KR101652263B1

KR101652263B1 - 항균 펩티드를 포함하는 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물

Info

Publication number: KR101652263B1
Application number: KR1020140072353A
Authority: KR
Inventors: 서동식; 김민성
Original assignee: (주)콜로디스 바이오사이언스
Priority date: 2014-06-13
Filing date: 2014-06-13
Publication date: 2016-08-30
Also published as: KR20150143173A

Abstract

본 발명은 자가 접착력이 있는 접착 단백질의 말단에 항균 펩티드가 융합된 항균 접착 단백질, 상기 항균 접착 단백질을 포함하는 항균 코팅 조성물 및 상기 항균 코팅 조성물이 코팅된 항균 필름에 관한 것이다. 본 발명의 항균 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물은 휴대폰의 액정 보호 필름, 식품 포장재, 의료기구 등의 표면에 코팅되어 유해 미생물에 대한 안정성을 확보할 수 있으며, 특히 본 발명의 항균 접착 단백질은 항균성이 지속적으로 유지됨으로써 항균 물질에 용출에 의한 항균력 감소를 방지할 수 있다.

Description

항균 펩티드를 포함하는 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물{Adhesive Protein Comprising Antimicrobial Peptide and Antimicrobial Coating Composition Comprising the Same}

본 발명은 항균 펩티드를 포함하는 접착 단백질, 상기 접착 단백질을 포함하는 항균 코팅 조성물, 상기 항균 코팅 조성물이 코팅된 항균 필름 및 코팅 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 접착 단백질의 C-말단 혹은 N-말단 혹은 하이브리드 접착 단백질 사이에 항균 펩티드가 융합된 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물에 관한 것이다.

일상생활에 사용되는 전자 제품 등의 다양한 생활용품은 먼지, 지문, 타액, 기름기 등의 주변 환경으로 인해 해로운 세균이나 바이러스에 쉽게 노출된다. 더욱이 환경 위생에 대한 높은 관심과 생활 양식의 고급화에 따라 식품 포장재, 보관용 용기, 칫솔, 도마, 문구류, 화장품 및 포장재와 같은 산업용품과 의료용품으로 사용하는 석유화학 소재에 항균성을 부여한 제품들의 생산 및 수요가 증가하고 있다.

많은 항균 조성물들이 상품화 되었으나, 대부분 항균제를 액상이나 고분자 물질에 첨가한 혼합형이었기 때문에(특허문헌 1 참조), 사용 중에 항균 성분이 서서히 제거되어 항균활성의 지속성에 문제가 제기되고 있다. 또한, 종래의 항균기술은 주로 은 나노입자나 무기입자들을 사용하는 것으로 미세 입자의 이탈로 인한 인체 유해성에 대한 논쟁이 있어 왔으며, 이에 따라 친환경적인 항균기술에 대한 요구가 증가하고 있다. 4급 암모늄염, 트라이진계, 벤즈이미다졸 등의 유기계 항균 물질 및 정유(essential oil), 고추냉이 추출물 등의 천연 항균 물질은 고분자 물질에 항균력을 부여하기 위하여 항균성 물질을 고분자 물질에 단순 첨가하여 항균성 소재를 제조하고 있으나(특허문헌 2 및 특허문헌 3), 유기계 항균물질의 자체적인 독성, 항균물질의 용출 및 그에 따른 항균력 감소 등의 기술적 한계가 지적되고 있으며(비특허문헌 1), 특히 플라스틱류를 사출 또는 압출하는 경우 항균성 물질은 열분해 및 황변 현상을 유발하기도 한다. 더욱이 항균 필름을 식품과 함께 포장하는 경우, 상기에 언급된 항균물질의 용출로 인한 내성 유발 등의 심각한 부작용이 발생할 수 있는 문제점이 제기되고 있다.

이에 따라 항균제를 고정화하거나, 물질의 화학적 구조가 균을 사멸시키거나, 균이 표면에 부착되지 못하게 하는 물질을 항균제로 개발하여 항균 지속성을 높이는 방법들이 연구되고 있다(특허문헌 4, 비특허문헌 2 및 비특허문헌 3). 또한, 광범위한 항균력을 부여하기 위해 2개 이상의 항균제가 포함되는 항균 기술들이 개발되고 있다(특허문헌 5).

이에, 본 발명은 순수한 단백질로 구성되고 본질적으로 접착력을 갖는 동시에 다양한 미생물에 항균 효과를 갖는 수용성 코팅 조성물을 제공하며, 본 발명에 의한 항균 조성물은 기존 기술에 비해 강력한 항균력은 물론 가공성과 특정 조건하에서의 생분해성이 뛰어나고, 유기용매를 사용하지 않는 친환경성이 우수한 특성이 있다.

대한민국 공개특허공보 제2003-0066424호 대한민국 공개특허공보 제2009-0024467호 대한민국 공개특허공보 제2008-0110578호 대한민국 공개특허공보 제2008-0039460호 미국 공고특허공보 제8,062,691호

K. Glinel et al., Acta Biomaterialia 8, 1670 (2012) Mo S, Krunic A, et al., J. Nat. Prod. 2009, 72(11):2043-5 Bin Wang, et al., J. Appl. Polym. Sci. 130(5), p3489-3497, 2013

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 도출된 것으로서, 다양한 표면에 대한 우수한 코팅력을 갖는 접착 단백질의 C-말단 혹은 N-말단에 항균 펩티드가 융합된 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 접착 단백질의 티로신 잔기를 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine)로 화학적 수정(modification)함으로써 간단한 방법으로 항균 표면 코팅이 가능하고, 수용성 코팅 조성물로 유기용매의 사용없이 가혹한 조건에서 오랜 시간 동안 코팅의 지속이 가능한 환경 친화형 코팅 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 광경화형 우레탄 아크릴레이트와 항균 펩티드 융합 접착 단백질의 혼합을 통해 액정 필름 등의 다양한 소재에 적용할 수 있는 광경화형 항균 코팅 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 특정한 장점들 및 신규한 특징들은 첨부된 도면들과 관련되어 이하의 상세한 설명과 바람직한 실시예로부터 더욱 명확해질 것이다.

본 발명은 습한 환경이나 건조한 환경에서 자가 접착이 가능한 접착 단백질에 항균 펩티드가 유전공학적으로 부가된 항균 접착 단백질 및 이를 포함하는 항균 코팅 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 접착 단백질의 C-말단 또는 N-말단에 적어도 한 개 이상의 항균 펩티드를 부가하여 항균 기능이 우수한 항균 접착 단백질을 제공한다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 항균 펩티드가 부가된 항균 홍합 접착 단백질의 티로신 부분을 DOPA로 치환함으로써, 다양한 표면에 간단하게 코팅이 가능한 항균 코팅 조성물을 제공할 수 있다.

또한, 본 발명은 수용성 우레탄 아크릴레이트와 항균 펩티드가 부가된 접착 단백질을 포함하는 UV 광경화형 코팅 조성물을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 항균 접착 단백질을 단독으로, 또는 상기 항균 접착 단백질과 광경화형 우레탄 아크릴레이트 계열의 접착 수지의 혼합물을 포함하는 항균 코팅 조성물을 제공한다. 본 발명에서 제공하는 항균 코팅 조성물은 자연적으로 존재하거나 인공적으로 고안된 항균 펩티드로 기능화된 항균 접착 단백질로 구성되며, 항균 접착 단백질의 기본적인 구조는 X-P-Y로 구성된다. 상기 X와 Y는 항균 펩티드이고, P는 접착 단백질이다. 임의의 적합한 항균 접착 단백질이 본 발명의 코팅 조성물에 사용될 수 있다.

본 발명의 항균 접착 단백질에 적용되는 접착 단백질은 자가 접착이 가능한 모든 단백질을 제한없이 포함한다. 자가 접착 단백질은 본질적으로 접착성을 보유하거나 혹은 화학적 개질을 통해 접착성이 부가된 임의의 단백질을 포함한다. 시판되는 자가 접착 단백질의 예로는 미국 사우스캐롤리나주 노스 오구스타 소재 콜로디스 바이오사이언스사에 의해 시판되고 있는 홍합 유래 재조합 접착 단백질인 MAPTrix™ 이 있지만 이에 한정되는 것은 아니다. 화학적 개질을 통해 접착성이 부가된 접착 단백질의 예로는 아크릴레이트로 개질된 단백질을 들 수 있다. 예를 들면, 아크릴레이트화된 콜라겐 혹은 홍합 접착 단백질을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 한 구현예에서는 아크릴레이트화된 홍합 접착 단백질로 구성된 항균 코팅 조성물을 제공한다.

본 발명의 한 구현예에서 제공하는 MAPTrix™은 유전자 재조합적으로 기능화된 홍합 접착 단백질이다. 본 발명에 있어서, 상기 홍합 접착 단백질은 그 자체로 사용하거나, 서열번호 10, 11, 12 또는 13으로 기재되는 족사 단백질(foot protein, FP) 5(FP-5) 또는 서열번호 5, 6, 7 또는 8로 기재되는 FP-3, 서열번호 14로 기재되는 FP-6의 C-말단이나 N-말단 혹은 양쪽 모두에 해당하는 제1 펩티드와 홍합 접착 단백질 FP-1(서열번호 1), FP-2(서열번호 4), FP-4(서열번호 9) 및 각 단백질의 절편으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 제2 펩티드가 융합된 융합 단백질로서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 상기 제1 펩티드는 서열번호 10, 11, 12 또는 13의 아미노산 서열을 포함하는 FP-5이고, 상기 제2 펩티드는 서열번호 1, 2 또는 3의 아미노산 서열을 포함하는 FP-1이다. 본 발명의 한 구현예에 따르면, 상기 홍합 접착 단백질은 서열번호 1 내지 서열번호 19로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 갖는 것이 바람직하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 있어서, 항균 펩티드는 상기 접착 단백질, 바람직하게는 홍합 접착 단백질에 항균 기능을 부가하기 위해 필요하다.

상기 항균 펩티드는 유전자 재조합 기술로 홍합 접착 단백질의 C-말단이나, N-말단, 혹은 양쪽 모두 혹은 하이브리드 홍합 접착 단백질의 사이에 부가될 수 있다. 예를 들면, 2 개의 FP-1 사이에 1 개의 FP-5이 결합된 구조를 갖는 융합 단백질 FP-151의 경우 FP-1과 FP-5 사이에 항균 펩티드를 부가할 수 있다. 또한, 양 말단이나 융합 단백질 사이에 서로 다른 항균 펩티드를 부가할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 항균 펩티드를 포함하는 접착 단백질은 아프리카 개구리 제노퍼스 래비스(Xenopus laevis)의 피부로부터 분리된 α-나선형 23개 아미노산 펩티드인 마가이닌(Magainin)이나 더마셉틴(Dermaseptin)과 같은 항균 펩티드를 제한없이 포함할 수 있으며, 또한 인간 디펜신(human defensin), 카세리시딘(cathelicidin) LL-37, 히스타틴(Histatin)과 같은 항균 펩티드가 포함될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에서 접착 단백질에 융합되는 항균 펩티드는 자연에서 유래하거나 인공적으로 합성되는 임의의 펩티드를 제한없이 사용할 수 있다. 본 발명의 한 구현예에 따르면, 상기 항균 펩티드는 미생물의 세포막을 파괴하거나 세포막을 투과하여 대사 기능을 저해하는 기작을 통해 항균 효과를 발휘한다. 본 발명의 다른 구현예에 따르면, 미생물의 세포막을 파괴하는 기작을 통해 항균 효과를 발휘하는 임의의 항균 펩티드는 모두 본 발명에 사용될 수 있다. 바람직하게는, 접착 단백질에 융합될 항균 펩티드는 그램 양성균은 물론 그램 음성균에 효과가 있는 항균 펩티드 중에서 임의로 선택될 수 있다. 보다 바람직하게는 KLWKKWAKKWLKLWKA(서열번호 20), FALALKALKKL(서열번호 21), ILRWPWWPWRRK(서열번호 22), AKRHHGYKRKFH(서열번호 23), KWKLFKKIGAVLKVL(서열번호 24), LVKLVAGIKKFLKWK(서열번호 25), IWSILAPLGTTLVKLVAGIGQQKRK(서열번호 26), GIGAVLKVLTTGLPALISWI(서열번호 27), SWLSKTAKKGAVLKVL(서열번호 28), KKLFKKILKYL(서열번호 29), GLKKLISWIKRAAQQG(서열번호 30) 및 GWLKKIGKKIERVGQHTRDATIQGLGIAQQAANVAATAR(서열번호 31)에서 선택될 수 있다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 광범위한 항균 효과를 가진 항균 접착 단백질을 제공하기 위하여 서로 다른 항균 펩티드가 접착 단백질의 C-말단과 N-말단에 부가된 항균 접착 단백질에 기반한 코팅 조성물을 제공한다. 본 발명에서 광범위한 항균 코팅 조성물을 제공하며, 바람직하게는 본 항균 코팅 조성물은 C-말단에 그램 음성균에 효과가 있는 펩티드 FALALKALKKL(서열번호 21)가 부가되고 N-말단에 그램 양성균에 효과가 있는 펩티드 AKRHHGYKRKFH(서열번호 23)가 부가된 항균 접착 단백질로 구성된다.

본 발명에서 항균 펩티드 융합 홍합 접착 단백질은 구성 아미노산 중에서 티로신 잔기는 화학적 수정을 통하여 DOPA, 그리고 더 나아가 DOPA 퀴논으로 바뀌며, 이렇게 수정된 DOPA 및 DOPA 퀴논은 표면에 대한 접착에 있어서 매우 중요한 역할을 할 수 있다. 본 발명의 한 구현예에 따르면, 이러한 화학적 수정을 매개할 수 있는 버섯 유래의 티로시나아제(tyrosinase) 효소를 이용하여 재조합 홍합 접착 단백질의 화학적 수정을 수행할 수 있다. 화학적 수정을 거친 항균 홍합 접착 단백질은 금속, 플라스틱, 유리등 다양한 소재에 부착될 수 있다.

항균 접착 단백질에 기반한 코팅 조성물 농도는 부가된 항균 펩티드에 따라 조정될 수 있다. 바람직하게는, 항균 코팅 조성물 내의 항균 접착 단백질의 농도는 0.01∼1% (wt/wt)이며, 보다 바람직하게는 0.01∼0.3% (wt/wt)이다.

본 발명의 항균 접착 단백질이 혼합된 수용성 아크릴레이트 계열의 항균 코팅 조성물은 UV 광경화형 항균 코팅제이다. 이때 항균 접착 단백질과 아크릴레이트를 먼저 혼합할 수 있다. 광개시제로는 벤조일 퍼록사이드, Irgacure 184 등이 사용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 아크릴레이트와 항균 접착 단백질의 중량비는 1:0.01, 바람직하게는 1:0.001의 비율로 혼합된다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용되는 아크릴레이트는 임의의 수용성 아크릴레이트가 제한없이 사용될 수 있다. 본 발명에서 제공하는 항균 코팅 조성물은 우레탄 아크릴레이트, 폴리에스테르 아크릴레이트, 에폭시 아크릴레이트 중에서 하나 이상 선택된 수용성 아크릴레이트와 항균 접착 단백질로 구성된다.

또한, 본 발명은 항균 접착 단백질을 포함하는 UV 광경화형 항균 코팅 조성물을 포함하는 항균 기능성 필름을 제공한다.

상기 항균 조성물로 코팅된 항균 필름을 제조하기 위해 사용되는 필름은 통상적으로 식품 포장, 휴대폰, 예컨대 스마트폰의 액정 보호용 등으로 흔히 사용되는 폴리에틸렌 또는 폴리프로필렌 필름일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 도포되는 UV 광경화형 항균 조성물의 양은 항균 접착 단백질의 양, 코팅 대상의 종류 등을 고려하여 적절히 선택될 수 있다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 폴리스티렌 필름에 항균 접착 단백질이 포함된 우레탄 아크릴레이트를 도포한 후 광경화하여 항균 코팅 필름을 제조할 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에 따르면, 상기 항균 코팅 필름의 항균력은 그람 음성균, 예를 들면 대장균을 대상으로 하여 코팅되지 않은 표면과 코팅된 표면에서의 균 감소율을 확인할 수 있다.

항균 접착 단백질을 단독으로, 또는 상기 항균 접착 단백질과 아크릴레이트가 혼합된 본 발명의 광경화형 항균 코팅 조성물은 휴대폰의 액정 보호 필름, 식품 포장재, 의료기구 등의 표면에 코팅되어 유해 미생물에 대한 안정성을 확보할 수 있는 효과가 있다. 특히, 본 발명의 항균 접착 단백질은 홍합 접착 단백질의 강력한 접착력을 바탕으로 항균성이 지속적으로 유지됨으로써, 항균 물질에 용출에 의한 항균력 감소를 방지할 수 있다.

본 발명의 상기 기술된 특징들과 또 다른 특징 및 장점들은 예시적인 목적으로 제공되는 하기 구현예들과 도면들을 함께 고려할 때 분명할 것이다.
도 1은 항균 코팅 조성물의 핵심인 항균 접착 단백질의 기본 구조를 나타내는 도면이다.
도 2은 항균 펩티드 A가 융합된 항균 접착 단백질의 대장균에 대한 항균력을 보여주는 사진이다.
도 3은 항균 펩티드 B가 융합된 항균 접착 단백질의 대장균에 대한 항균력을 보여주는 사진이다.
도 4은 항균 펩티드 C가 융합된 항균 접착 단백질의 대장균에 대한 항균력을 보여주는 사진이다.
도 5은 항균 펩티드 D가 융합된 항균 접착 단백질의 대장균에 대한 항균력을 보여주는 사진이다.
도 6은 화학 수정된 항균 펩티드 A가 융합된 홍합 접착 단백질이 폴리스티렌 표면에 코팅된 후, 표면에서의 대장균에 대한 항균력을 보여주는 사진이다.
도 7은 화학 수정된 항균 펩티드 A가 융합된 홍합 접착 단백질이 폴리스티렌 표면에 코팅된 후, 표면에서의 대장균에 대한 항균 지속성을 보여주는 사진이다.
도 8은 수용성 아크릴레이트와 항균 접착 단백질로 구성된 항균 코팅 조성물로 과산화물을 이용하여 제조된 항균 코팅 표면에서의 항균 효과를 보여주는 사진이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명에 개시된 바와 같이, 기능적으로 동일한 제품, 조성물 및 방법은 모두 본 발명의 범위에 포함되는 것이 자명하다.

실시예 1. 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 발현 벡터 제조

항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 제조를 위하여, 홍합 접착 단백질의 C-말단 혹은 N-말단 부위에 통상적인 항균 펩티드 서열이 부가된 유전서열을 설계하여 노바셀테크놀로지(Novacell Technology, 한국)에 발현 벡터 제작을 의뢰하였다. 제작 완료된 벡터는 E. coli BL21(DE3)로 형질전환되었으며, 부가된 서열은 표 1과 같다.

융합 펩티드	아미노산 서열	홍합 접착 단백질에서의 융합 부위
A	KLWKKWAKKWLKLWKA(서열번호 20)	C-말단
B	FALALKALKKL(서열번호 21)	N-말단
C	ILRWPWWPWRRK(서열번호 22)	C-말단
D	AKRHHGYKRKFH(서열번호 23)	C-말단

실시예 2. 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 제조

2.1. E. coli BL21 ( DE3 ) 배양

E. coli BL21(DE3)는 LB(5 g/L yeast extract, 10 g/L Tryptone 및 10 g/L NaCl) 배지에 배양하고, 배양액의 흡광도가 600 ㎚에서 0.6 정도가 되었을 때 IPTG를 최종농도 1 mM로 첨가하여 재조합 항균 펩티드 융합 홍합 접착 단백질의 발현을 유도하였다. E. coli BL21(DE3) 배양액은 13,000 rpm, 4에서 10분간 원심분리하여 세포 펠렛을 수득하였고, 이를 -80℃에 보관하였다.

2.2. 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 발현 확인

세포 펠렛은 SDS-PAGE용 완충액(0.5 M Tris-HCl, pH 6.8, 10% glycerol, 5% SDS, 5% β-mercaptoethanol, 0.25% bromophenol blue) 100 ㎍에 희석하고, 100℃에서 5분간 끓여 변성시켰다. SDS-PAGE의 경우 시료를 15% SDS-폴리 아크릴아마이드 젤에 전기영동한 후 쿠마시 블루(Coomasie blue) 염색을 이용해 단백질 밴드를 검출하여 확인하였다.

2.3. 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 정제

상기 실시예 2.1.에서 수득된 세포 펠렛은 용해 버퍼(2.4 g/L sodium phosphate monobasic, 5.6 g/L sodium phosphate dibasic, 10 mM EDTA 및 1% Triton X-100)를 사용하여 교반하였고, 고압 파쇄기를 사용하여 세포를 파쇄하였다. 파쇄물은 9,000 rpm으로 20분간 원심분리하여 홍합 접착 단백질을 포함하는 불용성 단백질 응집체를 수득하였다. 불용성 단백질 응집체로부터 25% 아세트산을 사용하여 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질을 추출하였고, 9,000 rpm으로 20분간 원심분리하여 홍합 접착 단백질을 포함하는 상층액을 회수하였다. 회수된 상층액은 10 N NaOH를 사용하여 pH 12.8까지 상승시켰, 동일한 조건으로 원심분리하여 상층액을 회수하였다. 상층액은 아세트산을 사용하여 pH 6∼7 까지 중화적정한 후, 동일한 조건으로 원심분리하여 항균 펩티드 융합 홍합 접착 단백질의 침전물을 수득하였다. 수득된 침전물을 적정량의 정제수로 용해한 후 동결건조하여, 순도 90% 이상의 항균 펩티드 융합 홍합 접착 단백질 동결 건조물을 수득하였다.

실시예 3. 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질의 항균력 시험

먼저 항균 펩티드가 융합된 홍합 접착 단백질 A, B, C, D를 농도별로 준비하였다. 항균력 시험을 위한 농도는 PBS(phosphate buffered saline) 버퍼 용액을 사용하여 10∼0.01 ㎎/㎖로 준비하였다. 항균력 시험 균주로는 그람 음성균인 대장균을 사용하였으며, 대장균을 LB 배지에서 37℃, 150 rpm에서 흡광도 1.0까지 진탕배양하였다. 흡광도 1.0에서 대장균 배양액을 10⁴ CFU/㎖이 되도록 PBS로 희석한 후, 미리 준비된 항균 펩티드 융합 단백질과 멸균된 튜브에 9:1의 비율로 혼합하였고, 항온 항습기에서 37℃ 온도에서 1시간 동안 배양하였다. 1시간 후, 각 튜브로부터 대장균액을 100 ㎕씩 분취하여 한천 배지에 도말한 후, 24시간 동안 동일한 조건에서 배양하였다.

그 결과, 도 1 내지 도 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 항균 펩티드 융합 홍합 단백질은 대조군과 비교하여 99.99%의 항균 효과를 갖는 것으로 나타났다.

도 3에 나타난 바와 같이 항균 접착제의 농도 효과를 확인한 결과, 항생제 농도보다 더 낮은 농도인 1 ㎎/㎖에서도 대장균 사멸 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

실시예 4. 항균 단백질의 자가 접착력을 위한 티로시나아제 효소 처리

동결건조된 항균 펩티드 융합 홍합 단백질 각각은 25 mM 아스코르빈산과 20 mM 나트륨 보레이트를 포함하는 0.1 M 나트륨 아세테이트 버퍼에 1 ㎎/㎖의 농도로 녹인 후, 산소 가스를 주입하여 30분 동안 항균 접착 단백질 용액내 산소를 포화시켰다. 이 후, 항균 접착 단백질 1 ㎎ 당 40∼1 ㎍, 바람직하게는 5∼1 ㎍의 농도로 티로시나아제를 첨가한 후, 산소를 주입하면서 1시간 동안 교반하였다. 1시간 후, 5% 아세트산을 첨가하여 화학적 수정 반응을 종료하였다. 반응 종료된 홍합 단백질 용액은 동결건조를 진행하여 분말로 수득하였다. 상기 과정을 통하여 항균 접착 단백질의 티로신 잔기를 DOPA로 수정하였다.

효소 처리된 항균 접착 단백질의 자가 접착력 확인과, 표면 코팅 시험과 효소 처리 과정이 항균력에 미치는 영향을 파악하기 위하여 항균력 시험을 진행하였다. 먼저, 항균 펩티드 융합 홍합 단백질 A를 농도별로 준비하였다. 항균력 시험을 위한 농도는 PBS 버퍼 용액을 사용하여 10∼0.01 ㎎/㎖로 준비하였다. 해당 용액은 세포 배양용 폴리스티렌 재질의 플레이트에 전체적으로 퍼지게 도포하였고, 잔여 용액은 회수하였다. 24시간 동안 Laminar flow 하에서 건조시킨 후, 멸균된 PBS로 3회 표면을 세척였고, 다시 24시간 동안 건조시켰다. 표면이 완전히 건조되면, 전 배양된 대장균 시험액을 10⁴ CFU/㎖이 되도록 PBS로 희석한 후, 표면 코팅된 플레이트에 1 ㎖씩 분주하였다. 항온 항습기에서 37℃ 온도에서 1시간 동안 배양한 후, 각 플레이트 대장균액을 100 ㎕씩 분취하여 한천 배지에 도말하였고, 24시간동안 동일한 조건에서 배양하였다.

그 결과, 항균 펩티드 융합 홍합 단백질은 0.1% 농도의 단백질 용액을 표면 코팅하였을 때, 대조군과 비교하여 99.99%의 항균 효과를 갖는 것으로 나타났다(도 5). 또한, 항균 지속성을 테스트하기 위하여, 상기에서 대장균 시험액이 분주되었던 플레이트를 1주일 후 동일한 과정으로 세척하여 동일한 테스트를 반복한 결과 항균력이 유지됨을 확인하였다(도 6).

실시예 5. 항균 접착 단백질을 포함하는 UV 광경화형 우레탄 아크릴레이트 조성물의 제조

우레탄 아크릴레이트 1 g을 0.5∼1 ㎖, 바람직하게는 0.5 ㎖의 에탄올에 녹인 후 항균 홍합 단백질 A 5 ㎎이 용해된 에탄올 수용액 0.5 ㎖과 혼합하였다. 항균 홍합 단백질-아크릴레이트 혼합물에 벤질 퍼옥사이드 30 ㎎이 용해된 아세톤/에탄올 용액 0.2 ㎖을 가한 후 90℃로 가열된 UV 룸 (파장 285nm)에서 2개의 UV 전구에 노광하고 10분간 경화반응을 시켜 항균 필름을 제조하였다. 제조된 항균 필름의 항균력 시험은 상기 실시예 3과 동일한 방법과 절차에 따라 대장균을 대상으로 시행하였다.

그 결과, 도 8에 나타난바와 같이 코팅되지 않은 대조군(A)과 비교하여, 항균 펩티드 융합 홍합 접착 단백질을 함유하는 광경화형 아크릴레이트가 코팅된 필름 표면(B, C)에서의 대장균 생육은 관찰되지 않았다.

<110> Kollodis Bioscience Co. Ltd. <120> Adhesive Protein Comprising Antimicrobial Peptide and Antimicrobial Coating Composition Comprising the Same <130> 2014-dpa-0823 <160> 31 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> model peptide of the tandem repeat decapeptide derived from foot protein 1 (FP-1, Mytilus edulis) <400> 1 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 1 5 10 <210> 2 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 2 times repeated sequence derived from foot protein 1 (FP-1, Mytilus edulis) <400> 2 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys 20 <210> 3 <211> 60 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 6 times repeated sequence derived from foot protein 1 (FP-1, Mytilus edulis) <400> 3 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 20 25 30 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 35 40 45 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 50 55 60 <210> 4 <211> 39 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> partial sequence of foot protein type 2 (FP-2, Mytilus californianus) <400> 4 Glu Val His Ala Cys Lys Pro Asn Pro Cys Lys Asn Asn Gly Arg Cys 1 5 10 15 Tyr Pro Asp Gly Lys Thr Gly Tyr Lys Cys Lys Cys Val Gly Gly Tyr 20 25 30 Ser Gly Pro Thr Cys Ala Cys 35 <210> 5 <211> 52 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein type 3 (FP-3, Mytilus edulis) <400> 5 Ala Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly 1 5 10 15 Gly Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Gly Ser Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys 20 25 30 Gly Trp Asn Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr 35 40 45 Glu Phe Glu Phe 50 <210> 6 <211> 46 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein type 3 (FP-3, Mytilus galloprovincialis : mgfp-3A) <400> 6 Ala Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly 1 5 10 15 Gly Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp 20 25 30 Asn Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr 35 40 45 <210> 7 <211> 50 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein type 3 (FP-3, Mytilus edulis: mefp-3F) <400> 7 Ala Asp Tyr Tyr Gly Pro Asn Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly 1 5 10 15 Gly Asn Tyr Asn Arg Tyr Asn Gly Tyr Gly Gly Gly Arg Arg Tyr Gly 20 25 30 Gly Tyr Lys Gly Trp Asn Asn Gly Trp Asn Arg Gly Arg Arg Gly Lys 35 40 45 Tyr Trp 50 <210> 8 <211> 44 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein type 3 (FP-3, Mytilus californianus) <400> 8 Gly Ala Tyr Lys Gly Pro Asn Tyr Asn Tyr Pro Trp Arg Tyr Gly Gly 1 5 10 15 Lys Tyr Asn Gly Tyr Lys Gly Tyr Pro Arg Gly Tyr Gly Trp Asn Lys 20 25 30 Gly Trp Asn Lys Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr 35 40 <210> 9 <211> 60 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> partial sequence from foot protein type 4 (Mytilus californianus) <400> 9 Gly His Val His Arg His Arg Val Leu His Lys His Val His Asn His 1 5 10 15 Arg Val Leu His Lys His Leu His Lys His Gln Val Leu His Gly His 20 25 30 Val His Arg His Gln Val Leu His Lys His Val His Asn His Arg Val 35 40 45 Leu His Lys His Leu His Lys His Gln Val Leu His 50 55 60 <210> 10 <211> 75 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein type5 (FP-5, Mytilus edulis) <400> 10 Ser Ser Glu Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Ala Tyr His 1 5 10 15 Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr 20 25 30 Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys 35 40 45 Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg 50 55 60 Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser 65 70 75 <210> 11 <211> 76 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein 5 (FP-5, Mytilus edulis) <400> 11 Ser Ser Glu Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His 1 5 10 15 Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr 20 25 30 Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys 35 40 45 Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg 50 55 60 Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Gly Ser Ser 65 70 75 <210> 12 <211> 71 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Foot protein 5 (FP-5, Mytilus coruscus) <400> 12 Tyr Asp Asp Tyr Ser Asp Gly Tyr Tyr Pro Gly Ser Ala Tyr Asn Tyr 1 5 10 15 Pro Ser Gly Ser His Trp His Gly His Gly Tyr Lys Gly Lys Tyr Tyr 20 25 30 Gly Lys Gly Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Phe Lys Arg Thr Gly Lys Tyr 35 40 45 Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr Lys Lys 50 55 60 His Tyr Gly Gly Ser Ser Ser 65 70 <210> 13 <211> 76 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> mussel adhesive protein foot protein type5 from (Mytilus galloprovincialis) <400> 13 Ser Ser Glu Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His 1 5 10 15 Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr 20 25 30 Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys 35 40 45 Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg 50 55 60 Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Gly Ser Ser 65 70 75 <210> 14 <211> 99 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> mussel adhesive protein foot protein type 6 <400> 14 Gly Gly Gly Asn Tyr Arg Gly Tyr Cys Ser Asn Lys Gly Cys Arg Ser 1 5 10 15 Gly Tyr Ile Phe Tyr Asp Asn Arg Gly Phe Cys Lys Tyr Gly Ser Ser 20 25 30 Ser Tyr Lys Tyr Asp Cys Gly Asn Tyr Ala Gly Cys Cys Leu Pro Arg 35 40 45 Asn Pro Tyr Gly Arg Val Lys Tyr Tyr Cys Thr Lys Lys Tyr Ser Cys 50 55 60 Pro Asp Asp Phe Tyr Tyr Tyr Asn Asn Lys Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Asn 65 70 75 80 Asp Lys Asp Tyr Phe Asn Cys Gly Ser Tyr Asn Gly Cys Cys Leu Arg 85 90 95 Ser Gly Tyr <210> 15 <211> 194 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid mussel adhesive protein (FP-151, MEFP-5 based) <400> 15 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 20 25 30 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 35 40 45 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu Glu 50 55 60 Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Ala Tyr His Tyr His Ser Gly 65 70 75 80 Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys Tyr 85 90 95 Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly Lys 100 105 110 Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr Lys 115 120 125 Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 130 135 140 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 145 150 155 160 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 165 170 175 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 180 185 190 Tyr Lys <210> 16 <211> 196 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid mussel adhesive protein (FP-151, MGFP-5 based) <400> 16 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 20 25 30 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 35 40 45 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu Glu 50 55 60 Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser Gly 65 70 75 80 Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys Tyr 85 90 95 Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly Lys 100 105 110 Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr Lys 115 120 125 Lys Tyr Tyr Gly Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 130 135 140 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser 145 150 155 160 Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 165 170 175 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 180 185 190 Pro Thr Tyr Lys 195 <210> 17 <211> 192 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid mussel adhesive protein (FP-151, MCFP-5 based) <400> 17 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 20 25 30 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 35 40 45 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Tyr Asp Gly Tyr 50 55 60 Ser Asp Gly Tyr Tyr Pro Gly Ser Ala Tyr Asn Tyr Pro Ser Gly Ser 65 70 75 80 His Gly Tyr His Gly His Gly Tyr Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Gly 85 90 95 Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Arg Thr Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu 100 105 110 Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly 115 120 125 Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 130 135 140 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 145 150 155 160 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser 165 170 175 Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 180 185 190 <210> 18 <211> 177 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid mussel adhesive protein (FP-131) <400> 18 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 1 5 10 15 Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys 20 25 30 Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 35 40 45 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Gly Cys Arg Ala 50 55 60 Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly Gly 65 70 75 80 Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Gly Ser Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly 85 90 95 Trp Asn Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr Glu 100 105 110 Phe Glu Phe Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro 115 120 125 Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr 130 135 140 Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 145 150 155 160 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Lys 165 170 175 Leu <210> 19 <211> 180 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid mussel adhesive protein (FP-251) <400> 19 Met Glu Val His Ala Cys Lys Pro Asn Pro Cys Lys Asn Asn Gly Arg 1 5 10 15 Cys Tyr Pro Asp Gly Lys Thr Gly Tyr Lys Cys Lys Cys Val Gly Gly 20 25 30 Tyr Ser Gly Pro Thr Cys Ala Cys Ser Ser Glu Glu Tyr Lys Gly Gly 35 40 45 Tyr Tyr Pro Gly Asn Ser Asn His Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His 50 55 60 Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala 65 70 75 80 Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu 85 90 95 Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly 100 105 110 Gly Ser Ser Glu Phe Glu Phe Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr 115 120 125 Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 130 135 140 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala 145 150 155 160 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 165 170 175 Thr Tyr Lys Lys 180 <210> 20 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 20 Lys Leu Trp Lys Lys Trp Ala Lys Lys Trp Leu Lys Leu Trp Lys Ala 1 5 10 15 <210> 21 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 21 Phe Ala Leu Ala Leu Lys Ala Leu Lys Lys Leu 1 5 10 <210> 22 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 22 Ile Leu Arg Trp Pro Trp Trp Pro Trp Arg Arg Lys 1 5 10 <210> 23 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 23 Ala Lys Arg His His Gly Tyr Lys Arg Lys Phe His 1 5 10 <210> 24 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 24 Lys Trp Lys Leu Phe Lys Lys Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu 1 5 10 15 <210> 25 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 25 Leu Val Lys Leu Val Ala Gly Ile Lys Lys Phe Leu Lys Trp Lys 1 5 10 15 <210> 26 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 26 Ile Trp Ser Ile Leu Ala Pro Leu Gly Thr Thr Leu Val Lys Leu Val 1 5 10 15 Ala Gly Ile Gly Gln Gln Lys Arg Lys 20 25 <210> 27 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 27 Gly Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu 1 5 10 15 Ile Ser Trp Ile 20 <210> 28 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 28 Ser Trp Leu Ser Lys Thr Ala Lys Lys Gly Ala Val Leu Lys Val Leu 1 5 10 15 <210> 29 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 29 Lys Lys Leu Phe Lys Lys Ile Leu Lys Tyr Leu 1 5 10 <210> 30 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 30 Gly Leu Lys Lys Leu Ile Ser Trp Ile Lys Arg Ala Ala Gln Gln Gly 1 5 10 15 <210> 31 <211> 39 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-microbacterial peptide <400> 31 Gly Trp Leu Lys Lys Ile Gly Lys Lys Ile Glu Arg Val Gly Gln His 1 5 10 15 Thr Arg Asp Ala Thr Ile Gln Gly Leu Gly Ile Ala Gln Gln Ala Ala 20 25 30 Asn Val Ala Ala Thr Ala Arg 35

Claims

서열번호 1 내지 서열번호 19로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 갖는 홍합 접착 단백질의 C-말단, N-말단, 또는 C-말단 및 N-말단에 서열번호 20 내지 31로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산 서열을 가지는 항균 펩티드가 융합된 항균 접착 단백질.
삭제
삭제
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삭제
삭제
삭제
청구항 1의 항균 접착 단백질을 포함하는 항균 코팅 조성물.
청구항 8에 있어서,
상기 항균 코팅 조성물 내의 항균 접착 단백질의 농도는 0.01∼1% (wt/wt)인 항균 코팅 조성물.
청구항 8에 있어서,
수용성 아크릴레이트를 추가로 포함하는 항균 코팅 조성물.
청구항 10에 있어서,
상기 수용성 아크릴레이트는 우레탄 아크릴레이트, 폴리에스테르 아크릴레이트 및 에폭시 아크릴레이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 항균 코팅 조성물.
청구항 8의 항균 코팅 조성물이 코팅된 항균 필름.
청구항 12에 있어서,
상기 항균 필름은 식품 포장 또는 휴대폰의 액정 보호용으로 사용되는 항균 필름.