KR20220082673A - Arthrobacter pascens S29-14 strain for controlling fire blight and uses thereof - Google Patents
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Abstract
본 발명은 과수화상병 방제용 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 과수화상병에 대해 항균활성 효과가 우수한 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주 또는 상기 균주의 배양액 등을 포함하는 과수화상병 방제용 조성물, 및 상기 균주를 사용한 과수화상병 방제 방법에 관한 것이다.The present invention relates to an Arthrobacter pascens strain for controlling fruit burns and uses thereof, and the Arthrobacter pascens S29-14 strain having excellent antibacterial activity against fruit burns (deposited) No.: KACC 92320P), a composition for controlling fruit burns containing the strain or a culture solution of the strain, and the like, and to a method for controlling fruit burns using the strain.
Description
본 발명은 과수화상병(fire blight) 방제용 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) 균주 및 이의 용도에 관한 것이다.The present invention relates to a strain of Arthrobacter pascens for controlling fire blight and uses thereof.
과수화상병(fire blight)은 장미과에 속하는 180여종의 식물의 잎, 꽃, 가지, 줄기, 및 과일 등이 마치 불에 타서 화상을 입은 것과 같이 변하며 식물이 말라 죽어가는 병이다. 흔히 볼 수 있는 사과, 배, 및 모과의 나무에서 발병한다. 세균성 식물 전염병인 과수화상병은 1780년 미국에서 최초 발견됐지만, 아직 치료제나 백신이 개발되지 않아 확산을 막기 위해서는 소각이나 매몰을 해야 한다. 문제는 매몰로 끝나는 게 아니다. 매몰 후에는 3년 동안 같은 땅에서 과수화상병이 발병할 수 있는 식물을 기르지 못한다. 재배 제한 기간은 3년이지만 실질적으로 예전과 같은 과수원의 모습을 되찾는 데는 더 긴 시간이 걸릴 수 있다.Fire blight is a disease in which the leaves, flowers, branches, stems, and fruits of more than 180 species of plants belonging to the Rosaceae change as if they were burned by fire, and the plants wither and die. It occurs in common apple, pear, and quince trees. Bacterial plant disease, orchard burns, was first discovered in the United States in 1780, but since no treatment or vaccine has been developed yet, incineration or burial is required to prevent its spread. The problem does not end with burial. After burial, it is not possible to grow plants susceptible to fruit burns on the same land for three years. The cultivation restriction period is three years, but it may take longer for the orchard to actually return to its former appearance.
과수화상병(fire blight)은 전세계적으로는 미대륙, 유럽지역, 아시아, 및 아프리카 등 전세계 대부분 지역 30개국에서 발생했다. 국내에는 2015년 경기도 안성시, 충청남도 천안시, 및 충청북도 제천시에서 발병이 보고된 이후 매년 산발적으로 발생하고 있다가 2020년 충북 일부 지역에서 크게 유행했다. 같은 해 화상병은 충북 지역 외에도 충남 천안, 전북 익산, 경기 안성, 파주, 이천, 연천, 양주, 및 광주 등에서도 발병사례가 공유됐다. 점차 전국 각지로 퍼지고 있어 올해 충북의 과수 농가뿐 아니라 전국의 사과 및 배 농가의 위협요인이 되고 있다.Worldwide, fire blight has occurred in 30 countries in most parts of the world, including the Americas, Europe, Asia, and Africa. In Korea, the outbreak was reported in Anseong-si, Gyeonggi-do in 2015, Cheonan-si, Chungcheongnam-do, and Jecheon-si, Chungcheongbuk-do. In the same year, cases of burn disease were shared in Cheonan, Chungnam, Iksan, Jeollabuk-do, Anseong, Paju, Icheon, Yeoncheon, Yangju, and Gwangju in addition to the Chungbuk region in the same year. As it is gradually spreading across the country, it is becoming a threat to not only fruit orchard farmers in North Chungcheong this year, but also apple and pear farms across the country.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 과수화상병을 방제하는데 효과적인 균주 및 이러한 균주를 이용해 과수화상병을 방제하는 조성물 및 이를 이용한 과수화상병 방제 방법을 제공하는 것이다.The technical problem to be achieved by the present invention is to provide a strain effective for controlling fruit burns, a composition for controlling fruit burns using such strains, and a method for controlling fruit burns using the same.
본 발명은 과수화상병을 방제하는 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P)를 제공한다.The present invention provides an Arthrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P) for controlling fruit burns.
상기 균주는 서열번호 1로 표시되는 염기서열의 16S rRNA를 갖는 것을 특징으로 한다.The strain is characterized in that it has 16S rRNA of the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 1.
상기 균주, 상기 균주의 배양액, 또는 상기 균주, 및 상기 균주의 배양액 모두를 유효성분으로 포함하는 과수화상병 방제용 조성물을 제공한다.It provides a composition for controlling fruit burn disease comprising all of the strain, the culture solution of the strain, or the strain, and the culture solution of the strain as an active ingredient.
상기 과수화상병 방제의 대상 식물은 사과나무, 배나무, 모과나무, 살구나무, 복숭아나무, 매실나무, 자두나무, 아로니아, 앵두나무, 라즈베리, 조팝나무, 장미, 마가목, 풀또기, 명자나무, 찔레, 딸기, 및 벚나무 중 적어도 하나를 포함하는 과수화상병 방제용 조성물을 제공한다.The target plants of the fruit burn disease control are apple trees, pear trees, quince trees, apricot trees, peach trees, plum trees, plum trees, aronia, cherry trees, raspberries, meadowsweet trees, roses, rowan trees, grasshoppers, myongjae trees, It provides a composition for controlling fruit burns comprising at least one of brier, strawberry, and cherry tree.
상기 과수화상병 방제의 대상 식물은 사과나무인 과수화상병 방제용 조성물을 제공한다.The target plant for controlling the fruit burns provides a composition for controlling the fruit burns of an apple tree.
아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 식물, 식물 주변 영역, 또는 이들 모두에 처리하는 단계를 포함하는 과수화상병 방제 방법을 제공한다.Any one or more selected from the group consisting of Arthrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), a culture solution of the strain, a composition comprising the strain, and a composition comprising the culture solution of the strain It provides a method for controlling fruit burn disease comprising the step of treating the plant, the area around the plant, or both.
상기 식물은 사과나무인 과수화상병 방제 방법을 제공한다.The plant provides a method for controlling fruit burn disease, which is an apple tree.
상기 균주, 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물 중 적어도 하나는 상기 식물에 살포되거나 접종되는 과수화상병 방제 방법을 제공한다.At least one of the strain, the culture solution of the strain, the composition comprising the strain, and the composition comprising the culture solution of the strain is sprayed or inoculated to the plant.
상기 식물은 접종되는 영역으로 잎, 열매, 및 유묘 중 적어도 하나를 포함하는 과수화상병 방제 방법을 제공한다.The plant provides a method for controlling fruit burn disease comprising at least one of a leaf, a fruit, and a seedling as an area to be inoculated.
본 발명은 과수화상병 방제용 균주인 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주 또는 상기 균주의 배양액을 포함하는 과수화상병 방제용 조성물, 이를 사용한 과수화상병 방제 방법을 제공한다. 본 발명에 따른 상기 균주를 이용하여 과수화상병을 방제할 수 있다.The present invention provides a composition for controlling fruit burns, including the Arthrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), the strain or a culture solution of the strain, for controlling fruit burns, using the same To provide a method for controlling fruit burns. Fruit burn disease can be controlled by using the strain according to the present invention.
도 1a는 음성대조군(negative control)으로, 배양 배지인 TSB(Tryptic Soy Broth)를 처리한 사과잎을 도시한 사진이다.
도 1b는 대조군(control)으로, 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 잎자루에 접종한 사과잎을 도시한 사진이다.
도 1c는 실험군(S29-14)으로, 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 잎자루에 접종한 사과잎을 도시한 사진이다.
도 2a는 음성대조군(negative control)으로, 배양 배지인 TSB를 처리한 사과열매를 도시한 사진이다.
도 2b는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.
도 3a는 대조군(control)으로, 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 도시한 사진이다.
도 3b는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.
도 4a는 실험군(S29-14)으로, 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 도시한 사진이다.
도 4b는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.
도 5a는 음성대조군으로, 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘를 도시한 사진이다.
도 5b는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.
도 5c는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.
도 5d는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.
도 6a는 대조군으로, 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘를 도시한 사진이다.
도 6b는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.
도 6c는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.
도 6d는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.
도 7a는 실험군으로, 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘를 도시한 사진이다.
도 7b는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.
도 7c는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.
도 7d는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.
도 8은 S29-14의 16S rRNA 염기서열에 의한 근연 계통도이다.1a is a photograph showing apple leaves treated with TSB (Tryptic Soy Broth), which is a culture medium, as a negative control.
1b is a photograph showing an apple leaf inoculated with a pathogen suspension on petioles after treatment with TSB, which is a culture medium, as a control.
1c is a photograph showing an apple leaf inoculated on petioles with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension as an experimental group (S29-14).
2A is a photograph showing apple fruits treated with TSB, a culture medium, as a negative control.
2B is a photograph showing a cross-section of an apple fruit treated with TSB, which is a culture medium.
3A is a photograph showing apple fruits inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, which is a culture medium, as a control.
3B is a photograph showing a cross-section of an apple fruit inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
4A is a photograph showing apple fruits inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension as an experimental group (S29-14).
Figure 4b is a photograph showing a cross-section of an apple fruit inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension.
5a is a photograph showing apple seedlings treated with TSB, a culture medium, as a negative control.
Figure 5b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings treated with the culture medium TSB.
Figure 5c is a photograph showing the reverse side of the leaf of the apple seedlings treated with TSB, a culture medium.
Figure 5d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings treated with the culture medium TSB.
6a is a photograph showing an apple seedling inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium, as a control.
Figure 6b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the culture medium TSB.
Figure 6c is a photograph showing the reverse side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the culture medium TSB.
Figure 6d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
7a is a photograph showing an apple seedling inoculated with a pathogen suspension after treatment with an antibacterial active strain suspension as an experimental group.
Figure 7b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antimicrobial active strain suspension.
Figure 7c is a photograph showing the reverse side of the leaves of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antimicrobial active strain suspension.
Figure 7d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension.
8 is a close-up view of the 16S rRNA nucleotide sequence of S29-14.
본 발명은 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주 또는 상기 균주의 배양액 등을 포함하는 과수화상병(fire blight) 방제용 조성물, 상기 균주 또는 상기 조성물 등을 이용한 과수화상병 방제 방법임을 특징으로 한다.The present invention is Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ) S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), a composition for controlling fire blight comprising the strain or a culture solution of the strain, the strain or the above It is characterized in that it is a method for controlling an overwater burn disease using a composition or the like.
이하 도면을 참조하여 본 발명을 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the drawings.
본 발명은 서열번호 1로 표시되는 염기서열의 16S rRNA를 갖는 것을 특징으로 하는 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P)를 제공한다.The present invention provides an Arthrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), characterized in that it has 16S rRNA of the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 1.
본 발명은 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주의 배양액, 또는 상기 균주, 및 상기 균주의 배양액 모두를 유효성분으로 포함하는 과수화상병 방제용 조성물을 제공한다.The present invention is Arthrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), the culture solution of the strain, or the strain, and for controlling fruit burns containing all of the culture solution of the strain as an active ingredient A composition is provided.
본 명세서에서 “식물”은 식물계에 속하는 임의의 살아있는 유기체 (즉, 식물계 내의 임의의 속/종)를 지칭하여, 나무, 허브, 관목, 목초, 덩굴, 양치식물, 이끼 및 녹조류와 같으나 이에 제한되지는 않는다. 따라서 조성물이 적용될 수 있는 대표적인 식물로 브라시카, 구근 채소, 곡물, 시트러스, 목화, 조롱박, 과실 채소, 잎 채소, 콩과식물, 오일 종자 식물, 땅콩, 이과류, 뿌리 채소, 괴경 채소, 구경 채소, 핵과류, 담배, 딸기, 장과류, 및 다양한 관상식물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일례로, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 사과에 적용될 수 있다.As used herein, “plant” refers to any living organism belonging to the plant kingdom (i.e., any genus/species within the plant kingdom), such as, but not limited to, trees, herbs, shrubs, grasses, vines, ferns, moss and green algae. does not Therefore, representative plants to which the composition can be applied include brassica, bulbous vegetables, grains, citrus, cotton, gourds, fruit vegetables, leaf vegetables, legumes, oil seed plants, peanuts, pome fruits, root vegetables, tuber vegetables, caliber vegetables , nuclear fruits, tobacco, strawberries, berries, and various ornamental plants. For example, according to an embodiment of the present invention, it may be applied to apples.
본 명세서에서 “배양액”은 균주를 배지에 접종하고 일정시간 배양하여 얻은 결과물로서, 본 발명에 따른 균주를 적합한 액체 배지에서 배양한 배양액 자체, 상기 배양액을 여과 또는 원심분리하여 균주를 제거한 여액(여과액 또는 원심분리한 상등액), 상기 배양액을 초음파 처리하거나 상기 배양액에 용해효소(lysozyme)를 처리하여 수득한 세포 파쇄액, 및 상기 배양액, 여액, 및 파쇄액 등을 농축한 농축액 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 생균제 또는 항균활성용 조성물은 고체배지 배양물, 또는 상기 배양액의 건조물 또는 추출물 등의 배양물을 함유할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 나아가 적합한 부형제 또는 담체를 추가로 포함할 수도 있다.As used herein, the term “culture medium” refers to a result obtained by inoculating a strain on a medium and culturing for a certain period of time, the culture medium itself culturing the strain according to the present invention in a suitable liquid medium, the filtrate obtained by filtering or centrifuging the culture medium to remove the strain (filtration solution or centrifuged supernatant), a cell lysate obtained by sonicating the culture solution or treating the culture solution with a lysozyme, and a concentrate obtained by concentrating the culture solution, filtrate, and lysate, etc. It is not limited. In addition, the composition for probiotic or antibacterial activity may contain a culture such as a solid medium culture or a dried product or extract of the culture medium, but is not limited thereto, and may further include a suitable excipient or carrier.
본 발명의 조성물은 액상 비료 형태로 제조될 수 있으며 이에 증량제를 첨가하여 가루분말의 형태로 이용하거나 이를 제형화하여 과립화시킬 수도 있다. 그러나 그 제형에 특별히 한정되지는 않는다.The composition of the present invention may be prepared in the form of a liquid fertilizer, and may be used in the form of a powder by adding an extender thereto, or may be formulated and granulated. However, it is not particularly limited to the formulation.
용어 “과수화상병”은 장미과에 속한 일부 그룹의 식물에 영향을 미치는 전염병으로, 원인이 되는 병원균은 에르위니아 아밀로보라(Erwinia amylovora)이며, 잎, 꽃, 가지, 줄기, 및 열매 등이 화상을 입은 것처럼 조직이 검게 변하고 서서히 말라죽게 되는 병이다.The term “fruit burn disease” is an infectious disease affecting some groups of plants belonging to the Rosaceae family. The causative pathogen is Erwinia amylovora , and leaves, flowers, branches, stems, and fruits are burned. It is a disease that causes the tissues to turn black and gradually dry up, as if they were wearing a sweatshirt.
용어 “과수화상병에 대한 방제”는 과수화상병에 대항하는 균주의 항균활성을 지칭하는 그의 통상의 의미로 본원에서 사용된다. 따라서, “과수화상병에 대응하는 균주의 항균활성을 활용하는 것”은 통상적으로 식물이 과수화상병 균주를 지닌 경우에 본 발명의 상기 균주 또는 상기 균주에 의해 제조된 물질을 투여함으로써 발병이 방제되는 것을 의미한다.The term “control against waterweed” is used herein in its ordinary meaning to refer to the antibacterial activity of a strain against waterweed. Therefore, "Utilizing the antibacterial activity of the strain corresponding to fruit burn" is usually to control the onset by administering the strain of the present invention or a substance produced by the strain when the plant has an orchard strain. means to be
본 발명의 과수화상병 방제용 조성물은 과수화상병을 방제할 수 있다.The composition for controlling fruit burns of the present invention can control fruit burns.
본 발명의 과수화상병 방제용 조성물은 사과나무, 배나무, 모과나무, 살구나무, 복숭아나무, 매실나무, 자두나무, 아로니아, 앵두나무, 라즈베리, 조팝나무, 장미, 마가목, 풀또기, 명자나무, 찔레, 딸기, 및 벚나무 등 장미과 중 에르위니아 아밀로보라(Erwinia amylovora) 기주식물에 해당하는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 과수화상병을 방제할 수 있다. 일례로, 본 발명의 일 일시예에 따르면, 과수화상병 방제용 조성물은 사과나무의 과수화상병을 방제시킬 수 있다.The composition for controlling fruit burns of the present invention is an apple tree, a pear tree, a quince tree, an apricot tree, a peach tree, a plum tree, a plum tree, an aronia tree, a cherry tree, a raspberry, a seaweed tree, a rose, a rowan tree, a grass tree, a myongja tree. Erwinia amylovora ( Erwinia amylovora ) It is possible to control any one or more fruit burn diseases selected from the group corresponding to the host plant, such as brier, strawberry, and cherry tree. For example, according to one embodiment of the present invention, the composition for controlling fruit burns can control fruit burns of apple trees.
본 발명의 과수화상병 방제용 조성물은 상술한 본 발명의 균주, 상기 균주 배양액, 또는 이들의 혼합물에 당해 분야에서 과수화상병을 방제시키는 것으로 사용되는 다른 임의의 성분을 추가로 포함할 수 있다.The composition for controlling fruit burns of the present invention may further include other optional components used for controlling plant burns in the art to the above-described strain of the present invention, the culture medium of the strain, or a mixture thereof.
본 발명의 과수화상병 방제용 조성물에는 유익한 다른 미생물들, 미생물 활성물질, 유기 비료, 그리고 화학비료가 포함될 수 있다.The composition for controlling fruit burns of the present invention may include other beneficial microorganisms, microbial active substances, organic fertilizers, and chemical fertilizers.
본 발명은 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 32320P), 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 식물, 식물 주변 영역, 또는 이들 모두에 처리하여 과수화상병을 방제하는 단계를 포함하는 과수화상병 방제 방법을 제공한다.The present invention is Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ) S29-14 strain (Accession No.: KACC 32320P), a culture solution of the strain, a composition comprising the strain, and a composition comprising the culture solution of the strain selected from the group consisting of It provides a method for controlling fruit burns, comprising the step of treating any one or more of plants, areas around plants, or both to control fruit burns.
본 발명이 적용되는 식물의 부위는 제한되지 않는다. 따라서, 식물 전체는 물론, 식물의 부분, 예를 들어 씨앗, 새순, 줄기, 뿌리, 잎, 과실(열매), 및 이들의 전체는 물론 이들의 일부를 모두 포함한다. 일례로, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 잎, 열매, 및 유묘에 적용될 수 있다.The part of the plant to which the present invention is applied is not limited. Accordingly, it includes the whole plant as well as parts of the plant such as seeds, shoots, stems, roots, leaves, fruits (fruits), and their whole as well as parts thereof. For example, according to an embodiment of the present invention, it can be applied to leaves, fruits, and seedlings.
본 발명은 상기 균주, 균주를 배양한 배양액, 및 상기 균주를 이용한 조성물을 종자나 식물에 침지하거나 살포, 즉 분무하여 수행할 수 있다. 침지하는 방법의 경우, 배양액 및 제제를 식물체 주변의 토양에 살포 또는 종자를 배양액 및 조성물에 담가 진탕 접종할 수 있다.The present invention can be carried out by immersing or spraying, that is, spraying, in seeds or plants, the strain, the culture medium in which the strain is cultured, and the composition using the strain. In the case of the immersion method, the culture solution and formulation can be sprayed on the soil around the plant or the seeds are soaked in the culture solution and composition and shaken inoculated.
본 발명이 적용되는 주변 영역이란 본 발명의 조성물이 효과를 발휘할 수 있는 범위를 의미하는 것으로, 지상, 및 지하를 모두 포함한다. 예를 들어 식물, 식물 부분 또는 과실 주위의 약 2m 이내, 약 1m 이내, 약 70cm 이내, 약 50cm 이내, 약 25cm 이내, 약 10cm 이내, 및 약 5cm 이내의 영역일 수 있다.The surrounding area to which the present invention is applied means a range in which the composition of the present invention can exert an effect, and includes both above ground and underground. For example, the area around a plant, plant part, or fruit may be within about 2 m, within about 1 m, within about 70 cm, within about 50 cm, within about 25 cm, within about 10 cm, and within about 5 cm.
본 발명의 방법은 조성물을 식물의 수명 주기 동안 임의의 시점에, 식물의 수명 주기의 하나 이상의 단계 동안, 또는 식물의 수명 주기에서 정기적인 간격으로, 또는 식물의 수명 전체에 걸쳐 계속적으로 적용하는 것을 포함한다. 따라서 조성물은 필요에 따라 적용될 수 있다. 조성물은 예를 들어 식물에게 성장 동안, 개화 전 및/또는 동안, 및/또는 종자 발생 전 및/또는 동안 적용될 수 있다. 일례로, 조성물은 식물이 한 위치에서 또 다른 위치로, 예컨대 온실 또는 온상에서 필드로 이식되기 전, 동안 및/또는 직후에 적용될 수 있다. 또 다른 일례로, 각각의 조성물은 식물에 원하는 간격 기간으로 다수회 적용될 수 있다.The method of the present invention comprises continuously applying the composition at any time during the life cycle of the plant, during one or more stages of the life cycle of the plant, or at regular intervals in the life cycle of the plant, or continuously throughout the life of the plant. include Accordingly, the composition can be applied as needed. The composition may be applied to the plant, for example, during growth, before and/or during flowering, and/or before and/or during seed development. In one example, the composition may be applied before, during and/or immediately after the plant is transplanted from one location to another, such as in a greenhouse or hotbed, into the field. As another example, each composition may be applied to the plant multiple times at a desired interval period.
본 발명의 상기 과수화상병 방제 방법은 사과나무, 배나무, 모과나무, 살구나무, 복숭아나무, 매실나무, 자두나무, 아로니아, 앵두나무, 라즈베리, 조팝나무, 장미, 마가목, 풀또기, 명자나무, 찔레, 딸기, 및 벚나무 등 장미과 중 에르위니아 아밀로보라(Erwinia amylovora) 기주식물에 해당하는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물의 과수화상병을 방제시킬 수 있다. 일례로, 본 발명의 일 일시예에 따르면, 사과의 과수화상병을 방제시킬 수 있다.The fruit burn disease control method of the present invention is an apple tree, a pear tree, a quince tree, an apricot tree, a peach tree, a plum tree, a plum tree, an aronia tree, a cherry tree, a raspberry, a seaweed tree, a rose, a rowan tree, a grass, and a myongja tree. Erwinia amylovora among rosaceae, such as brier, strawberry, and cherry tree, can control fruit burn disease of any one or more plants selected from the group corresponding to the host plant. For example, according to one embodiment of the present invention, it is possible to control the fruit burn disease of apples.
본 발명은 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 식물, 식물 주변 영역, 또는 이들 모두에 처리하는 단계를 포함하는 과수화상병 방제 방법을 제공한다.The present invention is Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ) S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), a culture solution of the strain, a composition comprising the strain, and a composition comprising the culture solution of the strain selected from the group consisting of It provides a method for controlling fruit burn disease, comprising the step of treating any one or more of the plant, the area around the plant, or both.
상술한 본 발명의 일 실시예에 따른 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물을 사용하는 경우, 사과, 및 배 등 에르위니아 아밀로보라(Erwinia amylovora)가 기주식물에 생장하여 걸리는 과수화상병을 방제할 수 있다. Asrobacter pascens S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P) according to an embodiment of the present invention described above, a culture solution of the strain, a composition comprising the strain, and a culture solution of the strain In the case of using a composition to be used, apples and pears, etc. Erwinia amylovora ( Erwinia amylovora ) It is possible to control fruit burns caused by growing on host plants.
이하, 실시예를 통해서 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하지만, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these are only for describing the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited thereto.
[실시예 1] 미생물의 분리, 항균활성 균주 S29-14 선발[Example 1] Isolation of microorganisms, selection of antibacterial active strain S29-14
과수화상병 방제 미생물을 선발하기 위해 토양, 과수의 신초, 화기, 줄기, 및 열매 등의 시료로부터 희석 도말법을 사용하여 1758점의 미생물을 분리하였다. 분리 미생물 중 과수 화상병원균(Erwinia amylovora)에 대해 항균활성을 나타내는 미생물을 선발하기 위해 고체배지(2.3% NA(Nutrient Agar) + 5% sucrose)에 분리 균주를 10㎕ 접종한 뒤 24시간 28℃에서 배양하였다. 분리균주가 배양된 플레이트(plate)에 병원균(OD600=0.1)을 포함하는 0.6% 소프트 아가(soft agar)를 부어준 뒤 28℃에서 2일간 배양하여 클리어 존(clear zone)이 형성되는 S29-14 균주를 선발하였다.In order to select fruit-burning control microorganisms, 1,758 microorganisms were isolated from samples such as soil, shoots, flowers, stems, and fruits using the dilution smear method. Among isolated microorganisms, 10 μl of the isolated strain was inoculated into a solid medium (2.3% NA (Nutrient Agar) + 5% sucrose) to select microorganisms exhibiting antibacterial activity against the fruit tree burn pathogen ( Erwinia amylovora ), and then inoculated at 28°C for 24 hours. cultured. S29-, in which a clear zone is formed by pouring 0.6% soft agar containing pathogens (OD 600 = 0.1) into a plate in which the isolate is cultured, and culturing at 28 ° C. for 2 days 14 strains were selected.
[실시예 2] 사과신초를 대상으로 한 검정 [Example 2] Test for apple shoots
과수화상병원균에 대한 항균활성을 나타내는 균주를 TSB(Tryptic Soy Broth)에 접종하여 28℃에서 24시간 배양하였고, 사과신초를 피실험대상으로 검정하였다. 접목 3년생 사과나무의 신초를 채취하여 깨끗한 붓으로 표면의 이물질을 떨어내어 준비하였다. 사과신초의 잎자루에 주사바늘로 상처를 내어준 뒤 상처가 난 사과신초를 항균활성균주 현탁액(OD600=0.1)에 30초간 담궜다가 필터페이퍼에 올려서 건조시켰다. 음성대조군(negative control)과 대조군(control)의 경우 선발 균주의 배양 배지인 TSB를 처리하였다. 건조된 사과잎을 습실처리된 사각 플레이트(plate)에 넣고 24시간(26℃, 16시간Light/8시간Dark(=16L/8D)) 항온실에 뒀다. 대조군과 실험군(S29-14)의 상처가 난 사과 잎의 잎자루에 병원균 현탁액(106 cfu/mL) 10㎕를 니들이 없는 주사기를 이용하여 주입, 접종한 뒤 7일간 항온실에서 발병 정도를 관찰하였다.A strain showing antibacterial activity against orchard burn pathogens was inoculated into TSB (Tryptic Soy Broth) and cultured at 28° C. for 24 hours, and apple shoots were tested as test subjects. The new shoots of the three-year-old grafted apple tree were collected and prepared by removing foreign substances from the surface with a clean brush. After making a wound on the petiole of the apple shoots with a needle, the wounded apple shoots were immersed in an antibacterial active strain suspension (OD 600 = 0.1) for 30 seconds, then placed on filter paper and dried. In the case of a negative control group and a control group, TSB, a culture medium of the selection strain, was treated. The dried apple leaves were placed in a wet chamber-treated square plate and placed in a constant temperature room for 24 hours (26°C, 16 hours Light/8 hours Dark (=16L/8D)). 10 μl of the pathogen suspension (10 6 cfu/mL) was injected and inoculated into the petiole of injured apple leaves of the control group and the experimental group (S29-14) using a needle-free syringe, and the severity of the disease was observed in a constant temperature room for 7 days. .
도 1a는 배양 배지인 TSB(Tryptic Soy Broth)를 처리한 음성대조군 사과잎을 도시한 사진이다.Figure 1a is a photograph showing the negative control apple leaves treated with TSB (Tryptic Soy Broth), which is a culture medium.
도 1b는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 잎자루에 접종한 대조군 사과잎을 도시한 사진이다.Figure 1b is a photograph showing a control apple leaf inoculated with the pathogen suspension on the petiole after treatment with the culture medium TSB.
도 1b를 참조하면, 대조군인 도 1b에는 병원균을 접종한 잎자루로부터 잎의 주맥을 따라 연갈색 병징이 넓게 확산되는 것이 발견되었다.Referring to FIG. 1B, in FIG. 1B as a control group, it was found that light brown symptoms were widely spread along the main vein of the leaf from the petiole inoculated with the pathogen.
도 1a, 및 도 1b를 참조하면, 과수화상병 발병 시 병원균이 이동하여 잎자루를 지나 잎사귀의 주맥을 따라 넓은 부위로 연갈색 병징이 확장되는 것을 가늠할 수 있었다.Referring to FIGS. 1A and 1B , it was possible to estimate that the pathogen migrated, passed the petiole, and expanded to a wide area along the main vein of the leaf during the onset of fruit burn disease.
도 1c는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 잎자루에 접종한 실험군 사과잎을 도시한 사진이다.Figure 1c is a photograph showing the experimental group apple leaves inoculated with the pathogen suspension on the petiole after treatment with the antibacterial active strain suspension.
도 1c를 참조하면, 실험군(S29-14)인 도 1c에는 병원균을 접종한 신초의 잎자루 부분에서 병징이 거의 관찰되지 않았고, 이에 따라 잎의 주맥으로 병징이 진행되지 않는 것이 확인되었다.Referring to Fig. 1c, in Fig. 1c of the experimental group (S29-14), almost no symptoms were observed in the petiole of the shoot inoculated with the pathogen, and accordingly, it was confirmed that the disease did not progress to the main vein of the leaf.
도 1b, 및 도 1c를 참조하면, 실험군(S29-14)의 잎사귀에는 대조군 대비 연갈색 병징이 확연히 적은 것을 확인하였다. 대조군 대비 병반의 확장 영역이 미비한 만큼 과수화상병이 방제되었고, 그에 따라 S29-14 균주는 사과 잎을 대상으로 과수화상병에 대한 방제 효과가 우수한 것으로 판단되었다.Referring to FIGS. 1B and 1C , it was confirmed that the leaves of the experimental group (S29-14) had significantly fewer light brown symptoms compared to the control group. Fruit burn disease was controlled as much as the lesion extension area was insufficient compared to the control group, and accordingly, the S29-14 strain was judged to have an excellent control effect on fruit burn disease targeting apple leaves.
[실시예 3] 사과열매를 대상으로 한 검정[Example 3] Test for apple fruits
과수화상병원균에 대한 항균활성을 나타내는 균주를 TSB(Tryptic Soy Broth)에 접종하여 28℃에서 24시간 배양하였고, 사과열매를 피실험대상으로 검정하였다. 표면 소독한 미성숙 사과를 절단하고 항균활성 균주 현탁액(OD600=0.1)에 절단 부위를 5초간 담궜다가 필터페이퍼에 올려서 건조시켰다. 음성대조군과 대조군의 경우 선발 균주의 배양 배지인 TSB를 처리하였다. 건조된 사과열매를 습실처리가 된 접시(dish)에 넣고 24시간(26℃, 16L/8D) 항온실에 뒀다. 대조군과 실험군(S29-14)의 사과 열매의 과육에 병원균 현탁액 (106 cfu/mL) 10㎕씩 2부위에 접종한 뒤 7일간 항온실에서 발병 정도를 관찰하였다.A strain exhibiting antibacterial activity against orchard burn pathogens was inoculated into TSB (Tryptic Soy Broth) and cultured at 28° C. for 24 hours, and apple fruits were tested as test subjects. Immature apples with surface disinfection were cut, and the cut site was immersed in the antibacterial active strain suspension (OD 600 = 0.1) for 5 seconds, then placed on filter paper and dried. In the case of the negative control group and the control group, TSB, which is the culture medium of the selection strain, was treated. The dried apple fruits were placed in a dish treated with wet room and placed in a constant temperature room for 24 hours (26°C, 16L/8D). After inoculating 2 sites with 10 μl of the pathogen suspension (10 6 cfu/mL) into the flesh of apple fruits of the control group and the experimental group (S29-14), the disease was observed in a constant temperature room for 7 days.
도 2a는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과열매를 도시한 사진이다.2A is a photograph showing apple fruits treated with TSB, a culture medium.
도 2b는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.2B is a photograph showing a cross-section of an apple fruit treated with TSB, which is a culture medium.
도 2a, 및 도 2b를 참조하면, 공기에 의해 산화되어 전체적으로 옅은 갈색인 음성대조군 사과열매의 갈변도를 확인할 수 있었다. 더 자세하게는, 옅은 갈색으로 고르게 갈변되었으며 갈변 부위가 표면에 한정됨을 관찰하였다.Referring to FIGS. 2A and 2B , the degree of browning of the negative control apple fruits, which were oxidized by air and were overall light brown, were confirmed. More specifically, it was observed that the browning area was uniformly browned to light brown and the browning area was limited to the surface.
도 3a는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 도시한 사진이다.3A is a photograph showing apple fruits inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
도 3b는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.3B is a photograph showing a cross-section of an apple fruit inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
도 3a, 및 도 3b를 참조하면, 과수화상병에 의해 전체적으로 진한 갈색 또는 일부가 검정색으로 변한 대조군 사과열매의 갈변도가 확인되었다. 더 자세하게는, 과실 표면에 우즈(ooze)가 발생했으며, 자연에서 화기를 통해 병원균이 접종되어 씨방을 따라 과수에 병원균이 확산되는 것과 같이 사과꼭지에서 씨방을 따라 과심부를 중심으로 심하게 갈변되어 일부가 검정색으로 변한 것이 관찰되었다.Referring to FIGS. 3A and 3B , the degree of browning of the control apple fruit, which was entirely dark brown or partially turned black due to orchard burns, was confirmed. More specifically, ooze occurred on the surface of the fruit, and in the same way that pathogens are inoculated through a fire in nature and the pathogens spread to the fruit tree along the ovary, it is severely browned from the apple stem along the ovary to the core of the fruit. A change to black was observed.
도 2a 내지 도 3b를 참조하면, 공기에 의해 생기는 갈변 정도 대비 과수화상병 발병 시 사과열매에 생기는 갈변 정도를 관찰하였다. 그에 따라, 상기 갈변 정도를 관찰하여 과수화상병이 진행된 범위를 확인하였다.Referring to FIGS. 2A to 3B , the degree of browning occurring in apple fruits at the onset of water burn disease was observed compared to the degree of browning caused by air. Accordingly, by observing the degree of browning, the extent of the progression of the water burn disease was confirmed.
도 4a는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 도시한 사진이다.Figure 4a is a photograph showing the apple fruit inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antimicrobial active strain suspension.
도 4b는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과열매를 잘라 단면을 도시한 사진이다.Figure 4b is a photograph showing a cross-section of an apple fruit inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension.
도 4a, 및 도 4b를 참조하면, S29-14 균주에 의해 과수화상병이 다소 방제되어 일부 반점 모양의 갈색인 사과열매의 갈변도가 확인되었다. 더 자세하게는, 병원균 접종 부위에 경미한 수침상의 흔적으로 갈색 반점이 형성되었다.Referring to FIGS. 4A and 4B , the degree of browning of some speckled brown apple fruits was confirmed as the fruit burn disease was somewhat controlled by the S29-14 strain. More specifically, brown spots were formed as traces of slight water needles at the site of pathogen inoculation.
도 3a 내지 도 4b를 참조하면, 대조군 대비 실험군(S29-14)에서는 갈변 정도가 훨씬 적었고, 접종 부위를 제외한 다른 영역에는 갈변 부위가 과실 내로 파고든 흔적이 없으므로 과수화상병이 일부 방제됨을 확인하였다.3A to 4B, compared to the control group, the degree of browning was much less in the experimental group (S29-14), and there was no trace of the browning part digging into the fruit in the areas other than the inoculation site, so it was confirmed that some fruit burns were controlled.
[실시예 4] 유묘를 대상으로 한 검정[Example 4] Assay for seedlings
과수화상병원균에 대한 항균활성을 나타내는 균주를 TSB(Tryptic Soy Broth)에 접종하여 28℃에서 24시간 배양하였고, 사과 대목(M9) 유묘를 피실험대상으로 검정하였다. 상기 사과 유묘의 상단부분을 전지가위로 절단하여 상처를 주었다. 상처가 난 유묘에 실험군(S29-14)의 경우, 항균활성균주 현탁액(OD600=0.1)을 10mL씩 분사하였다. 음성대조군과 대조군의 경우 선발 균주의 배양 배지인 TSB를 처리하였다. 상기 음성대조군, 상기 대조군, 및 상기 실험군(S29-14)의 유묘를 아크릴케이지에 넣고 28℃, 및 습도 100% 조건에서 24시간 뒀다. 24시간 후 대조군과 실험군의 유묘에 과수화상병균 현탁액(106 cfu/mL)을 분사하여 접종하였다. 처리 3주차 발병여부를 조사하였다.A strain exhibiting antibacterial activity against orchard burn pathogens was inoculated into TSB (Tryptic Soy Broth) and cultured at 28° C. for 24 hours, and apple rootstock (M9) seedlings were tested as test subjects. The upper part of the apple seedling was cut with pruning shears to give a wound. In the case of the experimental group (S29-14), the antimicrobial active strain suspension (OD 600 = 0.1) was sprayed on the wounded seedlings by 10 mL each. In the case of the negative control group and the control group, TSB, which is the culture medium of the selection strain, was treated. The seedlings of the negative control group, the control group, and the experimental group (S29-14) were placed in an acrylic cage and kept at 28° C. and 100% humidity for 24 hours. After 24 hours, the seedlings of the control group and the experimental group were inoculated by spraying a suspension (10 6 cfu/mL) of the fruit burnt fungus. The 3rd week of treatment was investigated whether the disease occurred.
도 5a는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘를 도시한 사진이다.Figure 5a is a photograph showing the apple seedlings treated with TSB, a culture medium.
도 5b는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.Figure 5b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings treated with the culture medium TSB.
도 5c는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.Figure 5c is a photograph showing the reverse side of the leaf of the apple seedlings treated with TSB, a culture medium.
도 5d는 배양 배지인 TSB를 처리한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.Figure 5d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings treated with the culture medium TSB.
도 5a 내지 도 5d를 참조하면, 음성대조군인 유묘, 잎의 앞면, 잎의 뒷면, 및 줄기의 정상일 때의 형태를 확인할 수 있었다.Referring to FIGS. 5A to 5D , it was possible to confirm the shape of the seedlings, which are negative controls, the front side of the leaf, the back side of the leaf, and the normal shape of the stem.
도 6a는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘를 도시한 사진이다.Figure 6a is a photograph showing an apple seedling inoculated with a pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
도 6b는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.Figure 6b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the culture medium TSB.
도 6c는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.Figure 6c is a photograph showing the reverse side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the culture medium TSB.
도 6d는 배양 배지인 TSB를 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.Figure 6d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with TSB, a culture medium.
도 6a 내지 도 6d를 참조하면, 대조군인 유묘에 접종된 병원균은 물관을 통해 이동하고 줄기의 물관도 갈색으로 괴사하는 병징을 나타내며 줄기를 따라 잎에 도달하였을 때 잎의 주맥을 따라 잎의 앞, 뒷면에 갈색 반점이 확장되는 병징을 나타내어 사과 유묘 전체가 과수화상병에 걸린 것을 확인할 수 있었다.6A to 6D, the pathogen inoculated on the control seedlings moves through the xylem and the xylem of the stem also shows a brown necrosis. When reaching the leaf along the stem, the front of the leaf along the main vein of the leaf, It was confirmed that the entire apple seedling was infected with fruit burn disease, as brown spots on the back showed symptoms of expanding.
도 7a는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘를 도시한 사진이다.7A is a photograph showing an apple seedling inoculated with a pathogen suspension after treatment with an antimicrobial active strain suspension.
도 7b는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 앞면을 도시한 사진이다.Figure 7b is a photograph showing the front side of the leaf of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antimicrobial active strain suspension.
도 7c는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 잎 뒷면을 도시한 사진이다.7c is a photograph showing the reverse side of the leaf of the apple seedling inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antimicrobial active strain suspension.
도 7d는 항균활성균주 현탁액을 처리한 후 병원균 현탁액을 접종한 사과 유묘의 줄기를 잘라 도시한 사진이다.Figure 7d is a photograph showing the cutting of the stem of the apple seedlings inoculated with the pathogen suspension after treatment with the antibacterial active strain suspension.
도 7a 내지 도 7d를 참조하면, 실험군인 유묘, 잎의 앞면, 잎의 뒷면, 및 줄기의 형태가 음성대조군에 가까운 것을 확인하였다. 과수화상병의 특징인 갈변 부위, 잎의 궤양 증상, 및 이동통로인 줄기의 괴사 등이 보이지 않았으며, 이를 통해 과수화상병이 방제됨을 확인하였다.7A to 7D , it was confirmed that the experimental group, the seedlings, the front side of the leaf, the back side of the leaf, and the shape of the stem were close to those of the negative control group. The browning area, leaf ulcer symptoms, and stem necrosis, which are the characteristics of fruit burn disease, were not observed, and it was confirmed that the fruit burn disease was controlled.
상기 음성대조군, 대조군, 및 실험군의 발병엽률(%)을 비교한 결과를 하기 표 1에 기재하였다.The results of comparing the leaf rates (%) of the negative control group, the control group, and the experimental group are shown in Table 1 below.
상기 표 1에 기재된 바와 같이, S29-14 균주로 처리한 실험군은 음성대조군(negative control)과 동일하게 발병엽률이 0%로 측정됨을 확인하였다.As shown in Table 1, it was confirmed that the experimental group treated with the S29-14 strain had a leaf rate of 0% in the same way as the negative control group.
[실시예 5] 과수화상병 방제 효과가 있는 S29-14 균주의 동정[Example 5] Identification of S29-14 strain having an effect of controlling fruit burns
상기 S29-14 균주의 16S rRNA 부분을 염기서열 분석하였고, 상기 S29-14 균주의 16S rRNA 정보를 계통분석을 통하여 동정하였다.The 16S rRNA portion of the S29-14 strain was sequenced, and 16S rRNA information of the S29-14 strain was identified through phylogenetic analysis.
도 8은 S29-14의 16S rRNA 염기서열에 의한 근연 계통도이다.8 is a close-up view of the 16S rRNA nucleotide sequence of S29-14.
도 8을 참조하면, S29-14 균주는 네이버-조이닝(Neighbour-joining) 방법을 통해 얻은 계통도 내에서 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) 종과 계통 분류학적 위치가 가장 근접했다. 따라서, 본 발명의 균주 S29-14 균주는 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens)와 가장 근연종인 것으로 확인되었다.Referring to Figure 8, the S29-14 strain Neighbor-joining (Neighbor-joining) in the phylogenetic tree obtained through the Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ) species and the closest taxonomic position. Therefore, the strain S29-14 strain of the present invention was confirmed to be the most closely related to Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ).
또한, 상기 S29-14 균주를 기탁하여 수탁번호 KACC 92320P를 부여받았다.In addition, the S29-14 strain was deposited and given an accession number KACC 92320P.
상술한 본 발명의 일 실시예에 따른 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물을 사용하거나 상기 과수화상병 방제 방법을 적용하는 경우, 식물에 감염되어 과수화상병을 일으키는 에르위니아 아밀로보라(Erwinia amylovora)를 친환경적인 방법으로 방제할 수 있다.Asrobacter pascens according to an embodiment of the present invention as described above ( Arthrobacter pascens ) When using the S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), the culture of the strain, the composition including the strain, and the composition including the culture solution of the strain, or applying the above-mentioned fruit burn disease control method, to the plant Erwinia amylovora , which infects and causes fruit burns, can be controlled in an environmentally friendly way.
이상에서, 출원인은 본 발명의 바람직한 실시예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.In the above, the applicant has described preferred embodiments of the present invention, but these embodiments are only one embodiment that implements the technical idea of the present invention, and any changes or modifications as long as the technical idea of the present invention is implemented. should be construed as within the scope.
<110> REPUBLIC OF KOREA(RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Arthrobacter pascens S29-14 strain for controlling fire blight and uses thereof <130> FP-2010056-KR <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1395 <212> RNA <213> Arthrobacter pascens <400> 1 tgcagtcgaa cgatgatctc cagcttgctg gggggattag tggcgaacgg gtgagtaaca 60 cgtgagtaac ctgcccttaa ctctgggata agcctgggaa actgggtcta ataccggata 120 tgactcctca tcgcatggtg gggggtggaa agctttttgt ggttttggat ggactcgcgg 180 cctatcagct tgttggtgag gtaatggctc accaaggcga cgacgggtag ccggcctgag 240 agggtgaccg gccacactgg gactgagaca cggcccagac tcctacggga ggcagcagtg 300 gggaatattg cacaatgggc gaaagcctga tgcagcgacg ccgcgtgagg gatgacggcc 360 ttcgggttgt aaacctcttt cagtagggaa gaagcgaaag tgacggtacc tgcagaagaa 420 gcgccggcta actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta gggcgcaagc gttatccgga 480 attattgggc gtaaagagct cgtaggcggt ttgtcgcgtc tgccgtgaaa gtccggggct 540 caactccgga tctgcggtgg gtacgggcag actagagtga tgtaggggag actggaattc 600 ctggtgtagc ggtgaaatgc gcagatatca ggaggaacac cgatggcgaa ggcaggtctc 660 tgggcattaa ctgacgctga ggagcgaaag catggggagc gaacaggatt agataccctg 720 gtagtccatg ccgtaaacgt tgggcactag gtgtggggga cattccacgt tttccgcgcc 780 gtagctaacg cattaagtgc cccgcctggg gagtacggcc gcaaggctaa aactcaaagg 840 aattgacggg ggcccgcaca agcggcggag catgcggatt aattcgatgc aacgcgaaga 900 accttaccaa ggcttgacat gggccggatc gccgcagaaa tgtggtttcc cctttggggc 960 cggttcacag gtggtgcatg gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc 1020 cgcaacgagc gcaaccctcg ttctatgttg ccagcgcgtg atggcgggga ctcataggag 1080 actgccgggg tcaactcgga ggaaggtggg gacgacgtca aatcatcatg ccccttatgt 1140 cttgggcttc acgcatgcta caatggccgg tacaaagggt tgcgatactg tgaggtggag 1200 ctaatcccaa aaagccggtc tcagttcgga ttggggtctg caactcgacc ccatgaagtc 1260 ggagtcgcta gtaatcgcag atcagcaacg ctgcggtgaa tacgttcccg ggccttgtac 1320 acaccgcccg tcaagtcacg aaagttggta acacccgaag ccggtggcct aaccccttgt 1380 gggagggagc tgtcg 1395 <110> REPUBLIC OF KOREA (RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION) <120> Arthrobacter pascens S29-14 strain for controlling fire blight and uses it <130> FP-2010056-KR <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1395 <212> RNA <213> Arthrobacter pascens <400> 1 tgcagtcgaa cgatgatctc cagcttgctg gggggattag tggcgaacgg gtgagtaaca 60 cgtgagtaac ctgcccttaa ctctgggata agcctgggaa actgggtcta ataccggata 120 tgactcctca tcgcatggtg gggggtggaa agctttttgt ggttttggat ggactcgcgg 180 cctatcagct tgttggtgag gtaatggctc accaaggcga cgacgggtag ccggcctgag 240 agggtgaccg gccacactgg gactgagaca cggcccagac tcctacggga ggcagcagtg 300 gggaatattg cacaatgggc gaaagcctga tgcagcgacg ccgcgtgagg gatgacggcc 360 ttcgggttgt aaacctcttt cagtagggaa gaagcgaaag tgacggtacc tgcagaagaa 420 gcgccggcta actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta gggcgcaagc gttatccgga 480 attattgggc gtaaagagct cgtaggcggt ttgtcgcgtc tgccgtgaaa gtccggggct 540 caactccgga tctgcggtgg gtacgggcag actagagtga tgtaggggag actggaattc 600 ctggtgtagc ggtgaaatgc gcagatatca ggaggaacac cgatggcgaa ggcaggtctc 660 tgggcattaa ctgacgctga ggagcgaaag catggggagc gaacaggatt agataccctg 720 gtagtccatg ccgtaaacgt tgggcactag gtgtggggga cattccacgt tttccgcgcc 780 gtagctaacg cattaagtgc cccgcctggg gagtacggcc gcaaggctaa aactcaaagg 840 aattgacggg ggcccgcaca agcggcggag catgcggatt aattcgatgc aacgcgaaga 900 accttaccaa ggcttgacat gggccggatc gccgcagaaa tgtggtttcc cctttggggc 960 cggttcacag gtggtgcatg gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc 1020 cgcaacgagc gcaaccctcg ttctatgttg ccagcgcgtg atggcgggga ctcataggag 1080 actgccgggg tcaactcgga ggaaggtggg gacgacgtca aatcatcatg ccccttatgt 1140 cttgggcttc acgcatgcta caatggccgg tacaaagggt tgcgatactg tgaggtggag 1200 ctaatcccaa aaagccggtc tcagttcgga ttggggtctg caactcgacc ccatgaagtc 1260 ggagtcgcta gtaatcgcag atcagcaacg ctgcggtgaa tacgttcccg ggccttgtac 1320 acaccgcccg tcaagtcacg aaagttggta acacccgaag ccggtggcct aaccccttgt 1380 gggagggagc tgtcg 1395
Claims (9)
상기 균주는 서열번호 1로 표시되는 염기서열의 16S rRNA를 갖는 것을 특징으로 하는 아스로박터 파센스(Arthrobacter pascens) S29-14 균주(기탁번호 : KACC 92320P).According to claim 1,
The strain is Asrobacter pascens ( Arthrobacter pascens ) S29-14 strain (Accession No.: KACC 92320P), characterized in that it has 16S rRNA of the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 1.
상기 과수화상병 방제의 대상 식물은 사과나무, 배나무, 모과나무, 살구나무, 복숭아나무, 매실나무, 자두나무, 아로니아, 앵두나무, 라즈베리, 조팝나무, 장미, 마가목, 풀또기, 명자나무, 찔레, 딸기, 및 벚나무 중 적어도 하나를 포함하는 과수화상병 방제용 조성물.4. The method of claim 3,
The target plants of the fruit burn disease control are apple trees, pear trees, quince trees, apricot trees, peach trees, plum trees, plum trees, aronia, cherry trees, raspberries, meadowsweet trees, roses, rowan trees, grasshoppers, myongjae trees, A composition for controlling fruit burns comprising at least one of brier, strawberry, and cherry tree.
상기 과수화상병 방제의 대상 식물은 상기 사과나무인 과수화상병 방제용 조성물.5. The method of claim 4,
The target plant for controlling the fruit burns is the apple tree, the composition for controlling fruit burns.
상기 식물은 사과나무인 과수화상병 방제 방법.7. The method of claim 6,
The plant is an apple tree fruit burn disease control method.
상기 균주, 상기 균주의 배양액, 상기 균주를 포함하는 조성물, 및 상기 균주의 배양액을 포함하는 조성물 중 적어도 하나는 상기 식물에 살포되거나 접종되는 과수화상병 방제 방법.7. The method of claim 6,
At least one of the strain, the culture solution of the strain, the composition comprising the strain, and the composition comprising the culture solution of the strain is sprayed or inoculated to the plant.
상기 식물은 접종되는 영역으로 잎, 열매, 및 유묘 중 적어도 하나를 포함하는 과수화상병 방제 방법.9. The method of claim 8,
The plant is an area to be inoculated, the fruit burn disease control method comprising at least one of leaves, fruits, and seedlings.
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