JPS6317882A - ５−置換−１Ｈ−ピラゾロ〔３，４−ｂ〕ピラジン誘導体及び該化合物を含有する抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 り業ヒの利用分野 本発明は、下記式（１） 〔但し、Ｒは水酸基、ハロゲン原子、−０−Ｒ’基また
は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基、ベンジ
ル基、フェニル基又はフェニル基の１以Ｊ二の水素原子
がハロゲン原子、アルキル基もしくはアルコキシ基で置
換されたフェニル基である）を示す。〕で示される新規
５−置換−１）（−ビラゾロ［３，４−ｂｌピラジン誘
導体及びこれら化合物を有効成分とする抗腫瘍剤に関す
る。

史米匁敦方退麦譲明が解決しようとする間４衷従来より
、抗ｊ１１！瘍作用を有する物質として種々のものが提
案され、Ｌ　Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン誘導
体のある種のものが抗腫瘍作用を有することも知られて
いるが、更に優れた抗腫瘍作用を持ち、低毒性で抗腫瘍
剤として有効に使用される物質が望まれる。

！Ｌ’１　巡惑を解決するための手段及び作用本発明は
、上記事情に鑑み、比較的毒性が低く、優れた抗ｌ１ｆ
ｆｌ瘍活性を有する物質について鋭意検討を行った結果
、５−置換−１−ビニル−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂ
ｌピラジン誘導体に過マンガン酸塩、硫酸又は過酸を反
応させるか、或いは５−クロロ−１−ビニル−ＩＨ−ピ
ラゾロ［３，４−ｂｌピラジンに硫酸又は過酸を反応さ
せてＳ−クロロ−Ｉ　Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラ
ジンを合成し、これにアミノ化合物又はアルコキシドを
反応させる等の方法により、種々の新規化合物５−置換
−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン誘導体が得ら
れることを見い出すと共に、これらの新規化合物がいず
れも優れた抗腫瘍作用を有し、しかも比較的低毒性であ
り、抗Ｍ　１２５剤として効果的に使用し得ることを知
見し、本発明をなすに至ったものである。

従って、本発明は、下記式（１） 〔但し、Ｒは水酸基、ハロゲン原子、−０−Ｒ’基また
は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基、ベンジ
ル基、フェニル基又はフェニル基の１以上の水素原子が
ハロゲン原子、アルキル基もしくはアルコキシ基で置換
されたフェニル基である）を示す。〕で示される新規５
−置換−１）！−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン誘導
体及びこの新規化合物を有効成分とする抗腫瘍剤を提供
するものである。

以下、本発明につき更に詳しく説明する。

本発明に係る新規化合物５−置換−ＩＨ−ピラゾロ［３
，４−ｂｌピラジン誘導体は、上述した（１）式、即ち 〔但し、Ｒは水酸基、ハロゲン原子、−０−Ｒ’基また
は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ′はアルキル基、ベンジ
ル基、フェニル基又はフェニル基の１以上の水素原子が
ハロゲン原子、アルキル基もしくはアルコキシ基で置換
されたフェニル基である）を示す。〕で示される化学構
造式を有する化合物である。

なお、ここでハロゲン原子としてはＣΩ、Ｂｒ等が、ア
ルキル基としてはＣｎ　Ｈｚ　ｎ＋ｘ　（但し、ｎ＝１
〜８）等が、アルコキシ基としては０ＣｎＨ２ｎや、（
但し、ｎ＝１〜８）等が挙げられる。

上記一般式（１）で示される化合物のうちで。

下記式（１ａ） で示される５−ヒドロキシ−ＩＨ−ピラゾロ（３，４−
ｂ］ピラジンは１例えば５−ヒドロキシ−１−ビニル−
ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂコピラジン（下記式（２）
）％式％［３ ４−ｂ〕ピラジン（下記式（３））に過酸を反応させる
ことにより合成することができる（下記反応式Ａ参照）
。

ロロ過安息香酸等の有機過酸が好適に用いられる。

また、上記一般式（１）で示される化合物のうちで下記
式（ｌｂ） Ｈ で示される５−クロロ−Ｉ　Ｈ〜ピラゾロ［３，４−ｂ
コピラジン誘導体は、例えば５−クロロ−１−ビニル−
ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン（下記式（４）
）に過酸を反応させることにより得ることができる（下
記式反応弐Ｂ参照）。

更に、上記一般式（１）で示される化合物のうちで下記
式（１ｃ） （但し、Ｒ′は（１）式で示したものと同様のものであ
る。以下同じ。）で示される５−アルコキシ−ＩＨ−ピ
ラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン誘導体は、例えば５−ア
ルコキシ−１−ビニル−ＩＨ〜ピラゾロ［３，４−ｂ］
ピラジン誘導体（下記式（５））に過マンガン酸カリウ
ム等の過マンガン酸塩又は有機過酸を反応させることに
より合成し得る（下記反応式Ｃ参照）。

（１ｃ） また更に、上記一般式（１）で示される化合物のうち下
記式（１ｄ） で示される５−アミノ−１ｉ（−ピラゾロ［３，４−ｂ
コピラジン誘導体は１例えば５−アミノ−１−ビニル＝
ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン誘導体（下記式
（６））に硫酸を反応させるか、又は上記（１ｂ）式の
５−クロロ−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジンに
アミノ化合物を反応させることにより合成することがで
きる（下記反応式り参照）。

員 （１ｂ） 前記（１）式の化合物は、優れた抗腫瘍作用を有し、癌
化細胞の増殖を抑制するため、抗腫瘍剤として有効に使
用される。

なお、（１）式の化合物を抗腫瘍剤として用いる場合、
（１）式においてハロゲン原子がＣＱ又はＢｒのもの、
アルキル基がＣｎｌ１．ｎや。

（但し、ｎ＝１〜８）のもの、アルコキシ基がｏＣｎＩ
−１２ｎ＋、（但し、ｎ＝１〜８）のものが好ましい。

本発明に係る抗腫瘍剤は、（１）式の化合物を有効成分
とするもので、これら（１）式の化合物は単独で又は必
要により他の医薬成分と併用して静脈内注射、皮下注射
、筋肉内注射、経口投与、座剤による直腸投与等の方法
で投与される。その投与量は投与経路、投与回数等によ
り異なり、また症状の軽重などに依存して広範囲に変え
ることができるが、一般には治療的有効投与量は一日当
たり体重１ｋｇにつき本発明有効成分約１〜５０■であ
る。

本発明に係る抗腫瘍剤は、一般式（１）で表わされる化
合物の有効量に適当量の無毒性担体を配合し、任意慣用
の製剤方法を用いて投与用に調製することができる。即
ち、経口投与用に調製する場合は、軟カプセル、硬カプ
セル、錠剤、顆粒剤。

細粒剤、散剤、有効成分持続的解放剤、液剤、懸濁剤等
に調製され、非経口投与する場合は、注射剤、点滴剤、
座薬等に調製される。この場合、製剤化するに際しては
、無毒性担体、例えばアルコール、エステル類、ポリエ
チレングリコール誘導体、ソルビタン脂肪酸エステル類
、硫酸化脂肪アルコール類等の界面活性剤、アラビヤガ
ム、ゼラチン、ソルビット、トラガカントガム、ポリビ
ニルピロリドン等の結合剤、蔗糖、乳糖、デンプン。

結晶セルロース、マンニット、軽質無水ケイ酸、アルミ
ン酸マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム
、合成ケイ酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸水素
ナトリウム、リン酸水素カルシウム、カルボキシメチル
セルロースカルシウム等の賦形剤，ステアリン酸マグネ
シウム、タルク、硬化油等の滑沢剤、食塩、サッカリン
、オレンジ油、カンゾウエキス、クエン酸、ブドウ糖、
メントール、ユーカリ油、リンゴ酸等の矯味剤、矯臭剤
、ココナツツ油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸
カルシウム、ベニバナ油、大豆リン脂質等の懸濁剤、湿
潤剤、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）などのセルロ
ース、糖類等の炭水化物誘導体、アクリル酸メチル・メ
タアクリル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・メタア
クリル酸共重合体などのアクリル酸系共重合体、二塩基
酸モノエステル類等のポリビニル誘導体その他の皮膜形
成剤、コーティング助剤などの成分を用いて慣用の方法
で調製され、使用に供される。なお、粘膜適用の製剤、
特に座剤を調製する場合には、基剤としてカカオ脂、ラ
ウリンＩＩＷ　、ポリエチレングリコール、グリセロゼ
ラチン、ステアリン酸ナトリウム、又はそれらの混合物
が用いられる。更に注射剤も慣用の方法によって調製さ
れるが、注射用蒸留水に懸濁或いは乳化させる方法を採
用する場合は、恕濁化剤として、ソルビットシロップ、
メチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロ
ース、ステアリン酸アルミニウムゲル等が使用でき，ま
た乳化剤としてモノオレイン酸ソルビタン、ポリオキシ
エチレン硬化ヒマシ油、レシチン等を使用できる。

２浬Ｊの効果 本発明の新規化合物は抗腫瘍作用を有するので、抗腫瘍
剤として有用であり、この新規化合物を有効成分とする
抗腫瘍剤は、このように優れた抗腫瘍活性を有する上、
比較的低毒性であり、固型癌に対しても有効である。

次に、本発明化合物（１）の製造例を示す。

〔製造例１〕 ５−アセトキシ−１−ビニル−１．　Ｈ−ピラゾロ［３
．４−ｂ］ピラジン４．０８ｇをクロロホルム１００−
に溶解し、これにメタクロロ過安息香酸５、１８ｇを加
え、１時間加熱還流する。反応後、クロロホルムを留去
し、残渣に１０％Ｎ　ａ　Ｏ　Ｈ水溶液１０ａｌｌを加
え、１時間攪拌する。次いで、１０％塩酸を加えて酸性
とし、これを減圧乾固した後、エーテルでメタクロロ安
息香酸を温抽出する。残渣をメタノールから再結晶して
、５−ヒドロキシ−Ｌ　Ｈ−ピラゾロ［３．４−ｂ］ピ
ラジン（前記式（１ａ）の化合物，融点３００℃以上）
２．２０ｇ（収率８１％）を得る。

〔製造例２〕 ５−クロロ−１−ビニル−ＩＨ−ピラゾロ［３．４−ｂ
コビラジン３．６１ｇの１００−クロロホルム溶液にメ
タクロロ過安息香酸５．１８ｇを加え、１時間加熱還流
する。反応後、クロロホルム層を炭酸水素ナトリウム水
溶液で洗浄し、クロロホルムを留去し、残渣を得ろ。こ
の残渣をクロロホルムから再結晶して、５−クロロ−Ｉ
Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン（前記式（１ｂ）
の化合物，融点２１８〜２２０℃）２．５６ｇ（収率８
３％）を得る。

〔製造例３〜１：３〕 第１表に示す化合物に５％過マンガン酸カリウム水溶液
又はメタクロロ過安息香酸をそれぞれ反応させ、製造例
３〜１１の目的化合物を得た。

例えば、ｆｉＱ　ａ例３においては、５−メトキシ−１
−ビニル−Ｉ　Ｉニーピラゾロ［　３　、　１１　−　
ｂ　］ピラジン３．５２ｇをアセトン２０　ｍＱに溶か
し、５％過マンガン酸カリウム水溶１１２０ｉｎＮを加
え、５０℃で１時間攪拌する。反応後、析出した過マン
ガン酸を濾別し、塩酸酸性した後、クロロホルムで抽出
して５−メトキシ−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂコピラ
ジン（融点１８４〜１８５℃）０．８０ｇ　（収率２５
％）を得る。

また、Ｈｎ例１１においては、５−バラトルオキシ−１
−ビニル−Ｉ　Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂコピラジン２
．５２ｇをクロロホルム５０ｍＱに溶かし、これにメタ
クロロ過安息香酸２．５９ｇを加え、１時間加熱還流す
る。反応後、クロロホルムを留去し、残渣に１０％水酸
化ナトリウム水溶液１０ａ＋Ｑを加え、１時間室温で攪
拌する。次いで、１０％塩酸で中和し、クロロホルムで
抽出した後、このクロロホルム層を炭酸水素ナトリウム
水溶液で洗浄し、クロロホルムを留去して残渣を得る。

この残渣をヘキサンから再結晶して５−パラトルオキシ
−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン（融点１９６
〜１９８℃）１．７６ｇ　（収率７８％）を得る。

なお、第１表に製造例１〜１３で得られた目的化合物の
形状、融点およびこれらの化合物のＩ　ＲとＮ　Ｍ　Ｒ
による分析結果を示す。

〔製造例１４〜２２〕 ５−クロロ−Ｌ　Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン
（前記式（ｌｂ））に第２表に示す化合物をそれぞれ反
応させ、５−アミノ−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂコピ
ラジン誘導体（前記式（ｌｄ））を得た。

例えば、製造例１４においては、５−クロロ−１１１−
ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジン３．０９ｇとヘキシル
アミン１０ｄを封管中で反応させ、過剰のアミンを除い
て、５−ヘキシルアミン−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂ
コビラジン（融点１１８〜１１９℃）１．４２ｇ　（収
率６５％）を得る。

第２表に製造例１４〜２２で得られた目的化合物の形状
、融点およびこれらの化合物のＩＲとＮＭＲによる分析
結果を示す。

なお、製造例１８，１９．２１で得られた目的化合物は
、各々５−フェニルアミノ−１−ビニル−ＩＨ−ピラゾ
ロ［３，４−ｂ］ピラジン、５−パラクロロフェニルア
ミノ−１−ビニル−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラ
ジン、５−バラブチルフェニルアミノ−１−ビニル−Ｌ
　Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂｌピラジンに６０％硫酸を
反応させることによっても得ることができ、その収率は
各々７５％、７０％、６８％であった。

例えば、製造例１８においては、５−フェニルアミノ−
１−ビニル−ＩＨ−ピラゾロ［３，４−ｂコピラジン２
．３７ｇに６０％硫酸５ａｔ２を加え、５００Ｃで１時
間加温する。反応後、水酸化ナトリウム水溶液で中和し
、析出した結晶を酢酸エチルエステルで抽出する。次い
で、この酢酸エチルを留去し、残渣をクロロホルムから
再結晶して５−フェニルアミノ−Ｉ　Ｈ−ピラゾロ［３
，４−ｂｌピラジン（融点２０９〜２１０℃）１．５８
ｇ　（収率７５％）を得る。

次に、実験例により本発明化合物の抗腫瘍作用およびＬ
Ｄ、。を示す。

〔実験例〕

１．０Ｘ１０’個／−のＬ　　５１７８Ｙ　癌細胞を含
む培養液中にサンプル（前記製造例１〜２２の化合物）
をｌ　ＯＯｔｔｇ／ｍｌになるように加え、５％炭酸ガ
スを含む空気中で４８時間培養した後、癌細胞数を自動
血球計数装置で測定し、コントロールと比較して下記式
により、細胞増殖抑制率を調べた。結果を第３表に示す
。また、マウスにおけるＬＤ、。についても併記する。

癌細胞増殖抑制率（％）＝（Ａ−Ｂ）／Ａ　Ｘ　１００
Ａ：コントロールのＬ　　５１７８Ｙ　細胞数Ｂ：試験
群のＬ　　５１７８Ｙ　細胞数なお、培養液としては１
０％の牛の胎児血清と５０ＡＵＳ／＋ａＱのカナマイシ
ンを含む　ＲＰＭＩ−１６４０を用いた。

第３表 以下、実施例により本発明抗腫瘍剤の製剤例を示す。

〔実施例１〕カプセル剤 製造例５の化合物　　　　　　　２００ｇトウモロコシ
デンプン　　　　　１５０ｇタルク　　　　　　　　　
　　　　　８０ｇステアリン酸マグネシウム　　　　３
０ｇ以上を充分混和し、６０メツシユの金網を通過せし
めて粒度を調整した後、１０００個のゼラチンカプセル
に充填する。これは１日当たり１〜３カプセルを経口的
に投与する。

〔実施例２〕カプセル剤 製造例８の化合物　　　　　　　１８０ｇ無水ケイ酸　
　　　　　　　　　　　６０ｇステアリン酸マグネシウ
ム　　　　　５ｇをアセトンに溶解し、無水ケイ酸を加
えて分散した後、アセトンを留去し、粒状化する。この
粒子を６０メツシユの金網を通過せしめ、粒度を調整し
た後、ステアリン酸マグネシウムを加えて混合してなめ
らかにし、これを１０００個のゼラチンカプセルに充填
する。

〔実施例３〕錠剤 製造例１０の化合物　　　　　　２００ｇ乳Ｍ５０　ｇ トウモロコシデンプン　　　　　　３０ｇステアリン酸
マグネシウム　　　　　５ｇ上記各成分を混和し、６０
メツシユの金網を通過せしめ、粒度を調整した後、打錠
機を用いて１０００個の錠剤を製造する。これは１日当
り１〜３錠を経口的に投与する。

〔実施例４〕座剤 カカオ脂　　　　　　　　　　１２００ｇ製造例１７の
化合物　　　　　　１４０ｇカカオ脂を５０℃に加熱し
て溶解し、これに製造例１４の化合物を加えて均一にし
、次いでコンテナーの中に流し込み、冷却固化させて座
剤１０００個を製造する。

〔実施例５〕注射剤 製造例１６の化合物　　　　　　４００ｇポリオキシエ
チレン硬化ヒマシ油　　５００ｇ注射用蒸留水　　　　
　　　　全量１０ｍ１２上記の処方に従い、常法により
注射剤を調製し、１アンプル２＋ｎＱずつ充填する。

〔実施例６〕注射剤 製造例６の化合物　　　　　　　　５０ｍｇＮ′−二ト
キシメチルー５−フルオロウラシル２００ｍｇトリスア
ミノメタン　　　　　　８００ｍｇ注射用蒸留水　　　
　　　　　　　　適量上記の処方に従い、常法により注
射剤を調表し、１アンプル５ｍ１ｌずつ充填する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・（１） 〔但し、Ｒは水酸基、ハロゲン原子、−Ｏ−Ｒ’基また
   は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ’はアルキル基。 ベンジル基、フェニル基又はフェニル基の１以上の水素
   原子がハロゲン原子、アルキル基もしくはアルコキシ基
   で置換されたフェニル基である）を示す。〕で示される
   ５−置換−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン誘導
   体。 ２、下記式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・（１） 〔但し、Ｒは水酸基、ハロゲン原子、−Ｏ−Ｒ’基また
   は−ＮＨ−Ｒ’基（ここで、Ｒ’はアルキル基、ベンジ
   ル基、フェニル基又はフェニル基の１以上の水素原子が
   ハロゲン原子、アルキル基もしくはアルコキシ基で置換
   されたフェニル基である）を示す。〕で示される５−置
   換−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン誘導体を有
   効成分とすることを特徴とする抗腫瘍剤。