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KR20130051647A - 자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법 - Google Patents

자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법 Download PDF

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KR20130051647A
KR20130051647A KR1020110116908A KR20110116908A KR20130051647A KR 20130051647 A KR20130051647 A KR 20130051647A KR 1020110116908 A KR1020110116908 A KR 1020110116908A KR 20110116908 A KR20110116908 A KR 20110116908A KR 20130051647 A KR20130051647 A KR 20130051647A
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KR
South Korea
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magnetic particles
target material
magnetic
biomaterial
bound
Prior art date
Application number
KR1020110116908A
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홍효봉
Original Assignee
한국전자통신연구원
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Publication date
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Abstract

자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법이 제공된다. 바이오 물질의 분석 방법은 타겟 물질을 포함하는 바이오 물질을 준비하는 것, 제 1 자성 입자와 제 1 자성 입자보다 작은 제 2 자성 입자를 준비하는 것, 타겟 물질에 제 1 및 제 2 자성 입자들이 결합(bind)된 결합체를 형성하는 것, 자석을 이용하여 결합체에서 제 1 자성 입자를 분리하는 것, 및 제 2 자성 입자와 결합된 타겟 물질을 정량화하는 것을 포함한다.

Description

자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법{Method for analysis of biomaterials using magnetic bead}
본 발명은 바이오 물질의 분석 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게 자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법에 관한 것이다.
신약개발이나 의료 진단을 위한 의학 및 생명과학 분야에서 대사산물이나 질병의 바이오마커(biomarker)와 같은 생체분자를 고감도로 검출하고 정량하는 방법의 개발이 강력하게 요구되고 있다. 이러한 생체분자의 분석을 위해서 결합 에세이(binding assay) 방법이 널리 사용되고 있으며, 면역분석(imMunoassay), DNA 혼성화(hybridization)나 수용체 기반 분석(receptor-based assay)이 이에 해당한다. 생체분자의 분석시 생체분자의 결합여부를 직접적으로 관측할 수 없기 때문에, 결합 에세이에서는 표적분자(target molecule)의 존재 여부를 측정 가능한 신호로 나타낼 수 있도록 표지물질을 사용한다. 표지물질로는 방사성 물질, 형광물질, 효소표지(enzymatic label)나 자성물질 등을 사용할 수 있다.
자성 입자(magnetic bead)는 자성에 의해 용이하게 제어될 수 있으며, 높은 생체적합성(biocompatibility) 및 높은 감지능과 같은 장점으로 인하여 결합 에세이의 표지물질로 많은 주목을 받고 있다.
하지만, 시료의 분리 목적으로 사용되는 자성 입자에 결합되어 있는 시료를 분석하기 위해서, 보통, 다시 분석하고자 하는 물질을 분리하여 일반적인 생화학분석 방법으로 분석을 하거나, 자성 입자에 형광물질이나 서양고추냉이 퍼옥시다제(Horse Radish Peroxidase, HRP)와 같은 발색 물질을 컨쥬게이션(conjugation)시켜 분석한다. 하지만, 이런 방법의 경우 자성 입자의 응집(aggregation)이나, 2차 또는 3차적인 화학물질의 처리로 인하여 분석에 많은 오류가 발생 할 수 있다. 즉, 형광이나 발색의 경우는 비드(bead)가 쌓이면(stacking) 입체 구조상 많은 부분들이 가려지게 되는 단점이 있다. 이러한, 단점을 극복하기 위해, 라벨 컴파운드(label compound)를 자성물질로 표지(label)하고 이를 분석하는 것이 바람직하다. 하지만, 보통 2가지의 자성 물질을 동시에 사용하게 되면 분리용 자성 입자와 신호 발생용 라벨 컴파운드(label compound)가 동시에 분리되어 정량이 불가능하다.
본원 발명이 해결하고자 하는 과제는 바이오 물질의 분석 효율이 보다 향상된 바이오 물질의 분석 방법을 제공하는데 있다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 해결하고자 하는 과제를 달성하기 위하여 본 발명의 일 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법은 타겟 물질을 포함하는 바이오 물질을 준비하는 것, 제 1 자성 입자와 제 1 자성 입자보다 작은 제 2 자성 입자를 준비하는 것, 타겟 물질에 제 1 및 제 2 자성 입자들이 결합(bind)된 결합체를 형성하는 것, 자석을 이용하여 결합체에서 제 1 자성 입자를 분리하는 것, 및 제 2 자성 입자와 결합된 타겟 물질을 정량화하는 것을 포함한다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 2 자성 입자의 자화 세기가 상기 제 1 자성 입자의 자화 세기보다 작을 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 1 자성 입자의 직경은 100nm 내지 200nm이고, 상기 제 2자성 입자의 직경은 10nm 내지 100nm일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 1 및 제 2 자성 나노 입자들은 Fe, Mn, Ni, Co 중 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들은 항원-항체 반응에 의해 상기 타겟 물질과 결합될 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 1 자성 입자는 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride) 화학적 반응 또는 단백질 결합에 의해 상기 타겟 물질과 결합되고, 상기 제 2 자성 입자는 항원-항체 반응에 의해 상기 타겟 물질과 결합될 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 타겟 물질을 정량화하는 것은, GMR, SQUIDS, Mixed Frequency magnetic Detector 중 어느 하나를 이용하여 상기 제 2 자성 입자의 자화 세기를 측정하는 것일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들의 표면들에 상기 타겟 물질과 특이 반응하는 프로브 물질이 고정화될 수 있다.
상기 해결하고자 하는 과제를 달성하기 위하여 본 발명의 다른 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법은 타겟 물질을 포함하는 바이오 물질 준비하는 것, 서로 다른 자화 세기를 갖는 제 1 및 제 2 자성 입자들을 준비하는 것, 타겟 물질에 제 1 및 제 2 자성 입자들이 결합된 결합체를 형성하는 것, 자석을 이용하여 결합체에서 제 1 자성 입자를 분리하는 것, 및 제 2 자성 입자와 결합된 타겟 물질을 정량화하는 것을 포함한다.
다른 실시예에 따르면, 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들의 직경이 서로 다를 수 있다.
다른 실시예에서, 상기 제 1 자성 입자의 직경이 상기 제 2 자성 입자의 직경보다 클 수 있다.
다른 실시예에서, 상기 타겟 물질을 정량화하는 것은, 상기 제 2 자성 입자의 자화 세기를 측정하는 것일 수 있다.
기타 실시예들의 구체적인 사항들은 상세한 설명 및 도면들에 포함되어 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법에 따르면, 자화(magnetization) 세기가 서로 다른 2종류의 자성 입자들을 이용하여 바이오 물질을 분석할 수 있다. 그리고, 바이오 정량에 필요한 시약을 보관하거나 준비할 필요가 없어 바로 분석이 가능하다. 또한, 일반적인 시약이 가지는 빛에 대한 민감성이나, 습기 및 온도 같은 문제의 영향이 줄어들며, 일반적인 생화학적 시약과 달리 시료의 보관이나 재분석이 가능하다. 즉, 고가의 바이오 물질 분석 장비나 훈련된 인력이 없이 군이나 오지 등에서도 용이하게 바이오 물질을 분석할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예들에 따른 바이오 물질의 분석 방법을 개략적으로 나타내는 순서도이다.
도 2는 본 발명의 제 1 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법을 나타내는 모식도이다.
도 3은 본 발명의 제 1 실험예에 따른 바이오 물질의 분석 결과는 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 제 2 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법을 나타내는 모식도이다.
도 5는 본 발명의 제 2 실험예에 따른 바이오 물질의 분석 결과는 나타내는 그래프이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예를 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다. 명세서 전문에 걸쳐 동일 참조 부호는 동일 구성 요소를 지칭한다.
본 명세서에서 사용된 용어는 실시예들을 설명하기 위한 것이며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다. 본 명세서에서, 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않는 한 복수형도 포함한다. 명세서에서 사용되는 '포함한다(comprises)' 및/또는 '포함하는(comprising)'은 언급된 구성요소, 단계, 동작 및/또는 소자는 하나 이상의 다른 구성요소, 단계, 동작 및/또는 소자의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다.
이하, 도면들을 참조하여 본 발명의 실시예들에 따른 바이오 물질 분석 방법에 대해 상세히 설명한다.
도 1은 본 발명의 실시예들에 따른 바이오 물질의 분석 방법을 개략적으로 나타내는 순서도이다. 도 2는 본 발명의 제 1 실시예에 따른 바이오 물질의 분석 방법을 나타내는 모식도이다.
도 1 및 도 2를 참조하면, 타겟 물질(11)을 포함하는 바이오 물질(10)을 준비한다(S10).
바이오 물질(10)은 생체로부터 얻어진 체액일 수 있다. 예를 들어, 바이오 물질(10)은 혈액, 혈장, 혈청, 림프, 골수액, 타액, 안구액, 정액, 뇌추출물, 척수액, 관절액, 흉선액, 복수 및 양막액 등일 수 있다. 바이오 물질(10)은 검출하고자 하는 타겟(target) 물질뿐만 아니라, 프로브(probe) 물질들과 결합하지 않는 비특이성(nonspecific) 분자들을 포함할 수 있다.
타겟 물질(target materials; 11)이란, 특정 기질을 나타내는 바이오 분자로서, 분석체 또는 애널라이트(analytes)와 동일한 의미로 해석될 수 있다. 타겟 물질(11)은 예를 들어, 단백질, 핵산, 바이러스, 세포, 유기 분자 및 무기 분자들을 포함하며, 단백질 분자의 경우, 항원, 항체, 기질 단백질, 효소, 조효소 등 어떠한 바이오 분자라도 가능하다. 그리고, 핵산의 경우, DNA, RNA, PNA, LNA 또는 그들의 혼성체일 수 있다. 일 실시예에서 타겟 물질(11)은 항원(antigen)일 수 있다.
이어서, 서로 다른 자화 세기를 갖는 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)을 준비한다(S20).
일 실시예에 따르면, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)은 직경에 따라 자화 세기가 달라질 수 있다. 다시 말해, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)은 직경에 따라 동일한 자석에 물리적으로 끌리는 비율이 다르다. 상세하게, 자성 입자들은 직경이 작을수록 자기 도메인(magnetic domain)이 감소되어, 자화 세기가 작을 수 있다. 여기서, 자기 도메인이란, 자성체의 자화를 구성하는　단위가 되는 영역이다.
일 실시예에 따르면, 제 2 자성 입자에 비해 직경이 큰 제 1 자성 입자(20)는 일정한 자기 도메인을 갖기 때문에 자석에 물리적으로 끌려갈 수 있는 반면, 자성 세기를 측정할 때 정밀도가 떨어질 수 있다. 이와 달리, 제 2 자성 입자(30)는 자기 도메인이 매우 작으므로 외부 자력의 영향을 거의 받지 않는다. 이에 따라, 제 2 자성 입자는 자석을 이용하여 타겟 분자를 분리하는데 이용되기 어렵다. 이에 따라, 본 발명의 실시예들에서는, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 이러한 특성, 즉, 자기 도메인 차이를 이용하여 타겟 물질(11)을 정량화할 수 있다. 다시 말해, 제 1 자성 입자(20)는 바이오 물질(10)에서 타겟 물질(11)을 분리하는데 이용될 수 있으며, 제 2 자성 입자(30)는 자성 세기를 측정할 수 있는 신호 발생용으로 이용될 수 있다.
보다 상세하게, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)은 직경이 약 1 nm 내지 200 nm의 나노 입자일 수 있다. 그리고, 제 2 자성 입자(30)의 직경이 제 1 자성 입자(20)의 직경보다 작으며, 제 2 자성 입자(30)의 자화 세기가 제 1 자성 입자(20)의 자화 세기보다 작을 수 있다. 구체적으로, 제 1 자성 입자(20)의 직경은 약 100nm 내지 200nm일 수 있다. 그리고, 제 2 자성 입자(30)의 직경은 약 10nm 내지 100nm일 수 있으며, 바람직하게 약 10nm 내지 50nm일 수 있다.
본 발명의 실시예들에서, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)은 Fe, Mn, Ni, Co로 구성할 수 있다. 즉, Fe, ε-Co, Co, Ni, FePt, CoPt, γ-Fe2O3, Fe3O4, CoO, CoFe2O4 등으로 구성할 수 있다. 또한, Fe를 다른 입자 중 하나와 합금을 형성하여 사용할 수도 있다.
이와 같은 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)은 바이오 물질(10)에 포함된 타겟 물질(11)과 결합될 수 있도록 표면 처리된다.
일 실시예에 따르면, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 표면에는 타겟 물질들(11)과 특이 결합하는 프로브 물질(probe materials; 12)이 화학적 방법에 의해 고정화(immobilization)된다.
프로브 물질(12)이란, 타겟 물질(11)과 특이 결합(specific binding)하는 생체 분자로서, 수용체(receptor) 또는 억셉터(acceptor)와 동일한 의미로 해석될 수 있다. 예를 들어, 프로브 물질(12)은 항체, 항원, DNA, 바이오틴(biotin), 아비딘(avidin) 및 스트렙트아비딘(streptavidin) 중에서 선택된 어느 하나일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서 프로브 물질(12)은 항체(antibody)일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 프로브 물질(12)은 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 표면에 화학적 흡착(chemical adsorption), 공유결합(covalent-binding), 전기적 결합(electrostatic attraction), 공중합체(co-polymerization) 또는 아비딘-바이오틴 결합 시스템(avidin-biotin affinity system) 등에 의해 고정화될 수 있다.
일 실시예에 따르면, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 표면에 프로브 물질(12)을 보다 단단히 고정화시키기 위해, 작용기(functional group)가 유도될 수 있다. 예를 들어, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 표면에, 카르복실기(-COOH), 티올기(-SH), 수산기(-OH), 실란기, 아민기 또는 에폭시기와 같은 작용기들이 유도될 수 있다.
또한, 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)의 표면에는 프로브 물질(12)과 함께, 타겟 물질(11)의 비특이 결합을 방지하기 위한 블록킹 물질(미도시)로서, 카세인(casein)이 고정될 수도 있다.
바이오 물질(10) 및 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)을 준비한 후, 타겟 물질(11)과 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)을 혼합(mix)하여, 타겟 물질(11)에 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)이 결합(bind)된 결합체(100)를 형성한다(S30).
표면에 프로브 물질(12)이 고정화된 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30)로, 타겟 물질(11)이 제공되면, 타겟 물질(11)은 프로브 물질(12)과 특이 반응하여 제 1 및 제 2 자성 입자들(20, 30) 주위에 고정될 수 있다. 프로브 물질(12)과 타겟 물질(11) 간의 특이 반응으로는, 항원-항체반응, 아비딘(Avidin)-바이오틴(biotin) 반응, 뉴트라아비딘(NeutrAvidin)-바이오틴(biotin) 반응, 스트렙트아비딘(StreptAvidin)-바이오틴(biotin) 반응, 상보적 관계에 있는 DNA(complementary DNA), 면역 글로불린 G(immunoglobulin G)-단백질 A(protein A), 단백질 G, 단백질 A/G, 단백질 L 간의 반응 중 적어도 어느 하나일 수 있다.
이어서, 자석을 이용하여 결합체(100)에서 제 1 자성 입자(20)를 분리한다(S40).
제 1 자성 입자(20)는, 제 2 자성 입자(30)와 달리, 자기 도메인을 가지므로 자석에 의해 물리적으로 끌려갈 수 있다. 이에 따라, 제 1 자성 입자(20)가 결합체(100)에서 분리되고, 타겟 물질(11)과 제 2 자성 입자(30)가 결합된 결합체(100)가 형성된다.
이어서, 도 1을 참조하면, 제 2 자성 입자(30)와 결합된 타겟 물질(11)을 정량화한다(S50).
일 실시예에서, 제 2 자성 입자(30)와 결합된 타겟 물질(11)을 정량화하는 것은, 타겟 물질(11)에 결합된 제 2 자성 입자(30)의 정량적 수치를 전기화학적 또는 전기적 신호 등으로 변환하는 것을 포함하며, 전기화학적 또는 전기적 신호를 분석하여 타겟 물질(11)의 정량적 검출이 가능하다.
일 실시예에서, 타겟 물질(11)을 정량화하는 것은 거대자기저항(GMR: Giant Magneto-Resistance) 센서, 초전도 양자 간섭소자(SQUIDS: Superconducting Quantum Interference Devices), Mixed Frequency magnetic Detector 중 어느 하나를 이용하여 제 2 자성 입자(30)의 자화 세기를 측정하는 것일 수 있다.
이와 같이, 본 발명의 실시예에 따르면, 제 2 자성 입자(30)의 수에 대한 신호의 검출로서 보다 간단하게 바이오 물질(10)의 존재를 정량적으로 측정할 수 있고, 보다 안정적인 데이터를 확보할 수 있으며, 실험실이 아닌 야외에서도 타겟 물질(11)을 분리 및 분석 할 수 있다.
<실험예 1>
제 1 실험예는 제 2 자성 입자(신호 생성용)가 자석에 의해 분리되지 않고, 표면 처리된 화학적 (또는 생화학적) 특이성에 의해서만 분리되고, 제 2 자성 입자의 자성이 전기적 신호로 해석될 수 있음을 알려준다.
제 1 실험예에 따르면, 타겟 물질과 특이적 반응하는 항체가 결합된 제 1 및 제 2 자성 입자들로는 독일의 Chemicell 사에서 공급된 50nm 및 100nM의 자성 입자들을 준비하였다. (Fluid MAG-ARA 및 FluidMAG biotin).
(50nm 자성 입자 준비)
1) 50nm의 자성 입자 표면에 특정한 바이오 물질 또는 화학 물질을 고정시키기 위해, 50nm의 자성 입자를 표면 처리한다. 상세하게, 50nm의 자성 입자를 포함하는 유체 100ul을 900ul의 MES(2-(N-Morpholino)ethansulfonic acid) 버퍼액(ph 5.6)에 녹인다.
2) 자석으로는 50nm의 자성 입자가 분리 되지 않으므로 14,000 rpm에서 10분정도 원심 분리하고 자성 입자를 세척(washing)한다.
3) 1)과 2) 단계를 2회 반복하고, 50nm 자성 입자를 250ul의 MES 버퍼액에 녹여둔다.
4) MES 버퍼액에 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimice) 10mg을 녹인다.
5) 3)과 4) 단계에서 준비된 용액들을 혼합한 후, 10분정도 실온에서 배양한다.
6) 1)과 2) 단계를 2회 반복하고, 50nm 자성 입자를 250ul의 MES 버퍼액에 녹여둔다.
7) 아비딘(Avidin) 50ug을 250ul MES 버퍼액에 녹인 후, MES 버퍼액과 혼합한 후 2시간 실온에서 부드럽게 혼합(mix)하면서 2시간 동안 반응시킨다.
8) 1)과 2) 단계를 반복하고, 50nm 자성 입자를 500ul PBS(Phosphate Buffer Saline) 용액(pH 7.4)에 녹여둔다. 이러한 PBS 용액에 100ug의 바이오틴(biotin)을 녹이고 30분정도 반응시키고, 원심 분리후 PBS 용액에 보관한다.
9) 장기 보관을 위해서는 0.1% BSA 및 0.05% thimerasol을 포함하는 PBS 용액에 녹여둔다.
(100nm 자성 입자 준비)
10) 타겟 물질(11) 분리용으로 사용되는 100nm 자성 입자로서, Chemicell사의 FluidMAG biotin을 10,000배 희석하여 사용하였다. 세척(Washing)과 희석은 모두 PBS 용액을 사용하였고, 자석으로 100nm의 자성 입자의 분리가 가능하므로 자석을 이용하여 100nm의 자성 입자를 분리하였다.
11) 10)에서 준비된 100ul의 PBS 용액에 1.0ug/ml 농도의 아비딘 100ul를 넣고, 10분간 반응시킨 후 다시 PBS 용액을 이용하여 세척하였다.
(50nm 및 100nm 자성 입자들과 타겟 물질 혼합)
12) 50nm 자성 입자를 포함하는 PBS 용액과, 100nm 자성 입자를 포함하는 PBS 용액 50ul씩 혼합후 20분간 배양하였다.
13) 자석을 이용하여 100nm 자성 입자들을 분리하고, 이를 100ul의 PBS에 혼합하여 혼합액에 포함된 자성 입자의 자성 세기를 측정하였다.
(비교 샘플들 준비)
이와 같은 제 1 실험예에 대한 비교예로서 샘플1과 샘플2를 준비하였다.
샘플1은 FluidMAG biotin 100nm 자성 입자만을 포함하는 용액 100ul을 준비하였다. 그리고, 샘플2는 표면처리가 되지 않은 100nm 자성 입자 용액과 50nm 자성 입자 용액을 희석한 후, 자석으로 100nm 자성 입자를 분리하고, 100ul 용액 내 자성 입자의 자성 세기를 측정하였다. 샘플2는 100nm 자성 입자와 50nm 자성 입자의 표면에 상보적인 (예: biotin + Avidin) 물질이 고정되어 있지 않아, 단지 100mm 자성 입자만 분리된 상태이다.
도 3은 본 발명의 제 1 실험예에 따른 바이오 물질의 분석 결과와 제 1 실험예에 대한 샘플들의 분석결과를 나타내는 그래프이다.
도 3에 도시된 그래프는 아비딘 및 바이오틴을 이용한 타겟 물질의 분석 결과를 나타내며, 100nm 자성입자와 50nm 자성 입자가 타겟 물질과 완전히 결합되었을 때의 전기적 신호 측정값을 100으로 환산했을 때, 상대적인 크기를 나타낸다. 도 3을 참조하면, 100nm의 자성 입자가 분리되고, 타겟 물질에 결합된 50nm의 자성 입자를 통해 타겟 물질의 정량화가 가능함을 알 수 있다.
도 4는 본 발명의 제 2 실시예에 따른 바이오 물질(10)의 분석 방법을 나타내는 모식도이다. 제 2 실시예에 따르면, 제 1 자성 입자에 타겟 물질(11)과 특이 반응하는 프로브 물질(12)을 고정화시키는 대신, 제 1 자성 입자 표면에 단백질이 결합 가능하도록 화학적 표면 처리가 수행된다는 점에서 제 1 실시예와 구별될 수 있다.
즉, 도 4를 참조하면, 제 2 실시예에 따른 바이오 물질(10)의 분석 방법은, 도 1을 참조하여 설명한 것처럼, 타겟 물질(11)을 포함하는 바이오 물질(10)을 준비하는 것, 서로 다른 자화 세기를 갖는 제 1 및 제 2 자성 입자들(25, 30)을 준비하는 것, 타겟 물질(11)과 제 1 및 제 2 자성 입자들(25, 30)을 혼합(mix)하여, 타겟 물질(11)에 제 1 및 제 2 자성 입자들(25, 30)이 결합(bind)된 결합체(150)를 형성하는 것, 자석을 이용하여 결합체(150)에서 제 1 자성 입자(25)를 분리하는 것, 및 제 2 자성 입자(30)와 결합된 타겟 물질(11)을 정량화하는 것을 포함한다.
이 실시예에서, 제 1 자성 입자(25)를 준비하는 것은, 바이오 분자에 포함된 모든 생체 분자들을 제 1 자성 입자(25)의 표면에 결합시키는 것을 포함한다. 이 때, 제 1 자성 입자(25)의 표면에 결합되는 생체 분자들은 타겟 물질(11)뿐만 아니라 다른 특이적 특성의 분자들도 결합될 수 있다. 예를 들어, 제 1 자성 입자(25)의 표면에 단백질이 결합될 수 있다. 다시 말해, 제 1 자성 입자(25)의 표면에 항원, 항체, 기질 단백질, 효소, 조효소 등이 결합될 수 있다. 일 실시예에 따르면, 제 1 자성 입자(25)의 표면에 단백질을 결합시키기 위해, EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimice) 화학적 반응이 수행될 수 있다.
제 2 자성 입자(30)를 준비하는 것은, 제 1 실시예를 참조하여 설명한 것처럼, 제 2 자성 입자들(30)의 표면에는 타겟 물질(11)들과 특이 결합하는 프로브 물질(12)을 고정화시키는 것을 포함한다.
이 실시예에서, 타겟 물질(11)과 제 1 및 제 2 자성 입자들(25, 30)을 혼합(mix)하면, 제 1 자성 입자(25)의 표면에 결합된 다양한 생체 분자들 중 타겟 물질(11)이 제 2 자성 입자(30)에 결합된 프로브 물질(12)과 특이 결합될 수 있다. 이에 따라, 도 4에 도시된 것처럼, 제 1 및 제 2 자성 입자들(25, 30)과 타겟 물질(11)이 결합된 결합체(150)가 형성될 수 있다.
이후, 제 1 실시예를 참조하여 설명한 것처럼, 자석을 이용하여 제 1 자성 입자(25)를 분리하고, 결합체(150)를 세척함으로써 제 2 자성 입자(30)와 타겟 물질(11)이 결합된 결합체(200)를 얻을 수 있다.
<실험예2>
제 2 실험예에 따르면, 베타-아밀로이드(beta-amyloid)와 베타-아밀로이드 항체(beta-amyloid antibody)의 특이적 반응을 이용하여 자성 입자들과 타겟 물질을 결합시킨다.
(50nm 자성 입자 준비)
1) 50nm의 자성 입자 100ul을 900ul의 MES(2-(N-Morpholino)ethansulfonic acid) 용액(ph 5.6)에 녹인다.
2) 자석으로는 50nm 자성 입자가 분리되지 않으므로, 14,000 rpm에서 10분정도 원심 분리된 50nm 자성 입자를 세척(washing)한다.
3) 1)과 2) 단계를 2회 반복하고 50nm 자성 입자를 250ul의 MES 용액에 녹여둔다.
4) 10mg의 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimice) 10 mg을 50nm 자성 입자를 포함하는 250ul의 MES 용액에 녹인다.
5) 3)과 4)에서 준비된 용액들을 혼합(mixing)한 후 10분정도 실온에서 배양한다.
6) 1)과 2) 단계를 2회 반복하고 250ul MES 용액에 다시 녹인다.
7) 10mg의 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimde) 10 mg을 250ul의 MES 용액에 녹인다.
8) 6)과 7)에서 준비된 용액들을 혼합(mixing)한 후 10분정도 실온에서 배양한다.
9) 1)과 2) 단계들을 2회 반복하고 250ul MES 용액에 다시 녹인다.
10) Rabbit anti human beta amyloid 1-40/42 polyclonal antibody (Millipore, CA, US) 50ul을 250ul MES 용액에 녹인 후, 6)에서 준비된 용액과 혼합한 후, 2시간 실온에서 혼합(mixing)하면서 2시간 동안 반응시킨다.
11) 다시 1)과 2) 단계들을 반복하고 MES 용액이 아닌 500ul의 PBS 용액(pH 7.4)에 녹인다. 장기 보관을 위해서 0.1% BSA 및 0.05% thimerasol을 포함하는 PBS 용액에 녹여둔다.
(100nm 자성 입자 준비)
12) 100nm의 자성 입자 100ul을 900ul의 MES 용액(ph 5.6)에 녹인다.
13) 1)과 2) 단계들을 2회 반복하고 100nm의 자성 입자를 250ul의 MES 용액에 녹여둔다.
14) EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimice) 10mg을 100nm 자성 입자를 포함하는 250ul의 MES 용액에 녹인다.
15) 13) 과 14)에서 준비된 용액을 혼합한 후, 10분정도 실온에서 배양한다.
16) 1)과 2)단계들을 2회 반복하고 100nm의 자성 입자를 250ul MES 용액에 다시 녹인다.
17) Beta amyloid 1-40(Sigma Aldrich) 5ug과 BSA(Bovine Serum Albumin) 45ug을 250ul MES 용액에 녹인 후, 16)과 혼합한 후 2시간 실온에서 혼합(mixing) 하면서 2시간 동안 반응시킨다.
18) 17)에서 준비된 용액을 2회 세척하고 PBS 용액에 녹인다.
(50nm 및 100nm 자성 입자들과 타겟 물질 혼합)
19) 14)와 18)에서 준비된 용액을 각각 50ul씩 혼합후 20분간 배양한 후 자석을 이용하여 100nm 자성 입자들을 분리하고, 이를 100ul의 PBS에 혼합하여 혼합액에 포함된 자성 입자의 자성 세기를 측정하였다.
(비교 샘플들 준비)
이와 같은 제 2 실험예에 대한 비교예로서 샘플1과 샘플2를 준비하였다.
샘플1은 FluidMAG biotin 100nm 자성 입자만을 포함하는 용액 100ul을 준비하였다. 그리고, 샘플2는 표면처리가 되지 않은 100nm 자성 입자 용액과 50nm 자성 입자 용액을 희석한 후, 자석으로 100nm 자성 입자를 분리하고, 100ul 용액 내 자성 입자의 자성 세기를 측정하였다. 샘플2는 100nm 자성 입자와 50nm 자성 입자의 표면에 상보적인 (예: biotin + Avidin)물질이 고정되어 있지 않아, 단지 100mm 자성 입자만 분리된 상태이다.
도 5는 본 발명의 제 2 실험예에 따른 바이오 물질(10)의 분석 결과는 나타내는 그래프이다.
도 5에 도시된 그래프는 베타-아밀로이드(beta-amyloid)와 베타-아밀로이드 항체(beta-amyloid antibody)의 특이적 반응을 이용한 타겟 물질의 분석 결과를 나타낸다. 그리고, 도 5에 도시된 그래프는 100nm 자성입자와 50nm 자성 입자가 타겟 물질과 완전히 결합되었을 때의 전기적 신호 측정값을 100으로 환산했을 때의 상대적인 크기를 나타낸다. 도 5를 참조하면, 100nm의 자성 입자가 분리되고, 타겟 물질에 결합된 50nm의 자성 입자를 통해 타겟 물질의 정량화가 가능함을 알 수 있다.
이상, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예에는 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (16)

  1. 타겟 물질을 포함하는 바이오 물질을 준비하는 것;
    제 1 자성 입자와 상기 제 1 자성 입자보다 크기가 작은 제 2 자성 입자를 준비하는 것;
    상기 타겟 물질에 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들이 결합(bind)된 결합체를 형성하는 것;
    자석을 이용하여 상기 결합체에서 상기 제 1 자성 입자를 분리하는 것; 및
    상기 제 2 자성 입자와 결합된 상기 타겟 물질을 정량화하는 것을 포함하는 바이오 물질의 분석 방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 2 자성 입자의 자화 세기가 상기 제 1 자성 입자의 자화 세기보다 작은 바이오 물질의 분석 방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1 자성 입자의 직경은 100nm 내지 200nm이고, 상기 제 2자성 입자의 직경은 10nm 내지 100nm인 바이오 물질의 분석 방법.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1 및 제 2 자성 나노 입자들은 Fe, Mn, Ni, Co 중 적어도 어느 하나를 포함하는 바이오 물질의 분석 방법.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1 및 제 2 자성 입자들은 항원-항체 반응에 의해 상기 타겟 물질과 결합되는 바이오 물질의 분석 방법.
  6. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1 자성 입자는 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride) 화학적 반응 또는 단백질 결합에 의해 상기 타겟 물질과 결합되고,
    상기 제 2 자성 입자는 항원-항체 반응에 의해 상기 타겟 물질과 결합되는 바이오 물질의 분석 방법.
  7. 제 1 항에 있어서,
    상기 타겟 물질을 정량화하는 것은, GMR, SQUIDS, Mixed Frequency magnetic Detector 중 어느 하나를 이용하여 상기 제 2 자성 입자의 자화 세기를 측정하는 것인 바이오 물질의 분석 방법.
  8. 제 1 항에 있어서,
    상기 제 1 및 제 2 자성 입자들의 표면들에 상기 타겟 물질과 특이 반응하는 프로브 물질이 고정화된 바이오 물질의 분석 방법.
  9. 제 8 항에 있어서,
    상기 프로브 물질은 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들의 표면에 유도된 카르복실기(-COOH), 티올기(-SH), 하이드록실기(-OH), 실란기, 아민기(-NH2) 또는 에폭시기에 의해 고정화된 바이오 센서.
  10. 제 8 항에 있어서,
    상기 타겟 물질과 상기 프로브 불질의 특이 반응은, 항원-항체반응, 아비딘(Avidin)-바이오틴(biotin) 반응, 뉴트라아비딘(NeutrAvidin)-바이오틴(biotin) 반응, 스트렙트아비딘(StreptAvidin)-바이오틴(biotin) 반응, 상보적 관계에 있는 DNA(complementary DNA), 면역 글로불린 G(immunoglobulin G)-단백질 A(protein A), 단백질 G, 단백질 A/G, 단백질 L 간의 반응 중 적어도 어느 하나인 바이오 물질의 분석 방법.
  11. 제 1 항에 있어서,
    상기 타겟 물질은 단백질, 핵산, 세포, 바이러스, 유기 분자 및 무기 분자로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나인 바이오 물질의 분석 방법.
  12. 제 1 항에 있어서,
    상기 바이오 물질은 혈액, 혈장, 혈청, 림프, 골수액, 타액, 안구액, 정액, 뇌추출물, 척수액, 관절액, 흉선액, 복수 및 양막액으로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나인 바이오 물질의 분석 방법.
  13. 타겟 물질을 포함하는 바이오 물질 준비하는 것;
    서로 다른 자화 세기를 갖는 제 1 및 제 2 자성 입자들을 준비하는 것;
    상기 타겟 물질에 상기 제 1 및 제 2 자성 입자들이 결합된 결합체를 형성하는 것;
    자석을 이용하여 상기 결합체에서 상기 제 1 자성 입자를 분리하는 것; 및
    상기 제 2 자성 입자와 결합된 상기 타겟 물질을 정량화하는 것을 포함하는 바이오 물질의 분석 방법.
  14. 제 13 항에 있어서,
    상기 제 1 및 제 2 자성 입자들의 직경이 서로 다른 바이오 물질의 분석 방법.
  15. 제 13 항에 있어서,
    상기 제 1 자성 입자의 직경이 상기 제 2 자성 입자의 직경보다 큰 바이오 물질의 분석 방법.
  16. 제 13 항에 있어서,
    상기 타겟 물질을 정량화하는 것은, 상기 제 2 자성 입자의 자화 세기를 측정하는 것인 바이오 물질의 분석 방법.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101427146B1 (ko) * 2013-11-13 2014-08-07 단국대학교 산학협력단 생체 분자 분석 키트 및 이를 이용한 생체 분자 분석 방법
WO2016032035A1 (ko) * 2014-08-25 2016-03-03 연세대학교 산학협력단 다중 생체물질의 분리방법
WO2022139478A1 (ko) * 2020-12-23 2022-06-30 한국전자기술연구원 자성 입자를 포함하는 바이오센서용 작업 전극의 제조 방법, 이에 의해 제조된 전극 및 제조된 전극을 사용한 시료 내 바이오마커의 농도 측정 방법

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9146248B2 (en) 2013-03-14 2015-09-29 Intelligent Bio-Systems, Inc. Apparatus and methods for purging flow cells in nucleic acid sequencing instruments
US9591268B2 (en) 2013-03-15 2017-03-07 Qiagen Waltham, Inc. Flow cell alignment methods and systems
CN105788421B (zh) * 2016-04-13 2019-03-01 肇庆医学高等专科学校 吸痰训练模型
US20190185921A1 (en) * 2016-06-14 2019-06-20 Base4 Innovation Ltd Polynucleotide separation method
US10845449B2 (en) 2016-10-20 2020-11-24 Quantum Diamond Technologies Inc. Methods and apparatus for magnetic particle analysis using diamond magnetic imaging
EP3559668B1 (en) 2016-12-23 2023-07-19 Quantum Diamond Technologies Inc. Methods and apparatus for magnetic multi-bead assays
KR20180080396A (ko) 2017-01-02 2018-07-12 한국전자통신연구원 바이오 센서
CA3070975A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Colin B. CONNOLLY Methods and apparatus for sample measurement
US11262352B2 (en) 2018-07-20 2022-03-01 Cornell University Magnetic separation of biological entities from fluid sample
CN112921028A (zh) * 2019-12-06 2021-06-08 深圳华大基因科技服务有限公司 Dna纯化方法、基因组dna的提取方法、测序方法和试剂盒
CN112067388A (zh) * 2020-09-07 2020-12-11 苏州英芮诚生化科技有限公司 一种血浆中脂溶性维生素高通量检测前处理方法、试剂盒

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1210461A4 (en) * 1999-08-21 2005-11-23 John S Fox DETECTION WITH HIGH SENSITIVITY OF BIOMOLECULES USING MAGNETIC PARTICLES
KR100823684B1 (ko) * 2006-12-06 2008-04-21 한국전자통신연구원 바코드 ｄｎａ를 이용한 생물학적 표적 물질의 검출 방법
CA2772020A1 (en) * 2009-08-31 2011-03-03 Mbio Diagnostics, Inc. Integrated sample preparation and analyte detection
EP2541230A1 (en) * 2011-06-30 2013-01-02 Koninklijke Philips Electronics N.V. Detection of clusters of magnetic particles

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101427146B1 (ko) * 2013-11-13 2014-08-07 단국대학교 산학협력단 생체 분자 분석 키트 및 이를 이용한 생체 분자 분석 방법
WO2016032035A1 (ko) * 2014-08-25 2016-03-03 연세대학교 산학협력단 다중 생체물질의 분리방법
WO2022139478A1 (ko) * 2020-12-23 2022-06-30 한국전자기술연구원 자성 입자를 포함하는 바이오센서용 작업 전극의 제조 방법, 이에 의해 제조된 전극 및 제조된 전극을 사용한 시료 내 바이오마커의 농도 측정 방법

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