PT1641787E - Dicetopiperazinas substituídas e sua utilização como antagonistas da oxitocina - Google Patents

Description

ΡΕ1641787 1 DESCRIÇÃO "DICETOPIPERAZINAS SUBSTITUÍDAS E SUA UTILIZAÇÃO COMO ANTAGONISTAS DA OXITOCINA"

Esta invenção relaciona-se com novos derivados de dicetopiperazina tendo uma potente e selectiva acção antagonista no receptor de oxitocina, com processos para a sua preparação, com composições farmacêuticas que os contêm e com a sua utilização em medicina. A hormona oxitocina é uma potente contractora do útero e é utilizada para a indução ou a aceleração do trabalho de parto. Também a densidade de receptores uterinos da oxitocina aumenta significativamente em >100 vezes durante a gravidez e tem um pico durante o parto (pré-termo e termo). O parto ou os nascimentos pré-termo (entre 24 e 37 semanas) causam cerca de 60% da mortalidade/morbilidade infantil e desta forma um composto que iniba as acções no útero da oxitocina por exemplo antagonistas da oxitocina, deverá ser útil para a prevenção ou o controlo do parto pré-termo. O Pedido de Patente Internacional PCT/EP02/14823 (WO 03/053443) descreve uma classe de derivados de diceto- 2 ΡΕ1641787 piperazina que apresentam um nível de actividade particularmente útil como antagonistas selectivos do receptor de oxitocina. Uma classe preferida de compostos nela descritos está representada pela fórmula (A)

O m

Tais compostos incluem aqueles em que, entre outros, Ri é 2-indanilo, R2 é alquilo (C3-C4), R3 é um grupo heteroarilo de 5 ou 6 membros ligado ao resto da molécula por via de um átomo de carbono no anel, R4 representa o grupo NR5R6 em que R5 e R6 representam cada um alquilo, por exemplo metilo, ou R5 e Rô conjuntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico saturado de 3 a 7 membros, heterociclo esse que pode conter um heteroátomo adicional seleccionado a partir de oxigénio.

Descobrimos agora um novo grupo de antagonistas selectivos do receptor de oxitocina que apresentam um perfil farmacocinético particularmente vantajoso. A presente invenção desta forma proporciona compostos com a fórmula (1) 3 ΡΕ1641787

em que Ri é 2-indanilo, R2 é 1-metilpropilo, R3 é 2-metil-1,3-oxazol-4-ilo e R4 e R5 conjuntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados representam morfolino. 0 grupo R2 contém um átomo de carbono assimétrico e a invenção inclui cada enantiómero e misturas deles incluindo o racemato.

Um composto preferido da invenção é o composto cuja preparação está especialmente descrita no Exemplo 1.

Os compostos com a fórmula (1) têm uma alta afinidade para os receptores de oxitocina no útero de ratos e de humanos e isto pode ser determinado utilizando procedimentos convencionais. Por exemplo, a afinidade para os receptores de oxitocina no útero de ratos pode ser determinada pelo procedimento de Pettibone et al, Drug Development Research 30. 129-142 (1993). Os compostos da invenção também apresentam uma alta afinidade no receptor humano de oxitocina recombinante em células CHO e isto pode ser convenientemente demonstrado utilizando o procedimento descrito por Wyatt et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2001 (11) p 1301-1305. 4 ΡΕ1641787

Os compostos da invenção também apresentam um perfil farmacocinético vantajoso incluindo boa biodisponi-bilidade e baixa depuração intrínseca quando administrados por via intravenosa ou oral associada a uma boa estabilidade a enzimas P450 incluindo a 2C9 e boa solubilidade aquosa.

Os compostos da invenção são portanto úteis no tratamento ou prevenção de doenças e/ou condições mediadas através da acção da oxitocina. Exemplos de tais doenças e/ou condições incluem o parto pré-termo, dismenorreia, endometriose e hiperplasia benigna da próstata.

Os compostos podem também ser úteis para retardar o parto antes de uma cesariana electiva ou da transferência da paciente para outro centro de cuidados, no tratamento da disfunção sexual, particularmente a ejaculação precoce, obesidade, perturbações alimentares, insuficiência cardíaca congestiva, hipertensão arterial, cirrose hepática, hipertensão nefrítica ou ocular, perturbação obsessivo-compulsiva e perturbações neuropsiquiátricas. Os compostos da invenção podem também ser úteis para melhorar as taxas de fertilidade em animais, por exemplo animais de criação. A invenção proporciona portanto a utilização de um composto com a fórmula (1) para utilização em terapia e em particular a utilização em medicina para antagonizar os efeitos da oxitocina sobre o receptor de oxitocina. 5 ΡΕ1641787 A invenção também proporciona a utilização de um composto com a fórmula (1) para o fabrico de um medicamento para antagonizar os efeitos da oxitocina sobre o receptor de oxitocina.

Também é descrito um método para antagonizar os efeitos da oxitocina sobre o receptor da oxitocina, compreendendo administrar a um paciente com necessidade disso uma quantidade antagonistica de um composto com a fórmula (1).

Será entendido pelos peritos na técnica que a referência aqui feita a tratamento se estende à profilaxia bem como ao tratamento de doenças ou sintomas já estabelecidos .

Será adicionalmente entendido que a quantidade de um composto da invenção necessária para utilização no tratamento variará com a natureza da condição a ser tratada, da via de administração e da idade e da condição do paciente e estará em última análise à descrição do médico assistente. Em geral, no entanto, as doses empregues para o tratamento de um humano adulto estarão tipicamente na gama de 2 mg a 800 mg por dia, dependendo da via de administração.

Desta forma, para administração parentérica, uma dose diária estará tipicamente na gama de 2 mg a 50 mg, 6 ΡΕ1641787 preferivelmente de 5 mg a 25 mg por dia. Para administração oral, uma dose diária estará tipicamente na gama de 10 mg a 800 mg, por exemplo de 20 mg a 150 mg por dia. A dose desejada pode ser apresentada de uma forma conveniente numa dose única ou como doses divididas administradas a intervalos apropriados, por exemplo como duas, três, quatro ou mais subdoses por dia.

Embora seja possivel que, para utilização em terapia, um composto da invenção possa ser administrado como o produto químico em bruto, é preferível apresentar o ingrediente activo na forma de uma formulação farmacêutica.

Desta forma, a invenção proporciona adicionalmente uma formulação farmacêutica compreendendo um composto com a fórmula (1) conjuntamente com um ou mais seus veículos farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, outros ingredientes terapêuticos e/ou profilácticos. 0(s) veículo (s) deverão ser "aceitáveis" no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e de não serem prejudiciais para o seu beneficiário.

As composições da invenção incluem aquelas numa forma especialmente formulada para administração oral, bucal, parentérica, por inalação ou insuflação, por implante ou administração rectal.

Os comprimidos e cápsulas para administração oral 7 ΡΕ1641787 podem conter excipientes convencionais tais como agentes agregantes, por exemplo xarope, acácia, gelatina, sorbitol, goma adragante, mucilagem de amido ou polivinilpirrolidona; enchimentos, por exemplo, lactose, açúcar, celulose micro-cristalina, amido de milho, fosfato de cálcio ou sorbitol; lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico, talco, polietilenoglicol ou sílica; desagre-gantes, por exemplo, amido de batata ou glicolato de amido sódico, ou agentes humectantes tais como laurilsulfato de sódio. Os comprimidos podem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na técnica. As preparações líquidas orais podem estar na forma de, por exemplo, suspensões, soluções ou emulsões aquosas ou oleosas, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentadas como um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo apropriado antes da utilização. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, por exemplo, xarope de sorbitol, metilcelulose, xarope de glu-cose/açúcar, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetilce-lulose, gel de estearato de alumínio ou gorduras hidroge-nadas alimentares; agentes emulsionantes, por exemplo, lecitina, mono-oleato de sorbitano ou acácia; veículos não aquosos (os quais podem incluir óleos alimentares), por exemplo, óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos, propilenoglicol ou álcool etílico; solubilizantes tais como surfactantes por exemplo polissorbatos ou outros agentes tais como as ciclodextrinas; e conservantes, por exemplo, p-hidroxibenzoatos de metilo ou de propilo ou ácido ascórbico. As composições podem também ser formuladas ΡΕ1641787 na forma de supositórios, por exemplo contendo bases para supositórios convencionais tais como manteiga de cacau ou outros glicéridos.

Para administração bucal, a composição pode tomar a forma de comprimidos ou de pastilhas formuladas de uma forma convencional. A composição de acordo com a invenção pode ser formulada para administração parentérica por injecção ou por infusão contínua. As formulações para injecção podem ser apresentadas na forma de dose unitária em ampolas, ou em contentores multidose com um conservante adicionado. As composições podem tomar formas tais como suspensões, soluções, ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos, e podem conter agentes de formulação tais como agentes de suspensão, estabilizantes e/ou de dispersão. Alternativamente, o ingrediente activo pode estar na forma de pó para reconstituição com um veículo apropriado, por exemplo água estéril livre de pirogéneos, antes da utilização.

As composições de acordo com a invenção podem conter entre 0,1-99% de ingrediente activo, convenientemente desde 1-50% para comprimidos e cápsulas e 3-50% para preparações líquidas. O perfil farmacocinético vantajoso dos compostos da invenção é facilmente demonstrado utilizando procedimentos convencionais para determinar propriedades farmaco-cinéticas de compostos biologicamente activos. 9 ΡΕ1641787

Os compostos com a fórmula (1) podem ser preparados por reacção do ácido carboxílico (11, em que Ri, R2 e R3 têm os significados definidos na fórmula (1))

ou de um seu derivado activado com a amina NHR4R5 em que NR4R5 tem o significado definido na fórmula (1) sob condições padronizadas para preparar amidas a partir de um ácido carboxílico ou de um seu anidrido misto e uma amina HNR4R5.

Desta forma a amida com a fórmula (1) pode ser preparada tratando o ácido carboxílico com a fórmula (11) com um agente activador tal como BOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris(dimetilamino)fosfónio), TBTU (te-trafluoroborato de 2-(líf-benzotriazol-l-il)-1,1,3, 3- tetra-metilurónio), B0P-C1 (cloreto bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fos-fínico) ou cloreto de oxalilo num solvente aprótico tal como diclorometano opcionalmente na presença de uma amina terciária tal como uma trietilamina e subsequente reacção do produto assim formado com a amina NHR4R5. ΡΕ1641787 10

Alternativamente, a amida com a fórmula (1) pode ser preparada fazendo reagir um anidrido misto derivado do ácido carboxilico (11) com a amina NHR4R5 num solvente aprótico tal como o tetra-hidrofurano. De forma conveniente, a reacção é levada a cabo a baixas temperaturas por exemplo a aproximadamente -78 °C. O anidrido misto é preparado, de forma conveniente, fazendo reagir o ácido carboxilico (11) com um cloreto ácido apropriado, por exemplo cloreto de pivavolilo, num solvente aprótico tal como o acetato de etilo na presença de uma base orgânica terciária tal como uma trialquilamina por exemplo trietilamina e a baixas temperaturas, por exemplo a aproximadamente -78 °C.

Os compostos com a fórmula (1) podem também ser preparados fazendo reagir um composto com a fórmula (111) 5 ·*

Í11.Í) o (em que Ri, R2 e R3 têm os significados definidos na fórmula (1) e R6 é 2-hidroxifenilo) com carbonildiimidazole ou tiocarbonildiimidazole num solvente apropriado tal como o diclorometano e subsequente reacção dos produtos assim formados com a amina HNR4R5. 11 ΡΕ1641787

Os compostos com a fórmula (11) podem ser preparados a partir de um composto com a fórmula (111) em que R6 é 2-hidroxifenilo por reacção com carbonildiimidazole ou tiocarbonildiimidazole num solvente apropriado tal como o diclorometano e subsequente reacção do produto assim formado com acetona aquosa.

Os compostos com a fórmula (111) em que Rê é 2-hidroxifenilo podem ser preparados a partir dos compostos correspondentes com a fórmula (111) em que R6 é um grupo 2-benziloxifenilo por hidrogenólise utilizando hidrogénio e um catalisador de paládio.

Os compostos com a fórmula (111) em que R6 é um grupo 2-benziloxifenilo são preparados de forma conveniente pelo processo aqui descrito abaixo. Assim, os compostos com a fórmula (III) podem ser preparados a partir do composto com a fórmula (IV)

(IV) em que Ri, R2 e R3 têm os significados definidos na fórmula (1), R7 é 2-benziloxifenilo e Rs é N-benziloxi-carbonilo pela reacção com hidrogénio na presença de um catalisador de paládio em carvão e ácido acético. Esta 12 ΡΕ1641787 reacção é levada a cabo de forma conveniente num solvente tal como o etanol ou o trifluoroetanol ou em misturas deles. 0 composto com a fórmula (IV) pode ser preparado fazendo reagir o cloridrato de aminoéster (V) , em que R2 tem o significado definido na fórmula (1)

GQjCHj m com o aldeído R3CHO (VI) em que R3 tem o significado definido na fórmula (1), na presença de trietilamina e num solvente tal como o trifluoroetanol e então fazendo reagir o produto resultante com o composto (VII) em que Ri tem o significado definido na fórmula (1) e R7 é benziloxicar-bonilo ;οςη

e o isocianeto CNR6 (VIII) em que R6 é um grupo 2-ben-ziloxifenilo, num solvente tal como 0 trifluoroetanol. 13 ΡΕ1641787 0 substituinte R2 é um grupo 1-metilpropilo e o composto com a fórmula (1) em que R2 é um grupo 1-metil-propilo tendo uma configuração (S) ou (R) pode ser preparado começando com o aminoéster (V) em que o grupo R2 tem a configuração (S) ou (R) requerida.

Os exemplos seguintes são ilustrativos, mas não limitando as formas de realização da presente invenção. Métodos gerais de purificação e analíticos. A HPLC analítica foi realizada com uma coluna Supelcosil LCABZ+PLUS (3,3 cm x 4,6 mm de Dl), eluindo com 0,1% de HCO2H e acetato de amónio a 0,01 M em água (solvente A), e 0,05% de HCO2H e 5% de água em acetonitrilo (solvente B), utilizando o seguinte gradiente de eluiçâo: 0-0,7 minutos 0% de B, 0,7-4,2 minutos 0%-100% de B, 4,2-5,3 minutos 100% de B, 5,3-5,5 minutos 0% de B a uma taxa de fluxo de 3 mL/minuto. O espectro de massa (MS) foi registado com um espectrómetro Fisons VG Platform utilizando modos de electropulverização positiva [(ES+va para dar iões moleculares MH+ e M(NH4)+] ou electropulverização negativa [(ES-va para dar iões moleculares (M-H)’] num espectrómetro de massa Micromass série 2 ou num espectrómetro de massa Waters ZQ. Os espectros de RMN de 1H foram registados utilizando um espectrómetro Bruker DPX 400 MHz utilizando tetrametilsilano como padrão externo. A cromatografia Biotage™ refere-se a purificação levada a 14 ΡΕ1641787 cabo utilizando equipamento comercializado pela Dyax Corporation (tanto o Flash 40i como o Flash 150i) e cartuxos pré-empacotados com KPSil. A autopreparação direcci-onada por massa refere-se a métodos em que o material foi purificado por cromatografia liquida de elevado rendimento numa coluna HPLCABZ+ de 5 ym (5 cm x 10 mm de Dl) com 0,1% de HC02H em água e 95% de MeCN, 5% de água (0,5% de HC02H) utilizando um gradiente de eluição a uma razão de fluxo de 8 mL minuto"1. O colector de fracções Gilson 202 foi disparado por uma VG Platform Mass Spectrometer na detecção da massa com interesse.

Frita hidrofóbica refere-se a tubos de filtragem comercializados por Whatman. SPE (extracçâo em fase sólida) refere-se à utilização de cartuxos comercializados por International Sorbent Technology Ltd. TLC (cromatografia em camada fina) refere-se à utilização de placas para TLC comercializadas por Merck revestidas com gel de sílica 60 F254. Oásis™ refere-se a cartuxos de extracçâo HLB Waters® Oásis™, comercializados por Waters Corporation®.

Intermediário 1 2-{(3R,SR)-3-(2,3-di-hidro-lfl-inden-2-il) -6-[(15)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}-N-(2-hidroxifenil)-2-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)acetamida. A uma solução vigorosamente agitada de cloridrato do éster metílico de (D)-aloisoleucina (5,0 g) em dicloro- 15 ΡΕ1641787 metano (150 mL) foi adicionada uma solução saturada de bicarbonato de sódio (150 mL) . A mistura resultante com duas fases foi separada utilizando frita hidrofóbica e a fase aquosa foi lavada duas vezes com diclorometano (50 mL) . A fase combinada de diclorometano foi diluida com metanol (200 mL) e adicionou-se ácido (2F)-[(benziloxicar-bonil)amino](2,3-di-hidro-ltf-inden-2-il)etanóico (14,64 g) e a mistura foi vigorosamente agitada durante 1 hr para efectuar a solução. A solução foi evaporada e o resíduo foi dissolvido numa mistura a 1:1 de trifluoroetanol/metanol (140 mL), e então foi-lhe adicionado 2-benziloxifeniliso-cinanida (9,43 g) seguida de 2-metil-4-formiloxazole (5,0 g) e a mistura reaccional foi agitada durante 4 dias à temperatura ambiente. A mistura foi evaporada e o resíduo foi dissolvido em etanol (500 mL) e foram-lhe adicionados paládio em carbono (4,0 g) e ácido acético (10 mL) e a mistura reaccional foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 3 horas. Foram-lhe adicionados mais paládio em carbono (4,0 g) e ácido acético (20 mL) e a mistura reaccional foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante mais 16 horas. A mistura foi filtrada através de Celite, foi evaporada e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo (300 mL) , lavado com água (2 x 100 mL), com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (2 x 100 mL) e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) e então passado através de frita hidrofóbica e evaporado. O produto em bruto foi purificado por cromato-grafia em coluna (sílica) eluindo com acetato de etilo (de 100% a 0%):metanol para dar 2-{(3R,6R)-3-(2,3-di-hidro-líf- 16 ΡΕ1641787 inden-2-il)-6-[(IS)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazi-nil}-N- (2-hidroxifenil)-2-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)aceta-mida (11,8 g 51%). HPLC Rt = 3,2 minutos; m/z [M+H]+ = 517.

Preparado de forma similar a partir de cloridrato do éster metilico de (D)-isoleucina.

Intermediário 2 2-{(3R, SR)-3-(2,3-di-hidro-lff-inden-2-il)-6-[(1R)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}-N-(2-hidroxifenil)-2-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)acetamida. HPLC Rt = 3,17 e 3,22 minutos; m/z [M+H]+ = 517. Intermediário 3 Ácido {(3R, 6R)-3-(2,3-di-hidro-lfl-inden-2-il)-6-[(15)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}(2-metil-l,3-oxazol-4-il)acético.

Adicionou-se carbonildiimidazole (352 mg, 1,6 equiv.) a uma solução de 2-{ (3R, 6R) -3- (2,3-di-hidro-líí-inden-2-il)-6-[(IS)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazinil} -N- (2-hidroxifenil)-2-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)acetamida (11,8 g secado previamente in vácuo sobre P4O10 durante 24 horas) em diclorometano (20 mL) e a solução foi deixada 17 ΡΕ1641787 à temperatura ambiente durante 16 hr. A mistura foi evaporada e o resíduo foi dissolvido em acetona (20 mL) e adicionou-se água (20 mL) , seguida da adição de HC1 a 2N (2 mL) e a mistura foi deixada à temperatura ambiente durante 4,5 hr. Esta foi extraída com acetato de etilo (2 x 30 mL) e a fase orgânica combinada foi secada por via de frita hidrofóbica e foi evaporada. O resíduo foi recolhido em acetato de etilo (30 mL) lavado com HC1 a 2N (2 x 10 mL) e então extraído com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (2 x 15 mL) . A fase aquosa combinada foi acidificada com HC1 a 2N e extraída com acetato de etilo (2 x 20 mL) e a fase orgânica combinada foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada por via de frita hidrofóbica e evaporada para dar ácido {(3R, 6R)-3-(2,3-di-hidro-li7-inden-2-il)-6-[(IS)-1-metil-propil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}(2-metil-l, 3-oxazol-4-il)acético (0,355 mg, 73%) na forma de um sólido branco. HPLC Rt = 3,0 e 3,1 minutos; m/z [M+H]+ = 426.

Preparado de forma similar a partir do Intermediário 2 . Ácido { (3R, 6R) -3- (2,3-di-hidro-li7-inden-2-il) -6-[(IR)-1-metilpropil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}(2-metil-l,3-oxazol-4-il)acético (Intermediário 4). HPLC Rt = 3,14 minutos; m/z [M+H]+ = 426. 18 ΡΕ1641787

Exemplo 1 (3R, 6R) -3- (2,3-di-hidro-lfl-inden-2-il) -1- [ (1R) -1-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-2-(4-morfolinil)-2-oxoetil]-6-[(15)-1-metilpropil]-2, 5-piperazinodiona.

Foram adicionados sequencialmente diisopropil-etilamina (100 mg, 3,3 equiv.), p-BOP (159 mg, 1,3 equiv.) e morfolina (102 yL, 5 equiv.) a uma solução de ácido {(3R, 6R)-3-(2,3-di-hidro-li7-inden-2-il)-6-[(15)-1-metil-propil]-2,5-dioxo-l-piperazinil}(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-acético (100 mg) em dimetilformamida (2 mL) e a mistura foi agitada durante 4 dias à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi diluída com diclorometano (10 mL) e foi-lhe adicionado HC1 a 2N (10 mL) . A fase orgânica foi separada, lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) secada por via de uma frita e evaporada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para dar (3R, 6R)-3-(2,3-di-hidro-lfí-inden-2-il) -1- [ (1R) -1- (2-metil-l, 3-oxazol-4-il) -2-(4-morfolinil)-2-oxoetil]-6-[(15)-1-metilpropil]-2,5-piperazinodiona (9 mg) na forma de um sólido incolor. HPLC Rt = 2,8 minutos; m/z [M+H]+ = 495. RMN de (CDCls) δ 7,72 (s, 1H) , 7,26-7,15 (m, 4H) , 6,93 (d, 1H) , 6,30 (s, 1H) , 4,18 (d, 1H), 4, 06 (dd, 1H) , 3,70 -3, 30 (m, 8H) , 3,17-3 ,10 (m , 3H) , 2,98- 2,86 (m, 1H) , 2,81 -2, 75 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 1,69-1 ,60 (m, 1H) , O LO \—1 -í, 43 (m, 1H), 1 ,05-0, 95 (m, 1H), 0,80-0, 75 (m, 6H)

Foi preparado de forma similar a partir do

Intermediário 4 e morfolina. 19 ΡΕ1641787

Exemplo 2 (3R, 6R) -3- (2,3-di-hidro-lff-inden-2-il) -l-{ (1R) -1-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-2-(4-morfolinil)-2-oxoetil}-6-[(IR)-1-metilpropil]-2, 5-piperazinodiona. HPLC Rt = 2,92 minutos; m/z [M+H]+ = 495.

Exemplo 3 (3.R, SR) -3- (2,3-di-hidro-lJ?-inden-2-il) -1- [ (li?) -1-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-2-(4-morfolinil)-2-oxoetil]-6-[(15)-1-metilpropil]-2,5-piperazinodiona.

Tratou-se ácido (2R)-[(benziloxicarbonil)amino] (2,3-di-hidro-ltf-inden-2-il)etanóico (35, 84 g, 0,110 mol) num balão de fundo redondo de 500 mL com 2,2,2-trifluo-roetanol (165 mL) seguido de metanol (55 mL) e trietilamina (11,13 g, 15,33 mL, 0,110 mmol); a suspensão espessa foi agitada durante 3,5 hrs até ser observada a dissolução. A solução foi então adicionada a cloridrato do éster metilico de (D)-aloisoleucina (20 g, 110 mol), num balão separado. A suspensão espessa foi agitada até se observar a dissolução. Foi então adicionado 2-metil-4-formiloxazole (12,24 g, 0,110 mmol) seguido de 2-benziloxifenilisocinanida (23,04 g, 0,110 mmol). A mistura reaccional castanho escuro foi então agitada a 20-25 °C durante 24 hrs. A solução foi 20 ΡΕ1641787 então concentrada até um volume de cerca de 130 mL por destilação a pressão reduzida. A solução foi então diluída com diclorometano (200 mL) e lavada com água (2 x 200 mL) . A fase orgânica foi então diluída com N-metilpirrolidinona (460 mL) e o diclorometano foi removido por agitação a 40 °C sob vácuo durante 2 hrs. Foi-lhe então adicionado ácido acético (46 mL) seguido de catalisador de paládio em carbono (69,0 g de Pd a 10% em peso, 57% de água, Johnson Matthey tipo 87L) e a mistura foi hidrogenada sob pressão de balão de hidrogénio com agitação rápida durante 2 hrs. A mistura reaccional foi então filtrada, lavada cuidadosamente com acetato de etilo (960 mL) e lavada com uma solução aquosa de cloreto de sódio a 3% p/v (960 mL) . A mistura bifásica foi filtrada e a fase orgânica foi separada e lavada com uma solução aquosa de cloreto de sódio a 3% p/v (2 x 960 mL) . A solução orgânica foi então diluída com acetato de etilo (200 mL) e concentrada por destilação à pressão atmosférica retirando-se por destilação 385 mL de solvente. A solução concentrada foi tratada a 20-25 °C com 1,1'-carbonildiimidazole (21,46 g, 0,132 mol) e foi agitada a 20-25 °C durante 1 hr, depois foi tratada com água (290 mL) e agitada rapidamente a 20-25 °C durante 24 hr. A mistura foi deixada em repouso e a fase de acetato de etilo foi separada e rejeitada. A fase aquosa foi lavada com acetato de etilo (290 mL) e a mistura foi deixada em repouso e a fase aquosa foi separada e acidificada até pH = 1-2 pela adição de ácido clorídrico concentrado (18 mL) . A fase aquosa foi então extraída para 21 ΡΕ1641787 acetato de etilo (290 mL e depois 145 mL). A solução combinada de acetato de etilo foi então concentrada por destilação à pressão atmosférica até um volume de cerca de 93 mL. Esta solução foi então diluida com tetra-hidrofurano (62 mL) e tratada com trietilamina (11,02 g, 15,20 mL, 0,109 mol) e arrefecida até -78 °C. A solução foi então tratada com cloreto de trimetilacetilo (4,81 g, 4,92 mL, 39, 90 mmol) e agitada a -78 °C durante 7 hr. A mistura reaccional foi então tratada com uma solução de morfolina (15,82 g, 15,83 mL, 0,181 mol) em tetra-hidrofurano (23 mL) e foi agitada a -78 °C durante 1 hr 20 mins antes de ser deixada aquecer até 20-25 °C. A solução foi então diluida com acetato de etilo (76 mL) e lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2 x 153 mL) seguida de água (153 mL) . A solução orgânica foi então diluida com acetato de etilo (54 mL) e destilada até um volume de 69 mL à pressão atmosférica. A solução foi então arrefecida até 20-25 °C altura a que ocorreu a cristalização do composto do titulo. A suspensão espessa foi então arrefecida adicionalmente até 0 °C antes do composto do titulo ser isolado por filtração e aspirado até à secura. Rendimento de 8,92 g.

Exemplos Farmacêuticos

Estes exemplos ilustram a preparação de formulações farmacêuticas representativas para administração contendo um composto da invenção. ΡΕ1641787 22 A. Formulação Parentérica

Ingredientes_

Composto da invenção 1 g

Álcool absoluto 5 mL

Propilenoglicol 25 mL 2-Hidroxipropil-p-ciclodextrina a 5% p/v em q.s.

ácido acético a 50 mM contendo 0,9% de cloreto 100 mL de sódio com o pH ajustado para 4,0 com hidróxido de sódio. O composto da invenção foi disperso no álcool e dissolvido no propilenoglicol com a ajuda de calor. O componente aquoso foi então adicionado com agitação para proporcionar 10 mL da solução I.V.. A solução pode ser esterilizada por meios apropriados tais como a filtração asséptica ou a autoclavagem.

Esta pode ser administrada por bólus ou diluída num saco de infusão contendo, por exemplo soro fisiológico normal. B. Cápsula para Administração Oral.

Ingredientes % p/p

Composto da invenção 25,0 Lactose 74,5 Estearato de magnésio 0,5 23 ΡΕ1641787

Os ingredientes acima foram misturados e distribuídos por cápsulas de gelatina dura contendo 100 mg cada uma. C. Comprimido para administração oral.

Ingredientes % p/p Composto da invenção 25,0 Lactose 35,0 Amido 34,5 Crospovidona 4,0 Estearato de magnésio 0,5

Os ingredientes acima, com a excepção do estearato de magnésio, foram combinados e misturados. O estearato de magnésio foi então adicionado e a formulação foi misturada. A formulação foi conformada em comprimidos com uma máquina apropriada para comprimidos.

Determinação da Actividade Antagonista de

Oxitocina.

Tampão da dosagem utilizado ao longo da dosagem: HEPES a 50 mM, MgCl2 a 10 mM, BSA a 0,125 mg/mL, pH ajustado para 7,4 com KOH. Foram preparadas membranas hOT-CHO a uma concentração de 0,3 mg de proteína/mL em tampão da dosagem. Os compostos do teste foram inicialmente dissolvidos em DMSO (até 10 mM) e diluídos em DMSO (Beckman 24 ΡΕ1641787

Biomek FX). Foi transferido 1 pL de composto para placas de dosagem de 384 poços pretas (NUNC) utilizando um Biomek FX. Foram adicionados 20 pL de Bodipy TMR Oxytocin (Perkin Elmer) a 1 nM em tampão da dosagem a todos os poços (Labsystems Multidrop) e depois foram adicionados 20 pL de membranas a todos os poços (Multidrop). As placas foram incubadas à temperatura ambiente durante 60 min. A polarização foi lida com um LJL Analyst (λΕχ = 535 nm, ÀEm = 580 nM, ADicróico = 555 nm) . Os dados foram ajustados a uma equação logística de 4 parâmetros. Foi estimado um Ki como ICso/5.

No teste acima, os compostos dos Exemplos 1 e 2 da invenção, tinham um valor de pKi de 9,0 e 8,2 respectivamente.

Os compostos da invenção são essencialmente não tóxicos a doses terapeuticamente activas. Desta forma o composto do Exemplo 1 tinha sido administrado a ratos a doses de 30 mg/kg durante 7 dias e não foram observados efeitos toxicológicos adversos.

Lisboa, 20 de Julho de 2007

Claims (9)

1. ΡΕ1641787 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto com a fórmula (1)

   em que Ri é 2-indanilo, R2 é 1-metilpropilo, R3 é 2-metil-1,3-oxazol-4-ilo e R4 e R5 conjuntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados representam morfolino.
2. 2. (3R,6R)-3-(2,3-di-hidro-li7-inden-2-il)-1-[(1R)-1-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-2-(4-morfolinil)-2-oxoetil]-6-[(1S)-1-metilpropil]-2,5-piperazinodiona.
3. 3. (3R,6R)-3-(2,3-di-hidro-lH-inden-2-il) -1-{(1R)-1-(2-metil-l,3-oxazol-4-il)-2-(4-morfolinil)-2-oxoetil}-6-[(1R)-1-metilpropil]-2,5-piperazinodiona.
4. 4. Composição farmacêutica compreendendo um composto com a fórmula (1) como reivindicado na reivindicação 1 conjuntamente com um ou mais veículos farmaceu-ticamente aceitáveis.
5. 5. Composto com a fórmula (1) como reivindicado na reivindicação 1 para utilização em terapia. 2 ΡΕ1641787
6. 6. Utilização de composto com a fórmula (1) como definido na reivindicação 1 para o fabrico de um medicamento para antagonizar os efeitos da oxitocina sobre o receptor de oxitocina.
7. 7. Utilização de composto com a fórmula (1) como definido na reivindicação 1 para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doenças seleccionadas a partir de: parto pré-termo, dismenorreia, endometriose, hiperplasia benigna da próstata, disfunção sexual, ejaculação precoce, obesidade, insuficiência cardíaca congestiva, hipertensão arterial, cirrose hepática, hipertensão nefrítica ou ocular, perturbação obsessivo-compulsiva e perturbações neuropsiquiátricas.
8. 8. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que as doenças são seleccionadas a partir de parto pré-termo e ejaculação precoce.
9. 9. Processo para a preparação de compostos com a fórmula (1) que compreende: (a) fazer reagir um composto com a fórmula (11)

   CO?H (11) 3 ΡΕ1641787 em que Ri, R2 e R3 têm os significados definidos na reivindicação 1 ou um seu anidrido misto, com a amina NHR4R5 em que R4 e R5 têm os significados definidos na fórmula (1) sob as condições padronizadas para preparar amidas a partir de um ácido carboxilico ou de um seu anidrido misto e uma amina. (b) fazer reagir um composto com a fórmula (111)

   em que Ri, R2 e R3 têm os significados definidos na reivindicação 1 e R6 é 2-hidroxifenilo com carbonildiimidazole ou tiocarbonildiimidazole num solvente apropriado e subsequente reacção do produto assim formado com a amina NHR4R5 em que R4 e R5 têm os significados definidos na fórmula (1). Lisboa, 20 de Julho de 2007