JPS6141554B2 - - Google Patents
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- JPS6141554B2 JPS6141554B2 JP14326979A JP14326979A JPS6141554B2 JP S6141554 B2 JPS6141554 B2 JP S6141554B2 JP 14326979 A JP14326979 A JP 14326979A JP 14326979 A JP14326979 A JP 14326979A JP S6141554 B2 JPS6141554 B2 JP S6141554B2
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は0.05g/dl以上のグルコン酸を含有す
る液体培地にL−ヒスチジン生産能を有する微生
物を培養し、培養液中に生成蓄積したL−ヒスチ
ジンを採取する発酵法によるL−ヒスチジンの製
造方法に関し、その目的とするところはL−ヒス
チジンの生成収率を向上せしめ、経済的に優れた
L−ヒスチジンの製造方法を提供することにあ
る。 従来発酵法によるL−ヒスチジンの生産に関し
ては通常の炭素源、窒素源から直接L−ヒスチジ
ンを生産する方法としてグルタミン酸生産菌から
誘導された変異株を用いる方法(特公昭51−
24594)などが知られている。本発明者らは更に
有利なL−ヒスチジンの製造法を確立するために
鋭意研究を進めたところ、L−ヒスチジン生産能
を有する微生物を用いてL−ヒスチジンを生産す
る場合に、培養液中にグルコン酸を添加して培養
するとL−ヒスチジンの生成収率が向上すること
を見出し本発明を完成した。 本発明において用いられる微生物はブレビバク
テリウム属、コリネバクテリウム属、アルスロバ
クター属、ミクロコツカス属及びバチルス属に属
する微生物を親株として通常の変異誘導並びにス
クリーニング法により採取した各種ヒスチジン生
産菌である。 直接生産菌としてはヒスチジンのフイードバツ
ク阻害及びリプレツシヨンに抵抗性を有する変異
株等の薬剤耐性変異株などがあり、具体的には2
−チアゾールアラニン、1・2・4−トリアゾー
ル3−アラニン、3−アミノ−1・2・4−トリ
アゾール、ヒドラジンイミダゾール、プロピオン
酸、α−メチルヒスチジン、あるいはサルフア剤
(スルフアダイアジン、スルフイソキサゾール、
スルフアメラジン、スルフアグアニジン、スルフ
アフエナゾール、スルフアメトキシピリタジン、
スルフアチアゾール)などに耐性を有する菌株と
して選ばれる。又メチオニン、プロリン要求性等
の栄養要求性を付加したL−ヒスチジン生産菌も
使用できる。 培養に際して使用するグルコン酸の添加量は、
その他の培養条件にもよるが、通常培地中に0.05
%〜2%程度である。 本発明方法によりL−ヒスチジンを生産せしめ
るに当り使用する発酵培地は炭素源、窒素源無機
塩類、生育促進因子及び使用する微生物が要求す
る栄養物質を含有する通常の栄養培地を用いるこ
とができる。用いられる炭素源としてはグルコー
ス、糖蜜、デンプン加水分解物などの糖類、安息
香酸、酢酸などの有機酸、エタノールなどのアル
コール類、さらに菌を選べば炭化水素なども使用
できる。窒素源としては硫安、硝安、塩安、リン
安、尿素、アンモニア、その他を使用できる。 培養条件は通気培養がよく、発酵温度は24〜37
℃、発酵日数は通常2〜7日である。発酵開始時
及び培養中のPHは5.0〜9.0がよく、PHの調整には
無機あるいは有機の酸、アルカリ性物質、さらに
は尿素、炭酸カルシウム、アンモニアガスなどを
使用することができる。 発酵液からのL−ヒスチジンの採取は通常イオ
ン交換樹脂法、その他の公知の方法を組合せるこ
とにより行われる。 L−ヒスチジンの定量はKapeiler−alder反応
〔Biochem.Z.、264 131(1933)〕を用いる比色
法によつた。 以下実施例により本発明を具体的に説明する。 実施例 1 グルコース10g/dl、(NH4)2SO45g/dl、
KH2PO40.1g/dl、MgSO4・7H2O0.04g/dl、
FeSO4・7H2O及びMnSO4・4H2O各1mg/dl、ビ
チオン500μg/、サイアミン塩酸塩50μg/
、大豆タンパク塩酸加水分解液(総窒素7%)
0.3mg/dl、CaCO35g/dl(別殺菌添加)、PH7.2に
調整した培地20mlを500ml振とうフラスコに分注
した。殺菌後予めブイヨンスラスト上で生育させ
たブレビバクテリウム・フラバムATCC14067か
ら誘導され2−チアゾールアラニン、スルフアダ
イアジン及びコバラミンに耐性を有する変異株
AJ3620(FERM−P2316)を一白金耳接種し、そ
れらを31℃にて72時間培養を行なつた。なお対照
としてグルコン酸無添加で同様に培養した。結果
は第1表の如くであつた。 AJ3620のグルコン酸0.3%添加し、上記の如く
培養した培養終了液から遠心分離によつて菌体及
びカルシウム塩を除いて得た上澄液1を、強酸
性イオン交換樹脂アンバーライトIR−120(H+
型)に通過させL−ヒスチジンを吸着させた。そ
の後3%アンモニア水で吸着したL−ヒスチジン
を溶出し、溶出液を減圧濃縮した。濃縮液を冷却
し放置したところ、L−ヒスチジンの結晶が析出
した。結晶を乾燥し、6.7gを得た。
る液体培地にL−ヒスチジン生産能を有する微生
物を培養し、培養液中に生成蓄積したL−ヒスチ
ジンを採取する発酵法によるL−ヒスチジンの製
造方法に関し、その目的とするところはL−ヒス
チジンの生成収率を向上せしめ、経済的に優れた
L−ヒスチジンの製造方法を提供することにあ
る。 従来発酵法によるL−ヒスチジンの生産に関し
ては通常の炭素源、窒素源から直接L−ヒスチジ
ンを生産する方法としてグルタミン酸生産菌から
誘導された変異株を用いる方法(特公昭51−
24594)などが知られている。本発明者らは更に
有利なL−ヒスチジンの製造法を確立するために
鋭意研究を進めたところ、L−ヒスチジン生産能
を有する微生物を用いてL−ヒスチジンを生産す
る場合に、培養液中にグルコン酸を添加して培養
するとL−ヒスチジンの生成収率が向上すること
を見出し本発明を完成した。 本発明において用いられる微生物はブレビバク
テリウム属、コリネバクテリウム属、アルスロバ
クター属、ミクロコツカス属及びバチルス属に属
する微生物を親株として通常の変異誘導並びにス
クリーニング法により採取した各種ヒスチジン生
産菌である。 直接生産菌としてはヒスチジンのフイードバツ
ク阻害及びリプレツシヨンに抵抗性を有する変異
株等の薬剤耐性変異株などがあり、具体的には2
−チアゾールアラニン、1・2・4−トリアゾー
ル3−アラニン、3−アミノ−1・2・4−トリ
アゾール、ヒドラジンイミダゾール、プロピオン
酸、α−メチルヒスチジン、あるいはサルフア剤
(スルフアダイアジン、スルフイソキサゾール、
スルフアメラジン、スルフアグアニジン、スルフ
アフエナゾール、スルフアメトキシピリタジン、
スルフアチアゾール)などに耐性を有する菌株と
して選ばれる。又メチオニン、プロリン要求性等
の栄養要求性を付加したL−ヒスチジン生産菌も
使用できる。 培養に際して使用するグルコン酸の添加量は、
その他の培養条件にもよるが、通常培地中に0.05
%〜2%程度である。 本発明方法によりL−ヒスチジンを生産せしめ
るに当り使用する発酵培地は炭素源、窒素源無機
塩類、生育促進因子及び使用する微生物が要求す
る栄養物質を含有する通常の栄養培地を用いるこ
とができる。用いられる炭素源としてはグルコー
ス、糖蜜、デンプン加水分解物などの糖類、安息
香酸、酢酸などの有機酸、エタノールなどのアル
コール類、さらに菌を選べば炭化水素なども使用
できる。窒素源としては硫安、硝安、塩安、リン
安、尿素、アンモニア、その他を使用できる。 培養条件は通気培養がよく、発酵温度は24〜37
℃、発酵日数は通常2〜7日である。発酵開始時
及び培養中のPHは5.0〜9.0がよく、PHの調整には
無機あるいは有機の酸、アルカリ性物質、さらに
は尿素、炭酸カルシウム、アンモニアガスなどを
使用することができる。 発酵液からのL−ヒスチジンの採取は通常イオ
ン交換樹脂法、その他の公知の方法を組合せるこ
とにより行われる。 L−ヒスチジンの定量はKapeiler−alder反応
〔Biochem.Z.、264 131(1933)〕を用いる比色
法によつた。 以下実施例により本発明を具体的に説明する。 実施例 1 グルコース10g/dl、(NH4)2SO45g/dl、
KH2PO40.1g/dl、MgSO4・7H2O0.04g/dl、
FeSO4・7H2O及びMnSO4・4H2O各1mg/dl、ビ
チオン500μg/、サイアミン塩酸塩50μg/
、大豆タンパク塩酸加水分解液(総窒素7%)
0.3mg/dl、CaCO35g/dl(別殺菌添加)、PH7.2に
調整した培地20mlを500ml振とうフラスコに分注
した。殺菌後予めブイヨンスラスト上で生育させ
たブレビバクテリウム・フラバムATCC14067か
ら誘導され2−チアゾールアラニン、スルフアダ
イアジン及びコバラミンに耐性を有する変異株
AJ3620(FERM−P2316)を一白金耳接種し、そ
れらを31℃にて72時間培養を行なつた。なお対照
としてグルコン酸無添加で同様に培養した。結果
は第1表の如くであつた。 AJ3620のグルコン酸0.3%添加し、上記の如く
培養した培養終了液から遠心分離によつて菌体及
びカルシウム塩を除いて得た上澄液1を、強酸
性イオン交換樹脂アンバーライトIR−120(H+
型)に通過させL−ヒスチジンを吸着させた。そ
の後3%アンモニア水で吸着したL−ヒスチジン
を溶出し、溶出液を減圧濃縮した。濃縮液を冷却
し放置したところ、L−ヒスチジンの結晶が析出
した。結晶を乾燥し、6.7gを得た。
【表】
実施例 2
ブレビバクテリウム・ラクトフエルメンタム
FERM−P1563、ミクロバクテリウム・アンモニ
アフイラムFERM−P803、エシエリヒア・コリ
ーFERM−P5035、及びバチルス・ズブチリス
FERM−P2672をそれぞれ実施例1と同様の方法
により培養した。結果は第2表の如くであつた。
FERM−P1563、ミクロバクテリウム・アンモニ
アフイラムFERM−P803、エシエリヒア・コリ
ーFERM−P5035、及びバチルス・ズブチリス
FERM−P2672をそれぞれ実施例1と同様の方法
により培養した。結果は第2表の如くであつた。
【表】
【表】
Claims (1)
- 1 グルコン酸を0.05g/dl以上含有する液体培
地にL−ヒスチジン生産能を有する微生物を培養
し、培養液中に生成蓄積したL−ヒスチジンを採
取することを特徴とする発酵法によるL−ヒスチ
ジンの製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14326979A JPS5668397A (en) | 1979-11-07 | 1979-11-07 | Production of l-hystidine |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14326979A JPS5668397A (en) | 1979-11-07 | 1979-11-07 | Production of l-hystidine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5668397A JPS5668397A (en) | 1981-06-09 |
JPS6141554B2 true JPS6141554B2 (ja) | 1986-09-16 |
Family
ID=15334814
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP14326979A Granted JPS5668397A (en) | 1979-11-07 | 1979-11-07 | Production of l-hystidine |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5668397A (ja) |
-
1979
- 1979-11-07 JP JP14326979A patent/JPS5668397A/ja active Granted
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5668397A (en) | 1981-06-09 |
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