JPS6168419A - 消炎剤 - Google Patents
消炎剤Info
- Publication number
- JPS6168419A JPS6168419A JP59189877A JP18987784A JPS6168419A JP S6168419 A JPS6168419 A JP S6168419A JP 59189877 A JP59189877 A JP 59189877A JP 18987784 A JP18987784 A JP 18987784A JP S6168419 A JPS6168419 A JP S6168419A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- krill
- protease
- inflammatory
- oral administration
- genus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は消炎剤に関し、更に詳しくは、オキアミの水性
抽出物を有効成分とする消炎剤に関する。
抽出物を有効成分とする消炎剤に関する。
動物、植物、微生物由来のプロテアーゼは、広く臨床的
に内科、外科、眼科、産婦人科、泌尿器科、歯科口腔外
科の領域で、単純な正常反応性炎症、血栓性静脈炎、慢
性気道、副鼻腔炎、膿胸、血胸、乳汁うつ滞、乳腺炎な
どに用いられている。
に内科、外科、眼科、産婦人科、泌尿器科、歯科口腔外
科の領域で、単純な正常反応性炎症、血栓性静脈炎、慢
性気道、副鼻腔炎、膿胸、血胸、乳汁うつ滞、乳腺炎な
どに用いられている。
現在臨床的に用いられているプロテアーゼとしては、ト
リプシン、α−キモトリプシン、パンクレアチン、パパ
イン、プロメライン、プロナーゼ。
リプシン、α−キモトリプシン、パンクレアチン、パパ
イン、プロメライン、プロナーゼ。
プロクターゼ、セラペプターゼ（セラチオペプチダーゼ
）、セアプローゼＳ（セミアルカリプロテアーゼ）、モ
ンサントエンザイム等が挙げられる。
）、セアプローゼＳ（セミアルカリプロテアーゼ）、モ
ンサントエンザイム等が挙げられる。
しかしながら、これらのプロテアーゼは、経口投与し九
場合に、期待した程の効果が得られないことがあること
、過敏症、悪心、両部不快感、発疹、発赤などの副作用
を生ずることがあること、更には一定量経口投与した場
合にも個人によって効果発現の程度に差があるなどの問
題点を有するため、経口投与した場合に副作用がなく、
かつ強力な抗炎症作用を有する新規な消炎剤、就中消炎
酵素剤の開発が熱望されていた。
場合に、期待した程の効果が得られないことがあること
、過敏症、悪心、両部不快感、発疹、発赤などの副作用
を生ずることがあること、更には一定量経口投与した場
合にも個人によって効果発現の程度に差があるなどの問
題点を有するため、経口投与した場合に副作用がなく、
かつ強力な抗炎症作用を有する新規な消炎剤、就中消炎
酵素剤の開発が熱望されていた。
斯様な実情に鑑み、本発明者等は、経口投与が可能で、
原料面でも制約のない消炎酵素剤の開発研究を鋭意進め
てきたが、オキアミの抽出物に抗炎症作用があることを
見い出し、本発明を完成した。
原料面でも制約のない消炎酵素剤の開発研究を鋭意進め
てきたが、オキアミの抽出物に抗炎症作用があることを
見い出し、本発明を完成した。
すなわち本発明は、オキアミの水性抽出物を有の粉砕物
を水と混合することにより得られる。
を水と混合することにより得られる。
本オキアミの水性抽出物は、プロテアーゼ活性に富み、
オキアミ水性抽出物よシ通常の酵素分離・精製法で分離
したプロテアーゼは更に強い抗炎症能を示した。
オキアミ水性抽出物よシ通常の酵素分離・精製法で分離
したプロテアーゼは更に強い抗炎症能を示した。
オキアミの水性抽出物からのプロテアーゼ（以下、オキ
アミプロテアーゼということがある）の分離・精製方法
は、特に制限されず、公知の方法で実施される。例えば
、オキアミの磨砕物を水と混合し、放ｌｉｔ後、その上
澄部を採取し、その上澄部に硫酸アンモニウム（硫安）
等の塩を加え塩析する方法；アルコール、アセトン等の
有機浴媒を加え沈澱させる方法；限外口過（例えば、ア
ミコン社製、ダイアコロ−メンブレン ＹＣ）ｔ−用い
て濃縮後、凍結乾燥する方法等によシ単離し、ジエチル
アミンエチル（ＤＥＡＥ ）−セルローズ又はＤＩＡＩ
−セファデックスを用いるイオン交換クロマトグラフィ
ー及びセファデックスＧ−５０の様なゲルクロマトグラ
フィーを夫々単独若しくは併用して分別精製される。塩
析で単離した場合効成分とする消炎剤を提供するもので
ある。
アミプロテアーゼということがある）の分離・精製方法
は、特に制限されず、公知の方法で実施される。例えば
、オキアミの磨砕物を水と混合し、放ｌｉｔ後、その上
澄部を採取し、その上澄部に硫酸アンモニウム（硫安）
等の塩を加え塩析する方法；アルコール、アセトン等の
有機浴媒を加え沈澱させる方法；限外口過（例えば、ア
ミコン社製、ダイアコロ−メンブレン ＹＣ）ｔ−用い
て濃縮後、凍結乾燥する方法等によシ単離し、ジエチル
アミンエチル（ＤＥＡＥ ）−セルローズ又はＤＩＡＩ
−セファデックスを用いるイオン交換クロマトグラフィ
ー及びセファデックスＧ−５０の様なゲルクロマトグラ
フィーを夫々単独若しくは併用して分別精製される。塩
析で単離した場合効成分とする消炎剤を提供するもので
ある。
オキアミは、全世界の海洋に分布し、特に南極周辺に多
く、生息量は数億トン〜２０億トンといわれておシ、現
在の全世界漁獲量に匹適する５０００〜７０００万トン
／年の漁獲も可能と考えられているもので、原料供給の
面でも安定供給が可能である。
く、生息量は数億トン〜２０億トンといわれておシ、現
在の全世界漁獲量に匹適する５０００〜７０００万トン
／年の漁獲も可能と考えられているもので、原料供給の
面でも安定供給が可能である。
本発明で使用するオキアミとしては、スバーパ（５ｕｐ
ｅｒｂａ ）、クリスタａｏフイアス（ｃｒｙｓｔａｌ
ｌ。
ｅｒｂａ ）、クリスタａｏフイアス（ｃｒｙｓｔａｌ
ｌ。
ｒｏｐｈｉａｓ ）、フリシダ（ｆｒｉｇｉｄａ ）、
トリアカンサ（ｔｒｉａｃａｎｔｈａ ）、ペランティ
ニ（ｖｅｌｌａｎｔｉｎｉ ）、ローシロストリス（ｌ
ｏｕｇｉｒｏｓｔｒｉｓ ）、ルーセンス（１ｕｃｅｎ
ｓ ）、シミリ、ｘ、 （ａｉｍｉｌｉｓ ）、スピニ
７エラ（５ｐｉｎｉｆｅｒａ ） 、ｖフルバ（ｒｅｃ
ｕｒｖａ ）等のオイファウシア（′Ｅｕｐｈａｕｇｉ
ａ ）属；マカルーラ（ｍａ−ｃｕｒｕｒａ）、ビシナ
（ｖｉｃｉｎａ ）、グレガリア（ｇｒｅ−ｇａｒｉａ
）等のシサノエシサ（Ｔｈｙｓａｎｏｅｓｓａ ）属
等のいずれでも使用可能であって、特別な種類に限定さ
れない。
トリアカンサ（ｔｒｉａｃａｎｔｈａ ）、ペランティ
ニ（ｖｅｌｌａｎｔｉｎｉ ）、ローシロストリス（ｌ
ｏｕｇｉｒｏｓｔｒｉｓ ）、ルーセンス（１ｕｃｅｎ
ｓ ）、シミリ、ｘ、 （ａｉｍｉｌｉｓ ）、スピニ
７エラ（５ｐｉｎｉｆｅｒａ ） 、ｖフルバ（ｒｅｃ
ｕｒｖａ ）等のオイファウシア（′Ｅｕｐｈａｕｇｉ
ａ ）属；マカルーラ（ｍａ−ｃｕｒｕｒａ）、ビシナ
（ｖｉｃｉｎａ ）、グレガリア（ｇｒｅ−ｇａｒｉａ
）等のシサノエシサ（Ｔｈｙｓａｎｏｅｓｓａ ）属
等のいずれでも使用可能であって、特別な種類に限定さ
れない。
オキアミの水性抽出物は、オキアミ若しくはそは、−過
若しくは遠心分離後、脱塩、凍結乾燥して粉末化可能で
ある。脱塩の方法としては、透析、セファデックスＧ−
２５等を使用するゲル口過方法が例示される。
若しくは遠心分離後、脱塩、凍結乾燥して粉末化可能で
ある。脱塩の方法としては、透析、セファデックスＧ−
２５等を使用するゲル口過方法が例示される。
本発明のオキアミ水性抽出物の投与方法は特に限定され
ないが、経口投与の場合極めてすぐれた抗炎症能を示す
。
ないが、経口投与の場合極めてすぐれた抗炎症能を示す
。
オキアミ水性抽出物の投与量は、経口投与の場合、プロ
テアーゼ量として１０〜ｓｏｏ＃ｌｖ／日が好ましいが
、症状の程度によって更に投与ｉｋヲ増やすことも可能
である。
テアーゼ量として１０〜ｓｏｏ＃ｌｖ／日が好ましいが
、症状の程度によって更に投与ｉｋヲ増やすことも可能
である。
なお、・オキアミ水性抽出物であるプロテアーゼの毒性
はラットに対するＬＤｌｌｏ は腹腔的投与で５９Ａ
ｇ以上で６Ｄ、経口投与で２５ ｆＡ４以上であった。
はラットに対するＬＤｌｌｏ は腹腔的投与で５９Ａ
ｇ以上で６Ｄ、経口投与で２５ ｆＡ４以上であった。
本発明のオキアミ水性抽出物の抗炎症作用の機作は未だ
解明されていないがオキアミ水性抽出物に含有されるプ
ロテアーゼに高活性が認められる率からして該プロテア
ーゼが抗炎症作用を呈すると推測される。
解明されていないがオキアミ水性抽出物に含有されるプ
ロテアーゼに高活性が認められる率からして該プロテア
ーゼが抗炎症作用を呈すると推測される。
斜上の如く本発明のオキアミ水性抽出物、就中、オキア
ミ由来のプロテアーゼは、経口投与にて優れた抗炎症作
用を示し、低毒性で副作用もなく極めて優れた消炎酵素
剤である。
ミ由来のプロテアーゼは、経口投与にて優れた抗炎症作
用を示し、低毒性で副作用もなく極めて優れた消炎酵素
剤である。
以下に実施例ｔ−Ｓばて本発明を具体的に説明するが、
本発明はこれら実施例に制約されるものではない。なお
、実施例１におけるプロテアーゼ活性は次の方法によシ
測定した。
本発明はこれら実施例に制約されるものではない。なお
、実施例１におけるプロテアーゼ活性は次の方法によシ
測定した。
くプロテアーゼ活性の測定〉
ミルクカゼインＬｆ’ｋＯ１Ｉ Ｍ リン酸緩衝液（Ｐ
）（７，６）ｌ ００１１ＬＩＴＩＣ＠濁させ、１５分
間煮沸して完全に溶解したもの全基質溶液とした。同緩
衝液４−に基質溶液１ｍｊ４加え、試料をＱ、 ｌ ｍ
添加し、３０℃６０分間反応させた。１２％トリクロル
酢酸Ｑｌ＋ｊ加えて反応を停止後、室温で３０分以上放
置した。１０℃、１４０００Ｘｆ、２０分間遠心し、上
澄液の２８０ｎｍの吸収を測定した。活性単位は１０分
間に２８０ ｎｍにおける吸光度ｆｔｌだけ増加させる
活性ｆ：Ｌ単位とした。
）（７，６）ｌ ００１１ＬＩＴＩＣ＠濁させ、１５分
間煮沸して完全に溶解したもの全基質溶液とした。同緩
衝液４−に基質溶液１ｍｊ４加え、試料をＱ、 ｌ ｍ
添加し、３０℃６０分間反応させた。１２％トリクロル
酢酸Ｑｌ＋ｊ加えて反応を停止後、室温で３０分以上放
置した。１０℃、１４０００Ｘｆ、２０分間遠心し、上
澄液の２８０ｎｍの吸収を測定した。活性単位は１０分
間に２８０ ｎｍにおける吸光度ｆｔｌだけ増加させる
活性ｆ：Ｌ単位とした。
実施例１
凍結されたオキアミ〔オイファウシア・スパーバ（Ｅｕ
ｐｈａｕｓｉａ ５ｕｐｅｒｂａ ） ：） ’ｅ細か
く砕き、この粉砕物４００？をＯ，ｌ Ｍリン酸緩衝液
（ｐＪ（７，０）１．５を中に加え、ホモジナイザーを
用いて０℃で２分間磨砕した。次いでホモシネ−）ｉ、
０℃、６８００Ｘ ｔで３０分間遠心し上澄液を得た。
ｐｈａｕｓｉａ ５ｕｐｅｒｂａ ） ：） ’ｅ細か
く砕き、この粉砕物４００？をＯ，ｌ Ｍリン酸緩衝液
（ｐＪ（７，０）１．５を中に加え、ホモジナイザーを
用いて０℃で２分間磨砕した。次いでホモシネ−）ｉ、
０℃、６８００Ｘ ｔで３０分間遠心し上澄液を得た。
上澄液に硫酸アンモニウムを添加して６５チ飽和とし、
０℃、１時間数ｌ１ｉｆｌｋ、遠心して塩析沈澱画分を
採取した。次いで該両分ｉ ０．１ Ｍ ＩＪン酸緩衝
液ｐＨ７，５に分散し、４℃においてセロファンチュー
ブを使用して蒸留水に対し透析脱塩した後、凍結乾燥し
てプロテアーゼ７、１ ｆ １ｆ（得た。このもののプ
ロテアーゼ活性は３３５ Ｕ／ｆであった。
０℃、１時間数ｌ１ｉｆｌｋ、遠心して塩析沈澱画分を
採取した。次いで該両分ｉ ０．１ Ｍ ＩＪン酸緩衝
液ｐＨ７，５に分散し、４℃においてセロファンチュー
ブを使用して蒸留水に対し透析脱塩した後、凍結乾燥し
てプロテアーゼ７、１ ｆ １ｆ（得た。このもののプ
ロテアーゼ活性は３３５ Ｕ／ｆであった。
かくして得られたオキアミプロテアーゼの生理学的性質
は次の通りである。
は次の通りである。
■至適−
オキアミプロテアーゼの一一活性曲線金、ミルクカゼイ
ンを基質に用いて求めた。結果を第１図に示す。なお、
−緩衝液は−に応じて１００ｍＭの酢酸（ｐ）ｉ４．０
〜６．０）、リン酸（ｐＨ６，５〜８．０）、トリス−
塩酸（ｐＨ７，５〜９．５）の各緩衝液を用いた。オキ
アミプロテアーゼはｐ）（６，０〜９．０にかけてのか
な９広す領域で強い活性を示し、−特異性は広いが、至
適−はＰ＆（８付近と考えられる。
ンを基質に用いて求めた。結果を第１図に示す。なお、
−緩衝液は−に応じて１００ｍＭの酢酸（ｐ）ｉ４．０
〜６．０）、リン酸（ｐＨ６，５〜８．０）、トリス−
塩酸（ｐＨ７，５〜９．５）の各緩衝液を用いた。オキ
アミプロテアーゼはｐ）（６，０〜９．０にかけてのか
な９広す領域で強い活性を示し、−特異性は広いが、至
適−はＰ＆（８付近と考えられる。
■至適温度
ＰＨ７，６テミルクカゼインを基質として各温度（００
〜６０℃）で６０分間反応させて、オキアミプロテアー
ゼ活性に及ぼす温度の影響を調べた。結果を第２図に示
す。至適温度は４０℃付近であった。
〜６０℃）で６０分間反応させて、オキアミプロテアー
ゼ活性に及ぼす温度の影響を調べた。結果を第２図に示
す。至適温度は４０℃付近であった。
■−安定性
オキアミプロテアーゼをＰＨ３〜Ｐｌ（ｌｏｌ ３０℃
でブレインキュベーションを行い、その−安定性を調べ
た。結果を第３図に示す。オキアミプロテアーゼは弱酸
性〜弱アルカリ性では安定であるが、酢性側、アルカリ
側ではやや不安定であった。
でブレインキュベーションを行い、その−安定性を調べ
た。結果を第３図に示す。オキアミプロテアーゼは弱酸
性〜弱アルカリ性では安定であるが、酢性側、アルカリ
側ではやや不安定であった。
■温度安定性
オキアミプロテアーゼｔ−０，１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７，６）中で３０分間所定の温度に放置したのち、ミル
クカゼインを基質として活性を測定し、温度安定性を調
べた。結果を第４図に示す。
７，６）中で３０分間所定の温度に放置したのち、ミル
クカゼインを基質として活性を測定し、温度安定性を調
べた。結果を第４図に示す。
オキアミプロテアーゼは６０℃以上ではかなシ失活が認
められた。
められた。
実施例２
オキアミプロテアーゼの抗炎症作用：
ウィスター系雄性ラット（体重約１５０Ｐ）（１群ｌＯ
匹）に２０ ｑ、〜の酵素を０５扉ｌの生理食塩水に浴
解し経口投与した。３０分仮に、ラットの足耶にカラゲ
ニン１チ生理食塩水溶液ｔ−０，１ｍｊ注入し１時間ご
とに足各積を測定した。
匹）に２０ ｑ、〜の酵素を０５扉ｌの生理食塩水に浴
解し経口投与した。３０分仮に、ラットの足耶にカラゲ
ニン１チ生理食塩水溶液ｔ−０，１ｍｊ注入し１時間ご
とに足各積を測定した。
なお、対照として生理食塩水０．５ ｄ及びトリプシン
２０ ＷＡｆを０，５ゴの生理食塩水に浴解したものを
用いた。結果を第５図に示す。
２０ ＷＡｆを０，５ゴの生理食塩水に浴解したものを
用いた。結果を第５図に示す。
第１図は実施列１で得られたオキアミプロテアーゼ活性
の一依存性を示す図面、第２図は同温度依存性を示す図
面、第３図は同−安定性金示す図面、第４図は同温度安
定性を示す図面、第５図はラットにカラゲニンを経口投
与した後の浮腫率の経時変化を示す図面である。 以上
の一依存性を示す図面、第２図は同温度依存性を示す図
面、第３図は同−安定性金示す図面、第４図は同温度安
定性を示す図面、第５図はラットにカラゲニンを経口投
与した後の浮腫率の経時変化を示す図面である。 以上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、オキアミ水性抽出物を有効成分とする消炎剤。 ２、オキアミ水性抽出物がプロテアーゼである特許請求
の範囲第１項記載の消炎剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59189877A JPS6168419A (ja) | 1984-09-11 | 1984-09-11 | 消炎剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59189877A JPS6168419A (ja) | 1984-09-11 | 1984-09-11 | 消炎剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6168419A true JPS6168419A (ja) | 1986-04-08 |
| JPH0528208B2 JPH0528208B2 (ja) | 1993-04-23 |
Family
ID=16248670
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59189877A Granted JPS6168419A (ja) | 1984-09-11 | 1984-09-11 | 消炎剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6168419A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5945102A (en) * | 1994-11-22 | 1999-08-31 | Phairson Medical Inc. | Crustacean and fish derived multifunctional enzyme |
| US5958406A (en) * | 1994-11-22 | 1999-09-28 | Phairson Medical Inc. | Acne treatment with multifunctional enzyme |
| US6030612A (en) * | 1994-11-22 | 2000-02-29 | Phairson Medical Inc. | Antimicrobial uses of multifunctional enzyme |
| US6232088B1 (en) | 1995-02-08 | 2001-05-15 | Phairson Medical, Inc. | Treatment and prevention of immune rejection reactions |
-
1984
- 1984-09-11 JP JP59189877A patent/JPS6168419A/ja active Granted
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5945102A (en) * | 1994-11-22 | 1999-08-31 | Phairson Medical Inc. | Crustacean and fish derived multifunctional enzyme |
| US5958406A (en) * | 1994-11-22 | 1999-09-28 | Phairson Medical Inc. | Acne treatment with multifunctional enzyme |
| US6030612A (en) * | 1994-11-22 | 2000-02-29 | Phairson Medical Inc. | Antimicrobial uses of multifunctional enzyme |
| US6232088B1 (en) | 1995-02-08 | 2001-05-15 | Phairson Medical, Inc. | Treatment and prevention of immune rejection reactions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0528208B2 (ja) | 1993-04-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2760429B2 (ja) | 抗−歯垢および抗齲歯剤 | |
| AU718220B2 (en) | Multifunctional enzyme | |
| Snipe et al. | Studies on Botulinus Toxin: 3. Acid Precipitation of Botulinus Toxin [with Discussion] | |
| CA1198697A (en) | Thrombolytic agent | |
| US4439423A (en) | Chymopapain and method for its use | |
| US5560935A (en) | Physiologically active substances extracted from activated tissues | |
| JP4633926B2 (ja) | 炎症または掻痒の予防または治療方法および手段 | |
| JP2003502071A (ja) | 魚類セリンプロティナーゼ及びそれらの薬品及び化粧品への利用 | |
| JPH02257853A (ja) | 非リン酸化ペプチドおよびこれを含有する栄養剤組成物 | |
| US4719108A (en) | Chymopapain composition and method for its use | |
| JPS62174023A (ja) | 抗血液凝固物質、その製法及びそれを有効成分とする抗血液凝固剤 | |
| IE59972B1 (en) | Lipases and lipase extracts, their preparation process and their therapeutic use. | |
| US5945102A (en) | Crustacean and fish derived multifunctional enzyme | |
| US5958406A (en) | Acne treatment with multifunctional enzyme | |
| US3646193A (en) | Iga antibody from lacteal fluids | |
| US4374926A (en) | Method for the production of improved chymopapain | |
| JPS6042207B2 (ja) | 胎盤よりプラスミノ−ゲン型活性化合物を抽出する方法 | |
| SU1012786A3 (ru) | Способ получени протеинового комплекса,стимулирующего секрецию инсулина | |
| JPS6130527A (ja) | 血栓溶解剤 | |
| JPS6168419A (ja) | 消炎剤 | |
| US4479937A (en) | Process of treating inflammation with human urinary thiol protease inhibitor | |
| Taylor et al. | Observations on the etiologic relationship of achylia gastrica to pernicious anemia. VII. Resemblances between the proteolytic activity of normal human gastric juice on casein in neutral solution and the activity of the intrinsic factor | |
| JP2805032B2 (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| US3522229A (en) | Glycoprotein from saliva or salivary glands having gastric acid secretion inhibitory as well as anti-ulcerative activity and method of collecting the same | |
| FR2499409A1 (fr) | Agent therapeutique a base d'une protease acide, pour le traitement des troubles allergiques, des maladies avec immunocomplexe et des tumeurs |