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KR20220110208A - 항-bcma 키메라 항원 수용체의 용도 - Google Patents

항-bcma 키메라 항원 수용체의 용도 Download PDF

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Publication number
KR20220110208A
KR20220110208A KR1020227018972A KR20227018972A KR20220110208A KR 20220110208 A KR20220110208 A KR 20220110208A KR 1020227018972 A KR1020227018972 A KR 1020227018972A KR 20227018972 A KR20227018972 A KR 20227018972A KR 20220110208 A KR20220110208 A KR 20220110208A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
bcma
car
level
subject
cells
Prior art date
Application number
KR1020227018972A
Other languages
English (en)
Inventor
티모시 캠벨
로날드 하우스
크리스텐 헤지
위에 장
셰리 케이서
이선 톰슨
제임스 풀러
나단 마틴
롱 리우
저스틴 델'아린가
Original Assignee
셀진 코포레이션
주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드
브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 셀진 코포레이션, 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드, 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 filed Critical 셀진 코포레이션
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Abstract

BCMA-발현 암과 같은 B-세포 관련 병태를 치료하기 위한 항-B 세포 성숙 항원 (B cell maturation antigen, BCMA) 키메라 항원 수용체 (CAR)의 용도가 본원에서 제공된다.

Description

항-BCMA 키메라 항원 수용체의 용도
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2019년 11월 5일자 출원된 미국 가출원 제62/931,077호, 2019년 12월 6일자 출원된 미국 가출원 제62/944,938호, 2019년 12월 20일자 출원된 미국 가출원 제62/952,186호, 2020년 5월 13일자 출원된 미국 가출원 제63/024,252호, 및 2020년 6월 10일자 출원된 미국 가출원 제63/037,471호에 대한 우선권을 주장하고, 이의 각 내용들은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
서열 목록
본 출원은 27,620 바이트의 크기를 갖고, 14247-549-228_SEQ_LISTING.txt라는 명칭으로 2020년 10월 27일자 생성된 ASCII 텍스트 파일로서 본 출원과 함께 제출된 서열 목록을 참조로 포함한다.
본원에 제공된 개시내용은 B 세포 관련 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 개시내용은 항-BCMA (B Cell Maturation Antigen) 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 개선된 키메라 항원 수용체 (chimeric antigen receptor, CAR), 및 이러한 CAR을 발현하도록 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포, 및 B 세포 관련 병태를 효과적으로 치료하기 위한 이러한 조성물의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 개시내용은 항-BCMA 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체 (CAR), 및 이러한 CAR을 발현하도록 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포를 BCMA-기반 치료 양식과 병용하여 사용하여 B 세포 관련 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다
몇몇 중요한 질환은 B 림프구, 즉 B 세포를 수반한다. 비정상적인 B 세포 생리학은 또한 전신 홍반성 루푸스 (SLE)를 포함하지만 이에 제한되지 않는 자가면역 질환의 발생을 유도할 수 있다. B 세포의 악성 형질전환은 림프종, 예를 들어 다발성 골수종 및 비-호지킨 림프종을 포함하지만 이에 제한되지 않는 암을 유도한다.
비-호지킨 림프종 (NHL) 및 다발성 골수종 (MM)을 비롯한 B 세포 악성종양을 갖는 대다수의 환자는 암 사망률에 상당한 기여자이다. 다양한 형태의 치료에 대한 B 세포 악성종양의 반응은 혼합된다. 화학요법 및 방사선요법을 포함한 B 세포 악성종양을 치료하는 전통적인 방법은 독성 부작용으로 인해 제한된 유용성을 갖는다. 항-CD19, 항-CD20, 항-CD22, 항-CD23, 항-CD52, 항-CD80 및 항-HLA-DR 치료 항체를 사용한 면역요법은 부분적으로 불량한 약동학적 프로파일, 혈청 프로테아제에 의한 항체의 급속한 제거 및 사구체에서의 여과, 및 종양 부위로의 제한된 침투 및 암 세포 상의 표적 항원의 발현 수준으로 인해 제한된 성공을 제공하였다. 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 유전적으로 변형된 세포를 사용하기 위한 시도는 또한 제한된 성공을 충족하였다. 또한, CAR에서 사용되는 주어진 항원 결합 도메인의 치료 효능은 예측할 수 없다: 항원 결합 도메인이 너무 강하게 결합하는 경우, CAR T 세포는 거대한 사이토카인 방출을 유도하여 "사이토카인 폭풍"으로 간주되는 잠재적으로 치명적인 면역 반응을 유발하고, 항원 결합 도메인이 너무 약하게 결합하는 경우, CAR T 세포는 암 세포를 제거하는 데 충분한 치료 효능을 나타내지 않는다.
본 발명은 일반적으로 B 세포 관련 질환, 예를 들어 다발성 골수종을 치료하는 개선된 방법을 제공한다.
일 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 30%를 초과함을 알아내는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준이 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아낸다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서, 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우, 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 선택적으로, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함할 수 있다.
다른 구현예에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계; 여기서, sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 sBCMA는 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아낸다. 이전 구현예 중 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 수준을 결정한 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 구현예에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계; 여기서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 각각 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 상기 면역 세포를 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA)-발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 페리틴(ferritin)의 수준을 알아내는 단계; 여기서, 페리틴의 상기 수준이 리터당 1500 피코몰(picomoles)을 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 사이토카인 방출 증후군 (CRS)을 치료하기 위해 요법이 제공됨, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여 전 0 내지 4일 이내에 수행된다. 구체적인 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여와 동일한 날에 수행된다. 구체적인 구현예에서, CRS를 치료하기 위한 상기 요법은 상기 투여 후 0 내지 5일에 상기 대상체에게 먼저 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 특정 구현예에서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준의 약 80%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 또는 150%을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 특정 구현예에서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준의 약 80%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 또는 150%을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서, i) sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우 및 ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준 보다 약 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40% 45% 또는 50% 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서 상기 방법은: (c) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준의 약 80%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 또는 150%를 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 (c) 단계에서의 결정에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서 상기 방법은: (c) sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과함을 알아냄, 및 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준의 약 80%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 또는 150%을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 (c) 단계에서의 결정에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서 상기 방법은 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
상기 방법의 특정 구현예에서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 조직 샘플은 혈액, 혈장 또는 혈청이다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종(예: 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma))이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예를 들어, 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종이다. 다른 구체적인 구현예에서, 고위험 다발성 골수종은 R-ISS III기 질환 및/또는 조기 재발을 특징으로 하는 질환(예: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및/또는 덱사메타손을 사용한 마지막 치료 요법과 같은 마지막 치료 요법 날짜로부터 12개월 이내의 진행성 질환)이다. 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택된다. 일 구현예에서, B 세포 성숙 항원 (BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 T 세포의 투여 전에, 종양을 갖는 대상체는 종양에 의한 BCMA의 발현에 대해 평가되었다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포, 예를 들어 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 세포독성 T 림프구 (CTL), T 킬러 세포, 또는 자연 살해 (NK) 세포이다. 다른 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 또는 하기 섹션 5.9에 나열된 다른 치료제 중 하나. 보다 구체적인 구현예에서, 환자는 CAR T 세포의 투여 전에 상기 비-CAR T 세포 요법을 받지 않았다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법 또는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손. 다양한 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상; 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하; 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하; 또는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받았다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포, 300 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 550 x 106 세포, 400 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 150 x 106 세포 내지 300 x 106 세포, 또는 400 x 106 세포 내지 500 x 106 세포 범위의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 150 x 106 세포, 약 200 x 106 세포, 약 250 x 106 세포, 약 300 x 106 세포, 약 350 x 106 세포, 약 400 x 106 세포, 약 450 x 106 세포, 약 500 x 106 세포, 또는 약 550 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 1회 주입이 투여된다. 일부 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여가 반복된다(예를 들어, 면역 세포의 제2 용량이 대상체에게 투여된다).
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 550 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 250 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포(예: 자가 T 세포)이다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 치료되는 대상체는 대상체에 투여하기 전에 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 제조를 위해 자가 면역 세포를 수집하기 위한 백혈구 분획 절차를 겪는다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포(예: T 세포)는 정맥내 주입으로 투여된다.
본원에 개시된 임의의 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 림프구 고갈(LD) 화학요법을 투여받는다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파마이드를 포함한다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일(예: 3일)의 기간 동안 플루다라빈(정맥 투여의 경우 약 30 mg/m2) 및 사이클로포스파마이드(정맥 투여의 경우 약 300 mg/m2)를 포함한다. 다른 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 섹션 5.9에 설명된 화학요법제 중 하나를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법 투여 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일(예: LD 화학요법 투여 후 2 또는 3일)에 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포가 투여된다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법을 시작하기 전에 적어도 1주 또는 1주 이상, 적어도 2주 또는 2주 이상(적어도 14일 또는 14일 이상), 적어도 3주 또는 3주 이상, 적어도 4주 또는 4주 이상, 적어도 5주 또는 5주 이상, 또는 적어도 6주 또는 6주 이상 동안 어떠한 요법도 받지 않았다. 본원에 개시된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 단일의 사전 치료 요법만을 받았다.
임의의 상기 구현예에 대해, 대상체는 상기 면역 세포, 예를 들어, T 세포를 수집 및 단리하기 위해 성분채집술을 겪는다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 성분채집술 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 보다 구체적인 구현예에서, 성분채집술 시에 상기 대상체는 추가로: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 (레날리도마이드 또는 포말리도마이드) 및 항-CD38 항체로의 사전 치료를 포함하는, 사전 치료 중 적어도 3개의 종류를 받았고; 진행성 질환이 치료 종류에 대한 최상의 반응이 아니더라도, 상기 적어도 3개 종류의 사전 치료의 각각에 대해 적어도 2회의 연속 사이클의 치료를 겪었고; 가장 최근의 종류의 사전 치료 날에 또는 60일 이내에 진행성 질환의 증거를 갖고; 및/또는 상기 사전 치료의 종류 중 적어도 하나에 대한 반응 (최소 반응 또는 더 양호함)을 달성하였다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 투여 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 다른 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 추가로: 하나의 사전 항-골수종 치료 요법만을 받았고; 하기 고위험 인자를 가진다: R-ISS 단계 III, 및 초기 재발, (i) 대상체가 유도 및 줄기 세포 이식을 겪는 경우, 최초 이식일 이후 12개월 미만의 진행성 질환 (PD)을 겪는 경우; 또는 (ii) 대상체가 오직 유도를 받았을 경우, 최소한, 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및 덱사메타손을 함유하여야 하는 최종 치료 요법일 이후 PD ≤ 12개월인 경우로서 정의됨.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 단일 쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 scFv를 포함하고, 상기 scFV는 서열번호 9의 항-BCMA02 CAR의 것이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 9이거나 이를 포함한다. 본원에서 임의의 구현예의 보다 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 서열번호 9이거나 이를 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다.
일 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 레날리도마이드가 투여됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 투여된다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
이전 구현예의 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종(MM) 이다. 특정 구현예에서, 질환은 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 포말리도마이드가 투여됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 매일 1회 투여된다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 질환이 진행될 때까지 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 경구 투여된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종(MM) 이다. 특정 구현예에서, 질환은 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 CC-220이 투여됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여된다. 구체적인 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종(MM) 이다. 특정 구현예에서, 질환은 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 CC-220 및 덱사메타손이 투여됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여된다. 구체적인 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여된다. 구체적인 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여된다. 구체적인 구현예에서, 상기 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종(MM) 이다. 특정 구현예에서, 질환은 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
일 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
상기 구현예의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 상기 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유하였다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
특정 구현예에서, 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%를 초과한 경우, 환자는 제2 BCMA 기반 치료 양식에 대한 후보자가 된다. 선택적으로, 상기 방법은 상기 제2 BCMA 기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA 기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함할 수 있다.
다른 구현예에서 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (b) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계, 여기서 sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며,
여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아낸다. 이전 구현예 중 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 수준을 결정한 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 구현예에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계; 여기서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종(예: 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma))이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예를 들어, 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종이다. 다른 구체적인 구현예에서, 고위험 다발성 골수종은 R-ISS III기 질환 및/또는 조기 재발을 특징으로 하는 질환(예: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및/또는 덱사메타손을 사용한 마지막 치료 요법과 같은 마지막 치료 요법 날짜로부터 12개월 이내의 진행성 질환)이다. 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택된다. 일 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 전에, 종양을 갖는 대상체는 종양에 의한 BCMA의 발현에 대해 평가되었다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포, 예를 들어 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 세포독성 T 림프구 (CTL), T 킬러 세포, 또는 자연 살해 (NK) 세포이다. 다른 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법 또는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손. 다양한 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상; 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하; 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하; 또는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받았다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포, 300 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 550 x 106 세포, 400 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 150 x 106 세포 내지 300 x 106 세포, 또는 400 x 106 세포 내지 500 x 106 세포 범위의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 150 x 106 세포, 약 200 x 106 세포, 약 250 x 106 세포, 약 300 x 106 세포, 약 350 x 106 세포, 약 400 x 106 세포, 약 450 x 106 세포, 약 500 x 106 세포, 또는 약 550 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 1회 주입이 투여된다. 일부 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여가 반복된다(예를 들어, 면역 세포의 제2 용량이 대상체에게 투여된다).
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 550 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 250 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포(예: 자가 T 세포)이다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 치료되는 대상체는 대상체에 투여하기 전에 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 제조를 위해 자가 면역 세포를 수집하기 위한 백혈구 분획 절차를 겪는다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포(예: T 세포)는 정맥내 주입으로 투여된다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 단일 쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 scFv를 포함하고, 상기 scFV는 서열번호 9의 항-BCMA02 CAR의 것이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 9이거나 이를 포함한다. 본원에서 임의의 구현예의 보다 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA, 예를 들어 인간 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 서열번호 9이거나 이를 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유하였다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다. 특정 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예컨대 재발성 및/또는 불응성 다발성 골수종이다.
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)는 CC99712 또는 GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴(belantamab mafodotin))를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)를 포함한다. 구체적인 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 또는 TNB-383B를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs)를 포함한다. 구체적인 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 자연 살해(NK) 세포 인게이저 (NKCEs)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 또는 CTX-8573를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함한다. 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 상기 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포, 및 CTX120를 포함한다.
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식에서 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포이다.
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포를 포함하지 않는다.
도 1은 B 세포 성숙 항원(BCMA) CAR 구조체(항-BCMA02 CAR)의 개략도를 나타낸다.
도 2a 및 2b는 IL-6 (도 2a) 및 TNF-α (도 2b)의 BCMA02 CAR T 세포 주입 후 프로파일을 보여준다. “TNF” = TNFα, “INTLK6” = 인터루킨-6. 비-반응자들은 굵은 선에 의해 표시되고, 반응자들(PR을 달성하거나 더 양호한 환자)은 더 연한 선들에 의해 표시된다. 제1일 내지 제9일, 특히 제2일에의 배수-변화는 이들 2개의 그룹들을 유의하게 구별한다 (p < 02). "Scr" = 스크리닝의 날짜.
도 3은 두 시점 모두에서 효능 종점 및 가용성 BCMA 측정을 갖는 I상 시험으로부터의 개인에 대한 최적의 전반적인 반응과 함께 주입으로부터 1달로의 퍼센트 가용성 BCMA 감소를 나타낸다(n = 66).
도 4는 혈청에서 가용성 BCMA 수준의 주입 후 프로파일을 보여준다. (ide-cel을 주입한 후 적어도 18개월 동안 무진행 상태로 남아있는 것으로 정의되는) 필수 반응자 프로파일은 굵은 선으로 표시되고, 18개월 전에 진행되거나 사망한 환자는 더 연한 선으로 표시된다. 가용성 BCMA의 2개월 수준은 필수 반응자에서 유의하게 더 낮다 (p =.0016).
도 5a 및 도 5b는 7일(도 5a) 및 1개월(도 5b)에서 sBCMA의 폴드 변화(FC)가 전체 반응과 상관됨을 보여준다. PR, 부분 관해.
도 6은 주입 후 2개월째에 지속성(무진행 생존(PFS) ≥ 18개월) 및 비지속성(PFS < 18개월) 응답자의 sBCMA 수준을 나타낸다. sBCMA 수준은 ng/L로 표시된다.
도 7a 및 도 7b는 응답자 (≥ PR) 및 비응답자 (< PR)에서 주입 후 2일째에 IL-6 (도 7a) 및 TNF-α (도 7b)의 배수 변화를 나타낸다.
도 8은 무진행 생존 (PFS)에 대한 부분 의존성 플롯을 나타낸다. 정규화된 IL-2 플롯에 대해, IL-2의 정규화된 양 (x-축)은 1x106 CAR T 세포당 pg/ml로 나타낸다. CD3+, CD8+, CAR+, CD25+ 플롯에 대해, x-축은 CD8+ CAR T 세포에서 CD25 양성 세포의 퍼센트를 나타낸다. 두 플롯 모두에 대해, y-축은 누적 국소 효과, 생존 확률 변화를 나타낸다.
도 9a 및 도 9b는 무진행 생존 (PFS)에 대해 선택된 변수에 대한 Univariate Cox-PH 모델의 포레스트 플롯 (도 9a) 및 CRS에 대해 선택된 변수에 대한 Univariate Cox-PH 모델의 박스 플롯 (도 9b)을 나타낸다. "PD-분비된 IL-2"는 IL-2 분비된 의약품을 의미한다.
도 10은 종양 BCMA 발현이 주입 전 모든 평가할 수 있는 환자에서 관찰되었음을 보여준다. 각각의 도트는 개별 환자에 대한 백분율 및 평균 강도 점수를 나타낸다. 중첩 도트는 각각의 강도 점수 주위로 오프셋된다. 약어: BCMA, B-세포 성숙 항원; ide-cel, 이데캅타진 비클류셀; IHC, 면역조직화학; NE, 평가할 수 없음.
도 11a 내지 도 11d는 BCMA-양성 세포의 백분율보다 더 높은 BCMA 수용체 밀도가 더 깊은 종양 반응과 연관된다는 것을 보여준다. 약어: BOR, 가장 우수한 전체 반응; CR, 완전 반응; HR, 위험 비율; IHC, 면역조직화학; NR, 반응 없음; PFS, 무진행 생존; PR, 부분 반응; R, 반응; sCR, 엄격한 완전 반응; VGPR, 매우 우수한 부분 반응.
도 12a 및 도 12b는 의심되는 항원 손실을 갖는 환자에서 BCMA IHC 염색 및 VDJ 클론 추적을 보여준다. 도 12a: 의심되는 항원 손실을 갖는 환자로부터의 BCMA IHC 염색. 도 12b: VDJ 클론 추적은 의심되는 항원 손실을 갖는 다발성 골수종 환자에서 재발시 초기 및 잠재적 출현 클론의 복귀를 예시한다. 약어: BCMA, B-세포 성숙 항원; BL, 기준선; IHC, 면역조직화학; M, 개월; MRD, 최소 잔류 질환; PD, 진행성 질환; Scrn, 스크리닝; VDJ, 변수, 다양성, 및 결합.
도 13a-13c는 융합 후 사이토카인 Cmax의 크기가 CAR T 세포 활성화 및 확장, 및 종양 반응과 관련된 것을 보여준다. 도 13a: ide-cel 증폭 및 수축의 시간 경과. 도 13a (연속): 임상 반응에 의한 ide-cel 증폭. 도 13b: 용량 수준에 의한 전-염증성 사이토카인 유도의 크기. 도 13c: 임상 반응에 의한 전-염증성 사이토카인 유도의 크기(Cmax). 약어: AUC, 곡선하 면적; BL, 기준선; CAR, 키메라 항원 수용체; Cmax, 최대 농도; CRP, 반응성 단백질; D, 일, IFN; 인터페론; IL, 인터루킨; M, 월; ORR, 전체 반응 속도.
도 14a-14c는 기준선 수준 보다 주입 후 사이토카인 유도의 크기(사이토카인 Cmax)가 더 높은 등급의 CRS 및 조사자 확인된 NT와 관련이 있음을 보여준다. 도 14a: 전염증성 사이토카인 유도의 크기 및 CRS의 등급. 도 14b: 전염증성 사이토카인 유도의 크기 및 조사자 확인된 NT의 등급. 도 14c: 기준선 안지오포이에틴-1 및 -2 수준 및 조사자 확인된 NT의 등급. 도 14a, 14b, 및 14c에 도시된 각각의 그래프에서, 오차 막대가 있는 각각의 직사각형은 등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥ 3 (각각의 그래프에서 오차 막대가 있는 1개의 직사각형)의 순서로 좌측으로부터 우측으로 도시된다. 약어: Ang, 안지오포이에틴, CRP, C-반응성 단백질; IFN, 인터페론; NT, 신경독성; IL, 인터루킨.
도 15a-15c는 sBCMA 제거 후 주입이 기준선 종양 부담 또는 EMP 관여와 무관하다는 것을 보여준다. 도 15a (상부 및 하부 패널): 기준선 sBCMA와 종양 부담 사이의 상관관계. 도 15b (상부 및 하부 패널): 기준선 sBCMA와 EMP의 존재 사이의 상관관계. 도 15c (상부 및 하부 패널): 기준선 sBCMA와 sBCMA 제거 사이의 상관관계. 약어: EMP, 골수외 형질세포종; LLOQ, 정량 하한; sBCMA, 가용성 B-세포 성숙 항원.
도 16a 내지 도 16c는 sBCMA 제거가 반응하는 환자에서 신속하게 발생하였고, sBCMA 재결합까지의 시간이 종양 반응의 깊이와 관련되었음을 보여준다. 도 16a: 주입 후 가장 우수한 전체 반응에 의해 계층화된 중앙값 sBCMA. 도 16b: 가장 우수한 전체 반응에 의해 sBCMA 최하점 < LLOQ를 달성하는 환자의 비율. 도 16c: 검출가능한 수준으로 sBCMA의 재결합까지의 시간. 약어: BL, 기준선; CR, 완전 반응; D, 일; LLOQ, 정량 하한; M, 월; NPC, 정상 형질 세포; NR, 무반응; PD, 진행성 질환; PR, 부분 반응; sBCMA, 가용성 B-세포 성숙 항원; VGPR, 매우 우수한 부분 반응.
도 17a 및 17b는 sBCMA 반응 궤적이 골수종 질환 부담의 전통적인 혈청 마커 및 NGS에 의한 민감한 MRD 평가와 일치한다는 것을 보여준다. 도 17a: MRD(차세대 서열분석을 사용하여 결정된 바와 같음, cells/million에서 측정됨) 및 비-반응자, 반응자(진행됨), 및 반응자(진행중)에서 sBCMA, M-단백질, 및 FLC의 수준(반응은 비반응자(<부분 반응자), 데이터 컷의 시점에서 재발한 반응자(반응자, 진행됨), 및 데이터 컷에서의 반응에서 여전히 반응한 반응자(반응자, 진행중)로서 특징지어졌음). 도 17b: 검출가능한 바이오마커. 약어: BL, 기준선; FLC, 자유 경쇄; M, 개월; MFC; 다색 유동 세포측정법; M-프로테아제, 모노클로날 단백질; MRD, 최소 잔류 질환; NGS, 차세대 서열분석; sBCMA, 가용성 B-세포 성숙 항원; NonR, 비반응자; R, prog, 반응자, 진행됨; R, ong, 반응자, 진행중.
서열번호의 간단한 설명
서열번호 1-3은 본원에서 고려되는 BCMA CAR에 대한 예시적인 경쇄 CDR 서열의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 4-6은 본원에서 고려되는 BCMA CAR에 대한 예시적인 중쇄 CDR 서열의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 7은 본원에서 고려되는 BCMA CAR에 대한 예시적인 경쇄 서열의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 8은 본원에서 고려되는 BCMA CAR에 대한 예시적인 중쇄 서열의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 9는 본원에서 고려되는 예시적인 BCMA CAR의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 10은 본원에서 고려되는 예시적인 BCMA CAR을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 제시한다.
서열번호 11은 인간 BCMA의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 12-22는 다양한 링커의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 23-35는 프로테아제 절단 부위 및 자가-절단 폴리펩타이드 절단 부위의 아미노산 서열을 제시한다.
서열번호 36은 BCMA CAR를 암호화하는 벡터의 폴리뉴클레오타이드 서열을 제시한다. 표 1을 참조한다.
[표 1] 서열 목록
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
발명을 실시하기 위한 구체적인 내용
5.1. 가용성 BCMA 및 사이토카인을 사용한 CRS의 CAR T 세포 효능 및 CRS 개발 예측
본원에 제공된 개시내용은 일반적으로 B 세포 관련 병태를 치료하기 위한 개선된 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본원에 사용된 용어 "B 세포 관련 병태(B cell related conditions)"는 부적절한 B 세포 활성 및 B 세포 악성종양을 수반하는 병태에 관한 것이다.
본원에 제시된 특정 실시예는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포를 사용하는 B 세포 관련 병태의 개선된 입양 세포 요법에 관한 것이다. 유전적 접근법은 암 세포의 면역 인식 및 제거를 향상시키기 위한 잠재적 수단을 제공한다. 하나의 유망한 전략은 암 세포를 향한 세포독성을 재지향시키는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하도록 면역 이펙터 세포를 유전적으로 조작하는 것이다. 그러나, B 세포 장애를 치료하기 위한 기존의 입양 세포 면역요법은 세포 표적 항원이 전부 또는 다수의 B 세포 상에 발현되기 때문에 체액성 면역을 손상시킬 심각한 위험을 나타낸다. 따라서, 이러한 요법은 임상적으로 바람직하지 않으며, 따라서 당해 분야에서는 체액성 면역을 보존하는 B 세포 관련 병태에 대한 보다 효율적인 요법에 대한 필요성이 남아 있다.
본원에 개시된 입양 세포 요법의 개선된 조성물 및 방법은 B 세포 성숙 항원 (BCMA, 또한 CD269 또는 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리, 멤버 17로도 공지됨; TNFRSF17)을 발현하는 B 세포를 표적화함으로써 용이하게 증폭될 수 있고, 생체 내 장기 지속성을 나타내고, 체액성 면역의 손상을 감소시킬 수 있는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포를 제공한다. 또한, 본 개시내용은 항-BCMA 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체 (CAR), 및 이러한 CAR을 발현하도록 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포를 BCMA-기반 치료 양식과 병용하여 사용하여 B 세포 관련 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다 또한, 본 개시내용은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식을 사용하여 B 세포 관련 병태를 치료하는 방법에 관한 것이고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이다.
BCMA는 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리의 멤버이다(예를 들어, Thompson et al., J. Exp . Medicine, 192(1): 129-135, 2000, 및 Mackay et al., Annu . Rev. Immunol, 21: 231-264, 2003 참조). BCMA는 B 세포 활성화 인자(BAFF) 및 증식 유도 리간드(APRIL)에 결합한다(예를 들어, Mackay et al., 2003 및 Kalled et al., Immunological Reviews, 204: 43-54, 2005 참조). 비악성 세포 중에서, BCMA는 형질 세포 및 성숙한 B 세포의 서브세트에서 주로 발현되는 것으로 보고되었다(예를 들어, Laabi et al., EMBO J., 77(1 ): 3897-3904, 1992; Laabi et al., Nucleic Acids Res., 22(7): 1147-1154,, 1994; Kalled et al., 2005; O'Connor et al., J. Exp. Medicine, 199(1): 91-97, 2004; 및 Ng et al., J. Immunol., 73(2): 807-817, 2004 참조). BCMA가 결핍된 마우스는 건강하고 정상적인 수의 B 세포를 갖지만, 수명이 긴 형질 세포의 생존이 손상된다(예를 들어, O'Connor et al., 2004; Xu et al., Mol . Cell. Biol ., 21(12): 4067-4074, 2001; 및 Schiemann et al., Science, 293(5537): 2 111-21 14, 2001 참조). BCMA RNA는 다발성 골수종 세포 및 기타 림프종에서 보편적으로 검출되었으며, BCMA 단백질은 여러 연구자에 의해 다발성 골수종 환자의 형질 세포 표면에서 검출되었다(예를 들어, Novak et al., Blood, 103(2): 689-694, 2004; Neri et al., Clinical Cancer Research, 73(19): 5903-5909, 2007; Bellucci et al., Blood, 105(10): 3945-3950, 2005; 및 Moreaux et al., Blood, 703(8): 3148-3157, 2004 참조).
CAR T 세포 요법, 예를 들어 항-BCMA CAR T 세포 요법의 투여 후 가용성(즉, 비-막-결합) BCMA(sBCMA)의 양은 대상체가 CAR T 세포 요법에 적절하게 반응할 것으로 예상될 수 있는지 또는 대상체가 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 데 사용될 수 있다. CAR T 세포 요법의 투여 후 조직 샘플(예: 혈청, 혈장, 림프 또는 혈액)에서 sBCMA 수준의 더 큰 하락은 더 임상적으로 유익한 결과(예: 매우 우수한 부분 반응, 완전 반응 또는 엄격한 완전 반응)와 상관관계가 있다. 일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 약 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 30%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다. 상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준이 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 23-35, 24-35, 25-36, 25-37, 23-35, 또는 25-37 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 또는 37 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 26-31, 27-31, 28-32, 28-33, 26-31, 또는 27-33 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 또는 33 일에 알아낸다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 비-CAR T 세포 요법이 제공된다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유한다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다.
조직 샘플(예: 혈장, 혈청, 림프 또는 혈액)에서 sBCMA의 절대 수준은 CAR T 세포 요법, 예를 들어, BCMA CAR T 세포 요법을 투여받은 사람이 해당 요법으로부터 적절하게 이익을 얻을 것인지 또는 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지를 결정하는 데 사용될 수도 있다. 따라서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계; 여기서, sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공된다. 상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준이 약 3000 ng/L, 3500 ng/L, 4000 ng/L, 4500 ng/L, 또는 5000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 45-70, 46-70, 47-70, 48-70, 49-70, 50-70, 50-71, 50-72, 50-73, 또는 50-75 일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 또는 70 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50-65, 51-65, 52-65, 53-65, 54-65, 55-64, 55-63, 55-62, 또는 55-61 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 또는 65 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 53-62, 54-62, 55-62, 56-62, 57-62, 58-68, 58-67, 58-66, 58-65, 58-64, 또는 58-63 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58, 59, 60, 61, 또는 62 일에 알아낸다. 이전 구현예 중 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 제1 수준을 결정한 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 비-CAR T 세포 요법이 제공된다.
특정 사이토카인(예: 인터루킨-6 (IL-6) 및/또는 종양 괴사 인자 알파 (TNFα))의 수준은 CAR T 세포 요법, 예를 들어, BCMA CAR T 세포 요법을 받은 사람이 해당 요법으로부터 적절하게 혜택을 받을지 또는 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 데 사용될 수도 있다. 따라서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계; 여기서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 각각 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 상기 면역 세포를 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 3일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 4일에 알아낸다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA)-발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 페리틴(ferritin)의 수준을 알아내는 단계; 여기서, 페리틴의 상기 수준이 리터당 1500 피코몰(picomoles)을 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 사이토카인 방출 증후군 (CRS)을 치료하기 위해 요법이 제공됨, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여 전 0 내지 4일 이내에 수행된다. 구체적인 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여와 동일한 날에 수행된다. 구체적인 구현예에서, CRS를 치료하기 위한 상기 요법은 상기 투여 후 0 내지 5일에 상기 대상체에게 먼저 제공된다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨, 를 포함한다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 를 포함한다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유한다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함한다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR T 세포 요법(예: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포, 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)은 약 10%, 5%, 3%, 2%, 또는 1%의 활성화된 CAR T-세포, 예를 들어 활성화된 CD8 CAR T-세포(CD3+/CD8+/CAR+/CD25+)를 포함하는 세포 집단을 포함한다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR T 세포 요법(예: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포, 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)은 10%, 5%, 3%, 2%, 또는 1% 노화 집단의 CAR T-세포, 예를 들어 활성화된 CD4 CAR T-세포(CD3+/CD4+/CAR+/CD57+)를 포함하는 세포 집단을 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 조직 샘플은 혈액, 혈장 또는 혈청이다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종(예: 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma))이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예를 들어, 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종이다. 다른 구체적인 구현예에서, 고위험 다발성 골수종은 R-ISS III기 질환 및/또는 조기 재발을 특징으로 하는 질환(예: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및/또는 덱사메타손을 사용한 마지막 치료 요법과 같은 마지막 치료 요법 날짜로부터 12개월 이내의 진행성 질환)이다. 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택된다.
일 구현예에서, B 세포 성숙 항원 (B Cell Maturation Antigen, BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 T 세포의 투여 전에, 종양을 갖는 대상체는 종양에 의한 BCMA의 발현에 대해 평가되었다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포, 예를 들어 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 세포독성 T 림프구 (CTL), T 킬러 세포, 또는 자연 살해 (NK) 세포이다. 다른 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 또는 하기 섹션 5.9에 나열된 다른 치료제 중 하나. 보다 구체적인 구현예에서, 환자는 CAR T 세포의 투여 전에 상기 비-CAR T 세포 요법을 받지 않았다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 레날리도마이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도미드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 28일에 매일 1회 약 10 mg의 투여량으로 지속적으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 10 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 15 mg의 투여량으로 격일로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 최대 12주기 동안 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 20 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 포말리도마이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 질환이 진행될 때까지 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 질환이 진행될 때까지 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 경구로 섭취되는 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 CC-220을 포함한다(이베르도마이드; 예를 들어, Bjorkland, C.C. et al., 2019, Leukemia, doi: 10.1038/s41375-019-0620-8; U.S. Patent No. 9,828,361 참조). 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 CC-220 (이베르도마이드) 및 덱사메타손을 포함한다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 40 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 약 20-60 mgs의 용량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있고, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법 또는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손. 다양한 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상; 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하; 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하; 또는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받았다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포, 300 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 550 x 106 세포, 400 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 150 x 106 세포 내지 300 x 106 세포, 또는 400 x 106 세포 내지 500 x 106 세포 범위의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 150 x 106 세포, 약 200 x 106 세포, 약 250 x 106 세포, 약 300 x 106 세포, 약 350 x 106 세포, 약 400 x 106 세포, 약 450 x 106 세포, 약 500 x 106 세포, 또는 약 550 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 1회 주입이 투여된다. 일부 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여가 반복된다(예를 들어, 면역 세포의 제2 용량이 대상체에게 투여된다).
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 550 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 250 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포(예: 자가 T 세포)이다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 치료되는 대상체는 대상체에 투여하기 전에 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 제조를 위해 자가 면역 세포를 수집하기 위한 백혈구 분획 절차를 겪는다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포(예: T 세포)는 정맥내 주입으로 투여된다.
본원에 개시된 임의의 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 림프구 고갈(LD) 화학요법을 투여받는다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파마이드를 포함한다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일(예: 3일)의 기간 동안 플루다라빈(정맥 투여의 경우 약 30 mg/m2) 및 사이클로포스파마이드(정맥 투여의 경우 약 300 mg/m2)를 포함한다. 다른 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 섹션 5.9에 설명된 화학요법제 중 하나를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법 투여 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일(예: LD 화학요법 투여 후 2 또는 3일)에 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포가 투여된다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법을 시작하기 전에 적어도 1주 또는 1주 이상, 적어도 2주 또는 2주 이상(적어도 14일 또는 14일 이상), 적어도 3주 또는 3주 이상, 적어도 4주 또는 4주 이상, 적어도 5주 또는 5주 이상, 또는 적어도 6주 또는 6주 이상 동안 어떠한 요법도 받지 않았다. 본원에 개시된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 단일의 사전 치료 요법만을 받았다.
임의의 상기 구현예에 대해, 대상체는 상기 면역 세포, 예를 들어, T 세포를 수집 및 단리하기 위해 성분채집술을 겪는다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 성분채집술 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 보다 구체적인 구현예에서, 성분채집술 시에 상기 대상체는 추가로: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 (레날리도마이드 또는 포말리도마이드) 및 항-CD38 항체로의 사전 치료를 포함하는, 사전 치료 중 적어도 3개의 종류를 받았고; 진행성 질환이 치료 종류에 대한 최상의 반응이 아니더라도, 상기 적어도 3개 종류의 사전 치료의 각각에 대해 적어도 2회의 연속 사이클의 치료를 겪었고; 가장 최근의 종류의 사전 치료 날에 또는 60일 이내에 진행성 질환의 증거를 갖고; 및/또는 상기 사전 치료의 종류 중 적어도 하나에 대한 반응 (최소 반응 또는 더 양호함)을 달성하였다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 투여 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 다른 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 추가로: 하나의 사전 항-골수종 치료 요법만을 받았고; 하기 고위험 인자를 가진다: R-ISS 단계 III, 및 초기 재발, (i) 대상체가 유도 및 줄기 세포 이식을 겪는 경우, 최초 이식일 이후 12개월 미만의 진행성 질환 (PD)을 겪는 경우; 또는 (ii) 대상체가 오직 유도를 받았을 경우, 최소한, 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및 덱사메타손을 함유하여야 하는 최종 치료 요법일 이후 PD ≤ 12개월인 경우로서 정의됨.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 단일 쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 scFv를 포함하고, 상기 scFV는 서열번호 9의 항-BCMA02 CAR의 것이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 9이거나 이를 포함한다. 본원에서 임의의 구현예의 보다 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (ide-cel) 세포이다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 서열번호 9이거나 이를 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다.
다른 구현예에서, 본원에서 고려되는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포는 B 세포 관련 병태, 예를 들어 B 세포와 관련된 자가면역 질환 또는 B 세포 악성종양을 갖는 환자에게 투여된다.
CAR T 세포 요법, 예를 들어 항-BCMA CAR T 세포 요법의 투여 후 가용성(즉, 비-막-결합) BCMA(sBCMA)의 양은 대상체가 CAR T 세포 요법에 적절하게 반응할 것으로 예상될 수 있는지 또는 대상체가 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 데 사용될 수 있다. CAR T 세포 요법의 투여 후 조직 샘플(예: 혈청, 혈장, 림프 또는 혈액)에서 sBCMA 수준의 더 큰 하락은 더 임상적으로 유익한 결과(예: 매우 우수한 부분 반응, 완전 반응 또는 엄격한 완전 반응)와 상관관계가 있다. 일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 20%, 25%, 또는 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 20%, 25%, 또는 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
일 측면에서, 예를 들어, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며; 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 30%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 30%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 또는 30%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 20%, 25%, 또는 30%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
또한, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계; 및 (c) 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA의 제2 수준이 상기 제1 수준의 약 30%, 35%, 40%, 45%, 또는 50%를 초과함을 알아냄하는 단계, 및 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계; 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준이 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다.
상기 구현예 중 어느 하나의 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 23-35, 24-35, 25-36, 25-37, 23-35, 또는 25-37 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 또는 37 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 26-31, 27-31, 28-32, 28-33, 26-31, 또는 27-33 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 또는 33 일에 알아낸다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유하였다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유하였다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 된다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
조직 샘플(예: 혈장, 혈청, 림프 또는 혈액)에서 sBCMA의 절대 수준은 CAR T 세포 요법, 예를 들어, BCMA CAR T 세포 요법을 투여받은 사람이 해당 요법으로부터 적절하게 이익을 얻을 것인지 또는 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지를 결정하는 데 사용될 수도 있다. 따라서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계; 여기서 sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
상기 구현예 중 어느 하나의 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준이 약 3000 ng/L, 3500 ng/L, 4000 ng/L, 4500 ng/L, 또는 5000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위한 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 45-70, 46-70, 47-70, 48-70, 49-70, 50-70, 50-71, 50-72, 50-73, 또는 50-75 일에 알아낸다. 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 또는 70 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 50-65, 51-65, 52-65, 53-65, 54-65, 55-64, 55-63, 55-62, 또는 55-61 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 제1 수준은 상기 투여 후 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 또는 65 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 53-62, 54-62, 55-62, 56-62, 57-62, 58-68, 58-67, 58-66, 58-65, 58-64, 또는 58-63 일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58, 59, 60, 61, 또는 62 일에 알아낸다. 이전 구현예 중 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 sBCMA의 제1 수준을 결정한 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공된다.
특정 사이토카인(예: 인터루킨-6 (IL-6) 및/또는 종양 괴사 인자 알파 (TNFα))의 수준은 CAR T 세포 요법, 예를 들어, BCMA CAR T 세포 요법을 받은 사람이 해당 요법으로부터 적절하게 혜택을 받을지 또는 다른 항암 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 데 사용될 수도 있다. 따라서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계; 여기서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 각각 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계; 여기서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 각각 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
특정 구현예에서, 상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 1일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 3일에 알아낸다. 다른 구체적인 구현예에서, 상기 제2 수준은 상기 투여 후 4일에 알아낸다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA)-발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 페리틴(ferritin)의 수준을 알아내는 단계; 여기서, 페리틴의 상기 수준이 리터당 1500 피코몰(picomoles)을 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 사이토카인 방출 증후군 (CRS)을 치료하기 위해 요법이 제공됨, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여 전 0 내지 4일 이내에 수행된다. 구체적인 구현예에서, 상기 알아냄은 상기 투여와 동일한 날에 수행된다. 구체적인 구현예에서, CRS를 치료하기 위한 상기 요법은 상기 투여 후 0 내지 5일에 상기 대상체에게 먼저 제공된다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, 및 (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계, 여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, 본원에서 제공되며, 이를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법은: (a) 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계; (b) 대상체에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계, (c) 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및 (d) 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임, 를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유하였다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법이 본원에서 제공되고, 상기 방법은 상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 환자는 이전에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준 및/또는 (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 함유하였다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
다른 측면에서, B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 이전에 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고, 여기서, (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는 (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 되며, 여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이다. 구체적인 구현예에서, 상기 방법은 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR T 세포 요법(예: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포, 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)은 약 10%, 5%, 3%, 2%, 또는 1%의 활성화된 CAR T-세포, 예를 들어 활성화된 CD8 CAR T-세포(CD3+/CD8+/CAR+/CD25+)를 포함하는 세포 집단을 포함한다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR T 세포 요법(예: BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포, 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)은 10%, 5%, 3%, 2%, 또는 1% 노화 집단의 CAR T-세포, 예를 들어 활성화된 CD4 CAR T-세포(CD3+/CD4+/CAR+/CD57+)를 포함하는 세포 집단을 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 조직 샘플은 혈액, 혈장 또는 혈청이다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종(예: 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma))이다. 구체적인 구현예에서, 질환은 다발성 골수종, 예를 들어, 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종이다. 다른 구체적인 구현예에서, 고위험 다발성 골수종은 R-ISS III기 질환 및/또는 조기 재발을 특징으로 하는 질환(예: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및/또는 덱사메타손을 사용한 마지막 치료 요법과 같은 마지막 치료 요법 날짜로부터 12개월 이내의 진행성 질환)이다. 구체적인 구현예에서, BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택된다.
일 구현예에서, B 세포 성숙 항원 (BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 T 세포의 투여 전에, 종양을 갖는 대상체는 종양에 의한 BCMA의 발현에 대해 평가되었다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포, 예를 들어 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 세포독성 T 림프구 (CTL), T 킬러 세포, 또는 자연 살해 (NK) 세포이다. 다른 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다.
일반적으로, BCMA-기반 치료 양식은 BCMA 및/또는 BCMA를 발현하는 세포(예: 세포 표면 상에서 BCMA를 발현하는 세포)를 표적으로 하는 치료 양식을 의미한다. 예를 들어 BCMA-기반 치료 양식(예: 제1 BCMA-기반 치료 양식 또는 제2 BCMA-기반 치료 양식)은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)일 수 있다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)이다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 및 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로 구성된 군에서 선택된다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)이며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 및 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로 구성된 군에서 선택되며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 보다 구체적인 구현예에서, 환자는 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 전에 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 받지 않았다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 CC99712, GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴), CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, TNB-383B, DF3001, AFM26, CTX-4419, CTX-8573, JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포 (Hrain Biotechnology), 또는 CTX120를 포함한다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 CC99712, GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴), CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, TNB-383B, DF3001, AFM26, CTX-4419, CTX-8573, JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포 (Hrain Biotechnology), 또는 CTX120이다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 CC99712, GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴), CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, TNB-383B, DF3001, AFM26, CTX-4419, CTX-8573, JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포 (Hrain Biotechnology), 또는 CTX120로 구성된다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 CC99712, GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴), CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, TNB-383B, DF3001, AFM26, CTX-4419, CTX-8573, JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포 (Hrain Biotechnology), 및 CTX120로 구성된 군에서 선택된다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)를 포함한다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)이다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)로 구성된다. 특정 구현예에서, 상기 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)는 CC99712 또는 GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴)를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)는 CC99712 또는 GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴)이다. 특정 구현예에서, 상기 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)는 CC99712 또는 GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴)으로 구성된다. 특정 구현예에서, BCMA-항체-약물 접합체(ADC)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA-항체-약물 접합체(ADC)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA-항체-약물 접합체(ADC)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA-항체-약물 접합체(ADC)는 적절한 골수 회복 시 또는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 90일(예: ide-cel의 투여 후 90일) 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)를 포함한다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)이다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)로 구성된다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 또는 TNB-383B를 포함한다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 또는 TNB-383B이다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 또는 TNB-383B로 구성된다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 및 TNB-383B로 구성된 군에서 선택된다. 특정 구현예에서, 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 적절한 골수 회복 시 또는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 90일(예: ide-cel의 투여 후 90일) 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)를 포함한다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)이다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)로 구성된다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 또는 CTX-8573를 포함한다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 또는 CTX-8573이다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 또는 CTX-8573으로 구성된다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 및 CTX-8573으로 구성된 군에서 선택된다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCE)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (BCMA)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (BCMA)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (BCMA)는 적절한 골수 회복 시 또는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 90일(예: ide-cel의 투여 후 90일) 중 더 늦은 시점에 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함한다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)이다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)이며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로 구성된다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)로 구성되며, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포 (Hrain Biotechnology), 및 CTX120를 포함한다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 적절한 골수 회복 시 또는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 90일(예: ide-cel의 투여 후 90일) 중 더 늦은 시점에 개시되어야 한다.
특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 직후에 투여될 수 있으며, 여기서 상기 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있으며, 여기서 상기 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있으며, 여기서 상기 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다. 특정 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 적절한 골수 회복 시 또는 제1 BCMA-기반 치료 양식의 투여 후 90일(예: ide-cel의 투여 후 90일) 중 더 늦은 시점에 개시되어야 하며, 여기서 상기 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식과 동일하지 않다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포)를 포함하는 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식에서 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포를 포함하지 않는다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 세포가 아니다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포, 예를 들어 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 세포독성 T 림프구 (CTL), T 킬러 세포, 또는 자연 살해 (NK) 세포이다. 다른 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 또는 하기 섹션 5.9에 나열된 다른 치료제 중 하나. 보다 구체적인 구현예에서, 환자는 CAR T 세포의 투여 전에 상기 비-CAR T 세포 요법을 받지 않았다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 레날리도마이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도미드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 28일에 매일 1회 약 10 mg의 투여량으로 지속적으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 10 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 15 mg의 투여량으로 격일로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 최대 12주기 동안 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 20 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 포말리도마이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 질환이 진행될 때까지 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 질환이 진행될 때까지 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 경구로 섭취되는 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 CC-220을 포함한다(이베르도마이드; 예를 들어, Bjorkland, C.C. et al., 2019, Leukemia, doi: 10.1038/s41375-019-0620-8; U.S. Patent No. 9,828,361 참조). 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 비-CAR T 세포 요법은 CC-220 (이베르도마이드) 및 덱사메타손을 포함한다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 40 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 약 20-60 mgs의 용량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있고, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 다른 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법 또는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받았다: 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd); 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd); 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd); 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손; 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd); 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd); 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손; 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd); 보르테조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손; 레날리도마이드 및 덱사메타손; 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE); 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손; 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손; 카르필조밉 및 덱사메타손; 레날리도마이드 단독; 보르테조밉 단독; 다라투무맙 단독; 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손; 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 포말리도마이드 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손; 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손; 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신; 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손; 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손; 익사조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손; 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손. 다양한 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상; 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하; 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하; 또는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받았다.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포, 300 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 350 x 106 세포 내지 550 x 106 세포, 400 x 106 세포 내지 600 x 106 세포, 150 x 106 세포 내지 300 x 106 세포, 또는 400 x 106 세포 내지 500 x 106 세포 범위의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 150 x 106 세포, 약 200 x 106 세포, 약 250 x 106 세포, 약 300 x 106 세포, 약 350 x 106 세포, 약 400 x 106 세포, 약 450 x 106 세포, 약 500 x 106 세포, 또는 약 550 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일 구현예에서, 상기 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 대상체는 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 1회 주입이 투여된다. 일부 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여가 반복된다(예를 들어, 면역 세포의 제2 용량이 대상체에게 투여된다).
본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 550 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 150 x 106 세포 내지 약 250 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 300 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 350 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 600 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 400 x 106 세포 내지 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 200 x 106 세포 내지 약 300 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포 내지 약 500 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 400 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 250 x 106 세포 내지 약 350 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포는 약 450 x 106 세포의 투여량으로 투여된다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포는 T 세포(예: 자가 T 세포)이다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 치료되는 대상체는 대상체에 투여하기 전에 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 제조를 위해 자가 면역 세포를 수집하기 위한 백혈구 분획 절차를 겪는다. 본원에 기재된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, 면역 세포(예: T 세포)는 정맥내 주입으로 투여된다.
본원에 개시된 임의의 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 림프구 고갈(LD) 화학요법을 투여받는다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 플루다라빈 및/또는 사이클로포스파마이드를 포함한다. 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일(예: 3일)의 기간 동안 플루다라빈(정맥 투여의 경우 약 30 mg/m2) 및 사이클로포스파마이드(정맥 투여의 경우 약 300 mg/m2)를 포함한다. 다른 구체적인 구현예에서, LD 화학요법은 섹션 5.9에 설명된 화학요법제 중 하나를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법 투여 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일(예: LD 화학요법 투여 후 2 또는 3일)에 B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포가 투여된다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 LD 화학요법을 시작하기 전에 적어도 1주 또는 1주 이상, 적어도 2주 또는 2주 이상(적어도 14일 또는 14일 이상), 적어도 3주 또는 3주 이상, 적어도 4주 또는 4주 이상, 적어도 5주 또는 5주 이상, 또는 적어도 6주 또는 6주 이상 동안 어떠한 요법도 받지 않았다. 본원에 개시된 임의의 구현예의 구체적인 구현예에서, B 세포 성숙 항원(BCMA)에 대해 지시된 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 면역 세포의 투여 전에, 치료되는 대상체는 단일의 사전 치료 요법만을 받았다.
임의의 상기 구현예에 대해, 대상체는 상기 면역 세포, 예를 들어, T 세포를 수집 및 단리하기 위해 성분채집술을 겪는다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 성분채집술 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 보다 구체적인 구현예에서, 성분채집술 시에 상기 대상체는 추가로: 프로테아좀 억제제, 면역조절제 (레날리도마이드 또는 포말리도마이드) 및 항-CD38 항체로의 사전 치료를 포함하는, 사전 치료 중 적어도 3개의 종류를 받았고; 진행성 질환이 치료 종류에 대한 최상의 반응이 아니더라도, 상기 적어도 3개 종류의 사전 치료의 각각에 대해 적어도 2회의 연속 사이클의 치료를 겪었고; 가장 최근의 종류의 사전 치료 날에 또는 60일 이내에 진행성 질환의 증거를 갖고; 및/또는 상기 사전 치료의 종류 중 적어도 하나에 대한 반응 (최소 반응 또는 더 양호함)을 달성하였다. 임의의 상기 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 상기 투여 시에 다음을 나타낸다: M-단백질 (혈청 단백질 전기영동[sPEP] 또는 소변 단백질 전기영동[uPEP]): sPEP ≥ 0.5g/dL 또는 uPEP ≥ 200mg/24시간; 혈청 면역글로불린 유리 경쇄 ≥ 10 mg/dL 및 비정상 혈청 면역글로불린 카파 람다 유리 경쇄 비율을 갖는 혈청 또는 소변에 측정 가능한 질환이 없는 경쇄 다발성 골수종; 및/또는 ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 수행 상태 ≤ 1. 다른 보다 구체적인 구현예에서, 상기 대상체는 추가로: 하나의 사전 항-골수종 치료 요법만을 받았고; 하기 고위험 인자를 가진다: R-ISS 단계 III, 및 초기 재발, (i) 대상체가 유도 및 줄기 세포 이식을 겪는 경우, 최초 이식일 이후 12개월 미만의 진행성 질환 (PD)을 겪는 경우; 또는 (ii) 대상체가 오직 유도를 받았을 경우, 최소한, 프로테아좀 억제제, 면역조절제 및 덱사메타손을 함유하여야 하는 최종 치료 요법일 이후 PD ≤ 12개월인 경우로서 정의됨.
임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 단일 쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함한다. 보다 구체적인 구현예에서, 상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함한다. 임의의 상기 측면 또는 구현예의 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 세포이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 scFv를 포함하고, 상기 scFV는 서열번호 9의 항-BCMA02 CAR의 것이다. 일 구현예에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 9이거나 이를 포함한다. 본원에서 임의의 구현예의 보다 구체적인 구현예에서, 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (ide-cel) 세포이다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA, 예를 들어 BCMA를 표적으로 하는 뮤린 단일 쇄 Fv 항체 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv, CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인, CD8α 막관통 도메인, CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다. 일 구현예에서, 면역 세포는 서열번호 9이거나 이를 포함하는 키메라 항원 수용체를 포함한다.
다른 구현예에서, 본원에서 고려되는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포는 B 세포 관련 병태, 예를 들어 B 세포와 관련된 자가면역 질환 또는 B 세포 악성종양을 갖는 환자에게 투여된다.
본원에 제시된 주제의 실시는, 달리 구체적으로 지시되지 않는 한, 당업계의 기술 내에 있는 화학, 생화학, 유기 화학, 분자 생물학, 미생물학, 재조합 DNA 기술, 유전학, 면역학, 및 세포 생물학의 통상적인 방법을 사용하며, 이들 중 다수는 예시의 목적을 위해 하기에 기재되어 있다. 이러한 기술은 문헌에 충분히 설명되어 있다. 예를 들어, Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd Edition, 2001); Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd Edition, 1989); Maniatis et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (1982); Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (John Wiley and Sons, updated July 2008); Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates and Wiley-Interscience; Glover, DNA Cloning: A Practical Approach, vol. I & II (IRL Press, Oxford, 1985); Anand, Techniques for the Analysis of Complex Genomes, (Academic Press, New York, 1992); Transcription and Translation (B. Hames & S. Higgins, Eds., 1984); Perbal, A Practical Guide to Molecular Cloning (1984); Harlow and Lane, Antibodies, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1998) Current Protocols in Immunology Q. E. Coligan, A. M. Kruisbeek, D. H. Margulies, E. M. Shevach and W. Strober, eds., 1991); Annual Review of Immunology; 및 Advances in Immunology와 같은 저널의 모노그래프 참조.
5.2. 정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 조성물, 방법 및 물질의 바람직한 구현예가 본원에 기재된다. 본 개시내용의 목적을 위해, 다음의 용어가 하기에 정의된다.
"a", "an" 및 "the"는 물품의 문법적 대상의 하나 또는 하나 초과(즉, 적어도 하나, 또는 하나 이상)를 지칭하기 위해 사용된다. 예로서, "요소(an element)"는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소를 의미한다.
대안(예를 들어, "또는(or)")의 사용은 대안들 중 하나, 둘 모두, 또는 이들의 임의의 조합을 의미하는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "및/또는(and/or)"은 상기 대안들 중 하나 또는 모두를 의미하는 것으로 이해되어야 한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "약(about)" 또는 "대략(approximately)"은 기준 분량(quantity), 수준, 값, 수, 빈도, 백분율, 치수, 크기, 양(amount), 중량 또는 길이에 대해 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% 또는 1% 만큼 변하는 분량, 수준, 값, 수, 빈도, 백분율, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 지칭한다. 일 구현예에서, 용어 "약(about)" 또는 "대략(approximately)"은 분량(quantity), 수준, 값, 수, 빈도, 백분율, 치수, 크기, 양(amount), 중량 또는 길이 ± 15%, ± 10%, ± 9%, ± 8%, ± 7%, ± 6%, ± 5%, ± 4%, ± 3%, ± 2%, 또는 ± 1% 약 분량, 수준, 값, 수, 빈도, 백분율, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 지칭한다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 문맥상 달리 요구하지 않는 한, 단어 "포함하다(comprise)", "포함하다(comprises)" 및 "포함하는(comprising)"은 언급된 단계 또는 요소 또는 단계 또는 요소 그룹의 포함을 의미하는 것으로 이해될 것이지만, 임의의 다른 단계 또는 요소 또는 단계 또는 요소 그룹의 배제를 의미하는 것은 아니다. "구성되는(consisting of)"은 "구성되는"이라는 문구 뒤에 오는 모든 것을 포함하고 이에 국한되는 것을 의미한다. 따라서, 문구 "구성되는(consisting of)"은 열거된 요소들이 요구되거나 의무적이고, 다른 요소들이 존재하지 않을 수 있음을 나타낸다. "필수적으로 구성되는(consisting essentially of)"은 문구 이후에 열거된 임의의 요소들을 포함하는 것을 의미하고, 열거된 요소들에 대해 본 개시내용에서 명시된 활성 또는 동작을 방해하거나 기여하지 않는 다른 요소들로 제한된다. 따라서, 문구 "필수적으로 구성되는(consisting essentially of)"은 열거된 요소들이 요구되거나 의무적이지만, 열거된 요소들의 활성 또는 동작에 실질적으로 영향을 미치는 다른 요소들이 존재하지 않음을 나타낸다.
본 명세서 전체에 걸쳐 "일 구현예(one embodiment)", "구현예(an embodiment)", "특정 구현예(a particular embodiment)", "관련 구현예(a related embodiment)", "특정 구현예(a certain embodiment)", "추가적인 구현예(an additional embodiment)" 또는 "추가 구현예(a further embodiment)" 또는 이들의 조합에 대한 언급은 구현예와 관련하여 설명된 특정한 특징, 구조 또는 특성이 본원에 제시된 개시내용의 적어도 하나의 구현예에 포함된다는 것을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전체에 걸쳐 다양한 곳에서의 전술한 문구의 출현은 반드시 모두 동일한 구현예를 지칭하는 것은 아니다. 더욱이, 구체적인 특징들, 구조들 또는 특성들은 하나 이상의 구현예에서 임의의 적절한 방식으로 결합될 수 있다. 또한, 하나의 구현예에서 특징의 긍정적인 언급은 특정 구현예에서 특징을 배제하기 위한 기초로서의 역할을 하는 것으로 이해된다.
5.3. 키메라 항원 수용체
다양한 구현예예에서, B 세포를 향한 면역 이펙터 세포의 세포독성을 재지향시키는 유전자 조작된 수용체가 제공된다. 이들 유전자 조작된 수용체는 본원에서 키메라 항원 수용체 (CAR)로 지칭된다. CAR은 목적하는 항원(예를 들어, BCMA)에 대한 항체-기반 특이성을 T 세포 수용체-활성화 세포내 도메인과 조합하여 특이적 항-BCMA 세포 면역 활성을 나타내는 키메라 단백질을 생성하는 분자이다. 본원에 사용된 용어 "키메라(chimeric)"는 상이한 기원으로부터의 상이한 단백질 또는 DNA의 부분으로 구성된 것을 기재한다.
본원에서 고려되는 CAR은 BCMA에 결합하는 세포외 도메인 (또한 결합 도메인 또는 항원-특이적 결합 도메인으로서 지칭됨), 막관통 도메인, 및 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. 표적 세포의 표면 상에서 BCMA와 CAR의 항-BCMA 항원 결합 도메인의 결합은 CAR의 클러스터링을 초래하고 활성화 자극을 CAR-함유 세포에 전달한다. CAR의 주요 특징은 면역 이펙터 세포 특이성을 재지향시키는 이들의 능력이며, 이에 의해, 모노클로날 항체, 가용성 리간드 또는 세포 특이적 공동수용체의 세포 특이적 표적화 능력을 활용하여, 주요 조직적합성 (MHC) 독립적인 방식으로 표적 항원 발현 세포의 세포 사멸을 매개할 수 있는 분자의 증식, 사이토카인 생산, 식세포작용 또는 생산을 유발시킨다.
다양한 구현예에서, CAR은 뮤린 항-BCMA (예를 들어, 인간 BCMA)-특이적 결합 도메인을 포함하는 세포외 결합 도메인; 막관통 도메인; 하나 이상의 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, CAR은 뮤린 항-BCMA (예를 들어, 인간 BCMA)-항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 세포외 결합 도메인; 하나 이상의 힌지 도메인 또는 스페이서 도메인; 막관통 도메인 포함; 하나 이상의 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
5.3.1. 결합 도메인
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 B 세포에서 발현되는 인간 BCMA 폴리펩타이드에 특이적으로 결합하는 뮤린 항-BCMA 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 세포외 결합 도메인을 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "결합 도메인(binding domain)", "세포외 도메인(extracellular domain)", "세포외 결합 도메인(extracellular binding domain)", "항원-특이적 결합 도메인(antigen-specific binding domain)" 및 "세포외 항원 특이적 결합 도메인(extracellular antigen specific binding domain)"은 상호교환적으로 사용되며, 목적하는 표적 항원, 예를 들어 BCMA에 특이적으로 결합하는 능력을 갖는 CAR을 제공한다. 결합 도메인은 천연, 합성, 반합성 또는 재조합 공급원으로부터 유래될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "특이적 결합 친화도(specific binding affinity)" 또는 "특이적으로 결합하다(specifically binds)" 또는 "특이적으로 결합된(specifically bound)" 또는 "특이적 결합(specific binding)" 또는 "특이적으로 표적하다(specifically targets)"는 배경 결합보다 더 큰 결합 친화도로 BCMA에 대한 항-BCMA 항체 또는 이의 항원 결합 단편 (또는 이를 포함하는 CAR)의 결합을 기재한다. 결합 도메인 (또는 결합 도메인을 포함하는 CAR 또는 결합 도메인을 함유하는 융합 단백질)은 BCMA에 결합하거나 BCMA와 예를 들어 약 105 M-1 이상의 친화도 또는 Ka(즉, 1/M 단위의 특정 결합 상호작용의 평형 결합 상수)로 회합하는 경우에 BCMA에 "특이적으로 결합"한다. 특정 구현예에서, 결합 도메인 (또는 이의 융합 단백질)은 약 106 M-1, 107 M-1, 108 M-1, 109 M-1, 1010 M-1, 1011 M-1, 1012 M-1, 또는 1013 M-1 이상의 Ka로 표적에 결합한다. "고 친화도(High affinity)" 결합 도메인 (또는 이의 단일 쇄 융합 단백질)은 적어도 107 M-1, 적어도 108 M-1, 적어도 109 M-1, 적어도 1010 M-1, 적어도 1011 M-1, 적어도 1012 M-1, 적어도 1013 M-1, 또는 그 초과의 Ka를 갖는 이들 결합 도메인을 지칭한다.
대안적으로, 친화도는 M 단위 (예를 들어, 10-5 M 내지 10-13 M, 또는 그 미만)로의 특정 결합 상호작용의 평형 해리 상수 (Kd)로서 정의될 수 있다. 본 개시내용에 따른 결합 도메인 폴리펩타이드 및 CAR 단백질의 친화도는 통상적인 기술, 예를 들어 경쟁적 ELISA (효소-연결된 면역흡착 검정)에 의해, 또는 표지된 리간드를 사용한 결합 회합, 또는 변위 검정에 의해, 또는 표면-플라즈몬 공명 장치, 예컨대 Biacore T100(Biacore, Inc., Piscataway, NJ에서 입수 가능함), 또는 광학 바이오센서 기술, 예컨대 각각 Corning 및 Perkin Elmer로부터 입수가능한 EPIC 시스템 또는 EnSpire를 사용하여 용이하게 결정될 수 있다(또한, 예를 들어 Scatchard et al. (1949) Ann. N.Y. Acad. Sci. 51:660; 및 미국 특허 번호 5,283,173; 5,468,614, 또는 그 등가물 참조).
일 구현예에서, 특이적 결합의 친화도는 배경 결합보다 약 2배, 배경 결합보다 약 5배, 배경 결합보다 약 10배, 배경 결합보다 약 20배, 배경 결합보다 약 50배, 배경 결합보다 약 100배, 또는 배경 결합보다 약 1000배 또는 그 이상 더 크다.
특정 구현예에서, CAR의 세포외 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. "항체(antibody)"는 면역 세포에 의해 인식되는 것과 같은 항원 결정기를 함유하는 펩타이드, 지질, 다당류, 또는 핵산과 같은 항원의 에피토프를 특이적으로 인식하고 결합하는 적어도 경쇄 또는 중쇄 면역글로불린 가변 영역을 포함하는 폴리펩타이드인 결합제를 지칭한다.
"항원(antigen, Ag)"은 동물에 주사 또는 흡수되는 조성물(예컨대 암 특이적 단백질을 포함하는 것)을 포함하여, 동물에서 항체 또는 T 세포 반응의 생산을 자극할 수 있는 화합물, 조성물 또는 물질을 의미한다. 항원은 개시된 항원과 같은 이종 항원에 의해 유도된 것들을 포함하여, 특이적 체액성 또는 세포성 면역의 산물과 반응한다. 특정 구현예에서, 표적 항원은 BCMA 폴리펩타이드의 에피토프이다.
"에피토프(epitope)" 또는 "항원 결정기(antigenic determinant)"는 결합제가 결합하는 항원의 영역을 지칭한다. 에피토프는 단백질의 3차 폴딩에 의해 병치된 인접 아미노산 또는 비-인접 아미노산 둘 다로부터 형성될 수 있다. 인접 아미노산으로부터 형성된 에피토프는 전형적으로 변성 용매에 대한 노출 시 유지되는 반면, 3차 폴딩에 의해 형성된 에피토프는 전형적으로 변성 용매로의 처리 시 소실된다. 에피토프는 전형적으로 독특한 공간 입체형태에서 적어도 3개, 및 보다 통상적으로 적어도 5개, 약 9개, 또는 약 8 내지 10개의 아미노산을 포함한다.
항체는 이의 항원 결합 단편, 예컨대 Camel Ig, Ig NAR, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab)'2 단편, F(ab)'3 단편, Fv, 단일쇄 Fv 단백질("scFv"), 비스-scFv, (scFv)2, 미니바디, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 디설파이드 안정화된 Fv 단백질("dsFv"), 및 단일-도메인 항체(sdAb, Nanobody) 및 항원 결합을 담당하는 전장 항체의 부분을 포함한다. 상기 용어는 또한 유전적으로 조작된 형태, 예컨대 키메라 항체(예를 들어, 인간화 뮤린 항체), 이종접합 항체(예컨대 이중특이적 항체) 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 또한, 예를 들어, Pierce Catalog and Handbook, 1994-1995 (Pierce Chemical Co., Rockford, IL); Kuby, J., Immunology, 3rd Ed., W. H. Freeman & Co., New York, 1997 참조.
당업자에 의해 이해되고 본원의 다른 곳에 기재된 바와 같이, 완전한 항체는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함한다. 각각의 중쇄는 가변 영역 및 제1, 제2 및 제3 불변 영역으로 구성된 반면, 각각의 경쇄는 가변 영역 및 불변 영역으로 구성된다. 포유류 중쇄는 α, δ, ε, γ 및 μ로 분류된다. 포유류 경쇄는 λ 또는 κ로 분류된다. α, δ, ε, γ 및 μ 중쇄를 포함하는 면역글로불린은 면역글로불린 (Ig)A, IgD, IgE, IgG 및 IgM으로 분류된다 완전한 항체는 "Y" 형상을 형성한다. Y의 줄기는 함께 결합된 2개의 중쇄의 제2 및 제3 불변 영역 (및 IgE 및 IgM에 대해, 제4 불변 영역)으로 구성되고, 디설파이드 결합 (쇄간)은 힌지에 형성된다. 중쇄 γ, α 및 δ는 3개의 탠덤 (일렬로) Ig 도메인으로 구성된 불변 영역 및 부가된 가요성을 위한 힌지 영역을 갖고; 중쇄 μ 및 ε는 4개의 면역글로불린 도메인으로 구성된 불변 영역을 갖는다. 제2 및 제3 불변 영역은 각각 "CH2 도메인" 및 "CH3 도메인"으로 지칭된다. Y의 각각의 암(arm)은 단일 경쇄의 가변 및 불변 영역에 결합된 단일 중쇄의 가변 영역 및 제1 불변 영역을 포함한다. 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은 항원 결합을 담당한다.
경쇄 및 중쇄 가변 영역은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"이라고도 하는 3개의 초가변 영역이 개재된 "프레임워크" 영역을 함유한다. CDR은 통상적인 방법, 예컨대 Kabat et al (Wu, TT and Kabat, E. A., J Exp Med. 132(2):211-50, (1970); Borden, P. and Kabat E. A., PNAS, 84: 2440-2443 (1987); (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and Human Services, 1991 참조, 본원에 참조로 포함되어 있음)에 따른 서열에 의해, 또는 Chothia et al (Chothia, C. and Lesk, A.M., J Mol . Biol., 196(4): 901-917 (1987), Chothia, C. et al, Nature, 342: 877 - 883 (1989))에 따른 구조에 의해 정의되거나 확인될 수 있다.
상이한 경쇄 또는 중쇄의 프레임워크 영역의 서열은 인간과 같은 종 내에서 비교적 보존된다. 항체의 프레임워크 영역, 즉 구성하는 경쇄와 중쇄의 프레임워크 영역은 3차원 공간에서 CDR의 위치를 지정하고 정렬하는 역할을 한다. CDR은 주로 항원의 에피토프에의 결합을 담당한다. 각각의 쇄의 CDR은 전형적으로 N-말단으로부터 순차적으로 넘버링된 CDR1, CDR2, 및 CDR3으로 지칭되고, 또한 전형적으로 특정 CDR이 위치되는 쇄에 의해 확인된다. 따라서, 항체의 중쇄의 가변 도메인에 위치된 CDR은 CDRH1, CDRH2, 및 CDRH3으로 지칭되는 반면, 항체의 경쇄의 가변 도메인에 위치된 CDR은 CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3으로 지칭된다. 상이한 특이성을 갖는 항체 (즉, 상이한 항원에 대한 상이한 조합 부위)는 상이한 CDR을 갖는다. 항체마다 달라지는 CDR이지만, CDR 내의 제한된 수의 아미노산 위치만이 항원 결합에 직접 관여한다. CDR 내의 이들 위치는 특이성 결정 잔기 (SDR)로 불린다. 본원에서 고려되는 인간화 BCMA CAR을 구축하는 데 적합한 경쇄 CDR의 예시적인 예는 서열번호 1-3에 제시된 CDR 서열을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 본원에서 고려되는 인간화 BCMA CAR을 구축하는 데 적합한 중쇄 CDR의 예시적인 예는 서열번호 4-6에 제시된 CDR 서열을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
"VH" 또는 "VH"에 대한 언급은 본원에 개시된 바와 같은 항체, Fv, scFv, dsFv, Fab 또는 다른 항체 단편의 가변 영역을 포함하는 면역글로불린 중쇄의 가변 영역을 지칭한다. "VL" 또는 "VL"에 대한 언급은 본원에 개시된 바와 같은 항체, Fv, scFv, dsFv, Fab 또는 다른 항체 단편의 가변 영역을 포함하는 면역글로불린 경쇄의 가변 영역을 지칭한다.
"모노클로날 항체"는 B 림프구의 단일 클론에 의해 또는 단일 항체의 경쇄 및 중쇄 유전자가 형질감염된 세포에 의해 생산된 항체이다. 모노클로날 항체는 당업자에게 공지된 방법에 의해, 예를 들어 골수종 세포와 면역 비장 세포의 융합으로부터 하이브리드 항체-형성 세포를 제조함으로써 생산된다. 모노클로날 항체는 인간화 모노클로날 항체를 포함한다.
"키메라 항체"는 인간과 같은 한 종으로부터의 프레임워크 잔기, 및 마우스와 같은 또 다른 종으로부터의 CDR (일반적으로 항원 결합을 부여함)을 갖는다. 특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 키메라 항체 또는 그의 항원 결합 단편인 항원-특이적 결합 도메인을 포함한다.
"인간화" 항체는 인간 프레임워크 영역 및 비인간(예를 들어, 마우스, 래트 또는 합성) 면역글로불린으로부터의 하나 이상의 CDR을 포함하는 면역글로불린이다. 상기 CDR을 제공하는 비인간 면역글로불린은 "공여체(donor)"로 명명되고, 상기 프레임워크를 제공하는 인간 면역글로불린은 "수용체(acceptor)"로 명명된다.
특정 구현예에서, 뮤린 항-BCMA (예를 들어, 인간 BCMA) 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 낙타 Ig (camelid antibody (VHH)), Ig NAR, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab)'2 단편, F(ab)'3 단편, Fv, 단쇄 Fv 항체 ("scFv"), 비스-scFv, (scFv)2, 미니바디, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 디설파이드 안정화 Fv 단백질 ("dsFv"), 및 단일-도메인 항체 (sdAb, 나노바디)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "낙타 Ig(Camel Ig)" 또는 "camelid VHH"는 중쇄 항체의 가장 작은 공지된 항원-결합 단위를 지칭한다(Koch-Nolte, et al, FASEB J., 21: 3490-3498 (2007)). "중쇄 항체" 또는 "camelid 항체"는 2개의 VH 도메인 및 경쇄를 함유하지 않는 항체를 지칭한다(Riechmann L. et al, J. Immunol. Methods 231:25-38 (1999); WO94/04678; WO94/25591; 미국 특허 번호 6,005,079).
"면역글로불린 신규 항원 수용체"의 "IgNAR"은 하나의 가변성 신규 항원 수용체 (VNAR) 도메인 및 5개의 불변성 신규 항원 수용체 (CNAR) 도메인의 동종이량체로 구성된 샤크 면역 레퍼토리로부터의 항체의 부류를 지칭한다. IgNAR은 가장 작은 공지된 면역글로불린-기반 단백질 스캐폴드의 일부를 나타내고, 고도로 안정하고 효율적인 결합 특성을 보유한다. 고유 안정성은 (i) 뮤린 항체에서 발견되는 통상적인 항체 VH 및 VL 도메인에 비해 상당한 수의 하전 및 친수성 표면 노출 잔기를 제시하는 기저 Ig 스캐폴드; 및 (ii) 루프간 디설파이드 가교를 포함하는 상보성 결정 영역 (CDR) 루프, 및 루프내 수소 결합의 패턴 둘 다에 기인할 수 있다.
항체의 파파인 분해(papain digestion)는 “Fab” 단편이라 불리는 두 개의 동일한 항원 결합 단편을 단일 항원 결합 부위와 함께 생성하고, 나머지 “Fc” 단편은 그 이름이 쉽게 결정될 수 있는 능력을 반영한다. 펩신 처리는 두 개의 항원 결합 부위를 가지고 여전히 항원을 가교할 수 있는 F(ab’)2 단편을 생성한다.
"Fv"는 완전한 항원-결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 일 구현예에서, 2-쇄 Fv 종은 단단한 비-공유 회합에서 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄 가변 도메인의 이합체로 구성된다. 단일-쇄 Fv (scFv) 종에서, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄 가변 도메인은 유연한 펩타이드 링커에 의해 공유적으로 연결될 수 있어서, 경쇄 및 중쇄는 2-쇄 Fv 종에서 그것과 유사한 "이합체" 구조에서 회합할 수 있다. 이러한 구성에서 각 가변 도메인의 3개의 초가변 영역 (HVR)은 상호작용하여 VH-VL 이합체의 표면 상에 항원-결합 부위를 정의한다. 집합적으로, 6개의 HVR은 항체에 항원-결합 특이성을 부여한다. 그러나, 단일 가변 도메인 (또는 항원에 특이적인 단지 3개의 HVR을 포함하는 Fv의 절반)조차도 전체 결합 부위보다 낮은 친화도에서 비록 항원을 인식하고 이에 결합하는 능력을 갖는다.
Fab 단편은 중쇄 및 경쇄 가변 도메인을 함유하고, 또한 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 제1 불변 도메인 (CH1)을 함유한다. Fab' 단편은 항체 힌지 영역으로부터의 하나 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카르복시 말단에서의 소수의 잔기의 첨가에 의해 Fab 단편과 상이하다. Fab'-SH는 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)가 유리 티올 기를 보유하는 Fab'에 대한 본원에서의 명칭이다. F(ab')2 항체 단편은 본래 이들 사이에 힌지 시스테인을 갖는 Fab' 단편의 쌍으로서 생성되었다. 항체 단편의 다른 화학적 커플링이 또한 공지되어 있다.
용어 "디아바디"는 동일한 폴리펩타이드 쇄(VH-VL)에서 경쇄 가변 도메인(VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 항체 단편을 지칭한다. 동일한 쇄 상의 2개의 도메인 사이의 쌍형성을 허용하기에는 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 도메인은 또 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍형성되도록 강제되고 2개의 항원-결합 부위를 생성한다. 디아바디는 2가 또는 이중특이적일 수 있다. 디아바디는 예를 들어 EP 404,097; WO 1993/01161; Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003); 및 Hollinger et al., PNAS USA 90: 6444-6448 (1993)에 보다 완전히 기재되어 있다. 또한, 트리아바디 및 테트라바디는 Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)에 기재되어 있다.
"단일 도메인 항체" 또는 "sdAb" 또는 "나노바디"는 항체 중쇄의 가변 영역(VH 도메인) 또는 항체 경쇄의 가변 영역(VL 도메인)으로 구성된 항체 단편을 의미한다(Holt, L., et al, 2003, Trends in Biotechnology, 21(11): 484-490).
"단일쇄 Fv" 또는 "scFv" 항체 단편은 항체의 VH 및 VL 도메인을 포함하며, 이들 도메인은 단일 폴리펩타이드 쇄 및 배향 중 어느 하나(예를 들어, VL-VH 또는 VH-VL)로 존재한다. 일반적으로, scFv 폴리펩타이드는 scFv가 항원 결합에 바람직한 구조를 형성할 수 있게 하는 VH 및 VL 도메인 사이에 폴리펩타이드 링커를 추가로 포함한다. scFv의 검토를 위해, 예를 들어, Pluckth
Figure pct00008
n, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York, 1994), pp. 269-315.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 뮤린 scFv인 항원-특이적 결합 도메인을 포함한다. 단일 쇄 항체는 원하는 표적에 특이적인 하이브리도마의 V 영역 유전자를 형성하도록 클로닝될 수 있다. 이러한 하이브리도마의 생산은 일상적이 되었다. 가변 영역 중쇄 (VH) 및 가변 영역 경쇄 (VL)를 클로닝하기 위해 사용될 수 있는 기술은, 예를 들어 Orlandi et al., PNAS , 1989; 86: 3833-3837에 기재되어 있다.
특정 구현예에서, 항원-특이적 결합 도메인은 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 scFv이다. 본원에서 고려되는 BCMA CAR을 구축하는 데 적합한 가변 중쇄의 예시적인 예는 서열번호 8에 제시된 아미노산 서열을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 본원에서 고려되는 BCMA CAR을 구축하는 데 적합한 가변 경쇄의 예시적인 예는 서열번호 7에 제시된 아미노산 서열을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 제공된 BCMA-특이적 결합 도메인은 또한 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR을 포함한다. 이러한 CDR은 경쇄의 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3 및 중쇄의 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3으로부터 선택된 비인간 CDR 또는 변경된 비인간 CDR일 수 있다. 특정 구현예에서, BCMA-특이적 결합 도메인은 (a) 경쇄 CDRL1, 경쇄 CDRL2 및 경쇄 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 영역, 및 (b) 중쇄 CDRH1, 중쇄 CDRH2 및 중쇄 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 영역을 포함한다.
5.3.2. 링커
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 다양한 도메인 사이의 링커 잔기를 포함할 수 있고, 예를 들어 분자의 적절한 간격 및 입체형태를 위해 첨가된다. 특정 구현예에서, 링커는 가변 영역 연결 서열이다. "가변 영역 연결 서열"은 VH 및 VL 도메인을 연결하고 2개의 하위-결합 도메인의 상호작용과 상용성인 스페이서 기능을 제공하여 생성된 폴리펩타이드가 동일한 경쇄 및 중쇄 가변 영역을 포함하는 항체와 동일한 표적 분자에 대한 특이적 결합 친화도를 보유하도록 하는 아미노산 서열이다. 본원에서 고려되는 CAR은 1, 2, 3, 4, 또는 5개 또는 그 이상의 링커를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 링커의 길이는 약 1 내지 약 25개의 아미노산, 약 5 내지 약 20개의 아미노산, 또는 약 10 내지 약 20개의 아미노산, 또는 임의의 그 사이의 아미노산 길이이다. 일부 구현예에서, 링커는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 또는 그 이상의 아미노산 길이이다.
링커의 예시적인 예는 글리신 중합체 (G)n; 글리신-세린 중합체 (G1- 5S1 - 5)n(여기서, n은 적어도 1, 2, 3, 4, 또는 5의 정수임); 글리신-알라닌 중합체; 알라닌-세린 중합체; 및 관련 기술분야에 공지된 다른 가요성 링커를 포함한다. 글리신 및 글리신-세린 중합체는 비교적 비구조화되고, 따라서 융합 단백질의 도메인, 예컨대 본원에 기재된 CAR 사이의 중성 테더로서 작용할 수 있다. 글리신은 심지어 알라닌보다 유의하게 더 phi-psi 공간에 접근하고, 더 긴 측쇄를 갖는 잔기보다 훨씬 덜 제한된다(Scheraga, Rev. Computational Chem. 11173-142 (1992) 참조). 통상의 기술자는 특정 구현예에서 CAR의 설계가 모든 또는 부분적으로 가요성인 링커를 포함할 수 있어서, 링커가 가요성 링커 뿐만 아니라 원하는 CAR 구조를 제공하기 위해 덜 가요성인 구조를 부여하는 하나 이상의 부분을 포함할 수 있음을 인식할 것이다.
다른 예시적인 링커는 하기 아미노산 서열을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다: GGG; DGGGS (서열번호 12); TGEKP (서열번호 13) (예를 들어, Liu et al., PNAS 5525-5530 (1997) 참조); GGRR (서열번호 14) (Pomerantz et al. 1995, supra); (GGGGS)n, 여기서 상기 n = 1, 2, 3, 4 또는 5, 상기 GGGGS는 서열번호 15로 식별됨 (Kim et al., PNAS 93, 1156-1160 (1996.); EGKSSGSGSESKVD (서열번호 16) (Chaudhary et al., 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:1066-1070); KESGSVSSEQLAQFRSLD (서열번호 17) (Bird et al., 1988, Science 242:423-426), GGRRGGGS (서열번호 18); LRQRDGERP (서열번호 19); LRQKDGGGSERP (서열번호 20); LRQKd(GGGS)2 ERP (서열번호 21). 대안적으로, 가요성 링커는 DNA-결합 부위 및 펩타이드 그 자체 둘 다를 모델링할 수 있는 컴퓨터 프로그램 (Desjarlais & Berg, PNAS 90:2256-2260 (1993), PNAS 91:11099-11103 (1994)을 사용하여 또는 파지 디스플레이 방법에 의해 합리적으로 설계될 수 있다. 일 구현예에서, 링커는 하기 아미노산 서열을 포함한다: GSTSGSGKPGSGEGSTKG (서열번호 22) (Cooper et al., Blood, 101(4): 1637-1644 (2003)).
5.3.3. 스페이서 도메인
특정 구현예에서, CAR의 결합 도메인은 하나 이상의 "스페이서 도메인(spacer domains)"이 후속되며, 이는 항원 결합 도메인을 이펙터 세포 표면으로부터 멀리 이동시켜 적절한 세포/세포 접촉, 항원 결합 및 활성화를 가능하게 하는 영역을 지칭한다(Patel et al., Gene Therapy, 1999; 6: 412-419). 스페이서 도메인은 천연, 합성, 반합성 또는 재조합 공급원으로부터 유래될 수 있다. 특정 구현예에서, 스페이서 도메인은 하나 이상의 중쇄 불변 영역, 예를 들어 CH2 및 CH3을 포함하나 이에 제한되지는 않는 면역글로불린의 일부이다. 스페이서 도메인은 자연 발생 면역글로불린 힌지 영역 또는 변경된 면역글로불린 힌지 영역의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 스페이서 도메인은 IgG1 또는 IgG4의 CH2 및 CH3 도메인을 포함한다.
5.3.4. 힌지 도메인
CAR의 결합 도메인은 일반적으로 하나 이상의 "힌지 도메인(hinge domains)"이 후속되며, 이는 적절한 세포/세포 접촉, 항원 결합 및 활성화를 가능하게 하기 위해 항원 결합 도메인을 이펙터 세포 표면으로부터 멀리 위치시키는 역할을 한다. CAR은 일반적으로 결합 도메인과 막관통 도메인(TM) 사이에 하나 이상의 힌지 도메인을 포함한다. 힌지 도메인은 천연, 합성, 반합성 또는 재조합 공급원으로부터 유래될 수 있다. 힌지 도메인은 자연 발생 면역글로불린 힌지 영역 또는 변경된 면역글로불린 힌지 영역의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
"변경된 힌지 영역"은 (a) 최대 30% 아미노산 변화 (예를 들어, 최대 25%, 20%, 15%, 10%, 또는 5% 아미노산 치환 또는 결실)를 갖는 자연 발생 힌지 영역, (b) 최대 30% 아미노산 변화 (예를 들어, 최대 25%, 20%, 15%, 10%, 또는 5% 아미노산 치환 또는 결실)를 갖는 길이가 적어도 10개 아미노산 (예를 들어, 적어도 12, 13, 14 또는 15개 아미노산)인 자연 발생 힌지 영역의 일부, 또는 (c) 코어 힌지 영역 (이는 길이가 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15개, 또는 적어도 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15개 아미노산일 수 있음)을 포함하는 자연 발생 힌지 영역의 일부를 지칭한다. 특정 구현예에서, 자연 발생 면역글로불린 힌지 영역 내의 1개 이상의 시스테인 잔기는 1개 이상의 다른 아미노산 잔기 (예를 들어, 1개 이상의 세린 잔기)에 의해 치환될 수 있다. 변경된 면역글로불린 힌지 영역은 대안적으로 또는 추가로 또 다른 아미노산 잔기 (예를 들어, 세린 잔기)에 의해 치환된 야생형 면역글로불린 힌지 영역의 프롤린 잔기를 가질 수 있다.
본원에 기재된 CAR에서 사용하기에 적합한 다른 예시적인 힌지 도메인은 이러한 분자로부터의 야생형 힌지 영역일 수 있거나 또는 변경될 수 있는, CD8α, CD4, CD28 및 CD7과 같은 유형 1 막 단백질의 세포외 영역으로부터 유래된 힌지 영역을 포함한다. 다른 구현예에서, 힌지 도메인은 CD8α 힌지 영역을 포함한다.
5.3.5. 막관통 도메인
막관통 (TM) 도메인은 세포외 결합 부분 및 세포내 신호전달 도메인을 융합하고 CAR을 면역 이펙터 세포의 혈장 막에 고정시키는 CAR의 부분이다. TM 도메인은 천연, 합성, 반합성 또는 재조합 공급원으로부터 유래될 수 있다. TM 도메인은 T-세포 수용체, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD152, CD154 및 PD-1의 알파, 베타 또는 제타 사슬 (즉, 적어도 이의 막관통 영역(들)를 포함함)로부터 유래될 수 있다. 특정 구현예에서, TM 도메인은 합성이고 주로 소수성 잔기, 예컨대 류신 및 발린을 포함한다.
일 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 CD8α로부터 유래된 TM 도메인을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 CD8α로부터 유래된 TM 도메인 및 짧은 올리고- 또는 폴리펩타이드 링커, 바람직하게는 CAR의 TM 도메인 및 세포내 신호전달 도메인을 연결하는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개 내지 길이의 아미노산을 포함한다. 글리신-세린 기반 링커는 특히 적합한 링커를 제공한다.
5.3.6. 세포내 신호 전달 도메인
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 세포내 신호전달 도메인을 포함한다. "세포내 신호전달 도메인(intracellular signaling domain)"은 인간 BCMA 폴리펩타이드에 대한 효과적인 BCMA CAR 결합의 메시지를 면역 이펙터 세포의 내부로 전달하여 이펙터 세포 기능, 예를 들어, CAR-결합된 표적 세포에 대한 세포독성 인자의 방출을 포함하는 활성화, 사이토카인 생성, 증식 및 세포독성 활성, 또는 세포외 CAR 도메인에 대한 항원 결합으로 유도된 다른 세포 반응을 유도하는 데 참여하는 CAR의 부분을 지칭한다.
용어 "이펙터 기능(effector function)"은 면역 이펙터 세포의 특화된 기능을 지칭한다. T 세포의 이펙터 기능은, 예를 들어, 사이토카인의 분비를 포함하는 세포용해 활성 또는 헬퍼 활성일 수 있다. 따라서, 용어 "세포내 신호전달 도메인"은 이펙터 기능 신호를 형질도입하고 세포를 지시하여 특화된 기능을 수행하는 단백질의 부분을 지칭한다. 일반적으로 전체 세포내 신호전달 도메인이 사용될 수 있지만, 많은 경우에 전체 도메인을 사용할 필요는 없다. 세포내 신호전달 도메인의 절단된 부분이 사용되는 정도로, 이러한 절단된 부분은 이펙터 기능 신호를 형질도입하는 한 전체 도메인 대신에 사용될 수 있다. 용어 세포내 신호전달 도메인은 이펙터 기능 신호를 형질도입하기에 충분한 세포내 신호전달 도메인의 임의의 절단된 부분을 포함하는 것을 의미한다.
TCR만을 통해 생성된 신호는 T 세포의 완전한 활성화에 불충분하고, 2차 또는 공자극 신호가 또한 요구되는 것으로 알려져 있다. 따라서, T 세포 활성화는 2개의 구별되는 부류의 세포내 신호전달 도메인: TCR(예를 들어, TCR/CD3 복합체)을 통한 항원-의존성 1차 활성화를 개시하는 1차 신호전달 도메인 및 항원-비의존적 방식으로 작용하여 2차 또는 공자극 신호를 제공하는 공자극 신호전달 도메인에 의해 매개되는 것으로 언급될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 하나 이상의 "공자극 신호전달 도메인" 및 "1차 신호전달 도메인"을 포함하는 세포내 신호전달 도메인을 포함한다.
1차 신호전달 도메인은 자극 방식으로 또는 억제 방식으로 TCR 복합체의 1차 활성화를 조절한다. 자극 방식으로 작용하는 1차 신호전달 도메인은 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프 또는 ITAM으로 공지된 신호전달 모티프를 함유할 수 있다.
본원에 제시된 주제에서 특정 용도인 ITAM 함유 1차 신호전달 도메인의 예시적인 예는 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d로부터 유래된 것을 포함한다. 특정 구현예에서, CAR은 CD3ζ 1차 신호전달 도메인 및 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인을 포함한다. 세포내 1차 신호전달 및 공자극 신호전달 도메인은 막관통 도메인의 카르복실 말단에 나란히 임의의 순서로 연결될 수 있다.
본원에서 고려되는 CAR은 CAR 수용체를 발현하는 T 세포의 효능 및 증폭을 향상시키기 위해 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인을 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "공자극 신호전달 도메인(co-stimulatory signaling domain)" 또는 "공자극 도메인(co-stimulatory domain)"은 공자극 분자의 세포내 신호전달 도메인을 지칭한다. 공자극 분자는 항원으로의 결합시 T 림프구의 효율적인 활성화 및 기능에 필요한 제2 신호를 제공하는 항원 수용체 또는 Fc 수용체 이외의 세포 표면 분자이다. 이러한 공자극 분자의 예시적인 예는 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70을 포함한다. 일 구현예에서, CAR은 CD28, CD137, 및 CD134, 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인을 포함한다.
다른 구현예에서, CAR은 CD28 및 CD137 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
또 다른 구현예에서, CAR은 CD28 및 CD134 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 CD137 및 CD134 공자극 신호전달 도메인 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 B 세포 상에서 발현되는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 B 세포 상에서 발현되는 인간 BCMA에 특이적으로 결합하는 뮤린 항-BCMA 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d 유래 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 하나 이상의 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; IgG1 힌지/CH2/CH3, IgG4 힌지/CH2/CH3로 구성된 군에서 선택되는 힌지 도메인; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d 유래 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; IgG1 힌지/CH2/CH3, IgG4 힌지/CH2/CH3로 구성된 군에서 선택되는 힌지 도메인; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 하나 이상의 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; IgG1 힌지/CH2/CH3, IgG4 힌지/CH2/CH3로 구성된 군에서 선택되는 힌지 도메인; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; TM 도메인을 CAR의 세포내 신호전달 도메인에 연결하는 바람직하게는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 사이의 아미노산 길이의 짧은 올리고- 또는 폴리펩타이드 링커; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d 유래 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; IgG1 힌지/CH2/CH3, IgG4 힌지/CH2/CH3로 구성된 군에서 선택되는 힌지 도메인; T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 사슬, CD3ε, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD 16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD 134, CD137, CD152, CD 154, 및 PD1로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 막관통 도메인; TM 도메인을 CAR의 세포내 신호전달 도메인에 연결하는 바람직하게는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 사이의 아미노산 길이의 짧은 올리고- 또는 폴리펩타이드 링커; 및 CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM, 및 ZAP70로 구성된 군에서 선택되는 공자극 분자로부터 유래된 하나 이상의 공자극 신호전달 도메인; 및 TCRζ, FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b, 및 CD66d로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩타이드로부터 유래된 하나 이상의 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; IgG1 힌지/CH2/CH3 폴리펩타이드 및 CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인; 약 3 내지 약 10개 아미노산의 폴리펩타이드 링커를 포함하는 CD8α 막관통 도메인; CD137 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인; 약 3 내지 약 10개 아미노산의 폴리펩타이드 링커를 포함하는 CD8α 막관통 도메인, CD134 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인; 약 3 내지 약 10개 아미노산의 폴리펩타이드 링커를 포함하는 CD8α 막관통 도메인, CD28 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
특정 구현예에서, CAR은 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA scFv; CD8α 폴리펩타이드를 포함하는 힌지 도메인; CD8α 막관통 도메인; CD137(4-1BB) 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 CD3ζ 1차 신호전달 도메인을 포함한다.
또한, 본원에서 고려되는 CAR의 설계는 비변형된 T 세포 또는 다른 CAR를 발현하도록 변형된 T 세포에 비해 CAR를 발현하는 T 세포에서 개선된 증폭, 장기 지속성, 및 용인가능한 세포독성 특성을 가능하게 한다.
5.4. 폴리펩타이드
본 개시내용은 부분적으로 CAR 폴리펩타이드 및 그의 단편, 이를 포함하는 세포 및 조성물, 및 폴리펩타이드를 발현하는 벡터를 고려한다. 특정 구현예에서, 서열번호 9에 제시된 바와 같은 하나 이상의 CAR를 포함하는 폴리펩타이드가 제공된다.
"폴리펩타이드", "폴리펩타이드 단편", "펩타이드" 및 "단백질"은, 반대로 명시되지 않는 한, 그리고 통상적인 의미에 따라, 즉, 아미노산의 서열로서 상호교환적으로 사용된다. 폴리펩타이드는 특정 길이에 제한되지 않으며, 예를 들면, 이들은 전장 단백질 서열 또는 전장 단백질의 단편을 포함할 수 있고, 폴리펩타이드의 번역후 변형, 예를 들면, 글리코실화, 아세틸화, 인산화 등, 뿐만 아니라 자연 발생 및 비-자연 발생 둘 다에서 공지된 다른 변형을 포함할 수 있다. 다양한 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드는 단백질의 N-말단에서 신호 (또는 리더) 서열을 포함하고, 이는 단백질의 동시-번역적으로 또는 번역후-번역적으로 전달을 지시한다. 본원에서 개시되는 CAR에서 유용한 적합한 신호 서열의 예시적인 예는 IgG1 중쇄 신호 서열 및 CD8α 신호 서열을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 폴리펩타이드는 임의의 다양한 널리 공지된 재조합 및/또는 합성 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 본원에서 고려되는 폴리펩타이드는 구체적으로 본 개시내용의 CAR, 또는 본원에 개시된 바와 같은 CAR의 하나 이상의 아미노산으로부터 결실, 이에 부가 및/또는 이의 치환을 갖는 서열을 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "단리된 펩타이드" 또는 "단리된 폴리펩타이드" 등은 세포 환경으로부터, 및 세포의 다른 성분과의 회합으로부터 펩타이드 또는 폴리펩타이드 분자의 시험관내 단리 및/또는 정제를 지칭하며, 즉 이는 생체내 물질과 유의하게 회합되지 않는다. 유사하게, "단리된 세포"는 생체내 조직 또는 기관으로부터 수득되고 세포외 매트릭스가 실질적으로 없는 세포를 지칭한다.
폴리펩타이드는 "폴리펩타이드 변이체"를 포함한다. 폴리펩타이드 변이체는 하나 이상의 치환, 결실, 부가 및/또는 삽입에서 자연적으로 발생하는 폴리펩타이드와 다를 수 있다. 이러한 변이체는 자연적으로 발생할 수 있거나, 예를 들어 상기 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 변형시킴으로써 합성적으로 생성될 수 있다. 예를 들어, 특정 구현예에서, CAR 폴리펩타이드의 결합 도메인, 힌지, TM 도메인, 공자극 신호전달 도메인 또는 1차 신호전달 도메인에 하나 이상의 치환, 결실, 부가 및/또는 삽입을 도입함으로써 CAR의 결합 친화도 및/또는 다른 생물학적 특성을 개선시키는 것이 바람직할 수 있다. 특정 구현예에서, 이러한 폴리펩타이드는 그와 적어도 약 65%, 70%, 75%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 아미노산 동일성을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다.
폴리펩타이드는 "폴리펩타이드 단편"을 포함한다. 폴리펩타이드 단편은 아미노-말단 결실, 카르복실-말단 결실, 및/또는 자연-발생 또는 재조합-생산된 폴리펩타이드의 내부 결실 또는 치환을 갖는 단량체 또는 다량체일 수 있는 폴리펩타이드를 지칭한다. 특정 구현예에서, 폴리펩타이드 단편은 적어도 5 내지 약 500개 아미노산 길이의 아미노산 사슬을 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 단편은 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 또는 450개 아미노산 길이인 것으로 이해될 것이다. 특히 유용한 폴리펩타이드 단편은 항체의 항원-결합 도메인 또는 단편을 포함하는 기능적 도메인을 포함한다. 뮤린 항-BCMA (예를 들어, 인간 BCMA) 항체의 경우에, 유용한 단편은 CDR 영역, 중쇄 또는 경쇄의 CDR3 영역; 중쇄 또는 경쇄의 가변 영역; 2개의 CDR을 포함하는 항체 쇄 또는 가변 영역의 일부; 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
폴리펩타이드는 또한 상기 폴리펩타이드의 합성, 정제 또는 확인을 용이하게 하기 위해 인-프레임(in-frame) 융합되거나 링커 또는 다른 서열에 접합될 수 있거나, 고체 지지체에 대한 상기 폴리펩타이드의 결합을 향상시킬 수 있다.
상기 언급된 바와 같이, 본 개시내용의 폴리펩타이드는 아미노산 치환, 결실, 절단 및 삽입을 포함하는 다양한 방식으로 변경될 수 있다. 이러한 조작을 위한 방법은 일반적으로 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 참조 폴리펩타이드의 아미노산 서열 변이체는 DNA에서의 돌연변이에 의해 제조될 수 있다. 돌연변이유발 및 뉴클레오타이드 서열 변경을 위한 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, Kunkel (1985, Proc . Natl . Acad . Sci . USA. 82: 488-492), Kunkel et al., (1987, Methods in Enzymol, 154: 367-382), 미국 특허 번호 4,873,192, Watson, J. D. et al., (Molecular Biology of the Gene, Fourth Edition, Benjamin/Cummings, Menlo Park, Calif., 1987) 및 본원에 인용된 참고문헌을 참조한다. 목적 단백질의 생물학적 활성에 영향을 주지 않는 적절한 아미노산 치환에 대한 지침은 Dayhoff et al., (1978) Atlas of Protein Sequence and Structure (Natl. Biomed. Res. Found., Washington, D.C.)의 모델에서 발견될 수 있다.
특정 구현예에서, 변이체는 보존적 치환을 함유할 것이다. "보존적 치환(conservative substitution)"은 아미노산이 유사한 특성을 갖는 또 다른 아미노산으로 치환된 것이어서, 펩타이드 화학 분야의 통상의 기술자는 폴리펩타이드의 2차 구조 및 소수성 성질이 실질적으로 변하지 않을 것으로 예상할 것이다. 변형은 본 개시내용의 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드의 구조에서 이루어질 수 있고, 여전히 바람직한 특성을 갖는 변이체 또는 유도체 폴리펩타이드를 코딩하는 기능적 분자를 수득할 수 있다. 폴리펩타이드의 아미노산 서열을 변경시켜 등가물, 또는 심지어 개선된 변이체 폴리펩타이드를 생성하는 것이 바람직할 때, 예를 들어 통상의 기술자는, 예를 들어 표 2에 따라, 코딩 DNA 서열의 코돈 중 하나 이상을 변화시킬 수 있다.
[표 2] 아미노산 코돈
Figure pct00009
생물학적 활성을 상실하지 않으면서 어느 아미노산 잔기가 치환, 삽입 또는 결실될 수 있는지를 결정하는 데 있어서의 지침은 당업계에 널리 공지된 컴퓨터 프로그램, 예컨대 DNASTARTM 소프트웨어를 사용하여 찾을 수 있다. 바람직하게는, 본원에 개시된 단백질 변이체에서의 아미노산 변화는 보존적 아미노산 변화, 즉 유사하게 하전된 또는 비하전된 아미노산의 치환이다. 보존적 아미노산 변화는 그의 측쇄에 관련된 아미노산 패밀리 중 하나의 치환을 수반한다. 자연 발생 아미노산은 일반적으로 4개의 패밀리로 나뉜다: 산성 (아스파테이트, 글루타메이트), 염기성 (리신, 아르기닌, 히스티딘), 비극성 (알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 및 비하전된 극성 (글리신, 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신) 아미노산. 페닐알라닌, 트립토판, 및 티로신은 때때로 방향족 아미노산으로서 공동으로 분류된다. 펩타이드 또는 단백질에서, 아미노산의 적합한 보존적 치환은 당업자에게 공지되어 있고, 일반적으로 생성된 분자의 생물학적 활성을 변경하지 않으면서 제조될 수 있다. 당업자는 일반적으로, 폴리펩타이드의 비필수 영역에서의 단일 아미노산 치환이 생물학적 활성을 실질적으로 변경하지 않는다는 것을 인식한다(예를 들어, Watson et al. Molecular Biology of the Gene, 4th Edition, 1987, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p.224 참조). 예시적인 보존적 치환은 미국 가출원 제61/241,647호(이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
이러한 변경을 수행할 때 아미노산의 소수성 지수를 고려할 수 있다. 단백질에 상호작용적 생물학적 기능을 부여하는 데 있어서 소수성 아미노산 지수의 중요성은 일반적으로 당업계에서 이해된다(Kyte and Doolittle, 1982, 본원에 참조로 포함됨). 각각의 아미노산은 이의 소수성 및 전하 특성에 기초하여 소수성 지수를 부여하였다 (Kyte and Doolittle, 1982). 이들 값은: 이소류신 (+4.5); 발린 (+4.2); 류신 (+3.8); 페닐알라닌 (+2.8); 시스테인/시스테인 (+2.5); 메티오닌 (+1.9); 알라닌 (+1.8); 글리신 (-0.4); 트레오닌 (-0.7); 세린 (-0.8); 트립토판 (-0.9); 티로신 (-1.3); 프롤린 (-1.6); 히스티딘 (-3.2); 글루타메이트 (-3.5); 글루타민 (-3.5); 아스파테이트 (-3.5); 아스파라긴 (-3.5); 리신 (-3.9); 및 아르기닌 (-4.5).
특정 아미노산은 유사한 생리학적 지수 또는 점수를 갖는 다른 아미노산에 의해 치환될 수 있고, 여전히 유사한 생물학적 활성을 갖는 단백질을 생성할 수 있고, 즉 여전히 생물학적 기능적으로 동등한 단백질을 수득할 수 있음이 당업계에 공지되어 있다. 이러한 변화를 제조함에 있어서, 생리학적 지수가 2 이내인 아미노산의 치환이 바람직하고, 1 이내가 특히 바람직하고, 0.5 이내가 보다 더 특히 바람직하다. 또한, 유사 아미노산의 치환은 친수성에 기초하여 효과적으로 이루어질 수 있음이 당업계에서 이해된다.
미국 특허 제4,554,101호에 상세히 기재된 바와 같이, 하기 친수성 값은 아미노산 잔기에 배정되었다: 아르기닌 (+3.0); 리신 (+3.0); 아스파테이트 (+3.0 ± 1); 글루타메이트 (+3.0 ± 1); 세린 (+0.3); 아스파라긴 (+0.2); 글루타민 (+0.2); 글리신 (0); 트레오닌 (-0.4); 프롤린 (-0.5 ± 1); 알라닌 (-0.5); 히스티딘 (-0.5); 시스테인 (-1.0); 메티오닌 (-1.3); 발린 (-1.5); 류신 (-1.8); 이소류신 (-1.8); 티로신 (-2.3); 페닐알라닌 (-2.5); 트립토판 (-3.4). 아미노산은 유사한 친수성 값을 갖는 또 다른 것에 대해 치환될 수 있고, 여전히 생물학적 등가물, 및 특히 면역학적으로 등가인 단백질을 수득할 수 있는 것으로 이해된다. 이러한 변화에서, 친수성 값이 2 이내인 아미노산의 치환이 바람직하고, 1 이내인 것이 특히 바람직하고, 0.5 이내인 것이 보다 더 특히 바람직하다.
상술한 바와 같이, 아미노산 치환은 아미노산 측쇄 치환기의 상대적 유사성, 예를 들어 소수성, 친수성, 전하, 크기 등을 기초로 할 수 있다.
폴리펩타이드 변이체는 글리코실화된 형태, 다른 분자와의 응집성 접합체, 및 관련되지 않은 화학적 모이어티 (예를 들어, 페길화된 분자)와의 공유 접합체를 추가로 포함한다. 다가 변이체는 당업계에 공지된 바와 같이, 아미노산 쇄에서 또는 N- 또는 C-말단 잔기에서 발견되는 기에 작용기를 연결함으로써 제조될 수 있다. 변이체는 또한 대립유전자 변이체, 종 변이체, 및 뮤테인을 포함한다. 단백질의 기능적 활성에 영향을 주지 않는 영역의 절단 또는 결실은 또한 변이체이다.
일 구현예에서, 2개 이상의 폴리펩타이드의 발현이 요구되는 경우, 이들을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열은 본원의 다른 곳에서 논의된 바와 같이 IRES 서열에 의해 분리될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 2개 이상의 폴리펩타이드는 하나 이상의 자기-절단(self-cleaving) 폴리펩타이드 서열을 포함하는 융합 단백질로서 발현될 수 있다.
본원에 개시된 폴리펩타이드는 융합 폴리펩타이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 융합 폴리펩타이드 및 융합 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드, 예를 들어 CAR가 제공된다. 융합 폴리펩타이드 및 융합 단백질은 적어도 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 또는 10개 이상의 폴리펩타이드 세그먼트를 갖는 폴리펩타이드를 지칭한다. 융합 폴리펩타이드는 전형적으로 C-말단에 연결되지만, 융합 폴리펩타이드는 또한 C-말단에, N-말단에, 또는 N-말단에 연결될 수 있다. 융합 단백질의 폴리펩타이드는 임의의 순서 또는 특정 순서로 존재할 수 있다. 융합 폴리펩타이드 또는 융합 단백질은 또한 융합 폴리펩타이드의 원하는 전사 활성이 보존되는 한, 보존적으로 변형된 변이체, 다형성 변이체, 대립유전자, 돌연변이체, 하위서열, 및 종간 상동체를 포함할 수 있다. 융합 폴리펩타이드는 화학적 합성 방법에 의해 또는 2개의 모이어티 사이의 화학적 연결에 의해 생성될 수 있거나, 일반적으로 다른 표준 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 융합 폴리펩타이드를 포함하는 라이게이션된 DNA 서열은 본원의 다른 곳에 논의된 바와 같은 적합한 전사 또는 번역 제어 요소에 작동가능하게 연결된다.
일 구현예에서, 융합 파트너는 천연 재조합 단백질보다 더 높은 수율로 단백질을 발현하는데 도움이 되는 서열을 포함한다. 다른 융합 파트너는 단백질의 용해도를 증가시키거나 단백질을 원하는 세포내 구획에 표적화하거나 세포막을 통한 융합 단백질의 수송을 용이하게 하도록 선택될 수 있다.
융합 폴리펩타이드는 본원에 기재된 각각의 폴리펩타이드 도메인 사이에 폴리펩타이드 절단 신호를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 폴리펩타이드 부위는 임의의 링커 펩타이드 서열 내로 도입될 수 있다. 예시적인 폴리펩타이드 절단 신호는 폴리펩타이드 절단 인식 부위, 예컨대 프로테아제 절단 부위, 뉴클레아제 절단 부위 (예를 들어, 희귀 제한 효소 인식 부위, 자가-절단 리보자임 인식 부위), 및 자가-절단 바이러스 올리고펩타이드를 포함한다(deFelipe and Ryan, 2004. Traffic, 5(8); 616-26 참조). 적합한 프로테아제 절단 부위 및 자가-절단 펩타이드는 당업자에게 공지되어 있다(예를 들어, Ryan et al., 1997. J. Gener . Virol . 78, 699-722; Scymczak et al. (2004) Nature Biotech. 5, 589-594 참조).
예시적인 프로테아제 절단 부위는 포티바이러스 NIa 프로테아제 (예를 들어, 담배 식각 바이러스 프로테아제)의 절단 부위, 포티바이러스 HC 프로테아제, 포티바이러스 P1 (P35) 프로테아제, 비요바 이러스(byovirus) NIa 프로테아제, 비요바이러스 RNA-2-암호화된 프로테아제, 앱토바이러스(aphthovirus) L 프로테아제, 엔테로바이러스 2A 프로테아제, 리노바이러스 2A 프로테아제, 피코르나 3C 프로테아제, 코모바이러스 24K 프로테아제, 네포바이러스(nepovirus) 24K 프로테아제, RTSV(벼 해충 구상 바이러스(rice tungro sphericalvirus)) 3C-형 프로테아제, PYVF(파스닙 황색 얼룩 바이러스) 3C-형 프로테아제, 헤파린, 트롬빈, 인자 Xa 및 엔테로키나제를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 일 구현예에서 TEV(담배 식각 바이러스) 프로테아제 절단 부위, 예를 들어, EXXYXQ(G/S)(서열번호 23), 예를 들어, ENLYFQG(서열번호 24) 및 ENLYFQS(서열번호 25)(여기서 X는 임의의 아미노산을 나타냄)(Q와 G 또는 Q와 S 사이에 TEV에 의한 절단이 발생함)가 이의 높은 절단 엄격성으로 인해 바람직하다.
특정 구현예에서, 자가-절단 펩타이드는 포티바이러스 및 카디오바이러스 2A 펩타이드, FMDV(구제역 바이러스), 말 A형 비염 바이러스, 해충 고착(Thosea asigna) 바이러스 및 돼지 테스코바이러스로부터 수득된 폴리펩타이드 서열을 포함한다.
특정 구현예에서, 자가-절단 폴리펩타이드 부위는 2A 또는 2A-유사 부위, 서열 또는 도메인을 포함한다(Donnelly et al., 2001. J. Gen. Virol. 82:1027-1041).
표 3: 예시적인 2A 부위는 하기 서열을 포함한다:
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특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 폴리펩타이드는 CAR 폴리펩타이드를 포함한다.
5.5. 폴리뉴클레오타이드
특정 구현예에서, 하나 이상의 CAR 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드, 예를 들어 서열번호 10이 제공된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "폴리뉴클레오타이드" 또는 "핵산"은 메신저 RNA(mRNA), RNA, 게놈 RNA(gRNA), 플러스 가닥 RNA(RNA(+)), 마이너스 가닥 RNA(RNA(-)), 게놈 DNA(gDNA), 상보성 DNA(cDNA) 또는 재조합 DNA를 지칭한다. 폴리뉴클레오타이드는 단일 및 이중 가닥 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 본원에(예를 들어 서열 목록을 참고)기술된 참조 서열 중 임의의 것에 대해 적어도 약 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는 폴리뉴클레오타이드 또는 변이체를 포함하며, 전형적으로 여기서 변이체는 참조 서열의 적어도 하나의 생물 활성을 유지한다. 다양한 예시적인 실시예에서, 본 발명은 부분적으로, 발현 벡터, 바이러스 벡터, 및 전달 플라스미드, 및 조성물을 포함하는 폴리뉴클레오타이드, 및 이를 포함하는 세포를 고려한다.
특정 구현예에 있어서, 상기 폴리뉴클레오타이드는 폴리펩타이드의 적어도 약 5, 10, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 500, 1000, 1250, 1500, 1750, 또는 2000개 이상의 연속된 아미노산 잔기 뿐만 아니라 모든 중간 길이를 코딩하는 것을 특징으로 한다. 본 명세서에서 "중간 길이"는 6, 7, 8, 9, 등, 101, 102, 103, 등; 151, 152, 153, 등; 201, 202, 203, 등과 같은 인용된 값 사이의 임의의 길이를 의미한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "폴리뉴클레오타이드 변이체" 및 "변이체" 등은 하기에 정의된 엄격한 조건 하에서 참조 폴리뉴클레오타이드 서열과 혼성화하는 폴리뉴클레오타이드 또는 참조 폴리뉴클레오타이드 서열과 실질적인 서열 동일성을 나타내는 폴리뉴클레오타이드를 지칭한다. 이들 용어는 하나 이상의 뉴클레오타이드가 참조 폴리뉴클레오타이드에 비해 부가되거나 결실되거나, 상이한 뉴클레오타이드로 대체된 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 이와 관련하여, 돌연변이, 부가, 결실 및 치환을 포함하는 특정 변경이 참조 폴리뉴클레오타이드에 대해 이루어질 수 있고, 이에 의해 변경된 폴리뉴클레오타이드는 참조 폴리뉴클레오타이드의 생물학적 기능 또는 활성을 보유하는 것으로 당업계에서 잘 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, "서열 동일성" 또는 예를 들어, "서열과 50% 동일한"을 포함하는 언급은 서열이 뉴클레오타이드 단위 또는 아미노산 단위의 비교 윈도우에 걸쳐 동일한 정도를 지칭한다. 따라서, "서열 동일성의 백분율"은 비교 윈도우에 걸쳐 2개의 최적으로 정렬된 서열을 비교하고, 동일한 핵산 염기 (예를 들어, A, T, C, G, I) 또는 동일한 아미노산 잔기 (예를 들어, Ala, Pro, Ser, Thr, Gly, Val, Leu, Ile, Phe, Tyr, Trp, Lys, Arg, His, Asp, Glu, Asn, Gln, Cys 및 Met)가 둘 모두의 서열에서 발생하여 매칭된 위치의 수를 산출하고, 매칭된 위치의 수를 비교 윈도우 내의 위치의 총 수로 나누고 (즉, 윈도우 크기), 결과에 100을 곱하여 서열 동일성의 백분율을 산출함으로써 계산될 수 있다. 전형적으로 폴리펩타이드 변이체가 참조 폴리펩타이드의 적어도 하나의 생물학적 활성을 유지하는 본원에 기재된 참조 서열 중 임의의 것에 대해 적어도 약 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는 뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드가 포함된다.
2개 이상의 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드 사이의 서열 관계를 기술하기 위해 사용되는 용어는 "참조 서열", "비교 윈도우", "서열 동일성", "서열 동일성의 백분율" 및 "실질적 동일성"을 포함한다. "참조 서열"은 길이가 뉴클레오타이드 및 아미노산 잔기를 포함하여, 적어도 12개이지만 종종 15 내지 18개이며 종종 적어도 25개의 단량체 단위이다. 2개의 폴리뉴클레오타이드는 각각 (1) 2개의 폴리뉴클레오타이드 사이에서 유사한 서열 (즉, 완전한 폴리뉴클레오타이드 서열의 일부만), 및 (2) 2개의 폴리뉴클레오타이드 사이에서 분기되는 서열을 포함할 수 있기 때문에, 2개의 (또는 그 이상의) 폴리뉴클레오타이드 사이의 서열 비교는 전형적으로 서열 유사성의 국소 영역을 확인하고 비교하기 위해 "비교 윈도우" 상에서 2개의 폴리뉴클레오타이드의 서열을 비교함으로써 수행된다. "비교 윈도우"는 2개의 서열이 최적으로 정렬된 후 동일한 수의 인접 위치의 참조 서열과 비교되는 적어도 6개의 인접 위치, 통상적으로 약 50 내지 약 100, 보다 통상적으로 약 100 내지 약 150의 개념적 분절을 지칭한다. 비교 윈도우는 2개의 서열의 최적 정렬을 위한 (부가 또는 결실을 포함하지 않는) 참조 서열과 비교하여 약 20% 이하의 부가 또는 결실 (즉, 갭)을 포함할 수 있다. 비교 윈도우를 정렬하기 위한 서열의 최적 정렬은 컴퓨터화된 알고리즘의 실행(Wisconsin Genetics Software Package Release 7.0, Genetics Computer Group, 575 Science Drive Madison, WI, USA에서의 GAP, BESTFIT, FASTA 및 TFASTA)에 의해, 또는 선택된 임의의 다양한 방법에 의해 생성된 검사 및 최상의 정렬(즉, 비교 윈도우 상에서의 최고 백분율 상동성을 야기함)에 의해 수행될 수 있다. 또한, 예를 들어 Altschul et al., 1997, Nucl . Acids Res. 25:3389에 개시된 바와 같은 프로그램의 BLAST 패밀리에 대한 참조가 이루어질 수 있다. 서열 분석의 상세한 논의는 Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc, 1994-1998의 Unit 19.3, Chapter 15에서 발견될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "단리된 폴리뉴클레오타이드"는 자연 발생 상태에 인접하는 서열로부터 정제된 폴리뉴클레오타이드, 예를 들면, 단편에 정상적으로 인접한 서열로부터 제거된 DNA 단편을 지칭한다. "단리된 폴리뉴클레오타이드"는 또한 상보성 DNA (cDNA), 재조합 DNA, 또는 자연에 존재하지 않고 사람의 손에 의해 만들어진 다른 폴리뉴클레오타이드를 지칭한다.
폴리뉴클레오타이드의 배향을 기술하는 용어는 5' (보통 유리 포스페이트 기를 갖는 폴리뉴클레오타이드의 말단) 및 3' (보통 유리 히드록실 (OH) 기를 갖는 폴리뉴클레오타이드의 말단)를 포함한다. 폴리뉴클레오타이드 서열은 5' 내지 3' 배향 또는 3' 내지 5' 배향으로 주석을 달 수 있다. DNA 및 mRNA의 경우, 5'에서 3' 가닥은 이의 서열이 프리메신저(premRNA)[RNA에서 우라실(U) 제외, DNA에서 티민(T) 대신]의 서열에 일치하기 때문에 "센스", "플러스", 또는 "암호화" 가닥으로 표시된다. DNA 및 mRNA의 경우, RNA 폴리머라제에 의해 전사되는 가닥인 상보성 3'에서 5' 가닥은 "주형", "안티센스", "마이너스" 또는 "비-암호화" 가닥으로서 지정된다. 본원에 사용된 용어 "역 배향"은 3' 내지 5' 배향으로 기록된 5' 내지 3' 서열 또는 5' 내지 3' 배향으로 기록된 3' 내지 5' 서열을 지칭한다.
용어 "상보적" 및 "상보성"은 염기쌍 규칙에 의해 관련된 폴리뉴클레오타이드(즉, 뉴클레오타이드의 서열)를 지칭한다. 예를 들면, DNA 서열 5' A G T C A T G 3'은 3' T C A G T A C 5'이다. 후자의 서열은 종종 5' 말단이 좌측에 있고 3' 말단이 우측에 있는 역방향 상보체, 5' C A T G A T C 3'로서 기록된다. 이의 역방향 상보체와 동일한 서열은 회문(palindromic) 서열이라고 한다. 상보성은 "부분적"일 수 있고, 핵산의 염기의 일부만이 염기쌍 규칙에 따라 매칭된다. 또는, 핵산 사이에 "완전한" 또는 "전체" 상보성이 있을 수 있다.
더욱이, 유전자 코드의 축퇴성의 결과로서, 본원에 기재된 바와 같은 폴리펩타이드, 또는 이의 변이체의 단편을 코딩하는 많은 뉴클레오타이드 서열이 존재한다는 것이 당업자에 의해 인식될 것이다. 이들 폴리뉴클레오타이드 중 일부는 임의의 천연 유전자의 뉴클레오타이드 서열과 최소의 상동성을 갖는다. 그럼에도 불구하고, 코돈 사용의 차이로 인해 변하는 폴리뉴클레오타이드는 본 개시내용에 의해 구체적으로 고려되며, 예를 들어 인간 및/또는 영장류 코돈 선택을 위해 최적화된 폴리뉴클레오타이드다. 추가로, 본원에 제공된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 유전자의 대립유전자가 또한 사용될 수 있다. 대립유전자는 하나 이상의 돌연변이, 예컨대 뉴클레오타이드의 결실, 부가 및/또는 치환의 결과로서 변경된 내인성 유전자이다.
본원에 사용된 용어 "핵산 카세트"는 RNA를 발현할 수 있는 벡터 및 이어서 단백질을 코딩하는 벡터 내의 유전자 서열을 지칭한다. 핵산 카세트는 목적 유전자, 예를 들어 CAR를 함유한다. 핵산 카세트는, 카세트 내의 핵산이 RNA로 전사될 수 있고, 필요한 경우에 단백질 또는 폴리펩타이드로 번역될 수 있고, 형질전환된 세포에서 활성에 필요한 적절한 번역후 변형을 겪고, 적절한 세포내 구획 또는 세포외 구획으로의 분비를 표적화함으로써 생물학적 활성에 대해 적절한 구획으로 전위될 수 있도록 벡터 내에 위치 및 순차적으로 배향된다. 바람직하게는, 카세트는 벡터 내로의 용이한 삽입에 적합한 그의 3' 및 5' 말단을 갖고, 예를 들어 각각의 말단에 제한 엔도뉴클레아제 부위를 갖는다. 일 구현예에서, 핵산 카세트는 B 세포 악성종양을 치료하는데 사용되는 키메라 항원 수용체의 서열을 함유한다. 카세트는 제거될 수 있고, 단일 단위로서 플라스미드 또는 바이러스 벡터 내로 삽입될 수 있다.
특정 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 적어도 하나의 관심 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "목적 폴리뉴클레오타이드(polynucleotide-of-interest)"는 발현시키고자 하는 발현 벡터 내로 삽입된 폴리펩타이드 (즉, 목적 폴리펩타이드(polypeptide-of-interest))를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 지칭한다. 벡터는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개의 목적 폴리뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 목적 폴리뉴클레오타이드는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에서 치료 효과를 제공하는 폴리펩타이드를 코딩한다. 목적 폴리뉴클레오타이드, 및 그로부터 코딩된 폴리펩타이드는 둘 다 야생형 폴리펩타이드, 뿐만 아니라 그의 기능적 변이체 및 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 기능적 변이체는 상응하는 야생형 참조 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드 서열과 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 또는 적어도 99% 동일성을 갖는다. 특정 구현예에서, 기능적 변이체 또는 단편은 상응하는 야생형 폴리펩타이드의 생물학적 활성의 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 적어도 90%를 갖는다.
일 구현예에서, 목적 폴리뉴클레오타이드는 폴리펩타이드를 코딩하지 않으나, miRNA, siRNA, shRNA, 리보자임, 또는 다른 억제성 RNA를 전사하는 주형의 역할을 한다. 다양한 다른 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 CAR을 코딩하는 목적 폴리뉴클레오타이드 및 siRNA, miRNA, shRNA, 및 리보자임을 포함하는 억제성 핵산 서열을 포함하나 이에 제한되지 않는 하나 이상의 추가의 목적 폴리뉴클레오타이드를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "siRNA" 또는 "짧은 간섭 RNA"는 동물에서 서열-특이적 전사후 유전자 침묵화, 번역 억제, 전사 억제, 또는 후성적 RNAi의 과정을 매개하는 짧은 폴리뉴클레오타이드 서열을 지칭한다(Zamore et al., 2000, Cell, 101, 25-33; Fire et al., 1998, Nature, 391, 806; Hamilton et al., 1999, Science, 286, 950-951; Lin et al., 1999, Nature, 402, 128-129; Sharp, 1999, Genes & Dev., 13, 139-141; 및 Strauss, 1999, Science, 286, 886). 특정 구현예에서, siRNA는 동일한 수의 뉴클레오시드를 갖는 제1 가닥 및 제2 가닥을 포함하지만; 제1 및 제2 가닥은 제1 및 제2 가닥 상의 2개의 말단 뉴클레오시드가 상보성 가닥 상의 잔기와 쌍을 이루지 않도록 오프셋된다. 특정 예에서, 쌍을 이루지 않은 2개의 뉴클레오시드는 티미딘 잔기이다. siRNA는 표적 유전자에 대한 충분한 상동성 영역을 포함할 것이고, 뉴클레오타이드의 측면에서 충분한 길이이어서, siRNA, 또는 그의 단편은 표적 유전자의 하향 조절을 매개할 수 있다. 따라서, siRNA는 표적 RNA에 적어도 부분적으로 상보적인 영역을 포함한다. siRNA와 표적 사이에 완벽한 상보성이 존재할 필요는 없지만, 그 상응성은 표적 RNA의 RNAi 절단과 같은 서열 특이적 침묵화를 지시하기 위해 siRNA, 또는 그의 절단 생성물을 가능하게 하기에 충분해야 한다. 표적 가닥과의 상보성, 또는 상동성의 정도는 안티센스 가닥에서 가장 중요하다. 완벽한 상보성이 종종 바람직하지만, 특히 안티센스 가닥에서, 일부 실시예는 표적 RNA에 대해 1개 이상, 그러나 바람직하게는 10개, 8개, 6개, 5개, 4개, 3개, 2개, 또는 그 미만의 미스매치를 포함한다. 미스매치는 말단 영역에서 가장 용인되고, 존재하는 경우에, 예를 들어 5' 및/또는 3' 말단의 6개, 5개, 4개, 또는 3개의 뉴클레오타이드 내의 말단 영역 또는 영역에서 가장 용인된다. 센스 가닥은 분자의 전체 이중 가닥 특징을 유지하기 위해 안티센스 가닥과 단지 충분히 상보적일 필요가 있다.
또한, siRNA는 변형될 수 있거나 뉴클레오시드 유사체를 포함할 수 있다. siRNA의 단일 가닥 영역은 변형될 수 있거나 뉴클레오시드 유사체, 예를 들어 쌍을 이루지 않은 영역 또는 헤어핀 구조의 영역, 예를 들어 2개의 상보적 영역을 연결하는 영역은 변형 또는 뉴클레오시드 유사체를 가질 수 있다. 예를 들어 엑소뉴클레아제에 대해 siRNA의 하나 이상의 3'- 또는 5'-말단을 안정화시키기 위한, 또는 RISC로 들어가기 위한 안티센스 siRNA 작용제를 선호하기 위한 변형이 또한 유용하다. 변형은 C3 (또는 C6, C7, C12) 아미노 링커, 티올 링커, 카르복실 링커, 비-뉴클레오타이드 스페이서 (C3, C6, C9, C12, 무염기, 트리에틸렌 글리콜, 헥사에틸렌 글리콜), 포스포르아미다이트로서 되고 또 다른 DMT-보호된 히드록실 기를 갖는 특수 비오틴 또는 플루오레세인 시약을 포함할 수 있고, RNA 합성 동안 다중 커플링을 허용한다. siRNA의 각각의 가닥은 길이가 30, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 뉴클레오타이드 이상일 수 있다. 가닥은 바람직하게는 길이가 적어도 19 뉴클레오타이드다. 예를 들어, 각각의 가닥은 길이가 21 내지 25 뉴클레오타이드일 수 있다. 바람직한 siRNA는 17, 18, 19, 29, 21, 22, 23, 24, 또는 25 뉴클레오타이드 쌍의 듀플렉스 영역, 및 2-3 뉴클레오타이드의 하나 이상의 오버행, 바람직하게는 2-3 뉴클레오타이드의 하나 또는 2개의 3' 오버행을 갖는다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "miRNA" 또는 "마이크로RNA"는 프리-miRNA로 공지된 전형적으로 ~70 뉴클레오타이드 폴드-백 RNA 전구체 구조로부터 절제된 20-22 뉴클레오타이드의 소형 비-코딩 RNA를 지칭한다. miRNA는 miRNA와 표적 사이의 상보성의 정도에 따라 2가지 방식 중 하나로 그의 표적을 음성적으로 조절한다. 먼저, 완벽한 또는 거의 완벽한 상보성으로 단백질-코딩 mRNA 서열에 결합하는 miRNA는 RNA-매개 간섭 (RNAi) 경로를 유도한다. 그의 조절 효과를 발휘하는 miRNA는 그의 mRNA 표적의 3' 비번역 영역 (UTR) 내의 불완전한 상보성 부위에 결합하고, 전사후 표적-유전자 발현을, 명백하게 번역 수준에서, RNAi 경로에 사용되는 것과 유사하거나 또는 아마도 동일한 RISC 복합체를 통해 억제한다. 번역 제어와 일치하게, 이러한 메카니즘을 사용하는 miRNA는 그의 표적 유전자의 단백질 수준을 감소시키지만, 이들 유전자의 mRNA 수준은 단지 최소로 영향을 받는다. miRNA는 자연 발생 miRNA 뿐만 아니라 임의의 mRNA 서열을 특이적으로 표적화할 수 있는 인위적으로 설계된 miRNA 둘 다를 포괄한다. 예를 들어, 한 실시예에서, 당업자는 인간 miRNA (예를 들어, miR-30 또는 miR-21) 1차 전사체로서 발현된 짧은 헤어핀 RNA 구조체을 설계할 수 있다. 이러한 설계는 헤어핀 구조체에 Drosha 프로세싱 부위를 부가하고, 녹다운 효율을 크게 증가시키는 것으로 나타났다(Pusch et al., 2004). 헤어핀 줄기는 22-nt의 dsRNA (예를 들어, 안티센스는 원하는 표적에 완벽한 상보성을 가짐) 및 인간 miR로부터의 15-19-nt 루프로 구성된다. 헤어핀의 양측 또는 양측 상의 miR 루프 및 miR30 인접 서열을 부가하는 것은 마이크로RNA가 없는 통상적인 shRNA 설계와 비교할 때 발현된 헤어핀의 Drosha 및 Dicer 프로세싱에서 10배 초과의 증가를 초래한다. 증가된 Drosha 및 Dicer 프로세싱은 발현된 헤어핀에 대해 더 큰 siRNA/miRNA 생산 및 더 큰 효력으로 전환된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "shRNA" 또는 "짧은 헤어핀 RNA"는 단일 자기-상보적 RNA 가닥에 의해 형성되는 이중-가닥 구조를 지칭한다. 표적 유전자의 코딩 또는 비-코딩 서열 중 어느 하나의 부분과 동일한 뉴클레오타이드 서열을 함유하는 shRNA 구조체는 억제에 바람직하다. 표적 서열에 비해 삽입, 결실 및 단일 점 돌연변이를 갖는 RNA 서열은 또한 억제에 효과적인 것으로 밝혀졌다. 억제 RNA와 표적 유전자의 부분 사이의 90% 서열 동일성, 또는 심지어 100% 서열 동일성보다 더 큰 것이 바람직하다. 특정 바람직한 구현예에서, shRNA의 이중-형성 부분의 길이는 길이가 적어도 20, 21 또는 22 뉴클레오타이드, 예를 들어 다이서-의존적 절단에 의해 생성된 RNA 생성물에 상응하는 크기이다. 특정 구현예에서, shRNA 구조체는 길이가 적어도 25, 50, 100, 200, 300 또는 400 염기이다. 특정 구현예에서, shRNA 구조체는 길이가 400-800 염기이다. shRNA 구조체는 루프 서열 및 루프 크기의 변화가 매우 허용적이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "리보자임"은 표적 mRNA의 부위-특이적 절단이 가능한 촉매적으로 활성인 RNA 분자를 지칭한다. 몇몇 아형, 예를 들어, 해머헤드(hammerhead) 및 헤어핀 리보자임(hairpin ribozymes)이 기술되었다. 리보자임 촉매 활성 및 안정성은 촉매하지 않은 염기에서 리보뉴클레오타이드에 대해 데옥시리보뉴클레오타이드를 치환함으로써 개선될 수 있다. 부위-특이적 인식 서열에서 mRNA를 절단하는 리보자임이 특정 mRNA를 파괴하기 위해 사용될 수 있지만, 해머헤드 리보자임의 사용이 바람직하다. 해머헤드 리보자임은 표적 mRNA와 상보적인 염기쌍을 형성하는 인접 영역에 의해 지시되는 위치에서 mRNA를 절단한다. 유일한 요건은 표적 mRNA가 2개의 염기: 5'-UG-3'의 서열을 갖는다는 것이다. 해머헤드 리보자임의 작제 및 생산은 당업계에 널리 공지되어 있다.
특정 구현예에서, siRNA, miRNA, shRNA, 또는 리보자임을 포함하는 목적 폴리뉴클레오타이드의 전달 방법은 본원의 다른 곳에 기재된 바와 같이, 하나 이상의 조절 서열, 예를 들어 강한 구성적(constitutive) pol III, 예를 들어 인간 U6 snRNA 프로모터, 마우스 U6 snRNA 프로모터, 인간 및 마우스 H1 RNA 프로모터 및 인간 tRNA-val 프로모터, 또는 강한 구성 pol II 프로모터를 포함한다.
코딩 서열 자체의 길이에 관계없이, 본원에 개시된 폴리뉴클레오타이드는 다른 DNA 서열, 예컨대 프로모터 및/또는 인핸서, 비번역 영역 (UTR), 신호 서열, 코작(Kozak) 서열, 폴리아데닐화 신호, 추가의 제한 효소 부위, 다중 클로닝 부위, 내부 리보솜 진입 부위 (IRES), 재조합효소 인식 부위 (예를 들어, LoxP, FRT, 및 Att 부위), 종결 코돈, 전사 종결 신호, 및 자가-절단 폴리펩타이드, 에피토프 태그를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 조합되어, 그의 전체 길이가 상당히 달라질 수 있다. 따라서, 거의 임의의 길이의 폴리뉴클레오타이드 단편이 사용될 수 있고, 총 길이는 바람직하게는 의도된 재조합 DNA 프로토콜에서의 제조 및 사용의 용이성에 의해 제한되는 것으로 고려된다.
폴리뉴클레오타이드는 당업계에 공지되고 이용가능한 임의의 다양한 잘 확립된 기술을 이용하여 제조, 조작 및/또는 발현될 수 있다. 목적하는 폴리펩타이드를 발현하기 위해, 폴리펩타이드를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열을 적절한 벡터 내로 삽입할 수 있다. 벡터의 예는 플라스미드, 자율 복제 서열, 및 전이 인자이다. 추가의 예시적인 벡터는 플라스미드, 파지미드, 코스미드, 인공 염색체, 예컨대 효모 인공 염색체 (YAC), 박테리아 인공 염색체 (BAC), 또는 P1-유래 인공 염색체 (PAC), 박테리오파지, 예컨대 람다 파지 또는 M13 파지, 및 동물 바이러스를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 벡터로서 유용한 동물 바이러스의 카테고리의 예는 레트로바이러스 (렌티 바이러스 포함), 아데노바이러스, 아데노-연관 바이러스, 헤르페스바이러스 (예를 들어, 헤르페스 단순 바이러스), 폭스바이러스, 바큘로바이러스, 파필로마바이러스, 및 파포바바이러스 (예를 들어, SV40)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 발현 벡터의 예는 포유동물 세포에서 발현을 위한 pClneo 벡터 (Promega); 포유동물 세포에서 렌티바이러스-매개 유전자 전달 및 발현을 위한 pLenti4/V5-DEST™, pLenti6/V5-DEST™, 및 pLenti6.2/V5-GW/lacZ (Invitrogen) 이다. 특정 구현예에서, 본원에 개시된 키메라 단백질의 코딩 서열은 포유동물 세포에서 키메라 단백질의 발현을 위해 이러한 발현 벡터 내로 라이게이션될 수 있다.
일 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR을 코딩하는 벡터는 서열번호 36에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
특정 구현예에서, 벡터는 염색체외로 유지되는 에피솜 벡터 또는 벡터이다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "에피솜"은 숙주의 염색체 DNA 내로의 통합 없이 그리고 분할 숙주 세포로부터 점진적인 손실 없이 복제할 수 있는 벡터를 지칭하며, 이는 또한 상기 벡터가 염색체외로 또는 에피솜으로 복제한다는 것을 의미한다. 벡터는 DNA 복제의 기원을 코딩하는 서열 또는 림프영양성 헤르페스 바이러스 또는 감마 헤르페스 바이러스, 아데노바이러스, SV40, 소 유두종 바이러스, 또는 효모, 특히 EBV의 또는 iP에 상응하는 림프영양성 헤르페스 바이러스 또는 감마 헤르페스 바이러스의 복제 기원을 보유하도록 조작된다. 특정 측면에서, 림프영양성 헤르페스 바이러스는 엡스타인 바 바이러스 (EBV), 카포시 육종 헤르페스 바이러스 (KSHV), 헤르페스 바이러스 시어리 (HS), 또는 마르크병 바이러스 (MDV)일 수 있다. 엡스타인 바 바이러스 (EBV) 및 카포시 육종 헤르페스 바이러스 (KSHV)는 또한 감마 헤르페스 바이러스의 예이다. 전형적으로, 숙주 세포는 복제를 활성화시키는 바이러스 복제 트랜스활성화제 단백질을 포함한다.
발현 벡터에 존재하는 "제어 요소" 또는 "조절 서열"은 전사 및 번역을 수행하기 위해 숙주 세포 단백질과 상호작용하는 벡터의 비-번역 영역 - 복제 기원, 선별 카세트, 프로모터, 인핸서, 번역 개시 신호 (Shine Dalgarno 서열 또는 Kozak 서열), 인트론, 폴리아데닐화 서열, 5' 및 3' 비번역 영역 - 이다. 이러한 요소는 그의 강도 및 특이성에 있어서 다양할 수 있다. 이용되는 벡터 시스템 및 숙주에 따라, 유비쿼터스 프로모터 및 유도성 프로모터를 포함하는 임의의 수의 적합한 전사 및 번역 요소가 사용될 수 있다.
특정 구현예에서, 본원에서 이용하기 위한 벡터는 발현 벡터 및 바이러스 벡터를 포함하지만, 이에 제한되지는 않으며, 외인성, 내인성, 또는 이종성 대조군 서열, 예컨대 프로모터 및/또는 인핸서를 포함할 것이다. "내인성" 대조군 서열은 게놈 내의 주어진 유전자와 자연적으로 연결된 것이다. "외인성" 대조군 서열은 유전자의 전사가 연결된 인핸서/프로모터에 의해 유도되도록 유전자 조작 (즉, 분자 생물학적 기술)에 의해 유전자에 병치된 것이다. "이종성" 대조군 서열은 유전자 조작된 세포와 상이한 종으로부터의 외인성 서열이다.
본원에 사용된 용어 "프로모터"는 RNA 폴리머라제가 결합하는 폴리뉴클레오타이드 (DNA 또는 RNA)의 인식 부위를 지칭한다. RNA 폴리머라제는 프로모터에 작동가능하게 연결된 폴리뉴클레오타이드를 개시 및 전사한다. 특정 구현예에서, 포유동물 세포에서 작동하는 프로모터는 전사가 개시되는 부위로부터 대략 25 내지 30개 염기 상류에 위치된 AT-풍부 영역 및/또는 전사의 개시로부터 70 내지 80개 염기 상류에 발견된 또 다른 서열, N이 임의의 뉴클레오타이드일 수 있는 CNCAAT 영역을 포함한다.
용어 "인핸서r"는 향상된 전사를 제공할 수 있는 서열을 함유하는 DNA의 분절을 의미하며, 경우에 따라 또 다른 조절 서열에 비해 이들의 배향에 독립적인 기능을 할 수 있다. 인핸서는 프로모터 및/또는 다른 인핸서 요소와 협동 또는 부가적으로 작용할 수 있다. 용어 "프로모터/인핸서"는 프로모터 및 인핸서 기능을 모두 제공할 수 있는 서열을 함유하는 DNA의 분절을 의미한다.
용어 "작동가능하게 연결된"은 기재된 성분이 그의 의도된 방식으로 기능하도록 허용하는 관계에 있는 병치를 지칭한다. 일 구현예에서, 용어는 핵산 발현 제어 서열 (예컨대 프로모터, 및/또는 인핸서) 및 제2 폴리뉴클레오타이드 서열, 예를 들어 목적 폴리뉴클레오타이드 사이의 기능적 연결을 지칭하며, 여기서 발현 제어 서열은 제2 서열에 상응하는 핵산의 전사를 지시한다.
본원에서 용어 “구성적 발현 조절 서열”은 작동 가능하게 연결된 서열의 전사를 지속적으로 또는 지속적으로 허용하는 프로모터, 인핸서 또는 프로모터/인핸서를 의미한다. 구성적 발현 조절 서열은 매우 다양한 세포 및 조직 유형에서 발현을 허용하는 “유비쿼터스” 프로모터, 인핸서 또는 프로모터/인핸서 또는 제한된 다양한 세포 및 조직 유형에서 발현을 허용하는 “세포 특이적”, “세포 유형 특이적”, “세포 계통 특이적” 또는 “조직 특이적” 프로모터, 인핸서 또는 프로모터/인핸서일 수 있다.
본원에 제시된 특정 구현예에서 사용하기에 적합한 예시적인 유비쿼터스 발현 제어 서열은 사이토메갈로바이러스(CMV) 전초기 프로모터, 바이러스 유인원 바이러스 40(SV40)(예를 들어, 초기 또는 후기), 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스(MoMLV) LTR 프로모터, 라우스 육종 바이러스(RSV) LTR, 헤르페스 단순 바이러스(HSV) (티미딘 키나제) 프로모터, H5, P7.5 및 P11 프로모터, 백시니아 바이러스로부터의 신장 인자 1-알파(EF1a) 프로모터, 초기 성장 반응 1(EGR1), 페리틴 H(FerH), 페리틴 L(FerL), 글리세르알데히드 3-포스페이트 데히드로게나제(GAPDH), 진핵 번역 개시 인자 4A1(EIF4A1), 열 충격 70kDa 단백질 5(HSPA5), 열 충격 단백질 90kDa 베타, 구성원 1(HSP90B1), 열 충격 단백질 70kDa(HSP70), β-카인신(β-KIN), 인간 ROSA 26 유전자좌(Irions et al., Nature Biotechnology 25, 1477 - 1482 (2007)), 유비퀴틴 C 프로모터(UBC), 포스포글리세레이트 키나제-1(PGK) 프로모터, 사이토메갈로바이러스 인핸서/치킨 β-액틴(CAG) 프로모터, β-액틴 프로모터 및 골수증식성 육종 바이러스 인핸서, 음성 대조군 영역 결실, dl587rev 프라이머-결합 부위 치환(MND) 프로모터(Challita et al., J Virol. 69(2):748-55 (1995))를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 본 발명의 벡터는 MND 프로모터를 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 벡터는 인간 EF1a 유전자의 제1 인트론을 포함하는 EF1a 프로모터를 포함한다.
일 구현예에서, 본 발명의 벡터는 인간 EF1a 유전자의 제1 인트론이 결여된 EF1a 프로모터를 포함한다.
특정 구현예에서, T 세포 특이적 프로모터로부터 CAR을 포함하는 폴리뉴클레오타이드를 발현시키는 것이 바람직할 수 있다.
본원에서, "조건적 발현"은 유도성 발현; 억제성 발현; 특정 생리적, 생물학적 또는 질병 상태 등을 갖는 세포 또는 조직에서의 발현 등을 포함하나 이에 한정되지 않는 임의의 유형의 조건적 발현을 의미할 수 있다. 이러한 정의는 세포 유형 또는 조직 특이적 발현을 배제하고자 하는 것은 아니다. 특정 구현예는 목적 폴리뉴클레오타이드의 조건적 발현, 예를 들면, 발현이 목적 폴리뉴클레오타이드에 의해 코딩되는 폴리뉴클레오타이드의 발현의 증가 또는 감소를 야기하거나 발현되도록 하는 세포, 조직, 유기체 등을 치료 또는 조건에 적용함으로써 조절되는 것을 제공한다.
유도성 프로모터/시스템의 예시적인 예는 스테로이드-유도성 프로모터, 예컨대 글루코코르티코이드 또는 에스트로겐 수용체를 코딩하는 유전자에 대한 프로모터 (이에 상응하는 호르몬에 의한 치료에 의해 유도성), 메탈로티오닌 프로모터 (다양한 중금속에 의한 치료에 의해 유도성), MX-1 프로모터 (인터페론에 의한 치료에 의해 유도성), "유전자 스위치" 미페프리스톤-조절가능 시스템 (Sirin et al., 2003, Gene, 323:67), 큐메이트 유도성 유전자 스위치 (WO 2002/088346), 테트라사이클린-의존성 조절 시스템 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
조건부 발현은 또한 부위 특이적 DNA 재조합효소를 사용함으로써 달성될 수 있다. 특정 구현예에 따르면, 벡터는 부위 특이적 재조합효소에 의해 매개된 재조합을 위한 적어도 하나의 (전형적으로 2개의) 부위(들)을 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "재조합효소" 또는 "부위 특이적 재조합효소"는 하나 이상의 재조합 부위 (예를 들어, 2개, 3개, 4개, 5개, 7개, 10개, 12개, 15개, 20개, 30개, 15개 등)을 포함하는 재조합 반응에 관여하는 절제 또는 통합 단백질, 효소, 보조인자 또는 관련 단백질을 포함하며, 이들은 야생형 단백질(Landy, Current Opinion in Biotechnology 3:699-707 (1993) 참조) 또는 돌연변이체, 유도체 (예를 들어, 재조합 단백질 서열 또는 이의 단편을 함유하는 융합 단백질), 이의 단편, 및 변이체일 수 있다. 본원에서 사용하기에 적합한 재조합효소의 예시적인 예는 Cre, Int, IHF, Xis, Flp, Fis, Hin, Gin, ΦC31, Cin, Tn3 레솔베이즈(resolvase), TndX, XerC, XerD, TnpX, Hjc, Gin, SpCCE1, 및 ParA를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
상기 벡터는 다양한 부위 특이적 재조합 효소 중 어느 하나에 대한 하나 이상의 재조합 부위를 포함할 수 있다. 부위 특이적 재조합 효소에 대한 표적 부위는 벡터, 예를 들어 레트로바이러스 벡터 또는 렌티바이러스 벡터의 통합에 필요한 부위(들) 이외에 존재하는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 용어 "재조합 서열", "재조합 부위" 또는 "부위 특이적 재조합 부위"는 재조합 효소가 인식 및 결합하는 특정 핵산 서열을 의미한다.
예를 들어, Cre 재조합효소에 대한 하나의 재조합 부위는 8개의 염기쌍 코어 서열에 인접된 2개의 13개 염기쌍 반전된 반복부(재조합효소 결합 부위로서 작용함)을 포함하는 34개 염기쌍 서열인 loxP이다(Sauer, B., Current Opinion in Biotechnology 5:521-527 (1994)의 도 1 참조). 다른 예시적인 loxP 부위는 lox511 (Hoess et al., 1996; Bethke and Sauer, 1997), lox5171 (Lee and Saito, 1998), lox2272 (Lee and Saito, 1998), m2 (Langer et al., 2002), lox71 (Albert et al., 1995), 및 lox66 (Albert et al., 1995)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
FLP 재조합효소에 대한 적합한 인식 부위는 FRT (McLeod, et al., 1996), F1, F2, F3 (Schlake and Bode, 1994), F4, F5 (Schlake and Bode, 1994), FRT(LE) (Senecoff et al., 1988), FRT(RE) (Senecoff et al., 1988)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
인식 서열의 다른 예는 attB, attP, attL, 및 attR 서열이며, 이는 재조합효소 λ 인테그라제, 예를 들어, phi-c31에 의해 인식된다. φC31 SSR은 이종형 부위 attB(34 bp 길이)와 attP(39 bp 길이) 사이에서만 재조합을 매개한다(Groth et al., 2000). 각각 세균 및 파지 게놈 상의 파지 인테그라제에 대한 부착 부위들을 명명하는 attB 및 attP는 모두 φC31 동종이량체에 의해서 결합되는 듯한 불완전한 역전된 반복부를 함유한다(Groth et al., 2000). 생산물 부위, attL 및 attR은 추가의 φC31-매개된 재조합에 대해 유효하게 불활성이며(Belteki et al., 2003), 이는 반응을 비가역적으로 만든다. 삽입을 촉매하기 위해, attB-함유 DNA는 attP 부위를 게놈 attB 부위에 삽입하는 것보다 게놈 attP 부위 내로 더 용이하게 삽입된다는 것이 밝혀졌다(Thyagarajan et al., 2001; Belteki et al., 2003). 따라서, 상동성 재조합에 의한 전형적인 전략 위치는 정의된 유전자좌 내로의 attP-함유 "도킹 부위"이고, 이는 이어서 삽입을 위해 attB-함유 유입 서열과 파트너화된다.
본원에서 사용된 바와 같이, "내부 리보솜 진입 부위" 또는 "IRES"는 시스트론 (단백질 암호화 영역)의 개시 코돈, 예컨대 ATG에 대한 직접적인 내부 리보솜 진입을 촉진하여 유전자의 캡-독립적 번역을 유도하는 요소를 지칭한다. 예를 들어, Jackson et al., 1990. Trends Biochem Sci 15(12):477-83) 및 Jackson and Kaminski. 1995. RNA 1(10):985-1000 참조. 특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 벡터는 하나 이상의 폴리펩타이드를 암호화하는 하나 이상의 목적 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 특정 구현예에서, 복수의 폴리펩타이드 각각의 효율적인 번역을 달성하기 위해, 폴리뉴클레오타이드 서열은 하나 이상의 IRES 서열 또는 자가-절단 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 분리될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "Kozak 서열"은 리보솜의 작은 서브유닛에 대한 mRNA의 초기 결합을 크게 용이하게 하고 번역을 증가시키는 짧은 뉴클레오타이드 서열을 지칭한다. 컨센서스 Kozak 서열은 (GCC)RCCATGG이고, 여기서 R은 퓨린 (A 또는 G)이다(Kozak, 1986. Cell. 44(2):283-92, 및 Kozak, 1987. Nucleic Acids Res. 15(20):8125-48). 특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 벡터는 컨센서스 Kozak 서열을 갖고 원하는 폴리펩타이드, 예를 들어 CAR를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드를 보유하는 세포는 직접적인 독성 및/또는 제어되지 않은 증식의 위험을 감소시키기 위해 유도성 자살 유전자를 포함하는 자살 유전자를 이용한다. 구체적 측면에서, 자살 유전자는 폴리뉴클레오타이드 또는 세포를 보유하는 숙주에 대해 면역원성이 아니다. 사용될 수 있는 자살 유전자의 특정 예는 카스파제-9 또는 카스파제-8 또는 시토신 데아미나제이다. 카스파제-9는 이량체화의 특이적 화학적 유도인자 (CID)를 사용하여 활성화될 수 있다.
특정 구현예에서, 벡터는 본 개시내용의 면역 이펙터 세포, 예를 들어 T 세포를 생체내에서 음성 선택에 민감하게 하는 유전자 절편을 포함한다. "음성 선택"은 주입된 세포가 개체의 생체내 상태의 변화의 결과로서 제거될 수 있음을 의미한다. 음성 선택 가능한 표현형은 투여된 제제, 예를 들어 화합물에 대한 민감성을 부여하는 유전자의 삽입으로부터 초래될 수 있다. 음성 선택가능한 유전자는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 특히 하기를 포함한다: 간시클로비르 민감성을 부여하는 헤르페스 단순 바이러스 I형 티미딘 키나제 (HSV-I TK) 유전자 (Wigler et al., Cell 11:223, 1977); 세포 하이포크산틴 포스포리보실트랜스퍼라제 (HPRT) 유전자, 세포 아데닌 포스포리보실트랜스퍼라제 (APRT) 유전자, 및 박테리아 시토신 데아미나제 (Mullen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:33 (1992)).
일부 구현예에서, 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포, 예컨대 T 세포는 시험관내에서 음성 선택가능한 표현형의 세포의 선택을 가능하게 하는 양성 마커를 추가로 포함하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 양성 선택가능한 마커는 숙주 세포 내로 도입될 때 유전자를 보유하는 세포의 양성 선택을 허용하는 우세한 표현형을 발현하는 유전자일 수 있다. 이러한 유형의 유전자는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 특히 히그로마이신 B에 대한 저항성을 부여하는 히그로마이신-B 포스포트랜스퍼라제 유전자 (hph), 항생제 G418에 대한 저항성을 코딩하는 Tn5로부터의 아미노 글리코시드 포스포트랜스퍼라제 유전자 (neo 또는 aph), 디히드로폴레이트 리덕타제 (DHFR) 유전자, 아데노신 데아미나제 유전자 (ADA), 및 다중-약물 저항성 (MDR) 유전자를 포함한다.
바람직하게는, 양성 선택가능한 마커 및 음성 선택가능한 요소는, 음성 선택가능한 요소의 소실이 또한 반드시 양성 선택가능한 마커의 소실을 동반하도록 연결된다. 보다 더 바람직하게는, 양성 및 음성 선택가능한 마커는 융합되어, 일일의 소실이 다른 것의 소실로 이어진다. 상기 기재된 목적하는 양성 및 음성 선택 특징 둘 다를 부여하는 폴리펩타이드로서의 발현 생성물을 생성하는 융합된 폴리뉴클레오타이드의 예는 하이그로마이신 포스포트랜스퍼라제 티미딘 키나제 융합 유전자 (HyTK)이다. 이 유전자의 발현은 시험관내 양성 선택을 위한 하이그로마이신 B 저항성, 및 생체내 음성 선택을 위한 간시클로비르 민감성을 부여하는 폴리펩타이드를 생성한다. Lupton S. D., et al, Mol. and Cell. Biology 1 1:3374- 3378, 1991 참조. 추가로, 특정 구현예에서, 키메라 수용체를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 융합된 유전자, 특히 시험관내 양성 선택을 위한 하이그로마이신 B 내성, 및 생체내 음성 선택을 위한 간시클로비르 민감성을 부여하는 것들을 함유하는 레트로바이러스 벡터, 예를 들어 상기 문헌[Lupton, S.D. et al.(1991)]에 기재된 HyTK 레트로바이러스 벡터 중에 있다. 또한, 우성 양성 선택가능한 마커를 음성 선택가능한 마커와 융합시키는 것으로부터 유래된 이작용성 선택가능한 융합 유전자의 사용을 기재하는, S. D. Lupton에 의한 PCT US91/08442 및 PCT/US94/05601의 공보를 참조한다.
양성 선택 마커는 예를 들어 hph, nco 및 gpt로 구성된 군으로부터 선택된 유전자로부터 유래될 수 있고, 음성 선택 마커는 예를 들어 시토신 디아미나제, HSV-I TK, VZV TK, HPRT, APRT 및 gpt로 구성된 군으로부터 선택된 유전자로부터 유래될 수 있다. 특정 구현예에서, 마커는 이작용성 선택 융합 유전자이고, 여기서 양성 선택 마커는 hph 또는 neo로부터 유래되고, 음성 선택 마커는 시토신 디아미나제 또는 TK 유전자 또는 선택 마커로부터 유래된다.
바이러스 벡터
특정 구현예에서, 세포 (예를 들어, 면역 이펙터 세포)는 CAR을 코딩하는 레트로바이러스 벡터, 예를 들어 렌티바이러스 벡터로 형질도입된다. 예를 들어, 면역 이펙터 세포는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 CAR을 코딩하는 벡터로, 세포내 신호전달 도메인이 CD3ζ, CD28, 4-1BB, Ox40 또는 그의 임의의 조합으로 형질도입된다. 따라서, 이들 형질도입된 세포는 CAR-매개 세포독성 반응을 유도할 수 있다.
레트로바이러스는 유전자 전달을 위한 통상적인 도구이다(Miller, 2000, Nature. 357: 455-460). 특정 구현예에서, 레트로바이러스는 키메라 항원 수용체(CAR)를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 세포에 전달하기 위해 사용된다. 본원에 사용된 용어 "레트로바이러스"는 그의 게놈 RNA를 선형 이중-가닥 DNA 카피로 역전사시키고, 후속적으로 그의 게놈 DNA를 숙주 게놈으로 공유적으로 통합시키는 RNA 바이러스를 지칭한다. 일단 바이러스가 숙주 게놈으로 통합되면, 이는 "프로바이러스"로 지칭된다. 프로바이러스는 RNA 폴리머라제 II에 대한 주형으로서 작용하고, 새로운 바이러스 입자를 생성하는데 필요한 구조적 단백질 및 효소를 코딩하는 RNA 분자의 발현을 지시한다.
특정 구현예에 사용하기에 적합한 예시적인 레트로바이러스는 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스(M- MuLV), 몰로니 뮤린 육종 바이러스(MoMSV), 하비 뮤린 육종 바이러스(HaMuSV), 뮤린 유방종양 바이러스(MuMTV), 긴팔 원숭이 백혈병 바이러스(GaLV), 고양이 백혈병 바이러스(FLV), 스푸마바이러스, 프리엔드 쥐 백혈병 바이러스, 뮤린 줄기세포 바이러스(MSCV) 및 라우스 육종 바이러스(RSV)) 및 렌티바이러스를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "렌티바이러스"는 복합 레트로바이러스의 군 (또는 속)을 지칭한다. 예시적인 렌티바이러스는 HIV (인간 면역결핍 바이러스; HIV 유형 1 및 HIV 유형 2를 포함함); 비스나-마디 바이러스 (VMV) 바이러스; 카프린 관절염-뇌염 바이러스 (CAEV); 말 감염성 빈혈 바이러스 (EIAV); 고양이 면역결핍 바이러스 (FIV); 소 면역결핍 바이러스 (BIV); 및 원숭이 면역결핍 바이러스 (SIV)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 일 구현예에서, HIV 기반 벡터 백본 (즉, HIV 시스-작용 서열 요소)이 이용된다. 특정 구현예에서, 렌티바이러스는 CAR을 포함하는 폴리뉴클레오타이드를 세포에 전달하는 데 사용된다.
레트로바이러스 벡터 및 보다 특히 렌티바이러스 벡터는 본원에 개시된 특정 구현예를 실시하는 데 사용될 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 용어 "레트로바이러스" 또는 "레트로바이러스 벡터"는 각각 "렌티바이러스" 및 "렌티바이러스 벡터"를 포함함을 의미한다.
용어 "벡터"는 또 다른 핵산 분자를 전달 또는 수송할 수 있는 핵산 분자를 지칭하기 위해 본원에서 사용된다. 전달된 핵산은 일반적으로 벡터 핵산 분자에 연결되며, 예를 들어 벡터 핵산 분자에 삽입된다. 벡터는 세포에서 자율 복제를 지시하는 서열을 포함할 수 있거나, 또는 숙주 세포 DNA 내로의 통합을 허용하기에 충분한 서열을 포함할 수 있다. 유용한 벡터는, 예를 들어 플라스미드 (예를 들어, DNA 플라스미드 또는 RNA 플라스미드), 트랜스포손, 코스미드, 박테리아 인공 염색체, 및 바이러스 벡터를 포함한다. 유용한 바이러스 벡터는, 예를 들어 복제 결함 레트로바이러스 및 렌티바이러스를 포함한다.
당업자에게 명백한 바와 같이, 용어 "바이러스 벡터"는 전형적으로 핵산 분자의 전달을 용이하게 하거나 또는 핵산 전달을 매개하는 바이러스 입자 또는 세포의 게놈 내로의 통합을 용이하게 하는 바이러스-유래 핵산 요소를 포함하는 핵산 분자 (예를 들어, 전달 플라스미드)를 지칭하기 위해 널리 사용된다. 바이러스 입자는 전형적으로 다양한 바이러스 성분 및 때때로 또한 핵산(들)에 추가로 숙주 세포 성분을 포함할 것이다.
용어 바이러스 벡터는 핵산을 세포 내로 또는 전달된 핵산 자체로 전달할 수 있는 바이러스 또는 바이러스 입자를 지칭할 수 있다. 바이러스 벡터 및 전달 플라스미드는 주로 바이러스로부터 유래된 구조적 및/또는 기능적 유전 요소를 함유한다. 용어 "레트로바이러스 벡터"는 주로 레트로바이러스로부터 유래된 구조적 및 기능적 유전 요소, 또는 그의 일부를 함유하는 바이러스 벡터 또는 플라스미드를 지칭한다. 용어 "렌티바이러스 벡터"는 주로 렌티바이러스로부터 유래된 LTR을 비롯한 구조적 및 기능적 유전 요소, 또는 그의 일부를 함유하는 바이러스 벡터 또는 플라스미드를 지칭한다. 용어 "하이브리드 벡터"는 레트로바이러스, 예를 들어 렌티바이러스 서열 및 비-렌티바이러스 바이러스 서열 둘 다를 함유하는 벡터, LTR 또는 다른 핵산을 지칭한다. 일 구현예에서, 하이브리드 벡터는 레트로바이러스, 예를 들어 렌티바이러스, 역전사, 복제, 통합 및/또는 패키징을 위한 서열을 포함하는 벡터 또는 전달 플라스미드를 지칭한다.
특정 구현예에서, 용어 "렌티바이러스 벡터" 및 "렌티바이러스 발현 벡터"는 렌티바이러스 전달 플라스미드 및/또는 감염성 렌티바이러스 입자를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 본원에서 클로닝 부위, 프로모터, 조절 요소, 이종성 핵산 등과 같은 요소를 언급하는 경우, 이들 요소의 서열은 본 개시내용의 렌티바이러스 입자에서 RNA 형태로 존재하고 본 개시내용의 DNA 플라스미드에서 DNA 형태로 존재한다는 것이 이해되어야 한다.
프로바이러스의 각각의 말단에서 "긴 말단 반복부(long terminal repeats)" 또는 "LTRs"로 불리는 구조가 있다. 용어 "긴 말단 반복부(long terminal repeat, LTR)"는 레트로바이러스 DNA의 말단에 위치한 염기쌍의 도메인을 말하며, 이의 자연적인 서열 맥락에서 직접적인 반복부이며 U3, R 및 U5 영역을 함유한다. LTR은 일반적으로 레트로바이러스 유전자(예를 들어, 유전자 전사체의 촉진, 개시 및 폴리아데닐화) 및 바이러스 복제에 대한 기본 기능을 제공한다. LTR은 전사 조절 요소, 폴리아데닐화 신호 및 바이러스 게놈의 복제 및 통합에 필요한 서열을 포함하는 다수의 조절 신호를 함유한다. 바이러스 LTR은 U3, R 및 U5로 불리는 3개의 영역으로 나뉜다. U3 영역은 인핸서 및 프로모터 요소를 함유한다. U5 영역은 프라이머 결합 부위와 R 영역 사이의 서열이며 폴리아데닐화 서열을 함유한다. R(반복) 영역은 U3 및 U5 영역에 의해 인접해 있다. U3, R 및 U5 영역으로 구성된 LTR은 바이러스 게놈의 5' 및 3' 말단 모두에서 나타난다. 5' LTR에 인접한 것은 게놈의 역전사( tRNA 프라이머 결합 부위) 및 입자로의 바이러스 RNA의 효율적인 패키징(Psi 부위)에 필요한 서열이다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "패키징 신호" 또는 "패키징 서열"은 바이러스 캡시드 또는 입자 내로의 바이러스 RNA의 삽입을 위해 요구되는 레트로바이러스 게놈 내에 위치된 서열을 지칭하며, 예를 들어 Clever et al., 1995. J. of Virology, Vol. 69, No. 4; pp. 2101-2109을 참조한다. 몇몇 레트로바이러스 벡터는 바이러스 게놈의 캡시드화를 위해 요구되는 최소 패키징 신호 (또한 psi [Ψ] 서열로서 지칭됨)를 사용한다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "패키징 서열", "패키징 신호", "psi" 및 기호 "Ψ"는 바이러스 입자 형성 동안 레트로바이러스 RNA 가닥의 캡시드화를 위해 요구되는 비-코딩 서열과 관련하여 사용된다.
다양한 구현예에서, 벡터는 변형된 5' LTR 및/또는 3' LTR을 포함한다. LTR 중 어느 하나 또는 둘 다는 하나 이상의 결실, 삽입 또는 치환을 포함하나 이에 제한되지는 않는 하나 이상의 변형을 포함할 수 있다. 3' LTR의 변형은 종종 바이러스 복제-결함을 부여함으로써 렌티바이러스 또는 레트로바이러스 시스템의 안전성을 개선하도록 구성된다. 본원에 사용된 용어 "복제-결함"은 감염성 비리온이 생성되지 않도록 (예를 들어, 복제-결함 렌티바이러스 자손) 완전한, 효과적인 복제를 할 수 없는 바이러스를 지칭한다. 용어 "복제-적격"은 바이러스의 바이러스 복제가 감염성 비리온을 생성할 수 있도록 (예를 들어, 복제-적격 렌티바이러스 자손) 복제할 수 있는 야생형 바이러스 또는 돌연변이체 바이러스를 지칭한다.
"자기-불활성화" (SIN) 벡터는 복제-결함 벡터, 예를 들어 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터를 지칭하며, 여기서 U3 영역으로서 공지된 우측 (3') LTR 인핸서-프로모터 영역은 바이러스 복제의 제1 라운드를 넘어 바이러스 전사를 방지하기 위해 (예를 들어, 결실 또는 치환에 의해) 변형되었다. 이는 우측 (3') LTR U3 영역이 바이러스 복제 동안 좌측 (5') LTR U3 영역에 대한 주형으로서 사용되기 때문에, 따라서 바이러스 전사체는 U3 인핸서-프로모터 없이 제조될 수 없다. 추가 구현예에서, 3' LTR은 U5 영역이, 예를 들어 이상적 폴리(A) 서열로 대체되도록 변형된다. LTR에 대한 변형, 예컨대 3' LTR, 5' LTR, 또는 3' 및 5' LTR 둘 다에 대한 변형이 또한 본원에 포함됨을 주목해야 한다.
추가적인 안전성 향상은 바이러스 입자의 생산 동안 바이러스 게놈의 전사를 유도하기 위해 5' LTR의 U3 영역을 이종성 프로모터로 대체함으로써 제공된다. 사용될 수 있는 이종성 프로모터의 예는, 예를 들어, 바이러스 유인원 바이러스 40 (SV40) (예를 들어, 초기 또는 후기), 사이토메갈로바이러스 (CMV) (예를 들어, 즉각적인 초기), 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스 (MoMLV), 라우스 육종 바이러스 (RSV), 및 헤르페스 단순 바이러스 (HSV) (티미딘 키나제) 프로모터를 포함한다. 전형적인 프로모터는 Tat-독립적 방식으로 높은 수준의 전사를 유도할 수 있다. 이러한 대체는 복제-적격 바이러스를 생성하기 위한 재조합의 가능성을 감소시키는데, 이는 바이러스 생산 시스템에서 완전한 U3 서열이 없기 때문이다. 특정 구현예에서, 이종성 프로모터는 바이러스 게놈이 전사되는 방식을 조절하는 데 추가적인 이점을 갖는다. 예를 들어, 이종성 프로모터는 유도 가능할 수 있어서, 바이러스 게놈의 전부 또는 일부의 전사는 유도 인자가 존재할 때에만 발생할 것이다. 유도 인자는 하나 이상의 화학적 화합물 또는 숙주 세포가 배양되는 온도 또는 pH와 같은 생리학적 조건을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
일부 구현예에서, 바이러스 벡터는 TAR 요소를 포함한다. 용어 "TAR"은 렌티바이러스 (예를 들어, HIV) LTR의 R 영역에 위치한 "트랜스-활성화 반응" 유전자 요소를 지칭한다. 이 요소는 바이러스 복제를 향상시키기 위해 렌티바이러스 트랜스-활성화인자 (tat) 유전자 요소와 상호작용한다. 그러나, 이 요소는 5' LTR의 U3 영역이 이종 프로모터에 의해 대체되는 구현예에서 요구되지 않는다.
"R 영역"은 캡핑 그룹의 시작(즉, 전사의 시작)에서 시작하여 폴리 A 트랙의 시작 직전에 끝나는 레트로바이러스 LTR 내의 영역을 지칭한다. R 영역은 또한 U3 및 U5 영역에 의해 인접해 있는 것으로 정의된다. R 영역은 게놈의 일 말단으로부터 다른 말단으로의 신생 DNA의 전달을 허용하는 역전사 동안 역할을 한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "FLAP 요소"는 그 서열이 레트로바이러스, 예를 들어 HIV-1 또는 HIV-2의 중심 폴리퓨린 트랙 및 중심 종결 서열 (cPPT 및 CTS)을 포함하는 핵산을 지칭한다. 적합한 FLAP 요소는 미국 특허 번호 6,682,907 및 Zennou, et al., 2000, Cell, 101:173에 기재되어 있다. HIV-1 역전사 동안, 중앙 폴리퓨린 트랙(cPPT)에서의 플러스-가닥 DNA의 중앙 개시 및 중앙 종결 서열(CTS)에서의 중앙 종결은 3-가닥 DNA 구조: HIV-1 중앙 DNA 플랩의 형성을 유도한다. 임의의 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, DNA 플랩은 렌티바이러스 게놈 핵 수입의 시스-활성 결정자로서 작용할 수 있고/있거나 바이러스의 역가를 증가시킬 수 있다. 특정 구현예에서, 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터 백본은 벡터에서 관심있는 이종성 유전자의 상류 또는 하류에 하나 이상의 FLAP 요소를 포함한다. 예를 들어, 특정 구현예에서, 전달 플라스미드는 FLAP 요소를 포함한다. 일 구현예에서, 벡터는 HIV-1로부터 단리된 FLAP 요소를 포함한다.
일 구현예에서, 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 전달 벡터는 하나 이상의 배출 요소를 포함한다. 용어 "배출 요소(export element)"는 핵으로부터 세포의 세포질로의 RNA 전사체의 수송을 조절하는 시스-작용 전사후 조절 요소를 지칭한다. RNA 배출 요소의 예는 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) rev 반응 요소 (RRE) (예를 들어, Cullen et al., 1991. J. Virol. 65: 1053; 및 Cullen et al., 1991. Cell 58: 423 참조), 및 B형 간염 바이러스 전사후 조절 요소 (HPRE)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 일반적으로, RNA 배출 요소는 유전자의 3' UTR 내에 위치하고, 1개 또는 다수의 카피로서 삽입될 수 있다.
특정 구현예에서, 바이러스 벡터에서의 이종성 서열의 발현은 전사후 조절 요소, 효율적인 폴리아데닐화 부위, 및 임의로, 전사 종결 신호를 벡터 내로 혼입시킴으로써 증가된다. 다양한 전사후 조절 요소는 단백질, 예를 들어 우드척 간염 바이러스 전사후 조절 요소 (WPRE; Zufferey et al., 1999, J. Virol., 73:2886); B형 간염 바이러스 (HPRE)에 존재하는 전사후 조절 요소 (Huang et al., Mol. Cell Biol., 5:3864); 및 이와 유사한 것 (Liu et al., 1995, Genes Dev., 9:1766)에서의 이종성 핵산의 발현을 증가시킬 수 있다. 특정 구현예에서, 벡터는 전사후 조절 요소, 예컨대 WPRE 또는 HPRE를 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, 벡터는, 일부 경우에 이들 요소가 세포 형질전환의 위험을 증가시키고/시키거나 mRNA 전사체의 양을 실질적으로 또는 상당히 증가시키지 않거나 mRNA 안정성을 증가시키기 때문에, 전사후 조절 요소 (PTE), 예컨대 WPRE 또는 HPRE를 결여하거나 포함하지 않는다. 따라서, 일부 실시예에서, 벡터는 PTE를 결여하거나 포함하지 않는다. 다른 구현예에서, 벡터는 추가된 안전성 척도로서 WPRE 또는 HPRE를 결여하거나 포함하지 않는다.
이종성 핵산 전사체의 효율적인 종결 및 폴리아데닐화를 지시하는 요소는 이종성 유전자 발현을 증가시킨다. 전사 종결 신호는 일반적으로 폴리아데닐화 신호의 하류에서 발견된다. 특정 구현예에서, 벡터는 발현될 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 3' 폴리아데닐화 서열을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "폴리A 부위" 또는 "폴리A 서열"은 RNA 폴리머라제 II에 의한 신생 RNA 전사체의 종결 및 폴리아데닐화 둘 다를 지시하는 DNA 서열을 나타낸다. 폴리아데닐화 서열은 코딩 서열의 3' 말단에 폴리A 테일을 부가함으로써 mRNA 안정성을 촉진할 수 있고, 따라서 증가된 번역 효율에 기여한다. 재조합 전사체의 효율적인 폴리아데닐화는 폴리A 테일이 결여된 전사체가 불안정하고 신속하게 분해되기 때문에 바람직하다. 본원의 벡터에 사용될 수 있는 폴리A 신호의 예시적인 예는 이상적인 폴리A 서열 (예를 들어, AATAAA, ATTAAA, AGTAAA), 소 성장 호르몬 폴리A 서열 (BGHpA), 토끼 β-글로빈 폴리A 서열 (rβgpA), 또는 관련 기술분야에 공지된 또 다른 적합한 이종성 또는 내인성 폴리A 서열을 포함한다.
특정 구현예에서, 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터는 하나 이상의 절연체(insulator) 요소를 추가로 포함한다. 절연체 요소는 렌티바이러스-발현된 서열, 예를 들어 치료학적 폴리펩타이드를 통합 부위 효과(이는 게놈 DNA 중에 존재하는 시스-작용 요소들에 의해 매개되고 전달된 서열의 조절해제된 발현을 유도할 수 있음)(즉, 위치 효과; 예를 들어 Burgess-Beusse et al., 2002, Proc . Natl . Acad. Sci ., USA, 99:16433; 및 Zhan et al., 2001, Hum. Genet., 109:471 참조)로부터 보호하는 데 기여할 수 있다. 일부 구현예에서, 전사 벡터는 하나 이상의 절연체 요소 3' LTR을 포함하고, 프로바이러스를 숙주 게놈 내로 통합할 때, 프로바이러스는 3' LTR을 복제함으로써 5' LTR 또는 3' LTR 둘 다에서 하나 이상의 절연체를 포함한다. 본원에서 사용하기에 적합한 절연체는 치킨 β-글로빈 절연체를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다(Chung et al., 1993. Cell 74:505; Chung et al., 1997. PNAS 94:575; 및 Bell et al., 1999. Cell 98:387 참조, 본원에 참조로 포함됨). 절연체 요소의 예는 β-글로빈 유전자좌로부터의 절연체, 예컨대 치킨 HS4를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
특정 구체적인 구현예에 따르면, 바이러스 벡터 백본 서열의 대부분 또는 전부는 렌티바이러스, 예를 들어 HIV-1로부터 유래된다. 그러나, 레트로바이러스 및/또는 렌티바이러스 서열의 많은 상이한 공급원이 사용될 수 있거나, 또는 조합될 수 있고, 렌티바이러스 서열의 특정에서 다수의 치환 및 변경이 본원에 기재된 기능을 수행하는 전달 벡터의 능력을 손상시키지 않으면서 수용될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 더욱이, 다양한 렌티바이러스 벡터가 관련 기술분야에 공지되어 있고(Naldini et al., (1996a, 1996b, and 1998); Zufferey et al., (1997); Dull et al., 1998, 미국 특허 번호 6,013,516; 및 5,994,136 참조), 이들 중 다수는 본 개시내용의 바이러스 벡터 또는 전달 플라스미드를 생성하도록 적응될 수 있다.
다양한 구현예에서, 본원에 기재된 벡터는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된 프로모터를 포함할 수 있다. 벡터는 하나 이상의 LTR을 가질 수 있고, 여기서 LTR은 하나 이상의 변형, 예컨대 하나 이상의 뉴클레오타이드 치환, 부가 또는 결실을 포함한다. 벡터는 형질도입 효율을 증가시키기 위한 하나 이상의 부속 요소 (예를 들어, cPPT/FLAP), 바이러스 패키징 (예를 들어, Psi (Ψ) 패키징 신호, RRE), 및/또는 치료 유전자 발현을 증가시키는 다른 요소 (예를 들어, 폴리(A) 서열)를 추가로 포함할 수 있고, 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, 전달 벡터는 좌측 (5') 레트로바이러스 LTR; 중앙 폴리퓨린 트랙/DNA 플랩 (cPPT/FLAP); 레트로바이러스 배출 요소; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 및 우측 (3') 레트로바이러스 LTR; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함한다.
특정 구현예에서, 전달 벡터는 좌측 (5') 레트로바이러스 LTR; 레트로바이러스 배출 요소; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 우측 (3') 레트로바이러스 LTR; 및 폴리(A) 서열; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함한다. 또 다른 특정 구현예에서, 본원에서 제공되는 렌티바이러스 벡터는 좌측 (5') LTR; cPPT/FLAP; RRE; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 우측 (3') LTR; 및 폴리아데닐화 서열; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함한다.
특정 구현예에서, 본원은 좌측(5') HIV-1 LTR; Psi (ψ) 패키징 신호; cPPT/FLAP; RRE; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 작동 가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 우측(3') 자가-불활성화(SIN) HIV-1 LTR; 및 토끼 β-글로빈 폴리아데닐화 서열; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함하는 렌티바이러스 벡터를 제공한다.
또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 LTR; 중앙 폴리퓨린 트랙/DNA 플랩 (cPPT/FLAP); 레트로바이러스 배출 요소; 및 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함하는 벡터가 본원에서 제공된다.
특정 구현예에서, 적어도 하나의 LTR; cPPT/FLAP; RRE; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 및 폴리아데닐화 서열; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE를 포함하는 벡터가 본원에서 제공된다.
특정 구현예에서, 적어도 하나의 SIN HIV-1 LTR; Psi (Ψ) 패키징 신호; cPPT/FLAP; RRE; 본원에서 고려되는 CAR 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동가능하게 연결된, T 세포에서 활성인 프로모터; 및 토끼 β-글로빈 폴리아데닐화 서열; 및 임의로 WPRE 또는 HPRE가 본원에서 제공된다.
다양한 구현예에서, 벡터는 통합된 바이러스 벡터이다.
다른 다양한 구현예에서, 벡터는 에피솜(episomal) 또는 비-통합 바이러스 벡터이다.
다양한 구현예에서, 본원에서 고려되는 벡터는 비-통합 또는 통합 결함 레트로바이러스를 포함한다. 일 구현예에서, "통합 결함" 레트로바이러스 또는 렌티바이러스는 바이러스 게놈을 숙주 세포의 게놈 내로 통합하는 능력이 결여된 인테그라제를 갖는 레트로바이러스 또는 렌티바이러스를 지칭한다. 다양한 구현예에서, 인테그라제 단백질은 그의 인테그라제 활성을 특이적으로 감소시키도록 돌연변이된다. 통합-적격 렌티바이러스 벡터는 인테그라제 단백질을 코딩하는 폴 유전자를 변형시킴으로써 수득되어, 인테그라제 결핍 인테그라제를 코딩하는 돌연변이된 폴 유전자를 생성한다. 이러한 통합-적격 바이러스 벡터는 특허 출원 WO 2006/010834에 기재되어 있고, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
인테그라제 활성을 감소시키기에 적합한 HIV-1 폴 유전자에서의 예시적인 돌연변이는 H12N, H12C, H16C, H16V, S81 R, D41A, K42A, H51A, Q53C, D55V, D64E, D64V, E69A, K71A, E85A, E87A, D116N, D1161, D116A, N120G, N1201, N120E, E152G, E152A, D35E, K156E, K156A, E157A, K159E, K159A, K160A, R166A, D167A, E170A, H171A, K173A, K186Q, K186T, K188T, E198A, R199c, R199T, R199A, D202A, K211A, Q214L, Q216L, Q221 L, W235F, W235E, K236S, K236A, K246A, G247W, D253A, R262A, R263A 및 K264H를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
인테그라제 활성을 감소시키기에 적합한 HIV-1 폴 유전자에서의 예시적인 돌연변이는 D64E, D64V, E92K, D116N, D1161, D116A, N120G, N1201, N120E, E152G, E152A, D35E, K156E, K156A, E157A, K159E, K159A, W235F, 및 W235E를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
특정 구현예에서, 인테그라제는 아미노산 D64, D116 또는 E152 중 하나 이상에 돌연변이를 포함한다. 일 구현예에서, 인테그라제는 아미노산 D64, D116 및 E152에 돌연변이를 포함한다. 특정 구현예에서, 결손 HIV-1 인테그라제는 D64V 돌연변이를 포함한다.
"숙주 세포"는 본원에 개시된 재조합 벡터 또는 폴리뉴클레오타이드로 전기천공되거나, 형질감염되거나, 감염되거나, 생체내, 생체외, 또는 시험관내에서 형질도입된 세포를 포함한다. 숙주 세포는 패키징 세포, 생산자 세포, 및 바이러스 벡터로 감염된 세포를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에 개시된 바이러스 벡터로 감염된 숙주 세포는 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여된다. 특정 구현예에서, 용어 "표적 세포"는 숙주 세포와 상호교환적으로 사용되고, 목적하는 세포 유형의 형질감염되거나, 감염되거나, 또는 형질도입된 세포를 지칭한다. 특정 구현예에서, 표적 세포는 T 세포이다.
합리적인 바이러스 역가를 달성하기 위해 대규모 바이러스 입자 생산이 종종 필요하다. 바이러스 입자는 바이러스 구조 및/또는 부속 유전자, 예를 들어, gag, pol, env, tat, rev, vif, vpr, vpu, vpx, 또는 nef 유전자 또는 다른 레트로바이러스 유전자를 포함하는 패키징 세포주에 전달 벡터를 형질감염시킴으로써 생산된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "패키징 벡터"는 패키징 신호가 결여되고 1개, 2개, 3개, 4개 또는 그 초과의 바이러스 구조적 및/또는 보조 유전자를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 발현 벡터 또는 바이러스 벡터를 지칭한다. 전형적으로, 패키징 벡터는 패키징 세포에 포함되고, 형질감염, 형질도입 또는 감염을 통해 세포 내로 도입된다. 형질감염, 형질도입 또는 감염을 위한 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 널리 공지되어 있다. 본원에 개시된 레트로바이러스/렌티바이러스 전달 벡터는 형질감염, 형질도입 또는 감염을 통해 패키징 세포주 내로 도입되어 생산자 세포 또는 세포주를 생성할 수 있다. 본원에 개시된 패키징 벡터는 예를 들어 칼슘 포스페이트 형질감염, 리포펙션 또는 전기천공을 포함하는 표준 방법에 의해 인간 세포 또는 세포주 내로 도입될 수 있다. 일부 구현예에서, 패키징 벡터는 우성 선택 마커, 예컨대 네오마이신, 하이그로마이신, 퓨로마이신, 블라스토시딘, 제오신, 티미딘 키나제, DHFR, Gln 신테타제 또는 ADA와 함께 세포 내로 도입되고, 이어서 적절한 약물의 존재 하에 선택되고 클론의 단리를 수행한다. 선택 마커 유전자는 패키징 벡터에 의해, 예를 들어 IRES 또는 자가-절단 바이러스 펩타이드에 의해 코딩되는 유전자에 물리적으로 연결될 수 있다.
바이러스 외피 단백질(env)은 세포주로부터 생성된 재조합 레트로바이러스에 의해 궁극적으로 감염 및 형질전환될 수 있는 숙주 세포의 범위를 결정한다. HIV-1, HIV-2, SIV, FIV 및 EIV와 같은 렌티바이러스의 경우에, env 단백질은 gp41 및 gp120을 포함한다. 바람직하게는, 본원에 개시된 패키징 세포에 의해 발현된 바이러스 env 단백질은 이전에 기재된 바와 같이, 바이러스 gag 및 pol 유전자로부터 별개의 벡터 상에 코딩된다.
본원에서 사용될 수 있는 레트로바이러스-유래된 env 유전자의 예시적인 예는 MLV 외피, 10A1 외피, BAEV, FeLV-B, RD114, SSAV, Ebola, Sendai, FPV (Fowl plague virus), 및 인플루엔자 바이러스 외피를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 유사하게, RNA 바이러스(예를 들어 피코르나비리다에, 칼시비리다에, 아스트로비리다에, 토가비리다에, 플라비비리다에, 코로나비리다에, 파라믹소비리다에, 라브도비리다에, 필로비리다에, 오쏘믹소비리다에, 분야비리다에, 아레나비리다에, 레오비리다에, 비르나비리다에, 레트로비리다에의 RNA 바이러스 과)뿐만 아니라 DNA 바이러스(헤파드나비리다에, 시르코비리다에, 파르보비리다에, 파포바비리다에, 아데노비리다에, 헤르페스 비리다에, 폭시리다에, 및 이리도비리다에 과)로부터의 외피를 암호화하는 유전자가 사용될 수 있다. 대표적인 예는 FeLV, VEE, HFVW, WDSV, SFV, 광견병(Rabies), ALV, BIV, BLV, EBV, CAEV, SNV, ChTLV, STLV, MPMV, SMRV, RAV, FuSV, MH2, AEV, AMV, CT10, 및 EIAV를 포함한다.
본 발명의 바이러스를 슈도타이핑(pseudotyping)하기 위한 외피 단백질은 하기의 바이러스 중 임의의 것을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다: 인플루엔자 A, 예컨대 H1N1, H1N2, H3N2 및 H5N1(조류독감), 인플루 엔자 B, 인플루엔자 C 바이러스, A형 간염 바이러스, B형 간염 바이러스, C형 간염 바이러스, D형 간염 바이러스, E형 간염 바이러스, 로타바이러스, 노로 바이러스 군의 임의의 바이러스, 장 아데노바이러스, 파르보바이러스, 뎅기열 바이러스, 원숭이 두창, 모노네가바이러스, 리사바이러스, 예를 들어 광견병 바이러스, 라고스 박쥐 바이러스, 모콜라 바이러스, 듀벤헤이즈 바이러스, 유럽 박쥐 바이러스 1 & 2 및 호주 박쥐 바이러스, 에페메로바이러스, 수포성 바이러스, 수포성 구내염 바이러스(VSV), 헤르페스바이러스, 예를 들어 헤르페스 단순 바이러스 1형 및 2형, 수두 대상포진, 거대세포바이러스, 엡스타인-바 바이러스(EBV), 인간 헤르페스바이러스(HHV), 인간 헤르페스바이러스 6형 및 8형, 인간 면역결핍 바이러스(HIV), 유두종 바이러스, 뮤린 감마헤르페스바이러스, 아레나바이러스, 예를 들어 아르헨티나 출혈열 바이러스, 볼리비아 출혈열 바이러스, 사비아-관련 출혈열 바이러스, 베네수엘라 출혈열 바이러스, 라싸열 바이러스, 마추포바이러스, 림프구성 맥락수막염 바이러스(LCMV), 분야비리다에, 예를 들어 크리미안-콩고 출혈열 바이러스, 한타바이러스, 신장 증후군 유발 바이러스에 의한 출혈열, 리프트밸리열 바이러스, 에볼라 출혈열 및 마르부르크 출혈열을 포함한 필로비리다에(필로바이러스), 카이사누르 포레스트병 바이러스를 포함한 플라비비리다에, Omsk 출혈열 바이러스, 진드기-매개 뇌염 유발 바이러스 및 파라믹소비리다에, 예를 들어 헨드라 바이러스 및 니파 바이러스, 대두창 및 소두창(천연두), 알파 바이러스, 예를 들어 베네수엘라 말 뇌염 바이러스, 동부 말 뇌염 바이러스, 서부 말 뇌염 바이러스, SARS-관련 코로나바이러스(SARS-CoV), 서나일 바이러스(West Nile virus), 임의의 뇌염 유발 바이러스.
일 구현예에서, 본원은 VSV-G 당단백질로 위형화된 재조합 레트로바이러스, 예를 들어, 렌티바이러스를 생산하는 패키징 세포를 제공한다.
본원에 사용된 용어 "슈도타입(pseudotype)" 또는 "슈도타이핑(pseudotyping)"은 바이러스 외피 단백질이 바람직한 특징을 보유하는 또 다른 바이러스로 치환된 바이러스를 지칭한다. 예를 들어, HIV는 소포성 구내염 바이러스 G-단백질(VSV-G) 외피 단백질로 슈도타입화될 수 있으며, 이는 HIV 외피 단백질(env 유전자에 의해 인코딩됨)이 일반적으로 바이러스를 CD4+ 제시 세포에 표적화하기 때문에 더 넓은 범위의 세포를 감염시킬 수 있게 한다. 일 구현예에서, 렌티바이러스 외피 단백질은 VSV-G로 슈도타입화된다. 일 구현예에서, VSV-G 외피 당단백질로 슈도타입화된 재조합 레트로바이러스, 예를 들어 렌티바이러스를 생산하는 패키징 세포가 본원에 제공된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "패키징 세포주"는 패키징 신호를 함유하지 않지만 바이러스 입자의 정확한 패키징에 필요한 바이러스 구조 단백질 및 복제 효소(예를 들어, gag, pol 및 env)를 안정적으로 또는 일시적으로 발현하는 세포주를 지칭하는 데 사용된다. 임의의 적합한 세포주는 본 개시내용과 관련하여 패키징 세포를 제조하는 데 사용될 수 있다. 일반적으로, 세포는 포유동물 세포이다. 특정 구현예에서, 패키징 세포주를 생산하는데 사용되는 세포는 인간 세포이다. 사용될 수 있는 적합한 세포주는, 예를 들어, CHO 세포, BHK 세포, MDCK 세포, C3H 10T1/2 세포, FLY 세포, Psi-2 세포, BOSC 23 세포, PA317 세포, WEHI 세포, COS 세포, BSC 1 세포, BSC 40 세포, BMT 10 세포, VERO 세포, W138 세포, MRC5 세포, A549 세포, HT1080 세포, 293 세포, 293T 세포, B-50 세포, 3T3 세포, NIH3T3 세포, HepG2 세포, Saos-2 세포, Huh7 세포, HeLa 세포, W163 세포, 211 세포 및 211A 세포를 포함한다. 구체적인 구현예에서, 패키징 세포는 293 세포, 293T 세포 또는 A549 세포이다. 또 다른 구체적인 구현예에서, 세포는 A549 세포이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "생산 세포주"는 패키징 세포주를 포함하는 재조합 레트로바이러스 입자를 생산할 수 있는 세포주 및 패키징 신호를 포함하는 전달 벡터 구조체를 지칭한다. 감염성 바이러스 입자 및 바이러스 스톡 용액의 생산은 통상적인 기술을 사용하여 수행될 수 있다. 바이러스 스톡 용액을 제조하는 방법은 당해 분야에 공지되어 있고, 예를 들어, Y. Soneoka et al. (1995) Nucl . Acids Res. 23:628-633, and N. R. Landau et al. (1992) J. Virol. 66:5110-5113에 예시되어 있다. 감염성 바이러스 입자는 통상적인 기술을 사용하여 패키징 세포로부터 수집될 수 있다. 예를 들면, 감염성 입자는 당해 분야에 공지된 바와 같이 세포 용해에 의해, 또는 세포 배양물의 상등액의 수집에 의해 수집될 수 있다. 임의로, 수집된 바이러스 입자는 원하는 경우 정제될 수 있다. 적합한 정제 기술은 당해 분야의 숙련가에게 널리 공지되어 있다.
형질감염보다는 바이러스 감염에 의한 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터를 이용한 유전자(들) 또는 다른 폴리뉴클레오타이드 서열의 전달은 "형질도입"으로 지칭된다. 레트로바이러스 벡터는 감염 및 프로바이러스 통합을 통해 세포 내로 형질도입된다. 특정 구현예에서, 표적 세포, 예를 들어 T 세포는 바이러스 또는 레트로바이러스 벡터를 이용한 감염에 의해 세포에 전달된 유전자 또는 다른 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 경우에 "형질도입"된다. 특정 구현예에서, 형질도입된 세포는 그의 세포 게놈에서 레트로바이러스 또는 렌티바이러스 벡터에 의해 전달된 하나 이상의 유전자 또는 다른 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.
특정 구현예에서, 하나 이상의 폴리펩타이드를 발현하는 본원에 개시된 바와 같은 바이러스 벡터로 형질도입된 숙주 세포는 B 세포 악성종양을 치료 및/또는 예방하기 위해 대상체에게 투여된다. 본원의 특정 구현예에 따라 이용될 수 있는 유전자 요법에서 바이러스 벡터의 사용에 관한 다른 방법은 예를 들어, Kay, M. A. (1997) Chest 111(6 Supp.):138S-142S; Ferry, N. and Heard, J. M. (1998) Hum. Gene Ther. 9:1975-81; Shiratory, Y. et al. (1999) Liver 19:265-74; Oka, K. et al. (2000) Curr . Opin . Lipidol. 11:179-86; Thule, P. M. and Liu, J. M. (2000) Gene Ther. 7:1744-52; Yang, N. S. (1992) Crit . Rev. Biotechnol. 12:335-56; Alt, M. (1995) J. Hepatol. 23:746-58; Brody, S. L. and Crystal, R. G. (1994) Ann. N.Y . Acad . Sci. 716:90-101; Strayer, D. S. (1999) Expert Opin . Investig . Drugs 8:2159-2172; Smith-Arica, J. R. and Bartlett, J. S. (2001) Curr . Cardiol. Rep. 3:43-49; 및 Lee, H. C. et al. (2000) Nature 408:483-8에서 찾아볼 수 있다.
5.6. 유전자 변형된 세포
특정 구현예에서, 본원에는 B 세포 관련 병태의 치료에 사용하기 위한, 본원에서 고려되는 CAR을 발현하도록 유전적으로 변형된 세포가 개시된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "유전적으로 조작된" 또는 "유전적으로 변형된"은 세포 내의 전체 유전적 물질 내로의 DNA 또는 RNA 형태의 여분의 유전적 물질의 첨가를 지칭한다. 용어 "유전적으로 변형된 세포", "변형된 세포" 및 "재지향된 세포"는 상호교환적으로 사용된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "유전자 요법"은 유전자의 발현을 회복, 교정 또는 변형시키거나, 또는 치료적 폴리펩타이드, 예를 들어 CAR을 발현하기 위한 목적으로 세포 내의 전체 유전적 물질 내로의 DNA 또는 RNA 형태의 여분의 유전적 물질의 도입을 지칭한다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR은 목적 표적 항원, 예를 들어 BCMA 폴리펩타이드에 대한 그의 특이성을 재지향시키기 위해 면역 이펙터 세포에서 도입되고 발현된다. "면역 이펙터 세포"는 하나 이상의 이펙터 기능(예를 들어, 세포독성 세포 사멸 활성, 사이토카인의 분비, ADCC 및/또는 CDC의 유도)을 갖는 면역계의 임의의 세포이다.
본 발명의 면역 이펙터 세포는 자가유래성/자가성("자가") 또는 비-자가유래성("비-자가", 예를 들어 동종이계, 동계 또는 이종)일 수 있다.
본원에서 사용된 "자가유래성(Autologous)"은 동일한 대상체로부터의 세포를 지칭한다.
본원에서 사용된 "동종이계(Allogeneic)"는 비교 세포와 유전학적으로 상이한 동일한 종의 세포를 지칭한다.
본원에서 사용된 "동계(Syngeneic)"는 비교 세포와 유전학적으로 일치하는 상이한 대상체의 세포를 지칭한다.
본원에서 사용된 "이종(Xenogeneic)"은 비교 세포와 상이한 종의 세포를 지칭한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 세포는 동종이계이다.
본원에서 고려되는 CAR와 함께 사용되는 예시적인 면역 이펙터 세포는 T 림프구를 포함한다. 용어 "T 세포" 또는 "T 림프구"는 당업계에 공지되어 있고, 흉선세포, 미성숙 T 림프구, 성숙 T 림프구, 휴지 T 림프구, 또는 활성화된 T 림프구를 포함하는 것으로 의도된다. T 세포는 T 헬퍼 (Th) 세포, 예를 들어 T 헬퍼 1 (Th1) 또는 T 헬퍼 2 (Th2) 세포일 수 있다. T 세포는 헬퍼 T 세포 (HTL; CD4+ T 세포) CD4+ T 세포, 세포독성 T 세포 (CTL; CD8+ T 세포), CD4+CD8+ T 세포, CD4-CD8- T 세포, 또는 T 세포의 임의의 다른 서브세트일 수 있다. 특정 구현예에서 사용하기에 적합한 T 세포의 다른 예시적인 집단은 나이브 T 세포 및 기억 T 세포를 포함한다.
당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 다른 세포가 또한 본원에 기재된 바와 같은 CAR을 갖는 면역 이펙터 세포로서 사용될 수 있다. 특히, 면역 이펙터 세포는 또한 NK 세포, NKT 세포, 호중구 및 대식세포를 포함한다. 면역 이펙터 세포는 또한 이펙터 세포의 선조체를 포함하며, 여기서 이러한 선조체 세포는 생체내 또는 시험관내에서 면역 이펙터 세포로 분화하도록 유도될 수 있다. 따라서, 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 대상체에서 투여 시 성숙한 면역 이펙터 세포로 분화하거나 또는 성숙한 면역 이펙터 세포로 분화하도록 시험관내에서 유도될 수 있는 면역 이펙터 세포의 선조체, 예컨대 제대혈, 골수 또는 동원된 말초 혈액으로부터 유래된 세포의 CD34+ 집단 내에 함유된 조혈 줄기 세포 (HSC)를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, BCMA-특이적 CAR를 포함하도록 유전적으로 조작된 면역 이펙터 세포는 "BCMA-특이적 재지시된 면역 이펙터 세포"로 지칭될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "CD34+ 세포"는 그의 세포 표면 상에 CD34 단백질을 발현하는 세포를 지칭한다. 본원에 사용된 "CD34"는 종종 세포-세포 부착 인자로서 작용하고 림프절로의 T 세포 진입에 관여하는 세포 표면 당단백질 (예를 들어, 시알로뮤신 단백질)을 지칭한다. CD34+ 세포 집단은 조혈 줄기 세포 (HSC)를 함유하며, 이는 환자에게 투여 시 T 세포, NK 세포, NKT 세포, 호중구 및 단핵구/대식세포 계통의 세포를 포함하여, 모든 조혈 계통에 분화 및 기여한다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR을 발현하는 면역 이펙터 세포를 제조하는 방법이 본원에서 제공된다. 일 구현예에서, 방법은 면역 이펙터 세포가 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 CAR을 발현하도록 개체로부터 단리된 면역 이펙터 세포를 형질감염 또는 형질도입하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 개체로부터 단리되고, 시험관내 추가의 조작 없이 유전자 변형된다. 이어서, 이러한 세포는 직접적으로 개체 내로 재-투여될 수 있다. 추가 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 먼저 CAR을 발현하도록 유전자 변형되기 전에 시험관내에서 증식하도록 활성화 및 자극된다. 이와 관련하여, 면역 이펙터 세포는 유전자 변형되기 전 및/또는 후에 배양될 수 있다 (즉, 본원에서 고려되는 CAR을 발현하도록 형질도입 또는 형질감염됨).
특정 구현예에서, 본원에 기재된 면역 이펙터 세포의 시험관내 조작 또는 유전적 변형 전에, 세포의 공급원은 대상체로부터 수득된다. 특정 구현예에서, CAR-변형된 면역 이펙터 세포는 T 세포를 포함한다. T 세포는 말초 혈액 단핵 세포, 골수, 림프절 조직, 제대혈, 흉선 문제, 감염 부위로부터의 조직, 복수, 흉막 삼출물, 비장 조직, 및 종양을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다수의 공급원으로부터 수득될 수 있다. 특정 구현예에서, T 세포는 당업자에게 공지된 임의의 다수의 기술, 예컨대 침강, 예를 들어 FICOLLTM 분리를 사용하여 대상체로부터 수집된 혈액의 단위로부터 수득될 수 있다. 일 구현예에서, 개체의 순환 혈액으로부터의 세포는 성분채집술에 의해 수득된다. 성분채집술 생성물은 전형적으로 림프구, 예컨대 T 세포, 단핵구, 과립구, B 세포, 다른 유핵 백혈구, 적혈구 및 혈소판을 함유한다. 일 구현예에서, 성분채집술에 의해 수집된 세포는 혈장 분획을 제거하고 세포를 후속 처리를 위해 적절한 완충제 또는 배지에 위치시키기 위해 세척될 수 있다. 세포는 PBS로 또는 칼슘, 마그네슘, 및 대부분은 모든 다른 2가 양이온이 없는 또 다른 적합한 용액으로 세척될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인식되는 바와 같이, 세척 단계는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해, 예컨대 반자동 유동 관통 원심분리를 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, Cobe 2991 세포 프로세서, Baxter CytoMate 등. 세척 후에, 세포는 완충제와 함께 또는 완충제 없이 다양한 생체적합성 완충제 또는 다른 염수 용액에 재현탁될 수 있다. 특정 구현예에서, 성분채집술 샘플의 바람직하지 않은 성분은 직접적으로 재현탁된 배양 배지에서 제거될 수 있다.
특정 구현예에서, T 세포는 적혈구를 용해시키고 단핵구를 고갈시킴으로써, 예를 들어 PERCOLLTM 구배를 통한 원심분리에 의해 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)로부터 단리된다. CD3, CD28, CD4, CD8, CD45RA, 및 CD45RO 중 하나 이상의 마커를 발현하는 T 세포의 특이적 하위집단은 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리될 수 있다. 일 구현예에서, CD3, CD28, CD4, CD8, CD45RA, 및 CD45RO를 발현하는 T 세포의 특이적 하위집단은 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리된다. 예를 들어, 음성 선택에 의한 T 세포 집단의 농축은 음성 선택된 세포에 특유한 표면 마커에 대해 지시된 항체의 조합으로 달성될 수 있다. 본원에 사용하기 위한 한 방법은 음성 선택된 세포 상에 존재하는 세포 표면 마커에 대해 지시된 모노클로날 항체의 칵테일을 사용하는 음성 자기 면역부착 또는 유동 세포측정법을 통한 세포 분류 및/또는 선택이다. 예를 들어, 음성 선택에 의해 CD4+ 세포를 농축하기 위해, 모노클로날 항체 칵테일은 통상적으로 CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR 및 CD8에 대한 항체를 포함한다. 유동 세포측정법 및 세포 분류는 또한 본 개시내용에 따라 사용하기 위한 목적 세포 집단을 단리하는 데 사용될 수 있다.
PBMC는 본원에서 고려되는 방법을 사용하여 CAR를 발현하도록 유전적으로 직접적으로 변형될 수 있다. 특정 구현예에서, PBMC의 단리 후, T 림프구는 추가로 단리되고, 특정 구현예에서, 세포독성 및 헬퍼 T 림프구 둘 다는 유전적 변형 및/또는 증폭 전 또는 후에 나이브, 기억 및 이펙터 T 세포 하위집단으로 분류될 수 있다.
CD8+세포는 표준 방법을 사용하여 수득할 수 있다. 일부 구현예에서, CD8+ 세포는 각각의 유형의 CD8+ 세포와 관련된 세포 표면 항원을 확인함으로써 나이브(naive), 중앙 기억(central memory) 및 이펙터(effector) 세포로 추가로 분류된다.
특정 구현예에서, 나이브 CD8+ T 림프구는 CD62L, CCR7, CD28, CD3, CD127 및 CD45RA를 포함하는 나이브 T 세포의 표현형 마커의 발현을 특징으로 한다.
특정 구현예에서, 기억 T 세포는 CD8+ 말초 혈액 림프구의 CD62L+ 및 CD62L- 서브세트 모두에 존재한다. PBMC는 항-CD8 및 항-CD62L 항체로 염색한 후 CD62L-CD8+ 및 CD62L+CD8+ 분획으로 분류된다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 T 세포의 표현형 마커의 발현은 CD45RO, CD62L, CCR7, CD28, CD3, 및 CD127을 포함하고, 그랜자임 B에 대해 음성이다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 T 세포는 CD45RO+, CD62L+, CD8+ T 세포이다.
일부 구현예에서, 이펙터 T 세포는 CD62L, CCR7, CD28, 및 CD127에 대해 음성이고, 그랜자임 B 및 퍼포린에 대해 양성이다.
특정 구현예에서, CD4+ T 세포는 하위집단으로 추가로 분류된다. 예를 들어, CD4+ T 헬퍼 세포는 세포 표면 항원을 갖는 세포의 집단을 식별하여 나이브, 중앙 기억 및 이펙터 세포로 분류될 수 있다. CD4+ 림프구는 표준 방법으로 수득될 수 있다. 일부 구현예에서, 나이브 CD4+ T 림프구는 CD45RO-, CD45RA+, CD62L+, CD4+ T 세포이다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 CD4+ 세포는 CD62L 양성 및 CD45RO 양성이다. 일부 구현예에서, 이펙터 CD4+ 세포는 CD62L 및 CD45RO 음성이다.
면역 이펙터 세포, 예컨대 T 세포는 공지된 방법을 사용한 단리 후에 유전적으로 변형될 수 있거나, 또는 면역 이펙터 세포는 유전적으로 변형되기 전에 시험관내에서 활성화 및 증폭 (또는 전구의 경우에 분화)될 수 있다. 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포, 예컨대 T 세포는 본원에서 고려되는 키메라 항원 수용체 (예를 들어, CAR을 코딩하는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터로 형질도입됨)로 유전적으로 변형되고, 이어서 시험관내에서 활성화 및 증폭된다. 다양한 실시예에서, T 세포는, 예를 들어 미국 특허 6,352,694; 6,534,055; 6,905,680; 6,692,964; 5,858,358; 6,887,466; 6,905,681 ; 7, 144,575; 7,067,318; 7, 172,869; 7,232,566; 7, 175,843; 5,883,223; 6,905,874; 6,797,514; 6,867,041; 및 미국 특허 출원 공개 제20060121005호에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여, CAR을 발현시키기 위한 유전자 변형 전 또는 후에 활성화 및 증폭될 수 있다.
일반적으로, T 세포는 CD3 TCR 복합체 관련 신호를 자극하는 작용제 및 T 세포의 표면 상의 공자극 분자를 자극하는 리간드가 부착된 표면과 접촉함으로써 증폭된다. T 세포 집단은 항-CD3 항체, 또는 그의 항원-결합 단편, 또는 표면 상에 고정된 항-CD2 항체, 또는 칼슘 이온영동과 함께 단백질 키나제 C 활성화제 (예를 들어, 브리오스타틴)와의 접촉에 의해 자극될 수 있다. T 세포의 표면 상의 보조 분자의 공자극이 또한 고려된다.
특정 구현예에서, PBMC 또는 단리된 T 세포는 적절한 사이토카인, 예컨대 IL-2, IL-7 및/또는 IL-15를 갖는 배양 배지에서 일반적으로 비드 또는 다른 표면에 부착된 자극제 및 공자극제, 예컨대 항-CD3 및 항-CD28 항체와 접촉된다. CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포의 증식을 자극하기 위해, 항-CD3 항체 및 항-CD28 항체가 있다. 항-CD28 항체의 예는 9.3, B-T3, XR-CD28 (Diacione, Besancon, France)을 포함하며 당해 분야에 통상적으로 공지된 다른 방법으로서 사용할 수 있다(Berg et al., Transplant Proc. 30(8):3975-3977, 1998; Haanen et al., J. Exp . Med. 190(9): 13191328, 1999; Garland et al., J. Immunol Meth. 227(1 -2):53-63, 1999). 동일한 비드에 부착된 항-CD3 및 항-CD28 항체는 "대리" 항원 제시 세포 (APC)로서 작용한다. 다른 구현예에서, T 세포는 활성화되고 자극되어 피더 세포 및 적절한 항체 및 사이토카인, 예컨대 US6040177; US5827642; 및 WO2012129514에 기재된 방법을 사용하여 증식할 수 있다.
다른 구현예에서, K562, U937, 721.221, T2, 및 C1R 세포를 조작하여 다양한 공자극 분자 및 사이토카인의 안정한 발현 및 분비를 유도함으로써 제조된 인공 APC (aAPC)가 있다. 특정 구현예에서, K32 또는 U32 aAPC는 AAPC 세포 표면 상에 하나 이상의 항체-기반 자극 분자의 디스플레이를 유도하는 데 사용된다. aAPC 상의 유전자의 다양한 조합의 발현은 인간 T-세포 활성화 요건의 정밀한 결정을 가능하게 하여, aAPC가 특정 성장 요건 및 별개의 기능을 갖는 T-세포 서브세트의 최적의 증식에 맞춰질 수 있도록 한다. aAPC는 천연 APC의 사용과 대조적으로, 외인성 사이토카인의 첨가를 필요로 하지 않으면서 기능성 인간 CD8 T 세포의 생체외 성장 및 장기 증폭을 지지한다. T 세포의 집단은 CD137L (4-1BBL), CD134L (OX40L), 및/또는 CD80 또는 CD86을 포함하지만 이에 제한되지는 않는 다양한 공자극 분자를 발현하는 aAPC에 의해 증폭될 수 있다. 마지막으로, aAPC는 유전자 변형된 T 세포를 증폭시키고 CD8 T 세포 상에서 CD28 발현을 유지하기 위한 효율적인 플랫폼을 제공한다. WO 03/057171 및 US2003/0147869에서 제공된 aAPC는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
일 구현예에서, CD34+ 세포는 본 개시내용에 따른 핵산 구조체로 형질도입된다. 특정 구현예에서, 형질도입된 CD34+ 세포는 대상체, 일반적으로 세포를 원래 단리한 대상체에게 투여한 후 생체내에서 성숙한 면역 이펙터 세포로 분화한다. 또 다른 구현예에서, CD34+ 세포는 본원에 기재된 바와 같은 CAR로 유전적으로 변형된 후 또는 그에 대한 노출 전에 상기에 기술된 방법(Asheuer et al., 2004, PNAS 101(10):3557-3562; Imren, et al., 2004)에 따라 하기의 사이토카인 중 하나 이상으로 시험관내 자극될 수 있다: Flt-3 리간드(FLT3), 줄기세포 인자(SCF), 거핵세포(megakaryocyte) 성장 및 분화 인자(TPO), IL-3 및 IL-6.
특정 구현예에서, 암 치료를 위한 변형된 면역 이펙터 세포의 집단이 본원에 제공되며, 변형된 면역 이펙터 세포는 본원에 개시된 바와 같은 CAR을 포함한다. 예를 들어, 변형된 면역 이펙터 세포의 집단은 본원에 기재된 B 세포 악성종양 (자가 공여자)으로 진단된 환자로부터 수득된 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)로부터 제조된다. PBMC는 CD4+, CD8+, 또는 CD4+ 및 CD8+일 수 있는 T 림프구의 이종 집단을 형성한다.
PBMC는 또한 다른 세포독성 림프구, 예컨대 NK 세포 또는 NKT 세포를 포함할 수 있다. 본원에서 고려되는 CAR의 코딩 서열을 보유하는 발현 벡터는 인간 공여자 T 세포, NK 세포 또는 NKT 세포의 집단 내로 도입될 수 있다. 발현 벡터를 보유하는 성공적으로 형질도입된 T 세포는 CD3 양성 T 세포를 단리하기 위해 유동 세포측정법을 사용하여 분류될 수 있고, 이어서 항-CD3 항체 및 또는 항-CD28 항체 및 IL-2 또는 본원의 다른 곳에 기재된 바와 같은 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 방법을 사용한 세포 활성화에 더하여 이들 CAR 단백질 발현 T 세포의 수를 증가시키기 위해 추가로 전파될 수 있다. 표준 절차는 인간 대상체에서 사용하기 위한 저장 및/또는 제조를 위해 CAR 단백질 T 세포를 발현하는 T 세포의 동결보존을 위해 사용된다. 일 구현예에서, T 세포의 시험관내 형질도입, 배양 및/또는 증폭은 비-인간 동물 유래 생성물, 예컨대 태아 혈청 및 소 태아 혈청의 부재 하에 수행된다. PBMC의 이종 집단이 유전자 변형되기 때문에, 생성된 형질도입된 세포는 본원에서 고려되는 바와 같은 BCMA 표적화 CAR을 포함하는 변형된 세포의 이종 집단이다.
추가 구현예에서, 예를 들어, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 그 초과의 상이한 발현 벡터의 혼합물이 면역 이펙터 세포의 공여자 집단을 유전자 변형시키는 데 사용될 수 있으며, 여기서 각각의 벡터는 본원에서 고려되는 바와 같은 상이한 키메라 항원 수용체 단백질을 코딩한다. 생성된 변형된 면역 이펙터 세포는 변형된 세포의 혼합 집단을 형성하며, 변형된 세포의 비율은 1개 초과의 상이한 CAR 단백질을 발현하는 것이다.
일 구현예에서, BCMA 단백질을 표적으로 하는 유전적으로 변형된 뮤린, 인간 또는 인간화된 CAR 단백질 발현 면역 이펙터 세포를 보관하는 방법이 본원에서 제공되며, 상기 방법은 상기 면역 이펙터 세포를 동결보존하여 상기 세포가 해동시 생존가능하게 유지되도록 하는 것을 포함한다. CAR 단백질을 발현하는 면역 이펙터 세포의 분획은 B 세포 관련 병태로 고통받는 환자의 미래의 치료를 위해 이러한 세포의 영구적 공급원을 제공하기 위해 당해 분야에 공지된 방법에 의해 동결보존될 수 있다. 필요한 경우, 상기 동결보존된 형질전환된 면역 이펙터 세포는 더 많은 이러한 세포에 대해 해동, 성장 및 증폭될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "동결보존(cryopreserving)"은 영하의 온도, 예컨대 (전형적으로) 77 K 또는 -196°C (액체 질소의 비점)로의 냉각에 의한 세포의 보존을 지칭한다. 동결보호제는 종종 영하의 온도에서 사용되어 저온에서의 동결 또는 실온으로의 가온으로 인해 세포가 손상되는 것을 방지한다. 동결보존제 및 최적의 냉각 속도는 세포 손상으로부터 보호할 수 있다. 사용될 수 있는 동결보호제는 디메틸 설폭사이드 (DMSO) (Lovelock and Bishop, Nature, 1959; 183: 1394-1395; Ashwood-Smith, Nature, 1961; 190: 1204-1205), 글리세롤, 폴리비닐피롤리돈 (Rinfret, Ann N.Y. Acad. Sci., 1960; 85: 576), 및 폴리에틸렌 글리콜 (Sloviter 및 Ravdin, Nature, 1962; 196: 48)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 바람직한 냉각 속도는 1° 내지 3° C/분이다. 적어도 2시간 후, T 세포는 -80°C의 온도에 도달하였고, 장기간 극저온 저장 용기에서와 같은 영구 저장을 위해 액체 질소 (-196°C)에 직접 배치될 수 있다.
5.7. T 세포 제조 공정
본원에서 고려되는 방법에 의해 제조된 T 세포는 개선된 입양 면역요법 조성물을 제공한다. 임의의 특정 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 본원에서 고려되는 방법에 의해 제조된 T 세포 조성물은 증가된 생존, 분화의 상대적 부재에서의 증폭, 및 생체내 지속성을 비롯한 우수한 특성을 갖는 것으로 여겨진다. 일 구현예에서, T 세포를 제조하는 방법은 세포를 PI3K 세포 신호전달 경로를 조절하는 하나 이상의 작용제와 접촉시키는 것을 포함한다. 일 구현예에서, T 세포를 제조하는 방법은 세포를 PI3K/Akt/mTOR 세포 신호전달 경로를 조절하는 하나 이상의 작용제와 접촉시키는 것을 포함한다. 다양한 구현예에서, T 세포는 임의의 공급원으로부터 수득될 수 있고, 제조 공정의 활성화 및/또는 증폭 단계 동안 작용제와 접촉될 수 있다. 생성된 T 세포 조성물은 하기 바이오마커: CD62L, CCR7, CD28, CD27, CD122, CD127, CD197, 및 CD38 중 하나 이상을 증식 및 발현하는 능력을 갖는 발달적으로 강력한 T 세포가 농축되어 있다. 일 구현예에서, 하나 이상의 PI3K 억제제로 처리된 T 세포를 포함하는 세포 집단은 하기 바이오마커: CD62L, CD127, CD197, 및 CD38 중 하나 이상 또는 전부를 공동-발현하는 CD8+ T 세포의 집단에 대해 농축된다.
일 구현예에서, 증식이 유지되고 분화가 감소된 변형된 T 세포가 제조된다. 특정 구현예에서, T 세포는 하나 이상의 자극 신호 및 PI3K 세포 신호전달 경로의 억제제인 제제의 존재 하에 활성화되고 증식하도록 T 세포를 자극함으로써 제조된다.
이어서, T 세포는 항-BCMA CAR을 발현하도록 변형될 수 있다. 일 구현예에서, T 세포는 본원에서 고려되는 항-BCMA CAR을 포함하는 바이러스 벡터로 T 세포를 형질도입함으로써 변형된다. 특정 구현예에서, T 세포는 PI3K 세포 신호전달 경로의 억제제의 존재 하에 자극 및 활성화 전에 변형된다. 또 다른 구현예에서, T 세포는 PI3K 세포 신호전달 경로의 억제제의 존재 하에 자극 및 활성화 후에 변형된다. 특정 구현예에서, T 세포는 PI3K 세포 신호전달 경로의 억제제의 존재 하에 자극 및 활성화의 12시간, 24시간, 36시간 또는 48시간 내에 변형된다.
T 세포가 활성화된 후, 세포를 배양하여 증식할 수 있다. T 세포를 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일, 적어도 2주일, 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개월 또는 그 초과 동안 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 또는 그 초과의 확장 라운드 동안 배양할 수 있다.
다양한 구현예에서, T 세포 조성물은 PI3K 경로의 하나 이상의 억제제의 존재 하에 제조된다. 억제제는 경로 내의 하나 이상의 활성 또는 단일 활성을 표적화할 수 있다. 임의의 특정 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 제조 공정의 자극, 활성화 및/또는 증폭 단계 동안 T 세포를 PI3K 경로의 하나 이상의 억제제와 접촉시키거나 처리하는 것은 우선적으로 젊은 T 세포를 증가시키며, 이에 의해 우수한 치료적 T 세포 조성물을 생성하는 것으로 고려된다.
특정 구현예에서, 조작된 T 세포 수용체를 발현하는 T 세포의 증식을 증가시키기 위한 방법이 제공된다. 이러한 방법은 예를 들어 대상체로부터 T 세포의 공급원을 수확하는 단계, PI3K 경로의 하나 이상의 억제제의 존재 하에 T 세포를 자극 및 활성화시키는 단계, 항-BCMA CAR, 예를 들어 항-BCMA02 CAR를 발현하도록 T 세포의 변형을 수행하는 단계, 및 배양 중에 T 세포를 증폭시키는 단계를 포함할 수 있다.
특정 구현예에서, T 세포의 집단의 생산 방법은 하기 바이오마커: CD62L, CCR7, CD28, CD27, CD122, CD127, CD197, 및 CD38 중 하나 이상의 발현이 농축되었다. 일 구현예에서, 젊은 T 세포는 하기 생물학적 마커: CD62L, CD127, CD197, 및 CD38 중 하나 이상 또는 모두를 포함한다. 일 구현예에서, 젊은 T 세포는 CD57, CD244, CD160, PD-1, CTLA4, TIM3, 및 LAG3의 발현이 결여되어 있다. 본원의 다른 곳에서 논의된 바와 같이, 젊은 T 세포 바이오마커의 발현 수준은 보다 분화된 T 세포 또는 면역 이펙터 세포 집단에서 이러한 마커의 발현 수준과 관련된다.
일 구현예에서, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)는 본원에서 고려되는 T 세포 제조 방법에서 T 세포의 공급원으로서 사용된다. PBMC는 CD4+, CD8+, 또는 CD4+ 및 CD8+일 수 있고 다른 단핵 세포, 예컨대 단핵구, B 세포, NK 세포 및 NKT 세포를 포함할 수 있는 T 림프구의 이종 집단을 형성한다. 본원에서 고려되는 조작된 TCR 또는 CAR을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 발현 벡터는 인간 공여자 T 세포, NK 세포 또는 NKT 세포의 집단 내로 도입될 수 있다. 발현 벡터를 보유하는 성공적으로 형질도입된 T 세포는 CD3 양성 T 세포를 단리하기 위해 유동 세포측정법을 사용하여 분류될 수 있고, 이어서 항-CD3 항체 및 또는 항-CD28 항체 및 IL-2, IL-7, 및/또는 IL-15 또는 본원의 다른 곳에 기재된 바와 같은 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 방법을 사용한 세포 활성화에 더하여 변형된 T 세포의 수를 증가시키기 위해 추가로 증식될 수 있다.
본원에서 고려되는 제조 방법은 인간 대상체에서 사용하기 위한 저장 및/또는 제조를 위한 변형된 T 세포의 동결보존을 추가로 포함할 수 있다. T 세포는 동결보존되어 세포가 해동시 생존가능하게 유지된다. 필요한 경우, 상기 동결보존된 형질전환된 면역 이펙터 세포는 더 많은 이러한 세포에 대해 해동, 성장 및 증폭될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "동결보존(cryopreserving)"은 영하의 온도, 예컨대 (전형적으로) 77 K 또는 -196°C (액체 질소의 비점)로의 냉각에 의한 세포의 보존을 지칭한다. 동결보호제는 종종 영하의 온도에서 사용되어 저온에서의 동결 또는 실온으로의 가온으로 인해 세포가 손상되는 것을 방지한다. 동결보존제 및 최적의 냉각 속도는 세포 손상으로부터 보호할 수 있다. 사용될 수 있는 동결보호제는 디메틸 설폭사이드 (DMSO) (Lovelock and Bishop, Nature, 1959; 183: 1394-1395; Ashwood-Smith, Nature, 1961; 190: 1204-1205), 글리세롤, 폴리비닐피롤리돈 (Rinfret, Ann N.Y . Acad . Sci., 1960; 85: 576), 및 폴리에틸렌 글리콜 (Sloviter and Ravdin, Nature, 1962; 196: 48)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 바람직한 냉각 속도는 1° 내지 3° C/분이다. 적어도 2시간 후, T 세포는 -80°C의 온도에 도달하였고, 장기간 극저온 저장 용기에서와 같은 영구 저장을 위해 액체 질소 (-196°C)에 직접 배치될 수 있다.
5.8. T 세포
본 개시내용은 개선된 CAR T 세포 조성물의 제조를 고려한다. CAR T 세포 제조에 사용되는 T 세포는 자가유래성/자가성("자가") 또는 비-자가유래성("비-자가", 예를 들어 동종이계, 동계 또는 이종)일 수 있다. 특정 구현예에서, T 세포는 포유동물 대상체로부터 수득된다. 보다 구체적인 구현예에서, T 세포는 영장류 대상체로부터 수득된다. 바람직한 구현예에서, T 세포는 인간 대상체로부터 수득된다.
T 세포는 말초 혈액 단핵 세포, 골수, 림프절 조직, 제대혈, 흉선 문제, 감염 부위로부터의 조직, 복수, 흉막 삼출물, 비장 조직, 및 종양을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다수의 공급원으로부터 수득될 수 있다. 특정 구현예에서, T 세포는 당업자에게 공지된 임의의 다수의 기술, 예컨대 침강, 예를 들어 FICOLLTM 분리를 사용하여 대상체로부터 수집된 혈액의 단위로부터 수득될 수 있다. 일 구현예에서, 개체의 순환 혈액으로부터의 세포는 성분채집술에 의해 수득된다. 성분채집술 생성물은 전형적으로 림프구, 예컨대 T 세포, 단핵구, 과립구, B 세포, 다른 유핵 백혈구, 적혈구 및 혈소판을 함유한다. 일 구현예에서, 성분채집술에 의해 수집된 세포는 혈장 분획을 제거하고 세포를 후속 처리를 위해 적절한 완충제 또는 배지에 위치시키기 위해 세척될 수 있다. 세포는 PBS로 또는 칼슘, 마그네슘, 및 대부분은 모든 다른 2가 양이온이 없는 또 다른 적합한 용액으로 세척될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인식되는 바와 같이, 세척 단계는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해, 예컨대 반자동 유동 관통 원심분리를 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, Cobe 2991 세포 프로세서, Baxter CytoMate 등. 세척 후에, 세포는 완충제와 함께 또는 완충제 없이 다양한 생체적합성 완충제 또는 다른 염수 용액에 재현탁될 수 있다. 특정 구현예에서, 성분채집술 샘플의 바람직하지 않은 성분은 직접적으로 재현탁된 배양 배지에서 제거될 수 있다.
특정 구현예에서, T 세포, 예를 들어 PBMC를 포함하는 세포의 집단은 본원에서 고려되는 제조 방법에 사용된다. 다른 구현예에서, T 세포의 단리되거나 정제된 집단은 본원에서 고려되는 제조 방법에 사용된다. 세포는 적혈구를 용해시키고 단핵구를 고갈시킴으로써, 예를 들어 PERCOLLTM 구배를 통한 원심분리에 의해 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)로부터 단리된다. 일부 구현예에서, PBMC의 단리 후, 세포독성 및 헬퍼 T 림프구 둘 다는 활성화, 증폭 및/또는 유전자 변형 전 또는 후에 나이브, 기억 및 이펙터 T 세포 하위집단으로 분류될 수 있다.
CD3, CD4, CD8, CD28, CD45RA, CD45RO, CD62, CD127, 및 HLA-DR 중 하나 이상의 마커를 발현하는 T 세포의 특이적 하위집단은 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리될 수 있다. 일 구현예에서, (i) CD62L, CCR7, CD28, CD27, CD122, CD127, CD197; 또는 (ii) CD38 또는 CD62L, CD127, CD197 및 CD38로 구성된 군으로부터 선택된 마커 중 하나 이상을 발현하는 T 세포의 특이적 하위집단은 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리된다. 다양한 구현예에서, 제조된 T 세포 조성물은 CD57, CD244, CD160, PD-1, CTLA4, TIM3 및 LAG3 중 하나 이상을 발현하지 않거나 실질적으로 발현하지 않는다.
일 구현예에서, CD62L, CD127, CD197 및 CD38로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 마커의 발현은 PI3K 억제제 없이 활성화되고 증폭되는 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5 배, 적어도 2 배, 적어도 3 배, 적어도 4 배, 적어도 5 배, 적어도 6 배, 적어도 7 배, 적어도 8 배, 적어도 9 배, 적어도 10 배, 적어도 25 배 또는 그 이상 증가된다.
일 구현예에서, CD57, CD244, CD160, PD-1, CTLA4, TIM3 및 LAG3로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 마커의 발현은 PI3K 억제제로 활성화되고 증폭되는 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5 배, 적어도 2 배, 적어도 3 배, 적어도 4 배, 적어도 5 배, 적어도 6 배, 적어도 7 배, 적어도 8 배, 적어도 9 배, 적어도 10 배, 적어도 25 배 또는 그 이상 감소된다.
일 구현예에서, 본원에서 고려되는 제조 방법은 나이브 또는 발달적으로 강력한 T 세포의 하나 이상의 마커를 포함하는 CAR T 세포의 수를 증가시킨다. 임의의 특정 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 본 발명자들은 T 세포를 포함하는 세포 집단을 하나 이상의 PI3K 억제제로 처리하는 것이 발달적으로 강력한 T 세포의 증폭을 증가시키고, 기존의 CAR T 세포 요법과 비교하여 더욱 강력하고 효과적인 입양 CAR T 세포 면역요법을 제공하는 것으로 생각한다.
본원에서 고려되는 방법을 사용하여 제조된 T 세포에서 증가된 나이브 또는 발달적으로 강력한 T 세포의 마커의 예시적인 예는 CD62L, CD127, CD197, 및 CD38을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 특정 구현예에서, 나이브 T 세포는 하기 마커 중 하나 이상을 발현하지 않거나 실질적으로 발현하지 않는다: CD57, CD244, CD160, PD-1, BTLA, CD45RA, CTLA4, TIM3, 및 LAG3.
T 세포와 관련하여, 본원에서 고려되는 다양한 증폭 방법론으로부터 생성된 T 세포 집단은 사용된 조건에 따라 다양한 특이적 표현형 특성을 가질 수 있다. 다양한 구현예에서, 증폭된 T 세포 집단은 하기 표현형 마커: CD62L, CD127, CD197, CD38, 및 HLA-DR 중 하나 이상을 포함한다.
일 구현예에서, 그러한 표현형 마커는 CD62L, CD127, CD197, 및 CD38 중 하나 이상 또는 전부의 향상된 발현을 포함한다. 특정 구현예에서, CD62L, CD127, CD197, 및 CD38을 포함하는 나이브 T 세포의 표현형 마커의 발현을 특징으로 하는 CD8+ T 림프구는 증폭된다.
특정 구현예에서, CD45RO, CD62L, CD127, CD197, 및 CD38을 포함하는 중앙 기억 T 세포의 표현형 마커의 발현을 특징으로 하는 T 세포 및 그랜자임 B에 대해 음성인 T 세포는 증식된다. 일부 구현예에서, 중앙 기억 T 세포는 CD45RO+, CD62L+, CD8+ T 세포이다.
특정 구현예에서, CD45RA 및/또는 CD45RO의 발현에 대해 CD62L 및 음성을 포함하는 나이브 CD4+ 세포의 표현형 마커의 발현을 특징으로 하는 CD4+ T 림프구가 증폭된다. 일부 구현예에서, CD62L 및 CD45RO 양성을 포함하는 중앙 기억 CD4+ 세포의 표현형 마커의 발현을 특징으로 하는 CD4+ 세포가 증폭된다. 일부 구현예에서, 이펙터 CD4+ 세포는 CD62L 양성 및 CD45RO 음성이다.
특정 구현예에서, T 세포는 개체로부터 단리되고, 항-BCMA CAR를 발현하도록 유전자 변형되기 전에 시험관내에서 증식하도록 활성화 및 자극된다. 이와 관련하여, T 세포는 유전자 변형되기 전 및/또는 후에 배양될 수 있다 (즉, 본원에서 고려되는 항-BCMA CAR를 발현하도록 형질도입 또는 형질감염됨).
5.8.1. 활성화 및 증폭
T 세포 조성물의 충분한 치료 용량을 달성하기 위해, T 세포는 종종 자극, 활성화 및/또는 증폭의 하나 이상의 라운드에 적용된다. T 세포는 일반적으로 예를 들어 미국 특허 6,352,694; 6,534,055; 6,905,680; 6,692,964; 5,858,358; 6,887,466; 6,905,681; 7,144,575; 7,067,318; 7,172,869; 7,232,566; 7,175,843; 5,883,223; 6,905,874; 6,797,514; 및 6,867,041에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여 활성화 및 증폭될 수 있으며, 이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 항-BCMA CAR을 발현하도록 변형된 T 세포는 T 세포가 변형되기 전 및/또는 후에 활성화 및 증폭될 수 있다. 또한, T 세포는 활성화 및/또는 증폭 전, 동안 및/또는 후에 PI3K 세포 신호전달 경로를 조절하는 하나 이상의 작용제와 접촉될 수 있다. 일 구현예에서, 본원에서 고려되는 방법에 의해 제조된 T 세포는 활성화 및 증폭의 1, 2, 3, 4 또는 5회 이상의 라운드를 겪으며, 이들 각각은 PI3K 세포 신호전달 경로를 조절하는 하나 이상의 작용제를 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 공자극 리간드는 T 세포 상의 동족 공자극 분자에 특이적으로 결합하는 항원 제시 세포 (예를 들어, aAPC, 수지상 세포, B 세포 등) 상에 제시되어, 예를 들어 TCR/CD3 복합체의 결합에 의해 제공되는 1차 신호에 추가로 목적하는 T 세포 반응을 매개하는 신호를 제공한다. 적합한 공자극 리간드는 CD7, B7-1 (CD80), B7-2 (CD86), PD-L1, PD-L2, 4-1BBL, OX40L, 유도성 공자극 리간드 (ICOS-L), 세포간 부착 분자 (ICAM), CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, 림포톡신 베타 수용체, ILT3, ILT4, 톨 리간드 수용체에 결합하는 효능제 또는 항체, 및 B7-H3과 특이적으로 결합하는 리간드를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
특정 구현예에서, 공자극 리간드는 T 세포 상에 존재하는 공자극 분자에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원 결합 단편, 예컨대 비제한적으로 CD27, CD28, 4- IBB, OX40, CD30, CD40, PD-1, 1COS, 림프구 기능-관련 항원 1(LFA-1), CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, 및 CD83과 특이적으로 결합하는 리간드를 포함한다.
적합한 공자극 리간드는 변형된 T 세포 상에서 발현된 조작된 TCR 또는 CAR에 결합하는 APC 또는 aAPC 상에서 가용성 형태로 제공되거나 발현될 수 있는 표적 항원을 추가로 포함한다.
다양한 구현예에서, 본원에서 고려되는 T 세포의 제조 방법은 T 세포를 포함하는 세포의 집단을 활성화시키는 단계 및 T 세포의 집단을 증폭시키는 단계를 포함한다. T 세포 활성화는 T 세포 TCR/CD3 복합체를 통해 또는 CD2 표면 단백질의 자극을 통해 1차 자극 신호를 제공하고, 보조 분자, 예를 들어 CD28을 통해 2차 자극 신호를 제공함으로써 달성될 수 있다.
TCR/CD3 복합체는 T 세포를 적합한 CD3 결합제, 예를 들어 CD3 리간드 또는 항-CD3 단클론 항체와 접촉시킴으로써 자극될 수 있다. CD3 항체의 예시적인 예는 OKT3, G19-4, BC3, 및 64.1을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
또 다른 구현예에서, CD2 결합제는 T 세포에 1차 자극 신호를 제공하는 데 사용될 수 있다. CD2 결합제의 예시적인 예는 CD2 리간드 및 항-CD2 항체, 예를 들어 T11.1 또는 T11.2 항체와 조합된 T11.3 항체 (Meuer, S.C. et al. (1984) Cell 36:897-906) 및 9-1 항체와 조합된 9.6 항체 (이는 TI 1.1과 동일한 에피토프를 인식함) (Yang, S. Y. et al. (1986) J. Immunol. 137:1097-1100) 를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 상기 기재된 임의의 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 다른 항체가 또한 사용될 수 있다. 추가의 항체, 또는 항체의 조합이 본원의 다른 곳에 개시된 바와 같은 표준 기술에 의해 제조되고 확인될 수 있다. 
TCR/CD3 복합체를 통해, 또는 CD2를 통해 제공되는 1차 자극 신호에 더하여, T 세포 반응의 유도는 제2 공자극 신호를 필요로 한다. 특정 구현예에서, CD28 결합제는 공자극 신호를 제공하는 데 사용될 수 있다. CD28 결합제의 예시적인 예는 천연 CD28 리간드, 예를 들어 CD28에 대한 천연 리간드 (예를 들어, 단백질, 예컨대 B7-1 (CD80) 및 B7-2 (CD86)의 B7 패밀리의 구성원); 및 CD28 분자를 가교시킬 수 있는 항-CD28 모노클로날 항체 또는 그의 단편, 예를 들어 모노클로날 항체 9.3, B-T3, XR-CD28, KOLT-2, 15E8, 248.23.2, 및 EX5.3D10을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 1차 자극 신호를 제공하는 분자, 예를 들어 TCR/CD3 복합체 또는 CD2를 통해 자극을 제공하는 분자, 및 공자극 분자는 동일한 표면에 결합된다.
특정 구현예에서, 자극 및 공자극 신호를 제공하는 결합제는 세포의 표면 상에 국소화된다. 이는 세포를 세포 표면 상에서의 그의 발현에 적합한 형태로 결합제를 코딩하는 핵산으로 형질감염 또는 형질도입시키거나, 또는 대안적으로 결합제를 세포 표면에 커플링시킴으로써 달성될 수 있다.
또 다른 구현예에서, 1차 자극 신호를 제공하는 분자, 예를 들어 TCR/CD3 복합체 또는 CD2를 통해 자극을 제공하는 분자, 및 공자극 분자는 항원 제시 세포에 표시된다.
일 구현예에서, 1차 자극 신호를 제공하는 분자, 예를 들어 TCR/CD3 복합체 또는 CD2를 통해 자극을 제공하는 분자, 및 공자극 분자는 별도의 표면에 제공된다.
특정 구현예에서, 자극 및 공자극 신호를 제공하는 결합제 중 하나는 가용성(용액에 제공됨)이고, 다른 제제(들)은 하나 이상의 표면 상에 제공된다.
특정 구현예에서, 자극 및 공자극 신호를 제공하는 결합제는 모두 가용성 형태로 제공된다(용액에 제공됨).
다양한 구현예에서, 본원에서 고려되는 T 세포의 제조 방법은 항-CD3 및 항-CD28 항체로 T 세포를 활성화시키는 것을 포함한다.
본원에서 고려되는 방법에 의해 제조된 T 세포 조성물은 PI3K 세포 신호전달 경로를 억제하는 하나 이상의 작용제의 존재 하에 활성화된 및/또는 증폭된 T 세포를 포함한다. 항-BCMA CAR을 발현하도록 변형된 T 세포는 T 세포가 변형되기 전 및/또는 후에 활성화 및 증폭될 수 있다. 특정 구현예에서, T 세포의 집단은 활성화된 후, 항-BCMA CAR를 발현하도록 변형되고, 이어서 증폭을 위해 배양된다.
일 구현예에서, 본원에서 고려되는 방법에 의해 제조된 T 세포는 높은 증식 가능성을 나타내는 마커를 발현하는 증가된 수의 T 세포 및 T 세포 분화의 검출 불가능한 마커를 발현하거나 실질적으로 발현하지 않는 T 세포를 포함한다. 이들 T 세포는 강력한 방식으로 반복적으로 활성화 및 증폭될 수 있고, 이에 의해 개선된 치료적 T 세포 조성물을 제공할 수 있다.
일 구현예에서, PI3K 세포 신호전달 경로를 억제하는 하나 이상의 작용제의 존재 하에 활성화되고 증폭된 T 세포의 집단은 PI3K 억제제 없이 활성화되고 증폭된 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5배, 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 적어도 8배, 적어도 9배, 적어도 10배, 적어도 25배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 250배, 적어도 500배, 적어도 1000배, 또는 그 이상 증폭된다.
일 구현예에서, PI3K 세포 신호전달 경로를 억제하는 하나 이상의 작용제의 존재 하에 젊은 T 세포의 마커의 발현을 특징으로 하는 T 세포의 집단은 활성화되고 증폭되고, PI3K 억제제 없이 활성화되고 증폭된 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5배, 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 적어도 8배, 적어도 9배, 적어도 10배, 적어도 25배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 250배, 적어도 500배, 적어도 1000배, 또는 그 이상 증폭된다.
일 구현예에서, 본원에서 고려되는 방법에 의해 활성화된 T 세포를 증폭시키는 것은 수 시간 (약 3시간) 내지 약 7일 내지 약 28일 동안 또는 그 사이의 임의의 시간 정수 값으로 T 세포를 포함하는 세포 집단을 배양하는 것을 추가로 포함한다. 또 다른 구현예에서, T 세포 조성물은 14일 동안 배양될 수 있다. 특정 구현예에서, T 세포는 약 21일 동안 배양된다. 또 다른 구현예에서, T 세포 조성물은 약 2-3일 동안 배양된다. T 세포의 배양 시간이 60일 이상이 될 수 있도록 자극/활성화/증폭의 여러 사이클이 또한 바람직할 수 있다.
특정 구현예에서, T 세포 배양에 적합한 조건은 적절한 배지 (예를 들어, 최소 필수 배지 (Minimal Essential Media) 또는 RPMI 배지 1640, 또는 X-vivo 15, (Lonza)) 및 혈청 (예를 들어, 태아 소 또는 인간 혈청), 인터루킨-2 (IL-2), 인슐린, IFN-γ, IL-4, IL-7, IL-21, GM-CSF, IL-10, IL-12, IL-15, TGFβ, 및 TNF-α 또는 당업자에게 공지된 세포의 성장에 적합한 임의의 다른 첨가제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 증식 및 생존에 필요한 하나 이상의 인자를 포함한다.
세포 배양 배지의 추가의 예시적인 예는 RPMI 1640, 클릭스(Clicks), AIM-V, DMEM, MEM, α-MEM, F-12, X-Vivo 15 및 X-Vivo 20을 포함하지만, 이에 제한되지는 않으며, 첨가된 아미노산, 나트륨 피루베이트 및 비타민과 함께, 적절한 양의 혈청 (또는 혈장) 또는 규정된 세트의 호르몬, 및/또는 T 세포의 성장 및 증폭에 충분한 양의 사이토카인(들)을 무-혈청 또는 보충한다.
T 세포 증폭을 위한 다른 첨가제의 예시적인 예는 계면활성제, 피사마네이트, HEPES와 같은 pH 버퍼 및 N-아세틸-시스테인 및 2-머캅토에탄올과 같은 환원제를 포함할 수 있지만, 이에 제한되지는 않는다.
항생제, 예를 들어 페니실린 및 스트렙토마이신은 대상체에 주입되는 세포의 배양액이 아닌 실험 배양액에만 포함된다. 표적 세포를 성장을 지지하는 데 필요한 조건, 예를 들어 적절한 온도(예를 들어, 37℃) 및 대기(예를 들어, 공기 + 5% C02)하에서 유지시킨다.
특정 구현예에서, PBMC 또는 단리된 T 세포는 적절한 사이토카인, 예컨대 IL-2, IL-7 및/또는 IL-15를 갖는 배양 배지에서 일반적으로 비드 또는 다른 표면에 부착된 자극제 및 공자극제, 예컨대 항-CD3 및 항-CD28 항체와 접촉된다.
다른 구현예에서, 인공 APC (aAPC)는 다양한 공자극 분자 및 사이토카인의 안정한 발현 및 분비를 유도하기 위해 K562, U937, 721.221, T2, 및 C1R 세포를 조작함으로써 제조될 수 있다. 특정 구현예에서, K32 또는 U32 aAPC는 AAPC 세포 표면 상에 하나 이상의 항체-기반 자극 분자의 디스플레이를 유도하는 데 사용된다. T 세포의 집단은 CD137L (4-1BBL), CD134L (OX40L), 및/또는 CD80 또는 CD86을 포함하지만 이에 제한되지는 않는 다양한 공자극 분자를 발현하는 aAPC에 의해 증폭될 수 있다. 마지막으로, aAPC는 유전자 변형된 T 세포를 증폭시키고 CD8 T 세포 상에서 CD28 발현을 유지하기 위한 효율적인 플랫폼을 제공한다. WO 03/057171 및 US2003/0147869에서 제공된 aAPC는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
5.8.2. 제제
다양한 구현예에서, T 세포를 세포에서 PI3K 경로를 조절하는 작용제와 접촉시키는 것을 포함하는, 미분화된 또는 발달적으로 강력한 T 세포(potent T cell)를 증폭시키는 T 세포의 제조 방법이 제공된다. 다양한 구현예에서, T 세포를 세포에서 PI3K/AKT/mTOR 경로를 조절하는 작용제와 접촉시키는 것을 포함하는, 미분화된 또는 발달적으로 강력한 T 세포를 증폭시키는 T 세포의 제조 방법이 제공된다. 세포는 활성화 및 증폭 전에, 활성화 동안, 및/또는 활성화 및 증폭 후에 접촉될 수 있다. T 세포 조성물은 충분한 T 세포 효능을 보유하여, 분화의 실질적인 증가 없이 다회 라운드의 증폭을 겪을 수 있다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "조절하다", "조절자", 또는 "조절제(modulatory agent)" 또는 비슷한 용어는 세포 신호전달 경로의 변화를 유도하는 제제의 능력을 지칭한다. 조절자는 경로 성분의 양, 활성을 증가 또는 감소시키거나 세포 신호전달 경로의 원하는 효과 또는 출력을 증가 또는 감소시킬 수 있다. 일 구현예에서, 조절자는 억제제이다. 다른 구현예에서, 조절자는 활성화제이다.
"제제(agent)"는 PI3K/AKT/mTOR 경로의 조절에 사용되는 화합물, 소분자, 예를 들어 작은 유기 분자, 핵산, 폴리펩타이드, 또는 이의 단편, 이소폼, 변이체, 유사체, 또는 유도체를 지칭한다.
"소분자"는 약 5 kD 미만, 약 4 kD 미만, 약 3 kD 미만, 약 2 kD 미만, 약 1 kD 미만, 또는 약 .5 kD 미만의 분자량을 갖는 조성물을 지칭한다. 소분자는 핵산, 펩타이드, 폴리펩타이드, 펩타이드모방체, 펩토이드, 탄수화물, 지질, 이의 성분 또는 다른 유기 또는 무기 분자를 포함할 수 있다. 화학적 및/또는 생물학적 혼합물, 예컨대 진균, 박테리아 또는 조류 추출물의 라이브러리는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 본 개시내용의 임의의 검정으로 스크리닝될 수 있다. 분자 라이브러리의 합성 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다(예를 들어, Carell et al., 1994a; Carell et al., 1994b; Cho et al., 1993; DeWitt et al., 1993; Gallop et al., 1994; Zuckermann et al., 1994 참조).
"유사체"는 본 개시내용의 목적하는 활성을 갖는 화합물, 뉴클레오타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드 또는 화합물과 유사하거나 동일한 활성 또는 기능(들)을 보유하지만, 바람직한 실시예의 서열 또는 구조와 유사하거나 동일한 서열 또는 구조를 반드시 포함할 필요는 없는 작은 유기 화합물, 뉴클레오타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 지칭한다.
"유도체"는 아미노산 잔기 치환, 결실 또는 부가의 도입에 의해 변경된 모 단백질 또는 폴리펩타이드, 또는 뉴클레오타이드 치환 또는 결실, 부가 또는 돌연변이의 도입에 의해 변형된 핵산 또는 뉴클레오타이드의 아미노산 서열을 포함하는 화합물, 단백질 또는 폴리펩타이드를 지칭한다. 유도체 핵산, 뉴클레오타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드는 모 폴리펩타이드와 유사하거나 동일한 기능을 보유한다.
다양한 구현예에서, PI3K 경로를 조절하는 작용제는 경로의 성분을 활성화시킨다. "활성화제" 또는 "작용제(agonist)"는 PI3K/AKT/mTOR 경로에서 분자의 하나 이상의 활성을 촉진, 증가 또는 유도하는 작용제를 의미하며, 이는 PI3K의 하나 이상의 활성을 억제하는 분자를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
다양한 구현예에서, PI3K 경로를 조절하는 작용제는 경로의 성분을 억제한다. "억제제" 또는 "길항제"는 PI3K를 포함하나 이에 제한되지는 않는 PI3K 경로에서 분자의 하나 이상의 활성을 억제, 감소 또는 감소시키는 작용제를 지칭한다. 일 구현예에서, 억제제는 이중 분자 억제제이다. 특정 구현예에서, 억제제는 분자의 부류가 동일하거나 실질적으로 유사한 활성 (범-억제제)을 갖거나 분자의 활성 (선택적 또는 특이적 억제제)을 특이적으로 억제할 수 있는 것을 억제할 수 있다. 억제는 또한 비가역적 또는 가역적일 수 있다.
일 구현예에서, 억제제는 적어도 1 nM, 적어도 2 nM, 적어도 5 nM, 적어도 10 nM, 적어도 50 nM, 적어도 100 nM, 적어도 200 nM, 적어도 500 nM, 적어도 1 μM, 적어도 10 μM, 적어도 50 μM, 또는 적어도 100 μM의 IC50을 갖는다. IC50 결정은 관련 기술분야에 공지된 임의의 통상적인 기술을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, IC50은 연구 중인 억제제의 다양한 농도의 존재 하에 주어진 효소의 활성을 측정함으로써 결정될 수 있다. 이어서, 효소 활성의 실험적으로 수득된 값은 사용된 억제제 농도에 대해 플롯팅된다. (임의의 억제제의 부재 하에 활성과 비교하여) 50% 효소 활성을 나타내는 억제제의 농도는 "IC50" 값으로 간주된다. 유사하게, 다른 억제 농도는 활성의 적절한 결정을 통해 정의될 수 있다.
다양한 구현예에서, T 세포는 PI3K 경로의 하나 이상의 조절제와 적어도 1nM, 적어도 2nM, 적어도 5nM, 적어도 10nM, 적어도 50nM, 적어도 100nM, 적어도 200nM, 적어도 500nM, 적어도 1μM, 적어도 10μM, 적어도 50μM, 적어도 100μM, 또는 적어도 1M의 농도로 접촉 또는 처리 또는 배양된다.
특정 구현예에서, T 세포는 적어도 12시간, 18시간, 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일, 적어도 2주, 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개월 또는 그 이상 동안, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10회 또는 그 이상의 증폭 라운드로 PI3K 경로의 하나 이상의 조절제와 접촉 또는 처리 또는 배양될 수 있다.
5.8.3. PI3K / Akt / mTOR 경로
포스파티딜이노시톨-3 키나제/Akt/라파마이신의 포유동물 표적 경로는 세포 증식, 분화, 대사 및 생존과 함께 성장 인자 신호전달을 통합하기 위한 도관으로서 작용한다. PI3K는 고도로 보존된 세포내 지질 키나제의 패밀리이다. 클래스 IA PI3K는 직접 또는 어댑터 분자의 인슐린 수용체 기질 패밀리와의 상호작용을 통해 성장 인자 수용체 티로신 키나제 (RTK)에 의해 활성화된다. 이러한 활성은 세린/트레오닌 키나제 Akt의 조절인자인 포스파티딜이노시톨-3,4,5-트리스포스테이트 (PIP3)의 생성을 초래한다. mTOR는 각각 상이한 결합 파트너가 상이한 활성을 부여하는 것을 특징으로 하는, 2개의 구별되는 복합체를 통해 정규 PI3K 경로를 통해 작용한다. mTORC1 (PRAS40, 트랩터 및 mLST8/GbL과 복합체 내의 mTOR)은 성장 인자 신호를 단백질 번역, 세포 성장, 증식 및 생존과 연결하는 PI3K/Akt 신호전달의 하류 이펙터로서 작용한다. mTORC2 (릭터, mSIN1, 프로토 및 mLST8과 복합체 내의 mTOR)는 Akt의 상류 활성화제로서 작용한다.
PI3K의 성장 인자 수용체-매개된 활성화 시, Akt는 PIP3과 이의 pleckstrin 상동성 도메인의 상호작용을 통해 막에 동원되고, 따라서 이의 활성화 루프를 노출시키고, 구성적으로 활성인 포스포이노시티드-의존성 단백질 키나제 1 (PDK1)에 의한 트레오닌 308 (Thr308)에서의 인산화를 가능하게 한다. 최대 활성화를 위해, Akt는 또한 이의 C-말단 소수성 모티프의 세린 473 (Ser473)에서 mTORC2에 의해 인산화된다. DNA-PK 및 HSP는 또한 Akt 활성의 조절에서 중요한 것으로 밝혀졌다. Akt는 TSC2의 억제성 인산화를 통해 mTORC1을 활성화시키고, 이는 TSC1과 함께 mTORC1의 양성 조절인자인 레브 GTPase를 억제함으로써 mTORC1을 음성으로 조절한다. mTORC1은 2개의 잘 정의된 기질인 p70S6K (이하 S6K1으로 지칭됨) 및 4E-BP1을 갖고, 이들 둘 다는 단백질 합성을 중요하게 조절한다. 따라서, mTORC1은 성장 인자 신호전달을 단백질 번역 및 세포 증식과 연결시키는, PI3K의 중요한 하류 이펙터이다.
5.8.4. PI3K 억제제
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "PI3K 억제제"는 PI3K의 적어도 하나의 활성에 결합하고 이를 저해하는 핵산, 펩타이드, 화합물, 또는 작은 유기 분자를 지칭한다. PI3K 단백질은 3개의 부류, 부류 1 PI3K, 부류 2 PI3K, 및 부류 3 PI3K로 나뉠 수 있다. 부류 1 PI3K는 4개의 p110 촉매 서브유닛(p110α, p110β, p110δ, 및 p110γ) 중 하나 및 조절 서브유닛의 2개의 부류 중 하나로 구성된 헤테로이량체로서 존재한다. 특정 구현예에서, 본 개시내용의 PI3K 억제제는 부류 1 PI3K 억제제를 표적으로 한다. 일 구현예에서, PI3K 억제제는 부류 1 PI3K 억제제의 하나 이상의 이소폼에 대한 선택성(즉, p110α, p110β, p110δ, 및 p110γ에 대한 선택성 또는 p110α, p110β, p110δ, 및 p110γ 중 하나 이상)을 나타낼 것이다. 다른 측면에서, PI3K 억제제는 이소폼 선택성을 나타내지 않을 것이고 "pan-PI3K 억제제"로 간주될 것이다. 일 구현예에서, PI3K 억제제는 PI3K 촉매 도메인에 ATP와의 결합에 대해 경쟁할 것이다.
특정 구현예에서, PI3K 억제제는 예를 들어 PI3K 뿐만 아니라 PI3K-AKT-mTOR 경로에서 추가의 단백질을 표적화할 수 있다. 특정 구현예에서, mTOR 및 PI3K 둘 다를 표적으로 하는 PI3K 억제제는 mTOR 억제제 또는 PI3K 억제제로서 지칭될 수 있다. PI3K만을 표적으로 하는 PI3K 억제제는 선택적 PI3K 억제제로서 지칭될 수 있다. 일 구현예에서, 선택적 PI3K 억제제는 경로에서 mTOR 및/또는 다른 단백질에 비해 억제제의 IC50보다 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 30배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 1000배, 또는 그 이상이 더 낮은, PI3K에 비해 50% 억제 농도를 나타내는 작용제를 지칭하는 것으로 이해될 수 있다.
특정 구현예에서, 예시적인 PI3K 억제제는 약 200 nM 이하, 바람직하게는 약 100 nm 이하, 보다 더 바람직하게는 약 60 nM 이하, 약 25 nM, 약 10 nM, 약 5 nM, 약 1 nM, 100 μM, 50 μM, 25 μM, 10 μM, 1 μM 이하의 IC50 (활성의 50%를 억제하는 농도)으로 PI3K를 억제한다. 일 구현예에서, PI3K 억제제는 약 2 nM 내지 약 100 nm, 보다 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 50 nM, 보다 더 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 15 nM의 IC50으로 PI3K를 억제한다.
본원에서 고려되는 T 세포 제조 방법에 사용하기에 적합한 PI3K 억제제의 예시적인 예는 BKM120(클래스 1 PI3K 억제제, 노바티스(Novartis)), XL147(클래스 1 PI3K 억제제, 엑셀릭시스(Exelixis)), (pan-PI3K 억제제, 글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)) 및 PX-866(클래스 1 PI3K 억제제; p110α, p110β, 및 p110γ 동형체, 온코티레온(Oncothyreon))을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
선택적 PI3K 억제제의 다른 예시적인 예는 BYL719, GSK2636771, TGX-221, AS25242, CAL-101, ZSTK474 및 IPI-145를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
pan-PI3K 억제제의 추가의 예시적인 예는 BEZ235, LY294002, GSK1059615, TG100713, 및 GDC-0941을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
5.8.5. AKT 억제제
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "AKT 억제제"는 AKT의 적어도 하나의 활성을 억제하는 핵산, 펩타이드, 화합물, 또는 소분자를 지칭한다. AKT 억제제는 지질-기반 억제제 (예를 들어, AKT가 혈장 막에 국소화되는 것을 방지하는 AKT의 플릭스트라이린 상동성 도메인을 표적으로 하는 억제제), ATP-경쟁적 억제제, 및 알로스테릭 억제제를 포함한 몇몇 부류로 분류될 수 있다. 일 구현예에서, AKT 억제제는 AKT 촉매 부위에 결합함으로써 작용한다. 특정 구현예에서, Akt 억제제는 하류 AKT 표적, 예컨대 mTOR의 인산화를 억제함으로써 작용한다. 또 다른 구현예에서, AKT 활성은 예를 들어 AKT의 DNA-PK 활성화, AKT의 PDK-1 활성화, 및/또는 Akt의 mTORC2 활성화를 억제함으로써 Akt를 활성화하기 위해 입력 신호를 억제함으로써 억제된다.
AKT 억제제는 모든 3개의 AKT 이소형, AKT1, AKT2, AKT3을 표적화할 수 있거나, 이소형 선택적일 수 있고, AKT 이소형 중 1개 또는 2개만을 표적화할 수 있다. 일 구현예에서, AKT 억제제는 PI3K-AKT-mTOR 경로에서 AKT 뿐만 아니라 추가의 단백질을 표적화할 수 있다. AKT만을 표적화하는 AKT 억제제는 선택적 AKT 억제제로서 지칭될 수 있다. 일 구현예에서, 선택적 AKT 억제제는 경로에서 다른 단백질에 대해 억제제의 IC50보다 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 30배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 1000배, 또는 그 이상이 더 낮은, AKT에 대해 50% 억제 농도를 나타내는 작용제를 지칭하는 것으로 이해될 수 있다.
특정 구현예에서, 예시적인 AKT 억제제는 약 200 nM 이하, 바람직하게는 약 100 nm 이하, 보다 더 바람직하게는 약 60 nM 이하, 약 25 nM, 약 10 nM, 약 5 nM, 약 1 nM, 100 μM, 50 μM, 25 μM, 10 μM, 1 μM 이하의 IC50 (활성의 50%를 억제하는 농도)으로 AKT를 억제한다. 일 구현예에서, AKT 억제제는 약 2 nM 내지 약 100 nm, 보다 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 50 nM, 보다 더 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 15 nM의 IC50으로 AKT를 억제한다.
아우리스타틴 기반 항체-약물 접합체와 조합하여 사용하기 위한 AKT 억제제의 예시적인 예는 예를 들어 페리포신(perifosine, Keryx), MK2206(Merck), VQD-002(VioQuest), XL418(Exelixis), GSK690693, GDC-0068 및 PX316(PROLX Pharmaceuticals)을 포함한다.
선택적 Akt1 억제제의 예시적인 비제한적인 예는 A-674563이다.
선택적 Akt2 억제제의 예시적인 비제한적인 예는 CCT128930이다.
특정 구현예에서, Akt 억제제는 Akt의 DNA-PK 활성화, Akt의 PDK-1 활성화, Akt의 mTORC2 활성화, 또는 Akt의 HSP 활성화이다.
DNA-PK 억제제의 예는 NU7441, PI-103, NU7026, PIK-75, 및 PP-121을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
5.8.6. mTOR 억제제
용어 "mTOR 억제제(mTOR inhibitor)" 또는 "mTOR를 억제하는 제제"는 mTOR 단백질의 적어도 하나의 활성, 예를 들어, 이의 기질(예를 들어, p70S6 키나제 1, 4E-BP1, AKT/PKB 및 eEF2) 중 적어도 하나에 대한 세린/트레오닌 단백질 키나제 활성을 억제하는 핵산, 펩타이드, 화합물 또는 소분자를 지칭한다. mTOR 억제제는 mTORCl, mTORC2, 또는 mTORCl 및 mTORC2 둘 다에 직접 결합하고 억제할 수 있다.
mTORC1 및/또는 mTORC2 활성의 억제는 PI3K/Akt/mTOR 경로의 신호 전달의 감소에 의해 결정될 수 있다. 매우 다양한 판독이 이러한 신호 전달 경로의 출력의 감소를 확립하기 위해 이용될 수 있다. 일부 비제한적인 예시적인 판독은 (1) 5473 및 T308을 포함하지만 이에 제한되지 않는 잔기에서 Akt의 인산화의 감소; (2) 예를 들어, Fox01/O3a T24/32, GSK3a/β; S21/9, 및 TSC2 T1462를 포함하지만 이에 제한되지 않는 Akt 기질의 인산화의 감소에 의해 입증되는 바와 같은 Akt의 활성화의 감소; (3) 리보솜 S6 S240/244, 70S6K T389, 및 4EBP1 T37/46을 포함하지만 이에 제한되지 않는 mTOR의 하류의 신호 전달 분자의 인산화의 감소; 및 (4) 암 세포의 증식의 억제를 포함한다.
일 구현예에서, mTOR 억제제는 활성 부위 억제제이다. 이들은 mTOR의 ATP 결합 부위 (또한 ATP 결합 포켓으로 지칭됨)에 결합하고 mTORC1 및 mTORC2 둘 다의 촉매 활성을 억제하는 mTOR 억제제이다. 본원에서 고려되는 T 세포 제조 방법에 사용하기에 적합한 활성 부위 억제제의 한 부류는 PI3K 및 mTOR 둘 다를 표적화하고 직접적으로 억제하는 이중 특이성 억제제이다. 이중 특이성 억제제는 mTOR 및 PI3K 둘 다의 ATP 결합 부위에 결합한다. 이러한 억제제의 예시적인 예는 이미다조퀴나졸린, 워트만닌, LY294002, PI-103 (Cayman Chemical), SF1126 (Semafore), BGT226 (Novartis), XL765 (Exelixis) 및 NVP-BEZ235 (Novartis)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
본원에서 고려되는 방법에서 사용하기에 적합한 mTOR 활성 부위 억제제의 또 다른 부류는 1종 이상의 I형 포스파티딜이노시톨 3-키나제, 예를 들어 PI3 키나제 α, β, γ, 또는 δ에 비해 mTORC1 및 mTORC2 활성을 선택적으로 억제한다. 이들 활성 부위 억제제는 mTOR의 활성 부위에 결합하지만 PI3K에는 결합하지 않는다. 이러한 억제제의 예시적인 예는 피라졸로피리미딘, 토린1 (Guertin and Sabatini), PP242 (2-4-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)-1H-인돌-5-올), PP30, Ku-0063794, WAY-600 (Wyeth), WAY-687 (Wyeth), WAY-354 (Wyeth), 및 AZD8055 (Liu et al., Nature Review, 8, 627-644, 2009)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
일 구현예에서, 선택적 mTOR 억제제는 mTORC1 및/또는 mTORC2에 대해 50% 억제 농도(IC50)를 나타내는 제제, 즉 1형, 2형, 3형 또는 그 이상의 I형 PI3-키나제 또는 모든 I형 PI3-키나제에 대해 억제제의 IC50보다 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 50배, 적어도 100배, 적어도 1000배, 또는 그 이상 더 낮은 농도를 나타낸다.
본 개시내용에서 사용하기 위한 mTOR 억제제의 또 다른 부류는 본원에서 "라파로그(rapalogs)"로 지칭된다. 본원에서 사용되는 용어 "라파로그(rapalogs)"는 mTOR FRB 도메인 (FKBP 라파마이신 결합 도메인)에 특이적으로 결합하고, 구조적으로 라파마이신과 관련되고, mTOR 억제 특성을 보유하는 화합물을 지칭한다. 용어 라파로그는 라파마이신을 배제한다. 라파로그는 라파마이신의 에스테르, 에테르, 옥심, 히드라존, 및 히드록실아민, 뿐만 아니라, 예를 들어 환원 또는 산화에 의해 라파마이신 코어 구조 상의 작용기가 변형된 화합물을 포함한다. 이러한 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 또한 라파마이신 유도체인 것으로 간주된다. 본원에서 고려되는 방법에서 사용하기에 적합한 라파로그의 예시적인 예는, 비제한적으로, 템시롤리무스 (CC1779), 에베롤리무스 (RAD001), 데포롤리무스 (AP23573), AZD8055 (AstraZeneca), 및 OSI-027 (OSI)을 포함한다.
일 구현예에서, 상기 제제는 mTOR 억제제인 라파마이신(sirolimus)이다.
특정 구현예에서, 본원에서 사용하기 위한 예시적인 mTOR 억제제는 약 200 nM 이하, 바람직하게는 약 100 nm 이하, 보다 더 바람직하게는 약 60 nM 이하, 약 25 nM, 약 10 nM, 약 5 nM, 약 1 nM, 100 μM, 50 μM, 25 μM, 10 μM, 1 μM 이하의 IC50 (활성의 50%를 억제하는 농도)으로 mTORC1, mTORC2 또는 mTORC1 및 mTORC2 둘 모두를 억제한다. 일 측면에서, 본원에서 사용하기 위한 mTOR 억제제는 약 2 nM 내지 약 100 nm, 보다 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 50 nM, 보다 더 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 15 nM의 IC50으로 mTORC1, mTORC2 또는 mTORC1 및 mTORC2 둘 모두를 억제한다.
일 구현예에서, 예시적인 mTOR 억제제는 약 200 nM 이하, 바람직하게는 약 100 nm 이하, 보다 더 바람직하게는 약 60 nM 이하, 약 25 nM, 약 10 nM, 약 5 nM, 약 1 nM, 100 μM, 50 μM, 25 μM, 10 μM, 1 μM 이하의 IC50 (활성의 50%를 억제하는 농도)으로 PI3K 및 mTORC1, mTORC2 또는 mTORC1 및 mTORC2 및 PI3K 둘 모두를 억제한다. 일 측면에서, 본원에 사용하기 위한 mTOR 억제제는 약 2 nM 내지 약 100 nm, 보다 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 50 nM, 보다 더 바람직하게는 약 2 nM 내지 약 15 nM의 IC50으로 PI3K 및 mTORC1 또는 mTORC2 또는 mTORC1 및 mTORC2 및 PI3K 둘 모두를 억제한다.
본원에서 고려되는 특정 구현예에서 사용하기에 적합한 mTOR 억제제의 추가의 예시적인 예는 AZD8055, INK128, 라파마이신, PF-04691502, 및 에베롤리무스를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
mTOR는 웨스턴 블롯팅에서 포스포-특이적 항체에 의해 측정된 바와 같이 생리학적 기질 단백질, p70 S6 리보좀 단백질 키나아제 I(p70S6K1) 및 eIF4E 결합 단백질 1(4EBP1)에 대한 강력하고 특이적인 촉매 활성을 입증하는 것으로 나타났다.
일 구현예에서, PI3K/AKT/mTOR 경로의 억제제는 BI-D1870, H89, PF-4708671, FMK, 및 AT7867로 구성된 군으로부터 선택된 s6 키나아제 억제제다.
5.9. 조성물 및 제형
본원에서 고려되는 조성물은 본원에서 고려되는 바와 같은 하나 이상의 폴리펩타이드, 폴리뉴클레오타이드, 이를 포함하는 벡터, 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포 등을 포함할 수 있다. 조성물은 약학 조성물을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. "약학 조성물"은 단독으로 또는 요법의 하나 이상의 다른 양식과 조합하여 세포 또는 동물에게 투여하기 위해 약학적으로 허용 가능한 또는 생리학적으로 허용 가능한 용액에서 제제화된 조성물을 지칭한다. 또한, 원하는 경우, 본 개시내용의 조성물은 다른 작용제, 뿐만 아니라, 예를 들어, 사이토카인, 성장 인자, 호르몬, 소분자, 화학요법제, 전구약물, 약물, 항체, 또는 다른 다양한 제약상-활성제와 조합하여 투여될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 의도된 요법을 전달하는 조성물의 능력에 악영향을 미치지 않는다면, 조성물에 또한 포함될 수 있는 다른 성분에 사실상 제한이 없다.
문구 "약학적으로 허용 가능한"은 타당한 의학적 판단의 범위 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하는 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하기 위해 본원에 사용된다.
본원에서 "약학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제"는 인간 또는 가축에서 사용하기 위해 허용되는 것으로 미국 식품의약국에 의해 승인된 어떠한 보조제, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 보존제, 염료/착색제, 풍미제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁화제, 안정화제, 등장화제, 용매, 계면활성제 또는 유화제를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 예시적인 약학적으로 허용 가능한 담체는 락토스, 글루코스 및 수크로스와 같은 당; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트와 같은 셀룰로스 및 그의 유도체; 트래거캔스; 맥아; 젤라틴; 탈크; 코코아 버터, 왁스, 동물 및 식물성 지방, 파라핀, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 산화아연; 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유와 같은 오일; 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 한천; 마그네슘 히드록시드 및 알루미늄 히드록시드와 같은 완충제; 알긴산; 발열원이 없는 물; 등장성 염수; 링거액; 에틸 알콜; 포스페이트 완충제 용액; 및 약제학적 제형에 사용되는 임의의 다른 상용성 물질을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
특정 구현예에서, 본원에 제시된 조성물은 본원에서 고려되는 CAR-발현 면역 이펙터 세포의 양을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "양"은 임상 결과를 비롯한 유익하거나 바람직한 예방 또는 치료 결과를 달성하기 위해 유전적으로 변형된 치료 세포, 예를 들어 T 세포의 "유효한 양" 또는 "유효량"을 지칭한다.
“예방적 유효량(prophylactically effective amount)”은 목적하는 예방 결과를 달성하는 데 효과적인 유전적으로 변형된 치료 세포의 양을 의미한다. 반드시는 아니나 통상적으로, 예방적 투여량이 질병 이전 또는 초기 단계의 대상체에서 사용되기 때문에, 예방적 유효량은 치료적 유효량보다 적다.
유전적으로 변형된 치료 세포의 "치료적 유효량"은 개체의 질환 상태, 연령, 성별, 및 체중, 및 개체에서 원하는 반응을 유도하는 줄기 및 전구 세포의 능력과 같은 인자들에 따라 달라질 수 있다. 치료적 유효량은 또한 바이러스 또는 형질도입된 치료 세포의 임의의 독성 또는 해로운 효과가 치료적으로 유익한 효과에 의해 능가되는 양이다. 용어 "치료적 유효량"은 대상체 (예를 들어, 환자)를 "치료하는 데 효과적인 양을 포함한다. 치료 양이 표시될 때, 투여될 본 개시내용의 조성물의 정확한 양은 연령, 체중, 종양 크기, 감염 또는 전이의 정도, 및 환자 (대상체)의 상태의 개별적인 차이를 고려하여 의사에 의해 결정될 수 있다. 일반적으로, 본원에 기재된 T 세포를 포함하는 약학 조성물은 102 내지 1010 cells/kg 체중, 바람직하게는 105 내지 106 cells/kg 체중의 투여량으로 투여될 수 있고, 이는 이들 범위 내의 모든 정수 값을 포함한다. 세포의 수는 조성물이 그에 포함된 세포의 유형으로서 의도되는 궁극적인 용도에 의존할 것이다. 본원에 제공된 용도를 위해, 세포는 일반적으로 리터 이하의 부피로, 500 mL 이하, 심지어 250 mL 또는 100 mL 이하일 수 있다. 따라서, 목적하는 세포의 밀도는 전형적으로 106 cells/ml 초과이고, 일반적으로 107 cells/ml 초과, 일반적으로 108 cells/ml 초과이다. 임상적으로 관련된 수의 면역 세포는 105, 106, 107, 108, 109, 1010, 1011, 또는 1012 세포와 동일하거나 또는 그를 누적적으로 초과하는 다중 주입으로 배분될 수 있다. 일부 측면에서, 특히 모든 주입된 세포가 특정 표적 항원 (예를 들어, κ 또는 λ 경쇄)에 재지시될 것이기 때문에, 106/킬로그램 (환자당 106-1011)의 범위 내의 더 낮은 수의 세포가 투여될 수 있다. CAR 발현 세포 조성물을 이들 범위 내의 투여량으로 다중 횟수 투여할 수 있다. 세포는 요법을 받고 있는 환자에게 동종이계, 동계, 이종, 또는 자가유래성일 수 있다. 원하는 경우, 치료는 또한 면역 반응의 유도를 증진시키기 위해 본원에 기재된 바와 같은 미토겐 (예를 들어, PHA) 또는 림포카인, 사이토카인, 및/또는 케모카인 (예를 들어, IFN-γ, IL-2, IL-12, TNF-알파, IL-18, 및 TNF-베타, GM-CSF, IL-4, IL-13, Flt3-L, RANTES, MIP1α 등)의 투여를 포함할 수 있다.
일반적으로, 본원에 기재된 바와 같이 활성화되고 증폭된 세포를 포함하는 조성물은 면역손상된 개체에서 발생하는 질환의 치료 및 예방에 이용될 수 있다. 특히, 본원에서 고려되는 CAR-변형된 T 세포를 포함하는 조성물은 B 세포 악성종양의 치료에 사용된다. 본 개시내용의 CAR-변형된 T 세포는 단독으로, 또는 담체, 희석제, 부형제, 및/또는 다른 성분, 예컨대 IL-2 또는 다른 사이토카인 또는 세포 집단과 조합된 약학 조성물로서 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 약학 조성물은 1종 이상의 약학적으로 또는 생리학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 조합된 유전자 변형된 T 세포의 양을 포함한다.
CAR-발현 면역 이펙터 세포 집단, 예컨대 T 세포를 포함하는 본 개시내용의 약학 조성물은 완충제, 예컨대 중성 완충 염수, 포스페이트 완충 염수 등; 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스, 수크로스 또는 덱스트란, 만니톨; 단백질; 폴리펩타이드 또는 아미노산, 예컨대 글리신; 항산화제; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA 또는 글루타티온; 보조제 (예를 들어, 알루미늄 히드록시드); 및 보존제를 포함할 수 있다. 특정 측면에서, 본 개시내용의 조성물은 비경구 투여, 예를 들어 혈관내 (정맥내 또는 동맥내), 복강내 또는 근육내 투여를 위해 제제화된다.
액체 약학 조성물은 용액, 현탁액 또는 다른 유사한 형태이든 간에, 멸균 희석제, 예컨대 주사용수, 염수 용액, 바람직하게는 생리 염수, 링거액, 등장성 염화나트륨, 고정 오일, 예컨대 용매 또는 현탁 매질로서 작용할 수 있는 합성 모노 또는 디글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 용매; 항박테리아제, 예컨대 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 나트륨 바이술파이트; 킬레이트화제, 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트, 및 장성 조정제, 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 비경구 제제는 앰플, 일회용 주사기 또는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 다중 용량 바이알에 봉입될 수 있다. 주사가능한 약학 조성물은 바람직하게는 멸균이다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 조성물은 유효량의 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 단독으로 또는 1종 이상의 치료제와 조합하여 포함한다. 따라서, CAR-발현 면역 이펙터 세포 조성물은 단독으로 또는 다른 공지된 암 치료, 예컨대 방사선 요법, 화학요법, 이식, 면역요법, 호르몬 요법, 광역학 요법 등과 조합하여 투여될 수 있다. 조성물은 또한 항생제와 조합하여 투여될 수 있다. 이러한 치료제는 관련 기술분야에서 본원에 기재된 바와 같은 특정 질환 상태, 예컨대 특정 암에 대한 표준 치료로서 인정될 수 있다. 고려되는 예시적인 치료제는 사이토카인, 성장 인자, 스테로이드, NSAID, DMARD, 항-염증제, 화학요법제, 방사선요법제, 치료 항체, 또는 다른 활성제 및 보조제를 포함한다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물은 임의의 수의 화학요법제, 예를 들어 항암제와 함께 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 화학요법제, 예를 들어 항암제는 CAR T 세포 요법이 대상체에게 치료적으로 유익하지 않을 것임을 나타내는, 본원의 다른 곳에 기술된 특정 상태가 발생하는 경우 CAR T 세포 요법, 예를 들어 BCMA CAR T 세포 요법의 투여 후에 대상체에게 투여된다. 화학요법제의 예시적인 예는 알킬화제, 예를 들어 티오테파 및 사이클로포스파미드(CYTOXAN™); 알킬 설포네이트, 예를 들어 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예를 들어 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파, 및 유레도파; 에틸렌이민 및 메틸아멜라민, 예를 들어 알트레타민, 트라이에틸렌멜라민, 트라이에틸렌포스포아미드, 트라이에틸렌티오포스파오라미드 및 트라이메틸올롤멜라민 레주메; 질소 머스터드, 예를 들어 클로람부실, 클로르나파진, 콜로포스파미드, 에스트라머스틴, 이포스파미드, 메클로르에타민, 메클로르에타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비친, 펜에스테린, 프레드니머스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스터드; 니트로스우레아, 예를 들어 카머스틴, 클로로조토신, 포테머스틴, 로머스틴, 니머스틴, 라니머스틴; 항생제, 예를 들어 아클라시노마이신, 액티노마이신, 오트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 칼케아미신, 카라비신, 카르미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-다이아조-5-옥소-L-노르류신, 독소루비신, 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 마이코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 퓨로마이신, 퀘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 튜베르시딘, 유베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항-대사체, 예를 들어 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU); 폴산 유사체, 예를 들어 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트라이메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예를 들어 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예를 들어 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자유리딘, 카르모푸어, 시타라빈, 다이데옥시유리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록슈리딘, 5-FU; 안드로젠, 예를 들어 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-아드레날, 예를 들어 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 폴산 보충제, 예를 들어 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레뷸린산; 암사크린; 베스트라부실; 비스안트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포르미틴; 엘리프티늄 아세테이트; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다민; 미토구아존; 미톡산트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 포도필린산; 2-에틸하이드라지드; 프로카바진; PSK®; 라족산; 시조피란; 스피로제르마늄; 테누아존산; 트라이아지쿠온; 2,2',2"-트라이클로로트라이에틸아민; 우레탄; 빈데신; 다카바진; 만노머스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드("Ara-C"); 사이클로포스파미드; 티오테파; 탁소이드, 예를 들어 파클리탁셀(TAXOL®, 브리스톨-마이어스 스큅 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology), 미국 뉴저지주 프린스톤 소재), 및 도세탁셀(TAXOTERE®, 롱 푸랑 로리(Rhne-Poulenc Rorer), 프랑스 안토니 소재); 클로람부실; 젬시타빈; 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이트; 백금 유사체, 예를 들어 시스플라틴 및 카보플라틴; 빈블라스틴; 백금; 에토포시드(VP-16); 이포스파미드; 미토마이신 C; 미톡산트론; 빈크리스틴; 비노렐빈; 나벨빈; 노반트론; 테니포시드; 다우노마이신; 아미노프테린; 젤로다; 이반드로네이트; CPT-11; 국소이성화효소 억제제 RFS 2000; 다이플루오로메틸로미틴(DMFO); 레티노산 유도체, 예를 들어 Targretin™(벡사로텐), Panretin™(알리트레티노인); ONTAK™(데닐류킨 디프티톡스); 에스페라미신; 카페시타빈; 및 상기 중 임의의 것의 약학적으로 허용 가능한 염, 산 또는 유도체를 포함한다. 또한 암에 대한 호르몬 작용을 조절하거나 억제하는 작용을 하는 항-호르몬제, 예를 들어 항-에스트로젠, 예를 들어 타목시펜, 랄록시펜, 아로마타제 억제성 4(5)-아미다졸, 4-하이드록시타목시펜, 트라이옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤, 및 토레미펜(파레스톤); 및 항-안드로젠, 예를 들어 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드, 및 고세렐린; 및 상기 중 임의의 것의 약학적으로 허용 가능한 염, 산 또는 유도체가 이러한 정의 내에 포함된다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 CAR-발현 면역 이펙터 세포(예를 들어, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포), 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)를 포함하는 조성물은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 레날리도마이드와 함께 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도미드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 28일에 매일 1회 약 10 mg의 투여량으로 지속적으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 5 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 10 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 약 15 mg의 투여량으로 격일로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 레날리도마이드는 최대 12주기 동안 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 1회 약 20 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 레날리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 CAR-발현 면역 이펙터 세포(예를 들어, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포), 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)를 포함하는 조성물은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 포말리도마이드와 함께 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드는 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 매일 1회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 질환이 진행될 때까지 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 포말리도마이드는 다발성 골수종(MM)을 치료하기 위해 질환이 진행될 때까지 대상체에게 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 경구로 섭취되는 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, 포말리도마이드 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 CAR-발현 면역 이펙터 세포(예를 들어, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포), 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)를 포함하는 조성물은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 CC-220 (이베르도마이드)와 함께 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
특정 구현예에서, 본원에 개시된 CAR-발현 면역 이펙터 세포(예를 들어, BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포(BCMA CAR T 세포), 예를 들어, 이데캅타진 비클류셀(ide-cel) 세포)를 포함하는 조성물은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 유지 요법으로서 CC-220 (이베르도마이드) 및 덱사메타손과 함께 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 직후에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1주, 2주, 3주 또는 4주에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 투여 후 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월 또는 12개월에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 덱사메타손은 약 40 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 경구로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 약 20-60 mgs의 용량으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220은 28일 주기의 21일 동안 매일, 예를 들어 28일 주기의 1 내지 21일에 매일, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 매일 약 15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있고, 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에, 필요에 따라 반복되는 28일 주기로 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손은 다발성 골수종 (MM)을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 모든 환자에게 권장된다. 특정 구현예에서, CC-220 및 덱사메타손 유지 요법은 적절한 골수 회복 시 또는 ide-cel 주입 후 90일 중 더 늦은 시점부터 개시되어야 한다.
다양한 다른 치료제가 본원에 기재된 조성물과 함께 사용될 수 있다. 일 구현예에서, CAR-발현 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물은 항-염증제와 함께 투여된다. 항-염증제 또는 약물은 스테로이드 및 글루코코르티코이드 (베타메타손, 부데소니드, 덱사메타손, 히드로코르티손 아세테이트, 히드로코르티손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니손, 트리암시놀론), 비스테로이드성 항-염증 약물 (NSAIDS), 예컨대 아스피린, 이부프로펜, 나프록센, 메토트렉세이트, 술파살라진, 레플루노미드, 항-TNF 의약, 사이클로포스파마이드 및 미코페놀레이트를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
다른 예시적인 NSAID는 이부프로펜, 나프록센, 나프록센 소듐, Cox-2 억제제, 예컨대 VIOXX® (로페콕시브) 및 CELEBREX® (세레콕시브), 및 시알레이트로 구성된 군으로부터 선택된다. 예시적인 진통제는 아세트아미노펜, 옥시코돈, 트라마돌, 및 프로폭시펜 하이드로클로라이드로 구성된 군으로부터 선택된다. 예시적인 글루코코르티코이드는 코르티손, 덱사메타손, 하이드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 및 프레드니손으로 구성된 군으로부터 선택된다. 예시적인 생물학적 반응 변형제는 세포 표면 마커 (예를 들어, CD4, CD5, 등)에 대해 지시된 분자, 사이토카인 억제제, 예컨대 TNF 길항제 (예를 들어, 에타너셉트 (ENBREL®), 아달리무마브 (HUMIRA®) 및 인플릭시마브 (REMICADE®)), 케모카인 억제제 및 접착 분자 억제제를 포함한다. 생물학적 반응 변형제는 모노클로날 항체 뿐만 아니라 분자의 재조합 형태를 포함한다. 예시적인 DMARD는 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 사이클로스포린, 메토트렉세이트, 페니실라민, 레플루노마이드, 설파살라진, 하이드록시클로로퀸, 골드 (또는 알라우라노인) 및 근육내) 및 미노사이클린을 포함한다.
본원에서 고려되는 CAR 변형된 T 세포와 조합하기에 적합한 치료 항체의 예시적인 예는 바비툭시맙, 베바시주맙 (아바스틴), 비바투주맙, 블리나투모맙, 코투무맙, 다라투무맙, 듀ligotumab, 다세투주맙, 달로투주맙, 엘로투주맙 (HuLuc63), 겜투주맙, 이브리투모맙, 인다투주맙, 인투주맙, 로보투주맙, 루투무맙, 밀라투주맙, 모세투모맙, 오카투주맙, 오파투무맙, 리툭시맙, 실툭시맙, 에프로투무맙, 및 우블리툭시맙을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
PD-1 또는 PD-L1 및/또는 CTLA-4에 대한 항체는 본원에 개시된 CAR T 세포, 예를 들어 BCMA CAR T 세포, 예를 들어 BCMA-2 단일 쇄 Fv 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체를 발현하는 CAR T 세포, 예를 들어 이데캅타진 비클류셀 세포와 조합하여 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, PD-1 항체는 니볼루맙, 펨브롤리주맙 및 피딜리주맙으로 구성된 군에서 선택된다. 특정 구현예에서, PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 다우발루맙 및 BMS-986559로 구성된 군에서 선택된다. 특정 구현예에서, CTLA-4 항체는 이필리무맙 및 트레멜리무맙으로 구성된 군에서 선택된다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 조성물은 사이토카인과 함께 투여된다. 본원에 사용된 "사이토카인(cytokine)"은 세포 간 매개체로서 다른 세포에 작용하는 하나의 세포 집단에 의해 방출된 단백질에 대한 일반적인 용어를 의미한다. 상기 사이토카인의 예는 림포카인, 모노카인 및 전통적인 폴리펩타이드 호르몬이다. 사이토카인 중에는 성장 호르몬, 예컨대 인간 성장 호르몬, N-메티오닐 인간 성장 호르몬 및 소 성장 호르몬(bovine growth hormone); 부갑상선 호르몬(parathyroid hormone); 티록신(thyroxine); 인슐린; 프로인슐린(proinsulin); 릴랙신(relaxin); 프로릴랙신(prorelaxin); 당단백질 호르몬(glycoprotein hormones), 예컨대 여포 자극 호르몬(FSH), 갑상선 자극 호르몬(TSH) 및 황체 형성 호르몬(LH); 간 성장 인자(hepatic growth factor); 섬유아세포 성장 인자(fibroblast growth factor); 프로락틴(prolactin); 태반성 락토겐(placental lactogen); 종양 괴사 인자-알파 및 -베타(tumor necrosis factor-alpha and -beta); 뮬러관 억제 물질(mullerian-inhibiting substance); 마우스 성선자극호르몬 관련 펩타이드(mouse gonadotropin-associated peptide); 인히빈(inhibin); 액티빈(activin); 혈관 내피 성장 인자; 인테그린(integrin); 트롬보포이에틴(TPO); 신경 성장 인자, 예컨대 NGF-베타; 혈소판 성장 인자; TGF-알파 및 TGF-베타 등의 형질 전환 성장 인자(TGF); 인슐린 유사 성장 인자-I 및 -II; 에리트로포이에틴(EPO); 골 유도성 인자(osteoinductive factor); 인터페론-알파, 베타 및 -감마와 같은 인터페론; 대식 세포-CSF(M-CSF)와 같은 집락 자극 인자(colony stimulating factor, CSF); 과립구-대식 세포-CSF(GM-CSF); 과립구-CSF(G-CSF); 인터루킨(IL), 예컨대 IL-1, IL-1알파, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; TNF-알파 또는 TNF-베타와 같은 종양 괴사 인자인 IL-15, IL-21; 및 LIF 및 키트 리간드(kit ligand, KL)를 포함한 다른 폴리펩타이드 인자가 포함된다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 사이토카인은 천연 공급원 또는 재조합 세포 배양물로부터의 단백질, 및 천연(native) 서열 사이토카인의 생물학적 활성 등가물을 포함한다.
특정 구현예에서, 본원에 기재된 조성물은 사이토카인 방출 증후군 (CRS)을 치료하기 위한 요법과 함께 투여된다. CRS는 특정 생물학적 치료제, 예를 들어 키메라 항원 수용체-발현 T 세포 또는 NK 세포 (CAR T 세포 또는 CAR NK 세포), 예를 들어 BCMA CAR T 세포의 투여 후에 발생할 수 있는 전신 염증 면역 반응이다. CRS는 하기와 같이, 사이토카인 폭풍, 유사한 임상 표현형 및 바이오마커 서명을 갖는 상태로부터 구별될 수 있다. CRS에서, T 세포는 종양 항원의 인식 시에 활성화되는 반면, 사이토카인 폭풍에서, 면역계는 종양 표적화와 독립적으로 활성화되며; CRS에서, IL-6은 핵심 매개체이며, 따라서 증상은 항-IL-6 또는 항-IL-6 수용체 (IL-6R) 억제제를 사용하여 완화될 수 있는 반면, 사이토카인 폭풍에서, 종양 괴사 인자 알파 (TNFα) 및 인터페론 감마 (IFNγ)는 핵심 매개체이며, 증상은 항-염증 요법, 예를 들어 코르티코스테로이드를 사용하여 완화될 수 있다. 항-IL-6 수용체 (IL-6R) 항체, 예컨대 토실리주맙은 CRS를, 임의로 지지 관리와 함께 관리하는 데 사용될 수 있다. 항-IL-6 항체, 예컨대 실툭시맙은 CRS를, 임의로 지지 요법과 함께 관리하는 데 추가로 또는 대안적으로 사용될 수 있다. IL-6 차단 (예를 들어, 항-IL-6R 항체 또는 항-IL-6 항체를 사용)은 CAR T 세포 또는 CAR NK 세포가 주입된 환자가 등급 1, 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 CRS 중 임의의 것을 나타내지만, 전형적으로 보다 중증 등급 (예를 들어, 등급 3 또는 등급 4)을 위해 예약된 경우에 사용될 수 있다. 코르티코스테로이드는 CRS를 동반하거나 그에 의해 유발되는 신경독성을 관리하기 위해 투여될 수 있거나, 또는 IL-6 차단으로 치료된 환자에게 투여될 수 있지만, 이는 일반적으로 CRS에 대한 제1-라인 치료로서 사용되지 않는다. CRS의 관리에 대한 다른 양식은 예를 들어, Shimabukuro-Vornhagen et al., “Cytokine Release Syndrome,” J. Immunother . Cancer 6:56 (2018)에 기재되어 있다.
표 4: CRS는 Penn 등급 척도를 사용하여 등급이 매겨질 수 있음
Figure pct00011
표 5: CRS는 CTCAE (National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events) v4.0에 의해 등급이 매겨질 수도 있음
Figure pct00012
표 6: CRS는 Lee et al . (“Current concepts in the diagnosis and management of cytokine release syndrome,” Blood, 2014, 124:188- 195)의 시스템에 의해 등급이 매겨질 수도 있음
Figure pct00013
특정 구현예에서, 조성물은 본원에 개시된 PI3K 억제제의 존재 하에 배양되고 하기 마커: CD3, CD4, CD8, CD28, CD45RA, CD45RO, CD62, CD127, 및 HLA-DR 중 하나 이상을 발현하는 본원에서 고려되는 CAR T 세포를 포함하고, 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리될 수 있다. 일 구현예에서, 조성물은 CD62L, CCR7, CD28, CD27, CD122, CD127, CD197; 및 CD38 또는 CD62L, CD127, CD197 및 CD38로 구성된 군으로부터 선택된 마커 중 하나 이상을 발현하는 T 세포의 특이적 하위집단을 포함하고, 양성 또는 음성 선택 기술에 의해 추가로 단리된다. 다양한 구현예에서, 조성물은 CD57, CD244, CD160, PD-1, CTLA4, TIM3 및 LAG3 중 하나 이상을 발현하지 않거나 실질적으로 발현하지 않는다.
일 구현예에서, CD62L, CD127, CD197 및 CD38로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 마커의 발현은 PI3K 억제제 없이 활성화되고 증폭되는 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5 배, 적어도 2 배, 적어도 3 배, 적어도 4 배, 적어도 5 배, 적어도 6 배, 적어도 7 배, 적어도 8 배, 적어도 9 배, 적어도 10 배, 적어도 25 배 또는 그 이상 증가된다.
일 구현예에서, CD57, CD244, CD160, PD-1, CTLA4, TIM3 및 LAG3로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 마커의 발현은 PI3K 억제제로 활성화되고 증폭되는 T 세포의 집단과 비교하여 적어도 1.5 배, 적어도 2 배, 적어도 3 배, 적어도 4 배, 적어도 5 배, 적어도 6 배, 적어도 7 배, 적어도 8 배, 적어도 9 배, 적어도 10 배, 적어도 25 배 또는 그 이상 감소된다.
5.10. 치료 방법
본원에서 고려되는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포는 면역 조절 병태 및 혈액 악성종양을 포함하지만 이에 제한되지 않는 B 세포 관련 병태의 치료에 사용하기 위한 입양 면역요법의 개선된 방법을 제공한다.
5.10.1. 일반적인 구현예
특정 구현예에서, 1차 면역 이펙터 세포의 특이성은 본원에서 고려되는 CAR로 1차 면역 이펙터 세포를 유전적으로 변형시킴으로써 B 세포에 재지시된다. 다양한 구현예에서, 바이러스 벡터는 BCMA 폴리펩타이드, 예를 들어 인간 BCMA 폴리펩타이드에 결합하는 뮤린 항-BCMA 항원 결합 도메인; 힌지 도메인; TM 도메인을 CAR의 세포내 신호전달 도메인에 연결하는 막관통 (TM) 도메인, 짧은 올리고- 또는 폴리펩타이드 링커; 및 하나 이상의 세포내 공자극 신호전달 도메인; 및 1차 신호전달 도메인을 포함하는 CAR을 코딩하는 특정 폴리뉴클레오타이드로 면역 이펙터 세포를 유전적으로 변형시키기 위해 사용된다.
일 구현예에서, T 세포가 BCMA 발현 B 세포를 표적으로 하는 CAR을 발현하도록 유전적으로 변형된 세포 요법의 유형이 포함된다. 또 다른 구현예에서, 항-BCMA CAR T 세포는 CAR T 세포의 치료 특성 및 지속성을 증가시키기 위해 IL-2 및 PI3K 억제제의 존재 하에 배양된다. 이어서, CAR T 세포는 이를 필요로 하는 수용자에게 주입된다. 주입된 세포는 수용자에서 B 세포를 유발하는 질환을 사멸시킬 수 있다. 항체 요법과 달리, CAR T 세포는 생체내에서 복제하여 지속된 암 요법을 유도할 수 있는 장기간 지속성을 생성할 수 있다.
일 구현예에서, CAR T 세포는 강력한 생체 내 T 세포 증폭을 겪을 수 있고 연장된 시간 동안 지속될 수 있다. 또 다른 구현예에서, CAR T 세포는 임의의 추가 종양 형성 또는 성장을 억제하기 위해 재활성화될 수 있는 특정 기억 T 세포로 진화한다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR을 포함하는 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물은 비정상적인 B 세포 활성과 관련된 상태의 치료에 사용된다.
본원에서 고려되는 CAR을 포함하는 면역 이펙터 세포를 사용하여 치료, 예방 또는 개선될 수 있는 상태의 예시적인 예는 전신 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 중증 근무력증, 자가면역 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판감소성 자반증, 항-인지질 증후군, Chagas' 질환, Grave' 질환, Wegener's granulomatosis, 다발성 동맥염, 쇼그렌 증후군, 심상성 천포창, 경피증, 다발성 경화증, 항-인지질 증후군, ANCA 관련 혈관염, 굿파스쳐병, 카와사키병, 및 신속하게 진행성 사구체신염을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
상기 변형된 면역 이펙터 세포는 또한 중쇄 질환, 원발성 또는 면역세포 관련 아밀로이드증, 및 결정되지 않은 유의성의 단클론성 감마병증(monoclonal gammopathy, MGUS)과 같은 형질 세포 장애를 가질 수 있다. 
본원에서 "B 세포 악성 종양"은 하기에서 논의되는 바와 같이 B 세포(면역계 세포의 유형)의 형태를 형성하는 암의 유형을 지칭한다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 CAR-변형된 T 세포를 포함하는 조성물은 B 세포 악성종양, 예를 들어 다발성 골수종 (MM) 및 비-호지킨 림프종 (NHL)을 포함하나 이에 제한되지는 않는 혈액 악성종양의 치료에 사용된다.
다발성 골수종은 이러한 유형의 세포의 단일 클론의 신생물 형질전환을 특징으로 하는 성숙한 형질 세포 형태의 B 세포 악성종양이다. 이러한 형질 세포는 골수(BM)에서 증식하고 인접한 뼈 및 때때로 혈액에 침입할 수 있다. 다발성 골수종의 변이체 형태는 과대 다발성 골수종, 더 오래된 다발성 골수종, 형질 세포 백혈병, 비-분비성 골수종, IgD 골수종, 골경화성 골수종, 뼈의 고립성 혈장세포종, 및 수질성 혈장세포종을 포함한다(예를 들어, Braunwald, et al. (eds), Harrison’s Principles of Internal Medicine, 15th Edition (McGraw-Hill 2001) 참조).
다발성 골수종은 다음과 같이 단계화될 수 있다:
표 7: Durie -Salmon MM 병기 기준
Figure pct00014
표 8: 국제 병기 시스템(International Staging System) MM 병기 기준
Figure pct00015
비-호지킨 림프종은 림프구(백혈구)의 암의 큰 그룹을 포함한다. 비-호지킨 림프종은 임의의 연령에서 발생할 수 있고, 종종 정상, 열, 및 체중 손실보다 더 큰 림프절에 의해 표시된다. 비-호지킨 림프종의 많은 상이한 유형이 존재한다. 예를 들어, 비-호지킨 림프종은 공격성(고속-성장) 및 무통성(저속-성장) 유형으로 분할될 수 있다. 비-호지킨 림프종은 B 세포 및 T-세포로부터 유래될 수 있지만, 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "비-호지킨 림프종" 및 "B 세포 비-호지킨 림프종"은 상호교환적으로 사용된다. B 세포 비-호지킨 림프종(NHL)은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)을 포함한다. 골수 또는 줄기 세포 이식 후 발생하는 림프종은 일반적으로 B 세포 비-호지킨 림프종이다.
만성 림프구성 백혈병(CLL)은 B 림프구, 또는 B 세포로 불리는 미성숙 백혈구, 또는 B 세포의 느린 증가를 야기하는 무통성(저-성장) 암이다. 암 세포는 혈액 및 골수를 통해 확산되고, 또한 림프절 또는 간 및 비장과 같은 다른 기관에 영향을 미칠 수 있다. CLL은 결국 골수가 고장나게 한다. 때때로, 질환의 후기 단계에서, 질환은 작은 림프구성 림프종으로 불린다.
특정 구현예에서, 본원에서 고려되는 치료적 유효량의 CAR-발현 면역 이펙터 세포 또는 이를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 단독으로 또는 1종 이상의 치료제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는 방법이 제공된다. 특정 구현예에서, 본 개시내용의 세포는 비정상적 B 세포 활성 또는 B 세포 악성종양과 연관된 상태를 발생시킬 위험이 있는 환자의 치료에 사용된다. 따라서, 특정 구현예에서, 비정상적 B 세포 활성 또는 B 세포 악성종양과 연관된 상태의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 본원에서 고려되는 치료적 유효량의 CAR-변형된 세포를 투여하는 것을 포함하는, 비정상적 B 세포 활성 또는 B 세포 악성종양과 연관된 상태의 치료 또는 예방을 위한 방법이 본원에 제시된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "개체" 및 "대상체"는 종종 상호교환적으로 사용되며, 유전자 요법 벡터, 세포-기반 치료제, 및 본원의 다른 곳에 개시된 방법에 의해 치료될 수 있는 질환, 장애, 또는 병태의 증상을 나타내는 임의의 동물을 지칭한다. 구체적인 구현예에서, 대상체는 조혈계, 예를 들어 B 세포 악성종양의 질환, 장애, 또는 병태의 증상을 나타내는 임의의 동물을 포함하며, 이는 유전자 요법 벡터, 세포-기반 치료제, 및 본원의 다른 곳에 개시된 방법에 의해 치료될 수 있다. 적합한 대상체 (예를 들어, 환자)는 실험실 동물 (예를 들어, 마우스, 래트, 토끼, 또는 기니 피그), 농장 동물, 및 가축 또는 애완동물 (예를 들어, 고양이 또는 개)을 포함한다. 비-인간 영장류 및 바람직하게는 인간 환자가 포함된다. 전형적인 대상체는 B 세포 악성종양을 갖는 인간 환자를 포함하며, B 세포 악성종양으로 진단되었거나, 또는 B 세포 악성종양을 갖거나 가질 위험이 있다.
본원에서 사용된 용어, "환자"는 유전자 치료 벡터, 세포 기반 치료제 및 본 발명의 다른 곳에 개시된 방법에 의해 치료될 수 있는 특정 질환, 장애 또는 병태로 진단된 대상체를 의미한다.
본원에서 사용된 "치료" 또는 "치료하는"은 질환 또는 병리학적 병태의 증상 또는 병리에 대한 임의의 유익하거나 바람직한 효과를 포함하며, 치료되는 질환 또는 병태의 하나 이상의 측정가능한 마커에서의 심지어 최소의 감소를 포함할 수 있다. 치료는 임의로 질환 또는 병태의 증상의 감소 또는 개선, 또는 질환 또는 병태의 진행의 지연을 수반할 수 있다. "치료"는 반드시 질환 또는 병태, 또는 이의 연관된 증상의 완전한 박멸 또는 치유를 나타내지는 않는다.
본원에서 사용된 "예방하다" 및 "예방한", "예방하는" 등과 같은 유사한 용어는 질환 또는 병태의 발병 또는 재발 가능성을 예방, 억제 또는 감소시키기 위한 접근법을 의미한다. 또한, 질환 또는 병태의 발병 또는 재발을 지연시키거나, 질환 또는 병태의 증상의 발병 또는 재발을 지연시키는 것을 의미한다. 본원에서 사용된 "예방" 및 유사한 용어는 또한 질환 또는 병태의 발병 또는 재발 전에 질환 또는 병태의 강도, 효과, 증상 및/또는 부담을 감소시키는 것을 포함한다.
"향상하다" 또는 "촉진하다", 또는 "증가시키다" 또는 "증폭시키다"는 일반적으로 비히클 또는 대조군 분자/조성물에 의해 야기된 반응과 비교하여 더 큰 생리학적 반응(즉, 하류 효과)을 생성, 유도 또는 야기하기 위해 본원에서 고려되는 조성물, 예를 들면, 유전자 변형된 T 세포 또는 CAR을 인코딩하는 벡터의 능력을 지칭한다. 측정 가능한 생리학적 반응은 본원의 기술 및 설명에서 이해로부터 명백한 다른 것들 중에서도, T 세포 증폭, 활성화, 지속성의 증가, 및/또는 암 세포 사멸 능력의 증가를 포함할 수 있다. "증가된" 또는 "향상된" 양은 전형적으로 "통상적으로 유의한" 양이고, 비히클 또는 대조군 조성물에 의해 생성된 반응의 1.1, 1.2, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30배 또는 그 이상(예를 들면, 500, 1000 배)(1 사이 및 그 이상의 모든 정수 및 소수점, 예를 들면, 1.5, 1.6, 1.7. 1.8 등을 포함함)인 증가를 포함할 수 있다.
"감소하다" 또는 "낮추다", 또는 "적게 하다", 또는 "줄이다", 또는 "약화시키다"는 일반적으로 비히클 또는 대조군 분자/조성물에 의해 야기되는 반응과 비교하여 더 적은 생리학적 반응(즉, 하류 효과)을 생성, 유도 또는 야기하는 것으로 본원에서 고려되는 조성물의 능력을 지칭한다. "감소된" 또는 "줄은" 양은 전형적으로 "통상적으로 유의한" 양이고, 비히클, 대조군 조성물, 또는 특정 세포 계통에서 반응에 의해 생성된 반응(기준 반응)의 1.1, 1.2, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30배 또는 그 이상(예를 들면, 500, 1000 배)(1 사이 및 그 이상의 모든 정수 및 소수점, 예를 들면, 1.5, 1.6, 1.7. 1.8 등을 포함함)인 감소를 포함할 수 있다.
"유지하다", 또는 "보존하다", 또는 "유지", 또는 "변화 없음", 또는 "실질적 변화 없음", 또는 "실질적 감소 없음"은 일반적으로 비히클, 대조군 분자/조성물, 또는 특정 세포 계통에서의 반응에 의해 야기되는 반응과 비교하여, 세포에서 실질적으로 유사한 생리학적 반응(즉, 하류 효과)을 생성, 유도, 또는 야기하는 것으로 고려되는 조성물의 능력을 지칭한다. 비교 가능한 반응은 기준 반응과 유의하게 상이하지 않거나 측정가능하게 상이하지 않은 것이다.
일 구현예에서, B 세포 관련 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 B 세포 관련 병태를 치료하는 방법은 본원에서 고려되는 유전적으로 변형된 면역 이펙터 세포를 포함하는 조성물의 유효량, 예를 들어, 치료적 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 적절한 투여량이 임상 시험에 의해 결정될 수 있지만, 투여의 양 및 빈도는 환자의 병태, 및 환자의 질환의 유형 및 중증도와 같은 인자에 의해 결정될 것이다.
일 구현예에서, 대상체에게 투여되는 조성물 중 T 세포의 양은 적어도 0.1 x 105 세포, 적어도 0.5 x 105 세포, 적어도 1 x 105 세포, 적어도 5 x 105 세포, 적어도 1 x 106 세포, 적어도 0.5 x 107 세포, 적어도 1 x 107 세포, 적어도 0.5 x 108 세포, 적어도 1 x 108 세포, 적어도 0.5 x 109 세포, 적어도 1 x 109 세포, 적어도 2 x 109 세포, 적어도 3 x 109 세포, 적어도 4 x 109 세포, 적어도 5 x 109 세포, 또는 적어도 1 x 1010 세포이다. 특정 구현예에서, 약 1 x 107 CAR T 세포 내지 약 1 x 109 CAR T 세포, 약 2 x 107 CAR T 세포 내지 약 0.9 x 109 CAR T 세포, 약 3 x 107 CAR T 세포 내지 약 0.8 x 109 CAR T 세포, 약 4 x 107 CAR T 세포 내지 약 0.7 x 109 CAR T 세포, 약 5 x 107 CAR T 세포 내지 약 0.6 x 109 CAR T 세포, 또는 약 5 x 107 CAR T 세포 내지 약 0.5 x 109 CAR T 세포는 대상체에 투여된다.
일 구현예에서, 대상체에게 투여되는 조성물 중 T 세포의 양은 적어도 0.1 x 104 cells/kg 의 체중, 적어도 0.5 x 104 cells/kg 의 체중, 적어도 1 x 104 cells/kg 의 체중, 적어도 5 x 104 cells/kg 의 체중, 적어도 1 x 105 cells/kg 의 체중, 적어도 0.5 x 106 cells/kg 의 체중, 적어도 1 x 106 cells/kg 의 체중, 적어도 0.5 x 107 cells/kg 의 체중, 적어도 1 x 107 cells/kg 의 체중, 적어도 0.5 x 108 cells/kg 의 체중, 적어도 1 x 108 cells/kg 의 체중, 적어도 2 x 108 cells/kg 의 체중, 적어도 3 x 108 cells/kg 의 체중, 적어도 4 x 108 cells/kg 의 체중, 적어도 5 x 108 cells/kg 의 체중, 또는 적어도 1 x 109 cells/kg 의 체중이다. 특정 구현예에서, 약 1 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 1 x 108 CAR T cells/kg 의 체중, 약 2 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 0.9 x 108 CAR T cells/kg 의 체중, 약 3 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 0.8 x 108 CAR T cells/kg 의 체중, 약 4 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 0.7 x 108 CAR T cells/kg 의 체중, 약 5 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 0.6 x 108 CAR T cells/kg 의 체중, 또는 약 5 x 106 CAR T cells/kg 의 체중 내지 약 0.5 x 108 CAR T cells/kg 의 체중은 대상체에 투여된다.
당업자는 본 발명의 조성물의 다중 투여가 목적하는 치료를 달성하기 위해 요구될 수 있음을 인식할 것이다. 예를 들어, 조성물은 1주, 2주, 3주, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 1년, 2년, 5년, 1년, 10년 또는 그 이상에 걸쳐 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10회 이상 투여될 수 있다.
특정 구현예에서, 활성화된 면역 이펙터 세포를 대상체에게 투여한 후, 후속적으로 적혈구를 투여하고 (또는 성분채집술을 수행한 후), 그로부터 본 개시내용에 따라 면역 이펙터 세포를 활성화시키고, 이들 활성화된 및 증폭된 면역 이펙터 세포를 갖는 환자를 재주입하는 것이 바람직할 수 있다. 이러한 공정은 수주마다 다수회 수행될 수 있다. 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 10 cc 내지 400 cc의 혈액 흡인물로부터 활성화될 수 있다. 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 20 cc, 30 cc, 40 cc, 50 cc, 60 cc, 70 cc, 80 cc, 90 cc, 100 cc, 150 cc, 200 cc, 250 cc, 300 cc, 350 cc, 또는 400 cc 이상의 혈액 흡인물로부터 활성화된다. 이론에 얽매이는 것은 아니지만, 이러한 다중 혈액 흡인물/다중 재주입 프로토콜을 사용하는 것은 면역 이펙터 세포의 특정 집단을 선택하는 역할을 할 수 있다.
본원에서 고려되는 조성물의 투여는 에어로졸 흡입, 주사, 섭취, 수혈, 이식 또는 이식을 포함하는 임의의 편리한 방식으로 수행될 수 있다. 일 구현예에서, 조성물은 비경구로 투여된다. 본원에서 사용된 문구 "비경구 투여" 및 "비경구로 투여된"은 통상적으로 주사에 의한 장내 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 지칭하며, 제한 없이, 혈관내, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척추강내, 피막내, 안와내, 종양내, 심장내, 피내, 복강내, 기관내, 피하, 피하하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척추내 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다. 일 구현예에서, 본원에서 고려되는 조성물은 종양, 림프절 또는 감염 부위로의 직접 주사에 의해 대상체에게 투여된다.
일 구현예에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 조성물을 투여하여 대상체에서 B 세포 관련 병태에 대한 세포 면역 반응을 증가시킨다. 면역 반응은 감염된 세포를 사멸시킬 수 있는 세포독성 T 세포, 조절 T 세포, 및 헬퍼 T 세포 반응에 의해 매개되는 세포 면역 반응을 포함할 수 있다. 따라서, B 세포를 활성화시킬 수 있는 헬퍼 T 세포에 의해 주로 매개되는 체액성 면역 반응이 또한 유도될 수 있다. 본 개시내용의 조성물에 의해 유도된 면역 반응의 유형을 분석하기 위해 다양한 기술이 사용될 수 있으며, 이는 당업계에 잘 설명되어 있다; 예를 들어, Current Protocols in Immunology, Edited by: John E. Coligan, Ada M. Kruisbeek, David H. Margulies, Ethan M. Shevach, Warren Strober (2001) John Wiley & Sons, NY, N.Y.
T 세포-매개된 사멸의 경우에, CAR-리간드 결합은 T 세포에 대한 CAR 신호전달을 개시하여, 다양한 메카니즘에 의해 표적 세포 아폽토시스를 유도할 수 있는 단백질을 생성 또는 방출하도록 T 세포를 유도하는 다양한 T 세포 신호전달 경로의 활성화를 초래한다. 이들 T 세포-매개된 메카니즘은 (이에 제한되지 않음) T 세포로부터 표적 세포 내로의 세포내 세포독성 과립의 전달, 표적 세포 사멸을 직접적으로 (또는 다른 킬러 이펙터 세포의 동원을 통해 간접적으로) 유도할 수 있는 전-염증성 사이토카인의 T 세포 분비, 및 표적 세포 상의 그의 동족 사멸 수용체 (예를 들어, Fas)에 대한 결합 후에 표적 세포 아폽토시스를 유도하는 T 세포 표면 상의 사멸 수용체 리간드 (예를 들어, FasL)의 상향 조절을 포함한다.
일 구현예에서, BCMA-발현 B 세포 관련 병태로 진단된 대상체로부터 면역 이펙터 세포를 제거하는 단계, 상기 면역 이펙터 세포를 본원에서 고려되는 바와 같은 CAR을 인코딩하는 핵산을 포함하는 벡터로 유전적으로 변형시키는 단계, 이로써 변형된 면역 이펙터 세포의 집단을 생성하는 단계, 및 변형된 면역 이펙터 세포의 집단을 동일한 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, B 세포 관련 병태로 진단된 대상체를 치료하는 방법이 본원에서 제공된다. 특정 구현예에서, 면역 이펙터 세포는 T 세포를 포함한다.
특정 구현예에서, CAR 분자를 코딩하는 핵산 구조체를 발현하는 면역 이펙터 세포 집단을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 표적 세포 집단에 대한 면역 이펙터 세포 매개된 면역 조절 인자 반응을 자극하는 방법이 또한 본원에 제공된다.
본원에 기재된 세포 조성물을 투여하는 방법은 대상체에서 본 개시내용의 CAR을 직접 발현하는 생체외 유전자 변형된 면역 이펙터 세포의 재도입 또는 대상체로의 도입시 CAR을 발현하는 성숙한 면역 이펙터 세포로 분화하는 면역 이펙터 세포의 유전자 변형된 전구세포의 재도입을 유도하는 데 효과적인 임의의 방법을 포함한다. 하나의 방법은 본 개시내용에 따른 핵산 구조체로 생체외 말초 혈액 T 세포를 형질도입하고 형질도입된 세포를 대상체로 복귀시키는 것을 포함한다.
본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허 출원, 및 발행된 특허는 각각의 개별 간행물, 특허 출원, 또는 발행된 특허가 구체적으로 및 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 지시된 것과 같이 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
전술한 발명은 이해의 명확성을 위해 예시 및 예로서 일부 상세히 설명되었지만, 첨부된 청구항의 사상 또는 범위를 벗어나지 않으면서 본 발명의 교시에 비추어 당업자에게는 특정 변경 및 수정이 이루어질 수 있다는 것이 쉽게 명백할 것이다. 다음의 실시예는 단지 예시를 위한 것이고 제한을 위한 것이 아니다. 당업자는 본질적으로 유사한 결과를 산출하기 위해 변경 또는 수정될 수 있는 다양한 중요하지 않은 파라미터를 쉽게 인식할 것이다.
6. 실시예
6.1. 실시예 1: BCMA CARs의 제작
항-BCMA scFv 항체를 함유하는 CAR은 항-BMCA scFv에 작동가능하게 연결된 MND 프로모터, CD8α로부터의 힌지 및 막관통 도메인 및 CD137 공자극 도메인에 이어 CD3ζ 사슬의 세포내 신호전달 도메인을 함유하도록 설계되었다. 예를 들어, 도 1을 참조한다. 또한, 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 국제 공개 번호 WO 2016/0944304를 참조하고, 특히 BCMA CAR의 개시 및 그의 특성화를 포함한다. 도 1에 제시된 BCMA CAR은 면역 이펙터 세포 상의 표면 발현을 위한 CD8α 신호 펩타이드 (SP) 서열을 포함한다. 예시적인 BCMA CAR의 폴리뉴클레오타이드 서열은 서열번호 10 (항-BCMA02 CAR의 폴리뉴클레오타이드 서열)에 제시되고; BCMA CAR의 예시적인 폴리펩타이드 서열은 서열번호 9 (항-BCMA02 CAR의 폴리펩타이드 서열)에 제시되고; 예시적인 CAR 구조체의 벡터 맵은 도 1에 도시된다. 표 9는 도 1에 도시된 바와 같은 BCMA CAR 구조체를 포함하는 BCMA CAR 렌티바이러스 벡터의 다양한 뉴클레오타이드 세그먼트에 대한 아이덴티티, 젠뱅크 참조 (적용가능한 경우), 공급원 명칭 및 인용을 나타낸다.
표 9.
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
6.2. 실시예 2: Ide - cel 처리에서의 바이오마커
1 상 임상 시험은 항-B 세포 성숙 항원 (BCMA) 키메라 항원 수용체 (CAR) (항-BCMA02 CAR, 상기 기재됨) CAR 표적화 인간 BCMA를 코딩하는 렌티바이러스 벡터로 형질도입된 세포를 포함하는 자가 T 림프구-농축된 집단인 이데캅타진 비클류셀 (ide-cel)을 수행하였다. 본 연구는 재발성 및 불응성 다발성 골수종 (RRMM)을 갖는 대상체에서 ide-cel의 안전성 및 효능을 결정하기 위한 공개-표지, 다기관 1 상 용량 증량 및 확장 연구이며, 여기서 각각의 대상체는 레날리도마이드, PI (프로테아솜 억제제) 및/또는 항-CD38 항체를 포함하는 요법 중 3 이상 종류(lines)를 받았다. 본 연구는 BCMA 발현 수준에 관계없이, 33명의 대상체를 등록하였다. 대상체는 CAR T 세포 투여 전 -5일, -4일 및 -3일에 30 mg/m2 플루다라빈 및 300 mg/m2 시타라빈으로 림프구 고갈되었다. Ide-cel를 50 x 105 cells, 150 x 105 cells, 450 x 105 cells, 및 800 x 105 cells의 투여량으로 투여하였다. 대상체를 ide-cel의 투여 후 제1 주에 걸친 사이토카인 반응 증후군 (CRS)의 발생에 대해 모니터링하였다. 효능을 ide-cel 투여 후 1 개월에, 및 그 후 적어도 18 개월 동안 매월 평가하였다.
재발/난치성 다발성 골수종에서 ide-cel의 시험에서 33명의 환자로부터 수집된 데이터에 대해 레트로스펙티브 분석을 수행하고, 결과를 ide-cel의 후속 2상 시험(NCT03361748)에서 128명의 환자의 더 큰 코호트에서 정성적으로 검증하였다. 대상체 혈청 중의 가용성 BCMA(sBCMA)의 양, 및 대상체 혈장 중의 IL-6, TNFα 및 페리틴을 0일(투여일)째에 평가하였다. 대상체 혈장 중의 IL-6, TNFα 및 페리틴의 양을 주입 후 1, 2, 3, 4, 7, 9, 11, 14, 21 및 1개월째에 평가하고, 대상체 혈청 중의 sBCMA를 ide-cel의 주입 후 2, 4, 7, 9, 11, 14, 21 및 1개월째 및 후속 3개월 간격으로 평가하였다.
IL-6 및 TNF에서의 배수-변화는 모든 주입 후 샘플 수집물에 대한 ide-cel의 주입일에 비해 계산되었다. 1, 2, 7 및 9일에서의 IL-6의 배수-변화는 부분 반응 (PR) 또는 더 나은 반응을 달성하는 데 실패한 환자에서 유의하게 더 낮았다 (p <.01) (도 2a). 2, 7 및 9일에서의 TNF의 배수-변화는 PR 또는 더 나은 반응을 달성하는 데 실패한 환자에서 유의하게 더 낮았다 (p <.0.02) (도 2b).
가용성 BCMA에서의 배수-변화는 모든 주입 후 샘플 수집물에 대한 주입일에 비해 계산되었다. PR 또는 더 나은 반응을 달성하지 못한 대상체는 안정한 또는 진행성 질환에 남아있는 환자에서보다 7, 9, 11, 14, 21 일 및 1 및 2 개월째에 가용성 BCMA의 유의하게 더 적은 감소(1 상 연구에 대해 p < 0.03)를 나타냈다. 특히, 진행성 질환 또는 안정한 질환을 나타내는 1 개월째의 대상체는 PR 또는 더 나은 반응을 달성한 대상체보다 유의하게 더 적은 ide-cel 투여 후 sBCMA 감소를 나타냈다 (도 3; 1 상 시험에 대해 Wilcoxon AUC =.01, p =.00013, 2 상 시험에 대해 9.43x10-8, 96.9%의 PR 또는 더 나은 반응자의 중앙 % 가용성 BCMA 감소와 비교하여 6.8%의 1개월째 비반응자의 중앙 % 가용성 BCMA 감소).
30명 중 7명은 적어도 18개월 동안 무진행 생존을 유지하였다. 2개월에서의 가용성 BCMA 농도는 나머지 코호트에서보다 이들 7명의 대상체에서 유의하게 더 낮았다(p =.0016, 도 4).
6.3. 실시예 3: Ide - cel 처리에서의 바이오마커
Ide-cel은 재발성/불응성 다발성 골수종(MM)에 대한 I상 임상 시험에서 유망한 효능을 입증했지만[객관적 반응률, 85%; 무진행 생존(PFS) 중앙값 11.8개월(95% CI 6.2, 17.8); 반응 기간 중앙값은 10.9개월(95% CI, 7.2~추정 불가)], 등록된 환자의 서브세트는 ide-cel에 반응하지 않았고 반응 기간은 반응자마다 달랐다(Raje et al., N. Engl . J. Med. 2019, 380:1726-1737). 이 관찰에 대한 통찰력을 얻기 위해 1상 연구에서 33명의 환자에 대한 후향적 분석을 수행했다.
혈액 내 면역 관련 인자(GMCSF, IFN-g, IL-10, IL-1b, IL-2, IL-6, IL-8, MCP-1, TNF-a) 및 가용성 BCMA의 농도는 유세포 분석 및 Luminex에 의해 측정된 290개의 ide-cel CAR T-세포 의약품 속성과 함께 ide-cel을 주입하기 전 및 후에 ELISA에 의해 측정되었다. 기준선으로부터의 절대 농도 및 배수 변화는 단변량 및 다변량(랜덤 포레스트) 접근법을 사용하여 전체 및 장기 반응과의 상관관계에 대해 평가되었다.
결과: 가용성 BCMA의 전-주입 (즉, 기준선) 수준은 M-단백질 수준이 측정 가능했던 33명의 환자 중 20명의 혈청 모노클로날 단백질(M-단백질) 수준(r = .49; P = 0.03) 및 측정 가능한 수준을 가진 33명의 환자 중 23명의 관련 유리 경쇄 농도(FLC) (r = .59; P = 0.005)와 유의한 상관관계가 있었다. 이들 결과는 sBCMA가 기존의 종양 부담 척도와 정렬되고 모든 환자에서 평가가능하고(M-단백질 및 FLC가 모든 환자에서 평가가능하지 않음), 반응 및 재발을 모니터링하기 위한 매력적인 잠재적 pan-환자 바이오마커임을 나타낸다. 부분 반응(PR) 또는 더 나은 반응을 달성한 환자의 가용성 BCMA 수준에 대한 조사는 주입 후 7일 이내에 비반응자(NR)에 비해 가용성 BCMA 수준의 유의한 감소를 확인하였다(≥ PR의 경우 중앙값 감소 50% 대 NR의 경우 중앙값 27% 증가, P = 0.02) (도 5a). 가용성 BCMA 수준의 감소는 주입 후 1개월에 가장 높았다 (도 5b). 주입 후 1개월에 가용성 BCMA의 배수-변화는 PR 또는 더 나은 반응을 달성한 환자와 그렇지 않은 환자를 계층화하였다(P = 0.0001) (도 5b). ≥ 18개월 동안 ide-cel에 대한 반응을 유지하는 환자 (즉, 지속가능한 반응자/M18 R)는 2 개월째에 가용성 BCMA의 더 큰 제거의 깊이를 경험하였다 (지속가능한 반응자/M18 R의 경우 1835 ng/L 대 비-지속가능한 반응자/M18 NR의 경우 6299 ng/L의 중앙값 농도, P = 0.002) (도 6). 특히, 지속가능한 반응자는 2 개월째에 비지속가능한 반응자에 비해 sBCMA 수준이 상당히 낮았다(도 6). 따라서, 주입 후 2개월에 sBCMA 제거의 부족은 조기 진행의 위험이 있는 환자를 소급하여 식별했다.
또한, 주입 후 1-9일에 혈액 내 IL-6 및 TNF-α의 유도는 ide-cel에 반응하여 PR 또는 더 나은 반응을 갖는 환자에서 유의하게 더 높았고(예를 들어, 도 7a에 도시된 바와 같이, 2일째 IL-6 중앙값 배수 변화 증가는 ≥ PR의 경우 2.9 대 NR의 경우 0.7, P = 0.00, 및 도 7b에 도시된 바와 같이, 2일째에 ≥ PR 대 NR에 대한 대략 2-log-배수 변화의 TNF-α 중간 배수 변화 증가, P = 0.006), 활성 염증 반응(즉, T-세포 활성화에 의해 유도된 사이토카인 반응) 및 더 높은 수준의 CAR T 증폭과 일치한다. 또한, 도 2a-2b를 참조한다.
다음을 포함하여 더 긴 무진행 생존 기간(PFS)과 관련된 여러 CAR T 세포 의약품 공변량: (1) 더 높은 IL-2 및 TNF-α 생산 (P = 0.03); (2) 활성화된 CD8 CAR T 세포 (CD3+/CD8+/CAR+/CD25+; P = 0.015)의 감소된 조성물; 및 (3) CD4 CAR T 세포 (CD3+/CD4+/CAR+/CD57+; P = 0.05)에서 감소된 노화 집단. 더 긴 PFS는 ide-cel 의약품에서 CD4+ CAR T 세포에서 CD57 (노화의 마커)의 더 낮은 발현 및 CD8+ CAR T 세포에서 CD25 (활성화의 마커)의 더 낮은 발현과 관련되었다.
생존 및 안전성 상관관계는 ≥ 150 × 106 세포를 받은 33명의 환자 중에서 분석되었다. 부분적 의존성 및 국소 효과 플롯은 최종 ide-cel 의약품에 기초한 다변량 분석으로부터 생성되었다. 더 긴 PFS는 CAR T 세포에 의한 증가된 IL-2 생산 및 CD8+ CAR T 세포에서 더 낮은 CD25 양성과 연관되었다(도 8). 더 긴 PFS는 또한 더 높은 용량의 ide-cel과 연관되었다(데이터 도시되지 않음).
최종 ide-cel 의약품에 기초한 단변량 분석을 수행하였다 단변량 및 다변량 (랜덤 포레스트) 모델을 사용하여 환자 반응을 면역-관련 인자 및 의약품 속성에서 기준선으로부터의 절대 농도 및 배수-변화와 상관시켰다. 도 9a는 CD8+CAR T 세포에서 CD25 (활성화의 마커)의 감소된 발현과 함께 더 긴 PFS 경향을 나타낸 것이다. 특히, CD3+, CD8+, CAR+, CD25+ 세포에 대한 위험비 (HR)는 1.0396 (P = 0.041)이다. CD3+, CD8+, CAR+, CD25+ 세포 서브세트는 활성화된 CD8 CAR T 세포를 나타낸다. 도 9b는 CAR T 세포의 더 높은 용량 및 CAR T 세포에 의한 IL-2 생산 증가가 사이토카인 방출 증후군 (CRS)의 더 큰 가능성과 상관됨을 나타낸다.
결론: 임상 시험으로부터의 결과는 가용성 BCMA가 다발성 골수종에 대한 보편적인 대용 종양 및 반응 평가를 제공할 수 있다는 것을 나타낸다. 임상 시험으로부터의 바이오마커 분석은 ide-cel에 대한 반응과 상관관계가 있는 후보 의약품 속성 및 가용성 인자를 확인하였다. 본원에 제시된 데이터는 가용성 BCMA의 변화가 ide-cel에 대한 초기 및 지속가능한 반응 둘 다와 상관관계가 있다는 것을 나타낸다. 놀랍게도, 주입 2개월 후 측정된 가용성 BCMA의 제거 깊이는 장기 반응과 강한 상관관계를 제공하여 골수종 진행의 표준 마커가 나타나기 전에 잠재적으로 진행 위험이 있는 환자를 식별할 수 있게 했다. sBCMA 발현의 빠르고 상당한 감소는 ide-cel에 대한 초기 및 지속 반응 모두의 강력한 바이오마커일 수 있다. 또한, 주입 후 2개월에서의 sBCMA 제거의 결여는 진행의 위험이 있는 환자를 확인하기 위해 골수종 반응 (예를 들어, M-단백질 및 FLC)의 표준 마커보다 우수할 수 있다.
혈액 내 의약품 속성 및 단백질 농도의 측정은 ide-cel에 대한 반응의 유용한 상관관계를 제공하였고, 무작위(생존) 포레스트는 더 높은 중요도의 후보 속성을 확인하고 더 큰 코호트에서 검증에 대한 가설을 생성하기 위해 사용되었다(예를 들어, 재발성 및 불응성 다발성 골수종을 갖는 대상체에서 bb2121의 효능 및 안전성 연구(KarMMa 연구), NCT03361748). 증가된 기능성 사이토카인 발현 및 감소된 활성화 및 노화 T 세포 마커 둘 모두와 연관된 Ide-cel 의약품 특성은 또한 더 큰 PFS와 연관된다. 비-반응 환자에서 IL-6 및 TNF-α의 주입 후 유도의 결여가 관찰되었고, 이들 환자는 또한 더 낮은 수준의 CAR T 증폭을 경험하였다는 관찰과 일치한다(Raje et al, N Engl J Med. 2019, 380:1726-1737).
6.4 실시예 4: ide- cel 처리 후 재발성 및 불응성 다발성 골수종 환자에서 bcma의 종양 세포 발현
재발성 및 불응성 다발성 골수종(RRMM) 환자를 이데캅타진 비클류셀(ide-cel; bb2121)로 치료하면 이러한 환자에서 빈번하고 깊은 반응이 나타났지만 초기 반응 후에 무반응 및 진행성 질환(PD)도 관찰되었다. CD19 항원 소실에 의해 매개되는 CD19 유도 CAR T 세포에 대한 획득 내성은 B 세포 악성 종양, 특히 급성 림프모구 백혈병 환자에서 비교적 높은 빈도로 보고되었다. B-세포 성숙 항원 (BCMA), 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리의 구성원은 다발성 골수종 세포 상에서 거의 보편적으로 발현되는 반면, 정상 발현은 형질 세포 및 일부 성숙한 B 세포로 제한된다. BCMA 항원 손실의 난치성 사례는 BCMA-유도된 CAR T 세포를 투여한 환자에서 보고되었지만, 탈출의 메카니즘 (즉, 후천적 내성)으로서 BCMA 항원 손실의 전체 빈도는 보고되지 않았다. 이데캅타진 비클류셀 (ide-cel, bb2121)는 2상 KarMMa 연구에서 치료된 재발성 및 난치성 다발성 골수종 (RRMM)을 갖는 환자에서 깊은 및 지속가능성 있는 반응을 입증하는 BCMA-유도된 키메라 항원 수용체 (CAR) T 세포 요법이다. 전체 반응률은 73%였고, 완전한 반응률은 33%였다. 그럼에도 불구하고, 일부 환자는 깊은 반응을 경험하지 않았거나, ide-cel에 대한 초기 반응 후에 진행되었다. 진행성 질환 (PD)의 시점에서 종양 BCMA 발현에 대한 통찰력을 얻기 위해, 종양 BCMA 발현을 평가하는 직접 및 간접 데이터의 분석을 2상 KarMMa 연구에서 ide-cel로 처리된 환자의 1차 분석 (NCT03361748)에 기초하여 수행하였다. 특히, KarMMa 시험에서 CD138+ 골수 형질 세포 상에서의 전처리 BCMA 발현 및 ide-cel에 대한 반응과의 연관성의 평가를 수행하였다. 또한, ide-cel-처리된 환자에서 진행에서 CD138+ 골수 형질 세포 상에서의 BCMA 항원 발현 및 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 수행하였다.
방법: 종양-관련 BCMA 발현은 세포내 BCMA 에피토프에 대해 지시된 모노클로날 항체를 사용하여 면역조직화학 (IHC)에 의해 포르말린-고정된 파라핀-포매된 탈회된 골수 생검 (BMB)에서 평가되었다. BCMA 발현은 ide-cel 주입 전에 수집된 골수 생검 상에서 IHC에 의해 평가되었다. BCMA를 발현하는 생검 내의 CD138+ 세포의 분획 및 BCMA의 평균 염색 강도는 훈련된 병리학자에 의해 평가되었다. ≥3%의 CD138+ 세포 (종양을 나타냄)가 BCMA 발현을 점수화하는 데 요구되었다. BCMA+ 세포 백분율 및 평균 발현은 골수 생검 내의 CD138+ 세포에서 수동으로 점수화되었고, 평균 BCMA 강도는 0, 1, 2, 3+ 규모로 결정되었다. 종양 세포 표면 BCMA 발현은 유동 세포측정법에 의해 골수 (BM) 흡인물에서 정량화되었다. BCMA-수용체 밀도는 신선한 골수 흡인물로부터 단리된 골수 단핵 세포에서 검출되었고, 유동 세포측정법에 의해 분석되었다. BCMA-수용체 밀도는 Quantibrite beads™ (BD Biosciences)를 사용하여 정량화되었고, 골수 흡인물 내의 악성 형질 세포에서 점수화되었다. BCMA-발현 세포로부터 분비된 단백질을 나타내는 가용성 BCMA (sBCMA)는 혈액에서 평가되었다. sBCMA는 말초 혈액으로부터 단리된 혈청에서 면역검정 (Luminex, 카탈로그 번호 LXSAHM-01)에 의해 평가되었다. 정량화의 하한선(LLOQ)은 4.4 ng/mL였고, sBCMA의 검출불가능한 수준에 대해 사용된 임계값이었다. LLOQ 미만의 값은 2.2 ng/mL로서 추정되었다. 최소 잔류 질환 (MRD)은 차세대 서열분석 (NGS)-기반 접근법 (Adaptive clonoSEQ®)에 의해 평가되었다. 종양 반응은 국제 골수 작용 그룹 기준을 사용하여 평가되었다.
결과: 주입 전 모든 평가할 수 있는 환자에서 종양 BCMA 발현을 관찰하였다(도 10 참조). ide-cel 주입(N=128) 전에, 평가할 수 있는 BMB로 처리된 모든 환자(112/112)는 IHC에 의해 CD138+ 종양 세포 상에서 BCMA 발현을 입증하였다(2명의 환자는 BCMA의 스코어링을 가능하게 하기 위해 골수 생검에서 불충분한(≤1%) %CD138+ 세포로 인해 평가할수 없음(NE). 79%의 환자(n = 88/112)는 그들의 전처리 골수 생검에 존재하는 모든 악성 형질 세포 상에서 BCMA를 발현하였다(도 10). 79%(88/112)에서, 100%의 CD138+ 세포는 다양한 수준의 염색 강도(1+ 내지 3+)로 BCMA를 발현하였고; 단지 3명의 환자는 <50%의 CD138+ 세포 상에서 BCMA 발현을 나타냈다(악성 형질 세포를 나타냄). 다양한 BCMA 염색 강도는 환자 코호트에 걸쳐 관찰되었다.
BCMA-양성 세포의 더 높은 백분율보다 더 높은 BCMA 수용체 밀도는 더 깊은 종양 반응과 연관되었다(도 11a 내지 도 11d 참조). 특히, 더 높은 기준선 BCMA 수용체 밀도는 더 깊은 종양 반응과 연관되었지만, 반응 그룹에 걸쳐 상당한 중첩이 관찰되었다. BCMA 수용체 표면 밀도는 BOR 및 PFS와의 상관관계에 대해 기준선에서 평가되었다. 이들 데이터에 의해, BCMA-발현 골수종 세포의 백분율(%BCMA+) 및 종양 반응 또는 반응의 깊이 사이에서 명확한 연관이 관찰되지 않았다(도 11a 및 도 11b 참조, 각각 반응자 및 비반응자에서 IHC에 의한 %BCMA+ 및 가장 우수한 전체 반응(BOR)에 의한 IHC에 의한 %BCMA+를 나타냄). 통계적으로 유의한 차이는 비반응자와 비교하여 매우 우수한 부분 반응(VGPR) 또는 완전 반응/엄격한 완전 반응(CR/sCR)을 갖는 환자에 대해 BCMA-수용체 밀도로 관찰되었다(도 11c). 도 11d에서, PFS 사건에 대한 위험비(HR)는 중앙값보다 더 낮은 수용체 밀도를 갖는 환자에 비해 중앙값보다 더 높은 수용체 밀도를 갖는 환자에 대해 도시된다. 기준선 BCMA-수용체 밀도와 무진행 생존 사이에서 통계적으로 유의한 연관이 관찰되지 않았다(도 11d).
재발한 대부분의 환자는 BCMA-발현 종양을 가졌다(표 10 및 11 참조). BCMA는 진행 시 평가할 수 있는 골수 생검의 대다수(16개 중 15개)에서 발현되었다. 부분 반응의 최상의 전반적인 반응을 갖는 한 환자는 진행 시 항원 손실의 가능성이 있는 증거를 보였다. 주입 후 3개월 또는 재발 시 BCMA 발현 또는 BCMA-양성 세포 퍼센트의 상향- 또는 하향-조절에서 일관된 경향은 없었다.
표 10: 부분 반응의 BOR이 있는 진행 중인 환자에서의 BCMA 발현.
Figure pct00019
표 10에 요약된 결과에서, BCMA-발현 세포의 빈도는 초기 반응 환자로부터의 이용가능한 종양 생검에 대한 IHC에 의해 평가되었다. 개별 환자 데이터로부터의 BCMA+ 세포의 백분율이 보고된다. NE는 너무 적은 CD138+ (≤1%)가 BCMA 염색의 결여를 해석하기 위해 존재한다는 것을 나타낸다. 3개월째 방문에 대한 PD는 환자가 3개월째에 진행되었음을 나타낸다. 3개월째 샘플은 진행 샘플이었고, 진행 컬럼에서 포획되었다. 표 10에서의 약어는 하기와 같다: BCMA, B-세포 성숙 항원; BOR, 가장 우수한 전체 반응; IHC, 면역조직화학; NE, 평가할 수 없음; PD, 진행성 질환.
표 11: VGPR의 BOR 또는 더 나은 반응이 진행 중인 환자에서의 BCMA 발현.
Figure pct00020
*CD138+ 세포가 거의 없었고; 그러나, 모두 BCMA-양성이어서 샘플을 BCMA+로 해석하였다.
표 11에 요약된 결과에서, BCMA-발현 세포의 빈도는 초기 반응 환자로부터의 이용가능한 종양 생검에 대한 IHC에 의해 평가되었다. 개별 환자 데이터로부터의 BCMA+ 세포의 백분율이 보고된다. ND는 생검 샘플이 시험에 이용불가능하다는 것을 나타낸다. NE는 너무 적은 (≤1%) CD138+ 세포가 BCMA 염색의 결여를 해석하기 위해 존재한다는 것을 나타낸다. 표 11에서의 약어는 하기와 같다: BCMA, B-세포 성숙 항원; BOR, 가장 우수한 전체 반응; IHC, 면역조직화학; ND, 수행되지 않음; NE, 평가할 수 없음; VGPR, 매우 우수한 부분 반응.
BCMA-발현 세포 백분율, 또는 BCMA 염색의 평균 강도에 대한 역치는 존재하지 않았고, 이는 전체 반응(반응자 대 비반응자) 또는 가장 우수한 전체 반응(BOR)에 의해 환자를 계층화하였다. 이용가능한 종 방향 BMB 샘플을 갖는 평가할 수 있는 환자에서, BCMA 수용체 수준의 유의한 조절은 주입 후 1개월에 또는 PD의 시점에 관찰되지 않았다.
표 12: sBCMA의 연속 분석은 환자의 96%가 지속적인 종양 BCMA 발현과 일치하는 재발 시점에 상승하는 sBCMA 수준을 가짐을 보여주었다.
Figure pct00021
표 12에 요약된 결과는 대부분의 환자(96%)가 재발시 증가하는 sBCMA 수준을 가졌다는 것을 보여준다(표 12 참조). 연구에서 ide-cel로 보고된 효능 측정은 73.4%의 ORR, 10.6개월의 중앙 반응 기간, 및 8.6개월의 중앙 PFS를 포함하였다. sBCMA는 초기 반응 후 PD가 확인된 시점에 평가 가능한 비-반응자(1차 내성)의 100%(27/27)와 평가 가능한 환자의 95.5%(42/44)에서 MM이 없는 건강한 환자의 수준을 초과하는 수준에서 측정가능하였다. 이러한 데이터는 BCMA 발현이 거의 모든 환자에서 PD의 시점에서 종양 세포 상에 여전히 존재한다는 간접적 지시를 제공한다. 이러한 가설을 뒷받침하면, PD의 시점에서 평가가능한 BMB를 갖는 환자의 94%(15/16)는 여전히 IHC에 의해 BCMA-발현 CD138+ 세포를 입증하였다(표 10 및 11 참조).
표 12의 결과는 또한 환자가 기준선에서 검출가능한 sBCMA를 발현하였고 2명의 환자가 진행에서 검출불가능한 sBCMA를 나타냈음을 보여준다. 표 12에서의 약어는 하기와 같다: BCMA, B-세포 성숙 항원; LLOQ, 정량 하한선; PD, 진행성 질환; sBCMA, 가용성 B-세포 성숙 항원.
종양 BCMA 발현의 쉽게 접근할 수 있는 혈청 바이오마커인 sBCMA 수준은 BCMA 항원과 일치하는 3명의 환자에서 진행의 임상적 증거 시점에서 LLOQ 이하로 또는 그 근처에서 관찰되었다 (표 13 참조).
Figure pct00022
*값 <LLOQ는 0.5 × LLOQ(LLOQ = 4.4ng/mL)로 계산되었다.
표 13에서의 약어는 하기와 같다: BCMA, B-세포 성숙 항원; IHC, 면역조직화학; LLOQ, 정량 하한선; NA, 이용 불가능; PD, 진행성 질환; PR, 부분 반응; sBCMA, 가용성 B-세포 성숙 항원; SD, 안정한 질환; VGPR, 매우 우수한 부분 반응
ide-cel로 처리된 RRMM 집단에서 진행에서 BCMA 손실의 증거는 드물게 관찰되었고, 이는 환자의 4%에서 발생하였다 (n = 3/71). BCMA 항원 손실의 하나 이상의 지표는 PD에서 환자의 4% (3/71)에서 관찰되었다. 한 환자는 검출 불가능한 sBCMA 및 음성 BMB BCMA 염색을 나타내었고, 1명은 검출 불가능한 sBCMA 및 이용 불가능한 BMB를 갖고, 1명은 음성 BMB BCMA 염색을 갖지 않았고, sBCMA (5 ng/mL)의 낮은 수준을 가졌다. 이들 경우 중 하나에서, 종양 BCMA 발현의 게놈 손실은 후속적으로 확인되었다. 도 12는 BCMA IHC 염색 (도 12a) 및 VDJ 클론 추적 (도 12b)을 의심되는 항원 손실을 갖는 환자에서 보여준다. BCMA IHC는 이들 환자에서 질환 진행에서 종양 BCMA 발현의 손실을 예상할 가능성이 있음을 예시하였고, 이는 진행에서 낮은 수준의 sBCMA에 의해 추가로 지지되었다 (도 12a). VDJ 클론 추적은 의심되는 항원 손실을 갖는 다발성 골수종 환자에서 재발시 초기 및 잠재적 출현 클론의 복귀를 예시한다 (도 12b). NGS MRD 결과의 확대 분석은 우성 기준선 MRD 클론의 추적을 가능하게 하였고, 이는 가변, 다양성, 및 접합 서열에 기초하여 시간에 걸쳐 존재하였다. 우성 기준선 MRD 클론은 여전히 진행에 존재하였다. 추가로, 기준선에서 낮은 빈도로 존재하는 상이한 클론의 증폭이 관찰되었다.
결론: 연구에서 ide-cel로 주입된 모든 평가할 수 있는 환자는 치료 전에 BCMA를 발현하는 종양을 가졌다. 대부분의 환자는 100%의 악성 형질 세포에서 BCMA를 발현하였다. BCMA-발현 수준은 더 낮은 BCMA 발현이 깊은 임상 반응을 달성하는 것으로부터 환자를 배제하지 않았지만, 종양 반응의 깊이와 긍정적으로 상관되었다. BCMA 항원 손실의 증거는 드물었고(환자의 4%), 이전에 3회 이상의 요법을 받은 RRMM 환자에서 재발의 우성 메카니즘으로 보이지 않는다.
종합하면, 이들 데이터는 종양 BCMA 발현의 상실이 단지 ide-cel 요법 후 환자에서 탈출의 흔하지 않은 기전일 수 있고, 추가 BCMA-표적화된 양상이 RRMM 환자에게, 특히 본원에서 평가된 바와 같이 이러한 종양 BCMA 발현의 상실을 나타내지 않는 환자에게 순차적으로 투여될 수 있음을 나타낸다.
참고문헌:
Xu S., Lam K.P., Mol. Cell Biol., 2001, 21(12):4067-74.
Friedman K.M. et al., Human Gene Ther., 2018, 29(5):585-601.
Munshi N., et al., J. Clin. Oncol., 38:2020 (suppl; abstr 8503).
Majzner R. et al., Cancer Discov., 2018, 8(10):1-8.
Ali S.A. et al., Blood, 2016, 128(13):1688-1700.
Shah N. et al., Leukemia, 2020, 34(4):985-1005.
Sanchez E. et al., Br. J. Haematol., 2012, 158(6):727-738.
6.5 실시예 5: ide- cel 처리 후 안전성 및 효능과 관련된 기준선 및 약력학적 바이오마커
ide-cel 치료 후 안전성 및 효능과 연관된 기준선 및 약력학적 바이오마커에 대한 통찰력을 얻기 위해, 2상 KarMMa 연구 (NCT03361748)에서 ide-cel (N=128)로 치료된 환자의 1차 분석을 기초로 한 분석을 수행하였다. 다양한 승인된 요법에도 불구하고, 다발성 골수종은 불응성으로 남아 있고 환자는 재발의 지속적인 위험에 직면한다. 2상, 단일-arm KarMMa 시험 (NCT03361748)에서 (면역조절제, 프로테아좀 억제제, 및 항-CD38 항체에 대한) 삼중-부류 노출된 RRMM 환자에서, 이데캅타진 비클류셀 (ide-cel, bb2121), B 세포 성숙 항원 (BCMA)-지시된 CAR T 세포 요법은 바람직한 유익성-위해성 프로파일을 입증하였다. 종양 반응 및 idecel 활성의 약력학적 바이오마커는 종양-관련 가용성 인자, 전-염증성 사이토카인, 및 최소 잔류 질환 (MRD)을 포함한다. CAR T 세포 활성화와 관련된 전염증성 사이토카인은 작용 및 안전성 사건, 예컨대 사이토카인 방출 증후군 (CRS) 및 조사자 확인된 신경독성 (NT)의 ide-cel 메카니즘의 잠재적 지표일 수 있다. 세포의 표면으로부터 절단된 BCMA (즉, 가용성 BCMA; sBCMA)는 시간 경과에 따라 종양 반응을 모니터링하기 위한 유용성을 나타낸 다발성 골수종에서 신규한 말초 접근가능한 바이오마커이다. MRD는 종양 부담의 민감한 척도이고; MRD 평가에 의한 종양 제거의 깊이는 반응 지속기간을 예측할 수 있다.
방법: 혈장 및 혈청 중 sBCMA (질환 진행을 통해 1일차) 중 25개의 면역-관련 가용성 인자 (1-28일차) (GM-CSF, 그랜자임 A, 그랜자임 B, IFNγ, IL10, IL13, IL2, IL4, IL5, IL6, MIP1α, MIP1β, 퍼포린, sCD137, sFas, sFasL, TNFα, Ang1, Ang2, IL15, IL18, IL2Rα, IL7, IL8, RANKL)의 기준선 및 주입 후 수준을 상업적으로 입수가능한 루미넥스 검정 (암페어랜드 바이오사이언시스 (Ampersand Biosciences), NY, USA)을 사용하여 말초 혈액 중 면역검정에 의해 평가하였다. sBCMA를 스크리닝, 기준선 (1일차)에서, 및 질환 진행까지 평가하고, 모든 다른 사이토카인 및 가용성 인자를 스크리닝, 기준선, 1-6일차, 및 7, 9, 11, 14, 및 21일차에 평가하였다. 정량 하한선(LLOQ) 미만의 모든 농도를 LLOQ/2 (예를 들어, sBCMA LLOQ는 4.4 ng/mL이고, 2.2 ng/mL로 추정됨)로 추정하였다. 염증, 반응성 단백질, 및 페리틴의 임상 마커를 각각의 임상 연구 센터에서 국소적으로 측정하고, 이 분석에 포함시켰다.
최소 잔류 질환(MRD) 상태는 진행(즉, 기준선, 1 개월(M1), 3 개월(M3), 6 개월(M6), 12 개월(M12), 18 개월(M18), 및 24 개월(M24)) 반응에 대해 진단되지 않을 때까지 고정된 시점들에서 차세대 염기서열분석(NGS; ClonoSEQ®, Adaptive Biotechnologies)에 의해 골수 흡인물(BMA)에서 평가되었다. 각각의 바이오마커와 주요 안전성 및 효능 종점 사이의 상관관계가 평가되었다.
각각의 바이오마커와 주요 안전성 및 효능 종점 사이의 상관관계가 평가되었다. P 값은 MannWhitney-Wilcoxon 시험 또는 Kruskal-Wallis 시험을 기초로 하여 2 μL였다. Holm 단계-다운 Bonferroni 방법을 사용하여 다중도 조정된 P 값을 상이한 면역-관련 가용성 인자에 걸쳐 제공하였다.
결과: 주입 후 사이토카인 Cmax의 크기는 CAR T 세포 활성화 및 증폭, 및 종양 반응과 연관되었다(도 13a 내지 도 13c 참조). 도 13a("ide-cel 증폭 및 수축의 시간 과정"으로 명칭됨)는 150 × 106 cells (n=4), 300 × 106 cells (n=69), 및 450 × 106 cells (n=54)의 용량에서 ide-cel의 투여 후 환자에서 ide-cel 증폭 및 수축의 시간 과정을 나타낸다. CAR T 세포 증폭은 모든 용량 수준에 걸쳐 관찰되었고 용량 의존적이었다. 특히, 중앙 피크 CAR+ T 세포 증폭은 11일째에 관찰되었다(도 13a, "ide-cel 증폭 및 수축의 시간 과정"으로 명칭됨). 중앙 증폭은 중첩 프로파일을 갖는 더 높은 표적 용량에서 증가하였다. Ide-cel 증폭은 임상 반응에 의해 평가되었다(도 13a, "임상 반응에 의한 Ide-cel 증폭"으로 명칭됨). 반응자는 부분 반응 또는 더 나은 반응을 가진 것으로 정의되었다. Ide-cel 증폭(AUC0 - 28 일, 일수 x 카피/mg)은 비-반응자와 비교하여 반응자에서 더 높았다(도 13a, "임상 반응에 의한 Ide-cel 증폭"으로 명칭됨). 따라서, CAR T 세포(ide-cel) 증폭은 반응과 강하게 상관되었다.
용량 수준에 의한 전염증성 사이토카인 유도의 크기를 평가하였다(도 13b). 전염증성 사이토카인 IL-2, IL-6, 및 IFN-γ의 수준을 150 × 106 cells (n=4), 300 × 106 cells (n=66), 및 450 × 106 cells (n=54)의 용량에서 ide-cel 투여 후 측정하였다. 사이토카인 유도는 모든 용량 수준에 걸쳐 관찰되었고 용량 의존적이었다(도 13b).
임상 반응에 의한 전-염증성 사이토카인 유도(Cmax)의 크기를 평가하였다(도 13c; 반응자는 부분 반응 또는 더 나은 반응을 갖는 것으로서 정의됨). C-반응성 단백질(CRP), IFN-γ, IL-10, 및 IL-6의 수준을 반응자 및 비-반응자에서 측정하였다. 기준선에서 전체 반응에 의해 계층화된 환자에서는 사이토카인이 없지만, 비-반응자에 비해 반응자에서 유의미하게 더 높은 피크(Cmax) CRP, IFNγ, IL-10, 및 IL-6 수준이 발생하였다(도 13c). 피크 사이토카인 농도는 일반적으로 주입 후 7일 내에 도달되었고; 사이토카인 Cmax는 일반적으로 450 × 106 CAR+ T 세포의 표적 용량 수준에서 더 높았다. 따라서, 전염증성 사이토카인은 비-반응자보다 반응자에서 더 큰 정도로 상승되었으며, 이는 CAR T 세포 활성화 및 증폭과 일치한다.
주입 후 사이토카인 유도의 크기 (사이토카인 Cmax, 그러나 기준선 수준은 아님)는 더 높은 등급의 CRS 및 조사자 확인된 신경독성 (NT)과 연관되었다 (도 14 참조). 전염증성 사이토카인 유도의 크기 및 CRS의 등급을 평가하였다 (도 14a 참조). CRP, IFN-γ, IL-6, 및 IL-8의 수준을 측정하고, 사이토카인 재형성 증후군 (CRS)에 대해 환자를 평가하였다 (등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥3이 도 14a에 제시됨; 도 14a에 제시된 각각의 그래프에서, 오차 막대를 갖는 각각의 직사각형은 등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥3 순서로 좌측으로부터 우측으로 제시됨). 기준선에서 어떠한 사이토카인도 더 높은 등급의 CRS와 통계적으로 유의하게 상관되지 않았다 (도 14a). CRP 및 사이토카인의 서브세트 (즉, IFN-γ, IL-6, 및 IL-8)의 증가된 유도는 CRS 등급이 증가함에 따라 관찰되었다(P<0.05) (도 14a).
전염증성 사이토카인 유도의 크기 및 조사자 확인된 NT의 등급을 평가하였다 (도 14b 참조). 페리틴, IL-10, IFN-γ, IL-6, 및 IL-8의 수준을 측정하였다. 기준선에서의 사이토카인은 더 높은 등급의 조사자 확인된 NT와 통계적으로 유의하게 상관되지 않았다(조사자 확인된 NT에 대해, 등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥3은 도 14b 에 제시됨; 도 14b에 제시된 각각의 그래프에서, 오차 막대를 갖는 각각의 직사각형은 등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥3 순서로 좌측으로부터 우측으로 제시됨). 페리틴 및 사이토카인의 서브세트 (즉, IL-10, IFN-γ, IL-6, 및 IL-8)의 증가된 유도는 조사자 확인된 NT의 등급이 증가함에 따라 관찰되었다(P<0.05) (도 14b 참조). 일반적으로, 더 높은 등급의 NT 이벤트는 거의 관찰되지 않았고; 그러나, 기준선과 비교하여 더 높은 내피 세포 활성화에 대한 경향(증가된 안지오포이에틴 ([Ang]-2) 및 더 낮은 내피 세포 안정화 (감소된 Ang 1))이 관찰되었다(도 14c; 도 14c에 제시된 각각의 그래프에서, 오차 막대를 갖는 각각의 직사각형은 등급 0, 등급 1+2, 및 등급 ≥3 순서로 좌측으로부터 우측으로 제시됨). 전체적으로, 기준선에서 측정된 27개 인자 중 어느 것도 사이토카인 방출 증후군 (CRS), 토실리주맙 또는 코르티코스테로이드를 필요로 하는 CRS, 또는 조사자 확인된 NT 종점과 상관되지 않았지만, 몇몇 인자 (예를 들어, GM-CSF, IL-6, IFNγ, IL-8, IL-10)가 CRS 또는 조사자 확인된 NT를 갖는 환자에서 주입 후 24 시간 내에 더 높은 수준으로 유도되었고, 피크 수준은 CRS 또는 조사자 확인된 NT 등급으로 증가되었다.
주입 후 sBCMA 제거는 기준선 종양 부담 (골수 내 형질 세포의 백분율) 또는 수질외 형질세포종 (EMP) 관여와 무관하였다 (도 15 참조). 기준선 sBCMA 수준은 낮은 기준선 종양 부담(< 50% 종양 부담, n=56, 중앙 기준선 sBCMA는 177 ng/ml임(Q1=57.5 ng/ml, Q3=327.0 ng/ml), <LLOQ, n(%) = 0) 을 갖는 환자에 비해 더 높은 기준선 종양 부담(≥ 50% 종양 부담, n=62, 중앙 기준선 sBCMA는 386.0 ng/ml임 (First Quartile (Q1)=269.0 ng/ml, Third Quartile (Q3)=696.0 ng/ml), <LLOQ, n(%) = 0)을 갖는 환자에서 상승하였다(도 15a, 상부 패널, P 값 < 0.0001). 더 높은 기준선 종양 부담을 갖는 환자에서 (≥ 50% 종양 부담, n=62), 최하점에서의 중앙 기준선 sBCMA는 2.2 ng/ml (Q1=2.2 ng/ml, Q3=43.0 ng/ml, <LLOQ n=45 (59.2%))이다. 더 낮은 기준선 종양 부담을 갖는 환자에서 (< 50% 종양 부담, n=56), 최하점에서의 중앙 기준선 sBCMA는 2.2 ng/ml (Q1=2.2 ng/ml, Q3=11.0 ng/ml, <LLOQ n=30 (62.5%))이다. 기준선 sBCMA 수준은 EMP 관련 없는 환자(EMP 없음, n=76, 중앙 기준선 sBCMA는 238.0 ng/ml임(Q1=76.0 ng/ml, Q3=424.5 ng/ml, <LLOQ, n(%) = 0)에 비해 EMP 관련 환자(EMP, n=48, 345.5 ng/ml (Q1=195.0 ng/ml, Q3=670.0 ng/ml, <LLOQ, n(%) = 0) (EMP, n=48, 345.5 ng/ml (Q1=195.0 ng/ml, Q3=670.0 ng/ml, <LLOQ, n(%) = 0)에서 높았다(도 15b, 상부 패널, P 값 = 0.0339). sBCMA 제거를 달성하는 환자의 비율에서 차이가 높은 종양 부담 또는 EMP 관여에 대해 관찰되지 않았다 (도 15a 및 15b, 하부 패널 각각 참조).
상부 사분위수(>75번째 백분위수 sBCMA)에서 기준선 sBCMA 값을 갖는 환자의 더 작은 비율은 sBCMA 제거를 달성하였다(도 15c, 상부 패널). 기준선 종양 부담은 골수에서 형질 세포의 백분율(%CD138+)에 의해 결정되었다. 높은 종양 부담은 >50% 골수 형질 세포 관여로서 정의되었다. 특히, 상부 사분위수(>75번째 백분위수 sBCMA, n=31)에서 기준선 sBCMA 값을 갖는 환자는 790.0 ng/ml(Q1=657.0 ng/ml, Q3=987.0 ng/ml, <LLOQ, n(%) = 0)의 중앙 기준선 sBCMA 및 25.0 ng/ml(Q1=2.2 ng/ml, Q3=507.0 ng/ml, <LLOQ, n(%)=11(35.5%))의 최하점에서 중앙 sBCMA를 가졌다. 그러나, 이러한 환자의 35%는 sBCMA 제거에 의해 표시된 바와 같이 깊은 반응을 달성하였다(도 15c, 하부 패널). 기준선 sBCMA 값을 갖는 환자는 191.0 ng/ml(Q1==73.0 ng/ml, Q3=314.0 ng/ml, <LLOQ, n(%) = 0)의 중앙 기준선 sBCMA 및 2.2 ng/ml(Q1=2.2 ng/ml, Q3=5.9 ng/ml, <LLOQ, n=64(68.8%))의 최하점에서 중앙 sBCMA를 가졌다. sBCMA 제거는 신속하게 반응하는 환자에서 발생하였고, sBCMA 재결합에 대한 더 긴 시간은 종양 반응의 깊이와 관련되었다(도 16 참조). 가용성 BCMA(sBCMA)는 MM 종양 부담의 임상적 척도로 기준선 혈청 수준 추적 및 종양 반응으로의 주입 후 수준 추적을 갖는 말초적으로 접근가능한 바이오마커였다. 도 16a는 ide-cel 주입 후 가장 우수한 전체 반응에 의해 계층화된 중앙 sBCMA를 도시한다 (도 16a에 도시된 x-축은 피크 증폭 동안 sBCMA 역학의 더 나은 관찰을 허용하기 위해 기준선으로부터 1개월(M1)로 신장되었다; sBCMA 반등까지의 시간 >LLOQ는 sBCMA 측정 >LLOQ 전에 마지막 방문 일로서 정의되었다; sBCMA 최하점 <LLOQ가 없는 환자는 0으로 입력되었다; BL, 기준선; CR, 완전 반응; D, 일; LLOQ, 정량 하한선; M, 개월; NPC, 정상 형질 세포; NR, 반응 없음; PD, 진행성 질환; PR, 부분 반응; sBCMA, 가용성 B 세포 성숙 항원; VGPR, 매우 우수한 부분 반응). 환자는 기준선 sBCMA 값이 이용 가능하지 않은 경우 분석으로부터 배제되었다(n = 4).
중간 기준선 sBCMA는 3 개월 이내에 최하점을 달성하는 환자를 갖는 반응자에서 ide-cel-치료된 환자에서 276.0 ng/mL이었고, 감소된 후-주입이었으며; 중간 최하점은 반응자에서 더 낮았다 (0-28d, 전이유전자 수준에 의해 측정됨). 중간 sBCMA 수준은 반응하는 환자에서 검정의 제거 < LLOQ를 나타내었고, 이는 종양의 초기 제거를 나타낸다. 중간 sBCMA 수준 < LLOQ의 지속기간은 종양 반응의 증가하는 깊이와 연관되었다. sBCMA 궤도는 종양 제거가 ide-cel 주입 후 처음 12 개월 내에 일어났음을 나타내었다. 가장 우수한 전체 반응에 의해 sBCMA 최하점 < LLOQ를 달성한 환자의 비율은 도 16b에 도시된다. 최하점에서 sBCMA 수준 ≤ LLOQ를 갖는 환자의 백분율은 가장 우수한 전체 반응 (63% PR, 81% ≥ VGPR, 95% ≥ CR)으로 증가하였다 (도 16b). 따라서, sBCMA 최하점 < LLOQ를 달성한 환자의 비율은 임상 반응의 깊이와 상관되었다. 도 16c는 검출가능한 수준으로 재결합된 sBCMA까지의 시간을 나타낸다. 관찰된 sBCMA 수준은 관찰되지 않은 환자와 비교하여 ≥CR을 달성한 환자 중에서 더 긴 지속기간 동안 ≤ LLOQ로 유지되었다 (도 16c). 따라서, sBCMA 수준은 증가하는 깊이 및 임상 반응의 지속기간을 갖는 환자에서 더 긴 지속기간의 시간 동안 < LLOQ로 유지되었다.
sBCMA 반응 궤도는 차세대 염기서열분석 (NGS) 및 골수종 질환 부담의 전통적인 혈청 마커 (즉, M-단백질 및 FLC)에 의해 평가된 바와 같이, 민감성 최소 잔류 질환 (MRD)과 일치하였다 (도 17a 및 도 17b 참조). MRD 및 sBCMA는 ide-cel 투여된 환자에서 평가되었다. 또한, 골수종 반응의 표준 마커(즉, M-단백질 및 FLC)가 측정되었다. 도 17a는 MRD(차세대 서열분석을 사용하여 결정된 바와 같음, cells/million에서 측정됨) 및 비-반응자, 반응자(진행됨), 및 반응자(진행중)에서 sBCMA, M-단백질, 및 FLC의 수준을 도시한다(반응은 비반응자(<부분 반응자), 데이터 컷의 시점에서 재발한 반응자(반응자, 진행됨), 및 데이터 컷에서의 반응에서 여전히 반응한 반응자(반응자, 진행중)로서 특징지어졌음). 환자는 기준선 sBCMA 값이 이용 가능하지 않은 경우 분석으로부터 배제되었다(n = 4). sBCMA 및 MRD 상태는 반응에 의해 유사한 궤도를 나타내었고, 질환의 전통적인 바이오마커와 일치하였다. sBCMA는 모든 환자에 대해 평가가능하였다 (도 17b, "검출가능한 바이오마커"로 명칭됨). 평가가능한 환자의 일부는 sBCMA가 높은 백분율의 환자에서 평가가능한 바이오마커인 반면, 종양 반응의 다른 바이오마커(즉, NGS MRD, 다색 유동 세포측정법 (MFC) MRD, M-단백질, 및 FLC)는 질환 특징 및/또는 기술적 한계로 인해 환자의 서브세트에서 평가가능함을 나타낸다.
결론: 평가된 주입 전 면역-관련 가용성 인자들은 고등급 CRS 또는 NT의 예측으로서 확인되지 않았다. 전염증성 사이토카인 유도는 CAR T 세포 활성화 및 증폭과 동시에 발생하였고, 더 높은 등급의 CRS 및 NT와 연관되었다. sBCMA 및 MRD는 종양 부담의 강력한 바이오마커들이고, 둘 모두는 주입 후 첫 달 내에 반응자에서 빠르게 제거되었다. sBCMA 제거의 깊이 및 지속기간은 각각 임상 반응의 깊이 및 지속기간과 연관되었다. sBCMA는 말초적으로 접근 가능하고, 빈번하게 모니터링될 수 있었고, 시간 경과에 따라 종양 부담 및 종양 반응을 평가하기 위한 보편적인 대리 척도로서 높은 비율의 idecel-처리된 환자에서 평가할 수 있었다.
참고문헌:
Sonneveld P and Broijl A., Haematologica, 2016, 101:995.
Munshi NC, et al., J. Clin. Oncol., 38:2020, suppl., Abstr. 8503.
Ghermezi J, et al., Haematologica, 2017, 102:785795.
Pappa C, et al., J. Cancer Res. Clin. Oncol., 2014, 140:18011805.
Terpos E, et al., Int. J. Cancer, 2011, 130:735742.
일반적으로, 하기 청구범위에서, 사용되는 용어는 청구범위를 본 명세서 및 청구범위에 개시된 특정 구현예로 한정하는 것으로 해석되어서는 안되며, 이러한 청구범위가 부여된 등가물의 전체 범위와 함께 모든 가능한 실시예를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 따라서, 청구범위는 본 개시내용에 의해 제한되지 않는다. 특허 또는 비특허 여부에 관계없이, 본 명세서에 인용된 모든 참고문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> CELGENE CORPORATION JUNO THERAPEUTICS, INC. BRISTOL-MYERS SQUIBB COMPANY <120> USES OF ANTI-BCMA CHIMERIC ANTIGEN RECEPTORS <130> 14247-549-228 <140> <141> <150> US 63/037,471 <151> 2020-06-10 <150> US 63/024,252 <151> 2020-05-13 <150> US 62/952,186 <151> 2019-12-20 <150> US 62/944,938 <151> 2019-12-06 <150> US 62/931,077 <151> 2019-11-05 <160> 36 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 1 Arg Ala Ser Glu Ser Val Thr Ile Leu Gly Ser His Leu Ile His 1 5 10 15 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> mus musculus <400> 2 Leu Ala Ser Asn Val Gln Thr 1 5 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> mus musculus <400> 3 Leu Gln Ser Arg Thr Ile Pro Arg Thr 1 5 <210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 4 Asp Tyr Ser Ile Asn 1 5 <210> 5 <211> 17 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 5 Trp Ile Asn Thr Glu Thr Arg Glu Pro Ala Tyr Ala Tyr Asp Phe Arg 1 5 10 15 Gly <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 6 Asp Tyr Ser Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 7 <211> 111 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 7 Asp Ile Val 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<223> Flexible peptide linker <400> 17 Lys Glu Ser Gly Ser Val Ser Ser Glu Gln Leu Ala Gln Phe Arg Ser 1 5 10 15 Leu Asp <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Flexible peptide linker <400> 18 Gly Gly Arg Arg Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 19 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Flexible peptide linker <400> 19 Leu Arg Gln Arg Asp Gly Glu Arg Pro 1 5 <210> 20 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Flexible peptide linker <400> 20 Leu Arg Gln Lys Asp Gly Gly Gly Ser Glu Arg Pro 1 5 10 <210> 21 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Flexible peptide linker <400> 21 Leu Arg Gln Lys Asp Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Arg Pro 1 5 10 15 <210> 22 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Flexible peptide linker <400> 22 Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr 1 5 10 15 Lys Gly <210> 23 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(3) <223> Xaa = Any amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = Any amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Gly or Ser <400> 23 Glu Xaa Xaa Tyr Xaa Gln Xaa 1 5 <210> 24 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 24 Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly 1 5 <210> 25 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 25 Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Ser 1 5 <210> 26 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 26 Leu Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn 1 5 10 15 Pro Gly Pro <210> 27 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 27 Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn 1 5 10 15 Pro Gly Pro <210> 28 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 28 Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro 1 5 10 <210> 29 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 29 Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly 1 5 10 15 Pro <210> 30 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 30 Gln Leu Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser 1 5 10 15 Asn Pro Gly Pro 20 <210> 31 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 31 Ala Pro Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly 1 5 10 15 Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro 20 <210> 32 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 32 Val Thr Glu Leu Leu Tyr Arg Met Lys Arg Ala Glu Thr Tyr Cys Pro 1 5 10 15 Arg Pro Leu Leu Ala Ile His Pro Thr Glu Ala Arg His Lys Gln Lys 20 25 30 Ile Val Ala Pro Val Lys Gln Thr 35 40 <210> 33 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 33 Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro 1 5 10 15 Gly Pro <210> 34 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 34 Leu Leu Ala Ile His Pro Thr Glu Ala Arg His Lys Gln Lys Ile Val 1 5 10 15 Ala Pro Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly 20 25 30 Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro 35 40 <210> 35 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> protease cleavage site <400> 35 Glu Ala Arg His Lys Gln Lys Ile Val Ala Pro Val Lys Gln Thr Leu 1 5 10 15 Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly 20 25 30 Pro <210> 36 <211> 7350 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> anti-BCMA02 CAR vector <400> 36 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca 60 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg 120 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc 180 accatcatat gccagcctat ggtgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat 240 tacggggtca ttagttcata gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa 300 tggcccgcct ggctgaccgc ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt 360 tcccatagta acgccaatag ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta 420 aactgcccac ttggcagtac atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt 480 caatgacggt aaatggcccg cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc 540 tacttggcag tacatctacg tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca 600 gtacatcaat gggcgtggat agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat 660 tgacgtcaat gggagtttgt tttggcacca aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa 720 caactccgcc ccattgacgc aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag 780 cagagctcgt ttagtgaacc gggtctctct ggttagacca gatctgagcc tgggagctct 840 ctggctaact agggaaccca ctgcttaagc ctcaataaag cttgccttga gtgctcaaag 900 tagtgtgtgc ccgtctgttg tgtgactctg gtaactagag atccctcaga cccttttagt 960 cagtgtggaa aatctctagc agtggcgccc gaacagggac ttgaaagcga aagtaaagcc 1020 agaggagatc tctcgacgca ggactcggct tgctgaagcg cgcacggcaa gaggcgaggg 1080 gcggcgactg gtgagtacgc caaaaatttt gactagcgga ggctagaagg agagagtagg 1140 gtgcgagagc gtcggtatta agcgggggag aattagataa atgggaaaaa attcggttaa 1200 ggccaggggg aaagaaacaa tataaactaa aacatatagt tagggcaagc agggagctag 1260 aacgattcgc agttaatcct ggccttttag agacatcaga aggctgtaga caaatactgg 1320 gacagctaca accatccctt cagacaggat cagaagaact tagatcatta tataatacaa 1380 tagcagtcct ctattgtgtg catcaaagga tagatgtaaa agacaccaag gaagccttag 1440 ataagataga ggaagagcaa aacaaaagta agaaaaaggc acagcaagca gcagctgaca 1500 caggaaacaa cagccaggtc agccaaaatt accctatagt gcagaacctc caggggcaaa 1560 tggtacatca ggccatatca cctagaactt taaattaaga cagcagtaca aatggcagta 1620 ttcatccaca attttaaaag aaaagggggg attggggggt acagtgcagg ggaaagaata 1680 gtagacataa tagcaacaga catacaaact aaagaattac aaaaacaaat tacaaaaatt 1740 caaaattttc gggtttatta cagggacagc agagatccag tttggaaagg accagcaaag 1800 ctcctctgga aaggtgaagg ggcagtagta atacaagata atagtgacat aaaagtagtg 1860 ccaagaagaa aagcaaagat catcagggat tatggaaaac agatggcagg tgatgattgt 1920 gtggcaagta gacaggatga ggattaacac atggaaaaga ttagtaaaac accatagctc 1980 tagagcgatc ccgatcttca gacctggagg aggagatatg agggacaatt ggagaagtga 2040 attatataaa tataaagtag taaaaattga accattagga gtagcaccca ccaaggcaaa 2100 gagaagagtg gtgcagagag aaaaaagagc agtgggaata ggagctttgt tccttgggtt 2160 cttgggagca gcaggaagca ctatgggcgc agcgtcaatg acgctgacgg tacaggccag 2220 acaattattg tctggtatag tgcagcagca gaacaatttg ctgagggcta ttgaggcgca 2280 acagcatctg ttgcaactca cagtctgggg catcaagcag ctccaggcaa gaatcctggc 2340 tgtggaaaga tacctaaagg atcaacagct cctggggatt tggggttgct ctggaaaact 2400 catttgcacc actgctgtgc cttggaatgc tagttggagt aataaatctc tggaacagat 2460 ttggaatcac acgacctgga tggagtggga cagagaaatt aacaattaca caagcttggt 2520 aggtttaaga atagtttttg ctgtactttc tatagtgaat agagttaggc agggatattc 2580 accattatcg tttcagaccc acctcccaac cccgagggga cccgacaggc ccgaaggaat 2640 agaagaagaa ggtggagaga gagacagaga cagatccatt cgattagtga acggatccat 2700 ctcgacggaa tgaaagaccc cacctgtagg tttggcaagc taggatcaag gttaggaaca 2760 gagagacagc agaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc tgccccggct 2820 cagggccaag aacagttgga acagcagaat atgggccaaa caggatatct gtggtaagca 2880 gttcctgccc cggctcaggg ccaagaacag atggtcccca gatgcggtcc cgccctcagc 2940 agtttctaga gaaccatcag atgtttccag ggtgccccaa ggacctgaaa tgaccctgtg 3000 ccttatttga actaaccaat cagttcgctt ctcgcttctg ttcgcgcgct tctgctcccc 3060 gagctcaata aaagagccca caacccctca ctcggcgcga ttcacctgac gcgtctacgc 3120 caccatggca ctccccgtca ccgcccttct cttgcccctc gccctgctgc tgcatgctgc 3180 caggcccgac attgtgctca ctcagtcacc tcccagcctg gccatgagcc tgggaaaaag 3240 ggccaccatc tcctgtagag ccagtgagtc cgtcacaatc ttggggagcc atcttattca 3300 ctggtatcag cagaagcccg ggcagcctcc aacccttctt attcagctcg cgtcaaacgt 3360 ccagacgggt gtacctgcca gattttctgg tagcgggtcc cgcactgatt ttacactgac 3420 catagatcca gtggaagaag acgatgtggc cgtgtattat tgtctgcaga gcagaacgat 3480 tcctcgcaca tttggtgggg gtactaagct ggagattaag ggaagcacgt ccggctcagg 3540 gaagccgggc tccggcgagg gaagcacgaa ggggcaaatt cagctggtcc agagcggacc 3600 tgagctgaaa aaacccggcg agactgttaa gatcagttgt 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Claims (113)

  1. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계,
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공됨;
    를 포함하는, 치료 방법.
  2. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계,
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함을 알아내는 단계, 및
    d. 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계;
    를 포함하는, 치료 방법.
  3. 제1항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공되는, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아내는, 방법.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아내는, 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 sBCMA의 상기 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 비-CAR T 세포 요법이 제공되는 방법.
  7. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법으로서,
    상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고,
    여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 가용성 BCMA (sBCMA) 수준의 30%를 초과하는 sBCMA 수준을 함유하는, 치료 방법.
  8. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법으로서,
    상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고,
    여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 되는, 방법.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  10. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    b. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계;
    를 포함하고,
    여기서, sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공되는, 치료 방법.
  11. 제10항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아내는, 방법.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아내는, 방법.
  13. 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아내는, 방법.
  14. 제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 sBCMA의 상기 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 비-CAR T 세포 요법이 제공되는 방법.
  15. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 후속적으로 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계;
    를 포함하고;
    여기서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공되는, 치료 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포를 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고,
    상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아내는, 방법.
  17. 제16항에 있어서,
    상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아내는, 방법.
  18. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    b. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 페리틴(ferritin)의 수준을 알아내는 단계;
    를 포함하고,
    여기서, 상기 페리틴의 수준이 리터당 1500 피코몰(picomoles)을 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 사이토카인 방출 증후군 (CRS)을 치료하기 위해 요법이 제공되는, 치료 방법.
  19. 제18항에 있어서,
    상기 알아냄은 상기 투여 전 0 내지 4일 이내에 수행되는, 방법.
  20. 제18항에 있어서,
    상기 알아냄은 상기 투여와 동일한 날에 수행되는, 방법.
  21. 제18항에 있어서,
    CRS를 치료하기 위한 상기 요법은 상기 투여 후 0 내지 5일에 상기 대상체에게 먼저 제공되는, 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종인, 방법.
  23. 제22항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종인, 방법.
  24. 제23항에 있어서,
    상기 다발성 골수종은 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종인, 방법.
  25. 제22항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택되는, 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포인, 방법.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여되는, 방법.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법.
  29. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법.
  30. 제28항 또는 제29항에 있어서,
    상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함하는, 방법.
  31. 제28항 또는 제29항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법:
    a. 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd);
    b. 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd);
    c. 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd);
    d. 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    e. 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd);
    f. 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd);
    g. 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손;
    h. 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd);
    i. 보르테조밉 및 덱사메타손;
    j. 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손;
    k. 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    l. 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE);
    m. 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손;
    n. 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손;
    o. 카르필조밉 및 덱사메타손;
    p. 레날리도마이드 단독;
    q. 보르테조밉 단독;
    r. 다라투무맙 단독;
    s. 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    t. 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    u. 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    v. 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    w. 포말리도마이드 및 덱사메타손;
    x. 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    y. 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손;
    z. 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신;
    aa. 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    bb. 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    cc. 익사조밉 및 덱사메타손;
    dd. 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    ee. 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는
    ff. 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손.
  32. 제31항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상을 받은, 방법.
  33. 제31항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하를 받은, 방법.
  34. 제31항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하를 받은, 방법.
  35. 제31항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받은, 방법.
  36. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함하는, 방법.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 단쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함하는, 방법.
  38. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함하는, 방법.
  39. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포인, 방법.
  40. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계;
    를 포함하고,
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 비-CAR T 세포 요법이 제공되는, 치료 방법.
  41. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계,
    c. 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및
    d. 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 비-CAR T 세포 요법을 상기 대상체에게 제공하는 단계;
    를 포함하는, 치료 방법.
  42. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법으로서,
    상기 질환으로 진단된 환자에게 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고,
    여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은
    (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는
    (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준;
    을 함유하는, 치료 방법.
  43. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)로의 치료 후 비-CAR T 세포 요법을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법으로서,
    상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 투여받은 적이 있고,
    여기서,
    (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는
    (ii) 상기 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우,
    상기 환자는 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자가 되는, 방법.
  44. 제43항에 있어서,
    상기 비-CAR T 세포 요법에 대한 후보자에게 상기 비-CAR T 세포 요법을 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  45. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계,
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 레날리도마이드가 투여됨;
    를 포함하는, 치료 방법.
  46. 제45항에 있어서,
    상기 레날리도마이드는 약 2.5 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 또는 25 mg의 투여량으로 투여되는, 방법.
  47. 제45항에 있어서,
    상기 레날리도마이드는 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 25 mg의 투여량으로 경구 투여되는, 방법.
  48. 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 질환은 다발성 골수종 (MM)인, 방법.
  49. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계;
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 포말리도마이드가 투여됨;
    를 포함하는, 치료 방법.
  50. 제49항에 있어서,
    상기 포말리도마이드는 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 또는 4 mg의 투여량으로 매일 1회 투여되는, 방법.
  51. 제49항에 있어서,
    상기 포말리도마이드는 질환이 진행될 때까지 반복된 28일 주기의 1 내지 21일에 1일 당 약 4 mg의 투여량으로 경구 투여되는, 방법.
  52. 제49항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 질환은 다발성 골수종 (MM)인, 방법.
  53. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환울 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계;
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 CC-220이 투여됨;
    를 포함하는, 치료 방법.
  54. 제53항에 있어서,
    상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여되는, 방법.
  55. 제53항에 있어서,
    상기 CC-220은 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여되는, 방법.
  56. 제53항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 질환은 다발성 골수종 (MM)인, 방법.
  57. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계;
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 CC-220 및 덱사메타손이 투여됨;
    를 포함하는, 치료 방법.
  58. 제57항에 있어서,
    상기 CC-220은 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 투여되는, 방법.
  59. 제57항 또는 제58항에 있어서,
    상기 덱사메타손은 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 투여되는, 방법.
  60. 제57항에 있어서,
    상기 CC-220은 28일 주기의 1 내지 21일에 매일 약 0.15 mg, 0.3 mg, 0.45 mg, 0.6 mg, 0.75 mg, 0.9 mg, 1.0 mg, 1.1 mg, 또는 1.2 mg의 투여량으로 경구 투여되는, 방법.
  61. 제57항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 덱사메타손은 28일 주기의 1, 8, 15, 및 22일에 약 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 또는 60 mg의 투여량으로 경구 투여되는, 방법.
  62. 제57항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 질환은 다발성 골수종 (MM)인, 방법.
  63. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준을 알아내는 단계;
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며;
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 방법.
  64. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준을 알아내하는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계,
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함을 알아내는 단계, 및
    d. 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계;
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 방법.
  65. 제63항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 40%를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되는, 방법.
  66. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 25 내지 35일에 알아내는, 방법.
  67. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 제2 수준은 상기 투여 후 28 내지 31일에 알아내는, 방법.
  68. 제63항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 sBCMA의 상기 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되는 방법.
  69. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법으로서,
    상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고,
    여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
    여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준을 함유하는, 치료 방법.
  70. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법으로서,
    상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계를 포함하고,
    여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고,
    여기서 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우, 상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 되는, 방법.
  71. 제70항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  72. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    b. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준을 알아내는 단계;
    여기서 sBCMA의 상기 수준이 4000 ng/L를 초과한 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며,
    여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 치료 방법.
  73. 제72항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 50 내지 70일에 알아내는, 방법.
  74. 제72항 또는 제73항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 55 내지 65일에 알아내는, 방법.
  75. 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서,
    sBCMA의 상기 수준은 상기 투여 후 58 내지 62일에 알아내는, 방법.
  76. 제73항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 sBCMA의 상기 제2 수준을 알아낸 후 3개월, 2개월 또는 1개월 이내에 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되는 방법.
  77. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 상기 대상체 유래 조직 샘플에서 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준을 후속적으로 알아내는 단계;
    여기서, IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며,
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 방법.
  78. 제77항에 있어서,
    상기 제1 수준은 BCMA에 대해 지시된 CAR을 발현하는 면역 세포를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 날에 알아내고,
    상기 제2 수준은 상기 투여 후 1 내지 4일에 알아내는, 방법.
  79. 제78항에 있어서,
    상기 제2 수준은 상기 투여 후 2일에 알아내는, 방법.
  80. 제1항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병, 또는 비-호지킨 림프종인, 방법.
  81. 제80항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 다발성 골수종인, 방법.
  82. 제81항에 있어서,
    상기 다발성 골수종은 고위험 다발성 골수종 또는 재발성 및 불응성 다발성 골수종인, 방법.
  83. 제80항에 있어서,
    BCMA-발현 세포에 의해 유발된 상기 질환은 비-호지킨 림프종이며, 상기 비-호지킨 림프종은 버킷 림프종(Burkitt’s lymphoma), 만성 림프구성 백혈병/소형 림프구성 림프종(CLL/SLL), 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 면역모세포성 거대 세포 림프종(immunoblastic large cell lymphoma), 전구 B-림프모구 림프종 및 외투 세포 림프종(mantle cell lymphoma)으로 구성된 군에서 선택되는, 방법.
  84. 제1항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포인, 방법.
  85. 제1항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 150 x 106 세포 내지 450 x 106 세포의 투여량으로 투여되는, 방법.
  86. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 3개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법.
  87. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법.
  88. 제86항 또는 제87항에 있어서,
    상기 종류의 선행 요법은 프로테아좀 억제제, 레날리도마이드, 포말리도마이드, 탈리도마이드, 보르테조밉, 덱사메타손, 사이클로포스파마이드, 독소루비신, 카르필조밉, 익사조밉, 시스플라틴, 독소루비신, 에토포사이드, 항-CD38 항체 파노비노스타트, 또는 엘로투주맙을 포함하는, 방법.
  89. 제86항 또는 제87항에 있어서,
    상기 투여 전에 상기 대상체는 다음을 포함하는 1개 이상의 종류(lines)의 선행 요법을 받은, 방법:
    a. 다라투무맙, 포말리도마이드, 및 덱사메타손 (DPd);
    b. 다라투무맙, 보르테조밉, 및 덱사메타손 (DVd);
    c. 익사조밉, 레날리도마이드, 및 덱사메타손 (IRd);
    d. 다라투무맙, 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    e. 보르테조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (RVd);
    f. 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손 (BCd);
    g. 보르테조밉, 독소루비신 및 덱사메타손;
    h. 카르필조밉, 레날리도마이드 및 덱사메타손 (CRd);
    i. 보르테조밉 및 덱사메타손;
    j. 보르테조밉, 탈리도마이드 및 덱사메타손;
    k. 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    l. 덱사메타손, 탈리도마이드, 시스플라틴, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 에토포사이드 및 보르테조밉 (VTD-PACE);
    m. 레날리도마이드 및 저-용량 덱사메타손;
    n. 보르테조밉, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손;
    o. 카르필조밉 및 덱사메타손;
    p. 레날리도마이드 단독;
    q. 보르테조밉 단독;
    r. 다라투무맙 단독;
    s. 엘로투주맙, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    t. 엘로투주맙 레날리도마이드 및 덱사메타손;
    u. 벤다무스틴, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    v. 벤다무스틴, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    w. 포말리도마이드 및 덱사메타손;
    x. 포말리도마이드, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    y. 포말리도마이드, 카르필조밉 및 덱사메타손;
    z. 보르테조밉 및 리포솜 독소루비신;
    aa. 사이클로포스파마이드, 레날리도마이드, 및 덱사메타손;
    bb. 엘로투주맙, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    cc. 익사조밉 및 덱사메타손;
    dd. 파노비노스타트, 보르테조밉 및 덱사메타손;
    ee. 파노비노스타트 및 카르필조밉; 또는
    ff. 포말리도마이드, 사이클로포스파마이드 및 덱사메타손.
  90. 제89항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개 또는 그 이상을 받은, 방법.
  91. 제89항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 3개 이하를 받은, 방법.
  92. 제89항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 2개 이하를 받은, 방법.
  93. 제89항에 있어서,
    상기 대상체는 상기 종류의 선행 요법 중 1개 이하를 받은, 방법.
  94. 제1항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 BCMA를 표적으로 하는 항체 또는 항체 단편을 포함하는, 방법.
  95. 제1항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 단쇄 Fv 항체 단편(scFv)을 포함하는, 방법.
  96. 제1항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 CAR은 BCMA02 scFv를 포함하는, 방법.
  97. 제1항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포인, 방법.
  98. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계, 및
    c. 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제2 수준을 알아내는 단계;
    여기서, sBCMA의 상기 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과한 경우 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않는 경우, 상기 대상체는 후속적으로 상기 질환을 치료하기 위해 제2 BCMA-기반 치료 양식이 제공되며,
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 방법.
  99. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환을 이를 필요로 하는 대상체에서 치료하는 방법으로서,
    a. 대상체 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 제1 수준 및/또는 인터루킨-6(IL-6), 종양 괴사 인자 알파(TNFα) 또는 둘 모두의 제1 수준을 알아내는 단계;
    b. BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 투여하는 단계,
    c. 대상체 유래 조직 샘플에서 sBCMA의 제2 수준이 sBCMA의 상기 제1 수준의 30%를 초과함 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 제2 수준이 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 상기 제1 수준을 초과하지 않음을 알아내는 단계, 및
    d. 상기 c 단계에서의 알아냄에 기초하여, 후속적으로 제2 BCMA-기반 치료 양식을 상기 대상체에게 제공하는 단계;
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식임;
    를 포함하는, 방법.
  100. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환의 치료 방법으로서,
    상기 질환으로 진단된 환자에게 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고,
    여기서 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식이며,
    여기서 상기 투여 후 환자 유래 조직 샘플은
    (i) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA 수준의 30%를 초과하는 가용성 BCMA (sBCMA) 수준; 및/또는
    (ii) 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준;
    을 함유하는, 치료 방법.
  101. B 세포 성숙화 제제 (B Cell Maturation Agent, BCMA) 발현 세포에 의해 유발된 질환으로 진단된 환자가 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식으로의 치료 후 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여받아야 하는지 여부를 결정하는 방법으로서,
    상기 환자 유래 조직 샘플에서 가용성 BCMA (sBCMA)의 수준 및/또는 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 알아내는 단계를 포함하고,
    여기서 상기 환자는 이전에 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 제1 BCMA-기반 치료 양식을 투여받은 적이 있고,
    여기서,
    (i) 조직 샘플에서 sBCMA의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 sBCMA의 수준의 30%를 초과한 경우; 및/또는
    (ii) IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준이 상기 투여 전에 환자로부터 수득된 조직 샘플에서 발견된 IL-6, TNFα 또는 둘 모두의 수준을 초과하지 않는 경우,
    상기 환자는 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자가 되며,
    상기 제1 BCMA-기반 치료 양식 및 제2 BCMA-기반 치료 양식은 상이한 BCMA-기반 치료 양식인, 방법.
  102. 제101항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식에 대한 후보자에게 상기 제2 BCMA-기반 치료 양식을 투여하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  103. 제63항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE), B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs), 또는 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는, 방법.
  104. 제103항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)를 포함하는, 방법.
  105. 제104항에 있어서,
    상기 BCMA-항체-약물 접합체 (ADC)는 CC99712 또는 GSK2857916 (벨란타맙 마포도틴(belantamab mafodotin))를 포함하는, 방법.
  106. 제103항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)를 포함하는, 방법.
  107. 제106항에 있어서,
    B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 이중특이적 T-세포 인게이저 (BiTE)는 CC-93269, AMG 420, JNJ-64007957, AMG 701, PF-06863135, REGN5458, REGN5459, 또는 TNB-383B를 포함하는, 방법.
  108. 제103항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 자연 살해 (NK) 세포 인게이저 (NKCEs)를 포함하는, 방법.
  109. 제108항에 있어서,
    B-세포 성숙 항원 (BCMA)을 표적으로 하는 상기 자연 살해(NK) 세포 인게이저 (NKCEs)는 DF3001, AFM26, CTX-4419, 또는 CTX-8573를 포함하는, 방법.
  110. 제103항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는, 방법.
  111. 제103항 또는 제110항에 있어서,
    BCMA 에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 상기 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)는 JCARH125, KITE-585, P-BCMA-101, LCAR-B38M, CT053, 항-CD19/BCMA CAR-T 세포, 및 CTX120를 포함하는, 방법.
  112. 제98항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서,
    BCMA에 대해 지시된 키메라 항원 수용체 (CAR)를 발현하는 면역 세포 (BCMA CAR T 세포)를 포함하는 상기 제1 BCMA-기반 치료 양식에서 상기 면역 세포는 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포인, 방법.
  113. 제63항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 제2 BCMA-기반 치료 양식은 이데캅타진 비클류셀 (idecabtagene vicleucel) 세포를 포함하지 않는, 방법.
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Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3182697A1 (en) 2020-05-11 2021-11-18 Janssen Biotech, Inc. Methods for treating multiple myeloma
WO2022221737A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Juno Therapeutics, Inc. T cell therapy in patients who have had prior stem cell transplant
TW202309522A (zh) * 2021-05-11 2023-03-01 美商健生生物科技公司 用於監測復發性及/或難治性多發性骨髓瘤之治療的方法及組成物
EP4426339A1 (en) * 2021-11-03 2024-09-11 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen for use in treating myeloma
WO2023081705A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers and enhancing efficacy of bcmaxcd3 bispecific antibodies
CN118338900A (zh) * 2021-11-05 2024-07-12 斯普林渥克斯治疗有限公司 含尼罗加司他的组合物和治疗
KR20240137075A (ko) 2022-01-28 2024-09-19 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 세포 조성물의 제조 방법
WO2023220641A2 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to t cell therapy and production of same
WO2023220655A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
WO2023230548A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2024097905A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Celgene Corporation Methods of treatment with t cell therapy and immunomodulatory agent maintenance therapy
WO2024097979A1 (en) * 2022-11-04 2024-05-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bcma vh-only cars
WO2024118632A1 (en) * 2022-11-30 2024-06-06 Fc Ip Holdings, Llc Methods and kits for dna editing and treating, ameliorating and/or preventing cancer
WO2024168192A1 (en) 2023-02-10 2024-08-15 Celgene Corporation Assessment of bcma in biological samples
CN118325927A (zh) * 2024-06-13 2024-07-12 广州安捷生物医学技术有限公司 编码nk细胞衔接器和car的多核苷酸及包含其的修饰细胞

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4554101A (en) 1981-01-09 1985-11-19 New York Blood Center, Inc. Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity
US4873192A (en) 1987-02-17 1989-10-10 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Process for site specific mutagenesis without phenotypic selection
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5283173A (en) 1990-01-24 1994-02-01 The Research Foundation Of State University Of New York System to detect protein-protein interactions
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
PT1621554E (pt) 1992-08-21 2009-07-13 Univ Bruxelles Imunoglobtainas desprovidas de cadeias leves
DK0698097T3 (da) 1993-04-29 2001-10-08 Unilever Nv Produktion af antistoffer eller (funktionaliserede) fragmenter deraf afledt af Camelidae-immunoglobuliner med tung kæde
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5827642A (en) 1994-08-31 1998-10-27 Fred Hutchinson Cancer Research Center Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
US6013516A (en) 1995-10-06 2000-01-11 The Salk Institute For Biological Studies Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells
US5994136A (en) 1997-12-12 1999-11-30 Cell Genesys, Inc. Method and means for producing high titer, safe, recombinant lentivirus vectors
FR2777909B1 (fr) 1998-04-24 2002-08-02 Pasteur Institut Utilisation de sequences d'adn de structure triplex pour le tranfert de sequences de nucleotides dans des cellules, vecteurs recombinants contenant ces sequences triplex
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
AU2001243288B2 (en) 2000-02-24 2005-11-24 Life Technologies Corporation Simultaneous stimulation and concentration of cells
EP1385946B1 (en) 2001-05-01 2009-12-23 National Research Council Of Canada A system for inducible expression in eukaryotic cells
AU2003202908A1 (en) 2002-01-03 2003-07-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Activation and expansion of t-cells using an engineered multivalent signaling platform
FR2872170B1 (fr) 2004-06-25 2006-11-10 Centre Nat Rech Scient Cnrse Lentivirus non interactif et non replicatif, preparation et utilisations
SG10202012179RA (en) 2010-02-11 2021-01-28 Celgene Corp Arylmethoxy isoindoline derivatives and compositions comprising and methods of using the same
CN103502438A (zh) 2011-03-23 2014-01-08 弗雷德哈钦森癌症研究中心 用于细胞免疫治疗的方法和组合物
WO2014097442A1 (ja) 2012-12-20 2014-06-26 三菱電機株式会社 車載装置及びプログラム
US9108442B2 (en) 2013-08-20 2015-08-18 Ricoh Company, Ltd. Image forming apparatus
US10383929B2 (en) 2014-12-12 2019-08-20 Bluebird Bio, Inc. BCMA chimeric antigen receptors
EP3464375A2 (en) * 2016-06-02 2019-04-10 Novartis AG Therapeutic regimens for chimeric antigen receptor (car)- expressing cells
CA3083949A1 (en) * 2017-11-30 2020-06-06 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof

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