JPH0222560A - 逐次分析試験を行なうための反応容器 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
聚亙Ω１月
本発明は、液体試験試料中に４在する分析対象物の量を
測定するための分析試験法に関する。特に、本発明は、
かかる測定を行なうために逐次的な操作工程を必要とす
る分析対象物と１以上の分析試薬との間の分析反応を包
含する液体試験試料中の分析対象物の測定に関する。
測定するための分析試験法に関する。特に、本発明は、
かかる測定を行なうために逐次的な操作工程を必要とす
る分析対象物と１以上の分析試薬との間の分析反応を包
含する液体試験試料中の分析対象物の測定に関する。
工業的、環境的及び特に医学的に重要な分析対象物を測
定するために種々の分析法が開発されている。多くの場
合において、かかる分析法は、試験プロトコルを行なう
ために逐次的に行なわなければならない数多（の分析反
応及び処理工程を含んでいる。ビベソｔ−滴加、遠心分
離、熟成段階、分離工程などのような処理をはじめとす
るかかる逐次工程は、エラーを生じ、これが不正確な結
果を引き起こす可能性がある。自動化するが又はそうで
なければかかる処理工程を簡単にする試みにおいて種々
の器具が開発されているが、かかる器具は煩雑であるこ
とが多く、操作のために訓練された経験の豊かな技術者
を必要とする。いくつかの場合においては、かかる器具
は、試験プロトコルを行なう間に多数の手動処理工程を
未だに必要とするものである。
定するために種々の分析法が開発されている。多くの場
合において、かかる分析法は、試験プロトコルを行なう
ために逐次的に行なわなければならない数多（の分析反
応及び処理工程を含んでいる。ビベソｔ−滴加、遠心分
離、熟成段階、分離工程などのような処理をはじめとす
るかかる逐次工程は、エラーを生じ、これが不正確な結
果を引き起こす可能性がある。自動化するが又はそうで
なければかかる処理工程を簡単にする試みにおいて種々
の器具が開発されているが、かかる器具は煩雑であるこ
とが多く、操作のために訓練された経験の豊かな技術者
を必要とする。いくつかの場合においては、かかる器具
は、試験プロトコルを行なう間に多数の手動処理工程を
未だに必要とするものである。
例えば、米国特許４．６７３．６５３号においては、間
仕切りされたプラスチック容器を用いて液体試料の生物
学的分析を行なう方法が記載されており、これは多数の
遠心分離工程を必要とする。容器は、液体試料用の貯留
室、較正セル、種々の反応液のための多数の貯留室及び
反応槽を有している。種々の室、較正セル及び反応槽は
、遠心力によってその間に液体を連絡させるための毛細
導管によって相互連絡している。生物学的分析を行なう
際には、器具内に配置された液体の処理を容易にするた
めに、遠心力の方向に対する特定の毛細導管の配向の関
数として各遠心分離工程について容器の角の位置を選択
しながら逐次的な遠心分離工程を行なう。
仕切りされたプラスチック容器を用いて液体試料の生物
学的分析を行なう方法が記載されており、これは多数の
遠心分離工程を必要とする。容器は、液体試料用の貯留
室、較正セル、種々の反応液のための多数の貯留室及び
反応槽を有している。種々の室、較正セル及び反応槽は
、遠心力によってその間に液体を連絡させるための毛細
導管によって相互連絡している。生物学的分析を行なう
際には、器具内に配置された液体の処理を容易にするた
めに、遠心力の方向に対する特定の毛細導管の配向の関
数として各遠心分離工程について容器の角の位置を選択
しながら逐次的な遠心分離工程を行なう。
米国特許第４．６９０．８１０号においては、その一端
に可撓性の薄膜が施されている円盤状部材を有する手動
処理具が記載されており、この薄膜によって、脆性の封
止手段により導管と多数の試薬貯留部とが互いに隔離し
て画定されている。
に可撓性の薄膜が施されている円盤状部材を有する手動
処理具が記載されており、この薄膜によって、脆性の封
止手段により導管と多数の試薬貯留部とが互いに隔離し
て画定されている。
試験管が導管の一端に配置されており、試料注入貯留部
が導管のもう一方の端部に配置されている０円盤部材は
基材中に取り付けられており、ローラーバーを有する被
包部材が基材上に取り付けられ、ローラーバーが円盤部
材の表面に付勢されている。器具を操作する際には、被
包部を円盤部材に対して回転させ、ローラーバーによっ
て貯留部に圧を加えて脆性の封止部材を破壊して、試験
を行なう目的で試薬をそのそれぞれの貯留部から導管内
に押入する。
が導管のもう一方の端部に配置されている０円盤部材は
基材中に取り付けられており、ローラーバーを有する被
包部材が基材上に取り付けられ、ローラーバーが円盤部
材の表面に付勢されている。器具を操作する際には、被
包部を円盤部材に対して回転させ、ローラーバーによっ
て貯留部に圧を加えて脆性の封止部材を破壊して、試験
を行なう目的で試薬をそのそれぞれの貯留部から導管内
に押入する。
したがって、本発明の目的は、遠心分離又は他の機械的
に発生ずる力を用゛いない逐次分析試験法を行なうため
の器具を提供することである。
に発生ずる力を用゛いない逐次分析試験法を行なうため
の器具を提供することである。
本発明の他の目的は、必要な手動処理工程の数を最小に
した逐次分析試験法を行なうための器具を提供すること
である。
した逐次分析試験法を行なうための器具を提供すること
である。
更に、本発明の目的は、複雑な製造又は組立工程を用い
ない逐次分析試験法を行なうための器具を提供すること
である。
ない逐次分析試験法を行なうための器具を提供すること
である。
本発明の更に他の目的は、処理及び操作するのが簡単な
逐次分析試験法を行なうための器具を提供することであ
る。
逐次分析試験法を行なうための器具を提供することであ
る。
更に、本発明の他の目的は、医院又は小さな臨床研究所
に容易に適合させることのできる逐次分析試験法を行な
うための器具を提供することである。
に容易に適合させることのできる逐次分析試験法を行な
うための器具を提供することである。
兄皿餞υ」要
本発明は、液体試験試料中の分析対象物と、該分析対象
物と相互作用して分析対象物の関数として検出可能な応
答を生成する１以上の分析試薬との間の逐次分析反応を
包含する分析試験工程を行なうための、自己内に試薬を
保持する分析試薬反応容器又は器具及び方法を提供する
ものである。
物と相互作用して分析対象物の関数として検出可能な応
答を生成する１以上の分析試薬との間の逐次分析反応を
包含する分析試験工程を行なうための、自己内に試薬を
保持する分析試薬反応容器又は器具及び方法を提供する
ものである。
該器具は、通常は、ピペット滴加、液体試験試料と分析
試薬との混合及びインキュベーション並びに検出のよう
な多数の煩雑な処理工程を必要とするイムノアッセイを
行なうのに特に有用である。
試薬との混合及びインキュベーション並びに検出のよう
な多数の煩雑な処理工程を必要とするイムノアッセイを
行なうのに特に有用である。
必要な逐次工程は、単に器具を非遠心回転させ、試験の
種々の機能工程を行なうように設計された器具内の領域
又は区域への試験試料又は反応混合物の重力による流れ
を生じさせることによって該器具内で行なわれる。
種々の機能工程を行なうように設計された器具内の領域
又は区域への試験試料又は反応混合物の重力による流れ
を生じさせることによって該器具内で行なわれる。
本発明によれば、該器具には、特定の逐次分析試験工程
を行なうために必要な１以上の分析試薬が含まれており
、試験を完了させるために更なる外的な処理工程を必要
とすることなく、器具内に導入される液体試験試料を分
析試薬と逐次的に接触させ、反応させることができる。
を行なうために必要な１以上の分析試薬が含まれており
、試験を完了させるために更なる外的な処理工程を必要
とすることなく、器具内に導入される液体試験試料を分
析試薬と逐次的に接触させ、反応させることができる。
また、該器具によって、分析対象物と分析試薬との間の
分析反応によって生成する検出可能な応答を簡便に測定
することが可能になり、また、１以上の検出可能な応答
が試験の実施の後又はその間に生成したら、該器具によ
って試験工程の間に該器具内においてそれを容易に処理
して簡便に測定することが可能になる。器具内における
液体試験試料及び分析試薬の処理には、遠心分離又は他
の機械的に発生する力を必要とせず、したがって、手動
で又は簡単な複雑でない装置を用いて処理することがで
きる。
分析反応によって生成する検出可能な応答を簡便に測定
することが可能になり、また、１以上の検出可能な応答
が試験の実施の後又はその間に生成したら、該器具によ
って試験工程の間に該器具内においてそれを容易に処理
して簡便に測定することが可能になる。器具内における
液体試験試料及び分析試薬の処理には、遠心分離又は他
の機械的に発生する力を必要とせず、したがって、手動
で又は簡単な複雑でない装置を用いて処理することがで
きる。
特に、該器具は、実質的に水平方向の回転軸。
好ましくは実質的に中心位置の回転軸を有し、分析試薬
反応路、液体試験試料の反応路内への一方向の流れを与
える好ましくは送出室の形態の液体試験試料送出手段、
及び、液体試験試料を送出平段内に導入するための、送
出手段と開放液体流連絡（ｏｐｅｎ １ｉｑｕｉｄ ｆ
ｌｏｗ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｌ Ｌでいる好ま
しバは導入口の形態の導入手段を備えた密閉された容器
を有するものである３分析試薬反応路は、１以上の分析
試薬を、それぞれ、好ましくはその乾燥形態のものとし
て含む１以］、の反応域を備えている６例えば、特定の
分析試験工程が試験を行なうために２以上の分析試薬を
必要とする場合には、第１の分析試薬を第１の反応域内
に含ませ、第２の分析試薬を、第１の反応域から予め定
められた距離離隔し、で配置され、これと開放液体流連
絡している第２の反応域内心、二含ませることができる
０分析試験反応路には、更に、反応路内の予め定められ
た位置に配置され、好ましくは反応路の一端に配置され
、これと開放液体流連絡している観察室の形態の分析反
応観察域を設けることができ、これから、液体試験試料
又はその分析反応混合物によって生成した検出可能な応
答を検出し測定することができる。
反応路、液体試験試料の反応路内への一方向の流れを与
える好ましくは送出室の形態の液体試験試料送出手段、
及び、液体試験試料を送出平段内に導入するための、送
出手段と開放液体流連絡（ｏｐｅｎ １ｉｑｕｉｄ ｆ
ｌｏｗ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｌ Ｌでいる好ま
しバは導入口の形態の導入手段を備えた密閉された容器
を有するものである３分析試薬反応路は、１以上の分析
試薬を、それぞれ、好ましくはその乾燥形態のものとし
て含む１以］、の反応域を備えている６例えば、特定の
分析試験工程が試験を行なうために２以上の分析試薬を
必要とする場合には、第１の分析試薬を第１の反応域内
に含ませ、第２の分析試薬を、第１の反応域から予め定
められた距離離隔し、で配置され、これと開放液体流連
絡している第２の反応域内心、二含ませることができる
０分析試験反応路には、更に、反応路内の予め定められ
た位置に配置され、好ましくは反応路の一端に配置され
、これと開放液体流連絡している観察室の形態の分析反
応観察域を設けることができ、これから、液体試験試料
又はその分析反応混合物によって生成した検出可能な応
答を検出し測定することができる。
本発明によれば、器具を該器具の水平方向の回転軸の回
りを回転させることによって、反応路内に配置された液
体試験試料を、反応路に沿って１以上の反応域と観察域
との間を移動させることができる。したがって、液体試
験試料を器具内に導入すると、単に器具を上記のように
回転させることによって、更なるピペット滴加、遠心分
離、あるいは、液体試験試料を１つの分析試薬から他の
ものへ、又は例えば検出可能な応答を検出及び測定する
ためのキュベツトへ移動させるための他の複雑な処理工
程を必要とすることなく分析試験工程を行なうことがで
きる。
りを回転させることによって、反応路内に配置された液
体試験試料を、反応路に沿って１以上の反応域と観察域
との間を移動させることができる。したがって、液体試
験試料を器具内に導入すると、単に器具を上記のように
回転させることによって、更なるピペット滴加、遠心分
離、あるいは、液体試験試料を１つの分析試薬から他の
ものへ、又は例えば検出可能な応答を検出及び測定する
ためのキュベツトへ移動させるための他の複雑な処理工
程を必要とすることなく分析試験工程を行なうことがで
きる。
本発明の器具を用いる分析試験工程は、液体試験試料を
導入手段を通して送出手段内に導入し、そこで、好まし
くは器具を水平軸の回りを回転させることにより、重力
によって液体試験試料を送出手段から反応路内器こ流れ
させることによって行なうことができる。液体試験試料
は、好ましくは反応域を水平軸の回りを回転させて、そ
れによって液体試験試料を重力によって反応路に沿って
第１の反応域中に移動させることによって第１の反応域
内の第１の分析試薬と接触せしめられ、その中に含まれ
ている第１の分析試薬との第１の反応混合物を生成する
６次に、第１の反応混合物を。
導入手段を通して送出手段内に導入し、そこで、好まし
くは器具を水平軸の回りを回転させることにより、重力
によって液体試験試料を送出手段から反応路内器こ流れ
させることによって行なうことができる。液体試験試料
は、好ましくは反応域を水平軸の回りを回転させて、そ
れによって液体試験試料を重力によって反応路に沿って
第１の反応域中に移動させることによって第１の反応域
内の第１の分析試薬と接触せしめられ、その中に含まれ
ている第１の分析試薬との第１の反応混合物を生成する
６次に、第１の反応混合物を。
直ちに、又はインキュベーション又は反応時間の後、器
具を水平軸の回りを回転させることによって、重力によ
って第１の反応域から反応路に沿って移動させ、第２の
反応域内の第２の分析試薬と接触せしめで、その中に含
まれている第２の分析試薬との第２の反応混合物を生成
する。例えば、第２の反厄混合物が検出可能な応答を生
成する場合には、器具を水平軸の回りを回転させること
によっ℃、第２の反応混合物を第２の反応域から反応路
に沿って観察域中に移動させることができる６次に、検
出可能な応答を観察域から測定し、液体試験試料中に存
在する分析対象物の量と関連付けることができる。
具を水平軸の回りを回転させることによって、重力によ
って第１の反応域から反応路に沿って移動させ、第２の
反応域内の第２の分析試薬と接触せしめで、その中に含
まれている第２の分析試薬との第２の反応混合物を生成
する。例えば、第２の反厄混合物が検出可能な応答を生
成する場合には、器具を水平軸の回りを回転させること
によっ℃、第２の反応混合物を第２の反応域から反応路
に沿って観察域中に移動させることができる６次に、検
出可能な応答を観察域から測定し、液体試験試料中に存
在する分析対象物の量と関連付けることができる。
以下により詳細に説明するように１本発明の器具は、上
記記載のように２種類の分析試薬を用いる分析試験工程
に限定されるものではなく、これを用いて、単一の分析
試薬又は１以上の更なる分析試薬を用いる実質的にいか
なる逐次分析試験方法を行なうこともできる０反応路内
における１以上の更なる分析試薬との逐次的な接触が与
久られるのに加えて、反応路と観察域との間に与えられ
た開放液体流連絡により、器具を水平軸の回りを回転さ
せて、液体試験試料又はそれの１以上の更なる分析試験
反応氾合物を単一の試験の進行中に反応路と多数の測定
のための観察域との間を重力によって移動させることに
よって、１以上の更なる検出可能な応答を所望の定めら
れた順番で測定することが可能になる。
記記載のように２種類の分析試薬を用いる分析試験工程
に限定されるものではなく、これを用いて、単一の分析
試薬又は１以上の更なる分析試薬を用いる実質的にいか
なる逐次分析試験方法を行なうこともできる０反応路内
における１以上の更なる分析試薬との逐次的な接触が与
久られるのに加えて、反応路と観察域との間に与えられ
た開放液体流連絡により、器具を水平軸の回りを回転さ
せて、液体試験試料又はそれの１以上の更なる分析試験
反応氾合物を単一の試験の進行中に反応路と多数の測定
のための観察域との間を重力によって移動させることに
よって、１以上の更なる検出可能な応答を所望の定めら
れた順番で測定することが可能になる。
ましい ｒ態りの投口
本発明のより良好な理解を得るために、本発明器具及び
逐次試験を行なう際のその使用の特に好ましい形態をこ
こで説明する。図１〜３を参ｐ召すると、本発明の器具
１０は、好ましくは、実質的に水平な回転軸を有し、蓋
部材１２によって密閉されている開放された本体部材１
１を備えた密閉された円筒形の容器の形態のものである
（図３及び３ａ）、以下により詳細に説明するように、
１以上の分析試薬をその中に入れるために、本体部材１
１及び蓋部材１２は別々の部品として与えられている。
逐次試験を行なう際のその使用の特に好ましい形態をこ
こで説明する。図１〜３を参ｐ召すると、本発明の器具
１０は、好ましくは、実質的に水平な回転軸を有し、蓋
部材１２によって密閉されている開放された本体部材１
１を備えた密閉された円筒形の容器の形態のものである
（図３及び３ａ）、以下により詳細に説明するように、
１以上の分析試薬をその中に入れるために、本体部材１
１及び蓋部材１２は別々の部品として与えられている。
したがって１分析試薬を本体部材１１内に入れたら、本
体部材１１を蓋部材１２によって閉止し、当該技術にお
いて公知の方法によってそこに永久的に固定して液密封
止を得る。
体部材１１を蓋部材１２によって閉止し、当該技術にお
いて公知の方法によってそこに永久的に固定して液密封
止を得る。
本体部材１１は、側壁１３、並びに、それぞれ外部支持
壁１６に対して実質的に垂直に配置されている第１及び
第２の内部壁１４及び１５を有している。側壁１３並び
に第１及び第２の内部壁１４及び１５は、実質的に高さ
が同等であり、本体部材１１が蓋部材１２によって閉止
されると、蓋部材１１の内面１７が、実質的に第１及び
第２の内部壁の上端部１８及び１９に対して付勢されて
、側壁１３の上端部２０に対して液密状態で封止するこ
とができる。
壁１６に対して実質的に垂直に配置されている第１及び
第２の内部壁１４及び１５を有している。側壁１３並び
に第１及び第２の内部壁１４及び１５は、実質的に高さ
が同等であり、本体部材１１が蓋部材１２によって閉止
されると、蓋部材１１の内面１７が、実質的に第１及び
第２の内部壁の上端部１８及び１９に対して付勢されて
、側壁１３の上端部２０に対して液密状態で封止するこ
とができる。
側壁２０は、実質的に本体部材１１の周囲の回りに伸長
し、第２の内部壁１５によって形成されている観察室２
２の形態の分析反応観察域中に開放されている分析試薬
反応路２１を形成している。観察室２２は、検出可能な
応答を測定する間に液体試験試料又はその分析反応混合
物を保持するだめのキュベツトとして機能し、反応路２
１の一端に配置され、これと開放液体流連絡している。
し、第２の内部壁１５によって形成されている観察室２
２の形態の分析反応観察域中に開放されている分析試薬
反応路２１を形成している。観察室２２は、検出可能な
応答を測定する間に液体試験試料又はその分析反応混合
物を保持するだめのキュベツトとして機能し、反応路２
１の一端に配置され、これと開放液体流連絡している。
好ましくは、観察室２２は、器具１０の実質的に中心の
位置に配置され、器具１０の水平な回転軸が観察室２２
と交差している。したがって、器具１０の水平な回転軸
は、観察室２２を、例えば、観察室２２内の分析反応混
合物の検出可能な応答を検出し測定するための、光源又
は分光光度計のような当該技術において公知の装置によ
って発生する他のエネルギー路と整列させるように機能
する。
位置に配置され、器具１０の水平な回転軸が観察室２２
と交差している。したがって、器具１０の水平な回転軸
は、観察室２２を、例えば、観察室２２内の分析反応混
合物の検出可能な応答を検出し測定するための、光源又
は分光光度計のような当該技術において公知の装置によ
って発生する他のエネルギー路と整列させるように機能
する。
第１の内部壁１４は、その中に配置さねだ液体試験試料
の反応路２１内への一方向の流れを与える送出室２３を
形成している。以下により詳細に説明するように、器具
１０を水平方向の回転軸の回りを回転させることによっ
て、送出室２３内に配置された液体試験試料を重力によ
って送出室２３から反応路２１内に移動させることがで
きるように、送出室２３は、反応路２１中に開放されて
おり、実質的に観察室２２と反応路２１との間に配置さ
れている。
の反応路２１内への一方向の流れを与える送出室２３を
形成している。以下により詳細に説明するように、器具
１０を水平方向の回転軸の回りを回転させることによっ
て、送出室２３内に配置された液体試験試料を重力によ
って送出室２３から反応路２１内に移動させることがで
きるように、送出室２３は、反応路２１中に開放されて
おり、実質的に観察室２２と反応路２１との間に配置さ
れている。
開放液体流連絡によって意図されていることは、器具１
０を水平方向の回転軸の回りを回転させることによって
、反応路２■内に配置された液体試験試料又は分析反応
混合物を、重力によってそれに沿って自由に移動させ、
反応路２１と観察室２２との間を重力によって自由にか
つ所望の場合には繰返し移動させることをできるように
することであるということを理解すべきである。逆に、
送出室２３からの液体試験試料の一方向の流れによって
意図されていることは、器具ｌＯを水平方向の回転軸の
回りを回転させることによって、送出室２３内に配置さ
れた液体試験試料を重力によって送出室２３から反応路
２１内に移動させることができるが、器具１０を水平方
向の回転軸の回りを引き続き回転させることによって液
体試験試料が送出室２３内に再流入しないようにするこ
とである。当業者によって理解されるように、液体試験
試料が送出室２３内に再流入しえないことは、もちろん
、液体試験試料の容量及び第１の内部壁１４の末端部２
４と側壁１３との間の距離に依存するものである。
０を水平方向の回転軸の回りを回転させることによって
、反応路２■内に配置された液体試験試料又は分析反応
混合物を、重力によってそれに沿って自由に移動させ、
反応路２１と観察室２２との間を重力によって自由にか
つ所望の場合には繰返し移動させることをできるように
することであるということを理解すべきである。逆に、
送出室２３からの液体試験試料の一方向の流れによって
意図されていることは、器具ｌＯを水平方向の回転軸の
回りを回転させることによって、送出室２３内に配置さ
れた液体試験試料を重力によって送出室２３から反応路
２１内に移動させることができるが、器具１０を水平方
向の回転軸の回りを引き続き回転させることによって液
体試験試料が送出室２３内に再流入しないようにするこ
とである。当業者によって理解されるように、液体試験
試料が送出室２３内に再流入しえないことは、もちろん
、液体試験試料の容量及び第１の内部壁１４の末端部２
４と側壁１３との間の距離に依存するものである。
本体部材ＩＪの側壁１３は、好ましくは、実質的に、側
壁１３に接続している第１及び第２の内部壁１４及び】
５の基端部２６及び２７の間に配置されている細長い開
口２５を有している。開口２５は、蓋部材１２の端部か
ら伸長しており、これに対して実質的に垂直に配置され
ている実質的に平板状の細長いビン２８を噛合可能に受
容するように構成されており、ビン２８の長さが開口２
５の長さよりも短くなっている。したがって、ビン２８
を開口２５内に挿入して本体部材】１を蓋部材】２によ
って閉止すると、液体試験試料を送出室２３内に導入す
るための導入口２つ（図３ａ）が与えられる。ビン２８
は、本体部材１１を蓋部材］２によって閉止し、接着、
レーザー濃青あるいは共に封止又は締着した際に、蓋部
材１２と本体部材１１とを簡便に整列させるために与え
られており、したがって、器具１０の組立に重要なもの
ではない。しかしながら、ビン２８が与えられでいない
場合には、実質的に図３ａにおいて示されているように
配置されている導入口２９を形成するために、開口２５
を、実質的にビン２８を受容すべき領域において閉止す
ることが好ましい。どちらの場合においても、導入口２
９の位置は、導入口２９内にピペットを挿入するように
して送出室２３内に液体試験試料を導入するように、蓋
部材１２の上部内表面及び送出室２３内の支持壁１６の
上部内表面から離隔した距離に配置することが好ましい
。このようにして、導入口２９を通して器具１０内に導
入した際に液体試験試料が蓋部材１２の上部内表面に実
質的に接触することが防止される。したがって、器具１
０内に導入された実質的に全ての所望容量の試料が１例
λば表面張力の結果として蓋部材１２及び支持壁１６の
上部内表面に吸着することなく送出室２３内に重力によ
って自由落下する。
壁１３に接続している第１及び第２の内部壁１４及び】
５の基端部２６及び２７の間に配置されている細長い開
口２５を有している。開口２５は、蓋部材１２の端部か
ら伸長しており、これに対して実質的に垂直に配置され
ている実質的に平板状の細長いビン２８を噛合可能に受
容するように構成されており、ビン２８の長さが開口２
５の長さよりも短くなっている。したがって、ビン２８
を開口２５内に挿入して本体部材】１を蓋部材】２によ
って閉止すると、液体試験試料を送出室２３内に導入す
るための導入口２つ（図３ａ）が与えられる。ビン２８
は、本体部材１１を蓋部材］２によって閉止し、接着、
レーザー濃青あるいは共に封止又は締着した際に、蓋部
材１２と本体部材１１とを簡便に整列させるために与え
られており、したがって、器具１０の組立に重要なもの
ではない。しかしながら、ビン２８が与えられでいない
場合には、実質的に図３ａにおいて示されているように
配置されている導入口２９を形成するために、開口２５
を、実質的にビン２８を受容すべき領域において閉止す
ることが好ましい。どちらの場合においても、導入口２
９の位置は、導入口２９内にピペットを挿入するように
して送出室２３内に液体試験試料を導入するように、蓋
部材１２の上部内表面及び送出室２３内の支持壁１６の
上部内表面から離隔した距離に配置することが好ましい
。このようにして、導入口２９を通して器具１０内に導
入した際に液体試験試料が蓋部材１２の上部内表面に実
質的に接触することが防止される。したがって、器具１
０内に導入された実質的に全ての所望容量の試料が１例
λば表面張力の結果として蓋部材１２及び支持壁１６の
上部内表面に吸着することなく送出室２３内に重力によ
って自由落下する。
以下により詳細に説明するように、器具１ｏを水平方向
の回転軸の回りを時計方向に回転させることによって、
送出室２３内に配置された液体試験試料を重力によっで
送出室２３がら反応路２１内に移動させる。液体試験試
料が反応路２１内に移動したら、次に、器具１ｏを単に
適当な方向に回転させることによって、反応路２１に沿
って、任意の所望の順序で観察室２２がら離隔する方向
又はそれに向かう方向及びもちろんその中へ、重力によ
って移動させることができる９例えば、器具１０を時計
と逆の方向に回転させることによって、液体試験試料を
重力によって反応路２１に沿って観察室２２がら離隔す
る方向に移動させることができる。液体試験試料が反応
路２１内に移動［７たら、次に、器具１ｏを時計と逆の
方向に回転させることによって反応路２１に沿って重力
によって観察室２２がら離隔する方向に、また、器具１
０を時計方向に回転させることによって観察室に向かう
方向に移動させることができる。
の回転軸の回りを時計方向に回転させることによって、
送出室２３内に配置された液体試験試料を重力によっで
送出室２３がら反応路２１内に移動させる。液体試験試
料が反応路２１内に移動したら、次に、器具１ｏを単に
適当な方向に回転させることによって、反応路２１に沿
って、任意の所望の順序で観察室２２がら離隔する方向
又はそれに向かう方向及びもちろんその中へ、重力によ
って移動させることができる９例えば、器具１０を時計
と逆の方向に回転させることによって、液体試験試料を
重力によって反応路２１に沿って観察室２２がら離隔す
る方向に移動させることができる。液体試験試料が反応
路２１内に移動［７たら、次に、器具１ｏを時計と逆の
方向に回転させることによって反応路２１に沿って重力
によって観察室２２がら離隔する方向に、また、器具１
０を時計方向に回転させることによって観察室に向かう
方向に移動させることができる。
上記のような器具１０の操作は、その中に配置された液
体試験試料又はその反応混合物の実質的に自由な重力流
動に依存することを理解すべきである。当業者によって
理解されるように、液体を１以上の固体表面に実質的に
接触させたり、あるいは、例えば毛細導管などの中に配
置した際にしばしば発生する表面張力、エアポケット及
び他の物理的現象によってかかる自由重力流動が実質的
に妨害される可能性がある。したがって、器具１０内に
おける液体試験試料のかかる自由重力流動は、反応路２
１．観察室２２及び送出室２３の開放部の内面積並びに
その中に配置される液体試験試料の容量に依存する。器
具のかかる内面積は、通常は、液体試験試料が器具１０
を通って処理される際に試料を収容しかつ同時に抜気す
るのに十分な寸法のものにする。器具１０の相対的な寸
法は実質的に図に示した相対的な寸法のものが好ましい
が、当業者によって、上述の点を考慮して器具１０の寸
法を修正するか、あるいは、その中の液体試験試料の自
由重力流動を与えることができる１例えば、器具１０に
、空気抜き又は開口を設けて、液体試験試料をその中で
処理する際に器具１０がら空気を放出させ、それによっ
てエアポケットの形成を防止したり、又は、液体試験試
料の自由重力流動を妨害する可能性のある他の物理現象
の発生を防止することができる。もちろん、かかる排気
口又は開口は、器具１ｏの１以上の領域に配置するが、
あるいは、器具１ｏがら７７り体試験試料又はその反応
混合物が漏出するのを防止するように構成される。
体試験試料又はその反応混合物の実質的に自由な重力流
動に依存することを理解すべきである。当業者によって
理解されるように、液体を１以上の固体表面に実質的に
接触させたり、あるいは、例えば毛細導管などの中に配
置した際にしばしば発生する表面張力、エアポケット及
び他の物理的現象によってかかる自由重力流動が実質的
に妨害される可能性がある。したがって、器具１０内に
おける液体試験試料のかかる自由重力流動は、反応路２
１．観察室２２及び送出室２３の開放部の内面積並びに
その中に配置される液体試験試料の容量に依存する。器
具のかかる内面積は、通常は、液体試験試料が器具１０
を通って処理される際に試料を収容しかつ同時に抜気す
るのに十分な寸法のものにする。器具１０の相対的な寸
法は実質的に図に示した相対的な寸法のものが好ましい
が、当業者によって、上述の点を考慮して器具１０の寸
法を修正するか、あるいは、その中の液体試験試料の自
由重力流動を与えることができる１例えば、器具１０に
、空気抜き又は開口を設けて、液体試験試料をその中で
処理する際に器具１０がら空気を放出させ、それによっ
てエアポケットの形成を防止したり、又は、液体試験試
料の自由重力流動を妨害する可能性のある他の物理現象
の発生を防止することができる。もちろん、かかる排気
口又は開口は、器具１ｏの１以上の領域に配置するが、
あるいは、器具１ｏがら７７り体試験試料又はその反応
混合物が漏出するのを防止するように構成される。
上記記載のような液体試験試料又はその反応混合物の自
由重力流動を与えるためには、その容量は、例えば、側
壁１３と第１の内部壁１４との間の領域及び第１の内部
壁Ｉ４と第２の内部壁１５との間の領域のような上部及
び下部の壁の間の液体が流動移動する領域を実質的に満
た１容量よりも少ないことが好ましい７好ましくは、液
体試験試料は、本発明の教示にしたがって器具ｌ。
由重力流動を与えるためには、その容量は、例えば、側
壁１３と第１の内部壁１４との間の領域及び第１の内部
壁Ｉ４と第２の内部壁１５との間の領域のような上部及
び下部の壁の間の液体が流動移動する領域を実質的に満
た１容量よりも少ないことが好ましい７好ましくは、液
体試験試料は、本発明の教示にしたがって器具ｌ。
内を自由に移動することのできる約０．０５〜約１．Ｏ
ｉ、より好ましくは約０．２５〜約０．７５−であるこ
とが好ましい。更に、通路表面に沿った液体試験試料の
自由流動を与太、表面張力又は他の物理現象が発生する
のを実質的に防止するために、器具１０内の表面を当該
技術において公知の方法によって処理し、湿潤性又は親
水性の表面を与えることができる。表面のかかる処理と
しては、プラズマエツチング及びプラズマ重合のような
プラズマ処理、コロナ放電、湿潤化学処理及び当該技術
において公知な被覆方法などが挙げられるが、これらに
限定されるものではない。
ｉ、より好ましくは約０．２５〜約０．７５−であるこ
とが好ましい。更に、通路表面に沿った液体試験試料の
自由流動を与太、表面張力又は他の物理現象が発生する
のを実質的に防止するために、器具１０内の表面を当該
技術において公知の方法によって処理し、湿潤性又は親
水性の表面を与えることができる。表面のかかる処理と
しては、プラズマエツチング及びプラズマ重合のような
プラズマ処理、コロナ放電、湿潤化学処理及び当該技術
において公知な被覆方法などが挙げられるが、これらに
限定されるものではない。
本発明によれば、器具を通常は水平軸の回りを実質的に
短い距離回転させて、液体に働く重力の結果として器具
内に配置された液体試料が移動することを理解すべきで
ある。したがって、器具内の液体の重力移動は、器具の
非遠心回転によって行なわれ、液体にかかる重力よりも
大きな遠心力によって行なわれるものではない。好まし
くは、示したような器具は、水平軸の回りを約１ ｒｐ
ｍ〜約４Ｏｒｐｍ、より好ましくは約１５ｒｐｍ〜約３
Ｏｒｐｍの速度で回転させる。もちろん、かかる非遠心
回転速度は、器具の寸法に依存するものであり、当業者
によって上記の点を考慮して決定することができる。
短い距離回転させて、液体に働く重力の結果として器具
内に配置された液体試料が移動することを理解すべきで
ある。したがって、器具内の液体の重力移動は、器具の
非遠心回転によって行なわれ、液体にかかる重力よりも
大きな遠心力によって行なわれるものではない。好まし
くは、示したような器具は、水平軸の回りを約１ ｒｐ
ｍ〜約４Ｏｒｐｍ、より好ましくは約１５ｒｐｍ〜約３
Ｏｒｐｍの速度で回転させる。もちろん、かかる非遠心
回転速度は、器具の寸法に依存するものであり、当業者
によって上記の点を考慮して決定することができる。
ここで、図４ａ〜図４λを参照すると、器具１０を上記
記載のように水平軸の回りを回転させた際の液体媒体の
重力流及びそれと反応路２１内に含まれている分析試薬
との接触を更に示すために、器具ｌＯが種々の回転位置
で示されている。
記載のように水平軸の回りを回転させた際の液体媒体の
重力流及びそれと反応路２１内に含まれている分析試薬
との接触を更に示すために、器具ｌＯが種々の回転位置
で示されている。
器具ｌＯの外側に示されている実線の矢印は器具１０の
水平軸の回りの回転の方向を示しており、器具ｌＯ内に
示されている破線の矢印は、器具ｌＯを実線の矢印によ
って示された方向に水平軸の回りを回転させた際の液体
流の方向を示している。図４ａ〜４２は例示のみの目的
のものであり、器具１０内に含まれている分析試薬の数
又は器具１０の回転の順序及び方向を制限するものでは
ない。例えば、３ｆ１１類の分析試薬を必要とする試験
プロトコルを示すために図４８においては３つの反応域
３０．３１及び３２が示されているが、特定の試験を行
なうために必要な分析試薬の数によって、３つ未満又は
それ以上の反応域を存在させることができる。更に、分
析試験方法を行なうために必要な数よりも少ない分析試
薬を器具ｌＯに含ませ、１以上のその反応混合物をまず
器具ｌＯの外側で生成させた後に器具ｌＯ内に導入して
試験を完了させることができる０例えば、特定の試験が
試験を行なうために３種類の分析試薬を必要とする場合
に、器具ｌＯに分析試薬の２つを含ませ、液体試験試料
及び分析試薬の１つを含む反応混合物を器具ｌＯの外側
で生成させた後にその中に導入して、器具１０内に含ま
れている２つの分析試薬によって試験を完了させること
ができる。
水平軸の回りの回転の方向を示しており、器具ｌＯ内に
示されている破線の矢印は、器具ｌＯを実線の矢印によ
って示された方向に水平軸の回りを回転させた際の液体
流の方向を示している。図４ａ〜４２は例示のみの目的
のものであり、器具１０内に含まれている分析試薬の数
又は器具１０の回転の順序及び方向を制限するものでは
ない。例えば、３ｆ１１類の分析試薬を必要とする試験
プロトコルを示すために図４８においては３つの反応域
３０．３１及び３２が示されているが、特定の試験を行
なうために必要な分析試薬の数によって、３つ未満又は
それ以上の反応域を存在させることができる。更に、分
析試験方法を行なうために必要な数よりも少ない分析試
薬を器具ｌＯに含ませ、１以上のその反応混合物をまず
器具ｌＯの外側で生成させた後に器具ｌＯ内に導入して
試験を完了させることができる０例えば、特定の試験が
試験を行なうために３種類の分析試薬を必要とする場合
に、器具ｌＯに分析試薬の２つを含ませ、液体試験試料
及び分析試薬の１つを含む反応混合物を器具ｌＯの外側
で生成させた後にその中に導入して、器具１０内に含ま
れている２つの分析試薬によって試験を完了させること
ができる。
図４８において示されているように、反応路２１は、第
１の分析試薬が含まれている第１の反応域３０、第２の
分析試薬が含まれている第２の反応域３１及び第３の分
析試薬が含まれている第３の反応域３２を有している。
１の分析試薬が含まれている第１の反応域３０、第２の
分析試薬が含まれている第２の反応域３１及び第３の分
析試薬が含まれている第３の反応域３２を有している。
以下により詳細に説明するように、分析試薬は反応路２
１内に実質的に乾燥している水溶性、懸濁性又は可溶性
の形態で存在させることが好ましく、当該技術において
公知の方法によってその中に含ませることができ、液体
試験試料と逐次接触するべき所望の順序で反応路２１に
沿って配置される。
１内に実質的に乾燥している水溶性、懸濁性又は可溶性
の形態で存在させることが好ましく、当該技術において
公知の方法によってその中に含ませることができ、液体
試験試料と逐次接触するべき所望の順序で反応路２１に
沿って配置される。
分析対象物を含む液体試験試料を導入口２９を通して器
具１０内に導入し、重力によって送出室２３内に移動さ
せる（図４ａ）、器具１０を時計方向に回転させること
によって液体試験試料３３が送出室２３から反応路２１
内に移動しく図４ｂｌ、次に、器具１０を同一の方向（
時計方向）に更に回転させることによって反応路２１に
沿って重力によって移動して第１の反応域３０と接触せ
しめられる。第１の分析試薬が液体試験試料によって溶
解して第１の反応混合物３４を生成させる（図４０）、
好ましくは２第１の分析試薬の溶解又は懸濁を完全にす
るために器具ｌＯを振動させ（図４ｄ）、所望の場合に
は、液体試験試料中の分析対象物を第１の分析試薬と十
分に相互作用させるために予め定められたインキュベー
ション時間のために図４０に示すように静止位置に保持
する。第１の反応混合物が、特定の試験プロトコルにし
たがって測定することが必要又は所望の第１の検出可能
な応答又は測定しつる特性を与える場合には、第１の反
応混合物３４を観察室２２内に重力によって移動させる
ために器具１０を同一の方向（時計方向）に更に回転さ
せる。次に、第１の反応混合物によって与えられた任意
のかかる第１の検出可能な応答を検出し測定することが
できる（図４ｅ）１例えば、以下により詳細に説明する
ように、かかる第１の検出可能な応答は、試料プランク
測定であってもよく、あるいは、全血試料中のグリケー
ト化ヘモグロビン（ｇｌｙｃａｔｅｄｈｅｍｏｇｌｏｂ
ｉｎｌのパーセントの試験を行なう際のような液体試験
試料が全血試料である場合の全ヘモグロビン測定であっ
てもよい。
具１０内に導入し、重力によって送出室２３内に移動さ
せる（図４ａ）、器具１０を時計方向に回転させること
によって液体試験試料３３が送出室２３から反応路２１
内に移動しく図４ｂｌ、次に、器具１０を同一の方向（
時計方向）に更に回転させることによって反応路２１に
沿って重力によって移動して第１の反応域３０と接触せ
しめられる。第１の分析試薬が液体試験試料によって溶
解して第１の反応混合物３４を生成させる（図４０）、
好ましくは２第１の分析試薬の溶解又は懸濁を完全にす
るために器具ｌＯを振動させ（図４ｄ）、所望の場合に
は、液体試験試料中の分析対象物を第１の分析試薬と十
分に相互作用させるために予め定められたインキュベー
ション時間のために図４０に示すように静止位置に保持
する。第１の反応混合物が、特定の試験プロトコルにし
たがって測定することが必要又は所望の第１の検出可能
な応答又は測定しつる特性を与える場合には、第１の反
応混合物３４を観察室２２内に重力によって移動させる
ために器具１０を同一の方向（時計方向）に更に回転さ
せる。次に、第１の反応混合物によって与えられた任意
のかかる第１の検出可能な応答を検出し測定することが
できる（図４ｅ）１例えば、以下により詳細に説明する
ように、かかる第１の検出可能な応答は、試料プランク
測定であってもよく、あるいは、全血試料中のグリケー
ト化ヘモグロビン（ｇｌｙｃａｔｅｄｈｅｍｏｇｌｏｂ
ｉｎｌのパーセントの試験を行なう際のような液体試験
試料が全血試料である場合の全ヘモグロビン測定であっ
てもよい。
観察室２２内において第１の検出可能な応答を検出及び
測定したら、器具１０を同一方向（時射方向）に回転さ
せて、反応混合物３４を重力によって観察室２２から反
応路２１内に移動させる（図４ｆ）、器具１０を逆の方
向（時計の逆方向）に回転させることによって、第１の
反応混合物３４を重力によって反応路２］に沿って第２
の反応域３１に移動させて第１の反応混合物３４を第２
の反応域３１と接触せしめ、その中に含まれている第２
の分析試薬との第２の反応混合物３５を生成させ（図４
ｇ）、好ましくは上記記載のようにインキュベート及び
振動させる（図４ｈ）、再び図４ｄを参照すると、もち
ろん、第１の検出可能な応答が与えられないか、又は、
上記記載のように測定することが必要でないかもしくは
所望でない場合には、器具］０を時計と逆の方向に回転
させることによって第１の反応混合物を代りに反応路２
１に沿って第１の反応域３０（図４ｄｌから第２の反応
域３１（図４ｇ）に直接移動させることができる。
測定したら、器具１０を同一方向（時射方向）に回転さ
せて、反応混合物３４を重力によって観察室２２から反
応路２１内に移動させる（図４ｆ）、器具１０を逆の方
向（時計の逆方向）に回転させることによって、第１の
反応混合物３４を重力によって反応路２］に沿って第２
の反応域３１に移動させて第１の反応混合物３４を第２
の反応域３１と接触せしめ、その中に含まれている第２
の分析試薬との第２の反応混合物３５を生成させ（図４
ｇ）、好ましくは上記記載のようにインキュベート及び
振動させる（図４ｈ）、再び図４ｄを参照すると、もち
ろん、第１の検出可能な応答が与えられないか、又は、
上記記載のように測定することが必要でないかもしくは
所望でない場合には、器具］０を時計と逆の方向に回転
させることによって第１の反応混合物を代りに反応路２
１に沿って第１の反応域３０（図４ｄｌから第２の反応
域３１（図４ｇ）に直接移動させることができる。
同様に、第３の反応域３２が存在する場合には、第２の
反応混合物３５を重力によって反応路２１に沿って第３
の反応域３２に移動させるために、同一の方向（時計と
逆の方向）に器具１０を更に回転させることによって、
第２の反応混合物３５を第３の反応域３２と接触せしめ
、その中に含まれている第３の分析試薬との第３の反応
混合物３６を生成させ（図４ｉＬ好ましくは上記記載の
ようにインキュベーション及び振動させる（図４ｊ）０
通常、分析試験工程における最終的な反応混合物、この
場合には第３の反応混合物３６が検出可能な応答を与え
、これを測定し、て液体試験試料中の分析対象物の量と
関連させるか、あるいは、上記記載のように第１の検出
可能な応答が与えられる場合には、これを測定して分析
対象物の関数として第１の検出可能な応答と比較する。
反応混合物３５を重力によって反応路２１に沿って第３
の反応域３２に移動させるために、同一の方向（時計と
逆の方向）に器具１０を更に回転させることによって、
第２の反応混合物３５を第３の反応域３２と接触せしめ
、その中に含まれている第３の分析試薬との第３の反応
混合物３６を生成させ（図４ｉＬ好ましくは上記記載の
ようにインキュベーション及び振動させる（図４ｊ）０
通常、分析試験工程における最終的な反応混合物、この
場合には第３の反応混合物３６が検出可能な応答を与え
、これを測定し、て液体試験試料中の分析対象物の量と
関連させるか、あるいは、上記記載のように第１の検出
可能な応答が与えられる場合には、これを測定して分析
対象物の関数として第１の検出可能な応答と比較する。
どちらの場合においても、器具ｌＯを時計方向に回転さ
せることによって第３の反応混合物３６を観察室２２に
戻す（図４ｋ及び４シ）。
せることによって第３の反応混合物３６を観察室２２に
戻す（図４ｋ及び４シ）。
反応路２１内における反応域の位置は、図４８において
示されているような位置に限定されるものではなく、液
体試験試料及びその分析反応混合物によって接触する反
応路２１上又はそれに沿ったいかなる表面上に配置する
こともできる。例えば、反応域を反応路２１内の所望の
位置の、側壁１３、蓋部材１２又は本体部材１１のいず
れか又は全ての内表面に配置することができる。
示されているような位置に限定されるものではなく、液
体試験試料及びその分析反応混合物によって接触する反
応路２１上又はそれに沿ったいかなる表面上に配置する
こともできる。例えば、反応域を反応路２１内の所望の
位置の、側壁１３、蓋部材１２又は本体部材１１のいず
れか又は全ての内表面に配置することができる。
分析試薬は、非共有結合法、吸着法又は当該技術におい
て公知な他の方法によって反応路２１内に含ませること
ができる。例えば、織成繊維、吸収性材料などのような
吸着材料を含む試薬パッド又は試薬フィルムに、当該技
術において公知の方法によって分析試薬を含ませて、こ
れを液体試験試料と接触する反応路の表面に取り付ける
ことができる。分析試薬はその乾燥形態で含まぜること
が好ましいが、１以上の液体分析試薬を器具の１以上の
領域中に含ませるか又は予め被包して、例えば試験の実
施の前又はその間に除去して液体分析試薬を器具中に放
出することのできる膿によって隔離又は封止することが
できる。
て公知な他の方法によって反応路２１内に含ませること
ができる。例えば、織成繊維、吸収性材料などのような
吸着材料を含む試薬パッド又は試薬フィルムに、当該技
術において公知の方法によって分析試薬を含ませて、こ
れを液体試験試料と接触する反応路の表面に取り付ける
ことができる。分析試薬はその乾燥形態で含まぜること
が好ましいが、１以上の液体分析試薬を器具の１以上の
領域中に含ませるか又は予め被包して、例えば試験の実
施の前又はその間に除去して液体分析試薬を器具中に放
出することのできる膿によって隔離又は封止することが
できる。
本発明器具は上記記載のように限定されるものではなく
、本発明の教示から逸脱することなく修正することがで
きることを理解すべきである。上記記載のような実質的
に円筒形の容器の形態のものに加えて、本発明の器具を
、正方形、長方形、三角形又は本発明の教示から逸脱す
ることのない伯の修正された形状又は構造にすることが
できる６更に、器具の内部、例えば壁の構造は、上記記
載のように限定されるものではなく、該器具の一般的な
形状及び構造に適合させても適合させな（でもよい。し
かしながら、もちろん、かかる修正は、少なくとも、器
具をその水平方向の回転軸の回りを回転させることによ
って、重力によってそれに沿って液体試験試料を移動さ
せることのできる反応路、液体試験試料の反応路内への
一方向の流れを与えるための送出手段、並びに、液体試
験試料を送出手段の中に導入するための導入手段を与え
るものである。
、本発明の教示から逸脱することなく修正することがで
きることを理解すべきである。上記記載のような実質的
に円筒形の容器の形態のものに加えて、本発明の器具を
、正方形、長方形、三角形又は本発明の教示から逸脱す
ることのない伯の修正された形状又は構造にすることが
できる６更に、器具の内部、例えば壁の構造は、上記記
載のように限定されるものではなく、該器具の一般的な
形状及び構造に適合させても適合させな（でもよい。し
かしながら、もちろん、かかる修正は、少なくとも、器
具をその水平方向の回転軸の回りを回転させることによ
って、重力によってそれに沿って液体試験試料を移動さ
せることのできる反応路、液体試験試料の反応路内への
一方向の流れを与えるための送出手段、並びに、液体試
験試料を送出手段の中に導入するための導入手段を与え
るものである。
送出手段は、器具を回転させる必要なしに液体試験試料
を反応路内に重力移動させることのできる実質的に縦方
向の流路の形態のもの又は他の構造のものであってもよ
く、この場合には、反応路内に配置された液体試験試料
又はその反応混合物が上記記載のようなその後の器具の
回転によって送出手段内に再流入することのないように
反応路に対して配置される。導入手段は、上記記載のよ
うに器具の側壁内に与えられた導入口の形態のものであ
ることが好ましいが、導入手段は、もちろん、そこを通
って送出手段内に導入された液体試験試料が、特にその
後の器具の回転中にかかる導入手段を通って器具から漏
出するか又は排出されることがなければ、支持壁又は蓋
部材中などに送出手段に沿って配置することができる。
を反応路内に重力移動させることのできる実質的に縦方
向の流路の形態のもの又は他の構造のものであってもよ
く、この場合には、反応路内に配置された液体試験試料
又はその反応混合物が上記記載のようなその後の器具の
回転によって送出手段内に再流入することのないように
反応路に対して配置される。導入手段は、上記記載のよ
うに器具の側壁内に与えられた導入口の形態のものであ
ることが好ましいが、導入手段は、もちろん、そこを通
って送出手段内に導入された液体試験試料が、特にその
後の器具の回転中にかかる導入手段を通って器具から漏
出するか又は排出されることがなければ、支持壁又は蓋
部材中などに送出手段に沿って配置することができる。
更に、観察域は、上記記載のような観察室の形態のもの
が好ましいが、観察域は、反応路に沿ってその中に予め
定められた領域であって、これから検出可能な応答を検
出及び測定することのできる領域であってもよいと理解
すべきである。また、観察室は、例えば、器具の側壁か
ら引き込み又は突出している形態のものであってよい。
が好ましいが、観察域は、反応路に沿ってその中に予め
定められた領域であって、これから検出可能な応答を検
出及び測定することのできる領域であってもよいと理解
すべきである。また、観察室は、例えば、器具の側壁か
ら引き込み又は突出している形態のものであってよい。
当業者によって理解されるように、本発明の器具を通る
液体試験試料の移動は、器具を上記記載のように実質的
に水平軸の回りを回転させた際に液体試験試料へかかる
重力の結果である。したがって、器具内における液体試
験試料のかかる移動には、遠心力のような機械的に発生
された力を必要とするものではない０本発明による器具
を通る液体試験試料の移動はその重力操作に基くもので
あるので、器具内に配置された液体試験試料は、下部の
面、例えば側壁１３、第１の内部壁１４又は第２の内部
壁１５、蓋部材１２と支持壁１６との間によって保持さ
れる０本発明による器具を通る液体試験試料の移動は、
器具内の液体試験試料の位置に対して上方の表面には実
質的に無関係であることを理解すべきである１例えば、
反応路２１内に配置された際には、液体試験試料の重力
移動は第１の内部壁１４とは無関係であり。
液体試験試料の移動は、器具を上記記載のように実質的
に水平軸の回りを回転させた際に液体試験試料へかかる
重力の結果である。したがって、器具内における液体試
験試料のかかる移動には、遠心力のような機械的に発生
された力を必要とするものではない０本発明による器具
を通る液体試験試料の移動はその重力操作に基くもので
あるので、器具内に配置された液体試験試料は、下部の
面、例えば側壁１３、第１の内部壁１４又は第２の内部
壁１５、蓋部材１２と支持壁１６との間によって保持さ
れる０本発明による器具を通る液体試験試料の移動は、
器具内の液体試験試料の位置に対して上方の表面には実
質的に無関係であることを理解すべきである１例えば、
反応路２１内に配置された際には、液体試験試料の重力
移動は第１の内部壁１４とは無関係であり。
同様に、送出室２３内に配置された際には第２の内部壁
１５とは無関係である。したがって、液体試験試料を第
１の内部壁１４に沿って保持し誘導する場合には第１の
内部壁が機能を果たし、第２の内部壁１５に沿って液体
試験試料を保持し誘導する場合には第２の内部壁がその
機能を果たし、そうでない場合にはそれぞれの壁は実質
的に機能していない。
１５とは無関係である。したがって、液体試験試料を第
１の内部壁１４に沿って保持し誘導する場合には第１の
内部壁が機能を果たし、第２の内部壁１５に沿って液体
試験試料を保持し誘導する場合には第２の内部壁がその
機能を果たし、そうでない場合にはそれぞれの壁は実質
的に機能していない。
反応路２１、送出室２３及び観察室２２は、それぞれ機
能的に、３つの壁、即ち、側壁１３、第１の内部壁及び
第２の内部壁並びに外部壁１６及び蓋部材１２を有して
いるが、それに沿って液体試験試料が誘導され移動せし
めされる機能壁の構造は、図に示されているもののよう
に限定されるものではなく、上記記載のようにそれに沿
って液体試験試料が保持され誘導されるように機能する
ならば修正することができる。例えば、１以上の側壁１
３並びに第１及び第２の内部壁１４及び１５は、Ｖ型、
Ｕ型又はそれに沿って液体試験試料を保持し誘導するた
めの樋状の流路又は導管を与える他の構造のものであっ
てよい。
能的に、３つの壁、即ち、側壁１３、第１の内部壁及び
第２の内部壁並びに外部壁１６及び蓋部材１２を有して
いるが、それに沿って液体試験試料が誘導され移動せし
めされる機能壁の構造は、図に示されているもののよう
に限定されるものではなく、上記記載のようにそれに沿
って液体試験試料が保持され誘導されるように機能する
ならば修正することができる。例えば、１以上の側壁１
３並びに第１及び第２の内部壁１４及び１５は、Ｖ型、
Ｕ型又はそれに沿って液体試験試料を保持し誘導するた
めの樋状の流路又は導管を与える他の構造のものであっ
てよい。
支持壁１６は、蓋部材１２のように別の部品として与え
られていてもよく、この場合には、第１及び第２の内部
壁１４及び１５は側壁１３と一体となっておりかかる別
の支持壁１６及び蓋部材１２によって閉止されている。
られていてもよく、この場合には、第１及び第２の内部
壁１４及び１５は側壁１３と一体となっておりかかる別
の支持壁１６及び蓋部材１２によって閉止されている。
かかる別の支持壁１６及び蓋部材１２は、また、側壁１
３に溶媒溶着、レーザー溶着、接着又は他の方法で取り
付けることができる薄い可撓性膜、フィルム又は薄贋プ
ラスチックの形態のものであってもよい。器具１０は、
また、本体部材１１と実質的に同等の寸法を有する開放
された更なる本体部材を有するように修正し、本体部材
１１を蓋部材１２によって閉止する方法と同様に本体部
材１１の支持壁１６によって閉止するか又は更なる蓋部
材１２によって閉止して取り付けることもできる。かか
る更なる本体部材は、例えば反応路２１の基端部３７に
おける支持壁内に開口を設けることによって更なる分析
試薬を収容するために、反応路２１の伸長部分を有する
ように適合させることもできる。これによって、反応路
２１とかかるその伸長部分との間に開放液体流連絡が与
えられる。
３に溶媒溶着、レーザー溶着、接着又は他の方法で取り
付けることができる薄い可撓性膜、フィルム又は薄贋プ
ラスチックの形態のものであってもよい。器具１０は、
また、本体部材１１と実質的に同等の寸法を有する開放
された更なる本体部材を有するように修正し、本体部材
１１を蓋部材１２によって閉止する方法と同様に本体部
材１１の支持壁１６によって閉止するか又は更なる蓋部
材１２によって閉止して取り付けることもできる。かか
る更なる本体部材は、例えば反応路２１の基端部３７に
おける支持壁内に開口を設けることによって更なる分析
試薬を収容するために、反応路２１の伸長部分を有する
ように適合させることもできる。これによって、反応路
２１とかかるその伸長部分との間に開放液体流連絡が与
えられる。
大きな液体収容容量を有する吸収性の計量パッド又は芯
を本体部材１１の伸長部内に配置し、送出室２３に実質
的に隣接して配置することもできる。かかる計量手段は
、支持壁１６内に与えられた計量開口を通して送出室２
３中に配置される液体試験試料と液体流接触するように
配置される。
を本体部材１１の伸長部内に配置し、送出室２３に実質
的に隣接して配置することもできる。かかる計量手段は
、支持壁１６内に与えられた計量開口を通して送出室２
３中に配置される液体試験試料と液体流接触するように
配置される。
計重量口を支持壁１６中の予め定められたレベルに配置
して、かかる所定のレベルにあるか又はこれを超える送
出室２３内の液体試験試料容量が計量開口を通して計量
手段によって吸収されるようにすることもできる。した
がって、過剰量の試料が計量パッドによって吸収されて
分析試験工程を行なうための所望の最終容量の液体試験
試料が得られるので、かかる軽量手段によって、適当な
容量の液体試験試料のみを送出室２３内に導入すること
が可能になる。当業者によって理解されるように、計量
開口の下部の送出室２３の収容容量によって送出室２３
内の液体試験試料の最終容量を決定し制御することがで
きる。
して、かかる所定のレベルにあるか又はこれを超える送
出室２３内の液体試験試料容量が計量開口を通して計量
手段によって吸収されるようにすることもできる。した
がって、過剰量の試料が計量パッドによって吸収されて
分析試験工程を行なうための所望の最終容量の液体試験
試料が得られるので、かかる軽量手段によって、適当な
容量の液体試験試料のみを送出室２３内に導入すること
が可能になる。当業者によって理解されるように、計量
開口の下部の送出室２３の収容容量によって送出室２３
内の液体試験試料の最終容量を決定し制御することがで
きる。
本発明の教示から逸脱しない更なる実施態様を図５及び
６並びに図９及び１０に示す。特に、図５においては上
記記載のように蓋部材（図７）によって閉止されている
開放されている本体部材４１を有する分析試薬反応容器
又は器具４０が示されている。本体部材４１は、反応路
４３、及び、反応路４３と開放液体流連絡している観察
室４４、並びに、送出室４５の形態の液体試験試料の反
応路４３内への一方向の流れを与える手段を有している
。送出室４５は、外部壁４８上に、これに対して実質的
に垂直に配置されている第１及び第２の内部壁４６及び
４７によって画定されている。反応路４３は、外部壁４
８上にこれに対して実質的に垂直に配置されている側壁
５１によって画定されており、曲線状の壁５２が外部壁
４８上に同様に配置されて観察室４４を形成している。
６並びに図９及び１０に示す。特に、図５においては上
記記載のように蓋部材（図７）によって閉止されている
開放されている本体部材４１を有する分析試薬反応容器
又は器具４０が示されている。本体部材４１は、反応路
４３、及び、反応路４３と開放液体流連絡している観察
室４４、並びに、送出室４５の形態の液体試験試料の反
応路４３内への一方向の流れを与える手段を有している
。送出室４５は、外部壁４８上に、これに対して実質的
に垂直に配置されている第１及び第２の内部壁４６及び
４７によって画定されている。反応路４３は、外部壁４
８上にこれに対して実質的に垂直に配置されている側壁
５１によって画定されており、曲線状の壁５２が外部壁
４８上に同様に配置されて観察室４４を形成している。
本体部材４１は、上記記載のように蓋部材４２によって
閉止されており、本体部材４１の側壁５１が細長い開口
部５３を有し、蓋部材４２が、開口５３よりも短（この
中に挿入される細長いビン５４を有しており、導入口５
５を与えている（図７）。
閉止されており、本体部材４１の側壁５１が細長い開口
部５３を有し、蓋部材４２が、開口５３よりも短（この
中に挿入される細長いビン５４を有しており、導入口５
５を与えている（図７）。
導入口５５を通して導入された液体試験試料は、重力に
よって送出路４５を通して反応路４３内に直接移動する
０次に、器具４０を上記記載のように水平方向の回転軸
の回りを回転させることによって、液体試験試料を重力
によって反応路４３に沿って移動させて、液体試験試料
を反応路の中に含まれている１以上の分析試薬と逐次接
触させ、観察室４４中に移動させることができ同様に、
図６においては、上記記載のように蓋部材によって閉止
されており、反応路６３及び送出路６４を有する開放さ
れている本体部材６１を有する分析試薬反応容器又は器
具６０が示されている。送出路６４は、外部壁６７上に
これに対して垂直に配置されている第１及び第２の内部
壁６５及び６６によって画定されており、反応路６３は
、外部壁６７上に同様に配置されている側壁７０によっ
て画定されている。本体部材６１は、上記記載のように
蓋部材６２によって閉止されており、本体部材６１の側
壁７０が細長い開ロア１を有し、蓋部材６２が、開ロア
１よりも短くこの中に挿入される細長いビン７２を有し
ており導入ロア３を形成している（図８）。
よって送出路４５を通して反応路４３内に直接移動する
０次に、器具４０を上記記載のように水平方向の回転軸
の回りを回転させることによって、液体試験試料を重力
によって反応路４３に沿って移動させて、液体試験試料
を反応路の中に含まれている１以上の分析試薬と逐次接
触させ、観察室４４中に移動させることができ同様に、
図６においては、上記記載のように蓋部材によって閉止
されており、反応路６３及び送出路６４を有する開放さ
れている本体部材６１を有する分析試薬反応容器又は器
具６０が示されている。送出路６４は、外部壁６７上に
これに対して垂直に配置されている第１及び第２の内部
壁６５及び６６によって画定されており、反応路６３は
、外部壁６７上に同様に配置されている側壁７０によっ
て画定されている。本体部材６１は、上記記載のように
蓋部材６２によって閉止されており、本体部材６１の側
壁７０が細長い開ロア１を有し、蓋部材６２が、開ロア
１よりも短くこの中に挿入される細長いビン７２を有し
ており導入ロア３を形成している（図８）。
この態様においては、検出可能な応答を、反応路６３に
沿った実質的にいかなる領域又は区域からも検出し測定
することができる。したがって、上記記載のように液体
試験試料が送出路６４を通して反応路６３内に導入され
たら、器具を水平方向の回転軸の回りを回転させて、液
体試験試料を重力によって反応路６３に沿って移動させ
、その中に含まれている１以上の分析試薬と逐次接触さ
せることができる。検出可能な応答は、反応路６３に沿
った所望の、好ましくは予め定められた観察領域の位置
から検出し測定することができる。
沿った実質的にいかなる領域又は区域からも検出し測定
することができる。したがって、上記記載のように液体
試験試料が送出路６４を通して反応路６３内に導入され
たら、器具を水平方向の回転軸の回りを回転させて、液
体試験試料を重力によって反応路６３に沿って移動させ
、その中に含まれている１以上の分析試薬と逐次接触さ
せることができる。検出可能な応答は、反応路６３に沿
った所望の、好ましくは予め定められた観察領域の位置
から検出し測定することができる。
更に、本発明の器具は、実質的に正方形のものであって
もよく、この場合には、その側壁によって形成された角
が、樋状の反応領域又は観察領域を与えるように機能す
る０例えば、図９においては、４つの側壁７１．７２．
７３及び７４並びに外部壁を有し、これらによって、上
記記載のように蓋部材（図示せず）によって閉止されて
いる実質的に正方形の開放された本体部材７６が形成さ
れている器具７０が示されている５本体部材７６は、側
壁７１．７２．７３及び７４によって形成されている反
応路７７、反応路７７と開放液体流連絡している観察室
７８、並びに、反応路７７内への液体試験試料の一方向
の流れを与えるための送出室７９を有している。送出室
７９は第１の内部壁８０によって形成されており、観察
室７８は第２の内部壁８１によって形成されており、そ
れぞれの壁８０及び８１は外部壁７５上にそれに対して
実質的に垂直に配置されている。液体試験試料を送出室
７９内に導入するための導入口が側壁７１内に与えられ
ている。第１の内部壁８１の端部が、示されているよう
に構成されて試薬室８３の形態の反応域を与えており、
これに分析試薬を含ませて、単に器具７０を大きく回転
させることによって液体試験試料と接触させることがで
きる。かかる試薬室８３は、例えば試験の終了時に標識
試薬の検出可能な化学基と相互作用する検出成分を用い
る場合のように、試験の過程中において分析試薬が液体
試験試料と接触するのを防止することが望ましい場合に
、その中に分析試薬を含ませるのに特に有用である。
もよく、この場合には、その側壁によって形成された角
が、樋状の反応領域又は観察領域を与えるように機能す
る０例えば、図９においては、４つの側壁７１．７２．
７３及び７４並びに外部壁を有し、これらによって、上
記記載のように蓋部材（図示せず）によって閉止されて
いる実質的に正方形の開放された本体部材７６が形成さ
れている器具７０が示されている５本体部材７６は、側
壁７１．７２．７３及び７４によって形成されている反
応路７７、反応路７７と開放液体流連絡している観察室
７８、並びに、反応路７７内への液体試験試料の一方向
の流れを与えるための送出室７９を有している。送出室
７９は第１の内部壁８０によって形成されており、観察
室７８は第２の内部壁８１によって形成されており、そ
れぞれの壁８０及び８１は外部壁７５上にそれに対して
実質的に垂直に配置されている。液体試験試料を送出室
７９内に導入するための導入口が側壁７１内に与えられ
ている。第１の内部壁８１の端部が、示されているよう
に構成されて試薬室８３の形態の反応域を与えており、
これに分析試薬を含ませて、単に器具７０を大きく回転
させることによって液体試験試料と接触させることがで
きる。かかる試薬室８３は、例えば試験の終了時に標識
試薬の検出可能な化学基と相互作用する検出成分を用い
る場合のように、試験の過程中において分析試薬が液体
試験試料と接触するのを防止することが望ましい場合に
、その中に分析試薬を含ませるのに特に有用である。
器具の４つの角部８４．８５．８６及び８７は樋状の領
域を形成しており、これを反応域として機能させること
ができ、この場合には分析試薬を１以上の角部８４．８
５．８６及び８７の接触可能な表面中に含ませることが
できる。したがって、器具７０を上記記載のように水平
方向の回転軸の回りを回転させることによって、器具７
０内に導入した液体試験試料を重力によって反応路７７
に沿って移動させて角部８４．８５．８６及び８７中に
含まれている分析試薬と接触させることができる。
域を形成しており、これを反応域として機能させること
ができ、この場合には分析試薬を１以上の角部８４．８
５．８６及び８７の接触可能な表面中に含ませることが
できる。したがって、器具７０を上記記載のように水平
方向の回転軸の回りを回転させることによって、器具７
０内に導入した液体試験試料を重力によって反応路７７
に沿って移動させて角部８４．８５．８６及び８７中に
含まれている分析試薬と接触させることができる。
本発明の更に他の態様においては、図１０において、４
つの壁部９１．９２．９３及び９４並びに外部壁９５を
有し、これらが蓋部材（図示せず）によって閉止されて
いる実質的に正方形の開放された本体部材９６を形成し
ている器具９０が示されている０本体部材９６は、側壁
９１．９２．９３及び９４によって形成きれている反応
路９７、並びに、第１及び第２の内部壁９９及び１００
によって形成されてあり、液体試験試料の反応路９７内
への一方向の流れを与えるための送出路９８を有してい
る。導入口ｌｏｔが側壁９１及び９４の間に与えられて
おり、導入口１０１を通って送出路９Ｂ内に導入された
液体試験試料が反応路９７内に直接移動する。
つの壁部９１．９２．９３及び９４並びに外部壁９５を
有し、これらが蓋部材（図示せず）によって閉止されて
いる実質的に正方形の開放された本体部材９６を形成し
ている器具９０が示されている０本体部材９６は、側壁
９１．９２．９３及び９４によって形成きれている反応
路９７、並びに、第１及び第２の内部壁９９及び１００
によって形成されてあり、液体試験試料の反応路９７内
への一方向の流れを与えるための送出路９８を有してい
る。導入口ｌｏｔが側壁９１及び９４の間に与えられて
おり、導入口１０１を通って送出路９Ｂ内に導入された
液体試験試料が反応路９７内に直接移動する。
器具９０の５つの角部１０２．１０３．１０４．１０５
及び１０６によって樋状の領域が形成され、これを反応
域として機能させることができ、この場合には、上記記
載のように分析試薬を１以上の接触可能な供給部に含ま
せることができる。
及び１０６によって樋状の領域が形成され、これを反応
域として機能させることができ、この場合には、上記記
載のように分析試薬を１以上の接触可能な供給部に含ま
せることができる。
角部１０２．１０３．１０４．１０５又は１０６の予め
定められたいずれかの部分、好ましくは角部１０４を観
察区域又・は領域として機能させることができることを
理解すべきである。したがって、器具９０内に導入され
た液体試験試料を重力によって反応路９７に沿って移動
させて、１以上の角部１０２．１０３，１０４，１０５
又は１０６中に含まれている分析試薬と接触させ、それ
から生成する検出可能な応答を予め定められた角部１０
２．１０３，１０４、ＩＯ’５又は１０６から検出し測
定することができる。
定められたいずれかの部分、好ましくは角部１０４を観
察区域又・は領域として機能させることができることを
理解すべきである。したがって、器具９０内に導入され
た液体試験試料を重力によって反応路９７に沿って移動
させて、１以上の角部１０２．１０３，１０４，１０５
又は１０６中に含まれている分析試薬と接触させ、それ
から生成する検出可能な応答を予め定められた角部１０
２．１０３，１０４、ＩＯ’５又は１０６から検出し測
定することができる。
図１〜４において示された好ましい態様に戻ると、本発
明器具１０は、ヘモグロビンＡｌｃ（ＨｂＡｌｃ）、グ
リケート化（ｇｌｙｃａｔｅｄ） ヘモグロビン誘導体
を測定するためのイムノタービディメトリックアッセイ
（ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａ
ｙｌを行なうのに特に有用である。かかる試験によれば
、全血試料中のヘモグロビンを変性チオシアン−メト−
ヘモグロビンの形態に転化させ、これを全試料ヘモグロ
ビンの最初の測定のベースとして用い、次に、イムノア
ッセイによって生成する変性Ｈｂ Ａ １ ｃを測定す
る。イムノアッセイは、米国特許出願筒１１８．４６９
号：同第１１８．４７６号及び同第１１８．５６６号に
記載されているもののような抗体粒子試薬と凝集試薬と
の特異的な相互作用に基くものである。
明器具１０は、ヘモグロビンＡｌｃ（ＨｂＡｌｃ）、グ
リケート化（ｇｌｙｃａｔｅｄ） ヘモグロビン誘導体
を測定するためのイムノタービディメトリックアッセイ
（ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａ
ｙｌを行なうのに特に有用である。かかる試験によれば
、全血試料中のヘモグロビンを変性チオシアン−メト−
ヘモグロビンの形態に転化させ、これを全試料ヘモグロ
ビンの最初の測定のベースとして用い、次に、イムノア
ッセイによって生成する変性Ｈｂ Ａ １ ｃを測定す
る。イムノアッセイは、米国特許出願筒１１８．４６９
号：同第１１８．４７６号及び同第１１８．５６６号に
記載されているもののような抗体粒子試薬と凝集試薬と
の特異的な相互作用に基くものである。
抗体粒子試薬は、水懸濁性粒子（例えばポリスチレン又
は他のラテックス）に結合している変性ヘモグロビンの
β−サブユニット中のグリケート化Ｎ−末端ペブチド連
鎖に特異的な抗体又はそのフラグメントを含んでいる。
は他のラテックス）に結合している変性ヘモグロビンの
β−サブユニット中のグリケート化Ｎ−末端ペブチド連
鎖に特異的な抗体又はそのフラグメントを含んでいる。
有用なかかるラテックス粒子は、ラテックス凝集イムノ
アッセイの分野に詳しい研究者には明らかであろう、概
して、かかる粒子は、試験のための所望の凝集試薬用の
安定な支持体として機能し、分析の目的のために十分な
凝集試薬の存在下において凝集作用を起こすのに必要な
特性を必要とする。ラテックス粒子は、通常、乳化重合
又は懸濁重合によって製造される［Ｂａｎｇｓ、Ｌ、Ｇ
、 （１９８４） Ｕｎｉｆｏｒｍ ＬａｔｅｘＰａ
ｒｔｉｃｌｅｓ、 Ｓｅｒａｇｅｎ Ｄｉａｇｎｏ
ｓｔｉｃｓ Ｉｎｃ、、 Ｉｎｄｉａｎａ−ｐｏｌ
ｉｓ、 ＩＮ、 ＵＳＡｌ、また、膨潤乳化重合を用い
ることもできる［Ｕｇｅｌｓｔａｄ、Ｊ、ら、 ｆ１９
８０１ Ａｄｖ、 Ｃｏ１１ｏｉｄａｎｄ Ｉｎｔｅｒ
ｆａｃｅ Ｓｃｉ、 １３：１０１−１４０］、良好な
ラテックス粒子を市販のものから選択することができる
。ポリスチレン粒子が特に有用である。
アッセイの分野に詳しい研究者には明らかであろう、概
して、かかる粒子は、試験のための所望の凝集試薬用の
安定な支持体として機能し、分析の目的のために十分な
凝集試薬の存在下において凝集作用を起こすのに必要な
特性を必要とする。ラテックス粒子は、通常、乳化重合
又は懸濁重合によって製造される［Ｂａｎｇｓ、Ｌ、Ｇ
、 （１９８４） Ｕｎｉｆｏｒｍ ＬａｔｅｘＰａ
ｒｔｉｃｌｅｓ、 Ｓｅｒａｇｅｎ Ｄｉａｇｎｏ
ｓｔｉｃｓ Ｉｎｃ、、 Ｉｎｄｉａｎａ−ｐｏｌ
ｉｓ、 ＩＮ、 ＵＳＡｌ、また、膨潤乳化重合を用い
ることもできる［Ｕｇｅｌｓｔａｄ、Ｊ、ら、 ｆ１９
８０１ Ａｄｖ、 Ｃｏ１１ｏｉｄａｎｄ Ｉｎｔｅｒ
ｆａｃｅ Ｓｃｉ、 １３：１０１−１４０］、良好な
ラテックス粒子を市販のものから選択することができる
。ポリスチレン粒子が特に有用である。
ラテックス粒子に凝集試薬を付着させることは通常の技
術である０通常、付着は共有結合であっても非共有結合
であってもよい、凝集試薬は、全抗体、抗体フラグメン
ト、多機能抗体集合体などから成っていてよい。通常は
、全抗体又はＦａｂ、Ｆａｂ’又はＦ（ａｂ’）２のよ
うなＩｇＧフラグメントを用いる。凝集試薬は、通常の
抗血清及びモノクローナル法のようないかなる利用しつ
る方法によっても誘導することができる。
術である０通常、付着は共有結合であっても非共有結合
であってもよい、凝集試薬は、全抗体、抗体フラグメン
ト、多機能抗体集合体などから成っていてよい。通常は
、全抗体又はＦａｂ、Ｆａｂ’又はＦ（ａｂ’）２のよ
うなＩｇＧフラグメントを用いる。凝集試薬は、通常の
抗血清及びモノクローナル法のようないかなる利用しつ
る方法によっても誘導することができる。
凝集試薬は、凝集試薬のための多数のエビトビツク（ｅ
ｐｉｔｏｐｉｃｌな結合部位を有し、凝集イムノアッセ
イの分野で通常の方法によって製造することができる。
ｐｉｔｏｐｉｃｌな結合部位を有し、凝集イムノアッセ
イの分野で通常の方法によって製造することができる。
この試薬は、概括的に言うと、抗分析対象物凝集試薬の
ための多数のエビトビツクな結合部位を有するものであ
る。かかる部位は、分析対象物自身、又は、試験の目的
のために抗体によって結合するのに十分な能力が保持さ
れている好適な類縁体を用いることによって提供するこ
とができる。蛋白質分析対象物の場合には、かかる類縁
体は、合成によって又は熟成することによって製造され
、凝集試薬に対するエピトープ、例えばヘモグロビンＡ
ｌｃのグリケート化ペプチド残基を有するものである。
ための多数のエビトビツクな結合部位を有するものであ
る。かかる部位は、分析対象物自身、又は、試験の目的
のために抗体によって結合するのに十分な能力が保持さ
れている好適な類縁体を用いることによって提供するこ
とができる。蛋白質分析対象物の場合には、かかる類縁
体は、合成によって又は熟成することによって製造され
、凝集試薬に対するエピトープ、例えばヘモグロビンＡ
ｌｃのグリケート化ペプチド残基を有するものである。
実質的に図４ａ〜４Ｊ２において示されているように、
ＨｂＡｌｃに関するイムノタービディメトリックアッセ
イをその中で行なうために上記記載の試薬を器具１０内
に含ませることができる。特に、第１の反応域３０に、
チオシアネート塩及び天然のヘモグロビン第１鉄イオン
をその第２鉄メトヘモグロビンの形態に転化させるのに
十分な酸化剤を含む乾燥した可溶性の形態の変性剤を含
ませ；第２の反応域３１に、乾燥した懸濁性の形態の抗
体粒子試薬を含ませ：第３の反応域３２に乾燥した可溶
性の形態の凝集試薬を含ませることができる。全血試験
試料３３又はそれを予め処理した試料を、導入口２９を
通して送出室２３内に導入しく図４ａ）、器具１０を時
計方向に回転させることによって、第１の反応域３０内
において変性剤と接触させて第１の反応混合物を生成さ
せ（図４ｂ〜４ｄＬ好ましくは、約３〜５分間、好まし
くは約２５〜約３９℃の温度、より好ましくは約３７°
Ｃの温度でインキュベーションする。次に、器具ｌＯを
時計方向に更に回転させることによって第１の反応混合
物３４を観察室内に移動させ（図４ｅ）、好ましくは約
５４０ｎｍにおいてその吸光度を測定することによって
全ヘモグロビン含量を測定する。次に、器具１０をまず
時計方向に回転させ（図４ｆ）、次に時計と逆の方向に
回転させる（図４ｇ）ことによって、第１の反応混合物
３４を第２の反応域３１内において抗体粒子試薬と接触
させて第２の反応混合物３５を生成させる６第２の反応
混合物３５を、好ましくは上記記載のようにインキュベ
ーションし、所望の場合番こは、試料プランク測定を行
なうために器具ｌＯを時計方向に回転させることによっ
て（図示せず）観察室２２内に移動させる６次に、反応
容器１０を時計と逆の方向に回転させる（図４１及び４
ｊ）ことによって第２の反応混合物３５を第３の反応域
３２内において凝集剤と接触させて第３の反応混合物３
６を生成させ、上記記載のようにインキュベーションす
る。抗体粒子と凝集剤とが互いに結合して光拡散コンプ
レックスを形成する度合が、存在するＨｂＡｌｃの量に
基くものであり、これをタービディメトリック測定によ
って容易に定量することができる。
ＨｂＡｌｃに関するイムノタービディメトリックアッセ
イをその中で行なうために上記記載の試薬を器具１０内
に含ませることができる。特に、第１の反応域３０に、
チオシアネート塩及び天然のヘモグロビン第１鉄イオン
をその第２鉄メトヘモグロビンの形態に転化させるのに
十分な酸化剤を含む乾燥した可溶性の形態の変性剤を含
ませ；第２の反応域３１に、乾燥した懸濁性の形態の抗
体粒子試薬を含ませ：第３の反応域３２に乾燥した可溶
性の形態の凝集試薬を含ませることができる。全血試験
試料３３又はそれを予め処理した試料を、導入口２９を
通して送出室２３内に導入しく図４ａ）、器具１０を時
計方向に回転させることによって、第１の反応域３０内
において変性剤と接触させて第１の反応混合物を生成さ
せ（図４ｂ〜４ｄＬ好ましくは、約３〜５分間、好まし
くは約２５〜約３９℃の温度、より好ましくは約３７°
Ｃの温度でインキュベーションする。次に、器具ｌＯを
時計方向に更に回転させることによって第１の反応混合
物３４を観察室内に移動させ（図４ｅ）、好ましくは約
５４０ｎｍにおいてその吸光度を測定することによって
全ヘモグロビン含量を測定する。次に、器具１０をまず
時計方向に回転させ（図４ｆ）、次に時計と逆の方向に
回転させる（図４ｇ）ことによって、第１の反応混合物
３４を第２の反応域３１内において抗体粒子試薬と接触
させて第２の反応混合物３５を生成させる６第２の反応
混合物３５を、好ましくは上記記載のようにインキュベ
ーションし、所望の場合番こは、試料プランク測定を行
なうために器具ｌＯを時計方向に回転させることによっ
て（図示せず）観察室２２内に移動させる６次に、反応
容器１０を時計と逆の方向に回転させる（図４１及び４
ｊ）ことによって第２の反応混合物３５を第３の反応域
３２内において凝集剤と接触させて第３の反応混合物３
６を生成させ、上記記載のようにインキュベーションす
る。抗体粒子と凝集剤とが互いに結合して光拡散コンプ
レックスを形成する度合が、存在するＨｂＡｌｃの量に
基くものであり、これをタービディメトリック測定によ
って容易に定量することができる。
次に、器具ｌＯを時計方向に回転させる（図４ｋ及び４
Ｉ２）ことにより、第３の反応混合物３６を観察室２２
内に移動させることによってＨｂＡｌｃの測定を行なう
。第３の反応混合物３６の濁度を上記記載のようにして
測定する。
Ｉ２）ことにより、第３の反応混合物３６を観察室２２
内に移動させることによってＨｂＡｌｃの測定を行なう
。第３の反応混合物３６の濁度を上記記載のようにして
測定する。
第３の反応混合物３６のクービディメトリック応答及び
第１の反応混合物３４の全ヘモグロビン測定値をＨｂＡ
ｌｃ及び試料中の全ヘモグロビンの量に関連させて、次
に、全血試験試料中のグリケート化ヘモグロビンの割合
（％）を計算する。
第１の反応混合物３４の全ヘモグロビン測定値をＨｂＡ
ｌｃ及び試料中の全ヘモグロビンの量に関連させて、次
に、全血試験試料中のグリケート化ヘモグロビンの割合
（％）を計算する。
本発明器具を用いて、概して種々の試験試料、例えば血
清、血漿及び尿中の対象となる分析対象物を測定する当
該技術において公知なタービディメトリック及びネフェ
ロメトリックアッセイを行なうことができる６例えば、
凝集イムノアッセイ及び凝集抑制イムノアッセイの分析
試薬を、液体試験試料によって接触させる所望の順番で
反応路内に含ませてこれらのイムノアッセイを行なうこ
とができる。
清、血漿及び尿中の対象となる分析対象物を測定する当
該技術において公知なタービディメトリック及びネフェ
ロメトリックアッセイを行なうことができる６例えば、
凝集イムノアッセイ及び凝集抑制イムノアッセイの分析
試薬を、液体試験試料によって接触させる所望の順番で
反応路内に含ませてこれらのイムノアッセイを行なうこ
とができる。
本発明の他の好ましい態様によれば、該器具は、分析対
象物間の結合、検出可能な化学基によって標識された抗
分析対象物凝集試薬を含む標識化試薬及び固定化形態の
分析対象物又はその結合類縁体を用いるイムノメトリッ
クアッセイを行なうのにも有用である。かかるアッセイ
によれば、液体試験試料からの分析対象物又は固定化形
態の分析対象物に結合しているものに結合した標識化凝
集試薬の量を測定し、試験試料中に存在する分析対象物
の量に関連付ける。
象物間の結合、検出可能な化学基によって標識された抗
分析対象物凝集試薬を含む標識化試薬及び固定化形態の
分析対象物又はその結合類縁体を用いるイムノメトリッ
クアッセイを行なうのにも有用である。かかるアッセイ
によれば、液体試験試料からの分析対象物又は固定化形
態の分析対象物に結合しているものに結合した標識化凝
集試薬の量を測定し、試験試料中に存在する分析対象物
の量に関連付ける。
凝集試薬の抗体成分は、公知のイムノグロブリンの任意
のクラス及びサブクラス、例えばＩｇＧ、ＩｇＭなどの
ような全抗体であっても、あるいは、通常はそれぞれＦ
ａｂ及びＦａｂ’並びにＦ（ａｂ’ｌｚとして知られて
いるＩｇＧの単価又は２側坑体フラグメントであっても
よい、好ましくは、抗体は、通常、２側坑体フラグメン
トＦｆａｂ’）を又はより好ましくは単価抗体フラグメ
ントＦａｂもしくはＦａｂ’である。２価及び単価Ｉｇ
Ｇ抗体フラグメントは、ペプシン又はパパインによる標
準蛋白質分解消化法を用いる技術において公知な方法に
よって得ることができる。
のクラス及びサブクラス、例えばＩｇＧ、ＩｇＭなどの
ような全抗体であっても、あるいは、通常はそれぞれＦ
ａｂ及びＦａｂ’並びにＦ（ａｂ’ｌｚとして知られて
いるＩｇＧの単価又は２側坑体フラグメントであっても
よい、好ましくは、抗体は、通常、２側坑体フラグメン
トＦｆａｂ’）を又はより好ましくは単価抗体フラグメ
ントＦａｂもしくはＦａｂ’である。２価及び単価Ｉｇ
Ｇ抗体フラグメントは、ペプシン又はパパインによる標
準蛋白質分解消化法を用いる技術において公知な方法に
よって得ることができる。
標識化試薬の検出可能な化学基は、検出可能な物理的又
は化学的特性を有するいかなる物質であってもよい。か
かる物質はイムノアッセイの分野においてよく研究され
ており、概して、かかる方法において有用ないかなる標
識をかかるイムノメトリックアッセイ法に適用すること
もできる。
は化学的特性を有するいかなる物質であってもよい。か
かる物質はイムノアッセイの分野においてよく研究され
ており、概して、かかる方法において有用ないかなる標
識をかかるイムノメトリックアッセイ法に適用すること
もできる。
例えば、検出可能な物理特性を有するかかる化学基は、
蛍光団、リン光分子、発色団、放射性同位体、スピン標
識又は電気活性成分のような検出可能な信号を生成させ
るために、他の化学物質又は物質と化学的反応又は相互
作用することを必要としないで、それ自身の物理特性Ｇ
こ基いて検出される基である。検出可能な化学特性を有
する化学基は、それ自身の化学反応性に基くか又は検出
可能な信号を与えるために検出剤成分と相互作用させる
ことによって検出される基である。検出可能な化学特性
を有するかかる化学基は、かかる検出剤成分を相互作用
させる前には検出可能な生成物を与えないか又は検出可
能な信号を与えないものであり、その例としては、酵素
、酵素基質、補酵素、酵素抑制剤及び活性剤、化学発光
種、化学触媒、金属触媒、酵素チャネリング部材、フロ
ロホア急冷剤又はエネルギー移動対並びにビオチン又は
ハブテンのような特異的に結合可能なリガンドのような
酵素的に活性な基である。
蛍光団、リン光分子、発色団、放射性同位体、スピン標
識又は電気活性成分のような検出可能な信号を生成させ
るために、他の化学物質又は物質と化学的反応又は相互
作用することを必要としないで、それ自身の物理特性Ｇ
こ基いて検出される基である。検出可能な化学特性を有
する化学基は、それ自身の化学反応性に基くか又は検出
可能な信号を与えるために検出剤成分と相互作用させる
ことによって検出される基である。検出可能な化学特性
を有するかかる化学基は、かかる検出剤成分を相互作用
させる前には検出可能な生成物を与えないか又は検出可
能な信号を与えないものであり、その例としては、酵素
、酵素基質、補酵素、酵素抑制剤及び活性剤、化学発光
種、化学触媒、金属触媒、酵素チャネリング部材、フロ
ロホア急冷剤又はエネルギー移動対並びにビオチン又は
ハブテンのような特異的に結合可能なリガンドのような
酵素的に活性な基である。
固定化形態の分析対象物又はその結合類縁体は、当該技
術において公知の方法によって第２の反応域３１として
示された領域中の反応路２１の表面に固定化又は結合さ
せるか、あるいは、上記記載のような試薬パッドもしく
はフィルム中に固定化形態として含ませることができる
。
術において公知の方法によって第２の反応域３１として
示された領域中の反応路２１の表面に固定化又は結合さ
せるか、あるいは、上記記載のような試薬パッドもしく
はフィルム中に固定化形態として含ませることができる
。
一方、分析対象物又はその結合類縁体を１通常は常ｍ性
体と称されている、永久的に磁化されることなく磁場に
応答する磁場応答性試薬粒子に固定化させることができ
る。例えば、かかる常磁挙動は、通常、約３００人より
少ない結晶径を有する鉄酸化物によって示されるが、約
５００人より大きな結晶径を有する鉄酸化物は、磁場に
応答して永久的に磁化されることを更に有する。したが
って、かかる磁場応答性試薬粒子は永久的に磁化するこ
となく磁場に曝露することができるが、そうでない場合
には、イムノアッセイの実施中に望ましくない磁性凝集
が起こる。
体と称されている、永久的に磁化されることなく磁場に
応答する磁場応答性試薬粒子に固定化させることができ
る。例えば、かかる常磁挙動は、通常、約３００人より
少ない結晶径を有する鉄酸化物によって示されるが、約
５００人より大きな結晶径を有する鉄酸化物は、磁場に
応答して永久的に磁化されることを更に有する。したが
って、かかる磁場応答性試薬粒子は永久的に磁化するこ
となく磁場に曝露することができるが、そうでない場合
には、イムノアッセイの実施中に望ましくない磁性凝集
が起こる。
かかる磁場応答性粒子は当該技術において公知であり、
市販されているか、あるいは、格子又は孔を有するポリ
マーをその中に配置された磁性材料と共に用いている米
国特許筒４．３３５゜０９４号】ビニル芳香族ポリマー
によって被包されている磁性コアを用いている米国特許
筒４．３３９．３３７号及び同第４．３５８゜３８８号
；生物学的分子をそこに結合させるための懸垂官能基を
有する多糖類によって被覆されているコロイド状のｍ性
鉄酸化物を用いている米国特許筒４．４５２．７７３号
：並びにシラン被覆によって１既して被包されている金
属酸化物コアを用いている米国特許筒４，５５４．０８
８号及び同第４．６２８．０３７号に記載されているよ
うな当該技術において公知の方法によって製造すること
ができる。
市販されているか、あるいは、格子又は孔を有するポリ
マーをその中に配置された磁性材料と共に用いている米
国特許筒４．３３５゜０９４号】ビニル芳香族ポリマー
によって被包されている磁性コアを用いている米国特許
筒４．３３９．３３７号及び同第４．３５８゜３８８号
；生物学的分子をそこに結合させるための懸垂官能基を
有する多糖類によって被覆されているコロイド状のｍ性
鉄酸化物を用いている米国特許筒４．４５２．７７３号
：並びにシラン被覆によって１既して被包されている金
属酸化物コアを用いている米国特許筒４，５５４．０８
８号及び同第４．６２８．０３７号に記載されているよ
うな当該技術において公知の方法によって製造すること
ができる。
好ましくは、かかる均一なラテックス粒子は、大きく重
力沈降することなく水性媒体中で分散又は懸濁しつるも
のであり、したがって、定常的に混合することなく反応
混合物中に懸濁状態で保持されつる、即ち水懸濁性のも
のである。したがって、ブラウン運動及び高い表面／容
量比と共に、十分でかつ迅速な結合速度が得られる。
力沈降することなく水性媒体中で分散又は懸濁しつるも
のであり、したがって、定常的に混合することなく反応
混合物中に懸濁状態で保持されつる、即ち水懸濁性のも
のである。したがって、ブラウン運動及び高い表面／容
量比と共に、十分でかつ迅速な結合速度が得られる。
分析対象物又はその結合類縁体を、当該技術において公
知の方法によってかかる常磁性粒子に固定化することが
できる。例えば、分析対象物又はその結合類縁体を磁場
応答性試薬粒子に共有結合させることが所望の場合には
、粒子は、多官能性のものであるか、又は、例えば当該
技術において公知な共有カップリング法（例えば、Ｃｕ
ａｔｒｅｃａｓａｓ、 Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈ
ｅｍ、 ｖｏｌ、２４５． ｐ、３０５９（１９７
０１参照）によって導入することのできる官能基によっ
て多官能化することのできるものでなければならない。
知の方法によってかかる常磁性粒子に固定化することが
できる。例えば、分析対象物又はその結合類縁体を磁場
応答性試薬粒子に共有結合させることが所望の場合には
、粒子は、多官能性のものであるか、又は、例えば当該
技術において公知な共有カップリング法（例えば、Ｃｕ
ａｔｒｅｃａｓａｓ、 Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈ
ｅｍ、 ｖｏｌ、２４５． ｐ、３０５９（１９７
０１参照）によって導入することのできる官能基によっ
て多官能化することのできるものでなければならない。
官能基としては、カルボン酸、アルデヒド、アミン、ア
ミド、マレイミドのような活性化エチレン類、ヒドロキ
シル類、スルホン酸類、メルカプタンなどが挙げられる
。例えば、アガロース及びポリアクリルアミドに分析対
象物及び他の生物学的分子を結合させることが、Ｗ、
Ｂ、 Ｊａｃｏｂｙ及び！Ｊ、Ｗｉｌｃｈｅｋ、 Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ−１ｏｇｙ、 ｖｏｌ
、３４． Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、 Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ（１９７４１において記載されている。
ミド、マレイミドのような活性化エチレン類、ヒドロキ
シル類、スルホン酸類、メルカプタンなどが挙げられる
。例えば、アガロース及びポリアクリルアミドに分析対
象物及び他の生物学的分子を結合させることが、Ｗ、
Ｂ、 Ｊａｃｏｂｙ及び！Ｊ、Ｗｉｌｃｈｅｋ、 Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ−１ｏｇｙ、 ｖｏｌ
、３４． Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、 Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ（１９７４１において記載されている。
本発明の器具１０を用いて上記記載のようなイムノメト
リックアッセイを行なう場合には、第１の反応域３０に
乾燥した可溶性の形態の抗分析対象物凝集試薬を含ませ
、第２の反応域３１に、支持壁１６、側壁１３又は蓋部
材１２の内表面又はその上に固定化された固定化形態の
分析対象物又はその結合類縁体を含ませることができる
。
リックアッセイを行なう場合には、第１の反応域３０に
乾燥した可溶性の形態の抗分析対象物凝集試薬を含ませ
、第２の反応域３１に、支持壁１６、側壁１３又は蓋部
材１２の内表面又はその上に固定化された固定化形態の
分析対象物又はその結合類縁体を含ませることができる
。
方１分析対象物又はその結合類縁体を上記記載のように
常６Ｒ性の試薬粒子に固定化させる場合には、かかる常
ｍ性試薬粒子を乾燥した懸濁性の形態で含ませて、反応
路２１に沿った自由流動を防止することが所望の場合に
は、液体試験試料又はその反応混合物によって懸濁させ
た際に磁気によって保持する。標識試薬が上記記載のよ
うな検出可能な化学特性を有する場合には、第３の反応
域３２に乾燥した可溶性の形態の検出剤成分を含ませる
ことができる、したがって、標識試薬の検出可能な化学
基が上記記載のような検出可能な物理特性を有する場合
には、第３の反応域３２は必要ではないことを理解すべ
きである。更に、標識試薬の検出可能な化学基が検出可
能な化学特性を有しており、分析対象物又はその結合類
縁体を上記記載のような常磁性の粒子に固定化させる場
合には、試験の進行中に、その中に含まれている検出剤
成分と常磁性の試薬粒子に固定化されている分析対象物
に結合していてもよい標識試薬の検出可能な化学基との
相互作用を防止するために、第３の反応域３２を好まし
くは観察室２２の下部に配置するか、又は、図９におい
て示されている反応室８３のように試薬室を与えること
ができる。
常６Ｒ性の試薬粒子に固定化させる場合には、かかる常
ｍ性試薬粒子を乾燥した懸濁性の形態で含ませて、反応
路２１に沿った自由流動を防止することが所望の場合に
は、液体試験試料又はその反応混合物によって懸濁させ
た際に磁気によって保持する。標識試薬が上記記載のよ
うな検出可能な化学特性を有する場合には、第３の反応
域３２に乾燥した可溶性の形態の検出剤成分を含ませる
ことができる、したがって、標識試薬の検出可能な化学
基が上記記載のような検出可能な物理特性を有する場合
には、第３の反応域３２は必要ではないことを理解すべ
きである。更に、標識試薬の検出可能な化学基が検出可
能な化学特性を有しており、分析対象物又はその結合類
縁体を上記記載のような常磁性の粒子に固定化させる場
合には、試験の進行中に、その中に含まれている検出剤
成分と常磁性の試薬粒子に固定化されている分析対象物
に結合していてもよい標識試薬の検出可能な化学基との
相互作用を防止するために、第３の反応域３２を好まし
くは観察室２２の下部に配置するか、又は、図９におい
て示されている反応室８３のように試薬室を与えること
ができる。
上記記載のような器具１０内に含まれている分析試薬を
用いてかかるイムノメトリックアッセイを行なう場合に
は、尿、血清、血漿又は他の生物学的液体あるいはその
希釈物のような液体試験試料を、導入口２９を通して送
出室２３内に導入しく図４ａ）、器具１０を時計方向に
回転させることによって、第１の反応域３０内の標識試
薬と接触させて第１の反応混合物３４を生成させ（図４
ｂ及び４ｃ）、上記記載のようにインキュベーションす
る（図４ｄ）０次に、器具１０を時計と逆の方向に回転
させることによって、第１の反応混合物３４を反応路２
１に沿って移動させて第２の反応域３１内の固定化形態
の分析対象物又はその結合類縁体と接触させて第２の反
応混合物３５を生成させ（図４ｇ）、上記記載のように
インキュベーションする（図４ｈｌ、したがって、標識
試薬の遊離種の全てが第２の反応域３１内において分析
対象物又はその結合類縁体に結合しかつこれによって固
定化され、標識試薬の固定化種が自由に移動しつる種と
して液体媒体中に残留する。
用いてかかるイムノメトリックアッセイを行なう場合に
は、尿、血清、血漿又は他の生物学的液体あるいはその
希釈物のような液体試験試料を、導入口２９を通して送
出室２３内に導入しく図４ａ）、器具１０を時計方向に
回転させることによって、第１の反応域３０内の標識試
薬と接触させて第１の反応混合物３４を生成させ（図４
ｂ及び４ｃ）、上記記載のようにインキュベーションす
る（図４ｄ）０次に、器具１０を時計と逆の方向に回転
させることによって、第１の反応混合物３４を反応路２
１に沿って移動させて第２の反応域３１内の固定化形態
の分析対象物又はその結合類縁体と接触させて第２の反
応混合物３５を生成させ（図４ｇ）、上記記載のように
インキュベーションする（図４ｈｌ、したがって、標識
試薬の遊離種の全てが第２の反応域３１内において分析
対象物又はその結合類縁体に結合しかつこれによって固
定化され、標識試薬の固定化種が自由に移動しつる種と
して液体媒体中に残留する。
標識試薬の検出可能な化学基が検出可能な物理特性を有
する場合には、器具１０を時計方向に回転させることに
よって、標識試薬の結合種を含む第２の反応混合物３５
（図４ｇ）を重力によって反応路２１に沿って観察室２
２内に移動させる。
する場合には、器具１０を時計方向に回転させることに
よって、標識試薬の結合種を含む第２の反応混合物３５
（図４ｇ）を重力によって反応路２１に沿って観察室２
２内に移動させる。
次に、観察室２２内において、標識試薬の結合種によっ
て生成した第２の反応混合物３５の検出可能な物理特性
を当該技術において公知の方法によって測定し、液体試
験試料中の分析対象物の量に関連させる１分析対象物又
はその結合類縁体を第２の反応域３１内において常磁性
の試薬粒子に固定化させ、したがって第２の反応混合物
２５中において懸濁した自由に流動する形態のものとし
て存在させる場合には、第２の反応混合物３５を観察室
２２に移動させる際に器具ｌＯを回転させる前に常磁性
の試薬粒子を磁気によって保持する。このようにして、
結合種が常磁性の試薬粒子に固定化された標識試薬の遊
離種から分離され、常磁性粒子が観察室２２内に移動す
ることが防止され、それから生成する検出可能な応答を
測定するために結合種を観察室２２内に自由に移動させ
ることができる。
て生成した第２の反応混合物３５の検出可能な物理特性
を当該技術において公知の方法によって測定し、液体試
験試料中の分析対象物の量に関連させる１分析対象物又
はその結合類縁体を第２の反応域３１内において常磁性
の試薬粒子に固定化させ、したがって第２の反応混合物
２５中において懸濁した自由に流動する形態のものとし
て存在させる場合には、第２の反応混合物３５を観察室
２２に移動させる際に器具ｌＯを回転させる前に常磁性
の試薬粒子を磁気によって保持する。このようにして、
結合種が常磁性の試薬粒子に固定化された標識試薬の遊
離種から分離され、常磁性粒子が観察室２２内に移動す
ることが防止され、それから生成する検出可能な応答を
測定するために結合種を観察室２２内に自由に移動させ
ることができる。
また、標識試薬の検出可能な化学基が検出可能な化学特
性を有する場合には、器具１０を時計と逆の方向に回転
させることによって第２の反応混合物３５を第３の反応
域３２内の検出剤成分と接触させ（図４ｉ１．上記記載
のようにインキュベーションして（図４ｊ）標識試薬の
検出可能な化学基とのその相互作用の結果として検出可
能な応答を生成する第３の反応混合物３６を生成させる
。
性を有する場合には、器具１０を時計と逆の方向に回転
させることによって第２の反応混合物３５を第３の反応
域３２内の検出剤成分と接触させ（図４ｉ１．上記記載
のようにインキュベーションして（図４ｊ）標識試薬の
検出可能な化学基とのその相互作用の結果として検出可
能な応答を生成する第３の反応混合物３６を生成させる
。
器具１０を時計方向に回転させることによって第３の反
応混合物を同様に観察室２２内に移動させ（図４ｋ及び
４Ｉ２１．検出可能な応答をそこから測定する。常磁性
の試薬粒子を用いる場合には、検出剤成分が含まれる第
３の反応域３２を観察室２２の下部に配置して、その中
で第３の反応混合物３６を生成させ、第２の反応生成物
を上記記載のように観察室２２内に移動させる前に常ｍ
性の試薬粒子を磁気によって保持することが好ましいこ
とを理解すべきである。
応混合物を同様に観察室２２内に移動させ（図４ｋ及び
４Ｉ２１．検出可能な応答をそこから測定する。常磁性
の試薬粒子を用いる場合には、検出剤成分が含まれる第
３の反応域３２を観察室２２の下部に配置して、その中
で第３の反応混合物３６を生成させ、第２の反応生成物
を上記記載のように観察室２２内に移動させる前に常ｍ
性の試薬粒子を磁気によって保持することが好ましいこ
とを理解すべきである。
上記記載のイムノアッセイ法は種々の分析対象物の測定
において用いることができる０分析対象物は、通常、ペ
プチド、ポリペプチド、蛋白質、炭水化物、グリコプロ
ティン、ステロイド、核酸あるいはそれに対する結合対
が存在するか又は生物学的系において生成することがで
きるか又は合成することのできる他の有機分子である０
分析対象物は、機能的な見地から、通常は、抗原、ハプ
テン、相補ポリヌクレオチド連鎖、ホルモン、ビタミン
、メタポライド及び薬剤を含む群から選択される。通常
は、分析対象物は、抗原性ポリペプチド又は蛋白質のよ
うな通常的１．０００〜約１０．０００．０００の分子
量を有する免疫学的に活性なポリペプチド又は蛋白質、
あるいは、少なくとも約１００、通常は約１．５００未
満の分子量を有するハブテンである。
において用いることができる０分析対象物は、通常、ペ
プチド、ポリペプチド、蛋白質、炭水化物、グリコプロ
ティン、ステロイド、核酸あるいはそれに対する結合対
が存在するか又は生物学的系において生成することがで
きるか又は合成することのできる他の有機分子である０
分析対象物は、機能的な見地から、通常は、抗原、ハプ
テン、相補ポリヌクレオチド連鎖、ホルモン、ビタミン
、メタポライド及び薬剤を含む群から選択される。通常
は、分析対象物は、抗原性ポリペプチド又は蛋白質のよ
うな通常的１．０００〜約１０．０００．０００の分子
量を有する免疫学的に活性なポリペプチド又は蛋白質、
あるいは、少なくとも約１００、通常は約１．５００未
満の分子量を有するハブテンである。
代表的なポリペプチド分析対象物は、アンギオテンシン
■及びＩＩ、Ｃ−ペプチド、オキシトシン、パップレシ
ン、ニューロフィシン、ガストリン、セクレチン、ブラ
ジキニン及びグルカゴンである。
■及びＩＩ、Ｃ−ペプチド、オキシトシン、パップレシ
ン、ニューロフィシン、ガストリン、セクレチン、ブラ
ジキニン及びグルカゴンである。
代表的な蛋白質分析対象物としては、プロトアミン、ム
コプロティン、グリコプロティン、グロブリン、アルブ
ミン、スクレロプロテイン、ホスホプロティン、ヒスト
ン、リボプロティン、クロモプロティン及びヌクレオプ
ロティンのクラスが挙げられる。特異蛋白質の例は、プ
レアルブミン、α−リボプロティン、ヒト血清アルブミ
ン、α−酸グリコプロテイン、αビアンチトリブシン、
αビグリコプロテイン、トランスコルチン、チロキシン
結合グロブリン、ハプトグロブリン、ヘモグロビン、ヒ
トヘモグロビンのβ−サブユニット内のグリケート化Ｎ
−末端ペブチド連鎖のようなグリケート化ペプチド連鎖
、ミオグロブリン、セルロブラスミン、α２−マクログ
ロブリン、β−リボプロティン、エリトロポエチン、ト
ランスフェリン、ヘモベキシン、フィブリノーゲン、Ｉ
ｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇ並びにこれらの
フラグメント、例えばＦｃ及びＦａｂ’相補因子のよう
なイムノグロブリン、プロラクチン、フィブリノーゲン
、トロンビンなどのような血液凝固因子、インシュリン
、メラノトロピン、ソマトトロブン、チロトロピン、濾
胞成熟ホルモン、黄体形成ホルモン、生殖腺刺激ホルモ
ン、ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、甲状腺刺激ホル
モン、胎盤ラクトーゲン、内因子、トランスコバラミン
、アルカリ性ホスファターゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、
アミラーゼ、リパーゼ、ホスファターゼ、コリンステア
ラーゼ、グルタミンピルビン酸トランスアミナーゼ、グ
ルタミンピルビン酸トランスアミナーゼ及びウロペプシ
ンのような血清酵素、エンドルフィン、エンケファリン
、プロトアミン、組織抗原、バクテリア性抗原、肝炎関
連抗原（例えばｌ（Ｂ、Ａｇ、 ＨＢｅＡｇ及びＨＢ、
Ａｇｌのようなウィルス性抗原、並びに、腫瘍標識体（
例えば、ＣＥＡ、α−フェトプロティン、プロスタチン
酸ホスファクーゼ、プロスフチン特異抗原、ニューロン
特異エノラーゼ、エストロゲン受容体、ＣＡ１２５ 、
ＣＡ−１９−９など）である。
コプロティン、グリコプロティン、グロブリン、アルブ
ミン、スクレロプロテイン、ホスホプロティン、ヒスト
ン、リボプロティン、クロモプロティン及びヌクレオプ
ロティンのクラスが挙げられる。特異蛋白質の例は、プ
レアルブミン、α−リボプロティン、ヒト血清アルブミ
ン、α−酸グリコプロテイン、αビアンチトリブシン、
αビグリコプロテイン、トランスコルチン、チロキシン
結合グロブリン、ハプトグロブリン、ヘモグロビン、ヒ
トヘモグロビンのβ−サブユニット内のグリケート化Ｎ
−末端ペブチド連鎖のようなグリケート化ペプチド連鎖
、ミオグロブリン、セルロブラスミン、α２−マクログ
ロブリン、β−リボプロティン、エリトロポエチン、ト
ランスフェリン、ヘモベキシン、フィブリノーゲン、Ｉ
ｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇ並びにこれらの
フラグメント、例えばＦｃ及びＦａｂ’相補因子のよう
なイムノグロブリン、プロラクチン、フィブリノーゲン
、トロンビンなどのような血液凝固因子、インシュリン
、メラノトロピン、ソマトトロブン、チロトロピン、濾
胞成熟ホルモン、黄体形成ホルモン、生殖腺刺激ホルモ
ン、ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、甲状腺刺激ホル
モン、胎盤ラクトーゲン、内因子、トランスコバラミン
、アルカリ性ホスファターゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、
アミラーゼ、リパーゼ、ホスファターゼ、コリンステア
ラーゼ、グルタミンピルビン酸トランスアミナーゼ、グ
ルタミンピルビン酸トランスアミナーゼ及びウロペプシ
ンのような血清酵素、エンドルフィン、エンケファリン
、プロトアミン、組織抗原、バクテリア性抗原、肝炎関
連抗原（例えばｌ（Ｂ、Ａｇ、 ＨＢｅＡｇ及びＨＢ、
Ａｇｌのようなウィルス性抗原、並びに、腫瘍標識体（
例えば、ＣＥＡ、α−フェトプロティン、プロスタチン
酸ホスファクーゼ、プロスフチン特異抗原、ニューロン
特異エノラーゼ、エストロゲン受容体、ＣＡ１２５ 、
ＣＡ−１９−９など）である。
代表的なハプテン分析対象物としては、−船釣なりラス
の薬剤（ｄｒｕｇｓ） 、メタポライド、ホルモン、ビ
タミン、トキシン及び同様の有機化合物が挙げられる。
の薬剤（ｄｒｕｇｓ） 、メタポライド、ホルモン、ビ
タミン、トキシン及び同様の有機化合物が挙げられる。
ハブテン系ホルモンとしては、チロキシン及びトリイン
ドチロニンが挙げられる。ビタミンとしては、ビタミン
Ａ、Ｂ、例えばチアミン、Ｂ１□、Ｃ，Ｄ、Ｅ及びＫ並
びに葉酸が挙げられる。薬剤としては、アミノグリコシ
ド、例えば、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカ
シン、シソマイシン、カナマイシン及びネチルマイシン
、ペニシリン、テトラサイクリン、テラマイシン、クロ
ロマイセチン及びアクチノマイセチンのような抗生物質
；アデノシンニリン酸（ＡＤＰＩ、アデノシンニリン酸
（ＡＴＰＩ、フラビンモノヌクレオチド（ＦＭＮ）、ニ
コチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）及びそ
のリン酸塩誘導体（ＮＡＤＰＩ、チミジン、グアノシン
及びアデノシンのようなヌクレオシド及びヌクレオチド
；プロスタグランジン：エストロゲン、例えば、エスト
リオール及びエストリオール、ステロゲン、アンドロゲ
ン、ジゴキシン、ジギトキシゲニン、ジギトキシン、ジ
ゴキシゲニン、１２−０−アセチルジゴキシゲニン及び
副腎皮質ステロイドのようなステロイド類；並びに、フ
エノバルビタール、フェニトイン、プリミドン、エトス
クシミド、カルバマゼピン、バルプ口エート、テオフィ
リン、カフェイン、プロパノロール、プロ力インアミド
、キニジン、アミトリブチリン、コルチゾール、デシプ
ラミン、シソビラミド、ドキセビン、ドキソルビシン、
ツートリブチリン、メトトレキセート、イミブラミン、
リドカイン、プロ力インアミド、Ｎ−アセチルブロ力イ
ンアミド、アンフェタミン、カテコールアミン及びアン
チヒスタミンのような他のものが挙げられる。トキシン
としては、アセチル−Ｔ−２トキシン、α−トキシン、
コレラトキシン、シトリニン、サイトカラシン類、スタ
フィロコツカールエンテロトキシンＢ、ＨＴ−２トキシ
ンなどが挙げられる。
ドチロニンが挙げられる。ビタミンとしては、ビタミン
Ａ、Ｂ、例えばチアミン、Ｂ１□、Ｃ，Ｄ、Ｅ及びＫ並
びに葉酸が挙げられる。薬剤としては、アミノグリコシ
ド、例えば、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカ
シン、シソマイシン、カナマイシン及びネチルマイシン
、ペニシリン、テトラサイクリン、テラマイシン、クロ
ロマイセチン及びアクチノマイセチンのような抗生物質
；アデノシンニリン酸（ＡＤＰＩ、アデノシンニリン酸
（ＡＴＰＩ、フラビンモノヌクレオチド（ＦＭＮ）、ニ
コチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）及びそ
のリン酸塩誘導体（ＮＡＤＰＩ、チミジン、グアノシン
及びアデノシンのようなヌクレオシド及びヌクレオチド
；プロスタグランジン：エストロゲン、例えば、エスト
リオール及びエストリオール、ステロゲン、アンドロゲ
ン、ジゴキシン、ジギトキシゲニン、ジギトキシン、ジ
ゴキシゲニン、１２−０−アセチルジゴキシゲニン及び
副腎皮質ステロイドのようなステロイド類；並びに、フ
エノバルビタール、フェニトイン、プリミドン、エトス
クシミド、カルバマゼピン、バルプ口エート、テオフィ
リン、カフェイン、プロパノロール、プロ力インアミド
、キニジン、アミトリブチリン、コルチゾール、デシプ
ラミン、シソビラミド、ドキセビン、ドキソルビシン、
ツートリブチリン、メトトレキセート、イミブラミン、
リドカイン、プロ力インアミド、Ｎ−アセチルブロ力イ
ンアミド、アンフェタミン、カテコールアミン及びアン
チヒスタミンのような他のものが挙げられる。トキシン
としては、アセチル−Ｔ−２トキシン、α−トキシン、
コレラトキシン、シトリニン、サイトカラシン類、スタ
フィロコツカールエンテロトキシンＢ、ＨＴ−２トキシ
ンなどが挙げられる。
本発明の器具は上記に特に記載したような試験工程を行
なうのに限定されるものではなく、当該技術において公
知の種々の他の試験工程を行なうための分析試薬を含ま
せることもできることを理解すべきである０例えば、か
かる他の試験工程としては、米国特許筒４．２３８．５
６５号に記載されているようなアポ酵素再活性化イムノ
アッセイ系（ＡＲＩＳ）：米国特許筒４，２７９．９９
２号に記載されているような基質標識蛍光体イムノアッ
セイ（ＳＬＦＩＡＩ；米国特許筒４．１３４゜７９２号
に記載されているような酵素抑制体標識イムノアッセイ
：米国特許筒３，８１７，８３７号及び同第４．０４３
．８７２号に記載されているようなエンザイムマルチプ
ライドイムノアッセイ法（ＥＭＩＴ■）：米国特許筒４
，５１０゜２５１号に記載されているような蛍光偏光イ
ムノアッセイ［ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｐｏｌａｒ
ｉｚａｔｉｏｎ ｉｍｍｕｎｏ−ａｓｓａｙ （Ｔ
Ｄ Ｘ■）１などが挙げられるがこれらに限定されるも
のではない。
なうのに限定されるものではなく、当該技術において公
知の種々の他の試験工程を行なうための分析試薬を含ま
せることもできることを理解すべきである０例えば、か
かる他の試験工程としては、米国特許筒４．２３８．５
６５号に記載されているようなアポ酵素再活性化イムノ
アッセイ系（ＡＲＩＳ）：米国特許筒４，２７９．９９
２号に記載されているような基質標識蛍光体イムノアッ
セイ（ＳＬＦＩＡＩ；米国特許筒４．１３４゜７９２号
に記載されているような酵素抑制体標識イムノアッセイ
：米国特許筒３，８１７，８３７号及び同第４．０４３
．８７２号に記載されているようなエンザイムマルチプ
ライドイムノアッセイ法（ＥＭＩＴ■）：米国特許筒４
，５１０゜２５１号に記載されているような蛍光偏光イ
ムノアッセイ［ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｐｏｌａｒ
ｉｚａｔｉｏｎ ｉｍｍｕｎｏ−ａｓｓａｙ （Ｔ
Ｄ Ｘ■）１などが挙げられるがこれらに限定されるも
のではない。
該器具は、上記記載のように手動で操作して、１以上の
反応混合物によって得られる検出可能な応答を、透過吸
収又は散乱などのような当該技術において公知の光学装
置を用いて検出し測定することができる。本体部材及び
蓋部材を、少なくとも観察室の領域において透明である
ように製造し、反応混合物のかかる光学測定を行ないつ
る観察窓を与えることを理解すべきである。器具な手動
で操作する場合には、観察者が反応容器中に配置された
液体試験試料の移動及び位置を観察することができるよ
うに、支持壁及び蓋部材は実質的に全部が透明であるこ
とが好ましい。
反応混合物によって得られる検出可能な応答を、透過吸
収又は散乱などのような当該技術において公知の光学装
置を用いて検出し測定することができる。本体部材及び
蓋部材を、少なくとも観察室の領域において透明である
ように製造し、反応混合物のかかる光学測定を行ないつ
る観察窓を与えることを理解すべきである。器具な手動
で操作する場合には、観察者が反応容器中に配置された
液体試験試料の移動及び位置を観察することができるよ
うに、支持壁及び蓋部材は実質的に全部が透明であるこ
とが好ましい。
好ましくは、該器具は、図において一貫して示されてい
るような実質的に垂直の配向位置に器具を受容するよう
に適合されており、例えば側壁に摩擦力によって噛合す
るローラー（但し、これに限定されるものではない）を
用いて上記記載のように器具を非遠心回転させる簡単な
機械的非遠心回転器具によって操作される。ローラーは
例えば電気ステップモーターによって操作され、このロ
ーラーは、器具を所望の方向に、かつ、インキュベーシ
ョンのための静止位置及び１以上の検出可能な応答の検
出及び測定位置などの所望の順序で回転させるようにプ
ログラムされたマイクロプロセッサ−によって制御され
る。かかる機械器具は、また、透過吸収又は散乱光学系
のような検出可能な応答を検出し測定するための光学系
を有し、これを、機械器具内の、実質的に器具の水平方
向の回転軸の位置、即ち観察室と整列させて配置する。
るような実質的に垂直の配向位置に器具を受容するよう
に適合されており、例えば側壁に摩擦力によって噛合す
るローラー（但し、これに限定されるものではない）を
用いて上記記載のように器具を非遠心回転させる簡単な
機械的非遠心回転器具によって操作される。ローラーは
例えば電気ステップモーターによって操作され、このロ
ーラーは、器具を所望の方向に、かつ、インキュベーシ
ョンのための静止位置及び１以上の検出可能な応答の検
出及び測定位置などの所望の順序で回転させるようにプ
ログラムされたマイクロプロセッサ−によって制御され
る。かかる機械器具は、また、透過吸収又は散乱光学系
のような検出可能な応答を検出し測定するための光学系
を有し、これを、機械器具内の、実質的に器具の水平方
向の回転軸の位置、即ち観察室と整列させて配置する。
かかる機械器具は、また、特定の試験プロトコルによっ
て必要とされる際に液体試験試料又は反応混合物を加熱
するための、静置ヒーター又は弾性ポイント接続を有す
る回転コンタクトプレートクイブのもののような加熱部
材、並びに、器具を機械器具内に適当に位置させるため
の光学センサーを有していてもよい、好ましくは、種々
の機械的及び電気的部品は、例えば、本発明の１つの器
具、あるいは、１以上の液体試験試料で試験プロトコル
を同時に行なうことが所望の場合には１以上の本発明器
具を受容するためのスロット又は開口を有する、通常の
寸法のケース内に設置される。
て必要とされる際に液体試験試料又は反応混合物を加熱
するための、静置ヒーター又は弾性ポイント接続を有す
る回転コンタクトプレートクイブのもののような加熱部
材、並びに、器具を機械器具内に適当に位置させるため
の光学センサーを有していてもよい、好ましくは、種々
の機械的及び電気的部品は、例えば、本発明の１つの器
具、あるいは、１以上の液体試験試料で試験プロトコル
を同時に行なうことが所望の場合には１以上の本発明器
具を受容するためのスロット又は開口を有する、通常の
寸法のケース内に設置される。
本発明器具は、成形することができ、あるいは、ポリス
チレン、アクリル系ポリマー、ポリカーボネート、ガラ
スなどのような（但しこれらに限定されるものではない
）当該技術において公知の種々の成形可能な物質から製
造することができる。湿潤性又は親水性の物質が好まし
いが、上記記載のように予め処理した非湿潤性又は疎水
性・の物質を用いることができることを理解すべきであ
る。
チレン、アクリル系ポリマー、ポリカーボネート、ガラ
スなどのような（但しこれらに限定されるものではない
）当該技術において公知の種々の成形可能な物質から製
造することができる。湿潤性又は親水性の物質が好まし
いが、上記記載のように予め処理した非湿潤性又は疎水
性・の物質を用いることができることを理解すべきであ
る。
本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、ここに記
載したような本発明の他の修正及び変更を行なうことが
でき、したがって、かかる制限は特許請求の範囲によっ
て示されるようにのみ課せられることは明らかである。
載したような本発明の他の修正及び変更を行なうことが
でき、したがって、かかる制限は特許請求の範囲によっ
て示されるようにのみ課せられることは明らかである。
図１は、本発明器具の好ましい態様の正面分解展開図：
図２は、蓋部材を除いた図１に示した器具の正面図
図３は、図２の３−３線に沿った器具の分解横断面図を
蓋部材と共に示した図： 図４ａ＝ｇは、本発明器具を用いて逐次分析試験工程を
行なうための種々の段階を示した、図２において示した
器具の正面図； 図５は、蓋部材を除いた本発明器具の他の態様の正面図
： 図６は、蓋部材を除いた本発明器具の更に他の態様の正
面図； 図７は、図５の７−７線に沿った分解横断面図を蓋部材
と共に示した図； 図８は、図６の８−８線に沿った分解横断面図を蓋部材
と共に示した図： 図９は、蓋部材を除いた本発明器具の他の態様の正面図
であり： 図１０は、蓋部材を除いた本発明器具の更に他の態様の
正面図である。 １０．４０．６０．７０・・・本発明器具、１２．４２
．６２・・・蓋部材、 ２１．４３．６３．７７．９７・・・反応路、２２．４
４．７８・・・観察室、 ２３．４５．６４．７９．９８・・・供給路（供給室）
、 ２９．５３．７３・・・導入口。 ＦＩＧ。 ＦＩＧ、 ３ ＦＩＧ。 ＦＩＧ、３ａ 手続補正書（方式） 平成 １年 ７月３１日
蓋部材と共に示した図： 図４ａ＝ｇは、本発明器具を用いて逐次分析試験工程を
行なうための種々の段階を示した、図２において示した
器具の正面図； 図５は、蓋部材を除いた本発明器具の他の態様の正面図
： 図６は、蓋部材を除いた本発明器具の更に他の態様の正
面図； 図７は、図５の７−７線に沿った分解横断面図を蓋部材
と共に示した図； 図８は、図６の８−８線に沿った分解横断面図を蓋部材
と共に示した図： 図９は、蓋部材を除いた本発明器具の他の態様の正面図
であり： 図１０は、蓋部材を除いた本発明器具の更に他の態様の
正面図である。 １０．４０．６０．７０・・・本発明器具、１２．４２
．６２・・・蓋部材、 ２１．４３．６３．７７．９７・・・反応路、２２．４
４．７８・・・観察室、 ２３．４５．６４．７９．９８・・・供給路（供給室）
、 ２９．５３．７３・・・導入口。 ＦＩＧ。 ＦＩＧ、 ３ ＦＩＧ。 ＦＩＧ、３ａ 手続補正書（方式） 平成 １年 ７月３１日
Claims (54)
- （１）（ａ）実質的に水平方向の回転軸を有し、（ｉ）
液体試験試料中の分析対象物と相互作用して分析対象物
の関数として検出可能な応答を生成する第１及び第２の
分析試薬が含まれている第１及び第２の反応域を有する
分析試薬反応路（ここで、かかる第２の反応域はかかる
第１の反応域から予め定められた距離離隔されて配置し
ており、かつこれと開放液体流連絡（ｏｐｅｎ ｌｉｑ
ｕｉｄ ｆｌｏｗ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）して
おり、これによって、該反応容器を、該水平軸の回りを
回転させることにより、該反応路内に配置されている液
体試験試料を、該反応域の間を該反応路に沿って重力に
よって移動させることができる）；（ｉｉ）該液体試験
試料の該反応路内への一方向の流れを与えるための液体
試験試料送出手段；及び（ｉｉｉ）液体試験試料を該送
出手段内へ導入するための、該送出手段と開放液体流連
絡状態にある導入手段を具備する密閉された分析試薬反
応容器を与え； （ｂ）該導入手段を通して液体試験試料を該反応容器内
に導入し； （ｃ）該液体試験試料をかかる第１の反応域内のかかる
第１の分析試薬と接触せしめて第１の反応混合物を生成
させ； （ｄ）該反応容器を、該水平軸の周りを回転させること
によって、かかる第１の反応混合物を重力によってかか
る第１の反応域から該反応路に沿って移動させて、かか
る第２の反応域内のかかる第２の分析試薬と接触せしめ
て第２の反応混合物を生成させ； （ｅ）かかる検出可能な応答を測定する工 程を含むことを特徴とする、逐次分析反応を行なって液
体試験試料中の分析対象物を測定する方法。 - （２）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
により、該液体試験試料を重力によって該反応路に沿っ
て移動させて、かかる第１の分析試薬と接触せしめるこ
とによって工程（ｃ）を行なう請求項１記載の方法。 - （３）工程（ｂ）において、該反応容器内に導入される
該液体試験試料が、重力によって該送出手段を通って該
反応路内に流れる請求項１記載の方法。 - （４）該反応路が、かかる第１及び第２の反応域と開放
液体流連絡している分析反応混合物観察域を更に有する
請求項１記載の方法。 - （５）該観察域が該反応路の一端に配置されている請求
項４記載の方法。 - （６）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
によって、かかる第２の反応混合物を、重力によってか
かる第２の反応域から該反応路に沿って該分析反応混合
物観察域内に移動させる工程を含む請求項４記載の方法
。 - （７）該分析反応混合物観察域が観察室の形態のもので
ある請求項４記載の方法。 - （８）該送出手段が送出室の形態のものであり、これに
より、該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
によって、該液体試験試料を、重力によって該送出室か
ら該反応路内に移動させる請求項１記載の方法。 - （９）該反応域に乾燥形態の該分析試薬が含まれている
請求項１記載の方法。 - （１０）（ａ）実質的に水平方向の回転軸を有し、液体
試験試料中の分析対象物と相互作用して分析対象物の関
数として検出可能な応答を生成する分析試薬が含まれて
おり、（ｉ）該水平軸の回りの回転面内に配置され、（
１）第１及び第２の分析試薬が含まれている第１及び第
２の反応域（ここで、かかる第２の反応域は、かかる第
１の反応域から予め定められた距離離隔されて配置して
おり、かつこれと開放液体流連絡（ｏｐｅｎ ｌｉｑｕ
ｉｄ ｆｌｏｗ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）してお
り、これによって、反応容器を、該水平軸の回りを回転
させることにより、反応路内に配置されている液体試験
試料を、該反応域の間を該反応路に沿って重力によって
移動させることができる）及び（２）該反応域と開放液
体流連絡状態にある分析反応混合物観察室を有する分析
試薬反応路；（ｉｉ）該液体試験試料の該反応路内への
一方向の流れを与えるための液体試験試料送出室；及び
（ｉｉｉ）液体試験試料を該送出手段内へ導入するため
の導入口を具備する密閉された分析試薬反応容器を与え
； （ｂ）該導入口を通して予め定められた量の液体試験試
料を該送出室内に導入し； （ｃ）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
によって、該液体試験試料を、該送出室から該反応路中
にかつ該第１の反応域に移動させて、それによって、か
かる第１の分析試薬と接触せしめて第１の反応混合物を
生成させ； （ｄ）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
によって、かかる第１の反応混合物を重力によってかか
る第１の反応域から該反応路に沿ってかかる第２の反応
域に移動させて、それによって、かかる第２の分析試薬
と接触せしめて第２の反応混合物を生成させ； （ｅ）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させること
によって、かかる第２の反応混合物を重力によってかか
る第２の反応域から該反応路に沿って該観察室内に移動
させ； （ｆ）かかる検出可能な応答を測定する工 程を含むことを特徴とする、逐次分析反応を行なって液
体試験試料中の分析対象物を測定する方法。 - （１１）該反応域に乾燥形態の該分析試薬が含まれてい
る請求項１０記載の方法。 - （１２）該観察室が該反応路の一端に配置されている請
求項１０記載の方法。 - （１３）かかる第１の反応域が該観察室に実質的に隣接
して配置されている請求項１２記載の方法。 - （１４）該観察室が該反応容器内の中心位置に配置され
ており、該水平軸が該観察室と交差している請求項１０
記載の方法。 - （１５）かかる第１の分析試薬が、検出可能な化学基に
よって標識されている分析対象物に対する抗体又はその
フラグメントを含む乾燥状態の可溶性抗体試薬を含み、
かかる第２の分析試薬が、固定化形態のかかる分析対象
物又はその結合類縁体を含む請求項１０記載の方法。 - （１６）かかる分析対象物又はその結合類縁体がかかる
第２の反応域の表面に固定化されている請求項１５記載
の方法。 - （１７）かかる分析対象物又はその結合類縁体が懸濁性
粒子に固定化されている請求項１５記載の方法。 - （１８）かかる分析対象物又はその結合類縁体が、懸濁
性で磁化可能な粒子に固定化されている請求項１５記載
の方法。 - （１９）かかる検出可能な化学基が、かかる検出可能な
応答を生起せしめる物理特性を有する請求項１５記載の
方法。 - （２０）該反応路が、第３の分析試薬を含み、かかる第
２の反応域から予め定められた距離離隔されており、か
つこれと開放液体流連絡状態にある第３の反応域を有す
る請求項１０記載の方法。 - （２１）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させるこ
とによって、かかる第２の反応混合物をかかる第２の反
応域から該反応路に沿ってかかる第３の反応域に移動さ
せ、かかる第３の分析試薬と接触せしめて第３の反応混
合物を生成させ、該反応容器を、該水平軸の回りを回転
させることによって、かかる第３の反応混合物を、重力
によってかかる第３の反応域から該反応路に沿って該観
察室中に移動させる更なる工程を含む請求項２０記載の
方法。 - （２２）かかる第１の分析試薬が、検出剤成分と相互作
用して検出可能な応答を与える生成物を生成する検出可
能な化学基によって標識されているかかる分析対象物に
対する抗体又はそのフラグメントを含む乾燥状態の可溶
性抗体試薬を含み、かかる第２の分析試薬が、固定化形
態のかかる分析対象物又はその結合類縁体を含み、かか
る第３の分析試薬が、乾燥した可溶性の形態のかかる検
出剤成分を含む請求項２０記載の方法。 請求項１０記載の方法。 - （２３）該分析対象物がグリケート化ヘモグロビン（ｇ
ｌｙｃａｔｅｄ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）であり、該液
体試験試料が全血試料であり、かかる第１の分析試薬が
、かかる全血試験試料の全ヘモグロビン濃度を測定する
ための乾燥状態の可溶性変性試薬を含み、かかる第２の
分析試薬が、懸濁性粒子に固定化されたかかる分析対象
物に対する抗体又はそのフラグメントを含む固定化抗体
試薬を含み、かかる第３の分析試薬が、かかる抗体と特
異的に結合してかかる全血試料中のグリケート化ヘモグ
ロビンの量の関数として濁り応答（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅ
ｔｒｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を与える乾燥状態の可溶
性凝集試薬を含む請求項２０記載の方法。 - （２４）試料中の全ヘモグロビン濃度及びグリケート化
ヘモグロビンの量を別々に測定し、グリケート化ヘモグ
ロビンの割合を計算することによってかかる全血試料中
のグリケート化ヘモグロビンの相対量を測定する請求項
２３記載の方法。 - （２５）かかる不溶性粒子が水懸濁性ラテックス粒子で
ある請求項２３記載の方法。 - （２６）（ａ）実質的に水平方向の回転軸を有し、（ｉ
）液体試験試料中の分析対象物と相互作用して分析対象
物の関数として検出可能な応答を生成する分析試薬が含
まれている反応域を備えた分析試薬反応路；（ｉｉ）該
液体試験試料の該反応路内への一方向の流れを与えるた
めの液体試験試料送出手段；及び（ｉｉｉ）液体試験試
料を該送出手段内へ導入するための、該送出手段と開放
液体流連絡状態にある導入手段を有する密閉された分析
試薬反応容器を与え； （ｂ）該導入手段を通して液体試験試料を該反応容器内
に導入し； （ｃ）該液体試験試料の測定可能な特性を測定し； （ｄ）該反応容器を、該水平軸の周りを回転させること
によって、かかる液体試験試料を重力によって該反応路
に沿って移動させて、かかる反応域内のかかる分析試薬
と接触せしめて反応混合物を生成させ； （ｅ）かかる反応混合物によって与えられたかかる検出
可能な応答を測定し； （ｆ）かかる液体試験試料のかかる測定可能な特性及び
かかる検出可能な応答を、かかる液体試験試料中に存在
する該分析対象物の量と関連させる工程を含むことを特
徴とする、逐次分析反応を行なって液体試験試料中の分
析対象物を測定する方法。 - （２７）かかる反応容器が、かかる反応域から予め定め
られた距離離隔され、これと開放液体流連絡状態に配置
されている（これによって、該反応容器を、該水平軸の
回りを回転させることにより、かかる反応路内に配置さ
れた液体試験試料を、重力によって該反応路を通って該
反応域と観察域との間を移動させることができる）観察
域を更に有する請求項２６記載の方法。 - （２８）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させるこ
とによって、該液体試験試料を重力によって該反応路に
沿って該観察域に移動させ、かかる測定可能な特性を該
観察域から測定する工程を含む請求項２７記載の方法。 - （２９）該反応容器を、該水平軸の回りを回転させるこ
とによって、該反応混合物を重力によって該反応路に沿
って該観察域に移動させ、かかる検出可能な応答をそこ
から測定する請求項２７記載の方法。 - （３０）該観察域が該反応路の一端に配置されている請
求項２６記載の方法。 - （３１）該観察域が観察室の形態のものである請求項２
６記載の方法。 - （３２）該観察室が、該反応容器内の中心位置に配置さ
れており、該水平軸が該観察室と交差している請求項３
１記載の方法。 - （３３）該送出手段が送出室の形態のものであり、これ
によって、該反応容器を該水平軸の回りを回転させるこ
とにより、該液体試験試料を重力によって該送出室から
該反応路内に移動させる請求項２６記載の方法。 - （３４）かかる第１の反応域に乾燥形態のかかる分析試
薬が含まれている請求項２６記載の方法。 - （３５）かかる測定可能な特性の測定が、試料プランク
測定である請求項２６記載の方法。 - （３６）該反応路が、実質的に該反応容器の周囲の回り
を伸長している請求項２６記載の方法。 - （３７）該反応容器が円盤の形態のものである請求項３
６記載の方法。 - （３８）実質的に水平方向の回転軸を有し、（ａ）（ｉ
）液体試験試料中の分析対象物と相互作用して分析対象
物の関数として検出可能な応答を生成する第１及び第２
の分析試薬が含まれている第１及び第２の反応域（ここ
で、かかる第２の反応域はかかる第１の反応域から予め
定められた距離離隔して配置されており、かつこれと開
放液体流連絡（ｏｐｅｎ ｌｉｑｕｉｄ ｆｌｏｗ ｃ
ｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）しており、これによって、
反応容器を、該水平軸の回りを回転させることにより、
反応路内に配置されている液体試験試料を、重力によっ
て反応路に沿って該反応域と観察室との間を移動させる
ことができる）及び（ｉｉ）かかる第１及び第２の反応
域と開放液体流連絡状態している室の形態の分析反応観
察域を有する分析試薬反応路；（ｂ）液体試験試料の該
反応路中への一方向の流れを与えるための液体試験試料
送出手段；及び（ｃ）液体試験試料を該送出手段内へ導
入するための導入口を有する、逐次分析反応を行なって
液体試験試料中の分析対象物を測定するための分析試薬
反応容器。 - （３９）該反応域に乾燥形態のかかる分析試薬が含まれ
ている請求項３８記載の反応容器。 - （４０）かかる送出手段が送出室の形態のものであり、
これによって、該反応容器を該水平軸の回りを回転させ
ることによって、該液体試験試料を重力によって該送出
室から該反応路内に移動させる請求項３８記載の反応容
器。 - （４１）該観察室が該反応容器の一端に配置されている
請求項３８記載の反応容器。 - （４２）該観察室が該第１の反応域に実質的に隣接して
配置されている請求項４１記載の反応容器。 - （４３）該観察室が該容器の中心位置に配置されており
、該水平軸が該観察室と交差している請求項４１記載の
反応容器。 - （４４）該反応路がかかる密閉された容器の周囲に配置
され、実質的にその回りに伸長している請求項３８記載
の反応容器。 - （４５）円盤の形態の請求項４４記載の反応容器。
- （４６）該反応路が、１以上の分析試薬が含まれている
１以上の更なる反応域を有する請求項３８記載の反応容
器。 - （４７）かかる第１の分析試薬が、検出可能な化学基に
よって標識されているかかる分析対象物に対する抗体又
はそのフラグメントを含む乾燥状態の可溶性抗体試薬を
含み、かかる第２の分析試薬が、固定化形態のかかる分
析対象物又はその結合類縁体を含む請求項３８記載の反
応容器。 - （４８）かかる分析対象物又はその結合類縁体がかかる
第２の反応域の表面に固定化されている請求項４７記載
の反応容器。 - （４９）かかる分析対象物又はその結合類縁体が懸濁性
粒子に固定化されている請求項４７記載の反応容器。 - （５０）かかる分析対象物又はその結合類縁体が、懸濁
性で磁化可能な粒子に固定化されている請求項４７記載
の反応容器。 - （５１）該反応路が、第３の分析試薬を含み、かかる第
２の反応域から予め定められた距離離隔して配置されて
おり、かつこれと開放液体流連絡状態にある第３の反応
域を有する請求項４６記載の反応容器。 - （５２）かかる第１の分析試薬が、検出剤成分と相互作
用して検出可能な応答を与える生成物を生成する検出可
能な化学基によって標識されているかかる分析対象物に
対する抗体又はそのフラグメントを含む乾燥状態の可溶
性抗体試薬を含み、かかる第２の分析試薬が、固定化形
態のかかる分析対象物又はその結合類縁体を含み、かか
る第３の分析試薬が、乾燥した可溶性の形態のかかる検
出剤成分を含む請求項５１記載の反応容器。 - （５３）該分析対象物がグリケート化ヘモグロビン（ｇ
ｌｙｃａｔｅｄ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ）であり、該液
体試験試料が全血試料であり、かかる第１の分析試薬が
、かかる全血試験試料の全ヘモグロビン濃度を測定する
ための乾燥状態の可溶性変性試薬を含み、かかる第２の
分析試薬が、懸濁性粒子に固定化されたかかる分析対象
物に対する抗体又はそのフラグメントを含む乾燥状態の
可溶性抗体試薬を含み、かかる第３の分析試薬が、かか
る抗体と特異的に結合してかかる全血試料中のグリケー
ト化ヘモグロビンの量の関数として濁り応答（ｔｕｒｂ
ｉｄｉｍｅｔｒｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を与える乾燥
状態の可溶性凝集試薬を含む請求項５１記載の反応容器
。 - （５４）かかる懸濁性粒子が水懸濁性ラテックス粒子で
ある請求項５３記載の反応容器。
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