JPH0770181A - 血液凝固を阻害するペプチドおよびそれらの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】次式で示されるペプチドおよびそれらの製造方
法。 Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ
９−Ａ１０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ａ１４−Ａ１５ 〔Ａ１は水素、システイン等、Ａ２は結合、Ａｓｎ、Ａ
ｓｐ、ＧｌｎまたはＧｌｕ、Ａ３は結合、Ｇｌｙまたは
Ａｌａ、Ａ４はＧｌｕまたはＡｓｐ、Ａ５はＰｈｅ、Ｔ
ｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｇｌ等、Ａ６はＧｌｕまたはＡｓｐ、
Ａ７はＧｌｕ、Ａｓｐ、ＰｒｏまたはＡｌａ、Ａ８はＩ
ｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、ＮｌｅまたはＰｈｅ、Ａ９はＰ
ｒｏまたはＨｙｐ、Ａ１０はＧｌｕまたはＡｓｐ、Ａ１
１はＧｌｕまたはＡｓｐ、Ａ１２はＰｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）
またはＰｈｅ（ＰＯ₃Ｈ₂）等、Ａ１３は結合、Ｌｅｕ、
Ｉｌｅ、ＶａｌまたはＡｌａ、Ａ１４は結合、Ｇｌｎ、
Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＣｙｓ、Ａ１５はＣｙ
ｓ、Ｃｙｓアミド等である〕 【効果】これらのペプチドは血液凝固を阻害しそして抗
凝固剤として使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は血液凝固を阻害するペプ
チド、その製造方法およびその抗凝固剤としての使用に
関する。

【０００２】

【従来の技術】抗凝固剤は血液凝固に影響する様々な障
害例えば播種性血管内凝固、心筋梗塞、および深部静脈
血栓症などを治療する上で治療的に極めて重要である。
これらの障害の治療に現在用いられているのはヒト血漿
から得られる抗トロンビンIIIなどの抗凝固剤である。

【０００３】最近、アミノ酸６５個より成る水蛙(Ｈｉ
ｒｕｄｏ ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ）からのポリペプチ
ドが抗凝固剤として試験されている。しかしながらこの
ペプチドの別称でもあるヒルジンの使用には様々な欠点
が伴う。一つの欠点はこの物質の入手可能性が低いとい
う問題である。可能性として問題はこのペプチドの分子
量が比較的高い（このことは抗体産生の潜在的危険があ
ることを意味する）ということからも派生し得る。

【０００４】ヒルジンのＣ末端領域と高度の相同性を有
する低分子量ペプチドを抗凝固剤として開発することに
よりこれらの欠点を回避することが可能である。このタ
イプのペプチドは出願明細書EP-A 0 276 014号、EP 0 3
33 356号およびJ.M. Maraganore et al., J. Biol. Che
m. 264, 8692〜8698 (1989)の刊行物に記載されてい
る。

【０００５】それらより、Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐ
ｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌ
ｕ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−ＯＨなる構造のペプチドが特に興
味深いものであることが明らかである。そのチロシン
（Ｔｙｒ）がフェノール基において検出し得る程にサル
フェート化されているペプチドが特に高い活性を有し
た。このことは更に６３位のチロシンがサルフェート化
されている天然ヒルジンに対応している。

【０００６】環状ペプチドも興味深い。これらは、今述
べたばかりの配列のほかに、Ｃ−およびＮ−末端にアミ
ノ酸システインを含み、それがジスルフィドの形での環
化を可能にする。更にジスルフィド橋を他の化学官能
部、好ましくはアミド結合による接続に置き換えること
もできる。

【０００７】サルフェート化チロシンの化学的性質は硫
酸のエステルのそれであるので、硫黄原子とフェノール
性酸素原子の間の結合は加水分解により分解することが
できる。このタイプのペプチドには抗凝固活性が低下す
るという欠点がある。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】そこで、従来技術によ
れば、引続いての化学反応によってチロシンのサルフェ
ート化を達成しようとする試みがなされている。そのた
めには、サルフェート化されていないヒルジンペプチド
をジシクロヘキシルカルボジイミドおよび硫酸と有機溶
媒中で反応させる。このサルフェート化は、チロシン含
有ペプチドをピリジン中三酸化硫黄トリエチルアンモニ
ウム塩またはクロロスルホン酸と反応させることによっ
ても達成することができる。

【０００９】しかしながら、これらの反応にはフェニル
アラニンで副反応が生じ得る、あるいはいくつかのチロ
シン残基が存在する場合に非選択的サルフェート化が生
じ得るといった欠点がある。更にこのことは大幅な収量
損失に到ることがある。

【００１０】そこで、本発明はこれらの欠点を排除し、
そして優れた物理的、化学的および生理学的性質を有す
るペプチドを製造することを目的とした。

【００１１】

【課題を解決するための手段】驚くべきことに、この目
的は、ペプチド中のアミノ酸チロシンまたはＴｙｒ（Ｓ
Ｏ₃Ｈ）をアミノ酸Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）またはＰｈｅ（Ｐ
Ｏ₃Ｈ₂）またはＰｇｌ（ＳＯ₃Ｈ）(Ｐｇｌとはフェニル
グリシンを表わす）またはＰｇｌ（ＰＯ₃Ｈ₂）で置き換
えることにより達成された。この場合において、そのス
ルホネートまたはホスフェート基は好ましくはフェニル
アラニンのフェニル環のパラ位に結合されるが、メタ位
の結合も同じく可能である。

【００１２】すなわち、本発明は式： Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ
９−Ａ１０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ａ１４−Ａ１５ 〔式中、Ａ１は水素、システイン、１〜４個の炭素原子
を有する１または２個のアルキル基、２〜１０個の炭素
原子を有するアシル基、２〜１０個の炭素原子および他
のカルボキシル基を有するアシル基またはペプチド化学
において慣用される保護基であり、Ａ２は結合、Ａｓ
ｎ、Ａｓｐ、ＧｌｎまたはＧｌｕであり、Ａ３は結合、
ＧｌｙまたはＡｌａであり、Ａ４はＧｌｕまたはＡｓｐ
であり、Ａ５はＰｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｇｌ（フェ
ニルグリシン）またはＮａｌ（ナフチルアラニン）であ
り、Ａ６はＧｌｕまたはＡｓｐであり、Ａ７はＧｌｕ、
Ａｓｐ、ＰｒｏまたはＡｌａであり、Ａ８はＩｌｅ、Ｌ
ｅｕ、Ｖａｌ、ＮｌｅまたはＰｈｅであり、Ａ９はＰｒ
ｏまたはＨｙｐであり、Ａ１０はＧｌｕまたはＡｓｐで
あり、Ａ１１はＧｌｕまたはＡｓｐであり、Ａ１２は
（好ましくはｐ位の）Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）またはＰｈｅ
（ＰＯ₃Ｈ₂）、または（好ましくはｐ位の）Ｐｇｌ（Ｓ
Ｏ₃Ｈ）またはＰｇｌ（ＰＯ₃Ｈ₂）であり、Ａ１３は結
合、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ＶａｌまたはＡｌａであり、Ａ１
４は結合、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＣｙ
ｓであり、そしてＡ１５はＣｙｓ、Ｃｙｓアミド、遊離
のまたは４個までの炭素原子を有する低級アルコールで
エステル化されたアルファ−カルボキシルのＯＨ基（そ
れはそれらの水素が所望により４個までの炭素原子を有
するアルキル基により置換されていてもよいカルボキサ
ミド基の形であってもよい）である〕で示されるペプチ
ドに関する。

【００１３】Ａ１がアミノ酸システインである場合に
は、そのアミノ基はアセチル化されていてもよい。

【００１４】本発明によるペプチドはよく知られた方法
（“The Peptides"（E. GrossおよびI. Meienhofer編）
にG. BaranyおよびR.B. Merrifieldが記載している方
法）により合成される。

【００１５】アミノ酸Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）またはＰｇｌ
（ＳＯ₃Ｈ）はそれぞれフェニルアラニンまたはフェニ
ルグリシン（それらはＤまたはＬまたはＤ、Ｌ体である
が、好ましくはＬ体である）をスルホン化することによ
り得ることができる。適当なスルホン化剤は硫酸である
が、これは好ましくは三酸化硫黄をも含有する。

【００１６】本発明によるペプチドを合成できるように
するため、これらのアミノスルホン酸のアミノ基にC.D.
Chang et al., Int. J. Peptide Protein Res. 15, 59
(1980)に知られる方法により保護基を設けた。この場
合において適当な保護基はＢｏｃ、Ｚ、Ｂｐｏｃ、Ｄｄ
ｚおよび好ましくはＦｍｏｃ基である。

【００１７】前記ペプチドは、溶液中で操作され既知の
手順を伴うペプチド合成法（E. Wuensch, “Houben-Wey
l, Synthese von Peptiden I”（ペプチド合成），G. T
hieme Verlag, Stuttgart (1974)）により、または同様
に知られている（前記参照）固相法（この場合にはＦｍ
ｏｃ化学を用いるのが好ましい）により合成された。

【００１８】この合成においてスルホネートまたはホス
フェート基は保護せずに用いた。

【００１９】固相ペプチド合成においては、ペプチド鎖
を架橋ポリスチレン（１％ジビニルベンゼン）（以下樹
脂と呼ぶ）上で合成した。遊離カルボキシル基を有する
ペプチドの合成はアルコキシベンジルアルコールに基づ
くアンカーを用いた。ペプチドアミドに対しては、非ア
ルキル化ペプチドアミドを生成するアミドアンカー（In
t. J. Peptide Protein Res. 34, 262〜267, 1989）を
用いた。個々の保護されたアミノ酸の取込みは反復的に
行った。すなわち、 − Ｆｍｏｃ−アミノ酸（またはアミドアンカー）−樹
脂を完全自動ペプチドシンセサイザーに導入する、 − その樹脂をＤＭＦ、ジクロロメタンまたはＮ−メチ
ルピロリドン（約１５ml／mg）で洗浄する、 − Ｆｍｏｃ基をジメチルホルムアミドまたはＮ−メチ
ルピロリドン中の２０％ピペリジンを用いて（好ましく
は１×３分および１×１０分）除去する、 − ＤＭＦ、ジクロロメタン、Ｎ−メチルピロリドン、
またはアルコール、好ましくはイソプロパノールで洗浄
することによりピペリジンを除去する、 − カルボジイミド、好ましくはジイソプロピルカルボ
ジイミドを用い、適切な場合にはＨＯＢｔ、ＨＯＳｕを
添加するかまたはＢＯＰまたはＴＢＴＵを用い適切な場
合にはＨＯＢｔを添加し、好ましくはＤＭＦまたはＮ−
メチルピロリドン中でアミノ酸を結合させる。

【００２０】三官能アミノ酸の側鎖を次のようにして保
護した： − ＡｓｐおよびＧｌｕはｔ−ブチルエステルとして、 − ＨｙｐおよびＴｙｒはｔ−ブチルエーテルとして、 − Ｇｙｓはトリチルエーテルまたはｔｅｒｔ.−ブチ
ルジスルフィドとして。

【００２１】スルホネート基はトリフルオロ酢酸の反復
使用によりダメージを受けないので、前述のＦｍｏｃ化
学に代えて、これらのペプチドをＢｏｃ法（J.M. Stewa
rtおよびJ.D. Young“Solid Phase Peptide Synthesi
s”Pierce Chemical Co., 1984, pp. 71〜95）を用いて
合成することもできる。

【００２２】Ｆｍｏｃ化学の場合には、トリフルオロ酢
酸を用い、好ましくはスキャベンジャー（ｓｃａｖｅｎ
ｇｅｒ）を添加して、ペプチドを樹脂から離脱させ、そ
してエーテルを用いて結晶化させた。逆相クロマトグラ
フィーによる精製後、それらの組成をアミノ酸分析およ
びＦＡＢ質量分析法によって確認した。

【００２３】システイン含有ペプチドを製造する場合、
Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）の場合には、離脱混合物が添加チオー
ル、好ましくはエタンジチオールを含有する限り、ペプ
チドを離脱させると同時にトリチル保護を除去した。

【００２４】Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）を用いた場合にはその
Ｓ−ｔＢｕ基は好ましくはペプチド離脱の後で除去し
た。この目的に用いたのは既知の方法、例えばトリ−ｎ
−ブチルホスフィンまたはジチオトレイトールによる処
理であった。好ましくはジチオトレイトール脱保護を用
いた。

【００２５】Ｓ−Ｓ橋を介しての環化は既知の酸化方法
により行うことができた。

【００２６】システイン含有ペプチドを好ましくは重炭
酸アンモニウム緩衝液（０.０１Ｍ）に０.１〜０.００
１mM濃度となるよう溶解し、そして空気中で数時間振盪
した。環化の後ＨＰＬＣにかけた。

【００２７】その他の環化方法、例えば（例えば酢酸中
での）沃素、またはＫ₃〔Ｆe(ＣＮ)₆〕による酸化もこ
の目的に適している。

【００２８】別法として、溶液中で操作される方法によ
る製造も可能であり、その場合は完全ペプチドの個々の
断片をまず製造する。ペプチドセグメントを与える各保
護アミノ酸の縮合は溶媒、例えばＤＭＦおよびテトラヒ
ドロフランまたはそれらの混合物中で行った。アミノ酸
の結合は固相合成の場合と同様カルボジイミドを用いて
行った。次に個々のセグメントを結合して完全なペプチ
ドとした。保護基を除去した後、ペプチドを同様に精製
しそして分析した。

【００２９】ペプチドの活性を機能試験により試験し
た。

【００３０】以下のペプチドを製造したが、本発明はそ
れらに限定されるものではない： Ａｓｎ Ｌ−アスパラギン Ａｓｐ Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙｓ Ｌ−システイン Ｇｌｎ Ｌ−グルタミン Ｇｌｕ Ｌ−グルタミン酸 Ｇｌｙ グリシン Ａｌａ Ｌ−アラニン Ｔｙｒ Ｌ−チロシン Ｐｈｅ フェニルアラニン Ｔｒｐ Ｌ−トリプトファン Ｐｇｌ Ｌ−フェニルグリシン Ｐｒｏ Ｌ−プロリン Ｉｌｅ Ｌ−イソロイシン Ｌｅｕ Ｌ−ロイシン Ｎｌｅ ノルロイシン Ｖａｌ Ｌ−バリン Ｎａｌ Ｌ−ナフチルアラニン Ｈｙｐ Ｌ−ヒドロキシプロリン Ｂｏｃ ｔ−ブチルオキシカルボニル Ｚ ベンジルオキシカルボニル Ｂｐｏｃ ビフェニリルプロピルオキシカルボニル Ｄｄｚ ジメチルジメトキシベンジルオキシカルボ
ニル Ｆｍｏｃ フルオレニルメチルオキシカルボニル ＤＭＦ ジメチルホルムアミド ＨＯＢｔ １−ヒドロキシスクシンイミド Ａｃ アセチル Ｓｕｃ スクシンイミジル ＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−
トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロ
ホスフェート ＴＢＴＵ ２（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イ
ル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフ
ルオロホスフェート Ｏｓｎ スクシンイミドエステル ＴＦＡ トリフルオロ酢酸 ＤＩＣ ジイソプロピルカルボジイミド Ｓ−ｔＢｕ ｔｅｒｔ．−ブチルチオ Ｔｒｔ トリチル ＦＡＢ 高速原子衝撃(ｆａｓｔ ａｔｏｍ ｂｏｍ
ｂａｒｄｍｅｎｔ)

【００３１】

【実施例】

〔実施例１〕 Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ（ＳＯ_３Ｈ）の製造 ２０ｇのＬ−フェニルアラニンを１７mlの３０％強度発
煙硫酸および２０mlの濃硫酸の混合物に少量ずつ溶解し
た。その混合物を１００℃に１時間加熱し次いで２００
mlの氷水に注いだ。酸を水酸化バリウムで中和し、そし
て硫酸バリウムを濾別した。その濾液を水を溶出剤とす
るカラム(Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ２、５０〜１００メッシ
ュ、寸法２３０×３２mm）クロマトにかけた。溶媒を蒸
発させると１８.５ｇのＬ−パラスルホフェニルアラニ
ンが得られた。

【００３２】７.３５ｇのアミノ酸を１５０mlの１０％
強度炭酸ナトリウム溶液にとった。これに撹拌しながら
１０ｇのＦｍｏｃ−ＯＳｕのジオキサン３００ml中の溶
液を添加した。その混合物は直ちにゲル状になったとこ
ろ、これを室温で２時間撹拌した。沈殿を濾別しそして
ジオキサンを蒸発させた。その水性溶液をエーテルで３
回抽出しそして１Ｎ塩酸でpH２の酸性とした。

【００３３】他の不純物を酢酸エチルで抽出した。水相
を回転蒸発器で蒸発させ、そして結晶性残渣を^RＳｉｃ
ａｐｅｎｔで真空乾燥した。

【００３４】〔実施例２〕 Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉ
ｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−
Ｌｅｕ−ＯＨ ０.８３ｇのＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−樹脂（０.５mmol）を次
のアミノ酸と結合させるためにＡｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈ
ｅｍｔｅｃｈ社（米国、ケンタッキー州、ルイスビル）
のペプチドシンセサイザーで製造元の教示に従って用意
した。Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）（１.５mmol）およ
び２.２５mmolのＨＯＢｔを１５mlのＤＭＦおよび１５m
lのＤＭＳＯに溶解し、そして１.６mmolのＤＩＣを添加
した。１時間後、その混合物を前記Ｌｅｕ−樹脂に添加
し、そして結合を２時間行った。次に標準的方法により
合成を完了させた。３倍過剰のアミノ酸を含むＴＢＴＵ
を結合に用いた。結合時間は各場合につき３５分とし
た。そのペプチド−樹脂を２７mlのＴＦＡ、１.５mlの
エタンジチオールおよび１ｇのレゾルシノールで１時間
処理した。ペプチド溶液をエーテルで結晶化し、濾別し
そして乾燥した。粗製収量４０５mg。１１０mgのこの粗
製ペプチドをＨＰＬＣカラム（Ｓｈａｎｄｏｎ，ＲＰ−
１８，２５０×２０mm）で０.１ＴＦＡ／アセトニトリ
ル勾配を用いて精製した。そのペプチドを凍結乾燥によ
り単離した（収量４８mg）。加水分解後に測定されたペ
プチド含率は７８％であった。

【００３５】アミノ酸組成は付属ダイアグラム（図表）
から明らかであり、また予想どおりであった。 アミノ酸分析： Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ） ０.９５（１） Ａｓｐ １.９４（２） Ｇｌｕ ４.１８（４） Ｐｒｏ １.１０（１） Ｇｌｙ １.００（１） Ｉｌｅ ０.９０（１） Ｌｅｕ ０.９０（１） Ｐｈｅ ０.９９（１）

【００３６】１０mgのペプチドを１mlの緩衝液（２０mM
Ｔｒｉｓ，１５０mM ＮａＣｌ pH７.５）に溶解した。
そのペプチドの部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）
をＰｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）に代えてＴｙｒを有するほかは同
じ配列のペプチドと対比しつつ試験した。

【００３７】〔ＰＴＴ試験〕 １００マイクロリットルの標準ヒト血漿 １００ ″ の緩衝液（前記参照） １００ ″ カオリン／パトロムチン（ｐａ
ｔｈｒｏｍｔｉｎ）試薬（ＢＥＨＲＩＮＧＷＥＲＫＥ
ＡＧ社） ３７℃で２分間 １００マイクロリットルのＣａＣｌ₂溶液

【００３８】〔結果〕

【表１】

【００３９】各場合について、アミノ酸分析とＦＡＢ質
量スペクトルは予想された結果と合致した。

【００４０】以下のペプチドをそれぞれ製造する： Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ
−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ
₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐ
ｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ａｃ−Ａｓ
ｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ
−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｓａｒ
−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−
Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｉｌｅ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌ
ｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃
Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｈ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｇｌｕ−Ｇ
ｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ
₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｈ
−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ａｓｐ
−ＯＨ、Ｓｕｃ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉ
ｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−
Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｓｕｃ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌ
ｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃
Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｎｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐ
ｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−ＮＨ₂、Ａｃ−Ｇｌ
ｙ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＮＨ
_２、Ｓｕｃ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ
−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ
（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ａｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−
Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ａ
ｓｐ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ａｌａ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ｇ
ｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｄ−Ｌｅｕ
−ＯＨ、Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌ
ｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｄ−Ｐｈｅ（Ｓ
Ｏ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ
−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−
Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｇｌ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｇｌ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｏ
Ｈ、Ａｃ−Ａｓｐ−Ｎａｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ
−ＯＨ、Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇ
ｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈ
ｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−ＯＨ、Ｃｙｓ−Ａｓ
ｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ
−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅ
ｕ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−ＯＨ、Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−
ＯＨ。

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式Ｉ Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ
   ９−Ａ１０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ａ１４−Ａ１５ 〔式中、 Ａ１は水素、システイン、アセチルシステイン、１〜４
   個の炭素原子を有する１または２個のアルキル基、２〜
   １０個の炭素原子を有するアシル基、２〜１０個の炭素
   原子および他のカルボキシル基を有するアシル基または
   ペプチド化学において慣用される保護基であり、 Ａ２は結合、Ａｓｎ、Ａｓｐ、ＧｌｎまたはＧｌｕであ
   り、 Ａ３は結合、ＧｌｙまたはＡｌａであり、 Ａ４はＧｌｕまたはＡｓｐであり、 Ａ５はＰｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｇｌ（フェニルグリ
   シン）またはＮａｌ（ナフチルアラニン）であり、 Ａ６はＧｌｕまたはＡｓｐであり、 Ａ７はＧｌｕ、Ａｓｐ、ＰｒｏまたはＡｌａであり、 Ａ８はＩｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、ＮｌｅまたはＰｈｅで
   あり、 Ａ９はＰｒｏまたはＨｙｐであり、 Ａ１０はＧｌｕまたはＡｓｐであり、 Ａ１１はＧｌｕまたはＡｓｐであり、 Ａ１２は（好ましくはｐ位の）Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）また
   はＰｈｅ（ＰＯ₃Ｈ₂）、または（好ましくはｐ位の）Ｐ
   ｇｌ（ＳＯ₃Ｈ）またはＰｇｌ（ＰＯ₃Ｈ₂）であり、 Ａ１３は結合、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ＶａｌまたはＡｌａで
   あり、 Ａ１４は結合、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐまたは
   Ｃｙｓであり、そしてＡ１５はＣｙｓ、Ｃｙｓアミド、
   遊離の、または４個までの炭素原子を有する低級アルコ
   ールでエステル化されたアルファ−カルボキシル基のＯ
   Ｈ基（それはそれらの水素が所望により４個までの炭素
   原子を有するアルキル基により置換されていてもよいカ
   ルボキサミド基の形であってもよい）である〕で示され
   るペプチド。
2. 【請求項２】 Ａ１２がＤまたはＬ体のスルホフェニル
   アラニンである請求項１記載のペプチド。
3. 【請求項３】 Ａ１２がＤまたはＬ体のスルホフェニル
   グリシンである請求項１記載のペプチド。
4. 【請求項４】 Ａ１が水素、メチル、アセチル、ベンゾ
   イルまたはスクシニルである請求項１記載のペプチド。
5. 【請求項５】 Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
   Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（Ｓ
   Ｏ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨなる構造を有する請求項１記載
   のペプチド。
6. 【請求項６】 Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−
   Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐ
   ｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ｈ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ
   −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅ
   ｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ、 Ａｃ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｏ
   Ｈ、 Ｓａｒ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐ
   ｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｉｌｅ−
   ＯＨ、 Ａｃ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌ
   ｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃
   Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ｈ−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ
   −Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｇｌ
   ｎ−ＯＨ、 Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ
   −Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ
   ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ｈ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ
   −Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ａｓ
   ｐ−ＯＨ、 Ｓｕｃ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐ
   ｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−
   ＯＨ、 Ｓｕｃ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐ
   ｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−
   ＯＨ、 Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｎｌ
   ｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｉ
   ｌｅ−Ａｓｎ−ＮＨ₂、 Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａ
   ｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌ
   ｅｕ−ＮＨ_２、 Ｓｕｃ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐ
   ｒｏ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ
   ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ａｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ａｓ
   ｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ａ
   ｌａ−ＮＨ_２、 Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌ
   ｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｄ
   −Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ａｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌ
   ｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｄ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）
   −Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ、 Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ
   −Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｇｌ（ＳＯ
   ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−ＯＨ、 Ａｃ−Ａｓｐ−Ｐｇｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｇｌ（ＳＯ₃Ｈ）−Ｌｅｕ−Ｏ
   Ｈ、またはＡｃ−Ａｓｐ−Ｎａｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉ
   ｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ（ＳＯ₃Ｈ）−
   Ｌｅｕ−ＯＨなる構造を有する請求項１記載のペプチ
   ド。
7. 【請求項７】 固相ペプチド合成または溶液中で操作さ
   れる合成により請求項１記載のペプチドの製造方法。
8. 【請求項８】 保護されたアミノ酸またはオリゴペプチ
   ドの反復結合によりポリマー支持体上でペプチド鎖を構
   築しそしてそれより分解除去することより成る請求項１
   記載のペプチドの製造方法。
9. 【請求項９】 保護されたアミノ酸または保護されたオ
   リゴペプチドを用いて溶液中でペプチド鎖を構築しそし
   て保護基を除去することによりペプチドを取得すること
   より成る請求項１記載のペプチドの製造方法。
10. 【請求項１０】 保護されたアミノ酸誘導体またはペプ
    チドセグメントを溶液中でまたは固相上で結合させ、そ
    して保護基の除去により、そして固相の場合には支持体
    樹脂から離脱させることにより取得することより成り、
    またシステイン含有ペプチドの場合にあっては酸化的閉
    環を行うこともできる式Ｉで示されるペプチドの製造方
    法。
11. 【請求項１１】 請求項１に記載の化合物を含有する診
    断または治療剤。