KR101736725B1

KR101736725B1 - 마나산틴 b를 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101736725B1
Application number: KR1020160010336A
Authority: KR
Inventors: 김우리; 오성화; 이정노; 박성민
Original assignee: 주식회사 뉴메디온
Priority date: 2016-01-27
Filing date: 2016-01-27
Publication date: 2017-05-18

Abstract

본 발명은 마나산틴 B (manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 및 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 마나산틴 B는 MMP-1을 억제하여 피부 주름 개선 효과 및 노화 방지 효과를 발휘한다.

Description

마나산틴 B를 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for anti-wrinkle with the manassantin B}

본 발명은 마나산틴 B (manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 및 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부 환경으로부터 인체를 보호하며, 내부의 수분 및 유용 성분이 밖으로 유출되는 것을 막아주는 장벽기능, 체온조절, 배설 등 다양한 생리적 기능을 담당하고 있는 중요한 기관이다. 그러나, 일반적으로 나이가 들면서 이러한 기능들이 점차 약화되고 피부의 노화가 진행된다. 특히, 피부 장벽의 기능을 수행하는 지질층의 지질 조성과 함량이 변화하면서 그 기능이 급격히 저하되는데, 피부 수분 함량이 감소하게 되면, 피부가 건조해지고, 주름이 형성되며, 기미, 주근깨, 색소 침착 및 다양한 피부 병변이 유발된다.

피부 주름 형성에 관련이 있는 결합 조직은 주로 콜라겐 섬유(collagen fiber), 세망섬유(reticular fiber), 엘라스틴 섬유(elastic fiber) 등의 섬유 성분으로 구성되어 있다.

진피 조직 내에 있는 콜라겐과 엘라스틴을 분해하는 MMP-1은 MMP(matrix metalloproteinase) 중 하나의 종류로서 피부 내에 존재하는 단백질 분해효소이며, 세포 간 형태 형성, 상처 치유, 조직 재생 및 재조직에 중요한 단백질이다. 그러나 MMP-1은 자외선에 노출되었을 때, 체내에서 평소보다 많이 생성되어, 콜라겐과 결합한 후, 콜라겐을 절단하여 피부 노화를 유발하게 된다.

보다 구체적으로, 콜라겐 단백질들은 'MMP-1 hemopexin domain'에 특이적으로 결합한다. 이로 인해, 콜라겐의 3차 구조를 풀게 되고, MMP-1 촉매활성 도메인(catalytic domain)의 아연이온과 결합 후, 절단되어진다.

상기와 같은 과정을 통해 주름 발생 등의 피부 노화가 진행되는데, 최근 외모에 대한 관심이 높아지면서, 피부노화를 지연시키고 예방하기 위한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 또한, 탄력있는 피부를 유지 및 개선하기 위해 화장품에 대한 관심도 높아지고 있는 실정이다.

한편, 삼백초(Saururus chinensis (Lour.) Baill.)는 어성초를 닮은 여러해살이풀로 잎에 흰 반점이 있으며, 꽃이 희고, 뿌리가 희다 하여 삼백초(三白草)라고 부른다. 삼백초(三百草)는 제주도를 비롯한 우리나라 남부지방의 숲 속 물기가 많은 땅에서 드물게 자라며, 키는 30~90센티미터이고, 뿌리는 희고 털이 있다.

삼백초는 변비, 당뇨병, 간장병, 암, 고혈압, 심장병, 부인병, 신장병 등 갖가지 성인병의 예방과 치료에 주목할 만한 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 삼백초의 유효물질인 퀘르세틴, 루틴 등 플라본계 물질은 은행잎 플라본계 물질 이상으로 모두 피를 맑게 하고, 많은 피를 전신의 각 조직 깊숙이 고루 공급해주는 말초동맥을 강화 보호하는 작용을 하며, 수용성 타닌은 DNA(유전자) 변이를 막는 작용이 있어 발암억제력이 크다는 연구가 있다.

한편, 어성초(Houttuynia cordata Thunb.)는 잎에서 고기 비린내가 나기 때문에 붙여진 이름으로, 이 잎을 비벼서 부수면 생선비린내가 나며 맛은 맵고 성질은 약간 차다. 어성초는 해열, 배농작용이 뛰어나 폐농양으로 인한 기침, 피고름을 토할 때, 폐렴, 급만성기관지염, 장염, 요로감염증, 종기에 쓰며, 열이 많고 소변을 못 볼 때 사용한다. 약리작용으로 항균작용, 면역증강작용, 항염증작용, 이뇨작용, 진해작용이 보고되어 있다.

이에 본 발명자들은 천연물로부터 기원하는 피부 주름 개선용 및 피부 노화 방지용 조성물을 연구하던 중 삼백초 또는 어성초로부터 유래하는 천연성분을 분리함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

대한민국 등록특허 제10-0774437호(등록일자: 2007. 11. 01)에는, 마나산틴 B(manassantin B)를 통해 멜라노좀(melanosome)의 세포내 이동을 억제함으로써 피부에서의 미백효과를 기대할 수 있는 피부 미백용 외용제 조성물에 관해 기재되어 있다. 대한민국 공개특허 제10-2002-0035656호(공개일자: 2002. 05. 15)에는, 삼백초추출물로 이루어진 티로시나제 저해제 및 이를 함유하는 미백화장료에 관해 기재되어 있다.

본 발명은 마나산틴 B를 유효성분으로 함유하여 주름 개선 및 피부 노화 방지 효과를 발휘하는 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 마나산틴 B는 MMP-1 억제 효과를 발휘하며, 세포 생존율 및 안정성이 우수하여 피부 화장료 조성물에 적용하기 적합하다.

[화학식 1]

본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B(manassantin B)는 삼백초 (Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초 (Houttuynia cordata Thunb.) 유래일 수 있다.

본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B는 바람직하게 삼백초의 잎, 줄기, 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상으로부터 추출될 수 있으나, 가장 바람직하게는 뿌리로부터 추출되는 것이 좋다.

본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B(manassantin B)는 바람직하게 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.00001~30.0중량% 함유되는 것이 좋다. 0.00001중량% 미만으로 함유되면 피부 주름개선 효과가 미미하며, 30.0중량%를 초과하면 제형상 및 제품의 안정성에 영향을 미치며, 초과투입에 따른 상승 효과가 적어 경제적이지 못하다.

한편, 상기 마나산틴 B는 삼백초(Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초(Houttuynia cordata Thunb.)에, 에탄올을 가하여 추출함으로써 에탄올 추출물을 수득하는 단계 (a); 상기 에탄올 추출물을 물에 현탁한 후, n-헥산을 가하여 분획하는 단계 (b); 상기 단계 (b)의 분획 후, 물 층을 분리하고, 분리한 물 층에 메틸렌클로라이드(methylene chloride)를 가하여 분획하는 단계 (c); 상기 단계 (c)의 분획 후, 메틸렌클로라이드 분획층을 분리하는 단계 (d); 상기 단계 (d)에서 분리한 메틸렌클롤라이드 분획층에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하는 단계 (e);를 포함하는 과정으로부터 회수되는 것이 좋다. 이때, 마나산틴 B는 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조의 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.마나산틴 B는 MMP-1 억제 효과를 발휘하며, 세포 생존율 및 안정성이 우수하여 피부 화장료 조성물에 적용하기 적합하다.

[화학식 1]

본 발명의 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B(manassantin B)는 삼백초 (Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초 (Houttuynia cordata Thunb.) 유래일 수 있다.

본 발명의 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B는 바람직하게 삼백초의 잎, 줄기, 뿌리 중 선택되는 어느 하나 이상으로부터 추출될 수 있으나, 가장 바람직하게는 뿌리로부터 추출되는 것이 좋다.

본 발명의 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 마나산틴 B(manassantin B)는 바람직하게 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.00001~30.0중량% 함유되는 것이 좋다. 0.00001중량% 미만으로 함유되면 피부 주름개선 효과가 미미하며, 30.0중량%를 초과하면 제형상 및 제품의 안정성에 영향을 미치며, 초과투입에 따른 상승 효과가 적어 경제적이지 못하다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있다. 특히, 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

한편, 본 발명에서 "유효성분으로 함유한다"는 의미는 본 발명의 화장료 조성물로부터 피부주름 개선효과, 피부노화 방지효과를 나타낼 수 있는 정도로 조성물에 마나산틴 B가 첨가되는 것을 의미한다.

본 발명의 마나산틴 B는 MMP-1을 억제하여 뛰어난 피부 주름 개선 및 피부 노화 방지 효과를 발휘한다.

도 1은 삼백초 추출물로부터 분리된 마나산틴 B의 고속 액체 크로마토그래피(HPLC) 크로마토그램과 UV 스펙트럼이다.
도 2는 삼백초 추출물로부터 분리된 마나산틴 B의¹H, ¹³C NMR 스펙트럼이다.
도 3은 마나산틴 B의 4가지 농도에서 세포 생존율을 나타내는 그래프이다.
도 4는 마나산틴 B의 4가지 농도에서 MMP-1의 발현 억제율을 나타내는 그래프이다.

이하 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

[ 실시예 1: 삼백초 추출물로부터 마나산틴 B 분리]

본 실시예에서는 삼백초로부터 본 발명의 마나산틴 B를 분리내고자 하였다.

(1) 마나산틴 B를 얻기 위한 삼백초 추출물의 제조

건조된 삼백초 뿌리를 분쇄한 후, 건조 중량 1 kg을 플라스크에 넣었다. 그 후, 70%(v/v) 에탄올 10 L을 가해 3일간 3회 반복 냉침하여 추출하였다. 추출 후, 여과하여 삼백초 추출물 270.3 g을 제조하였다.

(2) 마나산틴 B 분리

상기 제조된 삼백초 추출물 270.3 g 중 110 g을 정제수에 현탁시킨 후, n-헥산(n-hexane)으로 분획하고, n-헥산 분획물 8.12 g을 수득하였다. 물층을 다시 메틸렌 클로라이드(methylene chloride)로 분획하여, 메틸렌 클로라이드 분획물 6.96 g을 수득하였다. 메틸렌 클로라이드 분획물 6 g에 대하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (n-hexane : ethyl acetate gradient)를 시행하여, 6개의 분획 (SCR-M1 ~ SCR-M6)으로 나누었다.

그 후, 분취용 고속액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 SCR-M3으로부터 2개의 분획(SCR-M3-1, SCR-M3-2)으로 나누고, SCR-M3-1의 순도를 높이기 위해 에틸아세테이트(EA)에 용해되는 것만 분취하여, 마나산틴 B(manassantin B) 51.79 mg을 얻었다 (도 1). 도 1은 삼백초 추출물로부터 분리된 마나산틴 B의 고속 액체 크로마토그래피(HPLC) 크로마토그램과 UV 스펙트럼이다.

한편, 분리된 마나산틴 B는 ¹H 및¹³C NMR 분석으로부터 구조가 동정되었다 (도 2). 도 2는 삼백초 추출물로부터 분리된 마나산틴 B의¹H, ¹³C NMR 스펙트럼이다.

[ 실험예 1: 마나산틴 B의 세포 생존율 평가]

본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 마나산틴 B가 세포 생존율에 미치는 영향을 확인하고자 하였다.

사람 정상 섬유아세포 (human dermal fibroblast neonatal, 이하 HDFn)를 1×10⁴cells/well 농도로 96-웰 플레이트(well plate)에 접종한 후, 안정화시키기 위해 24시간 동안 37℃ 인큐베이터에서 안정화시켰다.

마나산틴 B는 1, 5, 25, 100 ㎍/㎖의 농도로 처리하였다. 처리 24시간 후, '3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)' 시약을 처리하였다. 시약 처리 2시간 후, 시료를 제거하고, DMSO 150 ㎕를 각 웰(well) 당 넣어, 형성된 포르마잔(formazan)을 녹여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

실험군	세포생존률 평균값 (% of control)	표준편차
대조군(Control)	100.00	± 1.11
100 uM 아데노신(Adenosine)	100.43	± 0.86
마나산틴 B 1 ㎍/ml	90.46	± 0.28
마나산틴 B 5 ㎍/ml	94.85	± 0.40
마나산틴 B 25 ㎍/ml	78.31	± 0.43
마나산틴 B 100 ㎍/ml	93.26	± 2.83

실험결과, 마나산틴 B는 세포 생존에 크게 영향을 미치지 않음을 알 수 있다 (도 3). 도 3은 마나산틴 B의 4가지 농도에서 세포 생존율을 나타내는 그래프이다.

[ 실험예 2: 마나산틴 B의 MMP -1 억제율 평가]

본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 마나산틴 B의 MMP-1 억제율을 평가하고자 하였다.

사람 정상 섬유아세포(human dermal fibroblast neonatal, HDFn)를 5×10⁴ cells/well 농도로 24-웰 플레이트(well plate)에 접종한 후, 24시간 동안 37℃ 인큐베이터에서 안정화시켰다.

그 후, PBS로 2번 헹구고, PBS가 있는 상태에서 UVA를 6 J/cm²로 조사하였다. 조사 후, 0.2% FBS가 첨가된 배지로 교환하였으며, 마나산틴 B (1, 5, 25, 100 ㎍/㎖)와 양성대조군으로 아데노신 100 ppm을 각각 처리하였다.

48시간 후에 상층액을 'human total MMP-1 ELISA kit (human total MMP-1 Cat.no. DY901, R&D systems)'를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.

실험군	MMP-1 발현 평균값 (% of control)	표준편차
대조군(Control)	100.00	± 3.50
100 uM 아데노신(Adenosine)	57.11	± 0.90
1 ㎍/ml	72.97	± 1.13
5 ㎍/ml	66.72	± 2.36
25 ㎍/ml	62.91	± 1.64
100 ㎍/ml	50.38	± 1.58

측정결과, 마나산틴 B는 1 ㎍/ml 부터 농도 의존적으로 MMP-1을 억제함을 확인할 수 있었다. 또한, 100 ppm의 낮은 농도에서도 MMP-1 발현이 50% 저해됨을 확인할 수 있다 (도 4). 도 4는 마나산틴 B의 4가지 농도에서 세포 생존율과 MMP-1의 발현 억제율을 나타내는 그래프이다.

[ 실시예 2: 마나산틴 B( manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물(크림)의 제조]

본 실시예에서는 마나산틴 B를 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물(크림)을 제조하고자 하였다.

마나산틴 B를 함유한 피부 주름개선용 크림의 성분구성은 하기 표 3에 나타내었다.

상기 표 3에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존하였다. 이것에 가)상을 가하여 예비 유화 후, 호모믹서로 균일하게 유화한 다음에 서서히 냉각하여 크림형태의 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제조하고, 실시예 1이라고 지칭하였다.

이상에서 설명된 마나산틴 B는 단지 본 발명을 설명하기 위한 목적에서 사용된 것이지, 의미 한정이나 특허 청구범위에 기재된 본 발명의 범위를 제한하기 위해 사용된 것이 아니다.

[ 비교예 1: 마나산틴 B( manassantin B)를 함유하지 않는 화장료 조성물(크림)의 제조]

본 비교예에서는 마나산틴 B를 함유하지 않는 화장료 조성물을 제조하고자, 마나산틴 B를 첨가하지 않고, 잔량을 정제수로 맞춘 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 동일하게 화장료 조성물을 제조하였다.

[ 실험예 3: 피부 주름 개선 효과 및 피부자극 관능평가]

본 실험예에서는 본 발명에 따른 피부 주름 개선용 화장료 조성물의 피부 주름개선효과 및 피부자극을 평가하기 위하여, 상기 실시예 2와 비교예 1에서 제조된 크림을 이용하여 관능평가를 실시하였다.

관능평가는 피부의 주름개선효과 항목에 대하여는 비교예 1의 크림을 기준으로, 실시예 2의 크림이 나타내는 주름개선효과를 상대적으로 평가하게 하였고, 피부자극에 대한 관능평가는 피부의 가려움, 따가움 및 홍반 등의 현상을 평가하게 하였다. 평가는 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점), 매우 나쁨(1점)의 오점법 기준에 의거하여 수행하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

번호	피부자극		주름개선효과
번호	실시예 2	비교예 1	주름개선효과
1	4	4	4
2	5	5	5
3	4	4	5
4	4	4	4
5	4	4	5
6	4	4	5
7	5	5	4
8	5	4	5
9	5	4	5
10	4	5	4
11	5	5	4
12	4	4	5
13	5	4	5
14	5	4	4
15	5	5	5
평균	4.53	4.33	4.60

실험결과, 본 발명에 따른 실시예 2의 화장료 조성물에 대한 피부자극 평가점수는 4.53점으로 매우 양호하게 평가되어, 비교예 1과 마찬가지로 피부자극 정도가 낮아 피부 안전성이 우수함을 확인할 수 있었다.

또한, 비교예 1 대비 실시예 2의 화장료 조성물이 가진 상대적인 피부의 주름개선효과는 평가점수 4.60점으로 개선 정도가 매우 우수함을 알 수 있었다.

[ 실험예 4: 피부의 안전성 실험]

본 실험예에서는 본 발명의 마나산틴 B와 상기 마나산틴 B를 포함하는 화장료 조성물의 피부 안전성, 즉 피부반응의 관찰을 통해서 자극 또는 알레르기성 반응의 발생 여부를 알아보기 위하여 한국식품의약품안전청 기준 피부안전성 검사법에 따라 인체첩포시험을 실시하였다.

피험자로 20대의 건강한 성인 남, 여 15명을 선정하였고, 첩포시험은 대상자 상박 내측에 첩포를 부착하였으며, 48시간이 지난 후 첩포를 제거하였다.

약 60분간 안정을 취하도록 한 후, 첫 판독을 시행하였다. 또한, 첩포 부착 96시간이 경과한 후, 2차 판독을 시행하였다. 판정기준은 하기 표 5에 나타내었다.

반응	가중치	판정의 기준
-	0	무반응
±	0.5	희미한 홍반
+	1	경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진
++	2	뚜렷한 홍반, 구진 및 수포
+++	2	대수포

첩포 부착 후, 48시간과 96시간에 판독한 결과를 하기 수학식 1을 이용하여 시료에 대한 피부 반응도를 산출하였으며, 첩포 실험결과에 근거하여 계산된 피부 반응도를 하기 표 6에 나타내었다. 또한, 피부 반응도별 판정 기준을 하기 표 7에 나타내었다.

시료	48시간		96시간		반응도 (%)
시료	+	++	+	++	48시간	96시간	평균
실시예 1 (1% in 1,3-Butyleneglycol)	-	-	-	-	0.00	0.00	0.00
실시예 2	-	-	-	-	0.00	0.00	0.00

피부의 평균 반응도	판정 기준
0.0 ~ 0.9	무자극
1.0 ~ 2.9	경자극
3.0 ~ 4.9	중자극
5.0 이상	강자극

실험결과, 상기 표 6와 표 7에 제시된 바와 같이, 본 발명의 마나산틴 B(실시예 1)과, 마나산틴 B를 포함하는 화장료 조성물(실시예 2)은 무자극으로, 민감한 피부에 사용해도 좋은 것으로 확인되었다.

따라서, 본 발명의 마나산틴 B를 함유하는 피부 주름개선용 화장료 조성물은 피부 부작용이 없는 안전한 성분으로 나타났다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
[화학식 1]
제1항에 있어서,
상기 마나산틴 B(manassantin B)는,
삼백초 (Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초 (Houttuynia cordata Thunb.) 유래인 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
제2항에 있어서,
상기 마나산틴 B(manassantin B)는,
화장료 조성물 총 중량에 대해 0.00001~30.0중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
삼백초(Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초(Houttuynia cordata Thunb.)에 에탄올을 가하여 추출함으로써 에탄올 추출물을 수득하는 단계 (a);
상기 에탄올 추출물을 물에 현탁한 후, n-헥산을 가하여 분획하는 단계 (b);
상기 단계 (b)의 분획 후, 물 층을 분리하고, 분리한 물 층에 메틸렌클로라이드(methylene chloride)를 가하여 분획하는 단계 (c);
상기 단계 (c)의 분획 후, 메틸렌클로라이드 분획층을 분리하는 단계 (d);
상기 단계 (d)에서 분리한 메틸렌클롤라이드 분획층에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 6개의 분획으로 나눈 후, 에틸아세테이트에 용해되는 것만 분취하여 하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 수득하는 단계 (e);를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
[화학식 1]
하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
[화학식 1]
제5항에 있어서,
상기 마나산틴 B(manassantin B)는,
삼백초 (Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초 (Houttuynia cordata Thunb.) 유래인 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
제5항에 있어서,
상기 마나산틴 B(manassantin B)는,
화장료 조성물 총 중량에 대해 0.00001~30.0중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
삼백초(Saururus chinensis (Lour.) Baill.) 또는 어성초(Houttuynia cordata Thunb.)에 에탄올을 가하여 추출함으로써 에탄올 추출물을 수득하는 단계 (a);
상기 에탄올 추출물을 물에 현탁한 후, n-헥산을 가하여 분획하는 단계 (b);
상기 단계 (b)의 분획 후, 물 층을 분리하고, 분리한 물 층에 메틸렌클로라이드(methylene chloride)를 가하여 분획하는 단계 (c);
상기 단계 (c)의 분획 후, 메틸렌클로라이드 분획층을 분리하는 단계 (d);
상기 단계 (d)에서 분리한 메틸렌클롤라이드 분획층에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 6개의 분획으로 나눈 후, 에틸아세테이트에 용해되는 것만 분취하여 하기 화학식 1로 표시되는 마나산틴 B(manassantin B)를 수득하는 단계 (e);를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물의 제조방법.
[화학식 1]