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KR102281606B1 - A multifunctional cosmetic composition for elasticity, anti-wrinkle, inhibiting tyrosinase comprising peptide complex - Google Patents

A multifunctional cosmetic composition for elasticity, anti-wrinkle, inhibiting tyrosinase comprising peptide complex Download PDF

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Publication number
KR102281606B1
KR102281606B1 KR1020210049622A KR20210049622A KR102281606B1 KR 102281606 B1 KR102281606 B1 KR 102281606B1 KR 1020210049622 A KR1020210049622 A KR 1020210049622A KR 20210049622 A KR20210049622 A KR 20210049622A KR 102281606 B1 KR102281606 B1 KR 102281606B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
comparative example
skin
cosmetic composition
examples
comparative
Prior art date
Application number
KR1020210049622A
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Korean (ko)
Inventor
김혜용
최재춘
Original Assignee
(주)바이오신펩
주식회사 이우바이오
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Publication date
Application filed by (주)바이오신펩, 주식회사 이우바이오 filed Critical (주)바이오신펩
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Abstract

The present invention relates to a multifunctional cosmetic composition comprising tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 as active ingredients.

Description

펩타이드 복합체를 함유하는 주름 및 피부탄력 개선, 타이로시네이즈 억제 등 다기능성 화장료 조성물{A MULTIFUNCTIONAL COSMETIC COMPOSITION FOR ELASTICITY, ANTI-WRINKLE, INHIBITING TYROSINASE COMPRISING PEPTIDE COMPLEX}Multifunctional cosmetic composition containing peptide complex for improving wrinkles and skin elasticity, inhibiting tyrosinase, etc. {A MULTIFUNCTIONAL COSMETIC COMPOSITION FOR ELASTICITY, ANTI-WRINKLE, INHIBITING TYROSINASE COMPRISING PEPTIDE COMPLEX}

본 발명은 저분자 펩타이드 복합체를 유효성분으로 포함하는 다기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a multifunctional cosmetic composition comprising a low molecular weight peptide complex as an active ingredient.

피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 장해, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다.The skin is a membrane that covers the outside of the body and performs various physiological functions to protect the body from environmental factors such as various external stimuli, obstacles, and dryness, thereby protecting and regulating internal organs and other internal organs. do.

그러나, 생체 노화로 인해 내적으로는 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하된다.However, due to aging in the living body, the secretion of various hormones that control metabolism internally is reduced, and the function of immune cells and the activity of cells are reduced.

또한, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선 함량이 증가하게 되고, 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 야기되는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스는 피부의 정상기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시킬 수 있다.In addition, externally, the UV content in the sun's rays increases due to the destruction of the ozone layer, and excessive physical and chemical stimulation and stress caused by the increase of free radicals and active harmful oxygen as the environmental pollution is further deepened is the normal function of the skin. It can damage the skin by promoting the generation of spots, freckles, etc. and skin aging caused by deterioration, melanin deposition.

우리 신체는 손상된 피부에 대하여 피부 재생 과정을 수행한다. 피부 재생은 손상에 대한 조직의 반응이며 조직회복의 과정으로, 주화성(chemotaxis), 세포의 분화 및 복제(differentiation and replication), 기질 단백질(matrix protein)의 합성, 혈관의 신생 및 창상의 재구성 등을 포함하는 복잡한 생물학적 과정이다.Our body performs a skin regeneration process on damaged skin. Skin regeneration is a tissue response to damage and is a process of tissue repair, such as chemotaxis, cell differentiation and replication, matrix protein synthesis, vascularization, and wound reconstitution. It is a complex biological process involving

따라서 내적, 외적 요인에 의한 피부노화 및 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등에서 수득한 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용하고 있다.Therefore, in order to prevent skin aging and damage caused by internal and external factors to maintain healthy and beautiful skin, physiologically active substances obtained from various animals, plants, and microorganisms are added to cosmetics and used.

이와 같이 다양한 생리 활성 물질을 통해 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부 세포를 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진함으로써 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 화장품, 피부 외용제 등이 개발되고 있다.Efforts to maintain skin health by maintaining the unique function of the skin and activating skin cells through various physiologically active substances as described above and promoting skin metabolism are continuing, and cosmetics and external preparations for skin are being developed accordingly.

그러나, 이들 물질은 피부 적용시 자극, 홍반, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 효과를 기대하기 어려웠다.However, when these substances are applied to the skin, there is a limitation in the amount used due to safety problems such as irritation, erythema, redness, or the like, or the effect is insignificant, so it is difficult to actually expect an effect of improving skin function.

따라서, 기존의 피부 외용제 조성물 보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부 외용제 조성물의 개발이 요구되고 있다.Therefore, there is a demand for the development of a new composition for external application for skin that is safer and more effective than the existing composition for external application for skin.

최근 화장품 업계에서 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품이 다수 개발되고 있다. Recently, in the cosmetic industry, a number of products using natural products have been developed to reduce skin irritation caused by chemicals.

천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.Natural ingredients have fewer side effects on the skin, and as consumers' response to cosmetics using natural ingredients increases, the value of development as a cosmetic raw material is increasing.

따라서, 부작용이 적고, 소비자의 호응도가 높은 천연 재료를 이용한 화장품의 수요가 점차 증가하고 있으며, 생체 안전성 및 피부 개선 효과가 우수한 다기능성(multi-functional) 화장품 개발에 대한 다양한 연구가 활발하게 이루어지고 있다.Therefore, the demand for cosmetics using natural ingredients with few side effects and high consumer response is increasing, and various studies on the development of multi-functional cosmetics with excellent biosafety and skin improvement effects are being actively conducted. there is.

본 발명의 목적은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 피부에 대한 자극성이 적고, 외부 자극에 의한 피부 손상을 최소화하는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to solve the problems of the prior art described above, and an object of the present invention is to provide a functional cosmetic composition that has little irritation to the skin and minimizes skin damage caused by external stimuli.

본 발명의 일 측면에 따르면, 테트라펩타이드-21(Tetrapeptide-21) 및 팔미토일 펜타펩타이드-4(Palmitoyl Pentapeptide-4)를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising tetrapeptide-21 (Tetrapeptide-21) and palmitoyl pentapeptide-4 (Palmitoyl Pentapeptide-4) as active ingredients.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 헥사펩타이드-11(Hexapeptide-11) 및 카노신(Carnosine) 중 하나 이상을 더 포함할 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may further include one or more of hexapeptide-11 and carnosine.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 아데노신(Adenosine), 지모뿌리 추출물, 및 글루타치온으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may further include one or more selected from the group consisting of adenosine, zymoroot extract, and glutathione.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 주름 개선 및 피부 탄력 개선용일 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may be for wrinkle improvement and skin elasticity improvement.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 미백용일 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may be for skin whitening.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항염 또는 항산화용일 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may be for anti-inflammatory or antioxidant.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부재생용일 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition may be for skin regeneration.

일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.In one embodiment, the cosmetic composition is selected from the group consisting of softening lotion, nourishing lotion, nourishing cream, massage cream, essence, ampoule, gel, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray and powder. One or more may be formulated.

본 발명의 일 측면에 따른 화장료 조성물은 피부 자극이 적고 각 유효성분의 시너지 효과에 의한 피부 개선 효과가 현저히 우수하다.The cosmetic composition according to one aspect of the present invention has less skin irritation and is remarkably excellent in skin improvement effect due to the synergistic effect of each active ingredient.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.It should be understood that the effects of the present invention are not limited to the above-described effects, and include all effects that can be inferred from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the present invention.

본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.The terms used in this specification have been selected as currently widely used general terms as possible while considering the functions in the present invention, which may vary depending on the intention or precedent of a person skilled in the art, the emergence of new technology, and the like. In addition, in a specific case, there is a term arbitrarily selected by the applicant, and in this case, the meaning will be described in detail in the description of the corresponding invention. Therefore, the term used in the present invention should be defined based on the meaning of the term and the overall content of the present invention, rather than the name of a simple term.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다. Unless defined otherwise, all terms used herein, including technical and scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Terms such as those defined in a commonly used dictionary should be interpreted as having a meaning consistent with the meaning in the context of the related art, and should not be interpreted in an ideal or excessively formal meaning unless explicitly defined in the present application. does not

수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.Numerical ranges are inclusive of the values defined in that range. Every maximum numerical limitation given throughout this specification includes all lower numerical limitations as if the lower numerical limitation were expressly written. Every minimum numerical limitation given throughout this specification includes all higher numerical limitations as if the higher numerical limitation were expressly written. All numerical limitations given throughout this specification shall include all numerical ranges that are better within the broader numerical limits, as if the narrower numerical limitations were expressly written.

이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, examples of the present invention will be described in detail, but it is obvious that the present invention is not limited by the following examples.

본 발명의 일 측면은, 테트라펩타이드-21(Tetrapeptide-21) 및 팔미토일 펜타펩타이드-4(Palmitoyl Pentapeptide-4)를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.One aspect of the present invention provides a cosmetic composition comprising tetrapeptide-21 (Tetrapeptide-21) and palmitoyl pentapeptide-4 (Palmitoyl Pentapeptide-4) as active ingredients.

상기 화장료 조성물은 저분자 복합 펩타이드 성분을 유효성분으로 포함하여 생체 안전성 및 피부 개선 활성이 우수할 뿐만 아니라 피부 자극이 적다.The cosmetic composition contains a low-molecular complex peptide component as an active ingredient, so that it has excellent biosafety and skin improvement activity as well as less skin irritation.

상기 펩타이드(peptide)는 아미드 결합(또는 펩타이드 결합)으로 연결된 하나 이상의 아미노산으로 구성된 폴리머를 의미한다. 본 발명의 목적상 상기 펩타이드는 주름 개선, 피부 탄력 개선 효과를 나타내는 펩타이드 또는 이의 단편을 의미할 수 있다. The peptide refers to a polymer composed of one or more amino acids linked by amide bonds (or peptide bonds). For the purpose of the present invention, the peptide may refer to a peptide or a fragment thereof that exhibits wrinkle improvement and skin elasticity improvement effects.

상기 펩타이드를 명명하는 일반적인 규칙은 구체적으로 지시된 예외사항이 없는 경우 3문자 또는1문자 아미노산 코드를 기초로 할 수 있다. 예컨대, 아미노산 구조의 중심부를 3문자 코드(예컨대, Ala, Lys)로 표시하며, 3문자 코드의 앞에 "D-"를 적음으로써 D-입체형태(예컨대, D-Ala, D-Lys)를 구체적으로 지시하지 않은 경우라면L-입체형태로 가정할 수 있다. 상기 펩타이드를 구성하는 아미노산 잔기는 천연 또는 비-천연아미노산 잔기일 수 있다.A general rule for naming such peptides may be based on a three-letter or one-letter amino acid code, unless specifically indicated otherwise. For example, the central part of the amino acid structure is indicated by a three-letter code (eg, Ala, Lys), and a D-conformation (eg, D-Ala, D-Lys) is specified by writing "D-" in front of the three-letter code. If not indicated, it can be assumed to have an L-stereoscopic shape. The amino acid residues constituting the peptide may be natural or non-natural amino acid residues.

본 발명자들은 상기 펩타이드가 다른 성분과 상호 작용하여 다양한 요인에 의해 유발될 수 있는 피부 손상 및 피부 노화를 효과적으로 억제할 수 있음을 규명하였으며 이를 통한 다양한 용도를 도출하였다.The present inventors have identified that the peptide can effectively inhibit skin damage and skin aging that may be caused by various factors by interacting with other components, and various uses have been derived through this.

상기 펩타이드는 당업계에 공지된 화학적 합성 방법, 특히 고상 합성 기술(solid-phase synthesis techniques)에 따라 제조될 수 있다(Merrifield, J. Amer. Chem. 1963, Soc. 85:2149-54; Stewart, et al. Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed., Pierce Chem. 1984, Co.: Rockford, 111).The peptide can be prepared according to chemical synthesis methods known in the art, particularly solid-phase synthesis techniques (Merrifield, J. Amer. Chem. 1963, Soc. 85:2149-54; Stewart, et al. Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed., Pierce Chem. 1984, Co.: Rockford, 111).

상기 “유효성분으로 포함하는”은 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는, 예컨대, 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 미백, 항산화 효과 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미할 수 있다.The "comprising as an active ingredient" may mean containing an effective amount that can exhibit a skin improvement effect, for example, wrinkle improvement, skin elasticity improvement, skin whitening, antioxidant effect, and the like.

상기 “테트라펩타이드-21(Tetrapeptide-21)”는 글라이신, 글루타민산, 라이신, 글라이신이 순차로 연결된 펩타이드로, 하기 화학식 1의 화합물일 수 있다.The “Tetrapeptide-21” is a peptide in which glycine, glutamic acid, lysine, and glycine are sequentially linked, and may be a compound of Formula 1 below.

[화학식 1][Formula 1]

Figure 112021044506871-pat00001
Figure 112021044506871-pat00001

상기 “팔미토일 펜타펩타이드-4(Palmitoyl Pentapeptide-4)”는 라이신, 쓰레오닌, 쓰레오닌, 라이신, 세린, 세린이 순차로 연결된 펩타이드의 아미노 말단 부위에 친유기인 지방산 팔미테이트(palmitate)를 접합시킨 것으로, 하기 화학식 2의 화합물일 수 있다.The "Palmitoyl Pentapeptide-4" is a lipophilic fatty acid palmitate at the amino terminal site of a peptide in which lysine, threonine, threonine, lysine, serine, and serine are sequentially linked. It may be a compound of Formula 2 below.

[화학식 2][Formula 2]

Figure 112021044506871-pat00002
Figure 112021044506871-pat00002

상기 화장료 조성물은 헥사펩타이드-11(Hexapeptide-11) 및 카노신(Carnosine) 중 하나 이상을 더 포함할 수 있다.The cosmetic composition may further include one or more of hexapeptide-11 and carnosine.

상기 “헥사펩타이드-11(Hexapeptide-11)”은 알라닌, 페닐알라닌, 프롤린, 발린이 순차로 연결된 합성 펩타이드로, 하기 화학식 3의 화합물일 수 있다.The “hexapeptide-11” is a synthetic peptide in which alanine, phenylalanine, proline, and valine are sequentially linked, and may be a compound of Formula 3 below.

[화학식 3][Formula 3]

Figure 112021044506871-pat00003
Figure 112021044506871-pat00003

상기 카노신(carnosine)은 베타알라닌(β-alanin)과 히스티딘(histidine)으로 이루어진 β-알라닐-L-히스티딘의 다이펩타이드(dipeptide)로 수명이 긴 조직에서 상당히 많은 양이 발견되고, 특히 척추동물 근육 세포의 비단백질 부분에 많이 존재하는데 그 양은 약 1 내지 20 mM에 달한다. The carnosine is a dipeptide of β-alanyl-L-histidine composed of β-alanin and histidine, and is found in a fairly large amount in long-lived tissues, particularly in the spine. It is abundantly present in the non-protein fraction of animal muscle cells, and its amount ranges from about 1 to 20 mM.

상기 카노신은 세포를 산화적 스트레스로부터 보호하는 항산화제로서, 활성 산소종(reactive oxygen species)을 제거하는데 뛰어난 효과를 갖는 자유 라디칼 소거제(free radical scavenger)로 알려져 있다.The carnosine is known as an antioxidant that protects cells from oxidative stress, and is a free radical scavenger having an excellent effect in removing reactive oxygen species.

상기 카노신의 보호 작용은 프로톤 완충효과(proton buffering), 중금속 킬레이트화(chelating) 및 자유 라디칼과 활성 당분자의 제거를 통해 산화적 스트레스 환경에서 생체 고분자의 변형을 억제하고 이들의 고유 기능을 유지시킴으로써 이루어지며, 상기 카노신이 저분자 복합 펩타이드와 함께 작용함으로써 우수한 시너지 효과를 나타낼 수 있다.The protective action of canosine is achieved by inhibiting the transformation of biopolymers in an oxidative stress environment through proton buffering, heavy metal chelating, and removal of free radicals and active sugar molecules and maintaining their intrinsic function. and the canosine acts together with the low molecular weight complex peptide, thereby exhibiting an excellent synergistic effect.

상기 화장료 조성물은 아데노신(Adenosine), 지모뿌리 추출물, 및 글루타치온으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수 있다.The cosmetic composition may further include one or more selected from the group consisting of adenosine, zymoroot extract, and glutathione.

상기 “아데노신(Adenosine)” 아데닌을 염기로 하는 뉴클레오티드로서 기능성 원료로 고시되어 있다. 상기 아데노신은 아데닌이 리보스(리보푸라노스)의 일부에 β글리코시드 결합으로 이어져 있는 뉴클레오시드이다. 상기 아데노신은 삼인산과 이인산의 형태로 생화학적인 작용에 기여할 수 있다.The “Adenosine” is a nucleotide based on adenine and is declared as a functional raw material. The adenosine is a nucleoside in which adenine is connected to a part of ribose (ribofuranose) by a β-glycosidic bond. The adenosine may contribute to biochemical action in the form of triphosphate and diphosphate.

상기 “지모(知母, Anemarrhenaasphodeloides Bunge)”는 외떡잎식물 백합목 지모과의 여러해살이풀로서 지모과의 뿌리줄기를 사용하며, 원산지는 중국이며 우리나라에서는 황해도 지방에 고루 분포한다. The above "Zemo (知母, Anemarrhenaasphodeloides Bunge)" is a perennial plant of the monocotyledonous Liliaceae family, and uses the rhizome of the Zymoaceae family, the origin is China, and is distributed evenly in Hwanghae Province in Korea.

상기 지모의 뿌리에서 잎들이 소복히 모여 자라나고 잎의 바깥 부분부터 외생엽, 정상엽, 내생엽으로 구분되며 가운데 부분의 정상엽이 가장 크기가 크며, 잎의 모양은 장협 피침형으로써 끝부분이 상당히 뾰족하다. The leaves are gathered and grown at the root of the genus, and the leaves are divided into exogenous, normal, and endogenous from the outer part of the leaf. The normal leaf in the middle is the largest, and the shape of the leaf is long narrow lanceolate, and the tip is quite sharp.

상기 지모의 뿌리와 줄기에는 티모사포닌(Timosaponin), 치모닌(Chimonin), 프로코카테시산 (Prococathechi acid), 판토텐산(Pantothenic acid) 등이 함유되어 있으며, 해열 작용, 강심 작용, 이뇨 작용, 양허증, 항균 작용, 거담 작용, 진정 작용, 혈당강하 작용, 항암 작용이 있는 것으로 보고 되고 있다.The roots and stems of the jimo contain timosaponin, chimonin, prococathechi acid, pantothenic acid, etc. It is reported to have antibacterial, expectorant, sedative, hypoglycemic, and anticancer effects.

상기 “글루타치온(glutathione)”은 하기 화학식 4의 구조를 가지는 화합물로서 Cas 번호가 70-18-8이고, 분자량이 307.32일 수 있다.The “glutathione” is a compound having the structure of Formula 4 below, and may have a Cas number of 70-18-8 and a molecular weight of 307.32.

[화학식 4][Formula 4]

Figure 112021044506871-pat00004
Figure 112021044506871-pat00004

상기 글루타치온은 생체 내에 존재하는 항산화제로서 아스코르빈산(비타민 C), 토코페롤(비타민 E) 등과 같은 생체 내 항산화제와 가역적으로 반응하여 생체 내 라디칼을 효과적으로 제거할 수 있다. The glutathione as an antioxidant present in the living body can effectively remove radicals in the living body by reversibly reacting with in vivo antioxidants such as ascorbic acid (vitamin C) and tocopherol (vitamin E).

상기 글루타치온은 상기 라디칼 제거와 관련된 생체 시스템에서 최종 라디칼 수용체로서 매우 중요한 역할을 수행할 수 있다.The glutathione may play a very important role as a final radical receptor in a biological system related to the radical removal.

상기 화장료 조성물은 주름 개선 및 피부 탄력 개선용일 수 있다.The cosmetic composition may be for wrinkle improvement and skin elasticity improvement.

상기 "피부 탄력 개선"은 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐과 함께 존재하며, 상기 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지 또는 향상되는 현상을 의미한다.The "improvement of skin elasticity" refers to a phenomenon in which elastic fibers composed of elastin exist together with collagen, and skin elasticity is maintained or improved in a state in which the elastin and collagen are sufficiently present.

또한, 상기 피부 탄력 개선 효과와 동시에 피부 주름 개선 효과가 동반될 수 있다. In addition, the skin elasticity improvement effect may be accompanied by a skin wrinkle improvement effect.

상기 "주름 개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름이 완화되는 현상을 의미한다.The "wrinkle improvement" refers to a phenomenon in which wrinkles are inhibited or inhibited from being generated on the skin, or wrinkles that have already been created are alleviated.

또한, 상기 화장료 조성물은 피부 미백용일 수 있다.In addition, the cosmetic composition may be for skin whitening.

상기 "피부 미백"은 피부색에 영향을 미치는 멜라닌, 산화-환원 헤모글로빈, 카로틴, 멜라노이드 등 다양한 생체 분자의 생성을 억제함으로써 잡티, 주근깨, 기미 등의 피부 색소 침착 현상을 완화시키고, 피부 누런기, 붉은기를 완화시켜 피부 밝기 및 균일도를 향상시키는 효과를 의미한다.The "skin whitening" suppresses the production of various biomolecules such as melanin, oxidation-reduction hemoglobin, carotene, and melanoids that affect skin color, thereby alleviating skin pigmentation phenomena such as blemishes, freckles, and blemishes, skin yellowness, It refers to the effect of improving skin brightness and uniformity by alleviating redness.

상기 화장료 조성물은 항염 또는 항산화용일 수 있다.The cosmetic composition may be for anti-inflammatory or antioxidant.

상기 “항산화”는 산화를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 인체는 산화촉 진물질과 산화억제물질이 균형을 이루고 있으나, 여러 가지 요인들로 인하여 이러한 균형 상태를 잃고 산화를 촉진하는 방향으로 기울게 되면, 생체 내에 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 세포손상 및 병리적 질환을 유발할 수 있다.The “antioxidation” refers to the action of inhibiting oxidation, and the human body has a balance of oxidative and antioxidant substances. However, due to various factors, this balance is lost and when the body tilts toward accelerating oxidation, , oxidative stress is induced in the living body, which may cause cell damage and pathological diseases.

상기 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 화학적으로 불안정하고 반응성이 높아 DNA, 단백질, 지질 및 탄수화물과 같은 여러 생체물질과 쉽게 반응할 수 있으며, 생체 내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 암 등을 초래하게 되고, 노화의 직접적인 원인이 되기도 한다. Reactive oxygen species (ROS), which is a direct cause of oxidative stress, is chemically unstable and highly reactive, so it can easily react with various biomaterials such as DNA, proteins, lipids and carbohydrates, It attacks and causes irreversible damage to cells and tissues or causes mutations, cytotoxicity and cancer, and is also a direct cause of aging.

상기 화장료 조성물은 상기 활성 산소종을 제거하거나 감소시킴으로써 항산화 효과를 얻어 노화를 방지하고 건강을 유지할 수 있다.The cosmetic composition can prevent aging and maintain health by obtaining an antioxidant effect by removing or reducing the active oxygen species.

상기 “항염”은 염증을 억제하는 작용을 의미하며, 염증반응의 조절은 매우 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시킨다. The “anti-inflammatory” refers to the action of inhibiting inflammation, and the regulation of the inflammatory response is known to be very complex, which reduces the enhancement and damage of the repair system in vivo.

반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 영구적인 유전자의 변형이 야기될 수 있다. 즉, ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다.If the inflammatory response continues due to repeated tissue damage or regeneration, ROS and RNS are overproduced in inflammation-related cells, and permanent gene modification may be caused. That is, ROS and RNS are deeply related to the inflammatory response that regulates the actions of various cells in vivo.

상기 화장료 조성물은 NF-kB의 활성화로 인해서 발생되는 염증 매개 인자의 발현을 조절함으로써 우수한 항염 활성을 나타낼 수 있다.The cosmetic composition may exhibit excellent anti-inflammatory activity by regulating the expression of inflammatory mediators generated due to the activation of NF-kB.

또한, 상기 화장료 조성물은 피부 재생용일 수 있다.In addition, the cosmetic composition may be for skin regeneration.

상기 “피부 재생”은 피부 외부 및 내부 원인에 의한 손상에 대해 피부 조직의 회복 과정을 의미한다.The “skin regeneration” refers to a process of restoring skin tissue from damage caused by external and internal causes of the skin.

상기 외부 원인에 의한 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상 등을 들 수 있으며, 상기 내부 원인에 의한 손상은 스트레스 등을 들 수 있다.The damage caused by the external cause may include ultraviolet rays, external pollutants, wounds, trauma, and the like, and the damage caused by the internal cause may include stress.

상기 화장료 조성물은 피부 장벽을 복구시키고, 이를 통해 피부 재생을 촉진하며, 수분을 증가시켜 자외선이나 공해로부터 피부를 보호하고 면역력을 증대시키며 피부노화를 억제할 수 있다.The cosmetic composition can restore the skin barrier, promote skin regeneration, and increase moisture to protect the skin from UV rays or pollution, increase immunity, and inhibit skin aging.

상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.The cosmetic composition may be formulated with one or more selected from the group consisting of softening lotion, nutrient lotion, nutrient cream, massage cream, essence, ampoule, gel, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray and powder. can

상기 화장료 조성물은 통상의 방법에 의해 제형화될 수 있다. 피부 외용제의 제형화에 있어서 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있고, 화장료 조성물의 제형화에 있어서 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed(The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995)에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다.The cosmetic composition may be formulated by a conventional method. In the formulation of external skin preparations, reference may be made to the contents disclosed in Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA, and in the formulation of cosmetic compositions, the International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed (The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association) , Inc., Washington, 1995) may be referred to.

구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징 폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 피부 외용제는, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.Specifically, the cosmetic composition can be prepared in general emulsified formulations and solubilized formulations. For example, lotion, such as a softening lotion or a nourishing lotion; emulsions such as facial lotions and body lotions; creams such as nourishing creams, moisturizing creams, and eye creams; essence; makeup ointment; spray; gel; pack; sunscreen; makeup base; foundations such as liquid type, solid type or spray type; powder; makeup removers such as cleansing creams, cleansing lotions, and cleansing oils; Or it may be formulated as a cleaning agent such as a cleansing foam, soap, body wash, but is not limited thereto. In addition, the external preparation for skin may be formulated as an ointment, patch, gel, cream or spray, but is not limited thereto.

상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.In the cosmetic composition, in addition to the essential components in each formulation, other components may be appropriately blended within the range that does not impair the purpose according to the present invention, depending on the type or purpose of use, etc. of the formulation.

상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.The cosmetic composition may include a conventionally acceptable carrier, for example, oil, water, surfactant, humectant, lower alcohol, thickener, chelating agent, colorant, preservative, fragrance, etc. may be appropriately mixed, but is limited thereto no.

상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있다The acceptable carrier may vary depending on the formulation. For example, when formulated into an ointment, paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide or their Mixtures can be used

상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.When the cosmetic composition is formulated as a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, or mixtures thereof may be used as a carrier component, and in the case of a spray, chlorofluorohydro It may further contain a propellant such as carbon, propane, butane or dimethyl ether.

상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 사용될 수 있다.When the cosmetic composition is formulated as a solution or emulsion, a solvent, solubilizer, or emulsifier may be used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butylglycol oil may be used.

상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.When the cosmetic composition is formulated as a suspension, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol as a carrier component, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester; Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth and the like can be used.

상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.The cosmetic composition may contain fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners, gelling agents, softeners, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, and fragrances commonly used in the industry depending on the quality or function of the final product. , surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, commonly used in cosmetics It may additionally contain adjuvants commonly used in cosmetic or dermatological fields, such as any other ingredients.

다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.However, the adjuvant and its mixing ratio may be appropriately selected so as not to affect the desirable properties of the cosmetic composition according to the present invention.

이하 실시예를 통해, 본 발명을 더욱 상술하나 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.Through the following examples, the present invention will be described in more detail, but it is obvious that the present invention is not limited by the following examples.

실시예 및 비교예Examples and Comparative Examples

본 발명의 펩타이드 복합체의 안정성 및 기능성을 검증하고자 하기 표 1 및 2와 같이 시료를 혼합하여 실시예 및 비교예를 설정하였다. 각 시료는 시중에서 구득하여 사용하였다.In order to verify the stability and functionality of the peptide complex of the present invention, samples were mixed as shown in Tables 1 and 2 below to set Examples and Comparative Examples. Each sample was obtained from the market and used.

[함량(중량부)][Content (parts by weight)] 구분division 실시예Example 1One 22 33 44 55 66 77 88 테트라펩타이드-21tetrapeptide-21 6060 4040 4040 3030 2424 2424 2424 2424 팔미토일 펜타펩타이드-4Palmitoyl Pentapeptide-4 6060 4040 4040 3030 2424 2424 2424 2424 헥사펩타이드-11Hexapeptide-11 -- 4040 -- 3030 2424 2424 2424 2424 카노신carnosine -- -- 4040 3030 2424 2424 2424 2424 아데노신adenosine -- -- -- -- 2424 -- -- 88 지모뿌리 추출물Zymoji root extract -- -- -- -- -- 2424 -- 88 글루타치온glutathione -- -- -- -- -- -- 2424 88

[함량(중량부)][Content (parts by weight)] 구분division 비교예comparative example 1One 22 33 44 55 66 77 88 99 1010 1111 1212 테트라펩타이드-21tetrapeptide-21 120120 -- -- -- -- -- -- 6060 6060 4040 3030 -- 팔미토일 펜타펩타이드-4Palmitoyl Pentapeptide-4 -- 120120 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- 헥사펩타이드-11Hexapeptide-11 -- -- 120120 -- -- -- -- 6060 -- 4040 -- -- 카노신carnosine -- -- -- 120120 -- -- -- -- 6060 4040 -- ---- 아데노신adenosine -- -- -- -- 120120 -- -- -- -- -- 3030 4040 지모뿌리 추출물Zymoji root extract -- -- -- -- -- 120120 -- -- -- -- 3030 4040 글루타치온glutathione -- -- -- -- -- -- 120120 -- -- -- 3030 4040

실험예 1 : 피부 안전성 시험Experimental Example 1: Skin safety test

실시예 및 비교예의 시료에 대한 피부 안전성을 검증하기 위해, 섬유아세포(HDF)에 대한 MTT assay 실험을 수행하였다.In order to verify the skin safety of the samples of Examples and Comparative Examples, an MTT assay experiment for fibroblasts (HDF) was performed.

실시예 및 비교예의 시료를 정제수에 25, 50, 100, 200, 400 μg/mL의 농도별로 각각 현탁한 후, 세포 생존율을 측정하였다.After each of the samples of Examples and Comparative Examples were suspended in purified water at concentrations of 25, 50, 100, 200, and 400 μg/mL, cell viability was measured.

세포 독성은 MTT{3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide} 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 모스만(Mosmann)의 방법을 변형하여 수행하였다.Cytotoxicity was performed by modifying Mosmann's method for measuring cell viability using MTT {3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide} reagent.

섬유아세포(HDF)를 각각 96-웰 플레이트에 1×104 cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO2에서 48시간 동안 배양하였다.Fibroblasts (HDF) were each dispensed in a 96-well plate at a concentration of 1×10 4 cells/well and cultured at 37° C., 5% CO 2 for 48 hours.

배양 배지를 제거하고 시료를 농도별로 처리한 배지에 48시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 PBS(Phosphate buffered saline)로 반복 세척하였다.After removing the culture medium and culturing the sample in a medium treated for each concentration for 48 hours, the medium was removed and washed repeatedly with PBS (Phosphate buffered saline).

MTT를 5mg/mL로 PBS에 녹여 50 μL 첨가하고 37℃, 5%의 CO2에서 48시간 동안 배양하였다. DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 한 웰(well) 당 100L 넣고, 10분 동안 교반한 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다.MTT was dissolved in PBS at 5 mg/mL, 50 μL was added, and incubated at 37° C., 5% CO 2 for 48 hours. 100 L of DMSO (dimethyl sulfoxide) was added per well, and the absorbance was measured at 540 nm after stirring for 10 minutes.

측정 결과, 각 시료의 모든 농도에서 세포 독성은 확인되지 않았다. 상기 결과는 상기 시료가 인체에 무해할 뿐만 아니라 인체 안전성이 우수함을 시사한다.As a result of the measurement, cytotoxicity was not confirmed at all concentrations of each sample. The above results suggest that the sample is not only harmless to the human body, but also has excellent human safety.

실험예 2 : 자유라디칼 소거 활성 평가Experimental Example 2: Evaluation of free radical scavenging activity

실시예 및 비교예의 추출물을 정제수에 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하였다.The extracts of Examples and Comparative Examples were suspended in purified water to evaluate free radical scavenging activity.

DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다.The DPPH measurement method is a method of measuring the absorbance at 540 nm to determine the extent to which an inhibitor is decolorized by scavenging a stable radical DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical).

대조군으로 비타민 C를 이용하였고, 실험의 정확도를 위하여 동일한 실험을 3회 반복하였으며, 결과는 하기 표 3과 같다.Vitamin C was used as a control, and the same experiment was repeated 3 times for the accuracy of the experiment, and the results are shown in Table 3 below.

[라디칼 DPPH의 50% 소거하는 농도][Concentration that scavenges 50% of radical DPPH] 구분division SCSC 5050 (μg/mL)(μg/mL) 실시예 1Example 1 129.7129.7 실시예 2Example 2 119.2119.2 실시예 3Example 3 120.7120.7 실시예 4Example 4 114.9114.9 실시예 5Example 5 110.9110.9 실시예 6Example 6 110.3110.3 실시예 7Example 7 111.7111.7 실시예 8Example 8 106.8106.8 비교예 1Comparative Example 1 219.3219.3 비교예 2Comparative Example 2 190.5190.5 비교예 3Comparative Example 3 178.4178.4 비교예 4Comparative Example 4 177.2177.2 비교예 5Comparative Example 5 174.2174.2 비교예 6Comparative Example 6 178.4178.4 비교예 7Comparative Example 7 178.4178.4 비교예 8Comparative Example 8 174.2174.2 비교예 9Comparative Example 9 180.1180.1 비교예 10Comparative Example 10 174.2174.2 비교예 11Comparative Example 11 178.4178.4 비교예 12Comparative Example 12 178.4178.4 대조군(비타민 C)Control (vitamin C) 124.5124.5

SC50의 값이 낮을수록 DPPH 자유라디칼의 소거 활성이 높은 것을 의미한다.표 3을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 피부 탄력 개선 효과가 현저히 우수하였다.The lower the SC 50 value, the higher the scavenging activity of DPPH free radicals. Referring to Table 3, the samples of Examples showed significantly better skin elasticity improvement effect than those of Comparative Examples.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 자유라디칼 소거 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 at the same time had significantly superior free radical scavenging activity compared to Comparative Examples 8 to 11 lacking some, and the results were suggest a synergistic effect.

실험예 3 : 항염 활성 평가Experimental Example 3: Evaluation of anti-inflammatory activity

Lipopolysaccharide(LPS)로 자극을 유도한 쥐 대식세포주 RAW 264.7 cell에서 EAME의 NO 생성 억제능을 분석하여 실시예 및 비교예의 항염 활성을 평가하였다.The anti-inflammatory activity of Examples and Comparative Examples was evaluated by analyzing the NO production inhibitory ability of EAME in RAW 264.7 cell, a mouse macrophage cell line induced by lipopolysaccharide (LPS) stimulation.

실험을 위해 Murine macrophage cell line 인 Raw 264.7 세포를 한국 세포주 은행으로부터 분양받았다. For the experiment, Raw 264.7 cells, a murine macrophage cell line, were distributed from the Korean cell line bank.

100 units/mL penicillin-streptomycin과 10% fetal bovine serum(FBS)이 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5%, CO2 incubator에서 배양하였으며, 2 내지 3일에 1회씩 계대 배양을 실시하였다.Using DMEM medium containing 100 units/mL penicillin-streptomycin and 10% fetal bovine serum (FBS), it was cultured in an incubator at 37° C., 5% CO 2 , and subcultured once every 2-3 days.

Raw 264.7 세포(3 x 105 cells/mL)를 18시간 전 배양하고, 실시예 및 비교예의 시료(농도 1%)와 LPS(1 μg/mL)를 동시 처리하여 24시간동안 배양하였다. Raw 264.7 cells (3 x 10 5 cells/mL) were cultured 18 hours before, and samples of Examples and Comparative Examples (concentration 1%) and LPS (1 μg/mL) were simultaneously treated and cultured for 24 hours.

생성된 NO는 Griess reagent을 이용하여 세포 배양액 중 존재하는 NO2 -의 형태로 측정하였다. The generated NO was measured in the form of NO 2 present in the cell culture medium using Griess reagent.

음성 대조군은 LPS를 처리하지 않았으며, 양성 대조군은 LPS만을 처리하여 생성된 NO량을 측정하였다.The negative control group was not treated with LPS, and the positive control group was treated with only LPS to measure the amount of NO generated.

세포 배양 상층액 100μL 및 Griess 시약(1%(w/v) sulfanilamide, 0.1%(w/v) naphtylehtylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid)을 동량 혼합하여 10분간 실온 암실에서 반응시킨 후 ELISA reader를 이용하여 흡광도(540nm)를 측정하였다.100 μL of cell culture supernatant and Griess reagent (1% (w/v) sulfanilamide, 0.1% (w/v) naphtylehtylenediamine in 2.5% (v/v) phosphoric acid) were mixed in equal amounts and reacted in the dark at room temperature for 10 minutes, followed by ELISA Absorbance (540 nm) was measured using a reader.

표준농도 곡선은 sodium nitrite(NaNO2)를 serial dilution하여 산출하였다(10-100μM). 측정 결과는 하기 표 4와 같다.The standard concentration curve was calculated by serial dilution of sodium nitrite (NaNO 2 ) (10-100 μM). The measurement results are shown in Table 4 below.

구분division NO 생성율(%)NO production rate (%) 실시예 1Example 1 47.147.1 실시예 2Example 2 44.844.8 실시예 3Example 3 43.243.2 실시예 4Example 4 41.441.4 실시예 5Example 5 37.237.2 실시예 6Example 6 38.538.5 실시예 7Example 7 39.139.1 실시예 8Example 8 35.935.9 비교예 1Comparative Example 1 73.073.0 비교예 2Comparative Example 2 76.376.3 비교예 3Comparative Example 3 72.772.7 비교예 4Comparative Example 4 68.468.4 비교예 5Comparative Example 5 83.083.0 비교예 6Comparative Example 6 67.667.6 비교예 7Comparative Example 7 73.073.0 비교예 8Comparative Example 8 67.867.8 비교예 9Comparative Example 9 68.668.6 비교예 10Comparative Example 10 83.083.0 비교예 11Comparative Example 11 74.074.0 비교예 12Comparative Example 12 75.975.9 대조군control 31.031.0 음성 대조군(무처리)negative control (no treatment) 100.0100.0

표 4를 참조하면, 실시예 1 내지 8의 시료는 비교예 1 내지 12 대비 NO(Nitric oxide) 생성 억제 활성이 우수하였다.Referring to Table 4, the samples of Examples 1 to 8 had excellent NO (nitric oxide) production inhibitory activity compared to Comparative Examples 1 to 12.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 항염 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 at the same time was significantly superior in anti-inflammatory activity compared to Comparative Examples 8 to 11 lacking a part, and the result was a synergistic effect according to the combination of each component. suggests

실험예 4 : 멜라닌 생성 억제 활성 평가Experimental Example 4: Evaluation of melanin production inhibitory activity

실시예 및 비교예의 멜라닌 생성 억제 효과를 평가하고자 멜라노사이트 B16F10을 배양하였다.To evaluate the melanogenesis inhibitory effect of Examples and Comparative Examples, melanocytes B16F10 were cultured.

B16F10을 8 x 104 cells가 되도록 6-well plate의 각 well에 분주한 후, 5% CO2, 37℃ 조건의 세포 배양기에서 18시간동안 배양하였다.B16F10 was aliquoted into each well of a 6-well plate to make 8 x 10 4 cells, and then incubated for 18 hours in a cell incubator under 5% CO 2 , 37°C conditions.

18시간 후 B16F10 세포의 배지를 제거하고 실시예 및 비교예의 시료를 동일 농도로 처리하여 5% CO2, 37℃ 조건의 세포 배양기에서 2일 동안 배양하였다.After 18 hours, the medium of the B16F10 cells was removed, and the samples of Examples and Comparative Examples were treated at the same concentration and cultured for 2 days in a cell incubator at 5% CO 2 , 37° C. conditions.

2일 후, scraper를 이용하여 플레이트로부터 세포를 회수하고 1분간 원심 분리하여 펠렛 형태의 세포를 수득하였다. After 2 days, cells were recovered from the plate using a scraper and centrifuged for 1 minute to obtain cells in the form of pellets.

수득된 세포에 1N NaOH를 넣고 95℃에서 10분 동안 반응시켜 멜라닌을 용해시켰다.1N NaOH was added to the obtained cells and reacted at 95° C. for 10 minutes to dissolve melanin.

10분 후, microplate reader를 이용하여 475nm 파장으로 멜라닌 생성량을 측정하였고, BCA assay를 이용하여 595nm 파장으로 단백질 양을 측정하였다.After 10 minutes, the amount of melanin production was measured at a wavelength of 475 nm using a microplate reader, and the amount of protein was measured at a wavelength of 595 nm using a BCA assay.

각 실험군은 “melanin 절대량 / protein 절대량”으로 수치화하여 나타내고, 실험군과 대조군을 상대 정량하였다.Each experimental group was numerically expressed as “absolute amount of melanin / absolute amount of protein”, and the experimental group and control group were quantified relative to each other.

Melanogenesis inducer로는 α-MSH를 사용하였고, 양성 대조군으로 알부틴을 사용하였다.α-MSH was used as a melanogenesis inducer, and arbutin was used as a positive control.

구분division 멜라닌 상대값 (%)Melanin Relative Value (%) 실시예 1Example 1 51.451.4 실시예 2Example 2 48.948.9 실시예 3Example 3 48.548.5 실시예 4Example 4 46.646.6 실시예 5Example 5 44.544.5 실시예 6Example 6 43.343.3 실시예 7Example 7 45.145.1 실시예 8Example 8 39.539.5 비교예 1Comparative Example 1 77.877.8 비교예 2Comparative Example 2 74.274.2 비교예 3Comparative Example 3 69.569.5 비교예 4Comparative Example 4 68.468.4 비교예 5Comparative Example 5 74.274.2 비교예 6Comparative Example 6 77.877.8 비교예 7Comparative Example 7 68.468.4 비교예 8Comparative Example 8 77.877.8 비교예 9Comparative Example 9 67.567.5 비교예 10Comparative Example 10 74.274.2 비교예 11Comparative Example 11 68.468.4 비교예 12Comparative Example 12 74.274.2 양성대조군positive control 43.343.3 대조군control 100.0100.0

표 5를 참조하면, 실시예 1 내지 8의 시료는 비교예 1 내지 12 대비 멜라닌 생성 억제 활성이 우수하였다.Referring to Table 5, the samples of Examples 1 to 8 were excellent in melanin production inhibitory activity compared to Comparative Examples 1 to 12.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 멜라닌 생성 저해 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 본원 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 at the same time was significantly superior in melanogenesis inhibitory activity compared to Comparative Examples 8 to 11 lacking a part, and the results are based on the combination of each component of the present application. This suggests a synergistic effect.

실험예 5 : 타이로시네이즈(tyrosinase) 억제 활성 평가Experimental Example 5: Tyrosinase (tyrosinase) inhibitory activity evaluation

상기 실시예, 및 비교예의 Tyrosinase 저해 활성을 평가하였다.Tyrosinase inhibitory activity of the Examples and Comparative Examples was evaluated.

상기 동일 농도로 처리하여 저해 활성을 측정하였으며, L-DOPA를 기질로 하였다.Inhibitory activity was measured by treatment with the same concentration, and L-DOPA was used as a substrate.

68mM sodium phosphate buffer(pH 6.8)에 mushroom tyrosinase를 녹여 125U/ml가 되도록 하고, -20℃에서 저장하여 실험에 사용하였다.Dissolve mushroom tyrosinase in 68mM sodium phosphate buffer (pH 6.8) to make 125U/ml, and store at -20℃ for use in the experiment.

96-well plate에 희석된 시료 40μM 및 8mM L-DOPA 120μL를 투입하였다.In a 96-well plate, 40 μM of diluted sample and 120 μL of 8 mM L-DOPA were added.

mushroom tyrosinase 40μL를 첨가하여 20분간 반응시킨 후, ELISA reader로 490nm에서 흡광도를 측정하였다. After adding 40 μL of mushroom tyrosinase and reacting for 20 minutes, absorbance was measured at 490 nm with an ELISA reader.

대조군으로 Arbutin을 사용하였다. Tyrosinase 저해 활성은 시료 무첨가군 대비 시료 첨가군의 흡광도 비율을 측정하였다.Arbutin was used as a control. Tyrosinase inhibitory activity was determined by measuring the absorbance ratio of the sample-added group compared to the sample-free group.

구분division Tyrosinase activity 상대값 (%)Tyrosinase activity relative value (%) 실시예 1Example 1 44.544.5 실시예 2Example 2 39.839.8 실시예 3Example 3 41.141.1 실시예 4Example 4 36.136.1 실시예 5Example 5 32.832.8 실시예 6Example 6 33.233.2 실시예 7Example 7 32.432.4 실시예 8Example 8 29.029.0 비교예 1Comparative Example 1 72.072.0 비교예 2Comparative Example 2 70.170.1 비교예 3Comparative Example 3 74.774.7 비교예 4Comparative Example 4 75.975.9 비교예 5Comparative Example 5 74.074.0 비교예 6Comparative Example 6 82.282.2 비교예 7Comparative Example 7 76.376.3 비교예 8Comparative Example 8 74.874.8 비교예 9Comparative Example 9 72.272.2 비교예 10Comparative Example 10 74.874.8 비교예 11Comparative Example 11 76.376.3 비교예 12Comparative Example 12 74.074.0 양성대조군positive control 44.544.5 대조군control 100.0100.0

표 6을 참조하면, 실시예 1 내지 8의 시료는 비교예 1 내지 12 대비 타이로시네이즈 저해 활성이 우수하였다.Referring to Table 6, the samples of Examples 1 to 8 had excellent tyrosinase inhibitory activity compared to Comparative Examples 1 to 12.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 타이로시네이즈 저해 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 본원 발명의 우수한 미백 활성을 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 at the same time was significantly superior in tyrosinase inhibitory activity compared to Comparative Examples 8 to 11 lacking a part, and the result is an excellent result of the present invention. suggest whitening activity.

실험예 6 : 엘라스타제 억제 효과 평가Experimental Example 6: Elastase inhibitory effect evaluation

엘라스타제(elastease)의 저해 활성을 통해 실시예 및 비교예의 시료의 주름 개선 효과를 평가하였다. 실시예 및 비교예의 시료를 정제수에 현탁하여 엘라스타제 저해 활성을 하기와 같이 측정하였다.The wrinkle improvement effect of the samples of Examples and Comparative Examples was evaluated through the inhibitory activity of elastase. The samples of Examples and Comparative Examples were suspended in purified water, and elastase inhibitory activity was measured as follows.

1.6mM 엘라스타제 기질(N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide; SANA) 및 0.2mM Tris-HCl 버퍼(pH 8.0)를 준비하였다. 96 well-plate에 상기 Tris-HCl 버퍼 0.165 mL, SANA 0.005 mL 및 엘라스타제 0.01 mL씩 분주하였다.1.6 mM elastase substrate (N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide; SANA) and 0.2 mM Tris-HCl buffer (pH 8.0) were prepared. In a 96 well-plate, 0.165 mL of the Tris-HCl buffer, 0.005 mL of SANA and 0.01 mL of elastase were dispensed.

양성 대조군과 함께 실시예 및 비교예의 시료를 넣고 25℃에서 15분간 반응시킨 후 405nm에서 흡광도를 측정하였다.After putting the samples of Examples and Comparative Examples together with a positive control and reacting at 25° C. for 15 minutes, absorbance was measured at 405 nm.

시료를 첨가하지 않은 흡광도 대비 시료를 첨가한 흡광도의 차의 비율로 엘라스타제 저해 활성의 퍼센트(%)를 계산하였다.The percentage (%) of elastase inhibitory activity was calculated as the ratio of the difference between the absorbance to which the sample was added to the absorbance to which the sample was not added.

양성 대조군으로 oleanolic acid를 사용하였고, 실시예 및 비교예의 시료의 엘라스타제를 50% 억제하는 농도(IC50)를 측정하여 표 7에 나타내었다.Oleanolic acid was used as a positive control, and the concentration (IC 50 ) that inhibited elastase by 50% of the samples of Examples and Comparative Examples was measured and shown in Table 7.

[엘라스타제 50% 억제 농도][Elastase 50% inhibitory concentration] 구분division ICIC 5050 (μg/mL)(μg/mL) 실시예 1Example 1 161.9161.9 실시예 2Example 2 152.5152.5 실시예 3Example 3 154.1154.1 실시예 4Example 4 146.2146.2 실시예 5Example 5 132.2132.2 실시예 6Example 6 132.4132.4 실시예 7Example 7 131.3131.3 실시예 8Example 8 114.2114.2 비교예 1Comparative Example 1 270.3270.3 비교예 2Comparative Example 2 277.5277.5 비교예 3Comparative Example 3 270.3270.3 비교예 4Comparative Example 4 263.2263.2 비교예 5Comparative Example 5 268.9268.9 비교예 6Comparative Example 6 280.4280.4 비교예 7Comparative Example 7 262.3262.3 비교예 8Comparative Example 8 266.2266.2 비교예 9Comparative Example 9 278.1278.1 비교예 10Comparative Example 10 268.9268.9 비교예 11Comparative Example 11 262.3262.3 비교예 12Comparative Example 12 265.9265.9 양성 대조군positive control 98.898.8

IC50의 값이 낮을수록 엘라스타제 활성 억제율이 높은 것을 의미한다. 엘라스타제(Elastase)는 진피 내 피부 탄력을 유지시키는 데 중요한 기질인 엘라스틴을 분해하는 효소이다. 또한 엘라스타제는 다른 중요한 기질단백질인 콜라겐(collagen)을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해 효소이다.The lower the IC 50 value, the higher the elastase activity inhibition rate. Elastase is an enzyme that breaks down elastin, an important substrate for maintaining skin elasticity in the dermis. In addition, elastase is a non-specific hydrolase capable of decomposing collagen, which is another important matrix protein.

따라서 높은 엘라스타제 활성 억제율은 피부 탄력을 유지하는데 중요한 엘라스틴과 콜라겐이 오래 유지됨을 의미하며, 이는 피부 주름 개선 효과가 우수하다는 것을 시사한다.Therefore, the high elastase activity inhibition rate means that elastin and collagen, which are important for maintaining skin elasticity, are maintained for a long time, suggesting that the skin wrinkle improvement effect is excellent.

표 7을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예에 비해 엘라스타제 활성을 더욱 효과적으로 억제하였다.Referring to Table 7, the samples of Examples more effectively inhibited the elastase activity compared to Comparative Examples.

실험예 7 : 주름 개선 효과 평가Experimental Example 7: Evaluation of wrinkle improvement effect

실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 조성물의 피부 주름 개선 효과를 평가하였다.The skin wrinkle improvement effect of the cosmetic compositions formulated with the samples of Examples and Comparative Examples was evaluated.

30세 이상의 성인 여성을 대상으로 20개의 그룹으로 나누고, 피시험자는 4주 동안 매일 아침, 저녁 세안 후 크림 타입으로 제형화한 화장료를 안면에 고르게 도포하여 충분히 흡수시켰다.Adult women over 30 years of age were divided into 20 groups, and the test subject was thoroughly absorbed by applying the cream-formed cosmetic to the face after cleansing every morning and evening for 4 weeks.

주름개선 평가를 위하여 ANTERA 3D(Miravex, Ireland)를 적용하였으며, 기기측정은 시험물질 사용 전과 3주 사용 후 시점에서 이루어졌다. ANTERA 3D (Miravex, Ireland) was applied to evaluate wrinkle improvement, and device measurements were made before and 3 weeks after use of the test substance.

동일한 시험담당자가 모든 피시험자의 왼쪽 눈꼬리부위를 측정하였고, 측정의 재현성을 위하여 시험 물질 사용 전에 측정한 이미지와 오버랩시켜 동일부위를 측정하였다.The same test person measured the left corner of the eye of all subjects, and for reproducibility of the measurement, the same part was measured by overlapping the image measured before the test substance was used.

촬영된 이미지는 ANTERA 3D 전용 소프트웨어인 ANTERA pro software를 이용하여 매칭시킨 후 일치된 측정부위를 분석에 사용하였다.The captured images were matched using ANTERA pro software, which is a dedicated software for ANTERA 3D, and then the matched measurement area was used for analysis.

측정값은 측정변수인 Indentation index를 이용하여 피부 주름을 나타내는 Wrinkles small 값을 분석하였다.Wrinkles small values representing skin wrinkles were analyzed using the indentation index, which is a measurement variable.

표 8에서 실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 사용에 따른 피시험자의 4주 후 Wrinkles small값의 변화량을 나타내었다. 주름 개선 효과가 우수할수록 Wrinkles small 값 변화량은 크다.Table 8 shows the amount of change in Wrinkles small value after 4 weeks of the test subject according to the use of cosmetics formulated with samples of Examples and Comparative Examples. The greater the wrinkle improvement effect, the greater the change in the Wrinkles small value.

구분division Wrinkles small 평균값Wrinkles small average 실시예 1Example 1 1.221.22 실시예 2Example 2 1.271.27 실시예 3Example 3 1.251.25 실시예 4Example 4 1.321.32 실시예 5Example 5 1.371.37 실시예 6Example 6 1.391.39 실시예 7Example 7 1.381.38 실시예 8Example 8 1.511.51 비교예 1Comparative Example 1 0.740.74 비교예 2Comparative Example 2 0.730.73 비교예 3Comparative Example 3 0.720.72 비교예 4Comparative Example 4 0.810.81 비교예 5Comparative Example 5 0.740.74 비교예 6Comparative Example 6 0.740.74 비교예 7Comparative Example 7 0.800.80 비교예 8Comparative Example 8 0.750.75 비교예 9Comparative Example 9 0.760.76 비교예 10Comparative Example 10 0.810.81 비교예 11Comparative Example 11 0.830.83 비교예 12Comparative Example 12 0.820.82

표 8을 참조하면, 실시예의 시료를 제형화한 화장료는 비교예 대비 피부 주름 개선 효과가 현저히 우수하였다.Referring to Table 8, the cosmetic formulated with the sample of Example was significantly superior to the skin wrinkle improvement effect compared to Comparative Example.

실험예 8 : 피부 탄력 개선 효과 평가Experimental Example 8: Evaluation of skin elasticity improvement effect

실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 조성물의 피부 탄력 개선 효과를 평가하였다.The skin elasticity improvement effect of the cosmetic compositions formulated with the samples of Examples and Comparative Examples was evaluated.

상기 각 시료를 동일한 조성의 크림으로 제형화하였으며 실시예 및 비교예 시료만을 달리하였다.Each of the samples was formulated as a cream of the same composition, and only the samples of Examples and Comparative Examples were different.

온도 24 내지 26℃, 습도 75%의 조건에서 20세 이상의 건강한 여성(평균연령 39세)을 그룹별로 나누고 제형화한 실시예 및 비교예의 크림을 각각 도포하였다.The creams of Examples and Comparative Examples prepared by dividing into groups of healthy women (average age 39 years) over 20 years of age at a temperature of 24 to 26° C. and a humidity of 75% were applied, respectively.

눈가를 중심으로 하루 2회씩(아침 및 저녁) 12주간 제형화한 크림을 도포하였고, 피부 탄력 측정기(Cutometer MPA580, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 피부 탄력을 측정하였다.The cream formulated for 12 weeks was applied twice a day (morning and evening) around the eyes, and skin elasticity was measured using a skin elasticity meter (Cutometer MPA580, Conrage + Khazaka, Germany).

시험결과는 cutometer MPA580의 R8(R8(12주)-R8(0주)) 값으로 기재하였고, R8 값은 피부 점탄성(Vicoelasticity)의 성질을 나타내며, 결과는 하기 표 9와 같다The test results were described as the R8 (R8 (12 weeks)-R8 (0 weeks)) value of the cutometer MPA580, and the R8 value represents the property of skin viscoelasticity, and the results are shown in Table 9 below.

구분division 피부 탄력 개선 효과Skin elasticity improvement effect 실시예 1Example 1 0.690.69 실시예 2Example 2 0.770.77 실시예 3Example 3 0.790.79 실시예 4Example 4 0.780.78 실시예 5Example 5 0.830.83 실시예 6Example 6 0.840.84 실시예 7Example 7 0.830.83 실시예 8Example 8 0.910.91 비교예 1Comparative Example 1 0.440.44 비교예 2Comparative Example 2 0.370.37 비교예 3Comparative Example 3 0.360.36 비교예 4Comparative Example 4 0.410.41 비교예 5Comparative Example 5 0.380.38 비교예 6Comparative Example 6 0.420.42 비교예 7Comparative Example 7 0.390.39 비교예 8Comparative Example 8 0.450.45 비교예 9Comparative Example 9 0.450.45 비교예 10Comparative Example 10 0.470.47 비교예 11Comparative Example 11 0.480.48 비교예 12Comparative Example 12 0.440.44 양성 대조군(비타민 C)Positive control (vitamin C) 0.910.91 음성 대조군(무처리)negative control (no treatment) 0.310.31

표 9를 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 피부 탄력 개선 효과가 현저히 우수하였다.Referring to Table 9, the sample of Example was significantly superior to the skin elasticity improvement effect compared to Comparative Example.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 at the same time was significantly superior to Comparative Examples 8 to 11 lacking some, and the results suggest a synergistic effect according to the combination of each component. .

실험예 9 : 세포 이동 촉진 활성 평가Experimental Example 9: Evaluation of cell migration promoting activity

상처 치유 어세이(Wound healing assay)를 통해 실시예 및 비교예의 시료의 피부 재생, 상처 치유 효과를 확인하였다.The skin regeneration and wound healing effects of the samples of Examples and Comparative Examples were confirmed through a wound healing assay.

구체적으로, HaCat 세포를 96웰 플레이트에 1×103 cells/well의 수로 분주하였다. Specifically, HaCat cells were seeded in a 96-well plate at the number of 1×10 3 cells/well.

24시간 후 5% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 교체한 후 실시예 및 비교예의 시료를 각 웰에 동일 농도(1%)로 처리하였다.After 24 hours, the samples of Examples and Comparative Examples were treated at the same concentration (1%) in each well after replacing the DMEM medium with 5% FBS.

48시간 후 옐로우 팁(yellow tip)을 이용하여 상처를 주었고, 24시간 후 상처가 닫힌 정도를 사진을 찍어 이미지 J(image J) 프로그램을 통해 면적을 측정하였다.After 48 hours, a wound was made using a yellow tip, and the area was measured through the image J program by taking a picture of the degree of closure of the wound after 24 hours.

구분division 세포이동성(%)Cell Mobility (%) 실시예 1Example 1 55.055.0 실시예 2Example 2 60.660.6 실시예 3Example 3 60.260.2 실시예 4Example 4 64.064.0 실시예 5Example 5 67.767.7 실시예 6Example 6 68.468.4 실시예 7Example 7 66.966.9 실시예 8Example 8 74.574.5 비교예 1Comparative Example 1 28.028.0 비교예 2Comparative Example 2 27.127.1 비교예 3Comparative Example 3 26.526.5 비교예 4Comparative Example 4 25.825.8 비교예 5Comparative Example 5 27.727.7 비교예 6Comparative Example 6 26.426.4 비교예 7Comparative Example 7 27.527.5 비교예 8Comparative Example 8 32.132.1 비교예 9Comparative Example 9 30.130.1 비교예 10Comparative Example 10 31.231.2 비교예 11Comparative Example 11 31.731.7 비교예 12Comparative Example 12 31.031.0

표 10을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 세포 이동능이 현저히 우수하였다.Referring to Table 10, the sample of Example was remarkably excellent in cell migration ability compared to Comparative Example.

특히, 테트라펩타이드-21 및 팔미토일 펜타펩타이드-4를 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 8 내지 11에 비해 세포 이동 촉진 활성이 현저히 월등하며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지에 의해 피부 재생, 상처 치유 효과가 개선되었음을 시사한다.In particular, Example 1 containing tetrapeptide-21 and palmitoyl pentapeptide-4 simultaneously has significantly superior cell migration promoting activity compared to Comparative Examples 8 to 11 lacking some, and the results are according to the combination of each component. It suggests that skin regeneration and wound healing effects are improved by synergy.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.The description of the present invention described above is for illustration, and those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains can understand that it can be easily modified into other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not restrictive. For example, each component described as a single type may be implemented in a distributed manner, and likewise components described as distributed may be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the following claims, and all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims and their equivalents should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (8)

테트라펩타이드-21(Tetrapeptide-21), 팔미토일 펜타펩타이드-4(Palmitoyl Pentapeptide-4), 헥사펩타이드-11(Hexapeptide-11), 카노신(Carnosine) 및 지모뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선 및 피부 미백용 화장료 조성물.Anti-wrinkle containing Tetrapeptide-21, Palmitoyl Pentapeptide-4, Hexapeptide-11, Carnosine and Zymoji root extract as active ingredients and a cosmetic composition for skin whitening. 삭제delete 제1항에 있어서,
아데노신(Adenosine) 및 글루타치온으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함하는, 화장료 조성물.
According to claim 1,
A cosmetic composition further comprising at least one selected from the group consisting of adenosine and glutathione.
제1항 또는 제3항에 있어서,
피부 탄력 개선 용도를 더 포함하는 화장료 조성물.
4. The method of claim 1 or 3,
A cosmetic composition further comprising the use of improving skin elasticity.
삭제delete 제1항 또는 제3항에 있어서,
항염 또는 항산화 용도를 더 포함하는 화장료 조성물.
4. The method of claim 1 or 3,
A cosmetic composition further comprising an anti-inflammatory or antioxidant use.
제1항 또는 제3항에 있어서,
피부 재생 용도를 더 포함하는 화장료 조성물.
4. The method of claim 1 or 3,
A cosmetic composition further comprising a skin regeneration use.
제1항 또는 제3항에 있어서,
유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화된 화장료 조성물.
4. The method of claim 1 or 3,
A cosmetic composition formulated with one or more selected from the group consisting of softening lotion, nourishing lotion, nourishing cream, massage cream, essence, ampoule, gel, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray and powder.
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