KR20130065662A

KR20130065662A - ⅠＬ-1β 관련 병태의 치료 방법

Info

Publication number: KR20130065662A
Application number: KR20127031454A
Authority: KR
Inventors: 알란 엠. 솔린거; 아메트 걸
Original assignee: 조마 테크놀로지 리미티드
Priority date: 2010-05-07
Filing date: 2011-05-06
Publication date: 2013-06-19
Also published as: CN102883748A; US9139646B2; JP5904645B2; US8551487B2; NZ603191A; SG2014014724A; IL222890A0; ZA201208172B; BR112012028557A2; MX337586B; SG185473A1; MX2012012901A; US20140242090A1; US20120014966A1; JP2013526485A; EP2566520A1; WO2011140522A1; EP2566520A4; EA201201526A1; CA2797846A1

Abstract

항-IL-1β 결합 분자(예를 들면, IL-1β 결합 항체 또는 이의 결합 단편)를 사용하여 대상체에서 치료 불응성 포도막염을 포함하는 포도막염을 억제하는(예를 들면, 치료하거나 예방하는) 방법 및 물질이 개시되어 있다.

Description

ⅠＬ-1β 관련 병태의 치료 방법{METHODS FOR THE TREATMENT OF IL-1β RELATED CONDITIONS}

관련 출원

본원은 2011년 2월 18일자로 출원된 미국 가출원 제61/444,638호, 2010년 5월 12일자로 출원된 미국 가출원 제61/334,125호 및 2010년 5월 7일자로 출원된 미국 가출원 제61/332,658호의 이익을 주장한다(이들의 개시내용은 전체적으로 본원에 참고로 도입됨).

발명의 기술분야

본 개시내용은 대상체에서 치료 불응성 포도막염을 포함하는 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법 및 물질에 관한 것이다.

포도막염은 일반적으로 안구내 염증을 의미하고, 예를 들면, 포도막의 전안부 및/또는 포도막의 후안부에 영향을 미칠 수 있다. 포도막염은 많은 국가에서 시력 손상의 주요 원인이다. 포도막의 전안부는 홍채 및 섬모체를 포함한다. 포도막의 후안부는 맥락막을 포함한다. 포도막은 안구내 구조체의 혈액 공급의 대부분을 제공하는 것 이외에 면역 세포, 특히 림프구가 눈으로 들어가는 통로로서 작용한다. 결과적으로, 포도막은 많은 안구내 염증 과정과 직접적으로 관련되어 있다.

국제 포도막염 연구회는 관련된 눈(들)(즉, 일측성 또는 양측성), 경과(즉, 12주 미만 동안 지속되는 급성, 또는 12주 이상 동안 지식되는 만성), 및 눈 내에서의 해부학적 위치의 관점에서 포도막염을 분류한다(Bloch-Michel et al., Am J Ophthalmol., 103:234-235, 1987). 포도막염의 특징규명 및 명명법의 추가 표준화는 SUN 연구실무진(working group)에 의해 제공된다(Jabs et al., Am J Ophtalmol., 140:509-516, 2005). 전포도막염은 예를 들면, 홍채염, 전섬모체염, 및 홍채 및/또는 주름부(pars plicata)(전섬모체)를 수반하는 홍채섬모체염을 포함한다. 중간포도막염은 예를 들면, 평면부염(pars planitis), 후섬모체염, 유리체염, 및 평면부(후섬모체) 및/또는 인접 주변망막의 염증을 의미하는 기저 망막맥락막염을 포함한다. 후포도막염은 국소성, 다중국소성 또는 미만성 맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막맥락막염 및 맥락망막염을 포함하고, 후자 2개의 용어(즉, 망막맥락막염 및 맥락망막염)는 어떤 조직이 주로 관련된 것처럼 보이는지를 표시한다. 범포도막염은 전안부 및 후안부 둘다를 수반하는 염증을 의미한다. 포도막염은 "굳기름(mutton fat)" 각막 침전물, 홍채 결절 및/또는 맥락막 육아종에 의해 표시되는 육아종성 염증의 존재 또는 부재에 기초하여 더 분류될 수 있다.

포도막염은 서방 세계에서 시각 장애의 약 10%의 원인될 수 있고(Nussenblatt, Int Ophthalmol., 14:303-308, 1990) 미국에서 전체 실명의 모든 경우의 최대 15%의 원인이 될 수 있다(Rothova et al., Br J Ophthalmol., 80:332-336, 1996)고 추정된다. 법적 실명은 모든 포도막염 환자의 22% 및 안구내 수술을 필요로 하는 모든 환자의 약 23%에서 하나 이상의 눈에서 발생한다. 또한, 하나 이상의 눈에서 6/18보다 더 악화된 정도까지의 시력 상실이 주로 지속성 황반 부종의 결과로서 포도막염 환자의 35%에서 일어난다(상기 문헌(Rothova et al.)). 포도막염의 안구 합병증은 통상적으로 시력의 감소와 관련되어 있다.

IL-1β는 단핵구 및 대식세포를 포함하는 다수의 상이한 종류의 세포에 의해 분비되는 전구염증 사이토카인이다. IL-1β는 염증 반응의 일부로서 방출되었을 때 주로 다른 염증 매개자, 예컨대, 코르티코트로핀, 혈소판 인자-4, 프로스타글란딘 E2(PGE2), IL-6 및 IL-8의 유도를 통해 매개되는 다양한 생물학적 효과를 생성한다. IL-1β는 거의 모든 종류의 세포 상에서 발견되는 IL-1 수용체의 활성화를 통해 국소 염증 효과 및 전신 염증 효과 둘다를 유도한다. 사이토카인의 인터루킨-1(IL-1) 패밀리(family)는 다수의 질환 상태와 관련되어 있다. IL-1 패밀리 구성원은 IL-1α, IL-1β 및 IL-1Ra를 포함한다. 이들 사이토카인들은 IL-1 수용체(IL-1R1 및 IL-1R2)에 결합하는 그들의 능력에 의해 관련되어 있지만, 이들 사이토카인들 각각은 상이하고 상이한 유전자에 의해 발현되고 상이한 일차 아미노산 서열을 갖는다. 나아가, 이들 사이토카인들의 생리학적 활성은 서로 구별될 수 있다.

염증 소견의 완전한 해소와 함께 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림(flare), 포도막염 발병)를 포함하는 포도막염의 효과적인 치료는 보다 우수한 시력 결과를 위해 중요하다. 포도막염 악화가 미해소된 상태로 오래 지속될수록 보다 심각한 후유증, 불완전한 해소 및/또는 시력의 상실의 가능성이 보다 높아진다. 위험군 대상체를 포함하는 대상체에서 불응성 포도막염의 치료 및 포도막염 악화의 예방을 포함하는 포도막염의 효과적인 치료 및 예방 방법에 대한 필요성이 남아있다.

본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 억제하는(예를 들면, 치료하거나 예방하는) 물질 및 방법에 관한 것이다. 놀랍게도, 본원에 개시된 방법은 추가 약학 조성물, 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 및/또는 스테로이드를 사용하거나 사용하지 않으면서 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염을 억제하는(예를 들면, 치료하거나 예방하는) 효과적인 수단을 제공한다. 이러한 물질 및 방법은 포도막염 질환(예를 들면, 치료 불응성 포도막염)을 앓는 포유동물(예를 들면, 인간) 대상체를 치료하거나 위험군 대상체에서 상기 질환의 발생을 예방하거나 상기 질환의 빈도 및/또는 중증도를 감소시키는 데에 사용될 수 있다.

본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 방법은 대상체에서 포도막염을 예방하는 방법이다. 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 방법은 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화를 억제하는 것이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화 사이의 간격을 증가시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화의 빈도를 감소시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화를 경험할 가능성을 감소시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화를 예방한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화를 치료한다. 각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화의 중증도를 감소시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친(colchicine)이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽(andrenocorticotrophic) 호르몬 및 글루코코르티코이드(예를 들면, 덱사메타손)로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상(예를 들면, 1개 또는 2개)의 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개의 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 선행 치료를 제공받았다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 대한 유해(adverse) 반응 또는 과민성을 나타내었다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 실패하였다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드(예를 들면, 덱사메타손)로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있고, 이때 상기 방법은 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약의 감소를 제공한다. 몇몇 실시양태에서, 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투여량에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투여량의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투약 빈도에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약 빈도의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린 또는 메토트렉세이트이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 포도막염으로 진단받은 대상체에서 급성 포도막염 악화를 억제하는 방법이고, 이때 상기 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는다.

본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상(예를 들면, 1개 또는 2개)의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 인터페론(예를 들면, IFN-α)을 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 이때 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이고, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물 및 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물 중 임의의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 선행 치료를 제공받았다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 대한 유해 반응 또는 과민성을 나타내었다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 실패하였다. 몇몇 실시양태에서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 부분적으로 반응하였다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상(예를 들면, 1개 또는 2개)의 약학 조성물을 사용한 상기 포도막염의 동시 치료를 제공받고 있다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 급성 포도막염 악화를 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 인터페론(예를 들면, IFN-α)을 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화 사이(예를 들면, 2회 이상의 급성 포도막염 악화 사이)의 간격의 증가이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 빈도의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화를 경험할 가능성의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 예방이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 치료이다. 몇몇 실시양태에서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 중증도의 감소이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있고, 상기 방법은 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약의 감소(예를 들면, 점감(tapering))를 제공한다. 몇몇 실시양태에서, 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투여량에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투여량의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투약 빈도에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약 빈도의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전 유사한 기간 동안 누적 노출에 비해 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여한 후 일정 기간(예를 들면, 일, 주, 월) 동안 상기 하나 이상의 약학 조성물의 누적 노출의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 누적 노출의 감소는 곡선 하의 면적(예를 들면, AUC)의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 곡선 하의 면적의 감소는 시간-조정된 적분 평균(예를 들면, 시간 대 약물 투여량)에 대한 상기 하나 이상의 약학 조성물의 감소된 평균 혈중 농도에 의해 표시된다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드, 비-스테로이드 면역억제제 또는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 2개 이상의 약학 조성물의 투약이 감소된다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드(예를 들면, 덱사메타손)로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 포도막염으로 진단받은 대상체에서 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이고, 상기 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 포도막염으로 진단받은 대상체에서 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 억제하는 방법을 제공하고, 이때 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이고, 급성 포도막염 악화는 신생 망막염 영역을 갖는다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 급성 포도막염 악화에 대한 위험이 있는 대상체이다.

또한, 본 개시내용은 약 0.5 ㎍/㎖ 이상, 약 1.0 ㎍/㎖ 이상, 약 1.5 ㎍/㎖ 이상, 약 2.0 ㎍/㎖ 이상, 약 3.0 ㎍/㎖ 이상, 약 4.0 ㎍/㎖ 이상 또는 약 5.0 ㎍/㎖ 이상의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편의 전신 최저(trough) 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 억제하는(예를 들면, 치료하거나 예방하는) 방법을 제공한다. 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 내지 약 5 ㎍/㎖, 약 1 ㎍/㎖ 내지 5 ㎍/㎖ 또는 약 2 ㎍/㎖ 내지 5 ㎍/㎖의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여된다.

본 개시내용은 1) 대상체에서 포도막염을 진단하는 단계, 및 2) 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 단계 1)의 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 방법은 전포도막염 또는 후포도막염을 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 전포도막염 및 후포도막염 둘다를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 포도막염으로 진단받은 대상체는 범포도막염으로 진단받은 대상체이다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 중간포도막염도 개선시킨다.

또한, 본 개시내용은 1) 대상체에서 포도막염을 진단하는 단계, 및 2) 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 단계 1)의 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁(haze), 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링(pooling), 망막전막 형성, 전방축농(hypopyon), 망막하 신생혈관형성, 시신경유두(optic disc) 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성(sheathing), 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 혈관 누출(예를 들면, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 이중 플루오레세인 혈관조영술 및 인도시아닌 그린 혈관조영술 점수), 시신경유두 과형광(hyperfluorescence), 유두(disc) 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드(arcades), 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출(pinpoint leaks), 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막 기능장애 및 상승된 안압으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염 및 신경망막염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 벤 에즈라(Ben Ezra) 점수를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출 및 망막 염색으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막 침윤물, 망막 혈관염 및 시신경유두 과형광으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터)를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염으로부터 선택된 2개 이상의 파라미터를 개선시킨다. 예를 들면, 1개의 파라미터의 개선은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 또는 망막 혈관염의 개선일 수 있다. 예를 들면, 2개의 파라미터의 개선은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염 중 2개의 파라미터의 개선일 수 있다. 각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시킨다.

또한, 본 개시내용은 1) 대상체에서 포도막염을 진단하는 단계, 및 2) 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 단계 1)의 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염 중 하나 이상을 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 포도막염은 비-감염성 포도막염이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 베체트병(Behcet's disease), 척추관절염(예를 들면, 강직성 척추염, 반응성 관절염), 건선 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 궤양성 결장염, 사르코이드증, 세뇨관간질성 신염 및 포도막염(TINU) 증후군, 류마티스성 관절염, 가와사키병(Kawasaki disease), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 전신홍반루푸스, 다발동맥염, 레이터병(Reiter disease), 베게너 육아종증, 보크트-고야나기-하라다 증후군(Vogt-Koyanagi-Harada syndrome), 전신 소아 특발성 관절염 및 육아종증성 맥관염으로부터 선택된 질환 또는 병태로 진단받았다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 사이토메갈로바이러스 감염, 톡소포자충증, 매독, 결핵, 묘소병(cat scratch disease), 라임병(Lyme disease), 웨스트 나일 바이러스 감염, 단순포진 바이러스 감염, 인간 면역결핍 바이러스 감염, 진균 감염 또는 수두대상포진 감염으로 진단받았다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 대상체는 평면부염, 다발성 경화증, 교감성 안염, 버드샷(birdshot) 맥락막병증, 면역 회복 포도막염(예를 들면, 면역 재구성 염증성 증후군), 림프종 및 특발성 포도막염으로부터 선택된 질환 또는 병태로 진단받았다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 베체트병을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 포도막염으로 진단받았고, 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다.

또한, 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 치료하는 단계를 추가로 포함하는, 상기 대상체에서 베체트병을 치료하는 방법을 제공하고, 이때 상기 대상체는 포도막염으로 진단받았고, 상기 포도막염은 치료 불응성 포도막염이고, 상기 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개 또는 2개의 약학 조성물을 사용한 상기 급성 포도막염 악화의 동시 치료를 제공받고 있다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친이다. 몇몇 실시양태에서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다. 몇몇 실시양태에서, 상기 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 전포도막염 또는 후포도막염을 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 전포도막염 및 후포도막염 둘다를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 혈관 누출(예를 들면, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 이중 플루오레세인 혈관조영술 및 인도시아닌 그린 혈관조영술 점수), 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막 기능장애 및 상승된 안압으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염 및 신경망막염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출 및 망막 염색으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막 침윤물, 망막 혈관염 및 시신경유두 과형광으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터, 5개 이상의 파라미터)를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터(예를 들면, 3개 이상의 파라미터, 4개 이상의 파라미터)를 개선시킨다. 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염으로부터 선택된 2개 이상의 파라미터를 개선시킨다. 예를 들면, 1개의 파라미터의 개선은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 또는 망막 혈관염의 개선일 수 있다. 예를 들면, 2개의 파라미터의 개선은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 및 망막 혈관염 중 2개의 파라미터의 개선일 수 있다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시킨다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 1 nM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다. 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 250 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다. 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 50 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다. 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 10 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다. 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 1 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다. 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.3 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 중화 항체이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 결합된 상기 항체 또는 단편이 IL-1β와 IL-1 수용체 I(IL-1RI)의 결합을 실질적으로 허용하도록 IL-1β 에피토프에 결합한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 IL-1α, IL-1R 또는 IL-1Ra에 검출가능하게 결합하지 않는다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체의 결합과 경쟁한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체에 의해 결합되는 에피토프와 실질적으로 동일한 IL-1β의 에피토프에 결합한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 IL-1β의 Glu64를 도입하는 에피토프에 결합한다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항체 또는 항체 단편은 IL-1β의 N 말단의 아미노산 1 내지 34에 결합한다.

몇몇 실시양태에서, 각각의 또는 임의의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 인간 개조된(human engineered) 또는 인간화된(humanized) 항체 또는 이의 결합 단편이다.

몇몇 실시양태에서, 각각의 또는 임의의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 인간 항체 또는 이의 결합 단편이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 3 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량(one or more doses)으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 항체 단편은 약 1 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 항체 단편은 약 0.3 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 항체 단편은 약 0.1 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 항체 단편은 약 0.03 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 항체 단편은 약 0.01 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 1 이상의 투여량은 약 0.01 ㎎/㎏ 이상의 항체 또는 단편이다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 대상체 체중 당 투여량 비와 무관한 고정된 투여량으로서 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 500 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 250 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 100 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 50 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 25 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 10 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 1.0 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 1.0 mg 이상의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 10 mg 이상의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 약 5 mg 내지 약 150 mg의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 약 10 mg 내지 약 75 mg(예를 들면, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg 또는 70 mg)의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 약 20 mg 내지 약 50 mg의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 상기 항체 또는 단편은 약 30 mg의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여된다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 개시(initial) 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 이때 상기 1 이상의 후속 투여량은 상기 개시 투여량과 거의 동일하거나 상기 개시 투여량보다 적은 양이다. 몇몇 실시양태에서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 이때 상기 1 이상의 후속 투여량은 개시 투여량보다 대략 10% 더 적은, 개시 투여량보다 20% 더 적은, 개시 투여량보다 30% 더 적은, 개시 투여량보다 40% 더 적은, 개시 투여량보다 50% 더 적은, 개시 투여량보다 60% 더 적은, 개시 투여량보다 70% 더 적은, 개시 투여량보다 80% 더 적은, 또는 개시 투여량보다 90% 더 적은 양이다. 예를 들면, 40 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 적은 양(32 mg), 30% 더 적은 양(28 mg), 40% 더 적은 양(24 mg), 50% 더 적은 양(20 mg), 60% 더 적은 양(16 mg) 등일 수 있다. 또 다른 예로서, 50 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 적은 양(40 mg), 30% 더 적은 양(35 mg), 40% 더 적은 양(30 mg), 50% 더 적은 양(25 mg), 60% 더 적은 양(20 mg) 등일 수 있다. 또 다른 예로서, 60 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 적은 양(48 mg), 30% 더 적은 양(42 mg), 40% 더 적은 양(36 mg), 50% 더 적은 양(30 mg), 60% 더 적은 양(24 mg) 등일 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 이때 상기 1 이상의 후속 투여량은 상기 개시 투여량보다 더 많은 양이다. 몇몇 실시양태에서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 이때 상기 1 이상의 후속 투여량은 상기 개시 투여량보다 10% 이상 더 많은, 20% 이상 더 많은, 30% 이상 더 많은, 40% 이상 더 많은, 50% 이상 더 많은, 75% 이상 더 많은 또는 100% 이상 더 많은 양이다. 예를 들면, 20 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 많은 양(24 mg), 30% 더 많은 양(26 mg), 40% 더 많은 양(28 mg), 50% 더 많은 양(30 mg), 100% 더 많은 양(40 mg) 등일 수 있다. 또 다른 예로서, 30 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 많은 양(36 mg), 30% 더 많은 양(39 mg), 40% 더 많은 양(42 mg), 50% 더 많은 양(45 mg), 100% 더 많은 양(60 mg) 등일 수 있다. 또 다른 예로서, 40 mg의 개시 투여량이 주어진 경우, 1 이상의 후속 투여량은 20% 더 많은 양(48 mg), 30% 더 많은 양(52 mg), 40% 더 많은 양(56 mg), 50% 더 많은 양(60 mg), 100% 더 많은 양(80 mg) 등일 수 있다.

각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 이상, 약 1.0 ㎍/㎖ 이상, 약 1.5 ㎍/㎖ 이상, 약 2.0 ㎍/㎖ 이상, 약 3.0 ㎍/㎖ 이상, 약 4.0 ㎍/㎖ 이상 또는 약 5.0 ㎍/㎖ 이상의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여된다. 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 내지 약 5 ㎍/㎖, 약 1 ㎍/㎖ 내지 5 ㎍/㎖ 또는 약 2 ㎍/㎖ 내지 5 ㎍/㎖의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여된다. 각각의 또는 임의의 전술된 방법의 몇몇 실시양태에서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 IL-1β에 의해 유도된 IL-8의 생성을 측정하는 인간 전혈 IL-1β 억제 분석에서 IL-1β 수용체 길항제보다 더 낮은 IC₅₀을 갖는다. 몇몇 실시양태에서, IL-1β 수용체 길항제는 아나킨라(anakinra)이다.

또한, 본 개시내용은 포도막염의 치료에서 사용되는 조성물의 제조에 있어서, IL-1β에 의해 유도된 IL-8의 생성을 측정하는 인간 전혈 IL-1β 억제 분석에서 IL-1β 수용체 길항제보다 더 낮은 IC₅₀을 갖는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편의 용도를 제공하고, 이때 상기 포도막염은 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염이다. 몇몇 실시양태에서, IL-1β 수용체 길항제는 아나킨라이다.

본 명세서가 일부 성질(예컨대, K_d 값 또는 IC₅₀ 값)을 갖는 항체 또는 이의 결합 단편을 사용하는 치료 방법들을 언급하고 있지만, 이것은 이들 방법들에서 사용되는 약제의 제조에 있어서 상기 항체 또는 이의 단편의 용도도 포함하기 위한 것이다. 추가로, 본 발명은 이들 성질을 갖는 항체 또는 이의 결합 단편뿐만 아니라 이하에 논의된 치료 방법에서 사용되는 이들 항체 또는 이의 결합 단편을 포함하는 약학 조성물도 포함한다.

도 1은 연구에 등록하기 전에 제공받은 치료 의약에 대한 정보와 함께 IL-1β 항체 임상 시험의 7명 대상체를 보여주는 표이다.
도 2는 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1001에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 3은 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1002에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 4는 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1003에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 5는 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1004에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 6은 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1005에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 7은 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1006에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 8은 IL-1β 항체로 치료된 대상체 1007에 대한 임상 데이터를 보여주는 표이다.
도 9는 IL-1β 항체를 사용한 치료 후 전방축농의 해소를 보여주는 영상이다.
도 10은 IL-1β 항체를 사용한 치료 후 유리체 혼탁의 해소를 보여주는 영상이다.

상세한 설명

포도막염의 치료 또는 예방에서 사용될 효과적인 요법이 중요한 의학적 요구로 남아있다. 본 개시내용은 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 치료 불응성(예를 들면, 치료 내성) 포도막염을 포함하는 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법 및 물질, 및 관련 제품을 제공한다. 이러한 물질 및 방법은 본원에서 제공된 다른 약학적 방법을 대체하거나 보완하는 데에 사용될 수 있다.

IL-1β는 단핵구 및 대식세포를 포함하는 다수의 상이한 종류의 세포에 의해 분비되는 전구염증 사이토카인이다. IL-1β는 염증 반응의 일부로서 방출되었을 때 주로 다른 염증 매개자, 예컨대, 코르티코트로핀, 혈소판 인자-4, 프로스타글란딘 E2(PGE2), IL-6 및 IL-8의 유도를 통해 매개되는 다양한 생물학적 효과를 생성한다. IL-1β는 거의 모든 종류의 세포 상에서 발견되는 IL-1 수용체의 활성화를 통해 국소 염증 효과 및 전신 염증 효과 둘다를 유도한다.

사이토카인의 인터루킨-1(IL-1) 패밀리는 여러 질환 상태, 예컨대, 류마티스성 관절염(RA), 골관절염, 크론병, 궤양성 결장염(UC), 패혈증 쇼크, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 천식, 이식편 대 숙주 반응, 죽상동맥경화증, 성인 T 세포 백혈병, 다발성 골수종, 다발성 경화증, 졸중 및 알츠하이머병과 관련되어 있다. IL-1 패밀리 구성원은 IL-1α, IL-1β 및 IL-1Ra를 포함한다. 이들 사이토카인들은 IL-1 수용체(IL-1R1, IL-1R2)에 결합하는 그들의 능력에 의해 관련되어 있지만, 이들 사이토카인들 각각은 상이한 유전자에 의해 발현되고 상이한 일차 아미노산 서열을 갖는다. 나아가, 이들 사이토카인들의 생리학적 활성은 서로 구별될 수 있다.

IL-1 수용체 신호전달을 파괴하는 화합물들은 IL-1 매개 질환, 예를 들면, 전술된 질환들 중 몇몇 질환을 치료하기 위한 치료제로서 연구되었다. 이들 화합물들은 재조합 IL-1Ra(암젠 인코포레이티드(Amgen Inc.), 미국 캘리포니아주 싸우전드 오크스 소재), IL-1 수용체 "트랩(trap)" 펩티드(리제네론 인코포레이티드(Regeneron Inc.), 미국 뉴욕주 태리타운 소재)뿐만 아니라 동물로부터 유래된 IL-1β 항체 및 재조합 IL-1β 항체, 및 이들의 단편을 포함한다.

전술된 바와 같이, IL-1 수용체 길항제(IL-1Ra) 폴리펩티드는 통풍의 치료에 사용될 것으로 제안되었지만(상기 문헌(So et al., 2007) 및 상기 문헌(McGonagle et al., 2007)), 통풍을 치료하는 효과적인 수단, 특히 매일 반복된 주사를 필요로 하지 않는 효과적인 수단에 대한 필요성이 남아있다. IL-1 수용체 길항제에 기초한 치료제에 대한 추가 과제는 이러한 치료제가 많은 수의 수용체들을 점유해야 할 필요성이 있다는 것인데, 이것은 이들 수용체들이 적혈구 세포를 제외한 모든 세포들 상에서 광범위하게 발현되기 때문에 방대한 일이다(Dinarello, Curr. Opin. Pharmacol. 4:378-385, 2004). 대다수의 면역 매개 질환들, 예컨대, 본원에 개시된 질환들에서, 체액에서 측정될 수 있거나 활성화된 세포와 관련되어 있는 IL-1β 사이토카인의 양은 상대적으로 낮다. 따라서, IL-1β 리간드를 직접적으로 표적화하는 치료 및/또는 예방 방법이 특히, 높은 친화성을 나타내는 IL-1β 항체를 투여하는 경우 우수한 방법이다.

본 발명은 IL-1β에 대해 특이적인 항체 또는 이의 단편을 사용하여 대상체(예를 들면, 포유동물, 인간)에서 통풍을 치료하고/하거나 예방하는 방법 및 관련 조성물, 및 제품을 제공한다.

하기 실시예 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명자들은 놀랍게도 이러한 항체(예를 들면, 매우 높은 친화성을 갖는 항체)가 IL-Ra(예를 들면, 키네렛(Kineret)^®)보다 훨씬 더 강력한 IL-1 경로 억제제일 수 있고 다른 약물, 예컨대, 재조합 IL-1Ra의 경우 필요한 투여량 및/또는 투여 빈도보다 더 낮은 투여량 및/또는 더 적은 투여 빈도로 치료 효과를 달성하는 기회를 제공한다는 것을 발견하였다.

IL-1β 항체 또는 단편을 사용하는 본원에 기재된 이러한 방법은 통풍(예를 들면, 급성 통풍, 만성 통풍, 불응성 통풍)을 앓는 대상체의 치료를 포함할 수 있다. 상기 방법은 위험군 대상체에서 통풍(예를 들면, 급성 통풍, 만성 통풍, 불응성 통풍)의 발생을 예방하는 것도 포함할 수 있다.

항체, 인간화된 항체 및 인간 개조된 항체

본 개시내용의 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체는 다중클론 항체, 단일클론 항체(mAb), 재조합 항체, 키메라 항체, CDR 이식된 항체, 전장 인간 항체, 단일쇄 항체 및/또는 이중특이적 항체뿐만 아니라, 효소에 의한 절단, 펩티드 합성 또는 재조합 기법을 포함하나 이들로 한정되지 않는 공지된 기법에 의해 제공된 상기 항체들의 변이체 및 유도체를 포함하는 단편으로서 제공될 수 있다.

1개의 중쇄 및 1개의 경쇄를 갖는 단일 도메인 항체, 및 경쇄를 갖지 않는 중쇄 항체도 고려되지만, 항체는 일반적으로 2개의 중쇄 폴리펩티드 및 2개의 경쇄 폴리펩티드를 포함한다. 중쇄 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여 분류된 5종의 중쇄(알파, 델타, 엡실론, 감마 및 뮤로 지칭됨)가 존재한다. 이들 상이한 종류의 중쇄들은 IgG의 4개 서브클래스, 즉 IgG₁, IgG₂, IgG₃ 및 IgG₄를 포함하는 5개 클래스의 항체, 즉 각각 IgA(IgA₁ 및 IgA₂를 포함함), IgD, IgE, IgG 및 IgM을 발생시킨다. 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여 분류된 2종의 경쇄(카파(κ) 또는 람다(λ)로 지칭됨)도 존재한다. 전장 항체는 불변 도메인 및 가변 도메인을 포함한다. 불변 영역은 항체의 항원 결합 단편에 존재할 필요가 없다. 본원에 개시된 항체의 항원 결합 단편은 Fab, Fab', F(ab')₂ 및 F(v) 항체 단편을 포함할 수 있다. 이하에 보다 상세히 논의되어 있는 바와 같이, IL-1β 결합 단편은 IL-1β에 결합할 항체 단편 및 항원 결합 폴리펩티드를 포함한다.

항체 또는 이의 항원 결합 단편의 중쇄 서열 및 경쇄 서열 각각은 3개의 상보성 결정 영역(CDR) 및 비-CDR 골격 영역(FR)을 갖는 가변 영역을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "중쇄" 및 "경쇄"는, 달리 명시되어 있지 않은 한, 각각 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 의미한다. 중쇄 CDR은 본원에서 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로서 지칭된다. 경쇄 CDR은 본원에서 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로서 지칭된다. 항체 서열 내의 가변 영역 및 CDR은 (i) 당업계에서 개발된 일반적인 규칙에 따라, 또는 (ii) 공지된 가변 영역의 데이터베이스에 대해 서열을 정렬시킴으로써 확인될 수 있다. 이들 영역들을 확인하는 방법은 문헌(Kontermann and Dubel, eds., Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001) 및 문헌(Dinarello et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley and Sons Inc., Hoboken, NJ, 2000)에 기재되어 있다. 항체 서열의 데이터베이스는 문헌에 기재되어 있고 문헌(Retter et al., Nucl. Acids Res., 33(Database issue):D671-D674 (2005))에 기재된 바와 같이 웹사이트(www.bioinf.org.uk/abs)(영국 런던에 소재하는 런던대학교 생화학 및 분자생물학부의 에이.씨. 마틴(A.C. Martin)에 의해 유지됨)의 "카바트만(Kabatman)" 데이터베이스 및 웹사이트(www.vbase2.org)의 VBASE2를 통해 접근될 수 있다. "카바트만" 데이터베이스 웹사이트는 CDR을 확인하기 위한 엄지손가락 일반 법칙도 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "CDR"은, 달리 표시되어 있지 않은 한, 문헌(Kabat et al., Sequences of Immunological Interest, 5th ed., U.S. Department of Health and Human Services, 1991)에서 정의된 바와 같다.

다중클론 항체는 바람직하게는 관련 항원 및 보조제의 다회 피하(sc) 또는 복강내(ip) 주사에 의해 동물에서 발생된다. 개선된 항체 반응은 이작용성 또는 유도체화 물질, 예를 들면, 말레이미도벤조일 설포석신이미드 에스테르(시스테인 잔기를 통해 접합), N-하이드록시석신이미드(라이신 잔기를 통해 접합), 글루타르알데하이드, 석신산 무수물, 또는 당업계에서 공지되어 있는 다른 물질을 사용하여 관련 항원을 면역화될 종에서 면역원성을 나타내는 단백질, 예를 들면, 키홀 림펫 헤모시아닌, 혈청 알부민, 소 티로글로불린 또는 대두 트립신 억제제에 접합시킴으로써 수득될 수 있다.

예를 들면, 100 ㎍ 또는 5 ㎍의 단백질 또는 접합체(각각 토끼 또는 마우스의 경우)를 3배 부피의 프로인트 완전 보조제(Freund's complete adjuvant)와 조합하고 용액을 다수의 부위에서 진피내로 주사함으로써 항원, 면역원성 접합체 또는 유도체에 대해 동물을 면역화시킨다. 1개월 후, 원래의 양의 1/5 내지 {분율(1/10)}의 프로인트 완전 보조제 중의 펩티드 또는 접합체를 다수의 부위에서 피하 주사함으로써 상기 동물을 부스팅시킨다. 부스터 주사 후 7일째 날 내지 14일째 날, 상기 동물을 채혈하고, 항체 역가에 대해 혈청을 분석한다. 역가 안정기까지 동물을 부스팅시킨다. 바람직하게는, 상이한 단백질에 접합되고/되거나 상이한 가교결합 시약을 통해 접합된 동일한 항원의 접합체를 사용하여 상기 동물을 부스팅시킨다. 접합체는 단백질 융합체로서 재조합 세포 배양물에서 제조될 수도 있다. 또한, 응집제, 예컨대, 명반을 적절하게 사용하여 면역 반응을 증강시킨다.

단일클론 항체는 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 수득된 항체를 의미한다. 단일클론 항체는 일반적으로 매우 특이적이고, 전형적으로 상이한 결정인자들(에피토프들)에 대해 유도된 상이한 항체들을 포함하는 통상적인 (다중클론) 항체 제제와 대조적으로 단일 항원성 부위에 대해 유도될 수 있다. 단일클론 항체는 그의 특이성 이외에 균질한 배양물에 의해 합성되고 상이한 특이성 및 특성을 갖는 다른 면역글로불린에 의해 오염되지 않는다는 점에서 유리하다.

단일클론 항체는 문헌(Kohler et al., Nature, 256:495-7, 1975)에 의해 최초로 기재된 하이브리도마 방법에 의해 제조될 수 있거나, 재조합 DNA 방법(예를 들면, 미국 특허 제4,816,567호 참조)에 의해 제조될 수 있다. 또한, 단일클론 항체는 예를 들면, 문헌(Clackson et al., Nature 352:624-628, 1991), 문헌(Marks et al., J. Mol. Biol. 222:581-597, 1991), 문헌(Hoogenboom, Nat Biotechnol. 23:1105-16, 2005) 및 문헌(Mondon et al., Front Biosci., 13:1117-1129, 2008)에 기재된 기법의 이용을 통해 디스플레이 라이브러리(예를 들면, 효모 라이브러리, 파지 항체 라이브러리)로부터 단리될 수 있다.

하이브리도마 방법에서, 면역화에 사용되는 단백질에 특이적으로 결합할 항체를 생성하거나 생성할 수 있는 림프구를 이끌어내기 위해 마우스 또는 다른 적절한 숙주 동물, 예컨대, 햄스터 또는 짧은꼬리 원숭이를 본원에 기재된 바와 같이 면역화시킨다. 대안적으로, 시험관 내에서 림프구를 면역화시킬 수 있다. 그 다음, 적합한 융합제, 예컨대, 폴리에틸렌 글리콜을 사용하여 림프구를 골수종 세포와 융합시켜 하이브리도마 세포를 형성한다(Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986)).

이로써 제조된 하이브리도마 세포를, 바람직하게는 비융합된 모 골수종 세포의 성장 또는 생존을 억제하는 하나 이상의 물질을 함유하는 적합한 배양 배지에 시딩하여 성장시킨다. 예를 들면, 모 골수종 세포가 효소 하이포잔틴 구아닌 포스포리보실 트랜스퍼라제(HGPRT 또는 HPRT)를 결여하는 경우, 하이브리도마를 위한 배양 배지는 전형적으로 HGPRT 결핍 세포의 성장을 방해하는 물질인 하이포잔틴, 아미노프테린 및 티미딘을 포함할 것이다(HAT 배지).

바람직한 골수종 세포는 효율적으로 융합하고 선택된 항체 생성 세포에 의한 항체의 안정한 고도 생성을 지지하고 배지에 민감한 골수종 세포이다. 인간 단일클론 항체의 생성을 위한 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주도 기재되어 있다(Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)). 예시적인 뮤린 골수종 세포주는 살크 인스티튜트 셀 디스트리뷰션 센터(Salk Institute Cell Distribution Center)(미국 캘리포니아주 샌 디에고 소재)로부터 입수가능한 MOP-21 및 M.C.-11 마우스 종양으로부터 유도된 골수종 세포주, 및 어메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection)(미국 메릴랜드주 록빌 소재)으로부터 입수가능한 SP-2 또는 X63-Ag8-653 세포를 포함한다.

하이브리도마 세포가 성장하고 있는 배양 배지를 항원에 대해 유도된 단일클론 항체의 생성에 대해 분석한다. 바람직하게는, 하이브리도마 세포에 의해 생성된 단일클론 항체의 결합 특이성을 면역침전 또는 시험관내 결합 분석, 예컨대, 방사면역분석(RIA) 또는 효소-연결된 면역흡착 분석(ELISA)으로 측정한다. 단일클론 항체의 결합 친화성을 예를 들면, 스캐차드(Scatchard) 분석으로 측정할 수 있다(Munson et al., Anal. Biochem., 107:220 (1980)).

원하는 특이성, 친화성 및/또는 활성을 나타내는 항체를 생성하는 하이브리도마 세포를 확인한 후, 클론을 제한 희석 절차로 서브클로닝할 수 있고 표준 방법으로 성장시킬 수 있다(Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986)). 이 목적에 적합한 배양 배지는 예를 들면, DMEM 또는 RPMI-1640 배지를 포함한다. 또한, 하이브리도마 세포를 동물에서 복수 종양으로서 생체 내에서 성장시킬 수 있다. 서브클론에 의해 분비된 단일클론 항체를 통상적인 면역글로불린 정제 절차, 예를 들면, 단백질 A-세파로스, 하이드록실아파타이트 크로마토그래피, 겔 전기영동, 투석 또는 친화성 크로마토그래피로 배양 배지, 복수액 또는 혈청으로부터 적절하게 분리한다.

항체가 당업계에서 잘 공지되어 있고 본원에 기재되어 있는 항체의 보다 작은 항원 결합 단편으로서 사용될 수 있다는 것도 고려된다.

본 개시내용은 2개의 전장 중쇄 및 2개의 전장 경쇄를 포함하는 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체를 포함한다. 대안적으로, IL-1β 결합 항체는 IL-1β에 결합하는 활성을 보유하는 구축물, 예컨대, 단일쇄 항체 또는 "미니" 항체일 수 있다. 이러한 구축물은 당업계에서 공지되어 있는 방법, 예를 들면, 이. 콜라이에서의 발현을 위한 단일쇄 항체의 PCR 매개 클로닝 및 조립에 의해 제조될 수 있다(문헌(Antibody Engineering, The practical approach series, J. McCafferty, H. R. Hoogenboom, and D. J. Chiswell, editors, Oxford University Press, 1996)에 기재된 바와 같음). 이러한 종류의 구축물에서, 항체 분자의 중쇄 및 경쇄의 가변 부분은 cDNA로부터 PCR에 의해 증폭된다. 그 다음, 생성된 앰플리콘(amplicon)은 예를 들면, 아미노산 Gly 및 Ser으로 구성된 유연성 단백질 링커를 코딩하는 링커 DNA를 통해 제2 PCR 단계에서 조립된다. 이 링커는 항원 결합 포켓(pocket)이 재생되고 항원이 종종 모 전장 이량체 면역글로불린 분자에 필적할만한 친화성으로 결합되는 방식으로 가변 중쇄 부분 및 경쇄 부분이 폴딩되게 한다.

본 개시내용의 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편은 본원에 개시된 예시적인 항체, 단편 및 서열의 변이체를 포함한다. 변이체는 본원에 개시된 하나 이상의 예시적인 항체, 단편 및 서열과 동일한 또는 실질적으로 동일한 친화성 및 특이성으로 에피토프에 결합하는, 하나 이상의 아미노산 서열 치환, 결실 및/또는 부가를 포함하는 펩티드 및 폴리펩티드를 포함한다. 따라서, 변이체는 본원에 개시된 예시적인 항체, 단편 및 서열에 대한 하나 이상의 아미노산 서열 치환, 결실 및/또는 부가를 포함하는 펩티드 및 폴리펩티드를 포함하고, 이때 이러한 치환, 결실 및/또는 부가는 에피토프 결합의 친화성 및 특이성의 실질적인 변화를 야기하지 않는다. 예를 들면, 항체 또는 단편의 변이체는 항체 또는 단편에 대한 하나 이상의 변화로부터 발생될 수 있고, 이때 변화된 항체 또는 단편은 출발 서열과 동일한 또는 실질적으로 동일한 친화성 및 특이성으로 에피토프에 결합한다. 변이체는 천연 발생 변이체, 예컨대, 대립유전자 또는 스플라이스 변이체일 수 있거나 인공적으로 구축될 수 있다. 변이체는 상기 변이체를 코딩하는 상응하는 핵산 분자로부터 제조될 수 있다. 본 발명의 항체 및 IL-1β 결합 단편의 변이체는 경쇄 및/또는 중쇄 아미노산 서열 내에서 천연적으로 발생하는 변화, 또는 재조합 DNA 기법을 이용한 천연 서열의 시험관내 개조에 의해 도입된 변화를 가질 수 있다. 천연 발생 변이체는 외래 항원에 대한 항체 반응의 발생 동안 생체 내에서 상응하는 생식세포주 뉴클레오티드 서열 내에서 발생되는 "체세포" 변이체를 포함한다.

IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편의 변이체는 돌연변이유발 기법에 의해 제조될 수도 있다. 예를 들면, 아미노산 변화는 항체 코딩 영역 전체에서 무작위적으로 도입될 수 있고, 생성된 변이체는 IL-1β에 대한 결합 친화성 또는 또 다른 성질에 대해 스크리닝될 수 있다. 대안적으로, 아미노산 변화는 IL-1β 항체의 선택된 영역, 예컨대, 경쇄 및/또는 중쇄 CDR, 및/또는 골격 영역 내에 도입될 수 있고, 생성된 항체는 IL-1β와의 결합 또는 몇몇 다른 활성에 대해 스크리닝될 수 있다. 아미노산 변화는 주어진 CDR, 예컨대, CDR3 내의 단일 아미노산 차이부터 다수의 아미노산 치환의 도입까지 다양할 수 있는, CDR 내의 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 또 다른 방법에서, CDR 내의 하나 이상의 잔기를 알라닌으로 치환시킴으로써 CDR 내의 각각의 잔기가 IL-1β 결합에 기여하는 정도를 평가할 수 있다(Lewis et al., (1995), Mol. Immunol. 32:1065-72). 그 다음, 보다 적합한 서열을 확인하기 위해 IL-1β와의 결합에 적합하지 않은 잔기를 변화시킬 수 있다. CDR, 예컨대, CDR3의 크기를 증가시키기 위한 아미노산의 삽입에 의해 발생된 변이체도 포함된다. 예를 들면, 대다수의 경쇄 CDR3 서열들은 길이에 있어서 9개의 아미노산을 갖는다. 9개 잔기보다 더 짧은 항체 내의 경쇄 서열은 CDR의 길이를 증가시키기 위한 적절한 아미노산의 삽입에 의해 IL-1β와의 결합에 대해 최적화될 수 있다.

변이체는 경쇄 또는 중쇄의 "쇄 셔플링(shuffling)"에 의해서도 제조될 수 있다(Marks et al., (1992), Biotechnology 10:779-83). 단일 경쇄(또는 중쇄)는 중쇄(또는 경쇄)의 레퍼토리를 갖는 라이브러리와 조합될 수 있고, 생성된 집단은 원하는 활성, 예컨대, IL-1β와의 결합에 대해 스크리닝된다. 이것은 중쇄 및 경쇄 둘다의 레퍼토리를 포함하는 라이브러리를 사용하는 경우 가능한 샘플보다 더 많은 샘플(단일 경쇄(또는 중쇄)와 조합된 상이한 중쇄들(또는 경쇄들)의 샘플)의 스크리닝을 허용한다.

본 개시내용의 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편은 본원에 개시된 예시적인 항체, 단편 및 서열의 유도체를 포함한다. 유도체는 폴리펩티드 또는 펩티드, 또는 화학적으로 변형된 이들의 변이체, 단편 또는 유도체를 포함한다. 예로는 하나 이상의 중합체, 예컨대, 수용성 중합체, N-연결된 또는 O-연결된 탄수화물, 당, 인산염 및/또는 다른 이러한 분자의 공유부착이 있다. 유도체는 부착된 분자의 종류 또는 위치에서 천연 발생 또는 출발 펩티드 또는 폴리펩티드와 상이한 방식으로 변형된다. 유도체는 펩티드 또는 폴리펩티드 상에 천연적으로 존재하는 하나 이상의 화학적 기의 결실을 추가로 포함한다.

IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 이중특이성을 나타낼 수 있다. 이중특이적 항체 또는 단편은 여러 입체구조를 가질 수 있다. 예를 들면, 이중특이적 항체는 단일 항체(또는 항체 단편)와 유사할 수 있으나 2개의 상이한 항원 결합 부위(가변 영역)를 가질 수 있다. 이중특이적 항체는 화학적 기법(Kranz et al., (1981), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78:5807), "폴리도마(polydoma)" 기법(미국 특허 제4,474,893호) 또는 재조합 DNA 기법에 의해 생성될 수 있다. 이중특이적 항체는 2개 이상의 상이한 에피토프(이들 중 1개 이상의 에피토프가 IL-1β의 에피토프임)에 대한 결합 특이성을 나타낼 수 있다. IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 이종항체일 수도 있다. 이종항체는 함께 연결된 2개 이상의 항체 또는 항체 결합 단편(Fab)이고, 이때 각각의 항체 또는 단편이 상이한 특이성을 나타낸다.

항체 분자의 항원 결합 영역의 재조합 DNA 버전을 생성하는 기법으로서, 단일클론 항체의 발생을 우회하는 기법이 본 발명의 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편에 대해 고려된다. DNA는 세균 발현 시스템 내로 클로닝된다. 본 발명의 실시에 적합한 이러한 기법의 일례는 발현된 Fab 단백질이 원형질막주위공간(세균 세포막과 세포벽 사이)으로 이동하게 하거나 분비되게 하는 리더 서열을 갖는 박테리오파지 람다 벡터 시스템을 이용한다. 이것은 많은 수의 기능성 Fab 단편들을 신속하게 발생시킬 수 있고 IL-1β에 결합하는 기능성 Fab 단편에 대해 스크리닝할 수 있다. 이러한 IL-1β 결합제(IL-1β 폴리펩티드에 대한 특이성을 나타내는 Fab 단편)는 본 개시내용의 IL-1β 결합 항체 및 결합 단편의 범위 내에 구체적으로 포함된다.

본 발명의 IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편은 인간화된 또는 인간 개조된 항체일 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 인간화된 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 비-인간 항체로부터의 항원 결합 부위의 일부, 및 인간 항체의 골격 및/또는 불변 영역의 일부를 포함하는 재조합 폴리펩티드이다. 인간 개조된 항체 또는 항체 단편은 인간에서 변형된 항체의 임의의 검출가능한 면역원성을 감소시키거나 제거하기 위해 특정 위치에서 아미노산을 변형(예를 들면, 결실, 삽입 또는 치환)시킴으로써 개조된 비-인간(예를 들면, 마우스) 항체이다.

인간화된 항체는 키메라 항체 및 CDR 이식된 항체를 포함한다. 키메라 항체는 인간 불변 영역에 연결된 비-인간 항체 가변 영역을 포함하는 항체이다. 따라서, 키메라 항체에서, 가변 영역은 주로 비-인간 항체 가변 영역이고, 불변 영역은 인간 불변 영역이다. 키메라 항체 및 이의 제조 방법은 문헌(Morrison, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6841-6855 (1984)), 문헌(Boulianne, et al., Nature, 312:643-646 (1984)) 및 PCT 특허출원 공보 제WO 86/01533호에 기재되어 있다. 키메라 항체가 마우스 단일클론 항체보다 더 낮은 면역원성을 나타낼 수 있지만, 키메라 항체의 투여는 항체의 비-인간 부분에 대한 인간 항-마우스 항체 반응(HAMA)과 관련되어 있다. 적절한 항원 결합 특이성을 나타내는 마우스 항체 분자로부터의 유전자를, 적절한 생물학적 활성, 예컨대, 인간 보체를 활성화시키고 ADCC를 매개하는 능력을 갖는 인간 항체 분자로부터의 유전자와 함께 스플라이싱시킴으로써 키메라 항체를 생성할 수도 있다(Morrison et al., (1984), Proc. Natl. Acad. Sci., 81:6851; Neuberger et al., (1984), Nature, 312:604). 일례는 Fc 영역을 상이한 동종형의 Fc 영역으로 치환시키는 것이다.

CDR 이식된 항체는 인간 "수용자" 항체로부터의 골격 영역에 연결된 비-인간 "공여자" 항체로부터의 CDR을 포함하는 항체이다. 일반적으로, CDR 이식된 항체는 이 항체가 인간 항체로부터의 불변 영역 서열 및 가변 영역(골격) 서열 둘다를 포함하기 때문에 키메라 항체보다 더 많은 인간 항체 서열을 포함한다. 따라서, 예를 들면, 본 발명의 CDR 이식된 인간화된 항체는 인간 항체의 골격 영역으로부터의 인접한 아미노산 서열(예를 들면, 약 5개 이상, 10개 이상 또는 심지어 15개 이상의 인접한 아미노산 잔기) 또는 임의적으로 인간 항체의 전체 골격 영역의 대부분 또는 전부를 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다. CDR 이식된 항체 및 이의 제조 방법은 문헌(Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986)), 문헌(Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988)) 및 문헌(Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988))에 기재되어 있다. 인간화된 항체를 생성하는 데에 이용될 수 있는 방법은 미국 특허 제4,816,567호, 제5,721,367호, 제5,837,243호 및 제6,180,377호에도 기재되어 있다. CDR 이식된 항체는 비-인간 항체 부분에 대한 면역 반응을 유도할 가능성이 키메라 항체보다 더 낮은 것으로 간주된다. 그러나, 공여자 항체로부터의 골격 서열들은 아마도 이들 골격 서열들이 공여자 항체의 항원 결합 부분의 폴딩에 영향을 미치기 때문에 공여자 항체의 결합 친화성 및/또는 특이성을 위해 요구된다고 보고되어 있다. 따라서, 공여자 비-인간 CDR 서열이 비-변경된 인간 골격 서열 상으로 이식된 경우, 생성된 CDR 이식된 항체는 몇몇 경우 원래의 비-인간 공여자 항체에 비해 상대적으로 결합 친화력(avidity)의 상실을 나타낼 수 있다. 예를 들면, 문헌(Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988)) 및 문헌(Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988))을 참조한다.

인간 개조된 항체는 예를 들면, "베니어드(veneered)" 항체, 및 휴먼 엔지니어링(HUMAN ENGINEERING)™ 기술을 이용하여 제조한 항체를 포함한다(예를 들면, 미국 특허 제5,766,886호 및 제5,869,619호 참조). 휴먼 엔지니어링™ 기술은 상업적으로 입수가능하고, 인간에서 감소된 면역원성을 나타내지만 원래의 비-인간 항체의 원하는 결합 성질을 보유하는 변형된 항체를 생성하기 위해 비-인간 항체의 아미노산 서열에 특정 변화를 도입함으로써 상기 비-인간 항체 또는 항체 단편, 예컨대, 마우스 또는 키메라 항체 또는 항체 단편을 변경시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 기법은 비-인간(예를 들면, 마우스) 항체의 아미노산 잔기를 "저위험", "중간 위험" 또는 "고위험" 잔기로서 분류하는 단계를 포함한다. 상기 분류는 특정 치환이 생성된 항체의 폴딩 및/또는 항원 결합 성질에 영향을 미칠 위험과 대조하여 상기 특정 치환의 도입의 예측된 이점(예를 들면, 인간에서의 면역원성)을 평가하는 전반적인 위험/이익 계산을 이용함으로써 수행된다. 따라서, 저위험 위치는 항원 결합 성질에 유의하게 영향을 미치지 않으면서 면역원성을 감소시킬 것으로 예측되기 때문에 유리한 치환일 것으로 예측되는 치환의 위치이다. 중간 위험 위치는 면역원성을 감소시키지만 단백질 폴딩 및/또는 항원 결합에 영향을 미칠 가능성이 보다 더 높은 치환일 것으로 예측되는 치환의 위치이다. 고위험 위치는 적절한 폴딩 또는 항원 결합과 관련될 가능성이 가장 높은 잔기를 함유한다. 일반적으로, 비-인간 항체에서 저위험 위치는 인간 잔기로 치환되고, 고위험 위치는 거의 치환되지 않고, 중간 위험 위치에서 인간화 치환이 종종 도입되지만, 무차별적으로 치환되지는 않는다. 비-인간 항체 가변 영역 서열에서 프롤린을 갖는 위치는 통상적으로 적어도 중간 위험 위치로서 분류된다.

비-인간(예를 들면, 마우스) 항체 서열의 주어진 저위험 또는 중간 위험 위치에서 치환될 구체적인 인간 아미노산 잔기는 비-인간 항체의 가변 영역으로부터의 아미노산 서열을 특정 또는 컨센서스 인간 항체 서열의 상응하는 영역과 정렬시킴으로써 선택될 수 있다. 비-인간 서열 내의 저위험 또는 중간 위험 위치에 존재하는 아미노산 잔기는 상기 정렬에 따라 인간 항체 서열 내의 상응하는 잔기를 치환시킬 수 있다. 인간 개조된 단백질의 제조 기법은 문헌(Studnicka et al., Protein Engineering, 7:805-814 (1994)), 미국 특허 제5,766,886호, 제5,770,196호, 제5,821,123호 및 제5,869,619호, 및 PCT 특허출원 공보 제WO 93/11794호에 더 상세히 기재되어 있다.

"베니어드" 항체는 그의 면역원성을 추가로 감소시키거나 그의 기능을 증강시키기 위해 일부 용매 노출된 아미노산 잔기를 치환시키도록 개조된 비-인간 또는 인간화된 항체(예를 들면, 키메라 또는 CDR 이식된 항체)이다. 키메라 항체의 표면 잔기가 적절한 항체 폴딩에 영향을 미칠 가능성이 보다 더 낮고 면역 반응을 이끌어낼 가능성이 보다 더 높은 것으로 추정되기 때문에, 키메라 항체의 베니어링(veneering)은 예를 들면, 키메라 항체의 비-인간 골격 영역에서 용매 노출된 잔기를 확인하는 단계, 및 이들 잔기들 중 하나 이상의 잔기를 인간 골격 영역으로부터의 상응하는 표면 잔기로 치환시키는 단계를 포함한다. 베니어링은 전술된 휴먼 엔지니어링™ 기술의 이용을 포함하는 임의의 적합한 개조 기법에 의해 달성될 수 있다.

상이한 방법에서, 결합 친화력의 회복은 CDR 이식된 항체를 "탈인간화함으로써(de-humanizing)" 달성될 수 있다. 탈인간화하는 것은 공여자 항체의 골격 영역으로부터의 잔기를 CDR 이식된 항체로 복원함으로써 적절한 폴딩을 복원하는 것을 포함할 수 있다. 유사한 "탈인간화(de-humanization)"는 (i) "수용자" 항체 내에 "공여자" 골격 영역의 일부를 포함시키거나, (ii) "공여자" 항체 골격 영역의 일부를 (이식되는 공여자 CDR과 함께) 수용자 항체 내로 이식함으로써 달성될 수 있다.

항체, 인간화된 항체, 인간 개조된 항체 및 이들의 제조 방법의 추가 논의에 대해서는 문헌(Kontermann and Dubel, eds., Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001)을 참조한다.

예시적인 인간화된 또는 인간 개조된 항체는 IgG, IgM, IgE, IgA 및 IgD 항체를 포함한다. 본 발명의 항체는 임의의 클래스(IgG, IgA, IgM, IgE, IgD 등) 또는 동종형의 항체일 수 있고 카파 또는 람다 경쇄를 포함할 수 있다. 예를 들면, 인간 항체는 IgG 중쇄 또는 정의된 단편, 예컨대, 동종형인 IgG₁, IgG₂, IgG₃ 및 IgG₄ 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 추가 예로서, 본 발명의 항체 또는 단편은 IgG₁ 중쇄 및 IgG₁ 경쇄를 포함할 수 있다.

본 발명의 항체 및 단편은 인간 항체, 예컨대, IL-1β 폴리펩티드에 결합하는 항체일 수 있고 인간 생식세포주 면역글로불린 핵산 서열의 천연 발생 체세포 변이체, 또는 이의 단편, 합성 변이체, 유도체 또는 융합체인 핵산 서열에 의해 코딩된다. 이러한 항체는 당업계에서 공지되어 있는 임의의 방법, 예컨대, 포유동물 염색체 내에서 천연 면역글로불린 레퍼토리가 인간 V 유전자로 치환되어 있는 형질전환 포유동물(예컨대, 형질전환 마우스)의 이용을 통해 생성될 수 있다. 이러한 포유동물은 인간 생식세포주 항체 유전자의 VDJ 재조합 및 체세포 과돌연변이를 정상적인 방식으로 수행하여 완전한 인간 서열을 갖는 고친화성 항체를 생성하는 듯하다.

내인성 면역글로불린 생성을 갖지 않고 인간 면역글로불린 좌위를 함유하도록 개조된 형질전환 동물을 이용하여 표적 단백질에 대한 인간 항체를 생성할 수도 있다. 예를 들면, PCT 특허출원 공보 제WO 98/24893호는 인간 Ig 좌위를 갖는 형질전환 동물을 개시하고, 이때 상기 동물은 내인성 중쇄 및 경쇄 좌위의 불활성화로 인해 기능성 내인성 면역글로불린을 생성하지 않는다. 또한, PCT 특허출원 공보 제WO 91/00906호는 면역원에 대한 면역 반응을 일으킬 수 있는 형질전환 비-영장류 포유동물 숙주를 개시하고, 이때 항체는 영장류 불변 영역 및/또는 가변 영역을 갖고, 내인성 면역글로불린 코딩 좌위는 치환되거나 불활성화된다. PCT 특허출원 공보 제WO 96/30498호 및 미국 특허 제6,091,001호는 포유동물에서 면역글로불린 좌위를 변형시키기 위한, 예컨대, 불변 영역 또는 가변 영역의 전부 또는 일부를 치환시켜 변형된 항체 분자를 형성하기 위한 Cre/Lox 시스템의 용도를 개시한다. PCT 특허출원 공보 제WO 94/02602호는 불활성화된 내인성 Ig 좌위 및 기능성 인간 Ig 좌위를 갖는 비-인간 포유동물 숙주를 개시한다. 미국 특허 제5,939,598호는 내인성 중쇄를 결여하고, 하나 이상의 이종발생성(xenogeneic) 불변 영역을 포함하는 내인성 면역글로불린 좌위를 발현하는 형질전환 마우스의 제조 방법을 개시한다. 미국 특허 제6,114,598호, 제6,657,103호 및 제6,833,268호도 참조한다.

전술된 형질전환 동물을 이용하여, 선택된 항원성 분자에 대한 면역 반응을 생성할 수 있고, 상기 동물로부터 항체 생성 세포를 분리하여 인간 단일클론 항체를 분비하는 하이브리도마를 생성하는 데에 사용할 수 있다. 면역화 프로토콜, 보조제 등은 당업계에서 공지되어 있고, 예를 들면, PCT 특허출원 공보 제WO 96/33735호에 기재된 바와 같이 형질전환 마우스의 면역화에 사용된다. 상기 공보는 IL-6, IL-8, TNFα, 인간 CD4, L 셀렉틴(selectin), gp39 및 파상풍 독소를 포함하는 다양한 항원성 분자에 대한 단일클론 항체를 개시한다. 상기 단일클론 항체는 상응하는 단백질의 생물학적 활성 또는 생리학적 효과를 억제하거나 중화시키는 능력에 대해 시험될 수 있다. PCT 특허출원 공보 제WO 96/33735호는 IL-8로 면역화된 형질전환 마우스의 면역 세포로부터 유도된, IL-8에 대한 단일클론 항체가 IL-8에 의해 유도된 호중구 기능을 차단한다고 개시한다. 형질전환 동물을 면역화시키는 데에 사용된 항원에 대한 특이성을 나타내는 인간 단일클론 항체도 PCT 특허출원 공보 제WO 96/34096호, 미국 특허출원 공보 제20030194404호 및 미국 특허출원 공보 제20030031667호에 개시되어 있다.

단일클론 항체의 제조에 유용한 추가 형질전환 동물은 인간 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 비재배열된 인간 항체 유전자로부터의 유전자 서열을 함유하는, 미국 특허 제5,770,429호 및 문헌(Fishwild, et al., Nat. Biotechnol. 14:845-851, 1996)에 기재된 메다렉스(Medarex) HuMAb-마우스(MOUSE)^®를 포함한다. HuMAb-마우스^®의 면역화는 표적 단백질에 대한 완전한 인간 단일클론 항체의 생성을 가능하게 한다.

또한, 문헌(Ishida et al., Cloning Stem Cells. 4:91-102, 2002)은 메가베이스 크기의 인간 DNA 절편을 포함하고 전체 인간 면역글로불린(hIg) 좌위를 도입하는 트랜스크로모 마우스(TransChromo Mouse)(TCMOUSE™)를 기술한다. TCMOUSE™는 IgG의 모든 서브클래스(IgG₁ 내지 IgG₄)를 포함하는 hIg의 전체 다양한 레퍼토리를 갖는다. 다양한 인간 항원을 사용한 TCMOUSE™의 면역화는 인간 항체를 포함하는 항체 반응을 생성한다.

문헌(Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993)), 문헌(Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993)), 문헌(Bruggermann et al., Year in Immunol., 7:33 (1993)), 미국 특허 제5,591,669호, 미국 특허 제5,589,369호, 미국 특허 제5,545,807호 및 미국 특허출원 공보 제20020199213호도 참조한다. 미국 특허출원 공보 제20030092125호는 동물의 면역 반응을 원하는 에피토프로 편향시키는 방법을 기술한다. 인간 항체는 시험관 내에서 활성화된 B 세포에 의해 발생될 수도 있다(미국 특허 제5,567,610호 및 제5,229,275호 참조).

인간 항체는 항체 디스플레이 라이브러리의 시험관내 스크리닝을 통해 발생될 수도 있다. 문헌(Hoogenboom et al., (1991), J. Mol. Biol. 227:381) 및 문헌(Marks et al., (1991), J. Mol. Biol. 222:581)을 참조한다. 다양한 항체 함유 파지 디스플레이 라이브러리가 기재되어 있고 용이하게 제조될 수 있다. 라이브러리는 적절한 표적에 대해 스크리닝될 수 있는 다양한 인간 항체 서열, 예컨대, 인간 Fab, Fv 및 scFv 단편을 함유할 수 있다. 파지 디스플레이 라이브러리는 IL-1β의 선택적 결합제를 확인하기 위해 스크리닝될 수 있는, 항체 이외의 펩티드 또는 단백질을 포함할 수 있다.

재조합 인간 항체 유전자의 레퍼토리를 제조하는 기술, 및 코딩된 항체 단편을 사상(filamentous) 박테리오파지의 표면 상에 디스플레이하는 기술의 개발은 인간 항체를 직접적으로 제조하는 수단을 제공하였다. 파지 기술에 의해 생성된 항체는 세균에서 항원 결합 단편(통상적으로 Fv 또는 Fab 단편)으로서 생성되므로 이펙터 기능을 결여한다. 이펙터 기능은 하기 2종의 방법들 중 하나에 의해 도입될 수 있다: 상기 단편은 포유동물 세포에서의 발현을 위한 완전한 항체로 개조될 수 있거나 이펙터 기능을 유발할 수 있는 제2 결합 부위를 갖는 이중특이적 항체 단편으로 개조될 수 있다.

본 개시내용은 파지 상의 인간 항체의 라이브러리를 합성하는 단계, 상기 라이브러리를 표적 단백질 또는 이의 일부로 스크리닝하는 단계, 표적에 결합하는 파지를 단리하는 단계, 및 상기 파지로부터 항체를 수득하는 단계를 포함하는, 표적 특이적 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 생성하는 방법을 고려한다. 예를 들면, 파지 디스플레이 기법에서 사용될 항체의 라이브러리를 제조하는 한 방법은 인간 면역글로불린 좌위를 포함하는 비-인간 동물을 표적 항원 또는 이의 항원성 부분으로 면역화시켜 면역 반응을 생성하는 단계, 항체 생성 세포를 면역화된 동물로부터 추출하는 단계, RNA를 추출된 세포로부터 단리하는 단계, RNA를 역전사하여 cDNA를 생성하는 단계, 상기 cDNA를 프라이머를 사용하여 증폭시키는 단계, 및 항체가 파지 상에서 발현되도록 상기 cDNA를 파지 디스플레이 벡터 내로 삽입하는 단계를 포함한다. 본 발명의 재조합 표적 특이적 항체는 이 방식으로 수득될 수 있다.

파지 디스플레이 과정은 사상 박테리오파지의 표면 상에의 항체 레퍼토리의 디스플레이, 및 상기 항체와 선택된 항원의 결합에 의한 파지의 후속 선택을 통해 면역 선택을 재현한다. 이러한 한 기법은 PCT 특허출원 공보 제WO 99/10494호에 기재되어 있는데, 상기 공보는 이러한 기법을 이용하여 MPL 및 msk 수용체에 대한 고친화성 및 기능성 작용제 항체를 단리하는 것을 기술하고 있다. 본 발명의 항체는 인간 림프구로부터 유래된 mRNA로부터 제조된 인간 V_L 및 V_H cDNA를 사용함으로써 제조된 재조합 조합 항체 라이브러리, 바람직하게는 scFv 파지 디스플레이 라이브러리의 스크리닝에 의해 단리될 수 있다. 이러한 라이브러리를 제조하고 스크리닝하는 방법은 당업계에서 공지되어 있다. 예를 들면, 미국 특허 제5,969,108호를 참조한다. 파지 디스플레이 라이브러리를 발생시키기 위한 상업적으로 입수가능한 키트가 존재한다(예를 들면, 파마샤(Pharmacia) 재조합 파지 항체 시스템, 카달로그 번호 27-9400-01; 및 스트라타진 SurfZAP.TM. 파지 디스플레이 키트, 카달로그 번호 240612). 항체 디스플레이 라이브러리의 발생 및 스크리닝에 사용될 수 있는 다른 방법 및 시약도 존재한다(예를 들면, 미국 특허 제5,223,409호(Ladner et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 92/18619호(Kang et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 91/17271호(Dower et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 92/20791호(Winter et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 92/15679호(Markland et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 93/01288호(Breitling et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 92/01047호(McCafferty et al.), PCT 특허출원 공보 제WO 92/09690호(Garrard et al.), 문헌(Fuchs et al., (1991) Bio/Technology 9:1370-1372), 문헌(Hay et al., (1992) Hum. Antibod. Hybridomas 3:81-85), 문헌(Huse et al., (1989) Science 246:1275-1281), 문헌(McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554), 문헌(Griffiths et al., (1993) EMBO J 12:725-734), 문헌(Hawkins et al., (1992) J. Mol. Biol. 226:889-896), 문헌(Clackson et al., (1991) Nature 352:624-628), 문헌(Gram et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:3576-3580), 문헌(Garrad et al., (1991) Bio/Technology 9:1373-1377), 문헌(Hoogenboom et al., (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137) 및 문헌(Barbas et al., (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:7978-7982) 참조).

한 실시양태에서, 원하는 특성을 갖는 표적 항원에 대해 특이적인 인간 항체를 단리하기 위해, 인간 V_H 및 V_L 라이브러리를 스크리닝하여 원하는 특이성을 나타내는 항체 단편을 선택한다. 이 방법에서 사용되는 항체 라이브러리는 바람직하게는 본원 및 당업계에서 기재되어 있는 바와 같이 제조되고 스크리닝된 scFv 라이브러리이다(PCT 특허출원 공보 제WO 92/01047호(McCafferty et al.), 문헌(McCafferty et al., Nature 348:552-554, 1990) 및 문헌(Griffiths et al., EMBO J 12:725-734, 1993)). 바람직하게는, 표적 단백질을 항원으로서 사용하여 scFv 항체 라이브러리를 스크리닝한다.

대안적으로, 항체의 Fd 단편(V_H-C_H1) 및 경쇄(V_L-C_L)를 PCR로 별도로 클로닝하여 조합 파지 디스플레이 라이브러리 내에서 무작위적으로 재조합한 후, 상기 라이브러리를 특정 항원과의 결합에 대해 선택할 수 있다. Fab 단편들은 파지 표면 상에서 발현된다(즉, 그들을 코딩하는 유전자들에 물리적으로 연결되어 있다). 따라서, 항원 결합에 의한 Fab의 선택은 추후 증폭될 수 있는 Fab 코딩 서열들을 동시 선택한다. 여러 차례의 항원 결합 및 재증폭(패닝(panning)으로 지칭되는 절차)을 통해 상기 항원에 대해 특이적인 Fab를 풍부하게 하고 최종적으로 단리한다.

1994년, "안내된(guided) 선택"으로 지칭되는 항체의 인간화 방법이 기재되었다. 안내된 선택은 마우스 단일클론 항체의 인간화를 위해 파지 디스플레이 기법의 힘을 이용한다(문헌(Jespers, L. S., et al., Bio/Technology 12, 899-903 (1994)) 참조). 이를 위해, 마우스 단일클론 항체의 Fd 단편을 인간 경쇄 라이브러리와 조합하여 디스플레이한 후, 생성된 하이브리드 Fab 라이브러리를 항원을 사용하여 선택할 수 있다. 이로써, 마우스 Fd 단편은 선택을 안내하는 주형을 제공한다. 그 후, 선택된 인간 경쇄는 인간 Fd 단편 라이브러리와 조합된다. 생성된 라이브러리의 선택은 완전한 인간 Fab를 제공한다.

파지 디스플레이 라이브러리로부터 인간 항체를 유도하는 다양한 절차가 기재되어 있다(예를 들면, 문헌(Hoogenboom et al., J. Mol. Biol., 227:381 (1991)), 문헌(Marks et al., J. Mol. Biol, 222:581-597 (1991)), 미국 특허 제5,565,332호 및 제5,573,905호, 및 문헌(Clackson, T., and Wells, J. A., TIBTECH 12, 173-184 (1994)) 참조). 구체적으로, 파지 디스플레이 라이브러리로부터 유도된 항체의 시험관내 선택 및 진화는 강력한 수단이 된다(문헌(Burton, D. R., and Barbas III, C. F., Adv. Immunol. 57, 191-280 (1994)); 문헌(Winter, G., et al., Annu. Rev. Immunol. 12, 433-455 (1994)); 미국 특허출원 공보 제20020004215호; PCT 특허출원 공보 제WO 92/01047호; 미국 특허출원 공보 제20030190317호; 및 미국 특허 제6,054,287호 및 제5,877,293호 참조).

문헌(Watkins, "Screening of Phage-Expressed Antibody Libraries by Capture Lift," Methods in Molecular Biology, Antibody Phage Display: Methods and Protocols 178:187-193 (2002)) 및 미국 특허출원 공보 제20030044772호(2003년 3월 6일 공개)는 후보 결합 분자를 고체 지지체 상에 고정시키는 단계를 포함하는 방법인 포획 리프트(capture lift)를 이용하여 파지 발현된 항체 라이브러리 또는 다른 결합 분자를 스크리닝하는 방법을 기술한다.

Fv 단편은 (예를 들면, M13 유전자 III을 갖는) 파지 단백질 융합체로서 발현된 1개의 쇄와 가용성 단편으로서 발현된 상보적 쇄의 결합에 의해 파지의 표면 상에 디스플레이된다. 상기 파지는 사상 파지, 예컨대, 클래스 I 파지인 fd, M13, f1, If1, lke, ZJ/Z 및 Ff 중 하나, 및 클래스 II 파지인 Xf, Pfl 및 Pf3 중 하나일 수 있다는 것이 고려된다. 상기 파지는 M13 또는 fd, 또는 이들의 유도체일 수 있다.

초기 인간 V_L 절편 및 V_H 절편이 선택되면, 초기에 선택된 V_L 절편 및 V_H 절편의 상이한 쌍들을 표적 결합에 대해 스크리닝하는 "혼합 및 매칭" 실험을 수행하여 바람직한 V_L/V_H 쌍 조합을 선택한다. 추가로, 항체의 질을 추가로 개선시키기 위해, 천연 면역 반응 동안 항체의 친화성 성숙을 담당하는 생체내 체세포 돌연변이 과정과 유사한 과정에서 바람직한 V_L/V_H 쌍(들)의 V_L 절편 및 V_H 절편을 바람직하게는 V_H 및/또는 V_L의 CDR1, CDR2 및 CDR3 영역 중 임의의 영역 내에서 무작위적으로 돌연변이시킬 수 있다. 이 시험관내 친화성 성숙은 각각 V_H CDR1, CDR2 및 CDR3, 또는 V_L CDR1, CDR2 및 CDR3에 상보적인 PCR 프라이머들을 사용하여 V_L 영역 및 V_H 영역을 증폭시킴으로써 달성될 수 있고, 이때 상기 프라이머들은 생성된 PCR 생성물이 V_H 및/또는 V_L CDR3 영역 내로 도입된 무작위 돌연변이를 갖는 V_L 절편 및 V_H 절편을 코딩하도록 일부 위치에서 4개의 뉴클레오티드 염기의 무작위 혼합물과 "섞여(spiked)"있다. 이들 무작위적으로 돌연변이된 V_L 절편 및 V_H 절편은 표적 항원과의 결합에 대해 재스크리닝될 수 있다.

재조합 면역글로불린 디스플레이 라이브러리로부터 표적 특이적 항체를 스크리닝하고 단리한 후, 선택된 항체를 코딩하는 핵산을 디스플레이 팩키지로부터(예를 들면, 파지 게놈으로부터) 회수하여 표준 재조합 DNA 기법으로 다른 발현 벡터 내로 서브클로닝할 수 있다. 원하는 경우, 이하에 기재된 바와 같이 본 발명의 다른 항체 형태를 생성하도록 상기 핵산을 추가로 조작할 수 있다. 조합 라이브러리의 스크리닝에 의해 단리된 재조합 인간 항체를 발현시키기 위해, 상기 항체를 코딩하는 DNA를 본원에 기재된 바와 같이 재조합 발현 벡터 내로 클로닝하고 포유동물 숙주 세포 내로 도입한다.

파지 디스플레이 방법을 세균 또는 숙주 세포의 돌연변이유발자(mutator) 균주에서 수행할 수 있다는 것이 고려된다. 돌연변이유발자 균주는 그의 내부에서 복제된 DNA가 그의 모 DNA에 대한 돌연변이를 갖게 하는 유전적 결함을 갖는 숙주 세포이다. 돌연변이유발자 균주의 예는 NR9046mutD5 및 NR9046 mut T1이다.

파지 디스플레이 방법을 헬퍼 파지를 사용하여 수행할 수 있다는 것도 고려된다. 이것은 결함이 있는 파지 게놈을 함유하는 세포를 감염시키는 데에 사용되고 상기 결함을 보완하는 기능을 수행하는 파지이다. 상기 결함이 있는 파지 게놈은 몇몇 기능을 코딩하는 유전자 서열이 제거되어 있는 파지미드 또는 파지일 수 있다. 헬퍼 파지의 예는 M13K07; M13K07 유전자 III 제3번; 및 캡시드 단백질에 융합된 결합 분자를 디스플레이하거나 코딩하는 파지이다.

항체는 PCT 특허출원 공보 제WO 92/01047호에 개시된 바와 같은 계층 이중 조합 방법을 이용한 파지 디스플레이 스크리닝을 통해서도 발생되고, 이때 상기 방법에서 H 또는 L 쇄 클론을 함유하는 개별 콜로니를 사용하여 다른 쇄(L 또는 H)를 코딩하는 클론의 완전한 라이브러리를 감염시키고, 생성된 2-쇄 특이적 결합 구성원을 파지 디스플레이 기법, 예컨대, 상기 공보에 기재된 기법에 따라 선택한다. 이 기법은 문헌(Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783, 1992)에도 개시되어 있다.

효모 및 미생물 세포의 표면 상에서 펩티드를 디스플레이하는 방법은 항원 특이적 항체를 확인하는 데에도 이용되어 왔다. 예를 들면, 미국 특허 제6,699,658호를 참조한다. 항체 라이브러리는 효모 단백질, 예컨대, 응집소에 부착되어 면역 시스템에서의 B 세포에 의한 항체의 세포 표면 디스플레이를 효과적으로 재현할 수 있다.

파지 디스플레이 방법 이외에, 리보좀 mRNA 디스플레이 방법 및 미생물 세포 디스플레이 방법을 이용하여 항체를 단리할 수 있다. 리보좀 디스플레이를 이용한 폴리펩티드의 선택은 문헌(Hanes et al., Proc. Natl Acad Sci USA, 94:4937-4942, 1997), 및 미국 특허 제5,643,768호 및 제5,658,754호(Kawasaki)에 기재되어 있다. 리보좀 디스플레이도 항체의 신속한 대규모 돌연변이 분석에 유용하다. 선택적 돌연변이유발 방법도 리보좀 디스플레이 기법의 이용을 통해 선택될 수 있는, 개선된 활성을 나타내는 항체를 생성하는 방법을 제공한다.

IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편은 IL-1β에 결합하지 않지만 그 대신에 다른 기능, 예컨대, 순환 반감기, 직접적인 세포독성 효과, 검출가능한 표지, 또는 수용자의 내인성 보체 캐스케이드(cascade) 및 내인성 세포 매개 세포독성의 활성화를 담당하는 하나 이상의 부분을 포함할 수 있다. 상기 항체 또는 단편은 불변 영역의 전부 또는 일부를 포함할 수 있고 IgA(예를 들면, IgA₁ 또는 IgA₂), IgD, IgE, IgG(예를 들면, IgG₁, IgG₂, IgG₃ 또는 IgG₄) 또는 IgM을 포함하는 임의의 동종형 항체일 수 있다. 본 발명의 항원 결합 화합물은 불변 영역 이외에 또는 불변 영역 대신에 에피토프 태그, 살비지(salvage) 수용체 에피토프, 진단 또는 정제 목적을 위한 표지 모이어티(moiety), 또는 세포독성 모이어티, 예컨대, 방사성핵종 또는 독소를 포함할 수 있다.

본 발명의 항체 및 단편의 불변 영역(존재하는 경우)은 γ1, γ2, γ3, γ4, μ, β2, δ 또는 ε 유형, 바람직하게는 γ 유형, 보다 바람직하게는 y 유형의 불변 영역일 수 있는 반면, 인간 경쇄의 불변 부분은 κ 또는 λ 유형(λ₁, λ₂ 및 λ₃ 하위유형을 포함함)의 불변 부분일 수 있으나, 바람직하게는 κ 유형의 불변 부분이다.

변이체는 변형된 Fc 영역을 포함하는 항체 또는 단편도 포함하고, 이때 변형된 Fc 영역은 야생형 Fc 영역에 비해 상대적으로 하나 이상의 아미노산 변형을 포함한다. 변이체 Fc 영역은 야생형 Fc 영역을 포함하는 필적할만한 분자에 비해 상대적으로 보다 높은 또는 보다 낮은 친화성으로 Fc 수용체에 결합하도록 디자인될 수 있다.

예를 들면, 본 발명의 IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 변형된 Fc 영역을 포함할 수 있다. Fc 영역은 IgG의 파파인 분해 시 생성되는 IgG C 말단 도메인에 대해 상동성을 나타내는 천연 발생 또는 합성 폴리펩티드를 의미한다. IgG Fc는 약 50 kD의 분자량을 갖는다. 본 발명의 항체 및 단편에서, 전체 Fc 영역이 사용될 수 있거나, 반감기 상승 부분만이 사용될 수 있다. 또한, 천연 활성이 모든 경우에서 필요하거나 요구되지 않기 때문에 아미노산 서열에서의 많은 변형이 허용될 수 있다.

원하는 경우, Fc 영역은 보체를 고정시키고 높은 친화성으로 Fc 수용체에 결합하는 그의 능력을 억제하도록 돌연변이될 수 있다. 뮤린 IgG Fc의 경우, Glu 318, Lys 320 및 Lys 322를 알라닌 잔기로 치환시키는 것은 상기 단백질이 ADCC를 유도할 수 없게 만든다. Leu 235를 Glu로 치환시키는 것은 높은 친화성으로 Fc 수용체에 결합하는 상기 단백질의 능력을 억제한다. 인간 IgG에 대한 다양한 돌연변이가 공지되어 있다(예를 들면, 문헌(Morrison et al., 1994, The Immunologist 2:119-124) 및 문헌(Brekke et al., 1994, The Immunologist 2:125) 참조).

몇몇 실시양태에서, 변형된 Fc 영역을 갖는 본 발명의 항체 또는 단편이 제공되고, 이때 천연 발생 Fc 영역은 생물학적 환경에서 상기 항체 또는 단편의 반감기, 예를 들면, 혈청 반감기 또는 시험관내 분석에 의해 측정된 반감기를 증가시키도록 변형된다. IgG의 원래의 형태의 Fc 영역을 변경시키는 방법은 미국 특허 제6,998,253호에도 기재되어 있다.

일부 실시양태에서, 항체 또는 단편의 혈청 반감기를 증가시키기 위해 상기 항체 또는 단편을 변형시키는 것, 예를 들면, 분자, 예컨대, PEG 또는 다른 수용성 중합체(다당류 중합체를 포함함)를 항체 단편에 부가하여 상기 반감기를 증가시키는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들면, 이것은 (예를 들면, 항체 단편 내의 적절한 영역의 돌연변이를 통해, 또는 예를 들면, DNA 또는 펩티드 합성에 의해 어느 한 말단 또는 중간 부분에서 항체 단편에 융합된 펩티드 태그 내로의 살비지 수용체 결합 에피토프의 도입을 통해) 상기 살비지 수용체 결합 에피토프를 상기 항체 단편 내로 도입함으로써 달성될 수도 있다(PCT 특허출원 공보 제W0 96/32478호 참조). 살비지 수용체 결합 에피토프는 IgG 분자의 생체내 혈청 반감기를 증가시키는 것을 담당하는 IgG 분자(예를 들면, IgG₁, IgG₂, IgG₃ 또는 IgG₄)의 Fc 영역의 에피토프를 의미한다.

살비지 수용체 결합 에피토프는 Fc 도메인의 1개 또는 2개 루프로부터의 임의의 하나 이상의 아미노산 잔기가 상기 항체 단편의 유사한 위치로 옮겨져 있는 영역을 포함할 수 있다. 보다 더 바람직하게는, Fc 도메인의 1개 또는 2개 루프로부터의 3개 이상의 잔기가 옮겨진다. 보다 바람직하게는, 상기 에피토프는 (예를 들면, IgG의) Fc 영역의 C_H2 도메인으로부터 유래되어 상기 항체의 C_H1, C_H3 또는 V_H 영역, 또는 1개 초과의 이러한 영역으로 옮겨진다. 대안적으로, 상기 에피토프는 Fc 영역의 C_H2 도메인으로부터 유래되어 상기 항체 단편의 C_L 영역, V_L 영역 또는 이들 둘다로 옮겨진다. Fc 변이체, 및 이 변이체와 살비지 수용체의 상호작용을 기술하는 PCT 특허출원 공보 제WO 97/34631호 및 제WO 96/32478호도 참조한다.

Fc 수용체 결합 부위 내의 잔기의 돌연변이는 이펙터 기능, 예컨대, ADCC 또는 CDC 활성, 또는 반감기를 변경시킬 수 있다. 잠재적인 돌연변이는 알라닌으로의 치환, 보존적 치환, 비보존적 치환, 또는 동일한 위치에서 상이한 IgG 서브클래스로부터의 상응하는 아미노산 잔기로의 치환(예를 들면, IgG₁ 잔기를 상기 위치에서 상응하는 IgG₂ 잔기로 치환시키는 것)을 포함하는 하나 이상의 잔기의 삽입, 결실 또는 치환을 포함한다. 예를 들면, IgG₄ 내의 아미노산 위치 241에서 세린을 프롤린(IgG₁ 및 IgG₂ 내의 상기 위치에서 발견됨)으로 돌연변이시키는 것은 균질한 항체를 생성시키고 혈청 반감기를 연장시키고 원래의 키메라 IgG₄에 비해 조직 분포를 개선시킨다(Angal et al., Mol. Immunol. 30:105-8, 1993).

항체 단편은 온전한 전장 항체의 일부, 예컨대, 온전한 항체의 항원 결합 또는 가변 영역이다. 항체 단편의 예로는 Fab, Fab', F(ab')₂, 및 Fv 단편; 디아바디(diabody); 선형 항체; 단일쇄 항체 분자(예를 들면, scFv); 다중특이적 항체 단편, 예컨대, 이중특이적 항체, 삼중특이적 항체 및 다중특이적 항체(예를 들면, 디아바디(diabody), 트리아바디(triabody), 테트라바디(tetrabody)); 미니바디(minibody); 킬레이팅 재조합 항체; 트리바디(tribody) 또는 비바디(bibody); 인트라바디(intrabody); 나노바디(nanobody); 작은 모듈 면역약제(SMIP), 애드넥틴(adnectin), 결합 도메인 면역글로불린 융합 단백질; 낙타과화된(camelized) 항체; V_HH 함유 항체; 및 항체 단편으로부터 형성된 임의의 다른 폴리펩티드가 있다.

본 개시내용은 임의의 상기 중쇄 서열 또는 경쇄 서열을 포함하고 IL-1β에 결합하는 IL-1β 결합 항체 단편을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 단편은 항체의 임의의 3개 이상의 인접 아미노산(예를 들면, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 8개 이상 또는 심지어 10개 이상의 인접 아미노산)을 의미하고 Fab, Fab', F(ab')₂ 및 F(v) 단편, 또는 이들의 개별 경쇄 또는 중쇄 가변 영역 또는 부분을 포함한다. IL-1β 결합 단편은 예를 들면, Fab, Fab', F(ab')₂, Fv 및 scFv를 포함한다. 이들 단편들은 온전한 항체의 Fc 단편을 결여하고 순환계로부터 보다 신속히 제거되고 온전한 항체보다 더 약한 비-특이적 조직 결합을 가질 수 있다. 문헌(Wahl et al., (1983), J. Nucl. Med., 24:316-25)을 참조한다. 잘 공지되어 있는 방법, 예를 들면, 효소, 예컨대, (Fab 단편을 생성하는) 파파인 또는 (F(ab')₂ 단편을 생성하는) 펩신을 사용한 단백질분해 절단을 이용하여 온전한 항체로부터 이들 단편들을 생성할 수 있다.

IL-1β와 IL-1 수용체 I형(IL-1RI)의 결합을 측정하는 데에 이용될 시험관내 분석 및 세포 기초 분석(IL-1β 또는 IL-1RI에 결합하는 분자(예컨대, 항체, 길항제 또는 다른 억제제)의 존재 하에서 측정하는 분석을 포함함)은 당업계에서 잘 공지되어 있다(예를 들면, 문헌(Evans et al., (1995), J. Biol. Chem. 270:11477-11483); 문헌(Vigers et al., (2000), J. Biol. Chem. 275:36927-36933); 문헌(Yanofsky et al., (1996), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7381-7386); 문헌(Fredericks et al., (2004), Protein Eng. Des. Sel. 17:95-106); 문헌(Slack et al., (1993), J. Biol. Chem. 268:2513-2524); 문헌(Smith et al., (2003), Immunity 18:87-96); 문헌(Vigers et al., (1997), Nature 386:190-194); 문헌(Ruggiero et al., (1997), J. Immunol. 158:3881-3887); 문헌(Guo et al., (1995), J. Biol. Chem. 270:27562-27568); 문헌(Svenson et al., (1995), Eur. J. Immunol. 25:2842-2850); 및 문헌(Arend et al., (1994), J. Immunol. 153:4766-4774) 참조). 이러한 분석을 위한 인간 IL-1 수용체 I형을 포함하는 재조합 IL-1 수용체 I형은 다양한 상업적 공급원으로부터 용이하게 입수될 수 있다(예를 들면, 알 앤드 디 시스템스(R&D Systems) 및 시그마(SIGMA) 참조). IL-1 수용체 I형은 당업계에서 공지되어 있는 표준 분자생물학 기법 및 형질감염 기법을 이용함으로써 적절한 숙주 세포 내로 도입된 발현 구축물 또는 벡터로부터 발현될 수도 있다. 그 후, 발현된 IL-1 수용체 I형은 결합 분석에서 사용되도록 단리되고 정제될 수 있거나, 대안적으로 세포 결합된 형태로 직접적으로 사용될 수 있다.

예를 들면, IL-1β와 IL-1 수용체 I형의 결합은 IL-1β 결합 항체를 고정시키고 IL-1β를 고정된 상기 항체와 접촉시키고 IL-1β가 상기 항체에 결합되어 있는지를 확인하고 가용성 형태의 IL-1RI을 결합된 IL-1β/항체 복합체와 접촉시키고 상기 가용성 IL-1RI이 상기 복합체에 결합되어 있는지를 확인함으로써 측정될 수 있다. 상기 프로토콜은 IL-1β와의 접촉 전에 상기 가용성 IL-1RI을 상기 고정된 항체와 접촉시켜 상기 가용성 IL-1RI이 상기 고정된 항체에 결합하지 않는지를 확인하는 단계도 포함할 수 있다. 결합 상호작용의 동역학적 분석을 위한 비아코어(Biacore) 장치를 이용하여 이 프로토콜을 수행할 수 있다. 이러한 프로토콜은 항체 또는 다른 분자가 IL-1β와 IL-1 수용체 I형의 결합을 허용하는지 아니면 차단하는지를 확인하는 데에도 이용될 수 있다.

다른 IL-1β/IL-1RI 결합 분석의 경우, IL-1β 항체 또는 이의 IL-1β 결합 단편의 존재 또는 부재 하에서 IL-1β와 IL-1RI의 결합을 비교함으로써 IL-1β와 IL-1 수용체 I형의 결합의 허용 또는 차단을 측정할 수 있다. 차단은 상응하는 완충제 또는 희석제를 함유하지만 IL-1β 항체 또는 이의 IL-1β 결합 단편을 함유하지 않는 대조군 샘플과 비교되었을 때 항-IL-1β 항체 또는 이의 IL-1β 결합 단편의 존재 하에서 IL-1β와 IL-1 수용체 I형의 결합의 표시된 감소로서 분석 판독에서 확인된다. 상기 분석 판독은 차단의 존재 또는 부재를 정성적으로 표시하는 것으로서 간주될 수 있거나, 상기 항체 또는 단편의 존재로 인한 결합의 % 또는 배수 감소를 정량적으로 표시하는 것으로서 간주될 수 있다.

대안적으로 또는 추가로, IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편이 IL-1β와 IL-1RI의 결합을 실질적으로 차단하는 경우, IL-1β와 IL-1RI의 결합은 상기 항체 또는 단편의 부재 하에서 동일한 농도의 IL-1β와 IL-1RI의 결합에 비해 10배 이상, 대안적으로 약 20배 이상, 대안적으로 약 50배 이상, 대안적으로 약 100배 이상, 대안적으로 약 1000배 이상, 대안적으로 약 10000배 이상 또는 이보다 많은 배수만큼 감소된다. 또 다른 예로서, IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편이 IL-1β와 IL-1RI의 결합을 실질적으로 허용하는 경우, IL-1β와 IL-1RI의 결합은 약 90% 이상, 대안적으로 약 95% 이상, 대안적으로 약 99% 이상, 대안적으로 약 99.9% 이상, 대안적으로 약 99.99% 이상, 대안적으로 약 99.999% 이상 또는 대안적으로 약 99.9999% 이상이거나, 대안적으로 상기 항체 또는 단편의 부재 하에서 동일한 농도의 IL-1β와 IL-1RI의 결합과 실질적으로 동일하다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 예시적인 항체들 중 하나 이상의 항체에 의해 결합되는 에피토프와 동일한 에피토프 또는 실질적으로 동일한 에피토프에 결합하는 IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편을 포함한다. 대안적으로 또는 추가로, IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편은 미국 특허출원 제11/472813호 또는 PCT 특허출원 공보 제WO 2007/002261호에 기재된 AB7의 가변 영역 서열(이하에 나타낸 서열)을 갖는 항체의 결합과 경쟁한다. 예로서, IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편이 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체의 결합과 경쟁하는 경우, 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체와 IL-1β의 결합은 이 결합이 IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편의 존재 하에서 측정될 때 약 2배 이상, 대안적으로 약 5배 이상, 대안적으로 약 10배 이상, 대안적으로 약 20배 이상, 대안적으로 약 50배 이상, 대안적으로 약 100배 이상, 대안적으로 약 1000배 이상, 대안적으로 약 10000배 이상 또는 이보다 많은 배수만큼 감소될 수 있다. IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 단편은 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체를 초과하는 양, 예를 들면, 약 2배 이상, 대안적으로 약 5배 이상, 대안적으로 약 10배 이상, 대안적으로 약 20배 이상, 대안적으로 약 50배 이상, 대안적으로 약 100배 이상, 대안적으로 약 1000배 이상 또는 대안적으로 약 10000배 이상 많은 양으로 존재할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용은 성숙 IL-1β 단백질의 잔기 83 내지 105에 상응하는 아미노산 서열 ESVDPKNYPKKMEKRFVFNKIE(서열번호 1)(미국 특허출원 제11/472813호 및 PCT 특허출원 공보 제WO 2007/002261호) 내에 함유된 에피토프에 결합하는 IL-1β 결합 항체 또는 단편을 포함한다. 본원에서 고려되는 바와 같이, IL-1β 결합 항체 또는 단편이 예시적인 항체들 중 하나 이상의 항체, 예를 들면, AB7로 명명된 항체에 의해 결합되는 에피토프와 동일한 에피토프 또는 실질적으로 동일한 에피토프에 결합하는지를 당업계에서 공지된 여러 방법들 중 임의의 방법을 이용하여 용이하게 확인할 수 있다.

예를 들면, IL-1β 결합 항체 또는 단편에 의해 결합된 핵심 아미노산 잔기(에피토프)를 펩티드 어레이, 예를 들면, 펩스폿(PepSpot)™ 펩티드 어레이(제이피티 펩티드 테크놀로지스(JPT Peptide Technologies), 독일 베를린 소재)를 이용하여 확인할 수 있고, 이때 전체 IL-1β 아미노산 서열에 걸쳐 있는(spanning) 12개의 아미노산 펩티드들의 스캔(각각의 펩티드는 11개의 아미노산에 의해 이전 펩티드와 중첩됨)이 막 상에서 직접적으로 합성된다. 그 다음, 상기 펩티드를 보유하는 막이 실온에서 예를 들면, 2 ㎍/㎖ 농도의 상기 항체로 2시간 동안 프로빙되고, 상기 항체에 대한 에피토프 결합 정보가 조사된다. 항체와 막-결합된 펩티드의 결합은 이차 HRP-접합된 염소 항-인간(또는 적절한 경우 마우스) 항체를 사용한 후 증강된 화학발광(ECL)을 이용함으로써 검출할 수 있다. 성숙 IL-1β 단백질의 특정 아미노산 잔기 또는 서열에 상응하고 항체 결합에 대해 양성 점수를 나타내는 펩티드 점(들)은 특정 항체에 의해 결합된 에피토프를 표시한다.

대안적으로 또는 추가로, 항체 경쟁 실험이 수행될 수 있고, 이러한 분석은 당업계에서 잘 공지되어 있다. 예를 들면, 미공지된 특이성을 나타내는 항체는 본 개시내용의 예시적인 항체들 중 임의의 항체(예를 들면, AB7)와 비교될 수 있다. 예를 들면, 결합 상호작용의 동역학적 분석을 위한 비아코어^® 장치를 이용하거나 ELISA를 이용하여 결합 경쟁 분석을 수행할 수 있다. 이러한 분석에서, 미공지된 에피토프 특이성을 나타내는 항체는 공지된 비교 항체(예를 들면, AB7)와 결합에 대해 경쟁하는 그의 능력에 대해 평가된다. 특정 에피토프와의 결합에 대한 경쟁은 공지된 비교 항체(예를 들면, AB7)와 IL-1β 에피토프의 결합이 약 50% 이상, 약 70% 이상, 약 80% 이상, 약 90% 이상, 약 95% 이상, 약 99% 이상 또는 약 100% 감소되는 것에 의해 확인되고, 실질적으로 동일한 에피토프와의 결합을 표시한다.

이 개시내용에서 예시적인 항체 내의 IL-1β 결합 영역 및/또는 개시된 항체에 의해 인식되는 에피토프의 확인을 고려할 때, 유사한 결합 특성 및 치료 또는 진단 유용성을 갖고 본 개시내용의 실시양태에 필적할만한 추가 항체가 발생될 수 있다는 것이 고려된다.

항체의 항원 결합 단편은 일반적으로 항체의 항원 결합 부분을 보유함으로써 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 단편을 포함한다. 항체의 항원 결합 기능이 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있다는 것은 잘 확립되어 있다. 항원 결합 부분의 예로는 (i) V_L, V_H, C_L 및 C_H1 도메인으로 구성된 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 이황화 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')₂ 단편; (iii) V_H 및 C_H1 도메인인 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암(arm)의 V_L 및 V_H 도메인인 Fv 단편; (v) V_H 도메인인 dAb 단편(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); 및 (vi) 단리된 상보성 결정 영역(CDR)이 있다. 단일쇄 항체도 항체의 항원 결합 부분이라는 용어에 포함된다. 본 발명의 IL-1β 결합 항체 및 단편은 스카폴드(scaffold)(예를 들면, 단백질 또는 탄수화물 스카폴딩)를 갖거나 갖지 않은 1가 또는 다가, 또는 단량체 또는 다량체(예를 들면, 사량체) CDR 유래 결합 도메인도 포함한다.

본 발명의 IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편은 항체 또는 항체 부분과 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩티드의 공유결합 또는 비공유결합에 의해 형성된 보다 큰 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착 분자의 예는 사량체 scFv 분자의 제조를 위한 스트렙타비딘 코어 영역의 사용(Kipriyanov, S. M., et al., (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101), 및 2가 바이오티닐화된 scFv 분자의 제조를 위한 시스테인 잔기, 마커 펩티드 및 C 말단 폴리히스티딘 태그의 사용(Kipriyanov, S. M., et al., (1994) Mol. Immunol. 31:1047-1058)을 포함한다. 면역부착 분자를 포함하는 항체 및 단편은 본원에 기재된 바와 같이 표준 재조합 DNA 기법을 이용함으로써 수득될 수 있다. 바람직한 항원 결합 부분은 완전한 도메인, 또는 완전한 도메인의 쌍이다.

IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 V_H 도메인으로 구성된 도메인 항체(dAb) 단편도 포함할 수 있다(Ward et al., Nature 341:544-546, 1989). 본 발명의 IL-1β 결합 항체 및 단편은 2가 항체인 디아바디도 포괄하고, 이때 V_H 도메인 및 V_L 도메인을 단일 폴리펩티드 쇄 상에서 발현시키되, 동일한 쇄 상의 상기 2개의 도메인들 사이에 페어링(pairing)을 허용하기에는 너무 짧은 링커를 사용함으로써 상기 도메인들이 또 다른 쇄의 상보적 도메인들과 페어링되게 하여 2개의 항원 결합 부위를 생성한다(예를 들면, 유럽 특허 제404,097호, PCT 특허출원 공보 제WO 93/11161호, 문헌(Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448, 1993) 및 문헌(Poljak et al., Structure 2:1121-1123, 1994) 참조). 디아바디는 이중특이적 또는 단일특이적 디아바디일 수 있다.

본 개시내용의 IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 IL-1β에 결합하는 단일쇄 항체 단편(scFv)도 포함한다. scFv는 항체 경쇄 가변 영역(V_L)에 작동가능하게 연결된 항체 중쇄 가변 영역(V_H)을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역 및 상기 경쇄 가변 영역은 함께 또는 개별적으로 IL-1β에 결합하는 결합 부위를 형성한다. scFv는 아미노 말단에서 V_H 영역을 포함할 수 있고 카르복시 말단에서 V_L 영역을 포함할 수 있다. 대안적으로, scFv는 아미노 말단에서 V_L 영역을 포함할 수 있고 카르복시 말단에서 V_H 영역을 포함할 수 있다. 나아가, Fv 단편의 2개 도메인들, 즉 V_L 및 V_H가 별도의 유전자에 의해 코딩되지만, 이들은 재조합 방법의 이용을 통해 합성 링커에 의해 연결될 수 있고, 상기 합성 링커는 이들을 단일 단백질 쇄로서 제조될 수 있게 하고, 이때 V_L 영역 및 V_H 영역은 페어링되어 1가 분자(단일쇄 Fv(scFv)로서 공지되어 있음)를 형성한다(예를 들면, 문헌(Bird et al., (1988) Science 242:423-426) 및 문헌(Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883) 참조).

scFv는 임의적으로 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역 사이에 폴리펩티드 링커를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 폴리펩티드 링커는 일반적으로 1개 내지 50개의 아미노산, 대안적으로 3개 내지 12개의 아미노산, 대안적으로 2개의 아미노산을 포함한다. scFv에서 중쇄와 경쇄를 연결하는 링커 펩티드의 예로는 5개의 아미노산으로 구성된 서열 Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(서열번호 2)이 있다. 다른 예로는 이 서열의 하나 이상의 직렬 반복부(tandem repeat)가 있다(예를 들면, 링커를 생성하기 위해 Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(서열번호 2)의 반복부를 2개 내지 4개 포함하는 폴리펩티드).

본 발명의 IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 중쇄 항체(HCAb)도 포함한다. 통상적인 항체의 H₂L₂ 구조에 대한 예외는 낙타과(낙타, 단봉낙타 및 라마; Hamers-Casterman et al., 1993 Nature 363:446; Nguyen et al., 1998 J. Mol. Biol. 275:413); 워베공 상어(wobbegong shark)(Nuttall et al., Mol Immunol. 38:313-26, 2001); 너스 상어(nurse shark)(Greenberg et al., Nature 374:168-73, 1995; Roux et al., 1998 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 95:11804); 및 은 상어(spotted ratfish)(Nguyen, et al., "Heavy-chain antibodies in Camelidae; a case of evolutionary innovation," 2002 Immunogenetics 54(1):39-47)에서 발견된 면역글로불린의 몇몇 동종형에서 발생된다. 이들 항체들은 이들 기능성 항체들이 중쇄만으로 구성된 이량체("중쇄 항체" 또는 "HCAb"로 지칭됨)라는 점에서 명백히 중쇄 가변 영역만을 사용하여 항원 결합 영역을 형성할 수 있다. 따라서, 본 발명의 IL-1β 결합 항체 및 단편의 몇몇 실시양태는 IL-1β에 특이적으로 결합하는 중쇄 항체일 수 있다. 예를 들면, IgG의 한 클래스이고 경쇄를 갖지 않는 중쇄 항체는 낙타, 단봉낙타 및 라마를 포함하는 낙타과 속의 동물에 의해 생성된다(Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993)). HCAb는 통상적인 IgG 항체의 약 160 kDa 분자량 대신에 약 95 kDa의 분자량을 갖는다. 그의 결합 도메인은 통상적인 V_H와 구별되도록 종종 V_HH로 지칭되는 중쇄 가변 도메인으로만 구성된다(Muyldermans et al., J. Mol. Recognit. 12:131-140 (1999)). 중쇄 항체의 가변 도메인은 종종 나노바디로 지칭된다(Cortez-Retamozo et al., Cancer Research 64:2853-57, 2004). 나노바디 라이브러리는 문헌(Conrath et al., Antimicrob Agents Chemother 45:2807-12, 2001)에 기재된 바와 같이 또는 재조합 방법의 이용을 통해 면역화된 단봉낙타로부터 발생될 수 있다.

제1 불변 도메인(C_H1)이 존재하지 않기(스플라이스 컨센서스 신호의 상실로 인해 mRNA 프로세싱 동안 스플라이싱되어 제거되기) 때문에, 가변 도메인(V_HH) 바로 다음에 힌지 영역, C_H2 도메인 및 C_H3 도메인이 존재한다(Nguyen et al., Mol. Immunol. 36:515-524 (1999); Woolven et al., Immunogenetics 50:98-101 (1999)). 낙타과 V_HH는 보고에 의하면 힌지, C_H2 도메인 및 C_H3 도메인을 함유하고 C_H1 도메인을 결여하는 IgG₂ 불변 영역 및 IgG₃ 불변 영역과 재조합된다(상기 문헌(Hamers-Casterman et al.)). 예를 들면, 라마 IgG₁은 V_H가 힌지, C_H1 도메인, C_H2 도메인 및 C_H3 도메인을 함유하는 불변 영역과 재조합되어 있는 통상적인(H₂L₂) 항체 동종형인 반면, 라마 IgG₂ 및 IgG₃은 C_H1 도메인을 결여하고 경쇄를 함유하지 않고 중쇄만으로 구성된 동종형이다.

HCAb는 경쇄를 갖지 않지만 항원 결합 레퍼토리를 갖는다. HCAb의 유전적 발생 기작은 문헌(Nguyen et al., Adv. Immunol 79:261-296 (2001)) 및 문헌(Nguyen et al., Immunogenetics 54:39-47 (2002))에 검토되어 있다. 너스 상어를 포함하는 상어는 유사한 항원 수용체 함유 단일 단량체 V 도메인을 디스플레이한다(Irving et al., J. Immunol. Methods 248:31-45 (2001); Roux et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:11804 (1998)).

V_HH는 작은 온전한 항원 결합 단편(예를 들면, 약 15 kDa의 분자량을 갖고 118개 내지 136개의 잔기로 구성된 단편)을 포함한다. 낙타과 V_HH 도메인은 높은 친화성으로 항원에 결합하는 것으로 발견되었고(Desmyter et al., J. Biol. Chem. 276:26285-90, 2001), 이때 V_HH 친화성은 전형적으로 나노몰 범위 내의 친화성이고 Fab 단편 및 scFv 단편의 친화성에 필적할만하다. V_HH는 scFv 단편 및 Fab 단편의 상응하는 유도체보다 더 높은 가용성 및 더 높은 안정성을 나타낸다. V_H 단편을 가용성 형태로 생성하는 것은 상대적으로 어렵지만, 골격 잔기가 V_HH의 골격 잔기와 더 유사하도록 변경된 경우 가용성 및 특이적 결합의 개선이 수득될 수 있다(예를 들면, 문헌(Reichman et al., J Immunol Methods 1999, 231:25-38) 참조). V_HH는 이것의 친수성을 더 높이고, L 쇄에 의해 치환될 때까지 폴딩 및 조립 동안 소포체(ER) 내에서 H 쇄에 정상적으로 결합하는 BiP(면역글로불린 중쇄 결합 단백질)와의 연장된 상호작용을 방지하는 아미노산 치환을 보유한다. V_HH의 증가된 친수성 때문에, ER로부터의 분비가 개선된다.

기능성 V_HH는 면역화된 낙타과 동물의 HCAb의 단백질분해 절단에 의해 수득될 수 있거나, 재조합 V_HH를 발생시키는 면역화된 낙타과 동물의 B 세포로부터의 V_HH 유전자의 직접적인 클로닝에 의해 수득될 수 있거나, 천연 또는 합성 라이브러리로부터 수득될 수 있다. 원하는 항원 특이성을 나타내는 V_HH는 파지 디스플레이 방법을 통해 수득될 수도 있다. 기능성 항원 결합 단편을 수득하기 위해 1개의 도메인만이 클로닝되어 발현될 필요가 있기 때문에 파지 디스플레이에서의 V_HH의 사용은 Fab 또는 scFv에 비해 훨씬 더 단순하고 더 효율적이다(Muyldermans, Biotechnol. 74:277-302 (2001); Ghahroudi et al., FEBS Lett. 414:521-526 (1997); and van der Linden et al., J. Biotechnol. 80:261-270 (2000)). 낙타과 동물의 중쇄를 갖는 항체를 발생시키는 방법은 미국 특허출원 공보 제20050136049호 및 제20050037421호에도 기재되어 있다.

리보좀 디스플레이 방법을 이용하여 원하는 결합 활성 및 친화성을 나타내는 scFv 및/또는 V_HH 분자를 확인하고 단리할 수 있다(Irving et al., J. Immunol. Methods 248:31-45 (2001)). 리보좀 디스플레이 및 선택은 큰 라이브러리(10¹⁴)를 발생시키고 디스플레이하는 잠재력을 갖는다.

다른 실시양태는 비-낙타과 동물의 V_H, 예컨대, 인간 V_HH를 변형시켜 그의 가용성을 개선시키고 비-특이적 결합을 방지함으로써 낙타과화(camelisation) 과정을 통해 발생된 V_HH 유사 분자를 제공한다. 이것은 V_H의 V_L 측면 상의 잔기를 V_HH 유사 잔기로 치환시켜 보다 더 높은 가용성을 나타내는 V_HH 단편을 재현함으로써 달성된다. 낙타과화된 V_H 단편, 특히 인간 골격을 기초로 한 낙타과화된 V_H 단편은 환자의 생채 내로 투여되었을 때 크게 감소된 면역 반응을 나타낼 것으로 예측되므로 치료 적용을 위해 상당한 이점을 가질 것으로 예측된다(Davies et al., FEBS Lett. 339:285-290 (1994); Davies et al., Protein Eng. 9:531-537 (1996); Tanha et al., J. Biol. Chem. 276:24774-24780 (2001); and Riechmann et al., Immunol. Methods 231:25-38 (1999)).

Fab 단편, scFv 및 V_HH를 포함하는 IL-1β 결합 단편의 생성을 위해 매우 다양한 발현 시스템들이 이용가능하다. 예를 들면, 항체 단편 및 항체 융합 단백질의 대규모 생성을 위해 원핵유기체 및 진핵유기체 둘다로부터 유래된 발현 시스템이 사용될 수 있다. 다량의 항체 단편이 배양 배지 내로 분비되게 하는 발현 시스템이 특히 유리하다.

이중특이적 Fab-scFv("비바디") 및 삼중특이적 Fab-(scFv)(2)("트리바디")의 생성은 문헌(Schoonjans et al., J Immunol. 165:7050-57, 2000) 및 문헌(Willems et al., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 786:161-76, 2003)에 기재되어 있다. 비바디 또는 트리바디의 경우, scFv 분자는 V_L-C_L(L) 쇄 및 V_H-C_H1(Fd) 쇄 중 하나 또는 둘다에 융합되어 예를 들면, 트리바디를 생성하고, 이때 2개의 scFv가 Fab의 C 말단에 융합되는 반면, 비바디에서는 1개의 scFv가 Fab의 C 말단에 융합된다. 펩티드 링커(힌지 부재) 또는 IgG 힌지를 통해 C_H3에 융합된 scFv로 구성된 "미니바디"는 문헌(Olafsen, et al., Protein Eng Des Sel. 2004 Apr; 17(4):315-23)에 기재되어 있다.

인트라바디는 세포내 발현을 나타내고 세포내 단백질 기능을 조절할 수 있는 단일쇄 항체이다(Biocca, et al., EMBO J. 9:101-108, 1990; Colby et al., Proc Natl Acad Sci USA. 101:17616-21, 2004). 세포내 영역에서 항체 구축물을 보유하는 세포 신호 서열을 포함하는 인트라바디는 문헌(Mhashilkar et al., EMBO J 14:1542-51, 1995) 및 문헌(Wheeler et al., FASEB J. 17:1733-5, 2003)에 기재된 바와 같이 생성될 수 있다. 트랜스바디(Transbody)는 단백질 형질도입 도메인(PTD)이 단일쇄 가변 단편(scFv) 항체와 융합되어 있는 세포 투과성 항체이다(Heng et al., Med Hypotheses. 64:1105-8, 2005).

IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 표적 단백질에 대해 특이적인 SMIP 또는 결합 도메인 면역글로불린 융합 단백질인 항체도 포함하다. 이들 구축물들은 항체 이펙터 기능을 수행하는 데에 필요한 면역글로불린 도메인에 융합된 항원 결합 도메인을 포함하는 단일쇄 폴리펩티드이다. 예를 들면, PCT 특허출원 공보 제WO 03/041600호, 미국 특허출원 공보 제20030133939호 및 미국 특허출원 공보 제20030118592호를 참조한다.

본 개시내용의 IL-1β 결합 항체 및 결합 단편은 면역부착물(immunoadhesin)도 포함한다. 하나 이상의 CDR을 공유적으로 또는 비공유적으로 분자 내로 도입하여 상기 분자를 면역부착물로 만들 수 있다. 면역부착물은 보다 큰 폴리펩티드 쇄의 일부로서 CDR(들)을 도입할 수 있거나, CDR(들)을 또 다른 폴리펩티드 쇄에 공유적으로 연결시킬 수 있거나, CDR(들)을 비공유적으로 도입할 수 있다. 본원에 개시된 CDR은 면역부착물이 IL-1β에 특이적으로 결합하는 것을 허용한다.

IL-1β 결합 항체 및 단편은 유기 또는 분자 스카폴드(예컨대, 단백질 또는 탄수화물 스카폴드) 상에 구축된 하나 이상의 IL-1β 결합 부분을 포함하는 항체 모조체(mimic)도 포함한다. 통상적으로 단백질 스카폴드로 지칭되는, 상대적으로 정의된 3차원적 구조를 갖는 단백질은 항체 모조체의 디자인을 위한 시약으로서 사용될 수 있다. 이들 스카폴드들은 전형적으로 특이적 또는 무작위적 서열 변경을 잘 받아들이는 하나 이상의 영역을 함유하고, 이러한 서열 무작위화를 종종 수행하여 단백질의 라이브러리를 생성하고, 이 라이브러리로부터 원하는 생성물이 선택될 수 있다. 예를 들면, 항체 모조체는 각각의 루프 내로 삽입된, 모 항체로부터의 상이한 CDR을 함유하고 모 항체에 의해 결합되는 리간드에 대한 선택적 결합 활성을 나타내는 2개 이상의 용매 노출된 루프를 갖는 면역글로불린 유사 도메인 함유 스카폴드를 갖는 키메라 비-면역글로불린 결합 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 신규 결합 성질을 갖는 단백질을 수득하기 위해 비-면역글로불린 단백질 스카폴드가 제안되었다(Tramontano et al., J. Mol. Recognit. 7:9, 1994; McConnell and Hoess, J. Mol. Biol. 250:460, 1995). 다른 단백질들은 골격으로서 시험되었고, 무작위화된 잔기를 알파 나선 표면(Nord et al., Nat. Biotechnol. 15:772, 1997; Nord et al., Protein Eng. 8:601, 1995), 알파 나선 다발 내의 알파 나선들 사이의 루프(Ku and Schultz, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:6552, 1995), 및 이황화 가교, 예컨대, 작은 단백질분해효소 억제제의 이황화 가교에 의해 구속된 루프(Markland et al., Biochemistry 35:8045, 1996; Markland et al., Biochemistry 35:8058, 1996; Rottgen and Collins, Gene 164:243, 1995; Wang et al., J. Biol. Chem. 270:12250, 1995) 상에 디스플레이하는 데에 사용되었다. 항체 모조체를 위해 스카폴드를 사용하는 방법은 미국 특허 제5,770,380호, 및 미국 특허출원 공보 제2004/0171116호, 제2004/0266993호 및 제2005/0038229호에 개시되어 있다.

본 발명에 따라 사용될 바람직한 IL-1β 항체 또는 항체 단편은 일반적으로 (예를 들면, 비아코어에 의해 측정될 때 또는 KinExA에 의해 측정될 때) 높은 친화성으로, 예를 들면, IL-1β에 대해 약 10 nM 이하, 약 5 nM 이하, 약 2 nM 이하, 바람직하게는 약 1 nM 이하, 약 500 pM 이하, 보다 바람직하게는 약 250 pM 이하, 약 100 pM 이하, 약 50 pM 이하, 약 25 pM 이하, 약 10 pM 이하, 약 5 pM 이하, 약 3 pM 이하, 약 1 pM 이하, 약 0.75 pM 이하, 약 0.5 pM 이하 또는 약 0.3 pM 이하의 평형 결합 해리상수(K_D)로 인간 IL-1β에 결합한다. 상기 해리상수는 예를 들면, 비아코어(지이 헬쓰케어(GE Healthcare))를 이용함으로써 측정될 수 있고, 비아코어를 이용한 측정은 상기 해리상수가 약 10 pM보다 더 큰 경우 바람직할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 상기 해리상수는 KinExA(사피다인 인스트루먼츠 인코포레이티드(Sapidyne Instruments, Inc))를 이용함으로써 측정될 수 있고, KinExA를 이용한 측정은 상기 해리상수가 약 10 pM보다 작은 경우 바람직할 수 있다.

본 발명의 항체 또는 단편은 예를 들면, 효소-연결된 면역흡착 분석(ELISA)에 의해 측정될 때 약 10 nM 이하, 약 5 nM 이하, 약 2 nM 이하, 약 1 nM 이하, 약 0.75 nM 이하, 약 0.5 nM 이하, 약 0.4 nM 이하, 약 0.3 nM 이하 또는 심지어 약 0.2 nM 이하의 IC₅₀으로 IL-1β에 결합할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 항체 또는 항체 단편은 IL-1 이외의 임의의 표적에 교차반응하지 않는다. 예를 들면, 본 발명의 항체 및 단편은 IL-1β에 결합할 수 있으나 IL-1α에 검출가능하게 결합하지 않거나, IL-1α와의 결합에 비해 IL-1β와의 결합에서 약 100배 이상(예를 들면, 약 150배 이상, 약 200배 이상 또는 심지어 약 250배 이상) 더 높은 선택성을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 본 발명에 따라 사용되는 항체 또는 단편은 동물에서 IL-1β에 의해 유도된 혈청 IL-6의 발현을 본 발명의 항체 또는 단편이 투여되지 않은 IL-1β 자극된 동물의 혈청 IL-6 수준에 비해 50% 이상(예를 들면, 60% 이상, 70% 이상 또는 심지어 80% 이상)까지 억제할 수 있다. 항체는 IL-1β에 결합할 수 있으나 결합된 IL-1β 리간드와 IL-1 수용체 I형(IL-1RI)의 결합을 허용할 수 있거나 실질적으로 허용할 수 있다. IL-1β와 IL-1RI의 결합을 차단하거나 실질적으로 방해하는 많은 공지된 IL-1β 결합 항체와 대조적으로, AB5 및 AB7(미국 특허 제7,531,166호)로 명명된 항체들은 IL-1β 리간드에 선택적으로 결합하지만 결합된 IL-1β 리간드와 IL-1RI의 결합을 허용한다. 예를 들면, AB7로 명명된 항체는 IL-1β 에피토프에 결합하지만 결합된 IL-1β가 IL-1RI에 결합하는 것을 여전히 허용한다. 일부 실시양태에서, 상기 항체는 결합된 IL-1β가 IL-1RI에 결합하는 상호작용의 친화성을 감소시킬 수 있다. 따라서, 관련 양태에서, 본 개시내용은 전술된 특성들 중 하나 이상의 특성을 갖는 IL-1β 결합 항체 또는 IL-1β 결합 항체 단편의 용도를 제공한다. 본 발명의 임의의 상기 항체, 항체 단편 또는 폴리펩티드는 본원에 기재된 바와 같이 인간화될 수 있거나 인간 개조될 수 있다.

예를 들면, 하기 특허들 및 특허출원들에 기재되어 있거나 하기 특허들 및 특허출원들에 기재된 방법의 이용을 통해 유도된 항체 및 항체 결합 단편(예를 들면, V 영역 서열)을 포함하는, 당업계에서 공지되어 있는 다양한 IL-1(예를 들면, IL-1β) 항체 및 단편이 본원의 개시내용에 의해 제공된 바와 같이 사용될 수 있다: 미국 특허 제4,935,343호; 미국 특허출원 공보 제2003/0026806호; 미국 특허출원 공보 제2003/0124617호(예를 들면, 항체 AAL160); 미국 특허 제7, 566,772호(예를 들면, 항체 9.5.2); PCT 특허출원 공보 제WO 03/034984호; PCT 특허출원 공보 제WO 95/01997호(예를 들면, 항체 SK48-E26 VTKY); 미국 특허 제7,446,175호(예를 들면, 항체 ACZ 885); PCT 특허출원 공보 제WO 03/010282호(예를 들면, 항체 Hu007); PCT 특허출원 공보 제WO 03/073982호(예를 들면, 항체 N55S); 미국 특허 제7,541,033호(예를 들면, W17, U43, W13, W18, W20); 미국 특허 제7,491,392호; PCT 특허출원 공보 제WO 2004/072116호; PCT 특허출원 공보 제WO 2004/067568호; 유럽 특허 제0 267 611 B1호; 유럽 특허 제0 364 778 B1호; 및 미국 특허출원 제11/472813호. 비제한적인 예로서, 항체 AB5 및 AB7(미국 특허 제7,531,166호)은 본 발명에 따라 사용될 수 있다. AB5 및 AB7(XOMA 052로도 지칭됨)의 가변 영역 서열은 다음과 같다:

AB5

경쇄

DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLSWYQQKPDGTVKLLIYYTSKLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCLQGKMLPWTFGGGTKLEIK(서열번호 3)

밑줄친 서열은 (좌측부터 우측으로) CDR1, CDR2 및 CDR3을 표시한다.

중쇄

QVTLKESGPGILKPSQTLSLTCSFSGFSLSTSGMGVGWIRQPSGKGLEWLAHIWWDGDESYNPSLKTQLTISKDTSRNQVFLKITSVDTVDTATYFCARNRYDPPWFVDWGQGTLVTVSS(서열번호 4)

AB7

경쇄

DIQMTQSTSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLSWYQQKPGKAVKLLIYYTSKLHSGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQQEDFATYFCLQGKMLPWTFGQGTKLEIK(서열번호 5)

중쇄

QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCSFSGFSLSTSGMGVGWIRQPSGKGLEWLAHIWWDGDESYNPSLKSRLTISKDTSKNQVSLKITSVTAADTAVYFCARNRYDPPWFVDWGQGTLVTVSS(서열번호 6)

본원에 기재된 항체 및 항체 단편은 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 항체 및 항체 단편을 제조하기에 적합한 방법은 당업계에서 공지되어 있다. 상기 항체 및 항체 단편을 제조하는 다른 방법은 본 발명의 일부로서 본원에 기재되어 있다. 본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 항체, 항체 단편 또는 폴리펩티드는 임의의 정도로 단리될 수 있거나 정제될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 단리된 화합물은 그의 천연 환경으로부터 제거된 화합물이다. 정제된 화합물은 화합물이 (i) 그의 천연 환경에서 존재하는 경우, 또는 (ii) 실험 조건 하에서 초기에 합성되고/되거나 증폭된 경우보다 더 순수한 형태로 존재하도록 증가된 순도를 갖는 화합물이고, 이때 "순도"는 상대적인 용어이고 반드시 "절대 순도"를 의미하는 것은 아니다.

조성물

IL-1(예를 들면, IL-1β) 결합 항체 및 결합 단편은 본원에 개시된 방법에서 사용되기 위해 조성물, 특히 약학 조성물로 제제화될 수 있다. 이러한 조성물은 적합한 담체, 예를 들면, 약학적으로 허용가능한 물질과의 혼합물로 치료 또는 예방 유효량의 IL-1β 결합 항체 또는 항체 단편을 포함한다. 전형적으로, IL-1β 결합 항체 및 항체 단편은 동물(예를 들면, 인간)에게 투여되기 위해 약학 조성물로 제제화되기 전에 충분히 정제된다.

약학적으로 허용가능한 물질은 예를 들면, 담체, 부형제, 희석제, 항산화제, 보존제, 착색제, 향미제 및 희석제, 유화제, 현탁제, 용매, 충전제, 증량제, 완충제, 전달 비히클, 긴장성 조절제(tonicity agent), 보조용매, 습윤화제, 착물화제, 완충제, 항균제 및 계면활성제를 포함한다.

중성 완충 식염수 또는 알부민과 혼합된 식염수는 예시적인 적절한 담체이다. 약학 조성물은 항산화제, 예컨대, 아스코르브산; 저분자량 폴리펩티드; 단백질, 예컨대, 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대, 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신; 단당류, 이당류 및 다른 탄수화물(글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 포함함); 킬레이팅제, 예컨대, EDTA; 당 알코올, 예컨대, 만니톨 또는 소르비톨; 염 형성 반대이온, 예컨대, 나트륨; 및/또는 비-이온성 계면활성제, 예컨대, 트윈, 플루로닉 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함할 수 있다. 또한, 예를 들면, 적합한 긴장성 증강제는 알칼리 금속 할로겐화물(바람직하게는, 염화나트륨 또는 염화칼륨), 만니톨, 소르비톨 등을 포함한다. 적합한 보존제는 염화벤즈알코늄, 티메로살, 펜에틸 알코올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로르헥시딘, 소르브산 등을 포함한다. 과산화수소도 보존제로서 사용될 수 있다. 적합한 보조용매는 글리세린, 프로필렌 글리콜 및 PEG를 포함한다. 적합한 착물화제는 카페인, 폴리비닐피롤리돈, 베타-사이클로덱스트린 또는 하이드록시-프로필-베타-사이클로덱스트린을 포함한다. 적합한 계면활성제 또는 습윤화제는 소르비탄 에스테르, 폴리소르베이트, 예컨대, 폴리소르베이트 80, 트로메타민, 레시틴, 콜레스테롤, 틸록사팔(tyloxapal) 등을 포함한다. 완충제는 통상적인 완충제, 예컨대, 아세트산염, 붕산염, 시트르산염, 인산염, 중탄산염 또는 트리스-HCl일 수 있다. 아세트산염 완충제의 pH는 약 4 내지 5.5일 수 있고, 트리스 완충제의 pH는 약 7 내지 8.5일 수 있다. 추가 약제는 문헌(Remington 's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, A. R. Gennaro, ed., Mack Publishing Company, 1990)에 기재되어 있다.

상기 조성물은 액체 형태, 또는 동결건조된 또는 냉동건조된 형태로 존재할 수 있고, 하나 이상의 동결건조보호제, 부형제, 계면활성제, 고분자량 구조 첨가제 및/또는 증량제를 포함할 수 있다(예를 들면, 미국 특허 제6,685,940호, 제6,566,329호 및 제6,372,716호 참조). 한 실시양태에서, 비-환원 당, 예컨대, 수크로스, 락토스 또는 트레할로스인 동결건조보호제가 포함된다. 고장성(hypertonic) 또는 다소 저장성(hypotonic) 제제도 적합할 수 있지만, 일반적으로 포함되는 동결건조보호제의 양은 재구성 시 생성된 제제가 등장성을 나타낼 정도의 양이다. 또한, 동결건조보호제의 양은 동결건조 시 허용불가능한 양의 단백질 분해 및/또는 응집을 방지하기에 충분해야 한다. 예비동결건조된 제제에서 당(예를 들면, 수크로스, 락토스, 트레할로스)에 대한 예시적인 동결건조보호제 농도는 약 10 mM 내지 약 400 mM이다. 또 다른 실시양태에서, 계면활성제, 예를 들면, 비-이온성 계면활성제 및 이온성 계면활성제, 예컨대, 폴리소르베이트(예를 들면, 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80); 폴록사머(예를 들면, 폴록사머 188); 폴리(에틸렌 글리콜) 페닐 에테르(예를 들면, 트리톤); 나트륨 도데실 설페이트(SDS); 나트륨 라우릴 설페이트; 나트륨 옥틸 글리코사이드; 라우릴설포베타인, 미리스틸설포베타인, 리놀레일설포베타인 또는 스테아릴설포베타인; 라우릴사르코신, 미리스틸사르코신, 리놀레일사르코신 또는 스테아릴사르코신; 리놀레일베타인, 미리스틸베타인 또는 세틸베타인; 라우로아미도프로필베타인, 코카미도프로필베타인, 리놀레아미도프로필베타인, 미리스타미도프로필베타인, 팔미도프로필베타인 또는 이소스테아르아미도프로필베타인(예를 들면, 라우로아미도프로필); 미리스타미도프로필디메틸아민, 팔미도프로필디메틸아민 또는 이소스테아르아미도프로필디메틸아민; 나트륨 메틸 코코일타우레이트 또는 이나트륨 메틸 오페일타우레이트; 및 모나쿠아트(MONAQUAT)™ 시리즈(모나 인더스트리스 인코포레이티드(Mona Industries, Inc.), 미국 뉴저지주 패터슨 소재), 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 및 에틸렌과 프로필렌 글리콜의 공중합체(예를 들면, 플루로닉스, PF68 등)가 포함된다. 예비동결건조된 제제에 존재할 수 있는 계면활성제의 예시적인 양은 약 0.001% 내지 0.5%이다. 고분자량 구조 첨가제(예를 들면, 충전제, 결합제)는 예를 들면, 아카시아, 알부민, 알긴산, 인산칼슘(이염기성), 셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스 나트륨, 하이드록시에틸셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 미세결정성 셀룰로스, 덱스트란, 덱스트린, 덱스트레이트, 수크로스, 틸로스, 예비젤라틴화된 전분, 황산칼슘, 아밀로스, 글리신, 벤토나이트, 말토스, 소르비톨, 에틸셀룰로스, 인산수소이나트륨, 인산이나트륨, 피로아황산이나트륨, 폴리비닐 알코올, 젤라틴, 글루코스, 구아 검, 액체 글루코스, 압축가능한 당, 규산알루미늄마그네슘, 말토덱스트린, 폴리에틸렌 옥사이드, 폴리메타크릴레이트, 포비돈, 알긴산나트륨, 트라가칸쓰 미세결정성 셀룰로스, 전분 및 제인(zein)을 포함할 수 있다. 고분자량 구조 첨가제의 예시적인 농도는 0.1 중량% 내지 10 중량%이다. 다른 실시양태에서, 증량제(예를 들면, 만니톨, 글리신)가 포함될 수 있다.

조성물은 비경구 투여에 적합할 수 있다. 예시적인 조성물은 당업자에 의해 이용될 수 있는 임의의 경로, 예컨대, 관절내, 피하, 정맥내, 근육내, 복강내, 뇌내(실질내), 뇌실내, 근육내, 안구내, 동맥내, 병소내, 직장내, 경피, 경구 및 흡입 경로에 의해 동물 내로 주사되거나 관주되기에 적합하다. 비경구 제제는 전형적으로 임의적으로 약학적으로 허용가능한 보존제를 함유하는 멸균 발열원 무함유 등장성 수용액일 것이다.

비수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일, 예컨대, 올리브 오일, 및 주사가능한 유기 에스테르, 예컨대, 에틸 올레에이트이다. 식염수 및 완충된 배지를 포함하는 수성 담체는 물, 알코올성/수성 용액, 유화액 또는 현탁액을 포함한다. 비경구 비히클은 염화나트륨 용액, 링커 덱스트로스, 덱스트로스 및 염화나트륨, 젖산염 함유(lactated) 링거 또는 고정된 오일을 포함한다. 정맥내 비히클은 유체 및 영양분 보충제(replenisher), 전해질 보충제, 예컨대, 링거 덱스트로스에 기초한 전해질 보충제 등을 포함한다. 보존제 및 다른 첨가제, 예를 들면, 항균제, 항산화제, 킬레이팅제, 불활성 기체 등도 존재할 수 있다. 일반적으로, 본원에 참고로 도입되는 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 16th Ed., Mack Eds., 1980)을 참조한다.

본원에 기재된 약학 조성물은 특정 국소 환경에서 국소 농도의 생성물(예를 들면, 볼루스, 데포 효과) 지속 방출 및/또는 증가된 안정성 또는 반감기를 제공하는 방식으로 조절 또는 지속 전달되도록 제제화될 수 있다. 본 발명은 일부 실시양태에서 이러한 조성물이 초기 침착물 중에 유의하게 더 많은 양의 항체 또는 단편을 포함할 수 있지만, 본원의 개시내용에 따라 임의의 시점에서 실제로 방출되고 이용될 수 있는 항체 또는 단편의 유효량은 초기 침착물보다 훨씬 더 낮은 양이다. 상기 조성물은 중합체 화합물, 예컨대, 폴리락트산, 폴리글리콜산 등의 미립자 제제뿐만 아니라, 데포 주사로서 전달될 수 있는 활성제의 조절 또는 지속 방출을 제공하는 물질, 예컨대, 생체분해성 매트릭스, 주사가능한 미세구, 미세캡슐 입자, 미세캡슐, 생체부식성 입자 비드, 리포좀 및 이식가능한 전달 장치와 함께 본 발명의 IL-1β 결합 항체, 항체 단편, 핵산 또는 벡터의 제제를 포함할 수 있다. 이러한 지속 또는 조절 전달 수단을 제제화하는 기법은 공지되어 있고, 다양한 중합체가 약물의 조절 방출 및 전달을 위해 개발되어 사용되어 왔다. 이러한 중합체는 전형적으로 생체분해성 및 생체상용성을 나타낸다. 거울상이성질체성 중합체 또는 폴리펩티드 절편의 착물화에 의해 형성된 중합체 하이드로겔, 및 온도 또는 pH 민감성을 나타내는 하이드로겔을 포함하는 중합체 하이드로겔이 생체활성 단백질 물질(예를 들면, 항체)의 포획에서 수반되는 약한 수성 조건 때문에 약물 데포 효과의 제공을 위해 바람직할 수 있다. 예를 들면, PCT 특허출원 공보 제WO 93/15722호에 기재된 약학 조성물의 전달을 위한 조절 방출 다공성 중합체 미세입자의 설명을 참조한다.

이 목적에 적합한 물질은 폴리락티드(예를 들면, 미국 특허 제3,773,919호 참조), 폴리-(a-하이드록시카르복실산), 예컨대, 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산(유럽 특허 제133,988A호)의 중합체, L-글루탐산과 감마 에틸-L-글루타메이트의 공중합체(Sidman et al., Biopolymers, 22:547-556 (1983)), 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트)(Langer et al., J. Biomed. Mater. Res., 15:167-277 (1981), and Langer, Chem. Tech., 12:98-105 (1982)), 에틸렌 비닐 아세테이트 또는 폴리-D(-)-3-하이드록시부티르산을 포함한다. 다른 생체분해성 중합체는 폴리(락톤), 폴리(아세탈), 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(오르토카르보네이트)를 포함한다. 지속 방출 조성물은 당업계에서 공지되어 있는 여러 방법들 중 임의의 방법에 의해 제조될 수 있는 리포좀도 포함할 수 있다(예를 들면, 문헌(Eppstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82:3688-92 (1985)) 참조). 담체 자체 또는 그의 분해 생성물은 표적 조직에서 무독성을 나타내어야 하고 병태를 더 악화시키지 않아야 한다. 이것은 표적 질환의 동물 모델, 또는 이러한 모델이 이용될 수 없는 경우 정상 동물에서의 관용적인 스크리닝에 의해 확인될 수 있다.

지속 방출을 위한 재조합 단백질의 미세캡슐화는 인간 성장 호르몬(rhGH), 인터페론(rhIFN), 인터루킨-2 및 MN rgp120의 경우에서 성공적으로 수행되었다(문헌(Johnson et al., Nat. Med., 2:795-799 (1996)); 문헌(Yasuda, Biomed. Ther., 27:1221-1223 (1993)); 문헌(Hora et al., Bio/Technologv. 8:755-758 (1990)); 문헌(Cleland, "Design and Production of Single Immunization Vaccines Using Polylactide Polyglycolide Microsphere Systems," in Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach, Powell and Newman, eds, (Plenum Press: New York, 1995), pp. 439-462); PCT 특허출원 공보 제WO 97/03692호; PCT 특허출원 공보 제WO 96/40072호; PCT 특허출원 공보 제WO 96/07399호; 및 미국 특허 제5,654,010호). 이들 단백질들의 지속 방출 제제를 폴리-락트산-코글리콜산(PLGA) 중합체(그의 생체상용성 및 광범위한 생체분해성으로 인해 사용됨)를 사용하여 개발하였다. PLGA, 락트산 및 글리콜산의 분해 생성물은 인간 체내에서 신속히 제거될 수 있다. 게다가, 이 중합체의 분해성은 그의 분자량 및 조성에 의해 좌우될 수 있다(Lewis, "Controlled release of bioactive agents from lactide/glycolide polymer," in: M. Chasin and R. Langer (Eds.), Biodegradable Polymers as Drug Delivery Systems (Marcel Dekker: New York, 1990), pp. 1-41). 지속 방출 조성물의 추가 예는 예를 들면, 유럽 특허 제58,481A호, 미국 특허 제3,887,699호, 유럽 특허 제158,277A호, 캐나다 특허 제1176565호, 문헌(U. Sidman et al., Biopolymers 22, 547 [1983]), 문헌(R. Langer et al., Chem. Tech. 12, 98 [1982]), 문헌(Sinha et al., J. Control. Release 90, 261 [2003]), 문헌(Zhu et al., Nat. Biotechnol. 18, 24 [2000]) 및 문헌(Dai et al., Colloids Surf B Biointerfaces 41, 117 [2005])에 기재된 조성물을 포함한다.

생체부착성 중합체도 본 발명의 조성물 중에 또는 본 발명의 조성물과 함께 사용될 것이 고려된다. 생체부착제는 연장된 시간 동안 생물학적 기질에 부착될 수 있는 합성 물질 및 천연 발생 물질이다. 예를 들면, 카르보폴 및 폴리카르보필은 둘다 폴리(아크릴산)의 합성 교차연결된 유도체이다. 천연 발생 물질에 기초한 생체부착성 전달 시스템은 예를 들면, 히알루로난으로도 공지되어 있는 히알루론산을 포함한다. 히알루론산은 D-글루쿠론산 잔기 및 N-아세틸-D-글루코스아민 잔기로 구성된 천연 발생 점액다당류이다. 히알루론산은 결합 조직을 포함하는 척추동물의 세포외 조직 매트릭스에서 발견될 뿐만 아니라, 활액, 및 눈의 유리체액 및 수성액에서도 발견된다. 히알루론산의 에스테르화된 유도체는 생체상용성 및 생체분해성을 나타내는, 전달에 사용될 미세구를 생성하는 데에 사용되어 왔다(예를 들면, 문헌(Cortivo et al., Biomaterials (1991) 12:727-730); 유럽 특허 제517,565호; PCT 특허출원 공보 제WO 96/29998호; 및 문헌(Ilium et al., J. Controlled Rel. (1994) 29:133-141) 참조). 본 발명의 예시적인 히알루론산 함유 조성물은 IL-1β 결합 항체 또는 단편 대 히알루론산 중합체의 중량비(w/w)를 기준으로 약 0.1% 내지 약 40%의 양으로 히알루론산 에스테르 중합체를 포함한다.

생체분해성 중합체 매트릭스 및 비생체분해성 중합체 매트릭스 둘다가 본 발명에 따른 조성물을 전달하는 데에 사용될 수 있고, 이러한 중합체 매트릭스는 천연 또는 합성 중합체를 포함할 수 있다. 생체분해성 매트릭스가 바람직하다. 방출이 일어나는 기간은 중합체의 선택에 기초한다. 전형적으로, 수시간 내지 3개월의 기간 내지 12개월의 기간 동안의 방출이 가장 바람직하다. 생체분해성 전달 시스템을 형성하는 데에 사용될 수 있는 예시적인 합성 중합체는 락트산과 글리콜산의 중합체, 폴리아미드, 폴리카르보네이트, 폴리알킬렌, 폴리알킬렌 글리콜, 폴리알킬렌 옥사이드, 폴리알킬렌 테레프탈레이트, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 에스테르, 폴리비닐 할로겐화물, 폴리비닐피롤리돈, 폴리글리콜라이드, 폴리실록산, 폴리무수물, 폴리우레탄 및 이의 공중합체, 폴리(부트산), 폴리(발레르산), 알킬 셀룰로스, 하이드록시알킬 셀룰로스, 셀룰로스 에테르, 셀룰로스 에스테르, 니트로 셀룰로스, 아크릴산 에스테르와 메타크릴산 에스테르의 중합체, 메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 하이드록시부틸 메틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 셀룰로스 프로피오네이트, 셀룰로스 아세테이트 부티레이트, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 카르복시에틸 셀룰로스, 셀룰로스 트리아세테이트, 셀룰로스 설페이트 나트륨 염, 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(에틸 메타크릴레이트), 폴리(부틸 메타크릴레이트), 폴리(이소부틸 메타크릴레이트), 폴리(헥실메타크릴레이트), 폴리(이소데실 메타크릴레이트), 폴리(라우릴 메타크릴레이트), 폴리(페닐 메타크릴레이트), 폴리(메틸 아크릴레이트), 폴리(이소프로필 아크릴레이트), 폴리(이소부틸 아크릴레이트), 폴리(옥타데실 아크릴레이트), 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리(에틸렌 옥사이드), 폴리(에틸렌 테레프탈레이트), 폴리(비닐 알코올), 폴리비닐 아세테이트, 폴리비닐 클로라이드, 폴리스티렌 및 폴리비닐피롤리돈을 포함한다. 예시적인 천연 중합체는 알긴산염 및 다른 다당류(덱스트란 및 셀룰로스를 포함함), 콜라겐, 이의 화학적 유도체(치환; 화학적 기, 예를 들면, 알킬 또는 알킬렌의 부가; 하이드록실화; 산화; 및 당업자에 의해 관용적으로 만들어지는 다른 변형), 알부민 및 다른 친수성 단백질, 제인 및 다른 프롤아민(prolamine) 및 소수성 단백질, 및 이들의 공중합체 및 혼합물을 포함한다. 일반적으로, 이들 물질들은 효소에 의한 가수분해에 의해 분해되거나, 표면 또는 벌크 부식에 의한 생체내 물에의 노출에 의해 분해된다. 중합체는 임의적으로 그의 중량의 약 90%까지 물을 흡수할 수 있고 임의적으로 다가 이온 또는 다른 중합체와 교차연결되는 하이드로겔(예를 들면, PCT 특허출원 공보 제WO 04/009664호 및 제WO 05/087201호, 및 문헌(Sawhney, et al., Macromolecules, 1993, 26, 581-587) 참조)의 형태로 존재한다.

또한, 전달 시스템은 스테롤, 예컨대, 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르 및 지방산 또는 중성 지방, 예컨대, 모노글리세라이드, 디글리세라이드 및 트리글리세라이드를 포함하는 지질인 비-중합체 시스템; 하이드로겔 방출 시스템; 실라스틱(silastic) 시스템; 펩티드 기초 시스템; 왁스 코팅물; 통상적인 결합제 및 부형제를 사용하는 압축된 정제; 부분적으로 융합된 이식물 등을 포함한다. 구체적인 예로는 (a) 생성물이 매트릭스 내에 한 형태로 함유되어 있는 부식성 시스템, 예컨대, 미국 특허 제4,452,775호, 제4,675,189호 및 제5,736,152호에 기재된 시스템; 및 (b) 생성물이 중합체로부터 조절된 속도로 투과하는 확산 시스템, 예컨대, 미국 특허 제3,854,480호, 제5,133,974호 및 제5,407,686호에 기재된 시스템이 있으나 이들로 한정되지 않는다. 생성물을 함유하는 리포좀은 공지되어 있는 방법, 예를 들면, 독일 특허 제3,218,121호; 문헌(Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82:3688-3692 (1985)); 문헌(Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4030-4034 (1980)); 유럽 특허 제52,322호; 유럽 특허 제36,676호; 유럽 특허 제88,046호; 유럽 특허 제143,949호; 유럽 특허 제142,641호; 일본 특허출원 제83-118008호; 미국 특허 제4,485,045호; 미국 특허 제4,544,545호; 및 유럽 특허 제102,324호에 기재된 방법에 의해 제조될 수 있다.

IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편을 포함하는 약학 조성물은 흡입용으로, 예를 들면, 건조 분말로서 제제화될 수 있다. 에어로졸 전달을 위한 액화된 추진제 중의 흡입 용액도 제제화될 수 있다. 또 다른 제제에서, 용액은 분사될 수 있다. 폐 투여를 위한 추가 약학 조성물은 예를 들면, 화학적으로 변형된 단백질의 폐 전달을 개시하는 PCT 특허출원 공보 제WO 94/20069호에 기재된 약학 조성물을 포함한다. 폐 전달의 경우, 입자 크기는 원위 폐까지 전달되기에 적합해야 한다. 예를 들면, 입자 크기는 1 ㎛ 내지 5 ㎛일 수 있으나, 각각의 입자가 높은 다공도를 갖는 경우 보다 큰 입자가 사용될 수 있다.

IL-1β 결합 항체 또는 항체 단편을 함유하는 일부 제제들은 경구 투여될 수 있다. 이 방식으로 투여되는 제제는 고체 투약 제형, 예컨대, 정제 및 캡슐의 조제에서 통상적으로 사용되는 담체를 사용하거나 사용하지 않고 제제화할 수 있다. 예를 들면, 캡슐은 생체이용성이 최대화되고 예비전신 분해가 최소화된 경우 위장관 내의 특정 지점에서 제제의 활성 부분을 방출하도록 디자인될 수 있다. 선택적 결합제의 흡수를 촉진하기 위한 추가 물질이 포함될 수 있다. 희석제, 향미제, 저융점 왁스, 식물성 오일, 윤활제, 현탁제, 정제 붕해제 및 결합제도 사용될 수 있다.

또 다른 제제는 정제의 제조에 적합한 무독성 부형제와의 혼합물로 유효량의 IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편을 포함할 수 있다. 정제를 멸균수 또는 또 다른 적절한 비히클에 용해시킴으로써 용액을 단위 투여 제형으로 제조할 수 있다. 적합한 부형제는 불활성 희석제, 예컨대, 탄산칼슘, 탄산나트륨 또는 중탄산나트륨, 락토스, 또는 인산칼슘; 또는 결합제, 예컨대, 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 또는 윤활제, 예컨대, 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 탈크를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.

적합한 및/또는 바람직한 약학 제제는 본 개시내용 및 제제화 기술의 일반적인 지식을 고려하여 의도된 투여 경로, 전달 형식 및 원하는 투여량에 따라 결정될 수 있다. 투여 방식과 관계없이, 유효 투여량은 환자의 체중, 신체 표면적 또는 기관의 크기에 따라 계산될 수 있다. 본원에 기재된 제제들 각각을 수반하는 치료에 적합한 투여량을 결정하기 위한 계산의 추가 개선은 당업계에서 관용적으로 달성되고 당업계에서 관용적으로 수행되는 노력의 범위 내에 있다. 적절한 투여량은 적절한 투여량-반응 데이터의 이용을 통해 확인될 수 있다.

하나 이상의 다른 치료제와 조합된 IL-1β 결합 항체 및 항체 단편을 포함하는 제제를 포함하는 추가 제제는 본 개시내용을 고려할 때 자명할 것이다. 예를 들면, 몇몇 제제에서, 본 발명의 IL-1β 결합 항체, 항체 단편(예를 들면, 결합 단편), 핵산 또는 벡터는 IL-1 신호전달 경로의 제2 억제제와 함께 제제화된다. 대표적인 제2 억제제는 항체, 항체 단편, 펩티드, 폴리펩티드, 화합물, 핵산, 벡터 및 약학 조성물, 예를 들면, 미국 특허 제6899878호, 미국 특허출원 공보 제2003022869호, 미국 특허출원 공보 제20060094663호, 미국 특허출원 공보 제20050186615호, 미국 특허출원 공보 제20030166069호, PCT 특허출원 제WO 04/022718호, PCT 특허출원 제WO 05/084696호 및 PCT 특허출원 제WO 05/019259호에 기재된 것들을 포함하나 이들로 한정되지 않는다. 예를 들면, 조성물은 또 다른 IL-1β 결합 항체, 단편, 또는 이러한 항체 또는 단편을 코딩하는 핵산 또는 벡터와 조합된 본 발명의 IL-1β 결합 항체, 항체 단편, 핵산 또는 벡터를 포함할 수 있다.

약학 조성물은 (예를 들면, IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편 이외의) 다른 활성제와 조합된 IL-1β 결합 항체 또는 이의 결합 단편을 포함할 수 있다. 대안적으로, 약학 조성물은 예를 들면, (예를 들면, IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편 이외의) 하나 이상의 활성제를 포함하는 약학 조성물을 포함하는 다른 약학 조성물과 조합된 IL-1β 결합 항체 또는 이의 결합 단편을 포함할 수 있다. 이러한 조합은 그의 의도된 목적에 유용한 조합이다. 본 발명의 일부인 상기 조합은 IL-1β 항체 및 단편, 예를 들면, 본원에 기재된 IL-1β 항체 및 단편, 및 하나 이상의 추가 물질일 수 있다. 하기 조합에서 사용될 수 있는 활성제의 예는 설명을 위한 것이고 이들로 한정되지 않는다. 조합은 형성된 조성물이 그의 의도된 기능을 수행할 수 있게 하는 경우 하나 초과의 추가 물질, 예를 들면, 2개 또는 3개의 추가 물질도 포함할 수 있다.

본 개시내용은 하나 이상의 다른 활성제를 포함하는 추가 약학 조성물이 IL-1β 결합 항체 또는 단편과 별도로 투여될 수 있고(예를 들면, 동시 치료 섭생, 동시 치료를 제공받는 대상체), 이러한 별도 투여가 동일한 시간 또는 상이한 시간, 예를 들면, 동일한 또는 상이한 날, 또는 동일한 날의 상이한 시간에서 수행될 수 있다는 것도 고려한다. IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편, 예컨대, 본원에 개시된 IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편의 투여와 함께 이용되는 경우, 다른 약학 조성물 및/또는 활성제의 투여는 당업계에서 공지되어 있는 표준 의학 관행에 따라 수행될 수 있거나 변형될 수 있다(예를 들면, 투약 사이의 보다 긴 간격, 보다 적은 투여량 수준, 지연된 개시).

본 개시내용에서 고려되는 약학 조성물은 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 및/또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 활성제를 포함하는 약학 조성물을 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 면역억제제는 핵산(예를 들면, DNA) 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 및 콜히친으로부터 선택된다. 몇몇 실시양태에서, 핵산(예를 들면, DNA) 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질(예를 들면, 메토트렉세이트), X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드이다. 몇몇 실시양태에서, 스테로이드는 프레드니손(예를 들면, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론), 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬이다. 몇몇 실시양태에서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제이다.

다른 활성제는 예를 들면, 인도메타신, 비-스테로이드 소염 약물(NSAID), 예컨대, 아스피린, 이부프로펜, 및 다른 프로피온산 유도체(알미노프로펜, 벤옥사프로펜, 부클록스산(bucloxic acid), 카프로펜, 펜부펜, 페노프로펜, 플루프로펜, 플루르비프로펜, 인도프로펜, 케토프로펜, 미로프로펜, 나프록센, 옥사프로진, 피르프로펜, 프라노프로펜, 수프로펜, 티아프로펜산 및 티옥사프로펜), 아세트산 유도체(인도메타신, 아세메타신, 알클로페낙, 클린다낙, 디클로페낙, 펜클로페낙, 펜클로즈산, 펜티아작, 푸이로페낙, 이부페낙, 이속세팍, 옥스피낙, 설린닥, 티오피낙, 톨메틴, 지도메타신 및 조메피락), 페남산 유도체(플루페남산, 메클로페남산, 메페남산, 니플룸산 및 톨페남산), 비페닐카르복실산 유도체(디플루니살 및 플루페니살), 옥시캄(이속시캄, 피록시캄, 수독시캄 및 테녹시칸), 살리실산염(아세틸 살리실산, 설파살라진) 및 피라졸론(아파존, 베즈피페릴론, 페프라존, 모페부타존, 옥시펜부타존, 페닐부타존)을 포함할 수 있다. 다른 조합은 사이클로옥시게나제-2(COX-2) 억제제, 수분제거제(aquarectics), 경구 글루코코르티코이드, 관절내 글루코코르티코이드, 콜히친, 잔틴-옥시다제 억제제, 알로푸리놀, 요산뇨배설 촉진제(uricosuric agent), 설핀피라존, 페북소스타트, 프로베네시드, 페노피브레이트, 베네미드, 안지오텐신 II 수용체 길항제, 로사르탄, 티아자이드, PEG-유리카제(uricase), 중탄산나트륨 및 에틸렌디아민테트라아세트산을 포함한다. 조합을 위한 다른 활성제는 스테로이드, 예컨대, 프레드니솔론, 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 베타메타손, 덱사메타손 또는 하이드로코르티손을 포함한다. 이러한 조합은 본 발명의 항체 또는 단편과 조합하여 환자를 치료하는 경우 요구되는 스테로이드 투여량을 점감시킴으로써 스테로이드의 하나 이상의 부작용을 감소시킬 수 있거나 심지어 제거할 수 있기 때문에 특히 유리할 수 있다.

(예를 들면, 활성제를 포함하는) 약학 조성물은 예를 들면, 항-대사물질, 예컨대, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 마이코페놀레이트 모페틸, 피리미딘 유사체, 퓨린 유사체, 엽산염 길항제; T 세포 억제제/칼시뉴린(calcineurin) 억제제, 예컨대, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트, FK506/태크롤리무스; 알킬화제/세포독성제, 예컨대, 사이클로포스파미드, 클로람부실; 정맥내 면역글로불린; 생물학적 물질, 예컨대, 인플릭시마브, 아달리무마브, 에타네르셉트; 인터루킨-2 수용체 길항제, 예컨대, 다클리주마브; 및 인터페론-α를 포함할 수 있다.

본 개시내용에 따라 대상체에게 투여되는 항-IL-1β 항체 또는 결합 단편이 (예를 들면, 활성제, 예컨대, 전술된 활성제들 중 임의의 활성제를 포함하는) 하나 이상의 추가 약학 조성물을 사용한 치료와 조합되어(예를 들면, 동시에) 투여될 수 있다는 것도 고려된다. 한 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료가 유지된다. 또 다른 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료는 (예를 들면, 일정한 투약 섭생에서 유지된 항-IL-1β 항체 또는 단편을 사용한) IL-1β 항체 치료의 과정 동안 감소되거나(예를 들면, 점감되거나) 중단된다(예를 들면, 대상체가 안정한 경우). 또 다른 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료는 감소되거나(예를 들면, 점감되거나) 중단되고(예를 들면, 대상체가 안정한 경우), 항-IL-1β 항체 또는 단편을 사용한 치료는 감소된다(예를 들면, 보다 낮은 투여량, 보다 덜 빈번한 투약, 보다 짧은 치료 섭생). 또 다른 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료는 감소되거나(예를 들면, 점감되거나) 중단되고(예를 들면, 대상체가 안정한 경우), 항-IL-1β 항체 또는 단편을 사용한 치료는 증가된다(예를 들면, 보다 높은 투여량, 보다 더 빈번한 투약, 보다 긴 치료 섭생). 또 다른 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료는 유지되고, 항-IL-1β 항체 또는 단편을 사용한 치료는 감소되거나 중단된다(예를 들면, 보다 낮은 투여량, 보다 덜 빈번한 투약, 보다 짧은 치료 섭생). 또 다른 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료 및 항-IL-1β 항체 또는 단편을 사용한 치료는 감소되거나 중단된다(예를 들면, 보다 낮은 투여량, 보다 덜 빈번한 투약, 보다 짧은 치료 섭생).

몇몇 실시양태에서, (항-IL-1β 항체 또는 결합 단편 이외의) 하나 이상의 활성제를 사용한 치료의 감소는 치료 과정 동안 투여되는 활성제의 누적 양의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, (항-IL-1β 항체 또는 결합 단편 이외의) 하나 이상의 활성제를 사용한 치료의 감소는 투여되는 활성제의 실제 투여량의 감소이다. 몇몇 실시양태에서, 하나 이상의 활성제를 사용한 치료의 감소는 전신 면역억제의 감소를 제공한다.

본 개시내용에서 사용되는 약학 조성물은 치료 유효량 또는 예방 유효량의 IL-1β 결합 항체 또는 결합 단편을 포함할 수 있다. 치료 유효량은 필요한 시간 동안 필요한 투여량에서 원하는 치료 결과를 달성하기에 효과적인 양을 의미한다. 항체 또는 항체 일부의 치료 유효량은 질환 상태, 개체의 연령, 성별 및 체중, 및 개체에서 원하는 반응을 이끌어내는 상기 항체 또는 항체 일부의 능력과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 또한, 치료 유효량은 치료적으로 유리한 효과가 상기 항체 또는 항체 일부의 임의의 독성 또는 유해 효과보다 더 클 때의 양이다. 예방 유효량은 필요한 시간 동안 필요한 투여량에서 원하는 예방 결과를 달성하기에 효과적인 양을 의미한다.

IL-1β 결합 항체 또는 단편을 포함하는 약학 조성물의 치료 또는 예방 유효량은 예를 들면, 치료 목적, 예컨대, 조성물이 사용될 증상, 투여 경로 및 대상체의 상태에 의해 좌우될 것이다. 약학 조성물은 IL-1 관련 병태를 치료하기 위한 치료 또는 예방 유효량으로 투여된다.

사용 방법

항-IL-1β 결합 항체 또는 이의 결합 단편은 예를 들면, 불응성 포도막염을 포함하는 포도막염의 치료 및/또는 예방을 위해 본원에 개시된 바와 같이 치료 유효량으로 사용될 수 있다. 본 개시내용은 항-IL-1β 항체 또는 단편에 대한 대안으로서, 또는 항-IL-1β 항체 또는 단편과 함께 다른 IL-1 경로 억제제의 사용도 고려한다.

기재된 방법과 관련하여 본원에서 사용된 용어 "예방", "예방한다", "예방하는", "저해", "저해한다" 및 "저해"는 (예를 들면, 위험군 대상체, 또는 선행 사건, 질환 또는 병태의 병력을 갖는 대상체에서) 사건, 질환 또는 병태, 예를 들면, 포도막염(예를 들면, 급성 포도막염 악화)의 임상 증상 또는 징후의 발생을 일시적으로 또는 영구적으로 및 부분적으로 또는 완전히 예방하거나, 저해하거나, 지연시키거나 감소시키는 것을 의미한다. 이러한 예방 또는 저해가 절대적으로 유용해야 할 필요는 없다.

본원에 기재된 방법과 관련하여 본원에서 사용된 용어 "치료", "치료한다" 및 "치료하는"은 사건, 질환 또는 병태, 예를 들면, 포도막염(예를 들면, 급성 포도막염 악화)의 임상 증상, 징후 또는 진행(예를 들면, 사건, 질환 또는 병태의 진단된 증상, 징후 또는 진행)을 일시적으로 또는 영구적으로 및 부분적으로 또는 완전히 제거하거나, 감소시키거나, 저해하거나 호전시키는 것을 의미한다. 이러한 치료가 절대적으로 유용해야 할 필요는 없다.

기재된 방법과 관련하여 본원에서 사용된 용어 "억제한다", "억제하는" 및 "억제"는 사건, 질환 또는 병태, 예를 들면, 포도막염(예를 들면, 급성 포도막염 악화)의 임상 증상 또는 징후를 일시적으로 또는 영구적으로 및 부분적으로 또는 완전히 예방하거나, 지연시키거나, 저해하거나, 감소시키거나, 치료하거나, 제거하거나 호전시키는 것을 의미한다. 이러한 예방, 치료, 저해 또는 감소가 절대적으로 유용해야 할 필요는 없다.

본원에서 사용된 용어 "치료가 필요한"은 환자가 치료를 필요로 하거나 치료로부터 이익을 얻을 것이라는 의료인의 판단을 의미한다. 이 판단은 의료인의 경험 범위 내에 있지만 본 개시내용의 방법 또는 화합물에 의해 치료될 수 있는 병태의 결과로서 환자가 아프다거나 아플 것이라는 지식을 포함하는 다양한 인자에 기초하여 만들어진다.

본원에서 사용된 용어 "유효량"은 단독으로 또는 약학 조성물의 일부로서 대상체에게 (예를 들면, 1 이상의 투여량으로서) 투여된 경우 질환 상태 또는 병태의 임의의 증상, 양태, 파라미터 또는 특성에 대한 임의의 검출가능한 긍정적인 효과(예를 들면, 본원에서 언급된 포도막염 파라미터의 개선을 포함함)를 나타낼 수 있는 화합물의 양을 의미한다. 이러한 효과가 절대적으로 유리해야 할 필요는 없다.

본원에서 사용된 용어 "치료 불응성" 및 "치료 내성" 포도막염은 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하되 IL-1β 항체 또는 결합 단편을 포함하지 않는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 선행 치료를 제공받은 대상체에서 만성 또는 재발성 포도막염(예를 들면, 급성 포도막염 악화, 포도막염 흐림)을 의미한다. 치료 불응성 및 치료 내성 포도막염은 선행 치료에 대한 유해 반응 또는 과민성을 나타낸 경험이 있을 수 있는 대상체; 또는 대안적으로 또는 추가로, 선행 치료에 실패하였거나 부분적으로 반응한 경험(예를 들면, 부적절한 또는 부분적인 치료 효과, 부적절한 반응, 불충분한 반응, 불완전한 반응, 부분적인 반응을 나타낸 경험)이 있을 수 있는 대상체에서의 포도막염을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "투약의 감소", "투약에서의 감소", "투약 감소" 및 "감소된 투약"은 (예를 들면, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전) 동일한 약학 조성물에 대한 선행 예방 또는 치료 섭생에 비해 약학 조성물에 대한 예방 또는 치료 섭생의 변화를 의미한다. 바람직하게는, 예방 또는 치료 섭생의 이러한 변화는 일정한 기간 동안 상기 예방 또는 치료 섭생의 몇몇 양태에서의 감소, 예를 들면, 투여량(예를 들면, 양)의 감소(예를 들면, 경감), 투약 빈도의 감소(예를 들면, 경감), 또는 누적 노출(예를 들면, 곡선 하의 면적, AUC)의 감소(예를 들면, 경감)이다. 약학 조성물에 대한 예방 또는 치료 섭생의 이러한 변화는 동일한 대상체에서 선행 예방 또는 치료 섭생에 비해 예방 또는 치료 섭생의 변화; 또는 대안적으로 또는 추가로, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편과 동시에 사용되지 않는 경우에 비해 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편과 동시에 사용되는 경우 약학 조성물에 대한 예방 또는 치료 섭생의 변화일 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "급성 포도막염 악화"는 대상체에서 포도막염의 하나 이상의 임상 증상 또는 징후(예를 들면, 파라미터)의 발생을 의미한다. 대안적으로 또는 추가로, 대상체는 하나 이상의 포도막염 증상의 임상적으로 유의한 개선(예를 들면, 증상의 감소 및/또는 임상 조절, 증상 부재 간격)이 있는 개재 기간을 가지면서 포도막염의 하나 이상의 임상 증상 또는 징후(예를 들면, 파라미터)를 이미 경험한 대상체(예를 들면, 위험군 대상체)일 수 있다. 예를 들면, 급성 포도막염 악화는 첫 번째 포도막염 악화일 수 있거나 포도막염 악화의 재발일 수 있다. 급성 포도막염 악화 동안 하나 이상의 포도막염 증상이 이전에 경험한 하나 이상의 포도막염 증상과 유사할 수 있거나, 동일할 수 있거나 상이할 수 있다(예를 들면, 상이한 조합). 포도막염 흐림은 급성 포도막염 악화로서 간주될 수 있다.

본원에서 언급된 질환 상태 또는 병태의 증상, 양태, 파라미터 또는 특성의 존재 및/또는 변화를 검출하는 다양한 방법 및 기법이 공지되어 있고 당업자에 의해 채택된다. 예를 들면, 본 개시내용의 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법에서 변화에 대해 조사될 수 있는 포도막염 파라미터(예를 들면, 증상)의 대표적인 예로는 임의의 또는 모든 하기 파라미터들이 있을 수 있다: 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수), 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 혈관 누출(예를 들면, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 이중 플루오레세인 혈관조영술 및 인도시아닌 그린 혈관조영술 점수), 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막 기능장애 및 상승된 안압.

변화(예를 들면, 개선)는 당업계에서 공지되어 있는 의학적으로 채택된 표준 관행, 예를 들면, 시력(예를 들면, ETDRS에 의한 BCVA), 안압 및 유리체 혼탁의 측정; 망막 소견(침윤물, 염증 초형성, 출혈/폐쇄성 혈관염, 및 망막 정맥 분지 폐쇄)의 평가; 생체현미경검사(예를 들면, 슬릿-램프 생체현미경검사); 검안경검사(예를 들면, 후안부의 간접적 검안경검사 후 안저 촬영); 시력 및 다른 안구 구성요소의 변화(예를 들면, 염증)를 추적하는 레이저 흐림 세포 측광의 판독; 및 플루오레세인 혈관조영술(예를 들면, 안저 플루오레세인 혈관조영술 검사, 이중 플루오레세인 혈관조영술(FA) 및 인도시아닌 그린 혈관조영술(ICGA))을 포함하는 정밀 안과학적 평가에 의해 검사될 수 있다.

대상체의 포도막염의 임상 상태는 포도막염의 평가를 하기 5개의 구성요소로 분리하는 포도막염 점수화 시스템(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)을 이용함으로써 평가될 수 있다: 전안부, 유리체, 안저, 시력 및 플루오레세인 혈관조영술. 이 시스템은 안구내 염증의 추적에 있어서 처음 3개의 구성요소의 중요성을 강조한다. 구성요소는 누적적으로 점수화되지 않고, 예를 들면, 다음과 같이 별도로 점수화된다:

전안부는 슬릿-램프 생체현미경검사에 의해 등급화된다. 세포 및 흐림 둘다가 0부터 중증까지 등급화된다.

염증으로부터 발생된 유리체 혼탁이 양안 간접적 검안경에 의해 검사된다. 점수는 후극의 가시성(visibility)에 따라 0부터 중증까지 기록된다.

안저는 각각의 눈을 사분면(예를 들면, 4개의 전-수평 단면 및 4개의 후-수평 단면)으로 나누고 망막 혈관염, 맥락망막 병소 및 유두의 신생혈관형성에 대해 각각의 단면을 검사하는 도표에 따라 등급화된다.

시력 점수는 스넬렌(Snellen) 또는 ETDRS 시험 차트를 이용함으로써 표준 분율의 십진법 버전으로 표현된다.

플루오레세인 혈관조영도는 망막 염증의 정도를 측정하는 데에 기여한다. 안저의 등급화를 위해 이전에 이용된 바와 같이 눈을 사분면(예를 들면, 4개의 전-수평 단면 및 후-수평 단면)으로 도식적으로 나누고 벤 에즈라 시스템이 각각의 단면의 염증을 11개의 기준에 따라 평가한다.

몇몇 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 포도막염 점수화 시스템에 의해 측정될 때 벤 에즈라 점수의 개선을 제공할 수 있다. 예를 들면, 상기 방법은 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상 또는 10 이상의 점수 개선(예를 들면, 감소)을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 0 초과의 임의의 점수 내지 0의 점수의 벤 에즈라 점수 개선을 제공할 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 시력(예를 들면, 가장 잘 교정된 시력, BCVA)은 객관적인 측정치를 제공하는 표준 베일리-로비(Bailey-Lovie) logMAR, 스넬렌 또는 ETDRS 시험 차트를 이용함으로써 측정될(예를 들면, 등급화될) 수 있다. 예를 들면, 본 개시내용의 방법은 스넬렌 차트 시험에 의해 측정될 때 및/또는 하기 표에서 기재된 바와 같이 1줄 이상, 2줄 이상, 3줄 이상, 4줄 이상 또는 5줄 이상의 시력 개선을 제공할 수 있다.

상이한 표기법에서의 시력
피트	미터	십진법	재거(Jaeger)
20/20	6/6	1.0	J1+
20/25	6/7.5	0.8	J1
20/30	6/9	0.7	J2
20/40	6/12	0.5	J3
20/50	6/15	0.4	J5
20/70	6/21	N/A	J7
20/80	6/24	N/A	N/A
20/100	6/30	0.2	J10
20/150	6/45	N/A	N/A
20/200	6/60	0.1	J16
20/400	6/120	0.05	N/A

대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 ETDRS 차트(Ferris et al., 1982, Am. J. Ophthalmol., 94:91-6)에 의해 측정될 때 1줄 이상(예를 들면, 5 문자), 2줄 이상(예를 들면, 10 문자), 3줄 이상(예를 들면, 15 문자), 4줄 이상(예를 들면, 20 문자) 또는 5줄 이상(예를 들면, 25 문자)의 시력 개선을 제공할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 1 미터에서 시험되었을 때 가장 큰 차트 문자가 판독될 수 없을 정도로 대상체의 시력이 좋지 않은 경우, 손가락을 세거나, 손 이동을 탐지하거나 광 지각을 갖는 대상체의 능력이 평가될 수 있다.

SUN 연구실무진 등급화 체계(Jabs et al., Am J Ophthalmol. 140:509-16, 2005)를 이용하여 전방 세포 소견을 평가할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 전안부를 생체현미경검사(예를 들면, 슬릿-램프 생체현미경검사)로 평가할 수 있고, 전방 세포 점수를 측정할(예를 들면, 점수화할) 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 전방 세포를 이하에 나타낸 바와 같이 SUN 연구실무진 등급화 체계를 이용하여 점수화한다.

예를 들면, 본 개시내용의 방법은 1 등급 이상(예를 들면, 3+에서 2+로, 1+에서 0.5+로), 2 등급 이상, 3 등급 이상 또는 4 등급 이상의 전방 세포 점수 개선을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 등급 1+ 내지 4+ 중 임의의 등급에서 등급 0.5+ 이상으로의 전방 세포 점수 개선을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 등급 0.5+ 내지 4+ 중 임의의 등급에서 등급 0으로의 전방 세포 점수 개선을 제공할 수 있다.

전방 세포에 대한 SUN 연구실무진 등급화 체계
등급	필드 내의 세포²
0	<1
0.5+	1 내지 5
1+	6 내지 15
2+	16 내지 25
3+	26 내지 50
4+	>50
²필드 크기는 1 mm x 1 mm 슬릿 광선이다.

몇몇 실시양태에서, 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수)를 예를 들면, 문헌(Ladas et al., Survey of Ophthalmology, 50:27-47, 2005)에 기재된 바와 같이 레이저 흐림 세포 측광을 이용하여 측정할 수 있다. 예를 들면, 본 개시내용의 방법은 초기(예를 들면, 치료 전) 수준에 비해 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상 또는 80% 이상의 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 개선(예를 들면, 감소)을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 10 이상, 20 이상, 30 이상, 40 이상, 50 이상, 60 이상, 70 이상, 80 이상, 90 이상 또는 100 이상의 점수 감소 이상의 레이저 흐림 세포 수(예를 들면, 흐림 점수) 개선(예를 들면, 감소)을 제공할 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 표준 방법, 예를 들면, 검안경검사(예를 들면, 양안 간접적 검안경을 이용한 검안경검사), 예를 들면, 누센블랫(Nussenblatt) 분류(Nussenblatt et al., 1985, Ophthalmol. 92:467-71)에 따른 등급화, 및/또는 유리체 흐림의 등급화를 위한 국립 안과 연구소 시스템의 SUN 연구실무진의 적용을 이용하여 유리체 혼탁을 측정할 수 있다. 예를 들면, 본 개시내용의 방법은 1 등급 이상(예를 들면, 3+에서 2+로, 1+에서 0.5+로), 2 등급 이상, 3 등급 이상 또는 4 등급 이상의 유리체 혼탁 개선을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 등급 1+ 내지 4+ 중 임의의 등급에서 등급 0.5+ 이상으로의 유리체 혼탁 개선을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 등급 0.5+ 내지 4+ 중 임의의 등급에서 등급 0으로의 유리체 혼탁 개선을 제공할 수 있다.

임의적으로 평가될 수 있는 추가 점수화 측정치, 예를 들면, 이중 플루오레세인 혈관조영술(FA) 및 인도시아닌 그린 혈관조영술(ICGA)(FA의 경우 시신경유두 과형광, 황반 부종, 망막 혈관 염색 및/또는 누출, 모세혈관 누출, 망막 모세혈관 비-관류, 시신경유두의 신생혈관형성, 다른 부위의 신생혈관형성, 극소 누출, 및 망막 염색 및/또는 망막하 풀링을 포함할 수 있고, ICGA의 경우 초기 간질 혈관 과형광, 맥락막 혈관염, 어두운 점(dark dot) 또는 영역(위축증을 제외함), 및/또는 시신경유두 과형광을 포함할 수 있음)은 포도막염 연구실무진의 혈관조영술 점수화에 의해 정의된다(Tugal-Tutkun et al., Int Ophthalmol, 2010 30(5):529-552; Epub ahead of print 2008 Sept 16).

몇몇 실시양태에서, 안압을 의학적으로 채택된 표준 관행, 예를 들면, 골드만 안압측정(Goldmann Tonometry)을 이용하여 평가할 수 있다. 혈관 및/또는 신경 합병증도 추적될 수 있다. 예를 들면, 기관 침습, 예컨대, 동맥류 또는 심정맥 혈전증을 갖는 대상체의 경우 임상 소견이 추적될 수 있고 조영 증강 나선형 컴퓨터 단층촬영(CT) 영상화가 수행될 있다. 실질 신경 침습을 갖는 대상체의 경우, 완전한 신경 검사, 조영 증강 두개 자기 공명 영상화(MRI) 및/또는 뇌척수액(CSF) 분석이 수행될 수 있다.

대안적으로 또는 추가로, 하기 사항들이 평가될 수 있다:

칼라 안저 촬영. 칼라 안저 촬영은 전안부 병리의 존재를 기록하는 데에 유용하다. 칼라 촬영은 종종 미묘한 임상 소견을 강조할 수 있고 기준을 확립하고 시간의 경과에 따른 질환 진행을 검출하는 데에 특히 유용하다.

플루오레세인 혈관조영술. 플루오레세인 혈관조영술(FA)은 변화, 예컨대, CME 및 유두염을 유발할 수 있는 혈관-망막 장벽의 파괴를 평가하는 데에 유용하다. FA는 다수의 원인의 전포도막염 및 맥락막염의 결과일 수 있는 혈관염으로부터의 혈관 폐쇄뿐만 아니라 합병증, 예컨대, 망막 또는 맥락막 신생혈관형성(CNV)으로부터의 혈관 폐쇄를 검출하는 데에도 유용하다.

인도시아닌 그린 혈관조영술. 인도시아닌 그린(ICG) 혈관조영술은 FA에 대한 보조수단으로서 주로 이용되어 맥락막 혈관구조를 평가하는 데에 기여한다. 가장 유용한 정보는 ICG 연구의 후기에서 수득된다. 1997년, 허보트(Herbort)와 그의 동료들은 ICG를 이용하는 전포도막염의 투여 및 해석을 위한 표준 프로토콜을 개발하였다. ICG 혈관조영술을 이용하였을 때 여러 병태, 예컨대, 버드샷 망막맥락막염이 훨씬 더 뚜렷하였다.

자가형광. 자가형광(AF) 영상화는 망막 색소 상피(RPE)에서 리포푸신(lipofuscin)의 존재를 강조한다. 많은 전포도막염 병태, 특히 흰반점 증후군(white spot syndrome)이 외부 망막-RPE-맥락막모세혈관 복합체에 영향을 미치기 때문에, AF는 특히 유용한 비침습성 진단 수단일 수 있다. 예를 들면, MEWDS의 다수의 점 및 반점이 안저 AF를 이용한 경우 인식되기에 훨씬 더 용이하다.

B-스캔 초음파촬영. B-스캔 초음파촬영은 불투명한 매질과 관련된 안구내 장애의 평가에 있어서 가장 유용하다. 불투명한 매질은 안구내 염증 및 이의 합병증에 의해 야기될 수 있을 뿐만 아니라 각막 불투명화, 전방출혈 또는 전방축농, 축동을 갖는 홍채후유착(posterior synechiae), 백내장, 유리체 출혈 및 망막 탈착을 포함하나 이들로 한정되지 않는 다른 병태에 의해서도 야기될 수 있다. 또한, 초음파는 보크트-고야나기-하라다(VKH) 증후군, 교감성 안염, 및 공막염으로부터의 조합된 공막 및 맥락막 비후화를 포함하는 만성 포도막염에서 발생하는 맥락막의 염증 침윤을 평가하는 데에 이용될 수 있다. 이들 상태에서, 초음파는 요법을 시작하거나 수술을 계획하기 전에 환자를 평가하는 데에 유용하다. 투명한 매질의 존재 하에서, 고빈도 초음파 또는 초음파 생체현미경검사(UBM)는 특히, 중간포도막염을 갖는 환자에서 종종 수반되고 임상적으로 가시화하기 어려울 수 있는 섬모체 및 평면부의 영역을 검사하는 데에도 이용될 수 있다. UBM은 외상 후 발생하는 만성 포도막염의 경우 잠복 외래 물질을 확인할 수도 있다.

광간섭단층촬영. 광간섭단층촬영(OCT)은 현재 포도막염의 연구에서 이용되는 가장 중요한 영상화 기법들 중 하나이다. 이 기법은 비접촉 및 비침습 방식으로 시신경상부(optic nerve head), 신경섬유층, 망막, 맥락막 및 유리체망막 계면의 영상화를 가능하게 한다. 이 기법은 OCT 시험에서 심각한 부작용이 없기 때문에 필요한 만큼 자주 반복될 수 있다. OCT는 황반 비후화를 정량하는 데에 이용될 수 있으므로 CME를 진단하고 치료의 효능을 모니터링하는 뛰어난 방법이다. OCT는 유리체망막 계면 장애, 예컨대, 망막전막, 황반 원공 및 유리체황반 당김을 검출할 수 있으므로 관리에서 도움이 될 수 있다. OCT는 다양한 종류의 망막 탈착, 및 관련된 삼출물의 역할, 위치 및 밀도의 연구에서도 귀중하다. OCT의 가장 중요한 한계는 OCT가 유용한 영상을 위해 상대적으로 투명한 매질에 의존한다는 점이다. OCT 유용성을 한정하는 두 번째 인자는 눈 움직임의 고정 및 조절에 있어서 환자의 협력이 필요하다는 점이다. 이들 한계점들은 광공포증(photophobic) 대상체의 경우 어려운 것으로 입증될 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 포도막염 점수화 시스템(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)에 의해 측정될 때 벤 에즈라 점수의 개선을 제공할 수 있다. 예를 들면, 상기 방법은 1 이상, 2 이상, 3 이상, 4 이상, 5 이상, 6 이상, 7 이상, 8 이상, 9 이상 또는 10 이상의 점수 개선(예를 들면, 감소)을 제공할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본 개시내용의 방법은 0 초과의 임의의 점수에서 0의 점수로의 벤 에즈라 점수 개선을 제공할 수 있다.

대안적으로 또는 추가로, 다른 베체트병 파라미터의 평가도 수행될 수 있다.

대안적으로 또는 추가로, 평가는 비-안구 파라미터, 예를 들면, 하기 비-안구 파라미터를 포함하는 생물학적 및 임상적 활성의 측정을 포함할 수 있다:

염증 마커(CRP 및 ESR 둘다)

아디포넥틴, 레시스틴, 렙틴, 비스파틴, PAI-1, TNFα, IFNγ, IL-1, IL-IRa, IL-6, IL-8, RANTES, IL-lα 및 MCP-1을 포함하나 이들로 한정되지 않는 사이토카인(예를 들면, 사이토카인, 예컨대, 염증 사이토카인에 대한 마커)의 분석.

추가로, 본 개시내용의 방법은 C-반응성 단백질(CRP) 수준의 개선(예를 들면, 감소)을 제공할 수 있다. CRP 수준의 감소는 표준 분석(예를 들면, 고감도 CRP, 초감도 CRP)을 이용함으로써 용이하게 측정된다. 본원에 개시된 방법에 의해 제공된 바와 같이, C-반응성 단백질 수준의 감소는 예를 들면, 치료 전 수준으로부터 0.2 ㎎/ℓ 이상, 0.4 ㎎/ℓ 이상, 0.6 ㎎/ℓ 이상, 0.8 ㎎/ℓ 이상, 1.0 ㎎/ℓ 이상, 1.4 ㎎/ℓ 이상, 1.8 ㎎/ℓ 이상, 2.2 ㎎/ℓ 이상, 2.6 ㎎/ℓ 이상 또는 3.0 ㎎/ℓ 이상의 감소일 수 있다. 대안적으로, C-반응성 단백질 수준의 감소는 예를 들면, 치료 전 수준으로부터 20% 초과, 30% 초과, 40% 초과, 50% 초과, 60% 초과, 70% 초과, 80% 초과, 90% 초과 또는 95% 초과의 감소일 수 있다.

추가로, 본 개시내용의 방법은 예를 들면, 삶의 질(QQL) 평가(예를 들면, SF-36V2 건강 조사, 안과학적 QQL 설문지)에 의해 측정될 때 삶의 질의 하나 이상의 양태의 개선을 제공할 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 본 개시내용에 따라 질환 또는 병태를 치료하거나 예방하는 방법은 항체 또는 단편의 투여에 대한 예정된 또는 "관용적인" 일정을 이용할 수 있다. 본원에서 사용된 관용적인 일정은 투여량 투여 사이의 예정된 지정 기간을 의미한다. 관용적인 일정은, 상기 일정이 예정되어 있는 한, 시간 길이에서 동일하거나 상이한 기간을 포함할 수 있다. 적절한 일정이 일정한 날짜에서의 투여를 수반한다는 것이 미리 결정되어 있는 한, 임의의 특정 조합이 관용적인 일정에 포함될 것이다.

실시예

하기 실시예는 본 발명의 실시를 더 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 어떠한 방식으로든 한정하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 여기서 인용된 모든 특허들 및 과학문헌들의 개시내용은 전체적으로 본원에 명백히 참고로 도입된다.

실시예 1

IL-1β 항체를 사용한 불응성 포도막염의 치료를 평가하기 위한 임상 연구

포도막염(예를 들면, 급성 포도막염 악화)으로 진단받은 인간 대상체에서 IL-1β 항체를 사용한 치료를 평가하기 위한 임상 시험을 착수하였다. 보다 구체적으로, 하나 이상의 표준 관리 약물치료, 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제(예를 들면, 아자티오프린, 콜히친, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트) 및/또는 스테로이드(예를 들면, 프레드니솔론)에 대한 불응성(예를 들면, 내성)을 나타내는 포도막염을 갖는 대상체에서 고친화성 IL-1β 항체의 안전성, PK 및 임상 활성을 조사하기 위해 개방 표지 임상 연구를 수행하였다. 이 임상 연구에서 다수의 포도막염 파라미터를 측정하였다.

임상 시험에 등록된 대상체들은 적어도 급성 전포도막염 또는 범포도막염, 또는 망막 혈관염을 갖는 포도막염 악화를 갖고 국제 연구회 분류 기준을 충족시키는 베체트병으로도 진단받은 대상체를 포함하였다. 상기 시험에 들어가기 위한 추가 기준은 하기 기준들도 포함하였다:

아자티오프린, 콜히친 및/또는 사이클로스포린 치료에 대한 내성.

0일째 날 전 14일 이상 동안 안정한 투여량의 아자티오프린(2 ㎎/㎏) 및/또는 안정한 사이클로스포린 치료 섭생을 제공받음.

0일째 날 및 연구 지속기간 동안 임의의 아자티오프린, 콜히친 및/또는 사이클로스포린 치료를 중단하는 것에 대한 동의.

대상체가 하기 기준들 중 임의의 기준을 충족시키는 경우, 상기 대상체는 본 연구로부터 배제되었다:

중증 포도막염, 및 시력에 대한 스넬렌/ETDRS 표준에 따른 0.1 미만의 잠재적인 시력.

대상체는 백내장을 갖고 그의 또는 그녀의 포도막의 전안부의 평가가 불충분하거나 불가능하였음.

하기 약물치료의 이용:

- 0일째 날 28일 전부터 연구의 종결 시점까지 (100 ㎎/일 이하의 아스피린 이외의) NSAID 요법.

- 0일째 날 28일 전부터 연구의 종결 시점까지 10 ㎎/일 초과의 스테로이드(이때, 20 ㎎/일의 프레드니솔론을 제공받는 1명의 대상체의 참가를 허용하도록 후속 프로토콜을 수정함).

- 0일째 날 28일 전부터 연구의 종결 시점까지 인터페론.

일차 결과 측정치는 시력 및 다른 안구 구성요소의 개선도(예를 들면, 벤 에즈라 포도막염 점수화 시스템 및 레이저 흐림 측정기 판독을 이용함으로써 측정됨)를 포함하는, 0일째 날 및 28일째 날 대상체의 포도막염의 중증도이었고, 이때 98일째 날까지 주기적인 추적조사 평가가 수행되었다.

이 개방 표지 연구에 등록된 7명의 환자들의 선행 치료 프로파일은 도 1에 나타나 있다. 모든 대상체들이 아자티오프린(AZA) 및 스테로이드를 사용한 선행 치료를 제공받았고, 추가로 몇몇 대상체들은 콜히친 및/또는 사이클로스포린(CysA)을 사용한 선행 치료를 제공받았다. 프레드니솔론 또는 메틸프레드니솔론을 사용한 스테로이드 치료를 위한 투여량은 도면에서 프레드니솔론(도 1에서 PRD) 당량(예를 들면, 8 ㎎ 메틸프레드니솔론 = 10 ㎎ 프레드니솔론; 16 ㎎ 메틸프레드니솔론 = 20 ㎎ 프레드니솔론)으로 전환된다. 볼루스 투여가 구급 약물치료로서 후기 시점(28일째 날 후)에서 요구되지 않은 한, 대상체는 연구 기간 동안 표시된 프레드니솔론 투여량으로 스테로이드 치료를 계속 제공받았다.

0.3 ㎎/㎏의 단회분 투여량의 IL-1β 항체 AB7을 등록된 대상체에게 정맥내로 투여하였다. 대상체는 주기적인 추적조사 평가를 받았다. 활력 징후의 치료 전 및 치료 후 연속 측정, 임상 실험 평가 및 불리한 임상 사건의 판독을 통해 안전성을 평가하였다. PK 데이터를 수집하여 분석하였다. 문헌(Sfikakis et al., Lancet 28:358, 2001))에 기재된 방법과 유사한 방법을 이용하여 포도막염의 임상 상태의 변화를 평가함으로써 장기간 및 평균 질환 조절을 판단하였다. 상기 연구는 아자티오프린, 사이클로스포린 및/또는 콜히친에 이미 반응하지 않은(예를 들면, 치료 불응성) 포도막염 증상을 갖고 연구 과정 동안 이들 치료들을 중단한 대상체를 포함하였기 때문에, 이 시험의 과정에서 대상체 눈 질환의 신속한 개선은 연구 약물에 기인할 것이다.

일차 결과 측정치는 0일째 날부터 28일째 날까지의 포도막염의 진행이었고, 이때 주기적인 추적조사 평가가 98일째 날까지 수행되었다. 당업계에서 공지되어 있는 의학적으로 채택된 표준 관행, 예를 들면, 시력, 안압 및 유리체 혼탁의 측정; 망막 소견(침윤물, 염증 초형성, 출혈/폐쇄성 혈관염, 및 망막 정맥 분지 폐쇄)의 평가; 슬릿-램프 생체현미경검사; 및 후안부의 간접적 검안경검사 후 안저 촬영을 포함하는 정밀 안과학적 평가를 이용하여 병원 방문마다(예를 들면, 0일째 날, 1일째 날, 4일째 날, 7일째 날, 14일째 날, 21일째 날, 28일째 날, 56일째 날 및 98일째 날) 포도막염의 임상 평가를 수행하였다. 시력 및 다른 안구 구성요소의 변화를 추적하기 위해 레이저 흐림 세포 측광의 판독치를 기록하였다. 0일째 날(투약 전) 및 98일째 날에서만 안저 플루오레세인 혈관조영술 검사도 수행하였다.

포도막염 점수화 시스템(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)을 이용하여 대상체의 포도막염의 임상 상태를 측정하였다. 벤 에즈라 포도막염 점수화 시스템은 포도막염의 평가를 다음과 같이 5개의 구성요소로 분리한다: 전안부, 유리체, 안저, 시력 및 플루오레세인 혈관조영술. 상기 시스템은 안구내 염증을 추적하는 데 있어서 처음 3개의 구성요소의 중요성을 강조한다. 구성요소는 누적적으로 점수화되지 않고, 예를 들면, 다음과 같이 별도로 점수화된다:

염증으로부터 발생된 유리체 혼탁이 양안 간접적 검안경에 의해 검사된다. 점수는 후극의 가시성에 따라 0부터 중증까지 기록된다.

안저는 각각의 눈을 사분면으로 나누고 망막 혈관염, 맥락망막 병소 및 신생혈관형성에 대해 각각의 단면을 검사하는 도표에 따라 등급화된다.

시력 점수는 스넬렌 또는 ETDRS 시험 차트를 이용함으로써 표준 분율의 십진법 버전으로 표현된다.

플루오레세인 혈관조영도는 망막 염증의 정도를 측정하는 데에 기여한다. 안저의 등급화를 위해 이전에 이용된 바와 같이 눈을 4개의 단면으로 도식적으로 나누고 벤 에즈라 시스템이 각각의 단면의 염증을 11개의 기준에 따라 평가한다.

추가로, SUN 연구실무진 등급화 체계(Jabs et al., Am J Ophthalmol. 140:509-16, 2005)를 이용하여 전방 세포 소견을 다음과 같이 평가하였다.

추가 점수화 측정, 예를 들면, 플루오레세인 혈관조영술(FA) 및 인도시아닌 그린 혈관조영술(ICGA)에 의한 추가 점수화 측정치는 포도막염 연구실무진의 혈관조영술 점수화에 의해 정의된다(Tugal-Tutkun et al., Int Ophthalmol, 2010 30(5):529-552; Epub ahead of print 2008 Sept 16). 적절한 대상체에서, 상기 임상 프로토콜은 하기 혈관 및/또는 신경 합병증의 평가도 제공하였다. 기관 침습, 예컨대, 동맥류 또는 심정맥 혈전증을 갖는 대상체의 경우, 상기 프로토콜은 각각의 방문 동안 추적될 임상 소견을 제공하였고, 조영 증강 나선형 컴퓨터 단층촬영(CT) 영상화를 0일째 날(기준) 및 98일째 날에 수행하였다. 실질 신경 침습을 갖는 대상체의 경우, 상기 프로토콜은 각각의 방문 동안 수행될 완전한 신경 검사, 및 0일째 날(기준), 28일째 날 및 98일째 날에 수행될 조영 증강 두개 자기 공명 영상화(MRI) 및/또는 뇌척수액(CSF) 분석을 제공하였다. 추가 평가는 비-안구 파라미터, 예를 들면, 하기 비-안구 파라미터를 포함하는 생물학적 및 임상적 활성의 측정을 포함하였다:

염증 마커(CRP 및 ESR 둘다)

아디포넥틴, 레시스틴, 렙틴, 비스파틴, PAI-1, TNFα, IFNγ, IL-1, IL-IRa, IL-6, IL-8, RANTES, IL-lα 및 MCP-1을 포함하나 이들로 한정되지 않는 사이토카인의 분석.

다른 베체트병 파라미터(예를 들면, 비-안구 파라미터)의 추가 평가도 수행될 수 있다.

실시예 2

IL-1β 항체를 사용한 불응성 포도막염의 치료

실시예 1에 기재된 연구로부터 수득된 데이터는 모든 대상체들의 치료 불응성 포도막염에서 다수의 파라미터의 개선과 함께 IL-1β 항체의 투여로부터 발생된 임상 이익을 입증하였다. 도 2 내지 8은 98일째 날 시점까지 파라미터, 즉 시력, 전방 세포 점수, 흐림 점수, 유리체 혼탁 및 벤 에즈라 점수에 대한 개별 대상체 데이터를 보여준다. 도 9 및 10은 IL-1β 항체를 사용한 치료 후 전방축농의 해소 및 유리체 혼탁의 해소의 구체적인 예를 보여주는 영상을 포함한다. 전체적으로, 이들 대상체들에서, 안구내 염증의 소견이 관주 후 1일째 날부터 시작되어 모든 환자들에서 해소되었고, 망막 소견 및 유리체 혼탁의 해소가 7일째 날 내지 21일째 날 이내에 달성되었다.

실시예 3

IL-1β 항체를 사용한 불응성 포도막염의 치료

실시예 1 및 2에 기재된 연구에 이미 등록되어 치료받은 대상체에서 추적조사 연구를 착수하였다. 이전 연구는 아자티오프린, 사이클로스포린 및/또는 콜히친을 포함하는 하나 이상의 표준 관리 약물치료에 이미 반응하지 않은(예를 들면, 치료 불응성, 치료 내성) 포도막염 증상을 갖는 대상체를 포함하였고, 이들 약물치료는 상기 연구의 과정 동안 배제되었다. 본 실시예에 기재된 연구에서, 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제(예를 들면, 아자티오프린, 사이클로스포린, 콜히친) 및/또는 스테로이드(예를 들면, 프레드니손)를 포함하는 하나 이상의 표준 관리 약물치료가 항-IL-1β 항체 치료와 동시에 허용된다.

이들 대상체들은 (예를 들면, 급성 포도막염 악화의 재발 예방에 대한 효과를 평가하기 위해) 연장된 기간 동안 IL-1β 항체의 추가 투여를 제공받을 수 있다. 보다 구체적으로, IL-1β 항체를 0일째 날, 14일째 날 및 28일째 날에 대상체에게 투여한 후, 최대 2년 동안 4주마다 투약한다. 먼저, 모든 대상체들은 0일째 날에 0.3 ㎎/㎏ 투여량의 AB7을 정맥내로 제공받고 14일째 날, 28일째 날, 56일째 날 및 84일째 날에 0.3 ㎎/㎏ 투여량을 피하로 제공받는다. 이들 처음 5회 투약 후, 안정한 대상체들은 다음 4회 투약 동안 4주마다 낮아진 투여량(예를 들면, 0.2 ㎎/㎏까지 낮아진 투여량)을 제공받을 것이다. 이들 4회 투약(예를 들면, 0.2 ㎎/㎏의 투약) 후에 안정한 상태를 유지하는 대상체들은 항체의 추가 치료 동안 4주마다 다시 낮아진 투여량(예를 들면, 0.1 ㎎/㎏까지 낮아진 투여량)을 제공받을 것이다.

대상체가 상기 낮아진 투여량 수준(예를 들면, 0.1 ㎎/㎏ 또는 0.2 ㎎/㎏)으로 투약을 제공받은 후 포도막염의 급성 악화(예를 들면, 흐림) 또는 치료에 대한 부적절한 반응을 경험하는 경우, 스테로이드, 예컨대, 프레드니솔론을 볼루스 플러스 탬퍼(bolus plus taper)로서 (경구 또는 정맥내) 투여할 수 있다. 추가로, 대상체의 다음 예정된 IL-1β 항체 투여량을 이전 투여량 수준으로 증가시킬 수 있다. 이러한 투여량 수준의 증가 후, 대상체가 보다 높은 투여량 수준의 4회 투약을 통해 안정한 상태를 유지하는 경우, 투여량 수준을 다시 감소시킬 수 있다.

대상체는 최대 111주 동안 주기적인 추적조사 평가를 받는다. 활력 징후의 치료 전 및 치료 후 연속 측정, 임상 실험 평가 및 불리한 임상 사건의 판독을 통해 안전성을 평가한다. PK 데이터를 수집하여 분석한다. 포도막염 및 임의의 혈관/신경 합병증의 임상 진행을 전술된 바와 같이 평가한다. 베체트병으로 진단받은 대상체에서 포도막염의 임상 상태의 변화를 문헌(Sfikakis et al., Lancet 28:358, 2001))에 기재된 방법과 유사한 방법을 이용하여 평가함으로써 장기간 및 평균 질환 조절을 판단한다. 일차 결과 측정치는 2년의 이 연장 연구 동안 포도막염의 진행 또는 안정성(예를 들면, 급성 포도막염 악화의 재발 예방)이다. (병원 방문마다 평가된) 포도막염의 임상 평가는 시력 및 유리체 혼탁의 측정; 안저 소견(침윤물, 염증 초형성, 출혈/폐쇄성 혈관염, 및 망막 정맥 분지 폐쇄)의 평가; 전안부 슬릿-램프 생체현미경검사; 및 후안부의 간접적 검안경검사 후 안저 촬영을 포함하는 정밀 안과학적 평가를 포함한다. 시력 및 다른 안구 구성요소의 변화를 추적하기 위해 레이저 흐림 세포 측광의 판독치를 기록한다. 0일째 날, 112일째 날, 224일째 날, 336일째 날, 448일째 날, 560일째 날, 672일째 날 및 756일째 날, 안과학적 평가는 망막 염증의 정도를 평가하기 위한 안저 플루오레세인 혈관조영술 검사를 포함한다. 대상체의 포도막염의 임상 상태를 전술된 방법을 이용하여 측정하고 점수화한다.

적절한 대상체에서, 혈관 및/또는 신경 합병증을 추적조사한다. 기관 침습, 예컨대, 동맥류 또는 심정맥 혈전증을 갖는 대상체의 경우, 각각의 방문 동안 임상 소견을 추적조사하고, 조영 증강 나선형 CT 영상화를 임상적으로 표시된 바와 같이 수행한다. 실질 신경 침습을 갖는 대상체의 경우, 각각의 방문 동안 완전한 신경 검사를 수행하고, 조영 증강 두개 MRI 및/또는 뇌척수액(CSF) 분석을 임상적으로 표시된 바와 같이 수행한다. 염증 마커(CRP, ESR 및 사이토카인)를 항체의 생물학적 활성의 추가 측정치로서 수집한다.

실시예 4

IL-1β 항체를 사용한 급성 포도막염 악화의 억제

추가 임상 시험이 수행될 수 있고, 예를 들면, 동일한 또는 대안적인 투여량 및 투약 섭생, 보다 긴 치료 및/또는 관찰 기간, 군 당 보다 많은 수의 대상체, 현재 급성 포도막염 발병(예를 들면, 급성 포도막염 악화)을 앓고 있지 않지만 (예를 들면, 6개월 또는 12개월 이내에) 1회 이상의 포도막염 발병의 과거 병력을 갖는 대상체(예를 들면, 위험군 대상체), 표준 관리 또는 점감 투여량의 하나 이상의 추가 활성제(예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제, 아자티오프린, 스테로이드)를 사용한 치료를 계속 제공받는 대상체, 및 대안적 형태의 포도막염(예를 들면, 비-감염성 포도막염, 감염성 포도막염) 및/또는 하나 이상의 다른 질환 또는 병태(예를 들면, 염증 질환)로 진단받은 대상체를 포함할 수 있다.

예를 들면, 임상 시험은 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림, 중증 악화)를 억제하는 데 있어서 IL-1β 항체를 사용한 치료의 치료 효과를 평가하기 위해 재발성 포도막염(예를 들면, 불응성 포도막염, 내성 포도막염)의 병력으로 진단받아 추가 포도막염 악화의 위험이 있는 환자(예를 들면, 베체트병 환자)에서 수행된다. 재발성 포도막염의 병력(예를 들면, 6개월 이내에 포도막염 흐림/악화, 12개월 이내에 포도막염 흐림/악화, 또는 18개월 이내에 포도막염 흐림/악화)을 갖지만, (예를 들면, 이전 1개월 이내에 또는 이전 3개월 이내에) 현재 급성 포도막염 악화를 경험하고 있지 않고, 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제(예를 들면, 아자티오프린, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트, 메토트렉세이트) 및/또는 스테로이드(예를 들면, 프레드니손 또는 프레드니솔론)를 포함하는 하나 이상의 표준 관리 약물치료에 의해 현재 안정한 상태를 유지하는 대상체(예를 들면, 위험군 대상체)가 본 임상 연구에 등록된다.

대상체들(예를 들면, 10명의 대상체, 25명의 대상체, 50명 이상의 대상체)로 구성된 군은 표준 관리 치료를 계속 제공받고 IL-1β 항체(예를 들면, 0.03 ㎎/㎏ 투여량, 0.3 ㎎/㎏ 투여량, 1.0 ㎎/㎏ 투여량, 30 ㎎ 투여량, 100 ㎎ 투여량) 또는 플라세보를 사용한 치료를 피하 주사를 통해 매달 추가로 제공받는다. 임의적으로, 상기 대상체는 항체의 후속 투여량에 비해 더 높고/높거나(예를 들면, 2배 더 많고/많거나) 대안적 경로(예를 들면, 정맥내)에 의해 전달되는 개시 투여량의 항체를 제공받을 수 있다. 그 다음, 대상체는 치료 기간(예를 들면, 6개월 치료 기간, 12개월 치료 기간) 동안 포도막염의 급성 악화에 대해, 예를 들면, 본원(예를 들면, 상기 실시예)에 기재된 바와 같이 모니터링된다. 급성 포도막염 악화 "사건"은 하나 이상의 병태의 악화(예를 들면, 시력의 감소, 또는 유리체 혼탁, 망막 침윤물 또는 혈관염의 증가)뿐만 아니라 하나 이상의 구급 약물치료(예를 들면, 볼루스 스테로이드 치료 또는 신규 면역억제 요법)의 개시도 포함할 수 있다.

IL-1β 항체 치료의 치료 효과는 (예를 들면, 특정된 기간 이내에) 포도막염의 급성 악화를 경험하는 군 내의 대상체의 수, 및/또는 급성 포도막염 악화까지의 시간에 대해 항체 치료군과 플라세보 치료군을 비교함으로써 확인된다.

실시예 5

IL -1β 항체를 사용한 포도막염의 치료:

약학 조성물을 사용한 표준 관리 치료의 점감

IL-1β 항체를 사용한 치료의 치효 효과, 및 급성 포도막염 악화(예를 들면, 포도막염 흐림)를 억제하는 항체의 능력을 평가하기 위해 재발성 포도막염(예를 들면, 불응성 포도막염, 내성 포도막염)의 병력으로 진단받은 환자(예를 들면, 베체트병 환자)에서 임상 시험이 수행된다. 재발성 포도막염의 병력을 갖고, 예를 들면, 비-스테로이드 면역억제제(예를 들면, 아자티오프린) 및/또는 스테로이드(예를 들면, 프레드니솔론)를 포함하는 하나 이상의 표준 관리 약물치료를 현재 제공받고 있고, 급성 포도막염 악화를 경험하고 있는 대상체가 이 임상 연구에 등록된다. 급성 포도막염 악화에 대한 등록 기준은 전술된 파라미터들 중 임의의 파라미터, 예를 들면, 유리체 혼탁(예를 들면, ≥1+ 또는 ≥2+), 상기 악화로 인한 시력의 감소(예를 들면, 20/40 ETDRS BCVA 이하, ≥15 문자 ETDRS 또는 2줄 스넬렌 감소), 또는 망막 침윤물 및/또는 망막 혈관염을 포함할 수 있다.

모든 대상체들은 표준 관리 치료를 계속 제공받고 급성 악화를 해소하기 위해 정맥내 또는 피하 투여를 통해 IL-1β 항체(예를 들면, 0.03 ㎎/㎏ 투여량, 0.3 ㎎/㎏ 투여량, 1.0 ㎎/㎏ 투여량, 30 ㎎/㎏ 투여량 또는 100 ㎎/㎏ 투여량)를 사용한 치료를 추가로 개시한다. 임의적으로, 제2 투여량의 항체가 14일째 날에 (예를 들면, 정맥내, 피하) 투여될 수 있다. 환자들은 IL-1β 항체 치료에 대한 반응에 대해 매주 모니터링되고, 반응 후(예를 들면, 1주일 후) 일반적으로 28일째 날까지 예정된 시간에서 모니터링되고, 치료에 반응한 모든 대상체들은 2개의 군들 중 하나로 무작위적으로 나누어지고, 이때 제1 군은 표준 관리 치료 및 IL-1β 항체를 (예를 들면, 매월) 계속 제공받고, 제2 군은 표준 관리 치료 및 추가로 플라세보를 계속 제공받는다. 임의적으로, 대상체들은 항체의 후속 투여량에 비해 더 높고/높거나(예를 들면, 2배 더 많고/많거나) 대안적 경로(예를 들면, 정맥내)에 의해 전달되는 양으로 개시 투여량의 항체를 제공받을 수 있다.

그 다음, 대상체는 치료 기간(예를 들면, 6개월의 치료 기간, 12개월의 치료 기간)의 제2기 동안 포도막염의 추가 급성 악화의 재발에 대해 본원(예를 들면, 상기 실시예)에 기재된 바와 같이 모니터링된다. 급성 포도막염 악화 "사건"은 하나 이상의 병태의 악화(예를 들면, 시력의 감소, 또는 유리체 혼탁, 망막 침윤물 또는 망막 혈관염의 증가)뿐만 아니라 하나 이상의 구급 약물치료(예를 들면, 볼루스 스테로이드 치료, 신규 면역억제 요법)의 개시도 포함할 수 있다. 추가로, 하나 이상의 표준 관리 약물, 예를 들면, 면역억제제(예를 들면, 아자티오프린, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트) 및/또는 스테로이드(예를 들면, 프레드니손)의 투여량 수준이 임의적으로 치료 기간 동안 감소되거나 점감될 수 있다. 추가 급성 포도막염 악화의 예방에 있어서 IL-1β 항체 치료의 치료 효과는 포도막염의 급성 악화를 경험하는 군 내의 대상체의 수(예를 들면, 특정된 기간 이내에 악화를 경험하는 군 내의 대상체의 특정된 수), 및/또는 급성 포도막염 악화까지의 시간에 대해 항체 치료군과 플라세보 치료군을 비교함으로써 확인된다.

본원에서 인용된 공개문헌, 특허출원 및 특허를 포함하는 모든 참고문헌은 각각의 참고문헌이 참고로 도입되는 것으로 개별적으로 및 구체적으로 기재되어 있고 전체적으로 본원에 기재되어 있는 것과 동일한 정도로 본원에 참고로 도입된다.

본원에서 달리 표시되어 있거나 내용상 명확히 상반되지 않는 한, 본 발명을 기술하는 내용(특히, 하기 특허청구범위의 내용)에서 단수형 용어 및 유사한 지시대상의 사용은 단수 및 복수 둘다를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 달리 명시되어 있지 않은 한, 용어 "포함하는", "갖는" "수반하는" 및 "함유하는"은 비제한적인 용어(즉, "포함하나 이로 한정되지 않는"을 의미함)로서 해석되어야 한다. 비제한적인 용어가 본 발명의 특징 또는 요소를 기술하기 위해 사용되는 경우마다, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 비제한적인 용어 대신에 제한적인 용어가 사용될 수 있다는 것이 구체적으로 고려된다. 본원에서 달리 표시되어 있지 않은 한, 본원에서 값 범위의 언급은 상기 범위 내에 속하는 각각의 개별 값을 개별적으로 언급하는 속기 방법으로서 기여하기 위한 것일 뿐이고, 각각의 개별 값은 이 값이 본원에서 개별적으로 언급되는 것처럼 본 명세서 내로 도입된다. 본원에서 달리 표시되어 있거나 내용상 명확히 상반되지 않은 한, 본원에 기재된 모든 방법들은 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본원에서 제공된 임의의 모든 실시예 또는 예시적인 표현(예를 들면, "예컨대")의 사용은 본 발명을 더 잘 설명하기 위한 것일 뿐이고, 달리 청구되지 않은 한, 본 발명의 범위를 한정하지 않는다. 본 명세서에서 어떠한 표현도 본 발명의 실시에 필수적인 임의의 비청구된 요소를 표시하는 것으로서 해석되어서는 안 된다.

본 발명을 실시하기 위해 본 발명자들에게 공지되어 있는 최적 방식을 포함하는 본 발명의 바람직한 실시양태들이 본원에 기재되어 있다. 이들 바람직한 실시양태들의 변경은 상기 설명을 읽었을 때 당업자에게 자명해질 수 있다. 본 발명자들은 당업자가 이러한 변경을 적절하게 이용할 것으로 예측하고, 본 발명자들은 본 발명이 본원에 구체적으로 기재된 것과 다른 방식으로 실시될 것으로 생각한다. 따라서, 본 발명은 적용가능한 법에 의해 허용되는 바와 같이 본원에 첨부된 특허청구범위에서 인용된 보호대상의 모든 변형물 및 등가물을 포함한다. 나아가, 본원에서 달리 표시되어 있거나 내용상 명확히 상반되지 않은 한, 전술된 요소들(이들의 모든 가능한 변경물을 포함함)의 임의의 조합이 본 발명에 포함된다.

SEQUENCE LISTING <110> XOMA Technology Ltd. <120> METHODS FOR THE TREATMENT OF IL-1BETA RELATED CONDITIONS <130> 3716368.00223 <160> 6 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- epitope <400> 1 Glu Ser Val Asp Pro Lys Asn Tyr Pro Lys Lys Lys Met Glu Lys Arg 1 5 10 15 Phe Val Phe Asn Lys Ile Glu 20 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- linker <400> 2 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 3 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- AB5 light chain varaible region <400> 3 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gln Gly Lys Met Leu Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 4 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- AB5 heavy chain variable region <400> 4 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Gly Asp Glu Ser Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Thr Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val 65 70 75 80 Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Val Asp Thr Ala Thr Tyr Phe 85 90 95 Cys Ala Arg Asn Arg Tyr Asp Pro Pro Trp Phe Val Asp Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 5 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- AB7 light chain variable region <400> 5 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Gln 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Leu Gln Gly Lys Met Leu Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 6 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthesized- AB7 heavy chain variable region <400> 6 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Gly Asp Glu Ser Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val 65 70 75 80 Ser Leu Lys Ile Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Phe 85 90 95 Cys Ala Arg Asn Arg Tyr Asp Pro Pro Trp Phe Val Asp Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

Claims

유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 억제하는 방법으로서, 여기서 포도막염은 치료 불응성 포도막염인 것인 방법.
제1항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 것은 급성 포도막염 악화를 억제하는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 대상체에서 포도막염을 예방하는 방법인 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법인 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 급성 포도막염 악화 사이의 간격을 증가시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 급성 포도막염 악화의 빈도를 감소시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 급성 포도막염 악화를 경험할 가능성을 감소시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 급성 포도막염 악화를 예방하는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 대상체에서 포도막염을 억제하는 상기 방법은 급성 포도막염 악화의 중증도를 감소시키는 것인 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염인 것인 방법.
제10항에 있어서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친(colchicine)인 것인 방법.
제11항에 있어서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린, 알킬화제, 항-대사물질, X-선 요법, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드인 것인 방법.
제10항에 있어서, 비-스테로이드 소염제는 TNF 억제제, IL-6 억제제 또는 IL-17 억제제인 것인 방법.
제10항에 있어서, 스테로이드는 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽(andrenocorticotrophic) 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬인 것인 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개 또는 2개의 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있는 것인 방법.
제15항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나의 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있는 것인 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
제17항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
제17항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 선행 치료를 제공받은 것인 방법.
제20항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 대한 유해 반응 또는 과민성을 나타낸 것인 방법.
제20항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 실패한 것인 방법.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 상기 포도막염의 억제를 위해 동시에 제공받고 있고, 상기 방법은 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약의 감소를 제공하는 것인 방법.
제23항에 있어서, 상기 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투여량에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투여량의 감소인 것인 방법.
제23항에 있어서, 상기 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투약 빈도에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약 빈도의 감소인 것인 방법.
제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소되는 것인 방법.
제26항에 있어서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친인 것인 방법.
제27항에 있어서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린 또는 메토트렉세이트인 것인 방법.
제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 스테로이드를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소되는 것인 방법.
제29항에 있어서, 스테로이드는 프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬인 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법으로서, 여기서 포도막염은 치료 불응성 포도막염인 것인 방법.
제31항에 있어서, 치료 불응성 포도막염은 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 약학 조성물을 사용한 치료에 대한 불응성을 나타내는 포도막염인 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 여기서 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개 또는 2개의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있는 것인 방법.
제33항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있는 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 여기서 포도막염은 치료 불응성 포도막염이고, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물, 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물 및 스테로이드를 포함하는 약학 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
제35항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
제35항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 소염제를 포함하는 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있지 않는 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 급성 포도막염 악화를 억제하는 방법으로서, 여기서 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 선행 치료를 제공받은 것인 방법.
제38항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 대한 유해 반응 또는 과민성을 나타낸 것인 방법.
제38항에 있어서, 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 사용한 포도막염의 상기 선행 치료에 실패한 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 급성 포도막염 악화를 억제하는 방법으로서, 여기서 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 1개 또는 2개의 약학 조성물을 사용한 상기 포도막염의 동시 치료를 제공받고 있는 것인 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화 사이의 간격의 증가인 것인 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 빈도의 감소인 것인 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화를 경험할 가능성의 감소인 것인 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 예방인 것인 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 급성 포도막염 악화의 상기 억제는 급성 포도막염 악화의 중증도의 감소인 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 치료하거나 예방하는 방법으로서, 여기서 대상체는 비-스테로이드 면역억제제, 비-스테로이드 소염제 또는 스테로이드를 포함하는 하나 이상의 약학 조성물을 상기 포도막염의 치료 또는 예방을 위해 동시에 제공받고 있고, 상기 방법은 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약의 감소를 제공하는 것인 방법.
제47항에 있어서, 상기 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투여량에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투여량의 감소인 것인 방법.
제47항에 있어서, 상기 투약의 감소는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 투여하기 전의 투약 빈도에 비해 상기 하나 이상의 약학 조성물의 투약 빈도의 감소인 것인 방법.
제47항에 있어서, 비-스테로이드 면역억제제를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소되는 것인 방법.
제47항에 있어서, 스테로이드를 포함하는 약학 조성물의 투약이 감소되는 것인 방법.
제15항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 비-스테로이드 면역억제제는 DNA 합성 억제제, 사이클로스포린, 마이코페놀레이트 또는 콜히친인 것인 방법.
제52항에 있어서, DNA 합성 억제제는 아자티오프린인 것인 방법.
제15항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 스테로이드는 프레드니솔론, 코르티졸, 안드레노코르티코트로픽 호르몬 및 글루코코르티코이드로 구성된 군으로부터 선택된 스테로이드 호르몬인 것인 방법.
유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 포도막염으로 진단받은 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 급성 포도막염 악화를 억제하는 방법으로서, 여기서 포도막염은 치료 불응성 포도막염이고, 급성 포도막염 악화는 SUN 기준에 따른 2 단계 이상의 안구내 염증 증가의 중증도 등급을 갖는 것인 방법.
제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 벤 에즈라(Ben-Ezra) 포도막염 점수를 개선시키는 것인 방법.
제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 전포도막염 또는 후포도막염을 개선시키는 것인 방법.
제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁(haze), 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림(flare) 세포 수, 망막하 풀링(pooling), 망막전막 형성, 전방축농(hypopyon), 망막하 신생혈관형성, 시신경유두(optic disc) 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성(sheathing), 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광(hyperfluorescence), 유두(disc) 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드(arcades), 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출(pinpoint leaks), 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막 기능장애 및 상승된 안압으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제58항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수, 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염 및 신경망막염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제59항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수, 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출 및 망막 염색으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제60항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수, 망막 침윤물, 망막 혈관염 및 시신경유두 과형광으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제61항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수 및 망막 혈관염으로부터 선택된 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제57항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시키는 것인 방법.
1) 대상체에서 포도막염을 진단하는 단계, 및 2) 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 단계 1)의 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 전포도막염 또는 후포도막염을 개선시키는 것인 방법.
제64항에 있어서, 포도막염으로 진단받은 대상체는 범포도막염으로 진단받은 대상체인 것인 방법.
제64항에 있어서, 상기 방법은 중간포도막염을 추가로 개선시키는 것인 방법.
1) 대상체에서 포도막염을 진단하는 단계, 및 2) 유효량의 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 단계 1)의 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체에서 포도막염을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수, 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염, 신경망막염, 망막 기능장애 및 상승된 안압으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제67항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수, 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출, 망막 염색, 홍채염, 홍채섬모체염, 전섬모체염, 평면부염, 후섬모체염, 국소 맥락막염, 다중국소 맥락막염, 미만성 맥락막염, 맥락망막염, 망막맥락막염, 망막염 및 신경망막염으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제68항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 전방 세포 점수, 황반 부종, 레이저 흐림 세포 수, 망막하 풀링, 망막전막 형성, 전방축농, 망막하 신생혈관형성, 시신경유두 신생혈관형성, 망막 신생혈관형성, 망막 침윤물, 망막 혈관염, 폐쇄성 혈관염, 말초혈관 초형성, 염증 초형성, 망막 정맥 분지 폐쇄, 안저 플루오레세인 혈관조영술 누출 점수, 시신경유두 과형광, 유두 가장자리 염색, 시신경유두 누출, 낭성 풀링, 후극 아케이드, 망막 모세혈관 비-관류, 황반 허혈증, 극소 누출 및 망막 염색으로부터 선택된 1개 또는 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제69항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수, 망막 침윤물, 망막 혈관염 및 시신경유두 과형광으로부터 선택된 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제70항에 있어서, 상기 방법은 시력, 유리체 혼탁, 레이저 흐림 세포 수 및 망막 혈관염으로부터 선택된 2개 이상의 파라미터를 개선시키는 것인 방법.
제64항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 벤 에즈라 점수를 개선시키는 것인 방법.
제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 포도막염은 비-감염성 포도막염인 것인 방법.
제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 베체트병(Behcet's disease), 척추관절염, 건선 관절염, 건선, 염증성 장 질환, 궤양성 결장염, 사르코이드증, 세뇨관간질성 신염 및 포도막염(TINU) 증후군, 류마티스성 관절염, 가와사키병(Kawasaki disease), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 전신홍반루푸스, 다발동맥염, 레이터병(Reiter disease), 베게너 육아종증, 보크트-고야나기-하라다 증후군(Vogt-Koyanagi-Harada syndrome), 전신 소아 특발성 관절염 및 육아종증성 맥관염으로부터 선택된 질환 또는 병태로 진단받은 것인 방법.
제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 사이토메갈로바이러스 감염, 톡소포자충증, 매독, 결핵, 묘소병(cat scratch disease), 라임병(Lyme disease), 웨스트 나일 바이러스 감염, 단순포진 바이러스 감염, 인간 면역결핍 바이러스 감염, 진균 감염 또는 수두대상포진 감염으로 진단받은 것인 방법.
제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 평면부염, 다발성 경화증, 교감성 안염, 버드샷(birdshot) 맥락막병증, 면역 회복 포도막염, 림프종 및 특발성 포도막염으로부터 선택된 질환 또는 병태로 진단받은 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 1 nM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제77항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 250 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제78항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 50 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제79항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 10 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제80항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 1 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제81항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.3 pM 이하의 해리상수로 인간 IL-1β에 결합하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 항체 단편은 중화 항체인 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 항체 단편은, 결합된 상기 항체 또는 단편이 IL-1β와 IL-1 수용체 I(IL-1RI)의 결합을 실질적으로 허용하도록 IL-1β 에피토프에 결합하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 IL-1α, IL-1R 또는 IL-1Ra에 검출가능하게 결합하지 않는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 이의 단편은 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체의 결합과 경쟁하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 이의 단편은 서열번호 5의 경쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 중쇄 가변 영역을 갖는 항체에 의해 결합되는 에피토프와 실질적으로 동일한 IL-1β의 에피토프에 결합하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 IL-1β의 Glu64를 도입하는 에피토프에 결합하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 IL-1β의 N 말단의 아미노산 1 내지 34에 결합하는 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 인간 개조된(Human Engineered) 또는 인간화된(humanized) 것인 방법.
제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 인간 항체 또는 항체 단편인 것인 방법.
제1항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 3 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제92항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 1 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제93항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.3 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제94항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.1 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제95항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.03 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제96항에 있어서, 항체 또는 항체 단편은 약 0.01 ㎎/㎏ 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제92항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 1 이상의 투여량은 0.01 ㎎/㎏ 이상의 항체 또는 단편인 것인 방법.
제1항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 단편은 대상체 체중 당 투여량 비와 무관한 고정된 투여량으로서 투여되는 것인 방법.
제99항에 있어서, 항체 또는 단편은 500 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제100항에 있어서, 항체 또는 단편은 250 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제101항에 있어서, 항체 또는 단편은 100 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제102항에 있어서, 항체 또는 단편은 25 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제103항에 있어서, 항체 또는 단편은 10 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제104항에 있어서, 항체 또는 단편은 1.0 mg 이하의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제99항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 단편은 1.0 mg 이상의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제99항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 단편은 10 mg 이상의 항체 또는 단편의 1 이상의 투여량으로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 단편은 피하, 정맥내, 안구내 또는 근육내 주사에 의해 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 개시(initial) 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 상기 1 이상의 후속 투여량은 개시 투여량과 거의 동일하거나 이보다 적은 양인 것인 방법.
제1항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 개시 투여량의 항체 또는 항체 단편의 투여 후 1 이상의 후속 투여량이 투여되고, 1 이상의 후속 투여량은 개시 투여량보다 더 많은 양인 것인 방법.
제1항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저(trough) 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제112항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 1.0 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제113항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 2.0 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제112항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 내지 약 5 ㎍/㎖의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
약 0.5 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 포도막염을 억제하는 방법.
제116항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 1.0 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제117항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 2.0 ㎍/㎖ 이상의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제116항에 있어서, 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편은 약 0.5 ㎍/㎖ 내지 약 5 ㎍/㎖의 전신 최저 혈청 농도를 유지하기에 충분한 투여량 및 빈도로 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 이의 단편은 IL-1β에 의해 유도된 IL-8의 생성을 측정하는 인간 전혈 IL-1β 억제 분석에서 IL-1β 수용체 길항제보다 더 낮은 IC₅₀을 갖는 것인 방법.
포도막염의 치료에서 사용될 조성물의 제조에 있어서, IL-1β에 의해 유도된 IL-8의 생성을 측정하는 인간 전혈 IL-1β 억제 분석에서 IL-1β 수용체 길항제보다 더 낮은 IC₅₀을 갖는 항-IL-1β 항체 또는 이의 결합 단편의 용도로서, 여기서 포도막염은 치료 불응성 포도막염인 것인 용도.
제120항 또는 제121항에 있어서, IL-1β 수용체 길항제는 아나킨라(anakinra)인 것인 방법 또는 용도.