JPH0674937A

JPH0674937A - 細管式電気泳動方法およびその装置並びにこれらに用いられるカラム

Info

Publication number: JPH0674937A
Application number: JP5083747A
Authority: JP
Inventors: Chuzo Fujimoto; 忠▲蔵▼ 藤本
Original assignee: Nakano Vinegar Co Ltd
Current assignee: Nakano Vinegar Co Ltd
Priority date: 1992-06-26
Filing date: 1993-03-05
Publication date: 1994-03-18
Also published as: EP0576361A2; EP0576361A3

Abstract

(57)【要約】【目的】高電圧下においてもジュール熱の影響を受け
ることなく大量の試料分離と分取を短時間で行なうこと
ができる。【構成】径の異なる２本の細管を同軸状に配設して所
定幅寸法の空隙部を形成し、該空隙部で試料の電気泳動
を行なう。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、各種の荷電物質、特
に、ＤＮＡ断片やタンパク質・ヘモグロビン・アミノ酸
等の生体高分子や有機物質を分離・分析或は濃縮するた
めに用いられる細管式電気泳動方法およびその装置並び
にこれらの電気泳動に用いられるカラムに関する。

【０００２】

【従来技術とその課題】周知のように、ＤＮＡ断片やタ
ンパク質等の生体高分子や有機物質を分離・分析或は濃
縮する場合には、一般的には電気泳動法が用いられる。

【０００３】そして、近年では、より高分離性能を求め
るため、泳動槽に細管を用い、高電圧下で電気泳動を行
なう細管式電気泳動法（ＣａｐｉｌｌａｒｙＥｌｅｃ
ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）が公知である。

【０００４】この細管式電気泳動法は、一般的には、
０．０３ｍｍ〜０．１ｍｍ程度の内径を有する長さ５０
ｃｍ程度の細管の一端に試料を数ｎｌ注入した後、上記
細管の両端に数１００Ｖ／ｃｍの電圧を印加して行なわ
れる。

【０００５】このような一般的な細管式電気泳動法によ
れば、通常の電気泳動法に比べて、高分離能が得られ、
かつ、分析時間を短縮することができると共に、微量の
試料でも分析することができる、という利点を有してい
る（文献名「生化学」第６３巻第７号，１９９１年発行
の第５２９頁〜第５３４頁参照）。

【０００６】しかしながら、上記従来の一般的な細管式
電気泳動にあっては、試料中の目的成分に対する爽雑物
が多く、また、例えば、比較的大量の試料を一度に分離
して目的成分を分析しなければならない場合には、細管
の径を大きくしなければならないため、発生するジュー
ル熱の増加によって分離能が大幅に低下する。このた
め、比較的大量の試料中の目的成分を一度に単離し分取
する、という本来の目的を達成できなくなる、という問
題を有していた。

【０００７】この問題を解決する手段として、従来、通
常の細管式電気泳動に用いる細管を複数本束ねて比較的
多量の試料を同時に電気泳動する方法が公知である（Ｎ
ｏｒｂｅｒｔｏＡ．ＧｕｚｍａｎＡｎａｌｙｔｉｃ
ａＣｈｉｍｉｃａＡｃｔａ．２４９１９９１年
第２４７頁〜第２５５頁）。

【０００８】しかしながら、この所謂「束細管式」電気
泳動法にあっては、複数本の細管に同時に同量の試料を
入れ、かつ、試料は複数本の異なる経路で各々独立して
分離されるため、目的成分を同じ分離時間で検出するた
めには、細管の形状や表面状態が同一でなければなら
ず、更に、試料の注入条件や分離条件を絶対同一に保持
しなければならない。このような条件を達成することは
全く困難であり、細管の数が多くなればなるほど実施不
可能である、という問題を有していた。

【０００９】また、上記細管式電気泳動法は、上記した
ような高い分離能を有するが、試料が微量であるため、
分離された成分を分取するのが非常に難しい、という問
題を有していた。

【００１０】即ち、上記細管式電気泳動法における試料
の分取方法としては、従来、試料溶出側の電極槽を目的
成分の溶出時間に合わせて交換し、電極液中に分取する
方法（秋山忠雄、大森彬キャピラリー電気泳動学会
講演要旨集７３〜７４頁、１９９１年）や、導電性プ
レート上に液体吸収層および多孔質層を設置することに
より所謂膜上での分取を行なう方法（特開平４−２６４
２５３号）が公知である。

【００１１】しかしながら、上記前者の分取方法では、
溶出成分が希釈されてしまうため、濃縮、脱塩操作が必
要となる、という問題を有し、また、後者の分取方法で
は、分離成分を膜から再回収しなければならず、操作が
非常に煩雑である、という問題を有していた。

【００１２】これら従来の分取方法の根本的な問題点
は、同様の分取目的で使用する高速液体クロマトグラフ
ィ等と比較したときに、高速液体クロマトグラフィの場
合、移動相の動力源はポンプの能力に起因するのに対
し、細管式電気泳動法の場合、移動相の動力源は電位差
に起因することから、分離用のキャピラリーの両端が電
源に電気的に接続していなければならないためである。

【００１３】この発明は、かかる現状に鑑み創案された
ものであって、その目的とするところは、高電圧下にお
いてもジュール熱の影響を受けることなく大量の試料分
離を一度に行なうことができ、しかも、熟練性を必要と
せず、取り扱いも簡便であるとともに、微量物質を高精
度に分離・分取することができる試料分取装置を備えた
細管式電気泳動方法およびその装置並びにこれらに用い
られるカラムを提供しようとするものである。

【００１４】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、この発明に係る細管式電気泳動方法にあっては、径
の異なる２本の細管を同軸状に配設して所定幅寸法の空
隙部を形成し、該空隙部で試料の電気泳動を行なうよう
に構成したことを特徴とするものである。

【００１５】また、この発明にあっては、上記目的を達
成する他の手段として、径の異なる２本の細管を同軸状
に配設して所定幅寸法の空隙部を形成し、該空隙部で試
料の電気泳動を行なうと共に、上記内側細管の内空部に
冷媒を供給して上記空隙部内の試料を冷却することで、
ジュール熱による影響を受けずに多量の試料分離を行な
うことができるように構成したことを特徴とするもので
ある。

【００１６】さらに、この発明にあっては、上記方法を
実施するため、細管式電気泳動装置を、径の異なる２本
の細管を同軸状に配設して所定幅寸法の空隙部を形成し
てなるカラムと、上記２本の細管に電源を供給する手段
と、上記細管が浸漬される電極液槽と、泳動により分離
された試料を測定する検出手段と、を有して構成したこ
とを特徴とするものである。

【００１７】また、この発明にあっては、上記他の方法
を実施するため、細管式電気泳動装置を、径の異なる２
本の細管を同軸状に配設して所定幅寸法の空隙部を形成
してなるカラムと、上記内側細管の内空部に供給され上
記空隙部内の試料を冷却する冷媒供給手段と、上記２本
の細管に電源を供給する手段と、上記細管が浸漬される
電極液槽と、泳動により分離された試料を測定する検出
手段と、を有して構成したことを特徴とするものであ
る。

【００１８】特定物質の分離・分取を高精度で行なうた
め、この発明にあっては、細管式電気泳動装置を、径の
異なる２本の細管を同軸状に配設して所定幅寸法の空隙
部を形成してなるカラムと、上記２本の細管に電源を供
給する手段と、上記細管が浸漬される電極液槽と、泳動
により分離された試料を測定する検出手段と、該検出手
段の下流側に配設された試料分取手段と、を有して構成
したことを特徴とするものである。

【００１９】また、この発明にあっては、特定物質の分
離・分取を高精度で行なう他の手段として、細管式電気
泳動装置を、径の異なる２本の細管を同軸状に配設して
所定幅寸法の空隙部を形成してなるカラムと、上記内側
細管の内空部に供給され上記空隙部内の試料を冷却する
冷媒供給手段と、上記２本の細管に電源を供給する手段
と、上記細管が浸漬される電極液槽と、泳動により分離
された試料を測定する検出手段と、該検出手段の下流側
に配設された試料分取手段と、を有して構成したことを
特徴とするものである。

【００２０】この場合、上記試料分取装置には、試料が
滴着される凹部が形成されてなる分取体が着脱自在に装
着される。

【００２１】さらに、この発明にあっては、上記各方法
および各装置を有効に実現させるため、これらに用いら
れるカラムを、径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成したことを特徴とするもの
である。

【００２２】

【実施例】以下、添付図面に示す一実施例に基き、この
発明を詳細に説明する。

【００２３】図１に示すように、この実施例に係る細管
式電気泳動装置は、径の異なる２本の細管２，３から構
成されてなるカラム１と、該カラム１に電圧を印加する
高電圧発生用電源４と、該電源４に一端が導電接続され
た電極線用白金線５，５と、上記カラム１を泳動時に浸
漬する電極液槽６，７と、上記カラム１と電極液槽６，
７とを電気的に接続する電極液接続部８と、上記内側細
管２の内空部９に冷却水を供給する冷媒供給装置１０
と、泳動により分離された試料を光学的に検出する検出
装置１１と、この検出装置１１によって検出され分析さ
れた結果を記録し表示する制御装置１２と、上記検出装
置１１から外部へと導かれたカラム１の終端部に隣接し
て配設された試料分取装置２０と、から構成されてい
る。尚、図中符号１３は、冷媒供給装置１０からの冷却
水を上記内側細管２の内空部９に圧送するポンプであ
る。

【００２４】カラム１は、内径の小さい細管２を内径の
大きな細管３内に同軸状に挿入して二重管とし、この細
管２の外周面と細管の内周面との間に形成された空隙部
１４内で電気泳動を行なうように構成されている。

【００２５】この空隙部１４を形成する細管２の外周面
と細管３の内周面との間隙寸法は、０．０３ｍｍ〜０．
２ｍｍの範囲内で設定されており、好ましくは、０．０
３ｍｍ〜０．１ｍｍとするのが望ましい。これは、通常
の一本細管式電気泳動装置で用いられるカラムの内径寸
法が０．０３ｍｍ〜０．１ｍｍ程度であり、この範囲内
で寸法値に設定した場合には、通常の一本細管式電気泳
動法と同じ分離能を保持したまま、体積比において約４
０〜６０倍の試料分離を達成することができることにな
るからである。

【００２６】このカラム１の断面形状は、体積当たりの
表面積を大きくすることができるために、熱の消散が比
較的良好なため分離への影響が小さく、かつ、成型性が
容易な形状、例えば、円形が望ましい。勿論、カラム１
の断面形状を多角形とすることもできる。

【００２７】また、上記カラム１の空隙部１４を均一に
保持させるためには、例えば、上記内側細管２の表面に
０．０３ｍｍ〜０．２ｍｍの高さを有する針状等の突起
（図示せず）を同心円上に複数個突設する等、一定の厚
さの充填物を部分的に或は随所に挿入することで、上記
間隙を一定に保持させる。勿論、上記突起は、使用する
カラム１の長さに対応させて、上記カラム１の長手方向
に沿って数カ所形成するのが望ましいが、分離能に対す
る影響を極力小さくするためには、その数は最小とすべ
きである。

【００２８】このように構成されるカラム１の細管２，
３は、溶融石英シリカで形成されるが、これに代えて、
一般の細管式電気泳動装置のカラムに用いられる材質の
ものであれば、いずれの材質で形成されていても構わな
い。また、カラム１の空隙部１４内に、一定厚みのクリ
アランスを保持するために充填物を挿入し、或は、コー
ティング材を塗布してもよい。

【００２９】電極液槽６と電極液槽７および空隙部１４
内には、同一の電解質緩衝液が収容されている。

【００３０】電極液接続部８は、図２に示すように、上
記カラム１に蹄鉄型固定プレート１５を接着させ、次
に、加熱した電熱線等をカラム１の細管３に接触させて
亀裂１６を形成し、この亀裂部分１６を導電性を有する
ポリアクリルアミドゲル１７で被覆して形成されてい
る。

【００３１】このように、電極液接続部８をカラム１の
中途部に形成することで、カラム１の一端部を電極液槽
７に浸漬する必要がなくなり、その結果、試料の分離・
回収および試料の検出を連続的に行なうことができる。
尚、本発明で「連続的に分離・回収・検出できる」と
は、電気泳動を止めることなく、即ち、通電させながら
分離・回収・検出することを指す。

【００３２】冷媒供給装置１０は、図示しない温度制御
装置によって例えば１０℃程度に冷却された冷却水を、
ポンプ１３を介して上記内側細管２の内空部９に供給す
るもので、細部の構成は、公知の液体圧送装置と同様で
あるので、その詳細な説明をここでは省略する。この場
合の冷却方法は必ずしも内空部９に限定されるものでは
ないが、冷却効率からすれば、内空部９が望ましい。

【００３３】このように上記内側細管２の内空部９に冷
却水を供給することで、高電圧を印加してもジュール熱
による分離能の低下を招く虞れが全くなくなり、分離性
能および再現性能を大幅に向上させることができる。勿
論、上記カラム１を冷却する場合、例えば、チャンバー
等を用いてカラムの外側から該カラムを冷却するように
構成しても同様の効果が得られる。

【００３４】検出装置１１は、目的物質を分離して光学
的に蛍光強度や紫外線吸光度を測定することで定性・定
量を行なうもので、この測定器は公知であるので、その
詳細な説明をここでは省略する。勿論、これに代えて、
公知の電位勾配検出器・電導度検出器・熱電対検出器或
はこれらを組み合わせたものを用いて目的物質の定性・
定量を行なうこともできる。

【００３５】制御装置１２は、例えば、公知のマイクロ
プロセッサ（ＭＰＵ）などで構成されており、上記検出
装置１１によって検出された結果をプリンタ（図示せ
ず）に出力し、或は、ＣＲＴ等の表示装置（図示せず）
に表示すると共に、上記結果を記録し保存したり、濃度
演算等するように構成されている。

【００３６】試料分取装置２０は、本実施例のような多
重管式カラムにおいて、高分離能を維持したまま、単一
操作あたりの試料の処理能力を向上させるため、次のよ
うな配慮が必要である。第１に、高分離能・再現性を維
持するため泳動空隙部は一定間隔で保持される必要があ
ること、即ち、カラム１を直線状に保持すること。第２
に、電気泳動中、カラムは重力方向に対し垂直に設定す
ること。第３に、亀裂を持つ多重管式電気泳動法で分取
を行なう場合、亀裂からカラム出口までの距離をできる
だけ短くすること。

【００３７】以上の３点を踏まえると、多重管式電気泳
動法における分取方法として必要な条件は、重力方向と
垂直に設置されたカラム１から溶液状の分離対象を、数
秒毎に０．１μｌ単位で捕集できるように構成すること
が望ましい。

【００３８】即ち、この試料分取装置２０は、図３乃至
図５に示すように、間欠パルスモータなどで構成されて
なる駆動装置２１と、この駆動装置の回転軸２２に固着
され一定方向に所定のタイミングで間欠移動制御される
ドラム２３と、このドラム２３の外周に凹設された溝部
（図示せず）に巻装される複数の分取ベルト２４と、か
ら構成されている。この場合、上記各分取ベルト２４と
上記カラム１の終端部１ａとの最適距離は、予め計測さ
れて設定されているものとする。尚、図中符合２７は、
分取ベルト２４の端部をドラム２３に止着するための止
着具であり、上記各分取ベルト２４の裏面側の端部に
は、ドラム２３の外周面に突設された突起（図示せず）
に嵌合係止される小孔２８（図４参照）が開設されてお
り、上記突起を小孔２８に嵌合係止させた後、この係止
状態が解除されないように、上記止着具２７で各分取ベ
ルト２４を固着するように構成されている。

【００３９】勿論、上記各分取ベルト２４と上記カラム
１の終端部１ａとの距離は、必要に応じて光センサー等
で構成されてなる距離計測部２５で計測するように構成
することができ、この場合には、この距離計測部２５で
計測されたデータに基づき、上記ドラム２３を、図示外
の駆動装置によってカラム１方向へと進退・昇降制御し
て、分取時における最適距離を保つように駆動制御する
こともできる。

【００４０】回転軸２２は、その外周面に凸部２２ａを
有して構成されており、この凸部２２ａがドラム２３の
凹部２３ａに嵌合係止されることで、ドラム２３を位置
決めることができる。

【００４１】ドラム２３の上下方向に沿って並着された
各分取ベルト２４は、回収液を後で濃縮・希釈・移動操
作しなければならないため、疎水性・耐水性・耐腐食性
・低吸着性・耐酸性・耐アルカリ性・低抽出性等の特性
を有し、かつ、ドラム２３に巻装するため柔軟片を有す
る、例えば、シリコンゴムやテフロンまたはタイゴン等
の材質で帯状に形成するのが望ましい。

【００４２】また、これらの分取ベルト２４は、図５か
らも明らかなように、その長手方向に沿って所要間隔毎
に、０．０５μｌ〜０．５μｌの回収が可能な試料回収
部２６が連続的に凹設されて形成されており、これら各
試料回取部２６は、分取する液胞の大きさに対応させ
て、円形或は円錐形に形成し、回収液が表面張力によっ
て液胞となったときに、各試料回収部２６の一点或は一
面と接触させ、或は、接触直前で停止させ、液滴と付着
させる間隙を設けることで試料を回収できるように構成
されている。勿論、各分取ベルト２４で試料回収部２６
の大きさを異ならしめて形成することもできる。

【００４３】例えば、１個の試料回収部２６において
０．１μｌを分取する場合には、最大孔径Ｄ_１を１ｍ
ｍ，深さＤ_２を１ｍｍの円錐形とし、間隔距離Ｄ_３を１
ｍｍ以上となるように加工すればよい。更に、分取した
目的成分の希釈等の処理方法を採用するときには、１〜
５μｌ程度の凹部の容量にすればよい。

【００４４】尚、分取ベルト２４は、図６に示すよう
に、長尺に形成したものをドラム２３にらせん状に巻装
して装着してもよい。

【００４５】このように構成されドラム２３に止着され
た分取ベルト２４を間欠移送する駆動装置２１は、該分
取ベルト２４に形成された試料回収部２６の形成間隔に
対応して、各試料回収部２６が正確にカラム１の終端部
ａと順次対峙するように駆動制御される。

【００４６】このように試料分取装置２０を構成するこ
とで、溶出成分を希釈することなく微量の特定物質を連
続的、かつ、高精度で分離・分取することができる。

【００４７】図７は、試料分取装置の他例を示すもので
あって、この試料分取装置３０は、複数の試料回収部３
６が整列状態で凹設されたプレート状の分取体３４をプ
レート保持体３３に止着し、このプレート保持体３３を
上下左右方向に移動させるＸ−Ｙ移送体３１に連結する
とともに、該Ｘ−Ｙ移送体３１をカラム１方向に前後進
させるように構成することで、疎水性・耐水性・耐腐食
性・低吸着性・耐酸性・耐アルカリ性・低抽出性等の特
性を有しているが柔軟性が少ない材質で形成された分取
体３４で目的微量物質を分離・分取できるように構成し
た他は、他の構成および作用は、前記試料分取装置２０
と同様であるので、その詳細な説明をここでは省略す
る。

【００４８】勿論、上記分取体３４は、図８に示すよう
に、円板状に形成し、この分取体３４の表面側に試料回
収部３６を同心円状に配列して構成してもよい。

【００４９】

【実験例１】次に、上記実施例に係る細管式電気泳動装
置を用いてアミノ酸の分離および大量試料の分離実験を
行なった結果を下記に示す。この実験に用いた細管式電
気泳動装置では、高電圧発生用電源４として「松定プレ
シジョンディバイセズ社製ＭｏｄｅｌＨＣＺＥ−３
０ＰＮ０．２５」を用い、かつ、検出装置１１として
「日本分光社製Ｍｏｄｅｌ８２０−ＦＰ」を用いる
と共に、カラム１の細管２を、全長７０ｃｍ・内径０．
２５ｍｍ・外径０．３７５ｍｍの溶融石英シリカ製キャ
ピラリーカラム（ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ社製）からな
るカラム１の細管２を、全長７０ｃｍ・内径０．５３ｍ
ｍ・外径０．６３ｍｍの溶融石英シリカ製キャピラリー
カラム（ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ社製）からなる細管３
に挿入し、前記空隙部１４の間隙寸法が０．０８ｍｍと
なるように設定した。このように構成されてなる実験器
によって下記の条件下でアミノ酸の分離実験を行なっ
た。試料は、Ｎε−ＤＮＳ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅとＤＮＳ
−Ｌ−ｖａｌｉｎｅの夫々の濃度が５００μｇ／ｍｌで
ある混合溶液を用いた。また、電気泳動用緩衝液として
は、ｐＨ７．２の１ｍＭリン酸緩衝液（関東化学製）を
用いた。試料の注入は、落差法により行なった。即ち、
先ず、試料が入った容器にカラム１を差し込んだ後、上
記容器を電極液槽７よりも１０ｃｍ程度高い位置まで持
ち上げることにより、試料０．１μｌを細管２，３の空
隙部１４内に注入した。次に、高電圧発生用電源４から
電極液槽６，７間に４０ＫＶの電圧を印加して電気泳動
を行なうと共に、細管２の内空部９内に冷却水を循環さ
せてカラム１を１０℃の温度に保った。その結果、電気
泳動開始後約４分でＮε−ＤＮＳ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅが
完全に分離して検出され、また、電気泳動開始後約６分
でＤＮＳ−Ｌ−ｖａｌｉｎｅが完全に分離して検出され
た。さらに、同一試料による繰り返し分析における保持
時間・ピーク高さの再現性は夫々０．４％，８％以内で
あり、高い再現性が得られた。

【００５０】

【実験例２】次に、上記実験例１で用いた試料の５倍量
の濃度（５ｍｇ／ｍｌ）のアミノ酸混合試料を用いて大
量試料の分離実験を行なった。実験器は上記実験例１の
ものと同じである。その結果、本実験に用いたカラム１
の空隙部１４と同じ長さの口径を有する従来の前記１本
細管式電気泳動法に比べて、約５０倍の量の試料が一度
に分離できた。このことからも明らかなように、本発明
の細管式電気泳動法によれば、高分離能を維持したまま
大量の試料を一度に分離できることが確認できた。

【００５１】

【実験例３】次に、上記実施例に係る二重細管式電気泳
動装置を用いて、従来の単一管式電気泳動法との比較試
験を行なった結果を下記に示す。この実験に用いた細管
式電気泳動装置では、高電圧発生用電源４として「松定
プレシジョンディバイセズ社製ＭｏｄｅｌＨＣＺＥ
−３０ＰＮ０．２５」を用い、かつ、検出装置１１と
して「日本分光社製Ｍｏｄｅｌ８７０−ＣＥ」を用
いるとともに、全長４１５ｍｍ・内径０．２５ｍｍ・外
径０．３３０ｍｍのポリイミドを剥離した溶融石英シリ
カ製キャピラリーカラム（ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ社
製）からなるカラム１の細管２を、全長４１４ｍｍ・内
径０．５３ｍｍ・外径０．６３ｍｍの溶融石英シリカ製
キャピラリーカラム（ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ社製）か
らなる細管３に挿入し、前記空隙部１４の間隙寸法が
０．１０ｍｍとなるように設定した。また、比較試験用
として、全長４１５ｍｍ・内径０．１０ｍｍ，外径０．
３７５ｍｍの溶融石英シリカ製キャピラリーカラム（Ｇ
ＬＳｃｉｅｎｃｅｓ社製）を用いた。このように構成
されてなる実験器によって下記の条件下でピリミジン塩
基の一種であるチミン（ｔｈｙｍｉｎｅ：２，４−ｄｉ
ｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌ−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ）の
分離比較実験を行なった。試料は、チミンを濃度０．２
５ｍｇ／ｍｌとなるように電気泳動用の電解質溶液に溶
解したものを用いた。また、電気泳動用電解質溶液とし
ては、ｐＨ５．８４の１ｍＭリン酸緩衝液を１０倍に希
釈し用いた。試料の注入は、動電注入法を用い、注入電
圧０．６ＫＶ，注入時間８秒で試料の注入を行なっ
た。次に、高電圧発生用電源４から電極液槽６，７間に
１５ＫＶの電圧を印加して電気泳動を行なうと共に、細
管２の内空部９内に冷却水を循環させてカラム１を１０
℃の温度に保った。試料の検出は、カソード電極側から
３００ｍｍの位置で、２９０ｎｍの吸収により確認し
た。結果を、図９（ａ）（ｂ）に示す。同図からも明ら
かなように、本実施例に係る二重細管式電気泳動装置に
よれば、従来の単一管式電気泳動装置よりも、多量の目
的成分が分離できた。

【００５２】

【発明の効果】以上説明したように、この発明によれ
ば、高電圧下においてもジュール熱の影響を受けること
なく大量の試料分離を一度に行なうことができ、しか
も、取り扱いが簡便で熟練性を必要としないので、この
種の試料分離を容易に行なうことができる、という優れ
た効果を得ることができる。

【００５３】また、この発明によれば、多重細管式電気
泳動装置に試料分取装置を付設したので、溶出成分を希
釈することなく微量の特定物質を連続的、かつ、高精度
で分離・分取することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】この発明の一実施例に係る細管式電気泳動装置
の概略的な構成を示す説明図である。

【図２】同細管式電気泳動装置に用いられるカラムの出
口直前に設けられた導電接続部分の拡大断面図である。

【図３】同細管式電気泳動装置の試料分取装置の第１構
成例を示す斜視図である。

【図４】同試料分取装置に装着される分取バンドの部分
拡大断面図である。

【図５】同試料分取装置の正面図である。

【図６】同試料分取装置における分取バンドの巻装状態
の他例を示す斜視図である。

【図７】同試料分取装置の第２構成例を示す斜視図であ
る。

【図８】同試料分取装置の分取体の他例を示す斜視図で
ある。

【図９】（ａ）は，本発明による二重細管式電気泳動装
置による分離結果を示す図であり、（ｂ）は従来の単一
管式電気泳動装置による分離結果を示す図である。

【符号の説明】

１カラム２内側の細管３外側の細管４電圧発生用電源６，７電極液槽８電極液接続部１０冷媒供給装置１１検出装置１４空隙部２０，３０試料分取装置２４，３４分取バンド（分取体）２６，３６試料回収部

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成し、該空隙部で試料の電気
泳動を行なうことを特徴とする細管式電気泳動方法。
【請求項２】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成し、該空隙部で試料の電気
泳動を行なうと共に、上記内側細管の内空部に冷媒を供
給して上記空隙部内の試料を冷却することを特徴とする
細管式電気泳動方法。
【請求項３】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成してなるカラムと、上記２
本の細管に電源を供給する手段と、上記細管が浸漬され
る電極液槽と、泳動により分離された試料を測定する検
出手段と、を有して構成されてなる細管式電気泳動装
置。
【請求項４】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成してなるカラムと、上記内
側細管の内空部に供給され上記空隙部内の試料を冷却す
る冷媒供給手段と、上記２本の細管に電源を供給する手
段と、上記細管が浸漬される電極液槽と、泳動により分
離された試料を測定する検出手段と、を有して構成され
てなる細管式電気泳動装置。
【請求項５】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成してなるカラムと、上記２
本の細管に電源を供給する手段と、上記細管が浸漬され
る電極液槽と、泳動により分離された試料を測定する検
出手段と、該検出手段の下流側に配設された試料分取手
段と、を有して構成されてなる細管式電気泳動装置。
【請求項６】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成してなるカラムと、上記内
側細管の内空部に供給され上記空隙部内の試料を冷却す
る冷媒供給手段と、上記２本の細管に電源を供給する手
段と、上記細管が浸漬される電極液槽と、泳動により分
離された試料を測定する検出手段と、該検出手段の下流
側に配設された試料分取手段と、を有して構成されてな
る細管式電気泳動装置。
【請求項７】前記試料分取装置は、試料が滴着される
凹部が形成されてなる分取体を有して構成されているこ
とを特徴とする請求項５または請求項６のいずれかに記
載の細管式電気泳動装置。
【請求項８】径の異なる２本の細管を同軸状に配設し
て所定幅寸法の空隙部を形成してなる細管式電気泳動に
用いられるカラム。