KR19990078610A

KR19990078610A - 피부보호용조성물

Info

Publication number: KR19990078610A
Application number: KR1019990026753A
Authority: KR
Inventors: 김현준
Original assignee: 김현준; 주식회사 인터코즘바이오텍
Priority date: 1999-07-03
Filing date: 1999-07-03
Publication date: 1999-11-05
Also published as: CA2281430A1; JP2001039859A; ITMI991884A1; IT1314186B1; ITMI991884A0; FR2794366A1

Abstract

본 발명은 세라마이드(Ceramide) 및 스핀고리피드(Sphingolipid)의 효능을 충분히 발휘하기 위해 피부세포막과 동일한 조성물 및 구조적 성질을 갖는 피부보호(Skin Care)용 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.

본 발명의 조성물은 각질층 세포간 주요성분인 세라마이드, 콜레스트롤, 지방산을 비롯하여 피부내피 세포막의 주성분인 레시틴, 트리글리세라이드 및 생리활성물질인 피토스핀고신 혹은 그 유도체로 구성되어 있다.

본 발명에 의해 제조된 피부 보호용 조성물은 세라마이드가 피부세포막과 다른 조성물로 혼합된 제품에 비해 부작용이 없고 피부 침투성과 보습력이 월등히 뛰어난 결과를 보였다. 이는 본 발명의 조성물이 피부 각질층의 수분손실을 크게 감소시켜 피부장벽 기능을 향상시킴으로서 보습효과가 뛰어남을 입증하는 것이라 할 수 있다. 또한 다른 소수성(hydrophobic) 혹은 수용성의 치료활성 성분 (Therapeutic Active Ingrediens)과 상용성이 좋을 뿐만 아니라 약물 전달성이 뛰어나 여드름이나 피부상처 치유에도 효과가 큰 것으로 입증되었다.

Description

피부 보호용 조성물 {Skin Care Composition For Improvement Of The Water-retaing Capacity Of The Skin And Restoration Of a Damaged Skin}

본 발명은 사람의 피부세포간(Intercellular)에 존재하는 생체막과 동일한 지질 조성물과 구조적 성질을 가진 피부 보호용 조성물에 관한 것이다.

건강한 피부상태를 유지하기 위한 가장 바람직한 피부 응용 제품을 개발하기 위해서는 피부의 구조와 피부세포의 생체막 조성물 및 물리적 성질을 충분히 이해 하는 것이 바람직하다.

피부의 구조는 기저층(Basal layer)으로부터 각화세포(Keratinocyte Cell)의 분화에 따라 내피(Dermis), 외피(Epidermis), 각질층(Stratum Corneum) 으로 분류된다.

피부세포간 조성물은 지질 이중층(Lipid Lamellar Bilayer) 구조로 되어 있고 피부층에 따라 지질 조성물이 변하고 있다.

특히 피부 최외각층인 각질층은 외부의 물리 화학적인 환경으로부터 일차적으로 피부를 보호하는 기능뿐만 아니라 내부의 수분 손실을 방지하는 중요한 피부장벽(Skin Barrier) 기능을 하고있다. 건조한 피부는 여러 가지 피부질환의 원인이 되므로 피부가 보습력을 유지하도록 하는 것이 피부 보호의 기본이다.

또한 피부는 수많은 외부의 미생물로부터 노출되어 있고 피부가 정상적인 상태(Normal Bacterial Flora)로 유지하기 위한 피부 조성물이 각질층에 있는 것으로 알려져 있다. [Tannock, G.W., in "Normal Microflora"(Eds. Chapman & Hall), pp 3~8, 1995].

따라서 각질층 세포간에 존재하는 지질 조성물과 이들의 물리화학적 성질과 생물학적 기능을 규명하는 연구가 지난 10년간 진행되어 왔다.

일반적으로 인지질(Phospholipids)은 세포간 조성물에 있어서 지질 이중층을 형성하는 중요한 성분이나 피부 외곽층으로 갈수록 세포막의 조성물에는 인지질의 함량이 줄어들고 세라마이드(Ceramide)의 함량이 증가되어 피부보호기능을 하는 각질층의 세포간 지질 조성물은 세라마이드가 40%, 콜레스트롤(Cholesterol)이25%, 지방산이 25%, 콜레스트롤술페이트(cholesterolsulfate)가 10%로 구성된다.

세라마이드는 각질층의 수분의 손실방지와 손상된 피부 보호층을 복원하는 중요한 성분으로 알려져 있다.

세라마이드의 전구체중 하나인 피토스핀고신(Phytosphingosine)은 각질층에 존재하는 함량은 적으나 미생물로부터 피부를 정상상태로 유지해 주는 항생제 역할을 하는 것으로 최근에 알려 지고 있다.(Bibel, D.J. et al.: "Topical sphingolipids in antisepsis and antifungal threapy:Clinical and Experimental Dermatology" 1995;20, pp 395-400. -Bibel, D.J. et al.:"Antimicrobial Activity of Stratum Corneum Lipids from Normal and Essential fatty Acid-Deficient Mice":J Invest Dermatol 92:632-638,1989. - Bibel, D.J. et al.: "Antimicrobial Activity of Sphingosines:J Invest Dermatol 98: 269-273, 1992)

또한 아토피성 피부병(Atopic dermatitis)등 여러 피부질병이 각질층의 지질보호막을 구성하는 지질조성의 비정상적인 변화에 기인하는 것으로 알려지면서 세포막의 중요 성분인 세라마이드, 콜레스트롤, 지방산을 복합한 제품의 개발이 Dermatology분야와 화장품분야의 새로운 경향을 나타내고 있다.(Mao-Qiang M.Feingold KR. Thornfeldt CR, Elias PM:"Optimization of physilogical lipid mixtures for barrier repair. J Invest Dermatol 106:1096-1101, 1996)

이런 연유로 인해 각질층의 지질과 피토스핀고신을 이용한 피부 보호용 제품의개발에 많은 연구가 이루어지고 있다. 이들 물질이 충분히 생리적 활성을 나타내기 위해서는 각질층을 통과하여 인지질로 구성된 피부내피 세포막을 통과하여야 한다. 이를 위해서는 피부세포막과 유사한 구조를 갖는 지질층(Lipid Lamellar) 제품을 개발해야 한다.

그러나 세라마이드 및 피토스핀고신의 소수성(Hydrophobic)으로 인하여 용해성(Solubility)이 낮고 결정화되기가 쉽기 때문에 사용량에 제한이 따르고, 프로필렌글리콜/에탄올과 같은 피부에 적합하지 않은 용제와 여러 가지 첨가제의 사용으로 인하여 부작용 및 피부 투과성에 문제점이 초래되었다.(-De Paepe K, Vandamme P, Roseeuw D, Rogiers V:Ceramides/Cholesterol/free fatty acids containing cosmetics: The effect on the barrier function. S?W-Journal 122:199-204, 1996. - de Groot AC, Weyland JW, Nater JP: Unwanted effects of cosmetics and drugs used in dermatology. In: de Groot AC, Weyland JW, Nater JP(eds.). Elsevier, Amsterdam, 1994, 3rd. ed, pp 770).

이런 문제점을 해결하기 위해 용해성 및 사용성이 뛰어난 세라마이드와 유사한 슈도세라마이드(Pseudo Ceramide)를 합성한 제품이 나오고 있지만 이들 제품은 피부에 쉽게 축적되고 생분해가 되지 않는다는 단점이 있었다.

따라서 피부에 미치는 세라마이드 및 피토스핀고신의 효능을 충분히 발휘하기 위해서는 어떤 특별한 제제(Formulation)가 요구되어지며, 이런 문제점들을 해결하기 위한 방안으로써 본 발명자는 피부친화력이 우수한 즉, 피부세포막과 동일한 조성 과 구조적 성질을 가진 피부보호용 조성물을 개발하게 되었다.

이와 같이 본 발명에서는 피부세포막에 존재하는 천연물질만을 이용하고 프로필렌글리콜/에탄올(Propylene glycol/ethanol)과 같은 용제나 합성계면 활성제를 사용하지 않음으로써 피부친화성이 높고 부작용이 없는 조성물을 개발할 수 있게 되었다.

본 발명에 사용한 세라마이드는 스핀고신(Sphingosine), 스핀가닌(Sphinganine), 피토스핀고신(Phytosphingosine)의 유도체들로써 순수한 형태 및 2개 이상의 혼합물을 이용하였다. 세라마이드 1, 2, 3, 4, 5, 6I, 6II 의 군도 포함된다.

(본 발명에서 사용한 세라마이드 유도체)

1. 스핀고신유도체

2. 스핀가닌유도체

3. 피토스핀고신유도체

R은 탄소수가 6∼25인 포화 및 불포화 지방산으로서 불포화 지방산인 경우에는 이중결합수가 1∼2개가 있으며, 포화지방산인 경우에는 α 또는 β위치에 수산기(Hydroxy group)를 갖고 있다.

본 발명에서 사용된 피토스핀고신은 그 자체로 사용하기도 하였으나 피토스핀고신의 유화력과 수용성을 높이기 위해 다음과 같은 극성을 띠는 유도체로 변형하여 사용할 수 있다.

1. 유기염.

유기산을 이용하여 pH가 중성인 유기염을 만들었으며 사용한 유기산은 염화수소, 젖산을 비롯한 α- 혹은 β-Hydroxy Acid, Salicylic Acid 등이다.

2. 양이온

피토스핀고신의 아민(Amine)기에 메칠(Methyl)기를 도입하여 N,N,N-트리메칠피토스핀고신(N,N,N-Trimethyl phytosphingosine)을 합성하였다.

3. Tetraacetylphytosphingosine(TAPS)

피토스핀고신으로부터 합성하여 사용하였다.

본 발명에 사용한 콜레스트롤과 그 유도체들은 피부세포막과 동일한 구조를 갖는 세라마이드의 액정(Liquid Lamellar Crystallization)형성에 도움을 주고 이 액정을 안정화시키는 물질로서 콜레스트롤, 콜레스트롤설페이트,콜레스트롤헤미숙시네이트(Cholesterol hemisuccinate)를 이용하였다.

본 발명에 사용한 지방산은 탄소수 6∼25의 포화 및 불포화 지방산을 단독 혹은 2개 이상의 혼합물을 이용하였다.

본 발명에 사용한 인지질은 투과개선제(Penetration enhancer) 및 유화제로서 제품의 안정성을 고려하여 수첨화 및 수산화 인지질을 이용하였다.

이와 같이 조성된 혼합물은 세라마이드가 피부세포막과 다른 조성물로 혼합된 제품에 비해 부작용이 없고 피부 침투성과 보습력이 월등히 뛰어난 결과를 보였다. 또한 다른 소수성(hydrophobic) 혹은 수용성의 치료활성 성분(Therapeutic Active Ingrediens)과 상용성이 좋을 뿐만 아니라 약물 전달성이 뛰어나 피부상처 치료용 제품의 전제제(Pre-Formulation)로서도 이용이 가능하였다.

본 발명은 세라마이드와 피토스핀고신 및 그 유도체의 효능을 충분히 발휘하기 위해 피부세포막과 동일한 조성물과 구조적 성질을 갖는 피부 보호용용 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

각질층의 세포막을 구성하는 지질의 조성이 여러 가지 피부질환과 연관이 있는 것으로 알려지면서 손상된 피부에 세포막의 주성분인 세라마이드, 콜레스트롤, 지방산을 공급하여 세포막을 복원하는 연구가 주목되고있다. 각질층 지질인 세라마이드, 콜레스트롤, 지방산을 적절한 비율로 혼합하여 액정의 일종인 리포좀(Liposome)을 만들어 피부에 연관돤 약물전달 시스템개발에 관한 연구에 이용하고 있다.

그러나 가장 중요한 성분으로 알려진 세라마이드의 소수성(Hydrophobic)과 혼합물 내에서의 결정형성이 잘되어 안정성, 사용성, 침투성이 뛰어난 제품 개발에는 많은 어려움이 있었다. 이를 해결하기 위해서 본 발명에서는 피부세포막에 존재하는 천연물질만을 이용하고 합성계면활성제 및 용제를 사용하지 않음으로써 피부친화력이 우수하고 부작용이 없는 Oil in Water(O/W)형의 액정을 띤 피부 보호 조성물을 개발하게 되었다.

본 발명에 사용한 세라마이드는 스핀고신, 피토스핀고신, 스핀가닌의 아민기에 지방산을 도입한 아마이드 유도체이다.

(본 발명에 사용한 세라마이드 유도체)

1. 스핀고신유도체

2. 스핀가닌유도체

3. 피토스핀고신유도체

R은 탄소수가 6∼25인 포화 및 불포화 지방산으로서 불포화 지방산인 경우에는 이중결합을 1∼2개 갖고 있으며, 포화지방산인 경우에는 α 또는 β위치에 수산기(Hydroxy group)를 갖고 있다.

상기 세라마이드 유도체는 안정된 에멀젼을 형성할 수 있도록 바람직하게는 본 발명의 조성물의 1∼10중량% 범위로 사용된다.

본 발명에 사용한 트리글리세라이드 및 레시틴은 본 발명의 조성물의 1~10중량%로 사용된다.

본 발명에 사용한 콜레스토롤은 콜레스트롤, 콜레스트롤술페이트, 콜레스트롤헤미숙시네이트로 구성되는 군에서 선택된다. 콜레스테롤의 첨가는 액정형성에 도움을 주고 형성된 액정의 안정성을 증가시킨다. 콜레스테롤 양은 조성물의 1∼10중량%까지 사용하는 것이 바람직하나, 가장 바람직하게는 세라마이드 중량비에 대하여 40∼50중량%의 범위로 사용할 때이다.

본 발명에 사용한 지방산은 탄소수가 6 ∼ 25의 포화 혹은 이중결합을 1∼ 2개 각조 있는 불포화지방산으로 단독 혹은 2개이상 혼합하여 사용하였다. 지방산의 사용량은 조성물의 1∼10중량%까지 사용할 수 있으나 가장 효과적인 사용량은 세라마이드 중량비에 대하여 40∼50중량% 범위로 사용할 때이다.

본 발명의 조성물의 제조에 있어서, 각질층 지질로 액정을 형성하면서 가장 효능이 뛰어난 비율은 세라마이드:콜레스테롤:지방산을 2:1:1 중량비로 사용할 때이다. 즉 이러한 비율로 조성된 화장물을 피부에 적용하였을 때 손상된 피부보호막의 복원이 가정 효과적으로 촉진될 수 있다.

본발명에 사용한 피토스핀고신은 1)피토스핀고신 자체로 단독사용하거나 용해성과 유화력을 높이기 위해 유기산을 이용하여 2)유기염 형태로 사용하거나 3) 피토스핀고신의 아민기에메칠기를 도입하여 N,N,N-트리메칠피토스핀고신 형태로 사용하거나 4)Tetraacetylphytosphingosine(TAPS) 형태로 변형하여 사용할 수 있으며 조성물의 1~10중량%의 범위내에서 사용된다.

1.유기염

유기산을 이용하여 pH가 중성인 유기염을 만들었으며 사용한 유기산은 염화수소, 젖산을 비롯한 α- 혹은 β-히드록실산(Hydroxy Acid), 살리실산(Salicylic Acid)이다. 이들 산은 피부세포를 활성화하는 것으로 알려져 있으나 높은 산성으로 인하여 피부보호용 제품에 이용하기가 어려웠으나 피토스핀고신의 중화로 인하여 그러한 문제점이 보완되었다.

2.양이온

피토스핀고신의 아민기에 메칠기를 도입하여 N,N,N-트리메칠피토스핀고신(N,N,N-Trimethylphytosphingosine)을 합성하였다.

3. Tetraacetylphytosphingosine(TAPS).

피토스핀고신으로부터 합성하여 사용하였다.

피토스핀고신은 각질층의 세포막에 1중량% 이하로 소량 존재하나 미생물에 대하여 항생력이 있어 피부가 미생물로부터 정상적인 건강한 상태를 유지하는데 기여할 뿐만 아니라 세라마이드 형성의 전구체 역할을 하는 생리활성 물질이다. 본 발명에서 제조한 조성물에 대하여 여드름이 있는 대상자를 통한 치유 실험을 한 결과 좋은 효과를 입증할 수 있었다.

레시틴은 생체막의 중요한 성분으로 지질이중막을 형성하고 물속에서 리포좀을 형성하는 성질로 인하여 약물의 전달체계 연구에 가장 많이 사용되고 있는 물질이다. 이런 용도 외에도 거친 피부를 부드럽게 해주는 유화제(Softner), 피부투과개선제(Skin Penetration Enhencer)로도 사용된다.

본 발명에서 사용한 레시틴은 산화안정성을 고려하여 수첨화(Hydrogenation) 혹은 수산화(Hydroxylation)된 요오드(Iodine Value)가 20 전후인 인지질을 사용하였다.

본 발명에 사용한 조성물은 피부에 활성이 있는 물질을 포획할 수 있는 비히클(Vehicles)을 형성하였다. 이런 성질은 치료제(Therapeutic Reagents)을 이용한 피부 보호용 제품의 전제제(Pre-Formulator)로서 사용이 가능하다.

(세라마이드 유도체의 제조방법)

1. 피토스핀고신의 유기염 제조방법

피토스핀고신을 에탄올에 녹인 후 당량의 유기산을 가한다. 30분간 상온에서 교반후 감압하에서 에탄올을 제거한 후 아세톤을 가하여 생성된 침전물을 여과하여 건조한다(수율: 98중량%).

2. N,N,N,-트리메틸피토스핀고신의 제조

피토스핀고신을 클로로포름(Chloroform) 용매에 용해한 후 5당량의 소디움 카보네이트(Sodium Carbonate)와 메틸아이오다이드(Methyl Iodide)를 가하여 7시간 동안 환류 교반한다. 침전물을 여과하여 제거한 후 감압하에 용매를 제거하고 잔여물에 아세톤을 가하여 생성된 침전물을 여과하여 모아서 건조시킨 후 원하는 물질을 얻었다.(수율: 70중량%)

3. TAPS

피토스핀고신을 무수 클로로포름에 용해한 후 5당량의 트리에틸아민(Triethylamine)을 가하고 실온으로 냉각한다.

아세틸언하이드라이드(Acetylanhydride) 5당량을 반응용기에 30분 동안 첨가한 후 4시간동안 환류교반한다. 실온으로 냉각 후 반응액과 동량의 물을 가하여 유기층을 분리한다. 3회 반복후 감압하에 유기용매를 날려 보내고 잔여물에 헥산(Hexane)을 가한후 재결정한다. 침전물을 여과하여 건조 후 원하는 물질을 얻었다.(수율: 95중량%).

[실시예 1]

본 발명의 피부 보호용 조성물은 지질상과 수상으로 나누어 제조한 뒤에 수상을 지질상에 서서히 첨가하여 제조한다. 먼저, 지질상은 트리글리세라이드 5g에 스테아린산 1.5g을 가하여 온도를 80℃까지 승온시킨다. 혼합물이 완전히 용해되면 콜레스테롤 3g. 세라마이드 5g을 가하여 용해될때까지 교반시킨다. 레시틴 2g을 가하여 용해시킨 후에 올레인산 1.5g을 가한다. 수상은 증류수 79.2g을 80℃까지 승온시킨다. 피토스핀고신 2g과 젖산 0.8g을 가하여 완전히 용해될때까지 교반시킨다. 용해된 수상을 지질상에 서서히 가하여 80℃에서 30분간 교반시킨 후 실온에서 서서히 냉각하여 크림상의 조성물을 수득하였다.

[실시예 2]

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 지질상은 트리글리세라이드 5g에 스테아린산 2g을 가하여 온도를 80℃까지 승온시킨다. 혼합물이 완전히 용해되면 콜레스테롤 3g. 세라마이드 5g을 가하여 용해될때까지 교반시킨다. 수상은 증류수 82.3.g을 80℃까지 승온시킨다. 피토스핀고신 2g과 젖산 0.7g을 가하여 완전히 용해될때까지 교반시킨다. 용해된 수상을 지질상에 서서히 가하여 80℃에서 25분간 교반시킨 후 실온에서 서서히 냉각하여 크림상의 조성물을 수득하였다.

[실시예 3]

지질상은 트리글리세라이드 3g에 스테아린산 1g을 가하여 온도를 80℃까지 승온시킨다. 혼합물이 완전히 용해되면 콜레스테롤 3g, TAPS 2g 및 세라마이드 5g을 가하여 용해될때까지 교반시킨다. 레시틴 2g을 가하여 용해시킨 후에 올레인산 1g 및 리놀레인산 1g을 차례로 교반하에 서서히 가한다. 수상은 증류수 80g을 80℃까지 승온시킨후에 피토스핀고신염(Phytosphingosine??Hcl) 2g을 가하여 완전히 용해될때까지 교반시킨다. 용해된 수상을 지질상에 서서히 가하여 80℃에서 30분간 교반시킨 후 실온에서 서서히 냉각하여 크림상의 조성물을 수득하였다.

본 발명에 따라 제조된 조성물은 사람피부에 적용할 수 있으며 특히 피부가 건조할때나 손상을 입었을때 피부로부터 수분의 이탈을 감소시키고 손상된 피부의 세포막의 복원에 도움을 주는 물질로 사용할 수 있다.

(시험예 1) 본 발명의 조성물(실시예1)의 여드름 치유효과 및 피부 보습효과

한쪽 볼에 10개 이상의 면포(Comedone)가 발생한 15명의 남자 청년의 피부를 대상으로 실험을 하였다. 매일 적절한 시기에 상기 실시예 1에서 제조한 본 발명의 피부용 조성물을 얼굴에 아침, 점심, 취짐전에 1일 3회씩 도포한 결과 사람에 따라 6∼12주가 경과하여 여드름 부위가 깨끗해진 것을 육안으로 관찰할 수가 있었다.

3주가 지난 후 여드름부위가 어느 정도 가라앉은 다음 액체비중계를(Skin Surface Hydrometer. Skicon-200. Ibs Inc., Japan) 이용하여 전기 전도도를 측정한 결과를 나타내었다.

표1. 전기전도도 측정결과

전기전도도 (μΩ¹)
치 료 전	치 료 후
51.2±6.6	200.5±9.7`

또한 3주가 지난 후 증발량 측정기(Evaporimeter,Epi. Servo Med사 제품. 스웨덴) 를 사용하여 각질층을 통한 수분손실(TEWL, Trans-Epidermal Water Loss) 을 측정한 결과를 나타내었다.

표2. 수분손실 측정결과

수분손실(TEWL)
치 료 전	치 료 후
50.5±2.5	10.1±3.2

상기 표에서 알 수 있듯이 본 발명의 조성물로 치유된 피부는 수분손실이 치료전에 비해 크게 개선된 것을 알 수 있다. 이는 본 발명의 조성물이 피부 각질층의 수분손실을 크게 감소시켜 피부장벽 기능을 향상시킴으로서 보습효과가 뛰어남을 입증하는 것이라 할 수 있다.

(시험예 2) 본 발명 조성물의 상처 치유효과

2-1 조성물(실시예1)의 자상(stab)에 대한 효능실험

피부 절개창(pierced wound)에 대한 장력(tension strength)을 측정함으로써 상처의 유작도를 측정하여 상처치료 효능을 알아보는 것이다. 이 방법은 Schulte and Domenjoz의 방법을 일부 개량하여 실시하였다.

일정체중의 Sprague-Dawley계 웅성 백서(male rat)를 사용하고, 사육환경은 온도 22±2℃, 습도 50±5%의 조건에서 일주일 이상 적응시킨 후 일반적인 이상 징후가 없는 실험동물을 선별하여 사용하였다. 예비사육 및 실험기간 동안 물과 사료를 자유로이 섭취하도록 하며, 실험기간 중에는 모든 실험동물은 개별 Cage에서 사육하였다. 실험군은 표 1과 같이 나누어 각 군마다 5마리씩 실험에 임하였다. Blank군은 아무것도 투여하지 않은 군이고 , 대조군은 약국이나 병원에서 연고제 기제(Base)로 쓰이는 오인먼트 기제(Ointment base)를 투여하였다.

쥐 등 부위의 털을 클리퍼(Clipper)로 깎아내고, 에테르(Ether) 마취하에 70% 알코올로 피부를 소독한 후 목선에서 3 cm 떨어진 곳에서부터 정중선을 따라 등 부위 피부를 외과용 메스(Surgical knife)로 2cm 절개한 후 0.5cm 간격으로 봉합(Suture)하였다. 감염방지를 위해 항생제를 4일간 1일 1회 근육주사(i.m. = Intra-Muscular Injection)하였다. 시험물질을 수술 당일로부터 1일 1회 일정량 도포하였다. 수술 5일 후 봉합사를 제거하고, 수술 7일째 창상부를 포함하는 피부를 적출하여 장력측정기로 창상부의 장력을 측정하였다.(C.K.Kim et al. J. Kor. Pharm. Sci., vol.27. No. 2. 139-143,1997 ), (R. Schulte and R. Domenjoz. Med. Pharmacol. Exp. 16. 453-458 ,1967 )

측정된 결과는 하단 표에 나타내었다.

표에 나타낸 결과로부터 본 발명의 조성물(실시예1)의 상처 치유효과가 뚜렸하게 나타냄을 밝혀 내었고, 대조군의 상처치유 효과가 Blank군보다 높게 나타난 것은 연고기제의 기본적인 보습효과에 의한 것으로 보인다.

표 3. 장력 측정결과

시험군 장력(중량%)

Blank군 100대조크림군 125본 발명(실시예1) 150

(시험예 3) 상처부위(Wound Area) 측정법에 의한 상처 치유효과

피부를 직경 6mm의 원형으로 절취한 부위의 복원을 측정함으로써 상처치료 효능을 알아보는 것이다. 이 방법은 와키타(Wakita)등의 방법을 일부 개량하여 실시하였다.

일정체중의 Sprague-Dawley계 레트(rat)를 사용하였고, 사육환경은 온도 22±2℃, 습도 50±5%의 조건에서 일주일 이상 적응시킨 후 일반적인 이상 징후가 없는 시험동물을 선별하여 사용하였다. 예비사육 및 실험기간 동안 물과 사료를 자유로이 섭취하도록 하며, 실험기간 중에는 모든 실험동물은 개별 우리(Cage)에서 사육하였다.

쥐 등 부위의 털을 클리퍼로 깎아내고, 면도기로 제모하여 피부를 노출시켰다. 에테르 마취하에 70% 알코올로 피부를 소독한 후 목선에서 3cm 떨어진 곳에서부터 정중선을 피부를 Biopsy Punch로 직경 6mm의 원형으로 절취하여 외상을 만든다. 감염방지를 위해 항생제를 4일간 1일 1회 근육주사하였다. 시험물질을 수술 당일로부터 1일 1회 일정량 도포하였다. 상처의 크기는 실험 실시 후 4일, 7일, 10일 마다 투명한 필름을 상처 부위에 밀착하고 상처 모양을 정확히 본을 떠내어 그 면적을 측정하였다. 면적 측정 방법은 본을 딴 모양을 일정한 복사지에 복사기를 이용하여 400% 확대 복사한 후 그 무게를 측정하는 방법을 사용하였고, 치료율은 다음과 같이 계산하였다.

* 치료율(%) = [1 - (측정날짜의 area weight /1st day area weight)] * 100

실험군은 아래표와 같이 나누어 각 군마다 5마리씩 실험에 임하였다. Blank군은 아무것도 투여하지 않은 군이고, 대조군은 약국이나 병원에서 연고제 기제(Base)로 쓰이는 오인먼트 기제(Ointment base)를 투여하였다.( H. Wakita. Et al. J. Invest. Dermatol. 110: 253-258, 1998 )

측정된 결과는 아래 표에 나타내었다.

표에 나타낸 결과로부터 본 발명의 조성물(실시예 1)의 상처 치유효과가 더 월등함을 나타내었다.

표4. 상처부위(Wound Area) 측정법에 의한 상처 치유효과

시험군 치료율(%)4일 7일 10일

Blank군 15.2 43.4 80.2대조크림군 16.6 52.7 92.5본 발명(실시예1) 22.5 61.0 96.2

이상과 같이 본 발명에 의해 제조된 피부 보호용 조성물은 세라마이드가 피부세포막과 다른 조성물로 혼합된 제품에 비해 부작용이 없고 피부 침투성과 보습력이 월등히 뛰어난 결과를 보였다. 이는 본 발명의 조성물이 피부 각질층의 수분손실을 크게 감소시켜 피부장벽 기능을 향상시킴으로서 보습효과가 뛰어남을 입증하는 것이라 할 수 있다. 또한 다른 소수성(hydrophobic) 혹은 수용성의 치료활성 성분(Therapeutic Active Ingrediens)과 상용성이 좋을 뿐만 아니라 약물 전달성이 뛰어나 여드름이나 피부상처 치유에도 효과가 큰 것으로 입증되었다.

Claims

피부지질 조성물로 된 피부 보호용 조성물에 있어서, 상기 조성물이 세라마이드, 콜레스트롤, 지방산, 트리글리세라이드, 레시틴 및 피토스핀고신 또는 이의 유도체로 구성되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 세라마이드, 콜레스트롤 및 지방산은 2:1:1의 중량비로 조성물에 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 레시틴, 피토스핀고신 및 그 유도체는 상기 조성물의 1내지 5중량%로 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 세라마이드는 스핀고신, 스핀가닌, 피토스핀고신의 아민기에 지방산을 도입한 아마이드 유도체로 상기 조성물의 1∼10중량%로 사용되는 것을 특징으로 하는 피부보호용 조성물.
제 4항에 있어서, 상기 지방산은 탄소수가 6내지 25인 포화 및 불포화 지방산인 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 콜레스트롤은 콜레스트롤술포네이트 및 콜레스트롤헤 미숙시네이트로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 피부보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 콜레스트롤은 상기 조성물의 1내지 10중량%로 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 피토스핀고신 유도체는 단독으로 사용하거나 용해성과 유화력을 높이기 위해 유기산을 이용하여 유기염 형태로 사용하거나, 피토스핀고신의 아민기에메칠기를 도입하여 N,N,N-트리메칠피토스핀고신 형태로 사용하거나, Tetraacetylphytosphingosine(TAPS)형태로 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 화상이나 상처로 손상된 피부의 치유에 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 여드름 치유에 사용되는 것을 특징으로 하는 피부 보호용 조성물.