JPH04253958A - 長鎖カルボン酸マレイミド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は長鎖カルボン酸マレイミ
ドに関する。本発明により提供される長鎖カルボン酸マ
レイミドは、医薬として有用性が注目されているス−パ
−オキシドジスムタ−ゼの血中半減期を延長させるため
の化学修飾剤として有用である。 【０００２】 【従来の技術】従来、ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ［
以下、これをＳＯＤと略記することがある］は動物、植
物、微生物などの生体内に広く存在し、生体に有害なス
−パ−オキシドを分解する酵素として知られており、抗
炎症剤としての使用の検討［ファルマシア、１７巻、４
１１〜４１２頁　（１９８１）　およびカレント・テラ
ピュ−ティク・リサ−チ（Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｔｈｅｒａ
ｐｅｕｔｉｃ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ），１６巻，　７０６
頁　（１９７４）参照］、心臓弁膜症手術時における心
筋保護効果の検討（「第　１９　回心臓血管外科学会講
演要旨集」、１０２　頁参照）等が行われてきたが、Ｓ
ＯＤを静脈内投与した場合ＳＯＤの分子量（約３２，０
００）が腎糸球体の濾過限界値（分子量で約　５０，０
００）よりも小さいため、速かに血中から尿中に排泄代
謝され、その血中半減期は僅か　４　〜　６　分とされ
ている。血中半減期の延長を主目的として、天然高分子
化合物または有機合成化合物による修飾が試みられてき
た。 【０００３】フィコ−ル、イヌリン、デキストラン硫酸
、デキストラン、ヘパリン、ヒアルロン酸、グリコサミ
ノグリカンなどの天然高分子化合物で修飾されたＳＯＤ
は知られているが［プロシ−ディングズ・オブ・ザ・ナ
ショナル・アカデミ−・オブ・サイエンス・オブ・ユナ
イテッド・ステ−ツ・オブ・アメリカ（Ｐｒｏｃ．　Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ），　７７巻，
　１１５９頁　（１９８０）；特開昭　５８−３２８２
６　号公報；特開平　２−２３１０７５　号公報；特開
平　２−２３１０７６　号公報；特開平　２−２３１０
７７　号公報；特開平　２−２３１０７８　号公報；特
開平　２−２７３１７６　号公報参照］、天然高分子化
合物の分子量には幅があることから、それらＳＯＤ修飾
体の分子量は一定ではない。またラットアルブミンで修
飾されたＳＯＤも知られているが［エイジェンツ・アン
ド・アクションズ（Ａｇｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ａｃｔｉｏ
ｎｓ），　１０巻，　２３１頁　（１９８０）　参照］
、このＳＯＤ修飾体には抗原性がある。 【０００４】ポリエチレングリコ−ルなどのポリアルキ
レングリコ−ル等の合成高分子化合物で修飾したＳＯＤ
も知られているが［リサ−チ・コミュニケ−ションズ・
イン・ケミカル・パソロジ−・アンド・ファ−マコロジ
−（Ｒｅｓ．　Ｃｏｍｍｕｎ．　Ｃｈｅｍ．　Ｐａｔｈ
ｏｌ．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．），　２９巻，　１１３
頁　（１９８０）；特開昭　６１−２４９３８８号公報
参照］、合成高分子化合物も天然高分子化合物と同様に
分子量に分布がある。 【０００５】部分半エステル化スチレン−無水マレイン
酸共重合体（以下、これをＳＭＡと略称する）によるＳ
ＯＤの修飾も検討されている［特開平　１−１０４１６
４　号公報参照］。ＳＯＤをＳＭＡで修飾することによ
り得られる誘導体（以下、これをＳＭＡ−ＳＯＤと略記
する）は、血中でアルブミンを主体とする血清タンパク
質と可逆的に結合・解離する性質を有することから血中
半減期が延長されており、またＳＭＡがカルボン酸を含
有することから炎症により酸性となった部位への集積性
をも有する。また、ジカルボン酸を用いることにより２
分子のＳＯＤを結合した分子量分布の狭い架橋化誘導体
も知られているが［特開平　１−９５７７５　号公報参
照］、この誘導体は炎症部位への集積性は期待できない
。 【０００６】 【発明が解決しようとする課題】以上述べた誘導体にお
いてはいずれもＳＯＤがアミノ基を介して修飾されてい
る。ヒト型ＳＯＤは１分子当たりアミノ基を２２個また
は２４個有しており、またウシ型ＳＯＤは１分子当たり
アミノ基を２０個有する。このようにＳＯＤは多数のア
ミノ基を有しており、修飾の際にＳＯＤ分子内の結合部
位となるアミノ基を特定することは極めて難しい。医薬
の有効成分は単一の化学構造を有する化合物であること
が好ましい状況にあることを考慮すれば、医薬用途に供
するＳＯＤ修飾体はＳＯＤ分子内の修飾位置が特定され
ているものが望まれる。 【０００７】かかる観点から、メルカプト基との反応性
を有する官能基が導入されたＳＭＡによりＳＯＤをメル
カプト基を介して修飾した誘導体（以下、これをＳＭＩ
−ＳＯＤと略記する）も創製されている［特開平　１−
２５７４７９　号公報参照］。この誘導体は血中寿命、
残存酵素活性、酸性部位への集積性の点では上記ＳＭＡ
−ＳＯＤと同等であり、またＳＯＤ分子内の修飾位置が
特定されているが、ＳＭＡの構造が高分子化学的に特定
されているとはいえ複雑であり、先に述べた医薬の有効
成分という観点にたつと改善すべき問題が残っている。 従って、血中寿命、残存酵素活性、酸性部位への集積性
の点ではＳＭＡ−ＳＯＤおよびＳＭＩ−ＳＯＤと同等で
、しかもＳＭＩ−ＳＯＤ同様ＳＯＤ分子内の修飾位置が
特定されており、さらに構造の明瞭な修飾剤を結合させ
たＳＯＤ修飾体の出現が切望されているのが実状である
。 【０００８】しかして、本発明の目的は、ＳＯＤに比べ
て大幅に延長された血中半減期を有し、酸性部位への集
積性を有する新規なＳＯＤ誘導体を与える、ＳＯＤ分子
内の２個のメルカプト基に結合性を有する新規な化学修
飾剤である長鎖カルボン酸マレイミドを提供することに
ある。 【０００９】 【課題を解決するための手段】本発明によれば、上記の
目的は、下記の化２ 【００１０】 【化２】 【００１１】（式中、Ｗは１個以上の酸素原子、硫黄原
子、または−Ｎ（Ｒ）−（式中、Ｒは低級アルキル基を
表す）で示される基で中断されていてもよい２価の長鎖
炭化水素基を表す）で示される長鎖カルボン酸マレイミ
ド（以下、これを長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）と略
称する）を提供することによって達成される。 【００１２】長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）において
、Ｗで表される２価の長鎖炭化水素基としては【００１
３】（ＣＨ２）１７　、（ＣＨ２）１８　、（ＣＨ２）
１９　、（ＣＨ２）２０　、（ＣＨ２）２１　、（ＣＨ
２）８ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）９ＣＨ＝
ＣＨ（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）１０ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ
２）７　、（ＣＨ２）１１ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７　、
（ＣＨ２）１２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）
８ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）８　、（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ
（ＣＨ２）９　、（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）１
０　、（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）１１　、（Ｃ
Ｈ２）５ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７　、
（ＣＨ２）６ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）７
　、（ＣＨ２）７ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２
）７　、（ＣＨ２）８ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ２）７　、（ＣＨ２）９ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ
（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１５　
、（ＣＨ２）４−Ｏ−（ＣＨ２）１６　、（ＣＨ２）２
−Ｏ−（ＣＨ２）１７　、（ＣＨ２）４−Ｏ−（ＣＨ２
）１８　、（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１９　、（Ｃ
Ｈ２）４−Ｏ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）４−Ｏ−
（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）４−Ｏ−（ＣＨ２）１５
　、（ＣＨ２）４−Ｏ−（ＣＨ２）１６　、（ＣＨ２）
４−Ｏ−（ＣＨ２）１７　、（ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ
２）１１　、（ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）１２　、（
ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）６−Ｏ
−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）１
５　、（ＣＨ２）８−Ｏ−（ＣＨ２）９　、（ＣＨ２）
８−Ｏ−（ＣＨ２）１０　、（ＣＨ２）８−Ｏ−（ＣＨ
２）１１　、（ＣＨ２）８−Ｏ−（ＣＨ２）１２　、（
ＣＨ２）８−Ｏ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）１０−
Ｏ−（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）１０−Ｏ−（ＣＨ２）
９　、（ＣＨ２）１０−Ｏ−（ＣＨ２）１１　、（ＣＨ
２）１２−Ｏ−（ＣＨ２）５　、（ＣＨ２）１２−Ｏ−
（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）１２−Ｏ−（ＣＨ２）９　
、（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２
）７　、（ＣＨ２）４−Ｏ−（ＣＨ２）５ＣＨ＝ＣＨ（
ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）５ＣＨ＝
ＣＨ（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）１
５　、（ＣＨ２）４−Ｓ−（ＣＨ２）１６　、（ＣＨ２
）２−Ｓ−（ＣＨ２）１７　、（ＣＨ２）４−Ｓ−（Ｃ
Ｈ２）１８　、（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）１９　、
（ＣＨ２）４−Ｓ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）４−
Ｓ−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）４−Ｓ−（ＣＨ２）
１５　、（ＣＨ２）４−Ｓ−（ＣＨ２）１６　、（ＣＨ
２）４−Ｓ−（ＣＨ２）１７　、（ＣＨ２）６−Ｓ−（
ＣＨ２）１１　、（ＣＨ２）６−Ｓ−（ＣＨ２）１２　
、（ＣＨ２）６−Ｓ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）６
−Ｓ−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）６−Ｓ−（ＣＨ２
）１５　、（ＣＨ２）８−Ｓ−（ＣＨ２）９　、（ＣＨ
２）８−Ｓ−（ＣＨ２）１０　、（ＣＨ２）８−Ｓ−（
ＣＨ２）１１　、（ＣＨ２）８−Ｓ−（ＣＨ２）１２　
、（ＣＨ２）８−Ｓ−（ＣＨ２）１３　、（ＣＨ２）１
０−Ｓ−（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）１０−Ｓ−（ＣＨ
２）９　、（ＣＨ２）１０−Ｓ−（ＣＨ２）１１　、（
ＣＨ２）１２−Ｓ−（ＣＨ２）５　、（ＣＨ２）１２−
Ｓ−（ＣＨ２）７　、（ＣＨ２）１２−Ｓ−（ＣＨ２）
９　、（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）１４　
、（ＣＨ２）４−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）１４　、（
ＣＨ２）６−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ
２）２−Ｎ（Ｃ２Ｈ５）−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２
）４−Ｎ（Ｃ２Ｈ５）−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）
６−Ｎ（Ｃ２Ｈ５）−（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）２
−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１２　、（ＣＨ２
）４−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１２　、（Ｃ
Ｈ２）６−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１２　、
（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１４
　、（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）
１６　、（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１４　、（
ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１６　、（ＣＨ２）２
−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１８　、（ＣＨ２）４−Ｓ−Ｓ−
（ＣＨ２）１２　、（ＣＨ２）４−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）
１４　、（ＣＨ２）４−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１６　、（
ＣＨ２）６−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１０　、（ＣＨ２）６
−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１２　、（ＣＨ２）６−Ｓ−Ｓ−
（ＣＨ２）１４　、（ＣＨ２）８−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）
８　、（ＣＨ２）８−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１０　、（Ｃ
Ｈ２）８−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ２）１２　、などが例示され
る。 【００１４】長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）は下記の
一般式 【００１５】Ｈ２Ｎ−Ｗ−ＣＯ２Ｈ 【００１６】（式中、Ｗは前記定義のとおりである）で
示されるアミノカルボン酸（以下、これをアミノカルボ
ン酸（ＩＩ）と略称する）をマレイン酸無水物と反応さ
せることにより、下記の化３ 【００１７】 【化３】 【００１８】（式中、Ｗは前記定義のとおりである）で
示されるアミドジカルボン酸（以下、これをアミドジカ
ルボン酸（ＩＩＩ）と略称する）を得、次いでアミドジ
カルボン酸（ＩＩＩ）を閉環処理する自体公知の方法［
オ−ガニック・シンセシス（Ｏｒｇ．　Ｓｙｎｔｈ．）
，　４１巻，　９３頁　（１９６１）　および「新実験
化学講座　１４−ＩＩ」、１１４５〜１１４７頁、（丸
善株式会社、昭和５２年発行）参照］により合成するこ
とができるが、この方法を一部改良した方法により合成
することもできる。 【００１９】アミノカルボン酸（ＩＩ）の合成は、アミ
ノ酸合成法として知られているガブリエル（Ｇａｂｒｉ
ｅｌ）法［ベリッヒテ（Ｂｅｒ．），　２２巻，　４２
６頁　（１８８９）参照］を鍵反応として利用する自体
公知の方法に従って実施するのが簡便である。即ち、下
記の一般式 【００２０】ＨＯ−Ｗ−ＣＯ２Ｒ１ 【００２１】（式中、Ｗは前記定義のとおりであり、Ｒ
１　は低級アルキル基を表す）で示されるオキシカルボ
ン酸エステル（以下、これをオキシカルボン酸エステル
（ＩＶ）と略称する）をｐ−トルエンスルホニルクロリ
ド、メタンスルホニルクロリド等のスルホン酸ハライド
で処理し、得られる下記の化４ 【００２２】 【化４】 【００２３】（式中、ＷおよびＲ１　は前記定義のとお
りであり、Ｒ２　は低級アルキル基または低級アルキル
基で置換されてもよいアリ−ル基を表す）で示されるス
ルホン酸エステル（以下、これをスルホン酸エステル（
Ｖ）と略称する）にガブリエル法を適用し、まずフタル
イミドアルカリ金属塩を反応させ、下記の化５【００２
４】 【化５】 【００２５】（式中、ＷおよびＲ１　は前記定義のとお
りである）で示されるフタルイミドカルボン酸エステル
（以下、これをフタルイミドカルボン酸エステル（ＶＩ
）と略称する）を得たのち、これをヒドラジンで処理す
ることによりフタルイミド基を分解し、その後、生成し
たアミノカルボン酸エステルをアルカリ条件下で加水分
解することによりアミノカルボン酸（ＩＩ）を得る。 【００２６】スルホン酸エステル（Ｖ）はオキシカルボ
ン酸エステル（ＩＶ）とｐ−トルエンスルホニルクロリ
ド、メタンスルホニルクロリド等のスルホン酸ハライド
との反応により容易に得ることができる。この反応は、
通常、例えばピリジン、トリエチルアミンなどで代表さ
れる塩基の存在下、塩化メチレン、エ−テルなどの適当
な溶媒の存在下または不存在下に、−２０　℃〜　＋５
０　℃の範囲の温度において行われる。 【００２７】スルホン酸エステル（Ｖ）とフタルイミド
アルカリ金属塩との反応は通常、非極性高沸点溶媒の存
在下または不存在下に行われるが、Ｎ，Ｎ’−ジメチル
ホルムアミド中で行うのが簡便である。即ち、フタルイ
ミドカリウムをＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドに溶解
し、得られた溶液に室温〜　１５３　℃の範囲、好まし
くは　８０　〜　１２０℃の範囲の温度でスルホン酸エ
ステル（Ｖ）を添加することにより行われる。 【００２８】上記のようにして得られたフタルイミドカ
ルボン酸エステル（ＶＩ）のアミノカルボン酸（ＩＩ）
への誘導は、フタルイミドカルボン酸エステル（ＶＩ）
をヒドラジンで処理することによりフタルイミド基を分
解したのち生成したアミノカルボン酸エステルをアルカ
リ条件下で加水分解することによって行われる。即ち、
フタルイミドカルボン酸エステル（ＶＩ）を例えば、エ
タノ−ル、メタノ−ルなどの適当な溶媒に溶解し、得ら
れた溶液にヒドラジンを加えて攪拌し、生成したフタル
ヒドラジドを除去したのち、残存する生成したアミノカ
ルボン酸エステルを常法に従い水酸化ナトリウムまたは
水酸化カリウムの含水メタノ−ル、含水エタノ−ル、ま
たは含水イソプロパノ−ルの溶液中で攪拌することによ
り行われる。ヒドラジンの使用量は、フタルイミドカル
ボン酸エステル（ＶＩ）に対して約　１．０　〜２０　
モル当量であることが好ましく、１．０　〜　１０　モ
ル当量であることがより好ましい。その反応を円滑に進
行させるため、反応温度としては、０　℃から溶媒の沸
点までの範囲の温度を採用することが望ましく、２５　
℃から溶媒の沸点までの範囲の温度を採用することがよ
り望ましい。反応完結に要する時間は、このとき採用す
る温度条件によって異なるが、通常約　１０　分間〜　
３日間の範囲内である。 【００２９】上記の反応によって生成するフタルヒドラ
ジドは、反応混合液を好適には室温ないしは氷冷下の温
度下で、塩酸、硫酸などの鉱酸を用いて　ｐＨ１　〜　
４　程度の酸性状態にして沈澱させ、濾過することによ
って除去するのが簡便である。かかる操作を行ったのち
に溶媒を留去し、残存するアミノカルボン酸エステルを
アルカリ条件下での加水分解反応に付する。この加水分
解反応は　０　℃から溶媒の沸点までの範囲の温度で行
うのが好ましく、２５　℃から溶媒の沸点までの範囲の
温度で行うのがより好ましい。反応完結に要する時間は
、採用する温度条件によって異なるが、通常約　１０　
分間〜　３　日間の範囲内である。反応後、反応混合物
からのアミノカルボン酸（ＩＩ）の単離は、好適には反
応混合物を室温ないしは氷冷までの範囲の温度条件下で
、塩酸、硫酸などの鉱酸を用いて中和し、生じた沈澱を
濾過したのち、再結晶することにより得られる。 【００３０】アミノカルボン酸（ＩＩ）とマレイン酸無
水物との反応は溶媒中で行うのが望ましい。好適に使用
される溶媒としては、含水メタノ−ル、含水エタノ−ル
、含水イソプロパノ−ルなどの含水アルコ−ルが挙げら
れる。反応を円滑に進行させるためには反応液の　ｐＨ
　は　６　以上に保つのが好ましい。ｐＨ　６　以下で
はアミノカルボン酸（ＩＩ）の溶解度が低下して反応が
進行しにくくなる。マレイン酸無水物はアミノカルボン
酸（ＩＩ）　１　モル当たり一般には　１　〜　３００
　モルの割合で用いられ、好ましくは　１　〜５０　モ
ルの割合で用いられる。好ましい実施態様においては、
アミノカルボン酸（ＩＩ）の溶液または分散液にマレイ
ン酸無水物を全量一度に加えるか、または少量ずつ徐々
に加えることにより反応させる。反応温度は　０℃から
溶媒の沸点までの範囲の温度を採用するのが好ましく、
２０　℃〜　６０　℃の範囲の温度を選択するのがより
好ましい。反応の進行を確認するためには、薄層クロマ
トグラフィ−により原料の消失を追跡するのが便利であ
る。反応後、反応混合物からのアミドジカルボン酸（Ｉ
ＩＩ）の単離は、好適には反応混合物を室温ないしは氷
冷までの範囲の温度条件下で、塩酸、硫酸などの鉱酸を
用いてｐＨ　１〜　４　程度の酸性状態にし、生じた沈
澱を濾過することにより行うのが簡便である。 【００３１】アミドジカルボン酸（ＩＩＩ）を常法に従
い、例えば酢酸ナトリウムの存在下に無水酢酸とともに
加熱し、脱水することにより容易に長鎖カルボン酸マレ
イミド（Ｉ）に誘導することができる。 【００３２】ＳＯＤと長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）
とを　ｐＨ　６　〜　１０　の水溶液中で反応させるこ
とにより、下記の化６ 【００３３】 【化６】 【００３４】（式中、［ＳＯＤ］はス−パ−オキシドジ
スムタ−ゼからメルカプト基を２個除去した残基を表し
、Ｗは１個以上の酸素原子、硫黄原子、または−Ｎ（Ｒ
）−（式中、Ｒは低級アルキル基を表す）で示される基
で中断されていてもよい２価の長鎖炭化水素基を表す）
で示されるス−パ−オキシドジスムタ−ゼ誘導体（以下
、これをＳＯＤ誘導体と略称する）を製造することがで
きる。 【００３５】ＳＯＤと長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）
との反応は、通常トリス（ヒドロキシメチル）アミノメ
タン塩酸塩、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、酢酸
ナトリウム、リン酸ナトリウムなどの塩の水溶液中にＳ
ＯＤを溶解し、得られた溶液に粉末状の長鎖カルボン酸
マレイミド（Ｉ）またはジメチルスルホキシドなどの有
機溶媒に溶解した長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）を添
加することにより行われる。反応中、溶液の　ｐＨ　は
　６　〜　１０　の範囲内、好ましくは　８　〜　１０
　の範囲内に維持されていることが必要である。ｐＨ　
が　６　より低い場合には、長鎖カルボン酸マレイミド
（Ｉ）の溶解性が低下して反応は進行しにくくなる。ま
た、ｐＨ　が１０　より高い場合には、長鎖カルボン酸
マレイミド（Ｉ）がＳＯＤのアミノ基とも反応してしま
う場合が生じる。反応温度としては室温以下の温度が好
ましい。また、反応時間は長鎖カルボン酸マレイミド（
Ｉ）の添加方法により異なるが、通常　１０　分間〜　
２　日間である。長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）の使
用量はＳＯＤ１モルに対して約　２．０　〜　３０　モ
ルの範囲内である。 【００３６】このようにして得られた反応液にはＳＯＤ
誘導体と未反応のＳＯＤおよび長鎖カルボン酸マレイミ
ド（Ｉ）などが存在するが、かかる反応液を濾過し、濾
液をゲル濾過し、得られるＳＯＤ誘導体を含む溶出液を
必要に応じてハイドロフォ−ビック・カラムクロマトグ
ラフィ−、イオン交換カラムクロマトグラフィ−などに
付したのち、限外濾過に付することにより濃縮し、凍結
乾燥することによりＳＯＤ誘導体の固形物を得ることが
できる。 【００３７】上記の反応により、ＳＯＤが有するメルカ
プト基と長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）が有するマレ
イミド環とが付加反応により結合し、ＳＯＤ誘導体が生
成する。 【００３８】本発明の長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）
には１分子中にマレイミド基が１個存在し、またＳＯＤ
が有するメルカプト基については、通常ヒト型ＳＯＤに
は反応しうる遊離のメルカプト基は２個存在する。それ
ゆえに、上記の反応および反応後の処理により、ヒト型
ＳＯＤ１分子当り長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）が２
分子結合したＳＯＤ誘導体を得ることができる。なお、
この反応および反応後の処理により、ＳＯＤ誘導体が有
するカルボキシル基がアルカリ金属塩またはアンモニウ
ム塩を形成する可能性があるが、かかる塩を形成したカ
ルボキシル基を有するＳＯＤ誘導体も医薬の有効成分化
合物として用いることに不都合はない。 【００３９】ＳＯＤ誘導体は、ＳＯＤに比べて大幅に延
長された血中半減期を有し、しかも酸性部位への集積性
を有することから抗炎症部位への移行性が良好であると
いう特徴を有する。 【００４０】原料として用いられるＳＯＤとしては、動
物（ヒト、ウシなど）、植物、微生物などの生物中に含
まれているものを公知の方法によりそれぞれの生物体か
ら分離取得されたもの、または遺伝子工学的手法を用い
て取得されたものなどが挙げられる。ＳＯＤの化学構造
（配位金属、分子量、アミノ酸配列など）はかなり解明
されてきており、ＳＯＤはＦｅ配位ＳＯＤ、Ｍｎ配位Ｓ
ＯＤ、Ｃｕ−Ｚｎ配位ＳＯＤ等に分類され、存在してい
る生体組織によって異なるが３万〜８万の分子量を有し
ている。ＳＯＤのアミノ酸配列も存在している生体組織
によって若干相異する［「ＳＯＤと活性酸素調節剤」第
２章　　ＳＯＤ（大柳善彦著、日本医学館、１９８９年
　１１月　６日発行）参照］。ヒト型のＣｕ−Ｚｎ配位
ＳＯＤは分子量　３２，０００　を有しており、反応性
の遊離のメルカプト基２個を有する。このヒト型ＳＯＤ
は、例えば、ヒトの血液を順次熱処理、イオン交換、ゲ
ル濾過に付することにより、また遺伝子工学の手法を用
いることによって取得される。 【００４１】本発明の長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）
は脂肪酸部分を有する。従って、かかる長鎖カルボン酸
マレイミド（Ｉ）が結合しているＳＯＤ誘導体は、血清
タンパク質および生体膜との可逆的な結合性を有してお
り、これにより血中半減期が延長され、また臓器への移
行性が良好となる。 【００４２】長鎖カルボン酸マレイミド（Ｉ）において
、Ｗが表す長鎖炭化水素基の主鎖原子数は　９　〜　２
９　であることが好ましく、１７　〜　２３　であるこ
とがより好ましい。主鎖原子数が　９　より少ない長鎖
カルボン酸マレイミドをＳＯＤと反応させて得られるＳ
ＯＤ誘導体は血清タンパク質への結合能が不良となるの
で好ましくない。主鎖原子数が　２９　より多い長鎖カ
ルボン酸マレイミドは　ｐＨ　６　〜　１０　の水溶液
中への溶解性が不良となり、かかる長鎖カルボン酸マレ
イミドをＳＯＤに結合させることが難しくなる。 【００４３】ＳＯＤ誘導体は後述の試験例２および試験
例３の結果から明らかなように優れた抗潰瘍作用および
抗不整脈作用を有する。またＳＯＤ誘導体は抗炎症作用
、抗虚血障害作用、抗脳浮腫作用などの薬理作用をも有
する。 【００４４】またＳＯＤ誘導体は毒性試験においても低
毒性であることが確認されている。 【００４５】以上の結果より、ＳＯＤは活性酸素ラジカ
ルが関与する種々の疾患に対して有効であり、特に抗炎
症剤、抗潰瘍剤、虚血性疾患治療剤、脳浮腫治療剤、パ
ラコ−ト治療剤として使用することができる。またＳＯ
Ｄ誘導体は、活性酸素ラジカルに起因する制癌剤の副作
用を軽減するための医薬としても有用である。さらにＳ
ＯＤ誘導体は火傷、外傷、各種の皮膚炎などの皮膚の疾
病などの治療薬としても有用である。 【００４６】ＳＯＤ誘導体の投与量は疾病、患者の重篤
度、薬物に対する認容性などにより異なるが、通常成人
　１　日あたり　０．１　〜　５００ｍｇ　の範囲、好
ましくは　０．５　〜　１００　ｍｇ　の範囲の量であ
り、これを　１　回または分割して投与するのがよい。 投与に際しては投与ル−トに適した任意の形態をとるこ
とができる。 【００４７】ＳＯＤ誘導体は任意慣用の製剤方法を用い
て投与用に調製することができる。ＳＯＤ誘導体を少な
くとも　１　種含有する医薬組成物は任意所用の製薬用
担体、賦形剤などの医療上許容される添加剤などを使用
して慣用の手段によって調製される。 【００４８】この医薬組成物が経口用製剤である場合に
は、該製剤は消化管からの吸収に好適な形態で提供され
るのが好ましい。経口投与の錠剤およびカプセルは単位
量投与形態であり、結合剤、例えばシロップ、アラビア
ゴム、ゼラチン、ソルビット、トラガント、ポリビニル
ピロリドンなど；賦形薬、例えば乳糖、とうもろこし澱
粉、りん酸カルシウム、ソルビット、グリシンなど；潤
滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリ
エチレングリコ−ル、シリカなど；崩壊剤、例えばラウ
リル硫酸ナトリウム、などのような慣用の賦形剤を含有
していてもよい。錠剤は当業界において周知の方法でコ
−ティングしてもよい。経口用液体製剤は水性または油
性の懸濁剤、溶液、シロップ、エリキシル剤、その他で
あってもよく、または使用する前に水もしくは他の適当
なビヒクルで再溶解させる乾燥生成物であってもよい。 このような液体製剤は普通に用いられる添加剤、例えば
懸濁化剤、例えばソルビットシロップ、メチルセルロ−
ス、グルコ−ス／糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエ
チルセルロ−ス、カルボキシメチルセルロ−ス、ステア
リン酸アルミニウムゲル、水素化食用脂など；乳化剤、
例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタン、アラビア
ゴムなど；非水溶性ビヒクル、例えばア−モンド油、分
別ココナット油、油性エステル、プロピレングリコ−ル
、エタノ−ルなど、；防腐剤、例えばｐ−ヒドロキシ安
息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソル
ビン酸などを含有してもよい。 【００４９】また注射剤を調製する場合には、ＳＯＤ誘
導体を生理食塩水、注射用ブドウ糖液などの溶剤に溶解
し、ＳＯＤ誘導体　２　〜　２０　ｍｇ／溶剤　２　〜
　１０　ｍｌ　の濃度に調整し、常法により皮下、筋肉
内、静脈内注射剤とする。調製時に必要により水溶液に
　ｐＨ　調整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤、可溶化剤
などを添加することもできる。 【００５０】上記の医薬組成物は、その形態等に依存し
て、ＳＯＤ誘導体を一般に約　０．０１〜　５０　重量
％、好ましくは約　０．１　〜　２０　重量％の濃度で
含有することができる。　　　　 【００５１】 【実施例】以下に、実施例により本発明を具体的に説明
する。なお、本発明は、これらの実施例により限定され
るものではない。１Ｈ−ＮＭＲ　はテトラメチルシラン
を内部標準として測定し、ＩＲ　は　ＫＢｒ　錠剤法に
より測定した。 【００５２】実施例１ １８　−　トシルオキシオクタデカン酸メチルエステル
の合成 １８　−　ヒドロキシオクタデカン酸メチルエステル　
（　４．５　ｇ，１４．３　ｍｍｏｌ　）を塩化メチレ
ン　５０　ｍｌ　に溶解し、得られた溶液にピリジン　
（　４．５３　ｇ，　５７．２　ｍｍｏｌ　）を加え、
次いで氷冷下にｐ−トルエンスルホニルクロリド　（　
５．４６　ｇ，　２８．６　ｍｍｏｌ　）を１時間を要
して徐々に添加して、冷蔵庫内で　１６　時間反応させ
た。反応液を　１０　％　塩酸、水、飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液、水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下に濃縮した。残渣をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィ−（展開液：ベンゼン）
で分離精製して、下記の物性値を示す　１８　−　トシ
ルオキシオクタデカン酸メチルエステル　（　５．６９
　ｇ，　８５　％　）を得た。 ｍ．ｐ．　６７．５　〜　６８．５　℃１Ｈ−ＮＭＲ　
（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　１．
０９　〜　１．４２　（　ｍ，２６Ｈ　），１．５３　
〜　１．７２　（　ｍ，４Ｈ　），２．３０　（　ｔ，
２Ｈ　），２．４５　（　ｓ，３Ｈ　），３．６８　（
　ｓ，３Ｈ　），４．０３　（　ｔ，２Ｈ　），７．３
５　（　ｄ，２Ｈ　），７．７９　（　ｄ，２Ｈ　） 【００５３】実施例２ １８　−　フタルイミドオクタデカン酸メチルエステル
の合成 フタルイミドカリウム　（　２．９６　ｇ，　１６．０
　ｍｍｏｌ　）　と乾燥　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホルム
アミド　１００　ｍｌ　との混合物を　１１０　℃に加
熱し、この混合物に　１８　−　トシルオキシオクタデ
カン酸メチルエステル　（　５．０　ｇ，　１０．７　
ｍｍｏｌ　）　の　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホルムアミド
　８０　ｍｌ　溶液を滴下し、１１０　℃で　２　時間
反応させた。反応液を氷水にあけ全量を　１．２　ｌ　
にし、３０　分間攪拌したのち、沈澱物を濾取し、クロ
ロホルムに溶解した。得られた溶液を水、飽和食塩水で
順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィ−［展開液：ベンゼンと塩化
メチレンとの混合液（容量比：　２　対　１　）］で分
離精製し、下記の物性値を示す　１８　−　フタルイミ
ドオクタデカン酸メチルエステル（　４．１５　ｇ，　
８８　％　）　を得た。 ｍ．ｐ．　８２　〜　８３　℃ １Ｈ−ＮＭＲ　（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）
　：　δ　１．０９　〜　１．４２　（　ｍ，２６Ｈ　
），１．５３　〜　１．７６　（　ｍ，４Ｈ　），２．
３０　（　ｔ，２Ｈ　），３．６６，　３．６７　（　
ｓ，ｔ，５Ｈ　），７．７１　（　ｍ，２Ｈ　），７．
８４　（　ｍ，２Ｈ　）【００５４】実施例３ １８　−　アミノオクタデカン酸の合成１８　−　フタ
ルイミドオクタデカン酸メチルエステル　（　２．０　
ｇ，　４．５１　ｍｍｏｌ　）、エタノ−ル　３０　ｍ
ｌ　および　８０　％　抱水ヒドラジン　（　０．４２
　ｍｌ，　６．７６　ｍｍｏｌ　）　の混合物を　９　
時間加熱還流した。反応液に　６Ｎ　塩酸　（　１１．
３　ｍｌ，　６７．６　ｍｍｏｌ　）を加えてさらに　
１　時間加熱還流したのち、不溶物を濾別した。濾液を
減圧下に濃縮した。残渣にエタノ−ル　３０　ｍｌ　お
よび　１Ｎ　水酸化ナトリウム水溶液　１８．１ｍｌ　
を加え、１８　時間加熱還流した。反応液を氷冷下に　
６Ｎ　塩酸で中和し、沈殿物を濾取後、再結晶（エタノ
−ル　−　酢酸　−　水）して、下記の物性値を示す　
１８　−　アミノオクタデカン酸　（　８００　ｍｇ，
　５９　％　）　を得た。 ｍ．ｐ．　１７２　〜　１７４　℃ ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：　２９２０，　２８５０，
　１６４０，　１５３５，　１４７０，　１４００ＦＤ
−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　［Ｍ＋Ｈ］＋　３００【
００５５】実施例４ Ｎ　−（１７　−　カルボキシヘプタデシル）マレアミ
ン酸の合成 １８　−　アミノオクタデカン酸　（　４００　ｍｇ，
　１．３３　ｍｍｏｌ　）　をエタノ−ル　　５０　ｍ
ｌ　および　１Ｎ　水酸化ナトリウム水溶液　２５　ｍ
ｌ　の混合液に　４０　℃で溶解し、得られた溶液の温
度を　４０　℃に保ちながら無水マレイン酸　（　１．
９７ｇ，　２０．０　ｍｍｏｌ　）　を　２時間を要し
て徐々に添加した。反応液を　３０　分間攪拌後、氷冷
下に塩酸酸性にし、遠心分離操作に付した。沈渣を濾過
し、十分に水洗後、減圧下に乾燥して、下記の物性値を
示す　Ｎ　−（１７　−　カルボキシヘプタデシル）マ
レアミン酸　（　４３６　ｍｇ，　８８　％　）を得た
。 ｍ．ｐ．　１４４　〜　１４７．５　℃ＩＲ　（　ｃｍ
−１　）　：　３３０５，　２９２０，　２８５０，　
１７１０，　１６３０，　１５８５，　１４７０，　１
４００，　１２８０，１２５０，　１２３０，　１２１
５，　１１９５，　１１８０ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　
）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　３９８【００５６】実施例
５ １８　−　マレイミドオクタデカン酸の合成Ｎ　−（１
７　−　カルボキシヘプタデシル）マレアミン酸　（　
４００　ｍｇ，　１．０１　ｍｍｏｌ　）、無水酢酸　
２．８３　ｍｌ　および無水酢酸ナトリウム　（　４１
．０　ｍｇ，　０．５０　ｍｍｏｌ）　の混合物を　１
００　℃で　１　時間反応させた。反応物を放冷し、氷
にあけて１時間攪拌したのち、クロロホルムで抽出した
。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、減圧下に濃縮してシリカゲルカラム
クロマトグラフィ−［展開液：ベンゼンとクロロホルム
との混合液（容量比：　１　対　１　）］で分離精製し
、下記の物性値を示す　１８　−　マレイミドオクタデ
カン酸　（　１７２　ｍｇ，　４５　％　）を得た。 ｍ．ｐ．　１０１　〜　１０３　℃ １Ｈ−ＮＭＲ　（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）
　：　δ　１．１４　〜　１．４０　（　ｍ，２６Ｈ　
），１．４８　〜　１．７２　（　ｍ，４Ｈ　），２．
３５　（　ｔ，２Ｈ　），３．５０　（　ｔ，２Ｈ　）
，６．６８　（　ｓ，２Ｈ　）ＩＲ　（　ｃｍ−１　）
　：　２９２０，　２８５０，　１７１０，　１４７０
，　１４５０，　１４１０，　８４０，　７００ ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　
３８０【００５７】実施例６ ２０　−　トシルオキシエイコサン酸メチルエステルの
合成２０　−　ヒドロキシエイコサン酸メチルエステル
　（　８．０　ｇ，　２３．４　ｍｍｏｌ　）を塩化メ
チレン　９０　ｍｌ　に溶解し、得られた溶液にピリジ
ン　（　７．３９　ｇ，　９３．４　ｍｍｏｌ　）を加
え、次いで氷冷下にｐ−トルエンスルホニルクロリド　
（　８．９０　ｇ，　４６．７　ｍｍｏｌ　）を１時間
を要して徐々に添加して、冷蔵庫内で　１４　時間反応
させた。反応終了後、実施例１におけると同様にして後
処理を行い、下記の物性値を示す　２０　−　トシルオ
キシエイコサン酸メチルエステル　（　１０．５７　ｇ
，　９１　％　）を得た。 ｍ．ｐ．　７２．５　〜　７３．５　℃１Ｈ−ＮＭＲ　
（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　１．
１０　〜　１．３８　（　ｍ，３０Ｈ　），１．５２　
〜　１．７２　（　ｍ，４Ｈ　），２．３０　（　ｔ，
２Ｈ　），２．４５　（　ｓ，３Ｈ　），３．６７　（
　ｓ，３Ｈ　），４．０２　（　ｔ，２Ｈ　），７．３
４　（　ｄ，２Ｈ　），７．７８　（　ｄ，２Ｈ　） 【００５８】実施例７ ２０　−　フタルイミドエイコサン酸メチルエステルの
合成フタルイミドカリウム　（　５．５９　ｇ，　３０
．２　ｍｍｏｌ　）　と乾燥　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホ
ルムアミド　２００　ｍｌ　との混合物を　１１０　℃
に加熱し、これに　２０　−　トシルオキシエイコサン
酸メチルエステル　（　１０．０　ｇ，　２０．１　ｍ
ｍｏｌ　）　の　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホルムアミド　
３００　ｍｌ　溶液を滴下し、１１０　℃で　２　時間
反応させた。反応終了後、実施例２におけると同様の後
処理を行い、下記の物性値を示す　２０　−　フタルイ
ミドエイコサン酸メチルエステル　（　８．９７　ｇ，
　９５　％　）　を得た。 ｍ．ｐ．　８６．５　〜　８７．５　℃１Ｈ−ＮＭＲ　
（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　１．
０８　〜　１．５０　（　ｍ，３０Ｈ　），１．５５　
〜　１．８１　（　ｍ，４Ｈ　），２．３０　（　ｔ，
２Ｈ　），３．６６，　３．６７　（　ｓ，ｔ，５Ｈ　
），７．７１　（　ｍ，２Ｈ　），７．８４　（　ｍ，
２Ｈ　）【００５９】実施例８ ２０　−　アミノエイコサン酸の合成 ２０　−　フタルイミドエイコサン酸メチルエステル　
（　５．０　ｇ，１０．６　ｍｍｏｌ　）、エタノ−ル
　１００　ｍｌ　および　８０　％　抱水ヒドラジン　
（　１．０　ｍｌ，　１５．９　ｍｍｏｌ　）　の混合
物を　９　時間加熱還流した。反応液に　６Ｎ　塩酸　
２６．５ｍｌ　を加えてさらに　１　時間加熱還流した
のち、不溶物を濾別した。濾液を減圧下に濃縮した。残
渣にエタノ−ル　７０　ｍｌ　および　１Ｎ　水酸化ナ
トリウム水溶液　４２．４　ｍｌ　を加え、１６　時間
加熱還流した。反応液を氷冷下に　６Ｎ　塩酸で中和し
、沈殿物を濾取後、再結晶（エタノ−ル　−　酢酸　−
　水）して、下記の物性値を示す　２０　−　アミノエ
イコサン酸　（　２．５０　ｇ，　７２　％　）　を得
た。 ｍ．ｐ．　１７２．５　〜　１７４　℃ＦＤ−ＭＳ　（
　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　３２８ＩＲ　（
　ｃｍ−１　）　：　２９２０，　２８５０，　１６４
０，　１５３５，　１４７０，　１４００【００６０】
実施例９ Ｎ　−（１９　−　カルボキシノナデシル）マレアミン
酸の合成２０　−　アミノエイコサン酸　（　５００　
ｍｇ，　１．５３　ｍｍｏｌ　）　をエタノ−ル　　８
５　ｍｌ　および　１Ｎ　水酸化ナトリウム水溶液　４
０　ｍｌ　の混合液に　４０　℃で溶解し、得られた溶
液の温度を　４０　℃に保ちながら無水マレイン酸　（
　３．７５　ｇ，　３８．３　ｍｍｏｌ　）　を　３　
時間を要して徐々に添加した。この間、反応液の　ｐＨ
　を　８　〜　１０　に保った。反応液を　３０　分間
攪拌後、実施例４におけると同様にして後処理を行い、
下記の物性値を示す　Ｎ　−（１９　−　カルボキシノ
ナデシル）マレアミン酸　（　５３８　ｍｇ，　８３　
％　）を得た。 ｍ．ｐ．　１４６　〜　１４８　℃ ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　
４２６ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：　３３０５，　２９
２０，　２８５０，　１７１０，　１６３０，　１５７
０，　１４７０，　１４０５，　１２７５，１２４５，
　１２２５，　１２１０，　１１９５，　１１８０【０
０６１】実施例１０ ２０　−　マレイミドエイコサン酸の合成Ｎ　−（１９
　−　カルボキシノナデシル）マレアミン酸　（　５０
０　ｍｇ，　１．２２　ｍｍｏｌ　）、無水酢酸　３．
４４　ｍｌ　および無水酢酸ナトリウム　（　５０．１
　ｍｇ，　０．６１　ｍｍｏｌ）　の混合物を１００　
℃で　１　時間反応させた。反応終了後、実施例５にお
けると同様にして後処理を行い、下記の物性値を示す　
２０　−　マレイミドエイコサン酸　（　２３０　ｍｇ
，　４６　％）を得た。 ｍ．ｐ．　１０４　〜　１０５．５　℃１Ｈ−ＮＭＲ　
（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　１．
１７　〜　１．４０　（　ｍ，３０Ｈ　），１．５０　
〜　１．６９　（　ｍ，４Ｈ　），２．３４　（　ｔ，
２Ｈ　），３．５１　（　ｔ，２Ｈ　），６．６８　（
　ｓ，２Ｈ　）ＦＤ−ＭＳ（　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ
＋Ｈ　］＋　４０８ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：　２９
２０，　２８５０，　１７１０，　１４７０，　１４５
５，　１４１０，　８４０，　７００ 【００６２】実施例１１ ２２　−　トシルオキシドコサン酸メチルエステルの合
成２２　−　ヒドロキシドコサン酸メチルエステル　（
　１．７０　ｇ，　４．５９　ｍｍｏｌ　）　をピリジ
ン　１５　ｍｌ　および塩化メチレン　１２０　ｍｌ　
の混合溶媒に溶解し、得られた溶液に氷冷下にｐ−トル
エンスルホニルクロリド　（　１．７５　ｇ，　９．１
８　ｍｍｏｌ　）を１時間を要して徐々に添加して、冷
蔵庫内で　１４　時間攪拌した。次いで、反応液にｐ−
トルエンスルホニルクロリド　（　１．７５　ｇ，　９
．１８　ｍｍｏｌ　）を加えてさらに　２４　時間反応
させた。反応終了後、実施例１におけると同様にして後
処理を行い、下記の物性値を示す　２２　−　トシルオ
キシドコサン酸メチルエステル　（　２．２８　ｇ，　
７５　％　）を得た。 ｍ．ｐ．　７４　〜　７６　℃ １Ｈ−ＮＭＲ　（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）
　：　δ　１．０８　〜　１．４０　（　ｍ，３４Ｈ　
），１．５３　〜　１．７２　（　ｍ，４Ｈ　），２．
３０　（　ｔ，２Ｈ　），２．４５　（　ｓ，３Ｈ　）
，３．６７　（　ｓ，３Ｈ　），４．０２　（　ｔ，２
Ｈ　），７．３５　（　ｄ，２Ｈ　），７．８０　（　
ｄ，２Ｈ　） 【００６３】実施例１２ ２２　−　フタルイミドドコサン酸メチルエステルの合
成フタルイミドカリウム　（　１．１６　ｇ，　６．２
９　ｍｍｏｌ　）　と乾燥　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホル
ムアミド　４０　ｍｌ　との混合物を　１１０　℃に加
熱し、これに　２２　−　トシルオキシドコサン酸メチ
ルエステル　（　２．２０　ｇ，　４．１９　ｍｍｏｌ
　）　の　Ｎ，Ｎ’−　ジメチルホルムアミド　７０　
ｍｌ　溶液を滴下し、１１０　℃で　２　時間反応させ
た。反応終了後、実施例２におけると同様にして後処理
を行い、下記の物性値を示す　２２　−　フタルイミド
ドコサン酸メチルエステル　（　１．５７　ｇ，　９５
　％　）　を得た。 ｍ．ｐ．　８８．５　〜　９０．５　℃１Ｈ−ＮＭＲ　
（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　１．
１２　〜　１．４１　（　ｍ，３４Ｈ　），１．５４　
〜　１．７５　（　ｍ，４Ｈ　），２．３０　（　ｔ，
２Ｈ　），３．６６，　３．６７　（　ｓ，ｔ，５Ｈ　
），７．７１　（　ｍ，２Ｈ　），７．８４　（　ｍ，
２Ｈ　）【００６４】実施例１３ ２２　−　アミノドコサン酸の合成 ２２　−　フタルイミドドコサン酸メチルエステル　（
　１．５　ｇ，　３．０　ｍｍｏｌ　）、エタノ−ル　
４０　ｍｌ　および　８０　％　抱水ヒドラジン　（　
０．２８　ｍｌ，　４．５０　ｍｍｏｌ　）　の混合物
を１０　時間加熱還流した。反応液に　６Ｎ　塩酸　１
１．３　ｍｌ　を加えてさらに　１　時間加熱還流した
のち、不溶物を濾別した。濾液を減圧下に濃縮した。残
渣にエタノ−ル３０　ｍｌ　および　１Ｎ　水酸化ナト
リウム水溶液　１５　ｍｌ　を加え、１９　時間加熱還
流した。反応液を氷冷下に　６Ｎ　塩酸で中和し、沈殿
物を濾取後、再結晶（エタノ−ル−　酢酸　−　水）し
て、下記の物性値を示す　２２　−アミノドコサン酸　
（　８２７　ｍｇ，　７７　％　）　を得た。 ｍ．ｐ．　１６６　〜　１６８　℃ ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　
３５６ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：　２９２０，　２８
５０，　１６４０，　１５３５，　１４７０，　１４０
０【００６５】実施例１４ Ｎ　−（２１　−　カルボキシヘンエイコシル）マレア
ミン酸の合成 ２２　−　アミノドコサン酸　（　４００　ｍｇ，　１
．１２　ｍｍｏｌ）　をエタノ−ル　　１００　ｍｌ　
および１Ｎ　水酸化ナトリウム水溶液　５０　ｍｌ　の
混合液に　４０　℃で溶解し、得られた溶液の温度を　
４０　℃に保ちながら無水マレイン酸　（　４．３９　
ｇ，　４４．８　ｍｍｏｌ　）　を　５　時間を要して
徐々に添加した。この間、反応液の　ｐＨ　を　８　〜
　１０　の範囲に保った。反応液を　３０　分間攪拌後
、実施例４におけると同様にして後処理を行い、下記も
物性値を示す　Ｎ　−（２１　−　カルボキシヘンエイ
コシル）マレアミン酸　（　５３８　ｍｇ，８３　％　
）を得た。 ｍ．ｐ．　１４０　〜　１４３　℃ ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　［　Ｍ＋Ｈ　］＋　
４５４ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：　３３０５，　２９
２０，　２８５０，　１７１０，　１６３０，　１５７
０，　１４７０，　１４０５，　１２７５，１２４５，
　１２２５，　１２１０，　１１９５，　１１８０【０
０６６】実施例１５ ２２　−　マレイミドドコサン酸の合成Ｎ　−（２１　
−　カルボキシヘンエイコシル）マレアミン酸　（　４
５０　ｍｇ，　０．９９　ｍｍｏｌ　）、無水酢酸　２
．８　ｍｌ　および無水酢酸ナトリウム　（　４０．７
　ｍｇ，　０．５０　ｍｍｏｌ）　の混合物を　１００
　℃で　１　時間反応させた。反応終了後、実施例５に
おけると同様にして後処理を行い、下記の物性値を示す
　２０　−　マレイミドエイコサン酸　（　１７０　ｍ
ｇ，　３９　％　）を得た。 ｍ．ｐ．　１０５．５　〜　１０６．５　℃１Ｈ−ＮＭ
Ｒ　（　ＣＤＣｌ３，　２７０　ＭＨｚ　）　：　δ　
１．１２　〜　１．４２　（　ｍ，３４Ｈ　），１．５
０　〜　１．７１　（　ｍ，４Ｈ　），２．３４　（　
ｔ，２Ｈ　），３．５１　（　ｔ，２Ｈ　），６．６８
　（　ｓ，２Ｈ　）ＦＤ−ＭＳ　（　ｍ／ｚ　）　：　
［　Ｍ＋Ｈ　］＋　４３６ＩＲ　（　ｃｍ−１　）　：
　２９２０，　２８５０，　１７１０，　１４７５，　
１４５０，　１４１５，　８４０，　７００ 【００６７】参考例１ １８　−　マレイミドオクタデカン酸とＳＯＤとの反応
によるＳＯＤ誘導体の合成の予備検討 ヒトＳＯＤ　１　ｍｇ　（３１　ｎｍｏｌ）を　０．１
Ｍ　トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩
衝液（　ｐＨ　９　）　０．９　ｍｌに溶解して得られ
た溶液を　７　検体用意し、下記の表１に示した量の実
施例５で得られた　１８　−　マレイミドオクタデカン
酸をそれぞれジメチルスルホキシド　０．１　ｍｌ　に
溶解して得られた溶液を上記のＳＯＤ溶液にそれぞれ攪
拌下に添加した。冷蔵庫内で二晩攪拌したのち、反応液
を電気泳動に付した。得られた電気泳動図を模式的に図
１に示す。図１中、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、
（ｅ）、（ｆ）および（ｇ）はそれぞれＳＯＤに対する
１８　−　マレイミドオクタデカン酸のモル比が　０、
　１、　２、　５、　１０、　２０　および　５０の場
合に得られた反応液の電気泳動図の模式図を示す。 【００６８】 【表１】 【００６９】なお、表中、モル比はＳＯＤに対する　１
８　−　マレイミドオクタデカン酸のモル比を表し、重
量は　１８　−　マレイミドオクタデカン酸の重量を表
す。 【００７０】図１から明らかなように、ＳＯＤと　１８
　−　マレイミドオクタデカン酸の反応成績体はモル比
　２　以上の各反応においてほぼ同一であり、モル比　
２　以上の反応ではＳＯＤ中の反応可能な官能基がすべ
て反応してしまったことを示している。 【００７１】図１中のバンド（１）、（２）および（３
）はそれぞれ上記予備検討に用いたＳＯＤのチャ−ジア
イソマ−に対応し、バンド（４）、（５）および（６）
はそれぞれバンド（１）、（２）および（３）に対応す
るＳＯＤのチャ−ジアイソマ−に　１８　−　マレイミ
ドオクタデカン酸が１個結合したＳＯＤ誘導体に対応す
る。またバンド（７）、（８）および（９）はそれぞれ
バンド（１）、（２）および（３）に対応するＳＯＤの
チャ−ジアイソマ−に　１８−　マレイミドオクタデカ
ン酸が２個結合したＳＯＤ誘導体に対応する。 【００７２】１８　−　マレイミドオクタデカン酸とＳ
ＯＤとの反応によるＳＯＤ誘導体の合成 ヒトＳＯＤ水溶液　（８８．９５ｍｇ／ｍｌ）　１．１
２ｍｌ　に　水　１．６８ｍｌ　および　０．５Ｍ　ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩衝液（
ｐＨ　９）　０．８ｍｌ　を加え、次いで実施例５で得
られた　１８　−　マレイミドオクタデカン酸　４．７
ｍｇ　をジメチルスルホキシド　０．４ｍｌ　に溶解し
て得られた溶液を攪拌下に徐々に添加した。室温で一晩
攪拌し、濾過したのち、反応液をセファデックスＧ−２
５　（Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−２５　：商品名、ファル
マシア社製）を担体として用いるゲル濾過［溶出液：１
０　ｍＭ　重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、高分子
画分を集めた。この画分をそのまま　ＤＥＡＥ−セファ
ロ　−ス（ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　Ｆａｓｔ　
Ｆｌｏｗ：商品名、ファルマシア社製）を担体として用
いるイオン交換クロマトグラフィ−［溶出液：　１０ｍ
Ｍ　トリス−塩酸緩衝液　（ｐＨ　８）　および０．０
７５Ｍ　塩化ナトリウム水溶液の混合液］に付し、ＳＯ
Ｄ誘導体を含む画分を分取した。この画分をセファデッ
クス　Ｇ−２５　（Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−２５：商品
名、ファルマシア社製）を担体として用いるゲル濾過［
溶出液：１０　ｍＭ　重炭酸アンモニウム水溶液］に付
し、脱塩したのち、高分子画分を凍結乾燥してＳＯＤ誘
導体　５２ｍｇ　を得た。なお、得られたＳＯＤ誘導体
からは遊離の　ＳＨ　基は検出されなかった。 【００７３】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図２の（ａ）および（
ｂ）に示す。（ｂ）におけるそれぞれのバンドは図１の
バンド（７）、（８）および（９）にそれぞれ一致した
。このことと　ＳＨ　基の定量結果から、得られたＳＯ
Ｄ誘導体はＳＯＤの２個の　ＳＨ　基に　１８　−　マ
レイミドオクタデカン酸分子がそれぞれ結合したもので
あると同定した。また、得られたＳＯＤ誘導体の赤外線
吸収スペクトルを図３に示す。 【００７４】参考例２ ２０　−　マレイミドエイコサン酸とＳＯＤとの反応に
よるＳＯＤ誘導体の合成 ヒトＳＯＤ水溶液　（８８．９５ｍｇ／ｍｌ）　１．１
２ｍｌ　に　水　１．６８ｍｌ　および　０．５Ｍ　ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液　０．８
ｍｌ　を加え、次いで実施例１０で得られた　２０　−
　マレイミドエイコサン酸　５．１ｍｇ　をジメチルス
ルホキシド　０．４ｍｌ　に溶解して得られた溶液を攪
拌下に徐々に添加した。室温で一晩攪拌し、濾過したの
ち、反応液をセファデックス　Ｇ−２５　を担体として
用いるゲル濾過［溶出液：１０ｍＭ　重炭酸アンモニウ
ム水溶液］に付し、高分子画分を集めた。この画分をそ
のまま　ＤＥＡＥ−　セファロ−スを担体として用いる
イオン交換クロマトグラフィ−［溶出液：　１０ｍＭ　
トリス−塩酸緩衝液　（ｐＨ　８）　および　０．１０
Ｍ　塩化ナトリウム水溶液の混合液］に付し、ＳＯＤ誘
導体を含む画分を分取した。この画分をセファデックス
　Ｇ−２５　を担体として用いるゲル濾過［溶出液：１
０ｍＭ　重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、脱塩した
のち、高分子画分を凍結乾燥してＳＯＤ誘導体　３３　
ｍｇを得た。なお、得られたＳＯＤ誘導体からは遊離の
　ＳＨ　基は検出されなかった。 【００７５】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図４の（ａ）および（
ｂ）に示す。以下、参考例１におけると同様にして、得
られたＳＯＤ誘導体はＳＯＤの２個の　ＳＨ　基に　２
０　−　マレイミドエイコサン酸分子がそれぞれ結合し
たものであると同定した。また、得られたＳＯＤ誘導体
の赤外線吸収スペクトルを図５に示す。 【００７６】参考例３ ２２　−　マレイミドドコサン酸とＳＯＤとの反応によ
るＳＯＤ誘導体の合成 ヒトＳＯＤ水溶液　（８８．９５ｍｇ／ｍｌ）　１．１
２ｍｌ　に　水　４，８８ｍｌ　および　０．５Ｍ　ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩衝液（
ｐＨ　９）４．０ｍｌ　を加え、次いで実施例１５で得
られた　２２　−　マレイミドドコサン酸　１３．６ｍ
ｇ　をジメチルスルホキシド　１０ｍｌ　に溶解して得
られた溶液を攪拌下に徐々に添加した。室温で一晩攪拌
し、濾過したのち、反応液をセファデックス　Ｇ−２５
　を担体として用いるゲル濾過［溶出液：１０　ｍＭ　
重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、高分子画分を集め
た。この画分をそのまま　ＤＥＡＥ−　セファロ−スを
担体として用いるイオン交換クロマトグラフィ−［溶出
液：　１０ｍＭ　トリス−塩酸緩衝液　（ｐＨ　８）　
および　０．１５Ｍ　塩化ナトリウム水溶液の混合液］
に付し、ＳＯＤ誘導体を含む画分を分取した。この画分
をセファデックス　Ｇ−２５　を担体として用いるゲル
濾過［溶出液：１０　ｍＭ　重炭酸アンモニウム水溶液
］に付し、脱塩したのち、高分子画分を凍結乾燥してＳ
ＯＤ誘導体　４２ｍｇ　を得た。なお、得られたＳＯＤ
誘導体からは遊離の　ＳＨ　基は検出されなかった。 【００７７】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図６の（ａ）および（
ｂ）に示す。以下、参考例１におけると同様にして、得
られたＳＯＤ誘導体はＳＯＤの２個の　ＳＨ　基に　２
２　−　マレイミドドコサン酸分子がそれぞれ結合した
ものであると同定した。また、得られたＳＯＤ誘導体の
赤外線吸収スペクトルを図７に示す。 【００７８】試験例１ ＳＯＤ誘導体の血中濃度 ペントバルビタ−ル麻酔下にラット（Ｗｉｓｔｅｒ　系
雄性、７　週令、体重約　２００ｇ、）の大腿静脈より
カニュレ−ションを行い、ヘパリン溶液（１０００　Ｕ
／ｍｌ）を　０．２ｍｌ注射した。ＳＯＤまたはＳＯＤ
誘導体を生理食塩水に溶解して得られる溶液（１０　ｍ
ｇ／ｍｌ）をそれぞれラット１匹当たり　０．２ｍｌ　
大腿静脈より注射した。経時的に０．２ｍｌ　づつ採血
し、血漿中のＳＯＤ活性を測定することにより血中濃度
を測定した。ＳＯＤの血中濃度およびＳＯＤ誘導体の血
中濃度の経時変化を図８に示す。 【００７９】試験例２ ラット急性胃粘膜病変（胃潰瘍）に対するＳＯＤ誘導体
の効果 ＳＤ　系雄性ラット（体重　２００ｇ　）を一晩絶食さ
せたのち、１群　６　匹としてストレスケ−ジに入れて
拘束し、ラットの胸から下を２２℃の水に浸漬し、ラッ
トにストレスを負荷した。６　時間後にラットを水から
引き揚げたのち、脱血死させ、胃を摘出した。胃内腔に
　１　％ホルマリンを注入して組織を固定した。固定後
、粘膜面の線状潰瘍の長さを測定しその総和を潰瘍係数
とした。 【００８０】なお、コントロ−ル群には　０．５ｍｌ　
の生理食塩水を、また試験群には　２ｍｇ／ラットの参
考例１で得られた　ＳＯＤ　誘導体を　０．２ｍｌ　の
生理食塩水溶液として水浸拘束　５　分前に静脈内投与
した。結果を下表に示す。 【００８１】 【表２】 【００８２】表２から明らかなとおり、試験群ではＳＯ
Ｄ誘導体の顕著な抗潰瘍作用が認められた。 【００８３】試験例３ ラット冠動脈再灌流性不整脈に対するＳＯＤ誘導体の効
果 ラット（Ｗｉｓｔａｒ　系雄性、体重　２００　〜　２
３０　ｇ）を一晩絶食させたのち、ペントバルビタ−ル
（５０　ｍｇ／ｋｇ　体重）を腹腔内投与することによ
り麻酔した。麻酔したラットを、気管切開してレスピレ
−タにより呼吸管理し（　１　回の換気量：１．５ｍｌ
／１００ｇ体重、換気回数：　６０　回／ｍｉｎ　）、
胸骨縦切開により心臓を露出させた。冠動脈の閉塞を、
左冠動脈前下行枝を回旋枝分岐部より約　３　ｍｍ　末
梢で吸引することにより行った。閉塞−再灌流の操作を
　３０　分間隔で　２　回行い、第　１　回目の再灌流
　１５　分後に、薬剤をラットの大腿静脈に　５　ｍｇ
／ｋｇ　体重（総量　０．１　ｍｌ）投与した。薬剤と
して、コントロ−ル群には生理食塩水を、試験群には参
考例２で得られた　ＳＯＤ　誘導体の生理食塩水による
調製液を用いた。各再灌流時に心電図（ＩＩ誘導）を　
３０　分間連続モニタ−し、心室性期外収縮（ＰＶＣ）
、心室性頻脈（ＶＴ）および心室細動（Ｖｆ）を調べた
。結果を下表に示す。 【００８４】 【表３】 【００８５】表３から明らかなとおり、試験群ではＳＯ
Ｄ誘導体の顕著な抗不整脈作用が認められた。 【００８６】 【発明の効果】本発明によれば、ＳＯＤに比べて大幅に
延長された血中半減期を有し、かつ単一の化学構造を有
するＳＯＤ誘導体を与える長鎖カルボン酸マレイミド（
Ｉ）が提供される。ＳＯＤ誘導体は血清タンパク質との
可逆的な相互作用を有しており、病巣局所に容易に移行
することが可能である。またＳＯＤ誘導体は優れた抗潰
瘍作用を有し、さらに抗炎症作用、抗不整脈作用、抗虚
血障害作用、抗脳浮腫作用などの薬理作用を併せ有する
。

【図面の簡単な説明】

【図１】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）、
（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）および（ｇ）
はそれぞれ参考例１において、ＳＯＤに対する１８　−
　マレイミドオクタデカン酸のモル比が　０、１、２、
５、１０、２０　および　５０　の場合に得られた反応
液の電気泳動図の模式図を示す。

【図２】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例１で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示し
、（ｂ）は参考例１で得られたＳＯＤ誘導体の電気泳動
図の模式図を示す。

【図３】参考例１で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。

【図４】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例２で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示し
、（ｂ）は参考例２で得られたＳＯＤ誘導体の電気泳動
図の模式図を示す。

【図５】参考例２で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。

【図６】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例３で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示し
、（ｂ）は参考例３で得られたＳＯＤ誘導体の電気泳動
図の模式図を示す。

【図７】参考例３で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。

【図８】試験例１で測定した血中濃度の経時変化を示す
図であり、（１）、（２）、（３）および（４）はそれ
ぞれＳＯＤ、参考例１で得られたＳＯＤ誘導体、参考例
２で得られたＳＯＤ誘導体および参考例３で得られたＳ
ＯＤ誘導体の血中濃度の経時変化を示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　下記の化１ 【化１】 （式中、Ｗは１個以上の酸素原子、硫黄原子、または−
   Ｎ（Ｒ）−（式中、Ｒは低級アルキル基を表す）で示さ
   れる基で中断されていてもよい２価の長鎖炭化水素基を
   表す）で示される長鎖カルボン酸マレイミド。