JPH0343093A - 新規アントラサイクリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は式（Ｉ） 〔式中Ｒ１は糖残基Ｒｏａまたは糖Ｒｏａ−Ｒｏｄ−Ｒ
ｏｄの組合せでありそして Ｒ１は糖残基Ｒｏａである。

但し、 Ｒｏａは式（Ｉｆ） で表わされるロドサミンでありそして Ｒｏａ−Ｒｏｄ−Ｒｏｄは式（ＩＩＩ）で表わされるロ
ドサミンーロジノースーロジノースである〕 で表わされるアントラサイクリン誘導体およびその薬理
学的に許容しうる塩に関する。

本発明はまたヨーロッパ特許出願第 ０．１３１．１８１号に記載の実施例４に従って微生物
株ｙ　−１１，４２７（ＤＳＭ　２６５８）を培養しそ
して各種の有機溶媒を用いて曹系体および培養ろ液を抽
出してフラクションＢとして得られるサイトロジン粗製
混合物を ａ）好ましくはｐＨ３，０〜４．０の水性緩衝液中に溶
解し、得られた溶液を段階的に増加されるｐＨ値好まし
くはｐＨ６，０，７，０および８．０において有機溶媒
好ましくは酢酸エチルで抽出しそして式Ｉ（式中Ｒ１は
Ｒｏａ−Ｒｏｄ−ＲｏｄでありモしてＲ２はＲｏａであ
る）の化合物を濃縮された抽出物からのクロマトグラフ
ィー精製により単離し、そして ｂ）場合によっては得られた化合物を無機酸で加水分解
して式Ｉ（式中Ｒ１およびＲ１は各々Ｒｏａである）の
化合物に変換する ことからなる式Ｉの化合物の製造法に関する。

加水分解は希釈無機酸好ましくは塩酸を用いて、例えば
数時間室温で撹拌しながら行われる。

次いで所望の化合物が反応媒体から例えばクロロホルム
を用いる抽出により得られる。

アントラサイクリノングリコシド類の物質は長い間知ら
れている。悪性腫瘍の治療に特に使用されている細胞増
殖抑制的に活性な化合物のダウノルビシンおよびドキソ
ルビシン〔例えばＦ、　　Ａｒｃａｍｏｎｅ、　　ドキ
ソルビシン、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ　（Ｎｅｗ　
Ｙｏｒｋ、　１９８１午）を参照〕はこれに属する。多
くの他の代表的なこの類の物質はこれまでに生物学的ま
たは生合成的な経路により製造されており、これらの中
にはまたそのすぐれた細胞増殖抑制作用のため特に興味
深いサイトロジン（ｃｙｔｏｒｈｏｄｉｎ　；ヨーロッ
パ特許用ＩｔＩ第０．１３１．１８１号、ヨーロッパ特
許出願第０．１３１．９４２号）も含まれる。

殆んどすべての生合成的に製造されたアントラサイクリ
ンの構造的特徴は種々に直換されたアントラサイクリノ
ン骨格、第２ヒドロキシル基（通常はＣ−７、Ｃ−１０
位）にグリコシド結合される１個以上の糖そしてしばし
ばＣ−９位における遊離の第３０Ｈ基である（　Ｄ、Ｇ
、　５ｔｒａｕｓｓ。

Ｐｈａｒｍａｚｉｅ　４２．２８９　（１９８７年））
。

驚くべきことに、今般微生物学的経路によりその細胞増
殖抑制活性および低い急性毒性によって特徴づけられる
アントラサイクリノンＣ−９グリコシドを製造すること
ができた。

下記のいわゆる増殖試験において、Ｌ１２１０は白血病
細胞について細胞増殖抑制活性を測定した：対数増殖期
のＬ　１２１０細胞（ＲＰＭＩ　１６４０中における５
　Ｘ　１０３／　＋＋Ｑ）を各種濃度の供試物質ととも
にマイクロタイターグレート中において７２時間インキ
ュベートした（３７℃、５％ＣＯ２，９５％相対湿度）
。

コントロール群は新鮮な培地のみでインキュベートされ
る細胞から戒る。すべての測定は４回行なった。６５時
間後、５０μｆｆ（７）ＭＴＴ　（３−（４−ジメチル
チアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾ
リウムプロミド、ＰｂＳ中における２、５１１９／　ｍ
ｆｆ）を加えた。ＭＴＴは生きた細胞により赤色の不溶
性ホルマザン染料に還元された。さらに７時間のインキ
ュベーションの後、培地の上溝を注意深く吸引除去した
。ホルマザン染料は１００μａのＤＭＳＯをマイクロタ
イタープレートの各ウェル中に添加しそして注意深く振
盪することにより溶解した。各溶液の吸光度はＦｌｏｗ
社のマルチスキャン３４０ｃｃ光度計を用いて４９２ｎ
ｍで測定した。

このようにして得られた測定結果から用量−効果プロッ
トを決定しそしてＩＣ５ｓ値すなわち試験条件下でホル
マザン染料の生皮をコントロールと比較して５０％まで
減少する濃度を図がら決定した。

急性毒性試験のために、ＢＤＦ、マウスに０．４ｍαの
生理学的食塩水中に溶解した各種用量の供試物質を第０
日、第３日および第６日に静脈注射した。供試物質の１
濃度あたりマウス２匹を使用した。第２０日に生存して
いるマウスの数を調べこれによりＬＤ、。値を決定した
。アドリアマイシンと比較した本明細書に記載の化合物
の毒性を第１表に示す。

第１表 サイトロジンＺ　　　　　　　Ｏ，３３１０〜２５−ロ
ドマイシノン アドリアマイシン ０．０２〜０．０３ ０ 示される細胞増殖抑制活性に基づいて、本発明の化合物
は哺乳動物の悪性腫瘍例えば人間の胃腸内、乳房、卵巣
および気管支の腫瘍の治療に好適である。

本発明の方法は以下の実施例により詳しく説明される。

実施例　１ ２１９のサイトロジン粗製混合物を５．ｉの酢酸ナトリ
ウム緩衝液（ｐＨ３，０，このｐＨは続いて２Ｎ水酸化
ナトリウム溶液を用いて６．０に調整される〕中に溶解
した。水相を１αの酢酸エチルで抽出し、２ＮＮａＯＨ
を用いてｐＨ７，０に調整しそして各回２ａの酢酸エチ
ルを用いて２回抽出した。

サイトロジンを完全に抽出するため、水相のｐＨを８．
０まで増加しモして２Ｑのクロロホルムで抽出した。有
機相を硫酸ナトリウム上で乾燥しそして真空′ａ縮した
。以下の生成物が得られた。

７ラクシ３ンＩ　（ｐＨ６，０）　：　１１．４９の主
に非極性のサイトロジン ７５　り’ｉ　ｍ　７　ＩＩ　（ｐＨ７，０）　：　８
．３９（７）中間極性のサイトロジン ７ラクシヨンｍ　（ｐＨ８，０）　＝　１　、７９の極
性のサイトロジン フラクシａンＩＦ　（ｐＨ７，０）からの乾燥した抽出
物４．８ｇをメタノール／１％リン酸トリエチルアンモ
ニウム緩衝液（ｐＨ７，０）　−９３：　７　（系Ａ）
３０ｍ４中に溶解し、系Ａで平衡化されたｌ　、９Ｑの
ＲＰ−１８シリカゲル（Ｍｅｒｃｋ社製のＬｉＣｈｒｏ
ｐｒｅｐ　ＲＰ　−１８，２５〜４０μｍ）を含有する
スチールカラムに付しそして流速２０＋ｘｆｆ／分で系
Ａを用いて溶離した。

１　、０００＋ｍ１２の前音の後、２０肩αの７ラクシ
ヨンｔ−ａめそして薄層クロマトグラフィー（Ｍａｒｃ
ｋ社製のシリカゲル６０　Ｆｘｓ−、系Ｂ：クロロホル
ム／メタノール／氷氷酢酸氷水７５：　ｌａ：　１０：
　４　）により分析した。サイトロジン２を含有するフ
ラクジョン（フラクション５５〜９５）を合体し、等容
量の水を加えそしてそれらを１１５容量のクロロホルム
で抽出した。有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で
乾燥し真空濃縮しモしてヘキサンを用いて沈殿させた。

収量：　１．９９の濃縮サイトロジンＺ実施ｆ１２ 実施例１で得られたサイトロジンＺ　　１．５ｇヲクロ
ロホルム／メタノール／氷ｒｌＨ／水−５０：２５ニア
：４（系Ｃ）６ｍ＜２中に溶解し、系Ｃで平衡化された
２０５ｍ１２のシリカゲル６０　（Ｍａｒｃｋ社製、１
５〜４０μ肩を含有するカラムに付しモして系Ｃで溶離
した。６００ｍ（１の前音の後、１０１１ＩＱのフラク
ションを集めそして薄層クロマトグラフィー（Ｍａｒｃ
ｋ社製のシリカゲル６０　Ｆ＊ｓａ、系Ｂ）により分析
した。サイトロジンＺを含有するフラクション（フラク
ションｌＯ〜６０）を合体しそして５％強度のＮａ、Ｈ
ＰＯ，水溶液をクロロホルム相が分離するまで加えた。

有機相をＮａｚＨＰｏ４溶液および水で洗浄し、硫酸ナ
トリウム上で乾燥し、真空濃縮しモしてヘキサンを用い
て沈殿させた。

収量：　６６０１１９の純粋なサイトロジンＺ赤色のア
モルファス物質であり、メタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルムに容易に溶解しそして水およびヘキサンに不溶
である。

薄層クロマトグラフィー：　Ｍｅｒｃｋ社製シリカゲル
６０Ｆ、□ 系−：　ＣＨＣｎ　ｓ　／　ＭｅＯＨ／氷酢ｒａ／Ｈ，
０−７５：　ｌδ：１０：　　４　　（Ｒｒ−０，５０
） ｕｖ（最大値）　：　２３６．２５６．２９６．４６８
（ｓｈ、）、４９３．５１２（ｓｈ、）　（メタ／　−
ル／　１０％ＨＣＩＩ中） ＮＭＲスペク トル：第１図 Ｃ＊ａＨａａＮ＊Ｏ＋ｈ 分子量（計算値）　：　９１２　（ＦＡＢＳ で確認） サイトロジンＺは式Ｉ（式中Ｒ１はＲｏａ−Ｒｏｄ−Ｒ
ｏｄでありそしてＲ”１ｔＲｏａである）を有する。

実施例　３ 実施例２で得られたサイトロジンＺ　　Ｏ，２９を２０
＋１ｆｆｉノ希塩酸（ｐＨ１，３）中、室温で２時間撹
拌した。溶液を１容量のクロロホルムで抽出し、水相を
１ＮＮａＯＨを用いてｐＨ８，０に調整しそして各回ｌ
容量のクロロホルムで２回抽出した。有機相を合一し、
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空濃縮しモしてヘキサン
を用いて沈殿させた。

収量：　１３５１９の加水分解生成物−９−０，１００
−ビス（α−Ｌ−ロドサミニル）− γ−ロドマイジノン 赤色のアモルファス物質であり、メタノール、酢酸エチ
ル、クロロホルムに容易に溶解しそして水およびヘキサ
ンに不溶である。

゛薄層クロマトグラフィー：　Ｍａｒｃｋ社製シリカゲ
ル６０　Ｆｌｓｔ 系Ｂ：クロロホルム／メタノール／氷氷酢酸氷水７５：
　１６：　１０：　４　（Ｒｒ−０，２７）ＵＶ（最大
値）：２３６．２５５．２９５．４６５（ｓｈ、）、４
９３Ｊ５１３（ｓｈ、）（メタノール／１０邦ＨＣｆ中
） ＮＭＲスペクトル：第２図 Ｃｓ１ＨａｓＮｔＯ０、分子量（計算値’）　：　６８
４　（ＦＡＢ　ＭＳで確認） 上記実施例で得られた化合物の同定は下記の測定条件を
用いて行なった：　’Ｈ−ＮＭＲスペクトルは２７０Ｍ
ＨｚのＨＸ−２７０ＢＲＵＫＥＲ７−リエ変換核磁気共
鳴分光計で記録した。濃度は２〜４１１９／　９９．８
％の純粋なＣＤＣａ３０．５１１であった。溶液は調製
後直ちに９９．５％Ｄ２０中においてＯ，１ｒａＱの５
％強度のＮａ２ＣＯ３とともに振盪した。

スペクトル図中において星印（＊）の付いたシグナルは
残留の溶媒によるものである。マススペクトルはＭＳ−
９０２Ｓマス分光計すなわちＦＡＢイオン源を用いるＦ
ＡＩで記録した。

４

【図面の簡単な説明】

第１図はサイ トロジンＺのＮＭＲススベクトル である。 第２図は９− ０− −ビス （α−Ｌ−ロ ドサミニル） γ 一ロドマイシノンである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中Ｒ＾１は糖残基Ｒｏａまたは糖Ｒｏａ−Ｒｏｄ−
   Ｒｏｄの組合せでありそして Ｒ＾２は糖残基Ｒｏａである） で表わされる化合物およびその薬理学的に許容しうる塩
   。 ２）ヨーロッパ特許出願第０，１３１，１８１号に従っ
   て微生物株Ｙ−１１，４７２（ＤＳＭ２６５８）を培養
   しそして有機溶媒を用いて菌系体および培養ろ液を抽出
   して得られるサイトロジン粗製混合物ａ）ｐＨ３．０〜
   ４．０の水性緩衝液中に溶解し、得られた溶液を段階的
   に増加されるｐＨ値において有機溶媒で抽出しそして式
   I （式中Ｒ＾１はＲｏａ−Ｒｏｄ−Ｒｏｄでありそし
   てＲ＾２はＲｏａである）の化合物を濃縮された抽出物
   からのクロマトグラフィー精製により単離し、そして ｂ）場合によっては得られた化合物を無機酸で加水分解
   して式 I （式中Ｒ＾１およびＲ＾２は各各Ｒｏａであ
   る）の化合物とすることからなる請求項１記載の化合物
   の製造法。３）水性緩衝溶液は工程ａ）において酢酸エ
   チルを用いてｐＨ値６．０、７．０および８．０で段階
   的に抽出される請求項２記載の方法。 ４）請求項１記載の化合物を含有する製剤。 ５）細胞増殖抑制効果を有する製剤の製造における請求
   項１記載の化合物の使用。