JPS5835120A - 血液循環改善剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は末梢血液循環不全を賦活改善したり。

血球細胞を安定化するなど血管内の循環不全をなりシ、
あるいは体外循環装置における血液。

血球の流動障害をなりシ、これ等を改善する薬剤に関す
るものである。

一般に、生理的に正常なヒトあるいは動物の血液には１
本来主として血球よりなる不溶性の固型成分が５０％以
上も含まれている。しかも血液中の−これ等の成分は、
細血管あるいは毛細血管のような内径５μ程度の微小空
隙を高速度で通過するが、この時赤血球、白血球等の血
球の直径はしばしば、血管の内径より大きく５〜１０μ
である。従って、このような場合に血流がとどこおりな
く血管内を通過するためには、これら血管が伸展する−
か、あるいは血球自体が変形しなければならない。一方
本発明者等は血球細胞と血管の間に生ずる摩擦が微小循
環に於ける血流に重要な役割を演じていることを見い出
しており、細胞潤滑作用の低下によって次の諸疾患が誘
発九逸されると考えられる。即ち、末梢動脈血栓症、静
脈血栓症、脳血栓症、虚血性心疾患、凝固系機能先進に
よる血栓症、その他の微小循環障害、さらにはまた癌患
者、あるいは抗癌剤使用患者における血小板等の血球の
凝集症あるいは溶血に起因する出血症等である。

更に９本来進展性の乏しい体外循環装置に於いては、短
時間の使用によっても、しばしば目づまり現象を呈し、
血流に障害を生ずると共に溶血をも伴ってくる。

本発明者らは、これらの疾病の治療および予防を目的と
して、血球等が血管を通過する際の血球細胞膜損傷を防
止し、微小血管空隙の血球通過を容易ならしめる方法に
ついて、長期にわたり研究を続けており、既に安定な蛋
白質溶液の製造法（特開昭５３−３７１８７　）　、糖
蛋白質を用いた末梢循環改善剤（特開昭５６−１５２１
３）およびゼラチンを用いた末梢循環改善剤（特願昭５
５−１３２３３６　）について特許出願を行ってきた。

今回可溶化コラーゲンが、赤血球、白血球、血小板、骨
髄細胞、その他の血球細胞等の血液固型成分の凝固、凝
集、溶血を阻止し、これによっても毛細血管、微小血管
１人工膜（例えばニトロセルロース膜、酢酸セルロース
膜、テフロン膜等）１人工細管９体外循環装置２人工心
肺装置における通過性あるいは透過性を容易ならしめる
と同時に、微細間隙における停滞を防止あるいは軽減し
、更に血球細胞膜を安定化し、血球成分の微小循環の賦
活化を行う作用を見出し。

本発明を完成した。

本発明は可溶化コラーゲ／を有効成分とすることを特徴
とする血液循環改善剤に関するものである。

本発明の有効成分であるコラーゲンは、たとえば＋　Ｈ
ａｕｒｏｗｉｔｚ著＋　Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　
ａｎｄ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓ、　
２１２〜２１７　（１９６３）　＋　その他に既に公知
の物質であり、容易に動物の皮膚組織、骨等より可溶化
し製造可能であり、又、市販のコラーゲンで十分精製さ
れたものであれば使用することができる。また非溶解性
コラーゲンに対してマレイル化、サクシニール化、シト
ラコニル化。

フォルミル化等化学修飾反応をおこさせることによって
、あるいはオートクレーブ処理、塩酸処理、液体アンモ
ニア処理、ブロムシア／処理。

コラゲナーゼ処理、エラスターゼ処理等の部分加水分解
を行うことによって溶解度を高め、可溶化したものを用
いることが可能である。

本発明の血液循環改善剤は一般に、注射剤として提供さ
れるが、この注射剤は生理食塩水。

栄養剤２点滴剤、血液剤等（・かなる注射剤とも組合せ
ることができる。これ等の場合可溶化コラーゲ／の濃度
は００１〜１０％程度で十分である。更に別の使用態様
として赤血球等の血球細胞浮遊液、血清、血しょう１人
工栄養補液、紀胞苛濁液ある（・は血液に１μｇ／ｒｎ
ｌ〜２００■／ｍｔを添加して使用することもできる。

更に又９体外循環装置に対しても上記に準じて使用する
ことができる。本発明の血液循環改善剤は体外循環装置
等の前処理剤、保全剤又は血球膜保護剤として、あるい
は注射剤として体外循環装置内に。

または静脈内、動脈内に投与することが好ましい。投与
量は体重６０ｋｇ換算で、０１〜１０ｇを１日１〜３回
投与するのが好ましいが、大量投与でも安全である。ま
た脳内等の局所細動脈内に投与する場合には、疾患の種
類および程度に応じて０．０１〜１．０　ｇを１日１〜
１０回投与するのが好ましい。

次に本発明の実験例及び実施例を示す。

実験例１．可溶化コラーゲンの製法 方法ＩＳ（コラーゲンのサクシニル化）不溶性コラーゲ
ン（メルク社製）ＩｇＫ水または７％重炭酸ソーダ水溶
液１０ｍｔを加え。

１２０ｔＺ’で０５〜２時間オートクレーブで処理する
。つ℃・で室温に冷却後、　ｐＨをｐＨスタ、トで８．
０　（ｐＨ７，５〜ｐＨ９，５の任意のｐＨでも反応は
同様に進行する。）に調整し。

細かく砕℃・た無水コ・・り酸１ｇを少量ずつ時間をか
けて加え、２〜３時間以上反応させる。反応後遠心分離
（２，００Ｏｒｐｍ　）して上清を蒸留水にて透析する
。それを凍結乾燥して、サクンニル化コラーゲノの標品
■約５００　ｔｌｌｇを得た。収量約５０％（ｗ／ｗ　
’）。

方法■；（コラーゲンの部分加水分解及びサクシニル化
）不溶性コラーゲ７２ｇに６規定塩酸２０＋ｎＺを加え
、２〜３時間室温で処理する。次に氷冷して５０％−Ｎ
ａＯＨ水＠液を加え、ｐＨを中性となす。さらに遠心分
離（２，００Ｏｒｐｍ　）の後、上清を水にて透析する
。透析中に°沈澱を生ずるが、上清を凍結乾燥して標品
■約３３０　ｆｉｇを得た。透析中の沈澱物は、方法Ｉ
に準じて調製後。

サクシニル化して標品■約４４０ｆＱｇとなした。

なお６規定塩酸の代りに濃塩酸または硫酸を使用しても
、より短時間で同様の結果が得られる。

実験例２．赤血球の微細間隙通過性におよぼす作用 ヒツジ血液を０．０１モ杵ｔリン酸で緩衝した０、１５
モＪｙ／−＋ｌ生理食塩水（ｐＨ７，２）で適宜希釈し
、２％（ｖ／ｖ　）浮遊液とする。

メンブレンフィルターは３μの平均ポアサイズを有する
直径１３ｍｍのものを珀いる。

生理食塩水に、無添加、可溶化コラーゲン標品■、■及
び■（０，０５％）、ゼラチン（０，０５％）。

アルブミン（０，０５％）、デキストラン（０，０５％
）を個別に溶解した溶液１容を上記２％浮遊液１容と混
和し、３７Ｃで緩やかに３０分間振とうした。

次にこの混合物を１　ｍｌとり、　８０　ｍｍＨｇ／Ｃ
ｌの加圧下でメンプレ／フィルターによりろ過した。ろ
液を０．５　ｍＺ採取し、軽く遠心分離しく　１．５０
Ｏｒｐｍ、　２分間）、得られた上清の吸光度を４２０
　ｎｍにて測定し溶血分を算出した。また沈査に脱イオ
ン水５１１Ｚを加えて低張下に溶血させ、その吸光度を
測定し９通過分を算出した。その結果は図１゜２に示し
た如くである。これにより明らかな通り、生理食塩水の
みの無添加の対照と比較して可溶化コラーゲン（０，０
５％）添加によって赤血球の通過率は顕著に増加した。

゛また。ろ過操作時（細隙通過時）の溶血率をみると。

３μのメンプレンフィルター上での８０　ｍｍＨｇ／ｃ
ｗｌ加圧によるヒツジ赤血球の溶血率は、無添加の場合
約２４％溶血を生ずるが、可溶化コラーゲンを添加する
ことにより溶血は約Ｋに低下した。

このことは９本薬剤が加圧下に微小間隙を通過する場合
、血球細胞膜の安定化に貢献し。

溶血を防止することを示している。

実験例３゜ 可溶化コラーゲンの濃度（０〜１．００１１　）以外そ
の結果は第３図に示されるが、赤血球の、透過率は可溶
化コラーゲン０．５■／ｍｌでほぼ上限に達することが
分る。

実験例４゜ 可溶化コラーゲンの毒性について実験した結果が第１表
に示されるが、毒性は極めて微弱であり、従りて循環改
善の目的、あるいは体外循環装置の潤滑保全剤として極
めて安全であることを示している。

第１表 マウス　　　）　１，０００　　　　　腹腔内、皮下ラ
ット　　　＞１．０００　　　　　腹腔内、皮下ウサギ
　　　）１，０００　　　　　腹腔内、皮下実施例　１
゜ 可溶化コラーゲン１０■を５％マルトース入り生理食塩
水１０ｍ７にとかし、動脈内投与注射剤とする。

実施例２゜ 可溶化コラーゲン１００■を５％ブドウ糖入り０．１９
重炭酸ナトリウム５０ｍＡにとかし、静脈内投与用注射
剤とする。

実施例　３゜ 可溶化コラーゲン１．０ｇを５％マルトースリンゲル５
００　ｍｌにとかし１点滴用静脈内投与用注射剤とする
。

実施例４゜ 可溶化コラーゲン０．１ｇを全血液輸血量２００　ｍｌ
にとかし、輸血剤とする。

実施例　５゜ 可溶化コラーゲノ術ｇを濃厚赤血球輸液１００ｍ１４に
とかし、輸血剤とする。

実施例　６ 可溶化コラーゲ７５〜２０ｇ／Ｚを含むり／ゲル液を調
製し２体外循環装置作動開始前の前処理剤とする。

実施例　７ １０％可溶化コラーゲノ溶液を調製し９体外循環装置作
動時に側管より注入して使用する潤滑保全剤及び血球膜
保護剤とする。

【図面の簡単な説明】

加対照群について、赤血球の微小間隙（メツプレンフィ
ルター、平均間隙３μ）の通過性の光道を比較したもの
である。 第２図は上記対照群について、赤血球の溶血に対する保
護安定化作用を比較したものである。 第３図は可溶化コラーゲンの各濃度における赤血球の微
小間隙透過率と溶血率の関係を示したものである。 特許出願人　山之内製薬株式会社 代理人　　佐々木　晃　− 第１図 第２図 ；ｔｍ呼（％） 第３図 シー 弓；聯化コラー与゛パ；ｌ崖０Ｖ社）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ＋１１　　可溶化コラーゲンを有効成分とすることを特
   徴とする血液循環改善剤。 （２）　　注射剤としてなる特許請求の範囲第１４記載
   の血液循環改善剤。　　　　　− （３）体外循環装置に於ける前処理剤、保全剤または血
   球膜保護剤としてなる特許請求の範囲第１項記載の血液
   循環改善剤。