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JPS5855754A - アミノ酸分析方法 - Google Patents

アミノ酸分析方法

Info

Publication number
JPS5855754A
JPS5855754A JP15362781A JP15362781A JPS5855754A JP S5855754 A JPS5855754 A JP S5855754A JP 15362781 A JP15362781 A JP 15362781A JP 15362781 A JP15362781 A JP 15362781A JP S5855754 A JPS5855754 A JP S5855754A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
amino acid
separation column
supplied
separation
analysis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP15362781A
Other languages
English (en)
Inventor
Yoshio Fujii
芳雄 藤井
Mitsuo Ito
三男 伊藤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitachi Ltd
Original Assignee
Hitachi Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hitachi Ltd filed Critical Hitachi Ltd
Priority to JP15362781A priority Critical patent/JPS5855754A/ja
Publication of JPS5855754A publication Critical patent/JPS5855754A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/96Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation using ion-exchange

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアミノ酸混合物試料を簡便に分離分析する方法
に関する。
生体液アミノ酸は、尿や血液等の生体液中に含まれてい
るアミノ酸および動植物中に存在している遊離アミノ酸
を指し、その種類は多い。
従来、アミノ酸分析計を用いて生体液アミノ酸を分離分
析する場合には、イオン交換樹脂を充填した分離カラム
の温度を34C〜68Cの間で5段階に昇温させるとと
もに、5種類の緩衝液を順次切換えて分離カラムに供給
していた。このため温度を段階的に変えて維持する機構
が必要であり、次回の分析のために分離カラムおよび循
環恒温槽を急冷させるだめの設備が必要であった。
本発明の目的は、カラム温度を変えることなく、従来と
同程度の分析時間でアミノ酸混合物試料を分析し得るア
ミノ酸分析方法を提供することにある。
本発明の特徴は、分離カラムの温度を変化させることな
く一定温度に維持し、その分離カラムには濃度の異なる
クエン酸リチウムおよび塩化リチウムを含んだ複数種の
緩衝液を混合した液を供給し、この混合液中のリチウム
濃度が次第に高まるように複数種の緩衝液の混合割合を
変えることにより、上記目的を達成することにある。
以下、本発明の詳細な説明する。
第1図は本発明を適用した一実施例の分析計の概略構成
図である。分離カラム10には強酸性陽イオン交換樹脂
例えばスチレンとジビニルベンゼンの共電分体からなる
樹脂が充填されている。A緩衝液1、B緩衝液2、再生
液3はそれぞれ第1電磁弁5、第2電磁弁6、第3電磁
弁7に接続されており、これらの電磁弁はマイクロコン
ピュータを備えだ電磁弁コントローラ17によって任意
に0N−OFFコントロールできる。これもの液を混合
液送液ポンプ8でサンプラ9を経由して分離カラム10
に送る。分離カラム10は循環恒温槽11によって一定
温度に保たれている。一方、検出試薬4はポンプ12に
よってミキサ13に送られ、反応コイル14で溶出液と
混合し、発色し、またはけい光が発せられ、検出器15
で検出される。それを記録計16で記録する。
この例では、分離カラム10の温度龜常時35Cの一定
に維持される。緩衝液の組成および再生液の組成は第1
表に示す通シである。検出試薬4にはニンヒドリン試薬
を用いているが、けい光検出試薬を用いてもよい。ニン
ヒドリン試薬を用い第    1    表 る場合には検出器15として44(1@Fおよび570
nmの単色光を測定し得る可視域吸光光度計を設ける。
第2図は第1図の実施例におけるA緩衝液1とB緩衝液
2の混合割合を示す。分離カラム10に供給される混合
液のリチウム礫度およびpHは、段階的に高められる。
両緩衝液の混合割合は、対応する電磁弁5.6の数秒毎
の開時間を切換え。
全体として開時間の比率を変えることによって変化せし
める。第3図は以上のような方法で生体液アミノ酸試料
を分離した結果を示すクロマトグラムである。36種の
アミノ酸成分を約220分で分離することができ、これ
は従来の昇温−5段階溶離法による分離時間約200分
よりわずかに多いだけである。
上述の実施例によれば、カラム温度を変える必要がない
ので、カラム温度の自動切換機能やプログラム機能が不
要になり装置が簡便になって、操作がやさしくなる。ま
た、カラム温度の急冷機能が不要になるので、冷却装置
や、水道水の供給が不要になる。緩衝液の混合比が伺%
でも何ステップでも任意に切換えることができ、2種の
緩衝液だけでも実質的に、伺種類もの緩衝液を使用する
のと同じ効果が得られる。(もちろん、緩衝液Bの割合
を上げることばかりでなく下げることも可能である。) 以上説明したように、本発明によれば、カラム温度を変
化させなくても比較的短時間でアミノ酸混合物試料の分
離分析が可能となり、温度切換機能やプログラムを必要
としない分析方法が可能となる′。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の一実施例を説明するだめの図、第2図
は第1図の実施例における混合状態を説明する図、第3
図は第1図の実施例で得られた生体液アミノ酸試料のク
ロ・マドグラムを示す。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1、 イオン交換樹脂を充填した分離カラムにアミノ酸
    混合物試料を供給し、上記分離カラムに緩衝液を流通し
    てアミノ酸成分を相互分離するアミノ酸分析方法におい
    て、上記分離カラムの温度を変化させることなく一定温
    度に維持し、上記分離カラムには濃度の異なるクエン酸
    リチウムおよび塩化リチウムを含んだ複数種の緩衝液を
    混合した液を供給し、上記混合液中のリチウム濃度が次
    第に高まるように上記複数種の緩衝液の混合割合を変え
    ることを特徴とするアミノ酸分析方法。
JP15362781A 1981-09-30 1981-09-30 アミノ酸分析方法 Pending JPS5855754A (ja)

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JPS5855754A true JPS5855754A (ja) 1983-04-02

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ID=15566628

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JP (1) JPS5855754A (ja)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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