KR20110093016A - Composition for preventing or improving diabetes containing fermented salicornia herbacea and the use thereof - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 함초 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병에 대한 치료, 개선 또는 예방 효과가 있는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition having a therapeutic, ameliorating or prophylactic effect on diabetes comprising a seaweed fermented product as an active ingredient.
대부분의 생물은 병균, 해충 또는 바이러스 등의 생물학적 스트레스나 지구 환경 악화에 따라 생기는 각종 환경 스트레스를 받고 있다. 생물에 이러한 각종 스트레스가 가해지는 경우, 생명 유지에 필수적으로 요구되는 산소는 반응성이 높아 심각한 생리적 장애 등을 유발하는 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)이 과다하게 증가하게 된다. 상기 과다 활성산소종은 노화를 촉진하는 원인이 되는 것으로 인식되고 있으며, 다양한 질병의 원인이 되는 것으로 보고되어 있다.Most organisms are subjected to various environmental stresses caused by biological stresses such as germs, pests or viruses, or deterioration of the global environment. When these stresses are applied to living organisms, oxygen, which is essential for life maintenance, is highly reactive, causing excessive increase in reactive oxygen species (ROS), which causes serious physiological disorders. The excess reactive oxygen species is recognized to be a cause for promoting aging, and has been reported to cause a variety of diseases.
구체적으로, 상기 활성산소종 또는 자유라디칼은 세포를 파괴하거나 피부 진피층의 결합조직을 절단하거나 교차 결합을 일으키므로 주름형성, 아토피성 피부염, 여드름 또는 피부암과 같은 피부 관련 이상현상뿐만 아니라 암, 심근경색증(myocardial infarction), 뇌졸중(stroke), 죽상동맥경화증(atherosclerosis) 등을 포함하는 심혈관계 질환, 근위축측삭경화증(amyotrophic laternal sclerosis)이나 파킨스씨 병(Parkinson's disease, PD)과 같은 퇴행성 신경질환(chronic neurodegenerative disease), 류마티스성 관절염 등의 여러 질병의 원인이 되는 것으로 보고되어 있다.Specifically, the reactive oxygen species or free radicals destroy cells, cut connective tissue of the dermal layer of the skin, or cause cross-linking, thereby causing skin-related abnormalities such as wrinkles, atopic dermatitis, acne or skin cancer, as well as cancer and myocardial infarction. cardiovascular diseases, including myocardial infarction, stroke, and atherosclerosis, and degenerative neurological diseases such as amyotrophic laternal sclerosis or Parkinson's disease (PD) chronic neurodegenerative disease, rheumatoid arthritis and other diseases have been reported.
또한, 활성산소종은 인체 내에서 지질을 과산화시켜 과산화지질이라고 하는 해로운 물질을 생성할 수 있으며, 상기 과산화지질은 혈관에 작용하여 동맥경화나 혈정과 같은 각종 성인병의 원인이 되는 것으로 보고되어 있다.In addition, reactive oxygen species can produce a harmful substance called lipid peroxide by peroxidizing lipids in the human body, and the lipid peroxide acts on blood vessels and causes various adult diseases such as arteriosclerosis and blood serum.
생체 내에는 이러한 활성산소종을 제거하는 시스템으로 슈퍼 옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase, SOD, EC 1. 15. 1. 1), 퍼옥시다제(peroxidase, POD), 카탈라제(catalase, CAT) 등의 고분자 항산화 효소와 비타민 C, 비타민 E 또는 글루타치온(glutathione) 등의 항산화 물질 등이 존재한다.It is a system that removes these active oxygen species in the living body, such as superoxide dismutase (SOD,
그러나, 공해나 자외선 또는 상기 생물학적 스트레스를 포함하는 여러 원인 및 노화에 의해서 점차적으로 인체의 항산화체계는 정상 작동을 하지 못하게 되며, 이러한 경우 항산화 물질을 섭취함으로써 방어할 수 있도록, 활성산소종을 제거할 수 있는 물질 즉, 항산화제의 체내 공급이 요구되고 있다.However, due to pollution, ultraviolet rays or various causes including the biological stress and aging, the antioxidant system of the human body gradually becomes unable to operate normally, and in this case, the active oxygen species can be removed to protect by ingesting antioxidants. There is a need for an in vivo supply of a substance that is capable of antioxidants.
종래에 뛰어난 항산화력을 지닌 합성 항산화제로는 BHA(butylated hydroxyanisole), BHT(butylated hydroxytoluene) 또는 TBHQ(tertiary butylhydropuinone) 등이 보고되어 있다.Conventionally, synthetic antioxidants having excellent antioxidant power have been reported, such as butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT) or tertiary butylhydropuinone (TBHQ).
그러나 상기 합성 항산화제는 체내 흡수 물질의 일부가 독성을 지니고 있어, 기형발생인자 및 발암 물질화될 수 있고(Ito, et al., 1983), 간 비대증을 유발하거나 간장 중 마이크로소말 효소활성(microsomal enzyme activity)을 증가시킬 수 있으며, 폐나 신장 등의 장기 조직의 병리적인 해를 유발시키는(Branen, 1975) 등의 안전성 문제가 제기되고 있다.However, the synthetic antioxidants are toxic to some of the absorbent substances in the body and can be teratogenic factors and carcinogens (Ito, et al ., 1983), which may cause hepatomegaly or increase microsomal enzyme activity in the liver, and cause pathological damage to organ tissues such as lungs and kidneys (Branen, 1975). Is being raised.
따라서, 근래에는 보다 인체에 안전하고, 항산화력이 뛰어난 항산화제를 개발하기 위한 많은 연구가 진행되고 있다. 이러한 연구의 일환으로 천연 항산화제에 대한 많은 연구가 진행되고 있다. 보다 상세하게, 현대인들의 안전에 대한 의식과 건강에 대한 욕구의 증가와 함께 천연 항산화제를 포함한 식품의 섭취가 활성산소종에 의한 질병의 발병률을 저하시킬 수 있다는 연구보고가 축적되면서, 천연 항산화제에 대한 관심이 고조되고 있다.Therefore, in recent years, many studies have been conducted to develop an antioxidant that is safer to the human body and excellent in antioxidant power. As part of this research, many studies on natural antioxidants are underway. More specifically, with the growing awareness of modern people's safety and health needs, natural antioxidants have been accumulating, as studies have reported that food intake, including natural antioxidants, can reduce the incidence of diseases caused by reactive oxygen species. There is a growing interest in.
천연 식물을 대상으로 항산화 효과를 탐색하는 등의 지속적인 천연 항산화제에 대한 연구 결과, 많은 천연 항산화 성분들이 보고 되고 있다.As a result of continuous research on natural antioxidants such as searching for antioxidant effects on natural plants, many natural antioxidant components have been reported.
현재까지 보고된 천연 항산화성분들로는 천연 항산화제로서 프라보노(flavone) 유도체, 이소프라본(isoflavone), 페놀릭산(phenolic acids), 토코페롤, 사포닌(saponin) 또는 트립신 저해제(trypsin inhibitor) 등이 항산화 물질로 보고되었다(Hayes et al., 1977).Natural antioxidants reported to date include antioxidants such as flavono derivatives, isoflavones, isoflavones, phenolic acids, tocopherols, saponins or trypsin inhibitors. Reported by Hayes et al ., 1977).
이러한 연구 결과와 함께, 활성산소종에 의한 질병의 예방 및 노화 방지를 위하여, 항산화 성분이 다량 포함되어 있거나 항산화능이 우수한 것으로 보고되어 있고, 식품으로 이용할 수 있거나 식품에 포함될 수 있는 천연 추출물에 대한 연구 또는 개발의 요구가 증가되고 있다.Along with these findings, studies on natural extracts containing high amounts of antioxidants or excellent anti-oxidant properties, which can be used as foods or included in foods, for the prevention of diseases caused by reactive oxygen species and prevention of aging Or the demand for development is increasing.
한편, 인슐린은 혈당을 낮추도록 조절하는 호르몬으로, 혈액 내 포도당의 농도가 증가되면 췌장에서 인슐린 분비가 증가되어 포도당을 조직 내로 유입시켜 혈액 내에 일정 농도의 포도당 농도를 유지하는 역할을 한다.On the other hand, insulin is a hormone that regulates blood sugar, and when the concentration of glucose in the blood is increased, insulin secretion is increased in the pancreas and glucose is introduced into the tissue to maintain a certain concentration of glucose in the blood.
정상인의 경우 체내 인슐린 감수성(효과)과 인슐린 분비가 균형을 이루어 혈당이 항상 정상 범위 내에서 조절된다. 그러나 인슐린이 결핍되거나, 감수성이 저하되면 혈중의 당분을 이용하지 못해 혈액 내 인슐린의 농도가 증가한다. 또한 인슐린에 대한 체내 감수성이 떨어져 인슐린 저항성이 증가하게 된다. 상기 인슐린 저항성은 골격근·지방세포·간장에서 인슐린의 주요한 작용인 당의 흡수 촉진 작용이 약한 상태로 이어진다. 이러한 인슐린 저항성에 의해 체내에 있는 인슐린의 양이 같은 정도이더라도 혈당 강하 작용이 약해지고, 이에 따라 혈당을 정상으로 유지하기 위해서는 더욱 많은 인슐린을 필요로 한다. 이에 따라 인슐린 저항성을 보충하기 위하여 다량의 인슐린이 체내에 분비되는 현상을 고인슐린 혈증(hyperinsulinemia)이라고 한다. 또한, 인슐린의 과잉분비는 식욕을 높여 지방합성을 촉진할 뿐만 아니라 지방분해를 억제하여 비만을 유도할 수 있다.In normal people, the body's insulin sensitivity (effect) and insulin secretion are balanced so that blood sugar is always regulated within the normal range. However, when insulin is deficient or susceptible to susceptibility, blood sugar cannot be used to increase the concentration of insulin in the blood. In addition, the body's susceptibility to insulin is reduced, increasing insulin resistance. The insulin resistance leads to a weak state of promoting the absorption of sugar, which is the main action of insulin in skeletal muscle, fat cells, and liver. Due to such insulin resistance, even if the amount of insulin in the body is about the same, the blood glucose lowering action is weakened, and accordingly, more insulin is required to maintain blood sugar normal. Accordingly, the phenomenon in which a large amount of insulin is secreted into the body to supplement insulin resistance is called hyperinsulinemia. In addition, excessive secretion of insulin increases appetite and promotes fat synthesis as well as inhibits lipolysis, thereby inducing obesity.
상기 체내 인슐린 감수성과 인슐린 분비의 균형이 깨어지는 경우, 즉 인슐린이 결핍되거나 인슐린 감수성이 저하되어 혈중의 당분을 이용하지 못해 혈당 조절이 되지 아니하여 소변에 포도당을 배출하는 당대사 이상 질환을 당뇨병이라 한다.When the balance between insulin sensitivity and insulin secretion in the body is broken, that is, insulin deficiency or insulin sensitivity is lowered, the glucose metabolism abnormality disease that causes glucose to be discharged in the urine due to the inability to use blood sugar is not called diabetes mellitus. do.
상기 당뇨병은 크게 제1형 당뇨병과 제2형 당뇨병으로 구분된다.The diabetes is largely divided into
상기 제1형 당뇨병 즉, 인슐린 의존형 당뇨병은 인슐린을 분비하는 췌장 베타 세포(β-cell)의 손상으로 인하여 인슐린의 생산과 분비가 감소하여 발생한다. 상기 제1형 당뇨병을 치료하기 위해서는 일반적으로 외부에서 인슐린을 투여하여 혈당을 낮추고 있다. 상기 제2형 당뇨병 즉, 인슐린 비의존형 당뇨병은 혈당이 정상 이상으로 높아진 상태를 말하며, 근육, 지방 및 간 등의 말초조직에서 인슐린 작용의 저하와 췌장에서의 인슐린 분비의 균형이 깨어졌을 때 발생한다. 대부분의 당뇨병 환자는 제2형 당뇨병으로 진행되기 이전에 인슐린 저항성과 고인슐린 혈증을 나타낸다. 즉, 제2형 당뇨병은 초기 혈당을 낮추는 인슐린의 작용이 저하되어, 말초조직에서 당을 효과적으로 흡수하지 못하고 에너지로 활용하지 못하는 인슐린 저항성이 발생되며, 이로 인해 유발되는 고혈당을 낮추기 위해 인슐린 분비량이 증가되는 고인슐린 혈증이 나타난다. 이를 극복하지 못하면 결국 제2형 당뇨병으로 진행된다. 우리나라의 경우, 최근 10년 동안 제2형 당뇨병 환자의 수가 증가되고 있다.The
세계보건기구(WHO)는 전세계 당뇨병환자의 수는 2000년의 경우 약 1억 5천만 명이고, 2010년에는 약 2억 2천만 명에 이를 것이라고 보고하였다. 우리나라의 경우, 부적절한 생활습관 및 비만인구의 증가로 인하여 당뇨병 환자가 현재 400만 명에 당하여 전체 인구의 약 10%를 차지하고 있다.The World Health Organization (WHO) reports that the number of diabetic patients worldwide will be about 150 million in 2000 and about 220 million in 2010. In Korea, due to inadequate lifestyles and an increase in the obese population, the number of diabetics is currently 4 million, accounting for about 10% of the total population.
현재 당뇨병 및 당뇨성 합병증을 치료하기 위해 설폰요소제 등을 포함한 인슐린 분비 촉진제, 치아졸리딘다이온 등과 같은 인슐린 감작제 또는 당분해효소, 구체적으로 알파-글루코시다아제 억제제의 처방이 주를 이루고 있으며, 이러한 경구용 약제의 효과가 없을 때 인슐린을 처방하고 있다. 이 중, 알파-글루코시다아제 억제제는 소장의 알파-글루코시다아제 및 췌장의 알파-아밀레이즈를 억제하여 복합 탄수화물의 소화를 감소시킴으로써 포도당의 흡수를 지연시켜 탄수화물 섭취에 의한 식후 혈당상승을 감소시킬 수 있고, 인슐린 분비를 증가시키지 않으므로, 저혈당의 위험이 없다는 장점이 있다. 즉, 알파-글루코시다아제를 억제할 수 있는 물질은 저혈당의 부작용 없이 당뇨병 또는 당뇨병 합병증의 치료 또는 예방에 응용될 수 있다.In order to treat diabetes and diabetic complications, the predominance of insulin secretion accelerators including sulfonurea agents, insulin sensitizers such as chiazolidinedione, or glycolytic enzymes, specifically alpha-glucosidase inhibitors, is mainly used. Insulin is prescribed when the drug does not work. Among these, alpha-glucosidase inhibitors reduce the digestion of complex carbohydrates by inhibiting alpha-glucosidase in the small intestine and alpha-amylase in the pancreas, thereby delaying the absorption of glucose and reducing the postprandial blood sugar rise due to carbohydrate intake. And does not increase insulin secretion, so there is no risk of hypoglycemia. In other words, a substance capable of inhibiting alpha-glucosidase may be applied to the treatment or prevention of diabetes mellitus or diabetic complications without the side effects of hypoglycemia.
상기한 다양한 당뇨병 치료제는 대부분 인공적으로 제조한 화합물에 해당하는 것으로서, 이들의 경우 부작용의 문제나 내성의 문제가 있으므로, 이를 대체할 수 있는 천연물질 유래 당뇨병 치료제의 개발이 요구되고 있다. 즉, 체중 증가 등의 부작용이 없고, 장기간 사용하여도 내성이나 안정성에 대한 문제가 대두되어지지 아니한 천연물질 유래의 당뇨병 또는 당뇨병 합병증 관련 질병 치료 또는 예방용 조성물을 개발하는 것이 시급한 실정이다.Most of the various antidiabetic agents correspond to artificially manufactured compounds, and in these cases, there is a problem of side effects or resistance, and thus, there is a demand for development of a diabetic therapeutic agent derived from a natural substance that can replace the diabetic agents. That is, it is urgent to develop a composition for treating or preventing diseases related to diabetes mellitus or diabetes complications derived from natural substances which do not have side effects such as weight gain and have not raised problems with resistance or stability even after long-term use.
상기와 같은 요구에 부응하기 위하여, 본 발명은 알파-글루코시다아제를 효과적으로 저해하여, 당뇨병의 치료, 예방 또는 개선에 유용하고 식용으로 사용될 수 있는 천연식물에서 비롯하여 부작용 등이 문제되지 아니하고, 안전성이 우수한 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.In order to meet such demands, the present invention effectively inhibits alpha-glucosidase, so that side effects, including natural plants, which are useful for the treatment, prevention or improvement of diabetes and can be used for food, are not a problem, and safety is It is an object to provide an excellent composition.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 알파-글루코시다아제를 효과적으로 저해할 수 있을 뿐만 아니라 천연물에서 비롯하여 부작용 등이 문제되지 아니한 함초 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a composition for treating or preventing diabetes including not only effective inhibition of alpha-glucosidase, but also a seaweed fermented product having no adverse effects such as natural products as an active ingredient. .
또한, 본 발명은 함초 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 개선 또는 예방용 식품조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a food composition for improving or preventing diabetes comprising a fermented seaweed as an active ingredient.
본 발명자들은 식품으로 이용되는 천연식물의 경우 부작용이나 내성 등과 관련된 안전성이 문제될 가능성이 기존 화학적으로 합성된 약물에 비하여 훨씬 적다는 점에 착안하여, 천연식물 유래 조성물의 약리효과에 대해 연구하던 중, 함초 발효물이 자유 라디칼 소거능, 구체적으로 DPPH를 통한 실험 및 ABTS radical 소거능을 통하여 확인한 결과, 항산화능이 우수하고, 당분해효소, 구체적으로 알파-글루코시다아제를 통하여 확인한 결과 혈당강하효과가 뛰어난 것으로 확인되었으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 상기 약학 조성물은 당뇨병을 치료, 예방 또는 개선할 수 있다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The present inventors have been investigating the pharmacological effects of natural plant-derived compositions, taking note that, in the case of natural plants used as foods, the possibility of safety related side effects or resistance is much less than that of conventional chemically synthesized drugs. , The fermented fermented soybean paste was found to be free radical scavenging, specifically through experiments with DPPH and ABTS radical scavenging, and had excellent antioxidant activity, and glycolytic enzymes, specifically alpha-glucosidase, showed excellent blood sugar lowering effects. Since it has been confirmed, the pharmaceutical composition comprising this as an active ingredient has been confirmed that the treatment, prevention or improvement of diabetes has completed the present invention.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명은 함초 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the treatment or prevention of diabetes, comprising a seaweed fermented product as an active ingredient.
본 발명에서 함초(Salicornia herbacea)란 명아주과에 속하는 한해살이풀로, 퉁퉁마디라고도 한다. 상기 함초는 한국 특히, 한국의 서해안, 일본, 중국 및 인도 등지에 분포하며, 주로 바닷가 구체적으로, 바닷물이 드나드는 갯벌 근처나 내륙 염분지에서 무리지어 자란다. 줄기는 육질이고 원기둥 모양이며, 가지가 마주 달리고, 퇴화한 비늘잎이 마주 달리며, 마디가 튀어나와 있어서, 이 때문에 퉁퉁마디라고 불리운다. 꽃은 8월 내지 9월에 녹색으로 피고, 가지의 위쪽 마디 사이의 오목한 곳에 3개씩 달린다. 열매는 포과로서 녹색이며 가을에는 붉은 빛을 띤 자주색이 되고, 납작한 달걀 모양이고 10월에 익는데, 화피로 싸이고 검은 종자가 들어 있다.In the present invention, Salicornia herbacea is a perennial herb belonging to the family of the family Dwarf , it is also referred to as tongsu. The seaweeds are distributed in Korea, especially on the west coast of Korea, Japan, China, and India, and mainly grow in the seaside, in particular, near tidal flats where seawater enters or in inland salt basins. Stems are fleshy, cylindrical, branched, degenerate scales facing each other, and nodes stick out, which is why they are called spurs. Flowers bloom green in August-September and hang in three recesses between upper nodes of branches. Fruits are red, green, reddish purple in autumn, flat egg shape, ripen in October, covered with bark, and contain black seeds.
상기 함초는 전라남도, 구체적으로 전라남도 갯벌지역에서 자생하는 함초를 채취, 일 예로 10월에 채취한 후, 유수로 세척하여 갯벌이나 이물질을 제거한 것일 수 있다.The seaweed may be collected in the Jeollanam-do, specifically Jeollanam-do tidal flat area, and collected in October, for example, and washed with running water to remove the tidal flat or foreign matter.
상기 함초 발효물은 바람직하게는 함초 당발효물일 수 있다. 상기 함초 당발효물은 함초의 당발효법에 의한 발효물일 수 있고, 구체적으로 함초를 당 저장법으로 저장한 후, 발효공정을 수행하여 제조할 수 있다.The seaweed fermentation product may preferably be a seaweed sugar fermentation product. The persimmon sugar fermentation product may be a fermentation product by the sugar fermentation method of the persimmon, specifically, after storing the persimmon in a sugar storage method, it can be prepared by performing a fermentation process.
당 저장법이란 염장법이나 산 저장법과 함께 대표적인 음식의 저장법에 해당하는 것으로 설탕에 절이는 방법을 말하며, 구체적으로 전체 식품 또는 조성물의 당 또는 설탕의 농도를 50%(w/w) 이상 유지시켜 식품에 곰팡이나 세균 등의 발육을 억제시켜 부패를 방지하는 방법을 의미한다. 일반적으로, 잼, 젤리 또는 가당연유 등을 만드는데 사용될 수 있다.Sugar storage method refers to a typical food storage method along with salting method or acid storage method, and refers to a method of marinating sugar. Specifically, the concentration of sugar or sugar in the whole food or composition is maintained at least 50% (w / w) to mold the food. B means a method of preventing corruption by inhibiting the growth of bacteria and the like. Generally, it can be used to make jam, jelly or sweetened condensed milk.
본 발명의 함초 발효물은 일 예로, 세수한 함초와 설탕을 혼합하고, 10 내지 30℃에서 발효시켜 제조할 수 있다. 상기 함초와 설탕은 중량비를 기준으로 1:1 (w/w) 내지 0.9:1.1(w/w), 바람직하게는 1:1(w/w)의 혼합비로 혼합할 수 있고, 상기 발효는 상기 함초와 설탕의 혼합물을 발효용기에 담아 밀봉한 다음 10 내지 30℃, 바람직하게는 20 내지 27℃, 더욱 바람직하게는 25℃에서 40개월 내지 80개월, 바람직하게는 45개월 내지 51개월, 더욱 바람직하게는 47개월 내지 49개월 동안 발효시켜 제조할 수 있다. 상기 10℃ 미만에서는 유용 미생물의 성장이 잘 되지 않아, 발효가 진행되지 않고, 상기 30℃보다 높은 온도에서는 미생물의 성장이 너무 과하게 일어나거나 고온으로 인한 미생물 성장 장애가 있을 수 있으므로, 상기 발효 온도는 10 내지 30℃일 수 있다. 또한, 상기 발효기간은 상기 본 발명의 발효 온도에서 충분한 발효가 일어나, 함초가 갖는 본래 갖는 기능성이 더욱 강화될 수 있도록 45개월 내지 51개월, 바람직하게는 47개월 내지 49개월일 수 있다. 상기 발효단계는 일 예로, 상기 함초와 설탕을 중량비를 기준으로 1:1(w/w)의 혼합비로 혼합한 함초와 설탕의 혼합물을 발효용기에 담아 밀봉한 다음 25℃에서 1년간 발효시켜 1단계 발효물을 제조하는 과정; 상기 1단계 발효물에 불용성 물질을 제거하는 과정 및 상기 불용성 물질을 제거한 1단계 발효물을 발효용기에 담아 밀봉한 다음 25℃에서 3년간 발효시키는 과정으로 수행할 수 있다.Fertilizer fermentation of the present invention, for example, can be prepared by mixing the washed with the seaweed and sugar, fermentation at 10 to 30 ℃. The seaweed and sugar may be mixed in a mixing ratio of 1: 1 (w / w) to 0.9: 1.1 (w / w), preferably 1: 1 (w / w) based on the weight ratio, and the fermentation may be The mixture of seaweed and sugar is put in a fermentation vessel and sealed, and then 40 to 80 months, preferably 45 to 51 months, more preferably at 10 to 30 ° C, preferably at 20 to 27 ° C, more preferably at 25 ° C. It may be prepared by fermentation for 47 to 49 months. Since the growth of useful microorganisms is less than 10 ° C., the fermentation does not proceed, and at a temperature higher than 30 ° C., the growth of microorganisms may occur too much or there may be a microbial growth disorder due to high temperature. To 30 ° C. In addition, the fermentation period may be 45 months to 51 months, preferably 47 months to 49 months so that sufficient fermentation occurs at the fermentation temperature of the present invention, so that the original functionality of the seaweeds can be further enhanced. In the fermentation step, for example, the mixture of seaweed and sugar mixed with a mixture ratio of 1: 1 (w / w) based on the weight ratio of the seaweed and sugar packed in a fermentation vessel and sealed and fermented for 1 year at 25 ℃ 1 Preparing a step fermentation product; Removing the insoluble material in the first step of the fermentation and the first step of removing the insoluble material in the fermentation vessel may be sealed and then fermented for 3 years at 25 ℃.
본 발명의 일 예로, 상기 함초 발효물은 상기 함초와 설탕을 중량비를 기준으로 1:1(w/w)의 혼합비로 혼합한 함초와 설탕의 혼합물을 발효용기에 담아 밀봉한 다음 25℃에서 1년간 발효시켜 1단계 발효물을 제조하는 과정; 상기 1단계 발효물에 불용성 물질을 제거하는 과정 및 상기 불용성 물질을 제거한 1단계 발효물을 발효용기에 담아 밀봉한 다음 25℃에서 3년간 발효시키는 과정을 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.As an example of the present invention, the fermented soybean paste contains the mixture of seaweed and sugar mixed in a mixture ratio of 1: 1 (w / w) based on the weight ratio of sugar and sugar in a fermentation vessel and then sealed at 25 ℃ 1 Fermentation for a year to produce a first stage fermented product; It can be prepared by a method comprising the step of removing the insoluble material in the first-stage fermentation and sealing the first-stage fermentation removes the insoluble material in a fermentation vessel and then fermented for 3 years at 25 ℃.
상기 함초 발효물은 바람직하게는 함초 발효물의 분획물, 더욱 바람직하게는 함초 당발효 분획물일 수 있다. 상기 함초 당발효 분획물은 함초 당발효물의 분획물을 의미한다.The seaweed fermentation may be preferably a fraction of the seaweed fermentation, more preferably a persimmon sugar fermentation fraction. The persimmon sugar fermentation fraction means a fraction of the persimmon sugar fermentation.
상기 함초 발효물의 분획물은 상기 함초 발효물에 분획용매를 이용하여 분획하여 제조할 수 있다.Fractions of the seaweed fermentation may be prepared by fractionation using the fraction solvent to the seaweed fermentation.
상기 분획용매는 물, 극성 유기용매, 비극성 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 상기 극성 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤 등일 수 있고, 상기 비극성 유기용매는 헥산, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 또는 디클로로메탄 등일 수 있다. 상기 분획용매는 바람직하게는 헥산, 클로로포름 및 부탄올로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 더욱 바람직하게는 헥산일 수 있다. 상기 분획용매는 상기 발효물 또는 발효물의 희석물(희석액)에 대하여 부피비를 기준으로 1:0.1(발효물:분획용매) 내지 1:10(발효물:분획용매)의 함량으로 가해질 수 있다.The fractional solvent may be water, a polar organic solvent, a nonpolar organic solvent or a mixed solvent thereof. The polar organic solvent may be an alcohol having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, ethyl acetate, acetone, and the like, and the nonpolar organic solvent may be hexane, chloroform, methylene chloride or dichloromethane. The fractional solvent may be at least one selected from the group consisting of hexane, chloroform and butanol, and more preferably hexane. The fractional solvent may be added in an amount of 1: 0.1 (fermented product: fractional solvent) to 1:10 (fermented product: fractional solvent) based on a volume ratio with respect to the fermentation product or diluent (diluent) of the fermentation product.
상기 분획물은 헥산, 클로로포름 및 부탄올로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 첨가하여 분배하는 방법으로 제조할 수 있다. 일 예로, 상기 분획물은 함초 발효물에 물을 첨가하여 현탁액을 제조한 후, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 순차적으로 가하여 분획함으로써 제조할 수 있고, 상기 분획은 분배법으로 수행할 수 있다.The fraction may be prepared by a method of distributing by adding one or more solvents selected from the group consisting of hexane, chloroform and butanol. For example, the fraction may be prepared by adding water to the fermented fermentation of the seaweed to prepare a suspension, and then fractionating by sequentially adding hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol, and the fraction may be performed by a distribution method.
상기 발효물의 분획물은 상기 분획과정을 수행하여 제조된 분획액에 대해 여과과정을 수행하거나 농축 및/또는 동결건조를 추가로 수행하여 제조할 수 있다. 상기 여과과정을 수행하여 분획액에 남아 있는 잔사 등을 제거할 수 있고, 상기 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 분획용매를 제거할 수 있다. 또한, 상기 농축은 감압농축기를 이용하여 수행할 수 있으며, 상기 감압농축 과정은 30 내지 70℃, 바람직하게는 40 내지 50℃의 조건에서 수행할 수 있다.Fractions of the fermentation may be prepared by performing a filtration process or the concentration and / or lyophilization for the fraction prepared by performing the fractionation process. By performing the filtration process it is possible to remove the residues and the like remaining in the fractionation liquid, it is possible to remove the fraction solvent by performing the concentration and / or lyophilization. In addition, the concentration may be carried out using a vacuum concentrator, the vacuum concentration process may be carried out under the conditions of 30 to 70 ℃, preferably 40 to 50 ℃.
상기 발효물의 분획물은 상기 발효물 또는 상기 발효물에 물에 첨가하여 희석한 희석액에 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 순차적으로 가하여 분획하면서 각 분획용매별 분획액을 얻은 후에, 상기 분획액을 감압 농축하여 제조할 수 있다.The fractions of the fermentation product were added to the fermentation product or the fermentation product by diluting the diluted solution with hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol in order to obtain a fraction solution for each fraction solvent, and then distilling the fraction solution under reduced pressure. It can be prepared by concentration.
본 발명의 일예로, 상기 함초 발효 분획물은 함초에 설탕을 첨가하고 45개월 내지 51개월 동안 발효시켜 함초 발효물을 제조하는 단계; 및 상기 발효물에 헥산, 클로로포름 및 부탄올로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상, 바람직하게는 헥산을 첨가하고 분배과정을 수행하는 방법으로 분획하는 분획단계를 포함하는 방법으로 제조된 것일 수 있다. 상기 발효물에 물을 첨가하여 희석하는 경우에는, 상기 함초 발효 분획물은 함초에 설탕을 첨가하고 45개월 내지 51개월 동안 발효시켜 함초 발효물을 제조하는 단계; 상기 함초 발효물에 물을 첨가하여 현탁액을 제조하는 단계; 및 상기 현탁액에 헥산, 클로로포름 및 부탄올로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상, 바람직하게는 헥산을 첨가하고 분배과정을 수행하는 방법으로 분획하는 분획단계를 포함하는 방법으로 제조된 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the fermentation fraction of the persimmon seaweed is added to the sugar and fermented for 45 months to 51 months to prepare a fermentation of seaweed; And hexane, chloroform and butanol to the fermentation may be prepared by a method comprising a fractionation step of fractionating by adding at least one selected from the group consisting of, preferably hexane and performing a partitioning process. When dilution by adding water to the fermentation, the fermentation fraction of the seaweed is added to the sugar and fermented for 45 months to 51 months to prepare a seaweed fermentation; Preparing a suspension by adding water to the seaweed fermentation; And a fractionation step of fractionating by adding at least one selected from the group consisting of hexane, chloroform and butanol, preferably hexane, and performing a partitioning process to the suspension.
또한, 상기 수득한 분획물은 사용 시까지 급속 냉동고(deep freezer)에 보관할 수 있다. 또한, 상기 분획물은 상기 수득된 분획액을 농축 및 동결건조를 통하여 용매를 완전히 제거시킨 것일 수 있으며, 상기 용매를 완전히 제거시킨 분획물은 분말형태로 사용하거나 상기 분획물을 상기 분획물 제조에 사용된 분획용매, 증류수 또는 통상의 용매에 녹여 사용할 수 있다.In addition, the obtained fractions can be stored in a deep freezer until use. In addition, the fraction may be a solvent obtained by completely removing the solvent through the concentration and the freeze-dried fraction obtained, the solvent is completely removed from the fraction used in the form of a powder or the fraction solvent used to prepare the fraction Can be used after being dissolved in distilled water or a common solvent.
본 발명에 따른 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물은 항산화 활성이 뛰어나고, 알파-글루코시다아제의 저해활성이 뛰어날 뿐만 아니라, 식용으로 사용될 수 있는 천연식물을 이용하여 제조한 것이므로 부작용 등이 문제되지 아니하고, 안전성이 우수하므로, 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물은 당뇨병의 치료 또는 예방을 위한 약학적 조성물의 유효성분 또는 당뇨병의 개선 및/또는 예방을 위한 식품 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.Seaweed fermentation or fractions of the seaweed fermentation according to the present invention is excellent in antioxidant activity, excellent in inhibitory activity of alpha-glucosidase, and prepared by using a natural plant that can be used for food, so no side effects, etc. Since the safety is excellent, the seaweed fermentation or fractions of the seaweed fermentation may be used as an active ingredient of a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of diabetes or an active ingredient of a food composition for the improvement and / or prevention of diabetes.
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물은 항산화활성이 뛰어날 뿐만 아니라, 알파-글루코시다아제를 저해할 수 있으므로, 알파-글루코시다아제 저해에 의한 당뇨병의 치료, 예방 또는 개선용 조성물로 사용될 수 있고, 상기 당뇨병 치료, 예방 또는 개선 기능과 관련하여, 상기 함초 발효물의 분획물은 바람직하게는 헥산, 클로로포름 또는 부탄올, 더욱 바람직하게는 헥산을 분획용매로 이용하여 제조된 것일 수 있다.The fermented fermented soybean or fractions of the fermented soybean fermentation not only have excellent antioxidant activity, but also inhibit alpha-glucosidase, and thus can be used as a composition for treating, preventing or improving diabetes by alpha-glucosidase inhibition. In relation to the diabetic treatment, prevention or improvement function, the fraction of the fertilizer fermentation may be prepared using preferably hexane, chloroform or butanol, more preferably hexane as a fraction solvent.
상기 당뇨병이란 이자에서의 인슐린 분비의 절대적 또는 상대적 부족이나, 세포들에 대한 인슐린의 생물학적 효과 감소로 인하여 즉, 인슐린이 결핍되거나 인슐린 감수성이 저하되어 발생되는 고혈당 상태 및 이에 수반되는 대사장애가 장기간 지속되는 상태로 특정지워지는 당대사 이상 질환을 의미한다.Diabetes is an absolute or relative lack of insulin secretion in the interest, but due to a decrease in the biological effect of insulin on the cells, that is, a hyperglycemic state caused by insulin deficiency or decreased insulin sensitivity and associated metabolic disorders for a long time Means a metabolic disorder that is specified as a condition.
상기 당뇨병은 크게 제1형 당뇨병과 제2형 당뇨병으로 구분된다. 상기 제1형 당뇨병 즉, '인슐린 의존형 당뇨병'은 인슐린을 분비하는 췌장 베타 세포(β-cell)의 선택적인 손상으로 인하여 인슐린의 생산과 분비가 감소하여 발생한다. 상기 제2형 당뇨병 즉, '인슐린 비의존형 당뇨병'은 어떤 이유로든 말초조직(간육, 지방, 간장)에 인슐린 저항성이 증가하였을 때, 이것을 감당할 만큼 베타세포의 인슐린 분비능력이 발휘되지 못할 경우에 발생한다.The diabetes is largely divided into
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물은 알파-글루코시다아제를 저해하여 장에서 당 소화와 포도당 흡수를 저해할 수 있으므로, 당뇨병의 치료, 개선 또는 예방 효과가 있다.The fermented seaweed fermentation or fractions of the seaweed fermentation can inhibit the digestion and glucose uptake in the intestine by inhibiting alpha-glucosidase, thereby treating, improving or preventing diabetes.
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물은 인간을 포함한 동물에 직접 적용될 수 있다. 상기 동물은 식물에 대응하는 생물군으로 주로 유기물을 영양분으로 섭취하고, 소화나 배설 및 호흡기관이 분화되어 있는 것을 말하며, 바람직하게는 포유류, 더욱 바람직하게는 인간일 수 있다.The diabetic fermentation product or the composition for treating or preventing diabetes comprising the fraction of the persimmon fermentation as an active ingredient can be directly applied to animals including humans. The animal is a biological group corresponding to plants, and mainly refers to the ingestion of organic matter as nutrients, digestion, excretion, and respiratory organs are differentiated, preferably mammals, and more preferably humans.
본 발명의 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물은 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물을 단독으로 포함할 수 있으며, 이외 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다.Diabetes treatment or prevention composition comprising a seaweed fermentation or a fraction of the seaweed fermentation of the present invention as an active ingredient may include only a seaweed fermentation or a fraction of the seaweed fermentation alone, depending on the formulation, method and purpose of use It may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent.
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물에 유효성분인 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물 외에 다른 성분이 첨가된 혼합물로 제공되는 경우, 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물 총 중량에 대하여 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 0.001 중량% 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 중량% 내지 99 중량 %, 더욱 바람직하게는 1 중량% 내지 50 중량% 포함할 수 있다.When provided with a mixture in which other ingredients other than the seaweed fermentation or the seaweed fermentation fraction as an active ingredient are added to the composition for treating or preventing diabetes comprising the seaweed fermentation or a fraction of the seaweed fermentation as an active ingredient, 0.001% by weight to 99.9% by weight, preferably 0.1% by weight, based on the total weight of the composition for treating or preventing diabetes comprising fermentation or fractions of the seaweed fermentation as an active ingredient. 99 wt%, more preferably 1 wt% to 50 wt%.
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물이 약제로 사용하는 경우 투여방법은 경구 또는 비경구 모두 가능하며, 일 예로는 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다.When the diabetic fermentation product or the composition for diabetic treatment or prophylaxis comprising the fraction of the persimmon fermentation as an active ingredient is used as a medicament, the administration method may be oral or parenteral, for example, oral, transdermal, subcutaneous, intravenous or Administration can be via several routes, including muscle.
또한, 상기 조성물의 제형은 사용방법에 따라 달라질 수 있으며, 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 본 발명이 속하는 기술분야에 알려진 방법을 채택하여 제형화될 수 있다.In addition, the formulation of the composition may vary depending on the method of use and may be formulated by employing methods known in the art to provide rapid, sustained or delayed release of the active ingredient after administration to a mammal. Can be.
일반적으로는, 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제(TABLETS), 알약, 연질 또는 경질 캅셀제(CAPSULES), 환제(PILLS), 산제(POWDERS) 및 과립제(GRANULES) 등이 포함되고, 이러한 제제는 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제(SUSTESIONS), 내용액제, 리모나데제(LIMONADES), 유제(EMULSIONS) 및 시럽제(SYRUPS) 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.Generally, solid preparations for oral administration include tablets, pills, soft or hard capsules (CAPSULES), pills (PILLS), powders (POWDERS) and granules (GRANULES), and the like. Excipients, for example, may be prepared by mixing starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used. Liquid preparations for oral use include suspensions, liquids, limonades, emulsions, and syrups. In addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin, Excipients such as wetting agents, sweetening agents, fragrances, preservatives and the like can be included.
또한, 비경구투여를 위한 형태는 크림(CREAM), 로션제(LOTIONS), 연고제(ONITMENTS), 안연고제, 경고제(PLASTERS), 액제(LIQUIDS AND SOULTIONS), 에어로솔제(AEROSOLS), 유동엑스제(FRUIDEXTRACTS), 엘릭서(ELIXIR), 침제(INFUSIONS), 향낭(SACHET), 리니멘트제(LINIMENTS), 패취제(PATCH) 또는 주사제(INJECTIONS) 등의 형태일 수 있다.In addition, for parenteral administration, creams, lotions, creams, ointments, eye creams, warnings, liquids, aerosols, fluids, etc. (FRUIDEXTRACTS), ELIXIR, INFUSIONS, SACHET, LINIMENTS, PATCH or INJECTIONS.
더 나아가, 본 발명의 조성물은 당해 기술 분야의 공지된 적절한 방법을 사용하여 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 제형화될 수 있다.Furthermore, the compositions of the present invention may be formulated using suitable methods known in the art or using methods disclosed in Remington's Pharmaceutical Science (Recent Edition, Mack Publishing Company, Easton PA). Can be.
상기 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자이리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아키시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀루로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이드, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀, 생리식염수로 이루어진 군에서 선택된 1 이상 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용가능하다.Pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents according to the formulation, method of use and purpose of use are lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xyitol, erythritol, maltitol, starch, akicia rubber, alginate, gelatin, calcium Phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, dextrin, calcium carbonate, It may be one or more selected from the group consisting of propylene glycol, liquid paraffin, saline, but is not limited thereto, and any conventional carrier, excipient or diluent may be used.
또한, 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물을 약제화하는 경우, 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 계면활성제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 더욱 포함할 수 있으며, 경구 또는 비경구 모두 사용할 수 있으나, 바람직하기로는 경구 투여용으로 할 수 있다. 구체적으로 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럼제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.In addition, when pharmaceuticalizing a composition for treating or preventing diabetes comprising the seaweed fermentation product or a fraction of the seaweed fermentation as an active ingredient, conventional fillers, extenders, binders, disintegrants, surfactants, anti-coagulants, lubricants, wetting agents , Fragrances, emulsifiers or preservatives may be further included, and can be used orally or parenterally, but preferably for oral administration. Specifically, solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, and sucrose in the extract. (sucrose), lactose (lactose), gelatin, etc. are mixed and prepared. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used. Liquid preparations for oral use include suspensions, solvents, emulsions, and serums.In addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin, various excipients include, for example, wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives. Can be.
본 발명에 따른 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물의 투여량은, 투여방법, 복용자의 연령, 성별 및 체중, 및 질환의 중증도 등을 고려하여 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 일예로, 본 발명의 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물은 1일 유효성분의 함량 즉, 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물의 함량을 기준으로 0.0001 mg/kg(체중) 내지 1000 mg/kg(체중)으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 mg/kg(체중) 내지 100 mg/kg(체중)으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Dosage of the composition for the treatment or prevention of diabetes comprising the seaweed fermentation product or the fraction of the seaweed fermentation according to the present invention as an active ingredient, taking into account the method of administration, the age, sex and weight of the recipient, and the severity of the disease, etc. It may be appropriately selected by those skilled in the art. For example, the diabetic treatment or prevention composition comprising the fractions of the seaweed fermentation or the seaweed fermentation of the present invention as an active ingredient content of the daily active ingredient, that is, the content of the fractions of the seaweed fermentation or the seaweed fermentation It can be administered from 0.0001 mg / kg (body weight) to 1000 mg / kg (body weight) as a standard, to 0.01 mg / kg (body weight) to 100 mg / kg (body weight) to be more effective. Administration may be administered once a day or may be divided several times. The dosage does not limit the scope of the invention in any aspect.
또한, 본 발명의 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물은, 상기 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물 이외에 공지의 항당뇨효과를 갖는 화합물 또는 식물 추출물을 더욱 포함할 수 있으며, 함초 발효물 100 중량부에 대하여 각각 5 중량부 내지 20 중량부로 포함될 수 있다.In addition, the composition for the treatment or prevention of diabetes comprising the seaweed fermentation or fractions of the seaweed fermentation of the present invention as an active ingredient, the compound or plant extract having a known anti-diabetic effect in addition to the fractions of the seaweed fermentation or seaweed fermentation further It may include, and may be included in 5 parts by weight to 20 parts by weight with respect to 100 parts by weight of seaweed fermentation.
또한, 본 발명은 함초 발효물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 식품 조성물의 예로는 식품, 식품첨가제, 음료 또는 음료첨가제를 들 수 있다.In addition, the present invention relates to a food composition for improving or preventing diabetes, comprising a seaweed fermented product as an active ingredient. Examples of the food composition of the present invention include food, food additives, beverages or beverage additives.
상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물은 그 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.The diabetic fermentation product or the diabetic fermentation or food fraction for diabetic containing a fraction of the fermentation as an active ingredient may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the preparation thereof.
본 명세서에서 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.In the present specification, the term "food" means a natural product or processed product containing one or more nutrients, and preferably means a state in which it can be directly eaten through some processing process. It is intended to include all foods, food additives, health functional foods and beverages.
본 발명의 식품 조성물의 유효성분인 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물이 포함될 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.Examples of the food that may contain the fermented fertilizer or fractions of the fermented soybean fermentation which are the active ingredients of the food composition of the present invention include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, functional foods, and the like. In addition, the food in the present invention includes special nutritional products (e.g., prepared oils, infants, baby food, etc.), processed meat products, fish products, tofu, jelly, noodles (e.g. ramen, noodles, etc.), health supplements, seasoned foods ( For example, soy sauce, miso, red pepper paste, mixed soy sauce), sauces, confectionery (e.g. snacks), dairy products (e.g. fermented milk, cheese, etc.), other processed foods, kimchi, pickles (various kimchi, pickles, etc.), beverages ( Examples include, but are not limited to, fruits, vegetable drinks, soy milk, fermented beverages, ice cream, etc., natural seasonings (eg, ramen soup, etc.), vitamin complexes, alcoholic beverages, alcoholic beverages, and other health supplements. The food, beverage or food additive may be prepared by a conventional production method.
본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능, 보다 구체적으로 항당뇨기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.Functional food in the present invention is the control of biological defense rhythm, disease prevention and recovery of food groups or food compositions that have added value to the food by using physical, biochemical, biotechnological techniques, etc. It refers to food processed and designed to fully express the gymnastics function, and more specifically antidiabetic function in the living body. The functional food may include food acceptable food additives, and may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of functional foods.
본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 5 내지 12g일 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.In the present invention, the drink is a generic term for drinking to quench thirst or to enjoy the taste and is intended to include a functional drink. The beverage contains, as an essential ingredient, the fermented fermentation product or the fraction of the fermentation product as an active ingredient, and there are no special limitations on the other ingredients, and various flavors or natural carbohydrates are added as in general drinks. It may contain as a component. Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and other disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and Sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The ratio of the natural carbohydrate may generally be about 1 to 20 g, preferably 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention. It may further contain a pulp for.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기 첨가제는 본 발명의 유효성분인 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물 100 중량부 당 0 내지 20 중량부, 바람직하게는 0.00001 내지 15 중량부 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.In addition to the above, the composition of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese and chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid and its Salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. These components can be used independently or in combination. The additive may be 0 to 20 parts by weight, preferably 0.00001 to 15 parts by weight, per 100 parts by weight of the seaweed fermentation or the fraction of the seaweed fermentation as an active ingredient of the present invention, but is not limited thereto.
본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.Functional beverage in the present invention is a biological defense rhythm control, disease prevention and the like having a beverage group or a beverage composition that has added value to the beverage by using physical, biochemical, biotechnological techniques, etc. to function and express the function of the beverage to a specific purpose Means a beverage that is designed and processed to fully express the gymnastics function related to recovery.
상기 기능성음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 유효성분인 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 중량부 내지 20 중량부, 바람직하게는 1 중량부 내지 18 중량부, 더욱 바람직하게는 5 중량부 내지 12 중량부 포함될 수 있다.The functional beverage is not particularly limited to other ingredients except for containing the above-mentioned seaweed fermentation product or the fraction of the seaweed fermentation, which are the active ingredients of the present invention as essential ingredients in the indicated ratios, and various flavors or natural carbohydrates as in general beverages. Etc. can be contained as an additional component. Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and other disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and xylitol Sugar alcohols such as sorbitol and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The natural carbohydrate may be included in an amount of 0 to 20 parts by weight, preferably 1 to 18 parts by weight, more preferably 5 to 12 parts by weight, per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
또한, 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물에 있어서, 상기 함초 발효물 또는 상기 함초 발효물의 분획물의 양은 전체 식품 중량의 0.00001 중량% 내지 50 중량%로 포함될 수 있으며, 음료 조성물의 경우 식품 전체의 부피 100 ml 를 기준으로 0.001 g 내지 50 g, 바람직하게는 0.01 g 내지 10 g의 비율로 포함될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.In addition, in diabetic fermentation or food composition for diabetic improvement or prevention comprising a fraction of the seaweed fermentation as an active ingredient, the amount of the seaweed fermentation or the fraction of the seaweed fermentation is 0.00001% to 50% by weight of the total food weight It may be included as, in the case of a beverage composition may be included in a ratio of 0.001 g to 50 g, preferably 0.01 g to 10 g based on 100 ml of the total volume of the food, but is not limited thereto.
본 발명의 조성물은 항산화 활성이 우수하고, 알파-글루코시다제를 저해하여 장에서 당 소화와 포도당 흡수를 저해할 수 있을 뿐만 아니라, 식용으로 사용되는 천연식물로부터 제조된 것이므로 안전성에 문제가 없어, 당뇨병 질환을 갖는 환자 또는 상기 질병의 위험성이 있는 환자에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단된다.The composition of the present invention is excellent in antioxidant activity, inhibits alpha-glucosidase and inhibits glucose digestion and glucose absorption in the intestine, and is prepared from natural plants used for food, so there is no problem in safety. It is believed that the present invention can be usefully used in patients with diabetes or at risk for the disease.
또한, 본 발명은 당뇨병 개선 또는 예방 효과가 있는 함초 발효물의 분획물 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for producing a fraction of the seaweed fermentation has an effect of improving or preventing diabetes.
상기 당뇨병의 개선 또는 예방 효과가 있는 함초 발효물의 분획물 제조방법은 a) 함초를 유수로 세척하여 갯벌이나 이물질을 제거하는 함초 세척 단계; b) 상기 세척된 함초와 설탕을 중량비를 기준으로 1:1로 혼합하고, 상기 혼합물을 발효용기에 담고 밀봉하여, 20 내지 27℃, 바람직하게는 25℃에서 1년간 발효시켜 1단계 발효물을 제조하는 1단계 발효물 제조 단계; c) 상기 1단계 발효물로부터 불용성 물질을 제거한 후, 다시 발효용기에 담고 밀봉하여 20 내지 27℃, 바람직하게는 25℃에서 3년간 발효시켜 2단계 발효물을 제조하는 2단계 발효물 제조 단계 및 d) 상기 2단계 발효물에 물을 첨가하여 현탁액을 제조한 후, 헥산을 가하여 분획하는 방법으로 헥산 분획을 제조하는 단계를 포함하는 것일 수 있다.Method for producing a fraction of the seaweed fermented product having an improvement or prevention effect of diabetes mellitus comprises: a) a seaweed washing step to remove the mud flats or foreign matter by washing the seaweed with running water; b) mixing the washed seaweed and sugar at a weight ratio of 1: 1, the mixture is placed in a fermentation vessel and sealed, and fermented at 20 to 27 ° C., preferably at 25 ° C. for 1 year, to give a first-stage fermentation product. A
상기 방법에 의하여 제조된 함초 당발효 헥산 분획물은 다른 분획물에 비하여 항산화 활성이 뛰어날 뿐만 아니라, 알파-글루코시다제 저해능이 우수하여, 당뇨병 환자 또는 이러한 위험성이 있는 경우에 유용하게 사용될 수 있다는 장점이 있다.The persimmon sugar fermented hexane fraction prepared by the above method is not only excellent in antioxidant activity compared to other fractions, but also has an alpha-glucosidase inhibitory ability, and thus may be useful in diabetic patients or when there is such a risk. .
본 발명의 함초 발효물 또는 함초 발효물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 항산화활성이 우수하고, 알파-글루코시다제를 저해하여 장에서 당 소화와 포도당 흡수를 저해할 수 있으므로 당뇨병의 치료, 개선 및 예방 효과 우수할 뿐만 아니라, 인공 화합물질이 주를 이루는 기존의 당뇨병 치료제와 달리 천연물질에서 유래된 물질을 유효성분으로 하는 것으로 부작용의 문제가 발생되지 아니하여 당뇨병을 치료, 개선 또는 예방하기 위한 식품 조성물 또는 의료용 조성물로 유용하게 사용될 수 있고, 나아가 우리나라 서해안 특히, 전라남도 해안지역의 갯벌에서 풍부하게 자생되는 함초를 원료로 하는 것이므로 경제성도 우수하다는 장점이 있다. 따라서, 본 발명의 조성물은 기존의 화학적으로 제조된 당뇨병에 대한 치료 또는 개선용 물질을 대체할 수 있다는 점에서 관련 사업에 폭 넓게 이용될 수 있다.The composition comprising the persimmon fermentation or fractions of the fermentation of the present invention as an active ingredient is excellent in antioxidant activity, and can inhibit glucose digestion and glucose absorption in the intestine by inhibiting alpha-glucosidase, thereby treating and improving diabetes. In addition to the excellent prevention effect, and unlike the existing diabetic drugs mainly composed of artificial compounds as an active ingredient derived from natural substances as an active ingredient to treat, improve or prevent diabetes without the problem of side effects It can be usefully used as a food composition or a medical composition, and furthermore, since it is made from raw seaweed, which is abundantly grown in the tidal flats of the west coast of Korea, especially in the Jeollanam-do coastal region, it has the advantage of excellent economic efficiency. Therefore, the composition of the present invention can be widely used in the related business in that it can replace the substance for the treatment or improvement for existing chemically manufactured diabetes.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른, 함초 발효물의 분획물을 제조하기 위하여 수행한 분획과정을 나타낸 순서도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른, 발효 기간에 따른 함초 발효물의 알파-글루코시다제 저해능을 비교한 그래프로, FG-02는 2년간 발효시킨 함초 발효물을 나타내고, FG-04는 4년간 발효시킨 함초 발효물을 나타내며, FG-06은 6년간 발효시킨 함초 발효물을 나타낸다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른, 함초 발효물의 분획물의 항당뇨능을 확인하기 위하여, 분획용매의 종류에 따른 분획물의 알파-글루코시다아제 저해능을 비교한 그래프이다.
도 4은 본 발명의 일 실시예에 따른, 함초 발효물의 분획물의 항산화능을 분획용매의 종류에 따라 확인한 그래프로, 도 4a는 분획용매의 종류에 따른 분획물의 DPPH 자유라디칼 소거능을 비교한 그래프이고, 4b는 분획용매의 종류에 따른 분획물의 ABTS 라디칼 소거능을 비교한 그래프이다.1 is a flow chart showing the fractionation process performed to prepare a fraction of the seaweed fermentation, according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a graph comparing alpha-glucosidase inhibitory ability of fermented soybeans with fermentation periods according to an embodiment of the present invention. FG-02 represents a fermented soybean fermented for 2 years, and FG-04 is 4 It represents the seaweed fermentation fermented for a year, and FG-06 represents the seaweed fermentation fermented for 6 years.
Figure 3 is a graph comparing the alpha-glucosidase inhibitory ability of the fractions according to the type of fraction solvent in order to confirm the anti-diabetic activity of the fractions of the seaweed fermentation according to an embodiment of the present invention.
Figure 4 is a graph confirming the antioxidant capacity of the fractions of the fermented seaweed fermentation according to an embodiment of the present invention according to the type of fraction solvent, Figure 4a is a graph comparing the DPPH free radical scavenging ability of the fractions according to the type of fraction solvent , 4b is a graph comparing the ABTS radical scavenging ability of the fraction according to the fraction of the solvent.
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위하여 제조예 및 실시예를 제시한다. 그러나, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 예시한 것을 뿐, 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 예들에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the preparation examples and examples are presented in order to explain the present invention in more detail. However, the following Preparation Examples and Examples are merely illustrated to aid the understanding of the present invention, and may be modified in various other forms, and the scope of the present invention is not limited to the following Examples.
<실시예 1> 함초 발효물 및 함초 당발효 분획물의 제조Example 1 Preparation of Seaweed Fermentation and Seaweed Sugar Fermentation Fraction
본 발명에 사용한 함초(Salicornia herbacea)는 10월에 전남 갯벌지역에서 자생하는 함초를 채위하였다. 본 발명의 함초발효액은 상기 함초를 2년, 4년 또는 6년간 상온에서 발효시킨 것이다.The sea urchin ( Salicornia herbacea ) used in the present invention was inhabited in the native seagrass in Chonnam tidal flat in October. The fermented soybean paste of the present invention is fermented at room temperature for 2 years, 4 years or 6 years.
보다 구체적으로, 전남 갯벌지역에서 자생하는 함초를 10월에 채취한 다음, 깨끗한 물에 3회 세척하여 갯벌이나 이물질을 제거하였다. 상기 세척 후, 물기를 제거한 함초 1 kg에 설탕 1 kg을 혼합하여 발효용기에 담아 밀봉한 다음 25℃에서 1년간 발효시켰다. 상기 1년이 경과한 후, 발효용기에서 발효된 발효물 중, 불용성 함초를 제거하여 남은 발효액을 발효용기에 담고 다시 밀봉한 다음 25℃에서 1년, 3년 및 5년간 발효 및 숙성시켰다.More specifically, the native seaweed was collected in October in Jeonnam tidal flat area, and then washed three times in clean water to remove the tidal flat or foreign matter. After the washing, 1 kg of dried seaweed was mixed with 1 kg of sugar, sealed in a fermentation vessel, and then fermented at 25 ° C. for 1 year. After 1 year, the fermented product fermented in the fermentation vessel, the insoluble seaweed was removed, the remaining fermentation broth was put in the fermentation vessel and sealed again, and then fermented and aged at 25 ° C. for 1 year, 3 years and 5 years.
상기 제조된 함초 당발효물에 대한 분획물의 제조는 각 용매별로 다음과 같은 방법으로 수행하였다.Preparation of the fractions for the prepared persimmon sugar fermentation was carried out in the following manner for each solvent.
우선, 상기 제조된 총 4년간 발효시킨 함초 당발효액 1,500ml에 물 500ml를 첨가하여 현탁액을 제조한 후, 상기 현탁액에 노르말 헥산(n-hexane) 2,000ml를 첨가하고 분배하여, 노르말 헥산 층을 수득하였다. 상기 노르말 헥산 층을 제거한 후, 남은 수용액 층에 클로로포름(chloroform, CHCl3) 2,000ml를 첨가하고 분배하여, 클로로포름 층을 수득하였다. 상기 클로로포름 층을 제거한 후, 남은 수용액 층에 에틸아세테이트(ethyl acetate, EtOAc) 2,000ml를 첨가하고 분배하여, 에틸아세테이트 층을 수득하였다. 상기 에틸아세테이트 층을 제거한 후, 남은 수용액 층에 수포화 노르말 부탄올(n-butanol, BuOH) 1,000ml를 첨가하고 분배하여, 노르말 부탄올 층을 수득하였다. 상기 노르말 부탄올 층을 제거하고 남은 수용액을 물 분획층으로 수득하였다.First, a suspension is prepared by adding 500 ml of water to 1,500 ml of the persimmon sugar fermentation broth fermented for 4 years, and then adding 2,000 ml of n-hexane to the suspension and partitioning to obtain a normal hexane layer. It was. After removing the normal hexane layer, 2,000 ml of chloroform (CHCl 3 ) was added to the remaining aqueous layer and partitioned to obtain a chloroform layer. After removing the chloroform layer, 2,000 ml of ethyl acetate (ethyl acetate, EtOAc) was added to the remaining aqueous layer and partitioned to obtain an ethyl acetate layer. After removing the ethyl acetate layer, 1,000 ml of saturated normal butanol (n-butanol, BuOH) was added to the remaining aqueous layer and partitioned to obtain a normal butanol layer. The normal butanol layer was removed and the remaining aqueous solution was obtained as a water fraction layer.
상기 발효기간에 따른 발효액과 상기 발효액의 각각의 분획용매로 얻어진 헥산 분획층, 클로로포름 분획층, 에틸아세테이트 분획층, 부탄올 분획층 및 물 분획층은 각각 cooling aspirator(CCA-1110, Eyela, 일본)가 장착된 vaccum evaporator를 사용하여 40℃에서 감압 농축하였다.
The hexane fractionation layer, the chloroform fractionation layer, the ethyl acetate fractionation layer, the butanol fractionation layer and the water fractionation layer obtained by each of the fermentation broths and the fractional solvents of the fermentation broth according to the fermentation period were respectively cooled aspirators (CCA-1110, Eyela, Japan). Concentrated under reduced pressure at 40 ℃ using a vaccum evaporator equipped.
<< 실시예Example 2> 2> 함초Hamcho 발효물의Fermented 항당뇨Anti-diabetic 활성 activation 확인1OK1 - 발효기간에 따른 활성 -Activity according to fermentation period
상기 실시예 1에서 제조된 2년, 4년 및 6년간 발효시킨 함초 당발효액의 항당뇨 활성은 알파-글루코시다제 효소에 대한 저해능으로 확인하였다. 상기 알파-글루코시다제에 대한 저해능의 측정은 다음과 같은 방법으로 수행하였다.The antidiabetic activity of the fermented sugar fermentation broth fermented for 2 years, 4 years, and 6 years prepared in Example 1 was confirmed as an inhibitory effect on alpha-glucosidase enzyme. The inhibition of the alpha-glucosidase was measured by the following method.
우선, 상기 알파-글루코시다제에 대한 저해능은 효모 유래의 알파-글루코시다제(α-glucosidase, Sigma, USA)를 이용하여 측정하였다. 보다 상세하게는, 상기 실시예 1에서 제조된 발효기간에 따른 각각의 함초 당발효물 10μL에 반응용액(100mM phosphate(pH 7.0), 2g/L BSA(bovine serum albumin) 및 0.2g/L NaNO3) 50μL와 효소 용액(최종농도 0.7 U) 50 μL을 가하여 혼합하였다. 이들 혼합용액에 파라-니트로페닐 알파-디-글루코사이드(p-nitrophenyl α-D-glucoside, 5 mM, 50 μL)을 가하여 37℃의 배양기에서 5분간 효소반응을 시켜 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 측정된 흡광도 결과로부터, 발효물을 첨가하지 않았을 때 알파-글루코시다제의 활성을 100%로 하여, 각 발효물을 첨가한 경우 저해정도를 비교하여 알파-글루코시다제 저해능을 구하였으며, 구해진 저해능을 도 2에 나타내었다.First, the inhibitory ability against the alpha-glucosidase was measured using a yeast-derived alpha-glucosidase (α-glucosidase, Sigma, USA). More specifically, the reaction solution (100mM phosphate (pH 7.0), 2g / L BSA (bovine serum albumin) and 0.2g / L NaNO 3 in 10μL of each persimmon sugar fermentation according to the fermentation period prepared in Example 1 ) 50 μL and 50 μL of enzyme solution (final concentration 0.7 U) were added and mixed. Para-nitrophenyl alpha-di-glucoside (5 mM, 50 μL) was added to these mixed solutions, followed by enzymatic reaction for 5 minutes in an incubator at 37 ° C. and absorbance at 405 nm. From the measured absorbance results, the activity of alpha-glucosidase was 100% when no fermentation was added, and the inhibition of alpha-glucosidase was determined by comparing the degree of inhibition when each fermentation was added. Inhibitory activity is shown in FIG. 2.
상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 2년간 발효시킨 당 발효물에 비하여 4년간 발효시킨 당 발효물과 6년간 발효시킨 당 발효물의 알파-글루코시다제에 대한 저해능이 우수한 것이 확인되었다. 한편, 4년간 발효시킨 발효물과 6년간 발효시킨 발효물의 알파-글루코시다제 저해능은 거의 유사한 것으로 확인되었다. 발효물의 제조비용 및 제조기간은 발효기간에 의해 가장 큰 영향을 받으므로, 발효기간의 단축은 발효물의 제조공정에 있어서 경제적인 효과가 매우 크다할 것이다. 따라서, 실제 발효물의 알파-글루코시다제 저해능 즉, 항당뇨효과의 차이가 없는 4년간 발효시킨 발효물은 6년간 발효시킨 발효물에 비하여 발효공정이란 측면에서 매우 경제적이므로, 결과적으로 4년간 발효시킨 발효물이 바람직한 것으로 확인되었다. 따라서, 이하 분획물에 대한 실험에서는 총 발효기간이 4년인 당 발효물에 대해 실험을 수행하였다.
As shown in FIG. 2, it was confirmed that the sugar fermentation product fermented for 4 years and the sugar fermentation product fermented for 6 years and alpha-glucosidase were superior to the sugar fermentation product fermented for 2 years. On the other hand, the alpha-glucosidase inhibitory ability of the fermented product fermented for 4 years and the fermented product fermented for 6 years was found to be almost similar. Since the production cost and the production period of the fermentation are most affected by the fermentation period, the shortening of the fermentation period will have a great economic effect in the manufacturing process of the fermentation product. Therefore, fermented products fermented for 4 years without any difference in the anti-diabetic effect of alpha-glucosidase, that is, are more economical in terms of fermentation process than fermented products for 6 years. Fermentation was found to be preferred. Therefore, in the experiments on the following fractions, the experiment was performed on sugar fermentation products having a total fermentation period of 4 years.
<실시예 3> 함초 발효물(분획물)의 항당뇨 활성 확인Example 3 Confirmation of Antidiabetic Activity of Seaweed Ferment (Fragment)
상기 실시예 2에서 확인된 바에 따라, 실시예 1에서 제조된 4년차 당 발효물의 분획물의 항당뇨 활성을 알파-글루코시다제 효소에 대한 저해능으로 확인하였다. 상기 알파-글루코시다제에 대한 저해능의 측정은 상기 실시예 2와 같은 방법으로 수행하였다.As confirmed in Example 2, the antidiabetic activity of the fraction of the fourth-year sugar fermentation prepared in Example 1 was confirmed as an inhibitory activity against alpha-glucosidase enzyme. The inhibition of the alpha-glucosidase was measured in the same manner as in Example 2.
측정된 흡광도 결과는 시료 대신 증류수를 첨가한 대조군의 활성과 측정된 활성을 비교하여 알파-글루코시다제 효소의 저해능으로 나타내었고, 상기 각 분획물의 알파-글루코시다제 효소 저해능을 비교한 값을 도 3에 나타내었다.The measured absorbance results are shown as the inhibitory activity of alpha-glucosidase enzyme by comparing the activity of the control group with distilled water instead of the sample and the measured activity. FIG. 3 is shown.
상기 도 3에 나타낸 바와 같이, 알파-글루코시다제에 대한 저해능은 헥산 분획층이 가장 우수하였다. 에틸아세테이트층이 가장 낮았으며, 물 분획층이 20% 미만의 저해능을 나타난데 비하여, 헥산 분획층은 물 분획층의 약 150% 이상의 저해능을 나타내었고, 클로로포름 분획층 및 부탄올 분획층에 비해서도 약 25% 가량 저해능이 높은 것으로 확인되어, 헥산 분획층의 항당뇨 효과가 현저하게 우수한 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 3, the inhibitory ability against alpha-glucosidase was the best in the hexane fractionation layer. The ethyl acetate layer was the lowest, the water fractionation layer showed less than 20% inhibition, whereas the hexane fractionation layer showed more than about 150% inhibition of the water fractionation layer, and about 25% compared to the chloroform and butanol fractionation layers. It was confirmed that the% inhibition ability was high, and the antidiabetic effect of the hexane fractionation layer was remarkably excellent.
<실시예 4> 함초 발효물(분획물)의 항산화 활성 확인Example 4 Confirmation of Antioxidant Activity of Seaweed Ferment (Fragment)
상기 실시예 1에서 제조된 함초 당발효 분획물의 항산화 활성은 DPPH 자유라디칼 소거능 및 ABTS 라디칼 소거능으로 확인하였다. 상기 항산화활성은 각각 다음과 같은 방법으로 수행하였다.Antioxidant activity of the persimmon sugar fermentation fraction prepared in Example 1 was confirmed by DPPH free radical scavenging ability and ABTS radical scavenging ability. The antioxidant activity was performed in the following manner, respectively.
상기 DPPH 자유라디칼 소거능은 상기 각각의 분획물에 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4, 400 μL)와 500 μM DPPH ethanol 용액(최종농도 100 μM, 500 μL)을 가하여 voltex mixer로 가볍게 혼합한 다음, 암소에서 30분간 반응시켰다. 상기 반응을 수행한 반응액의 흡광도를 spectrophotometer(UV-Visible, Varian)를 이용하여 517 nm에서 측정하였고 그 결과를 도 4a에 나타내었다.The DPPH free radical scavenging ability was mixed lightly with a voltex mixer by adding 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4, 400 μL) and 500 μM DPPH ethanol solution (
또한, ABTS 라디칼 소거능은 ABTS 라디칼 용액을 이용하여 확인하였다. 상기 ABTS 라디칼 용액은 1.0 mM의 2,3‘-azobis(2-amidino-propane) dihydrochloride (AAPH)를 phosphate-buffered saline(PBS)에 녹인 2.5 mM의 ABST와 혼합한 후, 70℃의 항온조에서 30분간 반응시켜 제조하였다. 상기 PBS는 100mM potassium phosphate buffer(pH 7.4)로서 150mM NaCl을 포함한 용매를 사용하였다. 이때, Blue-green ABST radical의 농도는 spectrophotometer를 사용하여 734 nm에서 0.7±0.02(mean ± SD)가 되도록 조정하였다. 상기 각 분획물 20uL와 980uL ABST radical용액을 혼합한 후, 37℃에서 일정한 시간동안 반응을 시키면서, 734 nm에서 감소하는 흡광도 정도를 측정하여 시료의 ABST라디칼 소거활성능을 조사하였고 그 결과를 도 4b에 나타내었다. 대조군은 상기 분획물 대신 100% 메탄올 20 uL을 혼합하였다.In addition, ABTS radical scavenging ability was confirmed using the ABTS radical solution. The ABTS radical solution was mixed with 2.5 mM ABST dissolved in 1.0
상기 도 4에 나타낸 바와 같이, 헥산 분획층과 클로로포름 분획층이 항산화 활성이 뛰어난 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로, 도 4a 나타낸 바와 같이, DPPH 자유라디칼 소거능은 헥산 분획층, 클로로포름 분획층 및 에틸아세테이트층의 경우 농도의존적으로 상승하는 것으로 확인되었고, 특히 헥산 분획층이 가장 우수하여, 최종 농도를 기준으로 클로로포름 분획층에 비하여 약 1.5배, 에틸아세테이트 분획층에 비하여 약 2배 가량 항산화활성이 우수한 것으로 확인되었다. 또한, 도 4b에 나타낸 바와 같이, ABST라디칼 소거능의 경우, 클로로포름 분획층이 가장 우수하였고, 헥산 분획층이 다음으로 우수한 것으로 확인되었다. 부탄올 분획층과 물 분획층은 항산화활성이 매우 낮았고, 에틸아세테이트 분획층을 기준으로 비교하면, 헥산 분획층은 에틸아세테이트 분획층의 약 약 150%, 클로로포름 분획층의 경우 약 200%의 항산화활성이 있는 것으로 확인되었다.As shown in FIG. 4, the hexane fractionation layer and the chloroform fractionation layer were found to have excellent antioxidant activity. More specifically, as shown in Figure 4a, the DPPH free radical scavenging ability was confirmed that the concentration-dependent increase in the hexane fraction layer, chloroform fraction layer and ethyl acetate layer, in particular the hexane fraction layer is the best, based on the final concentration It was confirmed that the antioxidant activity was about 1.5 times higher than that of the chloroform fractionation layer and about 2 times higher than the ethyl acetate fractionation layer. In addition, as shown in Figure 4b, in the case of ABST radical scavenging ability, the chloroform fractionation layer was the best, the hexane fractionation layer was confirmed to be the next excellent. The butanol fraction and the water fraction were very low in antioxidant activity. Compared with the ethyl acetate fraction, the hexane fraction was about 150% of the ethyl acetate fraction and about 200% in the chloroform fraction. It was confirmed that there is.
상기 결과로부터 함초 당발효물의 헥산 분획층 및 클로로포름 분획층이 항산화 효과가 다른 분획층에 비하여 현저하게 우수한 것으로 확인되었다.From the above results, it was confirmed that the hexane fraction layer and the chloroform fraction layer of the persimmon sugar fermentation were remarkably superior to the other fraction layers with antioxidant effects.
Claims (4)
상기 함초 발효물은 상기 함초 발효물에 헥산을 첨가하여 분획한 함초 발효 분획물인 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물.The method of claim 1,
The fermented fertilizer is a composition for treating or preventing diabetes mellitus is a fermentation fraction fractionated by adding hexane to the fermentation.
상기 함초 발효 분획물은
함초에 설탕을 첨가하고 45개월 내지 51개월 동안 발효시켜 함초 발효물을 제조하는 단계; 상기 함초 발효물에 물을 첨가하여 현탁액을 제조하는 단계; 및 상기 현탁액에 헥산을 첨가하고 분배과정을 수행하는 방법으로 분획하는 분획단계
를 포함하는 방법으로 제조된 것임을 특징으로 하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물.The method of claim 2,
The seaweed fermentation fraction is
Adding sugar to the seaweed and fermenting for 45 to 51 months to prepare a fermentation of seaweed; Preparing a suspension by adding water to the seaweed fermentation; And fractionation step of fractionating by adding hexane to the suspension and performing a distribution process.
Diabetic treatment or prevention composition, characterized in that it is prepared by a method comprising a.
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---|---|---|---|---|
WO2017043914A3 (en) * | 2015-09-09 | 2017-05-18 | Phyto Corporation | Pharmaceutical composition comprising salicornia spp. as an active ingredient for the prevention or treatment of thrombosis, and health functional food comprising the same |
-
2010
- 2010-02-11 KR KR1020100012790A patent/KR20110093016A/en not_active Application Discontinuation
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