[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

KR101294521B1 - Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture - Google Patents

Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture Download PDF

Info

Publication number
KR101294521B1
KR101294521B1 KR1020120015365A KR20120015365A KR101294521B1 KR 101294521 B1 KR101294521 B1 KR 101294521B1 KR 1020120015365 A KR1020120015365 A KR 1020120015365A KR 20120015365 A KR20120015365 A KR 20120015365A KR 101294521 B1 KR101294521 B1 KR 101294521B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
channel
oxygen
dissolved oxygen
cell
oxygen concentration
Prior art date
Application number
KR1020120015365A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
박재우
오수정
전누리
박정극
Original Assignee
동국대학교 산학협력단
서울대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 동국대학교 산학협력단, 서울대학교산학협력단 filed Critical 동국대학교 산학협력단
Priority to KR1020120015365A priority Critical patent/KR101294521B1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101294521B1 publication Critical patent/KR101294521B1/en

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/48—Automatic or computerized control
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/58—Reaction vessels connected in series or in parallel
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/34—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of gas

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Computer Hardware Design (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

PURPOSE: An apparatus for controlling the concentration of dissolved oxygen in cells and a method for controlling the concentration of dissolved oxygen in cells using the same are provided to simplify and miniaturize the apparatus because additional devices for injecting mixed gas are unnecessary. CONSTITUTION: An apparatus for controlling the concentration of dissolved oxygen in cells comprises: a first channel (110) which provides a space for cell culture; a second channel (120) which is placed at one side of the first channel; an intermediate membrane which is placed between the first and second channels and divides for enabling oxygen to pass through the first and second channels; and an oxygen absorbent supply unit which supplies an oxygen absorbent to the second channel for discharging intracellular dissolved oxygen of the first channel to the second channel through the intermediate membrane. A method for controlling the dissolved oxygen in cells using the apparatus comprises the steps of: culturing the cells in the first channel; and supplying the oxygen absorbent to the second channel and reducing oxygen partial pressure of the first channel.

Description

미세유체 기반의 조직 배양시 저산소 조건의 구현을 위한 세포 내 용존산소농도 제어장치 및 이를 이용한 세포 내 용존산소농도 제어방법 {OXYGEN CONCENTRATION CONTROLLING DEVICE AND METHOD FOR GENERATING HYPOXIC CONDITION FOR MICROFLUIDIC BASED TISSUE CULTURE}Device for controlling dissolved oxygen concentration in cells for realizing hypoxic conditions in microfluidic tissue culture and method for controlling dissolved oxygen concentration in cells using same {OXYGEN CONCENTRATION

본 발명은 미세유체 기반의 조직 배양시 세포의 저산소 조건을 구현할 수 있도록 세포 내 용존 산소의 농도를 제어하는 장치 및 이를 이용한 세포 내 용존산소농도 제어방법에 관한 것이다.The present invention relates to a device for controlling the concentration of dissolved oxygen in the cell to implement the hypoxic conditions of the cell in microfluidic tissue culture, and a method for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell using the same.

생체 외 세포 배양시 세포의 저산소 조건(Hypoxic condition)을 구현하는 것은 뇌졸증, 암전이, 줄기세포 등의 연구를 위해 매우 중요하며, 이를 위해 세포 배양시 세포 내 용존 산소를 제어하는 기술이 필요하다. Implementing hypoxic conditions of cells in cell culture in vitro is very important for the study of stroke, cancer metastasis, stem cells, etc. For this purpose, a technique for controlling dissolved oxygen in cells during cell culture is required.

세포 배양시 용존산소의 농도를 제어하기 위하여 챔버 내에 질소와 산소가 적정 비율로 혼합된 혼합가스를 주입하여 원하는 산소 농도를 만든 후 외부와의 접촉을 차단한 상태로 챔버 내에서 세포를 배양하는 방법이 일반적으로 사용되고 있다.Method of culturing cells in the chamber while blocking the contact with the outside after making a desired oxygen concentration by injecting a mixed gas of nitrogen and oxygen in an appropriate ratio to control the concentration of dissolved oxygen during cell culture. This is commonly used.

그러나 이와 같은 방법에 따르면 가스를 적정 비율로 혼합하여 챔버 내에 주입하기 위한 부가적인 장치가 필요하며, 세포 배양 면적 대비 챔버의 크기가 상대적으로 커지는 문제점이 있다.However, this method requires an additional device for injecting the gas into the chamber by mixing the gas at an appropriate ratio, and the size of the chamber relative to the cell culture area is relatively large.

따라서 세포 내 용존산소농도의 제어에 있어서 보다 단순화 및 소형화된 구조를 갖는 제어장치의 필요성이 증대되고 있는 실정이다.Therefore, there is an increasing need for a control device having a more simplified and miniaturized structure for controlling dissolved oxygen concentration in cells.

본 발명은 상기와 같은 점을 감안하여 안출된 것으로서, 복잡한 부가장비의 필요없이 단순화 및 소형화된 구조를 갖는 세포 내 용존산소농도 제어장치 및 이를 이용한 제어방법을 제공하기 위한 것이다.The present invention has been made in view of the above, and to provide an apparatus for controlling dissolved oxygen concentration in cells having a simplified and miniaturized structure without the need for complicated additional equipment and a control method using the same.

상기한 과제를 실현하기 위해 본 발명은 세포 배양을 위한 공간을 제공하는 제1채널과, 상기 제1채널의 일측에 배치되는 제2채널과, 상기 제1 및 제2채널의 사이에 배치되며 상기 제1 및 제2채널의 사이를 산소의 통과가 가능하게 구획하는 중간막과, 상기 제1채널의 세포 내 용존산소가 상기 중간막을 통해 상기 제2채널로 배출되도록 상기 제2채널에 산소 흡수제를 공급하는 산소 흡수제 공급부를 포함하는 세포 내 용존산소농도 제어장치를 개시한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a first channel for providing a space for cell culture, a second channel disposed on one side of the first channel, and disposed between the first and second channels. Supplying an oxygen absorber to the second channel so as to allow the passage of oxygen between the first and second channels so as to allow oxygen to pass therethrough, and to dissolve dissolved oxygen of the first channel into the second channel through the intermediate film Disclosed is an intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus including an oxygen absorber supply unit.

상기 제1 및 제2채널은 PDMS 재질의 본체 내에 레이어를 이루도록 형성될 수 있으며, 상기 중간막은 PDMS 재질로 형성 가능하다.The first and second channels may be formed to form a layer in a body of PDMS material, and the intermediate layer may be formed of PDMS material.

상기 제1채널의 양단에는 세포 배양을 위한 배지가 저장되는 제1 및 제2저장소가 각각 연결될 수 있으며, 상기 제2채널의 양단에는 상기 산소 흡수제의 주입 및 배출을 위한 주입구와 배출구가 각각 연결될 수 있다. 여기서, 상기 주입구는 복수개로 형성되며, 상기 제2채널에 병렬로 연결될 수 있다.Both ends of the first channel may be connected to the first and second reservoirs for storing the medium for cell culture, respectively, and both inlets and outlets for the injection and discharge of the oxygen absorbent may be connected to both ends of the second channel. have. Here, the injection holes may be formed in plural and connected in parallel to the second channel.

상기 산소 흡수제 공급부는 상기 각 주입구에 각각 연결되도록 복수개로 구비되며, 상기 각 주입구에 서로 다른 농도의 산소 흡수제를 공급하도록 구성될 수 있다.The oxygen absorber supply unit may be provided in plural to be connected to each injection hole, and may be configured to supply oxygen absorbers having different concentrations to the injection holes.

상기 제1채널은, 신경 세포체의 배양을 위한 제1배양채널과, 상기 제1배양채널에서 연장되며 상기 제1배양채널의 신경 세포체에서 성장한 축색돌기가 통과하는 공간을 제공하는 마이크로 채널과, 상기 마이크로 채널의 단부에 연결되며 상기 마이크로 채널의 축색돌기를 배양하기 위한 제2배양채널을 포함하는 구성을 가질 수 있다. 여기서, 상기 제2채널은 제1 및 제2배양채널의 상부 또는 하부에 각각 한 쌍으로 형성 가능하다.The first channel may include a first culture channel for culturing neuronal cell bodies, a microchannel extending from the first culture channel and providing a space through which axons grown in the neuronal cell body of the first culture channel pass; It is connected to the end of the micro channel may have a configuration including a second culture channel for culturing the axon projection of the micro channel. Here, the second channel may be formed in a pair at the top or the bottom of the first and second culture channels, respectively.

한편, 본 발명은 상기 제1채널 내에 세포를 배양시키는 단계와, 상기 산소 흡수제 공급부의 작동을 통해 상기 제2채널에 산소 흡수제를 공급하여 상기 제1채널의 산소 분압을 감소시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존 산소 제어방법을 개시한다. 여기서, 상기 세포 내의 용존산소농도는 상기 산소 흡수제의 농도 조절을 통해 제어 가능하다. On the other hand, the present invention comprises the steps of culturing the cells in the first channel, and supplying an oxygen absorber to the second channel through the operation of the oxygen absorber supply unit to reduce the oxygen partial pressure of the first channel Disclosed is a method for controlling dissolved oxygen in a cell. Here, the dissolved oxygen concentration in the cell can be controlled by adjusting the concentration of the oxygen absorbent.

상기와 같은 구성의 본 발명에 의하면, 저산소 조건의 구현을 위해 질소/산소 혼합가스를 주입할 필요가 없어 혼합 가스 주입을 위한 부가적인 장치가 불필요하므로, 용존산소농도 제어장치의 단순화 및 소형화가 가능한 효과가 있다. According to the present invention having the above-described configuration, it is not necessary to inject nitrogen / oxygen mixed gas to implement low oxygen conditions, so that an additional device for injecting mixed gas is unnecessary, so that the dissolved oxygen concentration control device can be simplified and downsized. It works.

또한 장치의 크기 대비 세포 현상을 이미징 할 수 있는 영역(ROI: Region Of Interest)을 확장하여, 장치 크기 대비 ROI 효율을 극대화 할 수 있는 장점이 있다.In addition, there is an advantage of maximizing ROI efficiency compared to device size by expanding a region of interest (ROI) capable of imaging cell phenomena relative to the size of the device.

아울러 산소 흡수제의 농도 조절을 통해서 용존 산소량을 원하는 대로 조절 할 수 있는 이점이 있다.In addition, there is an advantage that can be adjusted to the amount of dissolved oxygen as desired by adjusting the concentration of the oxygen absorbent.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 내 용존산소농도 제어장치의 사시도.
도 2는 도 1에 도시된 세포 내 용존산소농도 제어장치의 평단면도.
도 3은 도 1의 Ⅲ-Ⅲ 라인을 따르는 측단면도.
도 4는 본 발명의 세포내 용존산소농도장치를 사용하여 용존산소농도를 제어하는 것을 나타낸 그래프.
도 5는 도 4의 용존산소농도 제어에 따른 신경 세포의 사멸 과정을 나타내는 사진.
도 6은 산소 흡수제 농도에 따른 세포 내 용존산소농도를 나타내는 그래프.
도 7은 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포 내 용존산소농도 제어장치의 사시도.
도 8은 도 7에 도시된 세포 내 용존산소농도 제어장치의 평단면도.
도 9는 도 8의 Ⅸ-Ⅸ 라인을 따르는 측단면도.1 is a perspective view of an intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 is a plan cross-sectional view of the apparatus for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell shown in FIG.
3 is a side cross-sectional view along the III-III line of FIG.
Figure 4 is a graph showing the control of dissolved oxygen concentration using the intracellular dissolved oxygen concentration apparatus of the present invention.
5 is a photograph showing a process of killing neurons according to the dissolved oxygen concentration control of FIG.
Figure 6 is a graph showing the dissolved oxygen concentration in the cell according to the oxygen absorbent concentration.
Figure 7 is a perspective view of the intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus according to another embodiment of the present invention.
8 is a cross-sectional plan view of the apparatus for controlling the dissolved oxygen concentration in cells shown in FIG. 7.
9 is a side cross-sectional view along the VIII-VIII line in FIG. 8;

이하, 본 발명과 관련된 저산소 조건의 구현을 위한 세포 내 용존산소농도 제어장치 및 이를 이용한 세포 내 용존산소농도 제어방법에 대하여 도면을 참조하여 보다 상세하게 설명한다. Hereinafter, an apparatus for controlling dissolved oxygen concentration in cells for implementing hypoxic conditions related to the present invention and a method for controlling dissolved oxygen concentration in cells using the same will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 내 용존산소농도 제어장치의 사시도이고, 도 2는 도 1에 도시된 세포 내 용존산소농도 제어장치의 평단면도이다. 그리고 도 3은 도 2의 Ⅲ-Ⅲ 라인을 따르는 측단면도이다.1 is a perspective view of an intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus according to an embodiment of the present invention, Figure 2 is a cross-sectional plan view of the intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus shown in FIG. And FIG. 3 is a side cross-sectional view along the III-III line of FIG. 2.

도 1 내지 3을 참조하면, 세포 내 용존산소농도 제어장치는 제1채널(110), 제2채널(120), 중간막(130), 및 산소 흡수제 공급부(140)를 포함한다.1 to 3, the intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus includes a first channel 110, a second channel 120, an interlayer film 130, and an oxygen absorber supply unit 140.

제1채널(110)은 세포 배양을 위한 공간을 제공하기 위한 것으로, 용존산소농도 제어장치의 외관을 이루는 본체(100) 내에 형성된다. 여기서 본체(100)는 PDMS(polydimethylsiloxane) 재질로 형성될 수 있으며, 그 밖에도 PMMA (Polymethylmethacrylate), PS(Polystyrene) 등의 세포 배양이 가능한 고분자 물질로 형성 가능하다. 여기서, 본체(100)는 글라스 플레이트(150) 상에 설치될 수 있다.The first channel 110 is to provide a space for cell culture, and is formed in the main body 100 forming the exterior of the dissolved oxygen concentration control device. The body 100 may be formed of a PDMS (polydimethylsiloxane) material, or may be formed of a polymer material capable of culturing cells such as polymethylmethacrylate (PMMA) and polystyrene (PS). Here, the main body 100 may be installed on the glass plate 150.

제1채널(110)의 양단에는 세포 배양을 위한 배지가 저장되는 제1 및 제2저장소(111,112)가 각각 연결될 수 있다. 제1 및 제2저장(111,112)는 배지의 주입이 가능하도록 본체(100)의 표면까지 연장되어 있다.Both ends of the first channel 110 may be connected to the first and second reservoirs 111 and 112 storing the medium for cell culture, respectively. The first and second reservoirs 111 and 112 extend to the surface of the main body 100 to allow the injection of the medium.

제2채널(120)은 제1채널(110)의 일측에 배치되며, 유체가 흐르는 공간을 제공한다. 제2채널(120)은 본체(100) 내에 제1채널(110)과 레이어를 이루도록 형성되어 제2채널(120)의 유체가 제1채널(110)과 중첩된 영역을 흐를 수 있게 한다. 본 실시예의 경우 제2채널(120)이 제1채널(110)의 상측에 형성된 것을 예시하고 있다.The second channel 120 is disposed on one side of the first channel 110 and provides a space in which the fluid flows. The second channel 120 is formed to form a layer with the first channel 110 in the main body 100 to allow the fluid of the second channel 120 to flow in an area overlapping the first channel 110. In the present exemplary embodiment, the second channel 120 is formed on the upper side of the first channel 110.

중간막(130)은 제1채널(110)과 제2채널(120)의 사이에 배치되며, 제1채널(110)과 제2채널(120)의 사이를 산소의 통과가 가능하게 구획하는 기능을 한다. 제1채널(110)과 제2채널(120) 사이로 산소의 통과는 가능하나 제1채널(110)의 액체는 중간막(130)에 막혀 제2채널(120)로 유입될 수 없다. 중간막(130)은 PDMS 재질로 형성될 수 있으며, 산소의 통과가 가능하도록 매우 얇은 두께(10 내지 150 마이크로미터)를 갖는다.The interlayer 130 is disposed between the first channel 110 and the second channel 120, and partitions the oxygen between the first channel 110 and the second channel 120 to allow oxygen to pass therethrough. do. Oxygen may pass between the first channel 110 and the second channel 120, but the liquid of the first channel 110 may be blocked by the intermediate layer 130 and may not flow into the second channel 120. The interlayer 130 may be formed of a PDMS material and has a very thin thickness (10 to 150 micrometers) to allow oxygen to pass therethrough.

산소 흡수제 공급부(140)는 제2채널(120)에 산소 흡수제(Oxygen scavenger)를 공급하기 위한 것으로서, 산소 흡수제가 제2채널(120) 내부에서 흐르도록 한다. 제2채널(120)의 양단에는 산소 흡수제의 주입 및 배출을 위한 주입구(121,122)와 배출구(123)가 각각 연결되며, 산소 흡수제 공급부(140)는 튜브 등의 연결수단을 통하여 주입구(121,122)에 연결된다.The oxygen absorber supply unit 140 is for supplying an oxygen scavenger to the second channel 120 so that the oxygen absorber flows inside the second channel 120. Inlets 121 and 122 and outlets 123 for injecting and discharging the oxygen absorbent are respectively connected to both ends of the second channel 120, and the oxygen absorber supply unit 140 is connected to the inlets 121 and 122 through connecting means such as a tube. Connected.

주입구(121,122)는 하나의 개수를 가질 수도 있으나, 제2채널(120)에 흐르는 산소 흡수제의 농도 조절이 가능하도록 복수의 개수를 가질 수도 있다. 주입구(121,122)가 복수의 개수를 갖는 경우 이들은 제2채널(120)에 병렬로 연결되며, 각 주입구(121,122)에는 복수로 구비된 산소 흡수제 공급부(140)가 각각 연결된다. 각 산소 흡수제 공급부(140)는 서로 다른 농도의 산소 흡수제를 서로 다른 주입구(121,122)에 공급하며, 각 주입구(121,122)에 주입되는 산소 흡수제의 유량을 조절함으로써 제2채널(120)에 흐르는 산소 흡수제의 농도를 조절할 수 있다. The injection holes 121 and 122 may have a single number, but may have a plurality of numbers so as to control the concentration of the oxygen absorbent flowing in the second channel 120. When the injection holes 121 and 122 have a plurality of numbers, they are connected in parallel to the second channel 120, and each of the injection holes 121 and 122 is provided with a plurality of oxygen absorber supply units 140. Each oxygen absorber supply unit 140 supplies oxygen absorbers having different concentrations to different inlets 121 and 122, and adjusts the flow rate of the oxygen absorbers injected into the respective inlets 121 and 122 to flow through the second channel 120. The concentration of can be adjusted.

본 실시예의 경우 제1주입구(121)와 제2주입구(122)에 각각 연결된 채널들이 제2채널(120)에 합류되는 구조를 예시하고 있으며, 제1 및 제2주입구(121,122)에는 각각 서로 다른 농도의 산소 흡수제를 공급하는 제1 및 제2공급부(141,142)가 연결되어 있다. 이와 달리 제1주입구(121)에 산소 흡수제를 공급하고, 제2주입구(122)에 물을 공급하는 구성도 가능하다.In the present exemplary embodiment, the channels connected to the first inlet 121 and the second inlet 122 are respectively joined to the second channel 120. The first and second inlets 121 and 122 are different from each other. The first and second supply units 141 and 142 which supply the oxygen absorbent at the concentration are connected. Alternatively, a configuration may be provided in which an oxygen absorbent is supplied to the first inlet 121 and water is supplied to the second inlet 122.

산소 흡수제로서 아황산나트륨(Na2SO3)이 사용될 수 있으며, 아황산나트륨은 다음과 같은 반응식에 의해 제2채널(120) 내의 공기 중의 산소를 흡수한다.Sodium sulfite (Na 2 SO 3 ) may be used as the oxygen absorber, and sodium sulfite absorbs oxygen in the air in the second channel 120 by the following reaction formula.

Na2SO3 + 1/2 O2 → Na2SO4 Na 2 SO 3 + 1/2 O 2 → Na 2 SO 4

산소 흡수제는 산소와의 화학적 반응을 통해 산소를 흡수하는 물질이라면 어떤 물질이든 사용 가능하며, 산소 흡수제의 예로서 아황산나트륨(Sodium sulfite, Na2SO3), 하드라진(Hydrazine, N2H4), 카르보하이드아자이드(Carbohydrazide, H6N4CO), 메틸에틸케톡신(Methylethylketoxime, H3C(C=N-OH)CH2CH3), 하이드로퀴논(Hydroquinone, OHCH6OH), 디에틸하이드록실아민(Diethylhydroxylamine, (CH3CH2)2NOH) 등을 들 수 있다.Oxygen absorbers can be used as long as they absorb oxygen through a chemical reaction with oxygen, and examples of oxygen absorbers include sodium sulfite (Na 2 SO 3 ) and hardrazine (Hydrazine, N 2 H 4 ). Carbohydrazide (H 6 N 4 CO), Methylethylketoxime (H 3 C (C = N-OH) CH 2 CH 3 ), Hydroquinone (OHCH 6 OH), Di ethyl hydroxylamine may be mentioned (Diethylhydroxylamine, (CH 3 CH 2 ) 2 NOH) and the like.

제1채널(110) 내에서 세포를 배양 중인 상태에서 제2채널(120) 내로 산소 흡수제를 주입하면, 위와 같은 반응에 의해 산소 흡수제가 제2채널(120) 내의 산소를 흡수하여 제2채널(120) 내의 산소 분압이 감소하게 된다. 이에 따라 제1채널(110)에서 배양되는 세포 내의 용존산소가 중간막(130)을 통해 제2채널(120)로 배출되어 세포 내 용존산소량이 감소하게 되며, 산소 분압을 0으로 수렴시키는 경우 세포 내 용존산소농도를 0으로 수렴시켜 완벽한 저산소 조건을 구현할 수 있다.When the oxygen absorbent is injected into the second channel 120 while the cells are being cultured in the first channel 110, the oxygen absorber absorbs the oxygen in the second channel 120 by the reaction as described above. The partial pressure of oxygen in 120 is reduced. Accordingly, the dissolved oxygen in the cells cultured in the first channel 110 is discharged to the second channel 120 through the interlayer 130 to reduce the amount of dissolved oxygen in the cell, and when the oxygen partial pressure converges to zero, By dissolving the dissolved oxygen concentration to zero, perfect hypoxic conditions can be achieved.

이와 같은 현상은 헨리의 법칙에 의해 설명 가능한데, 일반적으로 헨리의 법칙은 p = k·c 의 수식으로 기술된다. 여기서 p는 기체의 압력, c는 기체의 용해도, k는 헨리 상수를 말한다. 즉, 일정한 온도에서 일정 부피의 액체 용매에 녹는 기체의 질량, 즉 용해도는 용매와 평형을 이루고 있는 그 기체의 부분압력에 비례한다는 법칙이다.This can be explained by Henry's law, which is generally described by the formula p = k · c. Where p is the pressure of the gas, c is the solubility of the gas, and k is the Henry's constant. In other words, the mass, or solubility, of a gas dissolved in a volume of liquid solvent at a constant temperature is proportional to the partial pressure of the gas in equilibrium with the solvent.

헨리의 법칙에 따르면, 용매 내의 용존 산소량은 대기 중의 산소 압력에 의해 결정되는데, 공기 중의 산소 부분압은 항상 20%이므로 0.2기압이다. 그래서 일반적으로 헨리의 법칙을 응용하여 상온의 물에 녹아 있는 산소의 양을 구하게 되면 260μM의 값을 얻을 수 있다. 만일 산소의 부분압이 0기압 까지 떨어지게 된다면, 물속의 용존산소량도 0으로 수렴하게 되는 것이다.According to Henry's law, the amount of dissolved oxygen in the solvent is determined by the oxygen pressure in the atmosphere, which is 0.2 atm since the oxygen partial pressure in the air is always 20%. Therefore, in general, if Henry's law is applied to determine the amount of oxygen dissolved in water at room temperature, a value of 260 μM can be obtained. If the partial pressure of oxygen drops to zero, the dissolved oxygen in the water also converges to zero.

본 발명의 경우 제2채널(120) 내의 산소 분압이 감소함으로써 제1채널(110)에서 배양되는 세포 내의 용존 산소량이 감소하게 되고, 세포 내 용존 산소는 중간막(130)을 통해 제2채널(120)로 배출되게 되는 것이다.In the present invention, the amount of oxygen dissolved in the cells cultured in the first channel 110 is reduced by decreasing the partial pressure of oxygen in the second channel 120, and the dissolved oxygen in the cell is transferred to the second channel 120 through the interlayer film 130. Will be discharged.

도 4는 본 발명의 세포 내 용존산소농도 제어장치장치를 사용하여 저산소 조건을 구현하는 과정을 나타낸 그래프이고, 도 5는 도 4의 저산소 조건 구현에 따른 신경 세포의 사멸 과정을 나타내는 사진이다.Figure 4 is a graph showing a process for implementing the hypoxic condition using the apparatus for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell of the present invention, Figure 5 is a photograph showing the process of killing neurons according to the implementation of the hypoxic condition of FIG.

도 4는 제2채널(120)에 산소 흡수제를 계속적으로 공급함에 따라 시간에 따른 세포 내 용존산소농도의 추이를 나타내고 있으며, 실험 후 10분 이후 세포 내 용존산소농도가 거의 0으로 수렴하고 있다. 도 5의 경우 실험 후 4.5 시간 이후 신경세포가 사멸한 것을 보여주고 있으며, 이를 통해 세포의 저산소 조건이 구현된 것을 확인할 수 있다. 4 shows the trend of intracellular dissolved oxygen concentration over time as the oxygen absorber is continuously supplied to the second channel 120. After 10 minutes, the dissolved oxygen concentration in the cell converges to almost zero. 5 shows that the neurons died after 4.5 hours after the experiment, it can be seen that the hypoxic conditions of the cells are implemented.

도 6은 산소 흡수제 농도에 따른 세포 내 용존산소농도를 나타내는 그래프이다.6 is a graph showing the dissolved oxygen concentration in the cell according to the oxygen absorbent concentration.

앞서 설명한 바와 같이, 세포 내 용존산소농도는 제2채널(120)을 흐르는 산소 흡수제의 농도 조절을 통해 제어 가능하다. 제1주입구(121,122)에 주입되는 산소 흡수제의 유량과 제2주입구(121,122)에 주입되는 산소 흡수제의 유량을 각각 조절함으로써 제2채널(120)의 산소 흡수제 농도를 다양하게 조절할 수 있다.As described above, the dissolved oxygen concentration in the cell can be controlled by adjusting the concentration of the oxygen absorbent flowing through the second channel 120. By adjusting the flow rates of the oxygen absorbents injected into the first inlets 121 and 122 and the flow rates of the oxygen absorbers injected into the second inlets 121 and 122, the concentrations of the oxygen absorbents in the second channel 120 may be variously adjusted.

도 6을 참조하면 산소 흡수제의 농도를 0에서부터 0.5M로 증가시킴에 따라 세포 내 용존산소농도가 감소함을 알 수 있으며, 산소 흡수제의 농도 조절을 통해 세포 내 용존산소농도를 다양하게 구현할 수 있음을 알 수 있다. Referring to FIG. 6, it can be seen that the dissolved oxygen concentration in the cell decreases as the concentration of the oxygen absorbent increases from 0 to 0.5 M. Various concentrations of the dissolved oxygen concentration in the cell can be realized by adjusting the concentration of the oxygen absorbent. It can be seen.

이와 같이 본 발명의 세포 내 용존산소농도 제어장치를 이용하여 완벽한 저산소 조건 뿐 아니라 생체 내 산소 분압과 유사한 환경을 제공하는 등 세포 배양 환경 중에서 용존 산소를 원하는 대로 손쉽게 조절할 수 있다. As such, by using the intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus of the present invention, dissolved oxygen can be easily adjusted as desired in a cell culture environment such as providing a perfect hypoxic condition as well as an environment similar to oxygen partial pressure in vivo.

도 7은 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포 내 용존산소농도 제어장치의 사시도이고, 도 8은 도 7에 도시된 세포 내 용존산소농도 제어장치의 평단면도이다. 도 9는 도 8의 Ⅸ-Ⅸ 라인을 따르는 측단면도이다.FIG. 7 is a perspective view of an apparatus for controlling dissolved oxygen concentration in cells according to another embodiment of the present invention, and FIG. 8 is a plan sectional view of the apparatus for controlling dissolved oxygen concentration in cells shown in FIG. 7. 9 is a side cross-sectional view along the VIII-VIII line of FIG. 8.

본 실시예의 세포 내 용존산소농도 제어장치는 앞선 실시예와 마찬가지로 세포 배양을 위한 제1채널(210)과, 산소 흡수제가 흘려주기 위한 제2채널(221,222)과, 제1 및 제2채널(221,222) 사이에 배치되는 중간막(231,232)과, 제2채널(221,222)에 산소 흡수제를 공급하기 위한 산소 흡수제 공급부(241,242)를 포함하는 구성을 갖는다.In the present embodiment, the apparatus for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell includes the first channel 210 for cell culture, the second channel 221 and 222 for flowing oxygen absorbent, and the first and second channels 221 and 222 as in the previous embodiment. ) And an interlayer film 231, 232 disposed therebetween, and oxygen absorbent supply units 241, 242 for supplying an oxygen absorbent to the second channels 221, 222.

본 실시예의 세포 내 용존산소농도 제어장치는 신경 세포체를 배양하기 위한 구성을 예시하고 있다. 앞선 실시예의 경우 제2채널(120)이 제1채널(110)의 상측에 배치된 것을 예시하였으나, 본 실시예와 같이 제2채널(221,222)이 제1채널(210)의 하측에 배치된 구조도 가능하다.The intracellular dissolved oxygen concentration control apparatus of this embodiment illustrates a configuration for culturing neuronal cell bodies. In the above embodiment, the second channel 120 is disposed above the first channel 110, but the second channel 221 and 222 are disposed below the first channel 210 as in the present embodiment. It is also possible.

본 실시예에 따르면, 제1채널(210)은 신경 세포체의 배양을 위한 제1배양채널(211)과, 제1배양채널(211)에서 연장되는 마이크로 채널(212)과, 마이크로 채널(212)의 단부에 연결되는 제2배양채널(213)을 포함하는 구성을 갖는다. 마이크로 채널(212)은 신경 세포체에서 성장한 축색돌기가 통과하는 공간을 제공하며, 마이크로 채널(212)을 통과하여 제2배양채널(213)로 이동한 축색돌기는 제2배양채널(213)에서 배양된다.According to the present embodiment, the first channel 210 includes a first culture channel 211 for culturing neural cell bodies, a micro channel 212 extending from the first culture channel 211, and a micro channel 212. It has a configuration comprising a second culture channel 213 connected to the end of. The micro channel 212 provides a space through which axons grown in neural cell bodies pass, and the axons moved through the micro channel 212 to the second culture channel 213 are cultured in the second culture channel 213. do.

제1배양채널(211)의 양단에는 배지 주입 및 저장을 위한 저장소(214,215)가 형성되며, 제2배양채널(213)의 양단에도 배지 주입 및 저장을 위한 저장소(216,217)가 형성된다. 이들은 배지의 주입이 가능하도록 본체(200)의 표면까지 연장 형성된 구조를 갖는다.Reservoirs 214 and 215 are formed at both ends of the first culture channel 211, and reservoirs 216 and 217 are formed at both ends of the second culture channel 213. They have a structure extending to the surface of the main body 200 to enable the injection of the medium.

제2채널(221,222)은 한 쌍으로 구비되며, 이들은 제1 및 제2배양채널(211,212)의 하측에 형성된다. 제2채널(211)과 제1 및 제2배양채널(211,212)의 사이에는 중간막(231,232)이 각각 형성된다.The second channels 221 and 222 are provided in pairs, and they are formed under the first and second culture channels 211 and 212. Interlayers 231 and 232 are formed between the second channel 211 and the first and second culture channels 211 and 212, respectively.

이와 같은 구조와 달리 제2채널(221,222)이 제1배양채널(211) 및 제2배양채널(213)의 상측에 형성되는 것도 가능하다. 제2채널(221,222)은 산소 흡수제의 반응 면적을 증가시킬 수 있도록 반복적으로 절곡된 구조로 형성될 수 있다.Unlike the structure described above, the second channels 221 and 222 may be formed above the first culture channel 211 and the second culture channel 213. The second channels 221 and 222 may be formed in a repeatedly bent structure to increase the reaction area of the oxygen absorbent.

제2채널(221,222)의 일단에는 산소 흡수제의 주입을 위한 주입구(223,224)가 형성되고, 제2채널(221,222)의 타단에는 산소 흡수제의 배출을 위한 배출구(225,226)가 형성된다. 주입구(223,224)와 배출구(225,226)는 본체(200)의 표면까지 연장 형성된다.Inlets 223 and 224 are formed at one end of the second channels 221 and 222, and outlets 225 and 226 are formed at the other ends of the second channels 221 and 222. The inlets 223 and 224 and the outlets 225 and 226 extend to the surface of the main body 200.

본 실시예의 세포 내 용존산소농도 제어장치를 사용하면 신경 세포체 및 축색 돌기의 저산소 조건을 구현할 수 있으며, 이를 통해 신경 세포의 사멸 과정에 대한 관찰 및 연구가 가능하다.Using the intracellular dissolved oxygen concentration control device of the present embodiment can implement the hypoxic conditions of the neuronal cell body and axon projections, it is possible to observe and study the neuronal cell death process.

이상에서 설명한 세포 내 용존산소농도 제어장치는 저산소 조건으로부터 유발되는 병리학적 원인(뇌졸증에 의한 세포 사멸 및 암전이 현상)을 분석하는 연구에 활용 가능할 뿐 아니라 in vitro 시스템에서 생체 내 환경과 유사한 환경을 제공하여 각종 세포의 생장 및 분화를 촉진 할 수 있는 환경을 제공하여 줄기세포의 분화 및 생장, 신경세포의 분화 및 생장 등 많은 세포/조직 공학에 대한 연구에 활용 가능하다.The intracellular dissolved oxygen concentration control device described above can be utilized for the study of pathological causes (cell death and cancer metastasis due to stroke) caused by hypoxic conditions, as well as the environment similar to the in vivo environment in the in vitro system. By providing the environment to promote the growth and differentiation of various cells, it can be utilized for research on many cell / tissue engineering such as differentiation and growth of stem cells, differentiation and growth of neurons.

이상에서는 본 발명에 따른 저산소 조건의 구현을 위한 세포 내 용존산소농도 제어장치 및 이를 이용한 세포 내 용존산소농도 제어방법을 첨부한 도면들을 참조로 하여 설명하였으나,　본 발명은 본 명세서에 개시된 실시예와 도면에 의해 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술사상의 범위 내에서 당업자에 의해 다양한 변형이 이루어질 수 있다.In the above described with reference to the accompanying drawings, the apparatus for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell and the method for controlling the dissolved oxygen concentration in the cell using the same for the implementation of the hypoxic conditions according to the present invention, the present invention is the embodiment disclosed herein It is not limited by the drawings, various modifications can be made by those skilled in the art within the scope of the technical idea of the present invention.

Claims (12)

세포 배양을 위한 공간을 제공하는 제1채널;
상기 제1채널의 일측에 배치되는 제2채널;
상기 제1 및 제2채널의 사이에 배치되며, 상기 제1 및 제2채널의 사이를 산소의 통과가 가능하게 구획하는 중간막; 및
상기 제1채널의 세포 내 용존산소가 상기 중간막을 통해 상기 제2채널로 배출되도록 상기 제2채널에 산소 흡수제를 공급하는 산소 흡수제 공급부를 포함하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.A first channel providing space for cell culture;
A second channel disposed at one side of the first channel;
An interlayer disposed between the first and second channels and partitioning the oxygen between the first and second channels to allow passage of oxygen; And
And an oxygen absorber supply unit configured to supply an oxygen absorbent to the second channel so that the dissolved oxygen of the first channel is discharged to the second channel through the interlayer. 제1항에 있어서,
상기 제1 및 제2채널은 PDMS 재질의 본체 내에 레이어를 이루도록 형성되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 1,
And said first and second channels are formed to form a layer in the body of PDMS material. 제1항에 있어서,
상기 중간막은 PDMS 재질로 형성되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 1,
The interlayer membrane is dissolved oxygen concentration control device, characterized in that formed of PDMS material. 제1항에 있어서,
상기 제1채널의 양단에는 세포 배양을 위한 배지가 저장되는 제1 및 제2저장소가 각각 연결되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 1,
Intracellular dissolved oxygen concentration control device, characterized in that the first and second reservoirs for storing the medium for cell culture are connected to both ends of the first channel, respectively. 제1항에 있어서,
상기 제2채널의 양단에는 상기 산소 흡수제의 주입 및 배출을 위한 주입구와 배출구가 각각 연결되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치. The method of claim 1,
Intracellular dissolved oxygen concentration control device, characterized in that the inlet and outlet for the injection and discharge of the oxygen absorbent is connected to both ends of the second channel, respectively. 제5항에 있어서,
상기 주입구는 복수개로 형성되며, 상기 제2채널에 병렬로 연결되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 5,
The injection port is formed in plural, intracellular dissolved oxygen concentration control device, characterized in that connected in parallel to the second channel. 제6항에 있어서,
상기 산소 흡수제 공급부는 상기 각 주입구에 각각 연결되도록 복수개로 구비되며, 상기 각 주입구에 서로 다른 농도의 산소 흡수제를 공급하는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method according to claim 6,
The oxygen absorber supply unit is provided with a plurality to be connected to each of the inlet, respectively, and the dissolved oxygen concentration control device in the cell, characterized in that for supplying the oxygen absorbent of different concentrations. 제1항에 있어서,
상기 산소 흡수제는 아황산나트륨인 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 1,
The oxygen absorber in the cell dissolved oxygen concentration control device, characterized in that the sodium sulfite. 제1항에 있어서, 상기 제1채널은,
신경 세포체의 배양을 위한 제1배양채널;
상기 제1배양채널에서 연장되며, 상기 제1배양채널의 신경 세포체에서 성장한 축색돌기가 통과하는 공간을 제공하는 마이크로 채널; 및
상기 마이크로 채널의 단부에 연결되며, 상기 마이크로 채널의 축색돌기를 배양하기 위한 제2배양채널을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.The method of claim 1, wherein the first channel,
A first culture channel for culturing neuronal cell bodies;
A micro channel extending from the first culture channel and providing a space for passage of the axons grown in the neural cell body of the first culture channel; And
Intracellular dissolved oxygen concentration control device, characterized in that connected to the end of the micro-channel, comprising a second culture channel for culturing the axon projection of the micro-channel. 제9항에 있어서,
상기 제2채널은 제1 및 제2배양채널의 상부 또는 하부에 각각 한 쌍으로 형성되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존산소농도 제어장치.10. The method of claim 9,
The second channel is a cell dissolved oxygen concentration control device, characterized in that formed in the upper and lower portions of the first and second culture channel in pairs, respectively. 제1항을 따르는 세포 내 용존 산소 제어장치를 이용한 세포 내 용존 산소 제어방법에 있어서,
상기 제1채널 내에 세포를 배양시키는 단계; 및
상기 산소 흡수제 공급부의 작동을 통해 상기 제2채널에 산소 흡수제를 공급하여 상기 제1채널의 산소 분압을 감소시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존 산소 제어방법.In the intracellular dissolved oxygen control method using the intracellular dissolved oxygen control device according to claim 1,
Culturing the cells in the first channel; And
And supplying an oxygen absorbent to the second channel through the operation of the oxygen absorber supply unit to reduce the oxygen partial pressure of the first channel. 제11항에 있어서,
상기 세포 내의 용존산소농도는 상기 산소 흡수제의 농도 조절을 통해 제어되는 것을 특징으로 하는 세포 내 용존 산소 제어방법.12. The method of claim 11,
Dissolved oxygen concentration in the cell is a method of controlling dissolved oxygen in a cell, characterized in that controlled by adjusting the concentration of the oxygen absorbent.
KR1020120015365A 2012-02-15 2012-02-15 Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture KR101294521B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120015365A KR101294521B1 (en) 2012-02-15 2012-02-15 Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120015365A KR101294521B1 (en) 2012-02-15 2012-02-15 Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101294521B1 true KR101294521B1 (en) 2013-08-07

Family

ID=49220117

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120015365A KR101294521B1 (en) 2012-02-15 2012-02-15 Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101294521B1 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101575085B1 (en) * 2013-10-28 2015-12-08 인하대학교 산학협력단 Microfludic chip, reproducing method of ischemia reperfusion injury and ischemia reperfusion injury immunoassay system using the same
KR20160000529A (en) 2014-06-24 2016-01-05 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 Hypoxia cell culture device comprising a lid for various gas concentration
KR20200019021A (en) * 2018-08-13 2020-02-21 광주과학기술원 Cell culture apparatus and cell culture system using the same
EP3978596A1 (en) 2020-10-02 2022-04-06 Sorbonne Universite Device for providing a liquid medium with a controlled flow rate and with a controlled dissolved gas concentration
KR20230109008A (en) * 2022-01-12 2023-07-19 경희대학교 산학협력단 Microfluidic chip possible of mimicking hypoxia

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03111873U (en) * 1990-02-28 1991-11-15
JP3111873U (en) 2004-09-21 2005-07-28 盧 朝輝 Plant algae / microorganism photosynthesis reactor
KR100799988B1 (en) 2006-11-30 2008-01-31 연세대학교 산학협력단 The bio-reactor which exerts various mechanical stimula for nurturing of stem cell and the method of nuturing of stem cell which uses it
KR20110087403A (en) * 2010-01-26 2011-08-03 인하대학교 산학협력단 Compartmental culture method of primary neurons using embryonic stem cell
JP2012100547A (en) 2010-11-08 2012-05-31 Daicel Corp Method and apparatus for producing organic matter by feeding gas resource to anaerobic microorganism

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03111873U (en) * 1990-02-28 1991-11-15
JP3111873U (en) 2004-09-21 2005-07-28 盧 朝輝 Plant algae / microorganism photosynthesis reactor
KR100799988B1 (en) 2006-11-30 2008-01-31 연세대학교 산학협력단 The bio-reactor which exerts various mechanical stimula for nurturing of stem cell and the method of nuturing of stem cell which uses it
KR20110087403A (en) * 2010-01-26 2011-08-03 인하대학교 산학협력단 Compartmental culture method of primary neurons using embryonic stem cell
JP2012100547A (en) 2010-11-08 2012-05-31 Daicel Corp Method and apparatus for producing organic matter by feeding gas resource to anaerobic microorganism

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101575085B1 (en) * 2013-10-28 2015-12-08 인하대학교 산학협력단 Microfludic chip, reproducing method of ischemia reperfusion injury and ischemia reperfusion injury immunoassay system using the same
KR20160000529A (en) 2014-06-24 2016-01-05 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 Hypoxia cell culture device comprising a lid for various gas concentration
KR20200019021A (en) * 2018-08-13 2020-02-21 광주과학기술원 Cell culture apparatus and cell culture system using the same
KR102127469B1 (en) * 2018-08-13 2020-06-26 광주과학기술원 Cell culture apparatus and cell culture system using the same
EP3978596A1 (en) 2020-10-02 2022-04-06 Sorbonne Universite Device for providing a liquid medium with a controlled flow rate and with a controlled dissolved gas concentration
WO2022069662A1 (en) 2020-10-02 2022-04-07 Sorbonne Universite Device for providing a liquid medium with a controlled flow rate and with a controlled dissolved gas concentration
KR20230109008A (en) * 2022-01-12 2023-07-19 경희대학교 산학협력단 Microfluidic chip possible of mimicking hypoxia
KR102677415B1 (en) * 2022-01-12 2024-06-21 경희대학교 산학협력단 Microfluidic chip possible of mimicking hypoxia

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101294521B1 (en) Oxygen concentration controlling device and method for generating hypoxic condition for microfluidic based tissue culture
EP2784151B1 (en) Cell culture device, cell culture system and cell culture method
US7976286B2 (en) Method and apparatus for pumping liquids using directional growth and elimination bubbles
US9962698B2 (en) Removing bubbles in microfluidic systems
US11141708B2 (en) Cell culture apparatus and cell culture method
Yazdi et al. Adding the ‘heart’to hanging drop networks for microphysiological multi-tissue experiments
KR20070011068A (en) Culture chamber, culture apparatus and liquid supplying method for cell or tissue cultivation
WO2017154880A1 (en) Cell culture device and cell culture method
US20070231901A1 (en) Microfluidic cell culture media
JP6823793B2 (en) Cell culture device and cell culture method
US11898129B2 (en) Microfluidic pressure regulator for robust hydrogel loading without bursting
RU2011139195A (en) SYSTEM AND METHOD FOR AUTOMATIC FORMATION OF LIQUID MIXTURES AND WORK WITH THEM
US20230174919A1 (en) Method for gas enrichment and simultaneously for displacement of a fluid, and system for controlling the cell environment on a corresponding multi-well cell culture plate
JP4381670B2 (en) Reactor
JP6366226B2 (en) Microchip reactor
KR102684875B1 (en) Modular microfluidic chip with individual flow rate control and oxygen concentration control
US20220220428A1 (en) Incubation system
CN116234618B (en) Liquid-liquid extraction device
JP2007300868A (en) Method for discharging liquid into cell and microinjection apparatus
KR20200050022A (en) Vacuum Cell Cultivation Apparatus
CN113117767B (en) Bubble dissolving unit for microfluid
US11207894B2 (en) Bubblers to provide sequential fluid flow
JP2011025127A (en) Microdevice
WO2022249400A1 (en) Soil microorganism observation device
JP2007177769A (en) Micropump device

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160325

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170724

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190801

Year of fee payment: 7