KR100279341B1 - 항악성종양제 독소루비신의 안정한 주사액 및 그 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항악성종양제인 독소루비신의 안정한 정맥 주사용 용액 및 그 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 의한 주사액은 독소루비신의 생리학적으로 허용되는 염을 생리학적으로 허용되는 용매에 용해시키고 당류로 10-50%의 덱스트로스(Dextrose), 프락토스(Fructose), 이노시톨(Inositol); 아미노산으로 타우린(Taurine), L-라이신 염산염(L-Lycine HCl), 비타민류로 티아민 염산염(Thiamine HCl), 티아민 질산염(Thiamine HNO₃)에서 선택된 1종 이상의 안정화제 및 경우에 따라서 등장화제, 방부제, 산화방지제 등의 생리학적으로 허용되는 동상의 첨가제를 첨가하고, 필요에 따라서 질소를 써서 조제액중 또는 조제액 상부의 산소 및 공기를 대체하여 제조된 밀봉, 포장된 주사액이다.

본 발명은 저장안정성이 있고 상업적으로 의의가 있는 독소루비신의 안정한 주사액을 제공한다.

Description

항악성종양제 독소루비신의 안정한 주사액 및 그 제조방법

본 발명은 항악성종양제인 독소루비신의 안정한 정맥 주사용 용액의 제조방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 밀봉용기 내에 상기 언급한 주사용 용액을 제공하여 즉시 사용 가능한 독소루비신 용액을 제공하고 이 용액을 사용하여 종양을 치료하는 방법도 본 발명에 포함된다.

독소루비신은 스트텝토마이세스 패우세티우스 바르.카에시우스(Streptomyces Peucetius var.caesius)의 배양액으로부터 분리되거나, 다우노루비신(Daunorubicin)으로부터 합성에 의해 생산되는 항악성종양제이다. 독소루비신은 DNA의 이중염기사슬에 끼어들어가 DNA와 RNA의 합성을 저지함으로써 약리작용을 나타낸다. 또한 독소루비신은 광범위의 악성종양에 유효하여 가장 일반적으로 사용되는 항암제의 하나이다.

그러나, 독소루비신은 액중에서 안정성이 열악하여 투여 직전에 재구성하여 투여하는 동결건조품 제형의 동시 용해형 바이알(vial)로 시판되어 왔다. 동결건조품인 독소루비신의 또다른 문제점을 이러한 제제의 제조 및 제조제시에 관련된 사람들, 특히 실제 치료활동에 있어 이를 조작하는 의료요원에게는 동결건조 독소루비신의 재구성에 있어서 항암성 물질에 기인한 위해를 줄 수 있다. 또 재구성시 주입되는 용매의 양이 의료요원 개인마다 상이함으로 해서 발생되는 용액의 농도의 차이 및 이로 인한 투여량의 개인차가 있을 수 있으며, 재구성시 진탕에 의해 발생된 기포가 주사기 내로 함입될 수 있는 가능성이 있다. 따라서 이와 같이 독소루비신을 액제로 제공하면 재구성시에 항암물질에 의한 독성감소, 농도의 균일성, 사용의 편리성 등 여러 가지 잇점이 있겠으나 종래에는 사용된 예가 거의 없었다. 이는 이 약이 수용액 상태에서는 매우 열악한 안정성을 갖기 때문이다.

재구성된 독소루비신 용액은 실온에서 24시간, 냉장에서는 48시간 밖에 안정하지 않고, 호프만(Hoffman) 등은 Am. J. Hosp. Pharm. 36; 1536-1538 (1979)에서 4℃에서 재구성된 독소루비신을 보관시 1개월에 1.5%, 6개월에 10.5%의 안정성 저하를 가져온다고 하였으며 이는 시판용 제제로는 부적합하다.

팜이탈리아(Pharmitalia) 국내특허공고 92-1773의 안트라사이클린 글리코사이드 주사용 용액의 제조방법에 의하면, 안트라사이클린 글리코사이드의 생리학적으로 허용되는 염에 수성용매로서 물, 생리식염수를 사용하고 가용화보조제로는 지방족아미드로 NN-디메틸아세트아미드, 그외 프로필렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 프로필렌글리콜 400, 에탄올을 사용하고 염산을 사용 pH 2.5-5.0으로 조절하여 안트라사이클린 주사용 용액을 용액의 제조방법에서는 안트라사이클린 글리코사이드의 생리적으로 허용되는 염에 유기산으로 포메이트, 아세테이트, 가용화보조제로서 티오글리세롤, 1-5%의 당류로는 멕스트로스, 갈락토스, 프락토스, 퓨코스, 덱스트란, 사이클록덱스트란, 만니톨, 소르비톨, 이노시톨 및 에탄올을 물과 함께 사용하고, 염산을 사용 pH 2.5-4.0으로 조절하여 주사용 용액을 제조하였다. 또한, 브리스톨-마이어즈 스퀴브의 국내특허 제 54,380에 의하면, 독소루비신 염산염에 유기산으로 시트레이를 사용, pH를 3-4로 조절하고 항산화제인 알파-토코페롤, 나트륨 포름알데히드비설페이트 및 3차 부틸하이드로퀴논을 사용, 주사용 용액의 안정성을 증가시켰음을 알 수 있다. 또한 브리스톱-마이어즈 스퀴브의 국내특허 공고 92-1460에 의하면, 독소루비신 염산염에 아세톤, 아황산나트륨을 첨가하여 pH 5-6에서 안정한 주사용 용액을 제조함을 알 수 있다.

이에 본 발명은 동결건조 형태가 아닌 독소루비신 염산염을 생리적으로 허용되는 용매에 용해시키고 본 발명에서 발견한 안정제를 1종 또는 그 이상을 첨가함을 특징으로 하며, 생리적으로 허용되는 산 또는 완충액을 가하여 pH를 2.5-5.0 범위로 조절한 후 발열성 물질을 함유하지 않는 멸균 독소루비신 용액을 제조하는 방법에 관한 것이다.

즉 본 발명의 목적은 종래의 기술에서 보고되지 않았던 새로운 방법을 이용하여 4℃에서 적어도 2년간, 실온에서는 적어도 1개월간 안정한 독소루비신 용액을 만드는 것으로, 즉 저장안정성이 있고 상업적으로 의의가 있는 용액을 제공하는 것이다.

현재, 당류에 의한 독소루비신의 안정성은 주로 등장화제인 용매를 사용하고 있다. Am. J. Hosp. Pharm. 38: 483-486, (1981)에서는 5% 덱스트로스를 사용하였으며, 팜이탈리아 국내특허공개 88-70861에서는 5% 농도의 덱스트로스, 프락토스, 이노시톨 등을 사용한 독소루비신 안정성을 기술하고 있다. 그러나, 당을 사용하여 주사용 용액을 조제할 때, 등장액으로 조제하는 것은 일반적인 기술이다. 따라서, 일반적인 등장액 농도인 약 5%보다 월등히 높은 당농도 10-50%에 대한 당농도의 안정성을 기술한 자료가 없으며, 10-50%의 당류를 사용한 고장액인 독소루비신 수용액인 경우, 정맥 투여를 할 때 5% 포도당 용액을 사용하여 정맥 수족관내에 투여시 10배 정도로 희석(침투압비 0.9)되므로 사용시 문제는 없다. 참고로 시중에 시판되고 있는 LVP 제제는 침투압비는 1-4이다. 또한 본 발명에 사용한 아미노산 및 비타민은 일반적으로 사용되고 있으며 손쉽게 구할 수 있고, 화학구조에 있어서 산성기를 갖고 있는 화합물을 선택하여 실험을 실시하였다.

본 발명에 의하면 지방족 아미드류, 당류, 아미노산류, 비타민류로부터 선택되는 안정화제 및 생화학적으로 허용되는 용매, 특히 물을 함유하는 것을 특징으로 하는 비경구투여에 적절한 밀봉용기중의 안정한 멸균된, 발열성 물질을 함유하지 않는 정맥주사용으로 즉시 사용가능한 독소루비신 수용액(농도 0.1-10mg/ml)이 제공된다. 본 발명의 독소루비신 용액의 제조에 사용될 수 있는 안정제의 예는 다음과 같다.

지방족아미드류, 예를 들어 모노에틸 아세트아미드(Monoethyl acetamide), 당류로는 10-50%의 덱스트토스, 프락토스 및 이노시톨올, 아미노산으로는 타우린(Taurine) 및 라이신(Lycine), 비타민류로는 티아민 염산염(Thiamine HCl), 티아민 질산염(Thiamine HNO₃)을 물 또는 생리식염수와 함게 사용하여 pH를 2.5-4.0으로 조절하는 것을 특징으로 하는 비경구투여에 적절한 밀봉 용기중의 멸균원, 발열성 물질을 함유하지 않는 정맥 투여용으로 즉시 사용가능한 독소루비신 수용액(농도 0.1-1.0mg/ml)을 제공한다.

하기 실시예는 본 발명을 설명하는 것이며, 본 발명의 조성물 및 비율을 제한하려는 것은 아니다.

실험예에서 독소루비신 액제주사액에 대한 안정성시험은 다음과 같은 실험 조건하에서 고성능 액체 크로마토그라피(HPLC)의 방법을 사용하였다.

분석법

이런 조건하에서 독소루비신 피크는 5분대를 나타내며, 수득한 결과는 실시예에 따라 표에 기록하였다.

본 발명은 또한 저장안정한 멸균된 발열성물질 미함유의 독소루비신 주사용액의 제조 방법도 제공한다. 그 방법은

1) 독소루비신의 생리학적으로 사용가능한 염을 생리학적으로 사용가능한 용매에 용해시키고,

2) 경우에 따라서 가용화보조제, 안정화제, 방부제, 산화 방지제로 부터 선택된 조제보조제의 1종 또는 그 이상을 첨가하고,

3) 본 발명에 의한 안정화제를 첨가하고,

4) 본 제조공정중에 필요에 따라서 질소를 써서 조제액중 또는 조제 탱크의 산소 및 공기를 대체하고,

5) 밀봉포장된 주사액

[실시예 1]

[용매 및 용기상부(head space)의 치환여부에 따른 안정성]

(+; 치환완료, -; 비치환)

염산독소루비신 10g을 약 90% 분량의 용매에 완전히 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 0.9% NaCl 또는 주사용증류수(WFI)를 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산 독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기(membrane filter)를 통해 여과한후 10ml 바이알(vial)에 7ml씩 충진시킨 후 용기상부(head space)를 질소 또는 이산화탄소로 치환한다. 치환 완료후 테플론(teflon) 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑(Aluminium cap)으로 밀봉한다. 각각의 시료(sample)를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, 역가의 잔존율의 %는 조제시의 농도를 100%로 환산하여 기록하였고 또한 pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 1에 나타내었다.

[표 1]

[실시예 2]

[비타민 B₁군에 의한 안정성 영양]

염산독소루비신 10g을 약 90% 분량의 용매에 완전히 용해시킨후 상기에 언급한 비타민의 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 0.9% NaCl용액을 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산 독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기(membrane filter)을 통해 여과한 후 10ml 바이알(vial)에 7ml씩 충전시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, 역가의 잔존율 %는 조제시의 농도를 100%로 환산하여 기록하였으며 pH 및 외관성상을 기록하였다. 결과는 표 2에 나타내었다.

[표 2]

[실시예 3]

[당류에 의한 안정성]

염산독소루비신 10g을 일정량의 용매에 완전히 용해시킨 후 상기에 언급한 당류의 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 주사용증류수(WFI)를 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기를 통해 여과한후 10ml 바이알에 7ml씩 충전시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, 역가의 잔존율 %는 조제시의 농도를 100%로 환산하여 기록하였고, pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 3에 나타내었다.

[표 3]

[표 3a]

[실시예 4]

[당류와 용기상부 치환에 의한 안정성의 영향]

염산독소루비신 10g을 일정량의 용매에 완전히 용해시킨 후 상기에 언급한 당류의 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 주사용증류수(WFI)를 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기를 통해 여과한후 10ml 바이알에 7ml씩 충전시킨 후, 질소가스를 30초간 purging 시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, 역가의 잔존율 %는 조제시의 농도를 100%로 환산하여 기록하였고, pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 4에 나타내었다.

[표 4]

[표 4a]

[실시예 5]

[아미노산에 의한 안정성 영향]

염산독소루비신 10g을 일정량의 용매에 완전히 용해시킨 후 상기에 언급한 아미노산 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 0.9% NaCl을 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산 독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기를 통해 여과한후 10ml 바이알에 7ml씩 충전시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 5에 나타내었다.

[표 5]

[실시예 6]

[지방족아미드류에 의한 안정성]

염산독소루비신 10g을 일정량의 용매에 완전히 용해시킨 후 상기에 언급한 지방족 아미드 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 주사용증류수(WFI)를 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기를 통해 여과한후 10ml 바이알에 7ml씩 충진시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 6에 나타내었다.

[표 6]

[표 6a]

[실시예 7]

[지방족아미드류와 당류, 아미노산의 복합처방에 의한 안정성]

* MEAA : Mono ethyl acetamide

독소루비신 10g을 일정량의 용매에 완전히 용해시킨 후 상기에 언급한 지방족 아미드, 당, 아미노산의 양을 가하여 용해시킨다. 용해가 완료된 후 10%HCl 또는 10%NaOH를 사용하여 pH를 3.5로 맞춘다. 주사용증류수(WFI)를 가하여 정용한 후 pH를 확인 조정한다. 정용후 염산독소루비신의 농도는 2mg/ml이다. 0.22㎛ 막여과기를 통해 여과한후 10ml 바이알에 7ml씩 충진시킨다. 테플론 고무전으로 시전하고 알루미늄 뚜껑으로 밀봉한다. 각각의 시료를 45℃에 보관 저장하여 독소루비신 안정성실험을 실시하였다. 역가의 측정은 상기 언급한 HPLC방법을 이용하였으며, pH 및 외관의 성상을 기록하였다. 결과는 표 7에 나타내었다.

[표 7]

[표 7a]

Claims (5)

1. 독소루비신의 생리학적으로 허용되는 염을 생리학적으로 허용되는 주사용증류수 또는 생리식염수에 0.1mg/ml-10mg/ml되도록 용해시키고, 당류로 10-50%의 덱스트로스, 프락토스, 이노시톨; 지방족아미드로 모노에틸 아세트아미드; 비타민류로 티아민염산염, 티아민 질산염; 아미노산으로 라이신 염산염, 타우린 중에서 선택된 1종 이상의 안정화제 및 경우에 따라서 등장화제, 방부제, 산화방지제 등의 생리학적으로 허용되는 통상의 첨가제를 첨가하고, 필요에 따라 용기상부의 공기를 질소로 대체하여 밀봉, 제조된 독소루비신의 주사액.
2. 제1항에 있어서, 비타민류로 티아민 염산염 또는 티아민 질산염을 0.01%-5% 사용한 주사액.
3. 제1항에 있어서, 지방족아미드로 모노에틸 아세트아미드를 1%-30% 사용한 주사액.
4. 제1항에 있어서, 아미노산으로 타우린 또는 L-라이신을 0.1-5% 사용한 주사액.
5. 독소루비신의 생리학적으로 허용되는 염을 생리학적으로 허용되는 주사용증류수 또는 생리식염수에 0.1mg/ml-10mg/ml 되도록 용해시키고, 당류로 10-50%의 덱스트로스, 프락토스, 이노시톨; 지방족아미드로 모노에틸 아세트아미드; 비타민류로 티아민염산염, 티아민 질산염; 아미노산으로 라이신 염산염, 타우린 중에서 선택된 1종 이상의 안정화제 및 경우에 따라서 등장화제, 방부제, 산화방지제 등의 생리학적으로 허용되는 통상의 첨가제를 첨가하고, 필요에 따라 용기상부의 공기를 질소로 대체하여 밀봉하는 독소루비신의 주사액을 제조하는 방법.