KR20190039022A

KR20190039022A - 샤가스 항원 및 항체, 및 이들의 조성물, 방법 및 용도

Info

Publication number: KR20190039022A
Application number: KR1020187032828A
Authority: KR
Inventors: 마테오 올가 플레게젤로스; 윌슨 로메로 카파로스-원더리; 그레고리 앨런 스톨로프
Original assignee: 펩트셀 리미티드
Priority date: 2016-04-14
Filing date: 2017-04-18
Publication date: 2019-04-10
Also published as: PE20190104A1; WO2017178660A9; BR112018071108A2; ECSP18079073A; WO2017178660A1; CO2018012295A2; US20210220453A1; AU2017248680A1; EP3442569A1; CN116059330A; US20170296637A1; MX2018012504A; CL2018002932A1; CN109310747B; SG11201808915YA; CL2021001441A1; US10973897B2; CN109310747A; RU2018139865A; CU20180127A7

Abstract

본 발명은 트리파노소마 항원, 상기 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물 및 약제, 트리파노소마-기반 질병을 치료하기 위한 상기 트리파노소마 항원 및 면역원성 조성물에 대한 방법 및 용도에 관한 것이다.

Description

샤가스 항원 및 항체, 및 이들의 조성물, 방법 및 용도

본원은 2016년 4월 14일자 출원된 미국 가출원 제62/322,770호(이의 전체내용은 본원에 참고로서 혼입됨)를 우선권 주장한다.

트리파노소마(Trypanosoma)는 단일세포 기생충 편모충류 원생동물의 단계통군인 키네토플라스디즈(Kinetoplastids) 속(키네토플라스티다(Kinetoplastida) 강)이다. 대부분의 트리파노소마는 다숙주성(생활 주기를 완료하기 위해 1개 초과의 의무적인 숙주를 요구함)이고, 대부분은 벡터를 통해 전염된다. 다수의 종은 혈액 공급 무척추동물의 혈액-섭취에 의해 전염되지만, 다양한 종 중에서 상이한 기전이 존재한다. 무척추동물 숙주에서, 그들은 일반적으로 장에서 발견되지만, 통상적으로 포유동물 숙주에서 혈류 또는 세포내 환경을 차지한다.

2개의 상이한 유형의 트리파노소마인 스테르코라리안(stercorarian) 종 및 살리바리안(salivarian) 종이 존재하고, 그들의 생활 주기는 상이하다. 스테르코라리안 트리파노소마는 곤충, 가장 흔히 흡혈 트리아토마 빈대(triatomid kissing bug)를 감염시키고, 후방 내장에서 발병하고, 감염성 유기체는 대변에서 배출되어 숙주의 피부에 침착된다. 이어서, 유기체가 침투하여 신체 전체에 퍼질 수 있다. 곤충은 혈분을 취할 때 감염된다. 살리바리안 트리파노소마는 곤충, 가장 중요하게는 체체 파리의 전방 내장에서 발생하고, 감염성 유기체는 곤충 자상에 의해 숙주에 접종된다. 트리파노소마가 생활 주기를 거침에 따라, 트리파노소마티즈(Trypanosomatids)의 전형적인 형태인 일련의 형태학적 변화를 겪는다. 생활 주기는 종종 척추동물 숙주의 파동편모형 형태, 및 무척추동물 숙주의 내장의 파동편모형 또는 전편모형 형태로 이루어진다. 세포내 생활 주기 단계는 통상적으로 무편모형 형태로 발견된다. 파동편모형 형태는 트리파노소마 속의 종에 고유하다.

트리파노소마는 다양한 숙주를 감염시키고, 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi)에 의해 유발되는 치명적인 인간 질병 샤가스병, 및 트리파노소마 브루체이(Trypanosoma brucei)에 의해 유발되는 아프리카 수면병을 비롯한 다양한 질병을 유발한다.

수년 동안 트리파노소마에 근거한 감염은 치료를 받기 쉬운 상태가 아니었다. 트리파노소마 항원, 면역원성 조성물 및 하나 이상의 트리파노소마 균주에 대한 방어에 효과적인 면역 반응을 유도하는 항체가 본 명세서에 개시된다.

따라서, 본원에 개시된 양상은 트리파노소마 항원을 제공한다. 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 트리파노소마-감염된 세포의 표면 상에 존재하는 에피토프를 결합할 수 있는 α-트리파노소마항체를 생성하는 면역 반응을 유발할 수 있다.

본원에 개시된 다른 양상은 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물을 제공한다. 조성물은 항원보강제를 추가로 포함할 수 있다.

본원에 개시된 다른 양상은 트리파노소마 병원균에 감염되거나 트리파노소마-기반 질병을 갖는 개체의 치료 방법을 제공한다. 개시된 방법은 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물을 트리파노소마 병원균에 감염되거나 트리파노소마-기반 질병을 갖는 개체에게 투여함을 포함한다.

본원에 개시된 다른 양상은 약제의 제조를 위한, 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물의 용도를 제공한다.

본원에 개시된 다른 양상은 트리파노소마 병원균에 감염된 개체의 치료를 위한, 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물의 용도를 제공한다.

본원에 개시된 다른 양상은 트리파노소마 병원균에 감염된 개체의 치료에 사용하기 위한 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물을 제공한다.

도 1a 내지 1d는 시험관 내에서 단일 펩티드에 대한 48시간 노출 후 비장세포에 의한 IL-4 및 IFN-γ의 생산을 도시하고, 이때 도 1a는 군 A 동물에서의 IL-4 생산을 도시하고; 도 1b는 군 B 동물에서의 IL-4 생산을 도시하고; 도 1c는 군 A 동물에서의 IFN-γ 생산을 도시하고; 도 1d는 군 B 동물에서의 IFN-γ 생산을 도시한다.
도 2a 및 2b는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 특이적인 총 면역글로불린 반응을 도시하고, 이때 도 2a는 수컷 동물에서 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 2b는 암컷 동물에서 총 면역글로불린 반응을 도시한다.
도 3a 내지 3d는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2 반응을 도시하고, 이때 도 3a는 수컷 동물에서 IgG2 반응을 도시하고; 도 3b는 암컷 동물에서 IgG2 반응을 도시하고; 도 3c는 수컷 동물에서 IgG1 반응을 도시하고; 도 3d는 암컷 동물에서 IgG1 반응을 도시한다.
도 4a 및 4b는 시험관 내에서 단일 펩티드에 대한 48시간 노출 후 비장세포에 의한 IL-4 및 IFN-γ의 생산을 도시하고, 이때 도 4a는 IL-4 생산을 도시하고; 도 4b는 IFN-γ 생산을 도시한다.
도 5는 단일 펩티드에 노출된 나이브(naive) 마우스로부터의 비장세포에 의한 IFN-γ의 생산을 도시한다.
도 6a 내지 6f는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 대해 특이적인 총 면역글로불린 반응을 도시하고, 이때 도 6a는 동물에서 CH47에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 6b는 동물에서 CH69에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 6c는 동물에서 CH72에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 6d는 동물에서 CH77에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 6e는 동물에서 CH84에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 6f는 동물에서 CH93에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시한다.
도 7a 내지 7f는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2 반응을 도시하고, 이때 도 7a는 동물에서 CH77에 대한 IgG1 반응을 도시하고; 도 7b는 동물에서 CH47에 대한 IgG1 반응을 도시하고; 도 7c는 동물에서 CH77에 대한 IgG2a 반응을 도시하고; 도 7d는 동물에서 CH47에 대한 IgG2a 반응을 도시한다.
도 8a 내지 8f는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2 반응을 도시하고, 이때 도 8a는 동물에서 CH37에 대한 IgG1 반응을 도시하고; 도 8b는 동물에서 CH77에 대한 IgG1 반응을 도시하고; 도 8c는 동물에서 CH37에 대한 IgG2a 반응을 도시하고; 도 8d는 동물에서 CH77에 대한 IgG2a 반응을 도시한다.
도 9a 내지 9h는 백신접종된 마우스의 혈청에서 개별 펩티드에 특이적인 총 면역글로불린 반응을 도시하고, 이때 도 9a는 동물에서 CH30에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9b는 동물에서 CH37에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9c는 동물에서 CH47에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9d는 동물에서 CH69에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9e는 동물에서 CH72에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9f는 동물에서 CH77에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9g는 동물에서 CH84에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시하고; 도 9h는 동물에서 펩티드 믹스에 대한 총 면역글로불린 반응을 도시한다.
도 10은 군 A, B, C 및 D에 대한 투약 섭생을 도시한다.
도 11은 트리파노소마 감염 후(pi = 감염 후) 대조군(A+C) 및 백신접종된(B 및 D) 동물군에서 기생충혈증을 도시한다.
도 12는 트리파노소마 감염 후(pi = 감염 후) 대조군(A+C) 및 백신접종된(B 및 D) 동물군의 사망률을 도시한다.
도 13은 군 A, B 및 C에 대한 투약 섭생을 도시한다.
도 14는 트리파노소마 감염 후(pi = 감염 후) 대조군(C) 및 백신접종된(A 및 B) 동물군의 사망률을 도시한다.
도 15는 공격 후 제17일 및 제22일에 모든 군의 평균 기생충혈증 농도 및 표준 오차를 도시한다. 단위는 기생충의 수 x 10⁵/mL 혈액이다.
도 16은 공격 후 25일 이상 생존한 동물에서 감염 후 제17일 및 제22일에 모든 군의 평균 기생충혈증 농도 및 표준 오차를 도시한다. 단위는 기생충의 수 x 10⁵/mL 혈액이다.

트리파노소마의 생활 주기는 트리파노소마가 벡터 중에서 증식하고 분화하여 기생충의 감염 형태를 생성하는 벡터 단계, 및 트리파노소마가 인간 숙주에서 분화하고 증식하는 인간 단계로 나누어질 수 있다. 인간 단계 중에, 벡터는 인간 숙주를 피딩(feeding)하고, 트리파노소마의 감염 형태(미숙 파동편모형으로 지칭됨)를 지나 순환계로 진행된다. 미숙 파동편모형은 숙주 세포를 침입하고, 이어서 무편모형으로 분화되고, 세포내 증식을 개시한다. 세포내 무편모형은 파동편모형으로 분화되고, 결국 숙주 세포를 파열시켜, 기생충이 새로운 숙주 세포를 감염시킬 수 있고/거나 새로운 벡터로 전달되는 혈액계로 들어간다.

세포내 무편모형이 숙주 세포를 감염시킬 때, 이러한 기생충으로부터 유래하는 다양한 단백질이 세포질에 축적된다. 이러한 단백질은 프로테아좀(세포질 프로테아제 복합체)에 의해 가공되어 전형적으로 길이가 8 내지 11개 아미노산인 작은 단백질 단편 또는 펩티드를 생성할 수 있다. 이어서, 이러한 펩티드는 소포체 내의 조직적합성 복합체 클래스 I(MHC-I) 당단백질의 클레프트(cleft)에 결합하고, 감염된 세포의 혈장 막으로 운송된다. 이러한 펩티드는 또한, 이들이 이들의 서열 내에 막 앵커(membrane anchor)를 함유하는 경우 세포 막 내에서 돌출되거나 자리잡을 수 있다. 항원 제시 세포는 또한 트리파노소마 또는 트리파노소마-감염된 세포를 삼켜버리고 기생충 단백질을, MHC 클래스 II 분자에 결합된 면역계에 제시될 수 있는, 12 내지 35개 아미노산의 더 큰 펩티드 단편으로 가공할 수 있다.

본원은 클래스 I 및 II MHC 복합체 내의 펩티드 단편을 인식할 수 있는 CD8⁺ 및 CD4⁺ T 세포, 및 세포 막 및 클래스 II MHC 분자 내의 이들 펩티드를 인식할 수 있는 B 세포를 포함하는 면역원성 조성물을 제공함으로써, 감염된 세포의 표면 상에 발현된 펩티드 단편을 이용한다. 상기 면역원성 조성물은 상기 항원에 대한 항체 및 T 세포(다시 감염된 세포의 세포 표면 상에 위치한 트리파노소마 펩티드 단편을 인식함)의 생성을 유도한다. T 세포 및/또는 항체에 의한 상기 세포 표면 펩티드 단편의 인식은 세포 막을 부수고, 궁극적으로 상기 감염된 세포의 파괴, 트리파노소마의 증식의 혼란 및 세포내 무편모형의 사멸을 유도한다.

본원의 하나의 핵심적인 발견은 면역 반응을 생성하는데 사용된 개시된 트리파노소마 항원이 기생충의 세포내 단백질로부터 유래한다는 것이다. 이것은, 생성된 면역 반응이 트리파노소마 자체를 임의의 큰 정도까지 직접적으로 공격하지 않으므로, 중요하다. 다른 핵심적인 발견은 개시된 치료가, 면역 반응이 기생충이 증식하는 감염된 세포를 표적화함으로, 트리파노소마 집단을 더욱 효과적으로 제어할 수 있다는 것이다.

본원의 양상은 부분적으로 트리파노소마 항원을 포함한다. 항원은 면역 반응을 유도하고, 비제한적으로, 펩티드, 다당류 및 지질의 접합체, 예컨대 지단백질 및 당지질을 포함하는 분자이다. 트리파노소마 항원은 트리파노소마 병원균 또는 트리파노소마 병원균을 포함하는 성분에 대한 면역 반응을 유도할 수 있는 임의의 항원이다. 트리파노소마 병원균을 포함하는 성분은, 비제한적으로, 트리파노소마의 게놈, 트리파노소마의 게놈에 의해 코딩된 단백질, 및 트리파노소마 병원균의 지질 막 성분을 포함한다. 본 양태의 한 양상에서, 트리파노소마 항원은 단일 트리파노소마 균주 또는 트리파노소마 균주를 포함하는 성분에 대한 면역 반응을 유도할 수 있는 임의의 항원이다. 본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원은 2개 이상의 트리파노소마 균주 또는 2개 이상의 트리파노소마 균주를 포함하는 성분에 대한 면역 반응을 유도할 수 있는 임의의 항원이다.

트리파노소마 항원은 서열이 실질적으로 유일하도록 충분히 커서 본원에 개시된 트리파노소마 항원 외의 항원에 대해 교차-반응성인 항체를 생성할 가능성을 감소시켜야 한다. 전형적으로, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 약 5 내지 약 100개 아미노산의 길이를 갖는다.

본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9, 약 10, 약 11, 약 12, 약 13, 약 14, 약 15, 약 16, 약 17, 약 18, 약 19, 약 20, 약 25, 약 30, 약 35, 약 40, 약 45, 약 50, 약 55, 약 60, 약 65, 약 70 또는 약 75개 아미노산의 길이를 가질 수 있다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 5개 이상, 6개 이상, 7개 이상, 8개 이상, 9개 이상, 10개 이상, 11개 이상, 12개 이상, 13개 이상, 14개 이상, 15개 이상, 16개 이상, 17개 이상, 18개 이상, 19개 이상, 20개 이상, 25개 이상, 30개 이상, 35개 이상, 40개 이상, 45개 이상, 50개 이상, 55개 이상, 60개 이상, 65개 이상, 70개 이상 또는 75개 이상 아미노산의 길이를 가질 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 5개 이하, 6개 이하, 7개 이하, 8개 이하, 9개 이하, 10개 이하, 11개 이하, 12개 이하, 13개 이하, 14개 이하, 15개 이하, 16개 이하, 17개 이하, 18개 이하, 19개 이하, 20개 이하, 25개 이하, 30개 이하, 35개 이하, 40개 이하, 45개 이하, 50개 이하, 55개 이하, 60개 이하, 65개 이하, 70개 이하 또는 75개 이하 아미노산의 길이를 가질 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 약 7 내지 약 10개 아미노산, 약 7 내지 약 12개 아미노산, 약 7 내지 약 15개 아미노산, 약 7 내지 약 18개 아미노산, 약 7 내지 약 20개 아미노산, 약 7 내지 약 25개 아미노산, 약 7 내지 약 30개 아미노산, 약 7 내지 약 35개 아미노산, 약 7 내지 약 40개 아미노산, 약 7 내지 약 45개 아미노산, 약 7 내지 약 50개 아미노산, 약 7 내지 약 55개 아미노산, 약 7 내지 약 60개 아미노산, 약 7 내지 약 65개 아미노산, 약 7 내지 약 70개 아미노산, 약 7 내지 약 75개 아미노산, 약 10 내지 약 12개 아미노산, 약 10 내지 약 15개 아미노산, 약 10 내지 약 18개 아미노산, 약 10 내지 약 20개 아미노산, 약 10 내지 약 25개 아미노산, 약 10 내지 약 30개 아미노산, 약 10 내지 약 35개 아미노산, 약 10 내지 약 40개 아미노산, 약 10 내지 약 45개 아미노산, 약 10 내지 약 50개 아미노산, 약 10 내지 약 55개 아미노산, 약 10 내지 약 60개 아미노산, 약 10 내지 약 65개 아미노산, 약 10 내지 약 70개 아미노산, 약 10 내지 약 75개 아미노산, 약 12 내지 약 15개 아미노산, 약 12 내지 약 18개 아미노산, 약 12 내지 약 20개 아미노산, 약 12 내지 약 25개 아미노산, 약 12 내지 약 30개 아미노산, 약 12 내지 약 35개 아미노산, 약 12 내지 약 40개 아미노산, 약 12 내지 약 45개 아미노산, 약 12 내지 약 50개 아미노산, 약 12 내지 약 55개 아미노산, 약 12 내지 약 60개 아미노산, 약 12 내지 약 65개 아미노산, 약 12 내지 약 70개 아미노산, 약 12 내지 약 75개 아미노산, 약 15 내지 약 18개 아미노산, 약 15 내지 약 20개 아미노산, 약 15 내지 약 25개 아미노산, 약 15 내지 약 30개 아미노산, 약 15 내지 약 35개 아미노산, 약 15 내지 약 40개 아미노산, 약 15 내지 약 45개 아미노산, 약 15 내지 약 50개 아미노산, 약 15 내지 약 55개 아미노산, 약 15 내지 약 60개 아미노산, 약 15 내지 약 65개 아미노산, 약 15 내지 약 70개 아미노산, 약 15 내지 약 75개 아미노산, 약 18 내지 약 20개 아미노산, 약 18 내지 약 25개 아미노산, 약 18 내지 약 30개 아미노산, 약 18 내지 약 35개 아미노산, 약 18 내지 약 40개 아미노산, 약 18 내지 약 45개 아미노산, 약 18 내지 약 50개 아미노산, 약 18 내지 약 55개 아미노산, 약 18 내지 약 60개 아미노산, 약 18 내지 약 65개 아미노산, 약 18 내지 약 70개 아미노산, 약 18 내지 약 75개 아미노산, 약 20 내지 약 25개 아미노산, 약 20 내지 약 30개 아미노산, 약 20 내지 약 35개 아미노산, 약 20 내지 약 40개 아미노산, 약 20 내지 약 45개 아미노산, 약 20 내지 약 50개 아미노산, 약 20 내지 약 55개 아미노산, 약 20 내지 약 60개 아미노산, 약 20 내지 약 65개 아미노산, 약 20 내지 약 70개 아미노산, 약 20 내지 약 75개 아미노산, 약 25 내지 약 30개 아미노산, 약 25 내지 약 35개 아미노산, 약 25 내지 약 40개 아미노산, 약 25 내지 약 45개 아미노산, 약 25 내지 약 50개 아미노산, 약 25 내지 약 55개 아미노산, 약 25 내지 약 60개 아미노산, 약 25 내지 약 65개 아미노산, 약 25 내지 약 70개 아미노산, 약 25 내지 약 75개 아미노산, 약 30 내지 약 35개 아미노산, 약 30 내지 약 40개 아미노산, 약 30 내지 약 45개 아미노산, 약 30 내지 약 50개 아미노산, 약 30 내지 약 55개 아미노산, 약 30 내지 약 60개 아미노산, 약 30 내지 약 65개 아미노산, 약 30 내지 약 70개 아미노산, 약 30 내지 약 75개 아미노산, 약 35 내지 약 40개 아미노산, 약 35 내지 약 45개 아미노산, 약 35 내지 약 50개 아미노산, 약 35 내지 약 55개 아미노산, 약 35 내지 약 60개 아미노산, 약 35 내지 약 65개 아미노산, 약 35 내지 약 70개 아미노산, 약 35 내지 약 75개 아미노산, 약 40 내지 약 45개 아미노산, 약 40 내지 약 50개 아미노산, 약 40 내지 약 55개 아미노산, 약 40 내지 약 60개 아미노산, 약 40 내지 약 65개 아미노산, 약 40 내지 약 70개 아미노산, 약 40 내지 약 75개 아미노산, 약 45 내지 약 50개 아미노산, 약 45 내지 약 55개 아미노산, 약 45 내지 약 60개 아미노산, 약 45 내지 약 65개 아미노산, 약 45 내지 약 70개 아미노산, 약 45 내지 약 75개 아미노산, 약 50 내지 약 55개 아미노산, 약 50 내지 약 60개 아미노산, 약 50 내지 약 65개 아미노산, 약 50 내지 약 70개 아미노산 또는 약 50 내지 약 75개 아미노산의 길이를 가질 수 있다.

다른 양태에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12를 포함한다. 본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12에 대한 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 86% 이상, 87% 이상, 88% 이상, 89% 이상, 90% 이상, 91% 이상, 92% 이상, 93% 이상, 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상의 아미노산 동일성을 갖는다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12에 대한 약 75% 내지 약 100%, 약 80% 내지 약 100%, 약 85% 내지 약 100%, 약 90% 내지 약 100%, 약 95% 내지 약 100%, 약 75% 내지 약 99%, 약 80% 내지 약 99%, 약 85% 내지 약 99%, 약 90% 내지 약 99%, 약 95% 내지 약 99%, 약 75% 내지 약 97%, 약 80% 내지 약 97%, 약 85% 내지 약 97%, 약 90% 내지 약 97% 또는 약 95% 내지 약 97%의 아미노산 동일성을 갖는다.

본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 5개 이상 아미노산, 6개 이상 아미노산, 7개 이상 아미노산, 8개 이상 아미노산, 9개 이상 아미노산, 10개 이상 아미노산, 11개 이상 아미노산, 12개 이상 아미노산, 13개 이상 아미노산, 14개 이상 아미노산, 15개 이상 아미노산, 16개 이상 아미노산, 17개 이상 아미노산, 18개 이상 아미노산, 19개 이상 아미노산, 20개 이상 아미노산, 21개 이상 아미노산, 22개 이상 아미노산, 23개 이상 아미노산, 24개 이상 아미노산, 25개 이상 아미노산, 26개 이상 아미노산, 27개 이상 아미노산, 28개 이상 아미노산, 29개 이상 아미노산, 30개 이상 아미노산, 31개 이상 아미노산, 32개 이상 아미노산, 33개 이상 아미노산, 34개 이상 아미노산, 35개 이상 아미노산, 36개 이상 아미노산, 37개 이상 아미노산, 38개 이상 아미노산, 39개 이상 아미노산 또는 40개 이상 아미노산의 길이를 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12의 연속적인 아미노산 하위서열로부터 취해진다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 5개 이하 아미노산, 6개 이하 아미노산, 7개 이하 아미노산, 8개 이하 아미노산, 9개 이하 아미노산, 10개 이하 아미노산, 11개 이하 아미노산, 12개 이하 아미노산, 13개 이하 아미노산, 14개 이하 아미노산, 15개 이하 아미노산, 16개 이하 아미노산, 17개 이하 아미노산, 18개 이하 아미노산, 19개 이하 아미노산, 20개 이하 아미노산, 21개 이하 아미노산, 22개 이하 아미노산, 23개 이하 아미노산, 24개 이하 아미노산, 25개 이하 아미노산, 26개 이하 아미노산, 27개 이하 아미노산, 28개 이하 아미노산, 29개 이하 아미노산, 30개 이하 아미노산, 31개 이하 아미노산, 32개 이하 아미노산, 33개 이하 아미노산, 34개 이하 아미노산, 35개 이하 아미노산, 36개 이하 아미노산, 37개 이하 아미노산, 38개 이하 아미노산, 39개 이하 아미노산 또는 40개 이하 아미노산의 길이를 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12의 연속적인 아미노산 하위서열로부터 취해진다.

본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12를 기준으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 이상의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 갖거나, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12를 기준으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 이하의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 갖는다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은, 예컨대 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12를 기준으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 이상의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 갖거나, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11 또는 서열번호 12를 기준으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 이하의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 갖는다.

임의의 다양한 서열 정렬 방법, 예컨대, 비제한적으로, 글로벌 방법, 로컬 방법 및 하이브리드 방법, 예컨대 분절 접근 방법이 % 동일성을 측정하는데 사용될 수 있다. % 동일성을 측정하기 위한 프로토콜은 당업자의 범주에 속하고 본원의 교시로부터의 일상적인 과정이다.

글로벌 방법은 분자의 처음부터 말단까지 서열을 정렬하고, 개별적인 잔기 쌍의 점수를 첨가하고 갭 패널티를 부과함으로써 최선의 정렬을 결정한다. 비제한적인 방법은, 예컨대 CLUSTAL W(예컨대, 문헌[Julie D. Thompson et al., CLUSTAL W: Improving the Sensitivity of Progressive Multiple Sequence Alignment Through Sequence Weighting, Position- Specfic Gap Penalties and Weight Matrix Choice, 22(22) Nucleic Acids Research 4673-4680 (1994)] 참고); 및 반복 정련(예컨대, 문헌[Osamu Gotoh, Significant Improvement in Accuracy of Multiple Protein Sequence Alignments by Iterative Refinement as Assessed by Reference to Structural Alignments, 264(4) J. Mol. Biol. 823-838 (1996)] 참고)을 포함한다.

로컬 방법은 모든 입력 서열에 의해 공유된 하나 이상의 보존적인 모티프를 동정함으로써 서열을 정렬한다. 비제한적인 방법은, 예컨대 매치-박스(Match-box)(예컨대, 문헌[Eric Depiereux and Ernest Feytmans, Match-Box: A Fundamentally New Algorithm for the Simultaneous Alignment of Several Protein Sequences, 8(5) CABIOS 501-509 (1992)] 참고); 깁스 샘플링(Gibbs sampling)(예컨대, 문헌[C. E. Lawrence et al., Detecting Subtle Sequence Signals: A Gibbs Sampling Strategy for Multiple Alignment, 262(5131) Science 208-214 (1993)]; Align-M(예컨대, 문헌[Ivo Van Walle et al., Align- M - A New Algorithm for Multiple Alignment of Highly Divergent Sequences, 20(9) Bioinformatics,:1428-1435 (2004)] 참고)을 포함한다.

하이브리드 방법은 글로벌 및 로컬 정렬 방법의 기능적인 양상을 조합한다. 비제한적인 방법은, 예컨대 분절-대-분절 비교(예컨대, 문헌[Burkhard Morgenstern et al., Multiple DNA and Protein Sequence Alignment Based 0n Segment-To-Segment Comparison, 93(22) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 12098-12103 (1996)] 참고); T-Coffee(예컨대, 문헌[Cedric Notredame et al., T-Coffee: A Novel Algorithm for Multiple Sequence Alignment, 302(1) J. Mol. Biol. 205-217 (2000)] 참고); 머슬(MUSCLE)(예컨대, 문헌[Robert C. Edgar, MUSCLE: Multiple Sequence Alignment With High Score Accuracy and High Throughput, 32(5) Nucleic Acids Res. 1792-1797 (2004)] 참고); 및 DIALIGN-T(예컨대, 문헌[Amarendran R Subramanian et al., DIALIGN-T: An Improved Algorithm for Segment-Based Multiple Sequence Alignment, 6(1) BMC Bioinformatics 66 (2005)] 참고)를 포함한다.

본원은 하나의 아미노산이 다른 아미노산을 치환하는 다양한 폴리펩티드 변이체, 예컨대 본원에 개시된 트리파노소마 항원을 기술한다. 치환은 다양한 인자, 예컨대 치환되는 아미노산의 물성(표 1) 또는 원래 아미노산이 치환을 견디는 방법(표 2)에 의해 평가될 수 있다. 폴리펩티드에서 다른 아미노산을 치환할 수 있는 아미노산의 선택은 당업자에게 공지되어 있다.

[표 1]

[표 2]

본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 소수성 아미노산은 다른 소수성 아미노산으로 치환될 수 있다. 소수성 아미노산의 예는, 예컨대 C, F, I, L, M, V 및 W를 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 지방족 아미노산은 다른 지방족 아미노산으로 치환될 수 있다. 지방족 아미노산의 예는, 예컨대 A, I, L, P 및 V를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 방향족 아미노산은 다른 방향족 아미노산으로 치환될 수 있다. 방향족 아미노산의 예는, 예컨대 F, H, W 및 Y를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 적층 아미노산은 다른 적층 아미노산으로 치환될 수 있다. 적층 아미노산의 예는, 예컨대 F, H, W 및 Y를 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 극성 아미노산은 다른 극성 아미노산으로 치환될 수 있다. 극성 아미노산의 예는, 예컨대 D, E, K, N, Q 및 R을 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 덜 극성 또는 중성 아미노산은 다른 덜 극성 또는 중성 아미노산으로 치환될 수 있다. 덜 극성 또는 중성 아미노산의 예는, 예컨대 A, H, G, P, S, T 및 Y를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 양으로 하전된 아미노산은 다른 양으로 하전된 아미노산으로 치환될 수 있다. 양으로 하전된 아미노산의 예는, 예컨대 K, R 및 H를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 음으로 하전된 아미노산은 다른 음으로 하전된 아미노산으로 치환될 수 있다. 음으로 하전된 아미노산의 예는, 예컨대 D 및 E를 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 작은 아미노산은 다른 작은 아미노산으로 치환될 수 있다. 작은 아미노산의 예는, 예컨대 A, D, G, N, P, S 및 T를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 하나의 특정 위치의 C-베타 분지 아미노산은 다른 C-베타 분지 아미노산으로 치환될 수 있다. C-베타 분지 아미노산의 예는, 예컨대 I, T 및 V를 포함한다.

하나 이상의 담체는 본원에 개시된 트리파노소마 항원에 연결되어 담체와 회합되지 않을 때 면역원성, 비-면역원성 또는 약한 면역원성인 트리파노소마 항원의 면역원성을 강화시킬 수 있다. 비제한적인 예는, 예컨대 키홀 림펫 헤마시아닌(KLH), 오발부민(OVA), 티로글로불린(THY), 소 혈청 알부민(BSA), 대두 트립신 억제제(STI) 또는 다중 부착 펩티드(MAP)를 포함한다. 비-항원성 또는 약한 항원성 항원은 항원을 담체에 커플링시킴으로써 제조될 수 있다. 다른 다양한 담체 및 항원을 담체에 커플링시키는 방법은, 예컨대 문헌[Harlow and Lane, supra, 1998a]; 문헌[Harlow and Lane, supra, 1998b]; 및 문헌[David W. Waggoner, Jr. et al., Immunogenicity - enhancing carriers and compositions thereof and methods of using the same, 미국 특허공개공보 제2004/0057958호](이들 각각은 전문이 참고로 혼입됨)에 기술되어 있다. 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 또한 항원을 융합 단백질로서 발현함으로써 생성될 수 있다. 폴리펩티드 융합을 발현하는 방법은, 예컨대 문헌[Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (Supplement 47), John Wiley & Sons, New York (1999)](이의 전문은 참고로서 혼입됨)에 기술되어 있다.

본원의 양상은 부분적으로 면역원성 조성물을 포함한다. 본원에 개시된 면역원성 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원 및 임의적으로 하나 이상의 항원보강제를 포함한다. 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물은, 개체에 투여될 때, 하나 이상의 트리파노소마 균주에 대한 면역 반응을 자극하고, 이에 의해 α-트리파노소마 항체를 생성한다. 면역 반응은 본원에 개시된 면역원성 조성물에 대한 개체의 면역계에 의한 임의의 반응이다. 예시적인 면역 반응은, 비제한적으로, 세포, 및 국소 및 전신 체액 면역, 예컨대 CTL 반응, 예컨대 CD8+ CTL의 항원-특이적 유도, 헬퍼 T 세포 반응, 예컨대 T 세포 증식성 반응 및 사이토킨 방출, 및 B 세포 반응, 예컨대 항체 생성 반응을 포함한다. 본 양태의 한 양상에서, 면역원성 조성물은 백신이다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 하나의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물은, 개체에 투여될 때, 하나의 트리파노소마 균주에 대한 면역 반응을 자극하고, 이에 의해 α-트리파노소마 항체를 생성한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 하나의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물은, 개체에 투여될 때, 2개 이상의 트리파노소마 균주에 대한 면역 반응을 자극하고, 이에 의해 각각의 균주에 대한 α-트리파노소마 항체를 생성한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물은, 개체에 투여될 때, 하나의 트리파노소마 균주에 대한 면역 반응을 자극하고, 이에 의해 α-트리파노소마 항체를 생성한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물은, 개체에 투여될 때, 2개 이상의 트리파노소마 균주에 대한 면역 반응을 자극하고, 이에 의해 각각의 균주에 대한 α-트리파노소마 항체를 생성한다.

본 양태의 한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 6(CH47), 서열번호 9(CH77), 서열번호 5(CH37) 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 발명의 바람직한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 5(CH37) 및 서열번호 9(CH77)를 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 다른 바람직한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47) 및 서열번호 9(CH77)를 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 가장 바람직한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 6(CH47)을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다.

본 양태의 한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 2(CH30), 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77), 서열번호 11(CH84) 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 본 양상의 바람직한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 2(CH30), 서열번호 6(CH47), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 본 양상의 바람직한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 2(CH30), 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 발명의 바람직한 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 서열번호 2(CH30), 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하는 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다.

본 양태의 다른 양상에서, 면역원성 조성물은 트리파노소마-기반 질병의 치료용 약제이다. 본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 트리파노소마-기반 질병의 치료용 약제의 제조에 사용된다. 본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시킴으로써, 트리파노소마-기반 질병을 치료하기에 충분한 양으로 사용된다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원은 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 면역화시키거나 백신접종시키기에 충분한 양으로 사용된다.

한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 본원에 개시된 단일 트리파노소마 항원을 포함한다. 한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 본원에 개시된 다수의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개의 본원에 개시된 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 7개 이상, 8개 이상, 9개 이상, 10개 이상, 11개 이상, 12개 이상, 13개 이상, 14개 이상 또는 15개 이상의 본원에 개시된 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1개 이하, 2개 이하, 3개 이하, 4개 이하, 5개 이하, 6개 이하, 7개 이하, 8개 이하, 9개 이하, 10개 이하, 11개 이하, 12개 이하, 13개 이하, 14개 이하 또는 15개 이하의 본원에 개시된 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1 또는 2개, 1 내지 3개, 1 내지 4개, 1 내지 5개, 1 내지 6개, 1 내지 7개, 1 내지 8개, 1 내지 9개, 1 내지 10개, 1 내지 11개, 1 내지 12개, 1 내지 13개, 1 내지 14개, 1 내지 15개, 2 또는 3개, 2 내지 4개, 2 내지 5개, 2 내지 6개, 2 내지 7개, 2 내지 8개, 2 내지 9개, 2 내지 10개, 2 내지 11개, 2 내지 12개, 2 내지 13개, 2 내지 14개, 2 내지 15개, 3 또는 4개, 3 내지 5개, 3 내지 6개, 3 내지 7개, 3 내지 8개, 3 내지 9개, 3 내지 10개, 3 내지 11개, 3 내지 12개, 3 내지 13개, 3 내지 14개, 3 내지 15개, 4 또는 5개, 4 내지 6개, 4 내지 7개, 4 내지 8개, 4 내지 9개, 4 내지 10개, 4 내지 11개, 4 내지 12개, 4 내지 13개, 4 내지 14개, 4 내지 15개, 5 또는 6개, 5 내지 7개, 5 내지 8개, 5 내지 9개, 5 내지 10개, 5 내지 11개, 5 내지 12개, 5 내지 13개, 5 내지 14개, 5 내지 15개, 6 또는 7개, 6 내지 8개, 6 내지 9개, 6 내지 10개, 6 내지 11개, 6 내지 12개, 6 내지 13개, 6 내지 14개, 6 내지 15개, 7 또는 8개, 7 내지 9개, 7 내지 10개, 7 내지 11개, 7 내지 12개, 7 내지 13개, 7 내지 14개, 7 내지 15개, 8 또는 9개, 8 내지 10개, 8 내지 11개, 8 내지 12개, 8 내지 13개, 8 내지 14개, 8 내지 15개, 9 또는 10개, 9 내지 11개, 9 내지 12개, 9 내지 13개, 9 내지 14개, 9 내지 15개, 10 또는 11개, 10 내지 12개, 10 내지 13개, 10 내지 14개, 10 내지 15개, 11 또는 12개, 11 내지 13개, 11 내지 14개, 11 내지 15개, 12 또는 13개, 12 내지 14개, 12 내지 15개, 13 또는 14개, 13 내지 15개 또는 14 또는 15개의 본원에 개시된 트리파노소마 항원을 포함한다.

면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은 개체에서 적절한 면역 반응을 유도하기에 충분한 양이다. 전형적으로, 이러한 양은 또한 유의한 부작용을 야기하지 않는 양이다. 이러한 양은 사용되는 특정 트리파노소마 항원에 따라 변할 것이다. 특정 면역원성 조성물에 대한 최적량은 개체에서의 항체 역가 및 다른 반응의 관찰과 관련된 표준 연구에 의해 확인될 수 있다. 1차 면역원성 조성물 코스는 면역보호 반응을 제공하기에 최적의 간격으로 제공되는 1, 2 또는 3회 투약량의 면역원성 조성물을 포함할 수 있다.

일반적으로, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 효과적이고 안전한 양은 약 1 μg 내지 1,000 mg이다. 본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 1 μg, 약 2 μg, 약 3 μg, 약 4 μg, 약 5 μg, 약 6 μg, 약 7 μg, 약 8 μg, 약 9 μg, 약 10 μg, 약 15 μg, 약 20 μg, 약 25 μg, 약 30 μg, 약 35 μg, 약 40 μg, 약 45 μg, 약 50 μg, 약 55 μg, 약 60 μg, 약 65 μg, 약 70 μg, 약 75 μg, 약 80 μg, 약 85 μg, 약 90 μg, 약 95 μg, 약 100 μg, 약 110 μg, 약 120 μg, 약 130 μg, 약 140 μg, 약 150 μg, 약 160 μg, 약 170 μg, 약 180 μg, 약 190 μg, 약 200 μg, 약 210 μg, 약 220 μg, 약 230 μg, 약 240 μg, 약 250 μg, 260 μg, 약 270 μg, 약 280 μg, 약 290 μg, 약 300 μg, 약 310 μg, 약 320 μg, 약 330 μg, 약 340 μg, 약 350 μg, 360 μg, 약 370 μg, 약 380 μg, 약 390 μg, 약 400 μg, 약 410 μg, 약 420 μg, 약 430 μg, 약 440 μg, 약 450 μg, 460 μg, 약 470 μg, 약 480 μg, 약 490 μg, 약 500 μg, 약 510 μg, 약 520 μg, 약 530 μg, 약 540 μg, 약 550 μg, 560 μg, 약 570 μg, 약 580 μg, 약 590 μg, 약 600 μg, 약 610 μg, 약 620 μg, 약 630 μg, 약 640 μg, 약 650 μg, 660 μg, 약 670 μg, 약 680 μg, 약 690 μg, 약 700 μg, 약 710 μg, 약 720 μg, 약 730 μg, 약 740 μg, 약 750 μg, 760 μg, 약 770 μg, 약 780 μg, 약 790 μg, 약 800 μg, 약 810 μg, 약 820 μg, 약 830 μg, 약 840 μg, 약 850 μg, 860 μg, 약 870 μg, 약 880 μg, 약 890 μg, 약 900 μg, 약 910 μg, 약 920 μg, 약 930 μg, 약 940 μg, 약 950 μg, 960 μg, 약 970 μg, 약 980 μg, 약 990 μg 또는 약 1,000 μg일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 1 μg 이상, 2 μg 이상, 3 μg 이상, 4 μg 이상, 5 μg 이상, 6 μg 이상, 7 μg 이상, 8 μg 이상, 9 μg 이상, 10 μg 이상, 15 μg 이상, 20 μg 이상, 25 μg 이상, 30 μg 이상, 35 μg 이상, 40 μg 이상, 45 μg 이상, 50 μg 이상, 55 μg 이상, 60 μg 이상, 65 μg 이상, 70 μg 이상, 75 μg 이상, 80 μg 이상, 85 μg 이상, 90 μg 이상, 95 μg 이상, 100 μg 이상, 110 μg 이상, 120 μg 이상, 130 μg 이상, 140 μg 이상, 150 μg 이상, 160 μg 이상, 170 μg 이상, 180 μg 이상, 190 μg 이상, 200 μg 이상, 210 μg 이상, 220 μg 이상, 230 μg 이상, 240 μg 이상, 250 μg 이상, 260 μg, 270 μg 이상, 280 μg 이상, 290 μg 이상, 300 μg 이상, 310 μg 이상, 320 μg 이상, 330 μg 이상, 340 μg 이상, 350 μg 이상, 360 μg, 370 μg 이상, 380 μg 이상, 390 μg 이상, 400 μg 이상, 410 μg 이상, 420 μg 이상, 430 μg 이상, 440 μg 이상, 450 μg 이상, 460 μg, 470 μg 이상, 480 μg 이상, 490 μg 이상, 500 μg 이상, 510 μg 이상, 520 μg 이상, 530 μg 이상, 540 μg 이상, 550 μg 이상, 560 μg, 570 μg 이상, 580 μg 이상, 590 μg 이상, 600 μg 이상, 610 μg 이상, 620 μg 이상, 630 μg 이상, 640 μg 이상, 650 μg 이상, 660 μg, 670 μg 이상, 680 μg 이상, 690 μg 이상, 700 μg 이상, 710 μg 이상, 720 μg 이상, 730 μg 이상, 740 μg 이상, 750 μg 이상, 760 μg, 770 μg 이상, 780 μg 이상, 790 μg 이상, 800 μg 이상, 810 μg 이상, 820 μg 이상, 830 μg 이상, 840 μg 이상, 850 μg 이상, 860 μg, 870 μg 이상, 880 μg 이상, 890 μg 이상, 900 μg 이상, 910 μg 이상, 920 μg 이상, 930 μg 이상, 940 μg 이상, 950 μg 이상, 960 μg, 970 μg 이상, 980 μg 이상, 990 μg 이상 또는 1,000 μg 이상일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양, 예컨대 1 μg 이하, 2 μg 이하, 3 μg 이하, 4 μg 이하, 5 μg 이하, 6 μg 이하, 7 μg 이하, 8 μg 이하, 9 μg 이하, 10 μg 이하, 15 μg 이하, 20 μg 이하, 25 μg 이하, 30 μg 이하, 35 μg 이하, 40 μg 이하, 45 μg 이하, 50 μg 이하, 55 μg 이하, 60 μg 이하, 65 μg 이하, 70 μg 이하, 75 μg 이하, 80 μg 이하, 85 μg 이하, 90 μg 이하, 95 μg 이하, 100 μg 이하, 110 μg 이하, 120 μg 이하, 130 μg 이하, 140 μg 이하, 150 μg 이하, 160 μg 이하, 170 μg 이하, 180 μg 이하, 190 μg 이하, 200 μg 이하, 210 μg 이하, 220 μg 이하, 230 μg 이하, 240 μg 이하, 250 μg 이하, 260 μg, 270 μg 이하, 280 μg 이하, 290 μg 이하, 300 μg 이하, 310 μg 이하, 320 μg 이하, 330 μg 이하, 340 μg 이하, 350 μg 이하, 360 μg, 370 μg 이하, 380 μg 이하, 390 μg 이하, 400 μg 이하, 410 μg 이하, 420 μg 이하, 430 μg 이하, 440 μg 이하, 450 μg 이하, 460 μg, 470 μg 이하, 480 μg 이하, 490 μg 이하, 500 μg 이하, 510 μg 이하, 520 μg 이하, 530 μg 이하, 540 μg 이하, 550 μg 이하, 560 μg, 570 μg 이하, 580 μg 이하, 590 μg 이하, 600 μg 이하, 610 μg 이하, 620 μg 이하, 630 μg 이하, 640 μg 이하, 650 μg 이하, 660 μg, 670 μg 이하, 680 μg 이하, 690 μg 이하, 700 μg 이하, 710 μg 이하, 720 μg 이하, 730 μg 이하, 740 μg 이하, 750 μg 이하, 760 μg, 770 μg 이하, 780 μg 이하, 790 μg 이하, 800 μg 이하, 810 μg 이하, 820 μg 이하, 830 μg 이하, 840 μg 이하, 850 μg 이하, 860 μg, 870 μg 이하, 880 μg 이하, 890 μg 이하, 900 μg 이하, 910 μg 이하, 920 μg 이하, 930 μg 이하, 940 μg 이하, 950 μg 이하, 960 μg, 970 μg 이하, 980 μg 이하, 990 μg 이하 또는 1,000 μg 이하일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 1 내지 약 10 μg, 약 1 내지 약 20 μg, 약 1 내지 약 30 μg, 약 1 내지 약 40 μg, 약 1 내지 약 50 μg, 약 1 내지 약 60 μg, 약 1 내지 약 70 μg, 약 1 내지 약 80 μg, 약 1 내지 약 90 μg, 약 1 내지 약 100 μg, 약 1 내지 약 110 μg, 약 1 내지 약 120 μg, 약 1 내지 약 130 μg, 약 1 내지 약 140 μg, 약 1 내지 약 150 μg, 약 5 내지 약 10 μg, 약 5 내지 약 20 μg, 약 5 내지 약 30 μg, 약 5 내지 약 40 μg, 약 5 내지 약 50 μg, 약 5 내지 약 60 μg, 약 5 내지 약 70 μg, 약 5 내지 약 80 μg, 약 5 내지 약 90 μg, 약 5 내지 약 100 μg, 약 5 내지 약 110 μg, 약 5 내지 약 120 μg, 약 5 내지 약 130 μg, 약 5 내지 약 140 μg, 약 5 내지 약 150 μg, 약 10 내지 약 20 μg, 약 10 내지 약 30 μg, 약 10 내지 약 40 μg, 약 10 내지 약 50 μg, 약 10 내지 약 60 μg, 약 10 내지 약 70 μg, 약 10 내지 약 80 μg, 약 10 내지 약 90 μg, 약 10 내지 약 100 μg, 약 10 내지 약 110 μg, 약 10 내지 약 120 μg, 약 10 내지 약 130 μg, 약 10 내지 약 140 μg, 약 10 내지 약 150 μg, 약 10 내지 약 175 μg, 약 10 내지 약 200 μg, 약 10 내지 약 225 μg, 약 10 내지 약 250 μg, 약 25 내지 약 50 μg, 약 25 내지 약 75 μg, 약 25 내지 약 100 μg, 약 25 내지 약 125 μg, 약 25 내지 약 150 μg, 약 25 내지 약 175 μg, 약 25 내지 약 200 μg, 약 25 내지 약 225 μg, 약 25 내지 약 250 μg, 약 50 내지 약 75 μg, 약 50 내지 약 100 μg, 약 50 내지 약 125 μg, 약 50 내지 약 150 μg, 약 50 내지 약 175 μg, 약 50 내지 약 200 μg, 약 50 내지 약 225 μg, 약 50 내지 약 250 μg, 약 75 내지 약 100 μg, 약 75 내지 약 125 μg, 약 75 내지 약 150 μg, 약 75 내지 약 175 μg, 약 75 내지 약 200 μg, 약 75 내지 약 225 μg 또는 약 75 내지 약 250 μg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양, 예컨대 약 100 내지 약 125 μg, 약 100 내지 약 150 μg, 약 100 내지 약 175 μg, 약 100 내지 약 200 μg, 약 100 내지 약 225 μg, 약 100 내지 약 250 μg, 약 100 내지 약 275 μg, 약 100 내지 약 300 μg, 약 100 내지 약 325 μg, 약 100 내지 약 350 μg, 약 100 내지 약 375 μg, 약 100 내지 약 400 μg, 약 100 내지 약 425 μg, 약 100 내지 약 450 μg, 약 100 내지 약 475 μg, 약 100 내지 약 500 μg, 약 100 내지 약 525 μg, 약 100 내지 약 550 μg, 약 100 내지 약 575 μg, 약 100 내지 약 600 μg, 약 125 내지 약 150 μg, 약 125 내지 약 175 μg, 약 125 내지 약 200 μg, 약 125 내지 약 225 μg, 약 125 내지 약 250 μg, 약 125 내지 약 275 μg, 약 125 내지 약 300 μg, 약 125 내지 약 325 μg, 약 125 내지 약 350 μg, 약 125 내지 약 375 μg, 약 125 내지 약 400 μg, 약 125 내지 약 425 μg, 약 125 내지 약 450 μg, 약 125 내지 약 475 μg, 약 125 내지 약 500 μg, 약 125 내지 약 525 μg, 약 125 내지 약 550 μg, 약 125 내지 약 575 μg, 약 125 내지 약 600 μg, 약 150 내지 약 175 μg, 약 150 내지 약 200 μg, 약 150 내지 약 225 μg, 약 150 내지 약 250 μg, 약 150 내지 약 275 μg, 약 150 내지 약 300 μg, 약 150 내지 약 325 μg, 약 150 내지 약 350 μg, 약 150 내지 약 375 μg, 약 150 내지 약 400 μg, 약 150 내지 약 425 μg, 약 150 내지 약 450 μg, 약 150 내지 약 475 μg, 약 150 내지 약 500 μg, 약 150 내지 약 525 μg, 약 150 내지 약 550 μg, 약 150 내지 약 575 μg, 약 150 내지 약 600 μg, 약 200 내지 약 225 μg, 약 200 내지 약 250 μg, 약 200 내지 약 275 μg, 약 200 내지 약 300 μg, 약 200 내지 약 325 μg, 약 200 내지 약 350 μg, 약 200 내지 약 375 μg, 약 200 내지 약 400 μg, 약 200 내지 약 425 μg, 약 200 내지 약 450 μg, 약 200 내지 약 475 μg, 약 200 내지 약 500 μg, 약 200 내지 약 525 μg, 약 200 내지 약 550 μg, 약 200 내지 약 575 μg, 약 200 내지 약 600 μg, 약 200 내지 약 625 μg, 약 200 내지 약 650 μg, 약 200 내지 약 675 μg, 약 200 내지 약 700 μg, 약 200 내지 약 725 μg, 약 200 내지 약 750 μg, 약 200 내지 약 775 μg, 약 200 내지 약 800 μg, 약 200 내지 약 825 μg, 약 200 내지 약 850 μg, 약 200 내지 약 875 μg, 약 200 내지 약 900 μg, 약 200 내지 약 925 μg, 약 200 내지 약 950 μg, 약 200 내지 약 975 μg 또는 약 200 내지 약 1,000 μg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 250 내지 약 275 μg, 약 250 내지 약 300 μg, 약 250 내지 약 325 μg, 약 250 내지 약 350 μg, 약 250 내지 약 375 μg, 약 250 내지 약 400 μg, 약 250 내지 약 425 μg, 약 250 내지 약 450 μg, 약 250 내지 약 475 μg, 약 250 내지 약 500 μg, 약 250 내지 약 525 μg, 약 250 내지 약 550 μg, 약 250 내지 약 575 μg, 약 250 내지 약 600 μg, 약 250 내지 약 625 μg, 약 250 내지 약 650 μg, 약 250 내지 약 675 μg, 약 250 내지 약 700 μg, 약 250 내지 약 725 μg, 약 250 내지 약 750 μg, 약 250 내지 약 775 μg, 약 250 내지 약 800 μg, 약 250 내지 약 825 μg, 약 250 내지 약 850 μg, 약 250 내지 약 875 μg, 약 250 내지 약 900 μg, 약 250 내지 약 925 μg, 약 250 내지 약 950 μg, 약 250 내지 약 975 μg, 약 250 내지 약 1,000 μg, 약 300 내지 약 325 μg, 약 300 내지 약 350 μg, 약 300 내지 약 375 μg, 약 300 내지 약 400 μg, 약 300 내지 약 425 μg, 약 300 내지 약 450 μg, 약 300 내지 약 475 μg, 약 300 내지 약 500 μg, 약 300 내지 약 525 μg, 약 300 내지 약 550 μg, 약 300 내지 약 575 μg, 약 300 내지 약 600 μg, 약 300 내지 약 625 μg, 약 300 내지 약 650 μg, 약 300 내지 약 675 μg, 약 300 내지 약 700 μg, 약 300 내지 약 725 μg, 약 300 내지 약 750 μg, 약 300 내지 약 775 μg, 약 300 내지 약 800 μg, 약 300 내지 약 825 μg, 약 300 내지 약 850 μg, 약 300 내지 약 875 μg, 약 300 내지 약 900 μg, 약 300 내지 약 925 μg, 약 300 내지 약 950 μg, 약 300 내지 약 975 μg, 약 300 내지 약 1,000 μg, 약 400 내지 약 425 μg, 약 400 내지 약 450 μg, 약 400 내지 약 475 μg, 약 400 내지 약 500 μg, 약 400 내지 약 525 μg, 약 400 내지 약 550 μg, 약 400 내지 약 575 μg, 약 400 내지 약 600 μg, 약 400 내지 약 625 μg, 약 400 내지 약 650 μg, 약 400 내지 약 675 μg, 약 400 내지 약 700 μg, 약 400 내지 약 725 μg, 약 400 내지 약 750 μg, 약 400 내지 약 775 μg, 약 400 내지 약 800 μg, 약 400 내지 약 825 μg, 약 400 내지 약 850 μg, 약 400 내지 약 875 μg, 약 400 내지 약 900 μg, 약 400 내지 약 925 μg, 약 400 내지 약 950 μg, 약 400 내지 약 975 μg 또는 약 400 내지 약 1,000 μg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 500 내지 약 525 μg, 약 500 내지 약 550 μg, 약 500 내지 약 575 μg, 약 500 내지 약 600 μg, 약 500 내지 약 625 μg, 약 500 내지 약 650 μg, 약 500 내지 약 675 μg, 약 500 내지 약 700 μg, 약 500 내지 약 725 μg, 약 500 내지 약 750 μg, 약 500 내지 약 775 μg, 약 500 내지 약 800 μg, 약 500 내지 약 825 μg, 약 500 내지 약 850 μg, 약 500 내지 약 875 μg, 약 500 내지 약 900 μg, 약 500 내지 약 925 μg, 약 500 내지 약 950 μg, 약 500 내지 약 975 μg, 약 500 내지 약 1,000 μg, 약 600 내지 약 625 μg, 약 600 내지 약 650 μg, 약 600 내지 약 675 μg, 약 600 내지 약 700 μg, 약 600 내지 약 725 μg, 약 600 내지 약 750 μg, 약 600 내지 약 775 μg, 약 600 내지 약 800 μg, 약 600 내지 약 825 μg, 약 600 내지 약 850 μg, 약 600 내지 약 875 μg, 약 600 내지 약 900 μg, 약 600 내지 약 925 μg, 약 600 내지 약 950 μg, 약 600 내지 약 975 μg, 약 600 내지 약 1,000 μg, 약 700 내지 약 725 μg, 약 700 내지 약 750 μg, 약 700 내지 약 775 μg, 약 700 내지 약 800 μg, 약 700 내지 약 825 μg, 약 700 내지 약 850 μg, 약 700 내지 약 875 μg, 약 700 내지 약 900 μg, 약 700 내지 약 925 μg, 약 700 내지 약 950 μg, 약 700 내지 약 975 μg, 약 700 내지 약 1,000 μg, 약 800 내지 약 825 μg, 약 800 내지 약 850 μg, 약 800 내지 약 875 μg, 약 800 내지 약 900 μg, 약 800 내지 약 925 μg, 약 800 내지 약 950 μg, 약 800 내지 약 975 μg 또는 약 800 내지 약 1,000 μg일 수 있다.

본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 1 mg, 약 2 mg, 약 3 mg, 약 4 mg, 약 5 mg, 약 6 mg, 약 7 mg, 약 8 mg, 약 9 mg, 약 10 mg, 약 15 mg, 약 20 mg, 약 25 mg, 약 30 mg, 약 35 mg, 약 40 mg, 약 45 mg, 약 50 mg, 약 55 mg, 약 60 mg, 약 65 mg, 약 70 mg, 약 75 mg, 약 80 mg, 약 85 mg, 약 90 mg, 약 95 mg, 약 100 mg, 약 110 mg, 약 120 mg, 약 130 mg, 약 140 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 170 mg, 약 180 mg, 약 190 mg, 약 200 mg, 약 210 mg, 약 220 mg, 약 230 mg, 약 240 mg, 약 250 mg, 260 mg, 약 270 mg, 약 280 mg, 약 290 mg, 약 300 mg, 약 310 mg, 약 320 mg, 약 330 mg, 약 340 mg, 약 350 mg, 360 mg, 약 370 mg, 약 380 mg, 약 390 mg, 약 400 mg, 약 410 mg, 약 420 mg, 약 430 mg, 약 440 mg, 약 450 mg, 460 mg, 약 470 mg, 약 480 mg, 약 490 mg, 약 500 mg, 약 510 mg, 약 520 mg, 약 530 mg, 약 540 mg, 약 550 mg, 560 mg, 약 570 mg, 약 580 mg, 약 590 mg, 약 600 mg, 약 610 mg, 약 620 mg, 약 630 mg, 약 640 mg, 약 650 mg, 660 mg, 약 670 mg, 약 680 mg, 약 690 mg, 약 700 mg, 약 710 mg, 약 720 mg, 약 730 mg, 약 740 mg, 약 750 mg, 760 mg, 약 770 mg, 약 780 mg, 약 790 mg, 약 800 mg, 약 810 mg, 약 820 mg, 약 830 mg, 약 840 mg, 약 850 mg, 860 mg, 약 870 mg, 약 880 mg, 약 890 mg, 약 900 mg, 약 910 mg, 약 920 mg, 약 930 mg, 약 940 mg, 약 950 mg, 960 mg, 약 970 mg, 약 980 mg, 약 990 mg 또는 약 1,000 mg일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 1 mg 이상, 2 mg 이상, 3 mg 이상, 4 mg 이상, 5 mg 이상, 6 mg 이상, 7 mg 이상, 8 mg 이상, 9 mg 이상, 10 mg 이상, 15 mg 이상, 20 mg 이상, 25 mg 이상, 30 mg 이상, 35 mg 이상, 40 mg 이상, 45 mg 이상, 50 mg 이상, 55 mg 이상, 60 mg 이상, 65 mg 이상, 70 mg 이상, 75 mg 이상, 80 mg 이상, 85 mg 이상, 90 mg 이상, 95 mg 이상, 100 mg 이상, 110 mg 이상, 120 mg 이상, 130 mg 이상, 140 mg 이상, 150 mg 이상, 160 mg 이상, 170 mg 이상, 180 mg 이상, 190 mg 이상, 200 mg 이상, 210 mg 이상, 220 mg 이상, 230 mg 이상, 240 mg 이상, 250 mg 이상, 260 mg, 270 mg 이상, 280 mg 이상, 290 mg 이상, 300 mg 이상, 310 mg 이상, 320 mg 이상, 330 mg 이상, 340 mg 이상, 350 mg 이상, 360 mg, 370 mg 이상, 380 mg 이상, 390 mg 이상, 400 mg 이상, 410 mg 이상, 420 mg 이상, 430 mg 이상, 440 mg 이상, 450 mg 이상, 460 mg, 470 mg 이상, 480 mg 이상, 490 mg 이상, 500 mg 이상, 510 mg 이상, 520 mg 이상, 530 mg 이상, 540 mg 이상, 550 mg 이상, 560 mg, 570 mg 이상, 580 mg 이상, 590 mg 이상, 600 mg 이상, 610 mg 이상, 620 mg 이상, 630 mg 이상, 640 mg 이상, 650 mg 이상, 660 mg, 670 mg 이상, 680 mg 이상, 690 mg 이상, 700 mg 이상, 710 mg 이상, 720 mg 이상, 730 mg 이상, 740 mg 이상, 750 mg 이상, 760 mg, 770 mg 이상, 780 mg 이상, 790 mg 이상, 800 mg 이상, 810 mg 이상, 820 mg 이상, 830 mg 이상, 840 mg 이상, 850 mg 이상, 860 mg, 870 mg 이상, 880 mg 이상, 890 mg 이상, 900 mg 이상, 910 mg 이상, 920 mg 이상, 930 mg 이상, 940 mg 이상, 950 mg 이상, 960 mg, 970 mg 이상, 980 mg 이상, 990 mg 이상 또는 1,000 mg 이상일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 1 mg 이하, 2 mg 이하, 3 mg 이하, 4 mg 이하, 5 mg 이하, 6 mg 이하, 7 mg 이하, 8 mg 이하, 9 mg 이하, 10 mg 이하, 15 mg 이하, 20 mg 이하, 25 mg 이하, 30 mg 이하, 35 mg 이하, 40 mg 이하, 45 mg 이하, 50 mg 이하, 55 mg 이하, 60 mg 이하, 65 mg 이하, 70 mg 이하, 75 mg 이하, 80 mg 이하, 85 mg 이하, 90 mg 이하, 95 mg 이하, 100 mg 이하, 110 mg 이하, 120 mg 이하, 130 mg 이하, 140 mg 이하, 150 mg 이하, 160 mg 이하, 170 mg 이하, 180 mg 이하, 190 mg 이하, 200 mg 이하, 210 mg 이하, 220 mg 이하, 230 mg 이하, 240 mg 이하, 250 mg 이하, 260 mg, 270 mg 이하, 280 mg 이하, 290 mg 이하, 300 mg 이하, 310 mg 이하, 320 mg 이하, 330 mg 이하, 340 mg 이하, 350 mg 이하, 360 mg, 370 mg 이하, 380 mg 이하, 390 mg 이하, 400 mg 이하, 410 mg 이하, 420 mg 이하, 430 mg 이하, 440 mg 이하, 450 mg 이하, 460 mg, 470 mg 이하, 480 mg 이하, 490 mg 이하, 500 mg 이하, 510 mg 이하, 520 mg 이하, 530 mg 이하, 540 mg 이하, 550 mg 이하, 560 mg, 570 mg 이하, 580 mg 이하, 590 mg 이하, 600 mg 이하, 610 mg 이하, 620 mg 이하, 630 mg 이하, 640 mg 이하, 650 mg 이하, 660 mg, 670 mg 이하, 680 mg 이하, 690 mg 이하, 700 mg 이하, 710 mg 이하, 720 mg 이하, 730 mg 이하, 740 mg 이하, 750 mg 이하, 760 mg, 770 mg 이하, 780 mg 이하, 790 mg 이하, 800 mg 이하, 810 mg 이하, 820 mg 이하, 830 mg 이하, 840 mg 이하, 850 mg 이하, 860 mg, 870 mg 이하, 880 mg 이하, 890 mg 이하, 900 mg 이하, 910 mg 이하, 920 mg 이하, 930 mg 이하, 940 mg 이하, 950 mg 이하, 960 mg, 970 mg 이하, 980 mg 이하, 990 mg 이하 또는 1,000 mg 이하일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 1 내지 약 10 mg, 약 1 내지 약 20 mg, 약 1 내지 약 30 mg, 약 1 내지 약 40 mg, 약 1 내지 약 50 mg, 약 1 내지 약 60 mg, 약 1 내지 약 70 mg, 약 1 내지 약 80 mg, 약 1 내지 약 90 mg, 약 1 내지 약 100 mg, 약 1 내지 약 110 mg, 약 1 내지 약 120 mg, 약 1 내지 약 130 mg, 약 1 내지 약 140 mg, 약 1 내지 약 150 mg, 약 5 내지 약 10 mg, 약 5 내지 약 20 mg, 약 5 내지 약 30 mg, 약 5 내지 약 40 mg, 약 5 내지 약 50 mg, 약 5 내지 약 60 mg, 약 5 내지 약 70 mg, 약 5 내지 약 80 mg, 약 5 내지 약 90 mg, 약 5 내지 약 100 mg, 약 5 내지 약 110 mg, 약 5 내지 약 120 mg, 약 5 내지 약 130 mg, 약 5 내지 약 140 mg, 약 5 내지 약 150 mg, 약 10 내지 약 20 mg, 약 10 내지 약 30 mg, 약 10 내지 약 40 mg, 약 10 내지 약 50 mg, 약 10 내지 약 60 mg, 약 10 내지 약 70 mg, 약 10 내지 약 80 mg, 약 10 내지 약 90 mg, 약 10 내지 약 100 mg, 약 10 내지 약 110 mg, 약 10 내지 약 120 mg, 약 10 내지 약 130 mg, 약 10 내지 약 140 mg, 약 10 내지 약 150 mg, 약 10 내지 약 175 mg, 약 10 내지 약 200 mg, 약 10 내지 약 225 mg, 약 10 내지 약 250 mg, 약 25 내지 약 50 mg, 약 25 내지 약 75 mg, 약 25 내지 약 100 mg, 약 25 내지 약 125 mg, 약 25 내지 약 150 mg, 약 25 내지 약 175 mg, 약 25 내지 약 200 mg, 약 25 내지 약 225 mg, 약 25 내지 약 250 mg, 약 50 내지 약 75 mg, 약 50 내지 약 100 mg, 약 50 내지 약 125 mg, 약 50 내지 약 150 mg, 약 50 내지 약 175 mg, 약 50 내지 약 200 mg, 약 50 내지 약 225 mg, 약 50 내지 약 250 mg, 약 75 내지 약 100 mg, 약 75 내지 약 125 mg, 약 75 내지 약 150 mg, 약 75 내지 약 175 mg, 약 75 내지 약 200 mg, 약 75 내지 약 225 mg 또는 약 75 내지 약 250 mg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 100 내지 약 125 mg, 약 100 내지 약 150 mg, 약 100 내지 약 175 mg, 약 100 내지 약 200 mg, 약 100 내지 약 225 mg, 약 100 내지 약 250 mg, 약 100 내지 약 275 mg, 약 100 내지 약 300 mg, 약 100 내지 약 325 mg, 약 100 내지 약 350 mg, 약 100 내지 약 375 mg, 약 100 내지 약 400 mg, 약 100 내지 약 425 mg, 약 100 내지 약 450 mg, 약 100 내지 약 475 mg, 약 100 내지 약 500 mg, 약 100 내지 약 525 mg, 약 100 내지 약 550 mg, 약 100 내지 약 575 mg, 약 100 내지 약 600 mg, 약 125 내지 약 150 mg, 약 125 내지 약 175 mg, 약 125 내지 약 200 mg, 약 125 내지 약 225 mg, 약 125 내지 약 250 mg, 약 125 내지 약 275 mg, 약 125 내지 약 300 mg, 약 125 내지 약 325 mg, 약 125 내지 약 350 mg, 약 125 내지 약 375 mg, 약 125 내지 약 400 mg, 약 125 내지 약 425 mg, 약 125 내지 약 450 mg, 약 125 내지 약 475 mg, 약 125 내지 약 500 mg, 약 125 내지 약 525 mg, 약 125 내지 약 550 mg, 약 125 내지 약 575 mg, 약 125 내지 약 600 mg, 약 150 내지 약 175 mg, 약 150 내지 약 200 mg, 약 150 내지 약 225 mg, 약 150 내지 약 250 mg, 약 150 내지 약 275 mg, 약 150 내지 약 300 mg, 약 150 내지 약 325 mg, 약 150 내지 약 350 mg, 약 150 내지 약 375 mg, 약 150 내지 약 400 mg, 약 150 내지 약 425 mg, 약 150 내지 약 450 mg, 약 150 내지 약 475 mg, 약 150 내지 약 500 mg, 약 150 내지 약 525 mg, 약 150 내지 약 550 mg, 약 150 내지 약 575 mg, 약 150 내지 약 600 mg, 약 200 내지 약 225 mg, 약 200 내지 약 250 mg, 약 200 내지 약 275 mg, 약 200 내지 약 300 mg, 약 200 내지 약 325 mg, 약 200 내지 약 350 mg, 약 200 내지 약 375 mg, 약 200 내지 약 400 mg, 약 200 내지 약 425 mg, 약 200 내지 약 450 mg, 약 200 내지 약 475 mg, 약 200 내지 약 500 mg, 약 200 내지 약 525 mg, 약 200 내지 약 550 mg, 약 200 내지 약 575 mg, 약 200 내지 약 600 mg, 약 200 내지 약 625 mg, 약 200 내지 약 650 mg, 약 200 내지 약 675 mg, 약 200 내지 약 700 mg, 약 200 내지 약 725 mg, 약 200 내지 약 750 mg, 약 200 내지 약 775 mg, 약 200 내지 약 800 mg, 약 200 내지 약 825 mg, 약 200 내지 약 850 mg, 약 200 내지 약 875 mg, 약 200 내지 약 900 mg, 약 200 내지 약 925 mg, 약 200 내지 약 950 mg, 약 200 내지 약 975 mg 또는 약 200 내지 약 1,000 mg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 250 내지 약 275 mg, 약 250 내지 약 300 mg, 약 250 내지 약 325 mg, 약 250 내지 약 350 mg, 약 250 내지 약 375 mg, 약 250 내지 약 400 mg, 약 250 내지 약 425 mg, 약 250 내지 약 450 mg, 약 250 내지 약 475 mg, 약 250 내지 약 500 mg, 약 250 내지 약 525 mg, 약 250 내지 약 550 mg, 약 250 내지 약 575 mg, 약 250 내지 약 600 mg, 약 250 내지 약 625 mg, 약 250 내지 약 650 mg, 약 250 내지 약 675 mg, 약 250 내지 약 700 mg, 약 250 내지 약 725 mg, 약 250 내지 약 750 mg, 약 250 내지 약 775 mg, 약 250 내지 약 800 mg, 약 250 내지 약 825 mg, 약 250 내지 약 850 mg, 약 250 내지 약 875 mg, 약 250 내지 약 900 mg, 약 250 내지 약 925 mg, 약 250 내지 약 950 mg, 약 250 내지 약 975 mg, 약 250 내지 약 1,000 mg, 약 300 내지 약 325 mg, 약 300 내지 약 350 mg, 약 300 내지 약 375 mg, 약 300 내지 약 400 mg, 약 300 내지 약 425 mg, 약 300 내지 약 450 mg, 약 300 내지 약 475 mg, 약 300 내지 약 500 mg, 약 300 내지 약 525 mg, 약 300 내지 약 550 mg, 약 300 내지 약 575 mg, 약 300 내지 약 600 mg, 약 300 내지 약 625 mg, 약 300 내지 약 650 mg, 약 300 내지 약 675 mg, 약 300 내지 약 700 mg, 약 300 내지 약 725 mg, 약 300 내지 약 750 mg, 약 300 내지 약 775 mg, 약 300 내지 약 800 mg, 약 300 내지 약 825 mg, 약 300 내지 약 850 mg, 약 300 내지 약 875 mg, 약 300 내지 약 900 mg, 약 300 내지 약 925 mg, 약 300 내지 약 950 mg, 약 300 내지 약 975 mg, 약 300 내지 약 1,000 mg, 약 400 내지 약 425 mg, 약 400 내지 약 450 mg, 약 400 내지 약 475 mg, 약 400 내지 약 500 mg, 약 400 내지 약 525 mg, 약 400 내지 약 550 mg, 약 400 내지 약 575 mg, 약 400 내지 약 600 mg, 약 400 내지 약 625 mg, 약 400 내지 약 650 mg, 약 400 내지 약 675 mg, 약 400 내지 약 700 mg, 약 400 내지 약 725 mg, 약 400 내지 약 750 mg, 약 400 내지 약 775 mg, 약 400 내지 약 800 mg, 약 400 내지 약 825 mg, 약 400 내지 약 850 mg, 약 400 내지 약 875 mg, 약 400 내지 약 900 mg, 약 400 내지 약 925 mg, 약 400 내지 약 950 mg, 약 400 내지 약 975 mg 또는 약 400 내지 약 1,000 mg일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 양은, 예컨대 약 500 내지 약 525 mg, 약 500 내지 약 550 mg, 약 500 내지 약 575 mg, 약 500 내지 약 600 mg, 약 500 내지 약 625 mg, 약 500 내지 약 650 mg, 약 500 내지 약 675 mg, 약 500 내지 약 700 mg, 약 500 내지 약 725 mg, 약 500 내지 약 750 mg, 약 500 내지 약 775 mg, 약 500 내지 약 800 mg, 약 500 내지 약 825 mg, 약 500 내지 약 850 mg, 약 500 내지 약 875 mg, 약 500 내지 약 900 mg, 약 500 내지 약 925 mg, 약 500 내지 약 950 mg, 약 500 내지 약 975 mg, 약 500 내지 약 1,000 mg, 약 600 내지 약 625 mg, 약 600 내지 약 650 mg, 약 600 내지 약 675 mg, 약 600 내지 약 700 mg, 약 600 내지 약 725 mg, 약 600 내지 약 750 mg, 약 600 내지 약 775 mg, 약 600 내지 약 800 mg, 약 600 내지 약 825 mg, 약 600 내지 약 850 mg, 약 600 내지 약 875 mg, 약 600 내지 약 900 mg, 약 600 내지 약 925 mg, 약 600 내지 약 950 mg, 약 600 내지 약 975 mg, 약 600 내지 약 1,000 mg, 약 700 내지 약 725 mg, 약 700 내지 약 750 mg, 약 700 내지 약 775 mg, 약 700 내지 약 800 mg, 약 700 내지 약 825 mg, 약 700 내지 약 850 mg, 약 700 내지 약 875 mg, 약 700 내지 약 900 mg, 약 700 내지 약 925 mg, 약 700 내지 약 950 mg, 약 700 내지 약 975 mg, 약 700 내지 약 1,000 mg, 약 800 내지 약 825 mg, 약 800 내지 약 850 mg, 약 800 내지 약 875 mg, 약 800 내지 약 900 mg, 약 800 내지 약 925 mg, 약 800 내지 약 950 mg, 약 800 내지 약 975 mg 또는 약 800 내지 약 1,000 mg일 수 있다.

본원에 개시된 면역원성 조성물은 임의적으로 및 추가로 하나 이상의 항원보강제를 포함할 수 있다. 본원에 개시된 트리파노소마 항원에 대한 면역 반응을 증가시키거나 다양화시키는 임의의 물질 또는 물질의 혼합물이다. 항원보강제는 면역의 수 또는 보호성 면역에 요구되는 항원의 양을 감소시키는 역할을 할 수 있다. 비제한적인 항원보강제는, 예컨대 리포좀, 바이러스-유사 입자(VLP), 나노입자, 유성 상, 예컨대, 비제한적으로, 프로인트(Freund) 유형의 항원보강제, 예컨대 프로인트 완전 항원보강제(FCA); 프로인트 불완전 항원보강제(FIA); 사포게닌 글리코시드, 예컨대, 사포닌; 카보폴; N-아세틸무라밀-L-알란일-D-이소글루타민(통상적으로 무라밀 다이펩티드 또는 "MDP"로 공지됨); 및 리포다당류(LPS)를 포함한다. 이러한 항원보강제는 일반적으로 수성 상, 또는 더욱 통상적으로 수-불용성 무기 염을 갖는 에멀젼의 형태로 사용된다. 이러한 무기 염은 알루미늄 하이드록사이드, 아연 설페이트, 콜로이드성 철 하이드록사이드, 칼슘 포스페이트 또는 칼슘 클로라이드를 포함한다.

항원보강제의 다른 예는 알루미늄-기반 항원보강제(또는 명반-기반 항원보강제)이다. 알루미늄-기반 항원보강제는 항원을 침전시켜 "데포(depot)"를 형성함으로써, 공동-투여된 항원에 대한 면역 반응을 자극한다. 알루미늄-기반 항원보강제는 주로 T_H2 면역 반응을 자극한다. 통상적으로 사용되는 명반-기반 항원보강제는 알루미늄 하이드록사이드(Al(OH)₃), 알루미늄 포스페이트(AlPO₄), 알루미늄 하이드록시포스페이트, 무정형 알루미늄 하이드록시포스페이트 설페이트(AAHS) 및 소위 "명반" KAl(SO₄)·12H₂O를 포함한다.

특정 항원보강제 및 제조 및 사용 방법은, 예컨대 문헌[Gupta et al. Vaccine, 11: 993-306, 1993; Arnon, R. (Ed.) Synthetic Vaccines 1:83-92, CRC Press, Inc., Boca Raton, Fla., 1987]; 및 문헌[David W. Waggoner, Jr. et al., Immunogenicity-Enhancing Carriers and Compositions Thereof and Methods of Using the Same, 미국 특허공개공보 제2004/0057958호(Mar. 25, 2004)]에 기술되어 있다. 첨가적인 항원보강제는 문헌["Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach" (eds. Powell, M. F. and Newman, M. J.) Pharmaceutical Biotechnology, Volume 6, Plenum Press (New York), Chapter 7 (pp 141-227)]에 기술된 임의의 화합물이다. 이러한 개론의 예는 무라밀 다이펩티드(MDP) 및 몬타니드(Montanide) 720을 포함한다. 폴리 이노신:시토신(Poly Inosine:Cytosine: Poly I:C) 또는 CpG 모티프를 함유하는 플라스미드 DNA와 같은 분자는 또한 마이크로입자에 캡슐화된 항원과 조합으로 항원보강제로서 투여될 수 있다. 다른 예에서, 항원보강제는 리스테리오리신, 스트렙토리신 또는 이들의 혼합물과 같은 세포의 세포질로의 항원성 화합물의 도입을 용이하게 하는 약품이다.

한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 본원에 개시된 단일 항원보강제를 포함한다. 한 양태에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 본원에 개시된 다수의 항원보강제를 포함한다. 본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1, 2, 3, 4 또는 5개의 본원에 개시된 항원보강제를 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상의 본원에 개시된 항원보강제를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1개 이하, 2개 이하, 3개 이하, 4개 이하 또는 5개 이하의 본원에 개시된 항원보강제를 포함한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 1 또는 2개, 1 내지 3개, 1 내지 4개, 1 내지 5개, 2 또는 3개, 2 내지 4개, 2 내지 5개, 3 또는 4개, 3 내지 5개 또는 4 또는 5개의 본원에 개시된 항원보강제를 포함한다.

항원보강제는 전형적으로 투여된 투약량의 부피의 절반을 포함한다. 전형적으로, 항원보강제를 포함하는 면역원성 조성물은 약 0.25 내지 약 1 mL의 투약량으로 투여될 것이다. 따라서, 면역원성 조성물이 약 1 mL 투약량으로 투여되는 경우, 이러한 조성물의 약 0.5 mL는 항원보강제일 것이다. 유사하게, 면역원성 조성물이 약 0.5 mL 투약량으로 투여되는 경우, 이러한 조성물의 약 0.25 mL는 항원보강제일 것이다.

면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 항원보강제의 양은 개체에서 표적화된 트리파노소마 항원의 적절한 면역 반응을 증가시키기에 효과적인 양이다. 전형적으로, 이러한 양은 또한 유의한 부작용을 야기하지 않는 양이다. 이러한 양은 사용되는 항원보강제에 따라 변할 것이다. 특정 면역원성 조성물에 대한 항원보강제의 최적량은 개체 내의 항체 역가 및 다른 반응의 관찰과 관련된 표준 연구에 의해 확인될 수 있다.

일반적으로, 본원에 개시된 항원보강제의 효과적이고 안전한 양은 약 100 내지 약 1,500 μg/mL 농도이다. 본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 항원보강제의 양은, 예컨대 약 100 μg/mL, 약 200 μg/mL, 약 300 μg/mL, 약 400 μg/mL, 약 500 μg/mL, 약 600 μg/mL, 약 700 μg/mL, 약 800 μg/mL, 약 900 μg/mL, 약 1,000 μg/mL, 약 1,100 μg/mL, 약 1,200 μg/mL, 약 1,300 μg/mL, 약 1,400 μg/mL 또는 약 1,500 μg/mL일 수 있다. 본 양태의 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 항원보강제의 양은, 예컨대 100 μg/mL 이상, 200 μg/mL 이상, 300 μg/mL 이상, 400 μg/mL 이상, 500 μg/mL 이상, 600 μg/mL 이상, 700 μg/mL 이상, 800 μg/mL 이상, 900 μg/mL 이상, 1,000 μg/mL 이상, 1,100 μg/mL 이상, 1,200 μg/mL 이상, 1,300 μg/mL 이상, 1,400 μg/mL 이상 또는 1,500 μg/mL 이상일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 항원보강제의 양은, 예컨대 100 μg/mL 이하, 200 μg/mL 이하, 300 μg/mL 이하, 400 μg/mL 이하, 500 μg/mL 이하, 600 μg/mL 이하, 700 μg/mL 이하, 800 μg/mL 이하, 900 μg/mL 이하, 1,000 μg/mL 이하, 1,100 μg/mL 이하, 1,200 μg/mL 이하, 1,300 μg/mL 이하, 1,400 μg/mL 이하 또는 1,500 μg/mL 이하일 수 있다.

본 양태의 또 다른 양상에서, 면역원성 조성물에 포함된 본원에 개시된 항원보강제의 양은, 예컨대 약 100 내지 약 200 μg/mL, 약 100 내지 약 300 μg/mL, 약 100 내지 약 400 μg/mL, 약 100 내지 약 500 μg/mL, 약 100 내지 약 600 μg/mL, 약 100 내지 약 700 μg/mL, 약 100 내지 약 800 μg/mL, 약 100 내지 약 900 μg/mL, 약 100 내지 약 1,000 μg/mL, 약 100 내지 약 1,200 μg/mL, 약 100 내지 약 1,300 μg/mL, 약 100 내지 약 1,400 μg/mL, 약 100 내지 약 1,500 μg/mL, 약 200 내지 약 300 μg/mL, 약 200 내지 약 400 μg/mL, 약 200 내지 약 500 μg/mL, 약 200 내지 약 600 μg/mL, 약 200 내지 약 700 μg/mL, 약 200 내지 약 800 μg/mL, 약 200 내지 약 900 μg/mL, 약 200 내지 약 1,000 μg/mL, 약 200 내지 약 1,200 μg/mL, 약 200 내지 약 1,300 μg/mL, 약 200 내지 약 1,400 μg/mL, 약 200 내지 약 1,500 μg/mL, 약 300 내지 약 400 μg/mL, 약 300 내지 약 500 μg/mL, 약 300 내지 약 600 μg/mL, 약 300 내지 약 700 μg/mL, 약 300 내지 약 800 μg/mL, 약 300 내지 약 900 μg/mL, 약 300 내지 약 1,000 μg/mL, 약 300 내지 약 1,200 μg/mL, 약 300 내지 약 1,300 μg/mL, 약 300 내지 약 1,400 μg/mL, 약 300 내지 약 1,500 μg/mL, 약 400 내지 약 500 μg/mL, 약 400 내지 약 600 μg/mL, 약 400 내지 약 700 μg/mL, 약 400 내지 약 800 μg/mL, 약 400 내지 약 900 μg/mL, 약 400 내지 약 1,000 μg/mL, 약 400 내지 약 1,200 μg/mL, 약 400 내지 약 1,300 μg/mL, 약 400 내지 약 1,400 μg/mL, 약 400 내지 약 1,500 μg/mL, 약 500 내지 약 600 μg/mL, 약 500 내지 약 700 μg/mL, 약 500 내지 약 800 μg/mL, 약 500 내지 약 900 μg/mL, 약 500 내지 약 1,000 μg/mL, 약 500 내지 약 1,200 μg/mL, 약 500 내지 약 1,300 μg/mL, 약 500 내지 약 1,400 μg/mL, 약 500 내지 약 1,500 μg/mL, 약 600 내지 약 700 μg/mL, 약 600 내지 약 800 μg/mL, 약 600 내지 약 900 μg/mL, 약 600 내지 약 1,000 μg/mL, 약 600 내지 약 1,200 μg/mL, 약 600 내지 약 1,300 μg/mL, 약 600 내지 약 1,400 μg/mL, 약 600 내지 약 1,500 μg/mL, 약 700 내지 약 800 μg/mL, 약 700 내지 약 900 μg/mL, 약 700 내지 약 1,000 μg/mL, 약 700 내지 약 1,200 μg/mL, 약 700 내지 약 1,300 μg/mL, 약 700 내지 약 1,400 μg/mL, 약 700 내지 약 1,500 μg/mL, 약 800 내지 약 900 μg/mL, 약 800 내지 약 1,000 μg/mL, 약 800 내지 약 1,200 μg/mL, 약 800 내지 약 1,300 μg/mL, 약 800 내지 약 1,400 μg/mL, 약 800 내지 약 1,500 μg/mL, 약 900 내지 약 1,000 μg/mL, 약 900 내지 약 1,200 μg/mL, 약 900 내지 약 1,300 μg/mL, 약 900 내지 약 1,400 μg/mL, 약 900 내지 약 1,500 μg/mL, 약 1,000 내지 약 1,200 μg/mL, 약 1,000 내지 약 1,300 μg/mL, 약 1,000 내지 약 1,400 μg/mL, 약 1,000 내지 약 1,500 μg/mL, 약 1,100 내지 약 1,200 μg/mL, 약 1,100 내지 약 1,300 μg/mL, 약 1,100 내지 약 1,400 μg/mL, 약 1,100 내지 약 1,500 μg/mL, 약 1,200 내지 약 1,300 μg/mL, 약 1,200 내지 약 1,400 μg/mL, 약 1,200 내지 약 1,500 μg/mL, 약 1,300 내지 약 1,400 μg/mL, 약 1,300 내지 약 1,500 μg/mL 또는 약 1,400 내지 약 1,500 μg/mL일 수 있다.

본원에 개시된 면역원성 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본원에 개시된 면역원성 조성물에 유용한 약학적으로 허용되는 담체는 사용되는 투약량 및 농도에서 개체에 비독성이고 투여될 때 장기 또는 영구 유해 효과를 실질적으로 갖지 않는 임의의 상용가능한 약품을 포함하고, 약학적으로 허용되는 비히클, 안정화제, 가용화제, 희석제, 첨가제, 보조제 또는 부형제와 같은 용어를 포괄한다. 이러한 담체는 일반적으로 활성 화합물과 혼합되거나, 활성 화합물을 희석하거나 둘러싸도록 하고, 고체, 반-고체 또는 액체 약품일 수 있다. 활성 성분이 가용성이거나 목적 담체 또는 희석제에 현탁액으로서 전달될 수 있음이 이해되어야 한다. 본원에 개시된 담체는 또한 항원보강제로서 작용할 수 있다. 임의의 다양한 약학적으로 허용되는 담체가 사용될 수 있고, 비제한적으로, 수성 매질, 예컨대, 물, 염수, 글리신, 하이알루론산 등; 고체 담체, 예컨대 만니톨, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 사카린, 활석, 셀룰로스, 글루코스, 수크로스, 마그네슘 카보네이트 등; 용매; 분산 매질; 코팅; 항균 또는 항진균 약품; 등장성 및 흡수 지연 약품; 또는 임의의 다른 불활성 성분을 포함한다. 약리학적으로 허용되는 담체는 투여 방식에 따라 변할 수 있다. 임의의 약리학적으로 허용되는 담체가 활성 성분과 불상용성이지 않는 한, 약학적으로 허용되는 조성물에서의 이의 사용이 고려된다. 이러한 약학 담체의 특정 용도의 비제한적인 예는 문헌[PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS (Howard C. Ansel et al., eds., Lippincott Williams & Wilkins Publishers, 7th ed. 1999)]; 문헌[REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (Alfonso R. Gennaro ed., Lippincott, Williams & Wilkins, 20th ed. 2000)]; 문헌[GOODMAN & GILMAN'S THE PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS (Joel G. Hardman et al., eds., McGraw-Hill Professional, 10th ed. 2001)]; 및 문헌[HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL EXCIPIENTS (Raymond C. Rowe et al., APhA Publications, 4th edition 2003)]에서 발견될 수 있다.

본원에 개시된 면역원성 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 성분(또는 약학 성분), 예컨대, 비제한적으로, 완충제, 보존제, 등장성 조정제, 염, 산화방지제, 삼투압 조절제, 생리학적 물질, 약리학적 물질, 벌크화제, 에멀젼화제, 습윤제, 감미 또는 향미 약품 등을 추가로 포함할 수 있다. 다양한 완충제 및 pH 조정 수단이, 생성된 제제가 약학적으로 허용되는 한, 본원에 개시된 약학 조성물을 제조하는데 사용될 수 있다. 이러한 완충제는, 예컨대, 비제한적으로, 아세테이트 완충제, 시트레이트 완충제, 포스페이트 완충제, 중성 완충 염수, 포스페이트 완충 염수 및 보레이트 완충제를 포함한다. 산 또는 염기가 필요에 따라 조성물의 pH를 조정하는데 사용될 수 있음이 이해된다. 약학적으로 허용되는 산화방지제는, 비제한적으로, 나트륨 메타바이설파이트, 나트륨 티오설페이트, 아세틸시스테인, 부틸화된 하이드록시아니솔 및 부틸화된 하이드록시톨루엔을 포함한다. 유용한 보존제는, 비제한적으로, 벤즈알코늄 클로라이드, 클로로부탄올, 티머로살, 페닐머큐릭 아세테이트, 페닐머큐릭 니트레이트, 안정화된 옥시 클로로 조성물, 예컨대 퓨라이트(PURITE: 등록상표) 및 킬란트, 예컨대 DTPA 또는 DTPA-비스아미드, 칼슘 DTPA 및 CaNaDTPA-비스아미드를 포함한다. 약학 조성물에 유용한 등장성 조정제는, 비제한적으로, 염, 예컨대 나트륨 클로라이드, 칼륨 클로라이드, 만니톨 또는 글리세린 및 다른 약학적으로 허용되는 등장성 조정제를 포함한다. 약학 조성물은 염으로서 제공될 수 있고, 비제한적으로, 염산, 황산, 아세트산, 락트산, 타르타르산, 말산, 석신산 등을 비롯한 많은 산에 의해 형성될 수 있다. 염은 상응하는 유리 염기 형태보다 수성 또는 다른 양성자성 용매에 더욱 가용성인 경향이 있다. 상기 물질 및 약리학 분야에 공지된 다른 물질이 약학 조성물에 포함될 수 있음이 이해된다.

본원의 양상은 부분적으로 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법을 개시한다. 이러한 방법은 치료(트리파노소마 감염 후) 및 예방(트리파노소마 노출, 감염 또는 병리 전)을 포함한다. 예를 들어, 트리파노소마 감염에 대해 개체를 처치하는 치료 및 예방 방법은 개체에서 트리파노소마 감염의 가능성을 감소시키거나 억제하거나 제거하기 위한, 트리파노소마 감염에 대한 개인의 감수성을 감소시키거나 억제하거나 제거하기 위한, 개체에서 트리파노소마 감염을 감소시키거나 억제하거나 제거하기 위한, 증상, 이환률 및/또는 사망률을 감소시키거나 억제하거나 제거하기 위한, 또는 감염된 개체로부터 비감염된 개체로의 트리파노소마의 전염을 감소시키거나 억제하거나 제거하기 위한, 트리파노소마 감염 또는 병리를 갖거나 가질 위험이 있는 개체의 처치, 트리파노소마 감염을 갖는 개체의 치료, 및 트리파노소마 감염으로부터 개체를 보호하는 방법을 포함한다. 이러한 방법은 본원에 개시된 면역원성 조성물을 투여하여 트리파노소마 감염 또는 병리를 갖거나 가질 위험이 있는 개체를 치료적으로 또는 예방적으로 처치함(백신접종 또는 면역화)을 포함한다. 따라서, 방법은 트리파노소마 감염 또는 병리를 치료하거나, 개인에게 감염으로부터의 보호(예컨대, 예방적 보호)를 제공할 수 있다.

한 양태에서, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물을 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키기에 충분한 양으로 투여하고, 이에 의해 트리파노소마-기반 질병을 치료함을 포함한다. 본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다.

한 양태에서, 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마-기반 질병을 치료하는데 사용된다. 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 사용은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시킴으로써, 트리파노소마-기반 질병을 치료한다. 본 양태의 양상에서, 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키고, 이에 의해 트리파노소마-기반 질병을 치료하기에 충분한 양으로 투여된다. 본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나; 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여된다.

한 양태에서, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물을 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 투여하고, 이에 의해 트리파노소마-기반 질병을 치료함을 포함한다. 본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마에 대한 면역 반응을 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하기에 충분한 양으로 투여된다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나; 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여된다.

한 양태에서, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물을 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 보호하기에 충분한 양으로 투여하고, 이에 의해 트리파노소마-기반 질병을 치료함을 포함한다. 본 양태의 양상에서, 면역원성 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함한다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 면역화시키거나 백신접종하거나; 트리파노소마 감염 또는 병리에 대한 감수성을 감소시키거나 줄이거나 제한하거나 제어하거나 억제하기에 충분한 양으로 투여된다.

한 양태에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물은 트리파노소마-기반 질병을 치료하는데 사용된다. 본 양태의 한 양상에서, 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물은 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 사용된다.

트리파노소마-기반 질병은 병리생리학 효과가 트리파노소마의 존재에 기인하는 임의의 병태, 질병 또는 질환을 지칭한다. 2개의 상이한 유형의 트리파노소마가 존재하고, 이들의 생활 주기는 상이하다: 스테르코라리안(stercorarian) 종 및 살리바리안(salivarian) 종. 스테르코라리안은 트리아토미나에(Triatominae) 아과(가장 중요한 트리아토마 기생동물)의 곤충의 배설물에서 수용체로 전달되는 트리파노소마이다. 이러한 군은 트리파노소마 크루지, 트리파노소마 레위시(Trypanosoma lewisi), 트리파노소마 멜로파기움(Trypanosoma melophagium), 트리파노소마 나비아시(Trypanosoma nabiasi), 트리파노소마 란겔리(Trypanosoma rangeli), 트리파노소마 테일레리(Trypanosoma theileri), 트리파노소마 테오도리(Trypanosoma theodori)를 포함한다. 헤르페토소마(Herpetosoma) 아속은 트리파노소마 레위시 종을 포함하고, 쉬조트리파눔(Schizotrypanum) 아속은 트리파노소마 크루지를 함유한다. 살리바리안은 두토넬라(Duttonella), 트리파노준(Trypanozoon), 파이크노모나스(Pycnomonas) 및 난노모나스(Nannomonas)의 아속의 트리파노소마이다. 이러한 트리파노소마는 체체 파리(글로시나 종(Glossina spp.))의 타액에서 수용자에게 전달된다. 항원성 변이는 트리파노소마 브루체이에서 특히 널리 연구된 살리바리아에 의해 공유되는 특징이다. 트리파노준 아속은 트리파노소마 브루체이, 트리파노소마 로데시엔스(Trypanosoma rhodesiense) 및 트리파노소마 이퀴페르둠(Trypanosoma equiperdum) 종을 함유한다. 두토넬라 아속은 트리파노소마 비박스(Trypanosoma vivax) 종을 함유한다. 난노모나스는 트리파노소마 콘골렌스(Trypanosoma congolense)를 함유한다.

본 양태의 한 양상에서, 트리파노소마-기반 질병은 샤가스병이다. 본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마-기반 질병은 아프리카 수면병, 예컨대 비제한적으로, 동아프리카 수면병 및 서아프리카 수면병이다.

샤가스병 또는 아메리카 트리파노소마증(American trypanosomiasis)은 아메리카에서만 발견되는 곤충 벡터에 의해 동물 및 인간에 전염되는 기생충 트리파노소마 크루지에 의해 유발된다. 치료되지 않는 경우, 감염은 평생 지속되고, 생명을 위협할 수 있다. 중미 멕시코 및 남미 지방에서 8백만명의 사람들이 샤가스병을 갖는 것으로 추정되고, 이들 중 대부분은 이들이 감염된 것을 모른다. 또한, 라틴 아메리카의 지방으로부터 도시로 및 세계 다른 지역으로의 대규모 집단 이동은 지리적인 분포를 증가시켰고, 샤가스병의 역학을 변화시켰다. 예를 들어, 미국에서 샤가스병을 앓는 대부분의 사람들은 풍토성 국가에서 감염되었고, 현재 추정치는 트리파노소마 크루지 감염을 갖는 300,000명 초과의 사람들이 미국에 사는 것으로 나타났다.

트리파노소마 크루지는 흡혈 트리아토마 빈대에 의해 인간에게 전염될 수 있는 동물원성 감염병이다. 트리파노소마증에 대한 공통적인 침노린재(triatomine) 벡터는 트리아토마(Triatoma), 로드니우스(Rhodnius) 및 판스트론길루스(Panstrongylus) 속에 속한다. 트리아토마 빈대는 트리파노소마 크루지 기생충의 순환 파동편모형을 함유하는 인간 또는 동물 혈액 상에서 피딩함으로써 감염된다. 섭취된 파동편모형은, 기생충이 번식하고, 분화되고, 이어서 후장(감염성 미숙 파동편모형으로 분화되는 장소)으로 이동하는 벡터의 중장에서 위편모형으로 형질전환된다. 인간 또는 동물 숙주는, 감염된 트리아토미드 벡터가 혈분을 섭취한 후, 물린 부위 근처의 이의 배설물에서 파동편모형을 배변하고 방출할 때, 트리파노소마 크루지에 의해 감염될 수 있다. 파동편모형은 피부의 상처 또는 다른 틈을 통해, 섭취에 의해, 또는 완전한 점막, 예컨대 결막을 통해 숙주에 도입된다. 숙주 내부에서, 파동편모형은 접종 부위 근처의 세포에 침입하여 세포내 무편모형으로 분화된다. 무편모형은 이분열에 의해 번식하고, 파동편모형으로 분화되고, 이어서 혈류 파동편모형으로서 혈액 순환으로 방출된다. 파동편모형은 다양한 조직으로부터의 세포를 감염시키고, 새로운 감염 부위에서 세포내 무편모형으로 형질전환된다. 임상적인 표현은 이러한 감염 사이클로부터 생성될 수 있다. 혈류 파동편모형은 복제되지 않는다(아프리카 트리파노소마와 상이함). 복제는 기생충이 다른 세포에 도입되거나 다른 벡터에 의해 섭취될 때만 다시 시작한다. 샤가스병을 얻는 1차 수단이 벡터-계 전염을 통하는 것이지만, 트리파노소마 크루지는 또한 수혈에 의해 오염된 혈액 추출물을 통해, 감염된 공여체로부터 이식된 기관을 통해, 엄마로부터 아기로 태반을 통해(선천적), 오염된 식품 또는 음료의 섭취를 통해, 및/또는 우발적인 노출에 의해 전염될 수 있다.

샤가스병은 급성 및 만성 상태를 갖는다. 급성 샤가스병은 감염 직후 발생하고, 수주 또는 수개월 지속될 수 있고, 기생충은 순환하는 혈액에서 발견될 수 있다. 감염은 온화하거나 무증상일 수 있다. (기생충이 피부 또는 점막에 도입되는) 접종 부위 주위에 열 또는 종기가 존재할 수 있다. 드물게, 급성 감염은 심근 또는 뇌의 심각한 염증 및 뇌 주위의 라이닝(lining)을 야기할 수 있다. 급성 상태에 따라서, 대부분의 감염된 인간은 질병의 연장된 무증상 형태("만성 잠복")에 진입하고, 이 동안 혈액에서 소수의 기생충이 발견되거나 전혀 발견되지 않는다. 이러한 시간 동안, 대부분의 사람들은 이들의 감염을 인식하지 못한다. 많은 사람들은 평생 동안 무증상 상태로 남을 수 있고, 결코 샤가스-관련 증상을 발병하지 않는다. 그러나, 감염된 사람 중 추정된 20 내지 30%는 쇠약해지고, 종종 이들은 삶 전반에 걸쳐 생명을 위협하는 의학적인 문제를 발생시킨다. 만성 샤가스병의 합병증은 1) 심장 복합증, 예컨대 심장 비대(심근증), 혈액을 불량하게 펌핑하는 확장성 심장, 심부전, 심장 리듬 이상, 심박 이상 및 심장 정지(돌연사); 및/또는 2) 장 복합증, 예컨대 식도 비대(거대식도증), 식도 결장 비대(거대결장증), 식사의 어려움 또는 배변의 어려움을 포함할 수 있다. 억제된 면역계(예를 들어, AIDS 또는 화학요법에 기인함)를 갖는 사람들에서, 샤가스병은 순환하는 혈액에서 발견되는 기생충에 의해 재개될 수 있다. 이러한 발생은 잠재적으로 심각한 질병을 야기할 수 있다.

아프리카 수면병 또는 아프리카 트리파노소마증은 형태학적으로 식별할 수 없는 기생충 트리파노소마 브루체이의 2개의 아종에 의해 야기된다. 그러나, 이러한 질병의 임상적인 특징은 관련된 아종에 따라 변한다. 트리파노소마 브루체이 로데시엔스(서아프리카 수면병)는 동부 및 남동부 아프리카 지역에서 발견된다. 매년 수백건의 동아프리카 수면병의 사례가 세계보건기구(World Health Organization)에 보고된다. 인간 감염 사례의 95% 이상이 탄자니아, 우간다, 말라위 및 잠비아에서 발생한다. 야생 및 가축 동물은 감염의 1차 보유자이다. 야생 동물이 사냥꾼 및 동물 보호 구역의 방문자로의 산발성 전염의 원인으로 여겨지는 반면, 소는 새로운 지역으로의 질병의 퍼짐 및 국소적인 발발과 관련된다. 트리파노소마 브루체이 로데시엔스를 갖는 국제 여행자의 감염은 드물지만, 때때로 발생한다. 미국에서, 평균 1년에 1건의 사례가 진단된다. 미국에 유입된 수면병의 대부분의 사례는 동아프리카에서 사파리를 한 여행자에서 발생했다.

트리파노소마 브루체이 감비엔스(Trypanosoma brucei gambiense)(서아프리카 수면병)는 주로 중앙아프리카 및 서아프리카의 제한된 지역에서 발견된다. 아프리카에서 대부분의 수면병은 이러한 형태의 기생충에 의해 유발된다. 수면병의 유행은 과거에 중요한 공중 보건 문제였지만, 질병은 현재 합리적으로 잘 제어되고 있고, 7,000 내지 10,000건의 사례가 최근에 매년 보고되었다. 인간 감염의 95% 이상의 사례가 콩고민주공화국, 앙골라, 중앙아프리카공화국, 차드 및 북부 우간다에서 발견된다. 기생충이 종종 가축 동물에서 발견될 수 있지만, 인간은 감염의 중요한 보유자이다. 미국에 유입된 감염은 매우 드물고, 대부분의 사례는 귀국한 미국 여행자보다는 이민온 아프리카 국민들에서 발생하였다.

트리파노소마 브루체이 아종은 둘 다 체체 파리(글로시나 종)의 자상에 의해 전염된다. 체체 파리는 트리파노소마 브루체이 기생충의 순환하는 파동편모형을 함유하는 인간 또는 동물 혈액 상에서 피딩에 의해 감염된다. 파리의 중장에서, 섭취된 파동편모형은 프로사이클릭(procyclic) 파동편모형으로 형질전환되고, 이분열에 의해 번식하고, 중장을 떠나고, 위편모형으로 형질전환된다. 위편모형은 파리의 타액선에 도달하고, 이분열에 의해 계속 번식하고, 여기서 미숙 파동편모형으로 형질전환된다. 파리에서의 사이클은 약 3주 걸린다. 인간 또는 동물 숙주는, 숙주 상에서 혈분 중에, 감염된 체체 파리가 트리파노소마 브루체이의 미숙 파동편모형을 함유하는 타액을 피부 조직에 주입할 때, 감염된다. 기생충은 림프계로 도입되고, 혈류 내로 통과한다. 숙주 내에서, 이들은 혈류 파동편모형으로 형질전환되고, 신체 전반의 다른 부위로 전달되고, 다른 혈액 유체(예컨대, 림프액, 척수액)에 도달하고, 이분열에 의해 복제를 계속한다. 감염되는 1차 수단이 벡터-계 전염을 통하는 것이지만, 트리파노소마 브루체이는 또한 수혈에 의해 오염된 혈액 추출물을 통해, 감염된 공여체로부터 이식된 기관을 통해, 엄마로부터 아기로 태반을 통해(선천적), 오염된 식품 또는 음료의 섭취를 통해, 성교를 통해 및/또는 우발적인 노출에 의해 전염될 수 있다.

인간 아프리카 수면병의 임상적인 과정은 2개의 단계를 갖는다. 제1 단계에서, 기생충은 말초 순환에서 발견되지만, 아직 중추신경계에 침입하지 않는다. 일단 기생충이 혈액-뇌 관문을 가로지르고 중추신경계를 감염시키면, 질병은 제2 단계에 진입한다. 아종은 상이한 질병 진행 속도를 가지고, 임상적인 특징은 감염을 야기하는 기생충의 형태(트리파노소마 브루체이 로데시엔스 또는 트리파노소마 브루체이 감비엔스)에 따라 변한다. 그러나, 치료되지 않으면, 각각의 형태에 의한 감염은 결국 혼수상태 및 사망을 야기할 것이다. 트리파노소마 브루체이 로데시엔스 감염(동아프리카 수면병)은 신속하게 진행된다. 일부 환자에서, 큰 상처(하감)가 체체 파리에 물린 부위에서 발생할 것이다. 대부분의 환자는 열, 두통, 근육 및 관절 통증 및 림프질 비대가 감염성 자상의 1 내지 2주 내에 발생할 것이다. 일부 환자는 발진이 발생한다. 감염 후 수주에, 기생충은 중추신경계에 침입하고, 결국 정신적인 열화 및 다른 신경학적 문제를 야기한다. 통상적으로 수개월 내에 사망한다. 트리파노소마 브루체이 감비엔스 감염(서아프리카 수면병)은 더욱 천천히 진행한다. 먼저, 단지 온화한 증상이 존재할 수 있다. 감염된 사람은 간헐적인 열, 두통, 근육 및 관절 통증, 및 으스스한 느낌을 가질 수 있다. 피부 가려움, 팽창한 림프절 및 체중 감소가 발생할 수 있다. 통상적으로, 1 내지 2년 후, 인격 변화, 야간 수면 장애를 수반한 주간 졸림증, 및 진행성 혼란을 갖는 중추신경계 관련의 증거가 존재한다. 다른 신경학적 신호, 예컨대 부분적인 마비 또는 균형 또는 보행의 문제, 및 호르몬 불균형이 발생할 수 있다. 비치료된 감염의 과정은 드물게 6 내지 7년보다 길게 진행되고, 더욱 종종 약 3년 내에 사망한다.

본 발명의 양상은 부분적으로 개체를 제공한다. 개체는 인간을 비롯한 임의의 포유동물을 포함하고, 인간은 환자일 수 있다.

본원에 개시된 방법은 트리파노소마-기반 질병의 처치를 포함한다. 처치는 임의의 치료적 또는 이로운 효과, 예컨대 특정 개체에 제공된 임의의 객관적인 또는 개별적으로 측정가능한 또는 검출가능한 개선 또는 이익을 포함한다. 치료적 또는 이로운 효과는 트리파노소마 감염, 증식, 복제 또는 병리에 의해 유발되거나 연관된 모든 또는 임의의 구체적인 불리한 병태, 증상, 질환, 병, 질병 또는 복합증의 완전한 제거일 수 있지만 그럴 필요는 없다. 따라서, 만족스러운 임상적인 종말점은, 단기간 또는 장기간에 걸친, 트리파노소마 감염, 증식, 복제 또는 병리에 의해 유발되거나 연관된 불리한 병태, 증상, 질환, 병, 질병 또는 복합증의 점증적인 개선 또는 부분적인 감소, 또는 트리파노소마 감염, 증식, 복제 또는 병리에 유발되거나 연관된 하나 이상의 병태, 불리한 증상, 질환, 병, 질병 또는 복합증의 억제, 감소, 경감, 억제, 예방, 제한 또는 제어가 존재할 때, 달성된다.

본 양태의 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 감염, 증식, 복제 또는 병리를 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 제한하거나 지연하거나 예방할 수 있다. 본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 병원균 수 또는 역가를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 트리파노소마 병원균 증식 또는 복제를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 합성된 트리파노소마 단백질의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 복제된 트리파노소마 병원균 핵산의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제할 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 감염, 증식 또는 복제 또는 병리에 의해 유발되거나 이와 연관된 하나 이상의 불리한 병태, 증상, 질환, 병, 질병 또는 합병증을 감소시키거나 줄이거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한할 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 감염 또는 병리, 또는 트리파노소마 감염, 증식 또는 복제 또는 병리에 의해 유발되거나 이와 연관된 하나 이상의 불리한 증상, 질환, 병, 질병 또는 합병증으로부터 개체의 회복을 개선하거나 촉진하거나 용이하게 하거나 강화시키거나 증가시키거나 재촉할 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 감염, 증식, 복제 또는 병리에 의해 유발되거나 이와 연관된 트리파노소마 감염, 병리, 불리한 병태, 증상, 질환, 병, 질병 또는 합병증을 안정화시킬 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 감염된 개체로부터 비감염된 개체로의 트리파노소마 병원균의 전염을 감소시키거나 줄이거나 억제하거나 저해하거나 제한하거나 제어할 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 본원에 개시된 치료 또는 사용 방법은 트리파노소마 감염 또는 병리를 갖거나 가질 위험이 있는 치료하는데 사용되는 다른 약물 또는 다른 약품과 같은 동반 또는 후속 치료의 필요, 투여 빈도 또는 양을 감소시키거나 제거할 수 있다. 예를 들어, 부속 치료법의 양의 감소, 예를 들어, 트리파노소마 감염 또는 병리를 위한 치료, 또는 백신접종 또는 면역화 프로토콜의 감소 또는 경감은 이로운 효과로 고려된다. 또한, 개체에 보호를 제공하기 위한 개체의 백신접종 또는 면역화에 사용되는 트리파노소마 항원의 양의 감소 또는 경감은 이로운 효과로 간주된다.

본원의 양상은 부분적으로 본원에 개시된 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물을 투여함을 제공한다. 본원에 사용된 용어 "투여"는 트리파노소마 항원 또는 본원에 개시된 면역원성 조성물을 개체에 제공하여 임상적으로, 치료적으로 또는 실험적으로 유리한 결과를 잠재적으로 야기하는 임의의 전달 기전을 지칭한다. 본원에 개시된 조성물을 개체에 투여하는데 사용된 실제 전달 기전은, 비제한적으로, 트리파노소마-기반 질병의 유형, 트리파노소마-기반 질병의 위치, 트리파노소마-기반 질병의 원인, 트리파노소마-기반 질병의 중증도, 트리파노소마-기반 질병에 요구되는 경감도, 트리파노소마-기반 질병에 요구되는 경감의 지속시간, 사용된 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물, 사용된 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 배설 속도, 사용된 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 약동학, 면역원성 조성물에 포함된 다른 화합물의 성질, 구체적인 투여 경로, 개체의 구체적인 특징, 병력 및 위험 인자, 예컨대 연령, 중량, 일반적인 건강 등 또는 이들의 임의의 조합을 비롯한 인자를 고려하여 당업자에 의해 결정될 수 있다.

본원에 개시된 조성물은 세포 섭취 접근법을 사용하여 개체에게 투여될 수 있다. 세포 섭취 접근법을 사용하는 본원에 개시된 조성물의 투여는 다양한 장 또는 비경구 접근법, 예컨대, 비제한적으로, 임의의 허용되는 형태, 예컨대 정제, 액체, 캡슐, 분말, 흡입제 등의 경구 투여; 임의의 형태, 예컨대 점적, 스프레이, 크림, 겔 또는 연고의 국소 투여; 임의의 허용되는 형태, 예컨대 정맥 주사, 정맥 주입, 동맥 주사, 동맥 주입, 및 맥관 구조로의 카테터 적하의 혈관내 투여; 임의의 허용되는 형태, 예컨대, 복강내 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 피하 주입, 안구내 주사, 망막 주사 또는 망막하 주사 또는 경막외 주사의 조직 주위 및 조직내 투여; 임의의 허용되는 형태, 예컨대, 카테터 적하의 소포내 투여; 및 설치 장치, 예컨대, 임플란트, 패치, 펠릿, 카테터, 삼투압 펌프, 좌제, 생분해성 전달 시스템, 비-생분해성 전달 시스템 또는 다른 이식된 연장 또는 저속 방출 시스템을 포함한다. 생체분해성 중합체 및 사용 방법의 예시적인 목록은, 예컨대 문헌[Handbook of Biodegradable Polymers (Abraham J. Domb et al., eds., Overseas Publishers Association, 1997)]에 기술되어 있다.

트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 트리파노소마-기반 질병을 치료하기에 충분한 양으로 투여된다. 본 양태의 양상에서, 투여된 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 양은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키기에 충분한 양, 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 면역화시키거나 백신접종시키기에 충분한 양, 또는 트리파노소마 감염 또는 병리에 대해 개체를 보호하기에 충분한 양이다. 본원에 사용된 용어 "충분한 양"은 "효과량", "효과적인 투약량", "치료 효과량" 또는 "치료적으로 효과적인 투약량"을 포함하고, 목적하는 치료 효과를 달성하는데 필수적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 최소량을 지칭하고, 트리파노소마 감염 또는 병리와 관련된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키거나 억제하는데 충분한 양을 포함한다.

본 양태의 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을, 예컨대 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상 또는 적어도 100%만큼 감소시키거나 억제한다. 본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을, 예컨대 10% 이하, 20% 이하, 30% 이하, 40% 이하, 50% 이하, 60% 이하, 70% 이하, 80% 이하, 90% 이하 또는 100% 이하만큼 감소시키거나 억제한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을, 예컨대 약 10% 내지 약 100%, 약 10% 내지 약 90%, 약 10% 내지 약 80%, 약 10% 내지 약 70%, 약 10% 내지 약 60%, 약 10% 내지 약 50%, 약 10% 내지 약 40%, 약 20% 내지 약 100%, 약 20% 내지 약 90%, 약 20% 내지 약 80%, 약 20% 내지 약 70%, 약 20% 내지 약 60%, 약 20% 내지 약 50%, 약 20% 내지 약 40%, 약 30% 내지 약 100%, 약 30% 내지 약 90%, 약 30% 내지 약 80%, 약 30% 내지 약 70%, 약 30% 내지 약 60% 또는 약 30% 내지 약 50%만큼 감소시키거나 억제한다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을, 예컨대 1주 이상, 1개월 이상, 2개월 이상, 3개월 이상, 4개월 이상, 5개월 이상, 6개월 이상, 7개월 이상, 8개월 이상, 9개월 이상, 10개월 이상, 11개월 이상 또는 12개월 이상 동안 감소시키거나 억제한다.

개체에게 투여되는 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 실질적인 효과량은, 비제한적으로, 트리파노소마-기반 질병의 유형, 트리파노소마-기반 질병의 위치, 트리파노소마-기반 질병의 원인, 트리파노소마-기반 질병의 중증도, 트리파노소마-기반 질병에 요구되는 경감도, 트리파노소마-기반 질병에 요구되는 경감의 지속시간, 사용되는 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물, 사용된 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 배출 속도, 사용된 구체적인 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 약동학, 면역원성 조성물에 포함된 다른 화합물의 성질, 사용된 구체적인 투여 경로, 개체의 구체적인 특징, 병력 및 위험 인자, 예컨대, 연령, 체중, 전반적인 건강 등, 또는 이들의 임의의 조합을 고려하여 당업자에 의해 결정될 수 있다. 추가적으로, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 반복된 투여가 사용되는 경우, 실질적인 치료 효과량은, 비제한적으로, 투여 빈도, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 반감기 또는 이들의 임의의 조합을 비롯한 인자에 따라 추가로 변할 것이다. 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량이 인간으로의 투여 전에 동물 모델을 사용하는 시험관내 검정 및 생체내 투여 연구로부터 외삽될 수 있다. 필수적인 효과량의 광범위한 변형이 다양한 투여 경로의 상이한 효능에 비추어 기대된다. 예를 들어, 경구 투여는 일반적으로 정맥내 또는 유리체내 주사에 의한 투여보다 높은 수준의 투약량 수준을 요구하는 것으로 기대될 것이다. 이러한 투약량 수준의 변동은 당업자에게 널리 공지된 최적화의 표준 경험적 관례를 사용하여 조정될 수 있다. 정확한 치료 효과적인 투약량 수준 및 패턴은 바람직하게는 상기 확인된 인자를 고려하여 주치의에 의해 결정된다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 일반적으로 약 0.001 내지 약 100 mg/kg/일이다. 본 양태의 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 0.001 mg/kg/일 이상, 0.01 mg/kg/일 이상, 0.1 mg/kg/일 이상, 1.0 mg/kg/일 이상, 5.0 mg/kg/일 이상, 10 mg/kg/일 이상, 15 mg/kg/일 이상, 20 mg/kg/일 이상, 25 mg/kg/일 이상, 30 mg/kg/일 이상, 35 mg/kg/일 이상, 40 mg/kg/일 이상, 45 mg/kg/일 이상 또는 50 mg/kg/일 이상이다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.001 내지 약 10 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 15 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 20 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 25 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 30 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 35 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 40 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 45 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 50 mg/kg/일, 약 0.001 내지 약 75 mg/kg/일 또는 약 0.001 내지 약 100 mg/kg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.01 내지 약 10 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 15 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 20 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 25 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 30 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 35 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 40 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 45 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 50 mg/kg/일, 약 0.01 내지 약 75 mg/kg/일 또는 약 0.01 내지 약 100 mg/kg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.1 내지 약 10 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 15 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 20 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 25 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 30 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 35 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 40 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 45 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 50 mg/kg/일, 약 0.1 내지 약 75 mg/kg/일 또는 약 0.1 내지 약 100 mg/kg/일일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 1 내지 약 10 mg/kg/일, 약 1 내지 약 15 mg/kg/일, 약 1 내지 약 20 mg/kg/일, 약 1 내지 약 25 mg/kg/일, 약 1 내지 약 30 mg/kg/일, 약 1 내지 약 35 mg/kg/일, 약 1 내지 약 40 mg/kg/일, 약 1 내지 약 45 mg/kg/일, 약 1 내지 약 50 mg/kg/일, 약 1 내지 약 75 mg/kg/일 또는 약 1 내지 약 100 mg/kg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 약 5 내지 약 10 mg/kg/일, 약 5 내지 약 15 mg/kg/일, 약 5 내지 약 20 mg/kg/일, 약 5 내지 약 25 mg/kg/일, 약 5 내지 약 30 mg/kg/일, 약 5 내지 약 35 mg/kg/일, 약 5 내지 약 40 mg/kg/일, 약 5 내지 약 45 mg/kg/일, 약 5 내지 약 50 mg/kg/일, 약 5 내지 약 75 mg/kg/일 또는 약 5 내지 약 100 mg/kg/일일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은 일반적으로 약 0.001 내지 약 100 mg/일이다. 본 양태의 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 0.001 mg/일 이상, 0.01 mg/일 이상, 0.1 mg/일 이상, 1.0 mg/일 이상, 5.0 mg/일 이상, 10 mg/일 이상, 15 mg/일 이상, 20 mg/일 이상, 25 mg/일 이상, 30 mg/일 이상, 35 mg/일 이상, 40 mg/일 이상, 45 mg/일 이상 또는 50 mg/일 이상일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.001 내지 약 10 mg/일, 약 0.001 내지 약 15 mg/일, 약 0.001 내지 약 20 mg/일, 약 0.001 내지 약 25 mg/일, 약 0.001 내지 약 30 mg/일, 약 0.001 내지 약 35 mg/일, 약 0.001 내지 약 40 mg/일, 약 0.001 내지 약 45 mg/일, 약 0.001 내지 약 50 mg/일, 약 0.001 내지 약 75 mg/일 또는 약 0.001 내지 약 100 mg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.01 내지 약 10 mg/일, 약 0.01 내지 약 15 mg/일, 약 0.01 내지 약 20 mg/일, 약 0.01 내지 약 25 mg/일, 약 0.01 내지 약 30 mg/일, 약 0.01 내지 약 35 mg/일, 약 0.01 내지 약 40 mg/일, 약 0.01 내지 약 45 mg/일, 약 0.01 내지 약 50 mg/일, 약 0.01 내지 약 75 mg/일 또는 약 0.01 내지 약 100 mg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 0.1 내지 약 10 mg/일, 약 0.1 내지 약 15 mg/일, 약 0.1 내지 약 20 mg/일, 약 0.1 내지 약 25 mg/일, 약 0.1 내지 약 30 mg/일, 약 0.1 내지 약 35 mg/일, 약 0.1 내지 약 40 mg/일, 약 0.1 내지 약 45 mg/일, 약 0.1 내지 약 50 mg/일, 약 0.1 내지 약 75 mg/일 또는 약 0.1 내지 약 100 mg/일일 수 있다.

본 양태의 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 1 내지 약 10 mg/일, 약 1 내지 약 15 mg/일, 약 1 내지 약 20 mg/일, 약 1 내지 약 25 mg/일, 약 1 내지 약 30 mg/일, 약 1 내지 약 35 mg/일, 약 1 내지 약 40 mg/일, 약 1 내지 약 45 mg/일, 약 1 내지 약 50 mg/일, 약 1 내지 약 75 mg/일 또는 약 1 내지 약 100 mg/일일 수 있다. 본 양태의 또 다른 양상에서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 효과량은, 예컨대 약 5 내지 약 10 mg/일, 약 5 내지 약 15 mg/일, 약 5 내지 약 20 mg/일, 약 5 내지 약 25 mg/일, 약 5 내지 약 30 mg/일, 약 5 내지 약 35 mg/일, 약 5 내지 약 40 mg/일, 약 5 내지 약 45 mg/일, 약 5 내지 약 50 mg/일, 약 5 내지 약 75 mg/일 또는 약 5 내지 약 100 mg/일일 수 있다.

투약은 단일 투약량 또는 누적량(연속 투약)일 수 있고, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 예를 들어, 트리파노소마-기반 질병은 효과량의 본원의 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물의 1회 투여를 포함할 수 있다. 비제한적인 예로서, 효과량의 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은, 예컨대 단일 주사 또는 디포지션으로서, 개체에게 1회 투여될 수 있다. 다르게는, 트리파노소마-기반 질병의 치료는 일정 기간의 시간, 예컨대, 1일 1회, 몇일에 1회, 1주 1회, 1개월 1회 또는 1년 1회에 걸쳐 수행된 효과량의 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물의 복수 투여를 포함할 수 있다. 비제한적인 예로서, 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 1년에 1, 2, 3, 4, 5 또는 6회 개체에게 투여될 수 있다. 투여 타이밍은 개체의 증상의 중증도와 같은 인자에 따라 개체마다 변할 수 있다. 예를 들어, 효과량의 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물은 불명확한 시간 동안 3개월마다 1회 또는 개체가 더 이상 치료법을 필요로 하지 않을 때까지 투여될 수 있다. 당업자는 개체의 병태가 치료 과정 전반에 걸쳐 모니터링될 수 있고, 투여되는 효과량의 트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물이 이에 따라 조정될 수 있음을 인식할 것이다.

트리파노소마 항원 및/또는 본원에 개시된 면역원성 조성물을 포함하는 조성물은 또한 치료의 전반적인 치료 효과를 증가시키는 다른 치료 화합물과 조합으로 개체에게 투여될 수 있다. 적응증을 치료하기 위한 다수의 화합물의 용도는 부작용의 존재를 감소시키면서 유리한 효과를 증가시킬 수 있다.

본원의 양상은 다음과 같이 기술될 수 있다:

1. 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12; 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖는 펩티드; 또는 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12로부터의 7개 이상의 연속적인 아미노산을 갖는 펩티드를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 트리파노소마 항원.

2. 제1 양태에 있어서, 펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 1개 이상의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.

3. 제1 양태에 있어서, 펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 1개 이상의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.

4. 제1 양태에 있어서, 펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 11개 이하의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.

5. 제1 양태에 있어서, 펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 11개 이하의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.

6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 양태에 따른 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진 면역원성 조성물.

7. 제6 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 6(CH47)을 포함하는, 면역원성 조성물.

8. 제6 양태 또는 제7 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 9(CH77)를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

9. 제6 양태 내지 제8 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5(CH37)를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

10. 제6 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5(CH37) 및 서열번호 9(CH77)를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

11. 제6 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47) 및 서열번호 9(CH77)를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

12. 제6 양태 내지 제11 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

13. 제6 양태 또는 제7 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2(CH30), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

14. 제6 양태 또는 제7 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2(CH30), 서열번호 5(CH37), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

15. 제6 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2(CH30), 서열번호 5(CH37), 서열번호 6(CH47), 서열번호 7(CH69), 서열번호 8(CH72), 서열번호 9(CH77) 및 서열번호 11(CH84)을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 면역원성 조성물.

16. 제6 양태 내지 제15 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 하나 이상의 트리파노소마 항원이 각각 약 1 내지 약 1,000 mg의 양으로 존재하는, 면역원성 조성물.

17. 제6 양태 내지 제16 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 하나 이상의 항원보강제를 추가로 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진 면역원성 조성물.

18. 제17 양태에 있어서, 하나 이상의 항원보강제가 각각 약 100 내지 약 1,500 μg/mL의 양으로 존재하는, 면역원성 조성물.

19. 제6 양태 내지 제18 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진 면역원성 조성물.

20. 제6 양태 내지 제18 양태 중 어느 한 양태에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키는데 충분한 양으로 투여하여 트리파노소마-기반 질병을 치료하는 단계를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.

21. 제20 양태에 있어서, 면역원성 조성물이 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나, 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

22. 제20 양태 또는 제21 양태에 있어서, 면역원성 조성물이 트리파노소마 병원균 수 또는 역가를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 트리파노소마 병원균 증식 또는 복제를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 합성된 트리파노소마 단백질의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 복제된 트리파노소마 병원균 핵산의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

23. 제20 양태 내지 제22 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 면역원성 조성물의 투여가 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 10% 이상만큼 감소시키는, 치료 방법.

24. 제20 양태 내지 제23 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 면역원성 조성물의 투여가 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 1주 이상만큼 감소시키는, 치료 방법.

25. 제20 양태 내지 제24 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 치료 방법.

26. 트리파노소마-기반 질병을 치료하기 위한, 제1 양태 내지 제5 양태 중 어느 한 양태에 따른 α-트리파노소마 항원 또는 제6 양태 내지 제18 양태 중 어느 한 양태에 따른 면역원성 조성물의 용도.

27. 제1 양태 내지 제5 양태 중 어느 한 양태에 따른 트리파노소마 항원 또는 제6 양태 내지 제19 양태 중 어느 한 양태에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 투여하여 트리파노소마-기반 질병을 치료하는 단계를 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.

28. 제1 양태 내지 제5 양태 중 어느 한 양태에 따른 트리파노소마 항원 또는 제6 양태 내지 제19 양태 중 어느 한 양태에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 보호하기에 충분한 양으로 투여함을 포함하거나 이들로 본질적으로 이루어지거나 이들로 이루어진, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.

29. 제27 양태 또는 제28 양태에 있어서, 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마에 대한 면역 반응을 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

30. 제27 양태 내지 제29 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

31. 제27 양태 내지 제30 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 감염 또는 병리에 대한 감수성을 감소시키거나 줄이거나 제한하거나 제어하거나 억제하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

32. 제27 양태 내지 제31 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나, 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.

33. 제27 양태 내지 제32 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 치료 방법.

34. 약제의 제조를 위한, 제1 양태 내지 제5 양태 중 어느 한 양태에 따른 트리파노소마 항원의 용도.

35. 약제의 제조를 위한, 제6 양태 내지 제18 양태 중 어느 한 양태에 따른 면역원성 조성물의 용도.

36. 제34 양태 또는 제35 양태에 있어서, 트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 용도.

실시예

하기 비제한적인 실시예는 단지 본원에 개시된 대상발명의 더욱 완전한 이해를 용이하게 하기 위한 설명적인 목적으로 제공된다. 이러한 예는 트리파노소마 항원 및/또는 면역원성 조성물에 속하는 것들 또는 트리파노소마-기반 질병의 치료를 위한 방법 및 용도를 비롯한 본원에 기술된 임의의 양태를 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다.

실시예 1

트리파노소마 펩티드의 동정

단백질 서열 펩티드 내의 T 세포 반응성 에피토프를 예측할 수 있는 컴퓨터 알고리즘을 사용하여 트리파노소마 항원을 동정하였다. 이러한 인-실리코(in-silico) 모델에서, 가능한 많은 단백질 서열 및 많은 상이한 균주를 트리파노소마 병원균으로부터 모았다. 이어서, 특정 단백질을 위한 이용가능한 서열을 클러스탈(Clustal)을 사용하여 정렬하였고, 공통 서열을 잘뷰(Jalview)를 사용하여 생성하였다. 이어서, 이러한 서열을 모든 가능한 T 세포 반응성 에피토프를 예측했던 알고리즘으로 업로드하였다. 많은 수의 에피토프를 함유하는 영역으로부터의 펩티드 서열을 동정하였고, 이러한 고도 T 세포 면역원성 영역을 상이한 균주 중에서 보존에 대해 추가로 분석하였다. 연속적인 아미노산이 발견된 모든 다른 서열 중에서 70% 이상의 서열 동일성을 공유하는, 길이가 20 내지 40개 아미노산인 보존된 펩티드 서열을 선택하고 추가로 분석하였다. 예를 들어, 백신접종 후 자가면역 반응을 피하기 위하여, 이러한 보존된 펩티드 서열을 평가하여 이러한 서열이 다른 인간 및 뮤린 단백질 서열과 유의한 동일성을 공유하지 않았음을 확인하였다. 또한, 이러한 보존된 펩티드 서열을 평가하여 이러한 서열이 F-moc 화학에 의해 합성적으로 제조될 수 있음을 확인하였다.

이러한 접근법을 사용하여, 상이한 항원으로부터의 총 452개 펩티드를 동정하였다. 이러한 펩티드를 예측된 에피토프의 수를 기준으로 랭킹하고, 이러한 분석으로부터 상위 100개 펩티드를 제조의 실행가능성에 대해 평가하였다. 궁극적으로, 12개의 후보 펩티드를 펩디드가 함유한 예측된 에피토프의 수 및 펩티드 제조의 실행가능성에 따라 동정하였다. 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10, 서열번호 11, 서열번호 12의 아미노산 서열을 갖는 펩티드를 각각 우수 제조 관리기준(Good Manufacturing Practice: GMP)에 따라 Fmoc 화학(바켐 아게(Bachem AG), 스위스)에 의해 제조하였다. 서열번호 1(CH9)은 트리파노소마 크루지로부터의 파라플라겔라 막대 단백질(paraflagelar rod protein)의 잔기 60 내지 99에 상응하는 40개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 2(CH30)는 트리파노소마 크루지로부터의 ADP 리보실화 인자의 잔기 1 내지 30에 상응하는 30개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 3(CH32)은 트리파노소마 크루지로부터의 트리파레독신 단백질의 잔기 1 내지 32에 상응하는 32개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 4(CH36)는 트리파노소마 크루지로부터의 글루코스 6 포스페이트 이소머라제 단백질의 잔기 564 내지 588에 상응하는 25개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 5(CH37)는 트리파노소마 크루지로부터의 피루베이트 포스페이트 다이키나제 단백질의 잔기 564 내지 588에 상응하는 39개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 6(CH47)은 트리파노소마 크루지로부터의 Tcp2b 단백질의 잔기 1 내지 34에 상응하는 34개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 7(CH69)은 트리파노소마 크루지로부터의 DNA 토포이소머라제 2 단백질의 잔기 441 내지 475에 상응하는 35개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 8(CH72)은 트리파노소마 크루지로부터의 포스포인시티드-특이적 포스포리파제 C 단백질의 잔기 116 내지 145에 상응하는 30개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 9(CH77)는 트리파노소마 크루지로부터의 다이하이드로오로테이트 탈수소효소 단백질의 잔기 108 내지 140에 상응하는 33개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 10(CH82)은 트리파노소마 크루지로부터의 히스톤 H3 단백질의 잔기 43 내지 78에 상응하는 36개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 11(CH84)은 트리파노소마 크루지로부터의 AGP2b2 단백질의 잔기 36 내지 68에 상응하는 33개 아미노산 펩티드이다. 서열번호 12(CH93)는 트리파노소마 크루지로부터의 Poly-A 결합 단백질의 잔기 514 내지 544에 상응하는 31개 아미노산 펩티드이다. 이러한 서열을 미국 국립생물정보센터(National Centre for Biotechnology Information: NCBI) 데이터베이스(2006년 1월)에서 이용가능한 모든 트리파노소마 단백질 서열의 면역원성 분석 및 다중 서열(ClustalW)을 통해 인-실리코 동정하였다. 각각의 폴리펩티드는 5개 초과의 인간 T 세포 에피토프를 함유하는 높은 서열 보존(70% 이상)의 짧은 영역을 나타낸다.

실시예 2

개별적인 트리파노소마 펩티드에 대한 사이토킨 반응

동정된 펩티드의 생체내 면역원성을, 서열, 또는 높은 IgG2a 역가를 유도하는 펩티드에 대한 시험관내 노출 후에 백신접종된 동물의 비장세포에서 IFN-γ의 생산에 의해 평가하였다. BALB/c 마우스를 10 nmol의 각각의 펩티드로 1일에 면역화시키고, 15일에 효능촉진제를 사용하고, 21일에 비장의 단리 및 말단 출혈을 수행하였다.

울타리 안에서 사육된 BALB/c 마우스(즉, 병원균 부재)(연구 개시시 7 내지 9주령)를 각각 6 마리 동물(3 마리 수컷/3 마리 암컷)을 갖는 3개의 군으로 나누었다. 급성 샤가스병에 대한 모델을 제공하므로, BALB/c 마우스를 본 연구를 위해 선택하였다. 군 A 마우스에 하기 펩티드의 10 nmol/펩티드 등몰 혼합물을 투여하였다: CH9(서열번호 1), CH30(서열번호 2). CH32(서열번호 3), CH36(서열번호 4), CH37(서열번호 5) 및 CH47(서열번호 6). 군 B 마우스에 하기 펩티드의 10 nmol/펩티드 등몰 혼합물을 투여하였다: CH69(서열번호 7), CH72(서열번호 8), CH77(서열번호 9), CH82(서열번호 10) 및 CH84(서열번호 11). 군 C 마우스에 대조군으로서 비-관련된 펩티드의 10 nmol/펩티드 등몰 혼합물을 투여하였다. 모든 동물을 1일에 꼬리의 기부에서 피하로 면역화시키고, 15일에 효능촉진제를 제공하였다. 21일에 모든 동물을 도태시키고, 비장 및 혈청을 분석을 위해 수집하였다.

T 세포 반응을 다음과 같이 사이토킨 ELISA로 평가하였다. 마우스 비장을 세포 여과기를 통해 적절히 압축하고, 적혈구를 적혈구 용해 완충액(9부의 0.16 M NH₄Cl 및 1부의 0.17 M 트리스(Tris), pH 7.2)으로 제거하였다. 각각의 실험 군으로부터의 비장세포 현탁액을 96-웰 플레이트에서 50 IU/50 μg/mL의 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FCS가 보충되고 각각의 매질 단독, 콘카나발린 A(Con A)(5 μg/mL), 단일 폴리에피토프 펩티드(2 μM)를 함유하는 RPMI-1640 중 4 x 10⁶ 세포/웰의 밀도로 평판배양하였다. 48시간의 항온처리 후, 상청액을 수집하고, 마우스 사이토킨 ELISA 키트(비디 바이오사이언시스(BD Biosciences))를 사용하여 IFN-γ 및 IL-4 생산에 대해 분석하여 면역 반응의 유도를 평가하였다. 검정을 위한 검출의 역치는 IFN-γ에 대해 31.25 pg/mL 및 IL-4에 대해 7.81 pg/mL였다. 반응을 샤가스 펩티드로 면역화된 군과 이들 각각의 대조군 사이의 사이토킨 생산(pg/mL)의 차이로서 도표화하였다. 모든 군의 동물은 1,000 pg/mL 초과의 IFN-γ 수준 및 200 pg/mL 초과의 IL-4 수준으로 Con A에 반응하였다. 동물은 자발적인 증식을 나타냈고, 모든 매질 단독 판독치는 IFN-γ 및 IL-4 둘 다에 대한 검출의 역치보다 작거나 역치 근처이었다.

예측된 바와 같이, Con A 비장세포의 비-특이적 자극에 의해 관찰된 분비와 비교하여 다양한 펩티드에 대한 반응에서 IL-4는 거의 또는 전혀 분비되지 않았다(도 1a 및 1b). IFN-γ 분비에 대하여, 결과는 암컷이 수컷보다 큰 양의 IFN-γ를 분비함으로써 반응하는 사실을 강조한다. 펩티드 CH9, CH47, CH77, CH82 및 CH84는 암컷에서 IFN-γ 분비를 유도하지만 수컷에서는 유도하지 않는다(도 1c 및 1d). 한편, CH72는 암컷보다 수컷에서 유사한 적당한 IFN-γ 분비를 유도하였고, 성별 둘 다에서 유사한 강한 반응을 유도하였다(도 1d). 이러한 결과는, 트리파노소마 크루지 감염에 대한 성별의 상이한 감수성 및 수컷과 암컷 사이의 상이한 면역 반응을 고려하면, 매우 흥미롭다. IL-4 생산의 부재 하에 리콜 항원에 대한 시험관내 노출 후에 백신접종된 BALB/c 마우스의 비장세포에 의한 IFN-γ의 생산은 샤가스 펩티드에 의한 면역화가 Th1 반응을 유도함을 명백히 나타낸다. BALB/c 마우스에서 CH30, CH32, CH36 및 CH37에 대한 반응의 부재는 이러한 서열로부터의 에피토프 생산의 상당히 감소된 속도를 반영할 수 있다(즉, 서열은 열화에 대한 내성이 있다).

상기 펩티드에 의한 백신접종에 의해 유도된 면역 반응을 추가로 분석하기 위하여, 각각의 펩티드에 특이적인 총 Ig 역가를 모든 군의 동물의 혈청에서 측정하였다. ELISA 96-웰 플레이트를 2 μM의 단일 샤가스 펩티드로 +4℃에서 밤새 코팅하였다. 플레이트를 PBST(0.05% TWEEN 20을 갖는 PBS)로 2회 세척하고, PBS 중 1% BSA 프랙션(Fraction) V로 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 PBST로 3회 세척한 후, 1:100 내지 1:3,200의 이중 감소 희석으로 시험 혈청 샘플을 첨가하고, 2시간 동안 항온처리하였다. PBST로 6회 세척 후, 웰에 HRP-접합된 염소 항-마우스-Ig 혈청을 로딩하였다. 1시간 항온처리 후, 플레이트를 PBST로 8회 세척하고, TMB 기질을 첨가하였다. 0.5 M H₂SO₄로 반응을 중단시키고, 각각의 웰의 흡광도를 450 nm에서 판독하였다.

결과는 백신접종된 수컷에 비해 백신접종된 암컷에서 양호한 항체 반응을 나타낸다. 펩티드 CH47 및 CH77은 성별 둘 다에서 최선의 항체 반응을 나타내고, 이어서 CH69는 성별 둘 다에서 유사한 더욱 낮은 항체 역가를 유도한다(도 2a 및 2b).

항체 반응을 분석하기 위하여, 강한 항체 반응을 나타낸 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2a 항체를 측정하였다. 이를 위하여, ELISA 96-웰 플레이트를 +4℃에서 2 μM의 단일 샤가스 펩티드로 밤새 코팅하였다. 플레이트를 PBST로 2회 세척하고, PBS 중 1% BSA 프랙션 V로 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 PBST로 3회 세척한 후, 시험 혈청 샘플을 2시간 동안 첨가하였다. PBST로 6회 세척한 후, 웰에 염소 항-마우스 IgG1 또는 항-마우스 IgG2a를 로딩하였다. 1시간 항온처리 후, HRP-접합된 항-염소 IgG를 첨가하고, 추가로 1시간 동안 항온처리하였다. 이어서, 플레이트를 PBST로 8회 세척하고, TMB 기질을 30분 동안 첨가하였다. 0.5 M H₂SO₄로 반응을 중단시키고, 각각의 웰의 흡광도를 450 nm에서 판독하였다.

그래프에서 보이는 바와 같이, 펩티드 CH47 및 CH77은 IgG2a 및 IgG1 둘 다의 강한 항체 반응을 나타낸다(도 3a 내지 3d). 본 발명자들은, ELISA가 정량적이지 않고 단지 정성적이므로, 항체가 Th1 반응(높은 IgG2a) 또는 Th2 반응(높은 IgG1)을 더욱 지향하는 경향이 있는지에 대한 가정을 할 수 없다.

따라서, 본 실시예의 결과는 결과적으로 새로이 합성된 샤가스 펩티드의 생체내 시험이 양호한 생체내 면역원성 및 유의한 Th1 반응의 유도를 증명하는 6개 펩티드의 군을 동정하였음을 나타낸다. 예를 들어, CH9, CH47, CH69, CH72, CH77 및 CH84는 서열에 대한 시험관내 노출 후 백신접종된 동물의 비장세포에서 IFN-γ의 강한 생산을 나타낸 반면, CH47 및 CH77은 또한 높은 IgG1 및 IgG2a 역가에 의해 제시되는 양호한 항체 반응을 유도하였다.

실시예 3

트리파노소마 펩티드에 대한 사이토킨 반응

CH47(서열번호 6), CH69(서열번호 7), CH72(서열번호 8), CH77(서열번호 9), CH84(서열번호 11) 및 추가적인 펩티드 CH93(서열번호 12)을 추가로 시험하기 위하여, 추가적인 생체내 면역원성 시험을 수행하였다. 울타리 안에서 사육된 BALB/c 마우스(즉, 병원균 부재)(연구 개시시 7 내지 9주령)를 각각 6 마리 동물(3 마리 수컷/3 마리 암컷)을 갖는 4개의 군으로 나누었다. 0.1 mL의 몬타나이드 ISA-51 항원보강제가 에멀젼화된 물 중에 CH47, CH69, CH72, CH77, CH84 및 CH93의 0.1 mL의 펩티드 믹스를 포함하는 0.2 mL 조성물을 제1일 및 제15일에 피하 주사로서 투여하였다. 군 1은 암컷 마우스 각각의 펩티드에 대해 2.5 nmol의 등몰 농도를 수용하는 3 마리 암컷 마우스로 구성되었고; 군 2는 각각의 펩티드에 대해 2.5 nmol의 등몰 농도를 수용하는 3 마리 수컷 마우스로 구성되었고; 군 3은 각각의 펩티드에 대해 10 nmol의 등몰 농도를 수용하는 3 마리 암컷 마우스로 구성되었고; 군 4는 각각의 펩티드에 대해 10 nmol의 등몰 농도를 수용하는 3 마리 수컷 마우스로 구성되었다. 마지막 투약 후 7일에 모든 동물을 도태시키고, 말기에 출혈시키고, 비장을 수확하였다.

T 세포 반응을 사이토킨 ELISA에 의해 평가하였다. 동일한 성별 및 군의 비장을 함께 풀링(pooling)하고, 세포 여과기를 통해 압축하고, 적혈구 용해 완충액(9부의 0.16 M NH₄Cl 및 1부의 0.17 M 트리스, pH 7.2)으로 적혈구를 제거하였다. 각각의 실험군으로부터 단리된 비장세포 현탁액을 96-웰 플레이트에서 50 IU/50 μg/mL의 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FCS가 보충되고 각각의 매질 단독, 콘카나발린 A(Con A)(5 μg/mL), 단일 폴리에피토프 펩티드(2 μM)를 함유하는 RPMI-1640 중 4 x 10⁵ 세포/웰의 밀도로 평판배양하였다. 48시간의 항온처리 후, 상청액을 수집하고, 마우스 사이토킨 ELISA 키트(비디 바이오사이언시스)를 사용하여 IFN-γ 및 IL-4 생산에 대해 분석함으로써 면역 반응의 유도를 평가하였다. 검정에 의해 측정된 사이토킨 검출 역치는 IFN-γ의 경우 31.25 pg/mL 및 IL-4의 경우 7.81 pg/mL였다.

수용된 투약량 및 성별에 따른 IFN-γ 및 IL-4 분비에 대한 결과를 도 4a 및 4b에 도시한다. 예측된 바와 같이, 비장세포의 Con A 비-특이적 자극에 의해 관찰된 분비와 비교하여 다양한 펩티드에 대한 반응에서 IL-4가 거의 또는 전혀 분비되지 않았다(도 4a). IFN-γ 분비에 대해, 2개의 고도 응답자는 펩티드 CH47 및 CH93였다(도 4b). CH69, CH77 및 CH84에 대한 IFN-γ 반응은 종전 연구(예컨대, 실시예 2)에 비해 본 연구에서 낮았다. 이의 이유는, 기본적으로 모든 펩티드가 등몰량으로 투여되고, CH47 및 CH93이 MHC에 결합할 때 더욱 효율적이고, 이에 따라 나머지 펩티드와 비교하여 높이 표시되더라도, 펩티드 CH47 및 CH93이 면역우세인 것일 수 있다. 실시예 2에서, 펩티드 CH69, CH77 및 CH84는 CH47 및 CH93과 상이한 군이고, 이에 따라 영향을 받지 않는다. 2.5 nmol 투약량 또는 10 nmol 투약량을 수용하는 동물 사이의 사이토킨 발현에 관하여 큰 차이가 존재하는 않는다. 단지 CH93이 10 nmol에 비해 2.5 nmol로 백신접종된 성별 둘 다에서의 IFN-γ 생산에서 명백한 증가를 나타냈다(도 4b).

관찰된 IFN-γ 반응이 특이적인지 여부를 확인하기 위하여, 본 발명자들은 백신접종된 되지 않은(나이브) 상이한 마우스 균주(C57BLK6)로부터의 비장세포에서 단일 펩티드를 시험하였다. 총 10개의 비장(5 마리 수컷/5 마리 암컷)을 상기 설명된 바와 같이 처리하였고, 단일 비장세포 현탁액으로서 풀링하였다. 50 IU/50 μg/mL의 페니실린/스트렙토마이신 및 10% FCS가 보충되고 각각의 매질 단독, 콘카나발린 A(Con A)(5 μg/mL), 단일 폴리에피토프 펩티드(2 μM)를 함유하는 RPMI-1640 중 4 x 10⁵ 세포/웰의 밀도로 세포를 96-웰 플레이트에 시딩하였다. 48시간의 항온처리 후, 상청액을 수집하고, 마우스 사이토킨 ELISA 키트(비디 바이오사이언시스)를 사용하여 IFN-γ 생산에 대해 분석함으로써 면역 반응의 유도를 평가하였다. IFN-γ에 대한 검정에 의해 측정된 사이토킨 검출 역치는 31.25 pg/mL였다.

결과는, CH93에 노출된 나이브 동물로부터의 비장세포가 매우 높은 수준의 IFN-γ를 48시간 항온처리 후에 분비하므로, CH93에 의해 수득된 반응이 비-특이적임을 나타낸다(도 5). CH93은 아마 TLR과 같은 패턴 인식 수용체(Pattern Recognition Receptor)로의 결합을 통해 선천적인 면역성을 자극한다.

상기 펩티드에 의한 백신접종에 의해 유도된 면역 반응을 추가로 분석하기 위하여, 총 Ig 역가를 다음과 같은 상이한 군으로부터의 혈청 샘플에 대한 ELISA에 의해 측정하였다. ELISA 96-웰 플레이트를 +4℃에서 2 μM의 단일 샤가스 펩티드로 밤새 코팅하였다. 플레이트를 PBST로 2회 세척하고, PBS 중 1% BSA 프랙션 V로 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 PBST로 3회 세척한 후, 시험 혈청 샘플을 1:100 내지 1:3,200의 이중 감소 희석으로 첨가하고, 2시간 동안 항온처리하였다. PBST로 6회 세척한 후, HRP-접합된 염소 항-마우스-Ig 혈청을 웰에 로딩하였다. 1시간 항온처리 후, 플레이트를 PBST로 8회 세척하고, TMB 기질을 첨가하였다. 0.5 M H₂SO₄로 반응을 중단시키고, 각각의 웰의 흡광도를 450 nm에서 판독하였다.

ELISA 결과를 분석한 후, CH47은 수컷 및 암컷에서 우수한 반응을 나타낸다(도 6a). 그러나, 이러한 높은 반응은 실시예 2에서 현저한 항체 반응을 나타낸 펩티드 CH69 및 CH77의 항체 반응을 꺾는다(도 6b 및 6d). CH93은 항체 반응을 유도하지 않는다.

CH47 및 CH77에 의해 생성된 항체 반응을 추가로 분석하기 위하여, 각각의 단일 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2a 항체를 측정하였다. 이를 위하여, ELISA 96-웰 플레이트를 +4℃에서 2 μM의 단일 펩티드로 밤새 코팅하였다. 플레이트를 PBST로 2회 세척하고, PBS 중 1% BSA 프랙션 V로 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 PBST로 3회 세척한 후, 시험 혈청 샘플을 2시간 동안 첨가하였다. PBST로 6회 세척한 후, 염소 항-마우스 IgG1 또는 항-마우스 IgG2a를 웰에 로딩하였다. 1시간 항온처리 후, HRP-접합된 항-염소 IgG를 첨가하고, 추가로 1시간 동안 항온처리하였다. 이어서, 플레이트를 PBST로 8회 세척하고, TMB 기질을 30분 동안 첨가하였다. 0.5 M H₂SO₄로 반응을 중단시키고, 각각의 웰의 흡광도를 450 nm에서 판독하였다.

도 7a 내지 7d에 보이는 바와 같이, 펩티드 CH47 및 CH77은 Th2 반응의 특징인 강한 IgG1 항체 반응을 나타낸다(도 7a 및 7b). 흥미롭게도, 단지 CH47이 강한 IgG2a 반응을 유도할 수 있고(도 7d), 이것은 마우스 내의 Th1 반응을 나타낸다.

실시예 4

CH47의 면역우세

다른 펩티드의 면역원성에 대한 CH47의 효과를 시험하기 위하여, CH47과 함께 시험된 다른 펩티드(실시예 2 및 3에 개시됨)를 2개의 군으로 나누고, 제1일에 군 1 또는 군 2의 펩티드로 마우스를 백신접종하였다. 이어서, 각각의 군을 A 및 B로 나누고, 제14일에 하위군 A는 제1일에 수용된 동일한 펩티드의 투약을 수용한 반면, 하위군 B는 제1일의 펩티드 + CH47을 수용하였다. 투약 섭생은 다음과 같았다: 군 1A, 제1일 및 제14일에 10 nmol의 각각의 CH9, CH30, CH32, CH36 및 CH37; 군 1B, 제1일에 10 nmol의 각각의 CH9, CH30, CH32, CH36 및 CH37, 및 제14일에 동일한 펩티드 조합 + 10 nmol의 CH47; 군 2A, 제1일 및 제14일에 10 nmol의 각각의 CH69, CH72, CH77, CH82 및 CH84; 및 군 2B, 제1일에 10 nmol의 각각의 CH69, CH72, CH77, CH82 및 CH84, 및 제14일에 동일한 조합의 펩티드 + 10 nmol의 CH47.

연구를 울타리 안에서 사육된 BALB/c 마우스(즉, 병원균 부재)(연구 개시시 7 내지 9주령)에서 수행하였다. 각각의 4개 군은 4 마리 동물(2 마리 수컷/2 마리 암컷)을 포함하였다. 모든 동물은 0.2 mL 조성물(0.1 mL의 몬타나이드 ISA-51 항원보강제가 에멀젼화된 물 중 0.1 mL의 펩티드 믹스)의 2회 투약량을 제1일 및 제14일에 피하 주사로서 수용하였다.

표 3은 수용된 투약량 및 성별에 따른 비장세포 배양물의 상청액에서 IL-4 생산(pg/mL)을 나타낸다. 콘카나발린 A(ConA)에 의해 수득된 반응과 비교하여 시험된 임의의 펩티드에 대한 반응으로 IL-4가 거의 생성되지 않았다.

[표 3]

표 4는 수용된 투약량 및 성별에 따른 비장세포 배양물의 상청액에서 IFN-γ 생산(pg/mL)을 나타낸다. 펩티드 CH30, CH69, CH72, CH77 및 CH84(흑색 상자로 표시됨)는 효능촉진제 백신 제제에 CH47을 가짐으로써 증가된 중간 내지 양호한 IFN-γ 반응을 유도하였다. CH9 및 CH32는 IFN-γ의 강한 생산을 유도하였지막, 펩티드로 백신접종되지 않은 동물로부터의 비장세포에서도 높으므로 비-특이적이었다. 이러한 비-특이적 반응은 아마 이들의 낮은 용해도 및 미립자화된 성질에 기인한다.

[표 4]

항체 반응에 대하여, CH37 및 CH77은 둘 다 항체 반응을 유도할 수 있다(표 5). 표 5는 혈청의 1:400 희석에서 항체 역가(흡광도 450 nm 내지 570 nm)를 나타낸다. CH77은 수행된 모든 연구에서 높은 수준의 항체 반응을 나타냈다. 본 발명자들은, 과거 연구에서 CH37이 항상 CH47을 포함하는 펩티드 조합에 사용되어, 이에 따라 이의 항체 반응이 CH47에 의해 침묵화되었으므로, CH37에 대한 이러한 강한 항체 반응을 결코 측정하지 않았다.

[표 5]

CH37 및 CH77에 의해 생성된 항체 반응을 추가로 분석하기 위하여, 각각의 단일 펩티드에 특이적인 IgG1 및 IgG2a 항체를 측정하였다(도 8a 내지 8d). 결과는 대조군의 흡광도가 시험군으로부터 차감된 상대적인 흡광도로서 표시된다. 도 8a 내지 8d에서 보이는 바와 같이, IgG1 역가는 CH37 및 CH77 둘 다에 대한 IgG2a 역가보다 크다. IgG2a 반응은 감염된 세포에 대한 ADCC 반응 및 보체의 활성화와 연관되는 경향이 있는 반면, IgG1 항체는 중화 반응을 유도하는 세포외 트리파노소마의 표면 상의 이용가능한 항원에 결합할 수 있다.

요약컨대, 결과는 효능촉진제 중 CH47의 단일 투약량이 사이토킨 및 항체 반응을 둘 다 증가시킴을 나타낸다. 시험된 펩티드의 목록으로부터, 본 발명자들은 백신이, 다른 펩티드의 효과를 강화시키기 위한 효능촉진제 백신접종에서 CH47과 함께, 이들의 항체 반응을 위하여 CH37 및 CH77, 및 이들의 IFN-γ 반응을 위하여 CH30, CH69, CH72 및 CH84로 구성되어야 함을 알았다.

실시예 5

토끼 항혈청

토끼에서 개시된 샤가스 펩티드에 대한 항체를 생성하기 위하여, 약 3 kg 체중의 2 마리의 수컷 뉴질랜드 토끼를 사용하였다. 한 마리는 음성 대조군으로서 사용되는 혈액을 수집하기 위하여 연구의 개시시 말기로 출혈시켰다. 하기 계획을 사용하여 다른 수컷을 면역화시켰다. 제0일에, 동물은 면역원성 조성물의 600 μL 피하 주사를 수용하였다. 제0일에, 물에 용해된 30 nmol의 각각의 CH30, CH37, CH69, CH72, CH77 및 CH84를 포함하는 300 μL 펩티드 혼합물 및 300 μL 몬타나이드 ISA-51 항원보강제(셉픽(Seppic))를 에멀젼화시킴으로써, 면역원성 조성물을 제조하였다. 제14일에, 동물은 면역원성 조성물의 다른 600 μL 피하 주사를 수용하였다. 제14일에, 물에 용해된 30 nmol의 각각의 CH30, CH37, CH69, CH72, CH77, CH84 및 CH47을 포함하는 300 μL 펩티드 혼합물 및 300 μL 몬타나이드 ISA-51 항원보강제(셉픽)를 에멀젼화시킴으로써, 면역원성 조성물을 제조하였다. 제28일에, 동물은 면역원성 조성물의 제3 600 μL 피하 주사를 수용하였다. 제14일에, 물에 용해된 30 nmol의 각각의 CH30, CH37, CH69, CH72, CH77 및 CH84를 포함하는 300 μL 펩티드 혼합물 및 300 μL 몬타나이드 ISA-51 항원보강제(셉픽)를 에멀젼화시킴으로써, 면역원성 조성물을 제조하였다. 제42일에, 동물은 면역원성 조성물의 제4 600 μL 피하 주사를 수용하였다. 제42일에, 물에 용해된 30 nmol의 각각의 CH30, CH37, CH69, CH72, CH77, CH84 및 CH47을 포함하는 300 μL 펩티드 혼합물 및 300 μL 몬타나이드 ISA-51 항원보강제(셉픽)를 에멀젼화시킴으로써, 면역원성 조성물을 제조하였다. 0.5 mL 혈액 샘플을 제0일(사전 백신접종), 제14일, 제25일(제2 면역화 후 11일), 제39일(제3 면역화 후 7일) 및 제67일(도태일의 제4 면역화 후 25일)에 수득하였다. 혈액을 실온에서 방치하여 응고시키고, 혈청을 수집하고, 항체 반응에 대해 분석하였다.

상기 면역원성 조성물에 의해 유도된 면역 반응을 평가하기 위하여, 총 Ig 역가를 다음과 같은 상이한 군으로부터의 혈청 샘플 상의 ELISA에 의해 측정하였다. ELISA 96-웰 플레이트의 웰을 +4℃에서 밤새 2 μM의 하나의 샤가스 펩티드로 개별적으로 코팅하였다. 플레이트를 PBST로 2회 세척하고, PBS 중 1% BSA 프랙션 V로 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 PBST로 3회 세척한 후, 180 μL 혈청 샘플을 1:100 내지 1:3,200의 이중 감소 희석으로 첨가하고, 2시간 동안 항온처리하였다. PBST에 의한 4회 세척 후, HRP-접합된 염소 항-토끼-Ig 혈청을 웰에 로딩하였다. 어둠에서 1시간 항온처리한 후, 플레이트를 PBST로 6회 세척하고, 100 μL의 TMB 기질을 첨가하고, 플레이트를 어둠에서 상온에서 30분 동안 항온처리하였다. 50 μL의 0.5 M H₂SO₄로 반응을 중단시켰다. 각각의 웰의 흡광도를 450 nm에서 판독하고, 배경을 570 nm에서 흡광도를 판독함으로써 차감하였다.

도 9a 내지 9h는 제67일(제4 면역화를 수용한 후 25일)에 IgG의 수준을 나타낸다. 펩티드 CH30, CH37, CH47 및 CH77은 각각 개별적으로 음성 대조군 혈청 및 전체 펩티드 혼합물 둘 다와 비교하여 강한 면역원성 반응을 유도한다. 펩티드 CH69 및 CH72는 또한 개별적으로 양호한 면역원성 반응을 유도한다.

실시예 6

트리파노소마 뮤린 공격에서 백신 효능

샤가스에 대한 예방적 백신으로서 본원에 개시된 트리파노소마 항원의 용도를 검사하기 위하여, 백신 조성물을 BALB/cJ 마우스(2개월령)에서 시험하였다. 조성물(CH-v로 지정됨)은 항원보강제 몬타나이드 ISA-51(셉픽) 및 하기 펩티드를 포함하였다: CH30, CH37, CH69, CH72, CH77 및 CH84. CH-v 및 CH47로 이루어진 추가적인 조성물이 또한 사용되었다. 수컷 BALB/cJ 마우스(2개월령)에 면역화를 수행하였다. 면역화 전에 먼저 동물이 BSL-3 실험실의 설비에 익숙해지도록 하였다. 면역화를 도 10에 도시된 바와 같이 수행하였다.

면역화된 동물을 트리파노소마 크루지 혈류 파동편모형, 균주 RA(진화 계통/유형화 단위 = TcVI)로 공격하였고(문헌[Risso, et al, J Infect Dis 189:2250, 2004]), 동물은 복강내 주사(IP)를 통해 50 마리 파동편모형을 수용하였다. 연구소의 동물 시설에서 수컷 CF1 마우스에서의 연속적인 계대배양에 의해 RA 균주를 유지하였다. 다른 혈장 샘플을 수집하고, 면역화 후 및 공격 전에 각각의 마우스로부터 저장하였다. 감염 후 제10일, 제13일 및 제40일(dpi)에 혈액 한 방울로부터 기생충을 계수함으로써(광학 현미경에서 400X로 30 필드) 순환하는 기생충의 존재를 평가하였다. 전방 16 dpi로부터, 45 μL의 용해 용액(적혈구를 용해시키기 위함)과 혼합된 5 μL의 말초 혈액으로부터 출발하여 혈구계수판(노이바우어(Neubauer))에서 기생충을 계수함으로써 기생충혈증을 측정하였다. 값은 1 mL 당 기생충의 수로 표시된다. 사망률을 매일 확인하였다.

모든 군에 대한 기생충혈증 데이터를 측정하였다. 기생충의 수에서 유의한 차이가 8 dpi에 대조군(A+C)에 대해 군 B에서 관찰되었다(p < 0.00014)(도 11). 놀랍게도, CH-v 단독(군 B)으로 백신접종된 동물 중 기생충의 수는 대조군 중 기생충의 수를 초과하였다.

모든 군에 대한 사망률 데이터를 측정하였다(도 12). 흥미롭게도, 군 D(CH47과 조합된 CH-v)의 동물 중 40%는 공격 후 25일 후에 공격에서 생존하였고, 33%는 50일까지 살아 있었다. 스튜던츠 시험(Student's test)(기생충혈증 값), ANOVA, 및, 이어서 본페페로니 및 게한-브레슬로우-윌콕슨(Bonferroni and Gehan-Breslow-Wilcoxon)(그래프패드 소프트웨어(GraphPad Software))을 사용하여 분석을 수행하였다. 사망률에서의 유의한 차이가 또한 확인되었다: B 대 대조군(A+C), p < 0.0005; D 대 대조군(A+C), p < 0.0394(도 11). 수득된 결과는 CH-v(군 B)로 면역화된 동물이 더욱 큰 기생충혈증을 발병하였고, 이는 이러한 군에서 관찰된 조기 사망률과 관련됨을 나타냈다. 이것은 이러한 혼합물 또는 이의 성분 중 하나가 숙주 반응의 결과에 부정적으로 영향을 주어 관찰된 더욱 빠른 사망률을 야기하는 조절 인자로서 작용할 수 있다. 군 D(CH47과 조합되는 CH-v)로부터의 동물의 기생충혈증 값은 대조군 마우스에서 관찰된 바와 유사하였고, 그럼에도 불구하고, 27 dpi에서의 사망률은 58.3%로 감소되었고 40 dpi까지 66.7%로 감소된 반면, 대조군은 24 dpi에 100% 사망률에 도달하였다. 전반적으로, 결과는 CH-v로 백신접종된 동물에 의해 수용된 효능촉진제 중 펩티드 CH47의 포함이 보호성 면역 반응을 유도하는데 중요함을 시사한다. 이러한 펩티드의 효과가 CH-v 혼합물에 의해 유도된, 면역 반응에 대한 부정적인 효과를 상쇄시킬 수 있음을 인지하는 것이 또한 중요하다.

트리파노소마 크루지의 RA 균주에 의한 감염의 모델은, 비장, 흉선 및 신경절의 조직 건축의 변경 및 파괴를 야기하므로, 평가되는 백신 후보에 대한 강인한 공격을 나타낸다. 마우스에서의 연속적인 계대배양에 의한 상기 균주의 유지는 상기 균주의 생물학적 특징(예컨대, 시험관내 배양될 때 약독화되는 이의 독성)의 보존을 선호한다.

실시예 7

트리파노소마 뮤린 공격에서 백신 효능

샤가스에 대한 예방적 백신으로서 CH47과 조합되는 CH-v, 또는 CH47 단독(2회 투약량)의 효능을 검사하기 위하여, 백신 조성물을 BALB/cJ 마우스(2개월령)에서 시험하였다. 본 연구는 각각 12 마리의 수컷 BALB/cJ 마우스(2개월령)를 함유하는 3개의 군(A, B 및 C)으로 이루어졌다. 도 13에 표시된 바와 같이, 군 A의 동물은 제1일 및 제14일에 항원보강된 CH47 단독의 2회 투약량을 수용하였다. 군 B의 동물은 제1일에 항원보강된 CH-v(CH30, CH37, CH69, CH72, CH77, CH84), 및, 이어서 제14일에 CH47과 조합되는 항원보강된 CH-v를 수용하였다. 군 C(대조군)는 물 및 몬타나이드 ISA-51 항원보강제의 에멀젼을 제1일 및 제14일에 피하 투약으로서 수용하였다.

면역화된 동물을 트리파노소마 크루지 혈류 파동편모형, 균주 RA(진화 계통/유형화 단위 = TcVI)로 공격하였고(문헌[Risso, et al, J Infect Dis 189:2250, 2004]), 동물은 복강내 주사(IP)를 통해 50 마리 파동편모형을 수용하였다. 연구소의 동물 시설에서 수컷 CF1 마우스에서의 연속적인 계대배양에 의해 RA 균주를 유지하였다. 45 μL의 용해 용액(적혈구를 용해시키기 위함)과 혼합된 5 μL의 말초 혈액으로부터 출발하여 혈구계수판(노이바우어)에서 기생충을 계수함으로써 기생충혈증을 측정하였다. 값은 1 mL 당 기생충의 수로 표시된다. 사망률을 매일 확인하였다.

도 14에서 보이는 바와 같이, CH47과 조합되는 CH-v에 의해 수득된 생존율은 연구 1(33.3%)에 수득된 바와 매우 유사하다. 놀랍게도, 단지 CH47로 면역화된 군에서의 생존은, 치명적인 트리파노소마 공격 후 60일에 대조군에서의 83.5%와 비교하여, 감염으로 죽은 동물의 단지 50%로 더욱 높은 생존을 경험하였다.

제17일에 기생충혈증은 대조군과 비교하여 백신접종된 군 둘 다에서 감소하였다. 군 CH-v+CH47에서 생존하는 동물은 제22일에 기생충혈증에서 추가 감소를 경험하였다(도 15). 그러나, 25일을 지나서 생존한 동물의 공격 후 제17일 및 제22일의 기생충혈증을 보면, 기생충혈증이 대조군과 비교하여 백신접종된 군 둘 다에서 감소된다(도 16). 가장 가능성 있는 설명은 대조군에서의 급성 감염에서 생존한 동물이 명백한 감염보다는 만성 감염을 개시한다는 것이다.

마지막으로, 본원의 양상이 특정 양태를 언급함으로써 강조되지만, 당업자는 이러한 개시된 양태가 단지 본원에 개시된 대상발명의 원리를 설명하는 것임을 용이하게 인정할 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 달리 명백히 언급되지 않는 한, 개시된 대상발명이 어떠한 방식으로도 본원에 개시된 특정 화합물, 조성물, 제품, 장치, 방법론, 프로토콜 및/또는 시약 등으로 제한되지 않음이 이해되어야 한다. 또한, 당업자는 특정 변화, 변형, 교환, 변경, 첨가, 공제 및 이들의 하위 조합이 본원의 사상을 벗어남이 없이 본원의 교시에 따라 수행될 수 있음을 인정할 것이다. 따라서, 하기 첨부된 청구범위 및 하기 소개된 청구범위는 이들의 진정한 사상 및 범주 내에서 이러한 변화, 변형, 교환, 변경, 첨가, 공제 및 하위 조합을 모두 포함하는 것으로 해석되도록 의도된다.

본 발명의 실시하기 위해 본 발명자들에게 알려진 최선의 방식을 비롯한 본 발명의 특정 양태가 본원에 기술된다. 물론, 이러한 기술된 양태의 변형이 상기 명세서를 읽음으로써 당업자에게 명백하게 될 것이다. 본 발명자들은 당업자가 이러한 변형을 적절히 사용할 것으로 기대하고, 본 발명자들은 본 발명이 본원에 구체적으로 기술된 바와 달리 실시될 것으로 의도된다. 따라서, 본 발명은 적용가능한 법에 의해 허용되는 한 본원에 첨부된 청구범위에 인용된 대상발명의 모든 변형 및 등가물을 포함한다. 또한, 이의 모든 가능한 변형에서 상기 양태의 임의의 조합이 본원에 달리 지시되거나 문맥상 명백히 부정되지 않는 한 본 발명에 포함된다.

본 발명의 대안적인 양태, 요소 또는 단계의 그룹화는 제한으로 간주되어서는 안 된다. 각각의 군의 구성원은 개별적으로 또는 본원에 개시된 임의의 다른 군의 구성원과의 임의의 조합으로 언급되거나 청구될 수 있다. 군의 하나 이상의 구성원이 편리함 및/또는 특허가능성의 이유로 군에 포함되거나 군에서 삭제될 수 있는 것으로 예상된다. 임의의 상기 포함 또는 삭제가 발생하는 경우, 본 명세서는 변형된 군을 함유하는 것으로 간주되고, 이에 따라 첨부된 청구범위에 사용된 모든 마쿠쉬 군의 서면 기술을 만족시킨다.

달리 지시되지 않는 한, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 특징, 항목, 양, 변수, 특성, 용어 등을 표시하는 모든 수는 용어 "약"에 의해 모든 경우에 수식되는 것으로 이해되어야 한다. 본원에 사용된 용어 "약"은 한정된 특징, 항목, 양, 변수, 특성 또는 용어가 언급된 특징, 항목, 양, 변수, 특성 또는 용어의 값 위아래로 +/- 10%의 범위를 포괄함을 의미한다. 따라서, 달리 지시되지 않는 않, 본 명세서 및 첨부된 청구범위에 제시된 수치 변수는 변할 수 있는 근사치이다. 예를 들어, 질량 분광분석법이 제공된 분석물의 질량의 측정시 약간 변할 수 있으므로, 이온 질량 또는 이온의 질량/전하 비의 맥락에서 용어 "약"은 +/- 0.50 원자량 단위를 지칭한다. 적어도 청구범위의 범주의 균등론의 적용을 제한하려는 시도 없이, 각각의 수치 표시는 보고된 유효 숫자의 수에 비추어 통상적인 반올림법을 적용하는 것으로 간주되어야 한다.

양태 또는 양태의 양상에 관한 용어 "할 수 있다" 또는 "일 수 있다"의 사용은 또한 "할 수 없다" 또는 "일 수 없다"의 택일적인 의미를 갖는다. 따라서, 본 명세서가 양태 또는 양태의 양상이 본 발명의 대상발명의 일부로서 포함될 수 있다고 개시하는 경우, 부정적인 제한 또는 예외적인 단서가 또한 명백히 의미되어 양태 또는 양태의 양상이 본 발명의 대상발명의 일부로서 포함될 수 없음을 의미한다. 유사한 방식으로, 양상 또는 양태의 양상에 관한 용어 "임의적으로"의 사용은 이러한 양태 또는 양태의 양상이 본 발명의 대상발명의 일부로서 포함될 수 있거나 본 발명의 대상발명의 일부로서 포함될 수 없음을 의미한다. 이러한 부정적인 제한 또는 예외적인 단서가 적용되는지 여부는 부정적인 제한 또는 예외적인 단서가 청구된 대상발명에 인용되는지 여부에 기초할 것이다.

본 발명의 광범위한 범주를 제시하는 수치 범위 및 값이 근사치임에도 불구하고, 특정 실시예에 제시된 수치 범위 및 값은 가능한 정확하게 보고된다. 그러나, 임의의 수치 범위 또는 값은 본래 이들 각각의 시험 측정에서 발견되는 표준 편차로부터 필수적으로 야기되는 특정 오차를 함유한다. 본원에서 값의 수치 범위의 인용은 단지 이러한 범위에 속하는 각각의 개별적인 수치 값을 개별적으로 언급하는 속기 방법으로서 역할을 하도록 의도된다. 본원에서 달리 지시되지 않는 한, 수치 범위의 각각의 개별 값은 이들이 개별적으로 본원에 인용된 것과 같이 본 명세서에 혼입된다.

본 발명의 기술하는 문맥(특히, 하기 청구범위의 문맥)에 사용된 단수형 용어 및 유사한 표현은 본원에 달리 지시되거나 문맥상 명백히 부정되지 않는 한, 단수 및 복수를 둘 다 포괄하는 것으로 간주되어야 한다. 또한, 확인된 요소에 대한 "제1", "제2", "제3" 등과 같은 서수 표현은 요소들을 구별하기 위해 사용되고, 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 이러한 요소들의 요구되거나 제한된 수를 나타내거나 암시하지 않고, 이러한 요소들의 특정 위치 또는 순서를 나타내지 않는다. 본원에 기술된 모든 방법은, 본원에 달리 지시되거나 문맥상 명백히 달리 부정되지 않는 한, 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본원에 제공된 임의의 및 모든 예 또는 예시적인 언어(예를 들어, "예컨대")의 사용은 단지 본 발명을 더욱 잘 설명하도록 의도되고, 달리 청구된 본 발명의 범주를 제한하려는 의도가 아니다. 본 명세서의 어떠한 언어도 본 발명의 실시에 필수적인 청구되지 않은 임의의 요소를 나타내는 것으로 간주되어서는 안된다.

청구범위에 사용되는 경우, 출원되었든지 또는 보정으로 첨가되었든지, 개방 이행구 용어 "포함하는"(및 이의 등가의 개방 이행구, 예컨대 비롯한, 함유하는 및 갖는)은 모든 명백히 인용된 요소, 제한, 단계 및/또는 특징을 단독으로 또는 인용되지 않은 대상발명과 조합으로 포괄하고; 언급된 요소, 제한 및/또는 특징은 필수적이지만, 언급되지 않은 다른 요소, 제한 및/또는 특징이 첨가되거나 청구범위의 범주 내의 구성을 또한 형성할 수 있다. 본원에 개시된 특정 양태는 "포함하는" 대신에 또는 이를 보정하여 폐쇄 이행구 "이루어진" 또는 "본질적으로 이루어진"을 사용하여 청구범위에서 더욱 제한될 수 있다. 청구범위에 사용되는 경우, 출원되었든지 또는 보정으로 첨가되었든지, 폐쇄 이행구 "이루어진"은 청구범위에 명백히 인용되지 않은 임의의 요소, 제한, 단계 또는 특징을 제외한다. 폐쇄 이행구 "본질적으로 이루어진"은 청구범위의 범주를 명백히 인용된 요소, 제한, 단계 및/또는 특징, 및 청구된 대상발명의 기본 특징 및 신규한 특징에 물질적으로 영향을 주지 않는 임의의 다른 요소, 제한, 단계 및/또는 특징으로 제한한다. 따라서, 개방 이행구 "포함하는"의 의미는 모든 구체적으로 인용된 요소, 제한, 단계 및/또는 특징, 및 임의의 선택적이고 첨가적인 비특정된 것들을 포괄하는 것으로 정의된다. 폐쇄 이행구 "이루어진"의 의미는 청구범위에 구체적으로 인용된 요소, 제한, 단계 및/또는 특징만을 포함하는 것으로 정의되는 반면, 폐쇄 이행구 "본질적으로 이루어진"은 청구범위에 구체적으로 인용된 요소, 제한, 단계 및/또는 특징, 및 청구된 대상발명의 기본 특징 및 신규한 특징에 물질적으로 영향을 주지 않는 요소, 제한, 단계 및/또는 특징만을 포함하는 것으로 정의된다. 따라서, 개방 이행구 "포함하는"(및 이의 등가의 개방 이행구)은 이의 의미 내에, 제한 사례로서, 폐쇄 이행구 "이루어진" 또는 "본질적으로 이루어진"에 의해 특정된 청구된 대상발명을 포함한다. 따라서, 본원에 기술되고 어구 "포함하는"을 사용하여 청구된 양태는 어구 "본질적으로 이루어진" 및 "이루어진"을 본원에서 명백히 또는 본래 명료하게 기술하고 가능케하고 지지한다.

본 명세서에서 참조되고 확인된 모든 특허, 특허공개 및 다른 공개문헌은, 예를 들어 본 발명과 결합하여 사용될 수 있는 이러한 문헌에 기술된 조성물 및 방법론을 기술하고 개시할 목적으로 이의 전체내용이 참고로서 본원에 개별적으로 및 명백하게 혼입된다. 이러한 문헌은 본원의 출원일 전에 이의 개시내용에 대해서만 제공된다. 이와 관련하여, 본 발명자들이 종래 발명에 기인하여 또는 임의의 다른 이유로 본 개시내용을 선행함을 인정하는 것으로 어떠한 것도 해석되어서는 안된다. 이러한 문헌의 날짜에 대한 모든 언급 또는 내용에 관한 표시는 본 발명자들이 이용가능한 정보에 기초하고, 이러한 문헌의 날짜 또는 내용의 정확성에 대해 임의로 승인하는 것이 아니다.

마지막으로, 본원에 사용된 용어는 단지 특정 양태를 기술하기 위한 것이고, 청구범위에 의해서만 한정되는 본 발명의 범주를 제한하려는 것이 아니다. 따라서, 본 발명은 정확하게 도시되고 기술된 것으로 제한되지 않는다.

SEQUENCE LISTING <110> PepTcell Limited <120> Chagas Antigens and Antibodies and Compositions, Methods and Uses Thereof <130> 3IPSK1.0047WO <140> PCT/EP2017/059189 <141> 2017-04-18 <150> US 62/322,770 <151> 2016-04-14 <160> 12 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi <400> 1 Ala Gly Ile Arg Ser Ile Leu Arg Thr Leu Gln Glu Thr Arg Thr Gln 1 5 10 15 Leu Pro Arg Gly Arg Phe Leu Leu Met Arg Asp Asn Leu Ser Ala Leu 20 25 30 Lys Pro His Gln Pro Pro Asp Leu 35 40 <210> 2 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi ADP ribosylation factor 1 <400> 2 Met Gly Gln Trp Leu Ala Ser Ala Phe Lys Ser Leu Leu Gly Lys Gln 1 5 10 15 Glu Val Arg Ile Leu Met Val Gly Leu Asp Ala Ala Gly Lys 20 25 30 <210> 3 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi <400> 3 Met Leu Pro Arg Val Leu Gly Ala Gly Thr Leu Glu Leu Leu Arg Gln 1 5 10 15 Asp Gly Ser Asn Val Thr Ala Ser Lys Ala Leu Gln Gly Lys Lys Tyr 20 25 30 <210> 4 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi <400> 4 Asp Gln Trp Gly Val Glu Leu Gly Lys Leu Leu Ala Lys Ser Ile Leu 1 5 10 15 Pro Gln Leu Gln Pro Gly Gln Lys Val 20 25 <210> 5 <211> 39 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi pyruvate phosphate dikinase <400> 5 Ser Arg Ile Asp Ala Ile Arg Glu Met Ile Leu Ala Asp Thr Leu Glu 1 5 10 15 Gly Arg Lys Ala Ala Ile Gln Lys Leu Leu Pro Val Gln Arg Gly Asp 20 25 30 Phe Leu Gly Ile Phe Arg Thr 35 <210> 6 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi acidic ribosomal P1 protein Tcp2b <400> 6 Met Lys Tyr Leu Ala Ala Tyr Ala Leu Val Gly Leu Ser Gly Gly Thr 1 5 10 15 Pro Ser Lys Ser Ala Val Glu Ala Val Leu Lys Ala Ala Gly Val Pro 20 25 30 Val Asp <210> 7 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi DNA topoisomerase 2 <400> 7 Ser Ala Lys Ala Leu Ala Gln Asn Ser Leu Ser Ser Asp Gln Lys Arg 1 5 10 15 Tyr Thr Gly Val Phe Pro Leu Arg Gly Lys Leu Leu Asn Val Arg Asn 20 25 30 Lys Asn Leu 35 <210> 8 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi phosphoinositide-specific phospholipase C <400> 8 Ser Leu Arg Glu Leu Gly Lys Leu Val Lys Gly Leu Asn Phe Pro Ala 1 5 10 15 Asp Leu Ser Lys Gln Leu Ile Ala Ala Val Lys Ala Ala Gly 20 25 30 <210> 9 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi dihydroorotate dehydrogenase <400> 9 Asn Val Ala Met Val Arg Arg Leu Ala Pro Val Ala Gln Glu Lys Gly 1 5 10 15 Val Leu Leu Glu Leu Asn Leu Ser Cys Pro Asn Val Pro Gly Lys Pro 20 25 30 Gln <210> 10 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi <400> 10 Val Ala Leu Arg Glu Ile Arg Gln Phe Gln Arg Ser Thr Asp Leu Leu 1 5 10 15 Leu Gln Lys Ala Pro Phe Gln Arg Leu Val Arg Glu Val Ser Gly Ala 20 25 30 Gln Lys Glu Gly 35 <210> 11 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi AGP2b2 <400> 11 Gly Asp Lys Ile His Ala Ser Ser Pro Pro Leu Ile Ala Asp Asp Gly 1 5 10 15 Gly Lys Leu His Val Asn Leu Ser Arg Ile Phe Thr Ser Thr Leu Gln 20 25 30 Arg <210> 12 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide fragment from Trypanosoma cruzi <400> 12 Met Leu Leu Glu Met Asp Asn Gly Glu Ile Leu Asn Leu Leu Asp Thr 1 5 10 15 Pro Gly Leu Leu Asp Ala Lys Val Gln Glu Ala Leu Glu Val Leu 20 25 30

Claims

서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12;
서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖는 펩티드; 또는
서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12로부터의 7개 이상의 연속적인 아미노산을 갖는 펩티드
인 트리파노소마 항원.
제1항에 있어서,
펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 1개 이상의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.
제1항에 있어서,
펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 1개 이상의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.
제1항에 있어서,
펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 11개 이하의 연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.
제1항에 있어서,
펩티드가 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12에 대한 75% 아미노산 동일성을 갖고, 서열번호 6, 서열번호 9, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 11, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 10 또는 서열번호 12를 기준으로 11개 이하의 비-연속적인 아미노산 결실, 첨가 및/또는 치환을 포함하는, 트리파노소마 항원.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 트리파노소마 항원을 포함하는 면역원성 조성물.
제6항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 6을 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 또는 제7항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 9를 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5를 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5 및 서열번호 9를 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 5, 서열번호 6 및 서열번호 9를 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 7, 서열번호 8 및 서열번호 11을 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 또는 제7항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9 및 서열번호 11을 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 또는 제7항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2, 서열번호 5, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9 및 서열번호 11을 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 서열번호 2, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9 및 서열번호 11을 포함하는, 면역원성 조성물.
제6항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
하나 이상의 트리파노소마 항원이 각각 약 1 내지 약 1,000 mg의 양으로 존재하는, 면역원성 조성물.
제6항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
하나 이상의 항원보강제를 추가로 포함하는 면역원성 조성물.
제17항에 있어서,
하나 이상의 항원보강제가 각각 약 100 내지 약 1,500 μg/mL의 양으로 존재하는, 면역원성 조성물.
제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는 면역원성 조성물.
제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 감소시키는데 충분한 양으로 투여하여 트리파노소마-기반 질병을 치료하는 단계를 포함하는, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.
제20항에 있어서,
면역원성 조성물이 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나, 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제20항 또는 제21항에 있어서,
면역원성 조성물이 트리파노소마 병원균 수 또는 역가를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 트리파노소마 병원균 증식 또는 복제를 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 합성된 트리파노소마 단백질의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하거나; 복제된 트리파노소마 병원균 핵산의 양을 감소시키거나 줄이거나 저해하거나 제한하거나 제어하거나 억제하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제20항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
면역원성 조성물의 투여가 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 10% 이상만큼 감소시키는, 치료 방법.
제20항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
면역원성 조성물의 투여가 트리파노소마 감염 또는 병리와 연관된 하나 이상의 생리학적 병태 또는 증상을 1주 이상만큼 감소시키는, 치료 방법.
제20항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 치료 방법.
트리파노소마-기반 질병을 치료하기 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 α-트리파노소마 항원 또는 제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 면역원성 조성물의 용도.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 트리파노소마 항원 또는 제6항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 투여하여 트리파노소마-기반 질병을 치료하는 단계를 포함하는, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 트리파노소마 항원 또는 제6항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 면역원성 조성물을 이를 필요로 하는 개체에게 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 보호하기에 충분한 양으로 투여함을 포함하는, 트리파노소마-기반 질병의 치료 방법.
제27항 또는 제28항에 있어서,
트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마에 대한 면역 반응을 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 감염 또는 병리에 대하여 개체를 면역화시키거나 백신접종하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 감염 또는 병리에 대한 감수성을 감소시키거나 줄이거나 제한하거나 제어하거나 억제하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
트리파노소마 항원 또는 면역원성 조성물이 트리파노소마 청소 또는 제거를 증가시키거나 유도하거나 강화시키거나 늘리거나 촉진하거나 자극하거나, 다른 개체로의 트리파노소마의 전염을 줄이거나 감소시키거나 억제하거나 저해하거나 예방하거나 제어하거나 제한하기에 충분한 양으로 투여되는, 치료 방법.
제27항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 치료 방법.
약제의 제조를 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 트리파노소마 항원의 용도.
약제의 제조를 위한, 제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 면역원성 조성물의 용도.
제34항 또는 제35항에 있어서,
트리파노소마-기반 질병이 샤가스병 또는 아프리카 수면병인, 용도.