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KR20220137630A - Il-7 단백질과 car-보유 면역 세포의 조합물로 고형 종양을 치료하는 방법 - Google Patents

Il-7 단백질과 car-보유 면역 세포의 조합물로 고형 종양을 치료하는 방법 Download PDF

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KR20220137630A
KR20220137630A KR1020227024195A KR20227024195A KR20220137630A KR 20220137630 A KR20220137630 A KR 20220137630A KR 1020227024195 A KR1020227024195 A KR 1020227024195A KR 20227024195 A KR20227024195 A KR 20227024195A KR 20220137630 A KR20220137630 A KR 20220137630A
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KR
South Korea
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glycine
protein
methionine
car
aspects
Prior art date
Application number
KR1020227024195A
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English (en)
Inventor
존 에프. 다이퍼시오
매튜 쿠퍼
양세환
병하 이
동훈 최
Original Assignee
워싱턴 유니버시티
네오이뮨텍, 인코퍼레이티드
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Filing date
Publication date
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Abstract

본 개시내용은 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포(예를 들어, CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR 세포) 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 IL-7 단백질을 사용하여 고형 종양을 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

IL-7 단백질과 CAR-보유 면역 세포의 조합물로 고형 종양을 치료하는 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 PCT 출원은 미국 가출원 제62/970,554호(출원일: 2020년 2월 5일)의 우선권 이익을 주장하며, 상기 기초출원은 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
EFS-웹(WEB)을 통해 전자적으로 제출된 서열목록에 대한 참조
본 출원과 함께 제출된 ASCII 텍스트 파일(파일명: 4241_014PC01_SequenceListing_ST25.txt; 크기: 83,475바이트; 작성일: 2021년 2월 3일)로 전자적으로 제출된 서열 목록의 내용은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
키메라 항원 수용체 T 세포(chimeric antigen receptor T cell: CAR-T) 면역요법은 점점 널리 알려지고 있다. T 세포는 항원 인식 모이어티 및 T 세포 활성화 도메인으로 구성된 융합 단백질인 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하도록 유전자 변형된다. CAR은 암 세포에서 과발현되는 항원을 인식하도록 설계된다. CAR-T는 B 세포 악성종양에 대한 예외적인 임상 효능을 나타내고, 2개의 요법인 KYMRIAH™(티사겐렉류셀(tisagenlecleucel), 노바티스사(Novartis)) 및 YESCARTA™(악시캅타겐 실로류셀(axicabtagene ciloleucel), 카이트/질레드사(Kite/Gilead))가 FDA에 의해서 승인되어 있다. 최근의 개시내용은 또한 T-세포 악성종양에 대한 CAR-T 요법의 반응을 확장시키고, 동종이계 반응성 없이 악성종양을 치료하기 위해서 공여자로부터의 사전 조작된 세포의 "오프-더-쉘프(off-the-shelf)" 사용을 가능하게 하는 데 있어서 가능성을 나타내었다.
그러나, 도전이 남아있다. CAR-T 면역요법은 수용자의 신체에서 조작된 세포의 성공적인 확장에 의해서 제한되고; 전형적으로 많은 세포의 주입이 요구된다. 추가로, 대상체 내에 주입된 CAR-T 세포의 지속의 손실이 관찰되어, 임상 효능의 손실 및 잠재적인 재발로 이어진다. 그리고 현재까지, CAR-T 요법은 조작된 세포를 포함하는 종양-침윤 림프구에 의한 접근을 방지하는 종양 미세환경으로 인해서 혈액 악성종양에 제한되어 왔다. 따라서, 암 환자, 특히 고형 종양을 갖는 환자에서 허용 가능한 안전성 프로파일 및 높은 효능을 갖는 새로운 치료 옵션에 대한 요구가 여전히 남아있다.
본 명세서에는 고형 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 고형 종양을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 종양 부피는 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 투여 후에 대상체에서 감소된다. 특정 양상에서, 종양 부피는 기준 종양 부피에 비해서 투여 후 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소된다.
일부 양상에서, 대상체의 생존 기간은 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존 기간)에 비해서 투여 후에 상기 대상체에서 증가된다. 특정 양상에서, 생존 기간은 기준 생존 기간에 비해서 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
또한 본 명세서에는 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 항-종양 활성을 향상시키는 방법이 개시되며, 이 방법은 대상체에게 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 항-종양 활성은 종양 부피의 감소, 생존 기간의 증가 또는 이들 둘 다를 포함한다. 일부 양상에서, 종양 부피는 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 상기 투여 후 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소된다. 일부 양상에서, 생존 기간은 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존 기간)에 비해서 투여 후 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
본 개시내용은 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 확장을 증가시키는 방법을 추가로 제공하며, 이 방법은 대상체에게 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 확장은 기준 확장(예를 들어, CAR-보유 면역 세포의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에서의 CAR-보유 면역 세포의 확장)에 비해서 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
본 명세서에는 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 생존 및/또는 지속을 증가시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다. 특정 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 생존 및/또는 지속은 기준 생존 및/또는 지속(예를 들어, CAR-보유 면역 세포의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에서의 CAR-보유 면역 세포의 생존 및/또는 지속)에 비해서 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법은 IL-7 단백질을 약 600㎍/㎏ 초과, 약 700㎍/㎏ 초과, 약 800㎍/㎏ 초과, 약 900㎍/㎏ 초과, 약 1,000㎍/㎏ 초과, 약 1,100㎍/㎏ 초과, 약 1,200㎍/㎏ 초과, 약 1,300㎍/㎏ 초과, 약 1,400㎍/㎏ 초과, 약 1,500㎍/㎏ 초과, 약 1,600㎍/㎏ 초과, 약 1,700㎍/㎏ 초과, 약 1,800㎍/㎏ 초과, 약 1,900㎍/㎏ 또는 약 2,000㎍/㎏ 초과의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,000㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,050㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,100㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,200㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏ 또는 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 800㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏ 또는 약 850㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 650㎍/㎏, 약 680㎍/㎏, 약 700㎍/㎏, 약 720㎍/㎏, 약 740㎍/㎏, 약 750㎍/㎏, 약 760㎍/㎏, 약 780㎍/㎏, 약 800㎍/㎏, 약 820㎍/㎏, 약 840㎍/㎏, 약 850㎍/㎏, 약 860㎍/㎏, 약 880㎍/㎏, 약 900㎍/㎏, 약 920㎍/㎏, 약 940㎍/㎏, 약 950㎍/㎏, 약 960㎍/㎏, 약 980㎍/㎏, 약 1000㎍/㎏, 약 1100㎍/㎏, 약 1200㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏, 약 1,400㎍/㎏, 약 1,440㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏, 약 1,600㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏, 약 1,800㎍/㎏, 약 1,900㎍/㎏ 또는 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 4주에 1회, 5주에 1회, 6주에 1회, 7주에 1회, 8주에 1회, 9주에 1회, 10주에 1회, 11주에 1회 또는 12주에 1회의 투여 빈도로 투여된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 100,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 50,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 5,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 2,500개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질 및 CAR-보유 면역 세포의 집단은 동시에 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 CAR-보유 면역 세포의 집단은 순차적으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 투여하기 전에 대상체에게 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 CAR-보유 면역 세포의 집단을 투여한 후에 대상체에게 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 비경구, 근육내, 피하, 안구, 정맥내, 복강내, 피부내, 안와내, 대뇌내, 두개내, 척수내, 심실내, 척추강내, 수조내(intracistemally), 피막내 또는 종양내로 대상체에게 투여된다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단은 정맥내로 투여된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법 붕 어느 하나에서 사용될 수 있는 IL-7 단백질은 야생형 IL-7 단백질(즉, 변형된 적이 있음)이 아니다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1 내지 10개의 아미노산 잔기로 이루어진 올리고펩타이드를 포함한다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드는 메티오닌(M), 글리신(G), 메티오닌-메티오닌(MM), 글리신-글리신(GG), 메티오닌-글리신(MG), 글리신-메티오닌(GM), 메티오닌-메티오닌-메티오닌(MMM), 메티오닌-메티오닌-글리신(MMG), 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM), 글리신-메티오닌-메티오닌(GMM), 메티오닌-글리신-글리신(MGG), 글리신-메티오닌-글리신(GMG), 글리신-글리신-메티오닌(GGM), 글리신-글리신-글리신(GGG), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MGGM)(서열번호 41), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(MMGG)(서열번호 42), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGMM)(서열번호 43), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MGMG)(서열번호 44), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMG)(서열번호 45), 글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGM)(서열번호 46), 메티오닌-글리신-글리신-글리신(MGGG)(서열번호 47), 글리신-메티오닌-글리신-글리신(GMGG)(서열번호 48), 글리신-글리신-메티오닌-글리신(GGMG)(서열번호 49), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(GGMMM)(서열번호 50), 글리신-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGGMM)(서열번호 51), 글리신-글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGGM)(서열번호 52), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(MGMMM)(서열번호 53), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(MGGMM)(서열번호 54), 메티오닌-글리신-글리신-글리신-메티오닌(MGGGM)(서열번호 55), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌(MMGMM)(서열번호 56), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MMGGM)(서열번호 57), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-글리신(MMGGG)(서열번호 58), 메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(MMMGM)(서열번호 59), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(MGMGM)(서열번호 60), 글리신-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(GMGMG)(서열번호 61), 글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMMG)(서열번호 62), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(GGMGM)(서열번호 63), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GGMMG)(서열번호 64), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(GMMGM)(서열번호 65), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(MGMMG)(서열번호 66), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(GMGGM)(서열번호 67), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MMGMG)(서열번호 68), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(GMMGG)(서열번호 69), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-글리신(GMGGG)(서열번호 70), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-글리신(GGMGG)(서열번호 71), 글리신-글리신-글리신-글리신-글리신(GGGGG)(서열번호 72) 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드는 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM)이다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 반감기 연장 모이어티를 포함한다. 특정 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 Fc, 알부민, 알부민-결합 폴리펩타이드, Pro/Ala/Ser(PAS), 인간 융모성 생식선 자극호르몬의 β 소단위의 C-말단 펩타이드(CTP), 폴리에틸렌 글라이콜(PEG), 아미노산의 구조화되지 않은 긴 친수성 서열(XTEN), 하이드록시에틸 전분(HES), 알부민-결합 소분자 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 Fc이다. 특정 양상에서, Fc는, 힌지 영역, CH2 도메인, 및 CH3 도메인을 포함하는 하이브리드 Fc이며, 여기서 힌지 영역은 인간 IgD 힌지 영역을 포함하고, CH2 도메인은 인간 IgD CH2 도메인의 일부 및 인간 IgG4 CH2 도메인의 일부를 포함하며, CH3 도메인은 인간 IgG4 CH3 도메인의 일부를 포함한다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 서열번호 1 내지 6 및 15 내지 25와 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 약 100%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 자가유래이다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 동종이계이다.
일부 양상에서, CAR은은 고형 종양 항원에 결합하는 항원-결합 도메인을 포함한다. 일부 양상에서, 고형 종양 항원은 메소텔린, MR1, 구아닐레이트 사이클라제 C(GC-C), 표피 성장 인자 수용체(EGFR 또는 erbB-1), 인간 표피 성장 인자 수용체 2(HER2 또는 erbB2), erbB-3, erbB-4, MUC-1, 흑색종-연관 콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸(melanoma-associated chondroitin sulfate proteoglycan: MCSP), 엽산염 수용체 1(folate receptor: FOLR1), CD4, CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, CD38, CD44, CD44v6, CD44v7/8, CD70, CD123, CD138, CD171, CEA, CSPG4, CXCR5, c-Met, HERV-엔벨로프 단백질, 에리오스틴(eriostin), Bigh3, SPARC, BCR, CD79, CD37, EGFRvIII, EGP2, EGP40, IGFr, L1CAM, AXL, 조직 인자(Tissue Factor: TF), CD74, EpCAM, EphA2, MRP3카드헤린 19(CDH19), 표피 성장 인자 2(HER2), 5T4, 8H9, αvβ6 인테그린, BCMA, B7-H3, B7-H6, CAIX, CA9, FAP, FBP, 태아 AchR, FRcc, GD2, GD3, 글리피칸-1(GPC1), 글리피칸-2(GPC2), 글리피칸-3(GPC3), HLA-A1+MAGE1, HLA-A1+NY-ESO-1, IL-13Rcc2, 루이스-Y, KDR, MCSP, Muc1, Muc16, NCAM, NKG2D 리간드, NY-ESO-1, PRAME, PSC1, PSCA, PSMA, ROR1, ROR2, SP17, 서바이빈, TAG72, TEM, 암배아 항원, HMW-MAA, VEGF, CLDN18.2 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, CAR은 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, CD19, TRAC, BCMA, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결합하는 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 CAR-T 세포, CAR-iNKT 세포 또는 이들 둘 다를 포함한다. 특정 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 CAR-T 세포이다. 일부 양상에서, CAR-T 세포는 게놈 편집된 CAR-T 세포이다. 일부 양상에서, 게놈 편집된 CAR-T 세포는 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, TRAC, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결실 또는 변형을 포함한다. 일부 양상에서, CAR-T 세포는 이중 CAR-T 세포 또는 탠덤(tandem) CAR-T 세포이다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 CAR-iNKT 세포이다. 일부 양상에서, CAR-iNKT 세포는 게놈 편집된 CAR-iNKT 세포이다. 일부 양상에서, 게놈 편집된 CAR-iNKT 세포는 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, TRAC, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결실 또는 변형을 포함한다. 일부 양상에서, CAR-iNKT 세포는 이중 CAR-iNKT 세포 또는 탠덤 CAR-iNKT 세포이다.
본 명세서에는 고형 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 고형 종양을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다. 또한 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 항-종양 활성을 향상시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 대상체에게 상기 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다. 본 개시내용은 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 확장을 증가시키는 방법을 제공하며, 대상체에게 상기 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다. 본 개시내용은 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 생존 및/또는 지속을 증가시키는 방법을 추가로 제공하며, 이 방법은 대상체에게 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 고형 종양은 중피종, 자궁경부암, 췌장암, 난소암, 편평세포암(예를 들어, 상피 편평세포암), 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종 및 폐의 편평 암종을 포함하는 폐암, 복막암, 간세포암, 위장암을 포함하는 위암, 췌장암, 교모세포종, 간암, 방광암, 간종(hepatoma), 유방암, 결장암, 직장암, 결장직장암, 자궁내막암 또는 자궁 암종, 침샘 암종, 신장암 또는 신암, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종, 두경부암 또는 이들의 임의의 조합으로부터 유래된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법은 적어도 1종의 추가 치료제를 대상체에게 투여하는 단계를 더 포함한다. 특정 양상에서, 추가 치료제는 면역 관문 저해제를 포함한다. 일부 양상에서, 면역 관문 저해제는 PD-1, PD-L1, LAG-3, Tim-3, CTLA-4 또는 이들의 조합의 저해제를 포함한다.
도 1A, 도 1B 및 도 1C는 췌장암의 마우스 모델에서, 메소텔린-특이적 CAR-T 세포 단독 또는 IL-7 단백질과의 조합물의 항-종양 효과를 나타낸 도면. 동물에게 GFP-표지된 AsPC-1 종양 세포를 주사하고, 그 다음 후속하여 하기 중 하나로 처리하였다: (i) 완충액 + 비히클 대조군("종양 단독"; 삼각형); (ii) IL-7 단백질 + 비히클 대조군("종양 + IL-7"; 역삼각형); (iii) 완충액 + CAR-T 세포("종양 + MesoCAR"; 충전된 원); 및 (iv) IL-7 + CAR-T 세포("종양 + MesoCAR + IL-7"; 빈 원). 도 1A 및 도 1B는 각각 생물발광 검정 및 캘리퍼에 의해서 측정된 바와 같은 종양 부담의 비교를 제공한 도면. 도 1C는 생존 데이터의 비교를 제공한 도면.
도 2A, 도 2B 및 도 2C는 췌장암의 마우스 모델에서, 메소텔린-특이적 CAR-T 세포 단독 또는 IL-7 단백질과의 조합물의 항-종양 효과를 나타낸 도면. 동물에게 GFP-표지된 AsPC-1 종양 세포를 주사하고, 그 다음 후속하여 하기 중 하나로 처리하였다: (i) 완충액 + 비히클 대조군("종양 단독"; 삼각형); (ii) IL-7 단백질 + 비히클 대조군("종양 + IL-7"; 역삼각형); (iii) 완충액 + CAR-T 세포("종양 + MesoCAR"; 충전된 원); 및 (iv) IL-7 + CAR-T 세포("종양 + MesoCAR + IL-7"; 빈 원). 도 2A 및 도 2B는 각각 생물발광 검정 및 캘리퍼에 의해서 측정된 바와 같은 종양 부담의 비교를 제공한 도면. 도 2C는 생존 데이터의 비교를 제공한 도면.
I. 정의
본 개시내용이 보다 용이하게 이해될 수 있도록, 먼저 특정 용어를 정의한다. 본 출원에서 사용되는 바와 같이, 본 명세서에서 달리 명시적으로 제공되는 경우를 제외하고, 다음 각각의 용어는 하기 제시된 의미를 가질 것이다. 추가적인 정의는 출원 전반에 걸쳐 제시되어 있다.
본 개시내용 전반에 걸쳐, 용어 "하나"의 실체는 하나 이상의 해당 실체를 말하며; 예를 들어, "항체"는 하나 이상의 항체를 나타내는 것으로 이해된다. 이와 같이, 용어 "하나", "하나 이상", 및 "적어도 하나"는 본 명세서에서 호환 가능하게 사용될 수 있다.
또한, 본 명세서에서 사용되는 "및/또는"은 다른 것을 포함하거나 포함하지 않는 2가지 명시된 특성 또는 성분 각각의 특정 개시로 간주되어야 한다. 따라서, 본 명세서에서 "A 및/또는 B"와 같은 어구에서 사용될 때 용어 "및/또는"은 "A 및 B", "A 또는 B", "A"(단독), 및 "B"(단독)을 포함하는 것으로 의도된다. 마찬가지로, "A, B, 및/또는 C"와 같은 어구에서 사용될 때 용어 "및/또는"은 A, B, 및 C; A, B 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A(단독); B(단독); 및 C(단독)의 양상 각각을 포함하는 것으로 의도된다.
본 명세서에서 용어 "포함하는"으로 양상이 기재된 곳은 어디든, "~로 이루어진" 및/또는 "~로 본질적으로 이루어진"의 관점에서 기재된 다른 유사한 양상이 또한 제공되는 것으로 이해된다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 개시내용과 관련된 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 예를 들어, 문헌[Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; 및 Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press]은 본 개시내용에서 사용된 많은 용어의 일반 사전을 숙련자에게 제공한다.
단위, 접두사, 및 기호는 국제단위계(
Figure pct00001
International de Unites; SI) 허용 형식으로 표시된다. 숫자 범위는 범위를 한정하는 숫자를 포함한다. 달리 표시되지 않는 한, 아미노산 서열은 아미노에서 카복시 방향으로 좌측에서 우측으로 기재된다. 본 명세서에서 제공되는 표제는, 명세서를 전체로서 참조하여 포함될 수 있는 개시내용의 다양한 양상을 제한하는 것이 아니다. 따라서, 바로 아래에 정의된 용어는 명세서 전문을 참조하여 보다 완전하게 정의된다.
용어 "약"은 본 명세서에서 대략, 거의, 주위 또는 그 영역을 의미하는 것으로 사용된다. 용어 "약"이 숫자 범위와 함께 사용되는 경우, 이는 제시된 수치의 위 및 아래로 경계를 확장함으로써 해당 범위를 수식한다. 일반적으로, 용어 "약"은, 예를 들어, 10% 위 또는 아래(더 크거나 더 작은)의 변화량만큼 언급된 값의 위 및 아래로 수치를 수식할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "투여하는"은 당업자에게 공지된 다양한 방법 및 전달 시스템 중 임의의 것을 사용하여, 치료제 또는 치료제를 포함하는 조성물을 대상체에게 물리적으로 도입하는 것을 지칭한다. 본 명세서에 기재된 치료제에 대한 다양한 투여 경로는 예를 들어, 주사 또는 주입에 의한, 정맥내, 복강내, 근육내, 피하, 척추 또는 다른 비경구 투여 경로를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 어구 "비경구 투여"는, 보통 주사에 의한, 장관(enteral) 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 의미하고, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 척추강내, 림프내, 병변내, 피막내, 안와내, 심장내, 피부내, 경기관, 기관내, 폐, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 심실내, 유리체내, 경막외, 및 흉골내 주사 및 주입뿐만 아니라 생체내 전기천공을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 대안적으로, 본 명세서에 기재된 치료제는 비경구 경로, 예컨대, 국소, 표피 또는 점막 투여 경로를 통해, 예를 들어, 비강내, 경구, 질, 직장, 설하 또는 국소로 투여될 수 있다. 투여는 또한, 예를 들어, 1회, 복수회, 및/또는 1회 이상의 장기간에 걸쳐 수행될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항원"은 임의의 천연 또는 합성 면역원성 물질, 예컨대, 단백질, 펩타이드 또는 합텐을 지칭한다. 특정 양상에서, 항원은 종양 항원을 포함한다. 용어 "종양 항원"은 정상적인 건강한 세포에 비해서 종양 세포에서 고유하게 또는 구별되게 발현되는 항원을 지칭한다. 일부 양상에서, 종양 항원은 고형 종양(즉, "고형 종양 항원")에서 발현된다.
대상체에 적용될 때 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "자연적으로 발생하는"은 대상체가 자연에서 발견될 수 있다는 사실을 지칭한다. 예를 들어, 자연의 공급원으로부터 단리될 수 있고 실험실에서 사람에 의해 의도적으로 변형되지 않은 유기체(바이러스를 포함함)에 존재하는 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드 서열은 자연적으로 발생한 것이다.
"폴리펩타이드"는 쇄의 길이에 대한 상한 없이 적어도 2개의 연속적으로 연결된 아미노산 잔기를 포함하는 쇄를 지칭한다. 단백질 내 하나 이상의 아미노산 잔기는, 글리코실화, 인산화 또는 이황화 결합 형성과 같은 변형을 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. "단백질"은 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 용어 "단백질" 및 "폴리펩타이드"는 호환 가능하게 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "핵산 분자"는 DNA 분자 및 RNA 분자를 포함하는 것으로 의도된다. 핵산 분자는 단일-가닥 또는 이중-가닥일 수 있으며, cDNA일 수 있다.
핵산은 전체 세포, 세포 용해물 또는 부분적으로 정제된 또는 실질적으로 순수한 형태로 존재할 수 있다. 핵산은 알칼리/SDS 처리, CsCl 밴딩, 컬럼 크로마토그래피, 아가로스 겔 전기영동 및 다른 당업계에 널리 공지된 기법을 포함한 표준 기법에 의해, 다른 세포 성분 또는 다른 오염물질, 예를 들어, 다른 세포 핵산(예를 들어, 염색체의 다른 부분) 또는 단백질로부터 정제될 때 "단리"되거나 "실질적으로 순수하게 된다". 문헌 [F. Ausubel, et al., ed. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York (1987)]을 참조한다.
핵산, 예를 들어, cDNA는 유전자 서열을 제공하기 위해 표준 기법에 따라 돌연변이될 수 있다. 암호 서열의 경우, 이러한 돌연변이는 원하는 대로 아미노산 서열에 영향을 미칠 수 있다. 구체적으로, 본 명세서에 기재된 천연 V, D, J, 불변, 스위치 및 다른 이와 같은 서열과 실질적으로 상동성이거나 이로부터 유래된 DNA 서열이 고려된다(여기서 "유래된"은 서열이 또 다른 서열과 동일하거나 이로부터 변형됨을 나타냄).
"보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기를 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 치환하는 것을 지칭한다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 패밀리는 당업계에 정의되어 있다. 이들 패밀리는 염기성 측쇄(예를 들어, 리신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 하전되지 않은 극성 측쇄(예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 타이로신, 시스테인, 트립토판), 비극성 측쇄(예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌), 베타-분지형 측쇄(예를 들어, 트레오닌, 발린, 아이소류신) 및 방향족 측쇄(예를 들어, 타이로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 포함한다. 특정 양상에서, 항체에서 예상되는 비필수 아미노산 잔기는 동일한 측쇄 패밀리로부터의 또 다른 아미노산 잔기로 대체된다. 항원 결합을 제거하지 않는 뉴클레오타이드 및 아미노산 보존적 치환을 확인하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Brummell et al., Biochem. 32: 1180-1187 (1993); Kobayashi et al. Protein Eng. 12(10):879-884 (1999); 및 Burks et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:412-417 (1997)] 참조).
핵산의 경우, 용어 "실질적 상동성"은 적어도 약 80%의 뉴클레오타이드, 적어도 약 90% 내지 95% 또는 적어도 약 98% 내지 99.5%의 뉴클레오타이드에서 적절한 뉴클레오타이드 삽입 또는 결실이 있는 2개의 핵산 또는 이의 지정된 서열이 최적으로 정렬되고 비교될 때, 동일함을 나타낸다. 대안적으로, 분절이 선택적인 혼성화 조건 하에서 가닥의 보체와 혼성화할 때 실질적인 상동성이 존재한다.
폴리펩타이드의 경우, 용어 "실질적 상동성"은 적어도 약 80%의 아미노산, 적어도 약 90% 내지 95% 또는 적어도 약 98% 내지 99.5%의 아미노산에서 적절한 아미노산 삽입 또는 결실이 있는 2개의 폴리펩타이드 또는 이의 지정된 서열이 최적으로 정렬되고 비교될 때, 동일함을 나타낸다.
2개 서열 사이의 동일성 백분율은 2개 서열의 최적 정렬을 위해 도입되어야 하는 갭의 수, 및 각각의 갭의 길이를 고려하여 서열에 의해 공유되는 동일한 위치의 수의 함수이다(즉, 동일성 % = 동일한 위치의 #/총 위치의 #Х100). 서열의 비교 및 2개 서열 사이의 동일성 백분율의 결정은, 예를 들어, 하기의 비제한적 실시예에 기재된 바와 같은 수학적 알고리즘을 사용하여 달성될 수 있다.
2개 뉴클레오타이드 서열 사이의 동일성 백분율은 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램(worldwideweb.gcg.com에서 이용 가능함)을 사용하여, NWSgapdna.CMP 매트릭스 및 갭 가중치 40, 50, 60, 70 또는 80 및 길이 가중치 1, 2, 3, 4, 5 또는 6을 사용함으로써 결정될 수 있다. 2개의 뉴클레오타이드 또는 아미노산 서열 사이의 동일성 백분율은 ALIGN 프로그램(버전 2.0)에 통합된 문헌[E. Meyers and W. Miller, CABIOS, 4: 11-17 (1989)]의 알고리즘을 사용하여, PAM120 가중치 잔기 표, 갭 길이 패널티 12 및 갭 페널티 4를 사용함으로써 결정될 수 있다. 추가적으로, 2개 아미노산 서열 사이의 동일성 백분율은 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램(worldwideweb.gcg.com에서 이용 가능함)에 통합된 문헌[Needleman and Wunsch, J. Mol. Biol. (48):444-453 (1970)] 알고리즘을 사용하여, Blossum 62 매트릭스 또는 PAM250 매트릭스, 및 갭 가중치 16, 14, 12, 10, 8, 6 또는 4 및 길이 가중치 1, 2, 3, 4, 5 또는 6을 사용함으로써 결정될 수 있다.
본 명세서에 기재된 핵산 및 단백질 서열은, 예를 들어, 관련 서열을 확인하기 위해 공공 데이터베이스에 대한 검색을 수행하기 위한 "질의 서열(query sequence)"로서 추가로 사용될 수 있다. 이와 같은 검색은 문헌[Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10]의 NBLAST(NBLAST) 및 XBLAST(XBLAST)(버전 2.0) 프로그램을 사용하여 수행될 수 있다. BLAST 뉴클레오타이드 검색은 본 명세서에 기재된 핵산 분자에 대해 상동성인 뉴클레오타이드 서열을 얻기 위해 NBLAST 프로그램, 스코어 = 100, 문자길이 = 12를 이용하여 수행될 수 있다. BLAST 단백질 검색은 본 명세서에 기재된 단백질 분자에 대해 상동성인 아미노산 서열을 얻기 위해 XBLAST 프로그램, 스코어 = 50, 문자길이 = 3을 이용하여 수행될 수 있다. 비교 목적을 위해 갭이 도입된 정렬을 얻기 위해, 문헌[Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25(17):3389-3402]에 기재된 바와 같이 Gapped BLAST를 이용할 수 있다. BLAST 및 Gapped BLAST 프로그램을 이용할 때, 각각의 프로그램(예를 들어, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 매개변수가 사용될 수 있다. 웹 사이트[worldwideweb.ncbi.nlm.nih.gov]를 참조한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "효과기 기능"은 분화된 면역 세포의 전문적인 기능을 지칭한다. T 세포의 효과기 기능은 예를 들어, 사이토카인의 분비를 비롯한 헬퍼 활성 또는 세포용해 활성일 수 있다. 미경험, 기억 또는 기억-유형 T 세포에서 효과기 기능은 또한 항원-의존적 증식을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "동족살해"는 CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR 세포가 CAR-T 또는 iNKT-CAR 세포의 표적과 동일한 키메라 항원 수용체를 포함하는 또 다른 CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR 세포의 표적이 되어, 이에 의해서 사멸될 때 일어나는 과정을 의미하는데, 그 이유는 표적화된 세포가 두 세포 상의 키메라 항원 수용체에 의해서 특이적으로 인식되는 항원을 발현하기 때문이다. 키메라 항원 수용체가 특이적으로 결합하는 항원이 결핍된 키메라 항원 수용체를 포함하는 CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR은 "동족살해-내성"일 것이다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "면역 세포"는 면역 반응에서 역할을 하는 세포를 지칭한다. 따라서, 일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 면역 세포는 고형 종양의 치료 및/또는 근절에 역할을 할 수 있는(예를 들어, 항-종양 활성을 보유하는) 세포이다. 일부 양상에서, 면역 세포는 림프구, 호중구, 단핵구, 대식세포, 수지상 세포 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다. 특정 양상에서, 림프구는 T 세포, 종양-침윤 림프구(TIL), 림포카인-활성화 킬러 세포, 자연 킬러 T(NKT) 세포 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다. 일부 양상에서, 림프구는 T 세포이다. 일부 양상에서, 림프구는 NKT 세포(예를 들어, 불변 NKT 세포)이다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용에 유용한 면역 세포는 변형된 적이 있다(즉, 변형된 면역 세포). 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "변형된 면역 세포"는 세포가 상응하는 비변형된 면역 세포에 존재하지 않는 하나 이상의 특성을 나타내도록, (예를 들어, 유전적으로) 변경된 적이 있는 면역 세포를 지칭한다. 예를 들어, 일부 양상에서, 면역 세포는 본 명세서에 개시된 키메라 항원 수용체(예를 들어, CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR 세포)를 발현하도록 변형된 적이 있다. 일부 양상에서, 면역 세포는 트랜스제닉 T-세포 수용체를 발현하도록 조작된 적이 있다(예를 들어, 조작된 T 세포). 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "트랜스제닉 T-세포 수용체"는 TCR이 상응하는 비변형된 TCR과 하나 이상의 특성이 상이하도록, 변형된 적이 있는 T-세포 수용체(TCR)를 지칭한다. 예를 들어, 일부 양상에서, 트랜스제닉 T-세포 수용체는 TCR을 자연적으로 발현하지 않는 면역 세포 상에서 발현된다(예를 들어, 항원 A에 특이적인 트랜스제닉 TCR은 항원 B에 특이적인 T 세포에서 발현된다). 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR은 표적 항원(예를 들어, 고형 종양 항원)에 목적하는 친화도로 특이적으로 결합하도록 조작된 적이 있다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR은 표적 항원에 대해서 목적하는 친화도를 갖고, TCR을 자연적으로 발현하지 않는 면역 세포 상에서 발현되는 TCR을 지칭할 수 있다. 추가로, 면역 세포에 수행될 수 있는 변형은 본 개시내용 다른 곳에 제공되어 있다(예를 들어, 동족살해-내성).
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "벡터"는 연결된 또 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자를 지칭하는 것으로 의도된다. 벡터의 한 가지 유형은 "플라스미드"이며, 이는 추가적인 DNA 분절이 결찰될 수 있는 원형의 이중 가닥 DNA 루프를 지칭한다. 벡터의 또 다른 유형은 바이러스 벡터이며, 여기서 추가적인 DNA 분절은 바이러스 게놈 내에 결찰될 수 있다. 특정 벡터는 도입될 숙주 세포에서 자율 복제를 할 수 있다(예를 들어, 박테리아 복제 기점 및 에피솜 포유동물 벡터를 갖는 박테리아 벡터). 다른 벡터(예를 들어, 비-에피솜 포유동물 벡터)는 숙주 세포 내로 도입 시 숙주 세포의 게놈 내에 통합될 수 있으며, 이에 의해 숙주 게놈과 함께 복제된다. 더욱이, 특정 벡터는 작동적으로 연결된 유전자의 발현을 유도할 수 있다. 이와 같은 벡터는 본 명세서에서 "재조합 발현 벡터"(또는 간단히 "발현 벡터")로 지칭된다. 일반적으로, 재조합 DNA 기법에서 유용한 발현 벡터는 종종 플라스미드 형태이다. 플라스미드가 가장 일반적으로 사용되는 벡터 형태이므로, 본 명세서에서 "플라스미드" 및 "벡터"는 호환 가능하게 사용될 수 있다. 그러나, 또한 동등한 기능을 제공하는 다른 형태의 발현 벡터, 예컨대, 바이러스 벡터(예를 들어, 복제 결함 레트로바이러스, 아데노바이러스 및 아데노-연관 바이러스)도 포함된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "재조합 숙주 세포"(또는 간단히 "숙주 세포")는 세포에 자연적으로 존재하지 않는 핵산을 포함하는 세포를 말하는 것으로 의도되며, 재조합 발현 벡터가 도입된 세포일 수 있다. 이와 같은 용어는 특정 대상 세포뿐만 아니라 이와 같은 세포의 자손을 말하는 것으로 의도됨이 이해되어야 한다. 특정 변형은 돌연변이 또는 환경적 영향으로 인해 다음 세대에서 일어날 수 있기 때문에, 이와 같은 자손은 실제로 모세포와 동일할 수 없지만 여전히 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "숙주 세포"의 범주 내에 포함된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "연결된"은 2개 이상의 분자의 회합을 지칭한다. 연결은 공유 또는 비-공유일 수 있다. 연결은 또한 유전적일 수 있다(즉, 재조합적으로 융합됨). 이와 같은 연결은 매우 다양한 당업계에 인식된 기법, 예컨대, 화학적 접합 및 재조합 단백질 생성을 사용하여 달성될 수 있다.
"암"은 체내에서 비정상적인 세포의 제어되지 않는 성장을 특징으로 하는 다양한 질환의 광범위한 그룹을 지칭한다. 조절되지 않는 세포 분열 및 성장은 주변 조직을 침범하고 또한 림프계 또는 혈류를 통해 신체의 먼 부위로 전이할 수 있는 악성 종양의 형성을 초래한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 "암"은 원발성, 전이성 및 재발성 암을 지칭한다. 본 개시내용으로 치료될 수 있는 암은 고형 종양과 연관된 암이다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "고형 종양"은 낭포(cyst) 또는 액체 영역을 보통 함유하지 않은 비정상적인 조직 덩어리를 지칭한다. 상이한 유형의 고형 종양은 이들을 형성하는 특별한 세포로부터 명명되며, 예를 들어, 육종은 결합 조직 세포(예를 들어, 연골 또는 지방)로부터 형성되고, 암종은 상피 조직 세포(예를 들어, 유방, 결장 또는 췌장)로부터 형성되고, 림프종은 림프 조직 세포(예를 들어, 림프절, 비장 또는 흉선)로부터 형성된다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용은 모든 유형의 고형 종양을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일부 양상에서, 암은 원발성, 전이성 및/또는 재발성 암을 포함한다.
용어 "융합 단백질"은 원래 별개의 단백질에 대해 암호화된 2개 이상의 유전자의 결합을 통해 생성된 단백질을 지칭한다. 이 융합 유전자의 번역은 원래 단백질 각각으로부터 유래된 기능적 특성을 갖는 단일 폴리펩타이드 또는 다중 폴리펩타이드를 생성한다. 일부 양상에서, 2개 이상의 유전자는 이의 뉴클레오타이드 서열에 치환, 결실, 및/또는 추가를 포함할 수 있다.
"Fc 수용체" 또는 "FcR"은 면역글로불린의 Fc 영역에 결합하는 수용체이다. IgG 항체에 결합하는 FcR은 대립유전자 변이체 및 대안적으로 이들 수용체의 스플라이싱된 형태를 포함하는, FcγR 패밀리의 수용체를 포함한다. FcγR 패밀리는 3가지의 활성화 수용체(마우스에서 FcγRI, FcγRIII, 및 FcγRIV; 인간에서 FcγRIA, FcγRIIA, 및 FcγRIIIA) 및 하나의 억제 수용체(FcγRIIB)로 이루어진다. 인간 FcγR의 다양한 특성은 당업계에 공지져 있다. 대부분의 선천적 효과기 세포 유형은 하나 이상의 활성화 FcγR 및 저해 FcγRIIB를 공동발현하는 반면, 자연 킬러(NK) 세포는 하나의 활성화 Fc 수용체(마우스에서 FcγRIII 및 인간에서 FcγRIIIA)를 선택적으로 발현하지만 마우스 및 인간에서 저해 FcγRIIB를 발현하지 않는다. 인간 IgG1은 대부분의 인간 Fc 수용체에 결합하고 결합하는 활성화 Fc 수용체의 유형과 관련하여 뮤린 IgG2a와 동등한 것으로 간주된다.
"Fc 영역"(단편 결정화가능 영역) 또는 "Fc 도메인" 또는 "Fc"는 면역계의 다양한 세포(예를 들어, 효과기 세포)에 위치하는 Fc 수용체 또는 고전적인 보체 시스템의 제1 성분(C1q)에 대한 결합을 포함하여, 숙주 조직 또는 인자에 대한 면역글로불린의 결합을 매개하는 항체의 중쇄의 C-말단을 지칭한다. 따라서, Fc 영역은 제1 불변 영역 면역글로불린 도메인(예를 들어, CH1 또는 CL)을 제외한 항체의 불변 영역을 포함한다. IgG, IgA 및 IgD 항체 아이소타입에서, Fc 영역은 항체의 2개의 중쇄의 제2(CH2) 및 제3(CH3) 불변 영역으로부터 유래된 2개의 동일한 단백질 단편을 포함하고; IgM 및 IgE Fc 영역은 각각의 폴리펩타이드 쇄에 3개의 중쇄 불변 도메인(CH 도메인 2 내지 4)을 포함한다. IgG의 경우, Fc 영역은 면역글로불린 도메인 CH2 및 CH3과 CH1 및 CH2 도메인 사이의 힌지를 포함한다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계에 대한 정의는 본 명세서에 정의된 바와 같이 다양할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 IgG1의 경우 D221, IgG2의 경우 V222, IgG3의 경우 L221 및 IgG4의 경우 P224의 아미노산 잔기로부터 중쇄의 카복시-말단으로의 구간으로 정의되며, 여기서 번호매김은 카밧(Kabat)에서와 같은 EU 인덱스에 따른다. 인간 IgG Fc 영역의 CH2 도메인은 아미노산 237번에서 아미노산 340번으로 확장되고, CH3 도메인은 Fc 영역에서 CH2 도메인의 C-말단측에 위치하며, 즉, 그것은 IgG의 아미노산 341번에서 아미노산 447번 또는 446번(C-말단 리신 잔기가 부재하는 경우) 또는 445번(C-말단 글리신 및 리신 잔기가 부재하는 경우)으로 확장된다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, Fc 영역은 임의의 알로타입 변이체를 포함하는 천연 서열 Fc 또는 변이체 Fc(예를 들어, 비-자연 발생 Fc)일 수 있다. Fc는 또한 "Fc 융합 단백질"(예를 들어, 항체 또는 면역부착물(immunoadhesion))로도 지칭되는, "Fc 영역을 포함하는 결합 단백질"과 같은 Fc-포함 단백질 폴리펩타이드의 문맥에서 또는 이의 분리된 이러한 영역을 말할 수 있다.
"천연 서열 Fc 영역" 또는 "천연 서열 Fc"는 자연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 천연 서열 인간 Fc 영역은 천연 서열 인간 IgG1 Fc 영역; 천연 서열 인간 IgG2 Fc 영역; 천연 서열 인간 IgG3 Fc 영역; 및 천연 서열 인간 IgG4 Fc 영역뿐만 아니라 이들의 자연 발생 변이체를 포함한다. 천연 서열 Fc는 Fc의 다양한 알로타입을 포함한다(예를 들어, 문헌[Jefferis et al. (2009) mAbs 1: 1] 참조).
추가적으로, 본 개시내용의 Fc(천연 또는 변이체)는 천연 형태와 비교하여 천연 당 쇄, 증가된 당 쇄 또는 감소된 당 쇄를 갖는 형태일 수 있거나 탈글리코실화된 형태일 수 있다. 면역글로불린 Fc 당 쇄는 통상적인 방법, 예컨대, 화학적 방법, 효소적 방법, 및 미생물을 사용하는 유전자 조작 방법에 의해 변형될 수 있다. Fc 단편으로부터 당 쇄의 제거는 제1 보체 성분 C1의 C1q 부분에 대한 결합 친화성의 급격한 감소, 및 ADCC 또는 CDC의 감소 또는 손실을 초래하고, 이에 의해 생체내에서 어떠한 불필요한 면역 반응을 유도하지 않게 된다. 이와 관련하여, 탈글리코실화(deglycosylated) 또는 어글리코실화된(aglycosylated) 형태의 면역글로불린 Fc영역은 약물 담체로서 본 개시내용의 목적에 더 적합할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "탈글리코실화"는 당이 Fc 단편으로부터 효소에 의해 제거되는 Fc 영역을 지칭한다. 추가적으로, 용어 "어글리코실화"는 Fc 단편이 원핵생물, 바람직하게는 이. 콜라이(E. coli)에 의해 비글리코실화된(unglycosylated) 형태로 생성됨을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "면역 반응"은 외래 작용제에 대한 척추동물 내의 생물학적 반응을 말하며, 상기 반응은 이러한 작용제 및 이에 의해 유발되는 질환으로부터 유기체를 보호한다. 면역 반응은 척추동물의 신체로부터 침입 병원체, 병원체로 감염된 세포 또는 조직, 암성 또는 다른 비정상적인 세포 또는 자가면역 또는 병리학적 염증의 경우, 정상적인 인간 세포 또는 조직의 선택적인 표적화, 이에 대한 결합, 이에 대한 손상, 이의 파괴, 및/또는 제거를 초래하는 면역계의 세포(예를 들어, T 림프구, B 림프구, 자연 킬러(NK) 세포, 대식세포, 호산구, 비만세포, 수지상 세포 또는 호중구) 및 이들 임의의 세포 또는 간에 의해 생성되는 가용성 거대분자(항체, 사이토카인 및 보체를 포함함)의 작용에 의해 매개된다. 면역 반응은, 예를 들어, T 세포, 예를 들어, 효과기 T 세포 또는 Th 세포, 예컨대, CD4+ 또는 CD8+ T 세포의 활성화 또는 저해 또는 Treg 세포의 저해를 포함한다.
"면역조정제" 또는 "면역조절제"는, 예를 들어, 면역 반응을 조정, 조절 또는 변형하는 데 관여될 수 있는 신호전달 경로의 성분인 작용제를 지칭한다. 면역 반응을 "조정", "조절" 또는 "변형"하는 것은 면역계의 세포에서 또는 이와 같은 세포(예를 들어, 효과기 T 세포)의 활성에서 임의의 변경을 지칭한다. 이와 같은 조정은 다양한 세포 유형의 수의 증가 또는 감소, 이들 세포의 활성의 증가 또는 감소 또는 면역계 내에서 일어날 수 있는 임의의 다른 변화에 의해 나타날 수 있는 면역계의 자극 또는 억제를 포함한다. 저해 및 자극성 면역조정제가 둘 다 확인되었으며, 이들 중 일부는 종양 미세환경에서 향상된 기능을 가질 수 있다. 바람직한 양상에서, 면역조정제는 T 세포의 표면에 위치한다. "면역조정 표적" 또는 "면역조절 표적"은 결합을 위해 표적화되고, 이의 활성이 물질, 작용제, 모이어티, 화합물 또는 분자의 결합에 의해 변경되는 면역조정제이다. 면역조정 표적은, 예를 들어, 세포의 표면 상의 수용체("면역조정 수용체") 및 수용체 리간드("면역조정 리간드")를 포함한다.
용어 "면역요법"은 면역 반응을 유도, 향상, 억제 또는 다르게는 변형시키는 것을 포함하는 방법에 의해 질환을 앓고 있거나 질환에 걸리거나 재발할 위험에 있는 대상체의 치료를 지칭한다. 대상체의 "치료" 또는 "요법"은 증상, 합병증 또는 병태 또는 질환과 연관된 생화학적 징후의 개시, 진행, 발달, 중증도 또는 재발을 반전, 완화, 개선, 저해, 늦춤 또는 예방할 목적으로 대상체에 대해 수행되는 임의의 유형의 개입 또는 과정 또는 대상체에 대한 활성제의 투여를 지칭한다.
"면역자극성 요법" 또는 "면역자극 요법"은, 예를 들어, 암을 치료하기 위해, 대상체에서 면역 반응의 증가(유도 또는 향상)를 초래하는 요법을 지칭한다.
용어 "효과기 T 세포"(Teff)는 세포용해 활성을 갖는 T 세포(예를 들어, CD4+ 및 CD8+ T 세포)뿐만 아니라, 사이토카인을 분비하고 다른 면역 세포를 활성화시키고 지시하는 T 헬퍼(Th) 세포를 말하지만, 조절 T 세포(Treg 세포)는 포함하지 않는다. 일부 양상에서, IL-7 단백질과 CAR-보유 면역 세포의 집단의 조합물은 대상체의 고형 종양에서 Teff 세포, 예를 들어, CD4+ 및 CD8+ T 세포를 활성화시키고/시키거나 이의 빈도를 증가시킬 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질과 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 조합물은 대상체의 고형 종양에서 Teff 세포, 예를 들어, CD4+ 및 CD8+ T 세포를 활성화시키고/시키거나 이의 빈도를 증가시킬 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "조절 T 세포"(Treg)는 효과기 T 세포의 유도 및 증식을 감소시키거나 억제하여 면역 반응을 조정하는 능력을 갖는 T 세포의 집단을 지칭한다. 일부 양상에서, Treg는 항-염증 사이토카인, 예컨대, IL-10, TGF-β 및 IL-35를 분비함으로써 면역 반응을 억제할 수 있으며, 상기 항-염증 사이토카인은 미경험 T 세포의 효과기 T 세포로의 활성화 및 분화를 방해할 수 있다. 일부 양상에서, Treg는 또한 세포용해 분자, 예컨대, 그랜자임 B를 생성할 수 있으며, 상기 세포용해 분자는 효과기 T 세포의 아포토시스를 유도할 수 있다. 일부 양상에서, 조절 T 세포는 자연 조절 T 세포(nTreg)(즉, 흉선 내에서 발생함)이다. 일부 양상에서, 조절 T 세포는 유도된 조절 T 세포(iTreg)(즉, 특정 자극에 노출시 말초 조직에서 Treg로 분화하는 미경험 T 세포)이다. Treg를 식별하는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, Treg는 유세포분석을 사용하여 측정될 수 있는 특정 표현형 마커(예를 들어, CD25, Foxp3 또는 CD39)를 발현한다. 예를 들어, 국제 출원 공개 WO 2017/062035 A1; 문헌[Gu J., et al., Cell Mol Immunol 14(6): 521-528 (2017)]을 참조한다. 일부 양상에서, Treg는 CD45RA- CD39+ T 세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "종양 침윤 림프구" 또는 "TIL"은 말초로부터(예를 들어, 혈액으로부터) 종양으로 이동한 림프구(예를 들어, 효과기 T 세포)를 지칭한다. 일부 양상에서, 종양 침윤 림프구는 CD4+ TIL이다. 일부 양상에서, 종양 침윤 림프구는 CD8+ TIL이다.
면역 반응 또는 면역계를 자극하는 능력의 증가는 T 세포 공동자극 수용체의 효능제 활성의 향상 및/또는 저해 수용체의 길항제 활성의 향상에 기인할 수 있다. 면역 반응 또는 면역계를 자극하는 능력의 증가는 면역 반응을 측정하는 분석, 예를 들어, 사이토카인 또는 케모카인 방출, 세포용해 활성(표적 세포 상에서 직접적으로 또는 CD107a 또는 그랜자임의 검출을 통해 간접적으로 결정됨) 및 증식의 변화를 측정하는 분석에서 EC50 또는 활성의 최대 수준의 배수 증가에 의해 반영될 수 있다. 면역 반응 또는 면역계 활성을 자극하는 능력은 적어도 10%, 30%, 50%, 75%, 2배, 3배, 5배 또는 그 초과만큼 향상될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "인터류킨-7" 또는 "IL-7"은, 예를 들어, IL-7 수용체 결합 친화성의 표준 생물검정 또는 검정에서, 야생형 성숙 포유동물 IL-7 단백질과 실질적인 아미노산 서열 동일성 및 실질적으로 동등한 생물학적 활성을 갖는 IL-7 폴리펩타이드 및 이의 유도체 및 유사체를 지칭한다. 본 개시내용과 함께 사용될 수 있는 IL-7 단백질과 관련된 추가 개시내용은 본 명세서 다른 곳에 제공되어 있다.
IL-7 단백질의 "변이체"는 하나 이상의 아미노산에 의해 변경되는 아미노산 서열로 정의된다. 변이체는, 치환된 아미노산이 유사한 구조적 또는 화학적 특성을 갖는 "보존적" 변화, 예를 들어, 류신의 아이소류신으로의 대체를 가질 수 있다. 보다 드물게는, 변이체는 "비보존적" 변화, 예를 들어, 글리신의 트립토판으로의 대체를 가질 수 있다. 유사한 사소한 변이는 또한 아미노산 결실 또는 삽입 또는 둘 다를 포함할 수 있다. 생물학적 활성을 제거하지 않으면서 치환, 삽입 또는 결실될 수 있는 아미노산 및 아미노산의 수를 결정하는 데 있어서 지침은 당업계에 잘 알려져 있는 컴퓨터 프로그램, 예를 들어, 분자 모델링 또는 정렬 생성을 위한 소프트웨어를 사용하여 찾을 수 있다. 본 개시내용에 포함된 변이체 IL-7 단백질은 IL-7 활성을 유지하는 IL-7 단백질을 포함한다. 단백질이 실질적으로 동등한 생물학적 IL-7 활성을 유지하는 한, 추가, 치환 또는 결실을 또한 포함하는 IL-7 폴리펩타이드가 또한 본 개시내용에 포함된다. 예를 들어, IL-7 단백질의 전장 형태와 비슷한 생물학적 활성을 유지하는 IL-7의 절단체는 본 개시내용에 포함된다. 일부 양상에서, 변이체 IL-7 단백질은 또한 야생형 IL-7과 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 93%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 그 초과의 서열 동일성을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "신호 서열" 또는 동등하게는 "신호 펩타이드"는 생물학적 활성 분자 약물 및 융합 단백질의 분비를 지시하는 단편을 지칭하고, 그것은 숙주 세포에서 번역된 후에 절단된다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 신호 서열은 소포체(endoplasmic reticulum: ER) 막을 관통하는 단백질의 움직임을 개시하는 아미노산 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드이다. 유용한 신호 서열은 항체 경쇄 신호 서열, 예를 들어, 항체 14.18(문헌[Gillies et al., J. Immunol. Meth 1989. 125:191-202]), 항체 중쇄 신호 서열, 예를 들어, MOPC141 항체 중쇄 신호 서열(문헌[Sakano et al., Nature, 1980.286: 676-683]) 및 당업계에 공지된 다른 신호 서열(예를 들어, 문헌[Watson et al., Nucleic Acid Research, 1984.12:5145-5164] 참조)을 포함한다. 신호 펩타이드의 특징은 당업계에 널리 공지되어 있고, 신호 펩타이드는 보통 16 내지 30개의 아미노산을 갖지만, 이것은 더 많거나 더 적은 수의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 종래의 신호 펩타이드는 염기성 N-말단 영역, 중심 소수성 영역 및 더 극성인 C-말단 영역의 3개의 영역으로 이루어진다.
"대상체"는 임의의 인간 또는 비인간 동물을 포함한다. 용어 "비인간 동물"은 척추동물, 예컨대, 비인간 영장류, 양, 개 및 설치류, 예컨대, 마우스, 래트 및 기니피그를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 양상에서, 대상체는 인간이다. 용어 "대상체" 및 "환자"는 본 명세서에서 호환 가능하게 사용된다.
용어 "치료적 유효량" 또는 "치료적 유효 투여량"은 원하는 생물학적, 치료적, 및/또는 예방적 결과를 제공하는 작용제의 양을 지칭한다. 해당 결과는 질환의 징후, 증상 또는 원인 중 하나 이상의 감소, 개선, 일시적 억제, 경감, 지연, 및/또는 완화 또는 생물학적 시스템의 임의의 다른 원하는 변경일 수 있다. 고형 종양과 관련하여, 유효량은 종양을 수축시키고/시키거나 종양 성장 속도를 감소(예컨대, 종양 성장을 억제)시키거나 다른 원치않는 세포 증식을 예방 또는 지연시키기에 충분한 양을 포함한다. 일부 양상에서, 유효량은 종양 발달을 지연시키기에 충분한 양이다. 일부 양상에서, 유효량은 종양 재발을 예방하거나 지연시키기에 충분한 양이다. 유효량은 1회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 약물 또는 조성물의 유효량은 (i) 암 세포의 수를 감소시킬 수 있고/있거나; (ii) 종양 크기를 감소시킬 수 있고/있거나; (iii) 말초 기관으로 암 세포 침윤을 어느 정도로 저해, 지연, 늦출 수 있거나 이를 정지시킬 수 있고/있거나; (iv) 저해(즉, 종양 전이를 어느 정도로 늦출 수 있고 이를 정지시킬 수 있음)시킬 수 있고/있거나; (v) 종양 성장을 저해시킬 수 있고/있거나; (vi) 종양의 발생 및/또는 재발을 예방 또는 지연시킬 수 있고/있거나; (vii) 암과 연관된 증상 중 하나 이상을 어느 정도로 완화시킬 수 있다. 일부 양상에서, "치료적 유효량"은 암의 현저한 감소 또는 암, 예컨대, 진행성 고형 종양의 진행의 둔화(퇴행)에 영향을 미치는 것으로 임상적으로 입증된 조합의 IL-7 단백질의 양 및 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단의 양이다. 질환 퇴행을 촉진시키는 치료제의 능력은, 예컨대, 임상 시험 동안 인간 대상체에서, 인간에서의 효능을 예측하는 동물 모델 시스템에서 또는 시험관내 분석에서 작용제의 활성을 분석함으로써, 숙련된 실무자에게 공지된 다양한 방법을 사용하여 평가될 수 있다.
용어 "투여 빈도"는 치료제(예를 들어, IL-7 단백질, CAR-보유 면역 세포의 집단 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단)가 특정 기간 내에 대상체에게 투여되는 횟수를 지칭한다. 투여 빈도는 주어진 시간 당 투여 수로서, 예를 들어, 1일에 1회, 1주에 1회 또는 2주에 1회로 표시될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "투여 빈도"는 대상체가 치료제의 다중(또는 반복된) 투여를 받는 경우에 적용 가능하다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "표준 치료"는 특정 유형의 질환에 대한 적절한 치료법으로서 의학 전문가에 의해 수용되고 의료 전문가에 의해 널리 사용되는 치료법을 지칭한다. 상기 용어는 용어 "모범 실무", "표준 의학 치료", 및 "표준 요법" 중 임의의 것과 호환 가능하게 사용될 수 있다.
예로서, "항암제"는 대상체에서 암 퇴행을 촉진시키거나 추가의 종양 성장을 예방한다. 특정 양상에서, 치료적 유효량의 약물은 암을 제거하는 지점까지 암 퇴행을 촉진시킨다. "암 퇴행을 촉진시키는 것"은 유효량의 약물을 단독으로 또는 항-신생물제와 조합하여 투여하면 종양 성장 또는 크기의 감소, 종양의 괴사, 적어도 하나의 질환 증상의 중증도 감소, 질환 무증상 기간의 빈도 및 기간 증가 또는 질환 고통으로 인한 손상 또는 장애의 예방을 초래함을 의미한다. 추가적으로, 치료와 관련하여 용어 "효과적" 및 "유효성"은 약리학적 유효성 및 생리적 안전성을 둘 다 포함한다. 약리학적 유효성은 환자에서 암 퇴행을 촉진시키는 약물의 능력을 지칭한다. 생리적 안전성은 독성 수준 또는 약물의 투여로 인한 세포, 기관 및/또는 유기체 수준에서 다른 부정적인 생리적 효과(부작용)를 지칭한다.
고형 종양 치료를 위한 예로서, 치료적 유효량의 항암제는 비치료 대상체에 비하여 또는 특정 양상에서 표준 치료 요법으로 치료된 환자에 비하여 세포 성장 또는 종양 성장을 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 40%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 80%만큼 저해시킬 수 있다. 일부 양상에서, 고형 종양 퇴행은 적어도 약 20일, 적어도 약 40일 또는 적어도 약 60일 동안 관찰되고 지속될 수 있다. 이러한 치료 유효성의 궁극적인 측정에도 불구하고, 면역요법 약물의 평가는 또한 "면역-관련" 반응 패턴을 참작해야 한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "면역 관문 저해제"는 하나 이상의 면역 관문 단백질을 전체적으로 또는 부분적으로 감소, 저해, 방해 또는 조정하는 분자를 지칭한다. 면역 관문 단백질은 T-세포 활성화 또는 기능을 조절한다. 수많은 관문 단백질, 예컨대, CTLA-4 및 이의 리간드인 CD80 및 CD86; 및 PD-1과 이의 리간드인 PD-L1 및 PD-L2가 알려져 있다. 문헌[Pardoll, D.M., Nat Rev Cancer 12(4):252-64 (2012)]. 이 단백질은 T-세포 반응의 공동자극 또는 저해 상호작용을 담당한다. 면역 관문 단백질은 자가 내성 및 생리적 면역 반응의 기간 및 크기를 조절하고 유지한다. 면역 관문 저해제는 항체를 포함하거나 항체로부터 유래된다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "기준"은 IL-7 단백질과 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단의 조합물을 제공받지 않은 상응하는 대상체(예를 들어, 고형 종양을 갖는 대상체), 예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단 단독을 제공받은 대상체를 지칭한다. 일부 양상에서, 기준 대상체는 IL-7 단백질도 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단도 제공받지 않았다. 용어 "기준"은 또한 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, CAR-보유 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)의 투여 이전의 동일한 암 대상체를 지칭할 수 있다. 특정 양상에서, 용어 "기준"은 대상체(예를 들어, 고형 종양을 갖는 대상체) 집단의 평균을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "ug" 및 "uM"은 각각 "㎍" 및 "μM"과 호환 가능하게 사용된다.
본 명세서에 기재된 다양한 양상은 하기 부분에서 더 상세히 기재된다.
II. 본 개시내용의 방법
본 개시내용은 유효량의 인터류킨-7(IL-7) 단백질을 유효량의 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, 키메라 항원 수용체(CAR)-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 T-세포 수용체 (TCR)-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 고형 종양(또는 고형 종양과 연관된 암)의 치료를 필요로 하는 대상체에서 종양(또는 암)을 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용에 유용한 CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 고형 종양에서 발현되는 항원(즉, 고형 종양 항원)에 결합할 수 있다. 사용될 수 있는 예시적인 IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)와 관련된 추가적인 개시내용이 본 개시내용 다른 곳에 제공되어 있다.
일부 양상에서, 고형 종양의 치료는 고형 종양의 크기(즉, 종양 부피)를 감소시키는 것을 포함한다. 특정 양상에서, IL-7 단백질을 CAR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 고형 종양을 갖는 대상체에게 투여하는 것은 종양 부피를 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포의 집단 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소시킬 수 있다. 특정 양상에서, IL-7 단백질을 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 고형 종양을 갖는 대상체에게 투여하는 것은 종양 부피를 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소시킬 수 있다.
일부 양상에서, 고형 종양의 치료는 고형 종양을 갖는 대상체의 생존을 연장(즉, 증가)시키는 것을 포함한다. 특정 양상에서, IL-7 단백질을 CAR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 고형 종양을 갖는 대상체에게 투여하는 것은 대상체의 생존 기간을 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150% 또는 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가시킬 수 있다. 일부 양상에서, 대상체(즉, CAR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 IL-7 단백질로 치료됨)의 생존 기간은 적어도 약 10일, 적어도 약 20일, 적어도 약 1개월, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 4개월, 적어도 약 5개월, 적어도 약 6개월, 적어도 약 7개월, 적어도 약 8개월, 적어도 약 9개월, 적어도 약 10개월, 적어도 약 11개월 또는 적어도 약 1년 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질을 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 고형 종양을 갖는 대상체에게 투여하는 것은 대상체의 생존 기간을 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150% 또는 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가시킬 수 있다. 일부 양상에서, 대상체(즉, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 IL-7 단백질로 치료됨)의 생존 기간은 적어도 약 10일, 적어도 약 20일, 적어도 약 1개월, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 4개월, 적어도 약 5개월, 적어도 약 6개월, 적어도 약 7개월, 적어도 약 8개월, 적어도 약 9개월, 적어도 약 10개월, 적어도 약 11개월 또는 적어도 약 1년 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, 본 개시내용의 병용 요법(즉, 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)의 투여는 고형 종양을 갖는 대상체의 무진행 생존의 기간을 증가시킨다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "무진행 생존"은 (예를 들어, IL-7 단백질을 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 투여함으로써) 질환을 치료하는 동안 그리고 질환을 치료한 후 대상체가 질환을 갖지만 더 악화되지 않고(예를 들어, 종양이 크기가 성장하지 않고) 살아가는 시간 길이를 지칭한다 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 병용 요법을 투여한 후, 예를 들어, 대상체의 무진행 생존은 기준 대상체(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포) 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체)와 비교할 때 적어도 약 1개월, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 4개월, 적어도 약 5개월, 적어도 약 6개월, 적어도 약 7개월, 적어도 약 8개월, 적어도 약 9개월, 적어도 약 10개월, 적어도 약 11개월 또는 적어도 약 1년만큼 증가된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)의 투여는 대상체의 군에서 반응률을 효과적으로 증가시킨다. 예를 들어, 대상체 군에서 반응률은 기준 대상체(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포) 단독)의 집단 단독으로 치료된 상응하는 대상체)와 비교할 때 적어도 약 2%, 적어도 약 3%, 적어도 약 4%, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 적어도 약 100%만큼 증가된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질을 CAR-보유 면역 세포의 집단을 조합하여 투여하는 것은 고형 종양을 갖는 대상체에서 CAR-보유 면역 세포의 항-종양 활성을 향상시키고/시키거나 개선시킬 수 있다. 특정 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 항-종양 활성은 기준(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 항-종양 활성)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100% 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질을 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 조합하여 투여하는 것은 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 항-종양 활성을 향상시키고/시키거나 개선시킬 수 있다. 특정 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 항-종양 활성은 기준(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 항-종양 활성)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100% 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 항-종양 활성 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 항-종양 활성은 대상체에서 고형 종양의 크기(즉, 종양 부피)를 감소시키는 능력을 포함한다. 일부 양상에서, 항-종양 활성은 고형 종양을 갖는 대상체의 생존을 연장시키는 능력을 포함한다. 일부 양상에서, 항-종양 활성은 (예를 들어, 동족 항원으로의 자극을 통한) 활성화 시 효과기 기능을 나타내는 CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 능력을 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "효과기 기능"은 고형 종양을 근절하고/하거나 사멸시킬 수 있는 활성화된 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 하나 이상의 특성을 지칭한다. 효과기 기능의 비제한적인 예는 세포용해 분자(예를 들어, 퍼포린 또는 그랜자임)의 증식, 발현, 사이토카인(예를 들어, TNF-α, IFN-γ 및/또는 IL-2)의 생산, 종양 조직으로의 이동, 면역 관문 저해성 신호전달(예를 들어, PD-1, LAG-3, TIM-3 또는 CTLA-4) 약화 및/또는 저항 또는 이들의 조합을 포함한다.
당업자에게 자명할 바와 같이, 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 항-종양 활성은 당업계에 공지된 임의의 관련 방법에 의해서 측정될 수 있다. 예를 들어, 종양 부피를 감소시키고/시키거나 대상체의 생존을 연장시키는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 TCR-트랜스제닉 면역 세포)의 능력은 실시예에 기재된 바와 같이 측정될 수 있다. 효과기 기능을 나타내는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 능력은 유세포 분석법, ELISA, 및/또는 ELISPOT와 같은 검정을 사용하여 측정될 수 있다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, IL-7 단백질(예를 들어, 본 명세서에 기재된 것)을 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 투여하는 것은 대상체에서 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 증식(즉, 확장)을 증가시킬 수 있다.
추가로, 일부 양상에서, 본 개시내용은 대상체에게 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 고형 종양을 갖는 대상체에서 CAR-보유 면역 세포의 확장을 증가시키는 방법을 제공한다. 또한 본 명세서에는 대상체에게 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 확장을 증가시키는 방법이 제공된다. 특정 양상에서, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 확장은 기준 확장(예를 들어, 변형된 면역 세포(즉, CAR-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단의 투여만을 제공받은 대상체에서의 상응하는 변형된 면역 세포(즉, CAR-보유 면역 세포 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 확장)에 비해서 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 투여되는 경우 고형 종양을 갖는 대상체에서 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 생존 및/또는 지속의 증가를 도울 수 있다. 특정 양상에서, 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 생존 및/또는 지속은 기준(예를 들어, 변형된 면역 세포의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에서의 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 생존 및/또는 지속)에 비해서 IL-7 단백질과 조합하여 투여되는 경우 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
일부 양상에서, 상기에 기재된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 확장, 생존 및/또는 지속의 증가는 고형 종양을 갖는 대상체에 존재하는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 총 수를 증가시킬 수 있다. 특정 양상에서, 대상체에 존재하는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)는 기준(예를 들어, 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에 존재하는 변형된 면역 세포의 총 수)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가된다.
당업자에게 자명할 바와 같이, 다수의 이용 가능한 표준 치료 암 치료법(예를 들어, 화학요법 및 방사선요법)은 림프구감소증을 유발하는 것으로 알려져 있으므로, 많은 암 환자에는 림프구감소증이 있다. 따라서, 본 명세서에 개시된 방법은 또한 림프구감소증 대상체에서 고형 종양(또는 고형 종양과 연관된 암)을 치료하는 데 사용될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "림프구감소증 대상체"는 림프구감소증이 있는 대상체를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "림프구감소증(lymphopenia)" 및 "림프구감소증(lymphocytopenia)"은 호환 가능하게 사용되며 순환 면역 세포(예를 들어, 림프구)의 비정상적인 적은 수를 특징으로 하는 병태를 지칭한다. 모든 유형의 림프구 또는 림프구의 하위 집단(예를 들어, CD4+ T 세포)의 말초 순환은 림프구감소증을 앓고 있는 환자에서 고갈될 수 있거나 비정상적으로 낮을 수 있다. 예를 들어, 문헌[Lymphopenia Description, The Merck Manual (18th Edition, 2006, Merck & Co.)]을 참조한다. 일부 양상에서, 정상적인 대상체(예를 들어, 건강한 개체)와 비교하여, 림프구감소증 대상체는 감소된 수의 T-림프구("T-림프구감소증"), B-림프구("B-림프구감소증"), 및/또는 NK 세포("NK 림프구감소증")를 가진다.
정량적으로, 림프구감소증은 다양한 컷오프에 의해 기재될 수 있다. 일부 양상에서, 림프구감소증 대상체는 림프구감소증을 나타내지 않는 상응하는 대상체에서 순환하는 혈액 총 림프구 수와 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 100%만큼 더 적은 순환하는 혈액 총 림프구 수를 가진다. 일부 양상에서, 대상체가 약 1,500개 림프구/㎕ 미만, 약 1,000개 림프구/㎕ 미만, 약 800개 림프구/㎕ 미만, 약 500개 림프구/㎕ 미만 또는 약 200개 림프구/㎕ 미만의 순환하는 혈액 총 림프구 수를 갖는 경우, 대상체에는 림프구감소증이 있다.
림프구감소증에는 광범위한 가능한 원인이 있다. 일부 양상에서, 림프구감소증은 종양에 의해 유발되거나 종양과 연관된다. 일부 양상에서, 림프구감소증은 종양에 대한 이전 요법(예를 들어, 화학요법 및 방사선요법)에 의해 유발되거나 이와 연관된다. 일부 양상에서, 림프구감소증은 바이러스(예를 들어, HIV 또는 간염 감염), 박테리아(예를 들어, 활동성 결핵 감염), 및 진균 감염을 포함하는 감염; 심장 우심실의 만성 부전, 호지킨병 및 림프계의 암, 백혈병, 흉관 누수 또는 파열, 항암제, 항바이러스제, 및 글루코코르티코이드를 포함한 처방약의 부작용, 단백질이 낮은 식단으로 인한 영양실조, 방사선요법, 요독증, 자가면역 장애, 면역 결핍 증후군, 높은 스트레스 수준, 외상에 의해 유발되거나 이들과 연관된다.
일부 양상에서, 림프구감소증은 특발성이다(즉, 병인이 알려져 있지 않음). 특발성 림프구감소증의 비제한적인 예는 특발성 CD4 양성 T-림프구감소증(ICL), 급성 방사선 증후군(ARS) 또는 이들의 조합을 포함한다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 명세서에 개시된 방법은 고형 종양(또는 고형 종양과 연관된 암)을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일부 양상에서, 고형 종양은 중피종, 자궁경부암, 췌장암, 난소암, 편평세포암(예를 들어, 상피 편평세포암), 폐암(예를 들어, 소세포 폐암(SCLC), 비소세포 폐암, 폐의 선암종 및 폐의 편평 암종), 피부암(예를 들어, 기저 세포 암종(BCC), 피부 편평 세포 암종(cSCC), 흑색종, 머컬 세포 암종(MCC)), 복막암, 간세포암, 위암(예를 들어, 위장암), 식도암(예를 들어, 위식도 접합부암), 췌장암, 뇌암(예를 들어, 교모세포종), 간암(예를 들어, 간세포 암종), 방광암, 간종, 유방암(예를 들어, 삼중 음성 유방암(TNBC)), 결장암, 직장암, 결장직장암, 자궁내막암 또는 자궁 암종, 침샘 암종, 신장암 또는 신암(예를 들어, 신장 세포 암종), 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종, 두경부암(예를 들어, 두경부 편평 세포 암종) 또는 이들의 임의의 조합으로부터 유래된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 기재된 방법은 또한 전이성 암, 절제불가능한 불응성 암(예를 들어, 이전 암 요법, 예를 들어, 면역요법(예를 들어, 차단 항-PD-1 항체를 이용함)에 대해 불응성인 암), 및/또는 재발성 암의 치료에 사용될 수 있다. 특정 양상에서, 이전 암 요법은 화학요법을 포함한다. 일부 양상에서, 화학요법은 백금-기반 요법을 포함한다. 일부 양상에서, 백금-기반 요법은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 트리플라틴 테트라나이트레이트, 페난트리플라틴, 피코플라틴, 사트라플라틴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 백금-기반 항신생물제를 포함한다. 특정 양상에서, 백금-기반 요법은 시스플라틴을 포함한다. 특정 양상에서, 백금-기반 요법은 카보플라틴을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법으로 치료될 대상체는 이전에 1, 2, 3, 4, 5회 또는 그 이상의 암 치료를 받았다. 일부 양상에서, 대상체는 치료 경험이 없다(즉, 이전에 암 치료를 받은 적이 없음). 일부 양상에서, 대상체는 다른 암 치료를 진행하였다. 특정 양상에서, 이전 암 치료는 면역요법(예를 들어, 항-PD-1 항체를 이용함)을 포함하였다. 일부 양상에서, 이전 암 치료는 화학요법을 포함하였다. 일부 양상에서, 고형 종양은 재발하였다. 일부 양상에서, 고형 종양은 전이성이다. 일부 양상에서, 고형 종양은 전이성이 아니다.
일부 양상에서, 본 개시내용으로 치료될 수 있는 대상체는 비인간 동물, 예컨대, 래트 또는 마우스이다. 일부 양상에서, 치료될 수 있는 대상체는 인간이다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질의 (예를 들어, 인간 사용을 위한) 단위 용량은 0.001㎎/㎏ 내지 10㎎/㎏의 범위일 수 있다. 특정 양상에서, IL-7 단백질의 단위 용량은 0.01㎎/㎏ 내지 2㎎/㎏의 범위이다. 일부 양상에서, 단위 용량은 0.02㎎/㎏ 내지 1㎎/㎏의 범위이다. 단위 용량은 치료할 대상체 질환 및 부작용의 존재 여부에 따라 달라질 수 있다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 중량-기반 용량으로 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 20㎍/㎏ 내지 약 600㎍/㎏의 중량-기반 용량으로 투여될 수 있다. 특정 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 약 20㎍/㎏, 약 60㎍/㎏, 약 120㎍/㎏, 약 240㎍/㎏, 약 360㎍/㎏, 약 480㎍/㎏ 또는 약 600㎍/㎏의 중량-기반 용량으로 투여될 수 있다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 약 600㎍/㎏ 초과의 용량으로 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 600㎍/㎏ 초과, 약 700㎍/㎏ 초과, 약 800㎍/㎏ 초과, 약 900㎍/㎏ 초과, 약 1,000㎍/㎏ 초과, 약 1,100㎍/㎏ 초과, 약 1,200㎍/㎏ 초과, 약 1,300㎍/㎏ 초과, 약 1,400㎍/㎏ 초과, 약 1,500㎍/㎏ 초과, 약 1,600㎍/㎏ 초과, 약 1,700㎍/㎏ 초과, 약 1,800㎍/㎏ 초과, 약 1,900㎍/㎏ 초과 또는 약 2,000㎍/㎏ 초과의 용량으로 대상체에게 투여된다.
일부 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 610㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 650㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,000㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,050㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,100㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,200㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏ 또는 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 610㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 650㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 약 1,000㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,050㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,100㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,200㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1,300㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,500㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,700㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 700㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 추가의 특정 양상에서, IL-7 단백질은 750㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 800㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏ 또는 약 850㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 750㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 800㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 800㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 850㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 650㎍/㎏, 약 680㎍/㎏, 약 700㎍/㎏, 약 720㎍/㎏, 약 740㎍/㎏, 약 750㎍/㎏, 약 760㎍/㎏, 약 780㎍/㎏, 약 800㎍/㎏, 약 820㎍/㎏, 약 840㎍/㎏, 약 850㎍/㎏, 약 860㎍/㎏, 약 880㎍/㎏, 약 900㎍/㎏, 약 920㎍/㎏, 약 940㎍/㎏, 약 950㎍/㎏, 약 960㎍/㎏, 약 980㎍/㎏, 약 1,000㎍/㎏, 약 1,020㎍/㎏, 약 1,020㎍/㎏, 약 1,040㎍/㎏, 약 1,060㎍/㎏, 약 1,080㎍/㎏, 약 1,100㎍/㎏, 약 1,120㎍/㎏, 약 1,140㎍/㎏, 약 1,160㎍/㎏, 약 1,180㎍/㎏, 약 1200㎍/㎏, 약 1,220㎍/㎏, 약 1,240㎍/㎏, 약 1,260㎍/㎏, 약 1,280㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏, 약 1,320㎍/㎏, 약 1,340㎍/㎏, 약 1,360㎍/㎏, 약 1,380㎍/㎏, 약 1,400㎍/㎏, 약 1,420㎍/㎏, 약 1,440㎍/㎏, 약 1,460㎍/㎏, 약 1,480㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏, 약 1,520㎍/㎏, 약 1,540㎍/㎏, 약 1,560㎍/㎏, 약 1,580㎍/㎏, 약 1,600㎍/㎏, 약 1,620㎍/㎏, 약 1,640㎍/㎏, 약 1,660㎍/㎏, 약 1,680㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏, 약 1,720㎍/㎏, 약 1,740㎍/㎏, 약 1,760㎍/㎏, 약 1,780㎍/㎏, 약 1,800㎍/㎏, 약 1,820㎍/㎏, 약 1,840㎍/㎏, 약 1,860㎍/㎏, 약 1,880㎍/㎏, 약 1,900㎍/㎏, 약 1,920㎍/㎏, 약 1,940㎍/㎏, 약 1,960㎍/㎏, 약 1,980㎍/㎏ 또는 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 650㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 약 680㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 740㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 750㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 760㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 780㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 800㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 820㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 840㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 850㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 860㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 880㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 900㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 920㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 940㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 980㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,020㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,040㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,060㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,080㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,100㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,140㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,160㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,180㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,220㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,260㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,280㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,320㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,340㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,360㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,380㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,520㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,540㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,560㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,580㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,620㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,640㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,660㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,680㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,740㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,760㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,780㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,800㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,820㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,840㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,860㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,880㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,900㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,920㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,940㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1,980㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7은 고정 용량으로 투여될 수 있다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 0.25㎎ 내지 약 9㎎의 고정 용량으로 투여될 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 0.25㎎, 약 1㎎, 약 3㎎, 약 6㎎ 또는 약 9㎎의 고정 용량으로 투여될 수 있다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 다중 용량(즉, 반복 투여)으로 대상체에게 투여된다. 특정 실시형태에서, IL-7 단백질은 적어도 2회, 적어도 3회, 적어도 4회, 적어도 5회, 적어도 6회, 적어도 7회, 적어도 8회, 적어도 9회 또는 적어도 10회 또는 그 이상 대상체에게 투여된다. 다른 실시형태에서, 대상체는 (예를 들어, 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 투여 전, 동시에 또는 후에) IL-7 단백질의 단일 투여를 제공받는다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1주에 1회, 약 2주에 1회, 약 3주에 1회, 약 4주에 1회, 약 5주에 1회, 약 6주에 1회, 약 7주에 1회, 약 8주에 1회, 약 9주에 1회, 약 10주에 1회, 약 11주에 1회 또는 약 12주에 1회의 투여 빈도로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 약 10일마다 1회, 약 20일마다 1회, 약 30일마다 1회, 약 40일마다 1회, 약 50일마다 1회, 약 60일마다 1회, 약 70일마다 1회, 약 80일마다 1회, 약 90일마다 1회 또는 약 100일마다 1회의 투여 빈도로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 1주, 약 2주, 약 3주 또는 약 4주의 간격으로 약 720㎍/㎏의 양으로 2회 이상 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 2주, 약 3주, 약 4주 또는 약 5주의 간격으로 약 840㎍/㎏의 양으로 2회 이상 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 5주 또는 약 6주의 간격으로 약 960㎍/㎏의 양으로 2회 이상 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주, 약 7주 또는 약 8주의 간격으로 약 1200㎍/㎏의 양으로 2회 이상 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 약 3주, 약 4주, 약 5주, 약 6주, 약 7주, 약 8주, 약 2개월, 약 8주, 약 10주, 약 12주 또는 약 3개월의 간격으로 약 1440㎍/㎏의 양으로 2회 이상 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 1주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 2주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 4주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 5주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 6주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 7주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 8주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 3주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 9주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 11주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 12주에 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 10일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 20일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 30일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 40일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 50일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 60일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 70일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 80일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 90일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 60㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 120㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 240㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 720㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 960㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,200㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,300㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,400㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,420㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,440㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,460㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,480㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,500㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,600㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 1,700㎍/㎏의 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 100일마다 1회의 투여 빈도로 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질을 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 투여하는 것은 임상 효능을 유지시키는 데 필요한 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단의 용량(예를 들어, 대상체의 종양 부피를 감소시키고/시키거나 대상체의 생존 기간을 증가시키는 데 필요한 용량)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 기준 용량(예를 들어, 단독으로 또는 본 개시내용의 IL-7 단백질 이외의 작용제와 조합하여 투여되는 경우 CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소된다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 기준 용량(예를 들어, 단독으로 또는 본 개시내용의 IL-7 단백질 이외의 작용제와 조합하여 투여되는 경우 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량)에 비해서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소된다.
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 100,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 50,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 5,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 2,500개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포를 포함한다.
일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 50,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 특정 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 5,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 2,500개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단의 용량은 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000개 미만의 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 포함한다.
IL-7 단백질 및 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 임의의 관련 투여 경로에 의해서 고형 종양을 갖는 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 비경구, 근육내, 피하, 안구, 정맥내, 복강내, 피부내, 안와내, 대뇌내, 두개내, 척수내, 심실내, 척추강내, 수조내, 피막내 또는 종양내로 대상체에게 투여된다. 일부 양상에서, 집단 of 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)는 정맥내로 투여된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 방법(예를 들어, IL-7 단백질을 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합하여 투여하는 것)은 1종 이상의 추가 치료제(예를 들어, 항암제 및/또는 면역조절제)와 조합하여 사용될 수 있다. 이와 같은 작용제는, 예를 들어, 화학요법 약물, 소분자 약물 또는 주어진 암에 대한 면역 반응을 자극하는 항체를 포함할 수 있다. 일부 양상에서, 본 명세서에 기재된 방법은 표준 치료 치료법(예를 들어, 수술, 방사선, 및 화학요법)과 조합하여 사용된다. 본 명세서에 기재된 방법은 또한 유지 요법, 예를 들어, 고형 종양의 발생 또는 재발을 예방하는 것으로 의도되는 요법으로서 사용될 수 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용과 함께 사용될 수 있는 추가 치료제는 면역 관문 저해제를 포함한다(즉, 특정 면역 관문 경로를 통해 신호전달을 차단함). 본 방법에서 사용될 수 있는 면역 관문 저해제의 비제한적인 예는 CTLA-4 길항제(예를 들어, 항-CTLA-4 항체), PD-1 길항제(예를 들어, 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체), TIM-3 길항제(예를 들어, 항-TIM-3 항체) 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 추가 치료제는 면역 관문 활성화제를 포함한다(즉, 특정 면역 관문 경로를 통해 신호전달을 촉진시킴). 특정 양상에서, 면역 관문 활성화제는 OX40 효능제(예를 들어, 항-OX40 항체), LAG-3 효능제(예를 들어, 항-LAG-3 항체), 4-1BB(CD137) 효능제(예를 들어, 항-CD137 항체), GITR 효능제(예를 들어, 항-GITR 항체) 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)으로 치료된 고형 종양을 갖는 대상체는 림프구 제거제(lymphocyte depleting agent)로 추가로 치료될 수 있다. 림프구 제거제의 비제한적인 예는 항체(예를 들어, THYMOGLOBULIN®, ATGAM®, CAMPATH®) 및 화학치료제(예를 들어, 플루다라빈(FLUDARA®) 및 사이클로포스파마이드(CYTOXAN®)를 포함한다. 일부 양상에서, 대상체는 키나제 저해제(예를 들어, 다사티닙(SPRYCEL®))로 추가로 치료된다. 특정 양상에서, 키나제 저해제는 CAR-T 세포 기능을 가역적으로 차단하는 데(예를 들어, 사이토카인 방출 증후군을 완화시키는 데) 사용될 수 있다.
일부 양상에서, IL-7 단백질(예를 들어, 본 명세서에 개시된 것) 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 약제학적으로 허용 가능한 담체 중의 단일 조성물로서 동시에 투여될 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 별개의 조성물로 동시에 투여될 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 순차적으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 특정 양상에서, IL-7 단백질은 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단을 투여하기 전에 대상체에게 투여된다. 특정 양상에서, IL-7 단백질은 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단을 투여한 후에 대상체에게 투여된다.
III. 본 개시내용에 유용한 IL-7 단백질
본 명세서에는 예를 들어, 고형 종양을 치료하기 위한 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단과 조합하여 사용될 수 있는 IL-7 단백질이 개시되어 있다. 일부 양상에서, 본 용도에 유용한 IL-7 단백질은 IL-7 단백질이, 예를 들어, IL-7R에 결합하여, 예를 들어, 조기 T-세포 발달을 유도하고, T-세포 항상성을 촉진시킬 수 있는, IL-7의 하나 이상의 생물학적 활성을 포함하는 한, 야생형 IL-7 또는 변형된 IL-7(즉, 야생형 IL-7 단백질이 아님)(예를 들어, IL-7 변이체, IL-7 기능성 단편, IL-7 유도체 또는 이들의 임의의 조합, 예를 들어, 융합 단백질, 키메라 단백질 등)일 수 있다. 문헌[ElKassar and Gress. J Immunotoxicol. 2010 Mar; 7(1): 1-7] 참조하기 바란다. 일부 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 야생형 IL-7 단백질이 아니다(즉, 하나 이상의 변형을 포함함). 이와 같은 변형의 비제한적인 예는 올리고펩타이드 및/또는 반감기 연장 모이어티를 포함할 수 있다. 국제 공개 제WO 2016/200219호를 참조하며, 이는 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
IL-7은 흉선 기질상 림포포이에틴(thymic stromal lymphopoietin; TSLP)(문헌[Ziegler and Liu, 2006])과 공유되는 2개 쇄의 IL-7Rα(CD127), 및 IL-2, IL-15, IL-9 및 IL-21에 대한 공통 γ 쇄(CD132)로 구성되는 수용체에 결합한다. γc는 대부분 조혈 세포에서 발현되는 반면, IL-7Rα는 거의 독점적으로 림프 세포 상에서 발현된다. 수용체에 결합한 후, IL-7은 2가지 상이한 경로, 즉, 각각 분화 및 생존을 담당하는 Jak-Stat(야누스 키나제-신호 전달체 및 전사 활성화제) 및 PI3K/Akt를 통해 신호전달한다. IL-7 신호전달의 부재는 항-IL-7 중화 단클론성 항체(MAb)(문헌[Grabstein et al., 1993])를 투여받은 마우스, IL-7-/-(문헌[Freeden-Jeffry et al., 1995]), IL-7Rα-/-(문헌[Peschon et al., 1994; Maki et al., 1996]), γc-/-(문헌[Malissen et al., 1997]) 및 Jak3-/- 마우스(문헌[Park et al., 1995])에서 관찰되는 바와 같이 흉선 세포충실도 감소의 원인이 된다. IL-7 신호전달의 부재 시, 마우스는 T-, B-, 및 NK-T 세포가 부족하다. IL-7α-/- 마우스(문헌[Peschon et al., 1994])는 IL-7-/- 마우스(문헌[Freeden-Jeffry et al., 1995])와 유사하지만 이보다 더 심각한 표현형을 가지고 있는데, 이는 아마도 TSLP 신호전달이 또한 IL-7α-/- 마우스에서 무효화되기 때문일 것이다. IL-7은 γδ 세포(문헌[Maki et al., 1996]) 및 NK-T 세포(문헌[Boesteanu et al., 1997])의 발달에 필요하다.
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 IL-7 단백질은 서열번호 1 내지 6 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 서열번호 1 내지 6의 서열과 약 70%, 약 75%, 약 80%, 약 85%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 변형된 IL-7 또는 이의 단편을 포함하며, 여기서 변형된 IL-7 또는 단편은 야생형 IL-7의 하나 이상의 생물학적 활성을 유지한다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 인간, 래트, 마우스, 원숭이, 소 또는 양으로부터 유래될 수 있다.
일부 양상에서, 인간 IL-7은 서열번호 1(진뱅크 수탁 번호 P13232)로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있고; 래트 IL-7은 서열번호 2(진뱅크 수탁 번호 P56478)로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있으며; 마우스 IL-7은 서열번호 3(진뱅크 수탁 번호 P10168)으로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있고; 원숭이 IL-7은 서열번호 4(진뱅크 수탁 번호 NP 001279008)로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있으며; 소 IL-7은 서열번호 5(진뱅크 수탁 번호 P26895)로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있고; 양 IL-7은 서열번호 6(진뱅크 수탁 번호 Q28540)으로 표현되는 아미노산 서열을 가질 수 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 IL-7 단백질은 IL-7 융합 단백질을 포함한다. 특정 양상에서, IL-7 융합 단백질은 (i) 올리고펩타이드 및 (i) IL-7 또는 이의 변이체를 포함한다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드는 IL-7 또는 이의 변이체의 N-말단 영역에 연결된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 올리고펩타이드는 1 내지 10개의 아미노산으로 이루어진다. 특정 양상에서, 올리고펩타이드는 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9 또는 10개의 아미노산으로 이루어진다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드의 하나 이상의 아미노산은 메티오닌, 글리신, 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특정 양상에서, 올리고펩타이드는 메티오닌(M), 글리신(G), 메티오닌-메티오닌(MM), 글리신-글리신(GG), 메티오닌-글리신(MG), 글리신-메티오닌(GM), 메티오닌-메티오닌-메티오닌(MMM), 메티오닌-메티오닌-글리신(MMG), 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM), 글리신-메티오닌-메티오닌(GMM), 메티오닌-글리신-글리신(MGG), 글리신-메티오닌-글리신(GMG), 글리신-글리신-메티오닌(GGM), 글리신-글리신-글리신(GGG), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MGGM)(서열번호 41), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(MMGG)(서열번호 42), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGMM)(서열번호 43), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MGMG)(서열번호 44), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMG)(서열번호 45), 글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGM)(서열번호 46), 메티오닌-글리신-글리신-글리신(MGGG)(서열번호 47), 글리신-메티오닌-글리신-글리신(GMGG)(서열번호 48), 글리신-글리신-메티오닌-글리신(GGMG)(서열번호 49), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(GGMMM)(서열번호 50), 글리신-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGGMM)(서열번호 51), 글리신-글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGGM)(서열번호 52), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(MGMMM)(서열번호 53), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(MGGMM)(서열번호 54), 메티오닌-글리신-글리신-글리신-메티오닌(MGGGM)(서열번호 55), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌(MMGMM)(서열번호 56), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MMGGM)(서열번호 57), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-글리신(MMGGG)(서열번호 58), 메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(MMMGM)(서열번호 59), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(MGMGM)(서열번호 60), 글리신-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(GMGMG)(서열번호 61), 글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMMG)(서열번호 62), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(GGMGM)(서열번호 63), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GGMMG)(서열번호 64), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(GMMGM)(서열번호 65), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(MGMMG)(서열번호 66), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(GMGGM)(서열번호 67), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MMGMG)(서열번호 68), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(GMMGG)(서열번호 69), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-글리신(GMGGG)(서열번호 70), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-글리신(GGMGG)(서열번호 71), 글리신-글리신-글리신-글리신-글리신(GGGGG)(서열번호 72) 또는 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드는 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM)이다.
일부 양상에서, IL-7 융합 단백질은 (i) IL-7 또는 이의 변이체, 및 (ii) 반감기 연장 모이어티를 포함한다. 일부 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 IL-7 또는 이의 변이체의 반감기를 연장한다. 일부 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 IL-7 또는 이의 변이체의 C-말단 영역에 연결된다.
일부 양상에서, IL-7 융합 단백질은 (i) IL-7(제1 도메인), (ii) 메티오닌, 글리신 또는 이들의 조합, 예를 들어, MGM으로 이루어진 1 내지 10개의 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 도메인, 및 (iii) 반감기 연장 모이어티를 포함하는 제3 도메인을 포함한다. 일부 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 제1 도메인 또는 제2 도메인의 N-말단 또는 C-말단에 연결될 수 있다. 추가적으로, 제1 도메인 및 제2 도메인을 포함하는 IL-7은 제3 도메인의 양쪽 말단에 연결될 수 있다.
반감기 연장 모이어티의 비제한적인 예는 Fc, 알부민, 알부민-결합 폴리펩타이드, Pro/Ala/Ser(PAS), 인간 융모성 생식선 자극호르몬의 β 소단위의 C-말단 펩타이드(CTP), 폴리에틸렌 글라이콜(PEG), 아미노산의 구조화되지 않은 긴 친수성 서열(XTEN), 하이드록시에틸 전분(HES), 알부민-결합 소분자, 및 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 Fc이다. 특정 양상에서, Fc는 Fc 수용체 및/또는 보체와의 결합 친화성의 변형으로 인해 항체-의존성 세포 독성(ADCC) 또는 보체-의존성 세포독성(CDC)이 약화된 변형된 면역글로불린으로부터 유래한다. 일부 양상에서, 변형된 면역글로불린은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgD, IgE, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 일부 양상에서, Fc는 힌지 영역, CH2 도메인, 및 CH3 도메인을 포함하는 하이브리드 Fc("hFc" 또는 "hyFc")이다. 특정 양상에서, 본 명세서에 개시된 하이브리드 Fc의 힌지 영역은 인간 IgD 힌지 영역을 포함한다. 특정 양상에서, 하이브리드 Fc의 CH2 도메인은 인간 IgD CH2 도메인의 일부 및 인간 IgG4 CH2 도메인의 일부를 포함한다. 특정 양상에서, 하이브리드 Fc의 CH3 도메인은 인간 IgG4 CH3 도메인의 일부를 포함한다. 따라서, 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 하이브리드 Fc는 힌지 영역, CH2 도메인, 및 CH3 도메인을 포함하며, 여기서 힌지 영역은 인간 IgD 힌지 영역을 포함하고, CH2 도메인은 인간 IgD CH2 도메인의 일부 및 IgG4 CH2 도메인의 일부를 포함하며, CH3 도메인은 인간 IgG4 CH3 도메인의 일부를 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 Fc는 Fc 변이체일 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "Fc 변이체"는 Fc 영역 중 아미노산의 일부를 치환함으로써 또는 상이한 종류의 Fc 영역을 조합함으로써 제조된 Fc를 지칭한다. Fc 영역 변이체는 힌지 영역에서 절단되는 것을 방지할 수 있다. 구체적으로, 일부 양상에서, Fc 변이체는 서열번호 9의 144번째 아미노산 및/또는 145번째 아미노산에서 변형을 포함한다. 특정 양상에서, 144번째 아미노산(K) 및/또는 145번째 아미노산(K)은 G 또는 S로 치환된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 Fc 또는 Fc 변이체는 하기 식으로 표현될 수 있다:
N' - (Z1)p - Y - Z2 - Z3 - Z4 - C
여기서,
N'은 N-말단을 포함하고;
Z1은 서열번호 7의 90 내지 98번 위치의 아미노산 잔기 중에서 N-말단 방향으로 98번 위치의 아미노산 잔기로부터 5 내지 9개의 연속적인 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하며;
Y는 서열번호 7의 99 내지 162번 위치의 아미노산 잔기 중에서 N-말단 방향으로 162번 위치의 아미노산 잔기로부터 5 내지 64개의 연속적인 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하고;
Z2는 서열번호 7의 163 내지 199번 위치의 아미노산 잔기 중에서 C-말단 방향으로 163번 위치의 아미노산 잔기로부터 4 내지 37개의 연속적인 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하며;
Z3은 서열번호 8의 115 내지 220번 위치의 아미노산 잔기 중에서 N-말단 방향으로 220번 위치의 아미노산 잔기로부터 71 내지 106개의 연속적인 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하고;
Z4는 서열번호 8의 221 내지 327번 위치의 아미노산 잔기 중에서 C-말단 방향으로 221번 위치의 아미노산 잔기로부터 80 내지 107개의 연속적인 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 Fc 영역은 서열번호 9(hyFc), 서열번호 10(hyFcM1), 서열번호 11(hyFcM2), 서열번호 12(hyFcM3) 또는 서열번호 13(hyFcM4)의 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 일부 양상에서, Fc 영역은 서열번호 14의 아미노산 서열(비-용해성 마우스 Fc)을 포함할 수 있다.
본 개시내용과 함께 사용될 수 있는 Fc 영역의 다른 비제한적인 예는 미국 특허 제7,867,491호에 기재되어 있으며, 상기 특허는 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 융합 단백질은 올리고펩타이드 및 반감기 연장 모이어티를 둘 다 포함한다.
일부 양상에서, IL-7 단백질은 알부민, 이의 변이체 또는 단편에 융합될 수 있다. IL-7 알부민 융합 단백질의 예는 국제 출원 공개 제WO 2011/124718 A1호에서 찾을 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은, 선택적으로 가요성 링커에 의해, 프리-프로-B-세포 성장 자극 인자(pre-pro-B cell Growth Stimulating Factor; PPBSF)에 융합된다. 미국 특허 제2002/0058791A1호를 참조한다. 일부 양상에서, 개시내용에 유용한 IL-7 단백질은 특정 3차원 구조를 갖는 IL-7 컨포머(conformer)이다. 미국 특허 제2005/0249701 A1호를 참조한다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 Ig 쇄에 융합될 수 있으며, 여기서 IL-7 단백질의 아미노산 잔기 70 및 91번은 글리코실화되고 IL-7 단백질의 아미노산 잔기 116번은 비-글리코실화된다. 미국 특허 제7,323,549 B2호를 참조한다. 일부 양상에서, 잠재적인 T-세포 에피토프를 포함하지 않는(이에 의해 항-IL-7 T-세포 반응을 감소시킴) IL-7 단백질이 또한 본 개시내용에 사용될 수 있다. 미국 특허 제2006/0141581 A1호를 참조한다. 일부 양상에서, 카복시-말단 나선 D 영역에서 하나 이상의 아미노산 잔기 돌연변이를 갖는 IL-7 단백질이 본 개시내용에 사용될 수 있다. IL-7 돌연변이체는 수용체에 대한 더 낮은 결합 친화성에도 불구하고 IL-7R 부분 효능제로서 작용할 수 있다. 미국 특허 제2005/0054054A1호를 참조한다. 상기 열거된 특허 또는 간행물에 기재된 임의의 IL-7 단백질은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
추가적으로, 본 개시내용에 유용한 추가적인 IL-7 단백질의 비제한적인 예는 미국 특허 제7708985호, 미국 특허 제8034327호, 미국 특허 제8153114호, 미국 특허 제7589179호, 미국 특허 제7323549호, 미국 특허 제7960514호, 미국 특허 제8338575호, 미국 특허 제7118754호, 미국 특허 제7488482호, 미국 특허 제7670607호, 미국 특허 제6730512호, 국제 특허 제WO0017362호, 영국 특허 제2434578A호, 국제 특허 제WO2010/020766 A2호, 국제 특허 제WO91/01143호, 문헌[Beq et al., Blood, vol. 114 (4), 816, 23 July 2009, Kang et al., J. Virol. Doi:10.1128/JVI.02768-15, Martin et al., Blood, vol. 121 (22), 4484, May 30, 2013, McBride et al., Acta Oncologica, 34:3, 447-451, July 8, 2009, 및 Xu et al., Cancer Science, 109: 279-288, 2018]에 기재되어 있으며, 이들은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 올리고펩타이드는 IL-7 또는 이의 변이체의 N-말단 영역에 직접 연결된다. 일부 양상에서, 올리고펩타이드는 링커를 통해 N-말단 영역에 연결된다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 반감기 연장 모이어티는 IL-7 또는 이의 변이체의 C-말단 영역에 직접 연결된다. 특정 양상에서, 반감기 연장 모이어티는 링커를 통해 C-말단 영역에 연결된다. 일부 양상에서, 링커는 펩타이드 링커이다. 특정 양상에서, 펩타이드 링커는 Gly 및 Ser 잔기로 이루어진 10 내지 20개 아미노산 잔기의 펩타이드를 포함한다. 일부 양상에서, 링커는 알부민 링커이다. 일부 양상에서, 링커는 화학 결합이다. 특정 양상에서, 화학 결합은 이황화 결합, 다이아민 결합, 설파이드-아민 결합, 카복시-아민 결합, 에스터 결합, 공유 결합 또는 이들의 조합을 포함한다. 링커가 펩타이드 링커일 때, 일부 양상에서 연결은 임의의 연결 영역에서 일어날 수 있다. 이들은 당업계에 공지된 가교결합제를 사용하여 커플링될 수 있다. 일부 양상에서, 가교결합제의 예는 N-하이드록시 석신이미드 에스터, 예컨대, 1,1-비스(다이아조아세틸)-2-페닐에탄, 글루타르알데하이드, 및 4-아지도살리실산; 다이석신이미딜 에스터, 예컨대, 3,3'-다이티오비스(석신이미딜 프로피오네이트), 및 이작용성 말레이미드, 예컨대, 비스-N말레이미도-1,8-옥탄을 포함한 이미도 에스터를 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 융합 단백질의 IL-7(또는 이의 변이체)는 서열번호 15 내지 20에 제시된 아미노산 서열과 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 아미노 서열을 포함한다. 특정 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 융합 단백질의 IL-7(또는 이의 변이체)는 서열번호 15 내지 20에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양상에서, IL-7 융합 단백질은 IL-7의 활성 또는 이의 유사한 활성을 갖는 폴리펩타이드를 포함하는 제1 도메인; 메티오닌, 글리신 또는 이들의 조합으로 이루어진 1 내지 10개 아미노산 잔기를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 도메인; 및 제1 도메인의 C-말단에 커플링된 변형된 면역글로불린의 Fc 영역인 제3 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 본 방법과 함께 사용될 수 있는 IL-7 융합 단백질은 서열번호 21 내지 25에 제시된 아미노산 서열과 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 아미노 서열을 포함한다. 특정 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 융합 단백질은 서열번호 21 내지 25에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 융합 단백질은 서열번호 26 및 27에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 IL-7 단백질은 대상체에게 투여될 때 대상체에서 절대 림프구 수를 증가시킬 수 있다. 특정 양상에서, 대상체는 본 명세서에 개시된 질환 또는 장애(예를 들어, 암)를 앓고 있다. 일부 양상에서, 대상체는 건강한 개체이다(예를 들어, 본 명세서에 기재된 질환 또는 장애, 예를 들어, 암을 앓지 않음). 특정 양상에서, 절대 림프구 수는 기준(예를 들어, IL-7 단백질을 투여받지 않은 대상체에서의 상응하는 수준)과 비교하여, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 약 100%만큼 증가된다.
IV. CAR-보유 면역 세포
A. 모노 CAR-T 세포
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 양상에서, 예를 들어, 고형 종양을 치료하기 위해서 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질과 조합하여 투여될 수 있는 CAR-보유 면역 세포는 CAR-T 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "CAR-T 세포"는 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 T 세포를 지칭한다. 용어 "키메라 항원 수용체"는 세포외 도메인에 대한 항원의 결합 시 전문적인 기능을 수행하도록 세포를 지시하는 세포내 도메인에 커플링된 항원-특이적 세포외 도메인을 갖는 재조합 융합 단백질을 지칭한다. 용어 "인공 T 세포 수용체", "키메라 T-세포 수용체" 및 "키메라 면역수용체''는 각각 용어 "키메라 항원 수용체"와 상호 호환적으로 사용될 수 있다. 키메라 항원 수용체는 세포내 도메인을 통해서 활성화 신호를 전달하고, MHC-독립적인 항원에 결합하는 능력에 의해서 다른 항원 결합제와 구별된다. CAR의 세포외 부분 및 세포내 부분은 하기에 보다 상세하게 논의된다.
키메라 항원 수용체의 항원-특이적 세포외 도메인(즉, 항원-결합 도메인)은 항원, 전형적으로 악성종양의 표면-발현된 항원을 인식하고 이에 특이적으로 결합한다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 CAR의 항원-결합 도메인은 고형 종양 항원(즉, 고형 종양에서 발현되는 항원)에 결합한다. 고형 종양 항원은의 비제한적인 예는 메소텔린, MR1, 구아닐레이트 사이클라제 C(GC-C), 표피 성장 인자 수용체(EGFR 또는 erbB-1), 인간 표피 성장 인자 수용체 2(HER2 또는 erbB2), erbB-3, erbB-4, MUC-1, 흑색종-연관 콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸(MCSP), 엽산염 수용체 1(FOLR1), CD4, CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, CD38, CD44, CD44v6, CD44v7/8, CD70, CD123, CD138, CD171, CEA, CSPG4, CXCR5, c-Met, HERV-엔벨로프 단백질, 에리오스틴(eriostin), Bigh3, SPARC, BCR, CD79, CD37, EGFRvIII, EGP2, EGP40, IGFr, L1CAM, AXL, 조직 인자(Tissue Factor: TF), CD74, EpCAM, EphA2, MRP3카드헤린 19(CDH19), 표피 성장 인자 2(HER2), 5T4, 8H9, αvβ6 인테그린, BCMA, B7-H3, B7-H6, CAIX, CA9, FAP, FBP, 태아 AchR, FRcc, GD2, GD3, 글리피칸-1(GPC1), 글리피칸-2(GPC2), 글리피칸-3(GPC3), HLA-A1+MAGE1, HLA-A1+NY-ESO-1, IL-13Rcc2, 루이스-Y, KDR, MCSP, Muc1, Muc16, NCAM, NKG2D 리간드, NY-ESO-1, PRAME, PSC1, PSCA, PSMA, ROR1, ROR2, SP17, 서바이빈, TAG72, TEM, 암배아 항원, HMW-MAA, VEGF, CLDN18.2 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 CAR의 항원-특이적 세포외 도메인은 약 0.1pM 내지 약 10μM, 예를 들어, 약 0.1pM 내지 약 1μM 또는 약 0.1pM 내지 약 100nM의 친화도 상수 또는 상호작용 친화도(KD)로 항원(예를 들어, 고형 종양 항원)에 특이적으로 결합한다. 상호작용 친화도를 결정하는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 본 개시내용의 CAR에서 사용하기에 적합한 항원-특이적 세포외 도메인은 임의의 항원-결합 폴리펩타이드일 수 있고, 이들 중 광범위한 것이 당업계에 공지되어 있다. 일부 양상에서, 항원-결합 도메인은 단일 쇄 Fv(scFv)이다. 다른 항체-기반 인식 도메인(cAb VHH(낙타과 항체 가변 도메인) 및 이의 인간화 버전, lgNAR VH(상어 항체 가변 도메인) 및 이의 인간화 버전, sdAb VH(단일 도메인 항체 가변 도메인) 및 "낙타화" 항체 가변 도메인이 사용에 적합하다. 일부 양상에서, T 세포 수용체(TCR) 기반 인식 도메인, 예컨대, 단일 쇄 TCR(scTv, V.알파.V.베타를 함유하는 단일 쇄 2-도메인 TCR)이 또한 사용에 적합하다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 명세서에 개시된 키메라 항원 수용체는 또한 항원-특이적 세포외 도메인에 대한 항원 결합 시 (CAR을 발현하는) 세포에 세포내 신호를 제공하는 세포내 도메인을 포함할 수 있다. 일부 양상에서, CAR의 세포내 신호전달 도메인은 키메라 수용체가 발현되는 T 세포의 효과기 기능 중 적어도 하나의 활성화에 대한 책임이 있다.
용어 "세포내 도메인"은 세포외 도메인에 대한 항원의 결합 시 효과기 기능 신호를 전달하고, 전문적인 기능을 수행하도록 T 세포를 지시하는 CAR의 부분을 지칭한다. 적합한 세포내 도메인의 비제한적인 예는 T-세포 수용체의 제타 쇄 또는 이의 동족체(예를 들어, 데타, 델타, 감마 또는 엡실론), MB1 쇄, 829, FcγRIII, FcγRI 및 신호전달 분자의 조합, 예컨대, CD3.제타. 및 CD28, CD27, 4-1BB, DAP-10, OX40 및 이들의 조합뿐만 아니라 다른 유사한 분자 및 단편을 포함한다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 CAR은 본 명세서에 개시된 단백질의 전체 세포내 도메인을 포함한다. 일부 양상에서, 세포내 도메인은 절단된다. 세포내 도메인의 절단된 부분은, 그것이 여전히 효과기 기능 신호를 전달하는 한, 온전한 쇄 대신에 사용될 수 있다. 따라서 용어 세포내 도메인은 효과기 기능 신호를 전달하기에 충분한 세포내 도메인의 임의의 절단된 부분을 포함하는 의미이다.
일부 양상에서, 항원-특이적 세포외 도메인(즉, 항원-결합 도메인)은 막관통 도메인에 의해서 키메라 항원 수용체의 세포내 도메인에 연결된다. 막관통 도메인은 세포막을 횡단하고, CAR을 T 세포 표면에 고정시키고, 세포외 도메인을 세포내 신호전달 도메인에 연결함으로써, T 세포 표면에서 CAR의 발현에 영향을 미친다. 일부 양상에서, 항원-특이적 세포외 도메인은 펩타이드 힌지 또는 스페이서에 의해서 CAR의 막관통 도메인에 연결된다. 특정 양상에서, 항원-특이적 세포외 도메인과 막관통 도메인 사이에 그리고 탠덤 CAR의 경우에 다수의 scFv 사이에 스페이서 도메인을 포함시키는 것은 항원-결합 도메인(들)의 가용성에 영향을 줌으로써, CAR 기능에 영향을 줄 수 있다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 CAR은 하나 이상의 공자극성 도메인을 추가로 포함할 수 있다. 일부 양상에서, 공자극성 도메인은 사이토카인 생산, 증식, 세포독성 및/또는 생체내 지속을 향상시킬 수 있는 공자극성 단백질의 세포내 신호전달 도메인으로부터 유래된다. 일부 양상에서, 막관통 도메인은 공자극성 도메인에 융합되고, 선택적으로 공자극성 도메인은 제2 공자극성 도메인에 융합되고, 공자극성 도메인은 CD3ζ에 제한되지 않는 신호전달 도메인에 융합된다. 본 명세서에 개시된 CAR에 사용될 수 있는 적합한 막관통 도메인, 공자극성 도메인 및 스페이서는 당업계에 공지되어 있다.
B. 게놈 편집된 CAR-T 세포
일부 양상에서, 본 개시내용에서 사용될 수 있는 CAR-보유 면역 세포는 게놈 편집된 CAR-T 세포이다. 일부 양상에서, 이러한 세포는 세포가 CAR이 특이적으로 결합하는 하나 이상이 항원이 결핍되도록 변형된 적이 있다. 따라서, 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 CAR-보유 면역 세포는 동족살해-저항성이다. 일부 양상에서, 면역 세포(예를 들어, T 세포)의 하나 이상의 항원은 키메라 항원 수용체가 하나 이상의 변형된 항원에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 변형된다. 예를 들어, 키메라 항원 수용체에 의해서 인식되는 하나 이상의 항원의 에피토프는 하나 이상의 아미노산 변화(예를 들어, 치환 또는 결실)에 의해서 변형될 수 있거나, 에피토프가 항원으로부터 결실될 수 있다. 일부 양상에서, 하나 이상의 항원의 발현은 면역 세포(예를 들어, T 세포)에서 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소된다. 단백질 발현을 감소시키는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고, 단백질을 암호화하는 핵산 서열에 작동 가능하게 연결된 프로모터를 변형시키는 것 또는 대체하는 것을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포(예를 들어, CAR-T 세포)는, 하나 이상의 항원이 하나 이상의 항원을 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서 발현되지 않도록 변형된다. 면역 세포(예를 들어, CAR-T 세포)를 하나 이상의 항원이 결핍되도록 유전자 변형시키는 방법(예를 들어, CRISPR/cas9 유전자 편집)은 당업계에 널리 공지되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용에 포함되는 CAR-T 세포는 T 세포 수용체(TCR)-CD3 복합체의 부분의 결실로 인해서 내인성 T 세포 수용체(TCR) 신호전달이 추가로 결핍될 수 있다. 일부 양상에서, CAR-T 세포에서 내인성 TCR 신호전달을 감소시키거나 제거하는 것은 동종이계 T 세포를 사용하여 CAR-T 세포를 생산하는 경우 이식편대숙주병(GvHD)를 예방하거나 감소시킬 수 있다. 내인성 TCR 신호전달을 제거하거나 억제하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고, TCR-CD3 수용체 복합체의 부분, 예를 들어, TCR 수용체 알파 쇄(TRAC), TCR 수용체 베타 쇄(TRBC), CD3.엡실론, CD3.감마, CD3.델타 및/또는 CD3.감마를 결실시키는 것을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. TCR 수용체 복합체의 부분의 결실은 TCR 매개된 신호전달을 차단할 수 있기 때문에, 생명을 위협하는 GvHD를 유도하지 않으면서 CAR-T 세포의 공급원으로서 동종이계 T 세포를 안전하게 사용할 수 있게 한다.
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 CAR-T 세포는 하나 이상의 자살 유전자를 추가로 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "자살 유전자"는 활성화되는 경우 CAR-T 세포의 사멸을 초래하는, 당업계에 공지된 표준 방법에 의해서 CAR-T 세포에 도입되는 핵산을 지칭한다. 자살 유전자는 필요한 경우 생체내에서 CAR-T 세포의 효과적인 추적 및 제거를 가능하게 할 수 있다. 자살 유전자에 의해서 가능해진 사멸은 당업계에 공지된 방법에 의해서 일어날 수 있다. 당업계에 공지된 적합한 자살 유전자 요법 시스템은 다양한 단순 포진 바이러스 티미딘 키나제(HSVtk)/간시클로비어(GCV) 자살 유전자 요법 시스템 또는 유도성 카스파제 9 단백질을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 특정 양상에서, 자살 유전자는 CD34/티미딘 키나제 키메라 자살 유전자이다.
C. 이중 CAR-T 세포
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 이중 CAR-T 세포이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "이중 CAR-T 세포"는 동일한 효과기 세포 내에서 발현되는 상이한 표적 항원에 대한 친화도를 갖는 2개의 구별되는 키메라 항원 수용체를 발현하는 CAR-T 세포이고, 여기서 각각의 CAR은 독립적으로 기능한다.　CAR은 단일 폴리뉴클레오타이드 서열 또는 다수의 폴리뉴클레오타이드 서열로부터 발현될 수 있다. 이중 CAR-T 세포의 비제한적인 예는 하기에 기재되어 있다.
게놈 편집된, 이중 CAR-T 세포, 즉, CD2*CD3e-dCARTΔCD2ΔCD3Δ은 상업적으로 합성된 항-CD2 단일 쇄 가변 단편을 CD28 및 4-1BB 내부 신호전달 도메인을 갖는 3세대 CAR 골격을 함유하는 렌티바이러스 벡터에 클로닝하고, 상업적으로 합성된 항-CD3e 단일 쇄 가변을 CD28 및 4-1BB 내부 신호전달 도메인을 갖는 추가적인 3세대 CAR 골격을 함유하는 동일한 렌티바이러스 벡터에 클로닝하여 2개의 CAR 작제물이 동일한 벡터로부터 발현되는 플라스미드를 생성함으로써 생성될 수 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 이중 키메라 항원 수용체(dCAR), 즉, CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합하는 단일 렌티바이러스 작제물로부터 발현된 2개의 CAR을 포함하는 조작된 T 세포를 제공하며, 여기서 T 세포는 CD5 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD5*TRAC-dCARTΔCD5ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD5의 변형, (b) CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD5 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD5*TRAC-CARTΔCD5ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합된 dCAR을 손상시킨 조작된 T 세포를 제공하고, 여기서 T 세포는 CD7 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD7*TRAC-dCARTΔCD7ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD5의 변형, (b) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD7 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD7*TRAC-dCARTΔCD7ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 eDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합된 dCAR을 손상시킨 조작된 T 세포를 제공하고, 여기서 T 세포는 CD2 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD2*TRAC-dCARTΔCD2ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD2의 변형, (b) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD2 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD2*TRAC-dCARTΔCD2ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
D. 탠덤 CAR-T 세포
일부 양상에서, CAR-보유 면역 세포는 탠덤 CAR-T 세포이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "탠덤 CAR-T 세포"는 상이한 표적에 대해 친화도를 갖는 2개의 구별되는 항원 인식 도메인을 함유하는 단일 키메라 항원 폴리펩타이드를 갖는 CAR-T 세포를 지칭하고, 여기서 항원 인식 도메인은 펩타이드 링커를 통해서 연결되고, 공통 공자극성 도메인(들)을 공유하고, 항원 인식 도메인 중 어느 하나의 결합은 공통 공자극성 도메인(들) 및 신호전달 도메인을 통해서 신호를 전달할 것이다. 탠덤 CAR-T 세포의 비제한적인 예는 하기에 기재되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 탠덤 키메라 항원 수용체(tCAR), 즉, CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합하는 단일 세포내 도메인을 공유하는 2개의 scFv를 포함하는 조작된 T 세포를 제공하며, 여기서 T 세포는 CD5 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD5*TRAC-tCARTΔCD5ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD5의 변형, (b) CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD5 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD5 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD5*TRAC-tCARTΔCD5ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합된 tCAR을 손상시킨 조작된 T 세포를 제공하고, 여기서 T 세포는 CD7 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD7*TRAC-tCARTΔCD7ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD5의 변형, (b) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD7 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD7*TRAC-tCARTΔCD7ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 특이적으로 결합된 tCAR을 손상시킨 조작된 T 세포를 제공하고, 여기서 T 세포는 CD2 및 TRAC가 결핍되어 있다(예를 들어, CD2*TRAC-tCARTΔCD2ΔTRAC 세포). 비제한적인 예에서, CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 T 세포에 의해서 발현된 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC) 및 CD2의 변형, (b) CD7 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)의 발현이 T 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 T 세포의 변형, 또는 (c) (예를 들어, CD2 및/또는 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) CD2 및 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)가 발현되지 않도록 하는 T 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, T 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD2*TRAC-tCARTΔCD2ΔTRAC 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
본 개시내용에서 작제되어 사용될 수 있는 CAR-T 세포(예를 들어, 모노 CAR-T 세포, 게놈 편집된 CAR-T 세포, 이중 CAR-T 세포 또는 탠덤 CAR-T 세포)의 비제한적인 예는 표 1 및 표 2에 제공되어 있다.
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
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Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
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E. 모노 iNKT-CAR 세포
일부 양상에서, 본 개시내용에서 사용될 수 있는 CAR-보유 면역 세포는 iNKT-CAR 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "iNKT-CAR 세포" 또는 "CAR-iNKT 세포는 키메라 항원 수용체를 발현하는 비변이체 자연 살해 T(iNKT) 세포를 지칭한다. 본 개시내용에서 작제되어 사용될 수 있는 iNKT-CAR 세포의 비제한적인 예는 하기에 추가로 기재되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 CD7에 특이적으로 결합하는 단일 CAR을 포함하는 조작된 iNKT 세포를 제공하며, 여기서 iNKT 세포는 CD7가 결핍되어 있다(예를 들어, CD7-iNKT-CARΔCD7 세포). 비제한적인 예에서, CD7의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD7에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 iNKT 세포에 의해서 발현된 CD7의 변형, (b) CD7의 발현이 iNKT 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 iNKT 세포의 변형 또는 (c) CD7이 (예를 들어, CD7을 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) 발현되지 않도록 하는 iNKT 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, iNKT 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD7-iNKT-CARΔCD7 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
CD7 특이적인 iNKT-CAR 세포에 대한 CAR은 상업적으로 합성된 항-CD7 단일 쇄 가변 단편(scFv)을 CD28 및 4-1BB 내부 신호전달 도메인을 갖는 3세대 CAR 골격에 클로닝함으로써 생성될 수 있다. 세포외 hCD34 도메인은 바이러스 형질도입 및 항-hCD34 자석 비드를 사용한 정제 후에 CAR의 검출을 가능하게 하기 위해서 P2A 펩타이드 이후에 첨가될 수 있다. 다른 악성 T 세포 항원에 특이적인 CAR을 제조하기 위해서 유사한 방법이 후속될 수 있다.
F. 이중 iNKT-CAR 세포
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 CAR-보유 면역 세포는 이중 iNKT-CAR 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "이중 iNKT-CAR 세포" 또는 "iNKT-dCAR"는 동일한 효과기 세포 내에서 발현되는 상이한 표적 항원에 대한 친화도를 갖는 2개의 구별되는 키메라 항원 수용체를 발현하는 iNKT-CAR 세포를 지칭하고, 여기서 각각의 CAR은 독립적으로 기능한다. CAR은 단일 폴리뉴클레오타이드 서열 또는 다수의 폴리뉴클레오타이드 서열로부터 발현될 수 있다. 이러한 CAR-보유 면역 세포의 비제한적인 예는 하기에 추가로 기재되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 이중 CAR(dCAR), 즉, CD7 및 CD2에 특이적으로 결합하는 단일 렌티바이러스 작제물로부터 발현된 2개의 CAR을 포함하는 조작된 iNKT 세포를 제공하며, 여기서 iNKT 세포는 CD7 및 CD2(예를 들어, CD7xCD2-iNKT-dCARΔCD7ΔCD2 세포)가 결핍되어 있다. 비제한적인 예에서, CD7 및 CD2의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD7 또는 CD2에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 iNKT 세포에 의해서 발현된 CD7 및 CD2의 변형, (b) CD7 및 CD2의 발현이 iNKT 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 iNKT 세포의 변형 또는 (c) CD7 및 CD2가 (예를 들어, CD7 및/또는 CD2를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) 발현되지 않도록 하는 iNKT 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, iNKT 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD7*CD2-iNKT-dCARΔCD7ΔCD2 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
G. 탠덤 iNKT-CAR 세포
일부 양상에서, 본 개시내용에 유용한 CAR-보유 면역 세포는 텐덤 iNKT-CAR 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "탠덤 iNKT-CAR 세포" 또는 "iNKT-tCAR"는 상이한 표적에 대해 친화도를 갖는 2개의 구별되는 항원 인식 도메인을 함유하는 단일 키메라 항원 폴리펩타이드를 갖는 iNKT-CAR 세포를 지칭하고, 여기서 항원 인식 도메인은 펩타이드 링커를 통해서 연결되고, 공통 공자극성 도메인(들)을 공유하고, 항원 인식 도메인 중 어느 하나의 결합은 공통 공자극성 도메인(들) 및 신호전달 도메인을 통해서 신호를 전달할 것이다. 이러한 CAR-보유 면역 세포의 비제한적인 예는 하기에 추가로 기재되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 탠덤 CAR(tCAR), 즉, CD7 및 CD2에 특이적으로 결합하는 단일 세포내 도메인을 공유하는 2개의 scFv를 포함하는 조작된 iNKT 세포를 제공하며, 여기서 iNKT 세포는 CD7 및 CD2가 결핍되어 있다(예를 들어, CD7xCD2-iNKT-tCARΔCD7ΔCD2 세포). 비제한적인 예에서, CD7 및 CD2의 결핍은, (a) 키메라 항원 수용체가 변형된 CD7 또는 CD2에 더 이상 특이적으로 결합하지 않도록 하는 iNKT 세포에 의해서 발현된 CD7 및 CD2의 변형, (b) CD7 및 CD2의 발현이 iNKT 세포에서 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 그 초과만큼 감소되도록 하는 iNKT 세포의 변형 또는 (c) CD7 및 CD2가 (예를 들어, CD7 및/또는 CD2를 암호화하는 유전자의 결실 또는 파괴에 의해서) 발현되지 않도록 하는 iNKT 세포의 변형으로부터 발생하였다. 일부 양상에서, iNKT 세포는 자살 유전자를 포함한다. 비제한적인 예에서, CD7*CD2-iNKT-tCARΔCD7ΔCD2 세포에서 발현되는 자살 유전자는 인간 CD34 cDNA의 세포외 도메인 및 막관통 도메인에 프레임 내에서 융합된 변형된 인간-단순 포진 바이러스-1-티미딘 키나제(TK) 유전자를 암호화한다.
게놈 편집된, 탠덤 iNKT-CAR 세포에 대한 tCAR, 즉, CD7*CD2-iNKT-tCARΔCD7ΔCD2는 상업적으로 합성된 항-CD7 단일 쇄 가변 단편(scFv) 및 항-CD2 단일 쇄 가변 단편(scFv)을 CD28 및 4-1BB 내부 신호전달 도메인을 갖는 3세대 CAR 골격에 클로닝함으로써 생성될 수 있다. 세포외 hCD34 도메인은 바이러스 형질도입 및 항-hCD34 자석 비드를 사용한 정제 후에 CAR의 검출을 가능하게 하기 위해서 P2A 펩타이드 이후에 첨가될 수 있다. 다른 악성 T 세포 항원에 특이적인 tCAR을 제조하기 위해서 유사한 방법이 후속될 수 있다.
본 개시내용에서 작제되어 사용될 수 있는 iNKT-CAR 세포(예를 들어, 모노 iNKT-CAR 세포, 게놈 편집된 iNKT-CAR 세포, 이중 iNKT-CAR 세포 또는 탠덤 iNKT-CAR 세포)의 비제한적인 예는 표 1 및 표 1에 제공되어 있다.
V. 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포
본 명세서에 기재된 바와 같이, CAR-보유 면역 세포 이외의 변형된 면역 세포가 또한 예를 들어, 고형 종양을 치료하기 위해서 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질과 조합하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 고형 종양의 치료 방법은 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 트랜스제닉 (TCR)-보유 면역 세포는 고형 종양 항원을 특이적으로 표적으로 할 수 있다. 일부 양상에서, 고형 종양 항원은 메소텔린, MR1, 구아닐레이트 사이클라제 C(GC-C), 표피 성장 인자 수용체(EGFR 또는 erbB-1), 인간 표피 성장 인자 수용체 2(HER2 또는 erbB2), erbB-3, erbB-4, MUC-1, 흑색종-연관 콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸(MCSP), 엽산염 수용체 1(FOLR1), CD4, CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, CD38, CD44, CD44v6, CD44v7/8, CD70, CD123, CD138, CD171, CEA, CSPG4, CXCR5, c-Met, HERV-엔벨로프 단백질, 에리오스틴(eriostin), Bigh3, SPARC, BCR, CD79, CD37, EGFRvIII, EGP2, EGP40, IGFr, L1CAM, AXL, 조직 인자(Tissue Factor: TF), CD74, EpCAM, EphA2, MRP3카드헤린 19(CDH19), 표피 성장 인자 2(HER2), 5T4, 8H9, αvβ6 인테그린, BCMA, B7-H3, B7-H6, CAIX, CA9, FAP, FBP, 태아 AchR, FRcc, GD2, GD3, 글리피칸-1(GPC1), 글리피칸-2(GPC2), 글리피칸-3(GPC3), HLA-A1+MAGE1, HLA-A1+NY-ESO-1, IL-13Rcc2, 루이스-Y, KDR, MCSP, Muc1, Muc16, NCAM, NKG2D 리간드, NY-ESO-1, PRAME, PSC1, PSCA, PSMA, ROR1, ROR2, SP17, 서바이빈, TAG72, TEM, 암배아 항원, HMW-MAA, VEGF, CLDN18.2 또는 이들의 조합물로부터 선택된다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 양상에서, 외인성 트랜스진을 발현하도록 면역 세포를 형질도입하는 것은 트랜스진을 발현하는 벡터(예를 들어, 렌티바이러스 또는 레트로바이러스)를 사용하는 것을 포함할 수 있다. 그러나, 트랜스진, 예컨대, 트랜스제닉 TCR을 암호화하는 것의 경우, 트랜스진의 렌티바이러스 또는 레트로바이러스 삽입은 다수의 유전자좌에서 무작위 통합 사건을 생성시키기 때문에 생리학적 발현 수준을 초과할 수 있다. 트랜스제닉 TCR의 경우, 내인성 TCR(예를 들어, 여기서 변형될 면역 세포는 T 세포임)과의 잘못 짝지움은 제거되지 않는다면 원치않는 특이성 및 낮은 수율로도 이어질 수 있다. 따라서, CAR-보유 면역 세포(예를 들어, CAR-T 세포 또는 iNKT-CAR 세포)에 대해서 상기에 기재된 바와 같이, 면역 세포에서 내인적으로 발현되는 하나 이상의 유전자는 트랜스진(예를 들어, 트랜스제닉 TCR을 암호화하는 트랜스진)의 발현을 방해하지 않도록 변형될 수 있다.
일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 T 세포를 포함한다. 특정 양상에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 특정 양상에서, T 세포는 CD4+ T 세포이다. 일부 양상에서, T 세포는 CD8+ T 세포 및 CD4+ T 세포 둘 다를 포함한다. 특정 양상에서, 트랜스제닉 TCR을 발현하는 T 세포는 T 세포 수용체(TCR)-CD3 복합체 일부의 결실로 인해서 내인성 T 세포 수용체 (TCR) 신호전달이 결핍되어 있다. 일부 양상에서, T 세포에서 내인성 TCR 신호전달의 감소 또는 제거는, 동종이계 T 세포를 사용하여 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포를 생산하는 경우 이식편대숙주병(GvHD)을 예방하거나 감소시킬 수 있다. 일부 양상에서, T 세포에서 내인성 TCR 신호전달의 감소 또는 제거는 세포에서 트랜스제닉 TCR의 발현을 증가시키는 데 도움을 줄 수 있다. 내인성 TCR 신호전달을 제거하거나 억제하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고, TCR-CD3 수용체 복합체의 부분, 예를 들어, TCR 수용체 알파 쇄(TRAC), TCR 수용체 베타 쇄(TRBC), CD3.엡실론, CD3.감마, CD3.델타 및/또는 CD3.감마를 결실시키는 것을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
일부 양상에서, TCR-보유 면역 세포는 자가유래 세포, 즉, 본 명세서에 개시된 병용 요법을 필요로 하는 대상체로부터 채취된 면역 세포 또는 세포이다. 이러한 양상에서, 대상체로부터 단리된 면역 세포는 트랜스제닉 TCR을 발현하도록 변형될 수 있고, 그 다음 대상체에게 재도입될 수 있다. 자가유래 세포는 세포의 임의의 면역학적 기반 거부를 회피하는 이점을 갖는다. 대안적으로, 세포는 예를 들어, 공여자로부터 채취된 동종이계일 수 있다. 전형적으로, 세포가 공여자로부터 유래되는 경우, 이것은 수용자과 충분히 면역학적으로 호환성인 공여자로부터 유래될 것이고, 즉, 면역억제에 대한 필요성을 줄이거나 제거하기 위해서 이식 거부되지 않을 것이다. 일부 양상에서, 세포는 이종발생성(xenogeneic) 공급원, 즉, 수용자 또는 수용자의 종과 충분히 면역학적으로 호환성이도록 유전자 조작된 비인간 포유동물이다. 면역학적 호환성의 결정 방법은 당업계에 공지되어 있고, HLA 및 ABO 결정기에 대한 공여자-수용자 호환성을 평가하기 위한 조직 타이핑(tissue typing)을 포함한다. 예를 들어, 문헌[Transplantation Immunology, Bach and Auchincloss, Eds. (Wiley, John & Sons, Incorporated 1994)] 참조하기 바란다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 HLA-독립적인 방식으로 고형 종양 항원을 인식한다. 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 고형 종양을 선택적으로 사멸시킬 수 있다(즉, 건강한 세포, 심지어는 건강하지만 스트레스가 있거나 감염된 건강한 세포를 사멸시키지 않는다). 일부 양상에서, 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 단형성 MHC 클래스 1-관련 단백질 MR1을 인식한다. 이러한 TCR-보유 면역 세포이 예는 문헌[Crowther, M.D., et al., Nat Immunol 21(2): 178-185 (Feb. 2020)] 및 미국 특허 제2019/0389926 A1호에 제공되어 있으며, 이들 각각은 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된다.
VI. 키메라 항원 수용체 및 트랜스제닉 T-세포 수용체 작제
본 개시내용에 유용한 CAR 및/또는 트랜스제닉 TCR은 당업계에 공지된 임의의 적절한 방법에 의해서 설계될 수 있다. 예를 들어, 국제 공개 제WO2018027036A1호 및 제WO2019138217A1호를 참조하기 바라며, 이들 각각은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다. 렌티바이러스 벡터 및 세포주는 상기 문헌에 개시된 바와 같이 그리고 당업계에 공지된 방법에 의해서 그리고 상업적 공급원으로부터 얻어지고, 가이드 RNA가 설계되고, 검증되고, 합성될 수 있다.
조작된 CAR 및/또는 트랜스제닉 TCR은 키메라 항원 수용체 또는 트랜스제닉 TCR을 암호화하는 핵산 서열을 표적 세포 게놈에 효율적으로 그리고 안정적으로 통합시키는 레트로바이러스를 사용하여 면역 세포(예를 들어, T 세포 또는 iNKT 세포)에 도입될 수 있다. 예를 들어, T-세포 수용체(TCR)는 주조직적합성 복합체(major histocompatibility complex: MHC) 분자에 결합된 펩타이드로서 표적 항원의 단편을 인식하는 데 책임이 있는 T 세포의 표면 상에서 발견되는 분자이다. TCR은 2개의 상이한 단백질 쇄로 구성된 이종이량체이다. 인간에서, T 세포의 95%에서, TCR은 알파(α) 쇄 및 베타(β) 쇄(각각 TRA 및 TRB에 의해서 암호화됨)로 이루어지는 반면, T 세포의 5%에서, TCR은 감마 및 델타(γ/δ) 쇄(각각 TRG 및 TRD에 의해서 암호화됨)로 이루어진다. 따라서, 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포는 TRA 및 TRB 유전자 또는 TRG 및 TRD 유전자를 (벡터를 통해서) 면역 세포에 인공적으로 도입함으로써 작제될 수 있다. 특정 양상에서, TRA 및 TRB 유전자 또는 TRG 및 TRD 유전자는 동일한 벡터에서 발현될 수 있다. 일부 양상에서, TRA 및 TRB 유전자 또는 TRG 및 TRD 유전자는 별개의 벡터에서 발현된다.
당업계에 공지된 다른 방법은 렌티바이러스 형질도입, 트랜스포존-기반 시스템, 직접 RNA 형질주입 및 CRISPR/Cas 시스템(예를 들어, 적합한 Cas 단백질, 예컨대, Cas3, Cas4, Cas5, Cas5e(또는 CasD), Cas6, Cas6e, Cas6f, Cas7, Cas8a1 , Cas8a2, Cas8b, Cas8c, Cas9, Cas10, Casl Od, CasF, CasG, CasH, Csy1 , Csy2, Csy3, Cse1(또는 CasA), Cse2(또는 CasB), Cse3(또는 CasE), Cse4(또는 CasC), Csc1 , Csc2, Csa5, Csn2, Csm2, Csm3, Csm4, Csm5, Csm6, Cmr1 , Cmr3, Cmr4, Cmr5, Cmr6, Csb1 , Csb2, Csb3,Csx17, Csx14, Csx1 0, Csx16, CsaX, Csx3, Csz1 , Csx15, Csf1 , Csf2, Csf3, Csf4 및 Cu1966 등을 사용한 타입 I, 타입 II 또는 타입 III 시스템)을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 징크 핑거 뉴클레아제(zinc finger nuclease: ZFN) 및 전사 활성화인자-유사 효과기 뉴클레아제(transcription activator-like effector nuclease: TALEN)가 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Shearer RF and Saunders DN, "Experimental design for stable genetic manipulation in mammalian cell lines: lentivirus and alternatives," Genes Cells 2015 Jan;20(1):1-10] 참조하기 바란다.
VII. 핵산, 벡터, 숙주 세포
본 명세서에 기재된 추가 양상는 본 명세서에 기재된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질, CAR 및/또는 트랜스제닉 TCR)를 암호화하는 하나 이상의 핵산 분자에 관한 것이다. 핵산은 전체 세포, 세포 용해물 또는 부분적으로 정제된 또는 실질적으로 순수한 형태로 존재할 수 있다. 핵산은 알칼리/SDS 처리, CsCl 밴딩, 컬럼 크로마토그래피, 제한 효소, 아가로스 겔 전기영동 및 당업계에 널리 공지된 다른 기법을 포함한 표준 기법에 의해, 다른 세포 성분 또는 다른 오염물질, 예를 들어, 다른 세포 핵산(예를 들어, 다른 염색체 DNA, 예를 들어, 사실상 단리된 DNA에 연결된 염색체 DNA) 또는 단백질로부터 정제될 때 "단리"되거나 "실질적으로 순수하게 된다". 문헌[F. Ausubel, et al., ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York]을 참조한다. 본 명세서에 기재된 핵산은, 예를 들어, DNA 또는 RNA일 수 있고 인트론 서열을 포함할 수 있거나 포함할 수 없다. 특정 양상에서, 핵산은 cDNA 분자이다. 본 명세서에 기재된 핵산은 당업계에 공지진 표준 분자 생물학 기법을 사용하여 얻어질 수 있다.
본 명세서에 개시된 특정 핵산 분자는 (예를 들어, 본 명세서에 개시된) IL-7 단백질을 암호화하는 것이다. 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질을 암호화하는 예시적인 핵산 서열은 서열번호 29 내지 39에 제시되어 있다.
일부 양상에서, 본 개시내용은 본 명세서에 개시된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)를 암호화하는 단리된 핵산 분자를 포함하는 벡터를 제공한다. 일부 양상에서, 벡터는 유전자 요법에 사용될 수 있다.
(예를 들어, 인간에서) 유전자 요법으로서 사용될 때, 본 명세서에 개시된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)를 암호화하는 핵산은 0.1㎎ 내지 200㎎ 범위의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 양상에서, 투여량은 0.6㎎ 내지 100㎎ 범위이다. 특정 양상에서, 투여량은 1.2㎎ 내지 50㎎ 범위이다.
본 개시내용에 적합한 벡터는 발현 벡터, 바이러스 벡터, 및 플라스미드 벡터를 포함한다. 일부 양상에서, 벡터는 바이러스 벡터이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 발현 벡터는 삽입된 암호 서열의 전사 및 번역에 필요한 요소 또는 RNA 바이러스 벡터의 경우에 적절한 숙주 세포에 도입될 때 복제 및 번역에 필요한 요소를 포함하는 임의의 핵산 작제물을 지칭한다. 발현 벡터는 플라스미드, 파지미드, 바이러스, 및 이들의 유도체를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 바이러스 벡터는, 레트로바이러스, 예컨대, 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스, 하비 뮤린 육종 바이러스, 뮤린 유선 종양 바이러스, 및 라우스 육종 바이러스; 렌티바이러스; 아데노바이러스; 아데노-연관 바이러스; SV40-유형 바이러스; 폴리오마바이러스; 엡스타인-바 바이러스; 유두종 바이러스; 헤르페스 바이러스; 백시니아바이러스; 폴리오바이러스; 및 RNA 바이러스, 예컨대, 레트로바이러스와 같은 바이러스 유래의 핵산 서열을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 당업계에 널리 공지된 다른 벡터를 용이하게 이용할 수 있다. 특정 바이러스 벡터는 비-필수 유전자가 관심이 있는 유전자로 대체된 비-세포변성 진핵 바이러스를 기반으로 한다. 비-세포변성 바이러스는 레트로바이러스를 포함하며, 이의 생활주기는 게놈 바이러스 RNA를 DNA로 역전사한 후 숙주 세포 DNA로의 후속 프로바이러스(proviral) 통합을 포함한다.
일부 양상에서, 벡터는 아데노-연관 바이러스로부터 유래된다. 일부 양상에서, 벡터는 렌티바이러스로부터 유래된다. 렌티바이러스 벡터의 예는 국제 공개 제WO9931251호, 제W09712622호, 제W09817815호, 제W09817816호 및 제WO9818934호에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
다른 벡터는 플라스미드 벡터를 포함한다. 플라스미드 벡터는 당업계에 광범위하게 기재되었으며, 당업자에게 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989]을 참조한다. 지난 몇 년 동안, 플라스미드 벡터는 숙주 게놈 내에서 복제하고 통합하는 것이 불가능하기 때문에, 생체 내에서 유전자를 세포에 전달하는 데 특이 유리한 것으로 밝혀졌다. 그러나, 숙주 세포에 적합한 프로모터를 갖는 이러한 플라스미드는 플라스미드 내에 작동 가능하게 암호화된 유전자로부터 펩타이드를 발현할 수 있다. 상업적 공급업체로부터 일반적으로 사용되는 일부 플라스미드는 pBR322, pUC18, pUC19, 다양한 pcDNA 플라스미드, pRC/CMV, 다양한 pCMV 플라스미드, pSV40, 및 피블루스크립트(pBlueScript)를 포함한다. 구체적인 플라스미드의 추가적인 예는 pcDNA3.1, 카탈로그 번호 V79020; pcDNA3.1/hygro, 카탈로그 번호 V87020; pcDNA4/myc-His, 카탈로그 번호 V86320; 및 pBudCE4.1, 카탈로그 번호 V53220을 포함하며, 이들 모두 인비트로젠사(Invitrogen; 미국 캘리포니아주 칼즈배드 소재)의 것이다. 다른 플라스미드는 당업자에게 잘 알려져 있다. 추가적으로, 플라스미드는 표준 분자 생물학 기법을 사용하여 맞춤 설계되어 DNA의 특정 단편을 제거하고/하거나 추가할 수 있다.
또한 본 명세서에 개시된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)의 제조 방법이 본 개시내용에 포함된다. 일부 양상에서, 이와 같은 방법은 치료제를 암호화하는 핵산 분자, 예를 들어, 서열번호 29 내지 39를 포함하는 세포에서 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)를 발현하는 단계를 포함할 수 있다. 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질을 제조하는 방법에 관한 추가적인 상세 내용은, 예를 들어, 국제 공개 제WO 2016/200219호에 제공되어 있으며, 이는 본 명세서에 전문이 참고로 포함된다. 이러한 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 숙주 세포가 본 명세서에 포함된다. 사용될 수 있는 숙주 세포의 비제한적인 예는 무한증식 하이브리도마 세포, NS/0 골수종 세포, 293 세포, 중국 햄스터 난소(CHO) 세포, 헬라(HeLa) 세포, 인간 양수-유래 세포(CapT 세포), COS 세포 또는 이들의 조합을 포함한다.
VIII. 약제학적 조성물
생리학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 안정화제 중 원하는 정도의 순도를 갖는 하나 이상의 치료제(예를 들어, IL-7 단백질 및/또는 본 명세서에 개시된 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단)를 포함하는 조성물이 본 명세서에서 추가로 제공된다(문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA]). 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 IL-7 단백질 또는 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단을 포함한다. 본 명세서에 개시된 바와 같이, 이러한 조성물은 조합물(예를 들어, IL-7 단백질을 포함하는 제1 조성물 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단을 포함하는 제2 조성물)로 사용될 수 있다. 일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단 둘 다를 포함한다.
허용 가능한 담체, 부형제 또는 안정화제는 이용되는 투여량 및 농도에서 수용체에 대하여 무독성이며, 완충액, 예컨대, 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 방부제(예컨대, 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 뷰틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대, 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 잔기 미만) 폴리펩타이드; 단백질, 예컨대, 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대, 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 포함하는 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물; 킬레이트제, 예컨대, EDTA; 당, 예컨대, 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨; 염-형성 반대 이온, 예컨대, 나트륨; 금속 착물(예를 들어, Zn-단백질 착물); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대, TWEEN®, PLURONICS® 또는 폴리에틸렌 글라이콜(PEG)을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 증량제, 안정화제, 계면활성제, 완충제 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 하나 이상의 추가적인 성분을 포함한다.
본 개시내용에 유용한 완충제는 또 다른 산 또는 염기의 첨가 후 선택된 값 근처에서 용액의 산도(pH)를 유지하는 데 사용되는 약산 또는 약염기일 수 있다. 적합한 완충제는 조성물의 pH 제어를 유지함으로써 약제학적 조성물의 안정성을 최대화할 수 있다. 적합한 완충제는 또한 생리학적 호환성을 보장하거나 용해도를 최적화할 수 있다. 레올로지, 점도 및 기타 특성은 또한 조성물의 pH에 따라 달라질 수 있다. 일반적인 완충제는 Tris 완충액, Tris-Cl 완충액, 히스티딘 완충액, TAE 완충액, HEPES 완충액, TBE 완충액, 인산나트륨 완충액, MES 완충액, 암모늄 설페이트 완충액, 인산칼륨 완충액, 포타슘 티오사이아네이트 완충액, 석시네이트 완충액, 타트레이트 완충액, DIPSO 완충액, HEPPSO 완충액, POPSO 완충액, PIPES 완충액, PBS 완충액, MOPS 완충액, 아세테이트 완충액, 포스페이트 완충액, 카코딜레이트 완충액, 글리신 완충액, 설페이트 완충액, 이미다졸 완충액, 구아니딘 하이드로클로라이드 완충액, 포스페이트-시트레이트 완충액, 보레이트 완충액, 말로네이트 완충액, 3-피콜린 완충액, 2-피콜린 완충액, 4-피콜린 완충액, 3,5-루티딘 완충액, 3,4-루티딘 완충액, 2,4-루티딘 완충액, Aces, 다이에틸말로네이트 완충액, N-메틸이미다졸 완충액, 1,2-다이메틸이미다졸 완충액, TAPS 완충액, 비스-Tris 완충액, L-아르기닌 완충액, 락테이트 완충액, 글라이콜레이트 완충액 또는 이들의 조합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 증량제를 더 포함한다. 증량제는 생성물에 부피 및 질량을 추가하고, 이에 의해 이의 정확한 계량 및 취급을 용이하게 하기 위해 의약품에 첨가될 수 있다. 본 개시내용과 함께 사용될 수 있는 증량제는 염화나트륨(NaCl), 만니톨, 글리신, 알라닌 또는 이들의 조합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 또한 안정화제를 포함할 수 있다. 본 개시내용과 함께 사용될 수 있는 안정화제의 비제한적인 예는 수크로스, 트레할로스, 라피노스, 아르기닌 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 계면활성제를 포함한다. 특정 양상에서, 계면활성제는 알킬 에톡실레이트, 노닐페놀 에톡실레이트, 아민 에톡실레이트, 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리프로필렌 옥사이드, 지방 알코올, 예컨대, 세틸 알코올 또는 올레일 알코올, 코카미드 MEA, 코카미드 DEA, 폴리솔베이트, 도데실 다이메틸아민 옥사이드 또는 이들의 조합물로부터 선택될 수 있다. 일부 양상에서, 계면활성제는 폴리솔베이트 20 또는 폴리솔베이트 80이다.
일부 양상에서, IL-7 단백질을 포함하는 조성물은 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단(예를 들어, 이것은 IL-7 단백질과 조합하여 사용될 것임)을 위해서 사용된 것과 동일한 제형을 사용하여 제형화될 수 있다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 상이한 제형을 사용하여 제형화된다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 (a) 기초 완충액, (b) 당, 및 (c) 계면활성제를 포함하는 조성물로 제형화된다. 특정 양상에서, 기초 완충액은 히스티딘-아세테이트 또는 소듐 시트레이트를 포함한다. 일부 양상에서, 기초 완충액은 약 10 내지 약 50nM의 농도이다. 일부 양상에서, 당은 수크로스, 트레할로스, 덱스트로스 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 양상에서, 당은 약 2.5 내지 약 5.0 w/v%의 농도로 존재한다. 특정 양상에서, 계면활성제는 폴리솔베이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 에터, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트, 알킬 설페이트, 폴리비닐 피리돈, 폴록사머 또는 이들의 조합물로부터 선택된다. 일부 양상에서, 계면활성제는 약 0.05% 내지 약 6.0 w/v%의 농도이다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된(예를 들어, IL-7 단백질 및/또는 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 포함함) 조성물은 아미노산을 추가로 포함한다. 특정 양상에서, 아미노산은 아르기닌, 글루타메이트, 글리신, 히스티딘 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 특정 양상에서, 조성물은 당 알코올을 더 포함한다. 당 알코올의 비제한적인 예는 솔비톨, 자일리톨, 말티톨, 만니톨 또는 이들의 조합물을 포함한다.
일부 양상에서, 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 (a) 소듐 시트레이트(예를 들어, 약 20mM), (b) 수크로스(예를 들어, 약 5%), (c) 솔비톨(예를 들어, 약 1.5%), 및 (d) Tween 80(예를 들어, 약 0.05%)을 포함하는 조성물로 제형화된다.
일부 양상에서, 본 개시내용의 IL-7 단백질은 국제 공개 제WO 2017/078385 A1호에 기재된 바와 같이 제형화되며, 이는 본 명세서에 전문이 포함된다.
약제학적 조성물은 대상체에 대한 임의의 투여 경로용으로 제형화될 수 있다. 투여 경로의 구체적인 예는 근육내, 피하, 안구, 정맥내, 복강내, 피부내, 안와내, 대뇌내, 두개내, 척수내, 심실내, 척추강내, 수조내, 피막내 또는 종양내 투여를 포함한다. 피하, 근육내 또는 정맥내 주사를 특징으로 하는 비경구 투여도 또한 본 명세서에서 고려된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 동일한 투여 경로를 사용하여 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질 및 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 상이한 투여 경로를 사용하여 투여된다. 일부 양상에서, IL-7 단백질은 정맥내로, 피하로 또는 종양내로 투여된다. 일부 양상에서, 변형된 면역 세포(예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포)의 집단은 정맥내로 투여된다.
주사제는 액체 용액 또는 현탁액, 주사 전에 액체 중 용액 또는 현탁액에 적합한 고체 형태 또는 에멀션으로서 통상적인 형태로 제조될 수 있다. 주사제, 용액 및 에멀션은 또한 하나 이상의 부형제를 포함한다. 적합한 부형제는, 예를 들어, 물, 식염수, 덱스트로스, 글리세롤 또는 에탄올이다. 추가적으로, 원하는 경우, 투여되는 약제학적 조성물은 또한 소량의 무독성 보조 물질, 예컨대, 습윤제 또는 유화제, pH 완충제, 안정화제, 용해도 향상제, 및 예를 들어, 소듐 아세테이트, 솔비탄 모노라우레이트, 트라이에탄올아민 올레에이트 및 사이클로덱스트린과 같은 이와 같은 기타 작용제를 포함할 수 있다.
비경구 제제에 사용되는 약제학적으로 허용 가능한 담체는 수성 비히클, 비수성 비히클, 항균제, 등장화제, 완충액, 항산화제, 국소마취제, 현탁화제 및 분산제, 유화제, 금속이온봉쇄제 또는 킬레이트제 및 기타 약제학적으로 허용 가능한 물질을 포함한다. 수성 비히클의 예는 염화나트륨 주사제, 링거 주사제, 등장성 덱스트로스 주사제, 멸균수 주사제, 덱스트로스 및 젖산 링거 주사제를 포함한다. 비수성 비경구용 비히클은 식물성 기원의 고정유, 면실유, 옥수수유, 참기름 및 땅콩유를 포함한다. 페놀 또는 크레졸, 수은, 벤질 알코올, 클로로뷰탄올, 메틸 및 프로필 p-하이드록시벤조산 에스터, 티메로살, 벤잘코늄 클로라이드 및 벤제토늄 클로라이드를 포함하는 정균 또는 정진균 농도의 항균제가 다회 용량 용기에 포장된 비경구 제제에 첨가될 수 있다. 등장화제는 염화나트륨 및 덱스트로스를 포함한다. 완충액은 포스페이트 및 시트레이트를 포함한다. 항산화제는 소듐 바이설페이트를 포함한다. 국소마취제는 프로카인 하이드로클로라이드를 포함한다. 현탁화제 및 분산제는 소듐 카복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 및 폴리비닐피롤리돈을 포함한다. 유화제는 폴리솔베이트 80(TWEEN® 80)을 포함한다. 금속 이온의 금속이온봉쇄제(sequestering agent) 또는 킬레이트제는 EDTA를 포함한다. 약제학적 담체는 또한 수혼화성 비히클용 에틸 알코올, 폴리에틸렌 글라이콜 및 프로필렌 글라이콜; 및 pH 조정을 위한 수산화나트륨, 염산, 시트르산 또는 락트산을 포함한다.
비경구 투여용 제제는 주사용 멸균 용액, 사용 직전에 용매와 조합될 준비가 된 멸균 건조 가용성 생성물, 예컨대, 동결건조 분말(피하주사용 정제를 포함함), 주사용 멸균 현탁액, 사용 직전에 비히클과 조합될 준비가 된 멸균 건조 불용성 생성물 및 멸균 에멀션을 포함한다. 용액은 수성 또는 비수성일 수 있다.
정맥내로 투여되는 경우, 적합한 담체는 생리 식염수 또는 포스페이트 완충 식염수(PBS), 및 증점제 및 가용화제, 예컨대, 글루코스, 폴리에틸렌 글라이콜, 및 폴리프로필렌 글라이콜 및 이들의 혼합물을 포함하는 용액을 포함한다.
국소 및 전신 투여에 대해 기재된 바와 같이 항체를 포함하는 국부용 혼합물이 제조된다. 생성된 혼합물은 용액, 현탁액, 에멀션 등일 수 있고 크림, 겔, 연고, 에멀션, 용액, 엘릭서, 로션, 현탁액, 팅크, 페이스트, 폼, 에어로졸, 관주(irrigation), 스프레이, 좌약, 붕대, 피부 패치 또는 국부 투여에 적합한 임의의 다른 제형일 수 있다.
본 명세서에 기재된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)는 흡입과 같은 국부 적용을 위한 에어로졸로서 제형화될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제4,044,126호, 제4,414,209호 및 제4,364,923호를 참조하며, 이들 특허는 염증성 질환, 특히 천식의 치료에 유용한 스테로이드의 전달을 위한 에어로졸을 기재함). 기도에 투여하기 위한 이러한 제형은 네뷸라이저용 에어로졸 또는 용액의 형태 또는 흡입제용 미세 분말로서 단독으로 또는 락토스와 같은 불활성 담체와 조합된 것일 수 있다. 이와 같은 경우에, 제형의 입자는 일 양상에서 직경이 50 마이크론 미만, 일 양상에서 10 마이크론 미만일 것이다.
본 명세서에 개시된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)는 국소 또는 국부 도포용, 예컨대, 겔, 크림, 및 로션 형태로 피부 및 점막, 예컨대, 눈에의 국부 도포용, 및 눈에의 도포 또는 수조내 또는 척추내 적용을 위해 제형화될 수 있다. 국부 투여는 경피 전달 및 또한 눈 또는 점막으로의 투여 또는 흡입 치료법 용으로 고려된다. 또한 항체의 비강 용액은 단독으로 또는 다른 약제학적으로 허용 가능한 부형제와 조합하여 투여될 수 있다.
이온영동 및 전기영동 장치를 포함하는 경피 패치는 당업자에게 잘 알려져 있으며, 항체를 투여하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 이와 같은 패치는 미국 특허 제6,267,983호, 제6,261,595호, 제6,256,533호, 제6,167,301호, 제6,024,975호, 제6,010715호, 제5,985,317호, 제5,983,134호, 제5,948,433호 및 제5,860,957호에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
특정 양상에서, 본 명세서에 기재된 치료제(예를 들어, IL-7 단백질)를 포함하는 약제학적 조성물은 동결건조된 분말이며, 상기 동결건조된 분말은 용액, 에멀션 및 다른 혼합물로서 투여를 위해 재구성될 수 있다. 이는 또한 고체 또는 겔로서 재구성 및 제형화될 수 있다. 동결건조된 분말은 본 명세서에 기재된 항체 또는 이의 항원-결합 부분 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 유도체를 적합한 용매 중에 용해시킴으로써 제조된다. 일부 양상에서, 동결건조된 분말은 멸균된다. 용매는 분말로부터 제조되는 재구성된 용액 또는 분말의 안정성 또는 다른 약리학적 성분을 개선시키는 부형제를 포함할 수 있다. 사용될 수 있는 부형제는 덱스트로스, 솔비톨, 프럭토스, 옥수수시럽, 자일리톨, 글리세린, 글루코스, 수크로스 또는 다른 적합한 작용제를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 용매는 또한 완충액, 예컨대, 시트레이트, 소듐 또는 포트슘 포스페이트 또는 일 양상에서 거의 중성 pH에서 당업자에게 공지된 다른 이와 같은 완충액을 포함할 수 있다. 용액의 후속 멸균 여과 후 당업자에게 공지된 표준 조건 하에서 동결건조하여 원하는 제형을 제공한다. 일부 양상에서, 생성된 용액은 동결건조를 위해 바이알에 배분될 수 있다. 각각의 바이알은 단일 투여량 또는 다회 투여량의 화합물을 포함할 수 있다. 동결건조된 분말은 적절한 조건, 예컨대, 약 4℃ 내지 실온 하에서 저장될 수 있다.
이러한 동결건조된 분말을 주사용수로 재구성하는 것은 비경구 투여에서 사용하기 위한 제형을 제공한다. 재구성을 위해, 동결건조된 분말은 멸균수 또는 기타 적합한 담체에 첨가된다. 정확한 양은 선택된 화합물에 따라 다르다. 이와 같은 양은 경험적으로 결정될 수 있다.
본 명세서에서 제공되는 조성물은 또한 치료될 대상체의 특정 조직, 수용체, 또는 신체의 다른 부위를 표적으로 하도록 제형화될 수 있다. 이와 같은 다수의 표적화 방법은 당업자에게 잘 알려져 있다. 이와 같은 모든 표적화 방법은 본 조성물에 사용하기 위해 본 명세서에서 고려된다. 표적화 방법의 비제한적인 예는, 예를 들어, 미국 특허 제6,316,652호, 제6,274,552호, 제6,271,359호, 제6,253,872호, 제6,139,865호, 제6,131,570호, 제6,120,751호, 제6,071,495호, 제6,060,082호, 제6,048,736호, 제6,039,975호, 제6,004,534호, 제5,985,307호, 제5,972,366호, 제5,900,252호, 제5,840,674호, 제5,759,542호 및 제5,709,874호를 참조한다. 구체적인 양상에서, 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, CAR-보유 또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)은 고형 종양을 치료하는 데 사용될 수 있다.
생체내 투여에 사용될 조성물은 멸균될 수 있다. 이는, 예를 들어, 멸균 여과막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다.
본 개시내용을 읽을 때 많은 변이 및 균등물이 당업자에게 명백하게 될 것이므로, 하기 실시예는 단지 예시적일 뿐이며, 어떠한 방식으로도 본 개시내용의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
실시예
실시예 1: 항-메소텔린 CAR-T 세포 및 IL-7 단백질 병용 요법의 항-종양 효과의 분석
고형 종양의 치료에서 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, CAR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)의 효능을 평가하기 위해서, 췌장 종양 마우스 모델을 사용하였다. 간략하면, 컨디셔닝되지 않은 NSG 마우스에게 GFP-표지된 AsPC-1 종양 세포(2x106개 세포/마우스)를 주사하였다. 생체내 투여를 위한 CAR-T 세포를 제조하기 위해서, T 세포를 건강한 공여자로부터 수거된 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)로부터 단리/정제시켰다. 그 다음 T 세포를 항-CD3 및 항-CD28 항체를 사용하여 시험관내에서 활성화시켰다. 대략 2일 후, CRISPR/Cas9 시스템을 사용하여 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 결실시켰다. 다음 날, T 세포에 메소텔린을 표적으로 하는 CAR을 형질도입하였다. 형질도입된 T 세포를 대략 1주 동안 추가로 확장되게 하였다. 유전자 편집을 탈출한 잔류하는 TCR+ T 세포를 자석 고갈에 의해서 제거하고, 그 다음, 형질도입된 T 세포(즉, CD3- CAR+)를 단리시키고, 동물에게 투여하였다.
종양 세포 주입 대략 15일 후, 동물에게 항-메소텔린 CAR-T 세포(5x105개 세포/마우스)의 용량을 정맥내로 제공하였다. 약 24시간 후, 동물을 비히클 또는 (예를 들어, 본 명세서에 개시된) 변형된 IL-7 단백질로 추가로 처리하였다. IL-7 단백질을 10㎎/㎏의 용량으로 총 3회 용량(CAR-T 세포 투여 후 제1일, 제15일 및 제29일) 동안 투여하였다. 상이한 처리군을 (하기) 표 3에 제시한다. 동물을 종양 크기 및 생존에 대해서 주 단위 기준으로 모니터링하였다.
Figure pct00013
도 1A 및 도 1B에 도시된 바와 같이, 상이한 처리군 간에는 종양 부피에서 전체적인 상당한 감소는 보이지 않았다. IL-7 단백질 및 CAR-T 세포 둘 다의 조합물로 처리된 동물 중 적어도 1마리는 CAR-T 세포 투여 후 약 75 내지 80일까지 종양 부피의 상당한 감소를 나타내었다(도 1B 참조). 종양 부피의 상당한 감소의 결여에도 불구하고, IL-7 단백질을 CAR-T 세포와 조합하여 처리하면 다른 치료군에 비해서 전체 생존을 증가시켰다.
실시예 2: 항-메소텔린 CAR-T 세포 및 IL-7 단백질 병용 요법의 항-종양 효과의 추가 분석
고형 종양의 치료에서 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, CAR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)의 효능을 추가로 평가하기 위해서, 상기 실시예를 하기와 같이 반복하였다. 간략하면, 컨디셔닝되지 않은 NSG 마우스에게 GFP-표지된 AsPC-1 종양 세포(1.5 x 106개 세포/마우스)를 주사하였다. 생체내 투여를 위한 CAR-T 세포를 제조하기 위해서, T 세포를 건강한 공여자로부터 수거된 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)로부터 단리/정제시켰다. 그 다음 T 세포를 항-CD3 및 항-CD28 항체를 사용하여 시험관내에서 활성화시켰다. 다음 날, T 세포에 항-메소텔린 CAR(즉, 실시예 1에서 사용된 것과 동일함)을 형질도입하였다. 다음 날 CRISPR/Cas9 시스템을 사용하여 TCR 수용체 알파 쇄(TRAC)를 결실시켰다. 형질도입된 T 세포를 대략 1주 동안 추가로 확장되게 하였다. 유전자 편집을 탈출한 잔류하는 TCR+ T 세포를 자석 고갈에 의해서 제거하고, 그 다음, 형질도입된 T 세포(즉, CD3- CAR+)를 단리시키고, 동물에게 투여하였다.
피하 종양 세포 주입 7일 후, 동물에게 항-메소텔린 CAR-T 세포(1x106개 세포/마우스)의 용량을 정맥내로 제공하였다. 약 24시간 후, 동물을 비히클 또는 (예를 들어, 본 명세서에 개시된) 변형된 IL-7 단백질로 추가로 처리하였다. IL-7 단백질을 10㎎/㎏의 용량으로 격주로 총 3회 용량 동안 투여하였다. 상이한 처리군은 실시예 1에서와 동일하다(하기 표 3 참조). 동물을 종양 크기 및 생존에 대해서 주 단위 기준으로 모니터링하였다.
실시예 1과 상반되게, IL-7 단백질과 CAR-T 세포의 조합물로 처리된 동물은 다른 처리군에 비해서 종양 부피의 상당한 감소를 나타내었다(도 2A 및 도 2B 참조). 종양 부피의 감소는 CAR-T 세포 투여 약 2주만큼 일찍 인식 가능하였다. 도 2C에 나타낸 바와 같이, 종양 부피의 감소는 생존 증가와 연관되었다. 다른 치료군에 비해서, 병용 요법(즉, CAR-T 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)을 제공받은 동물 모두는 전체 실험 기간에 생존하였다(즉, CAR-T 세포 투여 100일 후).
종합하면, 상기 결과는 본 명세서에 개시된 IL-7 단백질은 CAR-T 세포의 항-종양 효과를 상당히 개선시킬 수 있다. 따라서, 상기 결과는, 본 명세서에 개시된 병용 요법(즉, 변형된 면역 세포, 예를 들어, CAR-보유 면역 세포 및/또는 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단과 조합된 IL-7 단백질)은 고형 종양의 치료에 효과적일 수 있다는 것을 시사한다.
SEQUENCE LISTING <110> Washington University NeoImmuneTech, Inc. <120> METHOD OF TREATING A SOLID TUMOR WITH A COMBINATION OF AN IL-7 PROTEIN AND CAR-BEARING IMMUNE CELLS <130> WO/2021/158783 <140> PCT/US2021/016604 <141> 2021-02-04 <150> US 62/970,554 <151> 2020-02-05 <160> 72 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 177 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Phe His Val Ser Phe Arg Tyr Ile Phe Gly Leu Pro Pro Leu Ile 1 5 10 15 Leu Val Leu Leu Pro Val Ala Ser Ser Asp Cys Asp Ile Glu Gly Lys 20 25 30 Asp Gly Lys Gln Tyr Glu Ser Val Leu Met Val Ser Ile Asp Gln Leu 35 40 45 Leu Asp Ser Met Lys Glu Ile Gly Ser Asn Cys Leu Asn Asn Glu Phe 50 55 60 Asn Phe Phe Lys Arg His Ile Cys Asp Ala Asn Lys Glu Gly Met Phe 65 70 75 80 Leu Phe Arg Ala Ala Arg Lys Leu Arg Gln Phe Leu Lys Met Asn Ser 85 90 95 Thr Gly Asp Phe Asp Leu His Leu Leu Lys Val Ser Glu Gly Thr Thr 100 105 110 Ile Leu Leu Asn Cys Thr Gly Gln Val Lys Gly Arg Lys Pro Ala Ala 115 120 125 Leu Gly Glu Ala Gln Pro Thr Lys Ser Leu Glu 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<213> Mus Musculus <400> 3 Met Phe His Val Ser Phe Arg Tyr Ile Phe Gly Ile Pro Pro Leu Ile 1 5 10 15 Leu Val Leu Leu Pro Val Thr Ser Ser Glu Cys His Ile Lys Asp Lys 20 25 30 Glu Gly Lys Ala Tyr Glu Ser Val Leu Met Ile Ser Ile Asp Glu Leu 35 40 45 Asp Lys Met Thr Gly Thr Asp Ser Asn Cys Pro Asn Asn Glu Pro Asn 50 55 60 Phe Phe Arg Lys His Val Cys Asp Asp Thr Lys Glu Ala Ala Phe Leu 65 70 75 80 Asn Arg Ala Ala Arg Lys Leu Lys Gln Phe Leu Lys Met Asn Ile Ser 85 90 95 Glu Glu Phe Asn Val His Leu Leu Thr Val Ser Gln Gly Thr Gln Thr 100 105 110 Leu Val Asn Cys Thr Ser Lys Glu Glu Lys Asn Val Lys Glu Gln Lys 115 120 125 Lys Asn Asp Ala Cys Phe Leu Lys Arg Leu Leu Arg Glu Ile Lys Thr 130 135 140 Cys Trp Asn Lys Ile Leu Lys Gly Ser Ile 145 150 <210> 4 <211> 177 <212> PRT <213> Cercopithecus aethiops <400> 4 Met Phe His Val Ser Phe Arg Tyr Ile Phe Gly Leu Pro Pro Leu Ile 1 5 10 15 Leu Val Leu Leu Pro Val Ala Ser Ser Asp Cys Asp Ile Glu Gly Lys 20 25 30 Asp Gly Lys Gln Tyr Glu Ser Val Leu Met Val 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ggagggcatg 240 ttcctgttca gagccgccag aaagctgaga cagttcctga agatgaacag caccggcgac 300 ttcgacctgc acctgctgaa ggtgagcgag ggcacaacca tcctgctgaa ctgcaccggc 360 caggtgaagg gcagaaagcc cgccgccctg ggcgaggccc agcccaccaa gagcctggag 420 gagaacaaga gcctgaagga gcagaagaag ctgaacgacc tgtgcttcct gaagagactg 480 ctgcaggaga tcaagacctg ctggaacaag atcctgatgg gcaccaagga gcac 534 <210> 30 <211> 537 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MM) <400> 30 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat ggactgcgac atcgagggca aggacggcaa gcagtacgag 120 agcgtgctga tggtgagcat cgaccagctg ctggacagca tgaaggagat cggcagcaac 180 tgcctgaaca acgagttcaa cttcttcaag agacacatct gcgacgccaa caaggagggc 240 atgttcctgt tcagagccgc cagaaagctg agacagttcc tgaagatgaa cagcaccggc 300 gacttcgacc tgcacctgct gaaggtgagc gagggcacaa ccatcctgct gaactgcacc 360 ggccaggtga agggcagaaa gcccgccgcc ctgggcgagg cccagcccac caagagcctg 420 gaggagaaca agagcctgaa ggagcagaag aagctgaacg acctgtgctt cctgaagaga 480 ctgctgcagg agatcaagac ctgctggaac aagatcctga tgggcaccaa ggagcac 537 <210> 31 <211> 540 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MMM) <400> 31 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat gatggactgc gacatcgagg gcaaggacgg caagcagtac 120 gagagcgtgc tgatggtgag catcgaccag ctgctggaca gcatgaagga gatcggcagc 180 aactgcctga acaacgagtt caacttcttc aagagacaca tctgcgacgc caacaaggag 240 ggcatgttcc tgttcagagc cgccagaaag ctgagacagt tcctgaagat gaacagcacc 300 ggcgacttcg acctgcacct gctgaaggtg agcgagggca caaccatcct gctgaactgc 360 accggccagg tgaagggcag aaagcccgcc gccctgggcg aggcccagcc caccaagagc 420 ctggaggaga acaagagcct gaaggagcag aagaagctga acgacctgtg cttcctgaag 480 agactgctgc aggagatcaa gacctgctgg aacaagatcc tgatgggcac caaggagcac 540 <210> 32 <211> 540 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MGM) <400> 32 atgttccacg tgagcttcag gtacatcttc ggcctgccac ccctgatcct ggtgctgctg 60 cctgtggcca gctccatggg gatggactgc gacatcgagg gaaaagacgg caagcagtac 120 gaaagcgtgc tgatggtgtc catcgaccag ctgctggatt ctatgaagga gattgggagt 180 aactgcctga acaatgagtt caacttcttc aaacggcaca tttgtgatgc caacaaggag 240 ggaatgttcc tgtttcgggc cgctagaaaa ctgaggcagt tcctgaagat gaacagcacc 300 ggagactttg atctgcatct gctgaaagtg tctgagggca ccacaatcct gctgaactgc 360 actgggcagg tgaaaggaag gaagcctgcc gctctgggag aggctcagcc aaccaagtca 420 ctggaggaaa acaaaagcct gaaggaacag aagaaactga atgacctgtg ctttctgaaa 480 cggctgctgc aggagatcaa aacatgttgg aacaagattc tgatgggcac caaggagcac 540 <210> 33 <211> 540 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(DDD) <400> 33 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcgacga tgacgactgc gacatcgagg gcaaggacgg caagcagtac 120 gagagcgtgc tgatggtgag catcgaccag ctgctggaca gcatgaagga gatcggcagc 180 aactgcctga acaacgagtt caacttcttc aagagacaca tctgcgacgc caacaaggag 240 ggcatgttcc tgttcagagc cgccagaaag ctgagacagt tcctgaagat gaacagcacc 300 ggcgacttcg acctgcacct gctgaaggtg agcgagggca caaccatcct gctgaactgc 360 accggccagg tgaagggcag aaagcccgcc gccctgggcg aggcccagcc caccaagagc 420 ctggaggaga acaagagcct gaaggagcag aagaagctga acgacctgtg cttcctgaag 480 agactgctgc aggagatcaa gacctgctgg aacaagatcc tgatgggcac caaggagcac 540 <210> 34 <211> 543 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MMMM) <400> 34 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat gatgatggac tgcgacatcg agggcaagga cggcaagcag 120 tacgagagcg tgctgatggt gagcatcgac cagctgctgg acagcatgaa ggagatcggc 180 agcaactgcc tgaacaacga gttcaacttc ttcaagagac acatctgcga cgccaacaag 240 gagggcatgt tcctgttcag agccgccaga aagctgagac agttcctgaa gatgaacagc 300 accggcgact tcgacctgca cctgctgaag gtgagcgagg gcacaaccat cctgctgaac 360 tgcaccggcc aggtgaaggg cagaaagccc gccgccctgg gcgaggccca gcccaccaag 420 agcctggagg agaacaagag cctgaaggag cagaagaagc tgaacgacct gtgcttcctg 480 aagagactgc tgcaggagat caagacctgc tggaacaaga tcctgatggg caccaaggag 540 cac 543 <210> 35 <211> 1284 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(M) fused hyFc <400> 35 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgga ctgcgacatc gagggcaagg acggcaagca gtacgagagc 120 gtgctgatgg tgagcatcga ccagctgctg gacagcatga aggagatcgg cagcaactgc 180 ctgaacaacg agttcaactt cttcaagaga cacatctgcg acgccaacaa ggagggcatg 240 ttcctgttca gagccgccag aaagctgaga cagttcctga agatgaacag caccggcgac 300 ttcgacctgc acctgctgaa ggtgagcgag ggcacaacca tcctgctgaa ctgcaccggc 360 caggtgaagg gcagaaagcc cgccgccctg ggcgaggccc agcccaccaa gagcctggag 420 gagaacaaga gcctgaagga gcagaagaag ctgaacgacc tgtgcttcct gaagagactg 480 ctgcaggaga tcaagacctg ctggaacaag atcctgatgg gcaccaagga gcacaggaac 540 acaggcagag gcggcgagga gaagaagaag gagaaggaga aggaggagca ggaggaaaga 600 gagaccaaga cccccgagtg ccccagccac acccagcccc tgggcgtgtt cctgttccct 660 cccaagccca aggacaccct gatgatcagc agaacccccg aggtgacctg cgtggtcgtg 720 gatgtgagcc aggaagatcc cgaagtgcag ttcaactggt acgtggatgg cgtggaagtg 780 cacaacgcca agaccaagcc cagagaagag cagttcaact ccacctacag agtggtgagc 840 gtgctgaccg tgctgcacca ggactggctg aacggcaagg agtacaagtg caaggtgtcc 900 aacaaaggcc tgcccagctc catcgagaag accatcagca aagccaaagg ccagcccaga 960 gaaccccagg tgtacaccct gcctcccagc caggaagaga tgaccaagaa ccaggtgtcc 1020 ctgacctgcc tggtgaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg ggaaagcaac 1080 ggccagcccg agaacaatta caagacaacc cctcccgtgc tggatagcga tggcagcttc 1140 tttctgtaca gcagactgac cgtggacaag agcagatggc aggaaggcaa cgtgttcagc 1200 tgcagcgtga tgcacgaagc cctgcacaac cactacaccc agaagagcct gtccctgagc 1260 ctgggcaagt gactcgagtc taga 1284 <210> 36 <211> 1272 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MM) fused hyFc <400> 36 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat ggactgcgac atcgagggca aggacggcaa gcagtacgag 120 agcgtgctga tggtgagcat cgaccagctg ctggacagca tgaaggagat cggcagcaac 180 tgcctgaaca acgagttcaa cttcttcaag agacacatct gcgacgccaa caaggagggc 240 atgttcctgt tcagagccgc cagaaagctg agacagttcc tgaagatgaa cagcaccggc 300 gacttcgacc tgcacctgct gaaggtgagc gagggcacaa ccatcctgct gaactgcacc 360 ggccaggtga agggcagaaa gcccgccgcc ctgggcgagg cccagcccac caagagcctg 420 gaggagaaca agagcctgaa ggagcagaag aagctgaacg acctgtgctt cctgaagaga 480 ctgctgcagg agatcaagac ctgctggaac aagatcctga tgggcaccaa ggagcacagg 540 aacacaggca gaggcggcga ggagaagaag aaggagaagg agaaggagga gcaggaggaa 600 agagagacca agacccccga gtgccccagc cacacccagc ccctgggcgt gttcctgttc 660 cctcccaagc ccaaggacac cctgatgatc agcagaaccc ccgaggtgac ctgcgtggtc 720 gtggatgtga gccaggaaga tcccgaagtg cagttcaact ggtacgtgga tggcgtggaa 780 gtgcacaacg ccaagaccaa gcccagagaa gagcagttca actccaccta cagagtggtg 840 agcgtgctga ccgtgctgca ccaggactgg ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtg 900 tccaacaaag gcctgcccag ctccatcgag aagaccatca gcaaagccaa aggccagccc 960 agagaacccc aggtgtacac cctgcctccc agccaggaag agatgaccaa gaaccaggtg 1020 tccctgacct gcctggtgaa aggcttctac cccagcgaca tcgccgtgga gtgggaaagc 1080 aacggccagc ccgagaacaa ttacaagaca acccctcccg tgctggatag cgatggcagc 1140 ttctttctgt acagcagact gaccgtggac aagagcagat ggcaggaagg caacgtgttc 1200 agctgcagcg tgatgcacga agccctgcac aaccactaca cccagaagag cctgtccctg 1260 agcctgggca ag 1272 <210> 37 <211> 1275 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MMM) fused hyFc <400> 37 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat gatggactgc gacatcgagg gcaaggacgg caagcagtac 120 gagagcgtgc tgatggtgag catcgaccag ctgctggaca gcatgaagga gatcggcagc 180 aactgcctga acaacgagtt caacttcttc aagagacaca tctgcgacgc caacaaggag 240 ggcatgttcc tgttcagagc cgccagaaag ctgagacagt tcctgaagat gaacagcacc 300 ggcgacttcg acctgcacct gctgaaggtg agcgagggca caaccatcct gctgaactgc 360 accggccagg tgaagggcag aaagcccgcc gccctgggcg aggcccagcc caccaagagc 420 ctggaggaga acaagagcct gaaggagcag aagaagctga acgacctgtg cttcctgaag 480 agactgctgc aggagatcaa gacctgctgg aacaagatcc tgatgggcac caaggagcac 540 aggaacacag gcagaggcgg cgaggagaag aagaaggaga aggagaagga ggagcaggag 600 gaaagagaga ccaagacccc cgagtgcccc agccacaccc agcccctggg cgtgttcctg 660 ttccctccca agcccaagga caccctgatg atcagcagaa cccccgaggt gacctgcgtg 720 gtcgtggatg tgagccagga agatcccgaa gtgcagttca actggtacgt ggatggcgtg 780 gaagtgcaca acgccaagac caagcccaga gaagagcagt tcaactccac ctacagagtg 840 gtgagcgtgc tgaccgtgct gcaccaggac tggctgaacg gcaaggagta caagtgcaag 900 gtgtccaaca aaggcctgcc cagctccatc gagaagacca tcagcaaagc caaaggccag 960 cccagagaac cccaggtgta caccctgcct cccagccagg aagagatgac caagaaccag 1020 gtgtccctga cctgcctggt gaaaggcttc taccccagcg acatcgccgt ggagtgggaa 1080 agcaacggcc agcccgagaa caattacaag acaacccctc ccgtgctgga tagcgatggc 1140 agcttctttc tgtacagcag actgaccgtg gacaagagca gatggcagga aggcaacgtg 1200 ttcagctgca gcgtgatgca cgaagccctg cacaaccact acacccagaa gagcctgtcc 1260 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gtcgtggatg tgagccagga agatcccgaa gtgcagttca actggtacgt ggatggcgtg 780 gaagtgcaca acgccaagac caagcccaga gaagagcagt tcaactccac ctacagagtg 840 gtgagcgtgc tgaccgtgct gcaccaggac tggctgaacg gcaaggagta caagtgcaag 900 gtgtccaaca aaggcctgcc cagctccatc gagaagacca tcagcaaagc caaaggccag 960 cccagagaac cccaggtgta caccctgcct cccagccagg aagagatgac caagaaccag 1020 gtgtccctga cctgcctggt gaaaggcttc taccccagcg acatcgccgt ggagtgggaa 1080 agcaacggcc agcccgagaa caattacaag acaacccctc ccgtgctgga tagcgatggc 1140 agcttctttc tgtacagcag actgaccgtg gacaagagca gatggcagga aggcaacgtg 1200 ttcagctgca gcgtgatgca cgaagccctg cacaaccact acacccagaa gagcctgtcc 1260 ctgagcctgg gcaag 1275 <210> 39 <211> 1278 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> nucleotide sequence of modified IL-7(MMMM) fused hyFc <400> 39 atgttccacg tgagcttcag atacatcttc ggcctgcccc ccctgatcct ggtgctgctg 60 cccgtggcca gcagcatgat gatgatggac tgcgacatcg agggcaagga cggcaagcag 120 tacgagagcg tgctgatggt gagcatcgac cagctgctgg acagcatgaa ggagatcggc 180 agcaactgcc tgaacaacga gttcaacttc ttcaagagac acatctgcga cgccaacaag 240 gagggcatgt tcctgttcag agccgccaga aagctgagac agttcctgaa gatgaacagc 300 accggcgact tcgacctgca cctgctgaag gtgagcgagg gcacaaccat cctgctgaac 360 tgcaccggcc aggtgaaggg cagaaagccc gccgccctgg gcgaggccca gcccaccaag 420 agcctggagg agaacaagag cctgaaggag cagaagaagc tgaacgacct gtgcttcctg 480 aagagactgc tgcaggagat caagacctgc tggaacaaga tcctgatggg caccaaggag 540 cacaggaaca caggcagagg cggcgaggag aagaagaagg agaaggagaa ggaggagcag 600 gaggaaagag agaccaagac ccccgagtgc cccagccaca cccagcccct gggcgtgttc 660 ctgttccctc ccaagcccaa ggacaccctg atgatcagca gaacccccga ggtgacctgc 720 gtggtcgtgg atgtgagcca ggaagatccc gaagtgcagt tcaactggta cgtggatggc 780 gtggaagtgc acaacgccaa gaccaagccc agagaagagc agttcaactc cacctacaga 840 gtggtgagcg tgctgaccgt gctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 900 aaggtgtcca acaaaggcct gcccagctcc atcgagaaga ccatcagcaa agccaaaggc 960 cagcccagag aaccccaggt gtacaccctg cctcccagcc aggaagagat gaccaagaac 1020 caggtgtccc tgacctgcct ggtgaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 1080 gaaagcaacg gccagcccga gaacaattac aagacaaccc ctcccgtgct ggatagcgat 1140 ggcagcttct ttctgtacag cagactgacc gtggacaaga gcagatggca ggaaggcaac 1200 gtgttcagct gcagcgtgat gcacgaagcc ctgcacaacc actacaccca gaagagcctg 1260 tccctgagcc tgggcaag 1278 <210> 40 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic oligopeptide fragment <400> 40 Met Met Met Met 1 <210> 41 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic oligopeptide fragment <400> 41 Met Gly Gly Met 1 <210> 42 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic oligopeptide fragment <400> 42 Met Met Gly Gly 1 <210> 43 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic oligopeptide fragment <400> 43 Gly Gly Met Met 1 <210> 44 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic oligopeptide fragment <400> 44 Met Gly Met Gly 1 <210> 45 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic 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Claims (61)

  1. 고형 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 고형 종양을 치료하는 방법으로서, 상기 대상체에게 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor: CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  2. 제1항에 있어서, 종양 부피는 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 상기 투여 후에 상기 대상체에서 감소되는, 방법.
  3. 제2항에 있어서, 상기 종양 부피는 상기 기준 종양 부피에 비해서 상기 투여 후 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소되는, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체의 생존 기간은 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존 기간)에 비해서 상기 투여 후에 상기 대상체에서 증가되는, 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 생존 기간은 상기 기준 생존 기간에 비해서 상기 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가되는, 방법.
  6. 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 항-종양 활성을 향상시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 항-종양 활성은 종양 부피의 감소, 생존 기간의 증가 또는 이들 둘 다를 포함하는, 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 종양 부피는 기준 종양 부피(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 종양 부피)에 비해서 상기 투여 후 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%만큼 감소되는, 방법.
  9. 제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 생존 기간은 기준 생존 기간(예를 들어, IL-7 단백질 단독 또는 CAR-보유 면역 세포 단독 중 어느 하나를 제공받은 상응하는 대상체에서의 생존 기간)에 비해서 상기 투여 후 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가되는, 방법.
  10. 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 확장을 증가시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 확장은 기준 확장(예를 들어, CAR-보유 면역 세포의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에서의 CAR-보유 면역 세포의 확장)에 비해서 상기 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가되는, 방법.
  12. 고형 종양을 갖는 대상체에서 키메라 항원 수용체(CAR)를 포함하는 면역 세포("CAR-보유 면역 세포")의 생존 및/또는 지속을 증가시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 생존 및/또는 지속은 기준 생존 및/또는 지속(예를 들어, CAR-보유 면역 세포의 집단의 투여만을 제공받은 상응하는 대상체에서의 CAR-보유 면역 세포의 생존 및/또는 지속)에 비해서 상기 투여 후에 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200% 또는 그 초과만큼 증가되는, 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 약 600㎍/㎏ 초과, 약 700㎍/㎏ 초과, 약 800㎍/㎏ 초과, 약 900㎍/㎏ 초과, 약 1,000㎍/㎏ 초과, 약 1,100㎍/㎏ 초과, 약 1,200㎍/㎏ 초과, 약 1,300㎍/㎏ 초과, 약 1,400㎍/㎏ 초과, 약 1,500㎍/㎏ 초과, 약 1,600㎍/㎏ 초과, 약 1,700㎍/㎏ 초과, 약 1,800㎍/㎏ 초과, 약 1,900㎍/㎏ 또는 약 2,000㎍/㎏ 초과의 용량으로 투여되는, 방법.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,000㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,050㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,100㎍/㎏ 내지 약 1,200㎍/㎏, 약 1,200㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏ 내지 약 2,000㎍/㎏, 약 610㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 650㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 850㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏, 약 900㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏ 또는 약 950㎍/㎏ 내지 약 1,000㎍/㎏의 용량으로 투여되는, 방법.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 약 700㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏, 약 700㎍/㎏ 내지 약 800㎍/㎏, 약 800㎍/㎏ 내지 약 900㎍/㎏, 약 750㎍/㎏ 내지 약 850㎍/㎏ 또는 약 850㎍/㎏ 내지 약 950㎍/㎏의 용량으로 투여되는, 방법.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 약 650㎍/㎏, 약 680㎍/㎏, 약 700㎍/㎏, 약 720㎍/㎏, 약 740㎍/㎏, 약 750㎍/㎏, 약 760㎍/㎏, 약 780㎍/㎏, 약 800㎍/㎏, 약 820㎍/㎏, 약 840㎍/㎏, 약 850㎍/㎏, 약 860㎍/㎏, 약 880㎍/㎏, 약 900㎍/㎏, 약 920㎍/㎏, 약 940㎍/㎏, 약 950㎍/㎏, 약 960㎍/㎏, 약 980㎍/㎏, 약 1000㎍/㎏, 약 1100㎍/㎏, 약 1200㎍/㎏, 약 1,300㎍/㎏, 약 1,400㎍/㎏, 약 1,440㎍/㎏, 약 1,500㎍/㎏, 약 1,600㎍/㎏, 약 1,700㎍/㎏, 약 1,800㎍/㎏, 약 1,900㎍/㎏ 또는 약 2,000㎍/㎏의 용량으로 투여되는, 방법.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 1주에 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 4주에 1회, 5주에 1회, 6주에 1회, 7주에 1회, 8주에 1회, 9주에 1회, 10주에 1회, 11주에 1회 또는 12주에 1회의 투여 빈도로 투여되는, 방법.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 100,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 50,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 10,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 5,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 2,500개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 상기 대상체의 체중 1킬로그램당 약 1,000개 미만의 CAR-보유 면역 세포의 용량으로 투여되는, 방법.
  25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질 및 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 동시에 투여되는, 방법.
  26. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질 및 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 순차적으로 투여되는, 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단을 투여하기 전에 상기 대상체에게 투여되는, 방법.
  28. 제26항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단을 투여한 후에 상기 대상체에게 투여되는, 방법.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 비경구, 근육내, 피하, 안구, 정맥내, 복강내, 피부내, 안와내, 대뇌내, 두개내, 척수내, 심실내, 척추강내, 수조내(intracistemally), 피막내 또는 종양내로 대상체에게 투여되는, 방법.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포의 집단은 정맥내로 투여되는, 방법.
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 야생형 IL-7 단백질이 아닌(즉, 변형된 적이 있는), 방법.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 1 내지 10개의 아미노산 잔기로 이루어진 올리고펩타이드를 포함하는, 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 메티오닌(M), 글리신(G), 메티오닌-메티오닌(MM), 글리신-글리신(GG), 메티오닌-글리신(MG), 글리신-메티오닌(GM), 메티오닌-메티오닌-메티오닌(MMM), 메티오닌-메티오닌-글리신(MMG), 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM), 글리신-메티오닌-메티오닌(GMM), 메티오닌-글리신-글리신(MGG), 글리신-메티오닌-글리신(GMG), 글리신-글리신-메티오닌(GGM), 글리신-글리신-글리신(GGG), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MGGM)(서열번호 41), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(MMGG)(서열번호 42), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGMM)(서열번호 43), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MGMG)(서열번호 44), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMG)(서열번호 45), 글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGM)(서열번호 46), 메티오닌-글리신-글리신-글리신(MGGG)(서열번호 47), 글리신-메티오닌-글리신-글리신(GMGG)(서열번호 48), 글리신-글리신-메티오닌-글리신(GGMG)(서열번호 49), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(GGMMM)(서열번호 50), 글리신-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(GGGMM)(서열번호 51), 글리신-글리신-글리신-글리신-메티오닌(GGGGM)(서열번호 52), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌(MGMMM)(서열번호 53), 메티오닌-글리신-글리신-메티오닌-메티오닌(MGGMM)(서열번호 54), 메티오닌-글리신-글리신-글리신-메티오닌(MGGGM)(서열번호 55), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌(MMGMM)(서열번호 56), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(MMGGM)(서열번호 57), 메티오닌-메티오닌-글리신-글리신-글리신(MMGGG)(서열번호 58), 메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(MMMGM)(서열번호 59), 메티오닌-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(MGMGM)(서열번호 60), 글리신-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(GMGMG)(서열번호 61), 글리신-메티오닌-메티오닌-메티오닌-글리신(GMMMG)(서열번호 62), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-메티오닌(GGMGM)(서열번호 63), 글리신-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(GGMMG)(서열번호 64), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌(GMMGM)(서열번호 65), 메티오닌-글리신-메티오닌-메티오닌-글리신(MGMMG)(서열번호 66), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-메티오닌(GMGGM)(서열번호 67), 메티오닌-메티오닌-글리신-메티오닌-글리신(MMGMG)(서열번호 68), 글리신-메티오닌-메티오닌-글리신-글리신(GMMGG)(서열번호 69), 글리신-메티오닌-글리신-글리신-글리신(GMGGG)(서열번호 70), 글리신-글리신-메티오닌-글리신-글리신(GGMGG)(서열번호 71), 글리신-글리신-글리신-글리신-글리신(GGGGG)(서열번호 72) 또는 이들의 조합을 포함하는, 방법.
  34. 제33항에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 메티오닌-글리신-메티오닌(MGM)인, 방법.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 반감기 연장 모이어티를 포함하는, 방법.
  36. 제35항에 있어서, 상기 반감기 연장 모이어티는 Fc, 알부민, 알부민-결합 폴리펩타이드, Pro/Ala/Ser(PAS), 인간 융모성 생식선 자극호르몬의 β 소단위의 C-말단 펩타이드(CTP), 폴리에틸렌 글라이콜(PEG), 아미노산의 구조화되지 않은 긴 친수성 서열(XTEN), 하이드록시에틸 전분(HES), 알부민-결합 소분자 또는 이들의 조합물을 포함하는, 방법.
  37. 제36항에 있어서, 상기 반감기 연장 모이어티는 Fc인, 방법.
  38. 제36항 또는 제37항에 있어서, 상기 Fc는, 힌지 영역, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 포함하는 하이브리드 Fc이되,
    상기 힌지 영역은 인간 IgD 힌지 영역을 포함하고,
    상기 CH2 도메인은 인간 IgD CH2 도메인의 일부 및 인간 IgG4 CH2 도메인의 일부를 포함하고,
    상기 CH3 도메인은 인간 IgG4 CH3 도메인의 일부를 포함하는, 방법.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-7 단백질은 서열번호 1 내지 6 및 15 내지 25와 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 약 100%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포는 자가유래(autologous)인, 방법.
  41. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포는 동종이계(allogenic)인, 방법.
  42. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR은 고형 종양 항원에 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하는, 방법.
  43. 제42항에 있어서, 상기 고형 종양 항원은 메소텔린, MR1, 구아닐레이트 사이클라제 C(GC-C), 표피 성장 인자 수용체(EGFR 또는 erbB-1), 인간 표피 성장 인자 수용체 2(HER2 또는 erbB2), erbB-3, erbB-4, MUC-1, 흑색종-연관 콘드로이틴 설페이트 프로테오글리칸(melanoma-associated chondroitin sulfate proteoglycan: MCSP), 엽산염 수용체 1(folate receptor: FOLR1), CD4, CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, CD38, CD44, CD44v6, CD44v7/8, CD70, CD123, CD138, CD171, CEA, CSPG4, CXCR5, c-Met, HERV-엔벨로프 단백질, 에리오스틴(eriostin), Bigh3, SPARC, BCR, CD79, CD37, EGFRvIII, EGP2, EGP40, IGFr, L1CAM, AXL, 조직 인자(Tissue Factor: TF), CD74, EpCAM, EphA2, MRP3카드헤린 19(CDH19), 표피 성장 인자 2(HER2), 5T4, 8H9, αvβ6 인테그린, BCMA, B7-H3, B7-H6, CAIX, CA9, FAP, FBP, 태아 AchR, FRcc, GD2, GD3, 글리피칸-1(GPC1), 글리피칸-2(GPC2), 글리피칸-3(GPC3), HLA-A1+MAGE1, HLA-A1+NY-ESO-1, IL-13Rcc2, 루이스-Y, KDR, MCSP, Muc1, Muc16, NCAM, NKG2D 리간드, NY-ESO-1, PRAME, PSC1, PSCA, PSMA, ROR1, ROR2, SP17, 서바이빈, TAG72, TEM, 암배아 항원, HMW-MAA, VEGF, CLDN18.2 또는 이들의 조합물을 포함하는, 방법.
  44. 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR은 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, CD19, TRAC, BCMA, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는, 방법.
  45. 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포는 CAR-T 세포, CAR-iNKT 세포 또는 이들 둘 다를 포함하는, 방법.
  46. 제45항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포는 CAR-T 세포인, 방법.
  47. 제46항에 있어서, 상기 CAR-T 세포는 게놈 편집된 CAR-T 세포인, 방법.
  48. 제47항에 있어서, 게놈 편집된 CAR-T 세포는 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, TRAC, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결실 또는 변형을 포함하는, 방법.
  49. 제46항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-T 세포는 이중 CAR-T 세포 또는 탠덤(tandem) CAR-T 세포인, 방법.
  50. 제45항에 있어서, 상기 CAR-보유 면역 세포는 CAR-iNKT 세포인, 방법.
  51. 제50항에 있어서, 상기 CAR-iNKT 세포는 게놈 편집된 CAR-iNKT 세포인, 방법.
  52. 제51항에 있어서, 게놈 편집된 CAR-iNKT 세포는 CD2, CD3ε, CD4, CD5, CD7, TRAC, TCRβ 또는 이들의 조합물로부터 선택된 하나 이상의 항원에 결실 또는 변형을 포함하는, 방법.
  53. 제50항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CAR-iNKT 세포는 이중 CAR-iNKT 세포 또는 탠덤 CAR-iNKT 세포인, 방법.
  54. 고형 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 고형 종양을 치료하는 방법으로서, 상기 대상체에게 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  55. 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 항-종양 활성을 향상시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  56. 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 확장을 증가시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  57. 고형 종양을 갖는 대상체에서 트랜스제닉 T-세포 수용체(TCR)를 포함하는 면역 세포("트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포")의 생존 및/또는 지속을 증가시키는 방법으로서, 상기 대상체에게 상기 트랜스제닉 TCR-보유 면역 세포의 집단을 IL-7 단백질과 조합하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  58. 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 고형 종양은 중피종, 자궁경부암, 췌장암, 난소암, 편평세포암(예를 들어, 상피 편평세포암), 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종 및 폐의 편평 암종을 포함하는 폐암, 복막암, 간세포암, 위장암을 포함하는 위암, 췌장암, 교모세포종, 간암, 방광암, 간종(hepatoma), 유방암, 결장암, 직장암, 결장직장암, 자궁내막암 또는 자궁 암종, 침샘 암종, 신장암 또는 신암, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종, 두경부암 또는 이들의 임의의 조합으로부터 유래되는, 방법.
  59. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체에게 적어도 1종의 추가 치료제를 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  60. 제59항에 있어서, 상기 추가 치료제는 면역 관문 저해제를 포함하는, 방법.
  61. 제60항에 있어서, 상기 면역 관문 저해제는 PD-1, PD-L1, LAG-3, Tim-3, CTLA-4 또는 이들의 조합의 저해제를 포함하는, 방법.
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