KR100254082B1 - C형 간염의 치료를 위한 조성물 및 치료방법 - Google Patents

Abstract

본 발명에는 C형 간염 바이러스에 간염된 포유동물을 치료하는데 사용하기 위한 조성물 및 방법이 제공된다. 조성물은 하나이상의 티모신 단독 또는 하나 이상의 인터페론과 조합하는 것을 포함한다. 치료방법은 티모신 단독 또는 함께 또는 순차적으로 인터페론과 함께 사용하는 것을 포함한다.

Description

[발명의 명칭]

C형 간염의 치료를 위한 조성물 및 치료방법

[발명의 배경]

[발명의 분야]

본 발명은 일반적으로 C형 간염바이러스 감염 환자의 약물학적 치료에 관한 것이다.

[관련기술의 설명]

대부분의 수혈후 감염된 간염의 추정인자인 C형 간염바이러스(HCV)는 최근에 새로운 혈청학적 검정에 의해 정의되었다(Kuo, G. 등, Science, 244 : 362-4(1989)참조). 공혈자 푸울(pool)의 품질개선 및 헌혈된 혈액의 검사의 최근 방법에도 불구하고 수혈받은 사람들 중 현재 급성감염의 예상 발생율은 5-10%이다.(Alter, H. J., in Zuckerman, A.J., ed., Viral Hepatitis and Liver Disease, Allen K. Liss, 뉴욕, 1988, PP. 537-42 참조). 만성간염은 급성 HCV에 감염된 환자의 적어도 절반에서 나타나고(비-A, 비-B형 간염(NANB) 환자의 약 90%를 나타냄), 간경변은 이그룹 중 최소한 20%에서 나타난다. 따라서, 미국에서 해마다 수혈을 받는 약 3백만명의 사람들 중 급성 C형 간염이 약 150,000명에서 나타난다. 만성 C형 간염은 이들 중 최소한 75,000명에서 나타나고 그들 중 15,000명 이상에서 간경변이 나타난다. 수혈후 간염에 감염된 환자들 중에서 약 90%정도가 HCV항체에 양성이다.(Davis, G.L. 등, New England Journal of Medicine, 321 : 1501-6(1989) 참조). 산발성(sporadic) NANB 간염에 감염된 환자들(특이한 위험인자가 없는)은 아마도 항-HCV 항체를 갖는 것 같다(상기 Kuo, 등(1989) 참조). C형 간염에 걸린 환자들중 대부분이 잠재적이거나 가벼운 질환을 갖지만 약 50%가 간 생검(biopsy)시에 염증성병변 및 혈청 트랜스아미나제 이상이 파동되는(fluctuating)것으로 특징되는 만성질환상태로 진전될 것이다.

예상되기로는 이들중에서 20% 이하에서 간경변이 나타날 것이다(Koretz, R.L. 등, Gastroenterology, 88 : 1251-4(1985)참조).

HCV 관련 질환의 진전을 멈추게 하거나 느리게 진행시킬 목적으로 많은 약제가 최근 몇해에 평가되어 왔다. 아시클로비어(acyclovir) 및 코르티코스테로이드(corticosteroids)(양자는 자기면역 만성작용 간염에 유용하다) 양자는 비효과적이다.(Pappas, S.C., J. Med. Virol. 15 : 1-9(1985); Stokes, P. 등, Gastroenterology, 92 : 1783 요약서(1987) 참조).

오늘날에는 α-인터페론(IFA)이 반드시 최종해결책은 아닐지라도 가장 유망한 후보로 거론된다.(Hoofnagle, J.H. 등, Viral Hepatitis : 1981 International Symposium에서, 필라델피아, 프랭클린 인스티튜트 프레스, 1982, PP.573-83; Hoffnagle, J.H. 등, New England Journal of Medicine, 315 : 1575-8(1986); Thomson, J., Lancet, 1 : 539-41(1987); Kiyosawa, K. 등 Zuckerman, A., ed., Viral Hepatitis and Liver Disease, Allen K. Liss, 뉴욕, 1983, PP. 895-7; Hoofnagle, J.H. 등, Sem. Liver Dis. 9 : 259-263(1985) 참조). 인터페론은 바이러스성 감염 뿐만아니라 다른 항원성 자극에 응답하여 만들어진 숙주단백질이다. 그들은 그들 세포의 출처 및 항원성에 의하여 분류된다. α-인터페론은 임파아구성(lymphoblastoid)세포에 의해 만들어지고, β-인터페론은 섬유아세포(fibroblasts), γ-인터페론은 T-세포에 의해 만들어진다. 각 그룹의 아형은 항원적/구조적 특징에 근거한다. 각 그룹에 대한 재조합형태는 개발되어 상업적으로 입수가능하다. 특징이 잘 나타난 수혈후의 NANB 간염환자 10명에 대해 IFA를 사용하는 필롯(pilot) 연구가 후프네이글(Hoffnagle) 등에 의해 1986년에 보고되었다(Hoofnagle, J.H. 등, New England Journal of Medicine, 315 : 1575-8(1986) 참조). 이 연구에서 10명의 환자중 8명에서 치료시작 한달내에 혈청 알라닌 트랜스아미나제(ALT)수준이 개선되었다. IFA 요법은 7명에게 매일 5백만 유니트(MU)를 공급하고 3명의 환자에게 1MU를 공급하는 것으로 이루어졌다. 모든 피검자에게 매일 1MU로 용량을 점차적으로 감소시켜 마지막에도 격일 또는 3일마다의 공급으로 바꾸었다. 치료후 간 생검을 한 세명의 환자의 피검물에서 문맥염증정도로 현저한 개선이 나타났고 실질성 간담낭의 괴사의 없어짐이 나타났다. 5MU/일 용량 및 1MU/일 이하에서 일반적인 부작용이 있었다.

최근에 들어서 만성 HCV 감염 환자에게서 재조합 인간 인터페론의 효과에 대하여 예상되는 무작위추출된 이중맹검(double-blind)의 플라시보(placebo)대조시험이 수행되어왔다.(Di Bisceglie, A.M. 등, New England Journal of Medicine, 321 : 1506-10(1989) 참조). 41명의 환자가 이시험에 기록되었는데 그들중 37명이 후에 HCV에 대한 항체를 갖는 것으로 발견되었다. 21명의 환자는 6개월 동안 일주일에 3번씩 α인터페론(2MU)을 피하주사로 받았으며 20명은 플라시보를 받았다. 평균혈청 ALT와 간의 조직학적 특성이 인터페론으로 치료한 환자에게서는 개선되었으나 플라시보를 받은 환자는 개선되지 않았다. 인터페론으로 치료한 10명의 환자(48%)는, 치료시 정상범위로 평균혈청 ALT가 하락되는 것으로 정의되는 완전한 응답을 가졌으며; 다른 세명은 50%이상의 평균 ALT 감소를 가졌다. 그러나 치료가 끝난후에 혈청 ALT는 일반적으로 치료전 수준으로 되돌아왔다; 치료중단후 6-12개월에 단지 2명의 환자(10%)만이 정상값을 가졌다. 연구자는 α인터페론 요법이 만성 C형 간염의 질병활성을 감소시키는데는 유용하지만 유용한 응답이 일시적이며 부작용이 나타나는 것으로 알려졌다 라고 결론지었다.

또다른 보다 광범위한 연구에서는 166명의 만성 C형 간염(NANB 간염) 환자를 24주 동안 일주일에 3번씩 재조합 인간 α-ALT 3MU 또는 1MU로 치료하거나 전혀 치료하지 않았다. 혈청 ALT는 3MU의 인터페론에 응답한 26명의 환자중 22명(85%)에서, 그리고 1MU의 인터페론 치료에 응답한 16명의 환자중 9명(56%)에서 완전하게 정상이 되었다. 3MU의 인터페론을 받은 환자들은 소열편(lobular) 및 문맥 염증의 퇴행으로 인하여 조직학적으로 개선되었다. 그러나, 치료의 완료후 6개월 내에 3MU의 인터페론으로 치료한 환자중 51%가, 그리고 1MU로 치료한 환자중 44%가 재발했다(Davis, G.L. 등, New England Journal of Medicine, 321 : 1501-06(1989) 참조). 이 연구자들은 24주 과정의 인터페론 용법이 치료중지후 재발이 일반적임에도 불구하고 많은 C형 간염환자들에서 질병 활성을 조절하는데 효과적이다라고 결론지었다.

만성 NANB 간염환자에게 재조합 인간 α-IFN을 이용한 다중(multi-center) 무작위추출 대조시험이 최근에 보고되었다(Marcellin, P. 등, Hepatology, 13 : 393-97(1991) 참조). 환자들은 무작위로 치료되지 않거나 24주 동안 일주일에 3번씩 1-3MU의 α-인터페론으로 치료되었다. 45명의 환자(75%)가 HCV에 대한 항체에 양성이었다. 24주 치료기간동안 평균할청 ALT가 양쪽그룹 모두에서 감소했지만 그 감소는 3MU 그룹에서만 만족스러웠다. 그러나, 24주에 정상 ALT 수준을 갖는 환자의 비율은 3MU 그룹(39%)과 1MU 그룹(45%)이 유사했고 모두 대조군(0%)보다 훨씬더 높았다. 반복적인 간 생검의 피검물은 보다 소량의 그룹 또는 대조군에서가 아니라 보다 많은 량의 그룹에서 조직학적 변화가 많은 감소를 나타냈다. 그러나, 치료후에 평균 ALT 수준은 양 치료된 그룹에서 상승했다. 48주에 정상 ALT 수준을 갖는 환자의 비율은 3MU 그룹에서 28%이고 1MU 그룹에서 20%이다. 연구자들은 3MU의 인터페론을 투여하는 것이 혈청 ALT 수준 및 간 조직 검사의 개선을 유도하는데 24주 동안 주당 3번씩 1MU의 인터페론을 투여한 것보다 우수하다 라고 결론지었다. 그러나, 인터페론의 투여를 중단했을때 응답자 중 절반에서 질병활성의 재발이 발생했다. α-인터페론에 대한 응답은 감염의 원인 또는 환자혈청에 항-HCV 항체역가의 존재 또는 비존재와는 관련이 없다.

따라서, α-인터페론은 HCV 감염의 진전에는 유용한 효과를 갖는 반면에 이러한 효과가 단지 일시적이라는 것이 명백하다. 따라서, 환자에게서 C형 간염 바이러스의 영향을 영구적으로 조절시키기 위하여 새로운 형태가 필요하다.

흉선(thymus gland)로 부터 유도된 또다른 분류의 폴리펩타이드 면역조절제인 티모신이 임파구에서 성숙한 단계들을 일으키고 T-세포 기능을 증가시키며 면역결핍의 복원을 촉진시키는 것으로 나타났다(Low, T.L.K. 등, “thymosins” : 구조, 기능 및 치료에의 적용, Thymus, 6 : 27-42(1984) 참조).

Goldstein 등에 의해 처음 설명된 티모신 프랙션 화이브(Thymosin Fraction Five : TF-5)(Proc. Nat′l Acad. Sci.(USA), 69 : 1800-1803(1972) 참조)는 최소한 40 펩타이드 성분(그중 20성분은 등질성(homogeneity) 또는 등질성에 가깝게 정제된다)을 함유하는 부분적으로 정제된 소 흉선의 추출물이다; 이것은 약 0.6%의 티모신 α-1(THNα₁)을 함유한다.(위에 설명한 Low, 1984 참조).

TF-5로 부터 초기에 분리된 THNα₁은 서열화되어 화학적으로 합성된다(Wetzel, R. 등, Biochemistry, 19 : 6096-6104(1980) 참조). 그 서열은 생쥐, 송아지 및 인간에서 매우 유사하다. THNα₁는 3100의 분자량을 갖는 28 아미노산 폴리펩타이드인데 이것은 면역시스템을 조절하는데 있어서 TF-5와 질적으로 유사한 활성을 나타냈다(Low, T.L.K. 등, J. Biol. Chem., 254 : 981-6(1979) 참조). THNα₁은 α-와 γ-인터페론 생산의 자극을 포함하고, 소식세포 이동 억제 인자 생산을 증가시키며, T-세포마커(markers)의 발현을 유도하고, IL-2 리셉터(receptors)를 포함하며 T-세포의 헬퍼세포활성을 개선시키는 우수한 면역학적 활성을 갖는다(Schulof, R.S. 등, The Lymphocyte, 알렌 제이. 리스사, 뉴욕, 1981, PP191-215; Low, T.L.K. 등, “Thymosins : 구조, 기능 및 치료에의 적용”, Thymus, 6 : 27-43(1984); Koutab, N.M. 등, Immunopharm., 16 : 97-105(1988) 참조). 생쥐에 대한 연구는 면역억제된 생쥐에서 천연 킬러-세포 활성에 대한 THNα1 및 인터페론의 상승작용효과를 입증하고 있다(Favilli, C. 등, Cancer Immunol. Immunother., 20 : 189-92(1985) 참조). TF-5와 THNα₁은 면역조절 T-세포기능에 영향을 주고 인터페론-α, 인터페론-γ 및 인간 임파구에 의한 인터루킨-2의 생산을 증가시키고, 인터루킨-2 리셉터 발현을 증가시킬 수 있다(Marshall, G.D. 등, J. Immunol., 126 : 741-4(1981); Mutchnick, M.G. 등, Clin, Immunol. Immunopathol., 23 : 626-33(1982); Sztein, M.B. 등, Proc. Nat′l Acad. Sci.(USA), 83 : 6107-6111(1986); Serrate, S.A. 등, J. Immunol., 1939 : 2338-43(1987); Baxevanis, C.N. 등, Immunopharm., B : 133-41(1987); 및, Svedersky, L.P., Eur. J. Immunol., 12 : 244-7(1982) 참조)

면역결핍증 또는 암에 걸린 환자에게 일차 또는 보조요법으로서 TF-5 및 THNα₁을 이용한 임상실험에서 이들 제제가 면역응답성을 강화시키고 특정임파구 기능을 증가시키는 것으로 나타났다. TF-5와 정제된 THNα₁의 임상실험은 수년동안 진행되어왔다. 암 또는 면역결핍상태에 걸린 환자에 대한 초기 임상실험은 완성된 것은 아닐지라도 고무적인 것이었다(Goldstein, A.L. 등, Transp. Proc., 9 : 1141(1977); Barrett, D.J. 등, J. Pediatr., 97 : 61(1980); 및 Cohen, M.H. 등, J. Amer. Med. Assoc., 241 : 1813-5(1979) 참조). THNα₁의 용도는 적지않은 세포폐암에 걸린 환자의 무작위시험에서 설명되었다. 환자를 THNα1으로 2주동안 일주일 또는 매일 2번 및 방사선치료과정의 완료 후 일주일에 2번 900μg/m²의 용량으로 피하주사하여 치료했다. THNα₁의 부작용은 단지 3명의 환자에게서 주사 부위에 약간 통증이 있었다는 것이다. 이것은 많은 약제에 공헌했으며 담체제제 적당할 수 있었다. 재발없는 생존자 및 끝까지의 생존자는 플라시보 그룹에서 보다 THNα1 치료그룹들 모두에서 더 많았다; 방사선-억제면역기능의 약간의 회복 또한 나타났다. 이와 관련하여 T-세포수는 증가하지 않았다(Schulof, R.S. 등, J. Biol. Response Modifiers., 4 : 147-58(1985) 참조).

최근에 티모신을 이용한 이중맹검 무작위시험이 인플루엔자 백신에 대한 응답을 증가시키기 위한 노력의 일환으로 나이많은 사람들을 대상으로 수행되었다(Gravenstein, S. 등, JAGS, 37 : 8(1989) 참조). 일주일에 두번 피하주사로 합성 THNα1을 투여한 환자에게 동시에 인플루엔자백신을 투여하였다. 백신투여후 6주에 약을 투여하기 위해 무작위 추출된 환자들은 대조군보다 높은 인플루엔자에 대한 항체수준을 가졌다. 이러한 차이는 나이가 아주 많은 사람들(77-99세)에서 두드러졌다. 임상적 또는 생화학적 독성이 억제를 투여받은 사람에게서는 나타나지 않았다.

티모신은 HCV 이외에 간염바이러스에 의해 야기된 감염에 대하여 효과적일수있다 라는 일차보고가 있었다. 우드척(Woodchuck)간염 바이러스에 감염된 우드척을 이용한 바이러스성 간염의 동물모델에서, THNα1은 바이러스성 DNA복제를 억제했지만 임상학적 파라메터(parameter)에서는 개선이 없었다(Korba, B.E. 등, Hepatology, 12 : Abs. 880(1990) 참조). B형 간염 바이러스(HBV)에 의해 야기된 만성활성 B형 간염에 걸린 환자에 대한 필롯임상실험에서, THNα₁(5명의 환자) 또는 TF-5(2명의 환자)로 1년동안 치료한 환자들은 혈청 ALT의 현저한 감소를 나타냈다; 또한 7명 중 6명의 환자가 감소된 수준의 혈청 HBV DNA를 나타냈으며 초기에 혈청 B형 간염 표면 항원(HBsAg)에 대해 양성인 6명의 환자중 5명에서 이 항원이 없어졌다(Mutchnick, M.C. 등 Hepatology, 10 : Abs. 575(1989) 참조). 이 요약서들에는 티모신이 어떤 다른 간염 바이러스들에 대해서 효과적인 것이라는 제시는 없었다.

따라서, 포유동물에서 HCV 감염의 치료를 위한 새로운 형태의 기술이 중요한 필요성으로 남아있다; 이러한 새로운 형태의 기술이 하기에 설명된다.

[발명의 요약]

본 발명은 면역시스템-강화 용량의 하나이상의 티모신 단독 또는 인터페론요법과 조합하여 포유동물에게 투여하는 것을 포함하고 HCV 감염에 대한 치료형태가 제공된다.

따라서, 본 발명의 목적은 생물학적 반응조절제인 하나이상의 티모신 계열로 포유동물의 급성 또는 만성 HCV 감염을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공하는 것이다.

본 발병의 또다른 목적은 하나이상의 티모신 및 하나이상의 인터페론의 조합요법을 포함하는 포유동물의 급성 또는 만성 HCV 감염을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공하는 것이다.

이들 및 다른 목적들은 명세서 및 첨부된 특허청구범위를 참고로 명백해질 것이다.

[발명의 설명]

면역응답성을 강화시킬 수 있는 용량의 하나이상의 티모신 단독 또는 항-바이러스성 용량의 하나이상의 인터페론을 조합하여 HCV에 감염된 포유동물에 투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하기 위한 새로운 형태가 발명되었다.

여기에서 “티모신”이라 함은 흉선에서 자연적으로 발생하거나 화학적 또는 재조합수단에 의해 제조된 면역시스템 강화 폴리펩타이드의 일부 또는 전부이거나 이들 폴리펩타이드의 어떤것으로부터 유도된 단편을 의미한다. “포유동물”이라함은 C형 간염 감염의 치료가 요구되는, 인간 및 동물환자를 포함하는 모든 포유동물 피검자를 의미한다. “포유동물” 및 “피검자”는 상호교환가능하게 사용된다.

HCV 감염을 치료하기 위해 적절한 티모신 제제로는 TF-5, THNα₁및 그 단편, 예를 들면 C-말단 4-28 및 15-28과 N-말단 1-8, 1-14 및 1-20 단편을 포함한다. 이들은 캘리포니아 포스터시에 소재하는 알파-1 바이오메디칼 인코포레이티드로 부터 얻을 수 있다.

피검자, 예를들면 인간환자들은 적절한 기간동안 적절한 간격으로 피하주사 또는 수혈로 티모신을 받을 수 있다. 티모신은 C형 간염바이러스의 불활성화를 돕거나 촉진시킬수 있는 양으로 C형 간염바이러스에 감염된 포유동물에 투여된다. TF-5와 같은 티모신의 면역시스템을 강화시킬 수 있는 양의 약제학적 용량단위는 약제학적으로 수용가능한 담체에서 약 900-약 1200mg/m²몸체표면적이 될 수 있다. 만니톨 및 포스페이트 완충액에 함유된 티모신 또는 단편의 냉동건조된 제제는 조제전에 희석액에 용해된다. 티모신은 냉장고에 저장되었을때 최소한 6개월동안 희석액에 안정하게 있어야 한다. 티모신용액은 1ml 용량의 유리병으로 조제하는 것이 편리하다. 어떤 환자들은 한달에 약 8병이 요구될 수 있다.

전형적인 인간환자를 위해서는 약 1500-약 1700μg의 THNα₁또는 그 단편을 일주일에 두번(예를들면, 월요일과 목요일) 피하주사하는 투여법이 편리하다. 치료용법 및 기간은 조절가능한데 티모신에 대한 피검자의 임상학적 응답에 의해 결정된다.

질병의 과정 및 약제치료에 대한 질병의 반응은 임상시험 및 실험결과에 의해 나타난다. 상승혈청 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT) 및 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST)는 조절되지 않은 C형 간염에서 발생하는 것으로 알려졌으며, 치료에 대한 완전한 응답은 일반적으로 이들 혈청효소의 정상화로서 정의되므로(Davis, G.L. 등, New England Journal of Medicine, 321 : 1501-6(1989) 참조) 티모신을 이용한 치료의 진전을 예를들면 연속다중분석기로 수행된 기술-인식시험으로 편리하게 알 수 있다.

HCV에 대한 항체를 갖는 환자를 평가하기 위한 또다른 수단(C형 간염에 감염된 모든 환자에게서 HCV에 대한 항체를 검출할 수 있는 것은 아님-Weine, A.J. 등, Lancet, 335 : 1-3(1990) 참조)은 환자의 혈청으로 이들 항체의 역가를 주기적으로 시험하는 것이다. 항-HCV 항체는 현재 이용가능한 C100-3 테스트(Kuo, G. 등, Science, 244 : 362-4(1989) 참조), 엘리사(Elisa) 테스트(뉴저지, 래리탄, Ortho Diagnostic System 참조) 또는 재조합 평가법(캘리포니아 에머리빌 소재 Chiron Corporation, RIBA-1 및 RIBA-2 참조)으로 테스트될 수 있다. 어떤 적절한 테스트도 모두 사용될 수 있다.

약제치료에 응답하는 환자에서 HCV 복제 과정에 뒤이어 HCV RNA가 예를들면 HCV 게놈의 NS3 및 NS4 비-구조적 유전자 부위로 부터 유도된 두셋트의 프라이머(primers)를 이용하는 네스티드(nested) 폴리머라제 체인 반응 평가법을 이용하여 혈청샘플로 측정될 수 있다(Farci, P. 등, New England Journal of Nedicine, 325 : 98-104(1991); Ulrich, P.P. 등, J. Clin. Invest., 86 : 1609-14(1990) 참조).

치료과정을 뒤이은 다른 적절한 실험실 테스트들이 하기 실시예 1에 기재되었다.

또한, 티모신 요법을 인터페론요법과 조합하여 사용할 수 있는데 이로인하여 티모신의 면역시스템 강화효과에 인터페론의 항-바이러스효과를 조합할 수 있다. 현재 사용되는 인터페론용량이 더 많은 용량의 이들 단백질에서의 용량-한계 부작용을 고려할 때 응답율을 개선시키기 위하여 유용하다. 이러한 개념의 파생적 결과는 인터페론을 단독으로 사용했을때 보다 더 적은 양으로 인터페론과 티모신을 함께 사용했을때 비교우위의 효능을 갖는다는 것이다.

이러한 조합요법에서는 하나이상의 인터페론(예를들면, 인터페론 α-2b, Intron-A, 뉴저지 케닐워스 소재 쉐링-플라우)이 약 1MU-3MU의 용량으로 바람직하게는 THNα₁을 포함하는 하나 이상의 티모신 약 900-1200μg/m²몸체표면적의 용량과 함께 또는 순차적으로 투여된다.

상기예는 재조합 인터페론 α-2b를 예를 든것이지만, α, β 및 γ-인터페론과 같은 재조합 또는 자연발생적인 다른 항-HCV-효과 인터페론이 본 발명에서 바람직하게 사용될 수 있다.

이러한 조합복용법은 조절가능한데 환자의 임상학적 조건에 달려있다. 환자가 바람직한 투약수준에 반응하지 않을 경우에는 바람직하지 않은 부작용이 없는 범위내에서 증가될 수 있다. 전형적으로 주사는 일주일에 5번 이루어지는데 환자에게서 수용 가능한 응답이 나타날때까지 계속된다.

조합요법의 효능을 측정하기 위한 테스트는 상기 설명한 티모신 단독 치료에 대한 테스트와 같을 수 있다. 또한, 간 생검샘플의 조직검사가 평가를 위한 두번째 주요기준으로서 사용될 수 있다.(Knodell, R.G. 등, Hepatology, 1 : 43 1-5(1981), 조직학적 활성지표(Histological Activity Index, 문맥염증, 조각 또는 교량괴사, 소열편상처 및 섬유증)은 질병활성에 대한 스코어링(scoring)방법을 제공한다).

하기 실시예는 단순히 본 발명을 설명하기 위해 제공된 것으로서 명세서 및 청구범위에 설명된 것과 같은 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

[실시예 1]

[주사가능한 조성물의 제조]

각각 1ml의 약제학적 투약 단위체를 하기 표 1에 도시된 성분으로부터 제조했다.

[표 1]

[실시예 2]

[티모신과 인터페론을 이용한 C형간염 간염환자의 치료]

만성활성 C형간염(CAHC)에 감염된 성인환자를 그룹당 약 40명으로 이루어진 4개 그룹중 하나를 무작위 추출했다. 선택기준은 : (1) 환자가 성인이며(최소한 18세 이상); (2) 혈청 ALT가 테스트를 하는 실험실에서 정상의 상한값의 두배보다 더 큰 최소한 하나의 값으로 치료하기전에 최소한 6개월 동안 상승되어야 하고; (3) 환자가 두경우 및 확인실험에서 HCV 항체에 대하여 양성이어야하며; (4) 치료 3개월내의 간 생검이 만성 활성간염과 일치하는 병상을 나타내는 것을 포함한다.

제외 기준은 : (1) 다른 항-바이러스성 또는 면역억제 약품을 최근에 사용한 환자; (2) 치료과정의 완료를 막을 수 있는 혈우병, 임신 또는 HIV 감염, 또는 다른 심각한 질병을 가진 환자; A 또는 B형 간염, α-1 항트립신 결핍, 윌슨씨병 및 혈색증을 포함하는 다른 형태의 간질환이 없어야 하거나 존재한다면 역가가 ＜1 : 40이 되어야 한다; (5) 백혈구 결핍(＜3,000)환자; (6) 낮은 절대 호중구수(＜1,000)의 환자; (7) 낮은 혈소판(＜75,000)환자; (8) 낮은 Hb(＜11g/dL)환자); (9) 높은 빌리루민(＞4mg/dL)환자; 및 (10) 낮은 혈청 알부민(3g/dL)환자를 포함한다.

4개의 무작위 추출그룹중 첫번째 그룹은 월요일, 수요일 및 금요일에 피하주사(SQ)로 인터페론, 바람직하게는 인터페론 α-2b 3MU를 투여 받았으며 화요일과 토요일에 플라시보를 받았다. 두번째 그룹은 같은 용량/스케줄의 인터페론과 티모신, 바람직하게는 THNα₁을 화요일과 토요일에 900μg/m²SQ의 용량으로 투여받았다. 세번째 그룹은 같은 용량/스케줄의 티모신을 단독으로 투여 받았다. 네번째 그룹은 초기에 폴라시보치료를 받았지만 그후에 세번째 치료그룹으로 무작위 추출될 수 있다. 인터페론과 티모신은 재조합한 것이다. 부작용이 모니터된 그 기간동안 환자들은 약 일주일동안 입원하여 치료를 시작했다.

외래환자 재조사(follow-up)는 초기에 2주동안 일주일간격으로 하였으며 다음에는 2달동안 2주간격으로 다음에는 매달하였다. 각각의 방문시에 하기 실험테스트가 수행되었다. : CBC, 혈소판수, 차등 및 ESR, ALT, AST, GGT, 알칼린 포스파타재, 빌리루빈, 총 빌리루빈/알부민 및 HCV 항체. 한달간격으로 혈청 γ-글로불린, TSH, ANA 및 ASMA가 평가되었다.

약제의 독성이 임상학적 및 실험실지표를 이용하여 계속적인 자각증상이 없는 CAH를 가진 환자에게서 조직활성의 숫자로 나타나는 스코어링시스템을 제공한다.

이때 대조환자들이 세가지 치료형태중 하나를 받기 위해 세그룹으로 무작위 추출되는데 이는 이들이 그때까지 재조사 간 생검시에 CAH를 가지며, 연구의 한 지류(arm)가 6개월째의 분석시에 고도로 심각한 양성 또는 음성결과를 나타내지 않을 경우이다.

치료그룹에서 환자들은 ALT 수준이 올라가는 것에 의해 입증되는, 질병의 재발평가가 이어진다. 초기 6개월 치료기간에 응답이 나타나지만 그후에 질병의 재발이된 환자들에게는 추가요법이 제공된다.

가능한 경우에는 추가적인 혈청 또는 조직테스트가 수행된다. : 인터페론과 티모신에 대한 항체의 평가, 간 생검샘플에서 C형 간염 게놈세그먼트의 폴리머라제 체인반응 증폭 및 항-C형 간염 혈청 역가의 정량평가.

[실시예 3]

인터페론이 2MU 수준이고 티모신이 1050μg/m²으로 사용된 것 이외에는 치료방법(protocol)이 실시예 2와 같다.

[실시예 4]

인터페론이 1MU, 티모신이 1200μg/m²사용된 것 이외에는 치료방법이 같다.

[실시예 5]

[데이타분석]

치료에 대한 응답을 평가하기 위한 두개의 기본적인 기준이 있다. 치료기간의 마지막에 ALT 수준의 정상화(부분적인 응답은 최소한 50%의 초기 ALT의 감소로 정의될 수 있다) 및 상기 Knodell 등의 조직학적 활성지표(HAI)에 의해 측정된 조직학적 개선.

이러한 분석은 샘플당 1-22 범위의 기본 스코어를 제공한다. 윌콕슨(Wilcoxon)쌍(pired)-샘플테스트를 이용하여 쌍데이타가 분석될 수 있다. 또한 약하거나 보통이거나 반대의 CAH 및 Chi-스퀘어 통계학적 분석을 이용하여 평가된 개선으로 분류된다.

질병의 경감 및 ALT 수준의 정상화에서 재발상태를 평가하기 n이해 라이프-테이블(Life-table) 분석이 사용된다. 다른 계속적인 변수가 스튜던트 t 테스트(Student′s t test)를 사용하여 분석된다. 적절한 경우에 이분(dichotomous) 데이타가 CHi 스퀘어 또는 피셔스(Fisher′s) 테스트에 이용된다.

파워(power)분석이 예상된 차이를 나타내기 위한 각 테스트 그룹의 다수의 환자를 측정하는데 이용되었다. 파워분석에는 평균 ALT 수준 및 그들의 변수의 연구전에 결합되었으며, 15IU/L의 평균 ALT 차이를 나타내기 위해서 각 테스트 그룹에서 21-52명의 환자가 필요한 것으로 나타났다. 3-5%의 환자가 떨어져나가고 6개월 후에 대조그룹의 치료에서 분리될 것으로 예상되므로 그룹당 40명의 환자가 치료 완료되었다.

[실시예 6]

C형 간염을 치료하기 위한 티모신 α-1의 효능은 전에 α-인터페론에 대하여 비-응답자였던 두명의 C형 간염환자에게서 나타났다. 이들 두 환자들을 2MU의 α-IFN을 일주일에 세번 투여하는 동안 티모신 α-1을 일주일에 두번 피하주사하여 치료했다.

티모신 α-1으로 치료 6개월후 두환자 모두 혈청 알라닌 트랜스아미나제(ALT)가 50% 감소한 것으로 나타났고 이는 티모신 α-1의 효능을 입증하는 것이다. 상기와 같이 치료한 6명의 다른 C형 간염환자들도 6개월후 정상으로 감소된 혈청 ALT 수준과 함께 치료에 대한 “완전한 응답”을 부여주었다. 상기와 같이 치료한 세명의 추가적인 환자에게서는 혈청 ALT 수준이 6개월후에 50% 감소되었다. 상기와 같이 치료한 6명의 추가적인 환자는 6개월후에 한계인 혈청 ALT의 50% 감소를 달성하도록 충분히 응답하지 않았다.

Claims (20)

1. 티모신 및 티모신의 면역시스템-강화 단편으로 이루어진 그룹으로부터 선택된, 최소한 하나의 면역시스템-강화 양만큼의 요소를 함유하는 약제학적 용량단위의 약제학적으로 수용 가능한 캐리어를 포함하는데 상기 면역시스템 강화 양이 900-1,200μg/m²포유동물 몸체표면적이고, 상기 약제학적 용량단위는 C형 간염 바이러스에 감염된 포유동물에 투여되었을때 생체내에서 상기 바이러스의 불활성화를 촉진할 수 있는 것을 특징으로 하는, C형 간염을 치료하기 위한 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 프랙션 화이브 및 티모신 α-1으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 조성물.
3. 제1항에 있어서, 항-바이러스에 효과적인 1,000,000-3,000,000유니트 양의, 최소한 하나의 인터페론을 추가로 포함하는 조성물.
4. 제3항에 있어서, 상기 인터페론이 α-, β-, γ-인터페론으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 조성물.
5. 제4항에 있어서, 상기 α-인터페론이 인터페론 α-2b인 조성물.
6. 제5항에 있어서, 상기 인터페론이 재조합 인터페론인 조성물.
7. 제1항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 프랙션 화이브이고, 상기 면역시스템-강화양은 인간 면역시스템-강화양인 조성물.
8. 제3항에 있어서, 상기 인터페론이 α-인터페론이며 그 양이 1MU-3MU 사이의 인터페론인 조성물.
9. 제1항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 α-1이고, 상기 면역시스템-강화양은 인간면역시스템 강화양인 조성물.
10. 제1항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 α-1이고, 그 양이 1500-1700μg의 티모신 α-1을 함유하는 조성물.
11. 약제학적으로 수용가능한 캐리어에 900-1200μg/m²포유동물 몸체 표면적인 면역시스템-강화 양만큼의 최소한 하나의 티모신 또는 그 단편을 포함하는 C형 간염 바이러스에 감염된 포유동물의 치료에 사용하기 위한 항-C형 간염약제.
12. 제11항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 프랙션 화이브 및 티모신 α-1으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 약제.
13. 제11항에 있어서, 항-바이러스에 효과적인 1,000,000-3,000,000유니트 양의, 최소한 하나의 인터페론을 추가로 포함하는 약제.
14. 제13항에 있어서, 상기 인터페론이 α-, β-, γ-인터페론으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 약제.
15. 제14항에 있어서, 상기 α-인터페론이 인터페론 α-2b인 약제.
16. 제15항에 있어서, 상기 인터페론이 재조합 인터페론인 약제.
17. 제11항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 프랙션 화이브이고 상기 면역시스템-강화양은 인간 면역시스템-강화양인 약제.
18. 제13항에 있어서, 상기 인터페론이 α-인터페론이며 항-바이러스에 효과적인 양이 1MU-3MU의 인터페론인 약제.
19. 제11항에 있어서, 상기 티모신이 티모신 α-1이고, 상기 면역시스템-강화양은 인간면역시스템 강화양인 약제.
20. 제11항에 있어서, 상기 티모신은 티모신 α-1이며, 그 양이 약 1500-1700μg의 티모신 α-1인 약제.