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KR101397107B1 - 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물에 의한 염증 및 피부의 광손상 치료 및/또는 예방 및 피부의 광보호 - Google Patents

솔라눔 속 식물의 수용성 추출물에 의한 염증 및 피부의 광손상 치료 및/또는 예방 및 피부의 광보호 Download PDF

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KR101397107B1
KR101397107B1 KR1020120019701A KR20120019701A KR101397107B1 KR 101397107 B1 KR101397107 B1 KR 101397107B1 KR 1020120019701 A KR1020120019701 A KR 1020120019701A KR 20120019701 A KR20120019701 A KR 20120019701A KR 101397107 B1 KR101397107 B1 KR 101397107B1
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지앤이 허벌 바이오테크놀로지 씨오., 엘티디.
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Abstract

본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 염증 및 피부 광손상을 예방 및 치료하기 위한 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 상기 조성물은 광보호 효과를 가지며, 화장료 조성물로 이용될 수 있다.

Description

솔라눔 속 식물의 수용성 추출물에 의한 염증 및 피부의 광손상 치료 및/또는 예방 및 피부의 광보호{Treatment and/or prevention of inflammation and cutaneous photodamage and photoprotection of the skin with a water-soluble extract from plant of Solanum genus}
관련 특허의 상호 참증
본 출원은 2011년 5월 12에 제출된, 대만 출원 제100116659호에 기초한 우선권을 주장한다.
본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 염증 및 피부 광손상을 예방 및 치료하기 위한 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 상기 조성물은 광보호 효과를 가지며, 화장료 조성물로 이용될 수 있다.
호기성 생물에서, 산소는 호기성 호흡에서 이용되며, 그로 인해 활성산소종(reactive oxygen species, ROS) 및 자유 라디칼(free radicals)를 생산한다. 또한, 자외선(UV), 이온화 방사선, 및 일부 약제(medications), 또는 비생체물질(xenobiotics)이 ROS 및 자유 라디칼의 생성을 촉진할 것이다. ROS 및 자유 라디칼은 이들의 불안정성 때문에 세포내에 있는 성분(예, DNA, 단백질 및 지질 등)과 반응하고, 그로 인해 세포 및 조직에 산화적 손상을 야기할 수 있다.
일반적으로, 생물내 항산화 효소들은 산화적 손상으로부터 세포 및 조직을 보호하기 위하여 상호작용하는 네트워크를 형성한다. 산화적 스트레스는 ROS 및 자유 라디칼이 세포 또는 조직의 상호작용하는 네트워크에 의해 제공되는 항산화 능력을 초과할 때 형성된다. 산화적 스트레스는 염증 및 광손상의 병리 과정에서 중요한 역할을 하는 것으로 보고된 바 있다(Simon R. et al(2010), Free radical biology & Medicine, 49:1603-1616; Afaq F. et al.(2006), Experimentla Dematology, 15:678-684).
염증은 병원균 및 외부의 스트레스가 많은 자극에 대한 세포 또는 조직의 방어적인 반응이다. 염증 동안에, 상처 부위에서 세포 또는 조직은 NF-kB를 통해 특정한 유전자의 발현을 자극할 것이고, 뒤이어 케모카인(chemokine)의 증가된 발현이 나타나고, 그로 인해 상처 부위에 다핵 백혈구(polynuclear leukocytes), 단핵구(monocyte), 마크로파지(macrophages) 및 비만 세포(mast cells)의 축적을 야기한다(예, 침윤). 동원된 마크로파지는 병원균의 표면에서 발현되는 지질다당류(LPS)에 의해 활성화될 것이다. 활성화된 마크로파지는 염증유발 유전자(시클로옥시게나제-2 유전자(cylooxygenase-2 gene), COX-2, 및 유도형 일산화 질소 합성효소 유전자(inducible nitric oxide synthese gene), iNOS를 포함)의 발현을 유도하여, 염증 반응을 강화할 것이다. 더욱이, 활성화된 마크로파지는 ROS 및 자유 라디칼을 방출하여 병원균을 죽일 것이다. 그러나, 오래 지속되는 염증 반응은 ROS 및 자유 라디칼의 과도한 축적 때문에 산화적 스트레스 및 손상을 야기할 것이고, 그로 인해 만성적인 염증을 야기하고 궁극적으로 만성 질환 또는 암의 가능성을 높인다.
광손상은 생물의 피부가 자외선(특히 자외선-B, UV-B)에 노출되었을 때 일어나며, 피부 손상에 이르게 한다. UV 방사선으로의 노출은 피부 세포내 ROS 및 자유 라디칼의 축적을 가속화시키고, 피부 세포에 대한 산화적 스트레스를 증가시키며, 매트릭스 메탈로프로테이나제(matrix metalloproteinase, MMP)의 발현을 유도하고, 그로인해 산화적 광손상을 초래할 것이다. 산화적 광손상의 증상은 다음을 포함한다: 모세관혈관확장증(telangiectasia), 표피의 비박화(thinning of epidermis), 콜라겐 섬유(collagen fiber) 및 탄성 섬유(elastic fiber)의 감소, 건조(dryness), 주름 형성(wrinkle formation), 염증세포 침윤(inflammatory cells infiltration), 조기 피부 노화(premature skin aging) 및 피부의 병리적 변화(skin pathologic change).
최근, 식물로부터 유래된 피토케미칼(phytochemicals) 또는 피토케모예방(phytochemopreventive agents)는 항산화, 항염증 성질을 갖으며, 광손상을 개선하는 것이 입증되었다. 피토케미칼의 예는 다음을 포함한다: 녹차 폴리페놀(green tea polyphenols, GTPs), 에피갈로카테킨 갈레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 제니스테인(genistein), 레스베라트롤(resveratrol), 커큐민(curcumin), 아피제닌(apigenin), 리코펜(lycopene), 등(Adhami V.M. et al(2008), Photochem. Photobiol., 84:489-500). 피토케미칼은 원치 않은 부작용 없는 임상적 적용을 위해 보다 안전하다는 것이 입증된 바 있으며, 의학 연구의 분야에서 주목받고 있다.
솔라눔 속 식물은 솔라눔 운다툼(Solanum undatum)과 동의어인 솔라눔 인카눔 엘.(Solanum incanum L.), 솔라눔 인카눔 루이즈. & 파브(Solanum incanum Ruiz. & Pav.), 솔라눔 코아굴란스 포르스칼(Solanum coagulans Forsskal)(영어로는 쓴 사과), 솔라눔 인디쿰(Solanum indicum), 솔라눔 니그룸(Solanum nigrum)(중국어로는 롱 꾸이(Long Kui); 영어로는 블랙 나이트 쉐이드(black nightshade)), 솔라눔 잔토카르품(Solanum xanthocarpum), 솔라눔 멜론게나(Solanum melongena), 솔라눔 코아굴란스(Solanum coagulans), 솔라눔 투베로숨(Solanum tuberosum), 솔라눔 소도메움(Solanum sodomeum)(오스트레일리아에서는 Sodom의 사과), 솔라눔 투르부로숨(Solanum turburosum), 솔라눔 아큐레아스트룸(Solanum aculeastrum), 솔라눔 리코카르품(Solanum lycocarpum), 솔라눔 카시아눔(Solanum khasianum), 솔라눔 수아베올렌스(Solanum Suaveolens), 솔라눔 우포로(Solanum uporo), 솔라눔 아부틸로이데스(Solanum abutiloides), 솔라눔 코시네움(Solanum coccineum), 솔라눔 운구이쿨타툼(Solanum unguiculatum), 솔라눔 로부스툼(Solanum robustum), 솔라눔 안구이비(Solanum anguivi), 솔라눔 플라타니포리움(Solanum platanifolium), 솔라눔 맘모숨(Solanum mammosum) 등을 포함한다. 스테로이드 알카로이드는 솔라눔 속으로부터 추출될 수 있고, 일반적으로 솔라소닌 및 솔라마진을 포함한다는 것이 알려져 있다.
본 발명의 발명자에 의해 등록된 US 7,078,063 B2는 60 중량% 이상의 솔라소닌 및 솔라마진을 포함하는, 솔라눔 속 식물, 특히 솔라눔 인카눔 엘.로부터의 수용성 추출물 및 이 수용성 추출물을 제조하는 방법을 개시한다. 상기 특허는 참조에 의해 그 전체가 본 명세서에 포함된다.
전술한 US 특허에서, 본 발명자는 상기 수용성 추출물이 종양/암 세포(특히 간 종양 세포, 폐암 세포 및 유방암 세포)의 성장을 억제할 수 있다는 것을 발견하였다. 본 발명에서, 본 발명자는 상기 수용성 추출물이 염증 및 피부 광손상을 효과적으로 치료 및/또는 예방한다는 것을 예상치 못하게 발견하였다.
그러므로, 제1 양상에 따르며, 본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 피부 광손상의 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진(solamargine) 및 솔라소닌(solasonine)을 포함하는 것인 약학적 조성물을 제공한다.
제2 양상에 따르면, 본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 그러한 치료가 필요한 개체에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 광손상의 예방 및 치료를 위한 방법으로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 방법을 제공한다.
제3 양상에 따르면, 본 발명은 피부 광손상을 예방 및 치료하기 위한 의약의 제조에서 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물의 용도로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 용도에 관한 것이다.
제4 양상에 따르면, 본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는 화장료 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 화장료 조성물을 제공한다.
제5 양상에 따르면, 본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함한 염증 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물을 제공한다.
제6 양상에 따르면, 본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 그러한 치료가 필요한 개체에 적용하는 단계를 포함하는, 염증 예방 및 치료를 위한 방법으로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함한 것인 방법을 제공한다.
제7 양상에 따르면, 본 발명은 염증을 예방 및 치료하기 위한 의약의 제조에서 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물의 용도로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함한 것인 용도에 관한 것이다.
본 발명의 다른 특징 및 이점은 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 구현예의 하기의 상세한 설명에서 명백해질 것이며, 첨부된 도면에서:
도 1은 LPS-유도 염증 반응 후에 RAW264.7 세포내에서 COX-2 발현을 보여주는 웨스턴 블랏이다. 정상 대조군의 세포는 LPS 및 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물로 처리되지 않았고, 반면 질병 대조군(pathological control group)의 세포는 LPS 100ng/mL로 처리되었다. 실험군 1-6은 LPS 100 ng/mL와 함께 다양한 농도의 수용성 추출물로 처리되었다(0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1 및 5 ㎍/mL);
도 2는 6주의 UV-B 방사선 조사후 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 1 및 2 각각에서 HRS/J 무모 생쥐의 등피부의 경피수분손실(transepidermal water loss, TEWL)을 나타낸다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 1에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액으로 처리되었다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다;
도 3은 60주 실험 기간 후 HRS/J 무모 생쥐의 등피부 조직으로부터 NF-kB, COX-2 및 iNOS의 발현을 보여주는 웨스턴 블랏이다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다;
도 4는 첫번째 UV-B 방사선 조사후 60주의 종료시 HRS/J 무모 생쥐로부터의 등피부 조직에서 NF-kB 발현의 면역조직화학(immunohistochemistry)을 나타낸다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다;
도 5는 60주의 실험 기간의 종료시에 HRS/J 무모 생쥐로부터의 등피부 조직의 톨루이딘 블루 염색(toluidine blue stain)을 나타낸다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. 화살표는 침윤된 비만 세포의 위치를 표시한다;
도 6은 60주의 실험 기간 후에 정상 대조군, 질병 대조군, 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐 등피부 조직으로부터의 평균 비만 세포 수를 나타내는 막대 그래프(bar diagram)이다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. "*"는 실험군 2 및 정상 대조군 간의 P<0.05를 표시한다. "***"는 실험군 2와 질병 대조군 간의 P<0.01을 표시한다. "＃＃＃"은 질병 대조군과 정상 대조군 간의 P<0.001을 표시한다;
도 7은 60주 실험 기간 동안 다양한 시점에서 형성된 HRS/J 생쥐내의 평균 종양 수를 나타낸 그래프(plot)이다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 의해 유도된 광손상을 받았고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 1에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액으로 처리되었다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. "*"는 실험군 2와 정상 대조군 간의 P<0.05를 표시한다. "**"은 실험군 2 및 질병 대조군 간의 P<0.01을 표시한다;
도 8은 60주 실험 기간 동안 다양한 시점에 HRS/J 생쥐내의 평균 종양 크기를 나타낸 그래프이다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 의해 유도된 광손상을 받았고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 1의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액으로 처리되었다. 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. "＃"은 실험군 1과 질병 대조군 간의 P<0.05를 표시한다. "＃＃"은 실험군 1과 질병 대조군 간의 P<0.01를 표시한다. "＃＃＃"은 실험군 1과 질병 대조군 간의 P<0.001을 표시한다. "**"는 실험군 2와 질병 대조군 간의 P<0.01을 표시한다. "***"는 실험군 2와 질병 대조군 간의 P<0.001을 표시한다;
도 9는 60주 실험 기간 후 HRS/J 무모 생쥐에서 피부두께 검사(pinch test)시 회복 시간을 나타낸 바 그래프이다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선 및 수용성 추출물을 포함한 어떠한 처리도 받지 않았다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. "***"는 실험군 2와 질병 대조군 간의 P<0.001을 표시한다. "＃＃＃"은 질병 대조군과 정상 대조군 간의 P<0.001을 표시한다;
도 10은 레소르신-푸치신 용액(resorcin-fuchsin solution), 바이게르트' 철 헤마톡실린(Weigert's iron hematoxylin) 및 반 기슨 용액(van Geison solution)으로 염색된 등피부 조직의 탄성 섬유의 이미지를 나타낸다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 의해 유도된 광손상을 받았고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 실험군 2에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. 화살표는 탄성 섬유 변성(elastic fiber denaturation)의 위치를 표시한다;
도 11은 실험 기간 동안 HRS/J 생쥐내의 평균 종양 수를 나타낸다. HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 트레티노인 그룹(tretinoin group)에서 AIROL 배니싱 크림(vanishing cream)으로 처리되었다. 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군에서 P, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다;
도 12는 실험 기간 동안 경피수분손실(TEWL)을 나타내는 그래프이다. 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물에 의해 처리되지 않았다. 트레티노인 군에서 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, AIROL 배니싱 크림으로 처리되었다. 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군에서, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. " *"는 트레티노인 군과 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군 간의 P<0.05을 표시한다; 및
도 13은 실험 기간 동안 HRS/J 무모 생쥐로부터 유래된 등피부의 수분 함량을 나타내는 그래프이다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 의해 유도된 광손상을 받았고, 수용성 추출물로 처리되지 않았다. 트레티노인 그룹내, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, AIROL 배니싱 크림으로 처리되었다. 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군내, HRS/J 무모 생쥐는 UV-B 방사선에 노출되었고, 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리되었다. "*"는 트레티노인 그룹 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔 그룹 간의 P<0.05을 표시한다.
어떠한 선행 기술 문헌이 본 명세서에서 참조된다면, 그러한 참조는 상기 문헌이 대만 또는 다른 나라에서 당해 분야의 공통의 보편적인 지식의 일부를 형성하는 것을 인정하는 것은 아니라고 이해되어야 한다.
본 명세서의 목적을 위하여, 단어 "포함한(comprising)"은 "포함하나 한정되지 않는(including but not limited to)"을 의미하며, 단어 "포함하다(comprises)", "함유하다(contain)" 및 그의 변형은 대응하는 의미를 갖는 것으로 명백하게 이해될 것이다.
별도로 정의된 바가 없으면, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 공통적으로 이해되는 의미를 갖는다. 당해 기술분야의 당업자는 본 명세서에서 기술된 바와 유사하거나 동등한 다수의 방법 및 물질을 인식할 것이고, 그러한 방법과 물질은 본 발명의 실행시 이용될 수 있을 것이다. 사실, 본 발명은 기술된 방법 및 물질에 한정되지 않는다. 명확성을 위해, 다음의 정의가 본 명세서에서 사용된다.
본 발명은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 염증 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물을 제공한다. 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함한다. 바람직하게는, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 이상의 솔라마진 및 솔라소닌, 보다 바람직하게는, 60 wt% 내지 90 wt%의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함한다.
수용성 추출물을 제조하는 방법이 US 7,078,063 B2에 개시되어 있으며, 다음 단계를 포함한다:
(a) 솔라눔 속 식물의 식물 원료를 pH 3 ~ 5인 산성 수용액을 이용하여 추출 처리하여 수용액을 얻는 단계;
(b) (a) 단계에서 얻은 수용액을 염기로 pH 8 ~ 10으로 조정하여 침전물 을 형성시키는 단계;
(c) (b) 단계에서 형성된 침전물을 물로 세척한 다음, 건조하여 건조 생성물을 얻는 단계;
(d) (c) 단계에서 얻은 건조 생성물을 클로로포름과 혼합한 다음, 적절한 양의 100 % 알콜을 부가하여 클로로포름-알콜 혼합물을 형성시키는 단계;
(e) (d) 단계에서 형성된 클로로포름-알콜 혼합물을 소정의 물/알콜 비율을 갖는 물/알콜 용액과 혼합하여 클로로포름층과 비클로로포름층(non-chloroform-based layer)을 함유하는 혼합물을 얻는 단계;
(f) (e) 단계에서 얻은 혼합물로부터 클로로포름층을 제거한 다음, 적절한 양의 물을 부가하는 단계; 및
(g) (f) 단계에서 얻은 결과 혼합물로부터 상등액을 얻은 다음, 물에 직접적으로 용해되어 황색의 맑고 투명한 수용액을 형성할 수 있는 건조 생성물로 건조하는 단계.
바람직하게는, 상기 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물은 적어도 솔라눔 속 식물의 열매, 뿌리, 줄기 및 잎으로부터 얻었다. 상기 솔라눔 속 식물은 예비 처리에서 잘게 썰렸다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 단계 (a)에서 사용된 상기 식물 원료는 솔라눔 속 식물의 열매이다.
본 발명자들은 특정 요소가 상술한 과정을 이용하여 얻은 수용성 추출물 중 솔라소닌 및 솔라마진의 함량 및 비율에 영향을 줄 수 있다는 것을 발견하였다. 이러한 요소들은 솔라눔 속 식물의 종(species), 추출 과정에 사용된 식물의 부위 뿐 아니라, 사용된 알코올 및 염기의 종류를 포함한다. 그러므로, 당업자는 적절한 조작 조건과 함께, 식물의 적절한 종을 선택하여 원하는 수용성 추출물을 제조할 수 있다.
바람직하게는, 상기 수용성 추출물은 솔라눔 인카눔 엘., 솔라눔 인디쿰, 솔라눔 니그룸, 솔라눔 캅시카스트룸(Solanum capsicastrum), 솔라눔 잔토카르품, 솔라눔 멜론게나, 솔라눔 코아굴란스, 솔라눔 투니그룸(Solanum tunigrum), 솔라눔 소도메움, 솔라눔 투르부로숨(Solanum turburosum), 솔라눔 아큐레아스트룸, 솔라눔 리코카르품, 솔라눔 카시아눔, 솔라눔 수아베올렌스, 솔라눔 우포로, 솔라눔 아부틸로이데스, 솔라눔 코시네움, 솔라눔 운구이쿨타툼, 솔라눔 로부스툼, 솔라눔 안구이비, 솔라눔 플라타니포리움, 및 솔라눔 맘모숨으로 구성된 군으로부터 선택된 솔라눔 속 식물로부터 얻어진다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기 수용성 추출물은 솔라눔 인카눔 엘.로부터 얻어진다.
예비 실험에서, in vitro 데이터는 솔라눔 속으로부터의 수용성 추출물은 LPS에 의해 유도된 염증성 반응을 억제할 수 있다는 것을 보여주었다. 또한, UV-B 유도된 염증이 있는 무모 생쥐를 솔라눔 속 수용성 추출물로 처리한 후, 비만 세포 침윤 및 염증 반응의 완화와 함께, 상기 생쥐의 피부 조직에서 NF-kB, COX-2 및 iNOS의 발현이 현저하게 감소하였다는 것이 입증되었다.
그러므로, 본 발명은 상기 수용성 추출물 또는 상기 약학적 조성물을 그러한 치료가 필요한 개체에 적용하는 것을 포함하는, 염증 예방 및 치료를 위한 방법을 제공한다.
본 발명에 의해 제공된 상술한 약학적 조성물의 투여 경로는 경구, 국소(topical) 및 비경구 경로를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명에서 제공된 상기 약학적 조성물은 당업자에게 잘 알려진 기술을 이용하여 경구 제형으로 제형화될 수 있다. 경구 제형의 예는 멸균 파우더(aseptic power), 정제(tablet), 트로키(troche), 로젠지(lozenge), 펠릿(pellet), 캡슐(capsule), 분산성 파우더(dispersibe powder) 또는 과립(granule), 용액(solution), 현탁액(suspension), 에멀젼(emulsion), 시럽(syrup), 엘릭시르(elixir), 슬러리(slurry) 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 의약-제조 기술에 널리 이용되는 약제학적으로 허용가능한 담체를 더 포함할 수 있다.
상기 약학적으로 허용가능한 담체는 용매(solvent), 버퍼(buffer), 유화제(emulsifier), 현탁제(suspending agent), 분해제(decomposer), 붕해제(disintegrating agent), 분산제(dispersing agent), 결합제(binding agent), 부형제(excipient), 안정화제(stabilizing agent), 킬레이트제(chelating agent), 보존제(preservative), 습윤제(wetting agent), 윤활제(lubricant), 희석제(diluent), 흡수 지연제(absorption delaying agent), 리포좀(liposome), 감미제(sweetening agent), 착향제(flavoring agent), 착색제(coloring agent) 등을 포함한 하나 이상의 시약을 포함한다. 상기 약학적으로 허용가능한 담체의 선택 및 양은 당업자의 전문 지식 범주내에 있다.
상기 약학적으로 허용가능한 담체는 하나 이상의 시약을 포함하는데, 예를 들어 상기 시약은 물, 식염수(normal saline), 인산완충식염수(phosphate buffered saline, PBS), 포도당 함유 용액(glucose containing solution), 알코올 함유 수용액(aqueous solution containing alcohol) (예를 들어, 에탄올, 프로판디올, 글리콜, 만니톨, 등), 오일(예를 들어, 피넛 오일, 올리브 오일, 참깨 오일, 피마자 오일(castor oil), 면실 오일(cottonseed oil), 대두 오일(soybean oil) 등), 글리세롤, 유기 용매 및 리포좀을 포함한다. 본 발명의 구현예에서, 상기 용매는 물이다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 당업자에게 잘 알려진 기술을 이용하여 국소 투여(topical administration)를 위한 적합한 투여 제형으로 제형화될 수 있고, 상기 제형은 외용제(external preparations), 발포정(effervescent tablets), 좌제(suppositories), 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 수용성 추출물을 당해 기술분야에서 잘 알려지고 일반적으로 사용되는 염기와 혼합하여 겔 형태(gel form)로 된 외용제로 제형화된다.
본 발명에서, 적절한 염기는 다음의 첨가제 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 물, 알코올, 글리콜, 탄화수소(hydrocarbons)(예를 들면, 석유 젤리(petroleum jelly) 및 백색 바세린(white petrolatum)), 왁스(예를 들면, 파라핀(paraffin) 및 황납(yellow wax)), 보존제(preserving agent), 항산화제(antioxidants), 계면활성제(surfactant), 흡수 촉진제(absorption enhancers), 안정화제(stabilizing agents), 겔화제(gelling agents) (예를 들면, carbopol®974P, 미정질 셀룰로스(microcrystalline cellulose) 및 카르복시메틸셀룰로스(carboxymethylcellulose)), 활성제(active agent), 습윤제(humectants), 냄새 흡수제(odor absorbers), 방향제(fragrances), pH 조정제(adjusting agent), 킬레이트제(chelating agents), 유화제(emulsifiers), 차단제(occlusive agents), 연화제(emollients), 증점제(thickeners), 가용화제(solubilizing agents), 투과 촉진제(penetration enhancers), 자극완화제(anti-irritants), 착색제(colorants) 및 분사제(propellants) 등. 이와 같은 첨가제의 선택 및 양은 당업자의 전문 지식 범주내에 있다.
이 약학적 조성물의 투여량 및 투여 빈도는 다음의 요인에 따라 다양해질 수 있다: 치료대상 질병의 중증도, 투여 경로, 및 치료 대상 개체의 체중, 나이, 건강 상태 및 반응. 예를 들어, 본 발명에 따른 국소 투여(topical administration)를 위한 약학적 조성물의 일일 용량은 단위 병변 면적(lesion area)당 10-20 mg 및 1일에 1 내지 6회 일 수 있다. 경구 투여를 위한 약학적 조성물의 용량은 1-30 mg/Kg, 1일 1-4회 일 수 있다.
솔라눔 속 식물의 수용성 추출물은 무모 생쥐에서 UV-B 유도된 피부 광손상에 의해 유도된 피부 병리학적 변화를 완화시킨다는 것이 입증된 바 있다. 더욱이, 상기 수용성 추출물은 수분 유지 능력을 유지하면서 동시에 피부 탄성 및 광선탄력섬유증(solar elastosis)을 효과적으로 개선시킬 수 있다.
그러므로, 본 발명은 전술한 바와 같은 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 피부 광손상 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 상술한 수용성 추출물 또는 상기 약학저 조성물을 그러한 치료가 필요한 개체에 적용하는 것을 포함하는, 피부 광손상 예방 및 치료를 위한 방법을 제공한다.
본 발명에서, 용어 "피부 광손상(cutaneous photodamage)"은 일광 또는 UV 광(특히, UV-B)에 대한 피부의 노출에 의해 일어나는 피부 손상을 의미한다. 피부 광손상은 피부의 비박화(thinning of the skin), 피부 위축증(skin atrophy), 콜라겐 섬유(collagen fiber) 및 탄성 섬유(elastic fiber)의 감소, 탄력섬유증(elastosis), 피부 탄력성의 손실(loss of skin elasticity), 건조(dryness), 주름 형성(wrinkle formation), 염증세포 침윤(inflammatory cells infiltration), 조기 피부 노화(premature skin aging), 혈관 변화(vascular change)(예를 들면, 분산된 홍반(diffuse erythema), 반상출혈(ecchymosis), 또는 모세혈관확장증(telangiectasia)), 색소 변화(pigmentary change)(예를 들면, 검버섯(lentigines), 주근깨(freckles), 저색소 침착(hypopigmentation) 또는 과색소 침착(hyperpigmentation)), 면포(comedone), 낭종(cyst) 및 피부 병리적 변화(skin pathological change)을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따르면, 투여 경로, 투여량 및 약학적으로 허용가능한 담체는 염증 치료 및 예방을 위한 약학적 조성물에서 사용된 것과 유사하다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기 약학적 조성물은 피부상으로 투여를 위한 국소 형태(topical form)로 제형화된다.
수용성 추출물의 피부 광보호의 예방/보호 때문에, 수용성 추출물이 화장료 조성물을 제조하기 위한 화장료 성분으로 사용될 수 있다는 것을 예측할 수 있다.
그러므로, 본 발명은 전술한 바와 같은 수용성 추출물을 포함하는, 광보호 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 용어 "광보호(photoprotective)"는 태양 또는 자외선에 의해 야기되는 유해한 임상효과(adverse clinical effective), 조직학적 및 면역학적 효과를 차단 또는 완화시키는 것을 의미한다. 이러한 효과는 급성 반응(예를 들면, 홍반 및 염증) 및 만성 효과(예를 들면, 탄력섬유증 및 주름 형성)를 포함한다.
본 발명에 따르면, 상기 화장료 조성물은 화장품-제조 기술에 널리 이용되는 화장용으로 허용가능한 아주번트를 더 포함할 수 있다.
허용가능한 아쥬번트는 용매(solvent), 겔화제(gelling agents), 활성화제(activating agents), 보존제(preservatives), 항산화제(antioxidants), 차단제(screening agents), 킬레이트제(chelating agents), 계면활성제(surfactant), 착색제(coloring agents), 증점제(thickening agents), 충진제(fillers), 방향제(fragrance) 및 냄새 흡수제(odor absorbent)를 포함한 하나 이상의 시약을 포함한다. 상기 첨가제의 선택 및 양은 당업자의 전문 지식 범주내에 있다.
본 발명에 의해 제공된 화장료 조성물은 스킨케어(skincare), 헤어케어(haircare) 또는 메이크업(makeup) 제품의 제형으로 당업자에게 잘 알려진 기술을 이용하여 제조될 수 있다. 상기 제형은 수용액(aqueous solution), 에멀젼(emulsion), 겔(gel), 연고(ointment), 크림(cream), 마스크(mask), 패치(patch), 파우더(powder), 에어로졸(aerosol), 스프레이(spray), 로숀(lotion), 선블럭(sunblock), 및 기타 바디 클린징 제품(cleaning product)을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 다음의 작용제(agent)와 함께 사용될 수 있다: 미백제(whitening agents), 습윤제(humectants), 항균제(bactericides), 자외선 흡수제(ultraviolet absorbers), 항-여드름제(anti-acne agent), 항소양제(antipruritic), 항과각질 용해제(antihyperkeratolytic agents), 항건선제(antipsoriatic agents), 항노화제(antiager), 항주름제(antiwrinkle agents), 항지루제(antiseborrheic agents), 자가 태닝제(self-tanning agents), 및 상처 치료제(wound-healing agents). 이와 같은 작용제의 선택 및 양은 당업자의 전문 지식 범주내에 있다.
실시예
실험 재료:
1. 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물 및 상기 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액의 제조
솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물은 US 7,078,063 B2의 실시예 1에 개시된 절차를 바탕으로 제조하였다. 구체적으로, 솔라눔 인카눔 엘.의 성숙 열매 500 g에 순수한 물 1000 ml를 부가한 후에 갈아주었다. 수득된 수성 혼합물에, 99.5 %의 아세트산을 점적하여 pH 값을 4.0으로 맞춘 다음, 12시간 동안 실온에서 진탕시켰다. 수득된 수성 혼합물을 원심분리하여 상등액을 얻고, 거기에 33% NH4OH 염기성 용액을 점적하여 상등액의 pH 값을 9.0으로 조정하고 침전물을 형성시켰다. 그 침전물을 4,500 rpm에서 원심분리(Beckman Coulter, Avanti J-25, JA-14 Rotor)를 수행하여 분리하고, 수득된 침전물을 물로 세척하여 거기에 존재하는 잔류 염기성 용액을 제거한 다음, 4,500 rpm에서 원심분리하였다. 그리하여 얻어진 침전물을 증류수에 현탁하고 동결건조(Virtis, Freezemobile 12ES)하여 건조 파우더 5 g을 얻었다.
2 g의 건조 파우더를 시약등급의 클로로포름 50 ml에 용해한 다음, 100% 메탄올 40 ml를 첨가하고 진탕하여 균일한 현탁액을 형성시켰다. 형성된 현탁액을 4,500 rpm으로 원심분리하거나 여과함시켜 상등액을 얻었다. 그 상등액에 메탄올:물(1:1) 용액 70 ml를 첨가하고 잘 혼합하였다. 수득된 혼합물을 10분 동안 12,000 rpm에서 원심분리 하였다. 결과적으로 수득된 상등액을 제거하고, 증류수 120 ml를 거기에 첨가하고 잘 진탕하였다. 한편, 상기 상등액이 탁해졌다. 수득된 상등액을 12,000 rpm에서 10분 동안 더 원심분리하여 침전물을 제거하였다. 결과적으로 수득된 상등액을 감압하에 55℃에서 감압 농축하여 메탄올을 제거한 다음, 동결 건조하여 수용성 추출물의 건조 파우더를 얻었다.
상기 수용성 추출물을 멸균수에 용해시켜 하기에 기술된 실험에 더 사용하기 위하여 솔라눔 인카눔 엘.용액을 얻었다.
2. 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 제조
겔화제로 사용되고 Lubrizol Advanced Materials, Inc., KY 40258, USA로부터 상업적으로 이용 가능한, carbopol®974P 4 g을 순수한 물 50 g에 용해한 다음 프로필렌 글리콜 30g 및 "실험 재료"하의 "1. 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물 및 상기 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액의 제조"의 부분에서 얻어진 수용성 추출물의 건조 파우더 7g을 순차적으로 부가하고 잘 혼합하였다. 상기 혼합물을 20분 동안 50℃ - 60℃의 온도로 가열 용기에서 가열한 다음, 실온에서 냉각하였다. 냉각된 혼합물에 트리에탄올아민을 혼합하여, pH를 7.0±0.5로 조정하였다. 그 후에, 물을 상기 혼합물의 전체 질량이 100g에 이를 때까지 부가하여, 그에 의해 인해 수용성 추출물 7%(W/W)이 포함된 겔을 얻었다(이하에서, 솔라눔 인카눔 엘. 겔로서 지칭됨).
3. 동물 모델
HRS/J 무모 생쥐 (6-8 주령, 체중 20-22g)을 Jackson Laboratory(Bar Harbor, USA)로부터 구입하였다. 상기 생쥐들을 12 시간/12 시간 광/암 주기(light/dark cycle)로, 온도 21-22℃ 및 습도 30-70%인 방에 수용시켰다. 항상 식이와 물은 충분하였고, 생쥐들이 접근할 수 있었다. 모든 동물 실험은 Guide for the Care and Use of Laboratory Animals of National Institute of Health(NIH)에 따라 수행하였다.
일반적인 방법:
1. 단백질 생성물의 분석:
본 발명에서 단백질 분석을 위하여 소디움 도데실 설페이트-폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(SDS-PAGE) 및 웨스턴 블랏을 이용하였다. SDS-PAGE 및 웨스턴 블랏을 위한 장치 및 시약은 다음과 같다:
a. SDS-PAGE 분석을 위하여 수직 전기영동 시스템(Hoefer SE600, GE Healthcare)을 사용하였다.
b. 단백질 전달을 위하여 폴리비닐리덴 디플루오리드 막(polyvinylidene difluoride membrane)(PVDF, Millipore) 및 반-건조 블러테르(semi-dry blotters)(Hoefer TE70X, GE Healthcare)를 사용하였다.
c. 웨스턴 블랏에서 사용한 1차 및 2차 항체를 표 1에 열거된다.
d. ImmobilonTM Western Chemiluminescent HRP Substrate(Millipore, Cat No. WBKLS0500)를 이용하여 화학발광 염색(chemiluminescence staining)에 의해 단백질을 시각화한 다음, 자기방사 필름(autoradiography films) 위에서 검출하였다(Kodak Biomax, Kodak Cat. No. 1788207).
표 1. 웨스턴 블랏 분석에서 사용된 1차 항체 및 2차 항체
표적 단백질 1차 항체 2차 항체
COX-2 마우스 항 COX-2 모노클로날 항체(BD Bioscience, Cat. No. 610203) 양 항 마우스 IgG-홀스래디쉬 퍼옥시다제(horseradish peroxidase, HRP) 항체 (Amersham, Cat. No. NA931)
NF-kB 토끼 항 NF-kB 모노클로날 항체(Abcam, Cat. No. Ab7970) 당나귀 항 토끼 IgG-HRP 항체(Amersham, Cat. No. Na934)
iNOS 토끼 항 iNOS 폴리클로날 항체(Santa Cruz, Cat. No. So-651) 당나귀 항 토끼 IgG-HRP 항체
β-액틴(actin) 마우스 항 β-액틴 모노클로날 항체(Sigma, Cat. No. A5441) 양 항 마우스 IgG-HRP 항체
GAPDH 마우스 항 GAPDH 모노클로날 항체(Chemicon, Cat. No. Mab374) 양 항 마우스 IgG-HRP 항체
2. 염증 및 광손상의 유도
HRS/J 무모 생쥐 각각의 등피부를 14주 동안 일주일에 3번씩 UV-B 방사선에 노출시켜, 염증 반응 및 광손상을 유도하였다. 6x8W T-8M UV-B 램프(312 nm)가 장착된 BLX-312 자외선 크로스링커(ultraviolet crosslinker)(BIO-LINK, Vilber Lourmat, France)를 사용하여 UV-B 방사선 조사를 수행하였다. 각각의 노출 동안 UV-B 방사선의 단일 선량, 주당 UV-B 선량(dosage/wk), 및 누적 선량이 표 2에 열거된다.
실험 시점(wk) 단일 UV-B 선량
(Single UV-B dosage)
(mJ/cm2)		 선량/wk
(mJ/cm2)		 축적된 선량
(mJ/cm2)
1 36 108 108
2 54 162 270
3 72 216 486
4 90 270 765
5 108 324 1080
6 126 378 1458
7 144 432 1890
8 162 486 2376
9 180 540 2916
10 216 594 3510
11 216 648 4158
12 216 648 4806
13 216 648 5454
14 216 648 6102
3. 조직 절편:
(실온에서 수거된) 조직을 적어도 12시간 동안 PBS중 4% 파라포르알데히드(paraforaldehyde)에서 고정한 다음, 에탄올 탈수를 하였다. 상기 탈수수된 조직을 파라핀에 포매시키고 썰어서 길이 방향 절편(longitudinal section)을 얻었다.
4. 통계적인 분석:
결과는 평균±평균의 표준 오차(SEM)로 표시된다. 모든 통계적인 데이터 분석은 스튜던트 t-검정(양측(2-tailed))으로 수행하였다. P<0.05는 통계적으로 유의성 있는 것으로 고려된다.
실시예 1: 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물의 in vitro 항염증 효과의 평가
지질다당류(LPS)-유도된 염증을 갖는 마우스 마크로파지 세포주 RAW264.7을 사용하여 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물의 항염증 효과를 결정하였다.
실험 절차:
RAW264.7 세포(American Type Culture Collection, ATCC에서 구입, TIB-71)를 우태아혈청 10%, L-글루타민 4mM 및 (소디움 피루베이트 불포함) 포도당 4.5 g/L를 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)(HyClone SH 30022.01, Logan, Utah, USA)에 1x106 세포/웰(6-웰 플레이트)의 밀도로 접종하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 상기 세포를 3개의 그룹으로 나누었다: 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군(실험군 1, 2, 3, 4, 5 및 6). 72시간 배양 후에, 질병 대조군을 LPS (Escherichia coli serotype 0111:B4, Sigma) 100ng/mL이 포함된 신선한 DMEM 배지에서 배양되도록 바꾸었고, 실험군은 LPS 100ng/mL 및 "실험 재료"하의 "1. 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물 및 상기 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액의 제조"의 부분에서 얻어진 상이한 농도의 수용성 추출물이 포함된 신선한 DMEM 배지에서 배양하였다. 실험군 1, 2, 3, 4, 5 및 6에 대하여 수용성 추출물의 농도는 각각 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1 및 5 ㎍/mL이었다. 정상 대조군은 여전히 10% FBS, 4mM L-글루타민 및 (소디움 피루베이트 불포함) 4.5 g/L 포도당을 포함하는 DMEM에서 배양하였다.
(37℃, 5% CO2 배양기내에서) 24시간 배양 후, 각 웰의 배지를 제거한 다음, T-PER 시약(PIERCE에서 구입함) 100㎕을 첨가하고 혼합하여 세포 혼합물을 얻었다. 상기 세포 혼합물을 원심분리 튜브에 넣고, 5분 동안 진탕한 다음, 30분 동안 얼음에서 냉각하였다. 그후, 세포 혼합물을 4℃에서 10분 동안 14,000 rpm으로 원심분리하고, 이후 분석을 위해 상등액을 단백질 샘플로 모았다.
그 결과물인 단백질 샘플에 "일반적인 방법"하의 "1. 단백질 생성물의 분석"의 부분에서 기재된 방법을 이용하여 COX-2 웨스턴 블랏 분석을 수행하였다. β-액틴을 내부 대조군으로 사용하였다.
결과:
도 1은 RAW264.7 세포에서 COX-2 발현을 보여주는 웨스턴 블랏이다. 도 1에 도시된 바와 같이, COX-2 발현은 정상 대조군과 비교해 볼 때, 질병 대조군내에서 현저히 증가하였고, 이것은 RAW264.7 세포에서 LPS에 의해 염증이 성공적으로 유도되었음을 표시한다. 질병 대조군과 비교해 볼 때, 실험군 1-6에서 COX-2의 감소된 발현이 관찰되었고, 보다 높은 농도의 수용성 추출물이 첨가되었을 때, 감소된 발현은 보다 명백하다. 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물이 in vitro에서 LPS-유도된 염증을 억제할 수 있고, 항염증 반응에 대한 수용성 추출물의 효과가 용량-의존적임을 보여준다.
실시예 2: UV-B-유도된 염증을 가진 무모 생쥐에서 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 치료적 효과의 평가
실험 절차:
HRS/J 무모 생쥐는 임의적으로 정상 대조군, 질병 대조군 및 두개의 실험군(즉, 실험군 1 및 2)으로 나누었다(그룹당 n=4), 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 어떠한 UV-B 방사선도 받지 않았다. 질병 대조군 및 두개의 실험군내 HRS/J 무모 생쥐에서 "일반적인 방법"하의 "2. 염증 및 광손상의 유도"의 부분에서 기재된 절차를 이용하여 염증을 유발하였다.
UV-B 방사선 조사의 개시부터, 실험군 1의 HRS/J 생쥐에 솔라눔 인카눔 엘. 용액을 경구 투여하였는데, 상기 용액은, "실험 재료"하의 "1. 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물 및 상기 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액의 제조"의 부분에서 기재된 바에 따라 제조하였다. 이러한 생쥐에 14주(wk) 기간 동안, 일주일에 7회, 하루에 한번(1500 mg/kg)씩 솔라눔 인카눔 엘.의 용액을 투여하고, 60주 동안 지속적으로 관찰하였다(즉, 60주 실험 기간). 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐 각각의 UV-B에 노출된 등피부에, "실험 재료"하의 "2. 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 제조"의 부분에서 얻어진 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 적용하였다. 상기 겔을 14주(wk) 기간 동안, 일주일에 5회, 하루에 한번(용량: cm2 당 겔 10-20 mg)씩 적용하였고, 60주 동안 지속적으로 관찰하였다. 정상 대조군 및 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 처리하지 않았다.
6주의 UV-B 조사 후에, HRS/J 무모 생쥐를 하기에 열거된 항목 A 및 B에 대하여 분석하였다. 추가적으로, 60주 실험 기간 후에 등피부 조직을 수술용 가위를 이용하여 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 2의 생쥐로부터 수집하였다. 이 조직을 하기에 열거된 항목 C 내지 E에 대하여 분석하였다.
A. 임상 증상의 진단
6주의 UV-B 조사 후에 염증 증상, 예를 들면, 가려움, 홍반 등에 대하여 HRS/J 무모 생쥐를 관찰하였다.
B. 경피수분손실(TEWL)의 분석
6주의 UV-B 조사 후에 증발계(evaporimeter)(Tewameter TM201R, Courage & Khazaka, Cologne, Germany)를 사용하여 각각의 그룹으로부터 각각의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부에서 TEWL을 평가하였다.
C. NF-kB, COX-2 및 iNOS의 웨스턴 블랏 분석
피부 조직 0.5g을 T-PER 조직 단백질 추출 시약(T-PER tissue protein extraction reagent)(Thermo Scientific, Cat. No. 78510)에 첨가한 다음, 균질기(Biospec Products에서 구입)로 조직 파쇄를 수행하였다. 잘 균질된 생성물을 4℃, 15,000 rpm에서 10시간 동안 원심분리하였다. 단백질 분석을 위하여 상등액을 수집하였다.
또한, 분리된 단백질을 사용하여, "일반적인 방법"하의 "1. 단백질 생성물의 분석"의 부분에서 기재된 절차에 따른 웨스턴 블랏 분석에 의해 NF-kB, COX-2 및 iNOS을 검출하였다. GAPDH를 내부 대조(internal control)로 이용하였다.
D. NF-kB의 면역조직화학 염색
피부 조직을 "일반적인 방법"하의 "3. 조직 절편" 부분에서 제시된 절차를 이용하여 6㎛ 두께로 절단하였다. 상기 조직 절편을 1차 항체 토끼 항 NF-kB 모노클로날 항체 및 비오틴이 결합된 당나귀 항 토끼 IgG 항체 (DarkoCytomation)를 이용하여 면역조직화학 염색을 하였다. 염색된 조직을 광학 현미경(Olympus BX51, Japan)하에서 100 내지 400x 배율로 검사하고, 디지탈 카메라(Olympus DP50, Japan)를 이용하여 사진을 찍었다.
E. 비만 세포의 조직화학 염색
피부 조직을 "일반적인 방법"하의 "3. 조직 절편" 부분에서 제시된 절차를 이용하여 6㎛ 두께로 절단하였다. 상기 조직 절편에 톨루이딘 블루(Sigma, Cat. No. T3260)로 조직화학 염색을 수행하였다. 염색된 조직 절편을 100 내지 400x 배율로 광학현미경하에서 검사하고, 디지탈 카메라(Olympus DP50, Japan)으로 사진을 찍었다. 비만 세포 수의 정량을 임의적으로 5개 조직 절편을 선택하여 수행하고 조직 절편 각각에서, 임의적으로 10개의 관찰 영역(observing field)을 계수하였다. 데이터는 평균±SEM을 나타낸다(P<0.05는 통계적으로 중요하다).
결과:
A. 임상 증상의 진단
정상 대조군과 비교하여 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 염증 증상을 보였는데, 이것은 UV-B 방사선이 성공적으로 HRS/J 무모 생쥐에서 염증 반응을 유도하였다는 것을 시사한다. 실험군 1 및 2는 질병 대조군과 비교시, 염증 반응에서 유의성 있는 감소를 보였다. 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘.의 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 항염증 효과를 갖는다는 것을 제시한다.
B. 경피수분손실(TEWL)의 분석
도 2는 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 1 및 2의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부의 TEWL의 결과를 보여주는 그래프이다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 정상 대조군과 비교했을 때 증가된 수준의 TEWL을 보였다. 이것은 UV-B 방사선이 HRS/J 무모 생쥐내에서 TEWL을 유도하였고, 각질층(stratum corneum)의 장벽기능에 손상을 주었다는 것을 나타낸다. 실험군 1 및 2의 HRS/J 무모 생쥐는 질병 대조군과 비교했을 때 현저히 감소한 TEWL을 보였다. 모두, 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 UV-B 방사선에 의해 야기된 각질층 손상 및 염증을 개선시킬 수 있다는 것을 제시한다.
C. NF-kB, COX-2 및 iNOS의 웨스턴 블랏 분석
도 3은 정상 대조군, 질병 그룹 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부 조직의 NF-kB, COX-2 및 iNOS의 웨스턴 블랏 분석이다. 질병 대조군의 피부 조직은 정상 대조군과 비교했을 때 NF-kB, COX-2 및 iNOS의 증가된 발현을 보여주었고, 이것은 UV-B 방사선이 HRS/J 무모 생쥐에서 염증 반응을 유도하였음을 시사한다. NF-kB, COX-2 및 iNOS 수준의 유의성 있는 감소는 질병 대조군과 비교시 실험군 2에서 관찰되었다. 모두에서, 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 항염증 효과를 갖는 것을 시사한다.
D. NF-kB의 면역조직화학 염색
도 4는 HRS/J 무모 생쥐로부터 얻어진 등피부 조직에서 NF-kB 발현의 면역조직화학 염색을 나타낸다. 도 4에서 도시된 바와 같이, 질병 대조군은 정상 대조군과 비교할 때, NF-kB에서 증가된 발현 수준을 보였고, 이것은 UV-B 방사선이 HRS/J 무모 생쥐에서 염증 반응을 유도한다는 것을 제시한다. 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 실험군 2에서와 같이, HRS/J 무모 생쥐에 적용되었을 때, NF-kB의 발현은 질병 대조군과 비교시 유의성 있는 감소를 보였다. 모두에서, 이러한 데이터는 본 발명의 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 항염증 효과를 갖는 것을 제시한다.
E. 비만 세포의 조직화학 염색
도 5는 HRS/J 무모 생쥐의 등피부 조직으로부터 얻은 비만 세포의 조직화학 염색을 나타낸다. 도 5에서 도시된 바와 같이, 톨루이딘 블루 염색은 질병 대조군의 등피부 조직에서 광범위한 비만 세포 침윤을 밝혔다. 이러한 현상은 정상 대조군에서는 눈에 띄게 명확하지 않았다. 명백하게, 비만 세포 침윤은 병리학적 대군군과 비교할 때 실험군 2에서 유의성 있게 감소되었다.
정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 2의 각각에서 비만 세포의 수의 비교는 도 6에 도시되었다. 실험군 2는 질병 대조군과 비교시 비만 세포 수의 유의성 있는 감소를 보였다. 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 HRS/J 무모 생쥐에서 UV-B 방사선에 의해 유도된 염증 효과를 개선할 수 있다는 것을 제시한다.
실시예 3: UV-B 유도된 광손상이 있는 무모 생쥐에서 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 치료적 효과의 평가
실험 절차:
HRS/J 무모 생쥐는 임의적으로 정상 대조군, 질병 대조군 및 두개의 실험군(즉, 실험군 1 및 2)으로 나누었다(그룹당 n=4). 정상 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 어떠한 UV-B 방사선 처리도 받지 않았다. 질병 대조군 및 두개의 실험군의 HRS/J 무모 생쥐에서 "일반적인 방법"하의 "2. 염증 및 광손상의 유도"의 부분에서 기재한 바와 같이 염증을 유발하였다.
UV-B 방사선 조사의 개시부터, 실험군 1의 HRS/J 생쥐에 솔라눔 인카눔 엘. 용액을 경구 투여하였고, 상기 용액은, "실험 재료"하의 "1. 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물 및 상기 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 용액의 제조"의 부분에서 기재된 바에 따라 제조하였다. 이러한 생쥐에 14주(wk) 기간 동안, 일주일에 7회, 하루에 한번(1500 mg/kg)씩 솔라눔 인카눔 엘. 용액을 투여하였고, 60주 동안 지속적으로 관찰하였다(즉, 60주 실험 기간). 실험군 2의, "실험 재료"하의 "2. 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 제조"의 부분에 따라 제조된 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 UV-B 조사된 생쥐의 등피부에 적용하였다. 상기 겔을 14주(wk) 기간 동안, 일주일에 5회, 하루에 한번(용량: cm2 당 겔 10-20 mg)씩 적용하였고, 60주 동안 지속적으로 관찰하였다. 정상 대조군 및 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 처리하지 않았다.
60주 실험 기간 동안 26, 35, 38, 41, 52, 56 및 60주의 종료시, 질병 대조군 및 실험군 1 및 2의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부에 항목 A(하기 참조)의 분석을 수행하였다. 또한, 60주 실험 기간 후에, 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐로부터 얻은 등피부에 하기에 기재된 항목 B의 분석을 수행하였다. 질병 대조군 및 실험군 2의 생쥐의 등피부 조직을 수술용 가위를 이용하여 얻고, 하기에 기재된 항목 C의 분석을 수행하였다.
A. 피부 종양 형성의 분석
질병 대조군 및 실험군 1 및 2의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부에서 종양 수를 육안으로 관찰하였다. 종양 크기는 디지탈 칼리퍼(digital caliper)(Mitutoyo, NTD15P-6''CX)를 이용하여 기록하였다. 종양 수 및 부피에 대한 데이터는 평균±SEM으로 표시하였다(P<0.05는 통계적으로 유의성이 있다).
B. 피부 탄력 평가
피부 탄력은 K.Tsukahara et al(2005), Biolo. Pharm. Bull., 28(12):2302-2307에서 제안된 피부두께검사(pinching testing)를 참조하여 평가하였다. 요약하면, 정상 대조군, 병리학적 대조군 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐를 플랫폼에 배치하였다. 생쥐 몸체의 가운데 선에서 등피부를 (생쥐를 들지 않고) 가능한 한 위로 집었고, 그리고 나서 풀어주었다. 꼬집힌 피부가 정상 상태로 되돌아오는 회복 시간을 측정하였다.
C. 탄성 섬유의 조직화학 염색
60주 실험 기간 후에, 질병 대조군 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐로부터 얻은 피부 조직을 "일반적인 방법"하의 "3. 조직 절편" 부분에서 제시된 절차를 이용하여 6㎛ 두께로 절단하였다. 조직 절편을 레소르신-푸치신 용액, 바이게르트' 철 헤마톡실린 및 반 기슨 용액으로 염색하였다(모두 Muto Pure Chemicals Co., Ltd에서 구입함). 염색된 조직을 100-400x 배율로 광학현미경 하에서 관찰하고, 디지탈 카메라(Olympus DP50, Japan)로 기록하였다.
결과:
A. 피부 종양 형성의 분석
60주 실험 기간 동안의 종양 수가 도 7에 도시되었다. 60주 실험 기간의 과정 동안 종양 크기 측정은 도 8에 도시되었다.
도 7 및 8에 도시된 바와 같이, 38주에, 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부는 종양 성장이 가속화를 보였다. 반대로, 60주 실험 기간 동안 실험군 1 및 2에서 종양 수 및 크기는 보다 느리게 증가하는 것이 관찰되었다. 이러한 데이터는 솔라눔 인카눔 엘. 용액 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 UV-B 방사선에 의해 야기된 광손상을 개선할 수 있고, 광손상에 의해 야기된 피부 병리학적 변화를 완화할 수 있다는 것을 제시한다.
B. 피부 탄력 평가
60주 실험 기간 후에 정상 대조군, 질병 대조군 및 실험군 2의 HRS/J 무모 생쥐에서 피부두께검사를 하였다. 도 9에서 도시된 바와 같이, 질병 대조군에서 보다 긴 회복 시간이 필요하기 때문에, 질병 대조군은 정상 대조군에 비하여 감소된 탄력을 보였고, 이것은 UV-B 노출이 HRS/J 무모 생쥐에서 광손상을 유도한다는 것을 시사한다. 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 실험군 2의 무모 생쥐의 등피부에 적용되었을 때, 피부 탄력은 질병 대조군과 비교했을 때 크게 증가되었다. 이러한 실험으로부터의 데이터는 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 UV-B에 의해 야기된 광손상을 완화할 수 있고, 피부 탄력을 향상시킬 수 있다는 것을 시사한다.
C. 탄성 섬유의 조직화학 염색
도 10에 도시된 바와 같이, 탄성 섬유 변성의 발생이 질병 대조군에서 현저하게 증가하였다. 반면, 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 실험군 2의 무모 생쥐의 등피부에 적용하였을 때, 탄성 섬유 변성은 더 적게 발생하였고, 섬유가 길고 온전하게 유지되었다. 이러한 실험으로부터의 데이터는 본 발명의 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 UV-B 노출에 의해 야기된 광손상을 완화시킬 수 있고, 광선탄력섬유증를 개선시킬 수 있다는 것을 시사한다.
모두에서, 상기 실험으로부터의 데이터는 솔라눔 인카눔 엘.의 수용성 추출물이 광손상을 예방할 수 있고, 광손상에 의해 야기된 피부의 병리학적 변화를 개선할 수 있다는 것을 지지한다.
실시예 4: UV-B 유도된 광손상의 예방에 대한 솔라눔 인카눔 엘. 겔 및 트레티노인의 효과 비교.
실험 절차:
HRS/J 무모 생쥐는 임의적으로 질병 대조군, 트레티노인군 및 솔라눔 인카눔 엘. 그룹으로 나누었다(그룹당 n=5). 각 그룹의 HRS/J 무모 생쥐에 광손상 유도를 "일반적인 방법"하의 "2. 염증 및 광손상의 유도"의 부분에 따라 수행하였다.
UV-B 방사선의 개시로부터, 트레티노인 그룹의 HRS/J 생쥐에 AIROL 배니싱 크림(광손상을 치료하기 위한 통상적의 활성 성분인 0.05% 트레티노인을 포함함, 국소 용량: cm2당 AIROL 배니싱 크림 10 내지 20 mg)을 적용하였다. 상기 크림을 14주 동안, 일주일에 5회, 하루에 한번씩 적용하였고, 35주 동안 지속적으로 관찰하였다(즉, 35주 실험 기간). "실험 재료"하의 "2. 수용성 추출물을 포함하는 솔라눔 인카눔 엘. 겔의 제조"의 부분에서 얻은 솔라눔 인카눔 엘. 겔을 솔라눔 인카눔 엘.겔 군의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부에 적용하였다. 상기 겔을 14주 기간 동안, 일부일에 5회, 하루에 한번 적용하였고(용량: cm2당 겔 10-20 mg), 35주 동안 관찰하였다. 질병 대조군의 HRS/J 무모 생쥐는 수용성 추출물로 처리하지 않았다.
트레티노인 군 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군의 생쥐 등피부위의 종양 수는 35주 실험 기간 동안, 0주(즉, UV-B 방사선 노출 전) 및 2, 7, 12, 17, 22, 27, 및 32주의 종료시에 실시예 3의 항목 A(피부 종양 형성의 분석)에서 언급된 방법에 근거하여 정량화하였다. 또한, 질병 대조, 트레티노인 군 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군의 HRS/J 무모 생쥐를 실시예 2의 항목 B(경피수분손실의 분석), 및 35주 실험 기간 동안 0주, 및 5, 10, 15, 20, 25, 및 30주의 종료시에 다음의 항목 A에 기재된 바와 같이 분석하였다.
A. 피부 수분 함량의 검사
피부내 수분 함량의 결정을 증발계(Tewameter TM 201R, Courage & Khazaka, Cologne, Germany)를 사용하여 검사하였다.
(1) 피부 종양 형성의 분석
도 11에서 도시된 바와 같이, 17주차에, 트레티노인 군은 평균 종양 수가 극적으로 증가하는 것을 보여주었다. 반대로, 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군의 HRS/J 무모 생쥐는 평균 종양 수의 느린 증가를 보였다. 이 데이터는 본 발명의 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 트레티노인 군과 비교시 UV-B에 의해 야기된 광손상을 보다 효과적으로 개선할 수 있고, 피부의 병리학적 변화를 보다 효과적으로 완화할 수 있다는 것을 시사한다.
(2) 경피수분손실(TEWL)의 평가
도 12에서 도시된 바와 같이, 35주 실험 기간 동안, TEWL 비율은 질병 그룹 및 트레티노인 군에 비교시 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군에서 P 보다 낮았다. 특히, 35주 실험 기간 동안 20, 25 및 30주 종료시에, 질병 대조군과 솔라눔 인카눔 엘. 그룹간에 TEWL에서 통계적으로 유의성 있는 차이가 있었다(P<0.05). 이 데이터는 본 발명의 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 UV-B 방사선에 의해 유도된 광손상을 효과적으로 완화할 수 있고, 광손상에 의해 야기된 각질층에서 손상을 효과적으로 개선할 수 있다는 것을 제시한다.
(3) 피부내 수분 함량의 평가
각 군(정상 대조군, 질병 대조, 트레티니온 군 및 솔라눔 인카눔 엘. 겔 군)의 HRS/J 무모 생쥐의 등피부내 수분 함량을 35주 실험 기간에 걸쳐서 다양한 시점에서 결정하였다. 도 13에서 도시된 바와 같이, 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리된 생쥐는 질병 대조군 및 트레티니온 군과 비교시 보다 높은 피부 수분함량을 가졌다. 특히, 25주 종료시에, 솔라눔 인카눔 엘. 겔로 처리된 생쥐는 질병 그룹 또는 트레티노인 군과 비교할 때, 통계적으로 유의성 있는 수분 함량을 보였다. 이 데이터는 본 발명의 솔라눔 인카눔 엘. 겔이 트레티니온 처리보다 UV-B에 의해 야기된 광손상을 완화시키는데 보다 효과적이며, 피부 수분 손실을 개선시킨다는 것을 시사한다.
모두에서, 본 발명의 수용성 추출물이 광손상을 치료 및 예방하기 위해 임상적으로 자주 사용되었던 것(예를 들면, 트레티니온)보다 더 효과적으로 광손상의 예방, 광손상에 의해 야기된 병리학적 변화의 개선, 및 수분-유지 능력의 유지를 보인다는 것이 입증되었다.
본 명세서에서 인용된 모든 특허 및 참조 문헌 뿐 아니라 상기 특허 및 문헌에서 인용된 모든 참조 문헌이 그 전체가 참조에 의해 결합되었다. 본 명세서에 상충되는 경우에, 정의를 포함한 본 명세서가 우선할 것이다.
본 발명은 가장 실현 가능하고 바람직한 구현예로 여겨지는 것과 연계하여 기술되었으나, 본 발명은 기술된 구현예에 한정되지 않고, 가장 넓은 해석 및 균등한 구성(arrangement)의 정신 및 범위안에 포함된 다양한 구성을 포괄하도록 의도된다고 이해된다.

Claims (15)

  1. 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 피부 광손상 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진(solamargine) 및 솔라소닌(solasonine)을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 이상의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 내지 90 wt%의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 피부 광손상은 하기의 증상 중 하나를 포함하는 것인 약학적 조성물: 피부의 비박화(thinning of the skin), 피부 위축증(skin atrophy), 콜라겐 섬유(collagen fiber) 및 탄성 섬유(elastic fiber)의 감소, 탄력섬유증(elastosis), 피부 탄력성의 손실(loss of skin elasticity), 건조(dryness), 주름 형성(wrinkle formation), 염증세포 침윤(inflammatory cells infiltration), 조기 피부 노화(premature skin aging), 혈관 변화(vascular change), 색소 변화(pigmentary change), 면포(comedone), 낭종(cyst) 및 피부 병리적 변화(skin pathologic change).
  5. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 경구 투여 제형으로 적용되는 것인 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 국소 투여 제형으로 적용되는 것인 약학적 조성물.
  7. 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 화장료 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 화장료 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 이상의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 화장료 조성물.
  9. 제7항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 내지 90 wt%의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 화장료 조성물.
  10. 제7항에 있어서, 용매(solvent), 겔화제(gelling agents), 활성화제(activating agents), 보존제(preservatives), 항산화제(antioxidants), 차단제(screening agents), 킬레이트제(chelating agents), 계면활성제(surfactant), 착색제(coloring agents), 증점제(thickening agents), 충진제(fillers), 방향제(fragrance) 및 냄새 흡수제(odor absorbent)로 이루어진 군에서 선택되는 화장용으로 허용되는 아쥬번트를 더 포함하는 것인 화장료 조성물.
  11. 솔라눔 속 식물의 수용성 추출물을 포함하는, 염증 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물로서, 상기 수용성 추출물은 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 이상의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  13. 제11항에 있어서, 상기 수용성 추출물은 60 wt% 내지 90 wt%의 솔라마진 및 솔라소닌을 포함하는 것인 약학적 조성물.
  14. 제11항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 경구 투여 제형으로 적용되는 것인 약학적 조성물.
  15. 제11항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 국소 투여 제형으로 적용되는 것인 약학적 조성물.
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