KR101668029B1 - 라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 라파콜을 유효성분으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물은 콜라겐 합성을 촉진함으로써, 피부 주름을 보다 완화시킬 수 있고 하고, 견고하며 탄력있게 유지해주는 효과를 얻을 수 있다.

Description

라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Reducing Skin Wrinkle Comprising Lapachol}

본 발명은 라파콜을 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 피부 외용제 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 체내의 근육들과 기관을 보호하는 다수의 상피조직으로 이루어진 외피 체계에서 가장 큰 조직으로, 외부 환경으로부터 신체 내부를 보호하여 체내의 항상성을 유지시키는데 중요한 역할을 한다. 그 결과 피부는 외부에서 주어지는 물리적, 화학적 자극, 스트레스, 영양 결핍 등에 의해 피부의 정상기능이 저하되고 탄력 저하, 주름 생성 등의 피부 노화 현상이 촉진된다.

피부의 노화는 내인적 노화(innate age)와 외인적 노화(extrinsic age)로 구분할 수 있다. 상기 내인적 노화는 연령이 증가함에 따라 발생하는 노화로, 신체의 생리적인 기능이 저하되어 나타나는 노화이다. 또한, 상기 외인적 노화는 외부 자외선, 활성산소, 스트레스 등에 의해 발생하는 노화 현상을 말한다. 이러한 내인적 및 외인적 노화 요인에 의해 피부의 노화가 진행되고, 그 결과 피부 표면에 주름이 생성되어 피부결이 거칠어지고 탄력이 감소한다.

주름이 생성되는 기작에 따르면, 진피 내의 콜라겐(collagen), 엘라스틴(elastin) 등은 분해 및 생성이 계속해서 이루어지는데, 이때 분해작용 후 생성작용으로 인한 보충이 원활하지 않으면 피부가 탄력을 잃고 주름이 생성된다.

지금까지 연구보고된 대표적인 주름완화 및 피부 노화 예방 물질로는 레티노익산(retinoic acid), 레티놀(retinol), 아스코르브산(ascorbic acid), α-히드록시산(α-hydroxy acid) 등이 있다.

레티노익산은 지질과산화(lipid per-oxidation) 및 오르니틴 디카복실라아제 반응(ornithine decarboxylase response)을 억제한다. 그러나 자외선에 의해 민감한 반응을 보이며 자극이 높아 피부가 붉어지는 부작용이 보고되어 사용이 제한되고 있으며, 또한, 6개월 이상 계속 사용해야만 효과가 나타나는 문제점이 있다.

레티놀은 레티노익산에 비해 주름개선 효과가 약하지만 상대적으로 안전성이 높아 널리 사용되고 있다. 그러나 레티놀을 고농도로 사용하면 피부자극이 발생하며, 자외선에 노출 시 피부 색소 침착을 일으키며, 공기 중의 산소, 열 및 빛 등에 의해 쉽게 산화되므로 안정성에 문제가 있다.

아스코르브산은 공기, 수분, 고온 등 외부 환경에 의해 쉽게 산화되어 그에 따라 활성이 많이 감소하므로 주름개선 정도가 낮아지고, 제형의 변색 및 변취를 유발하는 문제점이 있다.

또한, α-히드록시산도 항주름제로 공시되어 있으나, 가려움, 홍반, 자외선에 민감성 반응 등 피부자극 부작용이 수반되어 제품의 안전성 측면에 문제점이 있다.

이외에도, 주름 방지를 위해 자외선 차단제, 보습제, 항산화제 등을 함유한 화장품들이 널리 사용되고 있으나 이 제품들의 실질적인 주름 개선 효과는 미미한 편이다.

본 발명자들은 여러 화합물을 스크리닝하던 중 라파콜이 콜라겐 생성을 촉진하는 효과를 확인하여 피부 외용제를 비롯 화장료 조성물에 적용하기 위한 연구를 진행하였다.

라파콜(lapachol)은 라파초 트리(lapacho tree, Tabebuia avellandedae,)로부터 얻어지는 천연 퀴논 물질로서, 다양한 식물로부터 추출된다.

종래 연구를 통해 라파콜이 항암 효과[Oliveira MF et al, New enamine derivatives of lapachol and biological activity. An Acad Bras Cienc. Jun;74(2):211-21 (2002); Felicio AC et al, Fetal growth in rats treated with lapachol. Contraception 66 (4): 289-93 (2002); Morrison et al, Oral toxicology studies with lapachol, Toxicology and Applied Pharmacology, 17(1), 1-11. (1970); Guerra Mde O, Mazoni AS, Brandao MA, Peters VM. "Toxicology of Lapachol in rats: embryolethality". Brazilian journal of biology = Revista brasleira de biologia 61 (1): 171-4. (2001)], 항종양 효과[K. V. Rao et al , Recognition and Evaluation of Lapachol as an Antitumor Agent, Cancer Research 28, 1952-1954, October 1, (1968)], 항박테리아 효과[Guiraud P, et al, Comparison of antibacterial and antifungal activities of lapachol and beta - lapachone, Planta Med. Aug;60(4):373-4. (1994)] 및 항진균 효과[Nagata, K. et al, Atimicrob . Agents Chemther. 42, 700. (1998); Steiman, R. et al, Planta Medica, 60, 373. (1994); Portillo, A. et al, Ethnopharmacology, 76, 93. (2001)]를 가짐을 발표하고 있다.

또한, 국제특허 공개 WO 2005/082434호는 항염증 효과를, WO 2005/032611 및 WO 2007/019845호는 항혈전 활성을, 대한민국 특허공개 제2003-91678호는 항암제로서의 용도를 제시하고 있다.

그러나 상기한 연구속에서도 본 발명의 유효성분인 라파콜의 피부 주름개선 효과에 관해서는 그 어떠한 연구도 없었다.

국제특허 공개 WO 2005/082434호; 국제특허 공개 WO 2005/032611호; 국제특허 공개 WO 2007/019845호; 대한민국 특허공개 제2003-91678호

Oliveira MF et al, New enamine derivatives of lapachol and biological activity. An Acad Bras Cienc. Jun;74(2):211-21 (2002); Felicio AC et al, Fetal growth in rats treated with lapachol. Contraception 66 (4): 289-93 (2002); Morrison et al. Oral toxicology studies with lapachol, Toxicology and Applied Pharmacology, 17(1), 1-11. (1970); Guerra Mde O, Mazoni AS, Brandao MA, Peters VM. "Toxicology of Lapachol in rats: embryolethality". Brazilian journal of biology 61 (1): 171-44. (2001); K. V. Rao et al, Recognition and Evaluation of Lapachol as an Antitumor Agent, Cancer Research 28, 1952-1954, October 1, (1968); Guiraud P, et al, Comparison of antibacterial and antifungal activities of lapachol and beta-lapachone, Planta Med. Aug;60(4):373-4. (1994); Nagata, K. et al, Atimicrob. Agents Chemther. 42, 700. (1998); Steiman, R. et al, Planta Medica, 60, 373. (1994); Portillo, A. et al, Ethnopharmacology, 76, 93. (2001)

본 발명자들은 라파콜이 콜라겐 생성을 촉진하여 실제적으로 피부에 적용되는 경우 피부 주름 개선 효과를 나타냄을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명은 라파콜을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 라파콜을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 피부 외용제 조성물을 제공한다:

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 외용제 조성물 및 화장료 조성물은 피부 진피 층의 섬유아세포에 작용하여 콜라겐 생성을 촉진하고, 종래의 주름개선제인 레티놀에 비하여 낮은 농도에서 현저히 우수한 콜라겐 생성 촉진 효과를 나타내어 주름개선 효과가 각별할 뿐만 아니라, 제형 안정성이 우수하고 피부에 대한 부작용이 거의 없다.

본 발명에서 제시하는 라파콜은 하기 화학식 1로 표시되는 2-하이드록시-3-(3-메틸-2-부테닐)-1,4-나프토퀴논 (2-Hydroxy-3-(3-methylbut-2-enyl)-1,4-naphthoquinone)화합물이다:

[화학식 1]

상기 라파콜은 CAS No.가 84-79-7인 공지된 물질로서 천연 식물로부터 추출하거나 시판되는 것을 구입하여 사용할 수 있다.

천연 식물로부터 추출되는 라파콜은 하기 표 1에 나타낸 바와 같이, 능소화과(Bignoniaceae), 마편초과(Verbenaceae), 프로테아과(Proteaceae), 콩과(Lequminosae), 사포타과(Sapotaceae), 현삼과(Scrophulariaceae), 아욱과(Malvaceae) 등의 식물에서 추출하여 얻어낼 수 있다.

Family	Species
능소화과(Bignoniaceae)	Tabebuia flavescens Benth - & Hook. F. ex. Griseb. T. guayacan Hemsl., T. avellanedae Lor. ex Griseb. T. serratifolia (Vahl.) Nichols, T. rosa T. bata (E. Mey) Sandw, T. pentaphylla (Linn) Hemls. T. heptaphylla , Haplophragma adenophylum , Heterophragma adenophylum , Kigelia pinnata Phyllarthron comorense , Radermachera sinica Paratecoma peroba (Record) Kuhlm, Tecoma araliaceae DC T. undulate , Stereospermum suaveolens DC. S. kunthianum , Zeyhera digitalis , Z. tuberculosa , Millingtonia hortensis Linn, Stereospermum tetragonum DC. Stereospermumpersonatum , Catalpa longissima Cybistax antisyphilitica , Macfadyena ungis - cati Melloa quadrivalvis , Newbouldia laevis
마편초과(Verbenaceae)	Tectona grandis L. fil, Avicennia tomentosa Jacq Avicenia officinalis
프로테아과(Proteaceae)	Conospremum teretifolium R. Br.
콩과(Leguminosae)	Diphysa robinoide Bent
사포타과(Sapotaceae)	Bassia latifolia
아욱과(Malvaceae)	Hibiscus tiliaceus
현삼과(Scrophulariaceae)	Paulownia kawakamii

일예로, 당업계 공지된 통상의 방법, 즉, 통상적인 용매를 사용하여, 통상적으로 이용되는 열수추출, 실온추출, 가온추출, 초음파추출, 초임계추출 등의 방법으로 제조될 수 있다.

바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 6의 저급 글리콜, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출한다. 가장 바람직하게는 1,3-부틸렌글리콜을 추출용매로 하여, 실온에서 초음파 추출기로 1 내지 12 시간 동안 추출한다. 상기 초음파 추출의 시간은 추출하고자 하는 시료의 양에 따라 달라질 수 있으며, 추출 결과물을 여과 또는 정제하는 과정을 거칠 수 있다.

또한, 시판되는 라파콜의 경우 구입 후 정제하여 사용한다. 이때 사용되는 정제방법은 이 분야에서 통상적으로 사용되는 방법이 가능하다. 각종 유기용매를 혼합하여 사용한 액-액 추출, 실리카겔이나 활성 알루미나 등의 각종 합성수지를 충진한 컬럼크로마토그래피 및 고속액체크로마토그래피(HPLC) 등의 정제방법이 가능하며, 위의 정제 방법에 한정된 것은 아니다.

본 발명에 따른 실험예 1에서 라파콜의 콜라겐 합성 효과를 알아보기 위해 실험한 결과, 종래 콜라겐 생성 촉진용 물질로 많이 사용되는 레티놀에 비해서 라파콜의 콜라겐 생합성 효과가 보다 우수함을 입증하였다.

이러한 결과를 통해 본 발명에서 제시하는 라파콜은 피부 외용제 조성물 및 화장료 조성물로 적용이 가능하고, 이를 피부에 적용시 콜라겐 합성을 촉진함으로써, 피부 주름을 보다 완화시킬 수 있고 하고, 견고하며 탄력있게 유지해주는 효과를 얻을 수 있다.

라파콜은 전체 외용제 조성물 중량 대비 0.00001∼10.0 중량%, 바람직하게는 0.001∼0.1 중량%를 포함할 수 있다. 만약, 상기 화합물의 함량이 상기 범위 미만일 경우 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 반대로 상기 범위를 초과하는 경우 포함량의 증가에 비해 효과의 증가가 미치지 못하며 약간의 세포 독성을 야기할 수 있다.

상기 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들어 바디 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제의 제형을 갖는 외용제 조성물일 수 있다. 이때 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 라파콜 이외의 다른 성분들은 기타 외용제의 제형 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 적의 선정하여 배합할 수 있다.

특히, 본 발명에 따른 라파콜은 콜라겐 합성 촉진 효과를 통해 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로서 적용이 가능하다.

본 발명에 따른 실험예 2에서 라파콜을 포함하는 크림을 피부에 도포한 결과 높은 주름 개선 효과를 나타내고, 실험예 3에서 피부 자극을 측정한 결과 상기 화합물이 피부 자극을 유발하지 않음을 확인하였다.

라파콜은 전체 화장료 조성물 중량 대비 0.00001∼10.0 중량%, 바람직하게는 0.001∼0.1 중량%를 포함할 수 있다. 만약, 라파콜의 함량이 상기 범위 미만일 경우 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 반대로 상기 범위를 초과하는 경우 포함량의 증가에 비해 효과의 증가가 미치지 못하며 약간의 세포 독성을 띈다.

상기 화장료 조성물은 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들어 화장수, 유액, 크림, 폼, 에센스, 세럼, 유연수, 유액, 파운데이션, 메이크업 베이스, 비누, 선 스크린크림 및 선 오일 등의 제형으로 제조할 수 있다.

또한 각 제형의 조성들은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 그 효과를 떨어트리지 않는 범위 내에서 비이온 계면활성제, 실리콘 폴리머, 체질안료, 향료, 방부제, 살균제, 산화 안정화제, 유기 용매, 이온성 또는 비이온성 증점제, 유연화제, 산화방지제, 자유 라디칼 파괴제, 불투명화제, 안정화제, 에몰리언트(emollient), 실리콘, α-히드록시산, 소포제, 보습제, 비타민, 곤충 기피제, 향료, 보존제, 계면활성제, 소염제, 물질 P 길항제, 충전제, 중합체, 추진제, 염기성화 또는 산성화제, 또는 착색제 등 공지의 화합물을 포함하여 제조된다.

본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 라파콜 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 상기 라파콜은 콜라겐 및 엘라스틴 생합성 촉진 효과가 매우 우수하였고(실험예 1 참조), 피부 주름을 효과적으로 개선하고 탄력을 증진시켰으며 (실험예 2 참조), 인체피부에 자극이 거의 없으며(실험예 3 참조), 제형내 안정성이 우수한 것을 알 수 있다(실험예 4 참조).

[실시예]

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

실험예 1: Type I collagen 생합성 촉진 효과

본 발명에 따른 라파콜의 콜라겐 합성효과를 알아보기 위해 시그마 알드리치사에서 구입하여 정제하여 사용하였다.

사람의 정상 섬유아세포(human normal fibroblast)를 10%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM 배지가 들어 있는 48-웰 마이크로 플레이트에 접종시키고(1x10⁵세포/웰), 5% 농도(CO₂)의 CO₂ 배양기에서 37℃로 24시간 배양하였다. 이때 사람의 정상 섬유아세포는 병원에서 신생아의 포경 수술 후 채취한 피부조직을 분리하여 사용하였다.

라파콜 및 레티놀이 적정 농도로 함유된 혈청이 들어있지 않은 DMEM 배지를 만들고, 이 배지로 교체하여 24시간 동안 배양한 후, 세포 배양액을 채취하였다. 타카라사(Takara Shuzo Co., Ltd. 일본국)의 콜라겐 단백질 측정키트와 바이오컬러사(Biocolor Co., Ltd. 영국)의 엘라스틴 단백질 측정 키트를 사용하여, 채취한 세포 배양액에서 생성된 프로콜라겐 타입 I의 C-펩타이드와 엘라스틴의 양을 측정함으로써 콜라겐 및 엘라스틴 생성 촉진 정도를 확인하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

조성(농도)	세포 생존도 (상대%)	콜라겐 타입I 함량 (상대%)	엘라스틴 함량 (상대%)
무처치	100.0	100.0	100.0
레티놀 1x10-5M	66.1	-	-
레티놀 1x10-6M	103.1	135.7	109.3
레티놀 1x10-7M	100.7	108.5	101.4
라파콜 200 ppm	68.3	-	-
라파콜 100 ppm	104.5	152.3	136.7
라파콜 20 ppm	101.2	151.8	134.3
라파콜 4 ppm	103.6	111.6	104.9

상기 표 2를 참조하면, 본 발명에 따른 라파콜을 적용하였을 때 레티놀과 동등 이상의 우수한 콜라겐 및 엘라스틴 생성 효과가 나타남을 알 수 있었다. 특히, 라파콜의 농도가 20 ppm인 경우 콜라겐 및 엘라스틴 생성율이 레티놀과 비교하여 월등히 향상되는 결과를 확인하였다.

실험예 2: 주름개선 효과

본 발명에 따른 라파콜의 주름 개선 효과를 확인하기 위해 크림 제형으로 제조 후 관능 시험을 수행하였다.

잔주름 및 굵은 주름을 지닌 30∼60세 성인 여성 20명을 대상으로의 하기 제형예 3의 조성으로 제조된 크림을 8주 동안 1일 2회 안면 양쪽 눈가에 각각 도포하였다. Derma Top-blue(Breuckmann Corporation, 독일국)를 이용하여 제품 사용 전과 사용 후의 피부 주름 변화를 다양한 파라미터로 측정하였고, 얻어진 결과를 하기 표에 나타내었다.

Cutometer(Courage-Khazaka electronic GmbH, 독일국)를 이용하여 제품 사용전과 사용후의 피부 탄력 변화를 측정하였고, 얻어진 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

이때 비교예로서 사용한 레티놀 함유 크림은 하기 제형예 3의 조성에서 라파콜 0.02% 대신 레티놀 2500IU(750ug/g, 0.075%, 식약청 고시 함량)로 대체한 것이다.

<3D 거칠기도 인자(roughness parameters)>

- Spt : 주름의 굴곡중 최고 높이와 최저 계곡의 거리

- Spa : 굴곡의 높은 곳과 낮은 곳의 평균거리

- Sdev : 분석 면적을 1로 하였을 때 주름 부분을 평편하게 폈을 때의 면적

- Sptm : 피크와 계곡의 평균거리(최대 피크 5개의 평균과 최저 계곡 5개의 평균의 합)

	파라미터	사용전	8주 사용후
실시예(라파콜 함유 크림)	Spt	0.728±1.08	0.509±0.141
	Spa	0.036±0.007	0.034±0.06
	Sdev	1.055±0.02	1.051±0.014
	Sptm	0.292±0.051	0.283±0.049
비교예(레티놀 함유크림)	Spt	0.647±0.513	0.539±0.171
	Spa	0.036±0.006	0.036±0.008
	Sdev	1.054±0.011	1.051±0.034
	Sptm	0.288±0.054	0.285±0.027

	R2 파라미터(총 탄력성, gross elasticity)
	사용전	4주 사용후	8주 사용후
실시예(라파콜 함유 크림)	0.703	0.725	0.732
비교예(레티놀 함유크림)	0.705	0.721	0.725

상기 표 3 및 표 4를 참조하면, 본 발명에 따른 라파콜을 포함하는 크림을 피부에 적용하는 경우, 기존 레티놀 함유 크림과 비교하여, 4~8주 사용 후 피부 주름 개선, 및 탄력증가 효능이 우수함을 알 수 있다.

실험예 3: 피부 자극

본 발명에 따른 라파콜의 피부 자극의 여부를 알아보기 위해 하기와 같은 평가를 수행하였다.

이때 비교예로서 사용한 레티놀 함유 크림은 하기 제형예 3의 조성에서 라파콜 0.02% 대신 레티놀 2500IU로 대체한 것이다.

1) 인체 피부 첩포시험

과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 20∼30대 여성 20명을 대상으로 객관적 피부 자극도를 측정하였다.

시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀 챔버(Finn chamber, 100±10, EPITEST, 핀란드국) 내에 적하시킨 후 시험대상자의 전박(forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 각각 1시간 그리고 24시간 후(첩포 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 24시간, 48시간)에 확대경(8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다.

이때 피부반응은 국제접촉피부염연구회(ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group )의 규정에 따라 판정하였으며(표 5), 하기 수학식 1에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하였고, 얻어진 결과를 표 6에 나타내었다.

피부 반응의 평가 기준 및 점수

기호	증상	점수
-	무반응, 정상피부	0
+-	희미한 또는 가벼운 홍반	0.5
+	경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진	1
++	뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포	2
+++	심한 홍반 및 소포형성	3
++++	대수포 형성	6

	24h			48h			피부 반응도
	±	+	++	±	+	++
대조군(베이스 크림)	-	-	-	-	-	-	0.00
비교예(레티놀 함유 크림)	5	1	-	2	1	-	2.29
실시예(라파콜 함유 크림)	1	-	-	-	-	-	0.21

상기 표 6을 참조하면, 본 발명에 따른 라파콜을 함유한 크림의 경우 레티놀 크림과 비교하여 피부 반응도가 약 11배 이상 낮아 피부 자극이 현저히 적음을 알 수 있다.

2) 자극감 시험

과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 20∼40대 여성 20명을 대상으로 주관적 피부 자극도를 측정하였다.

증기 발생기(Steam Generator)를 사용하여 15분간 충분히 스웨팅(Sweating) 시킨 후, 얼굴 양쪽에 화장료 조성물을 코 주위 및 뺨을 중심으로 강하게 비빈 다음, 얼굴에 나타나는 주관적 피부반응을 10분 동안 관찰하였다. 단, 건선(Psoriasis), 습진(Eczema), 기타 피부병변 보유자나 임신, 수유부 또는 피임제, 항히스타민제 등을 복용하고 있는 사람은 본 시험에서 제외하였다.

화장료 적용 후 자극 반응이 나타나는 시간에 따라 1분 단위로 점수를 기재하고 하기 수학식 2에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하였고, 얻어진 결과를 하기 표 7 및 표 8에 나타내었다.

	양성피험자수	반응도 합	피부반응도
대조군(베이스 크림)	5	17	0.71
비교예(레티놀 함유 크림)	16	113	4.71

	양성피험자수	반응도 합	피부반응도
대조군(베이스 크림)	4	19	0.79
실시예(라파콜 함유 크림)	6	22	0.92

상기 표 7 및 표 8을 참조하면, 본 발명에 따른 라파콜을 함유한 크림의 경우 종래 레티놀 크림에 비해 피부 자극이 약 5배 가량 크게 낮음을 알 수 있다.

실험예 4: 화장료 제형의 안정성 시험

본 발명에 따른 라파콜의 안정성 알아보기 위해 하기와 같은 평가를 수행하였다.

이때 비교예로서 사용한 레티놀 함유 크림은 하기 제형예 3의 조성에서 라파콜 0.02% 대신 레티놀 2500IU로 대체한 것이다.

라파콜을 함유한 크림과 레티놀을 함유한 크림을 불투명 초자 용기에 담아 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 1~4주 동안 보관하고, 불투명 초자 용기에 담아 4℃로 일정하게 유지되고 완전히 차광된 냉장고 내에서 1~4주 동안 보관한 후 고압액체크로마토그래피(HPLC)방법으로 정량하였다.

함량 측정 결과(% control)

	0주		1주		2주		3주		4주
	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃
비교예 (레티놀 함유 크림)	100	100	95.1	62.5	92.3	58.4	91.4	38.2	90.4	22.7
실시예 (라파콜 함유 크림)	100	100	99.7	98.3	99.6	97.6	99.6	97.1	99.5	96.5

상기 표 9를 참조하면, 본 발명에 따른 라파콜을 함유한 크림의 경우, 종래 레티놀 크림과 비교하여 제형 안정성이 월등히 우수한 것으로 나타났다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 제형예를 제시한다. 그러나 하기의 제형예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 제형예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

제형예 1: 유연화장수 (스킨로션)

하기의 표 10과 같이 라파콜을 함유하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	3.0
PEG 1500	1.0
알란토인	0.1
DL-판테놀	0.3
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
소듐 히아루로네이트	5.0
에탄올	10.0
옥틸도데세스-16	0.2
폴리솔베이트 20	0.2
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #13	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 2: 수렴화장수

하기의 표 11과 같이 라파콜을 함유하는 수렴화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
글리세린	2.0
1,3-부틸렌글리콜	2.0
알란토인	0.2
DL-판테놀	0.2
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
소듐 히아루로네이트	3.0
에탄올	15.0
폴리솔베이트 20	0.3
위치하겔 추출물	2.0
구연산	미량
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #13	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 3: 영양화장수

하기의 표 12와 같이 라파콜을 함유하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
글리세릴 스테아레이트 SE	1.5
세테아릴알콜	1.5
라놀린	1.5
폴리솔베이트 60	1.3
솔비탄스테아레이트	0.5
경화식물유	1.0
광물유	5.0
스쿠알란	3.0
트리옥타노인	2.0
디메치콘	0.8
초산 토코페롤	0.5
카르복시비닐 폴리머	0.12
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	3.0
소듐히아루로네이트	5.0
트리에탄올아민	0.12
향	0.01
유니사이드-유 13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 4: 영양크림

하기의 표 13과 같이 라파콜을 함유하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
친유형 모노스테아린산글리세린	2.0
세테아릴알콜	2.2
스테아린산	1.5
밀납	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
경화식물유	1.0
스쿠알란	3.0
광물유	5.0
트리옥타노인	5.0
디메치콘	1.0
소듐마그네슘실리케이트	0.1
글리세린	5.0
베타인	3.0
트리에탄올아민	1.0
소듐히아루로네이트	4.0
향	0.01
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 5 : 맛사지 크림

하기의 표 14와 같이 라파콜을 함유하는 맛사지 크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
친유형 모노스테아린산 글리세린	1.5
세테아릴알콜	1.5
스테아린산	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
이소스테아릴 이소스테아레이트	5.0
스쿠알란	5.0
광물유	35
디메치콘	0.5
히드록시에틸셀룰로오스	0.12
글리세린	6.0
트리에탄올아민	0.7
향	0.01
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 6 : 에센스

하기의 표 15와 같이 라파콜을 함유하는 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
글리세린	10
베타인	5.0
PEG 1500	2.0
알란토인	0.1
DL-판테놀	0.3
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
히드록시에틸 셀룰로오스	0.1
소듐 히아루로네이트	8.0
카르복시비닐폴리머	0.2
트리에탄올아민	0.18
옥틸도데칸올	0.3
옥틸도데세스-16	0.4
에탄올	6.0
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #3	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 7: 팩

하기의 표 16과 같이 라파콜을 함유하는 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
라파콜	0.02
폴리비닐알콜	15.0
셀룰로오스 검	0.15
글리세린	3.0
PEG 1500	2.0
사이클로덱스트린	0.15
DL-판테놀	0.4
알란토인	0.1
글리시리진산 모노암모늄	0.3
니코틴아미드	0.5
에탄올	6.0
PEG 40 경화피마자유	0.3
향	0.01
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 8: 연고

하기 표 17과 같이 라파콜을 함유하는 연고를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
라파콜	0.02
정제수	잔부
세토스테아릴알코올	3.0
경질 유동 파라핀	5.0
토코페롤 아세테이트	2.0
세테아레쓰-20	3.0
판테놀	0.5
파라옥시안식향산 메틸	적량
파라옥시안식향산 프로필	적량

Claims (7)

1. 하기 화학식 1로 표시되는 라파콜을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물:
   [화학식 1]
   

   
2. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 라파콜을 전체 조성물 중량에 대해서 0.00001∼10.0 중량%의 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물은 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 제형인 것을 특징으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물.
4. 하기 화학식 1로 표시되는 라파콜을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물:
   [화학식 1]
   

   
5. 제4항에 있어서, 상기 라파콜은 콜라겐 합성 촉진 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.
6. 제4항에 있어서, 상기 조성물은 라파콜을 전체 조성물 중량에 대해서 0.00001∼10.0 중량%의 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.
7. 제4항에 있어서, 상기 주름 개선용 화장료 조성물은 화장수, 유액, 크림, 폼, 에센스, 세럼, 유연수, 유액, 파운데이션, 메이크업 베이스, 비누, 선 스크린크림 및 선 오일로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.