3 х 50 см), доведенной до равновесного состо ни смесью хло- роформ:метанол (9 : 1 по объему). Продукт- содержащие фракции объедин ют и растворитель удал ют в вакууме. Остаточный сили- кагель выдел ют из продукта растворением
в 95% растворе этанола с водой( по объему) и фильтруют через 0,22 мкм фильтр, Этанол упаривают, и прибавл ют примерно 200 мл воды. Полученную суспензию лиофили- зуют с выходом 0,056 г тиэмиприн-9-/5-0-2,
3 -дидеоксирибофуранозида, который анализируют как 0,4 гидрат, содержащий 0,7 эквивалентов метанола (т.пл. 130°С, частичное плавление при 110°С).
Вычислено, %: С 41,84; Н 4,68; S7,60;N
26,55.
Ci4Hi6SNeO/rO,4H20 -OJCH40 Найдено, %: С 41,93; Н 4,43; S 7,48; N 26,34,
П р и м е р 9. 2-Амино-6-н-пропоксипуРИН-9-/5-0-21 , 3 -дидеоксирибофуранозид.
(0,21 г) 2-амино-6-н-пропорксипурина (полученного нуклеофильным замещением хлорной группы в 2-амино-6-хлороприне (Aldrich Chemical Co, Milwaukee Ti) алкоксильным анионом при реакции между гидридом натри и пропанолом и (0,29 г) 3 -деокситимидина соедин ют в 100 мл калий- фосфатного буфера, рН 6,8, содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют очищенную
тимидинфосфорилазу (1200 м.ед.) и пурин- нуклеозидфосфорилазу (8400 м.ед) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 48 часов реакционную смесь фильтруют, фильтрат хроматографируют на
колонке с гидроксильной смолой AG-I-X2 (2х х 25 см), Полученный продукт элюируют 90% раствором метанола с водой (по объему ). Растворитель удал ют в вакууме, и остаток раствор ют в метаноле. Прибавл ют 10 мл сухого силикагел , и метанол удал ют в вакууме. Высушенный силикагель нанос т на колонку с силикагелем (2,5 х 30 см), доведенную до равновесного состо ни в смеси хлороформ: метанол (9 : 1), котора также вл етс растворителем дл элюировани . Фракции, содержащие только целевой продукт , соедин ют, а растворитель удал ют в вакууме. Остаточный силикагель удал ют, а продукт высушивают согласно примеру 8. Получают 0,132 г 2-амино-6-н-пропоксипу- рина-9-/3-О-2 , З1--дидеоксирибофуранози- да, который анализируют как 0,2 гидрат (т.пл. 70°С),
Вычислено, %: С 52,91; Н 6,56; N 23,73.
Ci3HigN503 0,2Н20
Найдено, %: С 52,52; Н 6,62; N 23,49.
П р и м е р 10. 6-Этилтиопурин-9-/3-О-2 , З -дидеоксирибофуранозид (5,5 ммоль, 1 г) 6-этилтиопурина, полученного от Sigma Chemicals Co, St Louis МО (4,47 ммоль) З1- деокситимидина, суспендируют в 50 мл 15 мМ калийфосфатного раствора с рН 7,2. Прибавл ют очищенные тимидинфосфо- рилазу (7890 м.ед.) и пуриннуклеозид- фосфорилазу (1980 м.ед.) и суспензию перемешивают при 35°С. Через 144ч реак- ционную смесь фильтруют и фильтрат выдерживают при - 20°С. После размо- раживани фильтрат довод т до рН 10,7 гидроксидом аммони и хроматографируют на колонке со смолой из доуэкса-1-формиата (2,5 х 8 см). Затем элюируют 30% раствором н-пропанола с водой (по объему). Фракции, содержащие продукт объедин ют, а растворитель удал ют. Остаток раствор ют в 30% растворе н-пропанола с водой (по объему) и хроматографируют на колонке (50 х 30 см) Bio Rad P - 2. Продукт элюируют из колонки 30% раствором н-пропанола с водой (по объему). Продуктсодержащие фракции объ- един ют, а растворитель упаривают в вакууме с выходом 0,427 г 6-этилтиопурин- 9-/J-D-21. з -дидеоксирибофуранозида, кото- рый анализируют как 0,5 гидрат.
Вычислено, %: С 49,81; Н 5,92; N 19,36; S 11,44.
CiaHi6SN402 0,5Н20.
Найдено, %: С 49,63; Н 5,96; N 19,28; S 11,06.
Данные ЯМР:с58,71 /с, 1Н, На/.8,67/с, 1Н, Н2/, 6,33 /тр. 1Н, H /M 4,1/, 2Н, ОН,
HV/3.4-3.6/M.2H.51 СН2/. 1.8-2.4/М.4Н, 2 иЗ1 СН2/ 1,5/тр. ЗН. СНз/.
П р и м е р 11. 2-Амино-6-бензилтиопу- рин-9- -0-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид. 2-Амино-6-бензилтиопурин (1,9 ммоль. 0,5 г), полученный от Sigma Chemicals. Co. St Louis МО, и 3-деокситимидин (2,0 ммоль, 0,543 г) раствор ют в 20 мл 10 мМ калий-фосфатного буфера, рН 7 , содеражащего 0,04% азид кали . Прибавл ют очищенные тими- динфосфорилазу (2,000 м.ед.) и пуриннукле- озидфосфорилазу (2,900 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 3 дн прибавл ют 80 мл 10 мМ калийфосфатного буфера, рН 7. Через день реакционную смесь фильтруют. Полученную лепешку раствор ют в 90% растворе метанола с водой (по объему), фильтруют, фильтрат хроматографируют на колонке 2,5 х 10 см с дауэкс-1-гидроксидом. Продукт элюируют из колонки 90% раствором метанола с водой (по объему). Фракции, содержащие продукт , объедин ют и после лиофилизации получают 0,086 г 2-амино-6-бензилтиопу- рин-9-/3-0-2 , з -дидеоксифуранозида.
Вычислено, %: С 57,13; Н 5,36; N 19,59; S 8,97.
C17H19SH502
Найдено, %: С 57,02; Н 5,39; N 19,51; S 8,89.
Данные ЯМР: б 8,18 / С, 1Н, Не/7,3 /м, 5Н,0/, 6,6 /с, 2Н, NH2/, 6,08/ дд. 1Н1 /, 4,93 / шир. 1Н 5 ОН/, 4,45 /шир. 2Н, СН2/, 4,08 /м, 1Н, 4HV/, 3,43 - 3,65/м, 2Н 2,35/м, 2Н, 2 СИ2/ 2,0 /м. З1 СН2/
П р и м е р 12. 6-Этоксипурин-9-/2-0-2 , З -дидеоксирибофуранозид
6-Этоксипурин (3,0 ммоль, 0,5 г Sigma. Chemicals Co, St Louis М0)и 3-деокситимидин (3,3 ммоль 0,75 г) суспендируют в 25 мл 10 мМ калийфосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% азид кали . Прибавл ют очищенные тимидинфосфорилазу (800 м.ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазу (1200 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 24 часа прибавл ют 85 мл 10 мМ калийфосфатного буфера, рН 6,8 и реакционную смесь перемешивают в течение 5 дополнительных дней при 35°С. Выделившийс осадок выдел ют фильтрованием и фильтрат хроматографируют на колонке 2,5 х 10 см с дауэкс-1-гидроксидом. Полученный продукт элюируют 90% раствором метанола с водой (по объему), и фракции , содержащие указанный продукт, объедин ют. После удалени растворител в вакууме раствор ют в 30% растворе н-пропанола и воды (по объему) и хроматографируют на колонке со смолой Bio Rad P-2.
Фракции, содержащие продукт, объедин ют и после лиофилизации получают 0,225 г б-этоксипурин-9-/3-0-2 , з -дидеоксирибофу- ранозида, который анализируют 0,15 гидрата.
Вычислено. %: С53.68; Н 6,15; N 20,98.
(изНпМбОг 0,15 Н20
Найдено, %: С 54,05; Н 6,15; N 20,88.
Данные ЯМР: д 8,6 /с, 1Н, Не/, 8,5 / с, 1Н, Н2/, 6,3 /дд, 1Н, Hi /, 4,97 / тр. 1Н, 51 ОН/, 4,6 /м. 2Н,-СН2-/, 4,1 /м, 1 Н, , 3,53 /м, 2Н- б СН2/. 2,41 /м, 2Н 21 СН2/, 2,03 /м, 2Н. З1 СН2/, 1,4/тр. ЗН, J 0,035 Гц, СНз/.
П р и м е р 13. 6-Диметиламинопурин-9- /J-D-21, з -дидеоксирибофуранозид
6-Диметиламинопурин (6,13 ммоль, 1 г Sigma Chemicals Co, St Louis МО) и 3-деок- ситимидин (4,44 ммоль, 1 г) суспендируют в 50 мл 1Р мМ калийфосфатном буфере рН 7,0, содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют очищенные тимидинфосфорилазу (2000 м.ед.) и пуриннуклеизидфолсфорилазу (3000 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 120 часов реакционную смесь фильтруют и фильтрат хроматографируют на колонке со смолой из дауэкс-1-плдроксида (2,5 х 8 см), использу в качестве элюента 90% раствор метанола и воды (по объему). Фракции, содержащие указанный продукт, объедин ют, а растворитель удал ют в вакууме. Остаток раствор ют в 25 мл 30% раствора н-пропанола и воды (по объему) и хроматографируют на колонке со смолой Bio Rad P-2 с водой (по объему). Фракции, содержащие продукт, объедин ют, а растворитель удал ют в вакууме . Остаток раствор ют в 30 мл деионизо- ванной воды и хроматографируют на колонке с сефадексов G-10 (5 х 90 см). В- качестве элюента используют воду. Соответствующие фракции объедин ют и после лиофилизации получают 6-диметиламино- пурин-9-/ -0-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид, который анализируют как 0,3 гидрат (т.пл. 162°С)
Вычислено, %:С 53,64; Н 6.60; N 26,06 Ci2HiyN502 0,ЗН20 Найдено, %: С 53. 63; Н 6,63; N 25,8. Пример14. 6-Гидрооксиэтиламинопу- рин-9-уЗ-0-2 , З -дидеоксирибофуранозид.
6-Гидроксиэтиламинопурин (2,8 ммоль, 0,5 г, Sigma Chemicals Co, St Louis МО) и 3-деокситимидин (3,30 ммоль, 0,76 суспендируют в 75 мл 10 мМ калийфосфатного буфера , рН 6,8. содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют очищенные тимидин- фосфоридазу (400 м.ед.) и пуриннуклеозид- фосфорилазу (700 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 8 дней добавл ют 600 м.ед. тимидинфосфорилазы и 1050 м.ед. пуриннуклеозидфосфо- рилазы. Через день реакционную смесь фильтруют и фильтрат нанос т на колонку 2,5 х 10 см, с дауэкс-1-гидроксидом. Указанный продукт элюируют метанолом. Фракции , содержащие продукт, объедин ют и упаривают в вакууме. Остаток затем нанос т на колонку 2,5 х 50 см с силикагелем и элюируют под давлением смесью хлороформ;метанол (8 : 2). Фракции, содержащие продукт, объедин ют и после лиофилизации получают 6-гидроксиэтиламинопурин-9-/ - D-2 , З -дидеоксирибофуранозид, который анализируют как 0,65 гидрат (т.пл. 153°С).
. Вычислено, %: С 49,53; Н 6,34; N 24,7. Ci2Hi N405 0,65Н20 Найдено, %: С 49,83; Н 6,07; N 23,7. П р и м е р 15. 6-Циклопропиламинопу- PHH-9-/J-D-2 , 3 -дидезоксирибофуранозид.
6-Циклопропиламинопурин (полученный из 6-хлоропурина (Sigma Chemicals Co, St Louis МО) и циклопропиламина) (2,86 ммоль, 0,5 г) и 3-деокситимидин (4,30 ммоль, 1 г) раствор ют в 10 мл смеси диметилсульфоксид: N, М-диметилформамид (1 : 1) и далее разбавл ют 30 мл 10 мМ калий- фосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% азида кали . Прибавл ют тимидинфосфорилазу (10,000 м.е.) и пуриннук- леозидфосфорилазу (20,000 м.ед.), абсорбируемые в 10 мл DEAE-смолы (Whatman), и полученную суспензию пере: мешивают при 35°С. Через 8 ч реакционную смесь фильтруют, и затем фильтрат нанос т
на систему из сопр женных колонок. Перва колонка заполнена дауэкс-1- гидрокси- дом (2,5 х 10), в то врем как втора колонка содержит амберлитовую смолу XAD-2 (2,5 х х20). После нанесени образца колонки промывают большим объемом воды и полученный продукт элюируют метанолом. Фракции, Содержащие указанный продукт, соедин ют и после лиофилизации получают 0.54 г 6-циклопропиламинолурин-9-/3-0-2 ,
3 -дидеоксирибофуранозид, который анализируют как 0,55 гидрат (т.пл, 63 - 65°С). Вычислено, %: С 54,75; Н 6,40; N 24,55. Ci3Hi N202 0,55Н2О Найдено, %: С 54,67; Н 6,43: N 24,57.
П р и м е р 16. 6-Циклопропиламинопу- рин-9-/ -0-2 , З -дидеоксирибофуранозид,
6-Циклопентиламинопурин (полученный из 6-хлоропурина Sigma Chemicals, St LouisMOn циклопентамиламина) (2,49 ммоль
0,56 г) раствор ют в 5 мл М, М-диметилфор- мамида и 5 мл диметилсульфоксида. Прибавл ют 3 -деокситимидина (3,94 ммоль, 0,894 г) вместе с 30 мл 10 мМ калийфосфатного буфера , рН 6,8, содержащего 0,04% азида
кали . Уксусной кислотой рН довод тдо 6,8. К реакционной смеси прибавл ют очищенные тимидинфосфорилазу (10,000 ед.) и пу- риннуклеозидфосфорилазу (20,000 м.ед,), соединенные с DEAE-целлюлозой (Whatman). Полученную суспензию перемешивают при 35°С в течение 8 ч, фильтруют и фильтрат выдерживают при 20°С в течение ночи. После оттаивани фильтрат нанос т на колонку 2,5 х 10, наполненную дауэкс-1-гид- роксидной смолой. Продукт элюируют водой . Фракции, содержащие продукт, объедин ют и хроматографируют на колонке , содержащей смолу XAD-2 (2,5 - 20 см). Затем продукт элюируют 350 мл воды, а далее метанолом. Фракции, содержащие продукт, раствор ют в воде и после лиофилизовани получают 0,459 г 6-циклопентиламинопу- рин-2 ,3 -дидеоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,05 гидрата (т.пл. 88°С).
Вычислено, %: С 59,21; Н 6,99; N23,02.
Ci5H2iN502 0,05Н20
Найдено, %: С 59 24; Н 7,05; N 22,95.
Пример17. 2-Амино-6-метоксипурин- 9-/2-D-21, з -дидеоксирибофуранозид.
2-Амино-6-метоксипурин (3,0 ммоль, 0,5 г полученного из 2-эмино-6-хлорпурина (Aldrlch Chemical Co, Milwaukee Wl и мета- нола), и 3-деокситимидин (4,50 ммоль, 1 г) раствор ют в 10 мл смеси диметилсульфок- сид 11,11-диметилформамид 1 :1 с последующим разбавлением 30 мл 10 мМ калийфосфатного буфера с рН 6,8, содержащего 0,04% амида кали . К реакционной смеси прибавл ют очищенные тимидинфосфорилазу (10,000 м.ед.) и пуриннуклеозид- фосфорилазу (20,000 м.ед.), абсорбируемые на 10 мл DEAE-смоле, и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через 8 ч ре- акционную смесь фильтруют и фильтрат нанос т на колонку 2,5 х 10см, содержащую доуэкс - 1-гидроксид. Фракции, содержащие продукт, сгущают и довод т до объема 70 мл. Указанную пробу нанос т на колонку 2,5x20 см, заполненную амберлитовой смолой XAD-2. Колонку промывают большим объемом воды, а продукт элюируют метанолом . Фракции, содержащие продукт, объедин ют и после лиофилизовани получают 2-амино-б-метоксипурин-9-/3-О-2 , 3 -дидеоксирибофуранозида .
Вычислено, %: С 49.81; Н 5,70; N26,40;
CiiHi5N50.j
Найдено, %: С 49,70; Н 5,72; N 26,34.
П р и м е р 18. 6-н-Пропоксипурин-9-/ - D-21, 3-дидеоксирибофуранозид.
6-н-Пропоксипурин (0,5 г, 2.8 ммоль Sigma Chemicals Co. St Louis МО) и 3-деокситимидин (0,96 г. 4,2 ммоль) раглвоо ют в 5 мл диметилсульфоксида и 5 мл N. N-диме- тилформамида. В реакционную смесь прибавл ют 30 мл ММ калийфосфатного буфера, рН 6,8,содержащего 0,04% азида кали , и очищенные тимидинфосфорилаэу (10,000 м.ед.) и пуриннуклеозидфосфорила- зу (20,000 м.ед.), абсорбируемые в 10 мл DEAE-целлюлозной смоле, и полученную суспензию перемешивают при 35°С в течение 7 ч. Смолу удал ют из реакционной смеси центрифугированием и надосадочную жидкость нанос т на колонку со смолой AGI- Х2 (ОН форма), 2,5 х 10 см, соединенную с колонкой на смоле XAD-2, 2,5 х 20 см. Указанные колонки промывают 500 мл воды и полученный продукт элюируют метанолом. Продукт раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, Зх 50 см. использу смесь хлороформ: метанол (9 : 1 по объему ). После лиофилизации получают 0,554 г 6-н-пропоксипурин-9-/Н 2 , З -дидеоксири- бофуранозида, который анализируют в виде 0,3 гидрата.
Вычислено, %: С 55,04; Н 6,61; N 19,75;
Ci3Hi8N403 0,ЗН20
Найдено, %: С 55,05; Н 6,61; N 19,72
Пример19. 6-н-Бутоксипурин-9-/ -0- 2 ,-3 -дидеоксирибофуранозид
6-н-Бутоксипурин (0,5 г 2,6 ммоль, Sigma Chemicals Co, St Louis МО) и 3-деокситимидин (0,70 г, 3,1 ммоль) суспендируют в 100 мл 10 мМ калийфосфатного буфера рН 6,98, содержащего 0,04% азида кали . К реакционной смеси прибавл ют очищенные пуриннуклеозидфосфорилазу (3,500 м.ед.) и тимидинфосфорилазу (800 м.ед.) и полученный раствор перемешивают при 32°С. Через 7 дней реакционную смесь фильтруют и фильтрат нанос т на колонку, содержащую смолу AG-I-X2 (ОН-форма) 2,5 х 10 см. Продукт элюируют 90% водным раствором метанола . Растворитель удал ют в вакууме из указанного продукта и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем , 2,5 х 80 см, использу смесь хлороформ: метанол (8,2 по объему). Продукт раствор ют в воде и нанос т на колонку, содержащую смолу XAD-2. 2.5 х 20 см. Колонку промывают 500 мл воды, а затем метанолом . После лиофилизации получают 0,276 г б-н-бутоксипурин-д- О 1, З1-дидеоксирибофуранозида (т.пл. 55°С).
Вычислено, %: С 57,72: Н 6,90: N 19,17. CuH2oN j03
Найдено, %: С 57,86; Н 7,29; N 18,83. Пример 20. 6-Циклопропилметокси- пурин-9-у9-0-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид.
6-Циклопропилметоксипурин получают нуклеофильным замещением хлорной группы у 6-хлорпурина (Sigma Chemicals Co, St Louis МО) алкоксильным анионом, образованным при взаимодействии гидрида и цик- лопропилметилового спирта.
б-Циклопропилметоксипурин (0,505 г, 26,5 ммоль) и 2,3-дидеокситимидин (0,908 г, 40,1 ммоль) подвергают взаимодействию и разделению на смоле AG I-X2 (ОН-форма) и XAD-2, как описано в примере 18. Фракции, содержащие продукт, раздел ют флэш-хроматографией в колонке с силикагелем, 3 х 50 см, использу смесь ацетонитрил : вода (98 : 2, по объему). После лиофилизации получают 0,496 г 6-циклопропилметоксипу- РИН-9-Д-О-21, З -дидеоксирибофуранозида , Вычислено, %: С 57,92; Н 6,25; N 19,30. С14Н1в№Оз
Найдено, %: С 57,99; Н 6,28; N 19,27, Пример21. 6-Циклопентилоксипурин- 9-/5-D-21, З -дидеоксирибофуранозид.
6-Циклопентилоксипурин получают нуклеофильным замещением хлорной группы у 6-хлорпурина (Sigma Chemicals Co, St Louis М0)лкоксильным анионом, полученном при взаимодействии гидрида натри и циклопентанола.
6-Циклопентилоксипурин (0,506 г 2,48 ммоль) и 3-деокситимидин (0,856 г, 3,78 ммоль) подвергают взаимодействию и раздел ют на смоле AG-I-X2 (ОН-форма) и XD-2 по методике примера 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хрома- тог рафией на колонке с силикагелем, 3 х 50 см, использу смесь хлороформ: метанол (95 : 5, по объему). После лиофилизации вы-, ходит 0,385 г б-циклопентилоксипурин-9-/3- D-2 , 3 -дидеоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,15 гидрата.-
Вычислено, 58,68; Н 6,66; N 18,257 С15Н2о№Оз 0,15Н20 Найдено, %: С 5 8,61; Н 6,53; N 18,25. П р и м е р 22, 6-Циклогексилоксипурин- 9-/2-D-21, з -дидеоксирибофуранозид.
6-Циклогексилоксипурина получают нуклеофильным замещением хлорной группы в 6-хлорпурине (Sigma Chemicals,- St Louts МО) алкоксильным анионом, образуе- мым при взаимодействии между гидридом натри и циклогексанолом.
6-Циклогексилоксипурин (0,50 г, -2,29 ммоль) и 3-деокситимидин (0,776 г, $А2 ммоль) хроматографируют на колонке со смолой AG-I-X2 (ОН-форма) и XAD-2 по методике , описанной в примере 18, за исключением того, что дополнителььно к 5 мл диметилсульфоксида и 5 мл N, N-диметилформамида прибавл ют 10 мл глима и используют 70 мл 10 мМ калийфосфатного буфера , рН 6,8, содержащего 0,04% калийазида. После лиофилизации выходит 0,102 г 6-циклогексилоксипурин-9-/3-0-2 , З1- дидеоксирибофуранозида (т.пл. 105°С), который анализируют в виде 0,2 гидрата.
Вычислено, %: С 59,59; Н 7,01; N 17,40.
С1бН22М4Оз 0,2Н20.
Найдено. %: С 59,69; Н 6,93; N 17,27.
П р и м е р 23.6-Циклобутиламинопурин- 9-/3-D-21, З -дидеоксирибофуранозид.
6-Циклобутиламинопурин (0,510, 2,62 ммоль) и 3-деокситимидин (0,896 г, 3,96 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонке со смолой AG-I-X2 (ОН- форма) и смолой XAD-2 по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют из фракций, содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке со силикагелем, 3 х 50 см, использу смесь хлороформ: метанол (9 ; 1). После лиофилизации выходит 0,524 г 6-цик- лобутиламинопурин-9-уЗ-О-2 , з -дидеокси- рибофуранозида (т.пл. 96 - 98°С).
Вычислено, %: С 58,12; Н 6,62; N 24,20.
C14H19N502
Найдено, %: С 58,19; Н 6,65; N 24,16.
Пример 24. 6-Диэтиламинопурин-9- /3-D-21, З1 -дидеоксирибофуранозид.
б-Диэтиламинопурин получают нуклеофильным замещением хлорной группы в 6- хлорпурине (Sigma Chemicals, St Louis МО) аминогруппой диэтиламина.
6-Диэтиламинопурин (0,24 г,1,28 ммоль) и 3-деокситимидин (0,463 г, 2,04 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонке с AG-I-X2 (ОН-форма) и XAD-2 по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, а остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, 5 х 20 см, использу хлороформ , метанол (9 : 1 по объему). Растворитель удал ют в вакууме из фракций , содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хроматографией на второй колонке с силикагелем 2,5 х 50 см, использу этилацетат. Полученную смолу помещают во флакон с ацетоном и после лиофилизации получают 0,98 г б-диэтиламинопурин-9- -D- 2 з -дидеоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,25 воды и 0,20 ацетона .
Вычислено, %: С 57,03; Н 7,44; N 22,78.
Ci4H2iNs02 0.2СзНеО 0,25Н20
Найдено, %: С 57,20; Н 7,39; N 22,72.
П р и м е р 25. 6-Пирролидинпурин-9-/ - D-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид.
6-Пирролидинпурин получают нуклео- фильным замещением хлорной группы в 6- хлорпурине аминогруппой пирролидина.
6-Пирролидинпурин (0,500 г, 2,64 ммоль) и 3 -диокситимидин (0,901 г, 3,98 ммоль) раствор ют в смеси из 5 мл диметил- сульфоксида и 5 мл N, N-диметилформами- да. В реакционную смесь прибавл ют 30 мл 10 мМ калийфосфатного буфера, рН 6,8, содержащего 0,04% азида кали , и очищенные пуриннуклеозидфосфорилазу (20,000 м.ед.) и тимидинфосфорилазу (10,000 м.ед.), асборбируемые в 10 мл DEAE-целлюлозной смолы,и затем перемешивают в течение 7 дней при 35°С. Смолу удал ют центрифугированием и надосадочную жидкость нанос т на колонку со смолой AGI-X2 (ОН-форма), 2,5 х 10 см, котора соединена с колонкой, заполненной XAD-2, 2,5 х 20 см, Колонки промывают 500 мл воды и полученный продукт элюируют метанолом. После лиофилизации выходит 0,385 г 6-пирроли- динпурин-9-/5-0-2 , з -дидеоксирибофурано- зида, который анализируют в виде 0,05 гидрата (т.пл, 158- 159°С).
Вычислено, %: С 57,93; Н 6,63; N 24,13.
Ci4Hi9N502 0,05Н20
Найдено, %: С 57,92; Н 6,67; N 24,11
П р и м е р 26. 6-Морфолинопурин-9-/3- D-21, 3 -дидеоксирибофуранозид
6-Морфолинопурин получают нуклео- фильным замещением хлорного радикала в 6-хлорпурине (Sigma Chemicals, St Louis МО) аминогруппой морфолина.
6-Морфолинопурин (0,501 г, 2,44 ммоль) 3 -деокситимидин (0,842 г, 3,72 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографи- руют на колонке с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2 по методике, описанной в примере 18. После лиофилизации выходит 0,292 г 6- морфолинопурин-9-/2-0-2 , 3 -дидеоксири- бофуранозида, который анализируют в виде 0,2 гидрата (т.пл. 97°С)
Вычислено, %: 54,43; Н 6,33; N 22,67.
СмЖэМбОз 0,20 НаО
Найдено. %: С 54,48; Н 6,28; N 22,52.
П р и м е р 27. 6-у, у-Диметилаллилами- нопурин-9-/3-О-2 , з -дидеоксирибофурано- зид.
6-у, у-Диметилаллиламинопурин (0,500 г, 2,46 ммоль Sigma Chemicals, St Louis МО) 3 -диокситимидин (0,752 г, 3,32 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографи- руют на колонке со смолой AGI-X2 (ОН-форма) по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, а остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем. 3 х 50 см. использу смесь
хлороформ; метанол (95 . 5, по объему) Фракции, содержащие продукт, з тем нанос т на колонку с XAD-2, 2.5 х 20 см. и элюируют из метанола. Полученную смолу помещают во флакон с ацетоном и после лиофилизации получают 0.455 г 6-у у-диме- тилэллиламинопурин-9-/3-В-2 . 3 -дидеокси- рибофуранозида, который анализируют в виде 0,45 воды и 0,20 ацетона.
Вычислено, %: С 57,99; Н7,21; N21,68 Ci5H2iN502 0,45Н20 0,2С3НбО Найдено, %: С 57,77; Н 6,91, N21.41. П р и м е р 28. 6-Фурфуриламинопурин- 9-/J-D-21, З -дидеоксирибофуранозид.
6-Фурфуриламинопурин (0,50%. 2,33 ммоль) (Sigma Chemicals, St Louis МО) и 3-деокситимидин (0,754 г,0 3,33 ммоль). подвергают взаимодействию и хроматогра- фируют на колонке с AGI-X2 (ОН-форма) и
колонке с XAD-2 по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хроматографией в колонке с силикагелем, 5 х 50 см, использу
смесь хлороформ: метанол (9 1, по объему). После лиофилизации выходит 0,303 г 6-фур- фуроламинопурин-9-/ -О-2 , 3 -дидеоксири- бофуранозида, который анализируют в виде 0.2 гидрата.
Вычислено. %: С 56,49; Н 5,50. N 21.96
CisHi7N503 0.2Н20 Найдено, %: С 56,50; Н 5,53; N 21,97. П р и мер 29. 6-Бензилмеркаптопурин- 9-/3-D-21, з -диде9ксирибофуранозид
6-Бензилмеркзптопурин (0,501 г 2,7
ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и 3- деокситимидин (0,704 г, 3,11 ммоль) подвергают взаимодействию по методике, описанной в примере 18, за исключением
того, что дл растворени пуринового основани используют 10 мл глима. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем , 3 х 50 см, использу смесь хлороформ: метанол (95 : 5, по объему) Полученный продукт помещают во флакон с этанолом и после лиофилизации получают 0,304 г 6-бензилмеркаптопурин-9-/3-0-2 ,
3-дидеоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0.05 воды и 0,05 этанола (т.п/i. 81 -83°С)
Вычислено, %: С 59.43 Н 5 37: N 16,31; 39,28.
Ci7Hi8N402S 0.05Н20 O.OSCaHeO
Найдено, %: С 59.49; Н 5,38, N 16,32, S 9,30.
П р и м е р 30. 6-Анилинопурин-9-/ -0-2 . 3 -дидеоксирибофуранозид
6-Анилинопурин (0,500 г, 2,37 ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и 3-деоксити- мидин (0,752 г 3,32 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонке с AGI-X2 (ОН-форма) по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем 2,5 х 50 см, использу смесь растворителей хло- форм: метанол (95 : 5. по объему). После лиофилизации получают 0,470 г 6-анилино- пурин-9-/5-0-2 , з -дидеоксирибофуранози- да, который анализируют в виде 0,05 гидрата (т.пл, 170 - 172°С),
Вычислено, %: С 61,55; Н 5,52; N 22,43. C16H17N502 0.05Н20 Найдено, %: С 61,57; Н 5,55; N 22,43. П р и м е р 31. 2-Амино-6-этоксипурин 9-yS-D-2 , з -дидеоксирибофуранозид.
2-Амино-б-этоксипурин (0,5 г, 2.8 ммоль, полученный нуклеофильным замещением хлорной группы в 2-амино-б хлорпурина, (Aldrich Chemical Co, Milwaukee Wi) алкок- сильным анионом в результате взаимодей- стви гидрида натри и этанола) и З -деокситимидин (0,950, 4,19 ммоль), подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2 по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, а остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, 5x20 см, использу смесь хлороформ: метанол (9 :1, по объему). После лиофилизации получают 0,443 г 2 -амино-6- этоксипурин-9-/2-О-2 , З -дидеоксирибофу- ранозида, который анализируют в виде 0,3 гидрата (т.пл. 150°С, частичное плавление при 65°С).
Вычислено, %: С 50,63; Н 6,23; N 24,60. Ci2Hi7N503 0,ЗН20 Найдено, %: С 50,77; Н 6,21; N 24,63. П р и м е р 32. 2,6,8-Триаминопурин-9- /3-D-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид.
2,6,8-Тиаминопурин (0,500 г, 3,0 ммоль) и 3-доекситимидин (1,02 г, 4.50 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2, как описано -в примере 18. После лиофилизации выходит 0,148 г2,6,8-триами- нопурин-9-/3-0-2 , 3 -дидеоксирибофурано- зида, который анализируют в виде 0,7 метанола (т.пл. 154°С).
Вычислено, %: С 44,76; Н 6,24; N 34,08. CroHisNyOa 0.7СН40 Найдено, %: С 44,51; Н 5,95; N 33,78. Пример 33. 2-Амино-6-бензиламино- пурин-9-/2-0-2, З -дидеоксирибофуранозид.
2-Амино-6-бензиламинопурин (0.2 г, 0,8 ммоль), полученный нуклеофильным замещением хлорного радикала в 2-амино-6- хлорпурине (Aldrich Chemical Co, Milwaukee WI бензиламином) и 3 -деокситимидин (0,282 г, 1,2 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2 - по методике, описанной в примере 18, за исключением того, что используют меньшее количество пуриннукулеозидфосфорилазы (10,000 м.ед.) и тимидинфосфорилазы (5,00 м.ед.), После лиофилизации получают 0,182 г 2- амино-6-бензиламинопурин-9-/ -0-2 . 3 -ди- деоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,60 метанола (т.пл. 92 - 94°С).
Вычислено, %:58,78; Н 6,28; N 23,37,
С1уН2оМб02 0.60СН/Ю
Найдено, %: С 58,60; Н 6,06; N 23,48.
Пример 34, 2-Амино-6-циклопропила- минопурин-9-/ -0-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид .
2-Амино-6-циклопропиламинопурин (0,495 г, 2,1 ммоль, полученный нуклеофильным замещением хлорного радикала у 2- амино-6-хлорпурина (Aldrich Chemical Co, Milwaukee WI) циклопропиламином) и 3 -деокситимидин (0,73 г 3,2 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2 - по методике, описанной в примере 18. После лиофилизации. получают 0,419 г 2-амино-6- циклопропиламинопурин-9-/3-0-2 , 3 -диде- оксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,3 гидрата (т.пл. 82 - 84°С).
Вычислено, %: С 52,80; Н 6,34; N.28.42.
Ci3HieN602 0,ЗН20
Найдено, %: С 52,83; Н 6,35; N 28,44.
Пример 35. 2-Амино-6-метиламинопу- РИН-9-/3-0-21, З -дидеоксирибофуранозид.
2-Амино-6-метиламинопурин (0,5 г 3,0 ммоль, полученный нуклеофильным замещением хлорного радикала у 2-амино-6- хлорпурина (Aldrich Chemical Co, Milwaukee wi)мeтилaминoм) и 3 -деокситимидин (0,893 г, 3,9 ммоль) суспендируют в 100 мл 10 мМ калийфосфатного буфера, рН 6,8, содержащего 0,04% азид кали . В реакционную смесь прибавл ют очищенные пуриннукле- озидфосфорилазу (2,880 м.е, д) и тимидин- фосфорилазу (1.200 м.ед.) и реакцию провод т при перемешивании при 33°С в течение 72 часов. Реакционную смесь нанос т на колонку с AGI-X2 (ОН-форма) 2,5 х 10 см и полученный продукт вымывают 90% водным раствором метанола. Растворитель удал ют в ваккуме и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем , 2,5 х 30 см, использу хлороформ:
:метанол (97 : 3 по объему). После лиофили- зации получают 0,3 г 2-амино-6-метилами- нопурин-9- -0-21, з -дидеоксмрибофурано- зида, который анализируют в виде гидрата (т.пл. 95°С, частичное плавление при 75°С).
Вычислено. %: С 48,66; Н 6,24; N 30.95.
CiiHieN602 0,4Н20
Найдено, %: С 48,57; Н 6,27; N 30,77.
П р и м е р 36. 2-Амино-6-н-пропиксипу- РИН-9-Д-0-21, з -дидеоксирибофуранозид.
2-Амино-6-нупропоксипурин (0,21 г, 1,11 ммоль, полученный нуклеофильным замещением хлорного радикала у 2-амино-6- хлорпурина (Aldrich Chemical Co, Milwaukee WI) алкоксильным анионом в результате взаимодействи гидрида натри и н-пропа- нола) и з -деокситимидин (0,293 г, 1,3 ммоль) суспендируют в 100 мл 10 мМ калийфосфат- ного буфера, рН 7, содержащего 0,04% азида кали . К реакционной смеси прибавл ют очищенные пурин ну клеозидфосфорилазу (2,880 м.ед.) и тимидинфосфорилазу (1200 м.ед.) и затем перемешивают при 33°С в течение 48 ч. Реакционную смесь нанос т на колонку с AGI-X2 (ОН-форма) 2,5 х 5 см, и элюируют 90% водным раствором метанола . Растворитель удал ют в вакууме и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем 2,5 х 30 см, использу смесь хлороформ:метанол (9 : 1, по объему ). После лиофилизации получают 0,132 г 2-амино-б-н-пропоксипурин-9-/ -О-2 , 3 -ди- деоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,2 гидрата (т.пл. 70°С).
Вычислено, %: С 52,59; Н 6,59; N 23,59.
С1зН1эМ50з 0,2Н20
Найдено, %; С 52,52; Н 6,62; N 24,49.
П р и м е р 37. 6-Бензиламинопурин-9- /3-D-21, З -дидеоксирибофуранозид.
6-Бензиламинопурин (1 г, 4,44 ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и з -деокси- тимидин (1,0 г. 4,4 ммоль) суспендируют в 50 мл 15 мМ калийфосфатного буфера, рН 7,2. В реакционную смесь прибавл ют очищенные пуриннуклеозидфосфорилазу (2,000 м.ед.) и тимидинфосфорилазу (7, 900 м.ед) и перемешивают при 25°С. Через 1 прибавл ют 6 мл диглима, и перемешивают при 37°С в течение 65 дней. Полученный фильтрат довод т до рН 10,5 гидроксидом аммони , затем нанос т на колонку с AGI-X2 (форма- формиата), 2x6 см. Полученный продукт элюируют 30%-м водным раствором пропа- нола. Затем продукт хроматографируют на колонке Р-2, 2,5 х 90 см, вымывают 30% водным раствором пропанола и после лиофилизации получают 0,063 г 6-бензиламино- пурин-9-/5М 2 , З1 -дидеоксирибофуранози- да, который анализируют в виде 0,5 гидрата (т.пл. 65°С).
Вычислено, %: С 61,06; Н 6.03; N 20.94. Ci7HigN502 O.SHzO Найдено, %: С 61,29; Н 6,21; N 20.69. Пример 38. 6-Изопропоксипурин-9-/3- 5 D-21. З -дидеоксирибофуранозид.
6-Изопропоксипурин (0,5 г 2,8 ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и 3 -деокси- тимидин (0,95 г, 4,2 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на 0 колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и XAD-2 по методике, описанной в примере 18. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, и остаток раствор ют в 30% водном растворе пропанола. Хроматог- 5 рафируют на колонке с G - 10,5 х 90, элюируют 30% водным раствором пропанола с выходом смолы, которую перенос т дл лиофилизации во флакон с ацетоном. После лиофилизации получают 0,313 г 6-изопро- 0 поксипурин-9-Д-0-2 , з -дидеоксирибофура- нозида, который анализируют в виде 0,2 воды и 0,2 ацетона (т.пл. 75°С).
Вычислено, %: С 55,65; Н 6,73; N 19,09. С1зН1вМ4Оз 0,2СзНеО 0,2Н20 5 Найдено, %: С 55,65; Н 6,59: N 19,12.
Пример 39. 6-н-Пропиламинопурин- 9-/3-D-21, з -дидеоксирибофуранозид.
6-н-Пропиламинопурин (0,500 г, 2,81 ммоль, Sigma Chemicals, St Louis МО) и З1- 0 деокситимидин (0,957 г, 4,26 ммоль) подвергают взаимодействию и хроматографируют на колонках с AGI-X2 (ОН-форма) и ХО-2 по методике, описанной в примере 18 за исключением того, что 5 мл диметилсульфокси- 5 да замен ют дополнительной порцией 5 мл N, N-диметилформамида. Растворитель удал ют в вакууме из фракций, содержащих продукт, и остаток раздел ют флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, 3 х 50 0 см, использу смесь хлороформ : этанол (9 : :1 по объему). После лиофилизации получают 0,499 6-н-пропиламинопурин-9-/ -О-2 . з -ди- деоксирибофуранозида, который анализируют в виде 0,7 гидрата.
5Вычислено, %: С 53,85; Н 7,09; N 24,15.
Ci3HigN502 0,7Н20 Найдено, %: С 53,93; Н 7,08; N 24.18. Пример 40. 6-Циклогексиламинопу- рин-9-Д-О-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид. 06-Циклогексиламинопурин получают
нуклеофильным замещением хлорной группы 6-хлорпурина циклогексиламином.
6-Циклогексиламинопурин (1,0 г, 5 ммоль) и 3-деокситимидин ( 607 г, 9,1 5 ммоль) раствор ют в 25 мл 2-метоксиэтиле- нового простого эфира и 500 мл 10 мМ калий- фосфатного буфера, рН 7,2. Прибавл ют -очищенные пуриннуклеозидфосфооилазу (5,000 м.ед.) и тимидинфосфорилазу
(5.000 м.ед.) и тимидинфосфорилазу (3850 м ед.) и реакционную смесь перемешивают при 37°С в течение 7 дней. Затем реакционную смесь нанос т на колонку со смолой XAD-2 и тщательно промывают водой. Продукт элюируют 90% водным раствором метанола . Фракции, поглощающие УФ, сгущают и нанос т на колонку со смолой AGI-X2 (ОН-форма) 2 х 12 см и элюируют 30% водным раствором метанола. Продукт тщательно дополнительно хроматографиру- ют на колонках с Р-2, 2,5 х 90 см, и с С-10, 2,5 х 90 см и вымывают продукт из каждой колонки 30% водным раствором пропанола. После лиофилизации получают 0,093 г 6- циклогексиламинопурин-9-/5-0-2 . 3 -диде- оксирибофуранозида (т.пл, 70 - 92°С).
Вычислено, %: С 60,55; Н 7,30; N 22,07.
С1бН23№02
Найдено, %: С 60,37; Н 7,39; N 21.94.
П р и м е р 41. 6-Метиламинопурин-9-/3- D-2 3-дидеоксирибофуранозид.
6-Метиламинопурин (4, 31 ммоль, 1 г, полученный от Sigma Chernlcal Co, St Louis МО) и 3-деокситимидин (4,40 ммоль, 1 г суспендируют в 50 мл 10 мМ калийфосфат- ного буфера, рН 7 , содержащего 0,04% азида кали . В реакционную смесь прибавл ют очищенные тимидинфосфорилазу (2,000 м.ед. ) и пуриннуклеозидфосфо- рилазу (2,4000 м.ед.) и полученную суспензию перемешивают при 35°С. Через три дн реакционную смесь выдерживают при -20°С. После оттаивани смесь фильтруют и фильтрат нанос т на колонку 2,5 х 10 см, заполненную дауэкс-1-гидроксидом, Продукт элюируют из колонки 90% раствором метанола в воде (по объему). Фракции, содержащие продукт, хроматографируют дважды на колонке 5 х 90 см со смолой Bio Rad Р-2, использу 30% раствор н-пропано- ла в воде (по объему), фракции, содержащие продукт, сгущают и после лиофилизации получают 0,391 г 6 метиламинопурин-9-/ -0- 2 , 3 -дидеоксирибофуранозида, который анализируют в воде 0,1 гидрата.
Вычислено, %: С 52,62; Н 6,10; N 27,89.
CnHisNsOa -0,1H20
Найдено, %: С 62,75; Н 6,16; N 28,01.
Данные ЯМР - анализа: 34/с, 1Нв/, 8,12/с, 1Н, На/, 7,72/шир. 1Н, NH/, 6,23 / дд, 1Н, Hi/, 5,06/т., 1Н. , 4,10/м, Ж. Н4/, 3.58/-3.69./М.. 1Н, 5 СН2/, 3,45 - 3,55/м, Hi, 5(СН2/, 2,95/шир. ЗН, СН3/, 2,40/м, 2Н, и 2.07/м. 2Н, 3 СН2/
Активирусна активность.
6-Циклопропиламинолурин-9-у -0-2 , З1- дидеоксирибофуранозид и 6-метиламино- пурин-9- -0-2 , 3 -дидеоксирибофуранозид
испытывали на активность против ВИЧ, в результате чего установлена активность против ВИЧ при концентрации 1 мкмоль. П р и м е р 42. б-/Циклопропилметиламино/-9- (2Д, 5.5.-тетрагидро-5-) (пивалои- локси/метил)-2-фурил)-9Н-пурин.
Соединение по примеру 6,6-/циклопро- пилметиламино/-9- 2Д, 55)-тетрагидро-5- (оксиметил)-2-фурил -9Н-пурин (0,322 г, 1,1
ммол ) раствор ют в 50 мл ацетонитрила, добавл ют 4-метиламинопуридин (10,5 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламин (620 мкл, 4,4 ммол ) и колбу затем подвергают резкому охлаждению в ванне со льдом. Триметилуксусный ангидрид (450 мкл, 2,2 ммол ) раствор ют в 10 мл ацетонитрила и добавл ют капл ми в колбу в течение 15 мин Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 24 ч. Дополнительные аликвоты триэтиламина (620 мкл, 4,4 ммол ) и пи- валоилхлорида (250 мкл, 2,0 ммол ) добавл ют за 24 ч, 48 ч, 72 ч и 98 ч, После 120ч перемешивани при комнатной температуре добавл ют дополнительно пивалоилхлорид (500 мкл, 4 ммол ) и триэтиламин (1,24 мкл, 8,8 ммол ) и реакционную смесь нагревают с обратным холодильником 16 ч. Реакционную смесь резко охлаждают метанолом , а растворители удал ют в вакууме.
Остаток суспендируют в 25 мл этилацетата и удал ют соли фильтрованием. Растворитель отгон ют в вакууме и остающийс материал хроматографируют на Хроматроне с 2 мл пластинкой из силикагел , с применением смеси гексана с ацетоном (7 : 3); фрак- цию, содержащую целевой продукт, дополнительно очищают элюированием из колонки с силикагелем (2,5 х 40 см), использу смесь дихлорметана с метанолом (98 :2).
Лиофилизаци позволила получить 0,218 г
6-/циклопропилметиламин/-9-(2Д, 55)-тетрагидро-5- /пивалоилокси/метил/-2-фурил1
-9Н-пурина, в виде масла (52%-ный выход).
Вычислено, %: С 60,38; Н 7,33; N 18,35.
Ci9H27N503 0,25Н20
Найдено, %: С 60,49; Н 7,33; N 18,38. Данные ЯМР, 1Н ЯМР/200 МГц, диме- тилсульфоксид д 8,26 / вный сиглент, 2Н, Н2 и На/, 6,25 / мультиплет, 1Н, 1Hi /,4,25/
широкий 1Н, Н41, 4,16/ мультиплет 2Н, НБ и Нв11/, 3,36/ синглет, ЗН, М-СНз/, 3,21/ широкий,...,1Н, N-CHCH2CH2/; 2,48 / широкий , 2Н, Нз и Нз /; 2,11/ мультиплет. 2Н, На и Н2 /, 1,08 / синглет, 9Н, с/ СНз/з/.
0,84 и 0,70/ 2 мультиплет, 2Н каждый, N- СН/СН2//СН2/.
П р и м е р 43. . 55/-5-/Ацетокси- метил/-тетрагидро-2-фурил -б-циклопропи- лметиламино -9Н-пурин
6-/Циклопропилметиламино/-9Н-(2Р, 55)-тетрагидро-5-/оксиметил/ -2-фурил - 9Н-пурин (0,290 г, 1 ммоль/, 4-диметилами- нопиридин (10,2 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламин (620 мкл, 4,4 ммол ) раствор ют в 50 мл ацетонитрила. Колбу подвергают резкому охлаждению в ванне со льдом и добавл ют ацетилхлорид (1500 мкл, 2,1 ммол ). Реакционную смесь довод т до комнатной температуры и перемешивают 4 ч. Добавл ют дополнительные аликвоты триэ- тиламина (620 мкл, 4,4 ммол ) и ацетилхло- рида (150 мкл, 2,1 ммол ) и реакционную смесь перемешивают всю ночь. Реакционную смесь охлаждают метанолом и растворители выпаривают в ваккуме. Остаток суспендируют в 25 мл этилацетата и соли удал ют фильтрованием. Растворитель выпаривают в вакууме и остающийс материал хроматографируют на хроматроне (4 мм пластинка из силикагел ) с применением смеси гексана с ацетоном (7 : 3). Лиофили- заци дает 0,174 г 9-(2Ј, 53)-5-(ацетоксиме- тил-тетрагидро)-2-фурил -6-/циклопропил- метиламино/ -9Н-пурина в виде масла (выход 51%),
Вычислено, %: С 56,31; Н 6,53; N 20,52.
Ci6H2iN503 0,55Н20
Найдено, %: С 56,26; Н 6,50; N 20,50.
Данные ЯМР, 1Н ЯМР /200 МГц, диме- тилсульфоксид-de) б 8,31 и 8,29 / 2 синглет, 2Н, Н и Не/, 6,29/мультиплет, 1Н, Hi / 4,32/широкий, 1Н, Из /, 4,16 /мультиплет, 2Н, Hs и Н5П/, 3/6 3,38 / синглет, ЗН, N- СНз/, 3,25/ широкий/ 2Н, N-CbL CH2 СН2/, 2,5 / широкий, 2Н, Нз1 и , 2,14 /мультиплет , 2Н, Н2 и Н2 /, 2,98 / синглет, ЗН, СНзСОО/, 0,88 и 0,73/2 мультиплет, 2Н каждый , N-CH СЫ2 СН2/
П р и м е р 44. 6-/Циклопропилметила- мино/-9-(2Р., )-5-/(гексаноилокси)-ме- тил/-тетрагидро-2-фурил -9-пурин.
6-/ Циклоп роли л метилами но , 53/тетрагидро-5-/оксиметил/-2-фурил1-9Н- пурин (0,503 г, 1,7 ммол ) триэтиламин (2.0 мл, 14 ммолей) и 4 метиламинопиридин (10 мг, 0,1 ммол ) раствор ют в 50 мл ацетонитрила . Добавл ют гексаноилхлорид (980 мкл, 7,0 ммолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 3 ч. Реакционную смесь охлаждают метанолом и растворители выпаривают в вакууме. Остаток раствор ют в 25 мл этилацетата и нерастворившиес соли удал ют фильтрованием . Остаток после выпаривани этилацетата раствор ют в метаноле и пропускают через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем. Фракции, содержащие целевой продукт, соедин ют , концентрируют и хроматографируют на хроматроне (4 мм пластинка из си ликагел ) с применением смеси гексан с ацетоном (8 : 2). Продукт допопнптплыю очищают на хроматроне (2 мм пластинка из 5 силикагел ) с применением смеси хлороформа с ацетоном (99 : 1). Лиофилизаци дает 0,268 г 6-/циклопропилметиламино-9- (2R, 53)5-/(гексаноилокси)-метил/- тетра- гидро-2-фурил -9Н-пурина в виде масла
0 (40%-ный выход).
Вычислено. %: 61.71; Н 7,56; N 17,99. C2oH29N503 ЮН20 Найдено, %: С 61,81; Н 7,58; N 17,92. Данные ЯМР 1Н ЯМР /300 ГМц, диме5 тилсульфоксид-de/ д 8,30 и 8,28/ 2 синглет, 2Н, Н2 и На/; 6,28 / мультиплет, 1 Н, Дж 6,3 Гц, Дж 4,2 Гц, Hi/; 4,30 ;/ широкий 1Н, Н/ 4,23 / мультиплет, 2Н, Н5 и Нг, /, 3,38 / синглет, ЗН, N-СНз/; 3,24 / мультиплет 1Н,
0 N-CH.CH2 СН2/; 2,51 /широкий 2Н. Нз и . 2,22 / мультиплет, Н2 и 2.14 / мульти- плет2Н,ООСОН2СН2/СН2/ СНз/, 1,45/виды мы и пентет, 2Н, Дж 7,3 Гц, ООССН2СН2/СН2/2СНз/: 1,20 / мульти5 плет, 4Н, ООССН2/СН2/СН2/2СН3, 0,88 и 0,73 /2 мультиплет, 2Н каждый, N-CH СН2СН2/и 0,82/триплет, ЗН, Дж 6,8 Гц, ООССН2СН2/2СНз/.
Пример 45. 6/Циклопропилметилами0 но/-9- 2Р, 53)-5-/нонаноилокси/.
6-/Циклопропилметиламино/-9-(2Н, )-5/оксиметил/-2фурил -9Н пурин (0,998 г, 1,7 ммол ), 4-диметиламинопиридин (10 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламин (2,0 мл. 14
5 ммолей) раствор ют в 50 мл ацетонитрила Добавл ют нонаноилхлорид (2.26 мл. 7.0 миллимолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 3 ч. Реакционную смесь охлаждают метанолом и
0 растворители выпаривают в вакууме. Остаток раствор ют в 25 мл этилацетата и нерастворившиес соли удал ют фильтрованием . После выпаривани этилацетата остаток раствор ют в метаноле и пропускают
5 через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем. Фракции, содержащие целевой продукт, соедин ют , концентрируют и хроматографируют на хроматроне (4 мм пластинка из силикагел ) с применением смеси гексана с
0 ацетоном (80 : 20). 2 отдельных последовательных пропуска на хромагроне (4 мм пластинка из силикагел ) с применением смеси хлороформа с ацетоном (80 20) Две отдельные последовательные очистки на Хроматро5 не с использованием смеси хлороформа и ацетона (95 ; 5) и смеси гексана с ацетоном (85 : 15) с последующей лпофилизацией дали 0,236 г 6-/циклопропилметиламино/-9-{(2Ј 53)-/(5-нонаноилокси)-метил/-тетрагидро2-фурил -9Н-пурина в виде масла (выход 32%).
Вычислено, %: С 63,91; Н 8,23; N 16,20,
C23H35N503 0.15Н20
Найдено, %: С 63,73; Н 8,05; N 16,05. Данные ЯМР; 1Н ЯМР/300 МГц, диме- тилсульфоксид de/ 5 8,29 и 8,28/2 синглет, 2Н, № и Не/ 6,28/ двойной дуплет 1Н, Дж, 4,5 Гц, Дж 5,9 Гц, Hi/,4,21 /широкий, 1Н, Н4/ 4,17 /т, 2Н, Hs1 и . 3,38/ S, ЗН, N-СНз/. 3,24/b,1H, N-CHCHzCHa/i 2,51 широкий/ 6,2 Н, Нз1 и Нз /: 2,24/ мультиплет, 2Н, На и Н2 /, 2,16 / мультиплет, 2Н, ООССН2СН2/ СН2/5 СНз/. 1,45/ широкий 2Н. СООСН2-/СН2/-5 СИ//- 1,22 /широкий, ЮН, ООССН2СН2/СН2/5СНз/ 0,88 и 0,72 /2 мультиплет 2Н, каждый, N-CHCHaChte/, 0,83 триплет, ЗН Дж 6.7 Гц, ООССН.2СН2/СН2/5СНз/.
Пример 46. 6-/Циклопропилметила- мино/-9-{2 В, 55)-5/-гектаноилокси/-метил- тетрагидро-2-фурил -ОН-пурин.
6-/Циклоп ропил метил амино/-9-(2Л, Б тетрагидро-б /оксиметил/ -фурилЗ-ЭН- пурин (0,310 г, 1,1 ммолей), 4-диметилами- нопиридин (10 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламии (1,0 мл, 7 ммолей) раствор ют в 50 мл ацето- нитрила. Добавл ют гептаноилхлорид (800 мкг, 5,0 ммолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь охлаждают метанолом и растворители выпаривают в вакууме. Остаток раствор ют и пропускают через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем. Фракции, содержащие продукт, соедин ют, концентрируют и помещают на препаративные пластинки (20 х 20 х 0,2 см) и силикагел . Пластинки про вл ют смесью хлороформа с ацетоном (80 : 20), Продукт соскабливают с препаративной пластинки (Rf 0,5) и элюируют из силикагел этанолом. После выпаривани растворител продукт допол- нительнЪ очищ ают на хроматроне (2 мм пластинка из силикагел ) смесью гексана с ацетоном (80 : 20). Лиофилизаци позвол ет получить 0,227 г 6-/циклопропилметилами- но/-9-(2Р., 55)5-(гектаноилокси)метил/- тетрагидро-2-фурил -9Н-пурина в виде масла (выход 51%).
Вычислено, %: С 62,54; Н 7,80; N 17,36.
C2iH3iNg03 0.10Н20
Найдено, %; С 62,56; Н 7,79; N 17,28.
Данные ЯМР: Н ЯМР/200 МГц, диме- тилсульфоксид-йб/ 5 8,27 и 8,26/ 2 синглет, 2Н, Н2 и На/, 6,26/ мультиплет, 1Н, Hi/: 4,26 / широкий 1Н, Н4/, 4,15 / мультиплет, 2Н, Hs1 и Н5 3,36/ синглет, ЗН, М-/СНз/; 3,24 /широкий, 1Н. N-CH, СН2, СН2/; 2,48/ широкий , 2Н, Из и . 2,17/мультиплет-4Н,
Н2 и На ООССН2/СН2/4 СНз/; 1,42 / широкий , 2Н, ООССН2СН2/СН2/2СНз/; 1,19/ широкий 6Н, ООСС/СН2/2-/СН2/3, СНз/, 0,85 и 0,71 /2 мультиплет, 2 Н каждый, N-CH
СН2СН2/; и 0,80 / триплет ЗН, J - 6,9 Гц, ООС / СН2/5СН.З/
П р и м е р 47. б /Циклопропилметила4- мино/-9-(2 55)-5-/(метоксиацетокси)-ме- тил/-тетрагидро-2-фурил -9Н-пурин,
6-/Циклоп роли л метил амин о/-9-(2R, 55Г)тетрагидро-5-/оксиметил-2-фурил -9Н- фурил (0,319 г, 1,1 ммол ), 4-диметиламино- пиридин (10 г, 0,1 ммол )итриэтиламин (1,0 мл, 7 ммолей) раствор ют в 50 мл ацетонитрила . Добавл ют метоксиацетилхлорид (460 мкм, 5,0 ммолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь охлаждают метанолом и растворители выпаривают в вакууме.
Остаток раствор ют в ацетоне и пропускают через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем. Элюент, поглощающий ультрафиолетовое излучение, концентрируют и раздел ют на хроматроне (4 мм пластинка из силикагел )
с применением смеси хлороформа с ацетоном (95 : 5). Растворители удал ют в вакууме , а остаток дополнительно очищают на препаративной пластинке из силикагел (20 х 20 х 0,2 см). Дл про влени используют смесь хлороформа с ацетоном (70 ; 30). Продукт соскабливают с препаративной пластинки и элюируют из силикагел этанолом . Лиофилизаци дает 0,217 г 6-/цикло- пропмламинометиламино/9-(2Ј, 55)-/(метоксиацетокси )-метил/-тетрагидро-2-фурил - 9Н-пурина в виде масла (53%-ный выход). Вычислено, %: С 55,26; Н 6,52; N 18,95. Ci7H23Ns04 0.45Н20 Найдено, %: С 55,17; Н 6,38; N 18,34.
Данные ЯМР: 1Н ЯМР /200 МГц, диме- тилсульфоксид de / (5 8,30 и 8,26 / 2 синглет, 2Н, Н2 и Нз/ 6,27/ вный триплет, 1Н, Hi /, 4,31 /широкий 1Н, ИА /, 4,21/ широкий 2Н, Hs и Нв /, 3,99/ вный дублет. 2Н,
ООССНаОСНз/. 3,37/ синглет ЗН, М-СНз/ 3,25 / синглет, ЗН, ООССН2ОСНз/, 3,19 / широкий 1Н, N-CH.CH2CH2/, 2,46 / широкий , 2Н, Нз и , 2,12 /мультиплет, 2Н, Н2 и Нл/; 0,87 и 0,73/2 мультиплет, 2Н каждый,
N-(fH CH2-CH/2.
П р и м е р 48. б-/Циклопропиламино/- 9-// 2Д, 5.S./-5-// изобутироилокси/метил/- тетрагидро-2-фурил/9-Н-пурин.
6-/Циклопропилметиламино/-9-//(2Р,
55)тетрагидро-5-/оксиметил/-2-фурил/-9Ц -пурин (0,321 г, 1,1 ммол ), 4-диметиламино- пиридин (10 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламин (1,0 мл, 7 ммолей) раствор ют в 50 мл ацето- нитрила. Добавл ют ангидрид изомасл ной
кислоты (830 мкг, 5,0 ммолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь охлаждают метанолом и растворители выпаривают в вакууме. Остаток раствор ют в ацетоне и пропускают через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем Фракции, содержащие продукт , соедин ют, концентрируют и помещают на препаративные пластинки из силикагел (20 х 20 х 0,2 см), Пластинки про вл ют в смеси хлороформа с ацетоном (80 : 20). Продукт соскабливают с препаративной пластинки (Rf 0,5) и элюируют из силикагел этанолом. После выпаривани растворител продукт дополнительно очи- щают на хроматроне (пластинка из силикагел 2 мм) с применением смеси гексана с ацетоном (80 : 20). Лиофилизаци дает 0,277 г 6-/циклопропилметиламино/-9-//2Н, 5S/- 5-//изобутироилокси/-метил/-тетрагидро- 2-фурил/-9Н-пурина в виде масла (выход 69%).
Вычислено, %: С 59,26; Н 7,07; N 19,20.
Ci8H25N503 0,ЗОН20
Найдено, %: С 59,30; Н 6,92; N 19,05. - Данные ЯМР; 1Н ЯМР /200 МГц дейте- рированный хлоформ/ д 8,39 и 7,99/ 2 син- глета,2Н, Н2И Не/6,31 /мультиплет, 1Н, Hi1 /; 4,38/ широкий 1Н, Щ1/ 4,30 / мультиплет 2Н, Hs1 и Hs /, 3,46 / синглет, ЗН. М-СНз/, 3,22 / широкий 1Н, NCH, CH2CH2/. 2,56 / широкий, ЗН . Нз1, Н3 и ООСН// СНз/2/ 2,11/ мультиплет, 2Н, Н2( и , 1,16/дуплет , 6Н, Дж 7,0 Гц ООСН/ СНз/2/; 0,98 и 0,76/ 2 мультиплета, 2Н каждый, N-CH CH.2 СН2/.
П р и м е р 49. 6-/Циклопропилметилами- l HO/-9-/ 2В, 5S.7 5-/пентаноилоксиметил/- тетрагидро-2-фурил-9Н-пурин.
6-/Циклопропилметиламино/-/()- тетрагидро-5-(оксиметил)-2-фурил/- 9Н-пу- рин (0,624 г, 2,1 молл ), 4-диметиламино- пир идин (2,7 мг, 0,2 ммол и триэтиламин (2,0 мл, 14 ммолей) раствор ют в 100 мл ацетонитрила. Добавл ют хлоранидрид ва- лерь новой кислоты (1,08 мл, 8,9 ммолей) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь быстро охлаждают метанолом и растворитель выпаривают в вакууме. Остаток раствор ют в ацетоне и пропускают через колонку (4,8 х 13 см) с силикагелем. После выпаривани растворител продукт дополнительно очищают на хроматроне (4 мм пластинка из силикагел ) с применением смеси гексана и ацетона (85; 15). Фракции, содержащие целевой продукт, соедин ют, концентрируют и помещают на препаративные пластинки (120 х 20 х 6,2 см) из силикагел .
Пластинки про вл ют в смеси хлороформа и ацетона (80 : 20). Продукт соскабливают с препаративной пластинки и элюируют из силикагел этанолом. Затем продукт очищают с помощью испарительной хроматографии в колонке (2,5 х 40 см) с силикагелем с применением смеси хлороформа с ацетоном (95 : 5). Лиофилизаци приводит к получению 0,463 г 6-/циклопропилме- тиламино/-9-{(2 55}-5-/пентаноилоксиме- тил/-тетрагидро-2-фурил -9Н-пурина в виде масла (выход 58%).
Вычислено, %: С 60,38: Н 7,33: N 18.53
CigH27Ns03 0,25Н20
Найдено, %: С 60,66; Н 7,36: N 18.14.
ЯМР данные, 1Н ЯМР /300 МГц, диме- тилсульфоксид de /68.30 и 8,28/ 2 синглета. 2Н, Н2 и Hs// дуплет, дуплет, 1Н, Дж 4,1 Гц,Дж 6,3 Гц, Hi,4,29 / широкий Ж, , 4,18 / мультиплет, 2Н, Hs1 и , 3,38 /синглет , ЗН, М-СНз/; 3,25 /широкий, 1Н. N-CH. СН2, СН2/, 2,51 / широкий, 2Н, Нз , и Нз /, 2,22 / мультиплет, 2Н. ООССН.2СН2СН2СНз/, 2,13 / мультиплет, 2Н, Н21 и Н2 /, 1,44 / мультиплет, 2Н, СООСН2 СН2СН2СНз/. 1,23 / мультиплет, 2Н, ООССН2 СН2СН2СНз 0,89 и 0,74 / 2 мультиплета, 2Н каждый, N-CH СН.2СН2/. и 0,82 /триплет, ЗН, Дж 7.2 Гц ООССН2 СН2СН2СНз/
Пример 50. 6-/Циклопропилметила- мино/-9-/(2Р, 55)-5-/пропаноилокси/-мс- тил-1 /тетрагидро-2-фурил-9Н-пурин.
5- /Циклоп роли л мети лам и но /-9- /(, 5.5)-тетрагидро-5(оксиметил)-2-фу рил /-9 Н- пурин (0,369 г, 1,3 ммол ) -4-диметиламино- пиридин (10 мг, 0,1 ммол ) и триэтиламин (2,0 мл, 14 ммолей) раствор ют в 50 мл ацетонитрила . Добавл ют пропионилхлорид (450 мкл, 5,2 ммол ) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 2 ч. Реакционную смесь быстро охлаждают метанолом и растворитель выпаривают в вакууме .
К остатку добавл ют этилацетат и нерастворившиес соли удал ют фильтрованием . Затем фильтрат помещают в колонку (4,6 х 13 с мм) с силикагелем и элюируют метанолом, После выпаривани растворител продукт элюируют на пластинке Хро- матрона (4 мм силикагель) с применением смеси гексана с ацетоном (75 : 25). Фракции, содержащие целевой продукт, соедин ют, концентрируют и дополнительно хроматог- рафируют на хроматроне (2 мм пластинка из силикагел ), используют смесь хлороформа и ацетона (95 :5), содержащие продукт фракции помещают на препаративные пластинки из силикагел (20 х 20 х 0,2 см), которые затем про вл ют смесью хлороформа с ацетоном (85 . 15). Окончательной очистки достигают посредством третьей очистки на хроматроне (2 мм пластинка из силикагел ) с применением смеси гексана и ацетона (80: : 20). Лиофилизаци приводит к образованию 0,178 г б-/циклопропилметиламино/-9- 2Д, 5 }-5-/пропаноилоксм-мет ил-1 - тетрагидро-2-фурил -9Н-пурина в виде масла (выход 39%).
Вычислено, %: С 58,51; Н 6,76; N 20,07,
С17Н2зМ50з 0,20Н20
Найдено, %: С 58, Н 6,78, N 19,90.
Н ЯМР /200 МГц, диметилсульфоксид- de Id 8,28 и 8,26/ 2 синглета, 2Н, Н2 и Не/. 6,26 / мультиплет, 1Н, Hi/ 4,28 / широкий, 1Н, Н4/, 4,14/ мультиплет, 2Н, Hs и ,3,36 /синглет, ЗН, N/-CH/3, 3,21 /широкий, 1Н, N-CHCH2CH2/ 2,48 / широкий, 2Н, Из и Нз /, 2,26 /квинтет, 2Н, Дж 7,7 Гц, ООССН2СН3/, 2,18/m, 2H, Н21 и , 0,96 /t, ЗН, J 7,5 Гц, ООССНаСНз/ и 0,84 и 0,70 / 2 мультиплета, 2Н каждый, N-CHCH2- СН2/.
П р и м е р 51. 6-(Цик/юпропилметилами- но)-9-((2, 55)-/(л-метилбензоилокси)ме- тил/тетрагидро-2-фурил)-9Н-пурин.
6-(Циклопропилметиламино-9-/(2Р, 5S)- тетрагидро-5-(оксиметил)-2-фурил/-9Н -пу- рин (0,295 г; 1,0 ммол ), 4-диметилзминопи- ридин (20 мг; 0,2 ммол ) и триэтиламин (2,0 мл; 14 ммолей) раствор ют в50 мл ацетонит- рила. Добавл ют n-метилбензоилхлорид и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь быстро охлаждают метанолом и растворители выпаривают в вакууме Остаток суспендируют в этилацетаге и нерастворившиес соли отфильтровывают. Фильтрат концентрируют и нанос т на препаративные пластинки из силикагел (20 х 20 х 0,2 см). Пластинки про вл ют в смеси хлороформа с ацетоном (95 : 5). Продукт соскабливают с препаративной пластинки и элюируют из силикагел этанолом. Продукт дополнительно очищают путем испарительной хроматографии на колонке (2,5 х 40 см) с силикагелем с применением смеси хлороформа с метанолом (98 : 2). Лиофилизаци дает 0,330 г 6-/циклопропилметиламино/-9- /(2R., 55)-5-/(п-метилбензоилокси)-метил/- тетрагидро-2-фурил/-9 Н -пурина в виде масла (выход 78%).
Вычислено, %: С 63,89; Н 6,45; N 1-6,48. С22Н25М5Оз 0,20Н20 0,ЗОС2Н60 Найдено, %: С 64,10; Н 6,24; N 16,29. ЯМР данные: 1Н ЯМР / 200 МГц, диме- тилсульфоксид-de/ б 8,28 и 8,25/ 2 синглега, 2Н, Н2 и На/, 7,75 и 7,25 / 2 мультиплета, 2И каждый, ООССНбН, - СНз/. 6,28/ дуплет дуплет, 1Н.Дж 6,5Гц,Дж4.0Гц. Н2 /4,42
/широкий, ЗН Нд , Hs n Hs, 3,35/ синглет, ЗН, М-СНз/. 3,22 / широкий 1Н, N-CH СНаСН2/, 2,54 /широкий, 2Н, Нз и Нз / 2,35 / синглет ЗН, СОССНбН.4 - СНз/, 2,24
/мультиплет, 2Н, Н2 и Н2 /, 0,85 и 0,70 / 2 мультиплета 2Н каждый, N-CH СН2СН2/.
Пример 52. 6-/Циклопропилметила- мино/-9-(2Д, 55)-5-/(бензоилокси)метил/- тетрагидро-2-фурил/-9Н -пурин.
6-/Циклопропилметиламино/-9-/(2Н,
55)-тетрагидро-5(оксиметил)-2-фурил/-9Н- пурин (0,310 г 1,1 ммол ), 4 диметиламино- пиридин (27мг, 0,2 ммол ) и триэтиламин (1,1 мл, 8 ммолей) раствор ют в 50 мл ацетонитрила . Добавл ют бензойный ангидрид (0,92 г, 4,0 ммол ) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Реакционную смесь быстро охлаждают метанолом и растворители выпаривают в
вакууме. Остаток суспендируют в зтилаце- тате и нерастворившиес соли удал ют фильтрованием. Фильтрат концентрируют и нанос т на препаративные пластинки из силикагел (20 х 20 х 0,2 см). Пластинки про вл ют в смеси хлороформа с ацетоном (80 : :20). Продукт соскабливают с препаративной пластинки и элюируют из силикагел этанолом. Продукт концентрируют, затем повторно нанос т на препаративные пластинки из силикагел (20 х 20 х 0,2 см). Эти пластинки про вл ют в смеси дихлорметана с метанолом (90 : 10). Продукт соскабливают с препаративной пластинки и элюируют из силикагел эталоном. Окончательна очистка достигаетс посредством испарительной хроматографии на колонке (2,5 х 90 см) с силикагелем с применением смеси дихлорметана с метанолом (90 : 10). Лиофилизаци дает 0,342 г 6-(циклопропилметиламино)-9/ (2R, )-5-/(бензоилокси)метил/-тетрагид- ро-2-фурил/-9Н-пурина в виде масла. (Выход 78%).
Вычислено, %: С 63,24; Н 5,96; N 17,56. C2iH23Ns03 0,ЗОН20
Найдено, %: С 63,23; Н 5,95; N 17,50.
ЯМР данные. 1Н ЯМР /200 МГц, диме- тилсульфоксид-do/ (58,29 и 8,25 / 2 синглета , 2Н, Н2 и Не/. 7,86, 7,61 и 7,47/ 3 мультиплета, 5Н общий, 00 CCeHs/, 6,29 /,
дуплет, дуплет, IH, Дж 6,5 Гц, Дж 4,0 Гц, Hi /. 4,45 /широкий, ЗН, Н4 , Hs11/. 3,35 /синглет, ЗН, М-СНз/, 3,20 /широкий, 1Н, N-CH, СН2 СН2/, 2,52 /широкий, 2Н, Нз и ,22 /широкий, 2Н, Н2 и Н2Ч/, 0,83 и
0,69 /2-мультиплета, 2Н каждый, N- СНСН2СН2/.
П р и м е р 53, 6-/Циклопропилметила- мино/-9-/(2В, 5)-тетрагидро-5-/(4-нитро- бензоил)окси/-метил-2-фурил/-9Н-пурин.
6-/Циклопропилметиламинопурин-9-/ (2R, 53)-тетрэгидро-5-(оксиметил)-2-фурил/- 9Н-пурин (0,3, 0,96 ммол ) растовор ют в 10 мл ацетонитрила. Добавл ют триэтиламин (4,4 ммол ) и 4-диметиламинопиридин (0,0102 г, 0,086 ммол ) в 10мл ацетонитрила и содержимое охлаждают до 0°С. п-Нитро- бензоилхлорид (0,27 г, 2 ммол ) раствор ют в 7 мл ацетонитрила и полученный раствор добавл ют капл ми, поддержива температуру реакционной смеси на уровне 0°С при перемешивании. Спуст 90 мин, растворитель удал ют и остаток раствор ют в метаноле . После добавлени 25 мл сухого силикагел растворитель удал ют в вакууме и содержимое хроматографируют на колонке (4,9 х 28 см), содержащей силикагель. Подвижную фазу представл ет смесь хлороформа и метанола (95 : 5, соотношение объемов ). Фракции, содержащие продукт, соедин ют и последующее разделение про- звод т на хроматроне, снабженном 4 мм пластинкой из силикагел . Подвижной фазой служила смесь гексана, ацетона (7 : 3, соотношение объемов). Фракции, содержащие продукт, соедин ют и после лиофилизации получают 0,311 г 6-/цикло- пропилметиламино/-9-/(, 58)-тетрагид- ро-5/(4-нитробензоил)-окси/-метил-2-фур- ил-9Н-пурина.
Вычислено, %: С 57,53; Н 5,06; N 19,17;
C21H22N605
Найдено, %: С 57,50; Н 5,10; N 19,22.
ЯМР данные: 1ЯМР /2000 МГц, диме- тилсульфоксид-de/ б 8,05 - 8,29 /мульти- плет, 4Н / 0,8, 0,4 и 8,00 / 2 синглет, 2Н, Н2 и Нв /, 6,27 / мультиплет, 1Н, 1Hi /; 4,56 / широкий, 1 Н, Н / / мультиплет, 2Н, Hg и Hs /, 3,30 / синглет, ЗН. N-СНз/, 3,17 /широкий, 1Н, циклопропил СН/, 2,6 / широкий , 2Н, На и 2,14 / мультиплет, 2Н, Нз и Нз /, 0,87 и 0,79/2 мультиплета, 4Н. циклопропил СН2СН2/.
Пример 54. 6-(Циклопропилметилами- но-9-Х2Д, )-тетрагидро-5-(п-аминобензол- метил-2-фурил)-9Н-пурин.
6-/Цикропропилметиламино/-9-(2Ц, 55)-тетрагидро-5/п-нитробензоил-2-фурил /9Н-пурин (0,203 г, 0,463 ммол ) смешивают 10% палладием на активированном угле(0,1 г) и 4-диметиламинопиридином (0,0102 г, 0,086 ммол ) в метаноле (150 мл). Восстановление производ т в атмосфере азота при давлении 9,4 кг/см2 (52 фунта/кв. дюйм) в течение 6 ч. После удалени твердых веществ фильтрат высушивают и остаток хроматографируют на силикагеле с подвижной фазой, представл ющей смесь хлороформа и метанола (95 : 5). Фракции, содержащие продукт, соедин ют и после удалени растворител получают 0.127 г 6-/циклопро- пи л метил амин 0/9-/(2 R, )-тетрагидро-5- /п-аминобензоилметил/2-фурил/-9Н-пур- ин, который анализируют с использованием 5 0,5 эквивалентов воды. Выход 66% Т.пл. 63°С. Тонкослойна хроматографи : Rf 0,69 (силикагель, хлороформ, метанол) 9 : 1 а о 6,4° (С - 0,5, диметилформамид); ультрафиолетовый анализ: Дтах(Јх 10) при 0 рН 7,275,5 нм (32,2).
Вычислено, %: С 60,42; Н 6,04; N 20,13.
C21H24N603 0.5Н20
Найдено, %: С 60,54; Н 6,06; N 20,01. Данные ЯМР: 1Н ЯМР / 200 МГц, диме5 тилсульфоксид-de/ б 8,28 и 8,26 /синглет, 2Н. Н2 и Н8/. 7,56 /дуплет, 2Н, чДж 8,6 Гц,0а, d /, 6,51 /дуплет. 2Н Дж ,0Ь, с /, 6,27 /мультиплет, 1Н, HI /, 5,96 /широкий , 2Н МН2 /, 4,32 /мультиплет ЗН, Щ , Hs
0 /, 3,36 /синглет, ЗН, N-СНз /3,2 /широкий, 1 Н, N-CH, СН2, СН2/, 2,48 /широкий, 2Н, Нз1 и 2,17 /мультиплет, 2Н Н2 и Н21 /, 0,86 и 0.71 /2-мультиплета, 2Н, каждый, N-CH. СН2, СН2/.
5 Пример 55. 6-/ Циклопропилметила- мино/-9-/(2Р, 55)-те.трагидро-5-//(аце- тил)окси/-метил/-2-фурил/-9 Н-пу рин.
6-/Циклопропилметиламино/-9-/(2Ј. 5,5)-тетрагидро-5-/оксиметил /-2-фурил /-9
0 Н-пурин (0,312 г, 1 ммоль), раствор ют в 50 мл ацетонитрила. Добавл ют триэтиламин (4,4 ммол ) и 4-диметиламинопиридин (0,1 ммол ) и реакционную смесь охлаждают в ванне со льдом. Добавл ют ацетилхлорид
5 (2,1 ммол ) и реакционную смесь довод т до комнатной температуры. После перемешивани в течение 4 часов дополнительно до- бавл ют триэтиламин (4,4 ммол ) и ацетилхлорид (2,1 ммол ). Реакционную
0 смесь перемешивают всю ночь при комнатной температуре. Добавл ют метанол (50 мл) и растворитель удал ют в вакууме. Остаток раствор ют в этилацетате и нерастворившиес соли удал ют фильтрованием.
5 Продукт отдел ют на хроматроне с применением смеси гексана с ацетоном (7 : 3) 4 мм пластинка из силикагел . Лиофилиэаци дает 0,174 г6-/циклопропилметиламино/-пурин- 9-/(2EL. 55)-тетрзгидро-5-//(ацетил)окси/0 метил/-2-фурил/-9Н-пуринз, который анализировали в виде 0,56 гидрата.
Вычислено, %: С 56,31; Н 6,53; N 20,52.
Ci6H2iN503 0,55Н20
Найдено, %: С 56,26; Н 6,50; N 20,50.
5ЯМР данные, 1Н ЯМР /200 МГц, диметилсульфоксид б/ (5 8,31 и 8,29 /2 синглета, 2Н, Н2 и На/, 6 ,29 /мультиплет, 1Н, Hi1 /. 4,32 /широкий, 1Н, Н4 /, 4,16 /мультиплет, 2Н. Hs1 и ,38 / синглет, ЗН. N-СНз/,
3,25 /широкий, IH, циклопропил СН /, 2,5 широкий 2Н, На и Н2 /, 2,14 /широкий, 2Н. Н3 и Нз 7 1,98 /синглет, ЗН, СНзСОО/, 0,88 и 0,75 /2 мультиплета, 4Н, циклопропил
СН2СН2/.
П р и м е р 56. 6-/Циклопропилметила- мино/-9-/(2Е. )-тетрагидро-5-/(фенилаце- тил)метил/-2-фурил/-9Н-пурин.
6-/Циклопропилметиламино/-9-(25, 55)-тетрагидро-5-/оксиметил/-2-фурил -9Н -пурин (0,5 г, 1,44 ммол ) раствор ют в 20 мл ацетонитрила, Добавл ют 4-диметиламино- пиридин (10,2 мг, 0,08 ммол ) и триэтиламин (620 мкл, 4.4 ммол ), после чего колбу быстро охлаждают в ванне со льдом в атмосфере азота. Фенилацетилхлорид (1,11 г, 7,2 ммол ) добавл ют в колбу капл ми в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 0,5 ч, Реакционную смесь быстро охлаждают метанолом и растворитель удал ют в вакууме, Остаток раствор ют в 2 мл смеси хлороформа с метанолом (9 : 1) и хроматографируют на колонке (5 х 15 см) с си лика гелем в примен емом растворителе. Содержащие продукт фракции дополнительно хромагог- рафируют на хроматографе с 2 мм пластинкой из силикагел и про вл ют смесью гексана с ацетоном (7 : 3). Лиофилизаци содержащей продукт фракции дает 0,459 г 6-/циклоп роли л метил амино/-9-/(2Н, 5S)- тетрагидро-5-/(фенилацетил)метил/-2-фур ил/-9Н-пурина в виде масла Выход 78%, т. пл. 25°С.
Вычислено, %: С 64,95; Н 6,18; N 17,19.
C22H25N503
Найдено, %: С 64,90; Н 6,20; N 17,10.
Данные ЯМР: 1ЯМР 200 МГц диме- тилсульфоксид-de / 3 8,29, 8,27 /синглет, 2Н, Н2 и На/. 7,23 /мультиплет, 5Н0/ 6,27 /мультиплет, 1 Н. HV/, 4,24 /мультиплет, ЗН, HV, Hs и Hs V, 3,61 /d. 2H, 1,5 Гц, СН2 /, 3,36 /S, ЗН, N-СНз/, 3.21/b. 1H, N- СНСН2СН2 /, 2,2 /о, 2,2 /Ь, 2Н. Нз1 и 2,12 /m, 2H, Н2 и Н2 /, 0,83 и 0,70 /2-муль- типлета 2Н каждый, N-CHCH.2CH2 /.
Основное преимущество соединений по изобретению в сравнении с прототипны- ми нуклеизодами, описанными в Bloorg. , состоит в их стабильности в крови, так соединени по изобретению обладают усиленным терапевтическим действием за счет благопри тных фармакологических свойств, обусловленных лучшей стабильностью . Например, хороша стабильность может увеличить продолжительность действи соединени , если соединение не преобразуетс сразу же после поступлени в кровь
Таким образом, это соединение может про вл ть свойственное ему терапевтическое действие в течение длительного периода времени. Помимо этого, длительное врем воздействи позвол ет определить схему приема лекарственного средства с
большими интервалами.
Повышенную стабильность соединений по изобретению демонстируют данные, приведенные в таблице, которые показывают , что содержание прототипного соединени б-метил-аминопурин-Э /З-О З1 -дидеоксирибофуранозида, описанного в Bioorg., указанном в качестве ссылки (пример 41), снижаетс до 61% за 2 часа. Все соединени по изобретению содержатс в количестве свыше 80% в течение 4 часов , что свидетельствует о существенно большей стабильности в цельной человеческой крови.
Данные испытаний полученных соединении по стабильности в крови,
Препараты цельной венозной человеческой крови с добавлением стрептомицина, пенициллина и D-глюкозы инкубируют при 37°С вместе с 30 мкМ концентраци ми соединений , подлежащих испытанию. Аликвот- ные пробы отбирают через 10 мин, 2 ч и 4 ч, и анализируют путем жидкостной хроматографии высокого давлени , причем, проба, изъ та через 10 минут, служит в качестве
контрольной пробы t 0. Результаты (выраженные в % вещества, оставшегос после 2 или 4-часовой инкубации) представлены в таблице.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени нуклеозидов общейформулы I:Ro -цт%ХЧ/ 1 N NН0-ф|где RI - водород или амино;R2 - С2 - Сб-алкокси- или метокси, замещенный Сз - Се-циклоалкилом, Сз - Се - циклоалкокси, пирролидинил, или аминогруппа , замещенна С2 - Се-алкилом, Сз - Сб-циклоалколом, или ди-замещенна Сз - Сб-Циклоалкил-С2 - Сб-алкилом или ди-Ci Сб-алкиломили их фармацевтических приемлемых сложных эфиров, отличающийс тем, что пуриновое основание формулы II ВН, где В - соответствующий остаток пурина,5 подвергают взаимодействию с 3-деоксити- мидином в апротонном пол рном растворителе в фосфатном буфере в присутствии смеси ферментов переноса пентозила, такой как смесь тимидинфосфорилазы и пури- нуклеозидфосфорилазы с последующим вслучае необходимости переводом полученного соединени общей формулы I в его фармацевтически приемлемый сложный эфир, обработкой соответствующим галоидангидридом. Приоритет по признакам: 09.04.87 при RI - водород или амино, R - Са Сб-алкокси-, аминогруппа, замещенна С2- Се-алкилом;29,05.87 при R2 - аминогруппа, замещенна Сз - Сб-циклоалкилом, или ди-заме- щенна Сз Се-Циклоалкил-С2 - Сб-алкилом. или ди-Ci - Сб-алкилом;30.09.87 при R2 - метокси, замещенный Сз - Сб-циклоалкилом, Сз - Се-циклоэлкок- си,пирролидинил.Доза в мкМ дл 50 % ингибировани разложени вируса иммунодефицита человека в клеточной структуре.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB878708512A GB8708512D0 (en) | 1987-04-09 | 1987-04-09 | Therapeutic nucleosides |
GB878712691A GB8712691D0 (en) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Therapeutic nucleosides |
GB878723013A GB8723013D0 (en) | 1987-09-30 | 1987-09-30 | Therapeutic nucleosides |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU1779256C true RU1779256C (ru) | 1992-11-30 |
Family
ID=27263377
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU884355537A RU1779256C (ru) | 1987-04-09 | 1988-04-08 | Способ получени нуклеозидов или их фармацевтически приемлемых сложных эфиров |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5068320A (ru) |
EP (1) | EP0286425B1 (ru) |
JP (1) | JP2763888B2 (ru) |
KR (1) | KR880012630A (ru) |
AP (1) | AP78A (ru) |
AT (1) | ATE116984T1 (ru) |
AU (1) | AU608590B2 (ru) |
CA (1) | CA1326237C (ru) |
CS (1) | CS274461B2 (ru) |
DE (1) | DE3852710T2 (ru) |
DK (1) | DK191688A (ru) |
FI (1) | FI87214C (ru) |
HU (1) | HU201954B (ru) |
IL (1) | IL86007A0 (ru) |
MC (1) | MC1915A1 (ru) |
NO (1) | NO171641C (ru) |
NZ (1) | NZ224189A (ru) |
PL (1) | PL154956B1 (ru) |
PT (1) | PT87191B (ru) |
RU (1) | RU1779256C (ru) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5185437A (en) * | 1987-04-09 | 1993-02-09 | Burroughs Wellcome Co. | Therapeutic nucleosides |
IL86007A0 (en) * | 1987-04-09 | 1988-09-30 | Wellcome Found | 6-substituted purine nucleosides,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
US5077280A (en) * | 1988-04-12 | 1991-12-31 | Brown University Research Foundation | Treatment of viral infections |
IE882585L (en) * | 1988-08-25 | 1990-02-25 | Prendergast Patrick T | Viral treatment system |
JPH02164881A (ja) * | 1988-10-24 | 1990-06-25 | Wellcome Found Ltd:The | 治療用ヌクレオシド化合物 |
WO1990006312A1 (de) * | 1988-11-29 | 1990-06-14 | Institut Für Molekularbiologie Und Analytik (Ima) Gmbh | 2', 3'-didesoxyribofuranoside und ein verfahren zu ihrer herstellung |
JP2619710B2 (ja) * | 1989-02-27 | 1997-06-11 | 日本製紙 株式会社 | 2′,3′−ジデオキシプリンヌクレオシド類の製造方法 |
US5585364A (en) * | 1989-04-13 | 1996-12-17 | British Technology Group Limited | Antiviral compounds |
US5013829A (en) * | 1989-04-26 | 1991-05-07 | University Of Iowa Research Foundation | Stable congener of 2',3'-dideoxyadenosine |
DE4020529A1 (de) * | 1989-09-12 | 1991-03-21 | Roxana Vasiloiu | Multifunktionelle(s) enzym(e) mit nucleosid-didesoxyribosyltransferase(n) und/oder nucleoside-desoxyribosyltransferasen(n) und/oder kinease- und/oder reduktase- und/oder desaminase- und/oder polymerase-aktivitaet |
JPH0637391B2 (ja) * | 1989-09-29 | 1994-05-18 | 日本製紙株式会社 | 抗エイズウイルス剤 |
PT95516A (pt) * | 1989-10-06 | 1991-08-14 | Wellcome Found | Processo para a preparacao de derivados de 2',3'-didesoxi nucleosidos 6-substituidos |
CA2075490A1 (en) * | 1990-02-09 | 1991-08-10 | Hiroaki Mitsuya | 6-halo-and 2-amino-6-halo-purine 2',3'-dideoxy nucleosides and their use as antiviral agents |
US5654286A (en) * | 1993-05-12 | 1997-08-05 | Hostetler; Karl Y. | Nucleotides for topical treatment of psoriasis, and methods for using same |
CN1117751C (zh) * | 1998-12-23 | 2003-08-13 | 希拉生物化学股份有限公司 | 抗病毒的核苷类似物 |
CN101220071B (zh) * | 2008-01-17 | 2011-04-06 | 南京长澳医药科技有限公司 | 稳定的6-甲氧基-2’,3’-双脱氧鸟嘌呤核苷及其制备方法和包含它的药物组合物 |
CN102234280B (zh) * | 2010-04-26 | 2014-01-08 | 北京大学 | D,l-鸟嘌呤核苷类似物及其制备方法和应用 |
CA2810928A1 (en) | 2010-09-22 | 2012-03-29 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted nucleotide analogs |
WO2012167053A1 (en) | 2011-06-01 | 2012-12-06 | Janus Biotherapeutics, Inc. | Novel immune system modulators |
WO2013096680A1 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted phosphorothioate nucleotide analogs |
WO2013142124A1 (en) | 2012-03-21 | 2013-09-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of a thiophosphoramidate nucleotide prodrug |
NZ630805A (en) | 2012-03-22 | 2016-01-29 | Alios Biopharma Inc | Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog |
CA2902375A1 (en) * | 2013-03-05 | 2014-09-12 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1573777A (en) * | 1977-11-03 | 1980-08-28 | Wellcome Found | 9-d-arabinonucleosides and an enzymatic process for their preparation |
EP0291633B1 (en) * | 1985-03-16 | 1992-11-04 | The Wellcome Foundation Limited | Use of 3'-azido-3'-deoxythymidine in the treatment or prophylaxis of human retroviral infections |
US4724232A (en) * | 1985-03-16 | 1988-02-09 | Burroughs Wellcome Co. | Treatment of human viral infections |
DE3689976T2 (de) * | 1985-05-15 | 1995-03-16 | Wellcome Found | Therapeutische Nucleoside und deren Herstellung. |
JPS62501777A (ja) * | 1985-08-26 | 1987-07-16 | アメリカ合衆国 | 2′,3′―ジデオキシシチジンを含有する抗htlv―3/lav剤 |
AU595832B2 (en) * | 1985-09-17 | 1990-04-12 | Wellcome Foundation Limited, The | Therapeutic nucleosides |
IT1203558B (it) * | 1986-05-20 | 1989-02-15 | Firestone Int Dev Spa | Metodo per la realizzazione di un pneumatico radiale di prima fase per veicoli |
EP0342203B1 (en) * | 1987-03-24 | 1994-07-06 | Nycomed Imaging As | 2',3' dideoxyribofuranoxide derivatives |
IL86007A0 (en) * | 1987-04-09 | 1988-09-30 | Wellcome Found | 6-substituted purine nucleosides,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
IL87149A (en) * | 1987-07-20 | 1994-05-30 | Merck & Co Inc | 6-Piperazinyl derivatives of purine and its 3- and 9-deaza isosteres, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
-
1988
- 1988-04-07 IL IL86007A patent/IL86007A0/xx unknown
- 1988-04-08 DK DK191688A patent/DK191688A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-04-08 PL PL1988271722A patent/PL154956B1/pl unknown
- 1988-04-08 CS CS242188A patent/CS274461B2/cs unknown
- 1988-04-08 NZ NZ224189A patent/NZ224189A/xx unknown
- 1988-04-08 AP APAP/P/1988/000086A patent/AP78A/en active
- 1988-04-08 DE DE3852710T patent/DE3852710T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-08 PT PT87191A patent/PT87191B/pt active IP Right Grant
- 1988-04-08 HU HU881784A patent/HU201954B/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-04-08 RU SU884355537A patent/RU1779256C/ru active
- 1988-04-08 CA CA000563634A patent/CA1326237C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-08 AU AU14444/88A patent/AU608590B2/en not_active Ceased
- 1988-04-08 KR KR1019880003964A patent/KR880012630A/ko not_active Application Discontinuation
- 1988-04-08 FI FI881651A patent/FI87214C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-04-08 AT AT88303158T patent/ATE116984T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-08 NO NO881537A patent/NO171641C/no unknown
- 1988-04-08 MC MC881970A patent/MC1915A1/xx unknown
- 1988-04-08 EP EP88303158A patent/EP0286425B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-08 JP JP63087034A patent/JP2763888B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-10-06 US US07/417,989 patent/US5068320A/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
j.Bioorg. Chem, 9/1/, 1983, с.50-59. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US5068320A (en) | 1991-11-26 |
IL86007A0 (en) | 1988-09-30 |
PT87191B (pt) | 1993-02-26 |
EP0286425A2 (en) | 1988-10-12 |
EP0286425A3 (en) | 1990-12-05 |
FI87214C (fi) | 1992-12-10 |
MC1915A1 (fr) | 1989-04-06 |
DK191688D0 (da) | 1988-04-08 |
AU1444488A (en) | 1988-10-13 |
CS274461B2 (en) | 1991-04-11 |
NZ224189A (en) | 1991-09-25 |
NO881537D0 (no) | 1988-04-08 |
PT87191A (pt) | 1988-05-01 |
AP8800086A0 (en) | 1988-02-01 |
EP0286425B1 (en) | 1995-01-11 |
DK191688A (da) | 1988-10-10 |
FI881651A0 (fi) | 1988-04-08 |
ATE116984T1 (de) | 1995-01-15 |
FI87214B (fi) | 1992-08-31 |
FI881651A (fi) | 1988-10-10 |
NO171641C (no) | 1993-04-14 |
PL271722A1 (en) | 1989-01-23 |
CA1326237C (en) | 1994-01-18 |
AP78A (en) | 1990-03-12 |
CS242188A2 (en) | 1990-09-12 |
DE3852710D1 (de) | 1995-02-23 |
NO171641B (no) | 1993-01-04 |
HUT48269A (en) | 1989-05-29 |
PL154956B1 (en) | 1991-10-31 |
DE3852710T2 (de) | 1995-05-24 |
JPS63267796A (ja) | 1988-11-04 |
JP2763888B2 (ja) | 1998-06-11 |
NO881537L (no) | 1988-10-10 |
KR880012630A (ko) | 1988-11-28 |
HU201954B (en) | 1991-01-28 |
AU608590B2 (en) | 1991-04-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU1779256C (ru) | Способ получени нуклеозидов или их фармацевтически приемлемых сложных эфиров | |
FI87783B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 2',3'-dideoxinukleosider | |
US5962684A (en) | Method of preparation of dideoxycarbocyclic nucleosides | |
CA2268703C (en) | Enantiomerically pure .beta.-d-dioxolane nucleosides with selective anti-hepatitis b virus activity | |
EP0254268B2 (de) | Fluorierte Nucleoside, ihre Herstellung und ihre pharmazeutische Verwendung gegen AIDS | |
FI89713C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktivt 2-(2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-9h(purin-9-yl)metoxi)etyl-l-valinat eller l-isoleucinat eller deras salt | |
DE3851179T2 (de) | Oxetanocin. | |
JPH02218667A (ja) | 抗ウイルス化合物 | |
US5185437A (en) | Therapeutic nucleosides | |
EP0285432B1 (en) | Therapeutic nucleosides | |
US5071983A (en) | Therapeutic nucleosides | |
EP2430036B1 (en) | Substituted 6-(benzylamino) purine riboside derivatives, use thereof and compositions containing these derivatives | |
HUT55028A (en) | Process for producing nukleosides and pharmaceutical compositions containing them | |
AU616914B2 (en) | Therapeutic necleosides | |
JPH01149797A (ja) | プリン誘導体 | |
EP0361831A1 (en) | Antiviral nucleoside combination | |
Kasnar et al. | Synthesis of 2′, 3′-Dideoxy-and 3′-Azido-2′, 3′-dideoxy-pyridazine Nucleosides as Potential Antiviral Agents | |
Burns et al. | Novel 6-alkoxypurine 2', 3'-dideoxynucleosides as inhibitors of the cytopathic effect of the human immunodeficiency virus | |
US20040058880A1 (en) | Aminoglycoside antibiotics as novel anti-infective agents | |
EP1057825A1 (en) | Isoflavane derivatives and immunopotentiating compositions containing the same | |
US5567703A (en) | Method for treating HIV infections with dideoxycarbocyclic nucleosides | |
NO881135L (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av 1-(3-azido-2,3-dideoksy-betad-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(1h)-pyrimidinon. | |
US5175292A (en) | Intermediates for the preparation of dideoxycarbocyclic nucleosides | |
US5126347A (en) | Isomeric dideoxynuclesides | |
WO1988009332A1 (en) | Therapeutic nucleosides |