KR20230071879A

KR20230071879A - 미니향 과피 추출물을 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물

Info

Publication number: KR20230071879A
Application number: KR1020210157282A
Authority: KR
Inventors: 강희경; 강정일; 최윤경; 현진원; 박경순; 김상숙; 윤수현
Original assignee: 제주대학교 산학협력단; 대한민국(농촌진흥청장)
Priority date: 2021-11-16
Filing date: 2021-11-16
Publication date: 2023-05-24

Abstract

본 발명은 미니향 과피 추출물을 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학, 화장료 및 식품 조성물을 제공하는 것으로, 감귤을 미니향 (Citrus hybrid 'Minihyang')으로 한정함으로써, 타 감귤 대비 우수한 모유두 세포 증식능을 보유할 수 있다.

Description

미니향 과피 추출물을 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물{Composition for preventing, improving or treating hair loss symptoms comprising Minihyang peel extract}

본 발명은 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.

감귤류 과일은 우리나라에서 많이 생산되는 과일이며 제주도에는 토종 감귤인 진귤(Citrus sunki hortex Tanaka)을 비롯하여 다양한 품종의 감귤류 과일이 재배되고 있다. 감귤류 과일에 대해서 기존에는 비타민 C의 대명사로만 불리어 왔다. 하지만 감귤에는 몸에 이로운 다른 기능성 물질이 다양하게 있으며, 작은 분자량을 갖는 폴리페놀류 성분인 플라보노이드는 이러한 기능성 물질의 한 종류로서 감귤류 과일에는 60여 가지가 존재한다. 대부분의 플라보노이드 물질은 하이드록시기(-OH)를 가지며 이것이 항산화 등의 기능과 관련 있는 것으로 보인다.

한편, 인체의 모발은 약 10만∼15만 개 정도이며 "모낭"에서 형성된다. 모낭에는 유두가 있는데, 이 부위에는 작은 혈관이 분포되어 모발의 성장에 필요한 영양분을 공급하고 유두 위의 옆으로는 모발에 윤기를 주는 기름을 공급해 주는 지루샘이 있다. 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)를 거쳐서 성장하고 탈락한다. 이러한 주기는 3∼6년에 걸쳐 반복되는데, 일일 평균 50∼100 개의 모발이 정상적으로 탈락하게 된다. 일반적으로 탈모증이라 함은 이러한 주기 중에서 성장기 모발의 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 유지기 모발이 많아져 탈락하는 모발의 숫자가 비정상적으로 많아지는 것을 일컫는다.

탈모의 원인으로는 남성호르몬 작용 과잉설, 피지분비 과잉설, 혈액순환 불량설, 과산화물, 세균 등에 의한 두피기능 저하설, 유전적 요인, 노화, 스트레스 등이 논의되고 있다. 구체적으로, 남성호르몬의 일종인 테스토스테론(testosteron)은 5α-reductase라는 효소에 의해 디하이드로테스토스테론(dehydrotestoserone, DHT)으로 활성화된다. 이 DHT가 특정 수용체와 결합하고 탈모를 일으키는 단백질을 유도하여 탈모가 일어난다. 또한 이와 같은 기작에 의하여 피지를 과잉생성하기도 하며 여드름이나 지루성 피부염 등을 일으켜서 두피에 염증을 동반한 탈모가 나타나기도 한다.

현재 시중에는 수많은 탈모 방지 관련 제품들이 유통되고 있다. 특히, 미국 제약회사인 머크(Merck)사에서 나오는 "프로페시아(Propecia)"가 유명하다. 그러나 이는 가격이 비싸고 발기부전, 성욕감퇴 등의 부작용이 있는 것으로 알려져 있다.

또 다른 탈모 방지제로 "미노시딜(Minoxidil)"이 있는데, 기름기가 많고 가마 부분이 빠지는경우에만 어느 정도 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

이러한 화학 약물 요법의 부작용을 극복하기 위해 최근에는 천연물을 사용한 탈모 방지용 조성물이 다양하게 개발되고 있는 실정이며, 천연재료는 부작용이 적을 뿐만 아니라 소비자들의 호응이 높아 약품과 화장품의 원료로써 개발가치가 증가하고 있는 추세이다.

본 발명이 해결하고자 하는 과제는 미니향 과피 추출물을 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학, 화장료 및 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 실시예는 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물이다.

상기 감귤은 미니향 (Citrus hybrid 'Minihyang')일 수 있다.

상기 감귤 과피 추출물의 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물일 수 있다.

상기 알코올은 50 내지 90%(v/v)농도의 에탄올일 수 있다.

상기 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물은 모유두 세포 증식능을 가질 수 있다.

본 발명의 다른 실시예는 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방 또는 개선을 위한 화장료 조성물이다.

본 발명의 또 다른 실시예는 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물이다.

본 발명은 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함함으로써, 모유두 세포를 증식시킴으로써, 탈모를 방지, 개선 또는 치료하고 발모를 촉진시킬 수 있다.

또한, 감귤을 미니향 (Citrus hybrid 'Minihyang')으로 한정함으로써, 타 감귤 대비 우수한 모유두 세포 증식능을 보유할 수 있다.

도 1은 미니향 과피 추출물의 농도에 따른 모유두 세포 증식 결과를 나타낸 도면이다.

이하에서는 본 발명의 바람직한 실시예를 상세하게 설명한다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한, 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있음을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어인 "약학적으로 허용가능한" 및 "식품학적으로 허용가능한"이란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 활성 물질의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 것을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어인 "예방"는 본 발명의 조성물의 투여로 특정 질환의 증상을 억제하거나 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다

본 발명에서 사용되는 용어인 "치료"는 본 발명의 조성물의 투여로 특정 질환의 증상을 호전 또는 이롭게 변경시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어인 "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어인 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다. 이때, 개체는 본 발명의 조성물을 투여하여 특정 질환의 증상이 호전될 수 있는 질환을 가진 인간, 원숭이, 개, 염소, 돼지 또는 쥐 등 모든 동물을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어인 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜 또는 위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 이는 개체의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.

이하 본 발명을 자세히 설명한다.

본 발명에서 상기 감귤은 미니향 (Citrus hybrid 'Minihyang')일 수 있으며, 상기 감귤 과피 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

(1) 감귤 과피에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;

(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및

(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 감압 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.

상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 C1~C4의 저급 알코올이고, 더욱 더 바람직하게는 50~90%(v/v) 에탄올일 수 있고, 가장 바람직하게는 60~80%(v/v) 에탄올일 수 있다.

물과 에탄올은 극성이 상이하여, 각 극성에 따라 추출되는 유효성분이 달라질 수 있으며 최적의 발모 촉진 효과가 구현될 수 있도록 상기 에탄올의 농도를 적절히 제어할 수 있다. 이 때, 상기 에탄올은 농도가 90%(v/v) 초과이면 적정한 수율이 구현되지 않을 수 있고, 농도가 50%(v/v) 미만이면 탈모를 예방하고, 발모를 촉진하는 유효 성분이 충분하게 추출되지 않을 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 감귤 과피 중량의 1~50배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이고, 가장 바람직하게는 감귤 과피 3g 당 100ml의 용매를 첨가하여 추출할 수 있다.

추출온도는 10 내지 50℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결 건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

또한, 본 발명에 따른 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물은 모유두 세포 증식능을 가질 수 있으며, 이로부터 탈모를 방지하고, 모발 성장을 촉진할 수 있다.

모유두 세포는 모낭의 기저에 위치한 중배엽유래의 섬유아세포로서, 모낭의 모기질 세포와 상호작용을 통해 모발의 성장에서 중요한 역할을 한다.

본 발명에 따른 약학 조성물에서 유효성분의 함량은 조성물 중량 대비 0.00001 중량% 내지 99.99 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로, 0.0001 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있고, 더욱 구체적으로 0.002 중량% 내지 30 중량%를 포함할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분 외에 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 같은 첨가제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 통상의 방법에 의해 경구 투여를 위한 제형 또는 비경구 투여를 위한 제형으로 제제화될 수 있고, 제제화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여조제될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose), 락토오스(Lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라인간을 포함한 포유류에 경구 투여되거나 비경구 투여될 수 있으며, 비경구 투여 방식으로는 피부 외용, 복강내 주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식 등이 있다. 본 발명의 약학 조성물의 투여량은 약학적으로 유효한 양이라면 크게 제한되지 않으며, 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 약학 조성물의 통상적인 1일 투여량은 크게 제한되지 않으며, 예를 들어 유효성분을 기준으로 할 때 1 내지 3000 ㎍/㎏이고, 바람직하게는 10 내지 2000 ㎍/㎏이고 더 바람직하게는 20~1000 ㎍/㎏이다. 또한, 본 발명의 약학 조성물은 하루 1회 또는 수회로 나누어 투여될 수 있다. 본 발명에 따른 약학 조성물은 사용되는 양태를 고려할 때 크림, 젤, 패취, 분무제, 연구제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제와 같은 피부 외용 형태로 제조되는 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 화장료 조성물에서 유효성분의 함량은 조성물 중량 대비 0.00001 중량% 내지 99.99 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로, 0.0001 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있고, 더욱 구체적으로 0.002 중량% 내지 30 중량%를 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 사용되는 양태를 고려할 때 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어 에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 또는 헤어스프레이의 제형으로 제조되는 것이 바람직하다.

본 발명의 또 다른 실시예는 감귤 과피 추출물을 유효성분으로 탈모 증상의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물이다.

본 발명에 따른 식품 조성물에서 유효성분의 함량은 조성물 중량 대비 0.00001 중량% 내지 99.99 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로, 0.0001 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있고, 더욱 구체적으로 0.002 중량% 내지 30 중량%를 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐, 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 구체적인 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다. 본 발명의 식품 조성물은 유효성분 외에 식품학적으로 허용 가능한 담체, 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분들은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 향미제로는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 향미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 향미제 등을 사용할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 기술적 특징을 명확하게 예시하기 위한 것 일뿐, 본 발명의 보호범위를 한정하는 것은 아니다.

실시예 : 추출물 제조

하기 표 1의 감률의 과육 및 과피로 분리하여, 수세한 후, 상온에서 건조하고, 분쇄하여 조분쇄물을 각각 100g씩 수득하였다. 이후, 각 분쇄물 3g에 100ml의 70%(v/v) 에탄올을 침지한 후, 초음파 분산기에서 1시간 동안 방치하여 추출하였다. 이후, 상기 추출물을 미세 필터를 통해 여과하였으며 잔여 원료에 대해 동일한 방법으로 3회 반복 추출한 후 상온에서 냉각하였다. 상기 각 추출물은 30℃에서 감압 농축되었으며 동결 건조되어 고형으로 수득되었다. 수득된 파우더 형태의 추출물을 50%(v/v) 에탄올에 녹여 실험에 사용하였다.

구분	원료
C1 과육	하례조생 과육
C1 과피	하례조생 과피
C2 과육	윈터프린스 과육
C2 과피	윈터프린스 과피
C3 과육	사라향 과육
C3 과피	사라향 과피
C4 과육	무봉 과육
C4 과피	무봉 과피
C5 과육	미니향 과육
C5 과피	미니향 과피
C6 과육	탐나는봉 과육
C6 과피	탐나는봉 과피
C7 과육	황금하귤 과육
C7 과피	황금하귤 과피

실험예 : 모유두세포 증식 촉진 효과 평가

1. 실험방법

흰쥐 수염에서 분리된 모낭 유두 세포를 불멸화한 세포(Rat vibrissa immortalized dermal papilla cell: Filsell et al., 1994)를 100 units/mL의 페니실린(penicillin), 100 μg/mL 스트렙토마이신(streptomycin, Gibco Inc, NY, USA) 및 10% heat-inactivated fetal bovine serum(FBS; Gibco Inc, NY, USA)이 함유된 DMEM(Hyclone Inc, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ 항온기에서 배양하였으며, 3 일에 한 번씩 계대배양 하였다.

모유두 세포의 증식은 MTT assay를 이용하여 측정하였다. 모유두 세포 (1.0×10⁴ cells/mL)를 1% FBS를 포함한 DMEM 배지에 혼탁하여 96 well plate에 넣고 24시간 배양 후, 상기 실시예에서 제조된 시료를 1, 10 및 100 μg/mL의 농도로 처리하였다.

양성 대조군인 미녹시딜(Sigma, MO, USA)은 0.12 mM HCl로 녹여 10 μM의 농도로 처리하였고, 48 시간 동안 배양한 후 10μL의 WST dye (Daeil Lab Service, Seoul, Korea)을 첨가하고 3 시간 동안 반응시켰으며, 일반 대조군은 아무런 처리도 하지 않았다.

VERSAmax microplate reader (Molecular Devices, CA, USA)를 사용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료군에 대한 평균 흡광도 값을 구하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 증식정도를 조사하였고, 이에 대한 결과를 하기 표 2 에 나타내었고, 도 1에는 미니향 과피 추출물의 농도에 따른 모유두 세포 증식 결과를 나타내었다.

2. 통계처리

모든 측정결과는 평균 ± 표준편차로 나타내었으며, 통계학적 유의성 검정은 student's t test으로 검정하였으며, p-value가 0.05이하일 경우 유의성을 인정하였다. 통계처리는 Sigma Stat software Jandel Scientific Software(USA)를 사용하였다.

구분	모유두세포 증식 효능 (%)
구분	대조군	미녹시딜 (10uM)	1 ug/mL	10 ug/mL	100 ug/mL
C1 과육	100±2.2	106.7±2.2	92.6±3.7	92.2±5.4	86.8±6.8
C1 과피	100±10.3	110.7±7.9	90.1±12.3	87.6±11.8	96.9±9.6
C2 과육	100±2.2	106.7±2.2	93.2±5.8	90.1±5.4	97.4±7.4
C2 과피	100±3.8	108.7±4.8	91.0±5.1	91.0±7.5	97.0±6.8
C3 과육	100±2.2	106.7±2.2	86.0±5.3	87.6±3.6	98.2±2.6
C3 과피	100±3.8	108.7±4.8	91.4±2.6	85.8±8.4	89.4±7.5
C4 과육	100±5.4	110.7±5.6	92.4±3.7	90.5±5.6	99.7±7.7
C4 과피	100±3.8	108.7±4.8	96.0±7.7	89.9±3.6	95.1±6.7
C5 과육	100±10.3	110.7±7.9	98.6±10.5	92.4±5.2	98.1±7.0
C5 과피	100±4.3	107.7±6.6	84.8±6.5	91.1±6.8	110.5±9.0
C6 과육	100±10.3	110.7±7.9	88.3±5.9	85.8±5.2	90.6±9.0
C6 과피	100±4.3	107.7±6.6	83.8±4.4	86.0±3.0	89.1±6.8
C7 과육	100±8.0	109.6±6.6	96.6±7.2	92.2±5.3	95.0±6.5
C7 과피	100±8.0	109.6±6.6	96.6±7.2	95.1±4.3	90.5±3.9

상기 표 2 및 도 1을 참조하면, 과육보다 과피 추출물에서 우수한 모유두 세포 증식능을 나타내는 것을 확인할 수 있으며, 미니향 과피 70% EtOH 추출물을 1, 10 및 100 μg/mL의 농도로 처리하였을 때, 84.8±6.5%, 91.1±6.8% 및 110.5±9.0%(p<0.05)의 증식률을 나타내었고, 100 μg/mL의 농도에서 대조군에 비하여 모유두 세포의 성장을 유의하게 증가시켰으며, 양성대조군인 미녹시딜(10 μM)의 107.7±6.6% (p<0.05)%보다 우수한 모유두 세포 증식 효과를 나타낸 것을 확인할 수 있으며, 이로부터 과피 추출물이 탈모 증상을 개선, 예방 또는 치료할 수 있으며, 육모 촉진 효과가 매우 우수한 것으로 평가할 수 있다.

이와 같이, 본 발명은 미니향(Citrus hybrid 'Minihyang') 과피 추출물을 유효성분으로 포함함으로써, 타 감귤 대비 우수한 모유두 세포 증식능을 보유하고, 이에 따라 탈모 증상을 예방, 개선 또는 치료를 할 수 있으며, 발모 촉진 효과를 향상시킬 수 있다.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims

감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물.
제1항에 있어서,
상기 감귤은 미니향 (Citrus hybrid 'Minihyang')인 것을 특징으로 하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물.
제1항에 있어서,
상기 감귤 과피 추출물의 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물.
제4항에 있어서,
상기 알코올은 50 내지 90%(v/v)농도의 에탄올인 것을 특징으로 하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물.
제1항에 있어서,
상기 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물은 모유두 세포 증식능을 갖는 것을 특징으로 하는 탈모 증상의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 조성물.
감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방 또는 개선을 위한 화장료 조성물.
감귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 증상의 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.