KR101136976B1

KR101136976B1 - 티아넵틴 또는 그의 염을 포함하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물

Info

Publication number: KR101136976B1
Application number: KR1020110089915A
Authority: KR
Inventors: 박소라; 서성기; 이마세
Original assignee: 건일제약 주식회사
Priority date: 2011-09-06
Filing date: 2011-09-06
Publication date: 2012-05-30
Also published as: WO2013035997A3; WO2013035997A2; WO2013035997A9

Abstract

본 발명은 티아넵틴 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

Description

티아넵틴 또는 그의 염을 포함하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물{Pharmaceutical composition for preventing or treating alopecia comprising tianeptine or its salt}

본 발명은 티아넵틴 또는 그의 염의 신규 약학적 용도에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 티아넵틴 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

티아넵틴(tianeptine) 또는 그의 염(예를 들어, 나트륨염)은 선택적 세로토닌 재흡수 촉진제(Selective serotonin reuptake enhancer, SSRE)로 알려진 약물로서, 티아넵틴의 화학명은 7-(3-클로로-6-메틸-6,11-디하이드로디벤조[c,f][1,2]티아제핀-11-일아미노)헵타노익 에시드 S,S-디옥사이드이며, 하기 화학식 1의 구조를 갖는다.

<화학식 1>

티아넵틴 또는 그의 염은 다양한 형태의 우울증, 예를 들어 내인성, 신경반응성, 위장관장애와 같은 육체적, 정신적 증상을 가진 불안성 우울증, 알콜중독의 모든 상태와 금단시의 불안성 우울증의 치료제로서 개발된 약물이다 (미국특허 제3,758,528호 등).

항우울제로서의 활성 이외에도, 티아넵틴 또는 그의 염은 신경퇴행성 질환의 치료활성을 갖는다는 것이 보고된 바 있으며(국제특허공개 제WO 2000/59511호), 또한 어린이에서 천식 증상을 억제하는 활성을 갖는다는 것이 보고된 바 있으며(Lechin F et al., October 1998, Journal of Clinical Pharmacology 38 (10): 918-925). 또한, 티아넵틴 또는 그의 염은 우울증 및 발기부전 환자에 대한 효능(El-Shafey H, et al., September 2006, The Journal of Sexual Medicine 3 (5): 910-917), 항경련 및 진통 효능(Uzbay TI, May 2008, Progress in Neuro -psychopharmacology & Biological Psychiatry 32 (4): 915-924)을 갖는다고 보고된 바 있으며, 기타 파킨슨 질환(Levin OS, May 2007, Neuroscience and Behavioral Physiology 37 (4): 419-424)에도 효능이 있음이 보고되고 있다.

탈모증은 원형 탈모증, 전두 탈모증, 전신 탈모증 등으로 분류된다. 원형 탈모증은 하나 또는 두, 세 개의 원형 또는 난원형의 탈모반이 갑자기 발생하는데 보통 두피에 나타난다. 두피 이외에 수염, 눈썹, 속눈썹 기타 부위에서도 나타날 수 있다. 무증상이며 가끔 진행성으로 되어 서로 융합되어 확대되기도 한다. 자연적인 치유, 재발이 흔하다. 두피 전체를 침범하면 전두 탈모증, 신체 전부를 침범하면 전신 탈모증으로 칭해진다(대한의사협회지 제 42권 제 7호 682쪽).

원형 탈모증 등의 탈모증의 발병 기전은 아직 명확히 밝혀져 있지 않으며, 다양한 기전이 존재하는 것으로 추정되고 있다. 탈모증의 치료를 위하여 스테로이드의 국소 도포, 스테로이드의 병변내 주입, 스테로이드 전신 요법, 전신 면역억제제 치료 등이 행해지고 있고, 이 밖에도 디니트로클로로벤젠(dinitrochlorobenzene), 디페닐시클로프로페논(diphenylcyclopropenone) 등을 이용한 국소 면역요법, 미녹시딜(minoxidil), 광선치료 등이 사용되고 있으나(대한피부과학회지: 제 46권 제 4호 2008년), 아직 만족스러운 수준에는 이르지 못하고 있다. 예를 들어, 종래의 치료방법은 고통 및 부작용이 심하여 치료를 중도에 포기하는 환자들이 많으며, 스테로이드 병변내 주입이나 DPCP, 광선치료 등의 경우 주기적으로 자주 내원해야한다는 불편함도 있다. 또한, 스테로이드 병변내 주입방법의 경우 조직 위축, 탈색, 무균성 농양 형성, 월경의 불규칙, 부신 억제 등의 부작용이 보고되고 있으며, 스테로이드 전신치료제의 경우에도 자반증, 부종, 여드름 모양 발진, 색소침착, 소화성 궤양, 골연화 등의 심각한 부작용이 보고되고 있다. 사이클로스포린(Cyclosporin)과 같은 면역억제제의 경우 고가이며, 신장 외에 여러 장기에 대한 부작용의 발생을 고려해야 한다(대한의사협회지 제42권 제 7호, 686-687쪽).

본 발명자들은 탈모증의 예방 및 치료 활성을 갖는 물질을 다양하게 검색하던 중, 놀랍게도 주로 항우울제로 사용되는 티아넵틴 또는 그의 염이 모발 성장 및 굵기를 개선하고, 모낭 내 세포사멸을 억제함으로써 탈모증의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 발견하였다.

따라서, 본 발명은 티아넵틴 또는 그의 염을 유효성분으로 포함하는, 탈모증의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 일 태양에 따라, 티아넵틴 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물이 제공된다.

상기 탈모증은 바람직하게는 원형 탈모증일 수 있다. 상기 약학 조성물은 경구투여용인 것이 바람직하며, 예를 들어 정제 또는 캅셀제 형태의 경구용 고형 제형(oral solid dosage form)을 갖는 것이 바람직하다. 또한, 상기 경구용 고형 제형은 20 ～ 75 mg/day의 용량으로 경구투여되기에 적합한 함량의 티아넵틴 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 함유할 수 있다.

본 발명에 의해, 항우울제로 사용되는 티아넵틴 또는 그의 염이 모발 성장 및 굵기를 개선하고, 모낭 내 세포사멸을 억제한다는 것이 밝혀졌다. 따라서, 본 발명에 따른 약학 조성물은 원형 탈모증 등의 탈모증의 예방 및 치료에 유용하게 적용될 수 있다.

도 1a 및 도 1b는 각각 Folliscope 및 Dermoscope를 이용하여 각 시험군 마우스의 모발 성장을 육안적으로 평가한 결과이다.
도 2는 헤마톡실린 및 에오신 염색을 통하여 각 시험군 마우스 조직의 조직의 모낭 주기를 측정한 결과이다.
도 3은 TUNEL 염색을 통하여 각 시험군 마우스의 모낭 내 세포사멸 과정을 측정한 결과이다.

상기 탈모증은 원형 탈모증, 전두 탈모증, 전신 탈모증 등의 모든 형태의 탈모증을 포함하며, 바람직하게는 원형 탈모증일 수 있다.

본 발명에 의해 주로 항우울제로 사용되는 티아넵틴 또는 그의 염이 모발 성장 및 굵기를 개선하고, 모낭 내 세포사멸을 억제한다는 것이 밝혀졌다. 상기 티아넵틴의 약학적으로 허용가능한 염은 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 마그네슘염, 리튬염, 스트론튬염 등을 포함한 다양한 염의 형태일 수 있다. 바람직하게는, 티아넵틴의 나트륨염 형태일 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있으며, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 제형(dasage form)으로 제제화될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 약학 조성물은 경구 투여용 형태일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 정제 또는 캅셀제 형태의 고형 경구용 제형(dosage form)을 가질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학 조성물은 상업적으로 시판되는 티아넵틴 나트륨염-함유 정제[예를 들어, 스타브론정(제일약품)]의 형태일 수 있다.

상기 약제학적으로 허용가능한 담체는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오즈, 메틸 셀룰로오즈, 미결정 셀룰로오즈, 히드록시프로필셀룰로오스, 저치환도히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메칠셀룰로오즈2910, 폴리에틸렌글리콜 6000, 폴리비닐 피롤리돈, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 산화티탄, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한다. 또한, 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 포함한다. 경구용 고형 제제는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 포함할 수 있으며, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제 등을 포함할 수 있다. 구체적으로는, 본 발명의 약학 조성물은, 유효성분으로 티아넵틴 또는 그의 염을 포함하고, 담체(혹은 코팅물질 등을 포함한 첨가제)로서 만니톨, 옥수수 전분, 마그네슘 스테아레이트, 에틸 셀룰로오스, 글리세롤 올레이트, 폴리비돈, 소듐 카복시메틸 셀룰로오스, 실리카, 탈크, 티타늄 다이옥사이드, 바이카보네이트 오브 소다(중탄산나트륨), 왁스, 수크로스, 폴리소르베이트 등을 포함하는 정제 형태일 수 있다. 경구용 액상 제제는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등을 포함하며, 물, 생리 식염수, 리퀴드 파라핀 등의 희석제, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다. 비경구용 제제는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제를 포함하며, 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르류 등을 포함한다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 약학조성물에 함유되는 티아넵틴 또는 그의 염의 투여량은 탈모증 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들면, 상기 티아넵틴 또는 그의 염은 1일 10～150 mg, 바람직하게는 20～75 mg의 용량으로 경구투여할 수 있다. 따라서, 본 발명의 약학조성물, 바람직하게는 경구용 고형 제형 형태의 약학 조성물은 10～150 mg/day, 바람직하게는 20 ～ 75 mg/day의 용량으로 경구투여되기에 적합한 함량의 티아넵틴 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 함유할 수 있다. 각각의 단위 투여 형태는 하루에 한번 또는 수회 나누어(예를 들어, 12.5 mg 정제를 2 내지 3회) 투여하는데 적합하도록 제제화될 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예. 티아넵틴의 경구투여시 탈모증 예방 및 치료 효능 평가

공지의 방법(박원석, 허용철, Journal of Applied Micromagnetic Energy, 2004, Vol. 2, No. 1, pp 1-6)에 따른 탈모 마우스 모델을 사용하여, 탈모증에 대한 티아넵틴의 예방 및 치료활성을 평가하였다.

(1) 약물 투여

6～8주령의 휴지기 모낭 주기를 갖는 C57BL/6 J 마우스를 시험동물로 사용하였다. 시험군 및 대조군은 총 4군으로 나누어, 대조군 2군, 실험군 2군으로 구성하였다. 대조군 1은 총 22일 동안 생리식염수만 경구투여하고, 15일째 하루 동안 초음파 처리하였으며, 대조군 2는 총 22일 동안 생리식염수 경구투여를 하였고, 초음파 처리는 하지 않았다. 실험군 1은 티아넵틴 나트륨염을 14일간 경구투여하고, 초음파 처리한 후, 7일간 티아넵틴 나트륨염을 경구투여 하였다. 실험군 2는 14일간 생리식염수를 경구투여하고, 초음파 처리한 후, 7일간 티아넵틴 나트륨염을 경구투여 하였다. 상기 초음파 처리는 초음파 해충퇴치기를 사용하여 24시간 동안 300Hz의 주파수 영역에서 10초 정도의 시간을 두고 간헐적으로 적용함으로써 수행하였다. 약물은 아침, 저녁으로 5mg/kg 용량으로, 티아넵틴 나트륨염을 생리식염수에 용해시켜, 각각 경구투여하였다. 약물 및 식염수의 총 투여기간은 22일로 동일하게 하였다.

(2) 육안적 평가: Folliscope 및 Dermoscope를 이용한 모발 성장 확인

22일 경과 후 Folliscope 및 Dermoscope를 사용하여 모발의 성장을 관찰한 결과는 각각 도 1a 및 도 1b와 같다. 도 1a 및 도 1b의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 모발의 굵기와 성장은 대조군 2 > 실험군 1 > 실험군 2 > 대조군 1의 순이었다. 대조군 2와 실험군 1은 정상적인 모발 굵기가 관찰되었으며, 실험군 2에서는 1X1 cm 크기의 다수의 탈모 반이 관찰되었으나 연모(vellus hair)들이 대부분 재성장하고 있음을 확인할 수 있다. 대조군 1의 경우, 탈모반의 크기도 가장 넓고 수도 많았으며, 연모들이 전체 탈모반의 50% 미만에서만 관찰되었다.

(2) 조직의 모낭 주기 확인: 헤마톡실린 및 에오신 염색

시험 21일째에 시료도포 부위를 적출한 후 10% 포르말린 완충액을 사용하여 12시간 실온에 고정하였다. 물을 이용하여 4시간 수세하여 고정액의 주성분과 포르말린 절편을 제거하였다. 그 다음 70%, 95%, 100% 에탄올 순으로 각각 45분씩 방치해두면서 수분을 제거하였다. 자일렌에 30분을 담구어 세척 작업을 수행한 뒤, 60℃ 오븐에서 액체 파라핀 용기에 조직을 넣고 기포를 제거한 후에 약 1시간 정도 넣어두었다. 몰드에 원하는 섹션 부위가 바닥을 향하게 심고 4℃ 냉각판에 놓고 냉각시켰다. 파라핀에 포매한 후 마이크로톰을 이용하여 제작한 파라핀 조직 절편을 박절하였다. 그 후 50% 알코올을 묻힌 슬라이드 글라스에 올려 43℃의 부유 온수조에 띄워 파라핀 절편의 주름을 펴고, 파라핀 절편의 주름을 펴준 뒤 실온에서 잘 말려주었다. 말린 슬라이드 글라스를 60℃ 오븐에 넣어 하루 정도 탈파라핀을 행하였고, 꺼내어 실온으로 식힌 후 자일렌에 5분 정도 2회 넣어주었다. 그 뒤 100%, 95%, 70% 에탄올 순으로 각각 2분씩 수세한 후 헤마톡실린 및 에오신 염색(Hematoxylin & Eosin 염색, H&E 염색)을 하였으며, 그 결과는 도 2와 같다. 도 2의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 실험군 1과 대조군 2는 정상적인 성장기 모낭(anagen hair follicle) 및 모발 성장 과정(hair elongation process)이 관찰되었다. 이에 반하여, 실험군 2와 대조군 1은 성장기 모낭의 수가 적고, 휴지가 모낭(telogen hair follicle)이 더 많았으며, 대조군 1의 경우 모낭 주변으로 림프구의 경미한 침윤(perifollicular lymphocytic infiltration)이 관찰되었다. 모낭의 위치는 진피 심부에서 피하지방층에 위치하여야 굵은 털로 성장할 수 있으나, 이러한 모발 성장 과정(hair elongation process)은 대조군 1에서 가장 저해되어 있었다.

(3) 모낭 내 세포사멸 과정 확인: TUNEL 염색

자일렌에서 5분간 인큐베이션을 3번 수행하고, 자일렌과 에탄올 비율을 1:1로 한 용액에서 3분간 인큐베이션을 수행해 주었다. 95%, 90%, 80%, 70% 에탄올 순으로 각각 5분씩 인큐베이션을 수행한 뒤. 3차 증류수에서 5분간 인큐베이션을 수행하였다. 10Mm pH 7.4인 Tris/HCl용액과 Pretenase K 20ug/ml의 혼합액을 조직에 떨어뜨리고 15분간 인큐베이션 해주었다. PBS 버퍼로 3분간 2번씩 세척을 수행하여 슬라이드를 완전히 말려주었다. 음성대조군의 경우에는 라벨 용액 50ul를 이용하여 37℃에서 60분간 인큐베이션하였고, 양성대조군의 경우 DNase 1(150U/ml)을 이용하여 10분간 인큐베이션하였다. 실험군의 조직의 경우 라벨 용액과 효소를 합친 혼합액을 조직당 50ul씩 떨어뜨리고, 37℃에서 60분간 인큐베이션 해주었다. PBS 버퍼에서 3분간 세척을 수행한 뒤, DAPI와 함께 mounting solution을 사용하여 처리해주는 과정으로 TUNEL염색을 수행하였으며, 형광현미경으로 분석하여 얻은 결과는 도 3과 같다. 도 3의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 대조군 1에서 세포사멸 현상이 많이 나타남에 반해, 티아넵틴을 처리한 실험군 1과 실험군 2에서는 세포사멸 현상이 유의성 있게 감소하였으며, 실험군 2보다는 실험군 1에서 세포사멸 현상이 더욱 크게 감소하였다.

(4) 고찰

초음파 처리한 대조군 1과 비교하여 티아넵틴을 투여한 실험군에서 육안평가(Foliscope, Dermoscope)를 통하여 모발성장 및 굵기개선 효과를 확인할 수 있었으며, H&E 염색을 통하여 퇴행기 억제효과를 확인할 수 있었다. 또한, TUNEL 염색 분석을 통하여 모낭 내 세포사멸이 억제됨을 확인할 수 있었다. 아직 구체적인 약리학적 작용기전은 명백히 밝혀지지 않았으나, 티아넵틴 또는 그의 염은 모발성장 및 굵기를 개선하고, 모낭의 퇴행기 억제 및 모낭의 사멸현상을 억제함으로써, 탈모증의 예방 및 치료에 유용하게 적용될 수 있을 것으로 판단된다.

Claims

하기 화학식 1의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 탈모증의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
<화학식 1>
제1항에 있어서, 상기 탈모증이 원형 탈모증인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제1항에 있어서, 상기 약학 조성물이 경구투여용임을 특징으로 하는 약학 조성물.
제3항에 있어서, 상기 약학 조성물이 정제 또는 캅셀제 형태의 경구용 고형 제형(oral solid dosage form)을 갖는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
제4항에 있어서, 상기 경구용 고형 제형이 20 ～ 75 mg/day의 용량으로 경구투여되기에 적합한 함량의 화학식 1의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.